Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Поликлональные, моноклональные и антиидиотипические антитела к разным серотипам вируса болезни Марека

ВАК РФ 03.00.23, Биотехнология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Румянцева, Ирина Викторовна

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Вирус болезни Марека как представитель семейства герпес-вирусов, вызывающих опухолевые заболевания у птиц.

1.1.1. Эволюция вируса болезни Марека.

1.1.2. Персистенция вируса болезни Марека.

1.1.3. Специфическая профилактика болезни Марека.

1.2. Поликлональные антитела, обеспечивающие резистентность к болезни Марека.

1.2.1. Пассивно приобретенная резистентность к БМ.

1.2.2. Активно приобретенная резистентность к БМ

1.2.3. Антигены ВБМ, участвующие в развитии иммунных реакций организма птицы.-.

1.2.4. Другие белковые комплексы.

1.3. Моноклональные антитела к антигенам ВБМ, обладающие высокой специфичностью.

1.3.1. Получение гибридом, синтезирующих МАТ.

1.3.2. Применение МАТ для изучения структуры и функций антигенов ВБМ 1, 2 и 3 серотипов.

1.4. Антиидиотипические антитела, участвующие в иммунных реакциях организма.

1.4.1. Идиотипический каскад и внутренний образ антигена.

1.4.2. Антиидиотипические антитела - вакцинные препараты нового поколения.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Поликлональные, моноклональные и антиидиотипические антитела к разным серотипам вируса болезни Марека"

Актуальность темы

Болезнь Марека (БМ) - лимфопролиферативное заболевание кур, является серьезной проблемой для птицеводства. Возбудитель - онкогенный аль-фагерпесвирус обладает уникальной способностью сохраняться и в хозяине, и в экосистеме, при этом эволюционирует и приводит к появлению более вирулентных популяций патотипов вируса болезни Марека (ВБМ) первого се-ротипа, что в свою очередь, порождает новые научные и хозяйственные проблемы (52, 65, 106, 116). Кроме вирулентных штаммов ВБМ 1 серотипа, в природе существуют два неонкогенных: 2 серотип - вирус герпеса кур (ВГК) и 3 серотип - вирус герпеса индеек (ВГИ).

В настоящее время в России для предотвращения вспышек БМ применяют препараты на основе штаммов FC-126, FC-126M (ВГИ), CVI-988 (ВБМ), SB-1, № 42 и № 50 (ВГК) в виде moho-, би- и поливалентных препаратов. И хотя эффективность отечественных вакцин в основном хорошая (16, 23, 24, 28), практика требует поисков более действенных и безопасных средств специфической профилактики болезни Марека, а также постоянного наблюдения за качеством профилактических мероприятий и эпизоотической ситуацией по БМ. Одним из критериев оценки качества вакцинального процесса является определение уровней поствакцинальных антител (серологический статус привитой против БМ птицы).

Динамика накопления и уровень специфических антител зависит от генетической и возрастной резистентности птицы, но в большей степени - от самого вируса (57, 118). Существование штаммо-, серотипо- и видоспецифи-ческих вирусных антигенных детерминант позволяет дифференцировать антитела к вакцинным и полевым вирусам БМ, а также выделять и исследовать отдельные вирусные антигены, ответственные за выработку антител, нейтрализующих цельные внрионы. Подобные работы уже привели к созданию экспериментальных вакцин без инфекционного вируса (55, 65).

Известно, что при иммунизации животного, активизируется большое количество В-клеточных клонов лимфоцитов, в результате чего в сыворотке крови накапливаются поликлональные антитела с различной степенью специфичности, аффинности и авидности к вводимому антигену, что может давать, при использовании такой сыворотки в различных иммунохимических методах, как высокоспецифические, так и перекрестные реакции с антигенами ВБМ. Этого можно избежать, используя моноклональные антитела, синтезируемые одним В-клоном лимфоцитов.

Изучение антиген-антительного взаимодействия в организме животных привело ученого N.Jerne (1974) к заключению о существовании сетевой регуляции иммунной системы, элементами которой являются антитела 1, 2 и т.д. порядка. Предпринятые в последствии попытки экспериментально индуцировать образование антиидиотипических антител, несущих «внутренний образ» антигенов и использовать эти антитела в качестве вакцинных препаратов, оказались удачными. Что касается ВБМ, то исследования в этом направлении проводили в основном с антигеном MATSA (68) и опухолеассоцииро-ванными антигенами (107).

В связи с вышеизложенным представляется своевременным и обоснованным: создание и систематизация коллекции поликлональных и монокло-нальных анти-ВБМ сывороток, фракционирование и выделение иммуноак-тивных вирусных антигенов, получение антительного «образа» антигенов ВБМ (антиидиотипические антитела), определение динамики накопления антител у вакцинированной птицы.

Цель и задачи исследования

Цель работы - получить и изучить иммунобиологические особенности поликлональных, моноклональных и антиидиотипических антител к серотипам вируса болезни Марека, а также продемонстрировать возможность создания неинфекционных вакцин против болезни Марека.

В соответствии с целью работы поставлены следующие задачи:

- разработать упрощенный метод выделения, очистки и концентрирования IgG из желтков яиц кур и синтезировать иммунопероксидазный антивидовой конъюгат (анти-IgG кур);

- используя различные серотипы ВБМ, исследовать в ИФА и систематизировать поликлональные сыворотки из лабораторной коллекции;

- изучить в ИФА динамику антител в полевых сыворотках из птицехозяйств с различной эпизоотической ситуацией по БМ и применяющих moho-, би-или поливалентные вакцины на основе второго и третьего серотипов ВБМ;

- изучить возможность применения МАТ к белкам ВПГ человека для детекции gB и gD ВГИ и ВГК;

- провести фракционирование термоденатурированных антигенов ВГИ, изучить их иммунобиологические свойства;

- получить поликлональные антиидиотипические антитела, имитирующие «внутренний образ» антигенов ВГИ.

Научная новизна

- Разработан упрощенный метод получения чистого препарата IgG из желтка яиц кур и синтезирован иммунопероксидазный антивидовой конъюгат (анти-IgG кур) (приоритетная справка № 2000130058 от 04.12.2000 г.).

- Впервые проведены исследования с коллекционными сыворотками, полученными в 1986-2001 годы от вакцинированных против БМ птиц в условиях лаборатории и птицехозяйств. Сыворотки подразделили на 6 групп, отличающихся по характеру взаимодействия в ИФА с антигенами ВГИ; ВБМ и КК.

- Установлено, что для детекции в ИФА гликопротеинов D ВГИ и ВГК пригодны МАТ 4f6, направленные к gD ВПГ человека.

- Впервые проведено фракционирование термоденатурированных антигенов ВГИ, получены различающиеся по иммунобиологическим свойствам неинфекционные препараты ВГИ (белки В и С).

- Получены идиотипические антитела (антитела первого порядка) к отдельным фракциям термоденатурированного ВГИ, способные нейтрализовать инфекционную активность вируса.

- Впервые получены и изучены в серологических реакциях АИД АТ, которые содержат «внутренний образ» ВГИ, способный заменить антиген в индукции иммунного ответа.

Практическая значимость работы

В результате проведенных исследований разработаны:

- «Методика по выявлению антител к вакцинному вирусу герпеса индеек и вирусу болезни Марека в сыворотках крови кур иммуноферментным анализом» (утверждена директором ВНИТИБП в 2000 г).

- «Методика изготовления неинфекционных антигенов ВГИ, пригодных для получения специфических идиотипических антител» (утверждена директором ВНИТИБП в 2002 г).

- «Методика получения антиидиотипических антител, имитирующих «внутренний образ» антигенов цельновирионного вируса герпеса индеек» (утверждена директором ВНИТИБП в 2002 г).

Апробация работы

Материалы работы и ее отдельные разделы доложены на: Всероссийской научной конференции по ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии ВНИИВВиМ, посвященной 75-летию академика И.А. Бакуло-ва (Покров, 2000 г.); Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 30-летию ВНИТИБП "Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов" (Щелково, 2000 г.); Международной конференции молодых ученых "научные основы производства ветеринарных биологических препаратов", (Щелково-20001).

Болезнь Марека (БМ) - паралич птиц, нейролимфоматоз птиц, энзоотический нейроэнцефаломиелит птиц - описанная как полиневрит Марека (Marek, 1907), является типичным лимфопролиферативным вирусным заболеванием птиц, преимущественно отряда куриных (11, 30, 31).

Болезнь проявляется образованием лимфоидных опухолей (острая форма), поражением периферической, центральной нервной системы и развитием параличей (классическая форма) (31, 56, 57, 63).

Болезнь Марека характеризуется мононуклеарной инфильтрацией одного или нескольких из следующих органов и тканей: периферические нервы, гонады, радужная оболочка глаза и хрусталик, различные висцеральные органы (печень, селезенка, почки), мышечная ткань и кожа (12, 41, 44, 58).

Возбудитель - вирус болезни Марека (ВБМ) - онкогенный альфагер-песвирус первого серотипа - относится к группе вирусов, вызывающих опухолевые заболевания птиц (32, 43, 47, 48, 49, 88).

ВБМ является сложной структурой, состоящей из сердцевины, окруженной капсидом, тегумента и оболочки (19, 113) (рис.1).

Сердцевина зрелого вириона содержит двух-цепочечную ДНК в форме тороида. Капсид ВБМ икосаэдрической формы, состоит из 162 капсомеров, диаметром около 100 нм. Тегумент, термин, впервые предложенный Roizman (30, 113, 128), является структурой, расположенной между капсидом и оболочкой.

Оболочка ВБМ расположена вокруг тегумента и содержит липиды. Наличие липидов подтверждено при биохимическом анализе вириона и по чувствительности вириона к липидным детергентам. Оболочка ВБМ также содержит шипы, которые расположены на поверхности вириона и имеют длину приблизительно 8 нм. Шипы, выходящие из оболочки, по данным 81аппагс1 е1 а1. (139) является вирусным гликопротеидами. В настоящее время известно 46 гликопротеинов (92, 94). Однако полагают, что их значительно больше. Количество полипептидов вириона достоверно неизвестно и может колебаться от вируса к вирусу в пределах от 30 до 35 (83, 133). Размер вириона ВБМ варьирует от 120 до 370 нм. Полагают, что данные вариации являются следствием изменчивости тегумента (138). л, - :

Рис. 1. Электронная фотография вируса герпеса индеек: А - вирион без оболочки; В - ви-рион с оболочкой; 1 - сердцевина, 2 - капсид, 3 - тегумент, 4 - оболочка, 5 - шипы.

Заключение Диссертация по теме "Биотехнология", Румянцева, Ирина Викторовна

Результаты исследования сывороток в непрямом ИФА по разнице показателей ОП для антигенов ВГИ, ВБМ и отрицательного антигена КК (АОП) представлены в табл.9 и на рис.9.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Румянцева, Ирина Викторовна, Щелково

1. Антиидиотипические антитела к вирусу простого герпеса типа 1 нейтрализуют инфекционную активность вируса. / Кущ A.A., Посевая Т.А. и др. // Вопросы вирусологии, 1991, с.312-314.

2. Бобровская И.В. Антигенные свойства инфекционных и термоинактиви-рованных препаратов вакцинных штаммов вируса Болезни Марека. // Ав-тореф. канд. биол. наук. Щелково: 2000.

3. Болотников И.А. Словарь иммунологических терминов, 2-е издание переработанное и дополненное. М.: Росагропромиздат, 1991, с. 129.

4. Вирусология. Методы. / Под редакцией Мейхи Б. М.: Мир, 1988, с.344.

5. Гааль Э., Медьеши Г., Верцкеи JI. Электрофорез в разделении биологических молекул. // М.: Мир, 1982, с.214-224.

6. Гринин A.C., Титов И.Н. Очистка, концентрирование и фракционирование вирусов животных. -М.: 1971, с. 136-141.

7. Дудников JI.A. Онковирусные инфекции птиц. // БИО «Январ», 2002, с. 1316.

8. Иммунологические методы исследования. / Под редакцией Дефкитса И., Перниса Б. М.: Мир, 1988.

9. Лабораторное руководство по хроматографическому и смежным методам. / Под ред. Микеш О. М.: Мир, 1982.

10. Лавров C.B., Мазуренко Н.П., Черняховская И.Ю. и др. Выделение от индеек вируса герпеса, антигенно родственного вирусу Болезни Марека. // «Физ.-хим. и биол. свойства некоторых онкогенных вирусов». Рига, «Зинатне», 1975, с. 186.

11. Лукина В.А. вакцина против болезни Марека и оценка активности имму-ноферментным анализом. // Автореф. дисс. докт. биол. наук. М.: ВИЭВ; 1992.

12. Лукина В.А. и др. // Тез. докл. на конф. ВНИИЗЖ. Владимир, 1995, с. 256.

13. Лукина В.А. Теоретические и экспериментальные предпосылки изготовления moho-, би- и поливалентной вакцины против болезни Марека. // Тез. доклада научно-произв. конф. «100 лет Курской биофабрике и агропромышленное™ России». Курск: 1996, с. 184-189.

14. Марыгина А.Ф. Морфология и морфогенез вируса герпеса индеек. // Автореф. дисс. канд. биол. наук М.: 1987.

15. Маслов Е.В., Панферова С.М., Бойко A.A. Сравнительная характеристика препаративных методов очистки антивидовых иммуноглобулинов. // Передовой научно-произв. опыт в биол. пром-ти. М.: 1985, №8.

16. Плейфер Дж. Наглядная иммунология. -М.: ГЕОТАР Медицина, 1998.

17. Потехин C.B., Андреев В.Г., Куляшбекова Ш.К. и др. Использование метода полимеразной цепной реакции для детекции и генетирования вируса болезни Марека. // Современные аспекты ветеринарной патологии животных. Владимир: ВНИИЗЖ, 1998, с. 159- 167.

18. Придыбайло Н.Д., Коровин Р.Н., Афанасьева Г.Е. Эффективность соче-танного применения вакцины против болезни Марека и иммуномодулято-ра тималина. // Вестник с/х науки, 1991, №7, с.136-138.

19. Производственные испытания экспериментальных серий бивалентной вакцины из шт. FC-126 и SB-1. / Куляшбекова Ш.К., Гусев A.A., Родичкин В.И. // Тез.докл.конф. "Проблемы инфекционной патологии с/х животных». -Владимир: 1997, с. 154-155.

20. Ройт А. Основы иммунологии. М.: мир, 1991, с. 327.

21. Слепенко Т.Б. Выделение из клеток и изучение свойств вируса герпеса индеек. // Автореф. дисс. канд. биол. наук. М.: 1987.

22. Современное состояние и перспективы вакцинопрофилактики болезни Марека. / Лукина В.А., Соловьев Б.В., Быкова H.H., Ярыгина Е.И. и др. // Тез.докл. Веер, научно-практ.конференции. Щелково: 2000, с.6-8.

23. Соловьев Б.В. Технологии промышленного производства культуральных вакцин болезни Марека и инфекционной бурсальной болезни. // Автореф. дисс. докт. биол. наук. М.: 2001.

24. Справочник ветеринарного врача. / Составитель Кунакова A.A. М.: Колос, 1996, с.127-129.

25. Сюрин В.Н., Белоусова Р.В., Фомина Н.В. Болезнь Марека. // Кн. Диагностика вирусных болезней животных. Справочник. М.: Агропромиздат, 1991, с.101-116.

26. Сюрин В.Н., Самуйленко А.Я., Соловьев Б.В., Фомина Н.В. Болезнь Марека. // Кн. Вирусные болезни животных. М.: ВНИТИБП, 1998, с.689-720.

27. Тыщенко И.П. Модель фенотипической классификации герпесвирусных частиц. // Ветеринария, №7 М.: 1993, с.24-25.

28. Шевырев Н.С. Введение в ветеринарную иммунологию. Курск: Издательство Курской с/х. Академии, 1999.

29. Ярыгина Е.И. Гуморальный поствакцинальный иммунитет у кур, привитых моно-, би- и поливалентными вакцинами против болезни Марека. // Автореф. дисс. канд. биол. наук. Щелково: 1998.

30. A bivalent vaccin consisting of Chinese strain of serotyp 2 virus Z4 and FC-126 against Marek's disease: experimental studis and field trials.// X. Liu, R.Zhang et al.: in 19-th World's Poultry Congress, v.l. Amsterdam 1992, p. 305-309.

31. А1у M.M., Fadly A.M., Witter R.L. Effects of serotype 2 Marek's deseas virus on development of viremia, antibody and lymphoma induced by retuculoendot-liosis virus.// In: 19-th World's Poultry Congress, V.l. Amsterdam 1992, p. 272-276.

32. An L.L., Mudson A.P., Prendergrast R.A. et al. Biochemical and functional antigenic mimicry by a polyclonal antiidiotypic antibody for chlamydial exogly-colipid antigen.// Pathobiolodgy. 1997. - v.65 - 155.5, p.229-240.

33. Bacon L.D., Witter R.L. B-haplotype influence on the relative efficacy of Marek's disease vaccines in commercial chickens.// Poultry Sci. 1994. - 73. -v.4, p.481-487.

34. Bacon L.D., Witter R.L. Influence of B-haplotype on the relative effecacy of Marek's disease vaccines of different serotypes.//Avian Disease. 1993. - v.37, p.53-59.

35. Baigent S.M., Davison T.F. Development and composition of, limphoid lesions in the spleens of Marek's disease virus infected chickens: association with spead and the pathogenesis of Marek's disease.// Avian Path. 1999, v.28, p.287.

36. Bartolazzi A., Cerboni C., Nicotra M.R. et al.// Int. J. Cancer. 1994. - v.58, p.488-491.

37. Becker Y. Comparative molecular biology of alphaherpesviruses: genes involved in virus pathogeneticity.// In: 19-th World's Poultry Congress, v.I. Amsterdam 1992, p. 104-107.

38. Biggs P.M. Lymphoproliferative disease of turkeys. // In Disease of Poultry, 10-th Ed. (Calnek B.M. with Barned H.J.) Iowa State University Press, Amess, 1997, p.485.

39. Bona C., Kang C.Y. Epibody the image of the network created by a single antibody.// Immunol. Rev. 1986, v.90, p.l 15-125.

40. Brunovskis P., Chen X. and Velicer L.A. Analisis of Marek's disease virus glycoprotein D, I and E.// In: 19-th World's Poultry Congress., V.I. Amsterdam -1992,p.118-121.

41. Brunovskis P., Velicer L.F. Genetic organization of the Marek's disease virus unigue short region and identification of Us-encoded polypeptides.// In: 19-th World's Poultry Congress, v.I. Amsterdam 1992, p. 74-79.

42. Brunovskys P., Veliser L.F. The Marek's disease virus (MDV) unigue short region: Alphaherpesvirus homologous, fowlpoxvirus - homologous and MDV -specific genes.// Virology - 1995. - v.206. - №1, p.324-338.

43. Bulow V. Von, Biggs P.M. Differentiation between stains of Marek's disease virus and turkey herpesvirus by immunofluorescence assay.// Avian Pathol. -1975,-№4, p.133-162.

44. Bumstead N., Silibourne J., Rennie M. et al. Quantification of Marek's disease virus in chicken lumphocytes using the polymerase chain reaction with fluorescent detection.// J.Virol. Methods. 1997. - №65, p.75-81.

45. Burmester B.R. Future research on the control of M.D. // Avian Pathol. 1997, p.187.

46. Calnek B.W. Antibody development in chikens exposed to Marek's disease virus.// Oncogenesis and Herpesvirus. Ed. Biggs P.M., G. de The, Payne L.n.// 1ARC Scientific Publicayion №2. International Agency for Research on Cancer, Lyon, 1972, p/122-137.

47. Calnek B.W. Established cell lines of avian limphocytes and their use.// In Avian Immunology: Basis and Practice CRC. Press, Boca Roton, Fl. 1987. -v.2, p.57-70.

48. Calnek B.W. Marek's disease contribution to comparative herpes virology and oncology.// Proc 19-th Poultry World's congress, v.l. Amsterdam, Netherlands,- 1992, p.220-232.

49. Calnek B.W., Witter R.L. Marek's disease. // In: "Disease of poultry", 9-th -1991.

50. Cho K.-O., Endoh D., Qian D. Central nervouse system Lesion induced experimentally by a very virulent strain of Marek's disease virus in Marek's disease resistant chicens.// Avian Pathol. 1998 - v.5, №27, p.512-517.

51. Cho K.-O., Endoh D., Kimura T. Significance of MDV serotype 1 specific phosphorylated protein in Marek's disease skin lisions.// Avian Pathol. 1997, №26, p. 707-712.

52. Cho K.-O., Ohashi K., Onuma M. Electron Microscopic and Immunohisto-chimical localization of Marek's disease (MD) herpesvirus Particles in MD skin lymphomas.// Vet. Pathol. 1999, V.36, p.314-320.

53. Churchill A.E., Biggs P.M. Agent of Marek's disease in tissue culture.// Nature.- 1967, №215, p.528-530.

54. Churchill A.E., Chubb R.C., Baxendale C.W. The attenuation with loss of oncogenicity of the herpes-type virus of Marek's disease (strain HPRS-16) on passage in cell culture.// J.Gen. Virol. 1969, №4, p.557-564.

55. Coman T., Coman S. Determinantion of the apathogenecity of Marek's disease herpesvirus SB-1 strain after succesive passages in chicken embryofibroblast.// Arch. Vet. 1990, №19, p.93-102.

56. Coman T., Coman S. Study on the morphological modification induced by the apathogenic Marek's disease herpesvirus SB-1 strain in cell cultures. // Arch. Vet.-1990.-№19, p.103-111.

57. Co M., Gaultion G.N. et al. // Proc. Natl. Asad. Sci. USA. 1985. - v.82, p. 1494-1498.

58. Comparison of glycoproteine D (gD) genes of Marek's disease virus and Herpesvirus of turkey. / Zesnik V., Ross L.J.N., Smith G.D. et al. // In: 19-th World's Poultry Congress., V.l. Amsterdam 1992, p. 114-117.

59. Control of Merek's disease in the Netherlands. 1. Isolation of an avirulent MD virus (strain CVI-988) and its use in laboratory vaccination trials. / Rispens B.M., Van Vloten H. Et al. // Avian Dis. 1972. V.16, p.108-125.

60. Cui Z., Yan A., Lee L.F. Expression and procession and processing of Marek's disease virus pp 38 in insect cells and immunological characterization of the gene product. // In: 19-th World's Poultry Congress., V.l. Amsterdam 1992. P.123-125.

61. Dandapat S., Pradhan H.K., Mohanty G.C. Anti- idiotype antibodies to Marek's disease associated tumor surfase antigen in protection againts Marek's disease. // Vet. Immunology immunopathology. 1994. - v.40, p.353-366.

62. Davidson I., Becker Y., Malkinson M. Virus neutralization domains on the oligomeric (230 kDa) forms of antigen B herpesvirus of turkeys and Marek's disease virus in cross-serotypic activity. // J. Vet. Med. B. - 1995. - v.42? p. 100-109.

63. Davidson I., Dorovskaya A. and Malkinson M. Use of the polymerase chain reaction for the diagnosis of natural infection of chickens and turkeys with Marek's disease virus and reticuloendotheliosis virus. // Avin Pathol. 1995. -№24, p. 69-94.

64. Davidson I., Tanaka A., Nonoyama M. Common antigenic epitopes are present on heat-labile oligomers of MDV glicoprotein B and HSV glicoprotein B. // Virus Res. 1995. - v.35, №3, p.233-245.

65. Dudnikov Z.A., Witter R.Z. A comparison of autologous and heterologous vaccination adainst Marek's disease. // The 6-th International Symposium on Marek's disease, Monreal, Canada. 2000. - August 20-23, p.37.

66. Efficacy and safety of recombinant fowl pox Marek's disease vaccine. / Kinney N., Page D., Taylor J. et al. // Zootécnica - International. - 1995. - v. 18, №9. P.32-33.

67. Enhancement of spontaneous bursal limphoma freguency by serotype 2 Marek's disease vaccine, SB-1, in transgenic and non-transgenic line 0 white leghorn chickens. / Salter D.W., Payn W., Kung H.-I. et al. // Avian Pathol. -2000. v.28, №2, p.147-154.

68. Expression of the A antigen (gp 57-65) of Marek's disease virus by recombinant baculovirus. / Niikura M., Matsuura Y. Et al. // J. Gen. Virol. 1991. -v.72, p.1099-1104.

69. Gagic M., Carherine A. St. Hill, Shanna J.M. In Ovo vaccination of specific-pathogen-free chickens with vaccines containing multiple agents. // Avian Dis. 1999.-№43,p.293-301.

70. Gavora J.S. Genetics aspects of interactions between Marek's disease virus and their hosts. // In: 19-th World's Poultry Congress v.l. Amsterdam. 1992, p.175-180.

71. Genetics and vaccines for the future control of Marek's disease. / Witter R.L., Bacon L.D., Hunt H.D. and Cheng H.H. // Proc. Annual nat. beeders round table. 1994. - S.l, p.90-96.

72. Gilka E., Spenser J.L. Extravascular haemolytic anaemea in chickens infected with highly pathogenic Marek's disease viruses. // Avian Pathol. 1995. - v.24, №3, p.393-410.

73. Harasawa R. The new classification of animal viruses. // J. Vet. Med. 1995. -v.48, p.911-917.

74. Hase T., Summers P.L., Eskelesk H. // Virally Infected Cell. New-York. -1989, p. 275-308.

75. Heryn D., Ross A.H., Koprowski H. Anti-idiotipic antibodies bear the internal image of human tumor antigen. // Science. 1986. - v.232, p.100-102.

76. Hong Y., Frame M., Coussens P.M. A 14 kDa immediate-early phosphoprotein in specifically expressed in cells infected with oncogenic Marek's disease virus strains and their attenuated derivatives. // Virology. 1995. - v.206, №1, p.695-700.

77. Hoofi Van Idderinge B.S.J, et al. Genome analisis of Marek's disease virus staian CVI-988. Effect of cell cultura passage on the inverted Repeat Region. // Avian Dis. 1999. - №44, p. 182.

78. Isolation from turkeys of a cell-associated hepesvirus antigenically related to Marek's disease virus. / Witter R.L., Nazerian K. Et al. // Am. J.Vet. Res. -1970. v.31, p.525-538.

79. Isolation of serotype 1 Marek's disease viruses from vaccinatad Australian flocks. / De Laney D.B., Iones A.E., Zerbes et al. // Veter. Microbiol. 1995. -v.46, №1-3, p.213-219.

80. Jerne N.K. Toward anetwork theory of the immune system. // Ann. Immunol. (Paris). 1974. - v. 125 c. P.373-389.

81. Immunoprecipitation of Marek's disease virus-specific polypeptides with chicken antibodies purified by affinity chromatography. / Ikuta K., Nishi Y., Kato S., Hirai K. // Virology. 1981. - v. 114, p.227-281.

82. Kaaden O.K., Dietrchold B. and Ubrschar S. Vaccination againtst Marek's disease: Immunising effect of purified turkey herpes virus and cellular membrane from infected cells. // Med. Microbiol. Immunol. 1974. - №159, p. 261-269.

83. Kato S., Hirai K. Marek's disease. Advances in virus recearch. / Ed Mara-morsch K., Murphy F.A., Shatkin A.J. // New York: Academic Press. 1985, v.30, p.225-227.

84. Kawamura H., King D.J., Anderson D.P. A herpesvirus isolated from kidnev cell culture of normal turkeys. // Avian Dis. 1969. - v. 13, p.853-863.

85. Kazuhiro Nakajima. Syntesis and processing of a gp 28-32 membrane glycoprotein induced by Marek's disease virus serotype 2. // J. of General Virology. 1990. - v.71, p.1807-1810.

86. Keay S., Merigan T.C., Rasmussen L. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1989. -v.86, p.10100-10103.

87. Kennedy R.C., Melnich J.Z. and Dreesma G.R. Anti-idiotypes and immunity. // Sci. Am. 1986. - 255 (1), p.40-48.

88. Kobler G., Milstein C. Dervation of specific antibody producing tissue culture and tuneor lines by cell lusion. // Eur. J. Immunol. 1976. - №6, p.611-621.

89. Krah D.L., Choppin P.W. // J. Virol. 1988. - v.62, p. 1565-1572.

90. Kross I., Davis P.J., Schiletto R.W. Isolation of highly citolitic MDV strains from Germany and Spain. // Avaian Pat hoi. 1998. - v.27(3), p.313.

91. Lee L.F., Witter R.L. Monoclonal antibodies with specificity for three different serotypes of Marek's disease viruses in chickens. // J. Immunol. 1983. -v,130,p.l003-1006.

92. Lessard M., Hutchings D.L., Spenser J.L. et al. Influence of Marek's disease virus strain AC-1 on celluar Immunity in birds earring endogenous viral genes. // Avian Dis. 1996. - v.40, p.645-653.

93. Liberona P. Marek's.atill a treatl // Poultry Adv. 1990. - v.XXIII.- №1, p.65-69.

94. Marek's disease: a comprehensive view. / Prajapat K.S., Joshi B.P. et al. // Poultry Guide. 1990. - v.27. - №12, p.67-72.

95. Marek's disease field exprience and vaccination strategies. // Poultry International. - 1993. - №11, p.33-36.

96. Marx S.L. Making antibodies without the antigens. // Science. 1984. -v.228, p.162-165.

97. Mischak M., Neubauer C. et al. // J. Gen. Virol. 1988. - v.69, p.2653-2656.

98. Molecular analysis of the glucoprotein C nagative phenotype of attenuated Marek's disease virus. / Wilson M. R., Soutwick R.A. et al. // Virology. -1994. - v.199. - №2, p.339-402.

99. Murthy K.K., Calnec B.M. Pathogenesis of Marek's disease: effect of immunization with inactivated viral and tumor-associated antigenes. // Infect. Immun. 1979. - v.26, p.547-553.

100. Nagang G., Kharole M.U. Effects of levamisole on the efficacy of turkey herpesvirus vaccin against Marek's disease. // Indian J. Virol. 1995. - v.l 1. -№1, p.13-22.

101. Nazerian K., Burmester B.R. Electron microscopy of a herpesvirus associed with the agent of Marek's disease in cell culture. // Cancer Res. 1968. - v.28, p.2454-2464.

102. Nazerian K., Chen J.H. Immunoferiitin studies of Marek's disease virus directed intracelular and membrane antigenes. // Arch. Ges. Virusforsch. 1973. - v.431, p.59-65.

103. Nazerian K., Witter R.L., Lee L.F. Protection and synergism by recombinant fowl pox vaccines expressing genes from Marek's disease virus. // Avian Dis. -1996. v.40, p.368-376.

104. New vaccine for old problem. // International Poultry Production. 1995. -v.3 - №6, p.17-19.

105. Omar A.R., Schat. K.A., Lee L.F., Hunt M.D. Cytotoxic T Limphocute respouse in chickens immunized with a recombinent fowlpox virus expressing Marek's disease herpesvirus glycoprotein B. // Vet. Immunol. And Immu-nopath. 1998, v.62, p. 73-82.

106. Payne L.N. Pathogenesis of Marek's disease: recent development. // In: 19th World's Poultry Congress., v.l. Amsterdam, 1992, p. 189-194.

107. Petrone Garcia V.M. Xochill herrades velasco gullermo teller isaias. // Veterinaria Mexico. 2000. - v.31. - №4, p.355-369.

108. Phenotype analysis of lymphoid cells in Marek's disease of CD4+ or CD8+ T-cell-deficient chickens: occurence of double negative T-cell tumour. // Okada K., Talaka Y. et al. // Avian Pathol. 1997. - v.26, p.525-534.

109. Pradhan H.K., Mohanty G.C., Lee W.Y. Antibody directed against Marek's disease associated tumour surface antigen can be eluted from against Marek's disease tumour cells. // Vet. Immunol. And Immunopath. - 1991. - v.29, p.229-238.

110. Preparation of monoclonal antibodies against Marek's disease virus and herpesvirus of turkeys. / Hirose H., Matsuda H., Murata M., Seniya Y. // Jmp. J. Vet. Sci. 1986.-v.48. -№6,p.l263-1266.

111. Preparation of monoclonal antibodies against Marek's disease virus serotype 1 glycoprotein D expressed by a recombinant baculovirus. / Mitsuru O., Hyung-Kwan J., Ken M. et al. // Virus Res. 1995. - v.38. - №2-3, p.219-230.

112. Protection against Marek's disease by fowlpox virus recombinant expressing the glycoprotein B Marek's disease virus. / Nazerian K., Lee L.F. et al. // J. Virol. 1992. - v.66, p.1409-1413.

113. Protection studies against Marek's disease using bacculovirus expressed glycoprotein B and C of Marek's disease virus type 1. / Jang H.K., Kitazawa T., Ono M. et al. // Avian Pathol. - 1996. - v.25. - №1, p.5-25.

114. Rispens B.H., Van Vloten H., Mastenbroek N. Control of Marek's disease in the Netherlands 2. Feild trials of vaccination with an avirulent strain (CVI-988) of Marek's disease virus.//Avian Dis. 1992. - v.16, p.126-129.

115. Rodriguez J.M. Detection of animal pathogens by using the Polymerase Chain Reaction. //Vet. J. 1997. - v. 153, p.287-305.

116. Roizman B., Furlong D. The replication of herpesviruses. // J. Virol. 1980. - v.37, p.334-342.

117. Rong G. // Acta Veter. Zootechb. Sci. 1998. - v.29. - №2, p.142-150.

118. Ross N.J. T-cell transformatiom by Marek's disease virus. // Trends Microbiol. 1999. - v.7. - №1, p.22-28.

119. Sachs D.Z., Esser K., Sher A. Immunization of mise against African trypanosomiasis using anti-idiotypic antibodies. // J. Ezp. Med. 1982. - v. 155, p.1108-1119.

120. Sarma G. Field trial and immunogenecity studies on the polyvalent Marek's disease vaccones in chickens. // In: 19-th World's Poultry Congress, v.l. Amsterdam. 1992, p.310-314.

121. Serotype-specific polypeptides of Marek's disease virus identified by monoclonal antibodies reactive in enzyme-linked immunosorbent assay. / Lee L.F., Ren D., Li Y. and Sui D. // In: 19-th World's Poultry Congress, v.l, Amsterdam, 1992, p.127-130.

122. Schat K.A., Calnek B.W. and Fabricant I. Characterization of two highly oncogenic strainc of Marek's disease virus. // Avian Pathol. 1982. - v.ll, p.593-606.

123. Schat K.A., Calnek B.W. Protection against Marek's disease derived tumor transplants by the nononcogenic SB-1 strain of Marek's disease virus. // Infect. Immunol. - 1978. -v.ll, p.225-232.

124. Schat K.A. Immune responses against Marek's disease virus. // In: 19-th World's Poultry Congress., v. 1. Amsterdam. 1992, p.233-238.

125. Shierman W.L. Transplantable Marek's disease lymphomas. II. Variable tumor immunity induced by different lymphoblastoid cell. // J. Natl. Cancer Inst. 1984, v.73, p.423-428.

126. Silva R.F., Galvert I.D., Lee L.F. A simple immunoperoxidase plague assay to detect guantitate Marek's disease virus plagues. // Avian Dis. 1997. - v.41^ p.528-534.

127. Standard I.M., Fuller A.O., Spear P.G. Herpes simplex virus glicoproteins associated with different morphological enities projecting from the virion envelope. //J. Gen. Virol. 1987. - v.68, p.715-725.

128. Stein K., Soderstrom T. Neonatal administration of idiotype or anti-idiotype primes for protection against Escherichia coli K 13 infection in mice. // J. Exp. Med. 1984.-v.l 60, p.1001-1011.

129. The use of blood from selected chickens as an immunizing agent for Marek's disease. / Zander D.N., Hill R.W., Raymond R.G., Balch R.K. // Avian Dis.- 1972.-v.16, p.163-178.

130. Use of recombinant pp 38 antigen Marek's disease virus to identify serotype 1 specific antibodies in chicken sera by Western blotting. / Li D.S., Green P.F., Skinner et al.//J. Virol. Meth. - 1994. - v.50. - №1-3, p. 185-196.

131. Wilcox C.L., Johnson E.M. Nerve growth factor deprivation results in the reactivation of latent herpes simplex virus in vitro. // J. Virol. 1987. - v.61, p.2311-2315.

132. Wilson M.R., Tieber V.L. Molecular basis for reduced expression of glycoprotein C (gr 57-65) in attenuated Marek's disease virus. // In: 19-th World's Poultry Congress., v.l Amsterdam. 1992, p. 108-111.

133. Witter R.L. Attenuated revertanat serotype 1 Marek's disease virus: safety and protective efficacy. // Avian Dis. 1991. - v.3, p.877-891.

134. Witter R.L. Attenuated of lymphoid leukosis enhancement by serotype 2 Marek's disease virus. // Avian Pathol. 1995. - v.24, p.665-678.

135. Witter R.L., Lee L.F., Faly A.M. Characteristics of CVI-988/Rispens and R2/23, new prototype vaccine strains of serotype 1 Marek's disease virus. // Avian Dis. 1995. - №39, p.269-284.

136. Witter R.L., Lee L.F., Sharma J.M. Biological diversity among serotype 2 Marek's disease virus. // Avian Dis. 1990. - v.34, p.944-957.

137. Witter R.L. Marek's disease: prevention and control. // In: Advances in Marek's disease Research. Japanese Association on Marek's disease, Osaka. - 1989, p.389-397.

138. Witter R.L. Protection by attenuated and polyvalent vaccines against highly virulent strain of Marek's disease virus. // Avian Pathol. 1982, v.l 1, p.49-62.

139. Witter R.L. Resent development in the prevention and control of Marek's disease. In: 19-th World's Poultry Congress., v.l. Amsterdam. 1992, p.289-304.

140. Witter R.L. The changing landscape of Marek's disease. Avian Pathol.1998. v.27, p.46-63.

141. Witter R.L. Very virulent Marek's disease viruses: impotance and control. // World's Poultry. 1989. - v.45. - №1, p.60-68.

142. Witter R.L. Low enhancement serotype 2 vaccine for Marek's disease. // United States Departament of Agriculture patents. Washington. - Oct. 15. -1996 (5,565,202), p.1-12.

143. Wu P., Lee L.F., Reed W.M. Serological characteristics of membrene glycoprotein gp 82 of Marek's disease virus. // Avian Dis., Kennet Sguare, Pa: American Association of Avian Pathologists Inc. 1997. - v.41(4). - Jct./Dec., p.824-831.

144. Wu C.F., Liu X.F. Механизм протективного синергизма между сероти-пами 2 и 3 болезни Марека. // Zhong guo Shoyi Xiebao Chin. J. Vet. Sci.1999. v.5. - №19, p.425-428.

145. Zesnik F., Ross I.J. Immunization against Marek's disease using Marek's disease virus-specific antigenes from infectious virus. // Int. J. Cancer. 1975. - v.16, p.153-163.

146. Zhang L., Zxang S., Xue W. et al. Expression of a 50kDa patative receptor for bovine viral diarrhea virus in bovine fetal tissues. // Can. J. Vet. Res. -1998.-V.62. -№2, p.156-159.

147. Zhizhohg C. Marek's disease virus gene clones encoding virus-specific phosphorylated polypeptides and serological characterization of fusion proteins. // Virus genes. 1990. V.3, p.309-322.

148. Zhizhong C., Lee L.F. A lymphocyte surface antigen complex related of Marek's disease tumor cells and recognized by a monoclonal antibody. // Acta Veterinaria et Zootécnica. 1995. - v.26 (2), p.139-146.