ОЦЕНКА ЭФФЕКТОВ ОКТРЕОТИДА НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ЛЕЙКОЦИТОВ

Породенко, Игорь Валериевич

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
ОЦЕНКА ЭФФЕКТОВ ОКТРЕОТИДА НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ЛЕЙКОЦИТОВ
ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "ОЦЕНКА ЭФФЕКТОВ ОКТРЕОТИДА НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ЛЕЙКОЦИТОВ"

кубанский государственный медицинскии университет

На правах рукописи

Породенко Игорь Валериевич | 003403685

ОЦЕНКА ЭФФЕКТОВ ОКТРЕОТИДА НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ЛЕЙКОЦИТОВ

03.00.13 - физиология, 14.00.15 - патологическая анатомия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

1 9 НОЯ

Краснодар - 2009

003483685

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Кубанский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (КГМУ).

Научные руководители: доетор медицинских наук

Курзанов Анатолий Николаевич,

доктор биологических наук профессор Славинский Александр Александрович.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук профессор Сторожук Пётр Григорьевич доктор медицинских наук профессор Ермилов Виктор Владимирович

Ведущая организация: Ставропольская государственная медицинская академия.

Защита состоится « » декабря 2009 г. в 10:00 часов на заседании диссертационного совета Д208.038.01 при КГМУ по адресу: 350063, Краснодар, ул. Седина, 4, КГМУ, тел. (861) 262-73-75.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке КГМУ.

Автореферат разослан «_ _» ноября 2009 года.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук

профессор

'Я-

Ю.Р. Шейх-Заде

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Соматостатин - нейропептид, вырабатываемый гипоталамусом, поджелудочной железой, а также слизистой оболочкой желудка и кишечника (Chen D. et al„ 2006; Raufman J.P. et al., 2009). Этот пептид ингибирует секрецию соматотропного гормона передней доли гипофиза, угнетает- желудочную секрецию и секрецию поджелудочной железы, тормозит выделение гастрина и мотилина, уменьшает висцеральный кровоток. В экспериментах на крысах показано, что соматостатин стимулирует активность ретикуло-эндотелиальной и лимфопоэтической систем. Изменение под его влиянием активности клеток-киллеров отмечено у человека (Case С.С., Wirfei К., Vassilopoulou - Sellin R„ 2002).

Синтетический аналог соматостатина октреотид угнетает экзокринную функцию поджелудочной железы, снижает объем панкреатического секрета, содержание в нем ферментов и концентрацию бикарбонатов. Октреотид оказывает прямое угнетающее действие на экзокринную секрецию поджелудочной железы через специфические мембранные рецепторы. Препарат также обладает противовоспалительным действием, которое связано со стабилизацией клеточных мембран, блокадой цитокиногенеза и продукции простагландинов, антиоксидантной активностью (Ревтович М.Ю., 2003; Леонович С.И. с соавт., 2003). Обнаружено, что подкожно вводимая однократная доза октреотида подавляет секрецию инсулина через 30 минут после инъекции (Antony L.B., Wolfering Е.А., Espenan G.D., 2002). Эти свойства октреотида послужили основанием для его применения у больных, которым проводятся оперативные вмешательства на поджелудочной железе (Gur R., Meier R., 1996).

Существует представление о возможной роли нейропептидов в регуляции деятельности иммунной системы на разных уровнях ее

организации - от субклеточного до системного. Накапливается все больше данных, свидетельствующих о роли нейропептидов, в том числе и соматостатина, в обеспечении взаимодействия нервной и иммунной систем (Perry M.D. et al., 2009).

Пептиды, взаимодействуя со специфическими рецепторами, расположенными на нейтрофильных лейкоцитах и в центральной нервной системе, способны регулировать механизмы резистентности организма (Kumar U. et al., 2009). Введение пептидов повышает уровень содержания катионных белков в нейтрофильных лейкоцитах. Установлено корригирующее влияние пептидов на поврежденный рецепторный аппарат нейтрофильных лейкоцитов (Andina N. et al., 2009).

Существует предположение, что система тканевых нейтрофилов выполняет посредническую роль между центральной нервной системой и соединительной тканью (Третьякова И.Е., Долгушин И.И., 2004). Нейтрофильные лейкоциты получают сигналы по нейросекреторным каналам, реализуют в тканях свой функциональный потенциал и одновременно осуществляют механизм обратной связи.

На поверхности нейтрофилов обнаружены рецепторы к различным пептидам, осуществляющим регуляторную функцию (Маянский Д.Н., Маянская С.Д., 2001). Количество и аффинность рецепторов, их способность вызывать различные проявления активации нейтрофильных лейкоцитов изменяются в зависимости от уровня функционального состояния клеток (Prasad V. et al., 2007). Нейтрофильные лейкоциты способны продуцировать пептиды, участвующие в регуляции иммуногенеза, что позволяет рассматривать нейтрофил как регуляторную клетку, связанную с поддержанием постоянства внутренней среды организма (Falanga A. et al., 2000; Femling J.K., 2005).

Установлено, что инфильтрация нейтрофилами поджелудочной железы - ключевое событие в развитии панкреатита (Tu W. et al., 2000;

Wang X.P. et al., 2003). Ацинарные клетки поджелудочной железы способны нацеливать нейтрофильные лейкоциты на свою поверхность, что может привести к смерти не только клеток, но и самой железы (Hegyi P. et al., 2009). Это свидетельствует о том, что фатальный панкреатит может быть результатом прежде всего избыточной стимуляции нейтрофильных лейкоцитов (Mäher О. et al., 1999; Zaninovic V. et al., 2000).

Вопрос о влиянии соматостатина и октреотида на функциональную активность нейтрофилов в норме и при развитии патологических состояний остается недостаточно изученным.

Цель исследования Оценить влияние октреотида на функциональную активность нейтрофильных лейкоцитов крови в норме и при наличии патологических изменений поджелудочной железы у людей и крыс.

Задачи исследования

1. Выявить воздействие октреотида на способность нейтрофилов крови здоровых людей к активации in vitro.

2. Охарактеризовать октреотидиндуцированные эффекты на функционально-метаболическую активность нейтрофильных лейкоцитов больных острым панкреатитом in vivo и in vitro.

3. Определить характер изменений функциональной активности нейтрофилов периферической крови крыс в процессе развития острого экспериментального панкреатита (ОЭП).

4. Оценить влияние октреотида на состояние ткани поджелудочной железы крыс в динамике развития ОЭП.

5. Установить характер воздействия октреотида на функционально-метаболическую активность нейтрофильных лейкоцитов в физиологических условиях и при остром панкреатите.

Новизна результатов исследования

1. Представлены новые данные о влиянии октреотида in vitro на способность к активации нейтрофильных лейкоцитов периферической крови здоровых людей в зависимости от концентрации пептида.

2. Выявлена способность октреотида оказывать ингибирующее действие in vitro на повышенную функциональную активность нейтрофилов крови больных с острым панкреатитом.

3. Найдены новые особенности изменения функционально-метаболической активности нейтрофильных лейкоцитов (активность NADPH-оксидазы, миелопероксидазы, щелочной фосфатазы, содержание катионных белков, активационный потенциал ядерного хроматина) при развитии ОЭП.

4. Получены сведения о протекторном действии октреотида на ткань поджелудочной железы и ингибирующем - на функционально-метаболическую активность нейтрофильных лейкоцитов крови крыс с ОЭП.

Теоретическая значимость исследования

Выявлено модулирующее действие октреотида на функционально-метаболическую активность нейтрофильных лейкоцитов в норме и при патологии (острый панкреатит), что расширяет современные представления о взаимодействии нейроэндокринной и иммунной систем организма.

Результаты проведенной работы могут быть использованы в учебном процессе со студентами медицинских специальностей, а также служить основой для дальнейших прикладных исследований.

Практическая значимость исследования

экспериментальным панкреатитом может быть использовано для иммунокоррекции состояний, сопровождающихся избыточной активацией нейтрофилов крови.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Объекты исследования: венозная кровь 25 здоровых людей, 25 больных острым панкреатитом и капиллярная кровь 38 крыс. Экспериментальная часть работы выполнена на стандартизированных аутбредных крысах-самцах породы Sprague Dawley 4-5 месячного возраста массой 420-500 граммов, которые были разделены на 5 групп: 1 группа -ложнооперированые животные (5 крыс) с минимальным хирургическим вмешательством в виде лапаротомии; 2 группа - животные с острым экспериментальным панкреатитом (9 крыс); 3 группа - животные с острым экспериментальным панкреатитом, получавшие инъекции октреотида (9 крыс); 4 группа - ложнооперированые животные (5 крыс), получавшие инъекции октреотида; контрольная группа - интактные, здоровые животные (10 крыс).

Моделировали ОЭП путем глубокого охлаждения обеих поверхностей поджелудочной железы хлорэтилом (Мапхасян В.А., Симоворян П.Р., 1972). Для подтверждения развития ОЭП проводили морфологическое исследование состояния поджелудочной железы крыс в динамике эксперимента.

Функционально-метаболическую активность нейтрофилов исследовали на первые (до манипуляций), третьи (после операции) и седьмые сутки эксперимента. В нейтрофильных лейкоцитах определяли активность NADPH-оксидазы с помощью НСТ-теста (Нестерова И.В., 1980), активность миелопероксидазы оценивали по методу Шафран М.Г. и соавт. (1979), щелочной фосфатазы - по методике М.Г. Шубича (1965). Содержание катионных белков выявляли по методике A.A. Славинского и Г.В. Никитиной (1999). Активационный потенциал ядерного хроматина оценивали поляризационно-оптическим методом A.A. Евглевского (2000).

Компьютерную морфометрию изображения нейтрофильных лейкоцитов выполняли при помощи цветной телевизионной системы для микроскопических исследований «CitoW» (Диаморф, Москва). Результаты оценивали с использованием интегрального цитохимического показателя -ИЦП (Славинский А.А., 2000).

Оценку значимости различий между средними значениями двух сравниваемых исследуемых показателей выполняли с помощью дисперсионного анализа, вычисляли критерий Стьюдента (t) и доверительную вероятность различий (р) (Гланц С., 1999). Диапазон, ограниченный ±2 S (стандартное отклонение от средней величины), использовали при характеристике границ нормы как наиболее приемлемый для гематологических показателей (Воробьев А.И., 2002).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Влияние октреотида на функционально-метаболическую активность нейтрофилов крови здоровых людей in vitro Изучение влияния нейропептида на функционально-

метаболическую активность нейтрофильных лейкоцитов производили в опытах in vitro с помощью постановки НСТ-теста, отражающего изменение активности NADPH-оксидазы, по которой можно судить о способности нейтрофилов к активации. В контрольной группе без инкубации с октреотидом средние значения ИЦП составили 4,90±0,3 отн. ед. Воздействие пептида в диапазоне концентраций от 5-Ю"4 М до 5-Ю"7 М способствовало постепенному снижению активности NADPH-оксидазы. Наибольшее уменьшение показателей получено в результате использования октреотида в концентрации 5-10"7 М. При этом значения ИЦП составили 1,92±0,2 отн. ед., что ниже в 2,5 раза по сравнению с контролем (рис.1). Инкубация крови с раствором пептида в более низких концентрациях (5-104 М и 5-10"14 М) не вызывала такого выраженного

угнетения функционально-метаболической активности нейтрофилов, как действие октреотида в концентрации 5-107 М.

Влияние октреотида на функционально-метаболическую активность нейтрофилов крови больных острым панкреатитом in vitro

При постановке НСТ - теста ИЦП нейтрофильных лейкоцитов на первые сутки наблюдения превышал аналогичный показатель нейтрофилов здоровых людей и составил 8,76+0,3 относительных единиц, что по сравнению с группой здоровых людей без инкубации с октреотидом было выше в 1,8 раза (р<0,05). Этот же показатель нейтрофилов на первые сутки наблюдения оказался меньше, чем в нейтрофилах образцов крови, не подвергавшихся инкубации с октреотидом, но при этом он был достоверно (р<0,05) больше соответствующего показателя у здоровых людей (рис. 2).

На третьи сутки наблюдения ИЦП нейтрофилов в пробах крови, инкубированных in vitro с октреотидом, в 2 раза уменьшился как по сравнению с результатами в первые сутки наблюдения, так и, хотя в меньшей степени, по сравнению с соответствующим показателем у здоровых лиц (в 1,2 раза).

На седьмые сутки наибольшие изменения в данной серии исследований отмечены по параметрам ИЦП в нейтрофилах образцов крови больных острым панкреатитом после инкубации с октреотидом. Он оказался в 5,5 раз меньше этого показателя функциональной активности нейтрофильных лейкоцитов по сравнению со здоровыми испытуемыми, а также в 4,3 раза меньше соответствующих значений, зафиксированных в тех же условиях у исследуемых пациентов на третьи сутки наблюдения.

отн.ед

9 8,5 8 7,5 7 6,5 6 5,5 5 4,5 4 3,5 3 2,5 2 1,5 1

0,5 О

отн.ед

4,9

1,5*2

3,5 —

8,76

4,75

Зг«-

,0.35

контроль 10'7

Рис. 1

1 сутки 3 сутки 7 сутки

Рис.2

Рис. 1. Влияние октреотида на функционально-метаболическую активность нейтрофилов здоровых людей. Активность МАЭРН-оксидазы (отн. ед.):

□ - кровь здоровых людей без инкубации с октреотидом (контроль);

□ - кровь здоровых людей, инкубированная с октреотидом в концентрации 5• 10"7 М в течение 60 минут.

Рис. 2. Влияние октреотида на функционально-метаболическую активность нейтрофилов больных острым панкреатитом. Активность ИАБРН-оксидазы (отн. ед.):

□ - кровь больных острым панкреатитом без инкубации с октреотидом;

□ - кровь больных острым панкреатитом, инкубированная с октреотидом в концентрации 5-Ю"7 М в течение 60 минут.

ВЛИЯНИЕ ОКТРЕОТИДА НА СОСТОЯНИЕ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ КРЫС ПРИ ОСТРОМ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ПАНКРЕАТИТЕ

Проведено моделирование ОЭП у 38 крыс-самцов. В качестве групп

сравнения служили ложнооперированные животные без моделирования ОЭП, часть из которых получала инъекции раствора октреотида, а также животные, у которых выполняли моделирование ОЭП, но лечение октреотидом не проводили.

В селезеночном сегменте поджелудочной железы уже на 3-й сутки заболевания отмечались крупные масштабы незавершенного некроза

ацинарной ткани и дольки с неполноценной протоковой регенерацией, а также жировые некрозы с нагноением. К 7-м суткам поврежденные дольки поджелудочной железы подвергались склерозу с сохраняющимся воспалением. Незавершенная регенерация жировых интерстициальных некрозов приводила к формированию крупных воспалительных инфильтратов, отграниченных фиброзной капсулой, спаянной с окружающими органами (рис. 3).

Лечение ОЭП октреотидом тормозило прогрессирование ацинарного некроза во всех отделах поджелудочной железы, приводило к быстрому (3-й сутки) отграничению атрофирующихся путем протоковой трансформации долек от неповрежденной ацинарной ткани. Мелкие интерстициальные жировые некрозы под влиянием миграции лейкоцитов подвергались разобщению, элиминации детрита под воздействием макрофагов и заместительному склерозу. При этом крупные жировые некрозы инкапсулировались, отделяясь от ткани поджелудочной железы фиброзной капсулой. Вокруг таких инкапсулированных некрозов в результате перипроцесса формировался воспалительный инфильтрат с вовлечением окружающих органов.

Таким образом, можно заключить, что при лечении ОЭП октреотидом морфологически выявлены положительные эффекты влияния на течение заболевания по сравнению с контрольной серией без лечения. Они состоят в уменьшении масштабов ферментного некроза ацинарной и жировой ткани, ранних процессах репарации поврежденных тканей без нагноения. Репарация ацинарной ткани протекает по типу неполноценной протоковой трансформации с последующим склерозом и убылью в большей или меньшей степени ацинарной ткани. Заживление жировых некрозов происходит по типу полноценной завершенной регенерации: сначала острого демаркационного воспаления с завершенным протеолизом липолитического некроза без нагноения, затем сменой воспалительного

инфильтрата на макрофагальный с элиминацией некротического детрита и завершается заместительным склерозом и липоматозом без остаточных признаков интерстициального склероза.

Рис. 3. Патогистологические изменения в селезеночном сегменте поджелудочной железы на 3 и 7 сутки ОЭП у крыс без лечения (а, б) и при лечении октреотидом (в, г):

а - атрофия и склероз дольки, макрофагальное воспаление вокруг жирового некроза (х 125); б - незавершенный краевой некроз ацинусов с миграцией лейкоцитов в некротизированнные ткани (х400); в - краевая атрофия долек с воспалением интерстиция (х125); г - фиброзная капсула вокруг жирового некроза, спаянная с печенью (х125). Окраска гематоксилином и эозином.

ВЛИЯНИЕ ОКТРЕОТИДА НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛОВ КРОВИ КРЫС ПРИ ОСТРОМ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ПАНКРЕАТИТЕ NADPH-oкcидaзa. В течение первых суток эксперимента не

наблюдалось существенных изменений активности NADPH-oкcидaзы нейтрофильных лейкоцитов крови у подопытных животных всех групп. На третьи сутки эксперимента средние значения ИЦП нейтрофилов в 1-й группе ложнооперированных животных не имели статистически достоверных отличий по сравнению с группой интактных животных и с группой крыс, которой проводилась лапаротомия на 1-е сутки эксперимента. Во 2-й группе крыс с ОЭП значения ИЦП достигали значений 2,09±0,44 относительных единиц, что говорит о достоверном (р<0,05) повышении активности МАБРН-оксидазы нейтрофилов в 4 раза по сравнению с активностью этого фермента у животных 1-й группы и более чем в 3,6 раза превышает соответствующий показатель у животных этой же группы на 1-е сутки наблюдения (рис. 4). Это свидетельствует о том, что развитие ОЭП сопровождается резким повышением активности ИАБРН-оксидазы нейтрофилов крови крыс. Значения ИЦП в 3-й группе животных с ОЭП и введением октреотида составили 0,86±0,12 относительных единиц, что по сравнению со 2-й группой животных с ОЭП ниже в 2,4 раза (р<0,01). Таким образом, введение октреотида достоверно уменьшило повышение активности этого фермента на фоне ОЭП. В 4-й группе ложнооперированных животных введение октреотида привело к снижению активности ЫАОРН-оксидазы нейтрофилов до 0,41 ±0,01, что по отношению к группе животных с лапаротомией на 3-й сутки эксперимента ниже в 1,3 раза (р<0,05), а по сравнению с группой ложнооперированных животных, получавших инъекции октреотида, меньше в 1,1 раза (р>0,05).

На седьмые сутки эксперимента в 1-й группе крыс различия не были статистически достоверными в сравнении с группой интактных

животных, а также в сравнении со значениями ИЦП нейтрофилов в группе ложнооперированных животных на 1-е и 3-й сутки наблюдения. Во 2-й группе животных с ОЭП значения ИЦП превышали в 3 раза этот показатель в группе ложнооперированных крыс и составили 1,68±0,04 относительных единиц (р<0,01). Активность ИАОРН-оксидазы нейтрофилов у крыс с ОЭП в этот период наблюдения в 2,9 раза превышала показатель активности этого фермента на 1-е сутки наблюдения, но по сравнению с 3-ми сутками оказалась в 1,2 раза меньше (р<0,05). Значения ИЦП в 3-й группе животных с ОЭП и введением октреотида снижались до 0,48±0,02, что по сравнению со 2-й группой крыс с ОЭП меньше в 3,5 раза (р<0,01) и в 1,8 раза меньше (р<0,05) того же показателя в 3-й группе животных на 3-й сутки наблюдения.

Таким образом, введение октреотида ложнооперированным крысам не вызвало заметных изменений активности ¡ЧАОРН-оксидазы в нейтрофильных лейкоцитах. Развитие ОЭП привело к достоверному увеличению активности этого фермента, в то время как введение животным октреотида существенно уменьшило, а к концу периода наблюдения фактически нормализовало уровень активности ИАОРН-оксидазы нейтрофилов крови.

2^тн.ед.

1,5 1

0,5 О

Рис. 4. Влияние октреотида на динамику активности ИАОРН-оксидазы нейтрофилов крыс при моделировании острого экспериментального панкреатита: □ - интактные животные; ■ - лапаротомия; □ - ОЭП; □ - ОЭП с введением октреотида; 3 - лапаротомия с введением октреотида.

Миелопероксидаза. Колебания активности фермента в Iй группе ложнооперированных крыс на третьи и седьмые сутки эксперимента были статистически не дстоверны (рис. 5).

На третьи сутки эксперимента во 2- группе животных с ОЭП введение октреотида привело к увеличению активности миелопероксидазы в 2 раза по сравнению с контрольной группой (р<0,05). Важно, что активность миелопероксидазы нейтрофилов на 3-й сутки эксперимента достоверно снизилась (р<0,05) по сравнению с 1-ми сутками наблюдения и в группе животных с острым экспериментальным панкреатитом, и в группе животных с этой же экспериментальной моделью патологии поджелудочной железы, которые получали инъекции октреотида.

На седьмые сутки эксперимента во 2~ группе животных с ОЭП активность миелопероксидазы несколько повысилась (в 1,2 раза), но была существенно ниже того же показателя на 1-е сутки наблюдения (в 1,5 раза; р<0,05).

отн.ед.

0,5

Рис. 5. Влияние октреотида на динамику активности миелопероксидазы нейтрофилов крыс при моделировании ОЭП: □ - интактные животные;

□ - лапаротомия; □ - ОЭП; □ - ОЭП с введением октреотида;

□ - лапаротомия с введением октреотида.

Сопоставление уровня активности миелопероксидазы нейтрофильных лейкоцитов на этом этапе эксперимента с аналогичным показателем во

I I- г г*

0.67 0,б1 0.68 0.69 0.65

г-Ь,

0.78 0.75

1 сутки

3 сутки

7сутки

всех группах животных на 1-е и 3-й сутки наблюдения показало, что наиболее значимое изменение активности фермента имело место в группе подопытных животных с острым экспериментальным панкреатитом, которые получали инъекции октреотида. Введение октреотида ложнооперированным животным сопровождалось заметным увеличением активности миелопероксидазы нейтрофилов по сравнению с 1-й сутками.

Щелочная фосфатаза.

На третьи сутки во 2а группе животных значения ИЦП достигали 7,06±0,18 относительных единиц, что свидетельствует о повышении активности щелочной фосфатазы по сравнению с 1-й группой в 2,1 раза (рис. 6).

Значения активности щелочной фосфатазы в 3-й группе крыс с ОЭП и введением октреотида по сравнению со 2-й группой животных с ОЭП, не получавших препарат, были меньше в 1,4 раза (5,18±0,06, р<0,05).

В 4-й группе животных (ложнооперированные, получавшие инъекции октреотида) активность щелочной фосфатазы составила 3,43±0,17.

^тн.ед.

7,5 7 6,5 6 5,5 5 4,5 4 3,5 3 2,5 2 1,5 1

0.5 0

Рис. 6. Влияние октреотида на динамику активности щелочной фосфатазы нейтрофилов крыс при моделировании острого экспериментального панкреатита: □ - интактные животные; □ - лапаротомия; □ - ОЭП; □ - ОЭП с введением октреотида; □ - лапаротомия с введением октреотида.

1 сутки

3 сутки

7сутки

На седьмые сутки активность фермента несколько снизилась, но при этом значения активности фермента достоверно (р<0,05) превышали соответствующие показатели как интактных животных, так и у крыс с ОЭП в 1-е сутки наблюдения. Введение октреотида в течение 7 суток крысам с ОЭП оказало достоверное (р<0,05) влияние на активность щелочной фосфатазы. Активность фермента под влиянием аналога соматостатина была существенно ниже и на 3-й, и на 7-е сутки наблюдения по сравнению с группой животных с ОЭП, не получавших инъекции октреотида, хотя к концу эксперимента все же несколько превышала этот показатель в группе интактных животных. В обеих группах ложнооперированных животных значимых изменений активности щелочной фосфатазы нейтрофильных лейкоцитов крови на протяжении всего периода наблюдения не отмечено.

Неферментные катионные белки. Содержание катионных белков в Iй группе ложнооперированных крыс составило 0,68+0,01 относительных единиц (рис. 7). На третьи сутки в группе крыс с ОЭП значения достигли 2,90±0,05 относительных единиц, что указывает на повышение содержания неферментных катионных белков по сравнению с группой ложнооперированных крыс в 4 раза (р<0,01), и в сравнении с группой животных с ОЭП на первые сутки эксперимента в 4,1 раза (р<0,05). На седьмые сутки содержание катионных белков в нейтрофилах достоверно (р<0,01) возросло у животных с ОЭП как не получавших октреотид, так и получавших его инъекции. Однако у животных с ОЭП, получавших инъекции октреотида, увеличение названного показателя было достоверно (р<0,05) меньшим. Следует отметить, что в динамике экперимента наиболее значимые изменения содержания неферментных катионных белков в нейтрофильных лейкоцитах крыс отмечены в группах животных с моделированием острого экспериментального панкреатита.

отн 3

2,5

1,5

0,5 О

Рис. 7. Влияние октреотида на динамику содержания катионных белков нейтрофилов крыс при моделировании острого экспериментального панкреатита: □ - интактные животные; □ - лапаротомия; □ - ОЭП;

□ - ОЭП с введением октреотида; □ - лапаротомия с введением октреотида.

Ядерный хроматин. В Iй группе ложнооперированных животных и во 2- группе крыс, получавших инъекции октреотида, статистически достоверных изменений показателя активационного потенциала ядерного хроматина нейтрофилов не выявлено (рис. 8).

отн.ед.

3,5 3 2,5 2 1,5 1

0,5 0

Рис. 8. Влияние октреотида на активационный потенциал ядерного хроматина нейтрофилов крыс при моделировании острого экспериментального панкреатита: □ - интактные животные;

□ - лапаротомия; □ - ОЭП; □ - ОЭП с введением октреотида;

□ - лапаротомия с введением октреотида.

0.68

0.7

0.78

0,91

0.71 2.9 1.97 0.95

0.8 1.93 1.51 1.00

1 сутки

3 сутки

7сутки

г^п и г4- рЬ -*- 1

1.91 1.91 1,91 1.88 1.92 1,93 2,04

1.94: 2,00 2.81 2.16

1 сутки

3 сутки

7сутки

На третьи сутки эксперимента моделирование ОЭП в 3й группе животных вызвало повышение показателя активационного потенциала хроматина нейтрофилов в 1,8 раза по сравнению с показателем контрольной группы (р<0,01). Инъекции октреотида животным 4" группы с ОЭП снизили активационный потенциал хроматина нейтрофильных лейкоцитов в 1,4 раза (р<0,01), по сравнению с группой животных с ОЭП без лечения.

На седьмые сутки эксперимента у крыс 3й группы с ОЭП показатель активационного потенциала хроматина нейтрофильных лейкоцитов был выше значения контрольной группы в 1,1 раза (р<0,01). Однако это значение было ниже, чем показатель, полученный на третьи сутки эксперимента, в 1,2 раза (р<0,01). В 4~ группе животных с ОЭП, на фоне лечения октреотидом, наблюдалось снижение показателя активационного потенциала ядерного хроматина нейтрофилов в 1,3 раза по сравнению с 3й группой животных (р<0,01).

ВЫВОДЫ

1. Синтетический аналог соматостатина нейропептид октреотид у здоровых людей угнетает функционально-метаболическую активность нейтрофильных лейкоцитов, о чем свидетельствует снижение активности NADPH-оксидазы. Наиболее выраженное действие пептид оказывает в концентрации 5-10"7М.

2. У больных острым панкреатитом октреотид снижает повышенную функционально-метаболическую активность нейтрофильных лейкоцитов венозной крови in vitro, что проявляется уменьшением активности NADPH-оксидазы в цитоплазме клеток.

активационного потенциала ядерного хроматина, активности NADPH-оксидазы, щелочной фосфатазы и содержания неферментных катионных белков со снижением активности миелопероксидазы.

4. Репаративные изменения в поджелудочной железе крыс при остром экспериментальном панкреатите сопровождаются спонтанным снижением активационного потенциала ядерного хроматина, активности NADPH-оксидазы и щелочной фосфатазы, уменьшением содержания неферментных катионных белков и увеличением активности миелопероксидазы в нейтрофилах.

5. Инъекции октреотида животным с острым экспериментальным Холодовым панкреатитом оказывают протективное действие на поджелудочную железу. При репаративных изменениях в поджелудочной железе после применения октреотида показатели функционально-метаболической активности нейтрофильных лейкоцитов крови нормализуются.

6. Октреотид проявляет модулирующее действие на функционально-метаболическую активность нейтрофильных лейкоцитов, снижая её при избыточном исходном уровне. Эффекты октреотида проявляются in vitro и in vivo в норме и при остром панкреатите как у экспериментальных животных, так и у людей.

РАБОТЫ, ОПУБЛИКОВАННЫЕ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Породенко И.В. Влияние октреотида на активность нейтрофильных лейкоцитов при остром панкреатите // Кубанский научный медицинский вестник. - 2008. - № 1-2. - С. 79-83.

2. Породенко И.В., Курзанов А.Н., Славинский A.A. Октреотидиндуцированные изменения патоморфологических проявлений острого экспериментального панкреатита // Вестник хирургической гастроэнтерологии. - 2006. - № 1. - С. 127-128.

3. Породенко И.В., Курзанов А.Н. Лиганды соматостатиновых рецепторов в экспериментальной и клинической панкреатологии. Сообщение 3. Октреотид и соматостатин в хирургической панкреатологии

и онкопатологиии поджелудочной железы // Успехи современного естествознания. - 2006. - № 8. - С. 15-17.

4. Породенко И.В., Курзанов А.Н. Лиганды соматостатиновых рецепторов в экспериментальной и клинической панкреатологии. Сообщение I. Базисные предпосылки использования в гастроэнтерологии // Успехи современного естествознания. - 2006. - № 10. - С. 14-16.

5. Породенко И.В., Курзанов А.Н. Лиганды соматостатиновых рецепторов в экспериментальной и клинической панкреатологии. Сообщение 2. Соматостатин и его аналоги в лечении острого и хронического панкреатита // Успехи современного естествознания. - 2006. -№ Ю.-С. 17-20.

6. Породенко И.В. Иммунотропные эффекты лигандов соматостатиновых рецепторов // Открытое образование. - 2006. - № 3 - С. 248-250.

7. Породенко И.В., Беспалова Ж.Д., Славинский A.A., Курзанов А.Н. Морфологические изменения в поджелудочной железе при лечении экспериментального панкреатита октреотидом И Новые информационные технологии в медицине, биологии, фармакологии и экологии, 2007. Материалы XIV международной конференции и дискуссионного научного клуба. - Украина, Крым, Ялта-Гурзуф, 31 мая -9 июня 2007. - С. 225-227.

8. Породенко И.В., Славинский A.A., Балачевский Б.В., Курзанов А.Н. Октреотидиндуцированная оптимизация функциональной активности нейтрофильных лейкоцитов // Конгресс «Человек и лекарство. Краснодар - 2008». - 2008. - С. 72.

9. Славинский A.A., Балачевский Б.В., Породенко И.В. Функционально-метаболическая активность нейтрофильных лейкоцитов при остром панкреатите // Тез. докл. XII международного конгресса «Парентеральное и энтеральное питание». - 2008. - С. 28-29.

10. Курзанов А.Н., Славинский A.A., Породенко И.В., Балачевский Б.В. Пептидергическая модуляция функционально-метаболической активности нейтрофильных лейкоцитов // Науч. труды II Съезда физиологов СНГ «Физиология и здоровье человека». Москва-Кишинев. - 2008. - С. 160.

11. Курзанов А.Н., Славинский A.A., Породенко И.В., Балачевский Б.В. Пептидергическая модуляция функционально-метаболической активности нейтрофильных лейкоцитов как компонент их панкреатопротекторного действия // Тезисы докладов Г/ Российского симпозиума «Белки и пептиды». Казань, 23-27 июня 2009 г. - 2009. - С. 60.

Породенко Игорь Валериевич

ОЦЕНКА ЭФФЕКТОВ ОКТРЕОТИДА НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ЛЕЙКОЦИТОВ

автореферат

Подписано в печать 02.11.2009. Формат А5. Ризография. Усл.печ.л.1,3. Тираж 100 экз. Заказ 90, МУ «Краснодарский медицинский информационно-вычислительный

центр»

350059, г. Краснодар, ул. Дунайская, 62.

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Породенко, Игорь Валериевич

Список используемых сокращений

Введение

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. ВЛИЯНИЕ СОМАТОСТАТИНА И ОКТРЕОТИДА НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ

ЛЕЙКОЦИТОВ ПРИ ОСТРОМ ПАНКРЕАТИТЕ

1.1. Соматостатин

1.1.1. Историчекие сведения об открытии пептида

1.1.2. Описание структуры

1.1.3. Основные биологические эффекты

1.2. Октреотид

1.2.1. Исторические сведения о создании аналога пептида

1.2.2. Описание структуры

1.2.3. Основные фармакологические свойства

1.3. Нейтрофильные лейкоциты 22 1.3.1. Регуляторная функция нейтрофилов

1.4. Роль иммунной системы в развитии острого панкреатита и его осложнений

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Характеристика экспериментального материала in vivo

2.2. Моделирование острого холодового панкреатита

2.3. Методы патогистологического исследования ткани поджелудочной железы

2.4. Характеристика исследуемого материала in vitro

2.5. Влияние октреотида на функционально-метаболическую активность нейтрофилов в физиологических условиях

2.6. Цитохимические методы исследования

2.7. Метод определения активности ядерного хроматина

2.8. Компьютерная морфометрия изображения нейтрофильных лейкоцитов

2.9. Статистические методы

ГЛАВА 3. ВЛИЯНИЕ ОКТРЕОТИДА НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ IN VITRO

3.1. Определение дозозависимого влияния октреотида на функционально-метаболическую активность нейтрофилов в физиологических условиях

3.2. Функционально-метаболическая активность нейтрофилов крови и влияние на нее октреотида у больных острым панкреатитом

ГЛАВА 4. ВЛИЯНИЕ ОКТРЕОТИДА НА СОСТОЯНИЕ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ И ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛОВ ПРИ ОСТРОМ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ПАНКРЕАТИТЕ

4.1. Морфологические изменения поджелудочной железы у крыс с острым экспериментальным панкреатитом

4.2. Патоморфология поджелудочной железы крыс с острым 61 экспериментальным панкреатитом, получавших лечение октреотидом

4.3. Морфология поджелудочной железы-в контрольной серии

4.4. Морфология поджелудочной железы после лапаротомии и введения октреотида

4.5. Активность NADPI-I-оксидазы в нейтрофилах крови крыс с острым экспериментальным панкреатитом

4.6. Активность миелопероксидазы в нейтрофилах крови крыс с острым экспериментальным панкреатитом

4.7. Активность щелочной фосфатазы в нейтрофилах крови крыс с острым экспериментальным панкреатитом

4.8. Содержание неферментных катионных белков в нейтрофилах крови крыс с острым экспериментальным панкреатитом

4.9. Активность ядерного хроматина в нейтрофилах крови крыс с острым экспериментальным панкреатитом

ГЛАВА 5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ 90 ВЫВОДЫ

Введение Диссертация по биологии, на тему "ОЦЕНКА ЭФФЕКТОВ ОКТРЕОТИДА НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ЛЕЙКОЦИТОВ"

Соматостатин - это нейропептид, который вырабатывается в гипоталамусе, а также в поджелудочной железе, в слизистой оболочке желудка и кишечника (Chen D. et al., 2006; Raufman J.P. et a I., 2009). Этот пептид ингибирует секрецию соматотропного гормона передней доли гипофиза, он угнетает желудочную секрецию и секрецию поджелудочной железы, тормозит выделение гастрина и мотилина, уменьшает висцеральный кровоток. В экспериментах на крысах показано, что соматостатин стимулирует активность ретикуло-эндотелиальной и лимфопоэтической систем. Изменение под его влиянием активности клеток-киллеров отмечено у человека (Case С.С., Wirfel К., Vassilopoulou - Sellin R., 2002).

Синтетический аналог соматостатина октреотид угнетает экзокринную функцию поджелудочной железы и снижает объем панкреатического секрета, содержание в нем ферментов и концентрацию бикарбонатов. Октреотид оказывает прямое угнетающее действие на экзокринную секрецию поджелудочной железы через специфические мембранные рецепторы. Препарат также обладает противовоспалительным действием, которое связано со стабилизацией клеточных мембран, блокадой цитокиногенеза и продукции простагландинов, антиоксидантной активностью (Ревтович М.Ю., 2003; Леонович С.И. и соавт., 2003). Эти свойства октреотида послужили основанием для его применения у больных, которым проводятся оперативные вмешательства на поджелудочной железе (Gur R., Meier R., 1996). Обнаружено, что подкожно вводимая однократная доза октреотида подавляет секрецию инсулина через 30 минут после инъекции (Antony L.B., Woltering Е.А., Espenan G.D., 2002).

Существует представление о возможной роли нейропептидов в регуляции деятельности иммунной системы на разных уровнях ее организации - от субклеточного до системного (Лопаткина Т.Н., 2004). Накапливается все больше данных, свидетельствующих о роли нейропептидов, в том числе и соматостатина, в обеспечении взаимодействия нервной и иммунной систем (Perry M.D. et al., 2009).

Введение пептидов повышает уровень содержания катионных белков в нейтрофильных лейкоцитах. Установлено корригирующее влияние пептидов на поврежденный рецепторный аппарат нейтрофильных лейкоцитов (Andina N. et al., 2009).

Существует предположение, что система тканевых нейтрофилов выполняет посредническую роль между центральной нервной системой и соединительной тканью (Третьякова И.Е., Долгушин И.И., 2004). Нешрофильные лейкоциты получают сигналы по нейросекреторным каналам, реализуют в тканях свой функциональный потенциал и одновременно осуществляют механизм обратной связи.

Нейтрофильные лейкоциты способны продуцировать пептиды, участвующие в регуляции иммуногенеза, что позволяет рассматривать нейтрофил как регуляторную клетку, участвующую в каскадной сети регуляции иммуногенеза, поддерживая постоянство внутренней среды организма (Славинский А.А., Никитина Г.В., 2000; Falanga A. et al., 2000; FemlingJ.IC., 2005).

Экспериментально установлено, что инфильтрация нейтрофилами поджелудочной железы - ключевое событие в развитии панкреатита (Tu W. et al., 2000; Wang X.P. et al., 2003). Ацинарные клетки поджелудочной железы способны нацеливать нейтрофильные лейкоциты на свою поверхность, что может привести к смерти не только клеток, но и самой железы (Гасилина Т.В., Бельмер С.В., 2008). Это свидетельствует о том, что фатальный панкреатит может быть результатом прежде всего избыточной стимуляции нейтрофильных лейкоцитов (Maher О. et al., 1999; Zaninovic V. et al., 2000).

Задачи исследования

1. Выявить воздействие октреотида на способность нейтрофилов крови здоровых людей к активации in vitro.

4. Оценить влияние октреотида на состояние ткани поджелудочной железы крыс в динамике развития ОЭП.

Новизна результатов исследования

3. Найдены новые особенности изменения функционально-метаболической активности нейтрофильных лейкоцитов (активность ядерного хроматина, NADPH-оксидазы, миелопероксидазы, щелочной фосфатазы, содержание катионных белков) при развитии острого экспериментального панкреатита у крыс.

4. Получены сведения о протекторном действии октреотида на ткань поджелудочной железы, и ингибирующем - на функционально-метаболическую активность нейтрофильных лейкоцитов крови крыс с острым экспериментальным панкреатитом.

Основные положения, выносимые на защиту

1. У здоровых людей октреотид снижает уровень активации нейтрофильных лейкоцитов крови in vitro. Наиболее выраженное действие пептид проявляет в концентрации 1О"7 М.

2. Острый экспериментальный панкреатит у крыс сопровождается достоверным повышением функциональной активности нейтрофильных лейкоцитов крови.

3. Октреотид оказывает благоприятное действие на поджелудочную железу у крыс с экспериментальным панкреатитом, способствуя развитию процесса репарации ткани и уменьшая ее деструктивные изменения. Существенным компонентом этого действия, кроме уже известных эффектов нейропептида, является возможное модулирующее его влияние на функционально-метаболический статус нейтрофильных лейкоцитов.

Научная значимость исследования

Результаты проведенной работы могут быть использованы в учебном процессе со студентами медицинских специальностей, а также использоваться для прикладных исследований.

Практическая значимость исследования

Обнаруженное ингибирующее влияние октреотида на повышенную функционально-метаболическую активность нейтрофильных лейкоцитов in vitro у людей с острым панкреатитом и in vivo у крыс с острым экспериментальным панкреатитом может быть использовано для иммунокоррекции состояний, сопровождающихся избыточной активацией нейтрофилов.

Сведения о практическом использовании результатов исследования

На основании полученных фактов предложены практические рекомендации по дальнейшему использованию результатов исследования, которые внедрены в учебный процесс кафедр патологической анатомии, госпитальной хирургии Кубанского государственного медицинского университета (КГМУ) и в работе хирургического отделения ГУЗ центра функциональной хирургии и гастроэнтерологии Краснодарской краевой клинической больницы № 1 им. проф. Очаповского. По результатам исследования опубликовано 11 печатных работ.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Породенко, Игорь Валериевич

ВЫВОДЫ

3. Моделирование острого экспериментального панкреатита у крыс приводит к повышению функционально-метаболической активности нейтрофильных лейкоцитов. Воспалительно-деструктивным изменениям в поджелудочной железе сопутствует увеличение в нейтрофилах крови активационного потенциала ядерного хроматина, активности NADPH-оксидазы, щелочной фосфатазы и содержания неферментных катионных белков со снижением активности миелопероксидазы.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Породенко, Игорь Валериевич, Краснодар

1. Бахметьев Б.А., Лихачева Н.С. Влияние соматотропного гормона на функцию фагоцитирующих клеток крови человека. Проблемы эндокринологии, 2000. Т. 46. - № 3. - С. 25-28.

2. Бахов Н.И., Александрова Л.З., Титов В.Н. Роль нейтрофилов в регуляции метаболизма тканей (обзор литературы) // Лаб. дело. -1988. — № 6. -С. 3-12.

3. Вашетко Р.В., Толстой А. Д., Курыгин А. А., Стойко Ю.М., Краснорогов В.Б. Острый панкреатит и травмы поджелудочной железы // Санкт-Петербург, Москва, Харьков, Минск, 2000.

4. Воробьев А.И. Руководство по гематологии / Под ред. Академика А.И. Воробьева. М.: Издательство «Ныодиамед», 2002. - Т. 1. - 280 с.

5. Галкин А.А., Тимин Е.Н., Карелин А.А. Методы исследования подвижности нейтрофилов (обзор литературы) // Клин. лаб. диагностика. -2003.-№ 1.-С. 22-34.

6. Гамалей И.А., Клюбин И.В. Перекись водорода как сигнальная молекула // Цитология. -1996. Т. 38. - № 12. - С. 1233-1247.

7. Герасимов И.Г. Неоднородность нейтрофилов в фагоцитозе и респираторном взрыве // Клин. лаб. Диагностика. 2004. — № 6. — С. 34-36.

8. Бельмер( С.В., Гасилина Т.В., Коваленко А.А., Мухина Ю.Г. и др. Детская гастроэнтерология на компакт-диске. III издание. Руководство под ред. С.В.Бельмера и А.И.Хавкина. Москва, 2003. Компакт-диск: 600 мБ.

9. Гланц С. Медико-биологическая статистика / Пер. с англ. -М.: Практика, 1999. 459 с.

10. Ю.Голофеевский В.Ю. Введение в клиническую морфологию желудка и двенадцатиперстной кишки // Издательство: Фолиант, 2005; 112 стр.; ISBN: 5-93929-113-9.

11. Губергриц Н.Б. Лечение панкреатитов. Ферментные препараты в гастроэнтерологии; Медпрактика, М.:Медпрактика-М; 2003 г.; 100 стр.; 5901654-50-1.

12. Губергриц Н.Б., Христич Т.Н. Клиническая панкреатология.- Донецк: ООО «Лебедь», 2000.- 416с. 6. Дыньков С.М., Насонов Я.А., Кузнецов А.А. и др. Диагностика и лечение острого билиарного панкреатита//Анналы хирургии 2000. - №2. - С.30-35.

13. Голиков П.П., Николаева Н.Ю., Картавенко В.И. и др. Генерация оксида азота лейкоцитами периферической крови в норме и при патологии // Пат. физ. и эксп. тер. 2004. - № 4. - С. 11-13.

14. Долгушин И.И., Бухарин О.В. Нейтрофилы и гомеостаз. — Екатеринбург: Медицина, 2001. -С. 234.

15. Долгушин И.И. Роль нейрофилов в регуляции антимикробной резистентности // Вестник росс, академии мед. наук. 2002. - № 3. - С. 16-20.

16. Евглевский А.А., Пейливанян Э.Г., Алифанова Г.Ф. Особенности структурной организации хроматина ядер вагинальных эпителиоцитов // Кубанский научный мед. вестник. 1999. - Т. 48. - № 12. - С. 12-13.

17. Земсков B.C. Стандарты (протоколы) диагностики и лечения заболеваний поджелудочной железы. К., 2000. - 32 с.

18. Зербино Д.Д., Лукасевич Л.Л. Диссемипированное внутрисосудистое свертывание крови. М.: Медицина, 1989. - С. 237-242.

19. Зурочка А.В. Иммунобиологические свойства секреторных продуктов нейтрофилов (нейтрофилокинов): дис. . д-ра мед. наук. (14.00.36).-СПб.- 1991.-356 с.

20. Иванов Ю. В. Опыт применения Октреотида в лечении острого панкреатита — Фарматека, № 4/5, 2005

21. Клебанов Г.И., Владимиров Ю.А. Клеточные механизмы прайминга и активации фагоцитов // Успехи современной биологии. — 1999. Т 119. — №5.-С. 462-475.

22. Ковальчук JI.B., Сайгитов Р.Т. Хемокины — новое семейство цитокинов, регулирующих миграцию лейкоцитов // Журн. Микробиол. — 2000. -№ 1. С. 90-94.

23. Козлов И.Г., Сайгитов Р.Т., Митясева С.А. и др. Миграционная активность in vitro нейтрофилов периферической крови человека в норме и при иммунопатологии // Журн. микробиол. эпидемиол. и иммунобиол. — 2002,-№4. -С. 43-47.

24. Кокряков В.Н. Биология антибиотиков животного происхождения. — СПб.: Наука, 1999.-342 с.

25. Корнева Е.А. Регуляторные пептиды как модуляторы защитных функций организма // Физиол. журн. СССР им. И.М. Сеченова. -1989. — Т. 75.-№5.-С. 656-663.

26. Королева С.В., Ашмарин И.П. Биоинформационная система анализа функционального континиума регуляторных пептидов // II российский симпозиум по химии и биологии пептидов тезисы докладов и стендовых сообщений. СПб, 2005. - С. 72.

27. Костырной А.В., Старосек В.М. Деструктивно-перфоративные осложнения острого панкреатита // Юншчна х1рурпя. 2000.- №9.- С. 17-18.

28. Кулаков В.В., Симбирцева А.С., Котов А.Ю. и др. Влияние моноклональных антител против интерлейкина-1 а на цитостатические свойства нейтрофилов периферической крови человека // Иммунология. -1998,-№4. -С. 39-40.

29. Курзанов А.Н. Роль энкефалинов в пептидэргической и холинэргической регуляции гастродуодено-панкреатического комплекса:автореф. дис. . д-ра. мед. наук. (03.00.13). Краснодар: Кубанская гос. мед. академия, 2001. — 42 с.

30. Леонович С.И. и др. Влияние октреотида на перекисное окисление липидов у больных острым панкреатитом. Рецепт. 2003. — С. 3

31. Лихачева Н.С., Бахметьев Б.А. Влияние интерлейкинов и СТГ на функции фагоцитирующих клеток // Вестник МАНЭБ. 2000. - № 6. — С. 2633.

32. Малхасян В.А., Симаворян П.С. Новый способ получения эксперментальной модели острого панкреатита // Экспер. хир. и анестезиол., 1972.-№3.-С. 30-32.

33. Мари Р., Греннер Д., Мейес П., Родуэлл В. Биохимия человека. -М.: Мир, 2004.-360 с.

34. Маянский А.Н., Маянский Н.А., Заславская М.И. и др. Апотоз нейтрофилов // Иммунология. -1999. № 6. — С. 11-20.

35. Маянский Д.Н., Маянская С.Д. Роль нейтрофилов в ишемическом и реперфузионном повреждении миокарда // Терапевт, арх., 2001. № 12. - С. 84-88.

36. Меркулов Г. А. Курс патологогистологической техники. Большая медицинская энциклопедия: В 36 т. М.: Сов. энциклопедия, 1956-1964. 35.

37. Нестерова И. В. Клинико-диагностическое значение NBT-теста при стафилококковых пневмониях у детей. // Педиатрия.- 1980.- №5.- С. 50.

38. Нестерова И.В., Колесникова Н.В., Чудилова Г.А. Методы оценки функциональной активности нейтрофильных лейкоцитов // Методические рекомендации. Краснодар, 1992. - 20 с.

39. Нестерова И.В., Евглевский А.А, Фомичева Е.В., Парфенов В.В. Особенности активационного потенциала ядер нейтрофильных гранулоцитов в норме и патологии // Цитокины и воспаление., 2004. -Т. 3. № 2. - С. 5255.

40. Нестеренко Ю.А., Лаптев В.В., Михайлусов С.В. Диагностика и лечение деструктивного панкреатита (издание 2-е). М.: ООО "БИНОМ-ПРЕСС", 2004; 304.

41. Пальцев М.А., Аничков Н.М. Патологическая анатомия. -М.: Медицина, 2001. 736 с.

42. Полевщиков А.В., Назаров П.Г., Козлов С.В. и др. Регуляция функций нейтрофилов крови С-реактивным белком и сывороточным амилоидом Р // Физиол. журн. им. И.М. Сеченова. 1996. - Т. 82. — № 8-9. -С. 67-72.

43. Полушин Ю.С., Суховецкий А.В., Сурков М.В., Пащенко О.В., Широков Д.М. Острый послеоперационный панкреатит. СПб: ФОЛИАНТ. 2003, с. 157 е., ил. Рус. RU. ISBN 5-93929-059-0.

44. Потапнев М.П., Печковский Д.В. Иммунорегуляция антимикробной активности нейтрофилов человека // Иммунология. 1994. - № 5. - С. 4-6.

45. Поцелуева М.М., Пустовидко А.В., Ковалева Е.В. и др. Цитотоксическое действие полиморфноядерных лейкоцитов на опухолевые и нормальные клетки in vitro и in vivo // Цитология. 2005. - Т. 47. - № С. 57-63.

46. Ревтович М.Ю. Вариант неспецифической антицитокиновой терапии деструктивных форм острого панкреатита. Белорус, мед. журн. 2003. — С. 3

47. Ревтович М.Ю., Климович В.В. Октреотид в хирургической гастроэнтерологии // РМЖ.2003. № 5. С. 32-36. 16.

48. Римарчук Г.В., Волков Р.Ю., Акинфиев А.В., Болоханов Ю.Н. Медикаментозная терапия панкреатита у детей // Фарматека. 2003. № 2. С. 73-75.

49. Романов В.А., Кратнов А.Е., Романова Н.В., Хрусталев О.А. Особенности кислородзависимого метаболизма нейтрофилов и моноцитов у больных нестабильной стенокардией и его коррекция предукталом // Пат. физиол. и эксп. тер. 2003. -№3. - С. 14-17.

50. Савельев B.C., Филимонов М.И., Гельфанд Б.Р., Бурневич С.З., Орлов Б.Б., Саганов В.П. Клинико-морфологическая характеристика панкреонекроза в свете хирургического лечения. Анналы хирургии.-2001.- № З.-С. 58-62.

51. Сапрыкин В.П., Кузнецов C.J1. Морфологические варианты нейтрофильных гранулоцитов крови практически здоровых людей // Морфология. 2001. - Т. 120. - № 6. - С. 37-41.

52. Симоненко В.Б. , Дулин П.А. , Маканин М.А. Карциноиды и нейроэндокринные опухоли. 2008. Медицина. 5-225-03426-8.

53. Славинский А.А. Критерии функциональной активности нейтрофильных лейкоцитов, основанные не компьютерном анализе изображения и люминесценции: автореф. дис. . д-ра биол. наук (14.00.29). — Москва, 2000.-38 с.

54. Славинский А.А. Цитоплазматическая зернистость нейтрофильных лейкоцитов (обзор литературы) // Клин. лаб. диагн. 2002. - № 3. - С. 39-43.

55. Славинский А.А., Никитина Г.В. Цитохимическое выявление катионных белков в гранулоцитах крови амидо чёрным 10 Б для визуальной оценки и компьютерного анализа изображения // Клин. лаб. диагн. 1999. — №2.-С. 35-37.

56. Славинский А.А., Никитина Г.В. Компьютерный анализ изображения нейтрофильных лейкоцитов: миелопероксидаза // Клин. лаб. диагн. 2000. — № 1.-С. 21-24.

57. Славинский А.А., Никитина Г.В. Содержание катионных белков в нейтрофилах при гнойном перитоните // Клин. лаб. Диагн. — 2001. № 10. — С. 9-10.

58. Славинский А.А, Никитина Г.В. Компьютерный анализ изображения нейтрофильных лейкоцитов: щелочная фосфатаза // Клин. лаб. диагн. — 2002. № 1. - С. 40-43.

59. Славинский А.А, Никитина Г.В, Лищенко О.В. Цитохимические признаки активации нейтрофилов крови в начальном периоде инфаркта миокарда // Проблемы гематологии и переливания крови. — 2002. — № 1. — С. 81.

60. Тимошенко А.В, Бовин Н.В, Шиян С.Д. и др. Модификация функциональной активности нейтрофилов под действием белков острой фазы воспалительного ответа // Биохимия. 1998. - Т. 63. - № 5. - С. 646-651.

61. Третьякова И.Е, Долгушин И.И. Состояние секреторной функции нейтрофилов в норме и в условиях гнойного раневого процесса // Иммунология. 2004. - № 5. - С. 260-263.

62. Трухан, Д.И. Иммуногенетические аспекты патогенеза острого панкреатита / Д.И. Трухан // Хирургия. 2000. - №6. - С. 9-11.

63. Федорова М.З, Левин В.Н. Спонтанная миграция нейтрофилов крови в смешанной популяции лейкоцитов и ее изменения под влиянием веществ аутоплазмы при различных функциональных состояниях организма // Клин, лаб. диагн.-2001.-№5.-С. 16-19.

64. Хаитов P.M., Игнатьева Г.А, Сидорович И.Г. Иммунология, -М.: Медицина, 2000. 348 с.

65. Хомерики С.Г, Кубатиев А.А, Шляпников В.Н. Лектининдуцированная агрегация нейтрофильных гранулоцитов до и после облучения крови гелий-неоновым лазером // Гемат. трансф. 1993. - Т. 38. -№ 7.-С. 26-28.

66. Хомерики С.Г., Хомерики М.Н. Новые аспекты патогенетического лечения панкреатитов // Р.М.Ж. 2000. - Т. 8. - № 7. - С. 43-45.

67. Шафран М.Г., Пигаревский В.Е., Блинкова Э.Н. К цитохимическому определению пероксидазной активности в клетках крови и костного мозга // Цитология. 1979. - Т. 21.-№ 10.-С. 1206-1208.

68. Шлапак И.П., Мищенко Д.Л., Васильев Г.А. Острый панкреатит: профилактика и лечение панкреатической инфекции // Клиническая антибиотикотерапия. 2004. - №4 (30) - С. 10-14.

69. Шубич М. Г., Нагоев Б.С. Щелочная фосфатаза лейкоцитов в норме и патологии. М.: Медицина, 1980. - 92 с.

70. Alatas Е., Gunal О., Alatas О., Colak О. Octreotide prevents postoperative adhesion formation by suppressing peritoneal myeloperoxidase activity. Hepatogastroenterology. 2000 Jul-Aug; 47(34): 1034-6.•

71. Andina N., Conus S., Schneider E.M., Fey M.F., Simon H.U. Induction of Bim limits cytokine-mediated prolonged survival of neutrophils. Cell Death Differ. 2009 Sep; 16(9): 1248-55. Epub 2009 May 1.

72. Anthony L., Woltering E., Espenan G., Cronin M., Maloney T. & McCarthy K. 2002 Indium-111-pentetreotide prolongs survival in gastroenteropancreatic malignancies. Seminars in Nuclear Medicine 32 123—132.

73. Akahoshi Т., Namai R., Sekiyama N. at al. Rapid induction of neutrophil apoptosis by sulfasalazine: implications of reactive oxygen species in the apoptotic process // J. Leukocyte Biol. -1997. -Vol. 62. P. 817-826.

74. Antony L.B. Long-acting formulations of somatostatin analogues. Ital Gastroenterol Hepatol 1999; 31(suppl. 2): S216-18.

75. Attix E., Strombeck D.R., Wheeldon E.B., Stern J.S. Effects of an anticholinergic and a corticosteroid on acute pancreatitis in experimental dogs // Am. J. Vet. Res. -1981. -Vol. 42, № 10. -P. 1668-1674.

76. Bainton D.F., Farquhar M.G. Differences in enzyme content of azurophil and specific granules of polymorphonuclear leukocytes. II. Cytochemistry andelectron microscopy of bone marrow cells // J. Cell. Biol. -1968. -Vol. 39. -P. 299317.

77. Bainton D.F. Distinct granule populations in human neutrophils and lysosomal organelles identified by immuno-electron microscopy // J. Immunol. Meth. -1999. -Vol. 232, № 1-2. -P. 153-168.

78. Bastian A., Schafer H. Human alpha-defensin 1 (HNP-1) inhibits adenoviral infection in vitro // Regul. Pept. -2001. -Vol. 101, № 1-3. -P. 157-161.

79. Bhalla D.IC., Gupta S.K., Reinhart P.G. Alteration of epithelial integrity, alkaline phosphatase activity, and fibronectin expression in lungs of rats exposed to ozone // J. Toxicol. Environ. Health A. -1999. -Vol. 57, № 5. -P. 329-343.

80. Bogomolski-Yahalom V., Matzner Y. Disorders of neutrophil function // Blood Rev. -1995. -№ 9. -P. 183-190.

81. Borregaard N., Theilgaard-Monch K., Cowland J.B. et al. Neutrophils and keratinocytes in innate immunity-cooperative actions to provide antimicrobial defense at the right time and place // J. Leukoc. Biol. -2005. -Vol. 77, № 4. -P. 439-443.

82. Borregaard N., Theilgaard-Monch K., Sorensen O.E., Cowland J.B. Regulation of human neutrophil granule protein expression // Curr. Opin. Hematol. -2001. -Vol. 8,№ 1. -P. 23-27.

83. Brazeau P., Vale W., Burgus R., et al. Hypothalamic peptides that inhibit immunoreactive pituitary growth hormone. Science 1973; 179: 77-79.

84. Case C.C., Wirfel K., Vassilopoulou-Sellin R. Vasoactive intestinal polypeptide-secreting tumor (VIPoma) with liver metastases: dramatic and durable symptomatic benefit from hepatic artery embolization, a case report. Med Oncol. 2002; 19(3): 181-187. +

85. Chen H.M., Shyr M.H., Lau Y.T., Hwang T.L., Chen M.F. Leukocyte-endothelial adherence correlates with pancreatic nitric oxide production in early cerulein-induced pancreatitis in rats // Shock. -1998. -Vol. 10, № 3. -P. 218-222.

86. Chen D., Aihara Т., Zhao C-M., Hakanson R., Okabe S. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 2006. 291: G539-G544

87. Cowland J.B., Sorensen O.E., Sehested M., Borregaard N. Neutrophil gelatinase-associated lipocalin is up-regulated in human epithelial cells by IL-1 beta, but not by TNF-alpha // J. Immunol. -2003. -Vol. 171, № 12. -P. 6630-6639.

88. De Beaux A.C., Ross J.A., Maingay J.P., Fearon K.C., Carter D.C. Proinflammatory cytokine release by peripheral blood mononuclear cells from patients with acute pancreatitis // Br. J. Surg. -1996. -Vol. 83, № 8. -P. 1071-1075.

89. Del Maschio A., Zanetti A., Corada M. et al. Polymorphonuclear leukocyte adhesion triggers the disorganization of endothelial cell-to-cell adherens junctions//J. Cell Biol. -1996. -Vol. 135, №2.-P. 497-510.

90. Falanga A., Marchetti M., Evangelista V. et al. Polymorphonuclear leukocyte activation and hemostasis in patients with essential thrombocythemia and polycythemia vera // Blood. -2000. -Vol. 96, № 13. -P. 4261-4266.

91. Farkas G. Inflammatory mediators in acute pancreatitis (theoretical considerations)//Orv. Hetil. -1995. -Vol. 136,№34. -P. 1819-1822.

92. Farkas G., Nagy Z., Marton J., Mandi Y. Relevance of cytokine production to infected pancreatic necrosis // Acta. Chir. Hung. -1997. -Vol. 36, № 1-4. -P. 86-88.

93. Faurschou M., Borregaard N. Neutrophil granules and secretory vesicles in inflammation // Microbes Infect. -2003. -Vol. 5, № 14. -P. 1317-1327.

94. Faurschou ML, Karnp S., Cowland J.B. et al. Prodefensins are matrix proteins of specific granules in human neutrophils // J. Leukoc. Biol. -2005. -Vol. 78, №3. -P. 785-793.

95. Faurschou M., Sorensen O.E., Johnsen A.H., Askaa J., Borregaard N. Defensin-rich granules of human neutrophils: characterization of secretory properties // Biochemica et biophysica acta. -2002. -№ 1591. -P. 29-35.

96. Fernandes E.S., Passos G.F., Campos M.M. et al. Cytokines and neutrophils as important mediators of platelet-activating factor-induced kinin B1 receptor expression // Br. J. Pharmacol. -2005. -Vol. 146, № 2. -P. 209-216.

97. Fiedler F:, Jauernig G., Keim V. et al. Octreotide treatment in patients with necrotizing pancreatitis and pulmonary failure. Intensive Care Med, 1996; 22:909-15.

98. Fink G., Yang J., Carter G., Norman J. Acute pancreatitis-induced enzyme release and necrosis are attenuated by IL-1 antagonism through an indirect mechanism // J. Surg. Res. -1997. -Vol. 67, № 1. -P. 94-97.

99. Fiocca F., Santagati A., Ceci V. et al. ERCP and acute pancreatitis // Eur. Rev. Med. Pharmacol: Sci. -2002. -Vol. 6, № 1. -P. 13-17.

100. Fiset M.E., Gilbert C., Poubelle P.E., Pouliot M. Human neutrophils as a source of nociceptin: a novel link between pain and inflammation // Biochemistry. -2003. -Vol. 42, № 35. -P. 10498-10505.

101. Foxx-Orenstein A., Camilleri M., Stephens D., Burton D. Effect of a somatostatin analogue on gastric motor and sensory functions in healthy humans. Gut. 2003 Nov;52(l 1):1555-61.

102. Frossard J.L., Saluja A., Bhagat L. et al. The role of intercellular adhesion molecule 1 and neutrophils in- acute pancreatitis and pancreatitis-associated lung injury // Gastroenterology. -1999. -Vol. 116, № 3. -P. 694-701.

103. Fujimoto К., Hosotani R., Doi R. et al. Role of neutrophils in cerulein-induced pancreatitis in rats: possible involvement of apoptosis // Digestion. -1997. -Vol. 58, №5. -p. 421-430.

104. Grant M.B., Cooper-DeHoff R., Mames R.N. et al. The efficacy of octreotide in the therapy of severe non-proliferative and early proliferative diabetic retinopathy. A randomized controlled study // Diabetes Care. 2000. - Vol. 23. -P. 504-509.

105. Gur R., Meier R. Pharmacodynamic effects of sandostatin in the gastrointestinal tract. Digestion 1996; 57:14-19.

106. Нас S., Dobosz M., Kaczor J., Rzepko R. Influence of molecule CD lib blockade on the course of acute ceruleine pancreatitis in rats // Exp. Mol. Pathol. 2004. -Vol. 77, № 1. -P. 57-65.

107. Harler M.B., Wakshull E., Filardo E.J., Albina J.E., Reichner J.S. Promotion of neutrophil chemotaxis through differential regulation of beta 1 and beta 2 integrins // J. Immunol. -1999. -Vol. 162, № 11. -P. 6792-6799.

108. Hartwig W., Carter E.A., Jimenez R.E. et al. Chemotactic peptide uptake in acute pancreatitis: correlation with tissue accumulation of leukocytes // J. Appl. Physiol. -1999. -Vol. 87, №2.- P.743-749.

109. Heilborn J.D, Nilsson M.F, Kratz G. et al. The cathelicidin antimicrobial peptide LL-37 is involved in re-epithelialization of human skin wounds and is lacking in chronic ulcer epithelium // J. Invest. Dermatol. -2003. -Vol. 120, № 3. -P. 379-389.

110. Heilborn J.D, Nilsson M.F, Jimenez G.I. et al. Antimicrobial protein hCAP18/LL-37 is highly expressed in breast cancer and is a putative growth factor for epithelial cells // Int. J. Cancer. -2005. -Vol. 114, № 5. -P. 713-719.

111. Henderson L.M, Chappel J.B. NADPH oxidase of neutrophils // Biochim. Biophys. Acta. -1996. -Vol. 1273. -P. 87-107.

112. Hoffmann T.F, Leiderer R, Harris A.G, Messmer K. Ischemia and reperfusion in pancreas // Microsc. Res. Tech. -1997. -Vol. 37, № 5-6. -P.557-571.

113. Hvidberg V, Jacobsen C, Strong R.K. et al. The endocytic receptor megalin binds the iron transporting neutrophil-gelatinase-associated lipocalin with high affinity and mediates its cellular uptake // FEBS Lett. -2005. -Vol. 579, № 3. -P. 773-777.

114. Ikeda Y, Young L.H, Scalia R, Ross C.R, Lefer A.M. PR-39, a proline/arginine-rich antimicrobial peptide, exerts cardioprotective effects in myocardial ischemia-reperfusion // Cardiovasc. Res. -2001. -Vol. 49, № 1. -P. 69-77.

115. Inagaki H, Nakao A, Kurokawa T, Nonami T, Harada A, Takagi H. Neutrophil behavior in pancreas and liver and the role of nitric oxide in rat acute pancreatitis // Pancreas. -1997. -Vol. 15, № 3. -P. 304-309.

116. Ionescu C.V, Cepinskas G, Savickiene J, Sandig M, Kvietys P.R. Neutrophils induce sequential focal changes in endothelial adherens junctioncomponents: role of elastase // Microcirculation. -2003. -Vol. 10, № 2. -P. 205220.

117. Jablonska E., Marcinczyk M. Role of interleukin-15 and interleukin-18 in the secretion of sIL-6R and sgpl30 by human neutrophils // Mediators Inflamm. -2003. -Vol. 12, № 3. -P. 179-183.

118. Jiang Y., Gu X.P., Qiu Y.D. et al. Ischemic preconditioning decreases C-X-C chemokine expression and neutrophil accumulation early after liver transplantation in rats // World J. Gastroenterol. -2003. -Vol. 9, № 9. -P. 20252029.

119. Keck Т., Friebe V., Warshaw A.L. et al. Pancreatic proteases in serum induce leukocyte-endothelial adhesion and pancreatic microcirculatory failure // Pancreatology. -2005. -Vol. 5, № 2-3. -P. 241-250.

120. Kettritz R., Gaido M.L., Haller H., Luft F.C., Jennette C.J., Falk R.J. // Kidney Int. -1998. -Vol. 53. -P. 84-91.

121. Kjeldsen L., Cowland J.B., Borregaard N. Human neutrophil gelatinase-associated lipocalin and homologous proteins in rat and mouse // Biochim. Biophys. Acta. -2000. -Vol. 1482, № 1-2. -P. 272-283.

122. Klausen P., Niemann C.U., Cowland J.В., Krabbe K., Borregaard N. On mouse and man: neutrophil gelatinase associated lipocalin is not involved in apoptosis or acute response // Eur. J. Haematol. -2005. -Vol. 75, № 4. -P. 332-340.

123. Klut M.E., Whalen B.A., Hogg J.C. Flow cytometric analysis of defensins in blood and marrow neutrophils // Eur. J. Haematol. -2000. -Vol. 64, № 2. -P. 114-120.

124. Krulich L., Dharwal A., McCann S. Stimulatory and inhibitory effects of purified hypothalamic extracts on growth hormone release from rat pituitary in vitro. Endocrinology 1968; 83: 783-790.

125. Kyriakides C., Jasleen J., Wang Y. et al. Neutrophils, not complement, mediate the mortality of experimental hemorrhagic pancreatitis // Pancreas. -2001. -Vol. 22, № 1. -P. 40-46.

126. Lau D., Mollnau H., Eiserich J.P. et al. Myeloperoxidase mediates neutrophil activation by association with CD1 lb/CD 18 integrins // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -2005. -Vol. 11, № 102 (2). -P. 431-436.

127. Lee D.M., Friend D.S., Gurish M.F. et al. Mast cells: a cellular link between autoantibodies and inflamatory arthritis // Science. -2002. -Vol. 297. -P. 1689-1692.

128. Leindler L., Morschl E., Laszlo F. et al. Importance of cytokines, nitric oxide, and apoptosis in the pathological process of necrotizing pancreatitis in rats // Pancreas. -2004. -Vol. 29, № 2. -P. 157-161.

129. Lollike K., Lindau M., Calafat J., Borregaard N. Compound exocytosis of granules in human neutrophils // J. Leukoc. Biol. -2002. -Vol. 71, № 6. -P. 973-980.

130. Liu Y., Buhring H.J., Zen K., Burst S.L. et al. Signal regulatory protein (SIRPalpha), a cellular ligand for CD47, regulates neutrophil transmigration // J. Biol. Chem. -2002. -Vol. 277, № 12. -P. 10028-10036.

131. Markert R., Modzelewski B. Inflammatory mediators in the acute pancreatitis // Pol. Merkuriusz. Lek. -1999. -Vol. 6, № 32. -P. 100-103.

132. Marotti T, Balog T, Munic V, Sobocanec S, Abramic M. The link between met-enkephalin-induced down-regulation of APN activity and the release of superoxide anion. Neuropeptides. 2000 Apr; 34(2): 121-8.

133. Marubashi K., Hirano S., Suzuki K.T. Effects of intratracheal pretreatment with yttrium chloride (YC13) on inflammatory responses of the rat lung following intratracheal instillation of YC13 // Toxicol. Lett. -1998. -Vol. 99, № 1. -P. 43-51.

134. McKay C., Imrie C.W., Baxter J.N. Mononuclear phagocyte activation and acute pancreatitis // Scand. J. Gastroenterol. Suppl. -1996. -№ 219. -P. 32-36.

135. Mendes F.D., Jorgensen R., Keach J. et al. Elevated Serum IgG4 Concentration in Patients with Primary Sclerosing Cholangitis // Am. J. Gastroenterol. -2006. -Vol. 101, № 9. -P. 2070-2075.

136. Menzebach A, Hirsch J, Hempelmann G, Welters ID. Effects of endogenous and synthetic opioid peptides on neutrophil function in vitro. Br J Anaesth. 2003 Oct; 91(4):546-50.

137. Muhs B.E., Patel S., Yee H., Marcus S., Shamamian P. Inhibition of matrix metalloproteinases reduces local and distant organ injury following experimental acute pancreatitis // J. Surg Res. -2003. -Vol. 109, № 2. -P. 110-117.

138. Muller W.A. Leukocyte-endotelial cell interactions in the inflammatory response // Lab. Invest. -2002. -Vol. 82, № 5. -P. 521-533.

139. Muller C., Uhl W., Gloor B. et al. Acute pancreatitis—clinical and technical laboratory diagnostic and prognostic assessment // Swiss. Surg., -2000. -Vol. 6, № 5. -P. 235-240.

140. Nabokina S., Egea G., Blasi J., Mollinedo F. Intracellular location of SNAP-25 in human neutrophils // Biochem. Biophys. Res. Commun. -1997. -Vol. 239, № 2. -P. 592-597.

141. Nakamuta M., Ohashi M., Fukutomi T. et al. Rise of plasma myeloperoxidase during interferon therapy // J. Gastroenterol. Hepatol. -1995. -Vol. 10, №3.-P. 277-280.

142. Nathan C., Xie Q., Halbwachs-Mecarelli L., Jin W.W. Albumin inhibits neutrophil spreading and hydrogen peroxide release by blocking the shedding of CD43 (sialophorin, leukosialin) // J. cell. Biol. -1993. -Vol. 122, № 1. -P. 243-256.

143. Noda К., Aoki M., Akiyoshi PI., Asaki H., Shimada Т., Ohashi F. Evaluation of the polymorphonuclear cell functions of bottlenose dolphins // J. Vet. Med. Sci. -2003. -Vol 65, № 6. -P.727-729.

144. Okazaki Т., Suzuki M., Nagai Т., Nagai T. Abnormal alkaline phosphatase isoenzymes detected in the serum of elderly patients // Scand. J. Clin. Lab. Invest. -2004. -Vol. 64, № 7. -P. 611-617.

145. Olias G. et al. Regulation and function of somatostatin receptors. // J. Neurochem. 2004. v. 89: pp. 1057-191.

146. Osman M.O., Jensen S.L. Acute pancreatitis: the pathophysiological role of cytokines and integrins. New trends for treatment? // Dig. Surg. -1999. -Vol. 16, №5.-P. 347-362.

147. Paran H., Mayo A., Paran D. et al. Octreotide treatment in patients with severe acute pancreatitis. Dig Dis Sci 2000; 45:2247-51.

148. Parreira J.G., Rego R.E., Campos T. et al. Predictors of choledocholithiasis in patients sustaining acute biliary pancreatitis // Rev. Assoc. Med. Bras. -2004. -Vol. 50, № 4. -P. 391-395.

149. Partsch G, Matucci-Cerinic M. Effect of substance P and somatostatin on migration of polymorphonuclear (PMN) cells in vitro. Inflammation. 1992 Oct; 16(5):539-47.

150. Patel Y.C. Somatostatin and its receptor family. Front Neuroendocrinol 1999;20:157-98.

151. Perry M.D., Sandle G.I. Regulation of colonic apical potassium (BK) channels by cAMP and somatostatin. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 2009 Jul; 297(1):G159-67. Epub 2009 Apr 30.

152. Pobuts'kyi O.O. Application of synthetic neuropeptides Дп complex of surgical treatment of acute pancreatitis and its complication // Klin. Khir. -2002. -№ 1. -P. 26-29.

153. Prasad V., Fetscher S., Baum R.P. Changing role of somatostatin receptor targeted drugs in NET: Nuclear Medicine's view. // J. Pharm. Pharmaceut. Sci. 2007. 321s-327s.

154. Pregun I., Herszenyi L., Bakucz Т., Banai J., Molnar L., Altorjay I., Orosz P., Csernay L., Tulassay Z. Novel aspects in the pathogenesis of gastroesophageal reflux disease. Orv Hetil. 2009 Oct 11; 150(41): 1883-7. Hungarian.

155. Rau В., Bauer A., Wang A. et al. Modulation of endogenous nitric oxide synthase in experimental acute pancreatitis: role of anti-ICAM-1 and oxygen free radical scavengers.// Ann. Surg. -2001. -Vol. 233, № 2. -P. 195-203.

156. Rau В., Poch В., Gansauge F. et al. Pathophysiologic role of oxygen free radicals in acute pancreatitis: initiating event or mediator of tissue damage? // Ann. Surg. -2000. -Vol. 231, № 3. -P. 352-360.

157. Rollet-Labelle E., Grange M. J., Elbim C. et al. Hydroxy 1 radical as a potential intracellular mediator of polymorphonuclear neutrophil apoptosis // Free Radic. Biol. Med. -1998. -Vol. 24. -P. 563-572.

158. Rosen H, Michel B.R. Redundant contribution of myeloperoxidase-dependent systems to neutrophil-mediated killing of Escherichia coli // Infect. And Immun. -1997. -Vol. 65, № 10. -P. 4173-4178.

159. Ruan X, Chodosh J, Callegan M.C. et al. Corneal expression of the inflammatory mediator CAP37 // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. -2002. -Vol. 43, № 5. -P. 1414-1421.

160. Sahoo G, More T, Singh V.K. A comparative study on certain enzymes of the granulocyte from different ruminant species // Сотр. Immunol. Microbiol. Infect. Dis. -1998. -Vol. 21, № 4. -P. 319-325.

161. Sandoval D, Gukovskaya A, Reavey P. et al. The role of neutrophils and platelet-activating factor in mediating experimental pancreatitis // Gastroenterology. -1996. -Vol. 111, № 4. -P. 1081-1091.

162. Saito N, Sato F, Asaka M, Takemori N, Kohgo Y. Morphological heterogeneity of myeloperoxidase-positive granules in normal circulating neutrophils: an ultrastructural study by cryosection // Histol. Histopathol. -1998. -Vol. 13, №2.-P. 405-414.

163. Satake К, Ha S.S, Hiura A. Effects of bradykinin receptor antagonist on the release of beta-endorphin and bradykinin and on hemodynamic changes in a canine model of experimental acute pancreatitis // Pancreas. -1996. -Vol. 12, № 1. -P. 92-97.

164. Satoru T, Norihiro K, Susumu O. Regulation by Endogenous Interleukin-1 of mRNA Expression of Healing-Related Factors in Gastric Ulcers in Rats // the J. of Pharm. and Exp. Ther. -1999. -Vol. 291, № 2. -P. 634-641.

165. Sener G, Paskaloglu K, Kapucu C. et al. Octreotide ameliorates alendronate-induced gastric injury // Peptides. -2004. -Vol. 25, № 1. -P. 115-121.

166. Sengelov H, Borregaard N. Free-flow electrophoresis in subcellular fractionation of human neutrophil // Immunol. Meth. -1999. -Vol. 232, № 1-2. -P. 145-152.

167. Shibuya K., Sunamura M., Yamauchi J. et al. Analysis of the derangement of the pancreatic microcirculation in a rat caerulein pancreatitis model using an intravital microscope system // Tohoku J. Exp. Med. -1996. -Vol. 180, №2. -P. 173-186.

168. Song M., Zaninovic V., Kim D. et al. Amelioration of rat cerulein pancreatitis by guamerin-derived peptide, a novel elastase inhibitor // Pancreas. -1999. -Vol. 18, № 3. -P.231-239.

169. Sorensen O.E., Borregaard N. Cathelicidins-nature's attempt at combinatorial chemistry // Comb. Chem. High. Throughput Screen. -2005. -Vol. 8, №3. -P. 273-280.

170. Sorensen O.E., Follin P., Johnsen A.H. et al. Human cathelicidin, hCAP-18, is processed to the antimicrobial peptide LL-37 by extracellular cleavage with proteinase 3 // Blood. -2001. -Vol. 97, № 12. -P. 3951-3959.

171. Steinhoff M., Vergnolle N., Young S.H. et al. Agonist of proteinase-activated receptor 2 induce inflammation by a neurogenic mechanism // Nature med. -2000. -Vol. 6, № 2. -P. 151-158.

172. Su W.H., Chen H.I., Jen C.J. Differential movements of VE-cadherin and PECAM-1 during transmigration of polymorphonuclear leukocytes through human umbilical vein endothelium // Blood. -2002. -Vol. 100, № 10. -P. 35973603.

173. Takacs Т., Czako L., Morschl E. et al. The role of nitric oxide in edema formation in L-arginine-induced acute pancreatitis // Pancreas. -2002. -Vol. 25, № 3. -P. 277-282.

174. Tal Т., Aviram I. Defensin interferes with the activation of neutrophil NADPH oxidase in a cell-free system // Biochem Biophys Res Commun. -1993. -Vol. 196, № 2. -P. 636-641.

175. Tamagno G., Mioni R., De Carlo E., Maffei P., Rubello D., Sicolo N. Effects of a somatostatin analogue in occult gastrointestinal bleeding: a case report. Dig Liver Dis. 2004 Dec;36(12):843-6.

176. Theilgaard-Monch K., Porse B.T., Borregaard N. Systems biology of neutrophil differentiation and immune response // Curr. Opin. Immunol. -2006. -Vol. 18, № 1. -P. 54-60.

177. Tokita K. et al. FK962, a novel enhancer of somatostatin release, exerts cognitive-enhancing actions in rats. // Eur. J. Pharm. 2005. v. 527. pp. 111-120.

178. Tsikitis V.L., Albina J.E., Reichner J.S. Beta-glucan affects leukocyte navigation in a complex chemotactic gradient // Surgery. -2004. -Vol. 136, № 2. -P. 384-389.

179. Tu W., Li J., Zhu W. Influences of BN50739 on neutrophil elastase and phospholipase A2 in lung and tracheal mucosa of pigs with acute severe pancreatitis // Zhonghua Jie He He Hu Xi Za Zhi. -2000. -Vol. 23, № 10. -P. 595-598.

180. Turkall R.M., Denison R.C., Tsan M.F. Degradation and oxidation of methionine enkephalin by human neutrophils // J. Lab. Clin. Med. -1982. -Vol. 99, №3. -P. 418-427.

181. Uhl W., Muller C., Buchler M.W. Definition of predictors of a complicated course in acute pancreatitis // Langenbecks. Arch. Chir. Suppl. Kongressbd, -1998. -№ 115. -P. 427-433.

182. Valore E.V., Martin E., Harwig S.S., Ganz T. Intramolecular inhibition of human defensin HNP-1 by its propiece // J. Clin. Invest. -1996. -Vol. 97, № 7. -P. 1624-1629.

183. Vaissiere C., Le Cabec V., Maridonneau-Parini I. NADPH oxidase is functionally assembled in specific granules during activation of human neutrophils //J. Leukocyte Biol. -1999. -Vol. 65, № 5. -P. 629-634.

184. Van Hagen, E. P. Krenning Department of Internal Medicine, Department of Nuclear Medicine, Erasmus MC, Rotterdam, The Netherlands, QJNUCL MED 2003;47:270-8

185. Wang X.P., Wu L.Y., Wu K., Zhang R.L., Dong Y.W. The role of lipopolysacchride-binding protein in the pathogenesis of animal model of acute necrotizing pancreatitis // Zhonghua Yi Xue Za Zhi. -2003. -Vol. 83, № 18. -P. 1619-1623.

186. Von Rosenvinge E.C., Raufman J.P. Gastrointestinal peptides and regulation of gastric acid secretion. Curr Opin Endocrinol Diabetes Obes. 2009 Oct 22.

187. Wereszczynska-Siemiatkowska U., Mroczko В., Siemiatkowski A. Serum profiles of interleukin-18 in different severity forms of human acute pancreatitis // Scand. J. Gastroenterol. -2002. -Vol. 37, № 9. -P. 1097-1102.

188. Werner J., Rivera J., Fernandez-del Castillo C. et al. Differing roles of nitric oxide in the pathogenesis of acute edematous versus necrotizing pancreatitis // Surgery. -1997. -Vol. 121, № 1. -P. 23-30.

189. Wessely-Szponder J., Urban-Chmiel R., Wernicki A., Bobowiec R. Effect of leukotoxin of Mannheimia haemolytica and LPS of E. coli on secretory response of bovine neutrophils in vitro // Pol. J. Vet. Sci. -2005. -Vol. 8, №2. -P. 99-105.

190. Wittel U.A., Rau В., Gansauge F. et al. Influence of PMN leukocyte-mediated pancreatic damage on the systemic immune response in severe acute pancreatitis in rats // Dig. Dis. Sci. -2004. -Vol. 49, № 7-8. -P. 1348-1357.

191. Yang D., Chertov O., Bykovskaia S.N. et al. Beta-defensins: linking innate and adaptive immunity through dendritic and T cell CCR6 // Science. -1999. -Vol. 286. -P. 525-528.

192. Yu-Qing Zhao, Xiao-Hong Liu, Tetsuhide Ito, Jia-Ming Qian. Protective effects of rhubarb on experimental severe acute pancreatitis // World J. Gastroenterol. -2004. -Vol. 10, № 7. -P. 1005-1009.

193. Zang G., Ross C.R., Blecha F. Porcine antimicrobial peptides: New prospect for ancient molecules of host defense // Vet. Res. -2000. -№ 31. -P. 277.

194. Zhao D., Pothoulakis C. Rho GTPases as therapeutic targets for the treatment of inflammatory diseases // Expert Opin. Ther. Targets. -2003. -Vol. 7, № 5. -P. 583-592.

195. Zen K., Utech M., Liu Y., Soto I., Nusrat A., Parkos C.A. Association of BAP31 with CD1 lb/CD18. Potential role in intracellular trafficking of CD1 lb/CD 18 in neutrophils // J. Biol. Chem. -2004. -Vol. 279, № 43. -P. 4492444930.

Информация о работе

Породенко, Игорь Валериевич
кандидата медицинских наук
Краснодар, 2009
ВАК 03.00.13

Диссертация

ОЦЕНКА ЭФФЕКТОВ ОКТРЕОТИДА НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ЛЕЙКОЦИТОВ - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы