Молекулярно-генетическое изучение болезни Паркинсона в Башкортостане

Гилязова, Ирина Ришатовна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Молекулярно-генетическое изучение болезни Паркинсона в Башкортостане
ВАК РФ 03.00.15, Генетика

Автореферат диссертации по теме "Молекулярно-генетическое изучение болезни Паркинсона в Башкортостане"

На правах рукописи

ГИЛЯЗОВА ИРИНА РИШАТОВНА

МОЛЕКУЛЯРНО - ГЕНЕТИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ БОЛЕЗНИ ПАРКИНСОНА В БАШКОРТОСТАНЕ

03.00.15 - генетика

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Уфа - 2004

Гилязова Ирина Ришатовна

МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ БОЛЕЗНИ ПАРКИНСОНА В

БАШКОРТОСТАНЕ

03.00.15-генетика

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Лицензия № 0177 от 10.06.96 г. Подписано в печать 20.08.2004 Бумага офсетная. Отпечатано на ризографе. Формат 60x84 '/и. Усл.-печ. л. 2,2. Уч.-изд. 2,35. Тираж 100 экз. Заказ № 299.

450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3, Башкирский государственнй медицинский университет

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы. Болезнь Паркинсона (БП) — нейродегенеративное заболевание, манифестирующее чаще всего в возрасте старше 50 лет. Его частота в разных странах неодинакова, может достигать 1% населения, а среди лиц пожилого возраста - 2-4% (Голубев, с соавт., 1999). Распространенность БП в Башкортостане составляет 28,5: 100 000 населения, что, в среднем, соответствует частоте заболевания в Европе (Магжанов Р.В. с соавтор., 2002).

Основными клиническими признаками БП являются брадикинезия, ригидность и тремор покоя, по мере прогрессирования заболевания присоединяются постуральная неустойчивость, вегетативные расстройства и когнитивные дисфункции. В основе заболевания лежат дегенеративные изменения, в основном, в дофаминергических нейронах компактной части черной субстанции ствола головного мозга, и, как следствие, - снижение поступления в них двигательного нейромедиатора дофамина. Согласно современным представлениям, главным патогенетическим механизмом гибели дофаминергических нейронов является повышенный уровень апоптоза, обусловленный развитием в клетках окислительного стресса. Среди причин развития здесь окислительного стресса рассматриваются нарушения внутриклеточной убиквитин-зависимой деградации поврежденных белков и блокада митохондриального комплекса I, приводящие к накоплению в клетках свободных радикалов, источниками которых могут являться различные эндогенные и экзогенные нейротоксины (Крыжановский Г.Н. с соавт., 2002).

В большинстве случаев болезнь Паркинсона носит спорадический характер и имеет многофакторную природу с определенной генетической предрасположенностью. Существуют и моногенные формы заболевания. В настоящее время картировано 11 генных локусов, связанных с отдельными наследственными формами БП, отличающимися по типу наследования, возрасту манифестации и характеру прогрессирования заболевания; в четырех из них идентифицированы гены (Kontakos N.. Polymeropoulos M.H., 1997,1998; Kitada Т., Ishikawa S.,1998; Gasser Т., Faeny M.B., Bender W.W., 2000). Все эти гены связаны с функционированием убиквитин-зависимого протеолиза. Среди

РОС НАЦИОНАЛЬНА« БИБЛИОТЕКА С Петербург ОЭ МО кг 11 Iiwjwy

известных наследственных форм БП несколько более изученными на сегодняшний день являются аутосомно-доминантная БП, связанная с геном а синуклеина (PARK1) и аутосомно-рецессивная ювенильная БП, обусловленная мутациями в гене белка паркина (PARK2). При изучении генетической предрасположенности к спорадическим формам паркинсонизма рассматриваются гены, участвующие в детерминации процессов детоксикации различных эндогенных или экзогенных нейротоксинов (гены суперсемейства цитохрома Р-450 - CYP1A1, CYP2D6, глутатион-8-трансфераз (GSTM1), гены, участвующие в контроле дофаминового метаболизма (DRD2, DRD3, DRD4, DRD5), а также гены, задействованные в устранении свободных радикалов (SOD1, SOD2) (Smith С. et al., 1992; Armstrong M.et al., 1992; Kondo I. et al., 1993; Lucotte G. et al., 1996; Hotamisligil G.et al., 1994; Bandmann O. et al.,1998).

В соответствии с гипотезой о нарушении активности митохондриального комплекса I при БП исследуются гены мтДНК, кодирующие как субъединицы комплекса I, так и другие гены, связанные с функционированием системы окислительного фосфорилирования (Schulz J.B., Lindenau J., Seyfriend J. et al., 2000). Доказано, что респираторная недостаточность приводит к образованию высокотоксичных свободных радикалов (ROS), которые повреждают митохондрии и мтДНК. Поскольку митохондрии обеспечивают клетки энергией, необходимой для их жизнедеятельности, а кроме того, являются главным источником высокотоксичных свободных радикалов, в результате действия которых возникает окислительный стресс, ускоряющий процесс разрушения клеток (Schulz J.B., Lindenau J., Seyfriend J. et al., 2000), считается, что митохондрии играют ключевую роль в развитии многих нейродегенеративных заболеваний и старения (Harman D., 1972; Richter С, Park J.W., Ames B.N., 1988; Wallace D.C.,1992; Wallace D.C., Shofmer J.M., Brown M.D.et al. 1999; Wallace D.C., Shofmer J.M., Watts R.L., 1992; Wallace D.C., Lott M.T., 2002). Новым, интересным подходом является использование полиморфизма Alu-повторов в поиске генов предрасположенности к многофакторным заболеваниям, в том числе к нейродегенеративным.

Таким образом, проблема генетической предрасположенности к БП чрезвычайно актуальна и еще далека от разрешения. Требуют дальнейшего изучения вопросы о числе и механизмах функционирования генов, детерминирующих наследственные формы заболевания, о спектре клинических

симптомов при различных генетических нарушениях, а также о генах -кандидатах для спорадических форм БП.

Цель работы и задачи исследования. Целью работы являлось определение роли ряда генов ядерного и митохондриального геномов в развитии спорадической болезни Паркинсона у пациентов из Башкортостана. В соответствие с целью были поставлены следующие задачи:

1. Провести скрининг мутаций Ala53Thг и А1аЗОРго в гене PARK1 у пациентов с БП из Башкортостана.

2. Провести поиск мутаций в гене PARK2 у пациентов с БП и в контрольной группе.

3. Провести анализ ассоциации БП с генами GSTM1, CYP1A1, АРОЕ.

4. Оценить частоту Alu-инсерции Yb8NBC36 в гене калиевого канала (KCNJ6) у пациентов с БП и в контрольной группе.

5. Провести анализ мтДНК у пациентов с БП и в контрольной группе, включающий:

а) определение гаплогрупп мтДНК у больных и в контроле;

б) поиск мутаций в гене цитохрома Ь.

Научная новизна исследования. Впервые в республике Башкортостан создана коллекция ДНК пациентов с БП. Проведен анализ генов PARK1, PARK2, в результате которого у двух пациентов русского происхождения со спорадической БП впервые обнаружена делеция 12 экзона гена PARK2, не описанная ранее в литературе, а также ряд нейтральных мутаций. Установлено, что полиморфизмы генов GSTM1, АРОЕ, Yb8NBC36 ассоциированы с БП. Впервые у пациентов с БП из Башкортостана проанализирована мтДНК и определена ассоциация заболевания с отдельными гаплогруппами мтДНК в зависимости от этнической принадлежности больных. Выявлено, что для татар гаплогруппой риска развития БП является гаплогруппа Н, гаплогруппа U представляет протективный фактор. При изучении мутаций в гене митохондриального цитохрома Ь установлено, что гашютип 15 693 С-15218А-14793А, ассоциированный с гаплогруппой ^ является протективным в отношении развития болезни Паркинсона у татар.

Научно-практическая значимость работы. Полученные данные представляют интерес для понимания молекулярно-генетических механизмов возникновения БП, а также позволяют предложить новые направления в

разработке подходов для оценки групп риска БП. Результаты исследования могут быть использованы при чтении спецкурсов на факультетах биологии, в медицинских ВУЗах, на курсах повышения, квалификации медицинских

работников.

Положения, выносимые на защиту:.

1. Отсутствие мутаций Ala53Thr и А1а30Рго в гене PARK1 у пациентов с БП из Башкортостана.

2. Гетерозиготное носительство функционально значимых мутаций в гене PARK2 — редкая, но возможная причина развития спорадической формы БП.

3. Ассоциация спорадической БП с полиморфизмами генов GSTM1 (генотип «0/0» - фактор риска развития БП), АРОЕ (б4 - фактор риска БП), гена калиевого канала KCNJ6 (Alu- инсерция Yb8NBC36 - фактор риска БП).

4. Спорадическая форма БП ассоциирована с гаплогруппами мтДНК. В популяции татар фактором риска развития БП является гаплогруппа Н. Гаплогруппа U представляет протективный фактор в отношении развития заболевания:

5. Ассоциация спорадической формы БП с мутациями в гене митохондриального цитохрома В: в популяции татар гаплотип 15693С-15218А-14793А, сцепленный с гаплогруппой U мтДНК, является протективным в отношении развития БП.

Апробация работы. Результаты исследования были представлены на научной конференции «Актуальные проблемы современной генетики» (МоскваДООЗ), международных конференциях «Геном человека» (Канкун, Мексика,2003; Берлин, Германия, 2004), 3-й Европейско-Американской школе по судебной генетике и клинических курсах по молекулярной и клеточной медицине (Загреб, Хорватия,2003), на 7-ой Путинской школе-конференции молодых ученых (г. Пущино,2003), на Европейском обществе генетиков человека (Мюнхен, Германия,2004), Всероссийской конференции Вавиловского общества генетиков и селекционеров «Генетика в XXI веке: современное состояние и перспективы развития» (Москва, 2004).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 10 печатных работ, из них 2- статьи.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Структура и объем диссертации. Работа изложена на 155 страницах машинописного текста. Состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов и их обсуждения, заключения, выводов и библиографического списка (включает 260 работ отечественных и зарубежных авторов). Диссертация иллюстрирована 16 рисунками и 18 таблицами.

Материалы исследования. В работе использованы образцы ДНК больных с клиническим диагнозом болезнь Паркинсона. Подбор и клиническая характеристика больных проводились на базе кафедры неврологии с курсами нейрохирургии и медицинской генетики Башкирского государственного медицинского университета. Обследованный контингент представлен 200 семьями с болезнью Паркинсона (39,3% мужчин и 60,7% женщин), включающими больных в возрасте от 38 до 82 лет (средний возраст манифестации заболевания 56,5+16) и 100 членов их семей. Наследственные формы БП представлены 3-мя семьями с аутосомно-доминантным и 2-мя — с аутосомно-рецессивным типом наследования.

По этнической принадлежности семьи распределились следующим образом: 60 русских, 84 татарских, 20 башкирских, 4 чувашских, 9 марийских, 2 мордовских, 2 удмуртских, 3 украинских, 1 белорусская, 2 осетинских, 1 немецкая. В 12-ти семьях пробанды происходили из межнациональных браков: татарин-башкирка, башкир-татарка, русский-татарка. Все пациенты проявляли как минимум две из четырех принципиально важных клинических черт БП: тремор «покоя», ригидность, брадикинезию, нарушение постуральной устойчивости. Исключающим критерием в выборе пациентов было наличие вторичного паркинсонизма. Контрольная группа составлена из 210 человек (41,4% мужчин и 58,6% женщин) в возрасте от 29 до 84 лет (средний возраст контрольной группы составлял 58 лет), не имеющих клинических черт нейродегенеративных заболеваний, а также по возрасту, полу, этнической принадлежности и территории проживания соответствующих группе пациентов с БП.

Методы исследования. ДНК была выделена из периферической крови методом фенольно-хлороформной экстракции (Mathew et al.,1984). Для анализа генов PARK1, PARK2, GSTM1, CYP1A1, АРОЕ, Yb8NBC36 использовались методы полимеразной цепной реакции (ПНР) синтеза ДНК, ПДРФ-анализ. ПНР

проводилась на амплификаторе производства компании «ДНК-технология» с использованием ДНК-полимеразы Termus aquaticus производства фирмы «Силекс». Исследование образцов ДНК на наличие точковых мутаций в гене PARK2 проводили методом анализа конформационного полиморфизма однонитевой ДНК (SSCP- анализа) (Orita et al., 1989). Результаты SSCP-анализа оценивали в 10%-ном полиакриламидном геле с последующим окрашиванием азотнокислым серебром. Определение последовательности нуклеотидов образцов ДНК проводили с амплификатов с использованием флюоресцентно-меченых праймеров на приборе ALF™ DNA Sequencer (Pharmacia Biotech) no методу Сенгера. Анализ нуклеотидных последовательностей гипервариабельного сегмента I контрольного региона мтДНК (ГВС1) включал ПЦР-амплификацию фрагмента мтДНК ГВС1 размером 376 п.н. и сиквенс исследуемого участка. Для ПДРФ-анализа мтДНК были отобраны сайты, специфичные для большинства европейских и азиатских популяций: 73Alw44I, 7598HhaI, 4577NlaIII, 7025AM, 10032AM, 10397AM, 12308Hinfl, 12406HincII, 12704MboI, 13704Bst0l, 15606AM

Статистическая обработка полученных данных проводилась с использованием пакета программ: Genepop v. 1.2 [Raymond and Rousset, 1995], Statistica v.5.5 [StatSoft Inc., USA], RxC (Rows and Columns) (Roff, Bentzen, 1989), программного обеспечения MS Excel (Microsoft). При попарном сравнении частот генотипов и аллелей в группах больных и здоровых лиц использовался точный двухсторонний критерий Фишера р (F2), а также критерий х2 (Р) Для таблиц сопряженности 2x2 с поправкой Йейтса на непрерывность. Силу ассоциаций оценивали в значениях показателя соотношения шансов odds ratio (OR) [Schlesselman J.,1982].

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 1. Анализ мутаций в гене PARK1 у пациентов с болезнью Паркинсона.

У 200 больных со спорадической формой болезни Паркинсона и у пяти неродственных больных с наследственными формами БП проведен скрининг мутаций Ala53Thr и А1а30Рго в гене альфа-синукленина (PARK1). Данные мутации у обследованных больных, в том числе с аутосомно-доминантной формой, не выявлены. Указанные мутации являются единственными описанными функционально значимыми нарушениями в гене альфа-

синуклеина при редких наследственных формах БП (Polymeropoulos М.; Lavedan С, Leroy Е., 1997; Kriiger R., Kuhn W., Muller T.et al.,1998). Известно, что в результате ряда исследований, посвященных молекулярному изучению БП в европейских популяциях,- в том числе и в российской, мутаций в гене альфа-синуклеина не выявлено (Gasser Т., Muller-Myhsok В., Wszolek Z. et al., 1997; Scott W., Stajich J., Yamaoka L. et al., 1997; Vaughan J.R., Farrer M.J., Wszolek P. et al., 1998; Иванова-Смоленская И.А., Маркова Е.Д., Загоровская Т.Б., Иллариошкин С.Н., 2002). По-видимому, данные мутации связаны с эффектом основателя, являются сравнительно новыми, не получившими широкого распространения в мире.

2. Анализ мутаций в гене PARK2 у пациентов с болезнью Паркинсона и

в контрольной группе.

С помощью метода полуколичественного анализа дозы отдельных экзонов гена PARK2, основанного на мультипраймерной ПЦР групп экзонов, у двух неродственных больных БП русского происхождения была обнаружена гетерозиготная делеция экзона 12 (рис.1 А). Данная работа была проведена на базе отдела молекулярных основ генетики человека Института молекулярной генетики РАН (завлабораторией д.б.н., проф. Лимборская С.А.).

У этих больных величина пика, соответствующего экзону 12, составила 10,1% и 14,2% от общего амплификационного сигнала, тогда как у здоровых лиц и у других больных этот пик составляет 28± 1,6% сигнала (рис1Б). Клиническое течение заболевания у данных больных не отличалось от других в обследованной группе. Делеции экзона 12 в гене PARK2 в гомозиготном или гетерозиготном состоянии не были описаны ни при спорадической БП, ни при ювенильном паркинсонизме. Этот экзон кодирует С-концевой участок паркина, в котором расположен RING домен (Lucking СВ., DurrA., Bonifati V. et al, 2000), отвечающий как за связывание с белками-мишенями паркина, так и с Е2-убиквитином. Возможно, что обусловленное делецией нарушение структуры гена PARK2, по крайней мере, частично блокирует биологическую функцию его белкового продукта. Учитывая это, можно предположить, что делеция экзона 12 гена PARK2 в гомозиготном состоянии может вести в развитию ювенильной болезни Паркинсона по аналогии с делециями других экзонов этого гена (Kitada Т., Asakawa S., Hattori N. et al., 1998; Nisipeanu P.,

Inzelberg R., Blumen S.C. et al., 1999; Imai Y., Soda M., Takahashi R., 2000; Shimura H., Hattori N.. Kubo S. et al., 2000; Zhang Y., Gao J., Chung K.K. et al., 2000).

1 2 3

89,9% , 70,9% 85,5%

А Б

Рис.1. Делеция экзона. 12 в гене PARK2 у двух неродственных больных со спорадической формой болезни Паркинсона.

А) Мультипраймерная ПЦР амплификация экзонов 9 и 12 гена паркина у больных с идиопатической болезнью Паркинсона (дорожки 1 и 3) и здорового человека (дорожка 2) Б) Сканирование и обсчет радиоавтографа с использованием программы «Image Quant».

В гетерозиготном состоянии эту делецию можно рассматривать как фактор предрасположенности к развитию спорадической болезни Паркинсона или даже как причину развития этой формы паркинсонизма.

В результате поиска других мутаций с помощью SSCP-анализа и последующего секвенирования образцов с измененной подвижностью однонитевой ДНК, у 31 из 200 пациентов в гене PARK2 было выявлено 5 типов изменений нуклеотидной последовательности (таблица 1). Все изменения были найдены только у русских, татар и марийцев. Замена серина на аспарагин в 167-ом положении (Serl67Asn) и замена аспарагиновой кислоты на аспаранин в 167-ом положении (Asp394Asn) были описаны ранее в работе Abbas N. et al. (1999), проводивших анализ гена паркина в европейских семьях с аутосомно-рецессивным ювенильным паркинсонизмом. Авторы

охарактеризовали эти мутации как нейтральные полиморфные участки гена. Полученные нами данные подтверждают вывод о нейтральном характере мутаций Serl67Asn и Asp394Asn в гене PARK2; их частота среди больных и

здоровых жителей Башкортостана соответствует таковой в европейских популяциях (в среднем, 1.5%). Замену 866С—>Т, найденную только у одного больного из Башкортостана, не приводящую к изменению структуры кодируемого белка, тоже можно считать нейтральной.

Таким образом, при спорадических случаях БП функционально значимые мутации в гене PARK2 являются редким событием, но не исключено, что в гетерозиготном' состоянии они могут обусловливать предрасположенность к развитию БП.

Таблица 1.

Мутации в гене PARK2 у пациентов со спорадической формой идиопатической болезни Паркинсона

Локализац ия мутации Мутация • Изменения в структуре белка Частота (%)

Больные N=200 Контроль N=200

4-й экзон 601G-»A Serl67Asn 2 1

7-й экзон. 866С-УГ - 0.5 -

11-й экзон 1281G-*A Asp394Asn 4 2.5

2-й интрон IVS2+25T—»С - 9 6

4-й интрон IVS4-25 delA - 4.5 3.5

3. Анализ митохондриальной ДНК у пациентов с болезнью Паркинсона из Башкортостана.

а) определение гаплотипов мтДНК и их принадлежности к гаплогруппам в соответствии с классификацией по Macaulay et al. (1999).

Проведен анализ нуклеотидных последовательностей контрольного региона мтДНК (методами секвенирования и определениия 11 ПДРФ-маркеров) у 148 пациентов с БП и 200 контрольных индивидуумов. В результате исследования среди больных были выявлены гаплотипы, относящиеся к 9-и, а в контрольной выборке - к 11-и гаплогруппам мтДНК, характерным для жителей Европы (Н, I, J, T, U, V, W, Nib) и Азии (А, С, D, G). В выборках как больных, так и контрольной группы большую часть (>70%)

составили европейские гаплогруппы мтДНК, среди которых преобладали гаплогруппы Н (31.7% и 31.0%, соответственно), JT (12.8% и 18.5%) и U (21.6% и 29.5%). Сравнительный анализ распределения частот гаплогрупп мтДНК в выборках пациентов с БП и контроля не показал достоверно значимых отличий (Х2=18.2;Р =0.064).

Учитывая имеющиеся многочисленные данные о неоднородной структуре генофонда народов Волго-Уральского региона (Бермишева М.А. с соавт.,2002), наряду с описанным выше сравнительным анализом объединенных выборок, мы провели аналогичный анализ в группах русских и татар, наиболее представленных в нашей выборке больных (таблица 2). Сравнив- контрольные группы русских и татар, мы обнаружили, что по распределению частот гаплогрупп мтДНК эти выборки достоверно отличаются друг от друга (х2=9,1695; Р=0,0034). Было установлено, что среди русских преобладающая в европейских популяциях гаплогруппа Н так же встречается с высокой частотой (42%), тогда как среди татар ее частота значительно ниже (18%), а наиболее частой является гаплогруппа U (36.8%). При сравнении частот гаплогрупп мтДНК в выборке пациентов с БП татарской этнической принадлежности и в соответствующей группе контроля, были выявлены достоверные различия (х2=24.68; Р=0.002), характеризующиеся значительным преобладанием среди больных гаплогруппы Н (42% и 18% соответственно), (OR=3,2; С1=1,33-7,8; Р=0,008) и уменьшением частоты гаплогруппы U (12% и 36% соответственно) ^=0,2; а= 0,079 - 0,667; Р=0,005) (рис.2).

В выборках русских - больных и контроля, - достоверных различий в распределении частот гаплогрупп мтДНК не выявлено. Таким образом, на примере сравнительного анализа больных и контрольных лиц, этнических татар, можно сделать предварительное заключение, что в популяции татар БП ассоциирована с полиморфизмом мтДНК, при этом гаплогруппа Н представляет фактор риска, а гаплогруппа U является протективной в отношении развития болезни Паркинсона.

Таблица 2

Частота гаплогрупп мтДНК у пациентов с болезнью Паркинсона и в

контрольных группах из Башкортостана

Рис.2. Распределение частот гаплогрупп мтДНК у татар с болезнью Паркинсона и в контрольной группе.

б) Поиск мутаций в гене цитохрома Ь (MTCYB) у пациентов с болезнью-Паркинсона и в. контрольной группе. При секвенировании гена МТСУВ нами было обнаружено 16 миссенс-мутаций, из которых 15 было выявлено у пациентов с БП и 9 - в контрольной группе (таблица 3).

Таблица 3

Частоты миссенс-мутаций в гене митохондриального цитохрома В у пациентов с болезнью Паркинсона и в контрольной группе (татары).

Нукпеотид. замены АК-замены Частота у БП п=58 абс. (%) Гаплогруппы Частота в контр.группе п=80 абс. (%) Гаплогруппы

14766Т/С Ие/ТЬг 30 (51,72) Л, и, А, Ъ, С, 55 (68,75) и, Л, I, С, А, Ы1Ь, О.О^

15326А/0 Авп/Авр 57 (98,27) и, Н ¿Т. О, С, I, N9, V 75 (93,75) и,Л,Н,1,С,\У, Ы1Ь, О, в, V

15452С/А Ьеи/Ие 5 (8,62) Л 12 (15) Л

15860АЛ} 11еЛ/а1 1 (1.72) Л 0 (0) -

15218А/С ТЬг/А1а 3 (5,17) и 4 (5) и

15519Т/С Ьеи/Рго 1 (1,72) Н 0 (0) -

15884 О/С А1а/ТЬг 1 (1,72) т 3 (3,75) \У

15261б/А вег/Аяп 1 (1,72) другая 1 (1,25) другая

14793А/Т Шз/А^ 4 (6,89) и 7 (8,75) и

15204Т/С ие/ТЬг 1 (1,72) С 2 (2,5) С

15693Т/С Не/ТЬг 0 (0) - 14 (17,5) и

14748Т/С МеЮЪг 1 (1,72) и 0 (0) -

15423Т/А Не/Ает 1 (1.72) другая 0 (0) -

15534АЛ5 Авп/Бег 1 (1,72) С 0 (0) -

15653 А/Г МеЫли 1 (1,72) и 0 (0) -

15779Т/С Туг/№з 1 (1,72) л 0 (0) -

У всех контрольных индивидуумов замена тимина на цитозин в 15693 положении мтДНК была сцеплена с вариантом 15218А и 14793А, то есть мутантные варианты 15218G и 14793Т, обнаруженные как среди пациентов с болезнью Паркинсона, так и среди здоровых доноров, не были выявлены ни у одного из носителей аллеля 15693С. Кроме того, данные три мутации (15693Т/С, 15218Д^, 14793Д^) оказались сцеплены с гаплогруппой ^ Исходя из этого можно предположить, что гаплотип 15693С-15218А-14793А, ассоциированный с гаплогруппой ^ является протективным в отношении развития болезни Паркинсона (011=0,04,0=0,006-0,65) (рисунок 3).

Рис.3. Частоты гаплотипа 15693С-15218А-14793А гена митохондриального цитохрома В у пациентов татарской этнической принадлежности и в контрольной группе.

Помимо миссенс-мутаций, в результате анализа гена MTCYB было обнаружено 9 синонимичных замен, не приводящих к изменению аминокислотной последовательности белка. Все они были описаны ранее (Ikebe S., Tanaka M., Ozawa I., 1995; De Coo I.F., Renier W.O., Ruitenbeek W. et al., 1999; Kosel S., Grasbon-Frodl E.M., Mautsch U. et al., 1998) и причислены к нейтральным полиморфизмам, поскольку не приводят к аминокислотным заменам, встречаются как среди больных, так и среди здоровых доноров, что также подтверждается результатами нашего исследования.

Наши данные по анализу ассоциаций БП с гаплогруппами мтДНК и полиморфизмом гена MTCYB согласуются с гипотезой Wallace et al. (1993), согласно которой географическое распространение линий мтДНК является результатом климатического отбора. Энергия митохондрий используется как для выработки АТФ, направленной на выполнение работы, так и для

производства тепла, поддерживающее постоянную температуру тела. Отношение количества энергии, затрачивающейся на работу и тепло, регулируется взаимосвязанной эффективностью. Мутации в генах мтДНК изменяют эту эффективность, приводя к перераспределению калорий, затрачивающихся на работу и теплоту. В холодных температурных районах Евразии, большее количество энергии уходит на производство тепла, и, соответственно, меньшее - на выработку АТФ. Мутации, аккумулированные в мтДНК, уменьшают АТФ-связывающую эффективность и способствуют большей выработке тепла и меньшей - АТФ.

Поскольку митохондрии с такими мутациями «сжигают» электроны быстрее, значительно меньшее их количество переходит к кислороду, образуя высокотоксичные свободные радикалы с высоким повреждающим действием. Поскольку количество образующихся свободных радикалов ничтожно мало, то они не могут значительно повреждать митохондриальные ферменты, липиды и мтДНК. Следовательно, мутации и полиморфизмы мтДНК, уменьшающие АТФ-связывающую способность митохондрий, именно такие, как обнаруженные нами в гене митохондриального цитохрома b, являются протективными для БП и других нейродегенеративных заболеваний с поздним началом.

Среди европейских гаплогрупп мтДНК, среди больных БП. из Башкортостана наиболее часто встречается гаплогруппа Н, в которой не наблюдается ни одна из «несвязывающих» мутаций. Предполагают, что гаплогруппа Н имеет самый высокий выход АТФ и самую низкую продукцию тепла среди всех европейских линий мтДНК. Таким образом, «несвязывающие» линии мтДНК приводят к уменьшению предрасположенности к БП (Van der Walt et al., 2004) и БА (Chagnon P. et al., 1999; Carrieri G. et al., 2001) и способствуют долгожительству (De Benedictis G. et al.,1999; Coskun P.E. et al., 2003), и, следовательно, митохондриальная АТФ-связывающая эффективность объясняет, почему европейские гаплогруппы J и U являются протективными для БП. Результаты исследования, полученные нами при анализе распределения гаплогрупп у пациентов с БП и в контроле, а также при секвенировании гена митохондриального цитохрома b, согласуются с данной теорией, предложенной Wallace и его коллегами, позволяющей понять, почему гаплогруппа Н является фактором риска БП, а гаплогруппа U - протективным

фактором. Кроме того, данная теория объясняет, почему «несвязывающие» мутации 15693Т/С, 15218A/G, 14793A/G в гене MTCYB, а точнее гаплотип 15693С - 15218А - 14793А, сцепленный с гаплогруппой U, является протективным фактором для развития БП.

4. Анализ ассоциации болезни Паркинсона с полиморфизмом генов GSTM1, CYP1A1, АРОЕ, Yb8NBC36.

С целью анализа ассоциации БП с генами детоксикации ксенобиотиков, нами были определены частоты гомозиготной делеции 10 т.п.н. гена GSTM1 и аллелей полиморфного локуса 7-го экзона гена CYP1A1 у 200 неродственных пациентов с БП и 200 контрольных индивидуумов. У пациентов с БП частота встречаемости «нулевого» генотипа была достоверно выше, чем в контрольной группе (х2=8Д1; Р=0,005; OR=1,45; С1=1,20-2,83) - рис. 4. Анализируя аналогичные данные, полученные другими исследователями, можно выявить как согласующиеся, так и противоречивые результаты (Tison et al., 1994, Bandman et al., 1997, Menegon A. et al.,1998; Ahmadi A. et al., 2000). Наши данные подтвержают результаты исследования Ahmadi A.et al. о том, что ген GSTM1, кодируя фермент, являющийся универсальным антиоксидантом ЦНС и играющий важную роль в устранении нейротоксинов, может быть вовлечен в патогенез БП.

0,8

S ' 5 0.4

т 0,2

□ пациенты БП

□ контроль

аллель Del

аллельЫ

аллели

Рис.4 Анализ распределения частот аллелей гена 08ХМ1 у пациентов с БП и в контрольной группе.

При исследовании .частоты точковой мутации в экзоне 7 гена CYP1A1, приводящей к замене изолейцина на валин в полипептидной цепи белка у пациентов с БП и в контрольной выборке, нами не было выявлено ассоциации заболевания с данным полиморфизмом. Это согласуется с данными ряда авторов, проводивших подобные исследования (Nicholl D.J., Bennett P., Hiller L. et al., 1999; Wang J., Liu Z., Chen В., 2000; Liu P., Liu Z., Shao M. et al., 2001; Chan D.K.Y., Mellick G.D., Buchanan D.D. et al., 2002).

Одним из генетических маркеров нейродегенерации является аллельный полиморфизм гена аполипопротеина Е (АРОЕ), который обусловлен точковыми нуклеотидными заменами, приводящим к замещениям аминокислот цистеина и аргинина в положениях 112 и158 полипептидной цепи белка. Мы провели генотипирование по данному полиморфизму у 196 пациентов с БП и у 149 контрольных индивидуумов. Считается, что аллель б4 играет модифицирующую роль в развитии таких дегенеративных заболеваний, как болезнь Альцгеймера, прогрессирующий супрануклеарный паралич и других, но данные о роли аллеля е4 в развитии болезни Паркинсона до сих пор остаются противоречивыми (Kruger et al.,1999; Harhangi B.S., de Riijk M.C., van Duijn С.М., van Broekhaven C.et al., 2000; Tan et al., 2000). Предполагается, что каждая изоформа белка АроЕ имеет свою конформацию пептидной молекулы и изоформа белка е4 обладает более выраженным амилоидогенным потенциалом благодаря высокому сродству к ß-амилоиду (Schmechel D. et al., 1993; Weisgraber К. et al., 1994; Schelleberg G., 1995). Доказано, что белок АроЕ играет значительную роль в регуляции процессов регенерации нейрональных мембран (MahleyR-etal., 1996).

В результате исследования нами были выявлены статистически значимые различия по распределению частот генотипов (Е2/2, Е2/3, Е2/4, ЕЗ/3, ЕЗ/4, Е4/4) и аллелей у пациентов

с БП и в контрольной группе (х2=10,432; Р=0,005). При попарном сравнении частот генотипов и аллелей между выборками здоровых лиц различной этнической принадлежности и соответствующих им групп больных, также были выявлены статистические значимые отличия. Пациенты с БП татарского происхождения отличались от татар контрольной группы (х2= 9,251; Р=0,009), русские с БП - от контрольной группы русских (х2=г6,104; Р=0,047). Частота аллеля е4 достоверно различалась между выборками татар с БП и контрольной

группой татар (рис.5), а также между русскими с БП и контрольной группой русских (х2=7,45, Р=0,007, ОЯ=4,12, С1=1,4(М2,93 и х2=5,60, Р=0,01, ОЯ=4,82, С1=1,24-21,8 соответственно) (рис.6). Таким образом, анализ ассоциаций полиморфизма гена аполипопротеина Е с БП показал, что аллель Б4 является фактором риска развития болезни Паркинсона у русских и у татар.

Рис.5. Распределение частот аллелей и генотипов гена аполипопротеина Е у татар с болезнью Паркинсона и в контроле.

М М М 3,3 3,4 4,4

□ Больные БП русские_В Контроль, русские

Рис.6. Распределение частот аллелей и генотипов гена аполипопротеина Е у русских с болезнью Паркинсона и в контроле.

Кроме того, нами впервые был проанализирован характер распределения частот аллелей и генотипов Alu-инсерционного полиморфизма (Yb8NBC36) в гене калиевого канала (KCNJ6), который картирован на 21 хромосоме, в области 21q22.13. Калиевые каналы участвуют в таких физиологических процессах, как работа сердца, высвобождение инсулина, возникновение потенциала действия, а также играет ключевую роль в обеспечении пластичности и возбудимости нейронов.

В результате анализа было выявлено, что аллель Ins достоверно чаще встречается у пациентов с БП по сравнению с контрольной группой (рис.7). Этот результат одинаков как для общей выборки больных и контроля, так и для этнически различных групп. Таким образом, по данным наших исследований,

Рис.7. Распределение частот аллелей Alu - инсерционного полиморфизма (Yb8NBC36) в гене калиевого канала KCNJ6 у пациентов с БП различной этнической принадлежности и в контроле.

аллель Ins является фактором риска развития БП у русских (х2=5,58, Р=0,018,

OR=2,1, CI=l,13-3,98) и у татар (х2=14,36, Р=0,0008, OR=2,9, CI= 1,63-5,20), а

аллель Del для данных этнических групп является протективным для развития

БП (Х2=5,58, Р=0,018, 0R=0,47, С1=0,25-0,89 и Х2=14,36, Р=0,0008, 0R=0,43, С1=0,19-0,61, соответственно).

На основании данного результата можно предположить, что данная Alu -инсерция может влиять на структуру белкового продукта гена и, соответственно, на функционирование калиевого канала, что, в результате может обусловливать определенную предрасположенность к нейродегенеративным заболеваниям, в частности, к БП. Данный результат является основой для более глубокого, подробного изучения гена калиевого канала в связи с БП.

ВЫВОДЫ

1. Мутации Ala53Thr и А1аЗОРго в гене альфа-синуклеина, встречающиеся при наследственных формах болезни Паркинсона в странах Южной Европы, у пациентов из Башкортостана не обнаружены и не являются причиной развития болезни Паркинсона в Башкортостане.

2. Установлено, что функционально значимые мутации в гене PARK2 я&тяются редким событием у пациентов со спорадической формой болезни Паркинсона. У двух пациентов с болезнью Паркинсона русского происхождения в гене PARK2 выявлена ранее не описанная, функционально значимая делеция 12 экзона в гетерозиготном состоянии.

3. Для жителей республики Башкортостан выявлена ассоциация спорадической болезни Паркинсона с полиморфизмами генов глутатион-8-трансферазы, аполипопротеина Е, гена калиевого канала KCNJ6. Генетическим маркером повышенного риска являются: «нулевой аллель» гена GSTM1 (OR=1,45, С1=1,2-2,8), аллель е4 гена аполипопротеина Е (OR=4,5, CI=2,1-9,7), аллель Ins гена калиевого канала (KCNJ6)(OR=2,6, CI= 1,8-3,8).

4. В популяции татар выявлена ассоциация спорадической болезни Паркинсона с гаплогруппами мтДНК: гаплогруппа Н представляет фактор риска (OR=3,2, С1=1,33-7,8), а гаплогруппа U является протективной в отношении развития болезни Паркинсона (OR=0,2, CI=0,079 - 0,6).

5. Установлено, что в гене митохондриального цитохрома В гаплотип 15 693 С -15218А-14793А, ассоциированный с гаплогруппой U, является протективным в отношении развития болезни Паркинсона у татар (OR=0,04, CI=0,006-0,6).

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Сломинский П.А., Милосердова ОБ., Попова С.Н., Гилязова И.Р., Хидиятова И.М., Магжанов Р.В., Хуснутдинова Э.К., Лимборская С.А. Анализ делеционных мутаций в гене PARK2 у больных идиопатической формой болезни Паркинсона // Генетика. - 2003. - Т.39. - С. 223-228.

2. Гилязова И.Р., Хидиятова И.М., Байтимеров А.Р., Магжанов Р.В., Сафиханов Р.Я., Хуснутдинова Э.К. Генетические аспекты болезни Паркинсона //Сборник научных трудов конференции ученых Республики Башкортостан «Научный прорыв - 2003». - Уфа, 2003. -С.24-29.

3. Гилязова И.Р., Хидиятова И.М., Сломинский П.А., Байтимеров А.Р., Лимборская С.А., Хуснутдинова Э.К. Анализ гена паркин у пациентов с болезнью Паркинсона // Материалы 7-ой Пущинской школы-конференции молодых ученых «Биология — наука XXI века». - Пущино, 2003.-С. 322.

4. Gilyasova I.R., Khidiatova I.M., Baytimerov A.R., Slominsky P.A., Limborska SA, Khusnutdinova E.K. Gene PARK2 analysis in patients with Parkinson's disease from Bashkortostan // Abstracts of Human Genome Meeting - Cancun, 2003. - P. 29.

5. Гилязова И.Р., Хидиятова И.М., Сломинский П.А., Байтимеров А.Р., Лимборская СА., Хуснутдинова Э.К. Клинико - генетическое изучение болезни Паркинсона в Башкортостане // Медицинская генетика. - 2003. -Т.2.-Ж7.-С.409.

6. Gilyazova I.R., Khidiyatova I.M., Slominsky PA., Baytimerov A.R., Limborska S.A., Khusnutdinova E.K. Gene PARK2 analysis in patients with Parkinson's disease from Bashkortostan // Abstracts of the third European-american school in forensic genetics and Mayo clinic course in advanced molecular and cellular medicine - Zagreb, 2003. - P. 92.

7. Gilyasova I.R., Khidiatova I.M., Baytimerov A.R., Slominsky P.A., Khusnutdinova E.K. PARK2 mutations screening in Parkinson's disease patients from the Volga-Ural region // Abstracts ofHuman Genome Meeting -Berlin,2004.- P.30,112.

8. Gilyasova I.R., Khidiatova I.M., Slominsky P.A., Magzhanov R.V., Baytimerov A.R., Limborska S.A., Khusnutdinova E.K. Genes PARK1 and PARK2 analysis in Parkinson's disease patients from Bashkortostan // Abstracts of European Human Genetics Conference. - Munich, 2004. -European Journal ofHuman Genetics.2004. - V.I 2. - P. 268,276.

9. Гилязова И.Р., Хидиятова И.М., Сломинский П.А., Байтимеров А.Р.,. Лимборкая С.А., Хуснутдинова Э.К. Анализ генов PARK2 и альфа-синуклеина у пациентов с болезнью Паркинсона // Материалы конференции Вавиловского общества генетиков и селекционеров «Генетика в XXI веке: современное состояние и перспективы развития». — Москва, 2004. - С. 7.

10. Хидиятова И.М., Гилязова И.Р., Байтимеров А.Р., Магжанов Р.В., Хуснутдинова Э.К. Поиск мутаций в генах PARK1 и PARK2 у пациентов со спорадической и наследственными формами болезни Паркинсона из Башкортостана // Медицинская генетика. - 2004. - № 6. -С. 280-283.

Список сокращений и обозначений

БП - болезнь Паркинсона БА - болезнь Альцгеймера мтДНК - митохондриальная ДНК

ПДРФ - полиморфизм длин рестрикционных фрагментов OR (odds ratio) — соотношение шансов 95% CI (confidence interval) - доверительный интервал Р - вероятность

SSCP — анализ конформационного полиморфизма однонитевой ДНК GSTM1 -глутатион-8-трансфераза М1

CYP1A1 - цитохром Р450, семейство 1, подсемейство А, полипептид 1 АРОЕ - аполипопротеин Е

DRD2 - DRD5 - гены рецептора дофамина D2 - D5 SOD — ген супероксиддисмутазы

Работа выполнена в Институте биохимии и генетики Уфимского научного центра Российской академии наук

Научный руководитель:

доктор биологических наук, профессор Хуснутдинова Эльза Камилевна

Научный консультант:

доктор медицинских наук, профессор Магжанов Рим Валеевич

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Янковский Николай Казимирович

доктор биологических наук, с н с. Мустафина Ольга Eвгеньевна

Ведущая организация: ГУ Медико-генетический научный центр РАМН

/ / ча<

Защита диссертации состоится чХ^» сентября 2004 г. в 11 часов на заседании Регионального диссертационного совета КМ 002.133.01 при Институте биохимии и генетики Уфимского научного центра РАН по адресу: 450054, г. Уфа, просп. Октября, 69

С диссертацией можно ознакомиться в Научной библиотеке Уфимского научного центра РАН.

Автореферат разослан

1С

августа 2004 г.

Ученый секретарь

Регионального диссертационного совета

Гималов Ф Р.

И542?

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Гилязова, Ирина Ришатовна

ВВЕДЕНИЕ 5

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Клинико-эпидемиологические особенности болезни Паркинсона. 12

1.2. История изучения болезни Паркинсона.

1.3. Молекулярные основы болезни Паркинсона.

1.3.1. Аутосомно-доминантная болезнь Паркинсона, обусловленная мутациями в гене PARK1.

1.3.2. Аутосомно-рецессивная болезнь Паркинсона, обусловленная мутациями в гене PARK2.

1.3.3. Аутосомно-доминантная болезнь Паркинсона, обусловленная мутациями в генах PARK3 и PARK4.

1.3.4. Аутосомно-доминантная болезнь Паркинсона, обусловленная мутациями в гене PARK5.

1.3.5. Аутосомно-рецессивный паркинсонизм, сцепленный с локусом 1р35-36 (PARK6).

1.3.6. Аутосомно-рецессивный паркинсонизм, сцепленный с локусом 1р36 (PARK7).

1.3.7. Аутосомно-рецессивный паркинсонизм, обусловленный мутациями в локусе 12р 11.2-q 13.

1.4. Участие нарушений митохондриального генома в развитии болезни Паркинсона.

1.4.1. Разнообразие мтДНК в популяциях Западной и

Восточной Евразии.

1.4.2. Нарушение дыхательной функции митохондрий.

1.4.3. МФТП и его связь с болезнью Паркинсона.

1.4.4. Окислительный стресс и болезнь Паркинсона.

1.4.5. Митохондриальные нарушения и гибель клеток.

1.5. Болезнь Паркинсона и факторы окружающей среды.

ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

II. 1. Материал для исследования.

II.2. Методы исследования

И.2.1. Выделение геномной ДНК.

II.2.2. Полимеразная цепная реакция синтеза ДНК.

II.2.3. SSCP- анализ.

И.2.3. 1. SSCP со щелочной денатурацией.

II.2.4. Полуколичественная ПЦР.

II.2.5. Определение последовательности нуклеотидов.

II.2.6. Методы изучения полиморфизма мтДНК.

II.3. Статистическая обработка результатов.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

III. 1. Анализ мутаций в генах PARK1, PARK2 у пациентов с болезнью Паркинсона и в контрольной группе.

III.2. Анализ мтДНК у пациентов с болезнью Паркинсона и в контрольной группе.

III.3. Анализ ассоциаций полиморфизма генов аполипопротеина Е

АРОЕ), Alu-инсерции (Yb8NBC36) гена калиевого канала KCNJ6, гена глутатион- S-трансферазы Ml (GSTM1), гена семейства цитохромов Р-450 (CYP1A1) с развитием БП.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Молекулярно-генетическое изучение болезни Паркинсона в Башкортостане"

Актуальность проблемы. Болезнь Паркинсона (БП) -нейродегенеративное заболевание, манифестирующее чаще всего в возрасте старше 50 лет. Основными клиническими признаками БП являются брадикинезия, ригидность и тремор покоя, по мере прогрессирования заболевания присоединяются постуральная неустойчивость, вегетативные расстройства и когнитивные дисфункции. В основе заболевания лежат дегенеративные изменения, в основном, в дофаминергических нейронах компактной части черной субстанции ствола головного мозга, и, как следствие, - снижение поступления в них двигательного нейромедиатора дофамина.

Согласно современным представлениям, главным патогенетическим механизмом гибели дофаминергических нейронов является повышенный уровень апоптоза, обусловленный развитием в клетках окислительного стресса. Окислительный стресс, в свою очередь, может возникать здесь в результате двух основных патологических процессов - 1) нарушения внутриклеточной убиквитин-зависимой деградации поврежденных белков, что ведет к накоплению их оксидативно опасных форм; 2) блокады митохондриального комплекса I, приводящей к снижению содержания в клетках АТФ и последующему уменьшению образования глутатиона -универсального антиоксиданта ЦНС, что также ведет к накоплению в клетках свободных радикалов, источниками которых могут являться различные эндо- и экзонейротоксины.

Согласно данным эпидемиологических исследований, конец XX -начало XXI века характеризуется значительным ростом числа пациентов с болезнью Паркинсона. В вопросах этиологии и эпидемиологии болезни Паркинсона остается много неясных вопросов, что связано как с существованием нескольких форм заболевания, так и с трудностью его первичной диагностики и смертности, обусловленной, в свою очередь, развитием болезни у лиц старшей возрастной группы, уже отягощенных разнообразной соматической патологией. В то же время паркинсонизм занимает одно из центральных мест среди заболеваний центральной нервной системы и в настоящее время является растущей национальной проблемой.

Болезнь Паркинсона занимает второе место по распространенности среди нейродегенеративных заболеваний после болезни Альцгеймера. Его частота в разных странах неодинакова, может достигать иногда 1% населения, а среди лиц пожилого возраста - 2 - 4 % [Голубев B.J1. с соавт., 2000]. Распространенность БП в Башкортостане составляет 28,5:100 000 населения, что, в среднем, соответствует частоте заболевания в Европе. Общей тенденцией в наиболее крупных странах является увеличение за последнее десятилетие общего количества больных паркинсонизмом.

Медленный, но неуклонно продолжающийся рост заболеваемости, все еще недостаточная эффективность лечения, прогредиентное течение, а также тяжелая инвалидизация, наступающая в конце концов у большинства больных, - все это превращает паркинсонизм в серьезную социальную проблему, требующую всестороннего и интенсивного изучения.

Еще до недавнего времени болезнь Паркинсона не считалась наследственной, и исследования первоначально были фокусированы на факторах риска окружающей среды, таких как инфекции и нейротоксины. Однако в последние годы, на основании данных о семейной агрегации и близнецовых исследований, был подтвержден генетический вклад в этиологию болезни Паркинсона.

R., 1981, 1998; Gasser Т., 1998; Elbaz A et al., 1999], а вероятность развития БП у родственников больных с 1-й степенью родства в 2-3 раза выше, чем в общей популяции [Polymeropoulos М. et al., 1996].

В настоящее время картировано 11 генных локусов, связанных с отдельными наследственными формами БП, отличающимися по типу наследования, возрасту манифестации и характеру прогрессирования заболевания; в четырех из них идентифицированы гены [Polymeropoulos М.Н., 1996, 1997, 1998; Kitada Т., Asakawa S.,1998; Gasser Т. et al., 1998]. Кроме того, существуют семьи с наследственными формами БП, в которых связь заболевания с известными локусами исключена [Gwinn-Hardy K.A.et а1.,2000]. Все идентифицированные гены, непосредственно или косвенно, связаны с функционированием системы убиквитин-зависимого протеолиза.

Среди известных наследственных форм БП несколько более изученными на сегодняшний день являются аутосомно-доминантная БП, связанная с геном а-синуклеина (PARK1), для которой пока известны только две мутации, обнаруженные в нескольких семьях греческого, итальянского и немецкого происхождения; и аутосомно-рецессивная ювенильная БП, обусловленная мутациями в гене белка паркина, обозначенного как PARK2. Спектр и частота мутаций в гене PARK2 в разных популяциях различны [Hattori N., Matsumine Н., Asakawa S. et al.,1998; Kitada Т., Asakawa S., Hattori N. et al., 1998; Lucking et al., 1998; Scott W.K., Rogala A.R., Rampersaud E. et al., 2000; Imai Y., Soda M., Hattori N. et al., 2001; Сломинский П.А., Милосердова O.B., Попова C.H. и др., 2003].

При изучении генетической предрасположенности к спорадическим формам паркинсонизма рассматриваются гены, участвующие в детерминации процессов детоксикации различных эндогенных или экзогенных нейротоксинов (гены суперсемейства цитохрома Р-450 -CYP1A1, CYP2D6, глутатион-8-трансфераз (GSTM1), гены, участвующие в контроле дофаминового метаболизма (DRD2, DRD3, DRD4, DRD5), а также гены, задействованные в устранении свободных радикалов (SOD1, SOD2) [Smith С. et al., 1993; Armstrong M.et al., 1992; Kondo I. et al., 1993, 1998; Lucotte G. et al., 1996; Bandmann O. et al.,1998].

В соответствии с гипотезой о нарушении активности митохондриального комплекса I при БП исследуются гены мтДНК, кодирующие как субъединицы комплекса I, так и другие гены, связанные с функционированием системы окислительного фосфорилирования. Доказано, что респираторная недостаточность приводит к образованию высокотоксичных свободных радикалов (ROS), которые повреждают митохондрии и мтДНК. Поскольку митохондрии обеспечивают клетки энергией, необходимой для их жизнедеятельности, а кроме того, являются глайным источником высокотоксичных свободных радикалов, в результате действия которых возникает окислительный стресс, ускоряющий процесс разрушения клеток [Schulz J.B., Lindenau J., Seyfriend J. et al., 2000], считается, что митохондрии играют ключевую роль в развитии многих нейродегенеративных заболеваний и старения [Harman D., 1972; Richter С., Park J.W., Ames B.N, 1988; Wallace D.C,1992; Wallace D.C, Shoffner J.M, Brown M.D.et al. 1999; Wallace D.C, Shoffner J.M, Watts R.L, 1992; Wallace D.C, Lott M.T, 2002]. Однако, эти исследования до сих пор остаются на стадии разработки и требуют дальнейшего продолжения, подразумевающего определение мутаций в генах мтДНК, характера распределения частот гаплогрупп мтДНК в различных этнических группах и в группах больных с учетом этнической принадлежности.

В настоящее время интересным новым подходом является использование полиморфизма Alu-повторов в поиске генов предрасположенности к многофакторным заболеваниям. Известно, что инсерции Alu-элементов в геноме человека являются причиной приблизительно 0,3% всех генетических заболеваний человека. Среди многочисленных заболеваний, связанных с ретропозицией Alu-элементов можно выделить следующие: синдромы Леш-Нихана, Тея-Сакса, синдром XX у мужчин и многие другие [Deinenger P.L., Batzer М.А., 2002]. Ведется поиск Alu-элементов, которые могут быть задействованы в развитии нейродегенеративных заболеваний.

В целом, проблема генетической предрасположенности к БП еще далека от разрешения. Требуют дальнейшего изучения вопросы о числе и механизмах функционирования генов, детерминирующих наследственные формы заболевания, о спектре клинических симптомов при различных генетических нарушениях, а также о генах-кандидатах для спорадических форм БП. Учитывая, что спорадическая форма БП является преобладающей, поиск генов-кандидатов, причастных к ее развитию, особенно важен.

Исходя из имеющихся сведений о механизмах патогенеза заболевания, при поиске генов-кандидатов спорадической БП обоснованы такие подходы, как скрининг известных и поиск новых мутаций в генах, обусловливающих наследственные формы БП (т.к. до сих пор малоизученными являются вопросы, касающиеся механизмов функционирования выявленных генов, а также спектра и значения существующих в них мутаций, их свойств, таких, как доминирование и пенетрантность) и анализ ассоциаций с полиморфизмами других генов, связанных с различными специфическими для БП и универсальными системами функционирования клеток. При этом одним из важных требований к таким исследованиям является учет этнической принадлежности обследуемых групп.

Исходя из этого, целью нашей работы являлось определение роли ряда генов ядерного и митохондриального геномов в развитии спорадической БП.

В соответствие с целью были поставлены следующие задачи: 1. Провести скрининг мутаций Ala53Thr и А1а30Рго в гене PARK1 у пациентов с БП из Башкортостана.

2. Провести поиск мутаций в гене PARK2 у пациентов с БП и в контрольной группе.

3. Провести анализ ассоциации БП с генами GSTM1, CYP1A1, АРОЕ.

4. Оценить частоту Alu-инсерции Yb8NBC36 в гене калиевого канала KCNJ6 у пациентов с БП и в контрольной группе.

5. Провести анализ мтДНК у пациентов с БП и в контрольной группе, включающий: а) определение гаплогрупп мтДНК у больных и в контроле; б) поиск мутаций в гене цитохрома Ь. Научная новизна исследования.

Впервые в республике Башкортостан создана коллекция ДНК пациентов с БП. Проведен анализ генов PARK1, PARK2, в результате которого у двух неродственных пациентов русского происхождения со спорадической БП впервые обнаружена делеция 12 экзона гена PARK2, не описанная ранее в литературе, а также в ряд нейтральных мутаций. Установлено, что полиморфизмы генов GSTM1, АРОЕ, Yb8NBC36 ассоциированы с БП. Впервые у пациентов с БП из Башкортостана проанализирована мтДНК и определена ассоциация заболевания с отдельными гаплогруппами мтДНК в зависимости от этнической принадлежности больных. Выявлено, что для татар гаплогруппой риска развития БП является гаплогруппа Н, гаплогруппа U представляет протективный фактор. При изучении мутаций в гене митохондриального цитохрома b установлено, что гаплотип 15693С-15218А-14793А, ассоциированный с гаплогруппой U, является протективным в отношении развития БП у татар. Практическая значимость работы.

Полученные данные представляют интерес для понимания молекулярно-генетических механизмов возникновения БП, а также позволяют предложить новые направления в разработке подходов для оценки групп риска БП. Результаты исследования могут быть использованы при чтении спецкурсов на факультетах биологии, в медицинских ВУЗах, на курсах повышения квалификации медицинских работников. Положения, выносимые на защиту.

1. Отсутствие мутаций Ala53Thr и А1аЗОРго в гене PARK1 у пациентов с БП из Башкортостана.

2. Гетерозиготное носительство функционально значимых мутаций в гене PARK2 - редкая, но возможная причина развития спорадической формы БП.

3. Ассоциация спорадической БП с полиморфизмами генов GSTM1 (генотип «0/0» - генетический маркер повышенного риска развития БП), АРОЕ (в4 - генетический маркер повышенного риска), гена калиевого канала KCNJ6 (Alu- инсерция Yb8NBC36 - генетический маркер повышенного риска).

5. Ассоциация спорадической формы БП с мутациями в гене митохондриального цитохрома Ь: в популяции татар гаплотип

15693С- 15218А-14793А, сцепленный с гаплогруппой U мтДНК, является протективным в отношении развития БП.

Заключение Диссертация по теме "Генетика", Гилязова, Ирина Ришатовна

ВЫВОДЫ.

2. Установлено, что функционально значимые мутации в гене PARK2 являются редким событием у пациентов со спорадической формой болезни Паркинсона. У двух пациентов с болезнью Паркинсона русского происхождения в гене PARK2 выявлена ранее не описанная, функционально значимая делеция 12 экзона в гетерозиготном состоянии.

3. Для жителей республики Башкортостан выявлена ассоциация спорадической болезни Паркинсона с полиморфизмами генов глутатион-S-трансферазы, аполипопротеина Е, гена калиевого канала KCNJ6. Генетическими маркерами повышенного риска являются: «нулевой аллель» гена GSTM1 (OR=1.45, С1=1.2-2.8), аллель е4 гена аполипопротеина Е (OR=4.5, С1=2.1-9.7), Alu-инсерция Yb8NBC36 гена калиевого канала (KCNJ6)(OR=2.6, С1= 1.8-3.8).

4. В популяции татар выявлена ассоциация спорадической болезни Паркинсона с гаплогруппами мтДНК: гаплогруппа Н представляет генетический маркер повышенного риска (OR=3.2, CI=1.33-7.8), а гаплогруппа U является генетическим маркером пониженного риска развития болезни Паркинсона (OR=0.2, С1=0.079 - 0.6).

5. Установлено, что в гене митохондриального цитохрома В гаплотип 15693С -15218А-14793А, ассоциированный с гаплогруппой U, является протективным в отношении развития болезни Паркинсона у татар (OR=0.04, С1=0.006-0.6).

ЗАКЛЮЧЕНИЕ.

С генетической точки зрения болезнь Паркинсона представляет собой многофакторное заболевание. Основными факторами БП являются генетическая предрасположенность и факторы окружающей среды. Хотя патогенез заболевания до конца не изучен, в настоящее время существует несколько гипотез для объяснения развития БП, среди которых особое место занимает повышенный уровень апоптоза, вызванный развитием в клетках окислительного стресса. Окислительный стресс может возникать как при нарушении внутриклеточной убиквитин-зависимой деградации поврежденных белков, так и при дисфункции митохондриального комплекса I, приводящего к накоплению в клетках свободных радикалов с высоким повреждающим действием.

Мы проанализировали ряд генов ядерного и митохондриального геномов у пациентов с БП из Башкортостана. В результате проведенного нами исследования были получены следующие результаты. При анализе мутаций Ala53Thr и А1аЗОРго в гене альфа-синуклеина у 200 больных со спорадической формой болезни Паркинсона и у пяти неродственных больных с наследственными формами БП, в том числе с аутосомно-доминантной формой, данные мутации у обследованных больных не были выявлены. Этот результат свидетельствует о том, что мутации, найденные ранее в странах Южной Европы, являются сравнительно новыми, не получившими широкого распространения в мире. Результаты нашего исследования согласуются с данными большого числа работ, посвященных поиску мутаций в гене альфа-синуклеина, не обнаруживших мутаций Ala53Thr и А1а30Рго у больных с наследственными формами БП, в том числе и в российской популяции. В результате поиска различных типов мутаций в кодирующих областях гена PARK2 у пациентов со спорадической БП была обнаружена гетерозиготная делеция экзона 12, не описанная ранее в литературе. Этот экзон кодирует С-концевой участок паркина, в котором расположен RING домен [Lucking С.В., Durr A., Bonifati V. et al , 2000], отвечающий как за связывание с белками-мишенями паркина, так и с Е2-убиквитином. Возможно, что обусловленное делецией нарушение структуры гена паркина, по крайней мере, частично блокирует биологическую функцию его белкового продукта. В гетерозиготном состоянии эту делецию можно рассматривать как фактор предрасположенности к развитию спорадической болезни Паркинсона или даже как причину развития этой формы паркинсонизма. В результате поиска других мутаций с помощью SSCP-анализа и последующего секвенирования нами выявлено 2 миссенс-мутации и 3 нейтральных мутации в гене PARK2, не приводящих к изменению последовательности аминокислот в полипептидной цепи белка. Частота их встречаемости в популяциях Башкортостана соответствовала таковой в европейских популяциях. В результате анализа гена PARK2 у пациентов из Башкортостана, мы пришли к выводу, что хотя при спорадических случаях БП функционально значимые мутации в гене PARK2 очень редки, не исключено, что даже в гетерозиготном состоянии они могут обусловливать предрасположенность к БП.

Следует еще раз отметить, что все генетические дефекты, обнаруженные при БП, затрагивают путь убиквитин-зависимого протеолиза. Альфа-синуклеин и паркин экспрессируются преимущественно в меланинисодержащих дофаминергических нейронах, в которых присутствует дофаминовый переносчик, именно через который в клетку поступают ион МФП+ и другие нейротоксины, оказывающие негативное влияние на клетки черной субстанции головного мозга. При возникновении мутаций в вышеупомянутых генах, нарушается процесс убиквитинизации, что ведет к накоплению токсических субстратов альфа-синуклеина и паркина. Процесс завершается гибелью дофаминергических нейронов, который, по всей вероятности, является следствием сочетания нескольких факторов -генетической предрасположенности, окислительного стресса и действия нейротоксинов. Результаты наших исследований не подтверждают, но и не опровергают факт нарушения убиквитин-зависимого протеолиза. В настоящее время ведется интенсивное изучение патогенетических механизмов БП, но далеко не все из них раскрыты, поэтому дальнейшее изучение молекулярных механизмов формирования телец Леви, процесса убиквитинизации и механизмов возникновения в клетках окислительного стресса будет способствовать еще более полному пониманию основных механизмов возникновения БП, а также позволит разработать превентивную терапию для групп риска развития заболевания.

Принимая во внимание гипотезу о блокировании митохондриального комплекса I при БП, которое, как считается, приводит к недостаточной выработке энергии и накоплению свободных радикалов [Swerdlow et al, 1996, Gu et al, 1998], исследуются мутации в генах мтДНК и гаплогруппы мтДНК у пациентов с БП. Такие работы носят пока единичный характер, но представляют собой новый, перспективный подход в изучении механизмов возникновения заболевания.

В результате ПДРФ-анализа и секвенирования нуклеотидных последовательностей контрольного региона мтДНК среди больных нами были выявлены гаплотипы, относящиеся к 9-ти, а в контрольной группе - к 11-ти гаплогруппам, характерным для жителей Европы и Азии. При сравнении частот гаплогрупп мтДНК в выборке пациентов с БП татарской этнической принадлежности и в соответствующей контрольной группе, были обнаружены достоверные различия (х =24.68, Р=0.002), характеризующиеся значительным преобладанием среди больных гаплогруппы Н (OR=3.2, СГ=1.33-7.8) и уменьшением частоты гаплогруппы U (C)R=0.2, 0=0.079-0.667). Несколько меньшей в группе больных, по сравнению с контролем, оказалась и частота гаплогруппы JT (10% и 17% соответственно).

На основании этого мы сделали предварительное заключение, что в популяции татар БП ассоциирована с полиморфизмом мтДНК, при этом гаплогруппа Н является генетическим маркером повышенного риска (OR=3.2, 0=1.33-7.8), а гаплогруппа U - генетическим маркером пониженного риска развития заболевания (OR=0.2, С1= 0.079-0.667).

При анализе мутации гена MTCYB у пациентов с БП и в контрольной группе, было обнаружено 16 миссенс-мутаций и 9 синонимичных нуклеотидных замен. При этом, у всех контрольных индивидуумов замена тимина на цитозин в 15693 положении мтДНК была сцеплена с вариантом 15218А и 14793А, то есть мутантные варианты 15218G и 14793А, обнаруженные как среди пациентов с БП, так и среди здоровых доноров, не были выявлены ни у одного из носителей аллеля 15693С. Данные три мутации сцеплены с гаплогруппой U, следовательно, гаплотип 15693С-15218А- 14793А, является протективным в отношении развития БП.

Наши данные по анализу ассоциаций БП с гаплогруппами мтДНК и полиморфизмом гена MTCYB согласуются с гипотезой Wallace et al. (1993), согласно которой географическое распространение линий мтДНК является результатом климатического отбора. Слабопатогенные мутации и полиморфизмы мтДНК, уменьшающие АТФ-связывающую способность митохондрий, такие, как обнаруженные нами в гене MTCYB, являются протективными для БП и других нейродегенеративных заболеваний с поздним началом. Среди европейских гагогогрупп мтДНК, у больных БП из Башкортостана наиболее часто встречается гаплогруппа Н, являющаяся, согласно результатам нашего исследования, генетическим маркером повышенного риска развития заболевания. В гаплогруппе Н не наблюдается ни одна из слабопатогенных мутаций. Гаплогруппа U, напротив, содержит слабопатогенные мутации в генах АТР6 и MTCYB и является генетическим маркером пониженного риска развития БП.

Таким образом, линии мтДНК со слабопатогенными мутациями приводят к уменьшению предрасположенности к БП.

Противоречивый характер данных по исследованию ассоциаций БП с полиморфными аллелями ряда генов, подтолкнул нас к анализу ассоциации заболевания с полиморфизмом генов аполипопротеина Е, калиевого канала KCNJ6 (Alu-инсерционного полиморфизма), гена CYP1A1 семейства цитохромов Р-450, гена глутатион-Б-трансферазы Ml у пациентов из Башкортостана. С целью анализа ассоциации БП с генами детоксикации ксенобиотиков, нами были определены частоты гомозиготной делеции 10 т.п.н. гена GSTM1 и аллелей полиморфного локуса 7-го экзона гена CYP1A1 у 200 неродственных пациентов с БП и 200 контрольных индивидуумов. У пациентов с БП частота встречаемости «нулевого» генотипа была достоверно выше, чем в контрольной группе (х2=8.21, Р=0.005, OR=1.45, 0=1.20-2.83). Анализируя аналогичные данные, полученные другими исследователями, можно обнаружить как согласующиеся, так и противоречивые результаты [Tison et al, 1994, Bandman et al, 1997, Menegon A. et al,1998; Ahmadi A. et al, 2000]. Наши данные подтвержают результаты исследования Ahmadi A.et al. о том, что ген GSTM1, кодируя фермент, являющийся универсальным антиоксидантом ЦНС и играющий важную роль в устранении нейротоксинов, может быть вовлечен в патогенез БП.

При исследовании частоты точковой мутации в экзоне 7 гена CYP1A1, приводящей к замене изолейцина на валин в полипептидной цепи белка у пациентов с БП и в контрольной выборке, нами не было выявлено ассоциации заболевания с данным полиморфизмом. Это согласуется с данными ряда авторов, проводивших подобные исследования [Nicholl D.J, Bennett Р, Hiller L. et al, 1999; Wang J, Liu Z, Chen B, 2000; Liu P, Liu Z, Shao M. et al, 2001; Chan D.K.Y, Mellick G.D, Buchanan D.D. et al, 2002].

Кроме того, мы прогенотипировали 196 пациентов с БП и 149 контрольных индивидуумов по полиморфизму гена аполипопротеина Е

АРОЕ). Считается, что аллель s4 играет модифицирующую роль в развитии таких дегенеративных заболеваний, как болезнь Альцгеймера, прогрессирующий супрануклеарный паралич и других, но данные о роли аллеля в4 в развитии болезни Паркинсона до сих пор остаются противоречивыми [Kruger et al.,1999; Harhangi B.S., de Riijk M.C., van Duijn C.M., van Broekhaven C.et al., 2000; Tan et al., 2000]. В результате исследования нами были выявлены статистически значимые различия по распределению частот генотипов (Е2/2, Е2/3, Е2/4, ЕЗ/З, ЕЗ/4, Е4/4) и аллелей (аллель s2:Arg158—»Cys, еЗ: Cysn2, Argi58, s4: Cysn2—»Arg) у пациентов с БП и в контрольной группе (%2= 10,432; Р=0,005). При сравнении частоты аллеля е4 между пациентами с болезнью Паркинсона и контрольной группы были выявлены статистические значимые отличия (х = 9.69, Р=0.0027). Частота аллеля в4 достоверно различалась между выборками татар с БП и контрольной группой татар, а также между русскими с БП и контрольной группой русских (х2=7.45, Р=0.007, OR=4.12, С1=1.40-12.93 и х2=5-60, Р=0.01, OR=4.82, С1=1.24-21.8, соответственно). Таким образом, анализ ассоциаций полиморфизма гена аполипопротеина Е с БП показал, что аллель в4 является генетическим маркером повышенного риска развития БП у русских и татар из Башкортостана.

Однако, указанные генетические ассоциации при БП не во всех случаях могут быть подтверждены при исследовании заболевания в других популяциях, что может быть связано с существованием определенных межпопуляционных различий аллельных частот изучаемых генов. Каждый этнос имеет длительную историю становления. Генетическая структура этноса характеризуется частотами различных генов; частота того или иного генотипа является результатом отбора в связи с климатическими, демографическими и другими факторами. Поэтому одна из причин обнаружения ассоциаций в одной этнической группе при отсутствии ее в другой, может состоять в особенностях генетической структуры популяции или отсутствии у данного этноса «провоцирующих» факторов развития заболевания, способных запустить определенные патогенетические реакции. Таким образом, различие удельного веса разнообразных генетических и средовых факторов в патогенезе БП, также сказывается на ассоциации БП с теми или иными полиморфизмами генов у различных этнических групп.

Значительный вклад генетических компонентов в развитие БП сейчас не вызывает сомнения, об этом свидетельствуют данные о семейном накоплении случаев заболевания, а также о наличии клинических форм БП, обусловленных моногенными нарушениями. Однако, говорить о выделении групп риска развития спорадической БП на основе молекулярно-генетических исследований пока еще преждевременно, т.к. группа генетических факторов риска развития БП окончательно не выявлена.

В настоящее время происходит интенсивный процесс накопления информации о роли генов - кандидатов в этиологии и патогенезе БП, в этой связи как поиск функционально значимых мутаций в ядерных и митохондриальных генах, обусловливающих БП, так и поиск генов предрасположенности к развитию заболевания в различных этнических группах, являются наиболее продуктивными подходами для изучения такого заболевания, как болезнь Паркинсона.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Гилязова, Ирина Ришатовна, Уфа

1. Атаджанов М.А. Паркинсонизм и 1-метил-4-фенил-1,2,3,6-тетрагидропиридин // Невропатология и психиатрия. 1991. - Т.91. -№.4.-С.117-121.

2. Баранов В.С, Баранова Е.В, Иващенко Т.Э, Асеев М.В. Геном человека и гены «предрасположенности» // Санкт-Петербург: Интермедика, 2000. -195 с.

3. Бермишева М, Викторова Т.В, Беляева О. и др. Полиморфизм гипервариабельного сегмента I митохондриальной ДНК в трех этнических группах Волго-Уральского региона // Генетика. 2001. - Т.37. - №8. - С. 1118-1124.

4. Бермишева М, Тамбетс К, Виллемс Р. и др. Разнообразие гаплогрупп митохондриальной ДНК у народов Волго-Уральского региона России // Молекулярная биология. 2002. - Т. 36. - №6. - С. 990 - 1001.

5. Вейн A.M., Голубев В.Н, Берзинып Ю.Э. Паркинсонизм // Рига: Зинатне, 1981.-362 с.

6. Голубев B.JI, Левин Я.И, Вейн A.M. Болезнь Паркинсона и синдром паркинсонизма //М.: Медпресс, 2000. — 416 с.

7. Деренко М.В, Шилдс Дж.Ф. Разнообразие нуклеотидных последовательностей митохондриальной ДНК в трех группах коренного населения Северной Азии // Молекулярная биология. 1997. - Т.31. -№5. - С. 784-789.

8. Животовский Л.А. Популяционная биометрия. М.: Наука, 1984. 184 с.

9. Загоровская Т.Б, Иванова-Смоленская И.А, Маркова Е.Д, Иллариошкин С.Н, Брис А. Семейные случаи ювенильного паркинсонизма // Неврологический журнал. 2001. - №4. - С. 13-18.

10. Иванова-Смоленская И.А., Маркова Е.Д., Загоровская Т.Б., Иллариошкин С.Н. Семейные случаи болезни Паркинсона (клинико-генетический анализ) // Медицинская генетика. 2002. - Т.1 - №5. - С. 234-237.

11. Иллариошкин С.Н., Сломинский П.А., Иванова-Смоленская И.А., и др. Мутационный анализ генов некоторых наследственных нейродегенративных заболеваний // II Российский съезд медиков-генетиков Курск.2000 - с.51.

12. Иллариошкин С.Н., Иванова-Смоленская И.А., Маркова Е.Д. ДНК-диагностика и медико-генетическое консультирование в неврологии // М.: Миа, 2002. 272 с.

13. Каменецкий В.К. Паркинсонизм // Санкт-Петербург: Интермедика, 1995. -215 с.

14. Крыжановский Г.Н., Карабань И.Н., Магаева С.В., Кучеряну В.Г., Карабань Н.В. Болезнь Паркинсона // М.: "Медицина", 2002. 17 с.

15. Пчелина С.Н., Якимовский А.Ф., Горбунова В.Н. Молекулярная неврология // Санкт-Петербург: "Интермедика", 2002. с. 150-159.

16. Пчелина С.Н., Якимовский А.Ф., Шварц Е.И. Наследственные основы болезни Паркинсона // Медицинская генетика. 2003. - Т.2. - №9. -С.411-425.

17. Шток В.Н., Федорова Н.В. Лечение паркинсонизма // М.: "Медицина", 1997.- 196 с.

18. Якимовская А.Ф., Пушнова Е.А., Ахмедова С.Н., Автономов В.В. Молекулярно-генетические и токсико-экологические основыэтиопатогенеза болезни Паркинсона // Неврология и психиатрия 1997. -Т.97.-С. 69-73.

19. Abbas N., Lucking С.В., Ricard S., Durr A., Bonifati V. et al. A wide variety of mutations in the parkin gene are responsible for autosomal recessive parkinsonism in Europe // Hum.Mol. Genet. 1999. - Vol.8. - P. 567-574.

20. Abeliovich A., Schmitz Y., Farinas I., et al. Mice lacking a- synuclein display functional defects in the nigrostriatal dopamine system // Neuron. -2000 Vol.25. - P.239 - 252.

21. Adam D. Pesticide used linked to Parkinson's disease // Nature. 2000. -Vol.408. - P.88 - 90.

22. Ahmadi A., Fredrikson M., Jerregard H. et al. GSTM1 and mEPHX polymorphisms in Parkinson's disease age of oneset // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2000. - Vol.269. - P. 676 -680.

23. Akhmedova S.N., Pushnova E.A., Yakimovsky A.S.et al. The frequency of CYP2D6B mutation in clinically differentiated groups of patients with Parkinson's disease // Biochem. And Mol. Med. 1995. - Vol. 54. - P.234-236.

24. Anderson S., Bankier A.T., Barrell B.G., et al. Sequence and organization of the human mitochondrial genome // Nature. 1981. - V. 290. - P. 457-465.

25. Aquadro C.F., Greenberg B.D. Human mitochondrial DNA variation and evolution: analysis of nucleotide sequences from seven individuals // Genetics. 1983.-V. 103.-P. 287-312.

26. Armstrong M., Daly A.K., Cholerton S. Et al. Mutant debrisoquine hydroxilation genes in Parkinson's disease // Lancet- 1992. Vol.339. -P.1017-1018.

27. Asakawa S., Hattori N., Shintani A., Sasaki Т., Kawasaki K. et al. Molecular analysis of the deletion breakpoints of parkin gene // Am. J. Hum. Genet. -Vol.67.-P. 398.

28. Ascherio A, Zhang S.M, Hernan M.A. et al. Prospective study of caffeineconsumption and risk of Parkinson's disease development in men and women // Ann. Neurol.- 2001. -Vol.50. P.56-63.

29. Athanassiadou A, Voutsinas G, Psiouri L. et al. Genetic analysis of families with Parkinson's disease that carry the Ala53Thr mutation in the gene encoding alpha-synuclein // Am J Hum Genet. 1999. - Vol.65. - P.555-558.

30. Bai, Y, Attardi,G. The mtDNA-encoded ND6 subunit of mitochondrial NADH dehydrogenase is essential for the aseembly of the membrane arm and the respiratory function of the enzyme // EMBO Journal 1998. - Vol.17. - P. 4848-4858.

31. Baker M, Litvan I, Houlden H. Et al. Association of an extended haplotype in the tau-gene with progressive supranuclear palsy // Hum Mol Genet.-1999.-Vol.8.-P.711-715.

32. Baldereschi A, Di Carlo W.A, Rocca P, et al. Parkinson's disease andparkinsonism in a longitudinal study. Two-fold higher incidence in men // Neurology. 2000. - Vol.55. - P. 1358-1363.

33. Bandman O, Vaughan J.R, Holmans P, Marsden C.D. et al. Association of a slow acetylator genotype for N-acetyltransferase 2 with familial Parkinson's disease // Lancet. 1998. - Vol.350. - P. 1136-1139.

34. Barbosa E. R, da Costa L, Bachechi L. A, et al. Parkinsonism after glycine-derivate exposure // Mov Disord. -2001. Vol. 16. - P. 565-568.

35. Bennett D.A, Beckett L.A, Murray A.M., et al. Prevalence of Parkinsonian Signs and Associated Mortality in a Community Population of Older People //

36. N Engl J Med. 1996. - Vol. 334. - P. 71-76.

37. Ben-Shlomo Y. How far are we in understanding the cause of Parkinson's disease? // J. Neurosur. Psych. 1996. - Vol. 61. - P.4-16.

38. Benzi G., Curti D., Pastoris O. et al. Sequential damage in mitochondrial complexes by peroxidative stress // Neurochem. Res. 1991. - Vol.16. - P. 1295-1302.

39. Bezard E., Gross C.E., Foumier M.C. et al., Absence of MPTP- induced neuronal death in mice lacking the dopamine transporter // Exp. Neurol.- 1999.-Vol.115. P.268-273.

40. Bonifati V., Fabrizio E., Vanacore N. et al. Familial Parkinson's disease: a clinical and genetic analysis // Can. J. Neurol. Sci. 1995. - Vol.22. - P.271-279.

41. Bonifati V., Rizzu P., van Baren M.J. et al. Mutations in the DJ-1 gene associated with autosomal reseccive early-onset parkinsonism // Science.-2003.-Vol. 299.-P.256-259.

42. Bostantjopoulou S., Katsarou Z., Papadimitriou A. et al. Clinical features of Parkinsonian patients with alpha-synuclein (G209A) mutation // Mov. Disord. -2001.-Vol.6.-P. 1007-1013.

43. Boveris A., Oshino N., Chance B. The cellular production of hydrogen peroxide // Biochem. J. 1972. - Vol. 128. - P. 617-630.

44. Boveris A., Chance B. the mitochondrial generation of hydrogen peroxide // Biochem. J. 1973.-Vol.134.-P. 707-716.

45. Bower J.H., Dickson D.W., Taylor L. et al. Clinical correlates of the pathology underlying parkinsonism: a population prospective // Mov. Disord. 2002. -Vol.l7.-P.910-916.

46. Bredesen D.E. Neural apoptosis // Ann. Neurol. 1995. - Vol.38. - P. 839851.

47. Briggs M.D., Mortier G.R.,Cole W.G., King L.M. et al. Diverse mutations in the gene for cartilage oligomeric matrix protein in the pseudoachondroplasiamultiple epiphyseal dysplasia disease spectrum // Am. J. Hum. Genet. 1998. -Vol. 62.-P. 311-319.

48. Brooks A.I., Chadwick C.A., Gelbard H.A.et al. Paraquat elicited neurobehavioral syndrome caused by dopaminergic neuron loss // Brain Research. 1999. - Vol.823. - P. 1-10.

49. Brooks D.J. The early diagnosis of Parkinson's disease // Ann.Neurol. 1998. - Vol.44.-P.S10-S18.

50. Brooks D.J. Diagnosis and management of atypical parkinsonian syndromes // J Neurol Neuroserg Psychiatry. 2002. - Vol.72. - P. 10-16.

51. Brown M.D., Shoffner J. M., Kim Y.L., Jun A.S., Graham B.H., Cabell M.F., Gurley D.S. and Wallace D.C. Mitochondrial DNA sequence analysis of Aizheimer's and Parkinson's disease patients // American Journal of Human Genetics 1996.-Vol. 61.-P.283-289.

52. Burn D.J., Mark M.H., Playfold E.D. Parkinson's disease in twins studied with 18F -dopa and positrom emission tomography // Neurology. 1992. - Vol.42. -P.1894-1900.

53. Carmine A., Buervenich S., Sydow O. et al. Further evidence for an association of the paraoxonase I (PONI) Met-54 allele with Parkinson's disease // Mov. Disord. -2002. Vol.17. - P.764-766.

54. Castellani R., Hirai K., Aliev G., Drew K.L., Nunomura A., Takeda A., Cash A.D., Obrenovich M.E., Perry G., Smith M.A Role of mitochondrial dysfunction in Alzheimer's disease // Journal of Neuroscience Research. -2002.- Vol. 70-P. 357-360.

55. Chagnon P., Gee M., Filion M., Robitaille Y., Belouchi M., Gauvreau D.

56. Phylogenetic analysis of the mitochondrial genome indicates significant differences between patients with Alzheimer disease and controls in a French-Canadian founder population // American Journal of Medical Genetics. 1999. -Vol.85.-P. 20-30.

57. Chan D.K.Y., Mellick G.D., Buchanan D.D. et al. Lack of assosiation between CYP1A1 polymorphism and Parkinson's disease in a Chinese population // J. Neur. Transmis. Vol.109. - P. 35-39.

58. Chen Y.C., Olckers A., Schurr T.G. et al. mtDNA variation in the South African Kung and Khwe and their genetic relationships to other African populations // Am. J. Hum. Genet. - 2000. - V. 66. - P. 1362-1383.

59. Chung K.K., Zhang Y., Lim K.L. Parkin ubiquitinates the alpha-synuclein-interacting protein, synphilin-I: implications for Lewy-body formation in Parkinson's disease // Nat. Med. 2001. - Vol.7. - P. 1144-1150.

60. Cookson M.R. Pathways to parkinsonism // Neuron. -2003. Vol.37. - P.l-4.

61. Cooper J.M., Mann V.M., Shapira A.H.V. Analysis of mitochondrial respiratory chain functial and mitochondrial DNA deletion in human skeletalq muscle: effect of aging // Journal of the Neurolog. Scienc. 1992. - Vol.113. 1. P. 91-98.

62. Corral-Debrinski M, Horton T, Lott M.T, Shoffner J.M, McKee A.C, Beal

63. M.F, Graham B.H, Wallace D.C. Marked changes in mitochondrial DNA deletion levels in Alzheimer brains // Genomics. 1994. - Vol.23. - P.471-476.

64. Cortopassi G, Arnheim N. Accumulation of mitochondrial DNA mutations in normal aging brain and muscle. Mitochondrial DNA in human pathology // N.Y.: Raven Press, 1992. P. 125-136.

65. Coskun P.E, Beal M.F, Wallace D.C. Somatic mitochondrial DNA control region mutations are prevalent in Alzheimer disease brains // Proceedings of the Nat. Acad, of Sciences of the USA. 2004. - Vol. 101. - P. 10726-10731.

66. Coskun P.E, Ruisz-Pesini E.E, Wallace D.C. Control region mtDNA variants: longevity, climatic adaptation and a forensic conundrum // Proceedings of the Nat. Acad, of Sciences of the USA. 2003. - Vol.100. - P.2174-2176.

67. Cumming J.L. Understanding Parkinson's disease // JAMA. -1999. Vol.281. - P.376-378.

68. De Coo I.F, Renier W.O, Ruitenbeek W. et al. A 4-base pair deletion in the mitochondrial cytochrome b gene associated with parkinsonism/ MELAS overlap syndrome // Ann Neurol. 1999. - Vol.45. - P.130-133.

69. Deinenger P.L, Batzer M.A. Alu repeats and human disease // Molecular

70. Genetics and Metabolism. 1999. - V. 67. - P. 183-193.

71. De Stefano A.L., Golbe L.I., Mark M.M. et al. Genome-wide scan for Parkinson's disease: the Gene PD study // Neurology. -2001. Vol.57. -P.1124-1126.

72. Derenko M., Malyarchuk В., Dambueva I. et al. Mitochondrial DNA variation in tow south Siberian aboriginal populations: implications for the Genetic History of North Asia // Human Biology. 2000. - V. 72. - P. 945-973.

73. Dexter D.T., Carter C.J., Wells F.R., Javoy-Agid F. et al. Basal lipid peroxidation in substantia nigra is increased in Parkinson's disease // J. Neurochem. 1989. - Vol.52. -P.381-389.

74. Dexter D.T., Jenner P., Schapira A.H.V. et al. Alteration in levels of ferritin and other trace metals in neurodegenerative diseases affecting the basal ganglia // Ann Neurol. 1992. - Vol.32. - P.94-100.

75. Di Monte D.A., Sandy M.S., Jewell S.A., Adornato В., Tanner C.T. et al. Oxidative phosphorylation by intact muscle mitochondria in Parkinson's disease // Neurodegeneration. 1993. - Vol.2. - P.275-281.

76. Dolukhanov P. Prehistoric revolution and languages in Europe // The roots of peoples and languages of northern Eurasia III. Eds. A. Kunnap. Tartu. -2000.-P. 71-84.

77. Dunnet S.B., Bjorklund A. Prospects for new restorative and neuroprotective treatments in Parkinson's disease //Nature.-1999.-Vol.399.Suppl.- P.A32-A39.

78. Duvoisin R.C., Eldridge R., Williams A. et al. Twin study of Parkinson's disease // Neurology. 1981. - Vol.31. - P. 77-80.

79. Eerola J., Launes J., Hellstrom O., Tienari P.J. Apolipoprotein E (APOE), parkin and catechol-O-methyltransferase (COMT) genes and susceptibility tosporadic Parkinson's disease in Finland // Neurosci. Lett. 2002. - Vol.330. 1. P. 296-298.

80. Egensperger R., Bancher C., Kosel S. et al. The apolipoprotein E e4 allel in Parkinson's disease with Alzheimer lesions // Biochem. Biophys. Research Communications. Vol.224. - P. 484-486.

81. Elbaz A., Grigoletto F., Baldereschi M. et al. Familial aggregation of Parkinson's disease: a population-based case-control study in Europe //Neurol. 1999.-Vol.52.-P. 1876-1882.

82. Elizer D., Kutluay E., Bussell RJr. Conformational properties of alpha-synuclein in its free and lipid-associated states // J. Mol.Biol. 2001. -Vol.307.- P.1061-1073.

83. Engelborghs S., Dermaut В., Goeman J. Prospective Belgian study of neurodegenerative and vascular dementia: APOE genotype effects // J. Neurol. Neurosur. Psychiatry. 2003. - Vol.74. - P. 1148-1151.

84. Engelender S., Kaminsky Z., Guo X. Et al. Synphilin-I associates with a-synuclein and promotes of cytosolic inclusions // Nature Genet. -1999. -Vol.22.-P.l 10-114.

85. Esposito L.A., Kokoszka J.E., Waymire K.G., Cottrell В., MacGregor G.R.,

86. Wallace D.C. Mitochondrial oxidative stress in mice lacking the glutathione peroxidase -1 gene // Free Radical Biol, and Med. Vol.28. - P.754-766.

87. Esposito L.A., Melov S., Panov A., Cottrell B.A., Wallace D.C. Mitochondrial disease in mouse results in incresed oxidative stress // Proceedings of the Nat. Acad, of Sciences of the USA. 1999. - Vol.96. - P.4820-4825.

88. Fallon L., Moreau F., Croft B.G., Labib N., Gu W.J. et al. Parkin and CASK/LIN-2 associate via a PDZ-mediated interactions and are co-localized in lipid rafts and postsynaptic densities in brain // J. Biol. Chem. 2002. -Vol.277. - P. 486-491.

89. Farrer M, Gwin-Hardy R, Muentewr M.et al. A chromosome 4p haplotype segregating with parkinson's disease and postural tremor // Hum Mol Genet. -1999. -Vol.8. -P.81-85.

90. Farrer M, Maraganore D.M, Lockhart P. Alpha-synuclein gene haplotypes are associated with Parkinson's disease // Hum. Mol. Genet. 2001. - Vol. 10. - P. 1847-1851.

91. Farrer M, Wanrant-De Vrieze F, Crook R. et al. Low frequency of alpha-synuclein mutation in familial Parkinson's disease // Ann. Neurol. 1998. -Vol.18.-P. 262-265.

92. Feany M.B, Bender W.W, A Drosophila model of Parkinson's disease // Nature. -2000. Vol.404. - P.394-398.

93. Fleming L, Mann J.B, Bean J et al. Parkinson's disease and brain levels of organochlorine pesticides // Ann. Neurology. -1994. -Vol.36. -P. 100-103.

94. Foltynie T, Brayne C, Barker R.A. The heterogeneity of idiopathic Parkinson's disease // J Neurology. -2002. -Vol.249. P. 138-145.

95. Foltynie T, Sawser S, Brayne C, Barker R.A. The genetic basis of Parkinson's disease // J Neurosurg Psychiatry. -2002. -Vol.73. P.363-370.

96. Fomo L.S, DeLanney L.E, Irwin I.Similarities and differences between MPTP-indused parkinsonism and Parkinson's disease // Adv. Neurol.-1993.-Vol.60. P.600-608.

97. Friedlander R.M. Apoptosis and caspases in neurodegenerative diseases // New Engl.J Med. -2003. -Vol.348. P. 1365-1375.

98. Funayaama M, Hasegawa K, Kowa H. Et al. A new locus for Parkinson's disease (PARK8) maps to chromosome 12pl 1.2-p.l3.1 // Ann Neurol. -2002. -Vol.51.-P.296-301.

99. Gasser T. Genetics of Parkinson's disease // Ann Neurol. -1998. -Vol.44. -P.S53-S57.

100. Gasser Т., Muller-Myhsok В., Wszolek Z.K. et al. A susceptibility locus for Parkinson's disease maps to chromosome 2pl3 // Nat. Genet. 1998. - Vol.18. -P. 262-265.

101. Gerdes L., Klausen I., Sihm I. et al. Apolipoprotein E polymorphism in Danish population compared to findings in 45 other study population // Genet. Epidemiol. 1992. - Vol.9. - P. 155-167.

102. Golbe L.I. Young-onset Parkinson's disease: clinical review // Neurol. -1991.-Vol.41.-P. 68-73.

103. Golbe L.I., Iorio G., Sanges G. et al. Clinical genetic analysis of Parkinson's disease in the Contursi kindred // Ann. Neurol. 1996. - Vol.40. -P. 767- 775.

104. Graham D.G. Oxidative pathways for catecholamines in the genesis of neuromelanin and cytotoxic quinones // Mol. Pharmacol. 1978. - Vol.14. - P. 633-643.

105. Gu M., Cooper J.M., Taanman J.W., Schapira A.H. Mitochondrial DNA transmission of the mitochondrial defect in Parkinson's disease // Annals of Neurol. 1998. - Vol.44. - P. 177-186.

106. Gu M., Gash M.T., Cooper J.M. et al. Mitochondrial respiratory chain function in multiple system atrophy // Mov. Disord. 1997. - Vol.12. - P.418-422.

107. Gwinn-Hardy K.A., Crook R., Adler C.H. et al. A kindred with Parkinson's disease not showing genetic linkage to established loci // Neurology. 2000. -Vol.54. -P.504-507.

108. Hallman D., Boerwinkle E., Saha N. et al. Apolipoprotein E polymorphism: a comparison of allele and effects in nine populations // Am. J. Hum. Genet. -1991.-Vol.49.-P. 338-349.

109. Harhangi B.S., de Rijk M.S., van Duijn C.M. et al. APOE and the risk of PD with or without dementia in a population-based study // Neurology. 2000. -Vol.54.-P.1272-1276.

110. Harman D. The biologic clock: the mitochondria? // J. Am. Geriatr. Soc. -1972. -Vol.20.-P.145-147.

111. Hartley A., Stone J.M., Heron C. et al. Complex I inhibitors induce dose-dependent apoptosis in PC 12 cells: relevance to Parkinson's disease // J.Neurochem. 1994. - Vol.63. - P. 1987-1990.

112. Hampshine D.J., Roberts E., Crow Y. et al. Kufor-Rakeb syndrome, pallido-pyramidal degeneration with supranuclear upgaze paresis and dementia, maps to lp36 // J. Med Genet. 2001. -Vol.38. -P.680-682.

113. Harman D., The biological clock: the mitochondria? // J. Amer. Ger. Soc. -1972.-Vol.20.-P. 145-147.

114. Hattori N., Kitada Т., Matsumine H. et al. Molecular-genetic analysis of a novel parkin gene in Japanese families with autosomal recessive juvenile parkinsonism // Ann. Neurol. 1998 - Vol.44. - P. 935-941.

115. Hattori N., Matsumine H., Asakawa S. et al. Point mutations (Thr240Arg and Ala311Stop) in the parkin gene // Biochem. Biophys. Res. Commun.-1998,-Vol.249.-p.754-758.

116. Hayes J.D., Strange R.C. Potential contribution of the glutathione S-transferase supergene family to resistance to oxidative stress // Free Radic. Res. -1994.-Vol.22-P.43-48.

117. Hedrich К., Kann M., Lanthaler A.J. et al. The importance of gene dosage studies: mutational analysis of the parkin gene in early-onset parkinsonism // Hum. Mol. Genet. 2001. - Vol. 10. - P. 1649-1656.

118. Hermann M.A., Zhang S.M., Rueda de Castro A.M. et al., Sigarette smoking and the insidence in two prospective studies // Ann Neurol. -2001. Vol.50. -P.780-786.

119. Hicks A.A., Petursson H., Jonsson T. Et al. A susceptibility gene for late-onset idiopatic Parkinson's disease // Ann Neurol. -2002. Vol.52 (5). -P. 549550.

120. Hirai K., Aliev G., Nunomura A., Fujioka H., Russell R.L., Atwood C.S., Johnson A.B., Kress Y., Vinters H.V., Tabaton M., Shimohama S., Cash A.D. et al. Mitochondrial abnormalities in Alzheimer disease // J. of NeuroSci. -2001. Vol.21. - P.3017-3023.

121. Holmberg В., Kallio M., Johnels В., Elam M. Cardiovascular reflex testing contributes to clinical evaluation and differential diagnosis of parkinsonian syndromes // Mov Disord.-2001.-Vol.16.- p.217-225.

122. Horai S., Hayasaka K. Intraspecific nucleotide sequence differences in the major noncoding region of human mitochondrial DNA // Am. J. Hum. Genet. -1990.-V. 46.-P. 828-842.

123. Horai S., Murayama K. et al. mtDNA polymorphism in East Asian populations, with special reference to the peopling of Japan // Am. J. Hum. Genet. 1996. - V.59. - P. 579-590.

124. Huang C.C., Lu C.S., Chu N.S. et al. Progression after chronic manganese exposure // Neurol. 1993. - Vol.43. - P. 1479-1483.

125. Humble J.P., Cao Т., Hassanein R.E.S. et al. Risk factors for Parkinson's disease //Neurology. -1993. -Vol.43. P. 1693-1697.

126. Hutton M., Lendon C.L., Ruzzu P. et al. Association of missense and 5'-splice-site mutations with the inherited dementia FTDP-17 // Nature. -1998. -Vol.393.-P.302-305.

127. Ikebe S., Tanaka M., Ozawa I. Point mutations of mitochondrial genome in Parkinson's disease // Mol. Brain Res. 1995. - Vol.28. - P. 281-295.

128. Imai Y., Soda M., Hattori N. et al. An unfolded putative transmembrane polypeptide, which can lead to endoplasmic reticulum stress, is a substrate of parkin // Cell. -2001. -Vol.105. -P.891-902.

129. Inzelberg R., Chapman J., Treves T.A. et al. Apolipoprotein E4 in Parkinson's disease and dementia: new d and meta-analysis of published studies // Nat. Libr. Med. 1998. - Vol.12. - P. 45-48.

130. Ishikawa A., Tsuji S. Clinical analysis of 17 patients in 12 Japanese families with autosomal-recessive type juvenile parkinsonism // Neurol. 1996. -Vol.47.-P. 160-166.

131. Janetzky В., Hauck S., Youdim M.B.H. et al. Unaltered aconitase activity but decreased complex I activity in substantia nigra pars compacta of patients with Parkinson's disease // Neurosci Lett. 1994. - Vol.169. - P. 126-128.

132. Jazin E.E., Cavelier L., Eriksson I., Oreland L., Gyllensten U. Human brain contains high levels of heteroplasmy in noncoding regions of mitochondrial DNA // Proceeding of the Nat.Acad. of Scienc. 1996. - Vol.93. - P. 1238212387.

133. Jenner P.H., Dexter D.T., Sian J. et al. Oxidative stress as a cause of nigral cell death in Parkinson's disease and incidental Lewy body disease // Ann. Neurol. 1992. - Vol.32. - P. 82-87.

134. Jensen P.H., Nielsen M.S., Jakes R. et al. Binding of alpha-synuclein to brain vehicles is abolished by familial Parkinson's disease mutation // J Biol. Chem. -1998. -Vol.273. P.26292-26294.

135. Kagimoto M., Heim M., Kagimoto K.et al. Multiple mutations of the human cytochrome P450IID6 gene (CYP2D6) in poor metabolizers of debrizoquin // J. Biol. Chem. -1990. -Vol.65. -P. 17209-17214.

136. Kao F.T. Somatic cell genetics and gene mapping // Int Rewiew of cytology. -1983. -Vol.85. -P.109-146.

137. Kim J, Auerbach J.M, Rodrigues-Gomez J.A. et al. Dopamine neurons derived from embrionic stem cells function in an animal model of Parkinson's disease // Nature. -2002. -Vol.418. P.50-56.

138. Kiric D, Rosenblad C, Burger C. et al. Parkinson-like neurodegeneration induced by targeted overexpression of alpha-synuclein in the nigrostriatal system // J. Neurosci. 2002. - Vol.22. - P.2780-2791.

139. Kitada T, Asakawa S, Hattori N. et al. Mutation in the parkin gene cause autosomal recessive juvenile parkinsonism // Nature. -1998. Vol.392. -P.605-608.

140. Kivisild T, Bamshad M, Kaldma K. et.al. Deep common ancestry of Indian and western-Eurasian mtDNA lineages // Curr. Biol. 1999. - № 9. - P. 13311334.

141. Klein C, Pramstaller P.P., Kis B, Page C.C. et al. Parkin deletions in a family with adult-onset,tremor-dominant parkinsonism: expanding the phenotype // Ann. Neurol. 2000. - Vol.48. - P. 65-71.

142. Kondo I, Kanazawa I. Debrisoquine hydroxylase and Parkinson's disease // Adv. Neurol. 1993. - Vol.60. - P. 338-342.

143. Kondo I, Yamamoto M. Genetic polymorphism of paraxonase I (PONI) and susceptibility to Parkinson's disease // Brain Res.-1998.- Vol.608.- p.271-273.

144. Kontakos N, Stockes J. Monograph Series on Aging-related Diseases: XII. Parkinson's disease- Recent Developments and New Directions // Chronic Diseases in Canada.-1999.-Vol.20.- P.58-76.

145. Kosel S, Grasbon-Frodl E.M, Mautsch U, Egensperger R. Novel mutations of mitochondrial complex I genes in pathologically proven Parkinson's disease //Neurogenetics. 1998. - Vol.1. - P. 197-204.

146. Kowall N.W, Hantrave P, Brouillet E. et al. MPTP-induced alpha-synuclein aggregation in the substantia nigra of baboons // Neuroreport. 2000. -Vol.111.-P.211-213.

147. Krige D, Carroll M.T, Cooper J.M. et al. Platelet mitochondrial function in Parkinson's disease // Ann Neurol. 1992. - Vol.32. - P.782-788.

148. Kruger R, Kuhn W, Muller T. et al. Ala30 Pro mutation in the gene encoding a-synuclein in Parkinson's disease // Nature Genet. 1998. - Vol.18. -P.106-108.

149. Kurth M.C, Kurth J.H. Variant cytochrome P450 CYP2D6 allelic frequencies in Parkinson's disease // Am.J. Med. Genet. 1993. - Vol.48. -P.166-168.

150. Lahermo P, Sajantila A, Sistonen P. et al. The genetic relationship between the Finns and the Finnish Saami (Lapps): analysis of nuclear DNA and mtDNA // Am. J. Hum. Genet. 1996. - V. 58. - P. 1309-1322.

151. Langston J.F. Epidemiology versus genetics in Parkinson's disease: progress in resolving an age-old debate // Ann Neurol. 1998. - Vol.44.Suppl.I. -P.S45-S52.

152. Langston J.W, Billard P, Tetrud J.W, Irwin I. Chronic parkinsonism in humans due to a product of meperidine-analog synthesis // Science. 1983. -Vol.219.-P.979-980.

153. Langston J.W. MPTP-induced parkinsonism how good a model is it. Recent development in Parkinson's disease // N.Y.: Raven Press, 1986. P. 119-126.

154. Le W.D, Xu P.Jankovic J. et al. Mutations in NR4A2 associated with familial Parkinson's disease//Nat Genet-2003.- Vol.33. P.85-89.

155. Lee S, Shin K, Kim Y, Lee J. Sequence variation of mitochondrial DNA control region in Koreans // Forensis Sci. Int. 1997. - V. 87. - P.99-116.

156. Leroy E., Boyer R., Auburger G. Et al. The ubiquitin pathway in Parkinson'sYdisease // Nature.-1998.-Vol.395.- P.451-452.

157. Lestienne P., Nelson J., Riederer P. et al. Normal mitochondrial genome in brain from patients with Parkinson's disease and complex I defect // Neurochem.- 1990.-Vol.55.-P. 1810-1812.

158. Lincoln S., Vaughan J., Wood N. et al. Low frequency of pathogenic mutations in the ubiquitin carboxy-terminal hydrolaser gene in familial Parkinson's disease //Neuroreprt.-1999,-Vol.l0.- P.427-429.

159. Liu P., Liu Z., Shao M. et al. Genetic polymorphism of cytochrome P450 CYP1A1 and susceptibility of early-onset parkinsonism // Pro. Nat. Acad. Sci. 2001Vol.355. - P. 354-362.

160. Lucking C.B., Abbas N., Durr A. et al. Homozygous deletions in parkin gene in European and North-African families with autosomal recessive juvenile parkinsonism // Lancet.-1998.-Vol.352.- P.1355-1356.

161. Lucking C.B., Durr A., Bonifati V. et al. Association between early-onset Parkinson's disease and mutations in the parkin gene. French Parkinson's disease Genetics Study Group //N. Engl J. Med.-2000.-Vol.342.-p. 1560-1567.

162. Lucotte G., Turpin J.C., Gerard N. et al. Mutation frequencies of thecytochrome CYP2D6 gene in Parkinson's disease patients and in families // Am. J. Med. Genet. 1996. - Vol.67. - P.361-365.

163. Macaulay V., Richards M., Hickey E. et.al. The emerging tree of West Eurasian mtDNA: A synthesis of control-region sequences and RFLPs // Am. J. Hum. Genet. 1999. -V. 58. - P. 1309-1322.

164. Mackness В., Durrington P., Mackness M. Human serum paraoxonase // Gen. Pharmac.-1998.-Vol.31.- P.329-336.

165. Mahley R.W. Apolipoprotein E: cholesterol transport protein with expanding role in cell biology // Sci. 1988. - Vol.240. - P. 622-630.

166. Mahley R.W., Nathan B.P., Pitas R.E. Apolipolipoprotein E: structure, v .function, and possible roles in Alzheimer disease // Ann. NY Acad. Sci. -1996.-Vol.777.-P.139-145.

167. Mann V.M., Cooper J.M., Krige D. et al., Brain, skeletal muscle and platelet homogenate mitochondrial function in Parkinson's disease // Brain. 1992a. -Vol.115.-P. 333-342.

168. Mann V.M., Cooper J.M., Schapira A.H.V. et al. Quantitation of a mitochondrial DNA deletion in Parkinson's disease // FEBS Lett. 1992b. -Vol.299.-P.218-222.

169. Mann V.M., Cooper J.M., Daniel S. E. et al. Complex I, iron and ferritin in Parkinson's disease substantia nigra // Ann Neurol. 1994. - Vol. 36. - P. 876881.

170. Matsumine H., Saito M., Shimoda-Matsubayashi S. et al. Localization of a gene for autosomal recessive form of juvenile parkinsonism to chromosome 6q25.2-27 // Am.J.Hum.Genet. 1997. -Vol.60. - P. 588-596.

171. Maraganore D.M., Farrer M.J., Hardy J.A. Lincoln S.J., McDonnell S.K. et al. Case-control study of the ubiquitin carboxy-terminal hydrolase LI gene in

172. Parkinson's disease //Neurology. 1999. - Vol. 53. - P. 1858-1860.

173. Maruyama M., Ikeuchi Т., Saito M. et al. Novel mutations, pseudo-dominant inheritance, and possible familial effects in patients with autosomal recessive juvenile parkinsonism // Ann. Neurol. 2000. - Vol.48. - P.245-250.

174. Masliah E., Rockenstein E., Veinbergs I. Et al. Dopaminergic loss and inclusion body formation in alpha-synuclein mice: implications for neurodegenerative disorders // Science. -2000. Vol.287-P. 1265-1269.

175. Menegon A., Board P.G., Blackburn A.C. et al. Parkinson's disease, pesticides, and glutathione transferase polymorphisms // Lancet. -1998. -Vol.352.-P.1344-1346.

176. Merriwether D.A., Clark A.G., Ballinger S.W. et al. The structure of humanmitochondrial DNA variation // J.Mol.Evol. 1991. - Vol. 33. - P. 543-555.

177. Mezey E., Dehejia A., Harta G.et al. Alpha-synuclein in neurodegenerative disorders: murderer or accomplice? // Nature Med. -1998. -Vol.4. P.755-757.

178. MITOMAP: A Human Mitochondrial Genome Database. Center for Molecular Medicine, Emory University, Atlanta, Ga., USA, 2000.

179. Mizuno Y., Ikebe S., Hattori N. et al. Role of mitochondria in the etiology and pathogenesis of Parkinson's disease // Biochem.et Biophis. Acta. -1995. -Vol.1271. -P.265-274.

180. Mizuno Y., Suzuki K., Sone N., Saitoh T. Inhibition of mitochondrial respiration by MPTP in mouse brain in vivo // Neurosci. 1988. - Vol.91. -P.349-353.

181. Momose Y., Murata M., Kobayashi K. et al. Association studies of multiple candidate genes for Parkinson's disease using single nucleotide polymorphisms // Ann Neurol. 2002. - Vol.51. - P. 133-136.

182. Nicklas W.J., Vyas I., Heikkila R.E. Inhibition of NADH-linked oxidation in brain mitochondria by MPP+, a metabolite of the neurotoxin MPTP // Life Sci. -1985. Vol.36. -P.2503-2508.

183. Nicholii D.J., Bennett P., Hiller L. et al. A study of five candidate genes in Parkinson's disease and related neurodegenerative disorders // Neurology. -1999.-Vol.53-P.1415-1421.

184. Olivo P.D., Van de Walle M.J., Lapis P.J. et al. Nucleotide sequence evidence for rapid genotypic shifts in the bovine mitochondrial DNA D-loop // Nature. 1983. - Vol.306. - P. 400-402.

185. Ozawa Т., Tanaka M., Ikebe S. et al. Quantitative determination of deleted mitochondrial DNA relative to normal DNA in parkinsonian striatum by a kinetic PCR analysis // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1990. - Vol.172. -P.483-489.

186. Palma G., Mozzoni P., Mutti A. Et al. Case-control study of interactions between genetic and environmental factors in Parkinson's disease // Lancet. -1998.-Vol.352.-p.1986-1987.

187. Pankratz N, Nichols W.C, Uniacke S.K, Significant linkage of Parkinson's disease to chromosome 2q36-37 // Am J Hum Genet. 2003. - Vol.72. -P.1053-1057.

188. Parker W.D.Jr, Parks J, Filley C.M, Kleinschmidt-DeMasters B.K. Electron transport chain defects in Alzheimer disease brain // Neurol. 1994. -Vol. 44. - P.1090-1096.

189. Parkinson Study Group. A multicenter assessment of dopamine transporter imaging with DOPASCAN/SPECT in parkinsonism // Neurology.-2000.-Vol.55.- P.1540-1447.

190. Parkinson Study Group. Apolipoprotein E genotype in familial Parkinson's disease // J. Neurosurg. Psychiatry. 1997. - Vol. 63. - P. 394-395.

191. Petrovich H, Poss W, Abbort R.D. et al. Plantation work and risk of Parkinson's disease in a Population-based longitudinal study // Arch Neurol.-2002. -Vol.59. P. 1787-1792.

192. Petrucelli L, O'Farrell C, Lockhart P.J, et al. Parkin protacts against the toxicity associated with mutant a-synuclein proteasome dysfunction selectively affects catecholaminergic neurons // Neuron. -2002. -Vol.36. P. 1007-1019.

193. Plante Bordeneuve V, Taussig D, Thomas F. et al. Evaluation of four candidate genes encoding proteins of the dopamine pathway in familial and sporadic Parkinson's disease // Neurology. 1997. - Vol.48. - P. 1589-1593.

194. Polymeropoulos M.H., Higgins J.J., Golbe L.I., Mapping of a gene for Parkinson's disease to chromosone 4q21-23 // Sci. -1996. Vol.274 - P.1197-1199.

195. Polymeropoulos M.H., Lavedan C., Leroy E. Et al. Mutation in the a-synuclein gene identified in families with Parkinson's disease // Sci. 1997. -Vol.276.-P.2045-2047.

196. Polymeropoulos M.H. Autosomal dominant Parkinson's disease and alpha-synuclein // Ann. Neurol. 1998. - Vol.44. - P. 63-64.

197. Quintana-Murci L., Semino O., Bandelt H- J. et al. Genetic evidence of an early exit of Homo sapiens sapiens from Africa through eastern Africa // Nat. Genet. 1999. - V. 23. - P. 437-441.

198. Ramsay R.R., Singer T.P. Energy-dependent uptake of N-methyl-4-phenylpyridinium, the neurotoxic metabolite of l-methyl-4-phenyl-l,2,3,6-tetrahydropyridin, by mitochondria // J. Biol. Chem. 1986. - Vol.261. -P.7585-7587.

199. Rahbar A., Kempkes M., Muller Th., Reich S., Welter F.L. et al. Glutathione-S-transferase polymorphism in Parkinson's disease // J. Neural Transm. 2000. - Vol.107. - P. 331-334.

200. Richards M., Macaulay V., Bandelt H.J. Phylogeography of mitochondrial DNA in Western Europe // Ann. Hum. Genet. 1998. - Vol. 62. - P. 241-260.

201. Richards M., Macaulay V. The Mitochondrial Gene Tree Comes of Age // Am. J. Hum. Genet. -2001. Vol. 68. - P. 1057-1059.

202. Richter C., Park J.W., Ames B.N. Normal oxidative damage to mitochondrial and nuclear DNA is extensive // Proceeding of the Nat. Acad. Of Scien. of the USA. 1988. - Vol.85. - P. 6465-6467.

203. Riederer P., Sofic E., Rausch W.D. Transition metals, ferritin, glutathione and ascorbic acid in parkinsonian brains // J. Neurochem. 1989. - Vol.52. - P. 515-520.

204. Riess О, Berg R, Kruger R, Schultz J.B. Therapeutic strategies for Parkinson's disease based on data derived from genetics research // J Neurol.-2003- Vol.250.Suppl.I. P.I/3-I/10.

205. Rocca W.A, Bower J.H, McDonnel S.K. Time trends in the incidence of parkinsonism in Olmsted County, Minnesota // Neurology. -2001. -Vol.57. -P.462-467.

206. Rostami-Hodjegan A, Lennurd M.S., Wood H.F, Tucker G.T. Metaanalysis of studies of the CYP2D6 polymorphisms in relation to lung cancer and Parkinson's disease // Pharmacogenetics. -1998. -Vol.8. P.227-238.

207. Rostasy K, Augood S, Hewett J.W., Torsin A protein and neuropathology in early-onset generalysed distonia with CAG-deletion // Neurobiol Dis. -2003. -Vol.12.-P. 11-24.

208. Ruiz Pesini E, Mishmar D, Brandon M, Procaccio V, Wallace D.C. Effects of purifying and adaptive selection on regional variation in human mtDNA // Science. - 2004. - Vol.66. - P.409-435.

209. Sacchetti P, Mitchell T.R, Granneman J.G, Bannott M.J. NurrI enhaces transcription of the human dopamine transporter gene through a novel mechanism // J Neurochemistry. -2001. Vol.76. - P. 1565-1572.

210. Saigoh K, Wang Y.-L, Suh J.-G. Intragenic deletion in the gene encoding ubiquitin carboxy-terminal hydrolase in gad mice // Nature Genet. -1999. -Vol.223.-P.47-51.

211. Sajantila A, Lahermo P., Anttinen T. et al. Genes and languages in Europe: an analysis of mitochondrial lineages // Gemone Res. 1995. - Vol. 5. - P. 4252.

212. Sandy M.S., Armstrong M., Tanner C.M., et al. CYP2D6 allelic frequencies in young-onset Parkinson's disease // Neurology. -1996. -Vol.47. -P.225-230.

213. Schapira A.H., Cooper J.M., Dexter D. et al. Mitochondrial complex I deficiency in Parkinson's disease // J. Neurochem. 1990. - Vol.54. - P.823-827.

214. Schellenberg G.D. Genetic dissection of Alzheimer disease, a heterogeneous disorder // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1995. -Vol.92. -P.8552-8559.

215. Schmechel D., Saunders A., Strittmatter W. et al. Increased amyloid P-peptide deposition in cerebral cortex as a consequence of apolipoprotein E genotype in late-onset Alzheimer disease // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1993. -Vol.93.-P. 131-135.

216. Schultz J.B., Lindenau J., Seyfriend J., Dichgans J. Oxidative stress ans neurodegeneration// Eur J Biochem. -2000. -Vol.267. P.4904-4911.

217. Schurr Т., Sukernik R., Starikovskaya Y. et al. Mitochondrial DNA variation in Koryaks and Itel'men: population replacement in the Okhotsk Sea- Bering Sea region during the Neolithic // Am. J. Phys. Anthropol. 1999. - V. 108. -P. 1-39.

218. Scott W., Stajich J., Yamaoka L. et. al. Genetic complexity and Parkinson's disease. (Letter) // Science. 1997. - Vol. 277. -P.387-388.

219. Scott W.K., Rogala A.R., Rampersaud E. et al. Parkin mutations and idiopathic Parkinson's disease// Am. J. Hum. Genet. 2000. - Vol.67. - P. 19.

220. Scott W.K., Nance M.A., Watts R.L.et al. Complete Genomic Screen in Parkinson's disease evidence for Multiple Genes // JAMA. 2001. -Vol.286. -P.2239-2244.

221. Seidler A., Hellenbrand W., Robra B.P. et al. Possible environmental, occupational, and other etiological factors for Parkinson's disease // Neurology. -1997.-Vol.46.-P. 1275-1284.

222. Shimura H., Hattori N., Kubo S. Et al. Familial Parkinson's disease gene product, parkin, is a ubiquitin-protein ligase // Nature Genet. -2000. -Vol.25. -P.302-305.

223. Shimura H., Schlossmacher M.G., Hattori N. Et al. Ubiquitination of a new form of a-synuclein by parkin from human brain: implications for Parkinson's disease // Sci. -2001. -Vol.293. P.263-269.

224. Shoffner J.M., Brown M.D., Huoponen K., Stugard C., Koontz D., Kaufman A., Graham J., Dixon J., Wallace D.C. A mtDNA mutation associated with meternally inherited Parkinson's disease (PD) and deafness // Am. J. Hum. Gen. 1994. - Vol.55. - P. 1417.

225. Shoffner J.M., Watts R.L., Juncos J.L., Torroni A., Wallace D.C. Mitochondrial oxidative phosphorylation defects in Parkinson disease // Ann. Neurol. 1991. - Vol.30. - P. 332-339.

226. Simon D.K., Mayeux R., Marder K. et al. Mitochondrial DNA mutations in complex I and tRNA genes in Parkinson's disease // Neurology. 2000. -Vol.54.-P.703-709.

227. Smith C.A., Gough A.C. Leigh P.N. et al. Debrisoquine hidroxilase gene polymorphism and susceptibility to Parkinson's disease // Lancet. 1993. -Vol.339.-P.1375-1377.

228. Sofic E, Paulus W, Jellinger K. et al. Selective increase of iron in substantia nigra zone compacta in parkinsonian brains // J. Neurochem. 1991. -Vol.56.-P. 978-982.

229. Starikovskaya Y. Sukernik R, Schurr T. et al. MtDNA diversity in Chukchi and Siberian Eskimos: implications for the genetic history of Ancient Beringia and the peopling of the New World // Am. J. Hum. Genet. 1998. - V. 63. - P. 1473-1491.

230. Stephenson J. Exposure to home pesticides linked to Parkinson's disease // JAMlA. 2000. - Vol.283. - P.3055-3056.

231. Stoneking M, Hedgecock D, Higuchi R.G. et al. Population variation of human mtDNA control region sequences detected by enzymatic amplification and Sequence-specific oligonucleotide probes // Am. J. Human Genet. 1991. -V. 48.-P. 370-382,

232. Takahashi H, Ohama E, Suzuki S. et al. Familial juvenile parkinsonism: clinical and pathologic study in a family // Neurology. 1994. - Vol.44. -P.437-441.

233. Tan E.K, Khajavi M, Thoronby J.I. et al. Variability and validity of polymorphism association studies in Parkinson's disease // Neurology. 2000. - Vol.55.-P.533-538.

234. Tanaka Y, Engelender S, Igarashi S. et al. Inducible expression of mutant alpha-synuclein decreases proteasome activity and increases sensitivity to mitochondria-dependent apoptosis //Hum. Mol.Gen. 2001. - Vol.l0. -P.919-926.

235. Tanaka M. Mitochondrial genotypes and cytochrome b variants associated with longlivety or Parkinson's disease // J. Neurol. 2002. - Vol.249. - P. 1118.

236. Thomas P.K., Cooper J.M., King R.H.M. et al. Myopathy in vitamin Б deficient rats: muscle fibre necrosis associated with disturbance of mitochondrial function // J. Anat. 1993. - Vol.183. - P. 451-461.

237. Tison F., Coutrell C., Henry P. et al. Glutathione-S-transferase (class mu) phenotype in Parkinson's disease // Mov. Disord. 1994. - Vol.9. - P.117-118.

238. Tolk H.V., Pericic M., Barac L. et al. MtDNA Haplogroups in the Populations of Croatian Adriatic Islands // Coll. Antropol. 2000. - V. 24. - P. 267-279.

239. Torroni A., Schurr T.G., Cabell M.F. et al. Asian affinities and continental radiation of the four founding native American mtDNAs // Am. J. Hum. Genet. 1993a. - V.53. - P. 563-590.

240. Torroni A., Sukernik R.I., Schurr T.G. et al. MtDNA variation of aboriginal Siberians reveals distinct genetic affinities with native Americans // Am. J. Hum. Genet. 1993b. - V. 53. - P. 591-608.

241. Torroni A., Huoponen K. et al. Classification of European mtDNAs from an analysis of three European populations // Genetics. 1996. - V. 144. - P. 1835-1850.

242. Torroni A., Bandelt H.-J. et al. mtDNA analysis reveals a major late Paleolithic population expansion from Southwestern to Northeastern Europe // Am. J. Hum. Genet. 1998. - Vol.62. - P. 1137-1152.Т

243. Torroni A., Bandelt H.-J., Macaulay V. et al. A signal from human mtDNA, of postglacial recolonization in Europe // Am. J. Hum. Genet. 2001. - V. 69. P. 844-852.

244. Trojanowski J.Q. Rotenone neurotoxicity: a new window on environmental causes of Parkinson's disease and related brain amyloidoses // Exp. Neurology. -2003.-Vol.179.-P.6-8.

245. Turrens J.F., Boveris A. Generation of superoxide anion by the NADH dehydrogenase of bovine heart mitochondria // Biochem. J. 1980. - Vol.191. -P. 421-427.

246. Ugalde C., Janssen R.J., van den Heuvel L.P., Smeitink J.A., Nijtmans L.G. Differences in assembly or stability of complex I and other mitochondrial 0)PH0S complexes in inherited complex I deficiency // Hum. Mol. Genet. -2004.-Vol.13.-P.659-667.

247. Uversky V.N., Li J., Fink A.L., Pesticides directly accelerate the rate of alpha-synuclein fibril formation: a possible factor in Parkinson's disease // FEBS Letters. 2001. -Vol.500. - P. 105-108.

248. Valente E.M., Bentivoglio A.R., Dixon P.H. et al. Localization of a novel locus for autosomal recessive early-onset parkinsonism, PARK6, on human chromosome Ip35-p36 // Am. J. Hum. Gen. 2001. - Vol.68. - P.895-900.

249. Van der Warrenburg B.P.C., Lammens M., Lucking C.B. et al Parkinsonism associated with parkin gene mutations: clinical and pathological abnormalities in a Dutch family // Neurology. 2001. - Vol. 97. P.235-238.

250. Van Duijn C.M., Dekker Т., Becquet E. et al. PARK7, a novel locus for autosomal-recessive early-onset parkinsonism, on chromosome lp36 // Am. J. Hum. Genet. -2001. Vol.69. -P.629-634.

251. Vaughan J.R, Farrer M.J, Wszolek Z.K. et al. Sequencing of the alpha-synuclein gene in a large series of cases of familial Parkinson's disease fails to reveal any further mutations // Hum. Mol.Genet. 1998. - Vol.7. - P.751-753.

252. Vigilant L, Pennington R, Harpending et al. Mitochondrial DNA sequences in single hairs from a Southern African population // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1990. - V. 86. - P. 9350-9354.

253. Wallace D.C. Diseases of the mitochondrial DNA // Ann. Review of Biochem. 1992. - Vol.61. - P. 1175-1212.

254. Wallace D.C, Shoffner J.M, Watts R.L, Juncos J.L, Torroni A. Mitochondrial oxidative phosphorylation defects in Parkinson's disease // An. Neurol. 1992,-P.l 13-114.

255. Wallace D.C, Lott M.D, Brown I. Mitochondrial DNA committee report // Hum. Gen. Mapping 1994. - Vol.56. - P. 813-845.

256. Wallace D.C, Brown M.D, Lott M.T. Mitochondrial DNA variation in human evolution and disease // Gene. 1999. - Vol.238. - P. 211-230.

257. Wallace D.C, Shoffner J.M, Brown M.D, Torroni A, Lott M.T. et al. Mitochondrial DNA mutations associated with Alzheimer's and Parkinson;s diseases // Am. J. Hum.Genet. 1999. - P.30.

258. Wallace D.C. Mitochondrial defects in neurodegenerative disease // Mental Retardation and Development Disabilities Research Reviews. 2001. - Vol.7 -P.158-166.

259. Wallace D.C, Lott M.T. Mitochondrial genes in degenerative diseases, cancer and aging // Pr. Med.Genet. 2002. - P. 299-409.

260. Wang J, Liu Z, Chen B. Association beetween cytochrome P-450 enzyme polymorphisms and Parkinson's disease // Nat. Lib. Med. 2000. - Vol.80. - P. 585-587.

261. Weisgraber K.H, Roses A.D, Strittmatter W.L. The role of apolipoprotein E in the nervous system // Cur. Opin. Lipidol. 1994. - Vol. 5. - P. 110-116.

262. West A., Periquet M., Lincoln S. et al. The complex relatiomship betweenparkin mutations and Parkinson's disease // Am. J. Hum. Genet. 2002. -Vol.79. - P. 450-454.

263. Wilson A., Cann R., George M. et al. Mitochondrial DNA and two perspectives on evolutionary genetics // Biol. J. of the Linnean Soc. 1985. -Vol.26.-P. 375-400.

264. Yamamura Y., Hattori N., Matsumine H. et al. Autosomal recessive early-onset parkinsonism with diurnal fluctuation: clinicopathologic characteristics and molecular-genetic identification // Brain Dev. 2000. - Vol.22. - P. 87-91.

265. Yodium M.B.H., Ben Shachar D., Riederer P. Is Parkinson's disease a-»rprogressive siderosis of substantia nigra resulting in iron and melanin induced neurodegeneration? // Acta Neurol. Scand. 1989. - Vol.80. - P. 45-54.

266. Yoneda M., Katsumata K., Hayakawa M. et al. Oxygen stress induces an apoptotic cell death associated with fragmentation of mitochondrial genome // Biochem. Biophys. Red Commun. 1995. - Vol.209. - P. 723-729.

267. Zareparski S., Kay J., Camicioli R. et al. Analysis of the alpha-synuclein G209A mutation in familial Parkinson's disease // Lancet. 1998. - Vol.351.у P.37-38.

268. Zhang C., Baumer A., Maxwell R.J. et al. Multiple mitochondrial DNA deletions in an elderly human individual // FEBS. Lett. 1992. - Vol.297. - P.4-8.

269. Zhang Y., Gao J., Chung K.K. et al. Parkin functions as an E2 dependent ubiquitin - protein ligase and promotes the degradation of the synaptic vesicle-associated protein, CDCrei-i // Pro. Nat. Acad. Sci. - 2000. - Vol.97. - P. 1335413359.

Информация о работе

Гилязова, Ирина Ришатовна
кандидата биологических наук
Уфа, 2004
ВАК 03.00.15

Диссертация

Молекулярно-генетическое изучение болезни Паркинсона в Башкортостане - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы