Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Молекулярно-генетические и продуктивные особенности симментальского скота различного происхождения

ВАК РФ 03.02.07, Генетика

Автореферат диссертации по теме "Молекулярно-генетические и продуктивные особенности симментальского скота различного происхождения"

На правах рукописи О/

ЛЬВИНА Ольга Анатольевна

4850964

МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ И ПРОДУКТИВНЫЕ ОСОБЕННОСТИ СИММЕНТАЛЬСКОГО СКОТА РАЗЛИЧНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ

03.02.07 -Генетика

06.02.07 - Разведение, селекция и генетика сельскохозяйственных животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

2 3 (1ЮН 2011

Дубровицы - 2011

4850964

Работа выполнена в Центре биотехнологии и молекулярной диагностики животных ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт животноводства Российской академии сельскохозяйственных наук.

Научные руководители:

доктор биологических наук, профессор, член-корреспондент РАСХН Зиновьева Наталия Анатольевна кандидат сельскохозяйственных наук, доцент Сельцов Виктор Иванович

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Шихов Игорь Яковлевич доктор биологических наук Субботин Александр Данилович

Ведущая организация - ФГОУ ВПО Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина.

Защита состоится 30 июня 2011 года, в 10 часов, на заседании совета по защите докторских и кандидатских диссертаций Д 006.013.03 при ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт животноводства Россельхозакадемии.

Адрес института: 142132, Московская область,

Подольский район, пос. Дубровицы, ГНУ ВИЖ. т/факс (4967)651101

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ГНУ ВИЖ.

Автореферат разослан мая 2011 года.

Ученый секретарь Совета Д006.013.03

ИЗ. Гусев

1. ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. В условиях интенсификации молочного скотоводства все большее распространение находят породы крупного рогатого скота, которые в наибольшей степени отвечают требованиям промышленной технологии (Сельцов В.И., 1995, Стрекозов Н.И., 2006). Одной из таких пород в России является симментальская порода крупного рогатого скота. Современные селекционные стратегии с целью повышения обильномолочности и приспособленности к промышленной технологии предусматривают использование в селекции скота этой породы красно-пестрых голпгшнов (Дедов М.Д. и др., 1989, Прудов А.И. и др., 1989). На популяционном уровне это может повлечь за собой вымывание уникальных аллелей, свойственных симментальскому скоту. В связи с этим, актуальным является изучение аялелофоцца симментальского скота различного происхождения по ДНК-маркерам локусов количественных признаков (QTL). Опыт отечественных и зарубежных ученых показывает, что использование наряду с традиционной селекцией маркерной селекции, которая делает возможным оценку животных в раннем возрасте, не учитывая изменчивость признаков, обусловленную внешней средой, позволяет объективно оценивать истинный генетический потенциал животных, повышая эффективность селекционно-племенной работы в целом (Falaki М. et al., 1994, Калашникова Л.А. и др., 2000, Ardak A.D., 2005, Curi R. A. et al., 2005, Эрнст Л.К., Зиновьева H.A., 2008).

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы явилось изучение молекулярно-генетических и продуктивных особенностей симментальского скота различного происхождения.

Для достижения поставленной цели были решены следующие задачи:

1. Разработать модифицированную тест-систему для определения полиморфизма гена гормона роста у крупного рогатого скота;

2. Провести анализ полиморфизма генов белков молока (каппа -казеина, альфа-лактальбумина, бета-казеина) и гормона роста у различных генетических групп скота симментальской породы;

3. Изучить генетическую структуру популяций по исследуемым генам.

4. Установить связи генотипов изучаемых генов с показателями молочной продуктивности коров симментальской породы;

5. Изучить ги сто структуру мышечной ткани опытных групп животных.

Научная новизна исследований. Впервые дана сравнительная

характеристика различных генетических групп симментальского скота по ДНК-маркерам локусов количественных признаков - каппа-казеину (CSN3), альфа-лактальбумину (LALBA), бета-казеину (CSN2) и гормону роста (BGH). Выявлены различия в частотах встречаемости аллелей изучаемых ДНК-маркеров в различных фенотипических группах симментальского скота, отличающихся уровнем развития признаков молочной продуктивности (уровня удоя, процентного содержания жира и белка в молоке, количества молочного жира и белка). Выявлены особенности гистоструктуры мышечной

ткани у молодняка улучшенного типа с различной долей кровности по симментальской породе.

Практическая значимость. Предложена усовершенствованная тест-система для определения аллельных вариантов BGH. Выполнено построение ДНК-профилей по CSN3, LALBA, CSN2 и BGH у различных генетических групп симментальского скота (отечественной селекции, австрийской селекции, улучшенного типа). Выявлены генотипы коров по CSN3, LALBA, CSN2 и BGH, а так же комплексные генотипы по изучаемым ДНК-маркерам, достоверно коррелирующие с показателями молочной продуктивности коров (уровнем удоя, процентным содержанием жира и белка в молоке, количеством молочного жира и белка).

Положения, выносимые на защиту

• Усовершенствованная тест-система для определения полиморфизма гена гормона роста у крупного рогатого скота.

• Аллельные профили различных генетических групп скота симментальской породы по ДНК-маркерам каппа-казеину, бета-казеину альфа-лактальбумину и гормону роста.

• Различия в частотах встречаемости изучаемых ДНК-маркеров в различных фенотипических группах симментальского скота, отличающихся уровнем развития признаков молочной продуктивности.

• Влияние генотипов исследуемых ДНК-маркеров на показатели молочной продуктивности коров симментальской породы.

Апробация работы. Материалы диссертационной работы были доложены и обсуждены на:

- 3 международной научной конференции «Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных», ВИЖ, 2004 г.;

- 4 международной научной конференции «Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных», ВИЖ, 2005 г.;

- отчетных научных конференциях Центра биотехнологии и молекулярной диагностики ВИЖ, 2004,2005 гг.

- конференции Центра биотехнологии и молекулярной диагностики ВИЖ, 2011г.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 117 страницах, состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты, обсуждение, выводы, практические предложения, список литературы. Диссертационная работа содержит 27 таблиц и 41 рисунок. Список литературы включает 161 источник, в том числе 102 источника на иностранном языке.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 6 работ, в том числе 1 — в журнале, рекомендованном ВАК РФ (Сельскохозяйственная биология, № 6, 2007), 1 - методические рекомендации, 3 - в сборниках трудов конференций, 1 - в журнале научных публикаций.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Исследования проводили в лаборатории молекулярной генетики животных Центра биотехнологии и молекулярной диагностики животных и в отделе селекции молочного скота ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт животноводства Россельхозакадемии в период с 2003 по 2010 гг. в соответствии с планом НИР подразделений по схеме, представленной на рисунке 1.

Рис. 1. Схема исследований

Исследования выполнены на трех различных генетических группах коров симментальской породы (отечественной селекции, п=85; австрийской селекции, п=115; улучшенного типа, п=100) и группе животных голштинской красно-пестрой породы. От животных отбирали пробы ткани (ушные выщипы). Выделение ДНК осуществляли по методикам, описанным Зиновьевой H.A. с соавторами (1998) и Гладырь Е.А. с соавторами (2000). Генотипирование животных по генам каппа-казеина (CSN3), бета-казеина (CSN2) и альфа-лактальбумина (LALBA) проводили по методикам, разработанным в лаборатории молекулярной генетики и цитогенетики животных ГНУ ВИЖ (Гладырь Е.А. и др., 2001, 2002; Костюнина О.В. и др., 2003). Генотипы животных по гену гормона роста (BGH) определяли по методике, разработанной в ходе выполнения собственных исследований (Львина O.A., и др., 2005).

Данные по молочной продуктивности коров за 305 дней первой лактации были получены из карточек племенного учета (форма 2-Мол).

Гистологические препараты готовили по общепринятой методике (Ромейс, 1953) на замораживающем микротоме. Окраску препаратов проводили красителем Судан Ш - гематоксилин.

Статистическую обработку данных проводили по стандартным методикам (Плохинский H.A., 1978; Меркурьева Е.К., 1977; Меркурьева и другие, 1991).

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1. Разработка модифицированной тест-системы для определения полиморфизма гормона роста крупного рогатого скота

Исходя из наличия и локализации мутации С—+G в позиции 2141 в экзоне 5 гена BGH, приводящей к аминокислотной замене Leu—>Val в позиции 127 (генный банк М57664), нами были выбраны два праймера BGH1 и BGH2, амплифицирующих фрагмент гена длиной 240 п.о., включающий данную точечную мутацию. При этом в 6-й позиции от 3' конца прямого праймера BGH1, приходящегося на участок последовательности, включающий в себя сайт рестрикции эндонуклеазы Alu 1, нами была введена нуклеотидная замена А->Т, приводящая к исчезновению сайта рестрикции AGfCT эндонуклеазы Alu 1. Проведение ПЦР-ПДРФ анализа проводили по стандартной методике (Зиновьева H.A. и др., 2000). После рестрикции в зависимости от генотипа животного образуются фрагменты длиной 240, 173

и 67 п.о., при этом фрагмент длиной 240 п.о. соответствует аллелю V, а фрагменты длиной 173 и 67 п.о. соответствуют аллелю L (рис. 2).

Предложенная нами методика диагностики полиморфизма гена BGH на основе анализа ПЦР-ПДРФ проста в исполнении и отличается хорошей воспроизводимостью результатов. Она может с успехом использоваться для тестирования крупного рогатого скота в рамках популяционно-генети-ческих исследований, для изучения генетического разнообразия, а также в качестве возможного маркера локусов количественных признаков.

Генный

банк

MS7664

2141

2074

{ Вариант

V 2141

240 п.о.

Вариант

L 2141

«як

67 п.о.

173 п о.

LL LV W

2313

. 240П.О

- 173 П.О.

- 67 П.О.

Рис.2. Схема ПЦР-ПДРФ анализа аллелей L и V BGH крупного рогатого скота

3.2. Популяционно-генетические исследования крупного рогатого скота симментальской породы по вариантам генов белков молока

3.2.1. Полиморфизм гена каппа-казеина (СвЮ) Результаты анализа полиморфизма показаны на рисунке 3.

Рис.3. Распределение частот встречаемости аллелей (а) и генотипов (б) СБШ

Как показано на рисунке 3, группы коров симментальской породы оказались достаточно однородны и не показали существенных различий по частотам встречаемости аллелей А и В СБЫЗ. Наибольшая частота встречаемости «желательного» аллеля В отмечена в группе коров голштинской красно-пестрой породы (36,7%) и в популяции чистопородных коров симментальской породы отечественной селекции (36,3%). Наибольшая частота встречаемости генотипа ВВ выявлена у чистопородных коров симментальской породы отечественной селекции (16,7%).

Проведенные исследования показали наличие заметных различий в частотах встречаемости аллеля А С8№ между коровами отечественной селекции и улучшенного типа (Р<0,05), а также между коровами отечественной и австрийской селекции (Р<0,01). По встречаемости генотипов достоверная разница была отмечена лишь между группами коров отечественной и австрийской селекции (Р<0,001).

3.3.2. Полиморфизм гена альфа-лакгальбумина (ЬАЬВА)

На рисунке 4 представлены результаты анализа животных по вариантам гена ЬАЬВА. Анализируя данные рисунка 4, необходимо отметить наибольшую частоту встречаемости аллеля А ЬАЬВА у коров улучшенного типа (87,5%). Наименьшей частотой встречаемости аллеля А характеризовались чистопородные коровы австрийской селекции (72,6%). Анализ частот встречаемости генотипов ЬАЬВА показывает, что наибольшая частота встречаемости генотипа АА выявлена в группе скота улучшенного типа (85,0%), а наименьшая - у коров австрийской селекции (52,2%).

Следует отметить, что между группами симментальских чистопородных коров австрийской селекции, отечественной селекции и животными улучшенного типа симментальской породы не наблюдалось достоверной разницы в частотах встречаемости аллеля А и гомозиготного генотипа АА, за исключением различий в частоте встречаемости генотипа АА у животных отечественной селекции и улучшенного типа (<0,001).

Рис.4. Распределение частот встречаемости аллелей (а) и генотипов (б)

ЬАЬВА

Таким образом, проведенные нами исследования указывают на то, что прилитие крови голиггинского скота приводит увеличению частот встречаемости аллеля А и генотипа АА.

3.3.3. Полиморфизм гена бета-казеина (СБШ) На рисунке 5 показаны частоты встречаемости аллелей и генотипов СЯК2 в исследованных группах крупного рогатого скота.

Сиы*скга.«та актр семкикк

Рис.5. Распределение частот встречаемости аллелей (а) и генотипов (б)

Анализируя данные, представленные на рисунке 5, можно отметить, что частоты встречаемости аллелей и генотипов С£N2 в исследованных группах незначительно различались. Частота аллеля А варьировала от 93,3% у животных красно-пестрой голштинской породы до 100% у коров симментальской породы отечественной селекции. Доля гомозиготных генотипов АА во всех исследованных группах была выше по сравнению с частотой встречаемости генотипа ВВ и варьировала от 86,7% у животных красно-пестрой голштинской породы до 100% у коров симментальской породы отечественной селекции. Генотип ВВ был выявлен лишь в группе коров австрийской селекции. Достоверных различий в частотах встречаемости аллелей и генотипов С8К2 между группами выявлено не было.

3.3.4. Полиморфизм гена гормона роста (BGH)

На рисунке 6 показано распределение частот встречаемости аллелей и генотипов BGH в исследованных группах скота.

Рис.6. Распределение частот встречаемости аллелей (а) и генотипов (б) BGH

Данные, показанные на рисунке 6, показывают, что частота встречаемости аллеля L была выше по сравнению с частотой встречаемости аллеля V и варьировала от 69,6% у чистопородных коров австрийской селекции до 97,1% у чистопородных коров отечественной селекции. Доля гомозиготных генотипов LL во всех исследованных популяциях была выше по сравнению с частотой встречаемости генотипа ВВ и изменялась от 52,2% у чистопородных коров австрийской селекции до 94,1% у чистопородных коров отечественной селекции. Анализ различий в распределении аллелей и генотипов BGH между группами показал наличие достоверной разницы в частотах встречаемости аллеля L и генотипа LL между группами чистопородных коров и коров улучшенного типа (<0,001).

3.3.5. Анализ генетической структуры популяций по исследованным

ДНК-маркерам

Распределение генотипов и расчеты теоретической и фактической величин критерия х2 показали, что во всех исследованных популяциях коров наблюдалось сохранение генного равновесия по локусам CSN3 и BGH.

В группе чистопородных коров симментальской породы австрийской селекции и в группе коров голштинской красно-пестрой породы сохраняется генное равновесие по локусу LALBA. В группах коров симментальской породы отечественной селекции и скота улучшенного типа отмечается смещение генного равновесия в сторону увеличения гетерозиготного генотипа AB по LALBA.

Анализ генетической структуры популяций по локусу CSN2 показал, сохранение генного равновесия в группах скота симментальской породы отечественной селекции, улучшенного типа симментальского скота и красно-пестрой голштинской породе, в то время как в группе коров австрийской селекции наблюдается смещение генного равновесия в сторону увеличения гомозиготного генотипа ВВ (Р<0,05).

3.3.6. Кластерный анализ исследованных по изучаемым ДНК-:

сяо.1лвл.С8евю(

чистакредаясжмвгаьойя акпрш:« шадо

1&СШР0Э(аЗ СДШЯЭ1ШЯ ¡даКМЙЯН СБЯВ>Н

Гшшшеа кгвсжкссхея

Гйт^н&о&шш птентъааг. шша улучимнсго жз

Рис.7. Дендрограмма генетических различий между изучаемыми группами скота симментальской породы по генам СБЫЗ, ЬАЬВА, С8Ы2, ВОН

групп крупного рогатого скота маркерам

Для проведения кластерного анализа в качестве иерархически объединенных объектов были выбраны частоты встречаемости аллелей изучаемых ДНК-маркеров.

Как показано на рисунке 7, самой удаленной по частотам встречаемости аллелей генов С8ЫЗ, ЬАЬВА, СБ№ и ВОН является группа коров австрийской селекции. Группа коров отечественной селекции образует общий кластер с животными голш-тинской красно-пестрой породы. Вероятно, это является следствием того, что группа голштинской породы представлена быками-производителями.

3.4. Исследование молочной продуктивности коров с различными генотипами ДНК-маркеров 3.4.1. Молочная продуктивность коров с разными генотипами по СБШ

Результаты анализа молочной продуктивности коров в зависимости от генотипа по СБКЗ приведены в таблице 1.

Табл. 1. Продуктивность коров исследуемых популяций в зависимости ___от генотипа по гену __

Генотип Число голов, п Удой, кг Содержание жира, % Молочный жир, кг Содержание белка, % Молочный белок, кг

Симментальская порода австрийской селекции

АА 67 4782±93 3,69±0,03 176±3,6 3,27±0,02 156±3,1

АВ 35 4858±115 3,76±0,05 183±4,0 3,38±0,03 164±4,0

ВВ 8 5012±271 3,72±0,13 187±9,4 3,42±0,06* 172±9,7

Симментальская порода отечественной селекции

АА 24 3751±133** 3,69±0,04 138±5,0** 3,32±0,03* 125±4,4***

АВ 24 3284±99 3,69±0,04 121±4,1 3,20±0,04 105±3,3

ВВ 12 3551±223 3,74±0,04 133±7,5 3,25±0,05 115±7,6

Симментальская порода улучшенного типа

АА 55 3611±100 3,89±0,01 140±3,9 - -

АВ 41 3632±89 3,88±0,01 141±3,4 - -

ВВ 4 3323±197 3,84±0,06 128±8,0 - -

'Р<0,05; Р<0,01; "'Р<0,001

Анализ молочной продуктивности коров показал наличие достоверной разницы по удою (АА>АВ, <0,01) и выходу молочного жира за лактацию (АА>АВ, Р<0,01) у чистопородных коров симментальской породы отечественной селекции, по содержанию белка в молоке (ВВ>АА, Р<0,05) у чистопородных симментальских коров австрийской селекции (АА>АВ, Р <0,05) и у чистопородных симментальских коров отечественной селекции. По количеству молочного белка коровы отечественной селекции с генотипом А А превышали показатели коров с генотипом АВ (Р<0,001). 3.4.2. Молочная продуктивность коров с разными генотипами по ЬАЬВА Результаты анализа молочной продуктивности коров разного происхождения с учетом генотипа по гену ЬАЬВА представлены в таблице 2.

Табл. 2. Продуктивность коров исследуемых групп в зависимости от

генотипа по гену LALBA

Генотип Число голов, п Удой, кг Содержание жира, % Молочный жир, кг Содержание белка, % Молочный белок, кг

Симментальская порода австрийской селекции

АА 58 4925±95 3,73±0,04*** 184±4* 3,34±0,02 165±3

AB 45 4604±113 3,72+0,04 171+4,3 3,29±0,03 152+3,8

ВВ 8 5168±165** 3,53±0,05 182±5,8 3,23±0,07 167+7,8

Симментальская порода отечественной селекции

АА 35 3573±107 3,70+0,03 132±4,1 3,28±0,03 117±3,6

AB 25 3456±134 3,69+0,03 128±4,7 3,23+0,03 112±4,6

Симментальская порода улучшенного типа

АА 85 3610±74 3,89+0,01 140±2,8 - -

AB 5 3451+365 3,93+0,03* 136±14,7 - -

ВВ 10 3665±110 3,83+0,03 140±4,8 - -

Р<0,05; Р<0,О1; Р<0,001

Анализ молочной продуктивности показал наличие статистически достоверной разницы по удою (+564 кг, ВВ>АВ, Р<0,01) у коров симментальской породы австрийской селекции, по содержанию жира в молоке у коров австрийской селекции (+0,2%, АА>ВВ, Р<0,001), а также у коров улучшенного типа (АВ>ВВ, +0,1%, Р<0,05). По количеству молочного жира наличие достоверной разницы было отмечено у коров австрийской селекции (+13 кг, АА>АВ, Р<0,05). В остальных случаях выявленные различия можно рассматривать в качестве тенденции.

3.4.3. Молочная продуктивность коров с разными генотипами по CSN2 В таблице 3 представлены данные о молочной продуктивности в

группах коров с различными генотипами по CSN2. Анализ показал наличие достоверной разницы по содержанию жира (0,36%, АВ>АА, Р<0,001) и количеству молочного белка (+10 кг, АА >ВВ, Р<0,001) у чистопородных коров австрийской селекции. В остальных случаях достоверных различий обнаружено не было.

3.4.4. Молочная продуктивность коров с разными генотипами по BGH В таблице 4 представлены данные о молочной продуктивности по

генотипам BGH в родственных группах симментальских коров.

Табл. 3. Продуктивность коров исследуемых групп в зависимости от

генотипа по гену CSN2

Генотип Число голов, п Удой, кг Содержание жира, % Молочный жир, кг Содержание белка, % Молочный белок, кг

Симментальская порода австрийской селекции

АА 105 4824±72 3,70±0.03 179±2,7 3,31±0,02 160±2,5***

AB 4 4597±518 4,06±0,08*** 187±22,5 3,34±0,15 154±13,1

ВВ 2 4639±68 3,71±0,09 172±6,9 3^3±0,04 150±0,3

Симментальская порода отечественной селекции

АА 60 3524±83 3,7040,02 130±3,1 3,26±0,02 115±29

Симментальская порода улучшеипого типа

АА 97 3610±68 3,88±0,01 140±2,б - -

AB 3 3539±300 3,87±0,06 137±13,1 - -

'Р<0,05; "Р<0,01; "'Р<0,001

Табл. 4. Молочная продуктивность коров симментальской породы с различными генотипами по гену гормона роста

Генотип Число голов, п Удой, кг Содержали ежира,% Молочный жир, кг Содержание белка, % Молочный белок, кг

Симментальская порода австрийской селекции

LL 59 4746±99 3,90±0,04** 185±3,9 3,33±0,02*** 158±3,3

LV 39 4851±111 3,72±0,04 181±4,0 3,13±0,04 152±4,0

W 13 4998±221 3,78±0,08 189±7,4 3,28±0,03 164±7,1

Симментальская порода отечественной селекции

LL 80 3551*70 3,69±0,02 131±2,6 - -

LV 5 3510±356 3,88±0,П 136±15,5 - -

Симментальская порода улучшенного типа

LL 77 3575±76 3,88±0,01 139±2,9 - -

LV 20 3640*138 3,88±0,02 141±5,4 - -

W 3 4230t410 3,92±0,03 166±14,6 - -

Р<0,05; Р<0,01; Р<0,001

Как следует из данных таблицы 4, в двух из трех исследованных групп скота симментальской породы наблюдается превосходство по удою коров с генотипом W по BGH над коровами с генотипом LL, при этом у коров улучшенного типа различия приближаются к достоверным. Кроме того, установлено наличие достоверной разности по содержанию жира в молоке (0,18%, LL>LV, Р<0,01) и по содержанию белка в молоке (0,2%, LL>LV, Р<0,001) у коров симментальской породы австрийской селекции.

3.4.5. Молочная продуктивность коров с различными комплексными генотипами по LALBA и CSN2 В таблице 5 приведены сведения о молочной продуктивности коров исследуемых групп с учетом комплексного генотипа по LALBA и CSN2.

Данные таблицы 5 показывают, что коровы австрийской селекции с генотипом ВВАА превосходят коров с генотипом АВАА на 528 кг молока за лактацию (Р<0,05), а коровы с генотипом АВАА имеют на 528 кг более высокий удой по сравнению с коровами с генотипом АВАВ (Р<0,01).

Табл. 5. Продуктивность коров исследуемых групп с учетом комплексного генотипа по генам ЬАЬВА и СБЫ2

Комплексный Число Удой, Содержание Молочный Содержание Молочный

генотип' голов, п кг жира, % жир, кг белка, % белок, кг

Симментальская порода австрийской селекции

АА АА 56 4910+96 3,73+0,04* 183+3,5 3,35+0,02 164+3,2*

AB АА 41 4640Ü21** 3,70+0,04 172+4,7 3,28+0,04 152+4,2

AB AB 3 4084+105 4,05±0,1* 165+8,8 3,45+0,2 141+5,0

ВВ АА 8 5168+165* 3,53±0,05 182±5,8 3,23+0,07 167+7,8

Симментальская порода отечественной селекции

АА АА 35 3573+107 3,70±0,03 132±4,1 3,28+0,03 117+3,6

AB АА 25 3456+134 3,69±0,03 128+4,7 3,23+0,03 112±4,6

Симментальская улучшенного типа

АА АА 82 3613+77 3,89+0,01* 140+2,9 - -

АА AB 3 3539±300 3,87+0,1 137+13,1 - -

AB АА 5 3451±365 3,93+0,04 136+14,7 - -

ВВ АА 10 3665+110 3,83+0,03 140+4,8 - -

Генотип коров по генам LALBA и CSN2 'Р<0,О5; "Р<0,01; "'Р<0,001

Необходимо отметить различия по содержанию жира в молоке коров австрийской селекции и улучшенного типа (+0,20 и +0,06%, АААА>ВВАА, соответственно, Р<0,05). Высоко достоверная разница отмечена в группе коров австрийской селекции по содержанию жира в молоке (+0,35%, АВАВ>АВАА, Р<0,05) и по количеству молочного белка (+12 кг, АААА>АВАА, Р<0,05). В остальных вариантах статистически достоверных различий обнаружено не было.

3.4.6. Молочная продуктивность коров в зависимости от сочетаний генотипов по CSN3, LALBA, CSN2 и BGH В таблице 6 представлены сведения о молочной продуктивности коров в зависимости от сочетаний генотипов по CSN3, LALBA, CSN2 и BGH.

Табл. 6. Продуктивность коров исследуемых групп с учетом комплексного

генотипа по генам CSN3, LALBA, CSN2 и BGH

Комплексный генотип1 Число голов, п Удой, кг Содержание жира, % Молочный жир, кг Содержание белка, % Молочный белок, кг

1 2 3 4 5 6 7

Симментальская порола австрийской селекции

АА AAAALL 21 4997+150 3,83+0,06* 183±5,95 3,33+0,02*** 166+4,9

АА AAAALV 6 4784+303 3,53+0,11* 169+9,4 3,30+0,04 158+10,0

АА AAAAVV 6 4866+276 3,78+0,13 184+8,3 3,25+0,02*** 158+8,6

АА AB АА LL 13 4370±247 3,57+0,06 156±9,0 3,28+0,05 143+7,3

АА AB АА LV 9 3978+265 3,68+0,04 146+11,3 3,14+0,12 125+10,9

AB AAAALL И 4747+238 3,81+0,09 181+8,7 3,46+0,07 164±9,0

AB АА АА LV 6 4907+305 3,80+0,10 187±11,0 3,31+0,05 162+8,3

AB ABAALL 7 4821±223 3,76+0,09 181+9,0 3,30+0,05 159+6,8

AB AB АА LV 6 4942+277 3,69+0,10 182+8,3 3,38+0,07 167+9,9

Симментальская порода отечественной селекции

АА ABAALL 13 3707+156 3,70+0,05 137+6 I -

АА AB АА LV 3 3697+527 3,80+0,02 140±21 | -

1 2 з 4 5 6 7

Симментальская порода улучшенного типа

АА AAAALL 35 3551±128 3,9±0,01 138±5 - -

АА AAAALV 9 3887±221 3,9±0,03 152±8 - -

AB АА АА LL 26 3596±135 3,88±0,02 140±5 - -

AB AAAALV 6 3573±129 3,86±0,06 138±5 - -

'Генотип коров по генам, CSN3, LALBA, CSN2 и BGH. 'Р<0,05; "Р<0,01;Р<0,001

Анализ продуктивности животных показал наличие достоверной разницы по содержанию жира (СЗЫЗ/ЬАЬВА/СЗШ/ВСН - АА/АА/АА/ЬЬ > АА/АА/АА/ЬУ, Р<0,05) и белка в молоке (АА/АА/АА/ЬЬ > АА/АА/АА/УУ, Р<0,001) в группе коров австрийской селекции. В остальных случаях статистически достоверной разницы обнаружено не было.

3.4.6. Анализ распределения аллелей исследуемых ДНК-маркеров в различных фенотипических группах коров по показателям молочной продуктивности В таблице 7 приведены значения частот встречаемости аллелей исследуемых ДНК-маркеров в группах коров симментальской породы с уровнем молочной продуктивности, выходящим за пределы ±1сг.

Табл. 7. Частоты встречаемости аллелей ДНК-маркеров в группах коров с

уровнем молочной продуктивности, выходящим за пределы ±1о

Группа CSN3 LALBA CSN2 ВОН

- о + G - о + 0 - о + <з - а + о

А | В А | В А | В А | В А | В А | В L I V L I V

Удой

I 75,0 25,0 69,6 30,4 66,7 33,3 78,3 21,7 97,2 2,8 97,8 2,2 78,9 21,1 67,4 32,6

II 57,7 42,3 77,3 22,7 76,9 23,1 77,3 22,7 100 0 100 0 92,3 7,7 95,8 4,2

III 76,9 23,1 94,4 5,6 88,5 11,5 100 0 100 0 100 0 96,4 3,6 87,5 12,5

Жир

1 75,6 24,4 62,5 37,5 65,9 34,1 75 25 100 0 93,8 6,3 77,4 22,6 64,3 35,7

II 85,7 14,3 62,5 37,5 85,7 0,14 75 25 100 0 100 0 100 0 90,0 10,0

III 65,4 34,6 75,0 25,0 92,3 7,7 100 0 96,2 3,8 100 0 84,6 15,4 83,3 16,7

Молочный жи Р

I 88,6 И.4 80,0 20,0 63,6 36,4 80,0 20,0 97,7 2,3 96,7 3,3 80,4 19,6 75,0 25,0

II 54,5 45,5 81,3 18,8 72,7 27,3 81,2 18,8 100 0 100 0 93,3 6,7 93,8 6,2

III 80,0 20,0 95,0 5,0 90,0 10,0 100 0 96,7 3,3 100 0 96,7 3,3 75,0 25,0

Белок

I 92,9 7,1 57,1 42,9 42,9 57,1 78,6 21,4 92,9 7,1 92,9 7,1 66,7 33,3 70,0 30,0

П 40.0 60,0 75,0 25,0 75,0 25,0 87,5 12,5 100 0 100 0 95,0 5,0 88,9 11,1

Молочный белок

I 88,9 11,1 65,9 34,1 61,1 38,9 77,3 22,7 97,2 2,8 97,7 2,3 75,0 25,0 72,5 27,5

И 37,5 62,5 72,7 27,3 75 25 81,8 18,2 100 0 100 0 94,4 5,6 100 0

Примечание: генетические группы коров симментальской породы: I -австрийской селекции, II - отечественной селекции, III -улучшенного типа.

Проведенный анализ показал наличие некоторых различий в частотах встречаемости аллелей изучаемых ДНК-маркеров в группах коров с различным уровнем молочной продуктивности. Так, у коров отечественной селекции и улучшенного типа, обладающих повышенной жирномолочностью, частота встречаемости аллеля В CSN3 выше, чем у животных выходящих за пределы -1а. У коров австрийской селекции отмечается обратная тенденция.

Анализ частот встречаемости аллелей LALBA в группах коров, продуктивность которых выходит за пределы ±1с, показал, что у коров с повышенным удоем частота встречаемости аллеля А увеличивается. Наиболее сильно это проявляется в группе коров улучшенного типа. Во всех изучаемых группах с увеличением количества молочного жира, процентным содержанием белка и количеством молочного белка отмечается увеличение частоты встречаемости аллеля А LALBA.

Так как частота встречаемости аллеля А по CSN2 в исследованных популяциях скота была относительно высокой (более 93,8-100,0%) существенных различий в частотах встречаемости аллелей данного ДНК-маркера между группами коров с высоким (+1с) и низким (-1о) уровнем молочной продуктивности выявлено не было.

Анализ распределения аллелей BGH показал более низкие частоты встречаемости аллеля L у коров с низким содержанием жира в молоке и уровнем молочного жира во всех генетических группах симментальского скота.

4. ВЫВОДЫ

1. Разработана модифицированная тест-система определения аллелей L и V гормона роста крупного рогатого скота (BGH). Тест-система экспериментально апробирована для диагностики аллельного полиморфизма BGH у 315 животных различных генетических групп симментальской породы и голштинской красно-пестрой породы.

2. Определены генотипы каппа-казеина (CSN3) в различных генетических группах симментальской породы в сравнении с животными гоштинской красно-пестрой породы. Частота встречаемости аллеля А варьировала от 63,7% в группе коров отечественной селекции до 77,6% в группе коров австрийской селекции против 63,3% в группе голшгинского красно-пестрого скота. Выявлена изменчивость по удою, содержанию белка и количеству молочного жира в молоке коров с различными генотипами по CSN3. Чистопородные коровы симментальской породы отечественной селекции с генотипом АА достоверно превышали по удою коров с генотипом AB на 467 кг (Р<0,01), по содержанию белка в молоке на 0,12% (Р<0,05) и по количеству молочного жира на 17 кг (Р<0,01). Коровы австрийской селекции с генотипом ВВ по содержанию белка превышали коров с генотипом АА на 0,15% (Р<0,05).

3. Определены генотипы коров различных генетических групп симментальской породы по альфа-лактальбумину (LALBA). Частота встречаемости аллеля А различалась в зависимости от популяции и варьировала от 72,6 до 87,5% против 76,7% в группе голштинского красно-пестрого скота. Выявлена достоверная разница между коровами австрийской селекции с различными генотипами по LALBA по удою (ВВ>АВ, 564 кг, Р<0,01) и по содержанию жира в молоке (АА>ВВ, 0,2%, Р<0,001). У коров улучшенного типа отмечена разница между генотипами по содержанию жира в молоке (АВ>ВВ, 0,1%, Р<0,05), у коров австрийской селекции - по количеству молочного жира (АВ>АА, 13 кг, Р<0,05).

4. Изучены аллельные профили коров симментальской породы по бета-казеину (CSN2). Частота встречаемости аллеля А варьировала от 96,5% в группе до 100% у коров отечественной селекции против 93,3% в группе красно-пестрого голштинского скота. У чистопородных коров австрийской селекции была отмечена статистически достоверная разница между генотипами по содержанию жира (АВ>АА, 0,36%, Р<0,001) и количеству молочного жира (АА>АВ, 10 кг, Р<0,001).

5. Исследование полиморфизма BGH у скота симментальской породы показало, что частота встречаемости аллеля L варьировала от 69,6% у коров австрийской селекции до 97,1% у коров отечественной селекции против 93,3% в группе красно-пестрого голштинского скота. Коровы австрийской селекции с генотипом LL по BGH превосходили коров с генотипом LV по содержанию жира в молоке на 0,18% (Р<0,01) и по содержанию белка - на 0,2% (Р <0,001).

6. Анализ молочной продуктивности коров в зависимости от генотипа по комплексу ДНК-маркеров показал наличие достоверной разницы у коров австрийской селекции с различными генотипами по LALBA и CSN2 по удою (АВ/АА>АВ/АВ, 556 кг, Р <0,01 и ВВ/АА>АВ/АА, 528 кг, Р <0,05) и содержанию жира в молоке (АА/АА>ВВ/АА, 0,2%, Р<0,01; АВ/АА>ВВ/АА, 0,17%, Р<0,05; и АВ/АВ>АВ/АА, 0,35%, Р <0,01). У коров улучшенного типа выявлена зависимость АА/АА>ВВ/АА, 0,06%, Р<0,05. Были выявлены достоверные различия по количеству молочного белка в молоке коров австрийской селекции (АА/АА>АВ/АА, 12 кг, Р<0,05). У коров австрийской селекции в зависимости от генотипа по CSN3, LALBA, CSN2 и BGH выявлена достоверная разница по содержанию жира в молоке (AA/AA/AA/LL>AA/AA/AA/LV, 0,30%, Р<0,05), а также по содержанию белка в молоке (AA/AA/AA/LL>AA/AA/AA/W, 0,13%, Р<0,001).

7. Результаты морфометрических исследований мышечных волокон в группах скота с различной долей кровности по симментальской породе (I -62%, II - 82%, Ш - 94%) показали наибольший диаметр мышечных волокон полусухожильного мускула у животных II группы (59,6 мкм). В группах I и Ш данный показатель составил, соответственно, 50,0 и 52,2 мкм. Средний диаметр мышечных волокон длиннейшей мышцы спины на разной глубине залегания в группах I, П и Ш составил, соответственно, 49,9-55,1, 55,6-58,3 и

49,8-59,4 мм. Исследования включений жировой ткани в состав мышц показали повышение объема жировых включений с увеличением доли кровности по симментальской породе.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Лабораториям, занимающимся ДНК-диагностикой, рекомендуем использовать модифицированную нами тест-систему определения генетического полиморфизма по гену гормона роста крупного рогатого скота. Генотипирование животных по комплексу ДНК-маркеров позволяет проводить селекцию по основным признакам продуктивности молочного скота.

Список работ опубликованных по теме диссертации

Статьи в журналах, рекомендованных ВАК РФ

Коновалова, E.H. Гены белков молока и микросателлитные профили в популяциях симментальского скота различного происхождения / Коновалова E.H., Львина O.A., Сельцов В.И., Зиновьева H.A. // Сельскохозяйственная биология. -2007. -№6. -С. 35-40.

Методические рекомендации

Зиновьева, H.A. Методические рекомендации по использованию молекулярно-генетических тест-систем для анализа полиморфизма генов белков молока у крупного рогатого скота / Зиновьева H.A., Гладырь Е.А., Коновалова E.H., Костюнина О.В., Сельцов В.И., Львина O.A. // Дубровицы. - 2005. - С.38.

Статьи в сборниках научных трудов и международных конференций.

Львина, O.A. Полиморфизм генов альфа-лактальбумина и бета-казеина у различных популяций симментальского скота / Львина O.A. // 4-я Международная научная конференция «Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных» 24-25 ноября 2004 года. -Дубровицы. - 2004. - С. 72-74.

Львина, O.A. Молочная продуктивность коров симментальской породы с различными генотипами по генам каппа-казеина, альфа-лактальбумина, бета-казеина и гормона роста / Львина O.A., Сельцов В.И., Зиновьева H.A. // Международная школа конференция «Новые методы генодиагностики и генотералии: современное состояние и перспективы использования в сохранении генофонда сельскохозяйственных животных». -Дубровицы. - 2005. - С. 117-120.

Львина, O.A. Диагностика полиморфизма гена гормона роста у коров симментальской породы / Львина O.A., Сельцов В.И., Зиновьева H.A., Стрекозов Н.И. Научные труды ВИЖа // Всерос. гос. науч.-исслед. ин-т животноводства. - 2005. - в.63. - т. 2. -С. 192-196.

Львина, O.A. Гистологические исследования мышечной ткани бычков симментальской породы различных генотипов / Львина O.A., Сельцов В.И., Зиновьева H.A. // Журнал научных публикаций «Актуальные проблемы гуманитарных и естественных наук». - 2011. -№3 (26). -С. 66-69.

Издательство ГНУ ВИЖ Россельхозакадемия Тел.(84967)65-13-18 (8-4967)65-15-97

Сдано в набор 26.05.2011. Подписано в печать 27.05.2011. _Заказ X» 29. Печ. л. 1,0. Тираж 100 экз._

Отпечатано в типографии ГНУ ВИЖ Россельхозакадемия

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Львина, Ольга Анатольевна

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Полиморфизм ДНК и генетические маркеры.

1.2. Маркеры молочной и мясной продуктивности крупного рогатого д скота.

1.2.1. Маркеры мясной продуктивности. Идентификация БЫР.

1.2.2. Маркеры молочной продуктивности крупного рогатого скота

1.2.3. Гормон роста крупного рогатого скота (ВОН).

1.3. Генетические маркеры в симментальской породе крупного 20 рогатого скота.

1.4. Характеристика симментальского скота

1.5. Использование красно-пестрой голштинской породы при 23 разведении симментальского скота.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Материалы

2.1.1. Животные

2.1.2. Оборудование

2.1.3. Реактивы

2.2. Методика исследований

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Пополнение банка ДНК крупного рогатого скота

3.2. Разработка модифицированной тест-системы для определения ^ полиморфизма гормона роста крупного рогатого скота

3.3. Популяционно-генетические исследования крупного рогатого ^ скота различных пород по вариантам генов белков молока

3.3.1. Полиморфизм гена каппа-казеина (СБЮ)

3.3.2. Полиморфизма гена альфа-лактальбумина (ЬАЬВА)

3.3.3. Полиморфизма гена бета-казеина (С8И2)

3.3.4. Полиморфизма гена гормона роста крупного рогатого скота ^

3.3.5. Кластерный анализ исследованных групп крупного рогатого ^ скота по изучаемым ДНК-маркерам

3.4. Исследование молочной продуктивности коров с различными генотипами ДНК-маркеров

3.4.1. Молочная продуктивность коров с разными генотипами по каппа-казеину

3.4.2. Анализ распределения аллелей гена CSN3 в различных фенотипических группах коров по показателям молочной 62 продуктивности

3.4.3. Молочная продуктивность коров с различными генотипами по ^ альфа-лактальбумину

3.4.4. Анализ распределения аллелей гена LALBA в различных фенотипических группах коров по показателям молочной 68 продуктивности

3.4.5. Молочная продуктивность коров с разными генотипами по бета- у^ казеину

3.4.6. Анализ распределения аллелей гена CSN2 в различных фенотипических группах коров по показателям молочной 72 продуктивности

3.4.7. Молочная продуктивность коров с разными генотипами по гену у^ гормона роста крупного рогатого скота

3.4.8. Анализ распределения аллелей гена BGH в различных фенотипических группах коров по показателям молочной 78 продуктивности

3.4.9. Молочная продуктивность коров с различными комплексными g^ генотипами по альфа-лактальбумину и бета-казеину

3.4.10. Молочная продуктивность коров в зависимости от сочетаний генотипов по каппа-казеину, альфа-лактальбумину, бета-казеину и 84 гормону роста крупного рогатого скота

3.5. Результаты гистологического исследования

4. ОБСУЖДЕНИЕ

5. ВЫВОДЫ

6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ 99 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Молекулярно-генетические и продуктивные особенности симментальского скота различного происхождения"

Актуальность проблемы

В условиях интенсификации молочного скотоводства все большее распространение находят породы крупного рогатого скота, которые в наибольшей степени отвечают требованиям промышленной технологии (Сельцов В.И., 1995, Стрекозов Н.И., 2006). В связи с этим, перед селекционерами стоит задача создать конституционально-крепких животных, способных в условиях высокомеханизированного производства реализовать высокую и стабильную продуктивность, сохраняя при этом хорошую плодовитость.

Одной из таких пород в России является симментальская порода крупного рогатого скота. Этих животных отличает высокая мясная и молочная продуктивность. Современные селекционные стратегии с целью повышения обильномолочности и приспособленности к промышленной технологии предусматривают использование в селекции скота этой породы краснопестрых голштинов (Дедов М.Д. и др., 1989, Прудов А.И. и др., 1989). На популяционном уровне это может повлечь за собой вымывание уникальных аллелей, свойственных симментальскому скоту. В связи с этим, актуальным является изучение аллелофонда симментальского скота различного происхождения по ДНК-маркерам локусов количественных признаков (QTL).

Опыт отечественных и зарубежных ученых показывает, что использование наряду с традиционной селекцией маркерной селекции, которая делает возможным оценку животных в раннем возрасте, не учитывая изменчивость признаков, обусловленную внешней средой, позволяет объективно оценивать истинный генетический потенциал животных, повышая эффективность селекционно-племенной работы в целом (Falaki М. et al., 1994, Калашникова JI.A. и др., 2000, Ardak A.D., 2005, Curi R. A. et al., 2005, Эрнст Л.К., Зиновьева H.A., 2008).

Научная новизна.

Впервые дана сравнительная характеристика различных генетических групп симментальского скота по ДНК-маркерам локусов количественных признаков - каппа-казеину (CSN3), альфа-лактальбумину (LALBA), бета-казеину (CSN2) и гормону роста (BGH). Выявлены различия в частотах встречаемости аллелей изучаемых ДНК-маркеров в различных фенотипических группах симментальского скота, отличающихся уровнем развития признаков молочной продуктивности (уровня удоя, процентного содержания жира и белка в молоке, количества молочного жира и белка). Выявлены особенности гистоструктуры мышечной ткани у молодняка улучшенного типа с различной долей кровности по симментальской породе.

Цели и задачи исследования.

Цель исследований заключалась в изучении молекулярно-генетических и продуктивных особенностей симментальского скота различного происхождения. Для достижения поставленной цели были решены следующие задачи:

1. Разработать модифицированную тест-систему для определения полиморфизма гена гормона роста у крупного рогатого скота;

2. Провести анализ полиморфизма генов белков молока (каппа -казеина, альфа-лактальбумина, бета-казеина) и гормона роста у различных генетических групп скота симментальской породы;

3. Изучить генетическую структуру популяций по исследуемым генам;

4. Установить связи генотипов изучаемых генов с показателями молочной продуктивности коров симментальской породы;

5. Изучить гистоструктуру мышечной ткани опытных групп животных.

Практическая значимость работы.

Предложена усовершенствованная тест-система для определения аллельных вариантов BGH. Выполнено, построение ДНК-профилей по CSN3, LALBA, CSN2 и BGH у различных генетических групп симментальского скота (симменталы отечественной селекции, симменталы австрийской селекции, симменталы улучшенного типа). Выявлены генотипы коров по CSN3, LALBA, CSN2 и BGH, а так же комплексные генотипы по изучаемым ДНК-маркерам, достоверно коррелирующие с показателями молочной продуктивности коров (уровнем удоя, процентным содержанием жира и белка в молоке, количеством молочного жира и белка). Основные положения, выносимые на защиту.

• Усовершенствованная тест-система для определения полиморфизма гена гормона роста у крупного рогатого скота.

• Аллельные профили различных генетических групп скота симментальской породы по ДНК-маркерам каппа-казеину, бета-казеину альфа-лактальбумину и гормону роста.

• Различия в частотах встречаемости изучаемых ДНК-маркеров в различных фенотипических группах симментальского скота, отличающихся уровнем развития признаков молочной продуктивности.

• Влияние генотипов исследуемых ДНК-маркеров на показатели молочной продуктивности коров симментальской породы.

Апробация работы.

Материалы диссертационной работы были доложены и обсуждены на:

- 3 международной научной конференции «Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных», ВИЖ,

2004 г.;

- 4 международной научной конференции «Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных», ВИЖ,

2005 г.;

- отчетных научных конференциях Центра биотехнологии и молекулярной диагностики ВИЖ, 2004, 2005 гг.;

- конференции Центра биотехнологии и молекулярной диагностики ВИЖ, 2011г.

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 6 работ, в том числе 1 - в журнале, рекомендованном ВАК РФ (Сельскохозяйственная биология, № 6, 2007), 1 - методические рекомендации, 3 - в сборниках трудов конференций, 1 - в журнале научных публикаций.

Структура и объем работы.

Диссертация изложена на 117 страницах, состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты, обсуждение, выводы, практические предложения, список литературы. Диссертационная работа содержит 27 таблиц и 41 рисунок. Список литературы включает 161 источник, в том числе 102 источника на иностранном языке.

Заключение Диссертация по теме "Генетика", Львина, Ольга Анатольевна

ВЫВОДЫ

1. Разработана модифицированная тест-система определения аллелей L и V гормона роста крупного рогатого скота (BGH). Тест-система экспериментально апробирована для диагностики аллельного полиморфизма BGH у 315 животных различных генетических групп симментальской породы и голштинской красно-пестрой породы.

2. Определены генотипы каппа-казеина (CSN3) в различных генетических группах симментальской породы в сравнении с животными гоштинской красно-пестрой породы. Частота встречаемости аллеля А варьировала от 63,7% в группе коров отечественной селекции до 77,6% в группе коров австрийской селекции против 63,3% в группе голштинского красно-пестрого скота. Выявлена изменчивость по удою, содержанию белка и количеству молочного жира в молоке коров с различными генотипами по CSN3. Чистопородные коровы симментальской породы отечественной селекции с генотипом АА достоверно превышали по удою коров с генотипом АВ на 467 кг (Р<0,01), по содержанию белка в молоке на 0,12% (Р<0,05) и по количеству молочного жира на 17 кг (Р<0,01). Коровы австрийской селекции с генотипом ВВ по содержанию белка превышали коров с генотипом АА на 0,15% (Р<0,05).

3. Определены генотипы коров различных генетических групп симментальской породы по альфа-лактальбумину (LALBA). Частота встречаемости аллеля А различалась в зависимости от популяции и варьировала от 72,6 до 87,5% против 76,7% в группе голштинского красно-пестрого скота. Выявлена достоверная разница между коровами австрийской селекции с различными генотипами по LALBA по удою (ВВ>АВ, 564 кг, Р<0,01) и по содержанию жира в молоке (АА>ВВ, 0,2%, Р<0,001). У коров улучшенного типа отмечена разница между генотипами по содержанию жира в молоке (АВ>ВВ, 0,1%, Р<0,05), у коров австрийской селекции - по количеству молочного жира (АВ>АА, 13 кг, Р<0,05).

4. Изучены аллельные профили коров симментальской породы по бета-казеину (CSN2). Частота встречаемости аллеля А варьировала от 96,5% в группе до 100% у коров отечественной селекции против 93,3% в группе красно-пестрого голштинского скота. У чистопородных коров австрийской селекции была отмечена статистически достоверная разница между генотипами по содержанию жира (АВ>АА, 0,36%, Р<0,001) и количеству молочного жира (АА>АВ, 10 кг, Р<0,001).

5. Исследование полиморфизма BGH у скота симментальской породы показало, что частота встречаемости аллеля L варьировала от 69,6% у коров австрийской селекции до 97,1% у коров отечественной селекции против 93,3% в группе красно-пестрого голштинского скота. Коровы австрийской селекции с генотипом LL по BGH превосходили коров с генотипом LV по содержанию жира в молоке на 0,18% (Р<0,01) и по содержанию белка - на 0,2% (Р <0,001).

6. Анализ молочной продуктивности коров в зависимости от генотипа по комплексу ДНК-маркеров показал наличие достоверной разницы у коров австрийской селекции с различными генотипами по LALBA и CSN2 по удою (АВ/АА>АВ/АВ, 556 кг, Р <0,01 и ВВ/АА>АВ/АА, 528 кг, Р <0,05) и содержанию жира в молоке (АА/АА>ВВ/АА, 0,2%, Р<0,01; АВ/АА>ВВ/АА, 0,17%, Р<0,05; и АВ/АВ>АВ/АА, 0,35%, Р <0,01). У коров улучшенного типа выявлена зависимость АА/АА>ВВ/АА, 0,06%, Р<0,05. Были выявлены достоверные различия по количеству молочного белка в молоке коров австрийской селекции (АА/АА>АВ/АА, 12 кг, Р<0,05). У коров австрийской селекции в зависимости от генотипа по CSN3, LALBA, CSN2 и BGH выявлена достоверная разница по содержанию жира в молоке (AA/AA/AA/LL>AA/AA/AA/LV, 0,30%, Р<0,05), а также по содержанию белка в молоке (AA/AA/AA/LL>AA/AA/AA/VV, 0,13%, Р<0,001).

7. Результаты морфометрических исследований мышечных волокон в группах скота с различной долей кровности по симментальской породе (I -62%, II - 82%, III - 94%) показали наибольший диаметр мышечных волокон полусухожильного мускула у животных II группы (59,6 мкм). В группах I и III данный показатель составил, соответственно, 50,0 и 52,2 мкм. Средний диаметр мышечных волокон длиннейшей мышцы спины на разной глубине залегания в группах I, II и III составил, соответственно, 49,9-55,1, 55,6-58,3 и 49,8-59,4 мм. Исследования включений жировой ткани в состав мышц показали повышение объема жировых включений с увеличением доли кровности по симментальской породе.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Лабораториям, занимающимся ДНК-диагностикой, рекомендуем использовать модифицированную нами тест-систему определения генетического полиморфизма по гену гормона роста крупного рогатого скота. Генотипирование животных по комплексу ДНК-маркеров позволяет проводить селекцию по основным признакам продуктивности молочного скота.

100

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Львина, Ольга Анатольевна, Дубровицы

1. Бадагуева, Ю.Н. Исследование полиморфизма гена каппа-казеина у крупного рогатого скота и родственных видов / Бадагуева Ю.Н., Сулимова Г.Е., Удина И.Г. // Молекулярно-генетические маркеры животных: Тез. докл. II международной конф.-Киев. 1996.-С.5.

2. Балыданов, А.И. Пути преобразования симментальского скота с использованием красно-пестрой голштинской породы / Балыданов А.И. // Дис. Доктора с.-х. наук.- Саранск.- 1987. С.ЗЗЗ.

3. Бальцанов, А.И. Рост и развитие %-кровных симментал х голштино-фризских телок / Бальцанов А.И., Прудов А.И., Вельматов А.Н. // В кн.: кормление разведение с.-х. животных. — Саранск. 1984. - С. 56-58.

4. Баяхметов, К.Б. Продуктивные качества помесей симментальской, австрийской пятнистой и красно-пестрой голштинской пород / Баяхметов К.Б. // Автореф. дис.канд. с.-х. наук.- Алма-Ата.- 1984.-С. 20.

5. Бегучев, А.П. Направление племенной работы с симментальской породой в условиях интенсивного ведения молочного скотоводства / Бегучев А.П., Дедов М.Д. // Животноводство.- 1976. N1. - С.20-26.

6. Бойко, И.А. Откормочные и мясные качества помесей симментальская х красно-пестрая голштинская / Бойко И.А., Афанасьев П.И., Теребило H.A. // Животноводство. 1987. - №8.- С. 12-14.

7. Бондарчук, М.Н. Улучшение симментальского скота в Алтайском крае / Бондарчук М.Н., Мудриченко В.Ф. // Выведение новой красно-пестрой породы молочного скота.- М., 1987.- Вып.4.- С.75-81.

8. Гере, Т. Опыт скрещивания голштино-фризской породы скота / Гере Т. // Международный с.-х. журнал. 1983. - №3.- С.87-92.

9. Гладырь, Е.А. ДНК-диагностика вариантов генов каппа-казеина и бета-лактоглобулина у крупного рогатого скота / Гладырь Е.А. // Автореф. дис. канд. биол. наук / Дубровицы. 2001. - С.20.

10. Дедов, М.Д. Симментальский и сычевский скот СССР / Дедов М.Д., Григорьев Ю.Н. // М.: Колос. 1972. - С.6.

11. Дедов, М.Д. Совершенствование палево-пестрого скота в СССР / Дедов М.Д., Тимофеев Ю.П. // Зоотехния. 1989. - №1. - С.22-27.

12. Дзюба, Н.Ф. Воспроизводительная способность и молочная продуктивность коров в племенных хозяйствах симментальского скота/Дзюба Н.Ф. //Труды ВИЖа. -М. 1968. -т.31. - С.106-109; 148-154.

13. Дубовцева, JI.A. Наследование производственных типов симментальского скота / Дубовцева, JI.A. //В кн.: Сб. науч. трудов ВИЖа.- 1971.-Вып.22.-С.9-11.

14. Жебровский, Л.С. Связь полиморфных белков с продутивностью черно-пестрого скота / Жебровский Л.С., Бабуков A.B., Митютько В.Е. // Животноводство. 1977. - №7. - С.25-27.

15. Журавель, Е.В. О полиморфизме по локусу к-казеина молока у различных пород крупного рогатого скота / Журавель Е.В., Глазко В.И. // Сельскохозяйственная биология. 1999. - N2. - С. 120-124.

16. Журавлёва, Г.В. Экстерьерные особенности Австрийского симментала / Журавлёва Г.В. // Материалы межрегиональной научно практической конференции молодых учёных и специалистов, посвященной 90 лет ВГАУ. — Воронеж. -2003. 4.2. - С.173-175.

17. Зиновьева, H.A. Возможности использования ДНК-маркеров продуктивных качеств животных в практической селекционной работе / Зиновьева H.A. // Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных. — Дубровицы. 2003. - С.33-39.

18. Зиновьева, H.A. Диагностика различных аллельных вариантов ДНК «single tube» методом аллелеспецифической полимеразной цепной реакции / Зиновьева H.A., Васичек Д., Айгнер Б., Попов А.Н., Брем Г. // Биотехнология. 1996. - №6 -С.45-49.

19. Зиновьева, H.A. Методические рекомендации по использованию метода полимеразной цепной реакции в животноводстве / Зиновьева H.A., Попов А.Н., Эрнст Л.К. // Дубровицы: ВИЖ. 1998. - С.36.

20. Зиновьева, H.A. Методические рекомендации по использованию метода полимеразной цепной реакции в животноводстве / Зиновьева H.A., Попов А.Н., Эрнст Л.К. // Дубровицы: ВИЖ. 1998. - С.36.

21. Зиновьева, H.A. Подготовка проб, выделение ДНК и оптимизация ПЦР / Зиновьева H.A. // Методы исследований в биотехологии с/х животных. ВИЖ. -2002. - С.33-45.

22. Измайлов, Г.Н. Мясная продуктивность симментал х голштинских помесей / Измайлов Г.Н. // Повышение продуктивности молочного скота / Всерос. НПО по племенному делу в животноводстве. — М. 1992. - С.54-59.

23. Костюнина, О.В. Молекулярная диагностика генетического полиморфизма основных белков молока и их связь с признаками молочной продуктивности / Костюнина О.В. // Автореф. дис. канд. биол. наук / Дубровицы. 2005. - С.24.

24. Кушнер, Х.Ф. Полиморфизм белков и его значение в генетике и селекции животных / Кушнер Х.Ф., Зубарева Л.А., Гинговт В.Е., Новик И.Е. // М. -Агропромиздат. 1968. — С. 128.

25. Кушнер, Х.Ф. Полиморфизм белков и его значение в генетике и селекции животных / Кушнер Х.Ф., Зубарева JI.A., Гинговт В.Е., Новик И.Е. // М.-Агропромиздат. 1968. - С.128.

26. Логинов, Ж.Г. Эффективность скрещивания местных пород скота с голштинами и проблема оценки производителей по качеству потомства / Логинов Ж.Г. // С.-х. биология: 1984. - №5. - С.15-18.

27. Львина, O.A. Диагностика полиморфизма гена гормона роста у коров симментальской породы / Львина O.A., Сельцов В.И., Зиновьева H.A., Стрекозов

28. Н.И. Научные труды ВИЖа // Всерос. гос. науч. исслед. ин-т животноводства. — 2005. -B.63.-T.2.- С. 192-196.

29. Макаренко, Н.П. Мясные качества симментальских, помесных голштинских и монбельярдских бычков / Макаренко Н.П. // Использование голштинской породы для интенсификации селекции молочного скота / Тез. докл. — М.- 1987. — С.98-99.

30. Мамонтов, Н.И. Рост, развитие и мясные качества бычков симментальской, черно-пестрой и их голштино-фризских помесей в условиях Нижнего Поволжья / Мамонтов Н.И.// Автореф. дис. . канд. с.-х. наук. — Персиановка.- 1984. — С. 18.

31. Марченко, Г. Использование симментальского скота и проблема сохранения его генофонда / Марченко Г., Барышникова К. // Молочное и мясное скотоводство. — 2002. № 6. — С.4-6.

32. Меркурьева, Е.К. Генетика. / Меркурьева Е.К., Абрамова З.В., Бакай A.B., Кочиш И.И. // М.: Агропромиздат. 1991. - С.444.

33. Меркурьева, Е.К. Генетические основы селекции в скотоводстве / Меркурьева E.K. //М.: Колос. 1977. - С.238.

34. Мкртчян, Ш.А. Мясная продуктивность помесей симментальская х красно-пестрая голштинская / Мкртчян Ш.А., Гейшин М.А., Красюков А. А. // Зоотехния.- 1993. N9. - С.20-23.

35. Огрызкин, Г.С. Программа по выведению красно-пестрой породы крупного рогатого скота / Огрызкин Г.С., Прудов А.И., Опиак М.Г., Дедов М.Д. // М. 1985. -С.32.

36. Плохинский, H.A. Биометрия / Плохинский H.A. // М.: Издательство Московского университета. 1970. — С.366.

37. Прудов, А.И. Программа выведения новой красно-пестрой молочной породы в РСФСР / Прудов А.И., Мамонтов Н.И., Дунин И.М. // ВНИИплем. Лесные поляны. - 1989.-С. 19.

38. Прудов, А.И. Программа совершенствования палево-пестрых пород скота в СССР на период до 2000 года / Прудов А.И., Дедов М.Д., Тимофеев Ю.П. // ВИЖ.- Дубровицы. 1989. - С.34.

39. Сулимова, Г.Е. Анализ полиморфизма ДНК кластерных генов у крупного рогатого скота: гены казеинов и гены главного комплекса гистосовместимости (BOLA) / Сулимова Г.Е., Соколова С.С., Семикозов О.П. // Цитология и генетика. 1992.- №5. -С. 18-26.v

40. Федотова, Р.В. Воронежцы предпочитают симменталов / Федотова Р.В. // Вести с выставки. 2002. — С. 15-16.

41. Aleksander, L.J. Isolation and characterization of the bovine kappa-casein gene / Aleksander L.J., Stewart A.F., Mackinlay A.G., Kapelinskaya T.V., Tkach T.M., Gorodetsky S.I. //Molec. Reprod. Develop. 1988. - V.36. -P.291-296.

42. Ardak, A.D. Effects of genetic variants in milk protein on yield and composition of milk from Holstein-Friesian and Simmentaler cows / Ardak A.D. // South African Journal of Animal Science. 2005. - №35(1). - P.41-47.

43. Arthur, P. F. Double-muscling in cattle: A review / Arthur P. F. // Aust. J. Agric. Res. 1995. - №46. - P.1493-1515.

44. Arthur, P. F. Heterosis, maternal and direct effects in double-muscled and normal cattle: I. Reproduction and growth traits / Arthur P. F., Makarechian M., Price M. A. and Berg R. T. // J. Anim. Sci. 1989. - №67. - P.902-910

45. Aschaffenburg, R. Occurrence of different beta-lactoglobulins in cow's milk / Aschaffenburg R., Drewry J. // "Nature". 1955. - V.l76. -P.218-219.

46. Averdunk, G. Vorlaufige Ergefanise aus der Heuzunn von Rotbunten Holstein-Friesian mit Fleckvieh in Bauern / Averdunk G., Gottschalk A., Krauslich H., Sohwarz E. // Bauer. Landw. Jahrbuch. 1975. - H.5. - P.756-758.

47. Barendse, W. DNA markers for meat tenderness / Barendse W. // Patent W002064820. 2002

48. Bauman, D. E. Bovine somatotropin: review of an emerging animal technology / Bauman D. E. // J. Daily Sei. 1992. - №75. - P.3432-3451.

49. Bauman, D.E. Bovine somatotropin and lactation: From basic science to commercial application / Bauman D.E. // Dornest. Anim. Endocrinol. 1999. - №17. — P.101-116.

50. Beckmann, J.S. Restriktion fragment length polymorphisms in genetic improvement / Beckmann J.S., Soller M. // Methodologies mapping and costs. 1983. - P.35-43

51. Bell, K. Amino acid composition and peptide maps of ß-lactoglobulin variants / Bell K., McKenzie H.A., Shaw D.C. // Biochim. Biophis. Acta. - 1968. - V.154 -P.284-294.

52. Bialock, J. E. The syntax of immuno-neuroendocrine communication / Bialock J. E. //Immun. Today. 1994. -№15.-P.504-511.

53. Bleck, G.T. Correlation of the alpha-lactalbumin (+15) polymorphism to milk production and milk composition of Holstein / Bleck G.T., Bremel R.D. // J. Dairy Science. 1993. - V.76. - P.2292-2298.

54. Bleck, G.T. Sequense and single-base polymorphisms of the bovine alpha-lactalbumin 5'-flanking region / Bleck G.T., Bremel R.D. // Gene. 1993. -V.126. -P.213-218.

55. Bodner, M. The pituitary-specific transcription factor GHF-1 is a homeobox-containing protein / Bodner M., Castrillo J.L., Theill L.E., Deerinck T., Ellisman M. and Karin M.//Cell. 1998. - №55.-P.505-518.

56. Boland, M. Changing the milk supply to increase cheese yield: the Kaikoura experience / Boland M., Hill J. and O'Connor P. // In: Milk Composition, British Society of Animal Science Occasional Publication. 2000. - №25. - P.313-316.

57. Breier, B. H. The regulation of postnatal growth: nutritional influences on endocrine pathways and function of the somatotrophic axis / Breier B. H. and Gluckman P. D. // Livst. Prod. Sci. -1991. №27. - P.77-94.

58. Bronczek, R. R. Response of somatotropin, insulin, prolactin, and thyroxine to selection for milk yield in Holsteins / Bronczek R. R., Young C. W., Wheaton J. E. and Miiler K. P. // J. Dairy Sci. 1988. - №71. - P.2470-2479.

59. Buchanan, F. C. An association between a leptin single nucleotide polymorphism and milk and protein yield / Buchanan F. C., Van Kessel A. G., Waldner C., Christensen D. A., Laarveld B. and Schmutz S. M.// J. Dairy Sci. 2003. - 86. - P.3164-3166.

60. Casas, E. Association of myostatin on early calf mortality, growth, and carcass composition traits in crossbred cattle 1,2 / Casas E., Bennett G. L., Smith T. P. L.and Cundiff L. V. // J. Anim. Sci. 2004. - №82. - P.2913-2918

61. Casas, E. Effects of calpastatin and u-calpain markers in beef cattle on tenderness traits / Casas E., White S.N., Wheeler T.L., Shackelford S.D., Koohmaraie M., Riley

62. Curi, R.A. Association between IGF-I, IGF-IR and GHRH gene polymorphisms and growth and carcass traits in beef cattle" / Curi R.A., de Oliveira H.N., Silveira A.C., Lopes C.R. //LivestockProduction Science. 2005. - № 94(3). - P. 159-167.

63. Dario, C. Polymorphism of growth hormone GHl-AluI in Jersey cows and its effect on milk yield and, composition / Dario C., Carnicella D., Ciotola F., Peretti V., Bufano G. // Asian. Australasian Anim. Sci. 2008. - №21. - P.l-5.

64. Di Stasio, L. Lack of association of GH1 and POU1F1 gene variants with meat production traits in Piemontese cattle / Di Stasio L., Sartorel S., Albera A. // Animal Genetics. 2002. - № 33(1). -P.61.

65. Dierkes, B. Partial genomic structure of the bovine Pitl gene and characterization of a Hinf I transition polymorphism in exon 6 / Dierkes B., Kriegesmann B., Baumgartner B.G. and Brenig B. // Anim Genet. 1998. - №29. - P.405.

66. Dybus, A. Association of Growth Hormone and Prolactin genes polymorphisms with milk production traits in Polish Black and White Cattle / Dybus A. // Anim. Sci. 2002. №20. - P.203-212.

67. Erhardt, G. K-caseins in bovine milks. Evidence for a further allele ( k-CnE) in different breeds / Erhardt G. // J. Anim. Breed. Genet. 1989. - №106. - P.225-231.

68. Frank, G., Braunizer G., Milchwissenschaft. -1967. V.20. -P.361-365.

69. Fujii, J. Identification of a mutation in porsine ryanodin receptor associated with malignant hyperthermia / Fujii J., Otsu K., Zorzato F., Deleon S., Khanna V.K., Weiler J. E., O'Brien P.J., Maclennan D.H. // Sciencce. -1991. V.253. - P.448-451.

70. Gonzalez, R. R. Leptin and reproduction / Gonzalez R. R., Simon C., Caballero-Campo P., Norman R., Char-donnens D., Devoto L. and Bischof P. // Hum. Reprod. -2000. №6. - P290-300.

71. Groschlaude, F. Deterministe genetique des caseines kappa du lait de vache; etroite liaison du locus kappa-casein avec les loci alfa SI-casein et beta-casein /

72. Groschlaude F., Oujolle J., Gamier J., Ribadeau-Dumas B. // Comptes rendus de F academic des Sciences. Paris. - 1965. —P.5299.

73. Ftoj, S. Possible association of growth hormone gene polymorphism with growth hormone release in calves from lines selected for high and low milk fat yield / Haj S., Lovendahl P. and Sejrsen K. // Acta Agric.- Scand. 1993. - №43. -P.129-135.

74. Horvat, S. Interval mapping of high growth (hg), a major locus that increases weight gain in mice / Horvat S., Medrano J.F. // Genetics. 1995. - №139. - P.1737-1748.

75. Houseknecht, K. L. The biology of leptin: a review / Houseknecht K. L., Baile C. A., Matteri R. L. and Spurlock M.E. // J. Anim. Sci. 1998. - №76. - P.1405.

76. Kambadur, R. Mutations in myostatin (GDF8) in double-muscled Belgian Blue and Piedmontese cattle / Kambadur R., Sharma M., Smith T.P.L. and Bass JJ. // Genome Research. 1997. - №7. -P.910-815.

77. Kehrli, M.E. Leukocyte adhesion deficiency among Flolstein cattle / Kehrli M.E., Shuster D.E., Ackermann M.R. // Cornell Vet. 1992. - V.82. - P. 103-109.

78. Lagonigro, R. A new mutation in the coding region of the bovine leptin gene associated with feed intake / Lagonigro R., Wiener P., Pilla F., Woolliams J.A. and Williams J.L. //Animal Genetics. 2003. - №34. -P.371-374.

79. Lagziel, A. DNA sequences of SSCP haplotypes at the bovine growth hormone (bGH) gene / Lagziel A., Soller M. // Anim. Genet. 1999. - №30(5). - P.362-365.

80. Lien, S.Comparison of milk protein allele frequencies in Nordic cattle breeds// Lien S., Kantanen J., Olsaker I., Holm L-E., Eythorsdottir E., Sandberg K., Dalsgard B., Adalsteinsson S. //Animal Genetics. 1999. -N30. - P.85-91.

81. Lovendahl, P. The effect of genetic selection for milk yield on the response to growth hormone secretagogues in immature cattle / Lovendahl P., Angus K. D. and Woolliams J. A. //J. Endocrinol. 1991. - № 128. -P.419-424

82. Lervendahl, P. Endogenous growth hormone release in calves selected for milk fat yield / L0vendahl P., and Sejrsen K. // Anim. Prod. 1993. - №56. - P.285-291.

83. Lucy, M. C. Genetic polymorphism within the bovine somatotropin (bST) gene detected by polymerase chain reaction and endonuclease digestion / Lucy M. C., Hauser

84. S. D., Eppard P. J., Krivi G. G., Clark J. H., Bauman D. E. and Collier R. J. // J. Dairy Sci. 1991.-№74.-P.284.

85. Lukes, A. J. Response to selection for milk yield and metabolic challenges in primiparous dairy cows. Dom / Lukes A. J., Barnes M. A. and Pearson R. E. // Anim. Endocrinol. 1989. - №6. - P.287-293.

86. McPherron, A. C. Regulation of skeletal muscle mass in mice by a new TGF-b superfamily member / McPherron A. C., Lawler A.M. and Lee S.-J. // Nature. 1997. -№387. — P.83-90.

87. Moody, D.E. Restriction fragment length polymorphism in amplification products of the bovine PIT1 gene assignment of PIT 1 to bovine chromosome 1. / Moody D.E., Pomp D. and Barendse W. // Anim Genet. 1995. - №26. -P.45-47.

88. Nielsen, V.H. Association of DNA polymorphism in the growth hormone gene with basal-plasma growth-hormone concentration and production traits in pigs / Nielsen V.H., Larsen N.J., Agergaad N. // Anim. Breed. Genet. 1995. - №112(33). - P.205-212.

89. Ng-Kwai-Hang, K.F. Genetic polymorphism of milk proteins: Relationships with production traits, milk composition and technological properties / Ng-Kwai-Hang K.F. // Animal Science.-1998.-V78.-P. 131 -145.

90. Ng-Kwai-Hang, K.F. Relationships between Milk Protein Polymorphizms and Major Milk Constituents in Holstein-Fresian Cows / Ng-Kwai-Hang K.F., Haies J.F., Moxley J.E. // Journal of Dairy Science. 1986. - V69. - N1. - P.22-26.

91. Peel, C. J. Somatotropin and lactation / Peel C. J. and Bauman D.E. // J.Dairy Sei. 1987. - №70. -P.474-479.

92. Pomp, D. Mapping of leptin to bovine chromosome 4 by linkage analysis of a PCR-based polymorphism / Pomp D., Zou T., Clutter A. C. and Barendse W. // J. Anim. Sei. 1997. - №75. -P.1427.

93. Renaville, R. Pitl gene Hinf IRFLP and growth traits in double-muscled Belgian Blue cattle / Renaville R., Gengier N., Parmentier I., Mortiaux F., Massart S., Bertozzi C., Burny A. and Portetelle D. // J Anim Sei. 1997. - №75 (Suppl. 1). - P.146.

94. Ruegsegger, A. Die wichtigsten Milchleistungsergebnisse der Simmental x Red Holstein Kreuzungstiere im Kontrolljahr 1976/1977/ Ruegsegger, A. // Mitt, Schweiz. Fleckviehzuchtverband. 1978. - No.2. - P. 17-27.

95. Saici, R.K. Primer-directed enzymanic amplification of with a thermostable DNA polymerase / Saici R.K., Gelfand D.et. al. // Science. 1988. - P.487-491.

96. Sartore, S. Analisi genetica del locus GH (ormone della crescita) nella razzabovina Piemontese / Sartore S. and Di Stasio L. // Proceedings of the 54th Convegno

97. Societa Italiana Delle / Scienze Veterinarie (LIV). 2000. - P.411-412.

98. Schaar, J. Variation in Milk protein composition / Schaar J. // Studies on k-casein and B-lactoglobulin genetic polymorphism and milk plasmin / Thesis. Uppsala. — 1986. -P.71.

99. Schlee, P. Influence of growth hormone genotypes on breeding values of Simmental bulls / Schlee P., Graml R., Rottmann O. and Pirchner F. // J Anim Breed Genet. 1994. -№111.- P.253-256.

100. Schmidlin, I.F. Ergebnisse von Populationsanalysen bei Simmentaler Fleckvieh und dessen Kreuzungen mit Roten Holstein-Frisians / Schmidlin, I.F. // Abh.- Zurich. -1979.-P.116.

101. Schmutz, S.M. Mapping collagenase and a QTL to beef tenderness to cattle chromosome 29 / Schmutz S.M., Buchanan F.C., Plante Y., Winkelman-Sim D.C., Aalhus J., Boles J.A., Moker J.S. // Plant and Animal genome VHI Conference. -San Diego. CA. - 2000.

102. Sejrsen, K. Effect of exogenous bovine somatotropin on pubertal mammary development in heifers / Sejrsen K., Foldager J., Sorensen M. T., Akem R. M. and Bauman D. E. //J. Daily Sei. 1986. - №69. -P.528-1535.

103. Shuster, D.E. Identification and prevalence of a genetic defect that causes leukocyte adhesion deficiency in Holstein cattle / Shuster D.E., Kehrli M.E., Ackermann M., Gilbert R.O.// Proc. Natl. Acad. Sei. USA. - 1992. - V.89. - P.9225-9229.

104. Silva, L. F. Evidence for a local effect of leptin in bovine mammary gland / Silva L. F. P., VandeHaar M. J., Weber Nielsen M. S. and Smith G. W. // J. Dairy Sei. 2002. - №85. - P.3277-3286.

105. Smith, T.P.L. Bovine CAPN1 maps to a region of BTA29 containing a quantitative trait locus for meat tenderness / Smith T.P.L., Casas E., Rexroad HI C.E., Kappes S.M. and Keele J.W. // J. Anim. Sei. 2000. - № 78. - P.2589.

106. Sorensen, P. Polymorphism in the Bovine Growth Hormone Gene Affects Endocrine Release in Dairy Calves / Sorensen P., Grochowska R., Holm L., Heniyon M., Lovendahl P. //J. Dairy Sei. 2002. - №85. - C.1887-1893.

107. Stasio, L. Di. Polimorfismo biochimici del latte nella razza bovina Grigio Alpina / Stasio L. Di., Merlin P. // Rivista di Zootecnia e Veterinaria. 1979. - №2 - C.64-67.

108. Sudre, K. Transcriptome analysis of two bovine muscles during ontogenesis / Sudre K., Leroux C., Pietu G., Cassar-Malek I., Petit E., Listrat A., Auffray C., Picard B., Martin P. and Hocquette J.F.// Journal of Biochemistry. 2003. - №133. - P.745-756.

109. Thaller, G. DGAT1, a new positional and functional candidate gene for intramuscular fat deposition in cattle / Thaller G., Kühn C., Winter A., Ewald G., Bellmann O., Wegner J., Zühlke H., Fries R. // Animal Genetics. 2003. - №34. - P.354-357.

110. Voelker, G.R. Single-base polymorphisms within the 5-flanking region of the bovine a-lactalbumin gene / Voelker G.R., Bleck G.T., Wheeler M.B. // Journal of Daily Science. 1997. - V.80. -P.194-197.

111. Vukasinovic, N. Association of growth hormone loci with milk yield traits in Holstein bulls / Vukasinovic N., Denise K., and Freeman A. E. // J. Dairy Sci. 1999. -№82.-P.788.

112. Walsh B. Microarrays and beyond: What potential do current and future genomics tools have for breeders? / Walsh B., Henderson D. //Journal of Animal Science. 2004. - №82(E. Suppl.). - P.292-299.

113. Woolliams, J. Endogenous pulsing and stimulated release of growth hormone in daily calves of high and low genetic merit / Woolliams J., Angus K. D. and Wilson S. B. // Anim. Prod. 1993. -№56. -P.l-8.

114. Woychik, R. P. Cloning and nucleotide sequencing of the bovine growth hormone gene / Woychik R. P., Camper S. A., Lyons R. H., Horowitz S., Goodwin E. C. and Rottman F. M. // Nucleic Acids Res. 1982. - №10. - P.7197-7210.

115. Zhang, H. M. Nucleotide sequence determination of a bovine somatotropin allele / Zhang H. M., Brown D. R., Denise S. K. and Ax R. L. //Anim. Genet. 1992. -№23.-P.578.

116. Zhang, H. M. Bovine growth hormone gene frequencies in samples of U.S. AI bulls (Abstr.) / Zhang H. M., Maddock K. C ., Brown D. R., Denise S. K. and Ax R. L. // J. Anim. Sci. 1993. - №71. - P.93.