Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Микробиологические аспекты безопасности донорства крови в Самарской обл.

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Микробиологические аспекты безопасности донорства крови в Самарской обл."

На правах рукописи

Лямин Артем Викторович

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ БЕЗОПАСНОСТИ ДОНОРСКОЙ КРОВИ В САМАРСКОЙ ОБЛАСТИ

03 00 07 - микробиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

ООЗШЗа1

Челябинск, 2008

003163913

Работа выполнена на кафедре общей и клинической микробиологии, иммунологии и аллергологии в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Самарский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор Жесткое Александр Викторович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Зурочка Александр Владимирович доктор медицинских наук,

профессор Потатуркина-Нестерова Наталия Иосифовна

Ведущее учреждение: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Смоленская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Защита диссертации состоится 2008 г в _часов на

заседании диссертационного совета Д 208 117 03 при Государственном образовательном учреждении профессионального образования «Челябинская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (454092, г Челябинск, ул Воровского, 64)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Государственного образовательного учреждения профессионального образования «Челябинская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (454092, г Челябинск, ул Воровского, 64)

Автореферат разослан

Ученый секретарь диссертационного совета

доктор медицинских наук,

профессор

Л Ф Телешева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы

В конце XX - начале XXI вв в Российской Федерации отмечался резкий рост заболеваемости венерическими заболеваниями, вирусными гепатитами и другими инфекциями, передающимися трансфузионным путем [Покровский В И , Онищенко Г Г, Черкасский Б Л., 2003] По данным на конец 2005 года в России на учете состояло около 300000 ВИЧ-инфицированных Согласно экспертным оценкам, их фактическое число было примерно в три раза больше Еще более неблагоприятная ситуация складывалась по распространенности среди населения вирусных гепатитов [Онищенко Г Г 2006] При этом с каждым годом возрастала потребность в донорской крови, ее компонентах и медико-биологических препаратах, полученных на ее основе [Шевченко Ю.Л., 2000, Козинец Г И , 2001; Жибурт Е Б, 2003]

В связи с особенностями географического расположения и социально-экономического развития Самарская область отмечается высоким уровнем заболеваемости гемоконтактными инфекциями С целью повышения эффективности профилактики трансфузионной передачи ряда инфекций в регионе в 2001 году была принята областная целевая программа «Обеспечение вирусобезопасности донорской крови, ее компонентов и препаратов, заготавливаемых учреждениями службы крови Самарской области» [Косов А И, 2005]

Безусловно, с изменением эпидемиологической ситуации, необходим анализ степени риска инфицирования донорской крови возбудителями гемоконтактных инфекций Существующие стандарты не позволяют на 100% обеспечить безопасность донорской крови Необходим ее тщательный скрининг на все декретированные инфекции с использованием для тестирования заготовленной крови высокочувствительных методов прямого обнаружения возбудителя (полимеразная цепная реакция), а не косвенных методов (иммуноферментный анализ) Также необходима оценка применяемых методов обследования донорской крови с учетом уровня заболеваемости гемоконтактными инфекциями Из 48000 заготовленных в Самарской области в 2003-2004 годах доз крови при повторном тестировании в 94 случаях был обнаружен ВИЧ, в 230 случаях - вирусы гепатитов В и С В 2005-2006 годах было выявлено 44 положительных результатов повторного анализа донорской

крови на наличие вирусов гепатитов В и С, в 3 случаях был обнаружен ВИЧ при исследовании карантинизированной плазмы [Косов А И , 2007]

Не меньшую опасность представляет группа бактериальных инфекций, характеризующихся длительным периодом бессимптомной бактериемии [Sire J М , Michelet С., 1993, Haditch М , Binder L, 1994] Широкое распространение носительства среди здорового населения ряда условно патогенных бактерий также представляет реальную угрозу для донорства в связи с формированием бессимптомной бактериемии [Бухарин О В, 2002, Тец В В, 2003]. Это подтверждается учащением случаев бактериальной загрязненности донорской крови и, особенно, ее компонентов Также отмечается сохранение высокой заболеваемости совокупного населения Самарской области сифилисом [Жибурт Е Б, 2003] Кроме того, Самарская область длительный период являлась эндемичной по бруцеллезу, заболеваемость которым регистрировалась в 12 районах из 27

Цель исследования

Обосновать меры повышения микробиологической безопасности донорской крови в Самарской области на основе анализа распространенности среди доноров носительства условно патогенных микроорганизмов и оценки эффективности вирусологических и бактериологических методов исследования крови доноров

Задачи исследования

1 Оценить риск брака при заготовке крови на основе заболеваемости потенциальных доноров гемоконтактными вирусными инфекциями, сифилисом и бруцеллезом

2 Проанализировать эффективность применяемых в Самарской области вирусологических и бактериологических методов исследования безопасности донорской крови

3 Определить особенности микробиоценозов верхних дыхательных путей у доноров медицинских специальностей и выяснить распространенность фенотипов антибиотикорезистентности среди выделенных микроорганизмов

4 Разработать рекомендации для повышения эффективности бактериологической безопасности донорской крови

Научная новизна

Получены новые данные по заболеваемости потенциальных доноров гемоконтактными вирусными инфекциями, сифилисом и бруцеллезом в Самарской области На основе сравнительного анализа выявлены наиболее

эффективные методы оценки вирусологической безопасности донорской крови Впервые в Приволжском Федеральном округе проанализирована специфичность методов определения брака донорской крови, применяемых в отношении возбудителей сифилиса и бруцеллеза, с учетом распространенности данных инфекций среди потенциальных доноров

Впервые определено значение состояния микробиоценозов слизистых оболочек верхних дыхательных путей для обеспечения бактериологической безопасности донорской крови и ее компонентов. Проанализирована распространенность носительства полирезистентных штаммов микроорганизмов среди кадровых доноров крови

Практическая значимость

Разработаны рекомендации для повышения бактериологической безопасности донорской крови в Самарской области с учетом распространенности как патогенных, так и условно патогенных микроорганизмов среди доноров Проведенная оценка эффективности методов, применяемых для обеспечения вирусологической безопасности донорской крови, позволяет выбрать наиболее информативные из них, что можно использовать для совершенствования организации работы лабораторного звена службы крови

Результаты исследования внедрены в работу ГУЗ Самарская областная станция переливания крови, в учебную программу на кафедре общей и клинической микробиологии, иммунологии и аллергологии, кафедре инфекционных болезней с эпидемиологией ГОУ ВПО «СамГМУ Росздрава»

Основные положения, выносимые на защиту

1 Доля брака донорской крови зависит от уровня заболеваемости гемоконтактными вирусными и бактериальными инфекциями

2 Использование методов определения антител к инфекционным агентам в донорской крови и ее компонентах может давать ложноотрицательные и ложноположительные результаты, поэтому их применение является недостаточным для обеспечения микробиологической безопасности донорства

3 Медицинские работники - доноры крови и ее компонентов являются группой повышенного риска в отношении носительства условно патогенной микрофлоры, имеющей высокую степень антибиотикорезистентности, и могут быть рекомендованы в качестве доноров плазмы с отстранением их от донации эритроцитарной и тромбоцитарной масс

Апробация работы

Основные положения и результаты работы были доложены и обсуждены на III Всероссийской университетской научно-практической конференции молодых ученых и студентов по медицине (Тула, 2004), XI Всероссийском конгрессе «Экология и здоровье человека» (Самара, 2006), XVII Национальном конгрессе по болезням органов дыхания (Казань, 2007), научно-практической конференции «Актуальные вопросы медицины» (Самара, 2007), научном заседании кафедр общей и клинической микробиологии, иммунологии и аллергологии, инфекционных болезней с эпидемиологией и общей гигиены ГОУ ВПО «СамГМУ Росздрава» (Самара, 2007)

Публикации

По теме диссертации опубликовано 10 печатных работ

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы, посвященной материалам и методам исследования, трех глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка используемой литературы и двух приложений Диссертация изложена на 127 страницах машинописного текста Список литературы содержит 190 наименований, в том числе 82 зарубежных источника Работа иллюстрирована 14 таблицами, 26 рисунками

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования

В исследовании проводился анализ методов лабораторного обследования донорской крови и ее компонентов на предмет обнаружения биологических патогенных агентов и антител к ним Также была проведена оценка состояния микробиоценозов слизистых оболочек верхних дыхательных путей у 90 кадровых доноров медицинских и немедицинских специальностей в возрасте от 20 до 50 лет

Было проанализировано 180930 результатов анализов крови на наличие антител к ВИЧ-инфекции за период с 2003 по 2006 годы, на наличие антигенов ВИЧ - 29409 за 2005-2006 годы, антител к вирусным гепатитам В и С - 180930, антигена вируса гепатита С - 37295 за 2005-2006 годы, антител к бруцеллам -35386 за период с 2001 по 2006 годы и к возбудителю сифилиса - 244630 за период с 2001 по 2006 годы

Проведен анализ заболеваемости ВИЧ-инфекцией, вирусными гепатитами В и С, сифилисом и бруцеллезом на территории Самарской области за период с

1998 по 2006 годы При этом использовались методы ретроспективного эпидемиологического анализа многолетней динамики заболеваемости совокупного населения с оценкой направления и выраженности эпидемической тенденции

Проанализирован брак донорской крови и ее компонентов среди медицинских работников по инфекционным показателям за период с 2003 по 2006 годы

При оценке качественного состава микробиоценоза верхних дыхательных путей каждая группа доноров (медицинские и немедицинские работники) была разделена на две подгруппы по возрастным показателям- 20-34 года и 35-50 лет. Сравниваемые группы были однородны по полу Среди медицинских работников были представители как терапевтических (29 чел/64,4%), так и хирургических специальностей (1бчел/35,б%), средний медицинский персонал (24 чел /53,3%) и врачи (21чел /46,7%)

Работа проводилась на базе кафедры общей и клинической микробиологии, иммунологии и аллергологии ГОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет Росздрава» и на клинической базе кафедры - ГУЗ Самарская областная станция переливания крови Помимо стандартных методов определения антител против вирусных и бактериальных антигенов, которые используются в системе службы крови, нами были проанализированы современные методы прямого обнаружения антигенов в донорской крови и ее компонентах В первую очередь это методы полимеразной цепной реакции (ПЦР) диагностики вирусного гепатита С и ВИЧ

В работе были использованы следующие методы определения инфекционных агентов и антител к ним вирус гепатита В - ИФА, вирус гепатита С - ИФА, ПЦР, ВИЧ - ИФА, ПЦР, возбудитель сифилиса - реакция микроагглютинации, реакция связывания комплемента, иммуноферментный анализ (ИФА), возбудители бруцеллеза - реакция агглютинации

В соответствии с инструкцией, подготовленной коллективом ГУЗ Самарская областная станция переливания крови и сотрудников кафедры общей и клинической микробиологии, иммунологии и аллергологии ГОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет Росздрава», нами использовался следующий порядок проведения подготовки проб Донорская кровь забиралась в одноразовые пластиковые вакуумные стерильные пробирки с ЭДТА объемом не менее 10 мл, осторожно поворачивалась несколько раз (для перемешивания с антикоагулянтом) Пробирки доставлялись в ПЦР-лабораторию не позднее 6-ти часов с момента забора крови

В лаборатории проводилась пробоподготовка Из каждой пробирки отбиралась порция плазмы 1,5-3,0 мл в соответствующую пробирку на 5,0 мл, те формировался так называемый «архив» «Архивирование» производили с помощью роботизированной станции пробоподготовки - ИЗР производства фирмы «Текан» (Швейцария).

Затем пробирки с кровью и остаточным количеством плазмы передавались в ИФА-лабораторию для определения антител к ВИЧ и вирусу гепатита С После получения результатов из «архива» выбирались пробы положительные в ИФА

На следующий после забора крови день в лабораторию ПЦР пробирки с ИФА-отрицательными образцами устанавливались в ЯБР для создания пулов по 10-15-20 проб в каждом. В дальнейшем работа производилась с созданными пулами. Использовался классический порядок проведения ПЦР

Детекцию РНК методом гибридизационно-ферментного анализа - ГИФА -мы проводили в отдельном помещении сразу после амплификации

При обнаружении положительно реагирующих пулов проводилась задержка пула и оформление соответствующей документации. На следующий день в лаборатории ПЦР задержанный пул расшифровывался Со всеми входящими в него образцами плазмы проводился анализ ПЦР индивидуально При обнаружении образца плазмы, положительного в ПЦР, гемакон вместе с картой передавался сотруднику, ответственному за уничтожение абсолютного брака согласно действующим приказам

Помимо ИФА и ПЦР на ГУЗ Самарская областная станция переливания крови проводится обязательная 6-месячная карантинизация донорской плазмы с целью повышения уровня инфекционной безопасности

Исследование донорской крови на наличие антител к возбудителю сифилиса до 2006 года проводилось по стандартной схеме реакция связывания комплемента и реакция микроагглютинации на стекле С 2006 года определение антител к данному возбудителю проводили методом ИФА

Определение антител к бруцеллам ведется только у доноров из эндемичных по бруцеллезу районов С этой целью использовалась стандартная реакция агглютинации

В работе использовался классический микробиологический метод Всего было выделено и идентифицировано 319 штаммов микроорганизмов Использовался классический метод окраски по Граму Мазки микроскопировали под 1000-кратным увеличением светового микроскопа При микроскопии оценивались морфологические и тинкториальные свойства

микроорганизмов Для грибов рода Candida определяли морфологические признаки паразитической и сапрофитической фаз развития Определение сапрофитической и паразитической фазы грибов проводили в соответствии с рекомендациями А Ю Сергеева и Ю В Сергеева (2003)

У выделенных микроорганизмов определяли антибиотикорезистентность диско-диффузионным методом в соответствии с методическими указаниями МУК 4 2 1890-04 «Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам»

Дополнительно определяли фенотипические признаки выделения микроорганизмами р-лактамаз, р-лактамаз расширенного спектра действия и мегалло-Р-лактамаз

Определение штаммов Staphylococus spp, выделяющих пенициллиназы (Р-лактамазы), проводили по чувствительности микроорганизмов к оксациллину Для этого использовали диски с оксациллином, содержащие 1 мкг препарата

Для определения наличия у микроорганизмов семейства Enterobacteriaceae р-лактамаз расширенного спектра действия (БРЛС) использовался метод «двойных дисков»

Для фенотипического выявления продукции метапло-Р-лактамаз (МБЛ) у штаммов Р aeruginosa использовали метод «двойных дисков с ЭДТА» Постановку данного теста осуществляют по стандарту определения антибиотикорезистентности диско-диффузионным методом. В центр чашки помещают пустой диск, на который наносят 10 мкл 0,5 М раствора ЭДТА (рН 8,0), по бокам от него на расстоянии 15 мм между центрами дисков - диски с цефтазидимом (30 мкг), имипенемом (10 мкг) и меропенемом (10 мкг)

Оценку микробиоценоза слизистых оболочек проводили по количественному показателю (показатель микробной обсемененности) При этом нормальную микрофлору слизистой оболочки носа, задней стенки глотки и миндалин дифференцировали на три группы основную - ПМО > 4,5 !g КОЕ/тампон, добавочную - ПМО = 2,5-4,5 lg КОЕ/тампон, случайную - ПМО < 2,5 lg КОЕ/тампон [Паршута М И , 1998]

Наряду с количественными показателями при оценке микрофлоры биотопа определялась частота встречаемости таксонов в данном биоценозе (С), что рассматривается как характеристика постоянства микрофлоры [Сытник А В, 1994] Таксоны по частоте встречаемости классифицировались на три группы постоянная микрофлора (С>50%), добавочная микрофлора (С=25-50%) и случайная микрофлора (С<25%) [Домбровский И В , Бодрягина Е С , 1986].

Стабильность микрофлоры определяли по прочности формируемых ассоциаций бактерий в биоценозе С этой целью определяли коэффициент сопряженности таксонов Жаккарда Сопряженными считаются таксоны, для которых коэффициент Жаккарда выше 20,0 [Домбровский И В , Бодрягина Е С , 1986].

Все полученные данные подвергали математической обработке -вычисляли средние арифметические рядов, ошибки средних арифметических, стандартные отклонения, определяли коэффициент достоверности по Стьюденту [Лакин Г Ф, 1990, Медведев В В , 1997] Статистическая обработка данных проводилась на персональном компьютере с помощью программы Statistica V 6 0 ("StatSoft", USA) [Реброва О Ю, 2006]. Графическую обработку проводили с помощью пакета прикладных программ Microsoft Excel - 2000

Результаты исследования и их обсуждение

По результатам проведенного анализа заболеваемости населения Самарской области вирусными и бактериальными инфекциями с парентеральным путем передачи за период с 1998 по 2005 годы были отмечены особенности течения эпидемиологического процесса в регионе.

При анализе динамики заболеваемости населения Самарской области вирусным гепатитом В в 1999 и 2000 годах отмечался выраженный подъем (заболеваемость составила 138,15 и 101,13 на 100000 населения соответственно) с последующим спадом Максимальный темп прироста был зарегистрирован в период с 1998 по 1999 годы, максимальный темп снижения -с 2000 по 2001 год В 2005 году заболеваемость составила 9,28 на 100000 населения

В отношении заболеваемости вирусным гепатитом С в Самарской области можно отметить следующие закономерности подъем в 1999 и 2004 годах, с темпом прироста 34,42% и 12,13% соответственно Максимальная заболеваемость была зарегистрирована в 1999 году и составила 38,34 на 100000 населения В 2005 году заболеваемость составила 4,36 на 100000 населения

Ситуация по заболеваемости ВИЧ-инфекцией в Самарской области является наиболее неблагоприятной из всех вирусных инфекций с парентеральным путем передачи Максимальный подъем отмечался в 2001 году и составил 138,05 на 100000 населения В последующем произошел незначительный спад, несмотря на который распространенность данной нозологической формы среди населения сохраняется на достаточно высоком

уровне без значительного снижения В 2005 году она составила 43,78 на 100000 населения

Максимальный подъем заболеваемости сифилисом в Самарской области отмечался в период с 1998 по 2000 годы с пиком заболеваемости в 2000 году (221,37 на 100 000 населения) С 2001 года отмечалась выраженная тенденция к снижению заболеваемости данной инфекцией с темпом снижения 20-25% в год В 2005 году было зарегистрировано 58,83 случая на 100000 населения

В связи с тем, что медицинские работники являются достаточно стабильной группой кадровых доноров, отдельно была рассмотрена ситуация по заболеваемости гемоконтактными инфекциями среди медиков в Самарской области Общепризнан тот факт, что вирусный гепатит В является одним из основных профессиональных заболеваний медицинских работников [Косарев В В , 1998, Шахгильдян И В. и др, 2001, Измайлов Д В., 2002].

Общая ситуация по заболеваемости медицинских работников вирусными гепатитами с парентеральным путем передачи за период с 1998 по 2005 годы характеризуется выраженной тенденцией к снижению В Самарской области на сегодняшний день регистрируются единичные случаи инфицирования По данным Г Ф Васюковой (2005), в период с 1992 по 1997 годы ежегодно регистрировалось около 50 случаев инфицирования гепатитами

По результатам исследования по всем анализируемым инфекционным заболеваниям в период с 1998 по 2005 годы отмечается тенденция к снижению заболеваемости При этом, несмотря на снижение заболеваемости парентеральными инфекциями в целом, заболеваемость ВИЧ-инфекцией и распространенность носительства вирусного гепатита В в Самарской области сохраняется на высоком уровне (рисунок 1)

1898

1999

2000

2001 2002 годы

2003

2004

-Вирусный гепатит В

-Вирусный гепатите

-ВИЧ-инфекция —к— Сифилис

Рис. 1. Динамика заболеваемости внрусными гепатитами В, С, ВИЧ-инфекцией и сифилисом совокупного населения Самарской области в 1998-2005 годах (на 100000 населения)

За анализируемый период, заболеваемость бруцеллезом в Самарской области регистрировалась на уровне единичных случаев Всего было впервые диагностировано 8 случаев бруцеллеза, при этом все случаи имели производственный характер Также произошло сокращение количества эндемичных по бруцеллезу районов Самарской области с 12 до 4

После анализа современного уровня заболеваемости инфекциями с парентеральным путем передачи оценили эффективность и специфичность применяемых на ГУЗ Самарская областная станция переливания крови методов определения антител к инфекционным агентам и непосредственно антигенов в донорской крови

В соответствии с поставленными задачами была изучена структура брака донорской крови по наличию антител к вирусам гепатитов В и С, ВИЧ, возбудителям сифилиса и бруцеллеза

Наиболее неблагоприятной оказалась ситуация по браку крови в отношении носительства вирусного гепатита С За анализируемый период отмечается снижение брака по наличию антител к вирусу гепатита С, но сохраняется на достаточно высоком уровне Структура брака по наличию антител к ВИЧ и вирусу гепатита В практически не изменилась, несмотря на снижение распространенности данных инфекций среди населения.

Анализируя брак донорской крови по результатам ИФА за исследуемый период отдельно за каждый год, было отмечено, что максимальный брак донорской крови по ВИЧ был зарегистрирован в 2005 году и составил 0,24% от всех доз крови Для ВГВ и ВГС данный показатель был наибольшим в 2003 году - 215 (0,44%) и 854 (1,77%) случаев соответственно

С учетом того, что медицинские работники являются достаточно стабильной и активной группой доноров крови, был отдельно проанализирован брак донорской крови, полученной от данной категории При сравнении брака донорской крови, полученной от медицинских работников и доноров в целом за анализируемый период с 2003 по 2006 годы, по инфекционным показателям отмечено, что процент брака от общего количества кроводач у медицинских работников достоверно ниже, чем среди общего числа доноров Так, антитела к ВГВ среди крови, полученной от медицинских работников, были обнаружены в 0,01% от числа кроводач (в целом антитела к ВГВ среди доноров обнаруживались в 0,45% от общего числа кроводач) Брак по ВГС составил 0,17% от числа кроводач среди доноров медицинских специальностей (в целом, 1,77% от числа кроводач), по ВИЧ - 0,03% среди медиков и 0,25% от общего числа кроводач среди доноров в целом.

Максимальный процент брака по наличию антител к возбудителю сифилиса был отмечен в 2003 году (по данным РСК и MPC) - 97 случаев (0,24%). По данным ИФА в 2.006 году был зарегистрировано 236 (0,54%) случаев брака донорской крови. В первую очередь это обусловлено большей чувствительностью метода ИФА.

Анализируя структуру брака донорской крови по выявлению антител к бруцеллам в Самарской области, были отмечены следующие особенности. За период с 2001 по 2006 год обследовано 35386 доз крови, полученной от доноров из эндемичных по данному заболеванию районов. Было отбраковано от кроводач 299 кадровых доноров (рисунок 2).

Максимальный процент брака крови был отмечен в 2003 году и составил 1,36% (75 доз крови). С 2003 года отмечается выраженный спад выявляемое™ брака по данному показателю. В 2006 году было зарегистрировано 5 случаев брака (0,08% от числа кроводач).

2003 2004 2005 2006

годы

|ввич Л НСУ ПНЬвАд 13 Сифилис ИБруцеллез~]

Рис. 2. Брак донорской крови и ее компонентов по наличию антител к инфекционным антигенам (% от кроводач)

С 2005 года на ГУЗ Самарская областная станция переливания крови введено обязательное исследование донорской крови и ее компонентов на наличие антигенов ВИЧ и вирусного гепатита С. За 2005 год были выявлены 25 положительных результатов по определению вируса гепатита С в дозах крови и 3 положительных пробы по определению антигенов ВИЧ. В 2006 году было определено 19 положительных результатов по вирусу гепатита С, ВИЧ в полимеразной цепной реакции не выявлено. В ПЦР исследуются только ИФА отрицательные дозы крови, в связи с этим можно рассчитать чувствительность применяемых на ГУЗ Самарская областная станция переливания крови методов ИФА.

Чувствительность ИФА, применяемого для определения антител к ВГС, составила 95,18%, для определения антител к ВИЧ - 97,20% Данные результаты свидетельствуют о недостаточной чувствительности ИФА в отношении диагностики вышеперечисленных нозологии Рекомендованная чувствительность методов должна составлять, как минимум, 99,5% [Lackitz Е, 1995, Dodd R Y , 1997, 2003, Busch М Р , 2000, 2001] И даже этот показатель не является достаточным для обеспечения высокого уровня безопасности донорской крови

Безусловно, что применяемый комплексный подход к обеспечению безопасности донорской крови, включающий ИФА, ПЦР и карантинизацию, обеспечивает практически 100% гарантию качества только в отношении донорской плазмы. Эритроцитарная и тромбоцитарная массы, полученные от доноров, требуют более жесткого подхода, так как исключают возможность длительного хранения, и как следствие — карантинизации В связи с этим необходимо обязательное ПЦР исследование тех доз крови, которые идут для получения эритроцитарной или тромбоцитарной масс

По результатам исследования, можно сделать вывод, что применяемые методы выявления вирусных гепатитов В, С и ВИЧ-инфекции среди доноров в Самарской области являются достаточными лишь при проведении всего комплекса определения инфицированности, включающего ИФА, ПЦР и карантинизацию

Оценивая эффективность методов, применяемых на ГУЗ Самарская областная станции переливания крови для определения наличия антител к возбудителю сифилиса в донорской крови, можно сделать следующие выводы

Чувствительность реакции микроагглютинации на стекле составила в среднем 94,0%, что, безусловно, является недостаточным В дополнении с реакцией связывания комплемента чувствительность комплекса серологических реакций составила 97,0% Данный показатель также является недостаточным в соответствии с техническим руководством американской ассоциации банков крови

Определение антител к бруцеллам на ГУЗ Самарская областная станция переливания крови проводится в реакции агглютинации Данный метод является устаревшим, с низким уровнем чувствительности и специфичности Так, с учетом отсутствия подтвержденных случаев заболеваемости доноров крови, отстраненных от кроводач по результатам данного исследования, все «положительные» результаты оказались ложноположительными

В зарубежной литературе все чаще стали появляться публикации, посвященные проблеме инфицирования донорской крови и ее компонентов условно патогенными бактериями Основным фактором проникновения микроорганизмов в кровь рассматривается бессимптомная бактериемия [Sire J М , Michelet С , 1993, Haditch М , Binder L , 1994, Kaplan H , 2002, Williamson L S , 2002 и др ] Зарубежные и отечественные авторы отмечают возможность проникновения условно патогенных представителей нормальной микрофлоры слизистых оболочек в кровоток в результате ряда физиологических и патологических процессов [Andreu G, 2002] Особенно активно этот процесс происходит при дисбиозе слизистых оболочек В связи с отсутствием высокоспецифичных и чувствительных методов определения контаминации бактериями донорской крови единственно возможным методом профилактики брака является ужесточение отбора доноров для донации эритроцитарной и тромбоцитарной масс Это обусловлено возможностью размножения в заготовленной крови ряда психрофильных микроорганизмов [Голосова Т В , Никитин И К , 2004]

Для определения степени риска возможной контаминации донорской крови было исследовано состояние микробиоценозов слизистых оболочек верхних дыхательных путей у кадровых доноров медицинских и немедицинских специальностей

В норме на слизистых оболочках задней стенки глотки и нижних носовых ходов у здоровых людей преобладают условно патогенные микроорганизмы -представители родов Streptococcus, Staphylococcus, Haemophilus, значительно реже встречаются представители семейства Enterobacteriaceae и условно патогенные грибы рода Candida При развитии дисбиоза на слизистых оболочках верхних дыхательных путей преобладающими становятся представители последних двух групп При этом грибы рода Candida обнаруживаются, как правило, в паразитической фазе [Бухарин О В , Усвяцов Б Я , 1996, Сергеев А Ю , Сергеев Ю В , 2001, 2004, Бухарин О В , Валышев А В , Гильмутдинова Ф Г, 2006]

У кадровых доноров немедицинских специальностей в микробиоценозе слизистых оболочек нижних носовых ходов преобладали условно патогенные стафилококки (62,2%) и гемофильные бактерии (55,6%) Staphylococcus aureus был выделен у четырех обследованных (8,9%), Pseudomonas aeruginosa была выделена у одного донора (2,2%), Escherichia coli - у одного человека (2,2%) Грибы рода Candida были выделены от одного донора (2,2%)

Оценивая показатель постоянства микробиоценоза слизистых оболочек верхних дыхательных путей у кадровых доноров немедицинских специальностей, нами были отмечены следующие особенности К постоянной микрофлоре на слизистых нижних носовых ходов можно отнести Staphylococcus spp и гемофильные бактерии Максимальный показатель сопряженности таксонов был определен у Staphylococcus spp и Haemophilus ssp

В микробиоценозе слизистой задней стенки глотки в составе постоянной микрофлоры у доноров немедицинских специальностей были определены стафилококки (57,8%) Стрептококки (46,7%) и гемофильные бактерии (31,1%) определялись в составе добавочной микрофлоры Все остальные микроорганизмы являлись представителями случайной микрофлоры. Грибы рода Candida были выделены у 7 доноров (15,5%), из них у одного были выделены грибы в паразитической фазе развития Клебсиеллы выделены у 6 доноров немедицинских специальностей (13,3%) Синегнойная палочка была обнаружена у 2 обследованных (4,4%) Кишечной палочки в составе микробиоценоза слизистой задней стенки глотки у данной категории обследованных обнаружено не было.

Оценивая полученные результаты, можно сделать вывод о стабильности микробиоценоза слизистых верхних дыхательных путей у доноров немедицинских специальностей

В микробиоценозе слизистой оболочки задней стенки глотки у доноров медицинских специальностей стафилококки также были единственной группой среди постоянных обитателей данного биотопа (55,6%) В группу дополнительных микроорганизмов вошли стрептококки (44,4%) и грибы рода Candida (35,6%) При этом грибы в паразитической фазе развития были обнаружены у 17,8% доноров данной группы Все остальные микроорганизмы были «случайными» обитателями Однако следует отметить, что встречались они у достаточно большой части обследованных Так, клебсиеллы были обнаружены у 20,0% обследованных, кишечная палочка - у 15,5%, гемофильные бактерии - у 17,8% доноров медицинских специальностей

Среди доноров - медицинских работников терапевтических и хирургических специальностей, а также среди медицинских сестер и врачей не было получено статистически достоверных различий по качественному составу микробиоценозов верхних дыхательных путей

По результатам исследования среди здоровых медицинских работников выявлено широкое распространение носительства кишечной палочки,

клебсиелл и грибов рода Candida в паразитической фазе Это свидетельствует о неблагоприятном влиянии факторов производственной среды, которые вызывают развитие дисбиозов верхних дыхательных путей у медицинских работников [Яфаев Р X , Зуев Л П, 1989]

В результате исследования со слизистых оболочек верхних дыхательных путей доноров было выделено и идентифицировано 319 штаммов микроорганизмов

Из материала, полученного со слизистых оболочек верхних дыхательных путей у доноров немедицинских специальностей в возрасте 20-34 года, было выделено 86 штаммов микроорганизмов, из них стафилококки составили 34,88% (30 штаммов), стрептококки - 22,09% (19 штаммов), гемофильные бактерии - 26,74% (23 штамма), клебсиеллы - 1,16% (1 штамм), кишечная палочка -1,16% (1 штамм), грибы рода Candida - 8,13% (7 штаммов)

У доноров немедицинских специальностей в возрасте 35-50 лет из материала, полученного со слизистых оболочек верхних дыхательных путей, было выделено 73 штамма микроорганизмов, из них стафилококки составили 32,87% (24 штамма), стрептококки - 24,65% (18 штаммов), гемофильные бактерии — 21,91% (16 штаммов), клебсиеллы - 6,84% (5 штаммов), синегнойная палочка - 4,10% (3 штамма), грибы рода Candida - 2,73% (2 штамма)

Из материала, полученного со слизистых оболочек верхних дыхательных путей у доноров медицинских специальностей в возрасте 20-34 года, было выделено 82 штамма микроорганизмов, из них стафилококки составили 40,24% (33 штамма), стрептококки — 14,63% (12 штаммов), гемофильные бактерии -19,51% (16 штаммов), клебсиеллы - 7,31% (6 штаммов), кишечная палочка -1,21% (1 штамм), синегнойная палочка - 1,21% (1 штамм), грибы рода Candida -10,98% (9 штаммов)

В возрасте 35-50 лет у доноров медицинских специальностей из материала, полученного со слизистых оболочек верхних дыхательных путей, было выделено' 78 штаммов микроорганизмов, из них стафилококки составили 34,61% (27 штаммов), стрептококки - 15,38% (12 штаммов), гемофильные бактерии - 10,25% (8 штаммов), клебсиеллы - 10,25% (8 штаммов), кишечная палочка - 7,69% (6 штаммов), синегнойная палочка - 5,12% (4 штамма), грибы рода Candida - 15,38% (12 штаммов)

У выделенных микроорганизмов определяли фенотипы антибиотикорезистентности В соответствии с существующими данными литературы отмечается корреляция между степенью

антибиотикорезистентности и степенью вирулентности бактерий [Бухарин OB, Усвяцов БЯ, 1996] Определение антибиотикорезистентности проводилось нами у Staphylococus spp, Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coll и Pseudomonas aeruginosa

Оценивая антибиотикорезистентность выделенных штаммов стафилококков, можно сделать вывод о том, что среди доноров медицинских специальностей преобладает носительство полирезистентных стафилококков

Среди 14 штаммов Staphylococcus aureus, выделенных со слизистых верхних дыхательных путей у доноров медицинских специальностей, 8 (57,14%) штаммов оказалось резистентными к оксациллину, что является показателем устойчивости их ко всем ß-лактамным антибиотикам

Основным параметром по определению полирезистентности грамотрицательной флоры семейства Enterobacteriaceae является выявление БЛРС-фенотипа, то есть способности бактерий выделять ß-лактамазы расширенного спектра действия Такие штаммы Klebsiella pneumoniae (23,07%) были выделены от доноров медицинских специальностей

Среди штаммов Е coli, полученных от медицинских работников, были определены в 28,58% случаев полирезистентные штаммы, продуцирующие ß-лактамазы расширенного спектра действия. Наиболее часто встречались микроорганизмы, резистентные к ампициллину и цефтазидиму (57,14% и 42,72% соответственно)

Среди штаммов Pseudomonas aeruginosa, полученных от доноров немедицинских специальностей, не было выделено резистентных к тестируемым препаратам 40,0% штаммов Pseudomonas aeruginosa, выделенных от медицинских работников, были резистентны к ципрофлоксацину и гентамицину, 20,0% - к цефепиму, имипенему, амикацину и цефтазидиму При этом не было выделено ни одного штамма Pseudomonas aeruginosa с МБЛ-фенотипом, то есть выделяющего металло-Р-лактамазы

По результатам исследования можно сделать вывод, что кадровые доноры медицинских специальностей являются носителями полирезистентных штаммов микроорганизмов

В связи с широким распространением полирезистентных штаммов микроорганизмов на слизистых оболочках верхних дыхательных путей у доноров медицинских специальностей нами была разработана схема обследования доноров (рисунок 3)

Подводя итоги работы, следует отметить, что в Самарской области максимальное внимание в обеспечении микробиологической безопасности

донорства уделено профилактике передачи с донорской кровью вирусных гепатитов В и С, а также ВИЧ-инфекции

Это было вызвано высоким уровнем заболеваемости данными нозологическими формами в начале XXI века Введенные изменения в методы обследования доноров на предмет вирусоносительства позволили обеспечить высокий уровень эффективности проводимых мероприятий

При этом не было уделено должного внимания по обеспечению микробиологической безопасности донорской крови в отношении бруцеллеза Это привело к тому, что, несмотря на значительные изменения в структуре заболеваемости данной инфекцией в Самарской области, с 1999 года не пересматривались нормативные документы по обследованию доноров на наличие антител к бруцеллам

Использование низкоспецифичных методов на фоне спорадической заболеваемости привело к тому, что все «положительные» результаты обследований оказались ложноположительными Результатом этого было отстранение более 200 кадровых доноров от кроводач К тому же произошло изменение в распространенности бруцеллеза среди сельскохозяйственных животных, как следствие этого с 1999 года к 2006 количество эндемичных районов Самарской области по данной инфекции сократилось в 3 раза

Введение современных высокочувствительных методов исследования донорской крови на наличие антител к возбудителю сифилиса привело к увеличению брака крови по данному показателю

При проведении исследования качественного состава микробиоценозов верхних дыхательных путей у доноров оценивался потенциальный риск инфицирования крови Было выявлено наличие выраженных дисбиотических изменений микрофлоры у кадровых доноров медицинских специальностей Также среди данной категории доноров была определена высокая доля носительства полирезистентных штаммов микроорганизмов На примере доноров медицинских специальностей выявлены возможные факторы риска инфицирования заготовленной крови и, как следствие, требует решения вопрос о возможности участия данной категории в донорстве некоторых компонентов крови.

Рис. 3. Схема обследования доноров медицинских специальностей на предмет носительства условно патогенной и патогенной микрофлоры на слизистых оболочках верхних дыхательных путей.

Выводы

1 В Самарской области сохраняется высокая степень риска брака крови по гемоконтактным гепатитам и ВИЧ-инфекции в связи с высоким уровнем заболеваемости данными инфекциями, комплексное использование ИФА, ПЦР и карантинизации позволяет обеспечить надлежащий уровень вирусологической безопасности донорской крови

2 Применение низкоспецифичных и низкочувствительных методов определения брака донорской крови в отношении возбудителей сифилиса и бруцеллеза приводит к необоснованному отстранению кадровых доноров от кроводач

3 Дисбиотические изменения в составе микрофлоры верхних дыхательных путей у значительной части доноров медицинских специальностей, обусловленные факультативными микроорганизмами, являются возможным фактором риска снижения бактериологической безопасности донорской крови

4 Разработанные рекомендации по обследованию доноров медицинских специальностей позволяют повысить бактериологическую безопасность донорской крови

Практические рекомендации

1 Целесообразно проводить исследование донорской крови на наличие антител к бруцеллам только у лиц, по своей профессиональной деятельности имеющих потенциальный риск инфицирования и развития данного заболевания

2 В случае обнаружения антител к возбудителям сифилиса и бруцеллеза необходимо исследовать кровь донора на наличие бактериальных нуклеиновых кислот в ПЦР

3 Следует ввести обязательное обследование доноров медицинских специальностей у оториноларинголога на предмет наличия признаков хронического воспаления слизистой оболочки задней стенки глотки и нижних носовых ходов, а также других признаков дисбиоза с обязательным микробиологическим исследованием

4 Рекомендовать медицинских работников в качестве доноров плазмы, ограничивая их в донации эритроцитарной и тромбоцитарной масс, что позволит снизить риск бактериальной контаминации компонентов донорской крови

Список научных работ, опубликованных по теме диссертации:

1 Лямин А В Микрофлора верхних дыхательных путей у студентов СамГМУ // Сборник тезисов докладов 71-й итоговой конференции СНО / Под общ ред А А Лебедева - Самара, 2003 - С 121

2 Лямин А В Санитарно-микробиологическое исследование хирургического стационара // Сборник тезисов докладов 72-й итоговой конференции СНО / Под общ ред ГП Котельникова, В А Куркина - Самара, 2004 -С 119-120

3 Лямин А В Влияние внешней среды на формирование микробиоценозов верхних дыхательных путей у студентов медицинского университета // III Всероссийская университетская научно-практическая конференция молодых ученых и студентов по медицине Сборник материалов / Под общ ред В Г Сапожникова -Тула, 2004 - С 150-151

4 Лямин А В Распространенность бактериальных инфекций среди доноров крови в Самарской области // «Аспирантские чтения 2006» Труды межвузовской конференции молодых ученых Приложение к межвузовскому журналу «Аспирантский вестник Поволжья» - Самара, 2006 - С 17-19

5 Лямин А В Особенности микробиоценоза слизистых верхних дыхательных путей у медицинских работников // Труды XI Всероссийского конгресса «Экология и здоровье человека» на тему «Проблемы выживания человека в техногенной среде современных городов» Самара, 2006 - С 160-162

6 Лямин А В Вирусологические аспекты безопасности донорства крови в Самарской области // Международные стандарты, основанные на принципах доказательной медицины, в проведении научных исследований в здравоохранении - Самара, 2007 - С 45-46

7 Лямин А В Антибиотикорезистентность представителей семейства Enterobacteriaceae, выделенных со слизистых верхних дыхательных путей у доноров крови / А В Лямин, А В Жестков // Практическая медицина - 2007 -№4(23) - С 22-24

8 Жестков А В Распространенность носительства патогенной и условно патогенной микрофлоры среди кадровых доноров крови / А В Жестков, А В Лямин // XVII Национальный Конгресс по болезням органов дыхания -Сборник трудов - Казань, 2007 -С 93

9 Жестков А В Особенности антибиотикорезистентности энтеробактерий, выделенных со слизистых оболочек верхних дыхательных путей / AB Жестков, А В Лямин // XVII Национальный Конгресс по болезням органов дыхания - Сборник трудов - Казань, 2007 - С 93

10 Лямин А В Характеристика микрофлоры верхних дыхательных путей у доноров медицинских и немедицинских специальностей // Уральский медицинский журнал -2007 -№8(36) - С 38-41

На правах рукописи

Лямин Артем Викторович

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ БЕЗОПАСНОСТИ ДОНОРСКОЙ КРОВИ В САМАРСКОЙ ОБЛАСТИ

03 00 07 - микробиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Подписано в печать 11 01 2008 Формат 60x84/16 Бумага офсетная Объем 1,0 уел печ л Тираж 100 экз Отпечатано в типографии ОАО «Самарабланкиздат» 443020 г Самара, ул Садовая, 46 Тет (846) 333-76-43

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Лямин, Артем Викторович

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1 Обзор литературы.

1.1 Состояние службы крови в Российской Федерации и Самарской области.:.

1.2 Вирусологическая безопасность донорской крови.

1.2.1 ВИЧ-инфекция.

1.2.2 Гемоконтактные вирусные гепатиты.

1.3 Бактериологическая безопасность донорской крови.

1.3.1 Сифилис.

1.3.2 Бруцеллез.

1.3.3 Условно патогенная микрофлора.

1.4 Микробиологические аспекты донорской крови у медицинских работников.

ГЛАВА 2 Материалы и методы исследования.

ГЛАВА 3 Анализ вирусологической безопасности донорской крови в Самарской области.

3.1 Определение риска брака при заготовке донорской крови на основании показателей заболеваемости гемоконтактными вирусными инфекциями в Самарской области.

3.2 Оценка эффективности применяемых методов определения вирусных агентов в донорской крови и ее компонентах.

3.3 Изучение причин брака при заготовке донорской крови и ее компонентов у медицинских работников по инфекционным показателям.

ГЛАВА 4 Оценка бактериологической безопасности донорской крови в Самарской области.

4.1 Определение риска брака при заготовке донорской крови на основании показателей заболеваемости сифилисом и бруцеллезом в Самарской области.

4.2 Анализ брака крови по наличию антител к возбудителям сифилиса и бруцеллеза в службе крови Самарской области.

ГЛАВА 5 Определение степени риска возможной контаминации крови микрофлорой верхних дыхательных путей у кадровых доноров.

5.1 Особенности состояния микробиоценозов верхних дыхательных путей у доноров Самарской области.

5.2 Анализ распространенности носительства полирезистентных штаммов микроорганизмов в микрофлоре верхних дыхательных путей у кадровых доноров.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Микробиологические аспекты безопасности донорства крови в Самарской обл."

Актуальность темы

В конце XX — начале XXI вв. в Российской Федерации отмечался резкий рост заболеваемости венерическими заболеваниями, вирусными гепатитами и другими инфекциями, передающимися трансфузионным путем [Покровский В.И., Онищенко Г.Г., Черкасский Б. Л., 2003]. По данным на конец 2005 года в России на учете состояло около 300000 ВИЧ-инфицированных. Согласно экспертным оценкам, их фактическое число было примерно в три раза больше. Еще более неблагоприятная ситуация складывалась по распространенности среди населения вирусных гепатитов [Онищенко Г.Г. 2006]. При этом с каждым годом возрастала потребность в донорской крови, ее компонентах и медико-биологических препаратах, полученных на ее основе [Шевченко Ю.Л., 2000; Козинец Г.И., 2001; Жибурт Е.Б., 2003].

В связи с особенностями географического расположения и социально-экономического развития Самарская область отмечается высоким уровнем заболеваемости гемо контактными инфекциями. С целью повышения эффективности профилактики трансфузионной передачи ряда инфекций в регионе в 2001 году была принята областная целевая программа «Обеспечение вирусобезопасности донорской крови, ее компонентов и препаратов, заготавливаемых учреждениями службы крови Самарской области» [Косов А.И., 2005].

Безусловно, с изменением эпидемиологической ситуации, необходим анализ степени риска инфицирования донорской крови возбудителями гемоконтактных инфекций. Существующие стандарты не позволяют на 100% обеспечить безопасность донорской крови. Необходим ее тщательный скрининг на все декретированные инфекции с использованием для тестирования заготовленной крови высокочувствительных методов прямого обнаружения возбудителя (полимеразная цепная реакция), а не косвенных методов (иммуноферментный анализ). . Также необходима оценка применяемых методов обследования донорской крови с учетом уровня заболеваемости гемоконтактными инфекциями. Из 48000 заготовленных в Самарской области в 2003-2004 годах доз крови при повторном тестировании в 94 случаях был обнаружен ВИЧ, в 230 случаях - вирусы гепатитов В и С. В 2005-2006 годах было выявлено 44 положительных результатов повторного анализа донорской крови на наличие вирусов гепатитов В и С, в 3 случаях был обнаружен ВИЧ при исследовании карантинизированной плазмы [Косов А.И., 2007].

Не меньшую опасность представляет группа бактериальных инфекций, характеризующихся длительным периодом бессимптомной бактериемии [Sire J.M., Michelet С., 1993; Haditch М., Binder L., 1994]. Широкое распространение носительства среди здорового населения ряда условно патогенных бактерий также представляет реальную угрозу для донорства в связи с формированием бессимптомной бактериемии [Бухарин О.В., 2002; Тец В.В., 2003]. Это подтверждается учащением случаев бактериальной загрязненности донорской крови и особенно - ее компонентов. Также отмечается сохранение высокой заболеваемости совокупного населения Самарской области сифилисом [Жибурт Е.Б., 2003]. Кроме того, Самарская область длительный период являлась эндемичной по бруцеллезу, заболеваемость которым регистрировалась в 12 районах из 27.

Цель исследования

Обосновать меры повышения микробиологической безопасности донорской крови в Самарской области на основе анализа распространенности среди доноров носительства условно патогенных микроорганизмов и оценки эффективности вирусологических и бактериологических методов исследования крови доноров.

Задачи исследования

1. Оценить риск брака при заготовке крови на основе заболеваемости потенциальных доноров гемоконтактными вирусными инфекциями, сифилисом и бруцеллезом.

2. Проанализировать эффективность применяемых в Самарской области вирусологических и бактериологических методов исследования безопасности донорской крови.

3. Определить особенности микробиоценозов верхних дыхательных путей у доноров медицинских специальностей и выяснить распространенность фенотипов антибиотикорезистентности среди выделенных микроорганизмов.

4. Разработать рекомендации для повышения эффективности бактериологической безопасности донорской крови.

Научная новизна

Получены новые данные по заболеваемости потенциальных доноров гемоконтактными вирусными инфекциями, сифилисом и бруцеллезом в Самарской области. На основе сравнительного анализа выявлены наиболее эффективные методы оценки вирусологической безопасности донорской крови. Впервые в Приволжском Федеральном округе проанализирована специфичность методов определения брака донорской крови, применяемых в отношении возбудителей сифилиса и бруцеллеза, с учетом распространенности данных инфекций среди потенциальных доноров.

Впервые определено значение состояния микробиоценозов слизистых оболочек верхних дыхательных путей для обеспечения бактериологической безопасности донорской крови и ее компонентов. Проанализирована распространенность носительства полирезистентных штаммов микроорганизмов среди кадровых доноров крови.

Практическая значимость

Разработаны рекомендации для повышения бактериологической безопасности донорской крови в Самарской области с учетом распространенности как патогенных, так и условно патогенных микроорганизмов' среди доноров. Проведенная оценка эффективности методов, применяемых для обеспечения вирусологической безопасности донорской крови, позволяет выбрать наиболее информативные из них, что можно использовать для совершенствования организации работы лабораторного звена службы крови.

Результаты исследования внедрены в работу ГУЗ Самарская областная станция переливания крови, в учебную программу на кафедре общей и клинической микробиологии, иммунологии и аллергологии, кафедре инфекционных болезней с эпидемиологией ГОУ ВПО «СамГМУ Росздрава».

Основные положения, выносимые на защиту

1. Доля брака донорской крови зависит от уровня заболеваемости-гемоконтактными вирусными и бактериальными инфекциями.

2. Использование методов определения антител к инфекционным агентам в донорской крови и ее компонентах может давать ложноотрицательные и ложноположительные результаты, поэтому их применение является недостаточным для обеспечения микробиологической безопасности донорства.

3. Медицинские работники — доноры крови и ее компонентов являются группой повышенного риска в отношении носительства условно патогенной микрофлоры, имеющей высокую степень антибиотикорезистентности, и могут быть рекомендованы в качестве доноров плазмы с отстранением их от донации эритроцитарной и тромбоцитарной масс.

Апробация работы

Основные положения и результаты работы были доложены и обсуждены на III Всероссийской университетской научно-практической конференции молодых ученых и студентов по медицине (Тула, 2004); XI Всероссийском конгрессе «Экология и здоровье человека» (Самара, 2006); XVII Национальном конгрессе по болезням органов дыхания (Казань, 2007); научно-практической конференции «Актуальные вопросы медицины» (Самара, 2007); научном заседании кафедр общей и клинической микробиологии, иммунологии и аллергологии, инфекционных болезней с эпидемиологией и общей гигиены ГОУ ВПО «СамГМУ Росздрава» (Самара, 2007).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 10 печатных работ.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы, посвященной материалам и методам исследования, трех глав собственных, исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка используемой литературы и двух приложений. Диссертация изложена на 127 страницах машинописного текста. Список литературы содержит 190 наименований, в том числе 82 зарубежных источника. Работа иллюстрирована 14 таблицами, 26 рисунками.

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Лямин, Артем Викторович

ВЫВОДЫ

1. В Самарской области сохраняется высокая степень риска брака крови по гемоконтактным гепатитам и ВИЧ-инфекции в связи с высоким уровнем заболеваемости данными инфекциями, комплексное использование ИФА, ПЦР и карантинизации позволяет обеспечить надлежащий уровень вирусологической безопасности донорской крови.

2. Применение низкоспецифичных и низкочувствительных методов определения брака донорской крови в отношении возбудителей сифилиса и бруцеллеза приводит к необоснованному отстранению кадровых доноров от кроводач.

3. Дисбиотические изменения в составе микрофлоры верхних дыхательных путей у значительной части доноров медицинских специальностей, обусловленные факультативными микроорганизмами, являются возможным фактором риска снижения бактериологической безопасности донорской крови.

4. Разработанные рекомендации по обследованию доноров медицинских специальностей позволяют повысить бактериологическую безопасность донорской крови.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Целесообразно проводить исследование донорской крови на наличие антител к бруцеллам только у лиц, по своей профессиональной деятельности имеющих потенциальный риск инфицирования и развития данного заболевания.

2. В случае обнаружения антител к возбудителям сифилиса и бруцеллеза необходимо исследовать кровь донора на наличие бактериальных нуклеиновых кислот в ПЦР.

3. Следует ввести обязательное обследование доноров медицинских специальностей у оториноларинголога на предмет наличия признаков хронического воспаления слизистой оболочки задней стенки глотки и нижних носовых ходов, а также других признаков дисбиоза с обязательным микробиологическим исследованием.

4. Рекомендовать медицинских работников в качестве доноров плазмы, ограничивая их в донации эритроцитарной и тромбоцитарной масс, что позволит снизить риск бактериальной контаминации компонентов донорской крови.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Лямин, Артем Викторович, Челябинск

1. Аграненко, В.А. Передача вирусных инфекций при переливании крови и ее компонентов / В.А. Аграненко, Ю.В. Крижевская // Гематология и трансфузиология. 1991. - №6. - С.25-28.

2. Бабич, Е.М. Микробные ценозы носоглотки / Е.М. Бабич, И.В. Елисеева, В.И. Белозерский // Микробиологический журнал. 1999. Т. 61. -№3. - С.63-69.

3. Багдасаров, А. А. Переливание крови в СССР /A.A. Багдасаров // Советская медицина. 1938. - № 14-15. - С. 50-52.

4. Балаян М.С. Вирусы крови / М.С. Балаян // Новое в трансфузиологии. 2000. - №25. - С.67-74.

5. Беляков, В.Д. Псевдомонады и псевдомонозы / В.Д. Беляков, J1.A. Ряпис, В.И. Илюхин. М.: Медицина, 1990. - 223 с.

6. Беляков В.Д. Эпидемиология /В.Д. Беляков, Р.Х. Яфаев. М.: Медицина, 1989. - 416 с.

7. Бессмертный Б. С. Очерк истории переливания крови / Б.С. Бессмертный // Советская медицина. 1938. №11-12. - С. 77-81;

8. Бил ев, А.Е. Дисбактериоз кишечника (диагностика, лечение, эпидемиология и профилактика): монография / А.Е. Билев, A.B. Жестков, Ю.А. Осипов Самара: ООО «Офорт», 2005. - 160 с.

9. Богомолова, Л.Г. Донорство / Л.Г. Богомолова, Л.К. Николаева, Д.И. Рафальсон. -М.: Медицина, 1984. 200 с.

10. Боев, Б.В. Процессы заражения ВИЧ в больнице, возможности прогнозирования. / Б.В. Боев // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1992. - №7-8. - С. 17-20.

11. Бондаренко, В.М. Общий анализ представлений о патогенных и условно патогенных бактериях / В.М. Бондаренко // Микробиология. 1997. -№4. - С.20-25.

12. Бродская, А.П. Еще раз к вопросу о спорных нерешенных проблемах трансфузионного сифилиса / А.П. Бродская, Т.М. Шувалова, Н.И. Афонин.//Вестник Службы крови России.- 1999. №2.- С.21-24.

13. Бурмистрова, A.JI. Иммунный гомеостаз и микросимбиоценоз. Метаморфозы и пути развития воспалительных заболеваний кишечника / A.JI. Бурмистрова. Челябинск: Челябинский Дом печати, 1997. - 216 с.

14. Бухарин, О.В. Экология микроорганизмов человека / О.В. Бухарин, A.B. Валышев, Ф.Г. Гильмутдинова и др. Екатеринбург: УрО РАН, 2006. - 480 с.

15. Бухарин, О.В. Бактерионосительство (медико-экологические аспекты) / О.В. Бухарин, Б.Я. Усвяцов Екатеринбург: УрО РАН, 1996. - 203 с.

16. Бухарин, О.В. Биология патогенных кокков / О.В. Бухарин, Б.Я. Усвяцов, O.JT. Карташова. Екатеринбург: УрО РАН, 2002. - 282 с.

17. Васильева, Л.И. Микробные биоценозы новорожденных в условиях нормы и септических заболеваний: дис. . д-ра мед. наук. / Л.И. Васильева. Ростов-на-Дону, 1990. - 238 с.

18. Васюкова, Г.Ф. Клинические особенности профессиональных заболеваний внутренних органов у медицинских работников: автореф. дис. к.м.н. / Г.Ф. Васюкова; Самар. гос. мед. ун-т. Самара, 2005. - 23 с.

19. Внутрибольничная ВИЧ-инфекция. Информационно-методическое письмо. / О.В. Платошина, И.А. Попова, Н.В. Горшкова. СПб, 1999.-29 с.

20. Воробьев, A.A. Микрофлора человека и иммунитет: единство и противоположность / A.A. Воробьев, Ю.В. Несвижский // Современные проблемы аллергологии, клинической иммунологии и иммунофармакологии. -М., 1997.-С. 147-141.

21. Воробьев, A.A. Дисбактериозы у детей: учебное пособие для врачей и студентов / A.A. Воробьев, С.Г. Пак. М.: Медицина, 1998. - 64 с.

22. Гаврилов, O.K. Очерки истории развития и применения переливания крови / O.K. Гаврилов. — Д.: Медицина, 1968. 180 с.

23. Гинцбург, A.JI. Генодиагностика инфекционных заболеваний / А.Л. Гинцбург// ЖЭМИ. 1998. №33. - С.86-92.

24. Головацкая, Е.Г. Выявляемость ВИЧ-инфекции среди доноров в Калининграде / Е.Г. Головацкая, H.A. Кабанчук, О.Ю. Склавец. II Трансфузиология. 2001. - №3. - С.67-70.

25. Горшкова, Н.В. Клинико-эпидемиологическая характеристика ВИЧ-инфекции у детей с парентеральным путем инфицирования: автореф. дис. . канд. мед. наук. / Н.В. Горшкова. СПб, 1998. - 24с.

26. Голосова, Т.В. Асептика при заготовке консервированной крови / Т.В. Голосова. -М.: Медицина, 1975.- 160 с.

27. Голосова, Т.В. Гемотрансмиссивные инфекции / Т.В. Голосова, И.К. Никитин. — М.: Медицинское информационное агентство, 2003. 192 с.

28. Голосова, Т.В. Оценка риска передачи вирусных инфекций при гемотрансфузиях / Т.В. Голосова, A.B. Сомова, Т.А. Туполева. // Вестник службы крови России. 2000. - №2. - С.25-32.

29. Гущин, А.Е. Стабильность РНК вируса гепатита в плазме крови человека в панели контрольных образцов / А.Е. Гущин, О.Ю. Шипулина, Г.А. Шипулин // Вопросы вирусологии. 2002. - №5. - С.38-40.

30. Денисов, И.Н. Инфекционные болезни и задачи медицинской науки и здравоохранения по их профилактике / И.Н. Денисов // ЖЭМИ. -1991. -№11.-С.7-11.

31. Дмитриев, Г.А. Современное состояние серодиагностики сифилиса / Г.А. Дмитриев, Г.А. Кисилева, З.П. Акопова. // Вестник Службы крови России. -199. №2. - С.25-29.

32. Доклад о глобальной эпидемии ВИЧ/СПИДа // ЮНЭЙДС. 2002. - С.237.

33. Есипов, В.К. Патогенетические аспекты острого распространенного перитонита и обоснование рационального метода его лечения: автореф. дис. . докт. мед. наук. / В.К. Есипов. Оренбург, 1999. -274 с.

34. Жибурт, Е.Б. Привилегии доноров крови: Руководство для врачей и организаторов донорского движения / Е.Б. Жибурт. М.: Мед Эксперт Пресс, 2003.-392 с.

35. Жуковицкий, В.Г. Обоснование рациональной антибактериальной терапии в оториноларингологии с позиции бактериолога / • В.Г. Жуковицкий // Consilium medicum. 2001. - №8. - С.362-371.

36. Иванов, JI.B. Организационно-практические вопросы службы' крови / J1.B. Иванов. Минск: Беларусь, 1980. - 143 с.

37. Инструкция по переливанию крови и ее компонентов. /Министерство здравоохранения СССР, 1990. 50 с.

38. Инфекционные болезни и эпидемиология / В.И. Покровский, С.Г. Пак, Н.И. Брико и др.; под ред. В.И. Покровского. М.: ГЭОТАР-МЕД, 2003. -816с.

39. Киселев, А.Е. Служба крови за рубежом / А.Е. Киселев, А.А. Липац- М.: Медицина, 1972. 215 с.

40. Киселев, П.Н. Токсикология инфекционных процессов / П.Н. Киселев. JL: Медицина, 1971. - 359 с.

41. Колотилова, Л.В. Нормальная микрофлора слизистой глотки / JI.B. Колотилова, Т.М. Акишина, О.П. Заргарян // Антибиотики и химиотерапия, 1989. - №10. - С.751-755.

42. Контроль внутрибольничных инфекций / под ред. Н.И. Брико. -М.: Изд. Дом «Русский врач», 2002. 96 с.

43. Косов, А.И. Современные технологии, применяемые на Самарской станции переливания крови / А.И. Косов, Е.В. Кудинова // Здравоохранение и медицинская техника. 2005 - №7. - С.22-23.

44. Косарев, В.В. Профессиональные заболевания медицинских работников: Монография / В.В. Косарев. Самара. 1998. - 200 с.

45. Косарев, В.В. Профессиональная заболеваемость медицинских работников Самарской области / В.В. Косарев, Г.Ф. Васюкова // Гигиена и санитария. 2004. - № 3. - С.37-38.

46. Корякин, A.B. Статистика выявления антител к вирусу гепатита с среди доноров крови Российской федерации / A.B. Корякин, JI.A. Терентьева // Новое в трансфузиологии. 2004. - №38. - С.29-34.

47. Крижевская, Ю.В. Размеры пулов донорской плазмы и риск заражения болезнью Крейтцфельдта-Якоба через донорскую кровь / Ю.В. Крижевская. // Вестник Службы крови России. 2001. - №1. — С.45-47.

48. Кровь и инфекция. / Г.И. Козинец, В.В. Высоцкий, В.М. Погорелов; под ред. Г.И. Козинца М.: Триада-фарм, 2001. - 456 с.

49. Лакин, Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин М.: Высшая школа, 1990. - 343 с.

50. Лисицын, Ю.П. История медицины: учебник / Ю.П. Лисицын. -М.: ГЭОТАР-МЕД, 2004. 400 с.

51. Лобзин, Л.И. Дисбактериозы кишечника / Л.И. Лобзин, В.Г. Макаров, Е.Р. Корвякова. СПб.: Фолиант, 2003. - 256 с.

52. Лосева, O.K. Современные проблемы трансфузионного сифилиса / O.K. Лосева. // Вестник Службы крови России. 2001. - №3. - С.12=15.

53. Львов, Д.К. Вирусные гепатиты от А до G и далее / Д.К. Львов // Журнал Микробиологии. 1997 - №1. - С.70-77.

54. Медведев, В.В. Клиническая лабораторная диагностика / В.В. Медведев, Ю.З. Волчек. СПб.: Гиппократ, 1997. - 208 с.

55. Михайлов, М.И. TTV кандидат в возбудители посттрансфузионного гепатита / М.И. Михайлов, К.К. Кюрегян. // Вирусные гепатиты. Информ. бюлл. - 1999. -№3. - С.3-9.

56. Нейчев, С.К. Клиническая микробиология / С.К. Нейчев София, 1977.-317 с.

57. Никитин, И.К. Вирусная и бактериальная безопасность клеточных компонентов крови / И.К. Никитин, Г.И. Козинец, J1.B. Лобовская. // Гематология и трансфузиология. 2001. - №3. - С.91-95.

58. Никитин, И.К. Карантинизация дополнительная гарантия вирусной безопасности плазмы и ее препаратов / И.К. Никитин, Т.В. Голосова // Гематология и трансфузиология. - 2004 - №2. - С.31-35.

59. Онищенко, Г.Г. Распространение вирусных гепатитов ка угроза национальной безопасности / Г.Г. Онищенко, Л.А. Дементьева // Журнал микробиологии. 2003. - №4. - С.93-99.

60. Онищенко, Г.Г. Новые стратегии в предупреждении распространения ВИЧ-инфекции в России / Г.Г. Онищенко, М.И. Наркевич // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2000 - № 4. - С. 5-9.

61. Осипов, Г.А. Способ выявления возбудителя инфекционного процесса в стерильных биологических средах макроорганизма / Г.А. Осипов, Н.В. Белобородова // Патент РФ по заявке № 97117426/14 (018489). Приоритет от 21.10.97.

62. Остановка кровотечения. Острая кровопотеря. Переливание крови и ее компонентов: Учебное пособие. Самара: ООО «Содружество Плюс»; ГОУВПО «СамГМУ», 2005. - 324 с.

63. Петровская, В.Г. Микрофлора человека в норме и патологии / В.Г. Петровская, О.В. Марко. М.: Медицина, 1976. - 232 с.

64. Поздеев, O.K. Медицинская микробиология / под ред. В.И. Покровского. -М.: ГЕОТАР-МЕД, 2001. 768 с.112

65. Покровский, B.B. Внутрибольничиые вспышки ВИЧ-инфекции в Элисте / В.В. Покровский, И.Ю. Ерамова, В.В. Липетиков и др. // ЖМЭИ -1990.-№4. -С. 17-23.

66. Покровский, В.И. Эволюция инфекционных болезней В России в XX веке / В.И. Покровский, Г.Г. Онищенко, Б.Л. Черкасский. М.: Медицина, 2003.-664 с.

67. Практическая трансфузиология. / Под ред. Г.И. Козинца. М.: Триада-Х, 1997.-435 с.

68. Практическое руководство по антиинфекционной химиотерапии. / Под ред. Л.С. Страчунского, Ю.Б. Белоусова, С.Н. Козлова. М.:МАКМАХ, 2002.-382 с.

69. Рахманова, А.Г. ВИЧ-инфекция / А.Г. Рахманова. Санкт-Петербург, 2004. -696 с.

70. Реброва, О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA / О.Ю. Реброва М.: МедиаСфера, 2006. - 312 с.

71. Рейзман, П.В. Геномика в трансфузиологии, медицине и биологии /П.В. Рейнзман // Трансфузиология. 2004. - №1. - С.98-101.

72. Руководство по организации службы крови / Всемирная организация здравоохранения / Под ред. В.Н. Гиббса, А.Ф.К. Бриттена, пер. -М.: Медицина, 1994. 162 с.

73. Румянцев, А.Г. Клиническая трансфузиология / А.Г. Румянцев, В.А. Аграненко. -М.: ГЕОТАР-Медицина, 1997. 580 с.

74. Русанов, В.М. Плазма донорской крови — некоторые аспекты и достижения ее вирусной безопасности и самообеспечения регионов России /В.М. Русанов // Вестник Службы крови России. 2000. - №2. - С.42-45.

75. Санитарно-эпидемиологические правила «Профилактика вирусных гепатитов. Общие требования к эпидемиологическому надзору за вирусными гепатитами», введенные в действие с 1.07.2000 г.

76. Сбалансированное планирование различных видов донорства в учреждениях службы крови. Методические рекомендации / Ленинградский НИИ гематологии и переливания крови. Л.: Б. И., 1990. - 11 с.

77. Сбор, фракционирование, контроль качества и использования крови и продуктов крови: Перевод / ВОЗ. М.: Медицина, 1984. - 135 с.

78. Сергеев, А.Ю. Грибковые инфекции. Руководство для врачей / А.Ю. Сергеев, Ю.В. Сергеев. М.: ООО Бином-пресс, 2004. - 440 с.

79. Сергеев, А.Ю. Кандидоз. Природа инфекции, механизмы агрессии и защиты, лабораторная диагностика, клиника и лечение / А.Ю. Сергеев, Ю.В. Сергеев. М.: Триада-Х, 2001. - 472 с.

80. Скуркович, Г.В. Поражение верхних дыхательных путей при некоторых заболеваниях системы крови / Г.В. Скуркович. М.: Медицина, 1971.-151 с.

81. Современные клинические рекомендации по антимикробной терапии. Выпуск 1. / Под ред. Л.С. Страчунского, A.B. Дехнича. Смоленск: МАКМАХ, 2004.-384 с.

82. Справочник по антимикробной терапии. / Под ред. Л.С. Страчунского. Смоленск: МАКМАХ, 2006. - 384 с.

83. Суханов, Ю.С. На путях к полной вирусной безопасности донорской крови и ее компонентов / Ю.С. Суханов, H.A. Федоров, М.А. Артемьев // Вестник Службы крови России. 1997. - №1. - С.37-38.

84. Тарасова, Г. Д. Особенности микрофлоры носоглотки и функциональное состояние среднего уха у детей / Г.Д. Тарасова, Л.С. Страчунский // Вестник оториноларингологии. 2000. - №4. - С.30-32.

85. Таршис, М.Г. Болезни животных, опасные для человека / М.Г. Таршис, Б.Л. Черкасский М.: Космос, 1997. - 298 с.

86. Техническое руководство американской ассоциации банков крови. / пер. с англ. Н.К. Басина, Е.Б. Жибурт, И.А. Попова Милан: Европейская школа трансфузионной медицины, 2000. - 1056 с.

87. Тец, B.B. Микроорганизмы и антибиотики. Заболевания дыхательной системы / В.В. Тец. СПб.: Эскулап, 2002. - 172 с.

88. Тец, В.В. Микроорганизмы и антибиотики. Заболевания, передающиеся половым путем / В.В. Тец. СПб.: «Левша», 2004. - 244 с.

89. Тец, В.В. Микроорганизмы и антибиотики. Сепсис / В.В. Тец. -СПб.: Эскулап, 2003. 154 с.

90. Управление службой переливания крови / ВОЗ; под ред. С.Р. Холлана М.: Медицина, 1993. - 214 с.

91. Уразов С.Х. Карантинизация плазмы фактор, гарантирующий врусную безопасность трансфузионной терапии / С.Х. Уразов, Н.И. Афонин // Вестник Службы крови России. - 2001. - №1. — с.7-12.

92. Федоров, E.H. Длительность бессимптомного носительства вирусов гепатитов В и С среди доноро и лиц групп риска / E.H. Федоров, Н.П. Блохина. A.A. Елов // Вестник Службы крови России. 2000. - №1. - С. 1-8

93. Федоров, E.H. ПЦР-детекция ДНК и РНК Treponema pallidum в крови серопозитивных доноров / E.H. Федоров, И.И. Петухова, Ю.С. Суханов i // Вестник Службы крови России. 2001. - №3. - С.42-46.

94. Федоров, H.A. ПЦР: 20 лет в медицине и 10 лет в службе крови / H.A. Федоров, A.A. Елов // Здравоохранение и медицинская техника. 2004. -№8 (12). - С.13.

95. Хьюстис, Д.В. Первое переливание крови в России (1832 г.) // Трансфузиология.- 2005.- Т.6, № 1.- С. 100-107.

96. Чанчиев, 3. М. Переливание крови в историческом аспекте /З.М. Чанчев, В.В. Чаленко // Гематология и трансфузиология. 2003. - № 1. - С. 31-35.

97. Чеботкевич, В.Н. Прионы новая проблема трансфузиологии / В.Н. Чеботкевич, Е.А. Селиванов // Вестник Службы крови России. -1999. -№2. - С.51-57.

98. Черкасов, Е.Г. Первый российский опыт ручного и полуавтоматического минипул-ЫАТ-тестирования донорской крови на ВИЧ, ВГС, ВГВ / Е.Г. Черкасов, A.A. Елов., H.A. Федоров // Вестник Службы крови России. 2001. -№1.-С.4-8.

99. Шахгильдян, И.В. В кн.: Парентеральные вирусные гепатиты (эпидемиология, диагностика, профилактика) / И.В. Шахгильдян, М.И. Михайлов, Г.Г. Онищенко М.: ГОУ ВУНМЦ МЗ РФ, 2003. - С. 19.

100. Шевченко, Ю.Л. Роль современных факторов во взаимодействии человека и микроорганизмов. Значение национального здравоохранения в профилактике инфекционных болезней / Ю.Л. Шевченко // Журнал микробиологии. 2000. - №6. - С.3-6.

101. Шевченко, Ю.Л. Безопасное переливание крови: руководство для врачей / Ю.Л. Шевченко, Е.Б. Жибурт СПб.: Питер, 2000. - 308 с.

102. Экология человека на урбанизированных и сельских территориях; под ред. H.H. Верещагина, В.М. Боева. Оренбург, 2003. - 392 с.

103. Ярославцева, Н.Г. Анализ вирусных и серологических маркеров при гепатите в у больных с патологией системы крови / Н.Г. Ярославцева, Т.А. Гаранжа, С.Ю. Багрянцева // Новое в трансфузиологии. 2001. - №29. - С.12-23.

104. Ярославцева, Н.Г. ДНК вируса гепатита В в плазме крови HbsAg-негативных доноров и пациентов ГНЦ / Н.Г. Ярославцева, Т.А. Гаранжа, С.Ю. Багрянцева // Новое в трансфузиологии. 2002. - №30. - С.23-29.

105. Яфаев, Р.Х. Эпидемиология внутрибольничных инфекций / Р.Х. Яфаев, Л.П. Зуева. Л.: Медицина, 1989. - 168 с.

106. Alvares, F.E. Bacterial contamination of cellular blood components. A retrospective review at a large cancer center / F.E. Alvares, K.J. Rogge, J.B. Tarrard et al. // Ann. Clin. Lab. Sri. 1995. - №25. - P. 283-290.

107. Anderson, K.C. Transfusion-related sepsis after prolonged platelet storage / K.C. Anderson, M.A. Lew, B.C. Gorgone et al. // Am. J. Med. 1986. -№81. - P.405-411.

108. Anderson, R.L. Investigations of intrinsic Pseudomonas cepacia contamination in commercially manufactured povidone-iodide / R.L. Anderson, R.W. Vess, J.H. Carr et al. // Infect. Control Hasp. Epidemiol. 2002. -№12.-P. 297-302.

109. Andreu, G. Hemovigilance network in France: organization and analysis of immediate transfusion incident reports from 1994 to 1998 / G. Andreu, P. Morel, F. Forestier et al. // Transfusion. 2002. - № 41. - P. 1356-1364.

110. AuBuchon, J.P. Experience with universal bacterial culturing to detect contamination of apheresis platelet units in a hospital transfusion service / J.P. AuBuchon, L.K. Cooper, M.F. Leach // Transfusion. 2002. - № 42. - P. 855-861.

111. Avila, C., Stetier H., Sepulveda J. The epidemiology of AIDS transmission among paid plasma donors / C.Avila, H. Stetier, J. Sepulveda // Mexico City, Mexico AIDS. 1989-№3. - P. 631-633.

112. Berg, R.D. Bacterial translocation from the gastrointestinal tract / R.D. Berg // Trends in Microbiol. 1995. - V. 3. - P. 149-154.

113. Barret, B.B. Strategies for the avoidance of bacterial contaminantion of blood components / B.B. Barret, J.W. Andersen, K.C. Anderson // Transfusion. -1993.- №33.-P. 228-233.

114. Berg, R.D. Bacterial translocation from the gastrointestinal tract to extraintestinal sites / R.D. Berg // Abst. XII Intern. Sympos. Gnotobiology. -Honolulu, June. 1996. - P. 23-28.

115. Biswar, R. Erly detection of hepatitis B virus infection: sensitivity of HBV DNA detection by PCR and HbsAg detection by a new generation of assays / R. Biswar, C.C. Hisa, M. Bush et al. // Hepatology 2001. - Vol. 34. - P. 61 OA.

116. Biswas, R. Comparative sensitivity of HBV NATs and HbsAg assays for detection of HBV infection / R. Biswas, E. Tabor, C.C. Hsia et al. // Transfusion -2003.-№43.-P. 788-798.

117. Blajchman, M.A. Bacterial contamination and proliferation during the storage of cellular blood products / M.A. Blajchman // Vox. Sang. 1998. - № 74. -P. 155-159.

118. Borden, C.W. Fatal transfusions from massive bacterial contamination of blood / C.W. Borden, M.F. Hall //N. Engl. J. Med. 1951 - № 245. - P. 760-765.

119. Brecher, M.E. Monitoring of apheresis platelet bacterial contaminantion with an automated liquid system / M.E. Brecher, S.N. Hay, S.J. Rothenberg //Transfusion. 2003. - № 43. - P. 974-978.

120. Bruneau, C. Efficacy of new collection procedure for preventing bacterial contamination of whole-blood donations / C. Bruneau, P. Perez, M: Chassaigne // Transfusion. 2001. - № 41. - P.74-81.

121. Burstain, J.M. Rapid identification of bacterially contaminated platelets using reagent strips: glucose and pH analysis as markers of bacterial metabolism / J.M. Burstain, M.E. Brecher, K. Workman //Transfusion. 1997. - № 37. - P.255-258.

122. Busch, M. P. NAT and blood safety, what is problem? / M. P. Busch, R. Y. Dodd // Transfusion. 2000. - № 40. - P. 1175-1180.

123. Busch, M. P. Closing the windows on viral transmission by blood transfsion. In: Stramer S.L., editor. Blood safety in the new millennium. / M. P. Busch // Bethesda, MD: American Association of Blood Banks. 2001. - P. 33-54.

124. Busch, M. P. Transfusion-associated AIDS / M. P. Busch // Principles o of transfusion medicine, 2nd. Baltimore, MD: Williams and Wilkins 1995. - P. 699-708 .

125. Busch, M. P., Current and emerging infectious risks of blood transfusion / M. P. Busch, S.H. Kleinman, G.J. Nemo // JAMA. 2003. - №289 - P. 952-962.

126. Busch, M. P. Declining value of alanine aminotransferase in screening of blood donors to prevent posttransfusion hepatitis B and C virus infection / M. P. Busch, J. J. Koretitz, S. H. Kleinman et al. // Transfusion. 1995. - №35. - P. 903910.

127. Busch, U. Methods for the differentiation of microorganisms / U. Busch, H. Nitschon // J. Chromatogr. B. 1999. - Vol. 722, № 1-2. - P. 263-278.

128. Cardoso, M.S. Mini-pool screening by nucleic acid testing for hepatitis B virus, ytpatitis C virus, and HIV-1 preliminary result / M.S. Cardoso, K. Koerner, B. Kubanek // Transfusion. 1998. - № 38. - P. 905-907.

129. Center for Disease Control and Prevention. First 500 000 AIDS cases -USA, MMWR. 1995. - P. 849-853.

130. Chapman, J. Progress in iproving the pathogen of red cell concentrates / J. Chapman // Vox. Sang. 2000. - № 78. - P.203-204.

131. Chassaigne, M. Reduction of bacterial load by predonation sampling / M. Chassaigne, C. Vassort-Bruneau, P. Allouch et al. // Transfus. Apheresis Sci. -2001. -№24. P. 253

132. Cyrus, S. Evaluation of an alternate HIV confirmatory testing algorithm / S. Cyrus, G. Robertson G., S. Caglioti S., et al. // Transfusion. -2002. -№43. S.131-140K.

133. Dodd, R. Y. Blood supply: Risks, perceptions, and protects for the future / R. Y. Dodd // Bethesda, MD: American Association of Blood Banks, -1994.-P. 1-24.

134. Dodd, R. Y. Emerging infections, transfusion saety, and epydemiology / R. Y. Dodd // N. Engl. J. Med. 2003. - № 349. - P. 1205-1206.

135. Dodd, R. Y. The risk of transfusion-transmitted infection / R. Y. Dodd // N. Engl. J. Med. 1992 - №327. - P. 419-420.

136. Dodd, R.Y. Current prevalence and incidence of infectious disease markers and estimated window-period risk in the American Red Cross blood donor population / R. Y. Dodd, E.P. Notari, S.L. Stramer // Transfusion. 2002. - №42. -P. 975-979.

137. Dodd, R.Y. Indeterminate results in blood donor testing: what you don't know can you / R.Y. Dodd, E.P. Notari, S.L. Stramer // Trans. Med. Rev. -2000.-№14.-P. 151-160.

138. EcEntegtart, M.G. Dangerous contaminants in stored blood / M.G. EcEntegtart // Lancet. 1956. - №271. - P. 909-911.

139. Finegold, S.P. Normal human intestinal flora / S.P. Finegold // Ann. 1st. Super Sanuta. 1996. - Vol. 22, № 3 - P. 1111 -1117.

140. Gibson, T. Skin fragments removed by injection needles / T. Gibson, W. Norris // Lancet. 1958. - № 2. - P. 983-985.

141. Grethe, S. Characterization of unusial escape variants of hepatitis B virus antigen negative subject / S. Grethe, M. Monazahian, J. Bohme et al. // J. Virol. 1998. - Vol. 72, № 9. - P. 7692-7696.

142. Goldman, M. Evaluation of donor skin disinfection methods / M. Goldman, G. Roy, N.Frechette et al. // Transfusion. 1997. - №37. - P. 309-312.

143. Gong, J. Novel automated microbial screening of platelet concentrates / J. Gong, C.F. Hogman, M. Lundholm // APM1S. 1994. - № 102. - P.72-78.

144. Haditch, M. Yersinia enterocolitica septicemia in autologous blood transfusion / M. Haditch, L. Binder, C. Gabriel et al. // Transfusion 1994. - №34. -P. 907-909.

145. Hewlett, I.K. Food and drug administranion conference jn the feasibility of genetic technology to close the HIV-1 window in donor screening / I.K. Hewlett, J.S. Epstein // Transfusion. 1997. - № 37. - P. 346-351.

146. Hillyer, C.D. Bacterial contamination of blood components: risk, strategies and regulation / C.D. Hillyer, C.D. Josephson, M.A. Blajchman // Hematology (American Society of Hematology Education Program). 2003. -P.575-589.

147. Hogman, C.F. Posttransfusion Serratia marcescens septicemia / C.F.

148. Hogman, H. Fritz, L. Sandberg // Transfusion. 1993. - №33. - P. 189-191.

149. Jacobs, M.R. Don t bug me: the problem of bacterial contaminantion of blood components challenges and solutions / M.R. Jacobs, R. Yomtovian // Transfusion.-2001.-№41. - P. 1331-1334.

150. Jousimies, S.H.R. Comparision of the nasal bacterial floras in two groups of healthy subjects in patients with acute maxillary sinusitis / S.H.R. Jousimies, S. Savolainen, I.S. Ylikoski // J. Alin. Microbiol. 1989. - V. 27, №12. -P. 2736-2743.

151. Kenny, F. Development of a rapid test for detection of bacterial contamination in platelet units / F. Kenny, C. Woodbury, M. Pelak // Transfusion. -2003.- № 43.-P. 496-504.

152. Klein, H. G. Standards for blood banks and transfusion services / H. G. Klein // Bethesda, MD: American Association of Blood Banks. 1996.

153. Kleinman, S. False-positive HIV-1 test result in a low-risk screening seting of voluntary blood donation / S. Kleinman, M.P. Busch, L. Hall et al. JAMA. 1998. -№280. - P. 1080-1085.

154. Krishnan, L.A. Transfusion-transmitted bacterial infection / L.A. Krishnan, M.E. Brecher// Hematol. Oncol. Clin. North Am. 1995. - V.9. - P.167-185.

155. Lackitz, E. Current risk estimates of HIV in the United States / E. Lackitz, L. Petusen, G. Satten // 2 nd National Conference on Human Retroviruses and Related Infections. Washington, DC: American Society for Microbiology. -1995.-P. 56.

156. Leiby, D.A. A retrospective analysis of microbial contaminants in random-donor platelets from multiple sites / D.A. Leiby, K.L. Kerr, J.M.Campos et al. // Transfusion. 1997. - №37. - P. 259-263.

157. Macauley, A. Operational feasibility of bacterial monitoring of platelets / A. Macauley, A. Chandrasekar, G. Geddis et al. // Transjus Med. 2003. - №13. -P. 189-195.

158. McDonald, C.P. Fatal Clostridium perfringens sepsis from a pooled platelet transfusion / C.P. McDonald, S. Hartley, K. Orchard // Transfus. Med. -1998. -№ 8.-P.19-22.

159. McDonald, C.P. Evalution of donor arm disinfection techniques / C.P. McDonald, P. Lowe, A. Roy et al. // Vox. Sang. 2001. - № 80. - P. 135-141.

160. Moitow, J.F. Septic reaction to platelet transfusions. A persistent problem / J.F. Morrow, H.G. Braine, T.S. Kickler et al. // JAMA. 1991. - № 266. -P. 555-558.

161. Ness, P. M. Bacterial transmission by transfusion / P.M. Ness // In: Rossi E. C., Simon T. L., Moss G. S., Gould S. A. // Principles of transfusion medicine, 2nd. Baltimore, MD: Williams and Wilkins 1995. - P. 739-745.

162. Ortolano, G.A. Detection of bacteria in WBC-reduced PLT concentrates using percent as a marker for bacteria growth / G.A. Ortolano, L.F. Freundlich, S. Holme // Transfusion. 2003. - №43. - P. 1276-1284.

163. Pealer, L.N. Transmission of West Nile Virus trough blood transfusion in the United States 2002 / L.N. Pealer, A.A. Martin, L.R. Petersen at al. // N. Engl. J. Med. 2003. - № 349. - P. 1236-1245.

164. Peterson, L.J. The incidence of bacteremia in pediatric patients following tooth extraction / L.J. Peterson, R. Peacock // Circulation. 1976. - № 53. - P. 676-679.

165. Pichichero, M.E. Resistant respiratory pathogens and extend -spectrum antibiotics / M.E. Pichichero // Am. Fam. Physician. 1995. - V. 52, №6. -P. 1739-1746.

166. Pietrelli, L. A prospective study to evaluate the screening of plasma pools from volunteer blood donation for the presence of HBV DNA / L. Pietrelli, J. Gorlin, P.Holland et al. // MMWR. 2003. - № 52. - P. 1-16.

167. Pittman, M. A study of bacteria implicated in transfusion reaction and bacteria isolated from blood products / M. A. Pittman // J. Lab. Clin. Med. 1953. -№ 4. P. 273-288.

168. Radcliffe, J.H. Bacteriological sterility of washed red blood cells after 72 hours storage / J.H. Radcliffe, M.A. Denham, C. Gaydos et al. // Transfusion. -1978.- № 18.-P. 365-366.

169. Rhame, F.S. Salmonella septicemia from platelet transfusions. Study of an outbreak traced to a hematogenous carrier of Salmonella cholerae-suis /F.S. Rhame, R.K. Root, J.D. MacLowry et al. // Ann. Intern. Med. 1973. - №78 -P.633-641.

170. Roth, W. K. HBV NAT and anti-HBc testing increase blood safety / W. K. Roth, M. Weber, D. Hetersen et al. // Transfusion. 2002. - №42. - P. 869-875.

171. Roth, W. K.Feasibility and efficacy of routine PCR screening of blood donations for hepatitis B virus, and YIV-1 in blood-bank setting / W.K. Roth, M. Weber, E. Seifried//Lancet. 1999. - № 353. - P. 359-363.

172. Ruehnert, M.J. Transfusion-transmitted bacterial infection in the United States 1998 trough 2000 / M.J. Ruehnert, V.R. Roth, N.R. Haley et al. // Transfusion. 2001.-№41.- P. 1493-1499.

173. Savage, P.C. The normal human microflora composition / P.C. Savage // In: The regulatory and protective role of the normal microflora / ed. R. Grubb et al. -Ney York. W.- Stocton Press. 1989.

174. Sazama, K. Bacteria in blood for transfusion / K. Sazama // Arch. Pathol. Lab. Med. 1994.-№118. - P. 350-365.

175. Schottstedt, V. PCR for HBV, HCV and HIV-1 experiences and first results from a routine screening programme in a large blood transfusion service / V. Schottstedt, W. Tuma, G. Bungeret al. // Biologicals. 1998. - №26. - P. 101-104.

176. Schreiber, G.B. For the Retrovirus Epidemiology Donor Study. The risk of transfusion-transmitted vital infections / G.B. Schreiber, M.P. Busch, J.J. Kleinmann //N. Engl. J. Med. 1996. - № 334. - P. 1685-1690.

177. Seaver, M. First results using automated epifluorescence microscopy to detect Escherichia coli and Staphylococcus epidermidis in leukoreduced platelet concentrates / M. Seaver, J.C. Crookstop, D.C. Roselle // Transfusion. 2001. - № 41.- P.1351-1355.

178. Sire, J.M. Septic shock due to Yersinia enterocolitica after autologus transfusion / J.M. Sire, C. Michelet, R. Mesnard et al. // Clin, infect. Dis. 1993. -№ 17.-P. 954-955.

179. Stramer, S.I. NAT of United States and Canadian blood supply / S.I. Stramer, S. Caglioti, D.M. Strong // Transfusion. 2000. - №40. - P. 1165-1168.

180. Tabor, E. The epidemiology of virus transmission by plasma derivatives: clinical verifying the lack of transmission of hepatitis B and C viruses and HIV type 1 / E.Tabor // Transfusion. 1999. -№ 39. - P. 1160-1168.

181. Tobler, L.H. Misclassification of HCV viremic blod donors as indeterminate by RIBA 3.0 because of human superoxide dismutase activity / L.H. Tobler, S.L. Stramer, S. Kleinman et al. // Transfusion. 2001. - № 41. 7 P. 16251626.

182. Vengeler-Tyler, G. Decline of transfusion-associated hepatitis C virus / G. Vengeler-Tyler, M. Busch // CBBS Today 1995. -№13. - P. 17-21.

183. Wagner, S.J. Transfusion-associated bacterial sepsis / S.J. Wagner, L.I. Friedman, R.Y. Dodd // Clin. Microb. Rev. 1994. - № 7. - P. 290-302.

184. Wagner, S.J. Evaluation of swirling, pH, and glucose for the detection of bacterial contaminantion in platelet concentrates /S.J. Wagner, D. Robinette // Transfusion. 1996. - №36. - P.989-993.

185. Wagner, S.J. Diversion of initial blood flow to prevent whole blood contamination by «skin» surface bacteria: an in vitro model / S.J. Wagner, D. Robinette, L.I. Friedman et al. // Transfusion. 2000. - №40. - P.335-338.

186. Wust, T. Fatal endotoxic shock after administration of autologous erythrocyte concentrate / T. Wust, C. Saade // Chirurg. 2001. - № 72. - P. 215-217.

187. Young, N.S. Parvovirus B 19 / N.S. Young, K.E. Brown // N. Engl. J. Med. 2004. - № 350. - P. 586-597.