Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Физиологические аспекты активности холинэстеразы Triticum aestivum: в онтогенезе растения, при инфицировании корней Azospirillum brasilense sp245

ВАК РФ 03.00.12, Физиология и биохимия растений

Автореферат диссертации по теме "Физиологические аспекты активности холинэстеразы Triticum aestivum: в онтогенезе растения, при инфицировании корней Azospirillum brasilense sp245"



'/¿йашл^

На правах рукописи

КАЛИНИНА Алла Владимировна

ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ АКТИВНОСТИ ХОЛИНЭСТЕР АЗЫ ТНГПСиМАЕЗТІУЦМ: В ОНТОГЕНЕЗЕ РАСТЕНИЯ, ПРИ ИНФИЦИРОВАНИИ КОРНЕЙ ЛгОБРШІЬЬиМ Ш^ЇЬЕХБЕ вр245

Специальность 03.00.12 - физиология и биохимия растений

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва — 2003

Работа выполнена на кафедре микробиологии и физиологии растений Саратовского государственного университета им Н Г Чернышевского

Научный руководитель

доктор биологических наук, профессор С.А.Степанов

Официальные оппоненты

доктор биологических на\тс, Ь Ь Кириченко

кандидат биологических наук, доцент С В-Душехватов

Ведущая организация Научно исследовательский институт се тьского хозяйства Юго-Востока Р АСХН, г Саратов

Защита состоится « ' » '¿НС*/?*. проз г на иседании диссертационного совега // С Д 220 044 ОХ в Московской сельсхохозяисгвенной академии им К А Тимирязева '*

Адрес 127550, г Москва Тимирязевская учица д 49 Ученый совет МСХА

С диссертацией можно озн ься в ЦНБ МС " "

Автореферат разост

Ученый секретарь

диссертационного сс і /

каня ідат Оиою-ичесхлх н-)К ' V- с-^г)/ - НПКарсУнкина

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы. Этап ассимиляции физиологией растений методов и логических основ других биологических дисциплин - цитологии, биохимии, молекулярной биологии и других (Курсанов, 1982,1984, 1997), подвел исследователей к осмыслению главных принципов, которые лежат в основе поддержания целостности структурных и функциональных элементов- растительного организма (Мокроносов,1981; Гамалей, 1997; Полевой, 2001). Некоторые факты позволяют считать, что эти принципы едины как для животных, так и для растений (Гунар, 1953;Рощина, 1991).

Особенностью растительного организма является постоянное наличие образовательных тканей, обеспечивающих построение разноименных частей растения, гетерогенных по ряду макро - и микропризнаков (Хохряков, 1982; Эсау, 1969). Апикальная часть побега, рассматриваемая как полифункциональная структура, в которой сосредоточены атграгирующий центр, сенсорная и другие зоны (Полевой, 1975, 2001), одновременно обеспечивает метамерный принцип строения побега (Щафранова, 1980; Степанов, 2001). Предполагается (Кумаков и др., 1994; Головинская, Степанов, 2001), что отдельные метамеры обладают чертами автономности. В основе взаимодействия метамеров, как и элементов в пределах каждого из них, лежат трофические, гормональные и электрофизиологические связи. В то же время неоднократно выдвигаемая в конце X X столетия идея нервизма растения (Опритов и др., 1991) с некоторых пор получила ряд оснований - работы по изучению раздражимости, механизмов проницаемости клеток и распространения потенциала действия, основ энергетики органелл и клеток (Гунар, 1953; Скулачев, 1989; Полевой, 2001).

На рубеже 60-х годов XX столетия произошел мощный всплеск исследований по нейротрансмиттерам - ацетилхолину, адреналину, норадреналину, дофамину и другим, обнаруживаемых у все новых и новых видов растений. Как показали результаты работ, нейротрансмиттеры (биомедиаторы) оказывают многообразные действия на растения на разных уровнях их организации. В эти же годы стала переосмысливаться функция нейротрансмиттеров в жизнедеятельности животных. В ряде работ Г.А. Буз-никова (1967, 1987) было показано, что кроме нейротрансмиттерной функции многим из них присуща другая роль - регуляции процессов деления и дифференциации кле-

4ИЯ ения д

ток. С учетом наличия у растений оЬразов<Цй.11>ША nujieñ, где постоянно соверша-

'1НБ МСХА

ются процессы делений

дполагается (Рощина, 1991;

Степанов, 1992, 1993, Готовинская, Степанов, 2001), что нейротрансмиттеры имеют существенное значение в их жизнедеятельности, прежде всего, в таких интеграционных процессах, как рост и развитие растений Наибольшее число работ пока имеется по холинэргической системе регу-гяции что связано, прежде всего, с ее участие« в фотоморфогенезе растений Однако исследования в этом направлении находятся в самом начале пути (Роидана,1991)

Петь и задачи исстедов^ния Основной целью работы являлось изучение фшио тогических аспектов активности холинэстеразы в онтогенезе пшен.шы и при роздеи-ствии факторов биотическом (азоспирипа) и абиотической (фосфорорганические пестициды) природы

Для реализации поставленной цели решались стсдуюшие задачи

1 Установить основные закономерности вдменения активности хочннэстеразы в онтогенезе пшеницы

2 Изучить влияние факторов среды (азоспирилпд и ФОП) на активность холинэ-стеразы и отдельные морфозогические параметры развития зародышевых корней гшеницы

3 Очредечить качественный и кочичественныи состав фосфолипидов АгоБртНит Ьи^ете «р245

Научная новизна работы В работе впервые показано, что зародыши зерновок разных чет репродукции оп1Чшогся по активности холинэстеразы С момента прорастания зерновок в онтогенезе побега могут наблюдагься сортоспецифическне, периодические изменения активности хочннэстеразы метамеров и их лементов Показано, что биотичесхие (азоспириала) и абиотические (ФОП) факторы среды оказывают влияние на активность холинэстеразы и отдельные параметры роста и развития корней пшеницы Впервые определен качественный и количес! венный состав фосфолипидов А/.окршНиш Ьга-чЦспяе хр245

Теоретическая и практическая значимость работы Представленные » работе данные вносят вклад ь разрешении вопросов, связанных с механизмами чежметамерных взаимоогнот ений при учасзии холинэргической системы рефляции гомеостаза растения, ее зависимости от биотических и абиотических факторов среды

Полученные в результате работы сведения расширяют представления о физио ю-гри и биохимии важнейшей СеИСКОХОЗЯИСТпеННОЙ культуры - пшеницы ей приют"-

ного ассоциативного симбионта - азоспириллы.

Результаты исследований используются при оценке биологической активности новых соединений и продуктов деструкции отравляющих веществ, при проведении лабораторных практикумов, выполнении дипломных работ.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. В онтогенезе пшеницы наблюдаются сортоспецифические периодические изменения активности холинэстеразы.

2. АякртПит ЬтПепве яр245 и ФОП приводят к изменениям активности холинэстеразы и морфологии зародышевых корней пшеницы.

Апробация работы. Результаты исследования и основные положения диссертации докладывались: на 1-й Европейской конференции по азотфиксации (Сегет, Венгрия, 1994), 16-м Международном конгрессе по биохимии-* молекулярной биологии (Нью-Дели, Индия, 1994), Международном рабочем совещании по азоспириллам и родственным микроорганизмам (Шарвар, Венгрия, 1994), 4-м симпозиуме по биохимии липидов (Санкт-Петербург, Россия, 1994), Международном рабочем совещании по ассоциативному взаимодействию азотфиксирующих бактерий с растениями (Саратов, Россия, 1995), Интернациональном симпозиуме по микробиологии (Давос, Швейцария, 1996), симпозиуме по физико-химическим основам физиологии растений (Пенза, Россия, 1996), Международной конференции по анатомии и морфологии растений (Санкт-Петербург, Россия, 1997), 3-м ежегодном симпозиуме по физико-химическим основам физиологии растений и биотехнологии (Москва, Россия, 1997), научной конференции СВИРХБЗ (Саратов, 2003).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано IV работ.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 124 страницах машинописного текста и состоит из введения, 5 глав, заключения и выводов. Список цитированной литературы включает 264 источника, из них 134 иностранных авторов. Работа содержит 42 рисунка и 2 таблицы.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

1. ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ АКТИВНОСТИ ХОЛИНЭСТЕРАЗЫ РАСТЕНИЙ (обзор литературы)

В главе рассматриваются вопросы: о регуляторных системах растений (Полевой, 1975, 1982,1986; Мокроносоз, 1978, 1981; Зубкус,1979; Батыгин, 1986), понятие о

биомедиаторах (F'uck, Jaffe, 1974 ab, Hartmann,Gupta,1989, Рощина,1987 аб,1989, 1991), компоненты холинэргической системы регуляции - ааетичхолин (Hmrnelm, Feldberg, 1947, Rowatt,1948, Rouatt,194K, Рощина, Му^нн, 1986), холинацетитгранс-фераза (Barlou, Dixon. 1973, Hadakova et al, 1981), холинэстераза (Riov, Jaffe 1973ав, Fluck, Jaffe,1974ав, Momonoki, Momonoki, 1993, Gupta, Gupta, 1997, Gupta et al, 2001) их зависимости от биотических и абиотических факторов среды (Hartmann Kilbinger, 1974а, в; Miura, Shm,1984, Molyneux, McKinlav, 1989), влияние ацетилхолина и чоли-нэстеразы на физиологические процессы в растениях (Gressel et al, 1971 Holm, Miller, 1972, Tretyn et al, 1988, Рощина, 1992), влияние ассоциативных симбионтов -бактерий рода Azospinllum на растения (Мишустин, 1975, Tarrand et al, 1978. l'mali-Garsta et al ,1980, Baldany et al, 1983, Калининская и др, 1981, Umali-Garsia et al ,1980, Baldany et al, 1983, Пощнякова и др, 1988; Баканчикова, Мякиньков.1989, Bashan, Hoigum, 1993)

2 ОБЪЕКТЫ ИСССЛЕДОВАНИЙ, МЕТОДИКА И УСЛОВИЯ ПРОВЕ-ДЕШ1Я 01ШТ0В

Все исследования пшеницы проводились как в лабораторных условиях так и в по-тевых мечкодетяночных зксиериментах в течение ряда пет (1994-1997, 2'КЛ 20U2 гг ) Боаьшая часть иссчеяований Trmcum aestivum проводилась на сортах Ljpai опекая 36 (длинностебельный), Нададорес (короткостебельныи) и Саратовская ^2 (с укороченным стеблем), потученной от скрещивания первых двух сортов Кроме того испочьзовались сорта Уорчд Сидз 1Ы6 (короткостечьный, скороспелый) и Красно-кутка 7 - длинностельныи, скороспелый (С гепзнов, 2001 ) Испо 1ьзуечыи в работе штамм Azospinllum brasilense sp245 выращивали при 32°С в периодической KvnbTvpe с перемешиванием на синтетической малатной среде (IConnova et а!, 1994) Дпя определения активности холинэстеразы использовался метод Хестрина (Chestrm, 1949) в модификации (Муравьева, 1961, Пашоков, I960, Франке и др, 1973) Чисто повтор-ностей 5-7

' Для колонизации корней пшеницы использовали простерилизованныс семена пшеницы, которые через сутки от замачивания переносили на среду, состоящую из 10-ти мл 0,1 мМ CaSOj и 3-х м i культуры азоспириллы (п=20) На 4-тые, 5-тые сутки производили измерения длины корней, расстояния от корневого чехлика то юны корневых вошсков и длины корневых во толков В экспериментах по изучению и->м„-

нения холинэстеразной активности использовали семидневные проростки (п=20). Число повторностей 5-6.

Экстракцию фосфолипидов азоспирилл для анализа осуществляли по Эймсу (Ames, 1968). Индивидуальные фосфолипиды разделяли с помощью одномерной хроматографии (Новицкая, 1972; Уильяме, Уилсон, 1978) на пластинках 10x10 см с сили-кагелем 60 ("Merck", ФРГ) в системе: хлороформ / метанол / вода / аммиак (8,56 N) в соотношении 60:37,5:3:1. Камеру для хроматографии «насыщали» в течение одного часа. Пластинки перед употреблением помещали на 1-2 минуты в 1,2% раствор борной кислоты в 50% этаноле. Затем выдерживали на воздухе 15 минут. «Активирование» проводили в сушильном шкафу (90° С) в течение 1 часа. Двумерную хроматографию проводили в двух направлениях (Новицкая, 1972; Кейтс,1975). Первое направление проводили в щелочной системе: хлороформ / метанол / 7N аммиак в соотношении 130:60:8, второе - в кислой системе: хлороформ / метанол / уксусная кислота / вода в соотношении 170:25:25:6. Фосфолипиды проявляли парами йода. Число повторностей 5-6.

В качестве пестицидов использовали глифосаг, глуфосинат аммония (баста), карбофос разной концентрации (10"3-10"7 М). Статистическую обработку результатов исследований проводили на Pentium ММХ-166 по Б.А.Доспехову (1985).

3. АКТИВНОСТЬ ХОЛИНЭСТЕРАЗЫ В ОНТОГЕНЕЗЕ ПШЕНИЦЫ

В первой серии экспериментов в лабораторных условиях определялась активность ХЭ у 4-х и 7-суточных проростков яровой пшеницы Саратовская 36 в следующих частях: зародышевые корни, первый лист, колеоптиль и базальная часть побега, состоящая из нижней части первого листа, зачаточных 2-4 метамеров (рис. 1).

44

Ш7-суточные проростки П4-суточные проростки

100

О 20 40 60 • 80 100 120

Активность ХЭ, %

Рис.1. Активность холинэстераэы проростков яровой пшеницы Саратовская 36. 100% активности ХЭ соответствует 0.0167 мг/мин х г

Максимальная активность ХЭ наблюдалась в зародышевых корнях 7-суточных проростков пшеницы У 4-суточных проростков активность ХЭ зародышевых корней составляла 45 % от активности ХЭ у 7-суточных проростков

Минимальные значения активности ХЭ отмечались у 4 ^уточных проростков пшеницы в колеоптиле Они были примерно в 8 раз меньше активности ХЭ в зародышевых корнях

В полевых условиях абсолютные значения активности ХЭ в узлах стебая примерно в 2 раза выше, чем в проростках пшеницы Наименьшая активность ХЭ в начале наших исследований выявлена в 1-3 узлах, большая - в 5-ом узле стебчя Перед началом цветения значительно возрастает активность ХЭ 5-го узла стебля пшеницы В дальнейшем наблюдалось резкое возрастание активности ХЭ верхнего уз та, тогда как активность ХЭ в 1 -3 узлах стебтя уменьшалась (рис 2)

О '— — -+— ь (--> —

3 5 7 9 И 13 ¡5 17 „ 19 21 23 25

Календарные даты июня

Рис.2 Активность холинэстеразы в онтогенезе побега Саратовская 36, 1995 г 100 % активности ХЭ соответствует 0,0363 мг/мин х грамм

Отмечена градация по активности ХЭ между элементами метамера В частности спустя 10 дней от начала цветения, как свидетельствуют наши набиодения, абсолютное значение активности ХЭ, отмечаемое в 5 междоузлии, снижается примерно в три раза относительно значений дія пластинки 5-го чиста (рис 3)

При сравнение пластинок '¡-го и верхнего листьев до начала и в период цветения было выявлено, что максимальная активность характерна для 5-го листа Максимальные абсолютные значения активности ХЭ в верхнем листе были примерно в 1,5 раза

выше значений активности ХЭ в узлах стебля. Периодичность изменений активности ХЭ в пластинке верхнего листа составляла 1-3 дня, что несколько больше при сравнении с узлами стебля (рис. 2).

О 20 40 60 80 100 120

Активность ХЭ, %

Рис.3. Активность холинэстеразы частей побега Саратовская 36 на 10 день после начала цветения. 100% активности ХЭ соответствует 0,0280 мг/мин х грамм

Для верхнего метамера максимальная активность ХЭ наблюдалась у влагалища верхнего листа. Она была примерно в 22 раза выше подобной активности в пластинке листа ив 1,5 раза выше, чем в верхнем междоузлии. Тем не менее, максимальное значение активности ХЭ отмечалось в верхнем узле. Одной из возможных причин подобного явления является, очевидно, сохранение меристематической активности в узлах стебля.

В зародышах зерновок пшеницы Саратовской 36 разных лет репродукции активность ХЭ может различаться . Максимальные значения активности ХЭ были отмечены в семенах 1994 года, минимальные -1996 года.

Исследования, проведенные нами в лабораторных условиях, показали, что спустя 48 часов от момента замачивания и прорастания семян, активность ХЭ у сортов с укороченным стеблем (Саратовская 52 и Нададорес) была в два раза выше активности ХЭ у длинностебельного сорта мягкой яровой пшеницы Саратовская 36. Ещ8 через сутки активность ХЭ в проростках Нададорес была в три раза выше относительно подобных значений для Саратовской 36. Примечательно, что у сорта Саратовская 52,

полученного от скрещивания между Саратовской 36 и Нададорес, отмечены проме жуточные значения по активности ХЭ Включение в опыты новых сортов - Уорчд Сидз 1616, имеющего короткий стебель и Краснокутки 7, с длинным стеб чем -позволило отметить связь между морфотипом растения и уровнем активности ХЭ

Сравнение сортов по активности ХЭ в пластинке верхнего, флагового чиста показало, что на фоне динамики активности фермента в течение исследуемого периода для каждого из сортов сохраняется еортоспецифичность У короткосте белыгого сорта Нададорес активность ЧЭ в отдельные календарные даты была примерно в три раза выше относительно длинностебельного сорта Саратовская 36 У Саратовской 52 значения активности фермента бычи промежуточными между родительскими сортами - Нададорес и Саратовской 36 (рис 4)

Дтя влагалища верхнего, флагового чиста отмечена подобная же закономерность - низкии уровень активности ХЭ у длинностсбезького сорта Саратовская и бочее высокий у короткостебелыюго сорта Нададорес

Абсолютные значения активности ХЭ в генеративной зоне побега мягкой яровой пшеницы бычи сопоставимы с подобными значениями у проростков Максимальная активность ХЭ за день до начала цветения набчюдалась у Саратовской В ко-чосковых чешуях активность ХЭ > Саратовской 36 была примерно п два раза вь-ше, чем у Саратовской 52

В начале формирования зерновок больыая активность ХЭ отмечалась > Саратовской 36 Для Саратовской выявчены промежуточные значения активности ХЭ ме-

Я Саратовская 36 □ Саратовская 52 ■ Надтдореь.

я 12 п 15 и го гг

Календарные даты июня Рис 4 Активность хочинчетераш пластинки верхнего, фчагонот чиста яровой гаденицы, 1996 г

жду родительскими сортами В последующем большая активность ХЭ зерновок колоса была свойственна сортам с укороченной соломиной - Саратовская 52 и Нададорес

Не исключено, что основой подобной динамики активности холинэстеразы в он тогенезе пшеницы является подвижный баланс донорно-акцелторных отношений между метамерами побега пшеницы (Степанов 2001)

4 ВЛИЯНИЕ ФАКТОРОВ СРЕДЫ НА АКТИВНОСТЬ ХОЛИНЭС1ТРАЗЫ, РОСТ И РАЗВИТИЕ ЗАРОДЫШЕВЫХ КОРНЕЙ ПРОРОСТКОВ ПШЕНИЦЫ

При инфицировании зародышевых корней пшеницы АгоэршИит Ьпш1епье яр245 наблюдается изменение активности холинэстеразы относительно контрольных растений При этом отмечено различие в вечичине изменений активности ХЭ зародышевых корней и побега гроростков пшеницы (рис 5)

1---1—-—7"--

ИИ ш

Нададорес ['""'^^ду^^нн^^^атаж Ш Контроль ШОпыт

57 9 _ _

I I I

ШВШШННИВЯННННИI > > к I

Саратовская 52

Саратовская 36

1100

107.8

I

0 20 40 60 80 Ю0 120 14»

Активность холинэстеразы 0 о Рис ^ Активность холннзс-еразы зародышевых корней пшеницы при их инокуляции азосгириллой 100% активности ХЭ равно 0 0194 мг/мин х г

В частности, отмечено увеличение активности холинэстеразы зародышевых корней проростков у Саратовской 36 и Саратовской 52 относительно контрольных растений Наиболее значительное возрастание -ктивности ХЭ было характерно для Саратовской 36 Наоборот, у Нададорес установлено уменьшение активности ХЭ по цпв-нению с контролем (рис 5)

Таким образом, ассоциативный симбионт пшеницы Azospinllum brasiSense sp245 оказывает системное действие на проростки пшеницы, изменяя баланс активности ХЭ между побеговой и корневой частями проростков Установлено, что среди исследуемых сортов пшеницы наибольшее отношение активности холинэстеразы в системе побеї/корни у контрольных растений характерно для Саратовской 36 - 44 48, чаї.

меньшее - у сортов с укороченным стеблем -Саратовская 52 и Нададорес - соответственно 1,59 и 1,39.

Наблюдаются морфологические изменения зародышевых корней пшепицы при их инфицировании АгозрИПшп ЬгазНепве вр245 - длины корней, длины зоны растяжения и корневых волосков (рис.6).

Опыт

Контроль

I i I 1

Ш Нададорес ПСаратовская 36

ggg$fP 3729

3500 3800 4100 4400 4700 5000 5300 5600 5900 Расстояние от чсхлиха до зоны инициации корневых волосков» мкм Рис.6. Влияние А. ЬгиЛепж зр.245 на инициацию корневых волосков

Длина корневых волосков при инфицировании зародышевых корней АговрМИит Ьгазйепве вр245 увеличивается. В частности, для Саратовской 36 длина корневых волосков в контроле составляла 680,9 мкм, тогда как у опытных растений 845,2 мкм. Для Нададорес длина корневых волосков в контроле была 741,3 мкм, у опытных растений - 957,2 мкм (рис.7).

Опьгг

Контроль

! 1 i Н 845

1—1—1 957

— 741 ! i 1

□ Нададорес 19 Саратовская 36 ;

1--1 681

6S0 700 750 800 850 900 950 1000

Длина волосков, мкм

Рис.7. Изменение длины корневых волосков под влиянием А. brasilense sp.245 (на 4 сутки)

Отмечено изменение активности холинэстеразы под действием пестицидов При использовании раствора карбофоса в концентрации 10 J М наблюдалось уменьшение чолинэстеразной активности В частности выявлено снижение активности ХЭ в побе 1-е примерно в '4 раз относительно контрочя, в зародышевых корнях активность ХЭ снизилась примерно в 6 раз (рис 8)

Зародышевые корни

Побег

16.7

46 4

J

■ Опыт □ Контроль

г

40

60

80 100 12а

Активность ХЭ ° w

Ряс 8 Втияние карбофоса (10 VI) на активность холинэстеразы проростков Нададорес 100 активности ХЭ равно 0 0277 мг/мин х г

Использование фосфороорганических пестицидов приводит к изменению отношения активности холинэстеразы в системе гобег/корень (рис 9)

Установлено, что в зависимости от природы фосфорорганического пестицида, реакция на него, проявляемая в активности чоринэстеразы. может быть различной

Фосфорорганические пестициды влияют на развитие зародышевых корней пшеницы В экспериментах с карбофосом в качестве фосфорсодержащего пестицида в концентрационном интервале 2 10 3 М - 2 10 7 М наблюдалось уменьшение роста всех зародышевых корней Расстояние от корневого чехлика до зоны корневых волосков при концентрации 2 10 7 М составило 6^5,15 мкм, что в 7 раз меньше по сравнению с контрольным вариантом (4265,9 мкм)

При концентрациях 2 10 1 и 2 105М корневые волоски отмечались ера.™ же за корневым чехтакоч, что счидетечьствовало об отсутствии зоны растяжения клеток и о смещении зоны дифференциации корневых волосков к апексу корня По юченные результаты позволяют слетать гредположение о вчиянии растворов карбофоса на

процессы деления, растяжения и дифференциации клеток при участии холинэргиче-ской системы регуляции.

Баста

Глифосат

Карбофос

^ Отношение активности ХЭ Рис.9. Отношение активности холинэстеразы в системе побег/корни

В ходе дальнейших исследований было установлено, что не только концентрация пестицида влияет на данные параметры, но и вид используемого ФОП.

5. ФОСФОЛИПИДЫ ЛгОЭРШЬШМ ВЯА51ЬЕЫ5Е вр245

Мембраны азоспириллы содержат фосфолипиды, типичные для грамотри-цательных бактерий: кардиолипин (КЛ), фосфатидилэтаноламин (ФЭА) и фосфати-дилглицерин (ФГ). На долю ФЭА приходится 76,6% липидного фосфора, КЛ - 8,2%, а ФГ- 15,2%.

Методом двумерной хроматографии выявлены, кроме трех мажорных фосфоли-пидов, лизофосфатидилэтаноламин (лизоФЭА), а также два минорных фосфолипида, один из которых идентифицирован как фосфатидияинозитол (ФИ), а второй как фосфатидная кислота (ФК).

Выращивание азоспириллы в присутствии лекпта пшеницы не влияет на качественный фосфолипидный состав, но существенно изменяет количественный состав кислых фосфолипидов. При сохранении их суммарного содержания, количество КЛ снижалось до 3,4%, а ФГ увеличивалось до 19,9%; таким образом соотношение ФГ / КЛ возрастало более чем в 3 раза.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Присутствие ацетилхолина, холинэстеразы, других биомедиаторов в растениях позволяет говорить об универсальности механизмов межклеточной - межорганной коммуникации на всех уровнях биологической материи. Можно сказать, что природа

«экономит» в создании знаковых принципов структурированности организмов Однако, учитывая особенности растений - наличие меристем, развитой клеточной стенки, вакуолей и фототрофного типа питания, можно постулировать о доминировании \ растений другой, более важной функции биомедиаторов, кроме регуляции электрической и химической сигнализации, функции регуляторов процессов деления, растяже ния и дифференциации клеток Именно этим, на наш взгляд, можно объяснить различие в активности холинэстеразы зародышей зерновок пшеницы разных лет репродукции, существенные межсортовые различия, периодические изменения в онтогенезе растения Именно этрм, очевидно, определяются морфологические изменения зародышевых корней пшеницы в экспериментах с азоспириллой, фосфорорганическими пестицидами и активность хочинэстеразы в побеге и корнях растения.

Вместе с тем, оедует согласиться с мнением Рощиной В В (1991), что параллельно с накоплением экспериментальных данных о характере действия ацетичхочина, холинэстеразы на различные процессы в растительной клетке необходима разработка концептуальных подходов к расшифровке механизмов этого действия и анализ явлений в сложной системе оперативной регуляции растений Базисными вариантами таких подходов, на наш взпяд, могут являться 1 Рассмотрение активности \о лшэсте-разы, содержания ацетилхочина при изменении баланса донорно-акцепторных отношений между метамерами побега пшеницы В этом счучае метамеры побега, как пе-ментарные донорно акцепторные единицы (Мокроносов, 1981), выступают как «ступени» познания значимости биомедиаторов в регучяции морфогенеза цетот растения 2 Использование различных стресс-факторов биоткческои и абиотической природы, гозволяюшее цеченаправленно, в соответствии с рабочей гипотезой, почучить и расшифровать посчедоватечьность отдельных физиочогических и биохимических процессов регуляторпой системы

Вместе с тем, несмотря на то, что фундаментальные исследования механизмов морфогенеза, сенсорных реакций растений находятся еще в начале пути (Рощина, 1991) возникают вопросы практического применения уже полученных сведении Использование в гаком случае пшеницы, ее природных ассоциантов, как объектов ис следования, засуживает особого внимания, учитывая ей значение как важнетлеЛ протовольственной культуры

16

выводы

1. С момента прорастания зерновки между частями проростка пшеницы устанавливается различие в активности холинэстеразы, которая может изменяться по мере его роста и развития. В зародышах зерновок пшеницы разных лет репродукции активность холинэстеразы может существенно различаться.

2. В пределах отдельных метамеров побега пшеницы установлена градация по активности холинэстеразы между элементами - узлом, междоузлием, листом, или частями элемента метамера - пластинкой и влагалищем листа. Для узлов стебля, пластинки и влагалища листа выявлены периодические колебания активности холинэстеразы.

3. Установлено межсортовое различие по активности холинэстеразы в проростках, листьях и колосе вегетирующих растений яровой пшеницы. Меньшая активность холинэстеразы наблюдается у длинностебельных сортов, большая - у короткостель-ных сортов пшеницы.

4. Инфицирование • _ : корней пшеницы Azospirillum brasilense sp245 приводит к изменению активности холинэстеразы корней и побега проростков пшеницы, изменению длины корней, длины зоны элонгации и корневых волосков; при этом отмечена сортовая специфичность.

5. Использование фосфорорганических пестицидов приводит к уменьшению, как правило, активности холинэстеразы в проростках пшеницы, изменению морфологии

; корней - длины корней, длины зоны элонгации и корневых волосков.

6. Впервые определен качественный и количественный состав фосфолипидов мембран Azospirillum brasilense sp245. На долю фосфатидилэтаноламина приходится 76,6% липидного фосфора, кардиолипина - 8,2%, а фосфатидной кислоты - 15,2%.

7. Выращивание азоспириллы в присутствии лектина пшеницы не влияет на качественный фосфолипидный состав, но существенно изменяет количественный состав кислых фосфолипидов. При сохранении их суммарного содержания, количество КЛ снижается до 3,4%, а ФГ увеличивается до 19,9%; таким образом соотношение ФГ / КЛ возрастает более чем в 3 раза.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Antonyuk L.P., Kalinina A.V., Ignatov V.V., Nesmeyanova M.A. Regulation of nitrogen metabolism in Azospirillum brasilense by wheat lectin : involvement of Phospholipids in transm emmbrane signal transduction.//! st. Eur. Nitr. Fix. Conf . Szeged,

Hungary, Aug 28-sept 2, 1994 P 289

2 Antonyuk L P , Kalimna A V, Ignatov V V , Nesmeyanova M A Regulation of nitrogen metabolism in Azospinllum brasilense by wheat lectin involvement of Phospholipids in transmemmbrare signal transduction //Abstr 1 st Eur Nitr Fix Conf Szeged, Hungary, Aug 28 - sept 2, 1994 P 4

3 Калинина А В , Лнтошок Л П, Игнатов В В , Несмеянова М А Фосфолипид-ный состав мембран A/.ospirillum brasilense sp245 и его изменение под влиянием лос-гииа пшеницы / 4-й симпозиум го биохимии липидов, Санкт-Петербург, Роения, 3-6 октября 1994 С 4

4 Antonyuk L Р , Fomma О R , Kalimna А V, Semyonov S V , Nesmeyanova М А Ignatov V V Wheat lectin possiblv serves as a signal molecule m the Azospinllum - wheat association //Azosp rillum VI and Related Microorganisms Ocnetics, Phvsiologv Feologv / Ed I Fendrik, M Del Gal'o J Vanderlevden, M de Zamaroczv NATO AS! Scries Vol О Berlji Springer-Verlag, 1995 Р31Ч- 324

5 Antonjuk I P, Fomna OR, Kalmma AV, Ignatov VV Towards the lectm -carbohydrate recognition m the Azospinllum brasilense - wheat association / lit Workshop on Associative interactions of mtrogen-fixing bacteria with plants Saratov, Russia, 5-8 June 1995 Book ot Abstracts P 66

b Kalmma A V Involvement of the ' mobil ty" of phospholipid balance in Агоьр rillum brabilerse sp 24? ir wheat !ectn-med attd regulation of nitrogen metabolism /International Simposium on Subsurface Microbiology, Switzerland, Davos ¡^-21 September 1996 P 188

7 Stepanov S A, Kalmma A V Snevchenko О V Chohnesterase activitv m metameres of spnng wheat shoot / Abstr Phvsica!-chem ical basis of plant phvsiologv Perza, Russia, 5-8 Februarv 1996 M, 1996 P 74

8 Степанов С A . Гочовинская О H , Калинина А В А нагом о-ф нзио ю ги ческие аспекты межмегамерных взаимосвязей в онтогенезе яровой пшеницы //Труды международной конференции по анатомии и морфологии растении, Санкт-Петербург Россия, 2-6 июня 1997 С-Петербург, 1997 С 467

9 Стег-нов С А , Калинина А В Некоторые особенности активности хотите'е-разы яровой тпечипы /3-й ежегодный симпозиум по физико химическим осчевам

физиологии растений и биотехнологии. Москва, Россия, 27-28 июня 1997. М., 1997. С. 119.

10. Степанов С., Щеглова Е., Калинина А. Оценка активности холинэстеразы в онтогенезе побега сортов яровой пшеницы //Саратовский госуниверситет. Саратов, 1997. С. 1-7. Деп. В ВИНИТИ 19.03.97., № 841-В97.

11. Головинская О.Н., Калинина A.B., Степанов C.Ä. Физиологические аспекты межметамерных взаимосвязей в онтогенезе побега яровой пшеницы И Проблемы общей биологии и прикладной экологии животных и растений. Саратов,1997. С. 24-28.

12. Калинина A.B., Степанов С.А. Морфологические аспекты инокуляции зародышевых корней пшеницы Azospirillum brasilense sp. 245. //Вопросы биологии, экологии, химии и методики обучения: Сб. науч. ст. Саратов: ЗАО «Сигма-плюс», 2001. Вып 4. С.67-68.

13. Конешова Е.Ю., Калинина A.B. Исследование биологической активности новых соединений и продуктов деструкции OB // Научный отчет. Шифр "Биология". Инв. № гос.регистрации темы 0-02-11. Саратов: СВИ РХБЗ, 2002. 97 с.

14. Калинина A.B., Конешова ЕЮ., Стебеньков Д.В. Влияние растворов карбофоса на параметры развития зародышевых корней яровой пшеницы // Сб. научных трудов СВИРХБЗ. Саратов: СВИРХБЗ, 2003. Вып.2, С. 13-16.

! ,0 усл. п. л.

Зак. 286 Тираж 100 экз.

AHO «Издательство МСХА» 127550, Москва, ул. Тимирязевская, 44

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Калинина, Алла Владимировна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ АКТИВНОСТИ ХОЛИНЭСТЕРАЗЫ РАСТЕНИЙ

1.1. Регуляторные системы растений.

1.2. Понятие о биомедиаторах.

1.3.Холинэргическая система регуляции

1.4. Влияние ацетилхолина и холинэстеразы на физиологические процессы растений

1.5. Влияние ассоциативных симбионтов - бактерий рода Azospirillum на растения

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ, МЕТОДИКА И УСЛОВИЯ ПРОВЕДЕНИЯ ОПЫТОВ

2.1. Объекты исследования.

2.2. Методика исследования.

ГЛАВА 3. АКТИВНОСТЬ ХОЛИНЭСТЕРАЗЫ В ОНТОГЕНЕЗЕ

ПШЕНИЦЫ

ГЛАВА 4. ВЛИЯНИЕ ФАКТОРОВ СРЕДЫ НА АКТИВНОСТЬ ХОЛИНЭСТЕРАЗЫ, РОСТ И РАЗВИТИЕ ЗАРОДЫШЕВЫХ КОРНЕЙ ПРОРОСТКОВ ПШЕНИЦЫ

4.1. Изменение активности холинэстеразы при инфицировании зародышевых корней пшеницы Azospirillum brasilense sp

4.2. Морфологические изменения зародышевых корней пшеницы при их инфицировании Azospirillum brasilense sp

4.3. Изменение активности холинэстеразы под действием пестицидов

4.4. Влияние фосфорорганических пестицидов на морфологические изменения зародышевых корней пшеницы

1 f>

ГЛАВА 5. ФОСФОЛИПИДЫ AZOSPIRILLUM BRASILENCE sp245.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Физиологические аспекты активности холинэстеразы Triticum aestivum: в онтогенезе растения, при инфицировании корней Azospirillum brasilense sp245"

Этап ассимиляции физиологией растений методов и логических основ других биологических дисциплин - цитологии, биохимии, молекулярной биологии и других (Курсанов, 1982,1984, 1997), подвел исследователей к осмыслению главных принципов, которые лежат в основе поддержания целостности структурных и функциональных элементов растительного организма (Мокроносов,1981; Гамалей, 1997; Полевой, 2001). Некоторые факты позволяют считать, что эти принципы едины как для животных, так и для растений (Гунар, 1953; Рощина, 1991).

Особенностью растительного организма является постоянное наличие образовательных тканей, обеспечивающих построение разноименных частей растения, гетерогенных по ряду макро - и микропризнаков (Хохряков, 1982; Эсау, 1969). Апикальная часть побега, рассматриваемая как полифункциональная структура, в которой сосредоточены аттрагирующий центр, сенсорная и другие зоны (Полевой, 1975, 2001), одновременно обеспечивает мета-мерный принцип строения побега (Шафранова, 1980; Степанов, 2001). Предполагают (Кумаков и др., 1994; Головинская, Степанов, 2001), что отдельные метамеры обладают чертами автономности. В основе взаимодействия мета-меров, как и элементов в пределах каждого из них, лежат трофические, гормональные и электрофизиологические связи. В то же время неоднократно выдвигаемая в конце XIX столетия идея нервизма растения (Опритов и др., 1991) с некоторых пор получила ряд оснований - работы по изучению раздражимости, механизмов проницаемости клеток и распространения потенциала действия, основ энергетики органелл и клеток (Гунар, 1953; Скулачев, 1989; Полевой, 2001).

На рубеже 60-х годов XX столетия произошел мощный всплеск исследований по нейротрансмиттерам - ацетилхолину, адреналину, норадренали-ну, дофамину и другим, обнаруживаемых у все новых и новых видов растений. Как показали результаты работ, нейротрансмиттеры (биомедиаторы) оказывают многообразные действия на растения на разных уровнях его организации. В эти же годы стала переосмысливаться функция нейротрансмитте-ров в жизнедеятельности животных. В ряде работ Г. Бузникова (1967, 1987) было показано, что кроме нейротрансмиттерной функции многим из них присуща другая роль - регуляции процессов деления и дифференциации клеток. С учетом наличия у растений образовательных тканей, где постоянно совершаются процессы деления и дифференциации клеток, предполагается (Рощина, 1991; Степанов, 1992, 1993; Головинская, Степанов, 2001), что ней-ротрансмиттеры имеют существенное значение в их жизнедеятельности, прежде всего, в таких интеграционных процессах, как рост и развитие растений. Наибольшее число работ пока имеется по холинэргической системе регуляции, что связано, прежде всего, с ее участием в фотоморфогенезе растений. Однако исследования в этом направлении находятся в самом начале пути (Рощина, 1991).

Цель и задачи исследования. Основной целью работы являлось изучение физиологических аспектов активности холинэстеразы в онтогенезе пшеницы и при воздействии факторов биотической (азоспирилла) и абиотической (фосфорорганические пестициды) природы.

Для реализации поставленной цели решались следующие задачи:

1. Установить основные закономерности изменения активности холинэстеразы в онтогенезе пшеницы.

2. Изучить влияние факторов среды (азоспирилла и ФОП) на активность холинэстеразы и отдельные морфологические параметры развития зародышевых корней пшеницы.

3. Определить качественный и количественный состав фосфолипидов Azospirillum brasilense sp245.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. В онтогенезе пшеницы наблюдаются сортоспецифические периодические изменения активности холинэстеразы.

2. Azospirillum brasilense sp245 и ФОП приводят к изменениям активности холинэстеразы и морфологии зародышевых корней пшеницы.

Заключение Диссертация по теме "Физиология и биохимия растений", Калинина, Алла Владимировна

ВЫВОДЫ

1. С момента прорастания зерновки между частями проростка пшеницы устанавливается различие в активности холинэстеразы, которая может изменяться по мере его роста и развития. В зародышах зерновок пшеницы разных лет репродукции активность холинэстеразы может существенно различаться.

2. В пределах отдельных метамеров побега пшеницы установлена градация по активности холинэстеразы между элементами - узлом, междоузлием, листом, или частями элемента метамера - пластинкой и влагалищем листа. Для узлов стебля, пластинки и влагалища листа выявлены периодические колебания активности холинэстеразы.

3. Установлено межсортовое различие по активности холинэстеразы в ^ проростках, листьях и колосе вегетирующих растений яровой пшеницы.

Меньшая активность холинэстеразы наблюдается у длинностебельных сортов, большая — у короткостельных сортов пшеницы.

4. Инфицирование зародышевых корней пшеницы Azospirillum brasilense sp245 приводит к изменению активности холинэстеразы корней и побега проростков пшеницы, изменению длины корней, длины зоны элонгации и корневых волосков; при этом отмечена сортовая специфичность.

5. Использование фосфорорганических пестицидов приводит к уменьшению, как правило, активности холинэстеразы в проростках пшеницы, изменению морфологии зародышевых корней - длины корней, длины зоны элон

Щ гации и корневых волосков.

6. Впервые определен качественный и количественный состав фосфолипидов мембран Azospirillum brasilense sp245. На долю фосфатидилэтанола-мина приходится 76,6% липидного фосфора, кардиолипина - 8,2%, а фосфа-тидной кислоты -15,2%.

7. Выращивание азоспириллы в присутствии лектина пшеницы не влияет на качественный фосфолипидный состав, но существенно изменяет количеж ственный состав кислых фосфолипидов. При сохранении их суммарного содержания, количество KJ1 снижается до 3,4%, а ФГ увеличивается до 19,9% таким образом соотношение ФГ / KJI возрастает более чем в 3 раза.

101

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Присутствие ацетилхолина, холинэстеразы, других биомедиаторов в растениях позволяет говорить об универсальности механизмов межклеточной -межорганной коммуникации на всех уровнях биологической материи. Можно сказать, что природа «экономит» в создании знаковых принципов структурированности организмов. Однако, учитывая особенности растений — наличие меристем, развитой клеточной стенки, вакуолей и фототрофного типа питания, можно постулировать о доминировании у растений другой, более важной функции биомедиаторов, кроме регуляции электрической и химической сигнализации, функции регуляторов процессов деления, растяжения и дифференциации клеток. Именно этим, на наш взгляд, можно объяснить различие в активности холинэстеразы зародышей зерновок пшеницы разных лет репродукции, существенные межсортовые различия, периодические изменения в онтогенезе растения. Именно этим, очевидно, определяются морфологические изменения зародышевых корней пшеницы в экспериментах с азос-пириллой, фосфорорганическими пестицидами и активность холинэстеразы в побеге и корнях растения.

Вместе с тем, следует согласиться с мнением Рощиной В.В.(1991), что параллельно с накоплением экспериментальных данных о характере действия ацетилхолина, холинэстеразы на различные процессы в растительной клетке необходима разработка концептуальных подходов к расшифровке механизмов этого действия и анализ явлений в сложной системе оперативной регуляции растений. Базисными вариантами таких подходов, на наш взгляд, могут являться: 1. Рассмотрение активности холинэстеразы, содержания ацетилхолина при изменении баланса донорно-акцепторных отношений между метамерами побега пшеницы. В этом случае метамеры побега, как элементарные донорно-акцепторные единицы (Мокроносов, 1981), выступают как «ступени» познания значимости биомедиаторов в регуляции морфогенеза целого растения. 2. Использование различных стресс-факторов биотической и абиотической природы, позволяющее целенаправленно, в соответствии с рабочей гипотезой, получить и расшифровать последовательность отдельных физиологических и биохимических процессов регуляторной системы.

Вместе с тем, несмотря на то, что фундаментальные исследования механизмов морфогенеза, сенсорных реакций растений находятся ещё в начале пути (Рощина, 1991), возникают вопросы практического применения уже полученных сведений. Использование в таком случае пшеницы, её природных ассоциантов, как объектов исследования, заслуживает особого внимания, учитывая её значение как важнейшей продовольственной культуры.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Калинина, Алла Владимировна, Москва

1. Антонюк Л.П., Фомина О.Р., Игнатов В.В. Влияние лектина пшеницы на метаболизм Azospirillum brasilense: индукция биосинтеза белков // Микробиология. 1997. Т.66. С. 172-178.

2. Антонюк Л.П., Игнатов В.В. О роли агглютинина зародышей пшеницы в растительно-бактериальном взаимодействии: гипотеза и экспериментальные данные в её поддержку // Физиология растений. 2001. Т.48. №3. С.427-433.

3. Баканчикова Т. И., Мякиньков А. Г. Участие генов хемотаксиса в установлении ассоциативных взаимоотношений между Azospirillum brasilense и пшеницей //Молекулярная генетика. 1989. № 4. С.7-14.

4. Барлоу П.У. Деление клеток в меристемах и значение этого процесса для органогенеза и формообразования у растений // Онтогенез. 1994. Т.25. №5. С. 5-28.

5. Батыгин Н.Ф. Онтогенез высших растений. М.: Агропромиздат, 1986. 100 с.

6. Богданов М.В., Федосеева Г.Н., Несмеянова М.А. Изучение липид-белковых взаимодействий в процессе переноса белков через мембрану бактерий // Биологические мембраны. 1986. N3. С.1241-1249.

7. Бокарев К.С., Иванова Р.П. Влияние производных и аналогов холина и бетаина на качественный состав четвертичных аммониевых оснований в листьях картофеля//Физиология растений. 1970. Т. 17. Вып.5. С. 1070-1082.

8. Бресткин А. П., Бровко В. С., Жуковский Ю. Г. Четвертичные фосфо-ниевые соли как обратимые ингибиторы холинэстераз // ДАН СССР. 1984. Т. 277. С. 735—737.

9. Бузников Г.А. Низкомолекулярные регуляторы зародышевого развития. М.: Наука, 1967. 265 с.

10. Бузников Г.А. Нейротрансмиттеры в эмбриогенезе. М.: Наука, 1987. 232 с.

11. Буланова Е.Г., Будагян В.М. Протеинфосфатазы: структура и функции // Молекуляр. биология. 1994. Т. 28, № 5. С. 991-1001.

12. Васильев А.Е. Состояние и перспективы развития структурной ботаники (цитологии, анатомии, эмбриологии, морфологии) // Бот. журнал. 1989. T.74.N8. С. 1090-1100.

13. Вильяме В.Р. Избр. тр. Т. 1. М.: Изд-во АН СССР, 1950. 790 с.

14. Володарский А.И. Фотопериодическая активность листьев в связи с их возрастом и ростовыми процессами // Сельскохозяйственная биология. М., 1971. Т. 16. N2. С. 228-241.

15. Вульфиус Е.А., Коваленко В.А. Холинорецепторы //Итоги науки и техники. Сер. биофизика. М.:ВИНИТИ,1978. 208 с.

16. Гамалей Ю.В., Куликов Г.В. Развитие хлоренхимы листа. JL: Наука, 1978. 192 с.

17. Гамалей Ю.В. Эндоплазматическая сеть растений. Происхождение, структура и функции // 53-е Тимирязевское чтение. Спб.: Наука, 1994. 80 с.

18. Гамалей Ю.В. Надклеточная организация растений // Физиология растений. 1997. Т. 44. №6. С. 819-846.

19. Гамалей Ю.В. Фотосинтез и экспорт фотосинтатов. Развитие транспортной системы и донорно-акцепторных отношений // Физиология растений. 1998. Т. 45. №4. С. 614-631.

20. Голиков С.Н., Розенгарт В.И. Холинэстеразы и ацетилхолинэстеразные вещества. JL: Медицина, 1984. 117 с.

21. Головинская О.Н., Калинина А.В., Степанов С.А. Физиологические аспекты межметамерных взаимосвязей в онтогенезе побега яровой пшеницы // Проблемы общей биологии и прикладной экологии животных и растений. Саратов, 1997. С. 24-28.

22. Гречкин А.Н., Тарчевский И.А. Липоксигеназная сигнальная система //Физиология растений. 1999. Т. 46, № 1. С. 132-142.

23. Гречкин А.Н., Тарчевский И.А. Сигнальные системы клеток и геном // Биоорган, химия. 2000. Т. 26, № 10. С. 779-781.

24. Гунар И.И. Проблема раздражимости растений и дальнейшее развитие физиологии растений //Известия ТСХА. М., 1953. Вып.2. 26 с.

25. Добрынин Г.М. Рост и формирование хлебных злаков. J1.: Колос, 1969. 274 с.

26. Досон Р., Эллиот Д. Эллиот У., Джексон К. Справочник биохимика М.: Мир. 1991.543 с.

27. Доспехов Б.А. Методика полевого опыта. М.: Агропромиздат,1985. 352 с.

28. Евдокимова О.А., Кумаков В.А., Степанов С.А. Развитие зародышевых почек зерновок у различных видов и сортов яровой пшеницы // Международная научно-практическая конференция "Семя". Москва, 14-16 декабря 1999 г.: тез. докл. М., 1999. С. 85-87.

29. Егоренкова И.В., Коннова С.А., Скворцов И.М., Игнатов В.В. Исследование начальных этапов взаимодействия бактерий Azospirillum brasilense с корнями проростков пшеницы: адсорбции, деформации корневых волосков // Микробиология. 2000. Т.69. №1. С. 120-126.

30. Жолкевич В.Н., Синицына З.А., Пейсахзон Б.И. О природе корневого давления // Физиол. растений. 1979. Т.26. №5. С.978-993.

31. Жолкевич В.Н., Гусев Н.А., Кпля А.В., Пахомова Г.И., Пилыцикова Н.В., Самуилов Ф.Д., Славный П.С., Шматько И.Г. Водный обмен растений. М.: Наука, 1989. 256 с.

32. Жолкевич В.Н., Чугунова Т.В. Влияние нейромедиаторов на нагнетающую деятельность корня //Докл. РАН. 1997. Т.356. № 1. С. 122-125.

33. Жуковский С.Г., Евстигнеева Т.А. Действие фосфорорганических инсектицидов на холинэстеразу гороха // Бюллетень ВНИИ защиты растений. 1983. №56. С. 26-31.

34. Задонцев А.И., Пикуш Н.Р., Гринченко А.А. Хлорхолинхлорид в растениеводстве. М., 1973. 360 с.

35. Звягинцев Д. Г. Почвы и микроорганизмы. М., 1987. 256 с.

36. Звягинцев Д.Г., Добровольская Т.Г., Лысак JI.B. Растения как центры формирования бактериальных сообществ // Журнал общей биологии. 1993. Т.54. №2. С. 183- 199.

37. Зубкус О.П. Особенности генерации электрических импульсов растениями //Изв. Сибирск. отд.АН СССР. Сер. биол. науки. 1979. Вып.5/1. С. 120 -124.

38. Иосипенко А.Д., Сергеева Е.И., Антонюк Л.П., Игнатов В.В. Влияние лектина пшеницы на синтез индолил-3-уксусной кислоты у Azospirillum brasilense sp245 //Докл. РАН. 1994. Т.336. С.559-561.

39. Калининская Т.А., Редькина Т.В., Белова Ю.М. Применение ацетиленового метода для количественного учета разных групп азотфиксаторов методом предельных разведений//Микробиология, 1981. Т.50. N5. С.924-927.

40. Кейтс М. Техника липидологии. М., 1975. 322 с.

41. Кефели В.И., Кутачек М., Вацкова К., Махачкова И., Змиграл 3., Власов В.П., Гуськов А.В., Шапкин В.И. Производные синаповой кислоты в проростках кольраби. Свойства и биологическая активность //Физиология растений. 1977. Т.24. № 6. С.1200-1205.

42. Кефели В.И., Протасова Н.Н. Гормональные аспекты взаимодействия роста и фотосинтеза // Фотосинтез и продукционный процесс. М., 1988. С. 153-163.

43. Киршин И.К. Рост и развитие многолетних злаков. Красноярск: Красноярский ун-т, 1985. 200 с.

44. Коштоянц Х.С. Основы сравнительной физиологии. Т. 2. Сравнительная физиология нервной системы. М.: Изд-во АН СССР, 1957. 637 с.

45. Коштоянц Х.С. Проблемы энзимохимии процессов возбуждения и торможения и эволюции функций нервной системы. 17-е Баховское чтение. М.: АН СССР, 1963.31 с.

46. Красильников Н. А. Микроорганизмы почвы и высшие растения. М.: Наука, 1958. 462 с.

47. Кумаков В.А. Физиология яровой пшеницы. М.: Колос, 1980. 207 с.

48. Кумаков В.А. Итоги исследования по частной физиологии яровой пшеницы и физиологическому обоснованию модели сорта // Физиологические и генетические основы селекции. Саратов, 1984. С. 3-12.

49. Кумаков В.А. Физиологическое обоснование моделей сортов пшеницы. М.: Агропромиздат, 1985. 270 с.

50. Кумаков В.А. Анализ фотосинтетической деятельности и физиологическое обоснование модели сорта // Фотосинтез и продукционный процесс. М., 1988. С. 247-251.

51. Кумаков В.А., Степанов С.А. Сравнительная характеристика развития зародышевых почек зерновок некоторых видов и сортов яровой пшеницы // Биологические основы селекции: сб. науч. трудов. Саратов, 1991. С. 125-131.

52. Кумаков В.А., Березин Б.В., Игошин А.П., Степанов С.А., Евдокимова О. В., Шер К.Н. Продукционный процесс в посевах пшеницы. Саратов, 1994. 203 с.

53. Курсанов АЛ. Ученый и аудитория. М.: Наука, 1982. 272 с.

54. Курсанов A.JI. Эндогенная регуляция транспорта ассимилятов и до-норно акцепторные отношения у растений // Физиология растений. 1984. Т. 31. С. 579-595.

55. Курсанов A.JI. Физиология растений в системе биологических наук // Физиология растений. 1997. Т.44.№6. С. 564-567.

56. Лебедев С.И. Физиология растений. Киев: Вища школа, 1978. 440 с.

57. Лившиц Л.Я., Рубин В.И. Об определении ацетилхолина и ацетилхо-линоподобных веществ в спинномозговой жидкости // Лабораторное дело. М.,1961. № 3. С.15-17.

58. Лодкина М.М. Черты морфологической эволюции растений, обусловленные спецификой их онтогенеза // Журн. общей биологии. М., 1983. Т. 44. N2. С. 239-253.

59. Лукин С.А., Кожевин П.А., Звягинцев Д.Г. Азоспириллы и ассоциативная азотфиксация у не бобовых культур в практике сельского хозяйства //Сельскохоз. биол. 1987. N1. С. 51-58.

60. Лукнер М. Вторичный метаболизм у микроорганизмов, растений и животных. М.,1979. 548 с.

61. Луцик М.Д., Панасюк Е.Н., Антонюк В.Ф., Луцик А.Д. Методы поиска лектинов (фитогемагглютиногенов) и определение их иммунохимической специфичности: Методические рекомендации для биохимиков и иммунологов. Львов: Изд-во Львов, мед. ин-та, 1981. 14 с.

62. Мазуренко М.Т., Хохряков А.П. Классы метамеров деревьев // Журнал общей биологии. М., 1991. Т. 52. N3. С. 409-421.

63. Мальцева Н.Н., Волкогон В.В. Азотфиксирующая бактерия Azospirillum lipoferum в почве, ризосфере и ризоплане сельскохозяйственных растений // Микробиологический журнал. 1984. Т.46. N 1. С. 6-8.

64. Мельников Н.Н., Новожилов К.В., Белан С.Р., Пылова Т.Н. Справочник по пестицидам. М.,1985. 352 с.

65. Мирославов Е.А. Структура и функция эпидермиса листа покрытосеменных растений. Л.: Наука, 1974. 119 с.

66. Митрополенко А.И. Влияние уровня развития растений озимой пшеницы на скорость роста эпикотиля и глубину заложения узла кущения // Докл. ВАСХНИЛ. М., 1984, № 5. С. 14-15.

67. Михельсон М.Я., Зеймаль Э.В. Ацетилхолин. Л.: Наука, 1970. 280 с.

68. Мишустин Е.Н. Ассоциация почвенных микроорганизмов. М.: Наука, 1975.351 с.

69. Мокроносов А.Т. Эндогенная регуляция фотосинтеза в целом растении // Физиология растений. 1978. Т. 25. Вып. 5. С. 938-951.

70. Мокроносов А.Т. Онтогенетический аспект фотосинтеза. М.: Наука, 1981. 195 с.

71. Морозова З.А. Основные закономерности морфогенеза пшеницы и их значение для селекции: автореф. дис. д-ра биол. наук. М., 1988. 36 с.

72. Муравьева З.М. Модификация метода Хестрина для раздельного определения истинной и ложной холинэстераз // Вопросы медицинской химии. М.,1961. Т.7. Вып.1. С.97-101.

73. Никелл JI. Дж. Регуляторы роста растений. М.,1984. 192 с.

74. Новицкая Г.В. Методическое руководство по тонкослойной хроматографии фосфолипидов. М.,1972. 64 с.

75. Ониани Д.А. Исследование влияния физиологически активных веществ на регуляцию скорости движения протоплазмы и мембранного потенциала в клетках Nitella : автореф. дис. на соискание уч. ст. канд. биол. наук. Тбилиси: Тбилисск. гос. ун-т, 1975. 28 с.

76. Панюков А.Н. О применении метода Хестрина для раздельного измерения активности холинэстераз // Вопросы медицинской химии. М., 1966. Т. 12. ВыпЛ.С. 88-95.

77. Подольный В.З., Агамалова С.Р., Кокшарова Т.А., Чайлахян М.Х. Влияние яровизации и фотопериода на рост молодых листьев растений мягкой пшеницы, различающихся по одному гену систем vrn и ppd // Физиология растений. М., 1990. Т. 37. Вып. 2. С. 213-219.

78. Позднякова Л.И., Каневская С.В., Леванова Г.Ф., Барышева Н.И., Пи-липенко Т.Ю., Богатырев В.А., Федорова Л.С. Таксономическое изучение азоспирилл, выделенных из злаков Саратовской области //Микробиология. 1988. Т. 57. N2. С. 275-278.

79. Полевой В.В. Регуляторные системы организмов // Вестник Ленинград, ун та, 1975. N15. С. 104-108.

80. Полевой В.В. Фитогормоны. Л.: ЛГУ, 1982. 248 с.

81. Полевой В.В. Роль ауксина в системах регуляции у растений. Л.: Наука, АН СССР, 1986. Тимирязевские чтения. 79 с.

82. Полевой В.В. Физиология целостности растительного организма //Физиология растений. 2001. Т.48. №4. С.631-643.

83. Редькина Т.В. Механизм положительного влияния бактерий рода Azospirillum на высшие растения // Биологический азот в сельском хозяйстве СССР / Под ред.Мишустина Е.Н. М.,1989. С.132-141.

84. Ростовцева З.П. Цитогистологическая характеристика функциональности верхушечной меристемы в связи с органогенезом. М.: МГУ, 1976. 41 с.

85. Рощина В.В., Мухин Е.Н. Ацетилхолинэстеразная активность хлоро-пластов высших растений//Доклады АН СССР. 1984. Т.278. №6. С.754-757.

86. Рощина В.В., Мухин Е.Н. Проблемы современной биохимии и биотехнологии. Тез. докл.8-го объединенного симпозиума биохимических об-в СССР и ГДР. Рига, 1985. С. 126.

87. Рощина В.В., Мухин Е.Н. Ацетилхолин, его роль в жизнедеятельности растений //Успехи современной биологии. 1986. Т. 101. N 2. С. 265-274.

88. Рощина В.В., Мухин Е.Н. Ацетилхолинэстеразная система изолированных хлоропластов гороха и регуляция фотосинтетических реакций //Физиология растений. 1987а. Т.34. №1. С. 67-73.

89. Рощина В.В., Мухин Е.Н. Ацетилхолин изменяет фотохимические реакции и стимулирует выход Na+ и К+ из хлоропластов // Физиология растений. 19876. Т.34. №5. С.907-911.

90. Рощина В.В. Холинэстеразы из хлоропластов высших растений //Физиология растений. 1988. Т.35. Т5. С.899-906.

91. Рощина В.В., Рощина В.Д. Выделительная функция высших растений. М.: Наука, 1989.214 с.

92. Рощина В.В., Семенова М.Н. Холинэстераза листьев и хлоропластов растений // Тезисы докл.У Всесоюзной конференции «Физиология и биохимия медиаторных процессов». М.: Ин-т биологии развития АН СССР, 1990а. С.243.

93. Рощина В.В., Семенова М.Н. Холинэстераза растений: активность и субстратно-ингибиторная специфичность //Журнал эволюционной биохимии и физиологии. 19906. Т.26. N5. С.644 652.

94. Рощина В.В. Биомедиаторы в растениях: ацетилхолин и биогенные амины. Пущино, 1991. 192 с.

95. Рощина В.В. Действие нейромедиаторов на прорастание семян // Биологические науки. 1992. №9. С. 124-129.

96. Рощина В.В., Мельникова Е.В., Ковалева Л.В., Спиридонов Н.А. Хо-линэстераза в пыльцевых зернах растений // Докл. РАН. 1994. Т.337. С. 424* 427.

97. Северин С.Е., Пальцев М.А., Иванов А.А. Молекулярные механизмы регуляции активности клеток //Вестн. Ин-та молекуляр. медицины. 2001. Вып. 1. 124 с.

98. Скворцов И.М. Муцигель и слизь поверхности корней растений //Успехи современной биологии. 1994. Т. 114. Вып. 3. С.372-383.

99. Соловова Г.К., Кривопалов Ю.В., Беликов В.А., Чумаков М.И. Прикрепление Agrobacterium radiobacter к корням пшениц //Микробиология. 1995. Т. 64. N4. С.526-530.

100. Соляков Л.С., Саблин С.О., Кууск В.В., Агабекян Р.С. Ацетилхолинэстераза из корней гороха: выделение, очистка, характеристика растворимой и мембраносвязанной форм //Биохимия. 1989. Т.54. № 1. С.88-94.

101. Степанов С.А. Функциональная изменчивость апикальной меристемы побега пшеницы в связи с продуктивностью сорта: Автореф. дисс . канд. биол. наук. М.,1991. 20 с.

102. Степанов С.А. Склеренхима. Саратовский госуниверситет. Саратов, 1992. 67 с. Деп. в ВИНИТИ 06.05.92., № 1520-В92.

103. Степанов С.А. Новые аспекты проблемы целостности растительного организма. Саратов, 1993. 23 с.

104. Степанов С.А., Щеглова Е.К. Холинэстеразная активность узлов ^ стебля мягкой яровой пшеницы // Защита растений от вредителей и болезней:сб. науч. работ. Саратов: СХА, 1996. С. 117-120.

105. Степанов С.А., Щеглова Е.К., Калинина А.В. Оценка активности холинэстеразы в онтогенезе побега сортов яровой пшеницы // Саратовский госуниверситет. Саратов, 1997. С. 1-7. Деп. в ВИНИТИ 19.03.97., № 841-В97.

106. Степанов С.А., Калинина А.В. Некоторые особенности активности холинэстеразы яровой пшеницы // Физико-химические основы физиологииф растений и биотехнологии. 3-ий ежегодный симпозиум. М, 1997. С. 134.

107. Степанов С.А., Головинская О.Н., Калинина А.В. Анатомо-физиологические аспекты межметамерных взаимосвязей в онтогенезе побега яровой пшеницы // Труды международной конференции по анатомии и морфологии растений. С.-Петербург, 1997. С. 367-368.

108. Степанов С.А., Головинская О.Н. Роль меристем и склеренхимы в гомеостазе растений // Известия Саратовского гос. университета. Саратов: Изд-воСГУ, 2001. Сер. Биол., вып. спец. С. 137-142.

109. Степанов С.А. Морфогенез пшеницы: анатомические и физиологические аспекты. Саратов: Слово, 2001. 213 с.

110. Степанов С.А. Развитие склеренхимы Populus nervirubens // Вопросы биологии, экологии, химии и методики обучения: Сб. науч. ст. Вып.4. Саратов: ЗАО "Сигма-плюс", 20016. С. 26-29.

111. Сытник К.М., Книга Н.М., Мусатенко J1.M. Физиология корня. Киев, 1972.356 с.

112. Уильяме Б., Уилсон К. Хроматографические методы // Методы практической биохимии. М., 1978. С.65-113.

113. Умаров М. М. Ассоциативная азотфиксация в биогеоценозах // Почвенные организмы как компоненты биогеоценоза. М.: Наука, 1984. С. 185199.

114. Умаров М.М. Ассоциативная азотфиксация. М.: Изд-во Моск. ун-та, 1986. 134 с.

115. Уоринг Ф., Филлипс И. Рост и дифференцировка. М.: Мир, 1984. 512с.

116. Франке 3., Франц П., Варнке В. Химия отравляющих веществ. Т.2. М., 1973.404 с.

117. Хайдарлиу C.X. Функциональная биохимия адаптации. Кишинев: Штиинца, 1984. 272 с.

118. Хохряков А.П. Уровни полимерации в эволюции растений // Изв. АН СССР. Сер. биология. 1982. N5. С. 722-737.

119. Чайлахян М.Х. Целостность организма в растительном мире // Физиология растений. М., 1980. Т. 27. Вып. 5. С. 917-940.

120. Чайлахян М.Х. Регуляция цветения высших растений. М.: Наука, 1988.588 с.

121. Чельцова Л.П. Рост конусов нарастания побегов в онтогенезе растений. Новосибирск: Наука, 1980. 191 с.

122. Шлегель Г. Общая микробиология. М.: Мир, 1972. 327 с.

123. Шафранова Л.М. О метамерности и метамерах у растений // Журнал общей биологии. М., 1980. Т. 41. N3. С. 437-447.

124. Шутарева Л.В., Степанов С.А. Межметамерные взаимосвязи в онтогенезе побега пшеницы // Третий съезд ВОФР: Тез.докл. С.-Петербург, 1993. С. 459.

125. Щеглова Е.К., Калинина А.В., Степанов С.А. Динамика активности холинэстеразы побега яровой пшеницы //Саратовский госуниверситет. Саратов, 1997. С. 1-14. Деп. в ВИНИТИ 19.03.97., №840-В97.

126. Эккерт Р., Рэндел Д., Огастин Дж. Физиология животных. Механизмы и адаптация. М., 1991а. Т. 1. 424 с.

127. Эккерт Р., Рэндел Д., Огастин Дж. Физиология животных. Механизмы и адаптация. М., 19916. Т.2. 344 с.

128. Эсау К. Анатомия растений. М.: Мир, 1969. 564 с.

129. Юрин В.М., Иванченко В.М., Галактионов С.Г. Регуляция функций мембран растительных клеток. Минск: Наука и техника, 1979. 200 с.

130. Aibara S., Kato М., Ishinaga М., Kito М. Changes in positional distribution of fatty acids in the phospholipids of E.coli after shift-down in temperature // Biochim. Biophis. Acta. 1972. V. 270. P. 301-306.

131. Ames G.F. Lipids of S.typhymurium and E. coli: structure and metabolism // J. Bacteriol. 1968. V. 95. P. 833-843.

132. Audet A., Cole R., Proulx P. Polyglycerophosphatide metabolism in E. coli // Biochim. Biophys. Acta. 1975. V. 380. P. 414-420.

133. Baldany V.L.D., Baldany J.I., Dobereiner J. Effekts of Azospirillum inoculation on root infection and nitrogen incorporation in wheat //Can. J. Microbiol. 1983. V. 29. N8. P. 924-929.

134. Ballesta G.P.G., Schaechter M. Effect of shift-down and growth inhibition on phospholipid metabolism of E. coli //J. Bacteriol. 1971. V.107. P. 251-258.

135. Bandyopadhyay R. Inhibition of acetylcholine esterase by permethrin and its reversion by acetylthiocholine // Indian J.Expt.Biol. 1982. V.20. N 6. P.488-491.

136. Bashan Y. Interaction between Azospirillum brasilense Cd and wheat, root, cells during early stages of root colonization //Azospirillum IV; genetics,physiology, ecology / Ed. W. Klingmuller. Berlin, Heidelberg: Springer — Verlag, 1988.- P. 166-173.

137. Bashan Y., Levanony H. Factors affekting adsorptin of Azospirillum brasilrnse Cd to root, hairs as compared with root surface of wheat // Can. J. Microbiol. 1989. V.35.N10. P.936-944.

138. Bashan Y., Holguin G. Anchoring of Azospirill urn brasilense to hidrophobic polystyrene and wheat roots // J.Gen. Microbiol. 1993. V. 139. N2. P. 379-385.

139. Bashan Y., Holguin G. Azospirillum — plant relationship: environmental and physiological advances (1990-1996) // J. G-eti. Microbiol. 1997. V.43. P. 103121.

140. Barlow R.B., Dixon R.O. Cholineacetyltransferase in the nettle Urtica dioica L.//Biochem. J. 1973. V. 132. N 1. P. 15-18.

141. Bednarska E., Tretyn A. Ultrastruetural localization of acetylcholinesterase activity in the stigma of Pharbitis nill //Cell Biology International Reports. 1989. V.13. N3. P.275-281.

142. Beijerinch M. W. Uber ein Spirillum, welche freien Stickstoff binden kann? // Centralbl. bakt. Parasitenkd. 11 Abt. 1925. V.63. P.353-357.

143. Berden I.A., Barker R.W., Radda G.K. NMR studies of phospholipid bilavers: some factors affecting lipid distribution // Biochim. Biophys. Acta. 1975. V.375. P. 186-208.

144. Biro R.L. Choline acetylation and its phytochrome control in etiolated pea extracts. Master Thesis, Ohio University. 1978.

145. Burcky K., Kauss H. Veranderung in Gehalt an ATP und ADP in Wurzelsptzen der Mungobohne nach Hellrotbelichtung //Z. Pflanzenphysiol. 1974.1. V.73.N2. РЛ 84-186.

146. Calcott Р.Н., Petty R.S. Phenotypic variability of lipids of E.coli grown in chemostat culture // FEMS Micobiol. Lett. 1980. V. 7. P. 23-27.

147. Cassab G. I. Plant cell wall proteins //Annu. Rev. Plant Biol. 1998. Vol.49. N1. P.281-309.

148. Chestrin Sh. The reaction of acetylcholine and other carboxylic acid derivates with hydroxylamine, and it is analytical application //Biological Chemistry. 1949. V. 180. N1. P. 249-261.

149. Chet I., Henis Y., Mitchell R. Effect of biogenic amines and cannabinoids on bacterial chemotaxis//J. Bacteriol. 1973. V.115. N3. P.l215-1218.

150. Coleman J., Evans D., Hawes C. Plant coated vesicles // Plant Cell and Environment. 1988. V.l 1.N8. P.669-684.

151. Dazzo F.B., Truohet G.L., Sherwood J.E., Hrabak E. M, Abe M., Pankratz S.H. et al. Specificphases of root hair attachment in the Rhisobiunri trifolii clover symbiosis //Appl. Environ. Microbiol. 1984. V. 48, N 6. P. 11401150.

152. Dekhuijzen H.M. The effect of acetylcholine on the growth and on growth inhibition by CCC in wheat seedlings // Planta. 1973. V.l 11. N2. P.149-156.

153. Dettbarn W.D. Acetylcholinesterase activity in Nitella //Nature. 1962. V. 194. N4834. P.l 175-1176.

154. Dobereiner J., Day J.M. Associative symbiosis in tropical grasses: characterization of microorganisms and dinitrogenfixing: sites // Proc. Intern. Symp. on NS Fixation. Washington, 1976. P.518-536.

155. Ellman G.L., Courtney K.D., Andres V.Jr., Featherstone R.M. A new and rapid colorimetric determination of acetylcholineesterase activity // Biochem. Pharmacol. V.7. P.88-95

156. Emmelin N., Feldberg W. The mechanism of the sting of the common nettle (Urtica urens)//J. Physiol. 1947. V.106. N4. P.440-455.

157. Ernst M., Hartmann E. Biochemical characterization of an acetylcholinehydrolyzing enzyme from bean seedling //Plant Physiol. 1980. V.65. N3. P.447-450.

158. Evans M.L. Promotion of cell elongation in Avena coleoptiles by acetylcholine // Plant Physiol. 1972. V.50. N3. P.414-416.

159. Ewins A.J. Acetylcholine, a new active principle of ergot //Biochem. J. 1914. V.8.N.I.P. 44-49.

160. Faust M.A., Doetsch R.N. Effect of drugs that alter excitable membranes on the motility of Rhodospirillum rubrum and Thiospirillum rubrum and Thiospirillum jenense// Can. J. Microbiol. 1971. V. 17. N2. P. 191-196.

161. Fielder U., Hildebrand G., Neu R. Weitere Inhaltstoffe des Weissdorns: Der Nachweis von Cholin und Acetylcholin //Arzneimittelforschung. 1953. V.3. N8. P.436-437.

162. Fluck R.A., Jaffe M.J. The acetylcholine system in plants //Current Advances in Plant Sciences / Ed. by E.Smith. Oxford: Sci. Engineering, Medical and Data Ltd, 1974a. V.5. P. 1-22.

163. Fluck R.A., Jaffe M.J. The distribution of cholinesterases in plant species //Phytochemistry. 1974b. V.13. N11. P.2475-2480.

164. Fluck R.A., Jaffe M.J. Cholinesterases from plant tissues.VI. Distribution and subcellular localization in Phaseolus aureus Roxb // Plant Physiol. 1974c. V.53. N5. P.752-758.

165. Fluck R.A., Jaffe M.J. The acetylcholine system in plants //Commentaries in Plant Science/Ed.by H.Smith.Oxford: Pergamon Press, 1976. P. 119-136.

166. Gafni R., Okon Y., Kapulnik Y., Fisher M. Adsorption of Azospirillum brasilense to corn roots //' Soil Biol. Biocheiri. 1986. V. 18. N 1. P. 69-75.

167. Goldstein D.B., Goldstein A. An adaptive bacterial cholinesterase from a Pseudomonas species // J.Gen. Microbiol. 1953. V.8. N1. P.8-17.

168. Gorun V., Proinov I., Baltesscu V., Balaban J., Barru O. Modified Ellman procedure for assay of cholinesterase in crude enzymatic preparations // Anal. Biochem. 1978. V.86. P.324-326.

169. Govindappa Т., Govardhan L., Jyothy P.S., Veerrabhadrappa P.S. Purification and characterization of acetylcholinesterase isoenzymes from the latex of Synadenium grantii Hook"f' //Indian J. Biochem. Biophys. 1987. V.24. N 4. P.209-217.

170. Gressel J., Strausbauch L., Galun E. Photomimetic effect of acetylcholine on morphogenesis in Trichoderma // Nature. 1971. V.232. N 5313. P. 648-649.

171. Gupta R., Maheshwari S.C. Preliminary characterization of a cholinesterase from roots of Bengal gram-Cicer arietinum L. //Plant and Cell Physiol. 1980. V.21. N 8. P.1675-1679.

172. Gupta A., Gupta R. A survey of plants for presence of cholinesterase activity //Phytochemistry. 1997. V.46. N5. P.827-831.

173. Gupta A., Thakur S. S., Uniyal P. L., Gupta R. A survey of bryophytes for presence of cholinesterase activity // American J. Bot. 2001. V. 88. P.2133-2135.

174. Hadacova V., Hofman J., Almeida R.M., Vackova K., Kutacek M., Klozova E. Cholinesterases and choline acetyltransferase in the seeds of Allium altaicum (Pall.) Reyse//Biol.Biol.Plant. 1981. V.23. N3. P.220-227.

175. Hanson A.D., Grumet R. Betaine accumulation: metabolic pathways and genetics //Cellular and Molecular biology of plant stress /J.L.Key, T.Kosuge eds. UCLA Symposia on Molecular and Cellular Biology, New Series. N.Y.: Alan R. Liss, 1985. V.22. P.71-92.

176. Hartmann E. Uber den Nachweis eines Neurohormones beim Laubmosscallus und seine Beeinflussung durch das Phytochrom //Planta. 1971. V.101.N2. P. 159-165.

177. Hartmann E., Kilbinger H. Gas-liquid chromatographic determination of light dependent acetylcholine concentrations in moss callus //Biochem.J. 1974a. V.137. N2. P.249-252.

178. Hartmann E., Kilbinger H. Occurence of light-dependent acetylcholine concentrations in higher plants//Experientia. 1974b. V.30. N12. P.1387-1388.

179. Hartmann E., Gupta R. Acetylcholine as a signaling system in plants //Second messengers in plant growth and development /Ed. by W.F.Boss, D.I.Morve. N.Y.: Allan R.Liss, 1989. P.257-287.

180. Heise K.P., Treede H.J. Regulation of acetylcoenzyme A synthesis in chloroplasts //Metabolism, Structure and Function of Plant lipids. Proc. 7th Int. Symp. Plant Lipids. Davis, California (Jule 27-August 1, 1986). N.Y., London, 1987. P.505-507.

181. Hochino Т., Oata Y. The occurrence acetylcholine in Lemna gibba G-3 // Plant Cell Physiol. 1978. V.19. N5. P.769-776.

182. Holm R.E., Miller M.R. Hormonal control of weed seed germination // Weed Sci. 1972. V.20. N3. P.209-219.

183. Hoshino T. Effects of acetylcholine on the growth of the Vigna seedlings //Plantand Cell Physiol. 1983. V.24. N3. P.551-556.

184. Jackson B.J., Gennity I.M., Kennedy E.P. Regulation of the balanced synthesis of membrane phospholipids: experimental test of models for regulation in Escherichia coli //J. Biol.Chem. 1986. V. 261. P. 13464-13468.

185. Jaffe M.J. Evidence for the regulation of phytochrome mediated processes in bean roots by the neurohumor, acetylcholine //Plant Physiol. 1970. V.46. N6. P.768-777.

186. Jaffe M.J. Acetylcholine as a native metabolic regulator of phytochrome me^-diatedprocesses in bean roots //Recent Advances in Phytochemistry / Ed. by V.C. Runeckles, T.C. Tso. N.Y.: Acad Press, 1972a. V.5. P.81-104.

187. Jaffe M.J. Acetylcholine as a native metabolic regulator of phytochrome mediated processes in bean roots // Proc. 8th Ann. Symp. Phytochem. Soc. N. Am. Adv. Phytochemistry. 19726. V.7. P.81-104.

188. Jaffe M.J. Phytochrome-controlled acetylcholine synthesis at the endoplasmatic reticulum //Light and plant development /Ed.by H. Smith. London: Butterworth, 1976. P. 333 -344.

189. Kandeler R. Die Wirkung von Acetylcholin auf die photoperiodische Steurung der Blutenbildung bei Lemnaceen //Z. Pflanzenphysiol. 1972. Bd.67. N1. S.86-92.

190. Kanfer J. Kennedy E.P. Metabolism and function of bacterial lipids //J. Biol. Chem. 1964. V.239. P. 1720.

191. Kapulnik Y., Sarig S., Nur I. et al. Yield increases in summer cereal crops in Israel in field inoculated with Azospirillum //Experim. Agrioult. 1981. Vol. 17. N2. P. 179-187.

192. Kasturi R., Vasantharajan V.N. Properties of acetylcholine esterase from Pisum sativum//Phytochemistry. 1976. V.15. N9. P.1345-1347.

193. Kasturi R. De novo synthesis of acetylcholineesterase in roots of Pisum sativum//Phytochemistry. 1978. V.17. N4. P.647-649.

194. Kasturi R. Influence of light, phytohormones and acetylcholine on the de novo synthesis of acetylcholinesterase in roots of Pisum sativum // Indian . J. Biochem. Biophis. 1979. V.16. N1. Supplement. P. 14-17.

195. Kim II.Y., Kim T.I., Kim H.K., Chae Q. The effect of phytochrome action on the activity of cytosolic cholinesterase in oat cells //Biochem.Biophys. Res. Commun. 1990. V.169. N1. P.159-164.

196. Kirshner R.L., White J.M., Pike C.S. Control of bean bud ATP levels by regulatory molecules and phytochrome // Physiol. Plant. 1975. V.34. N4. P.373-377.

197. Koelle G.B., Fridenwald J.S. A histochemical method for localization cholinesterase activity// Proc. Soc. Exp. Biol. Med. V. 70. P. 617-622.

198. Koelle G.B. The histochemical identification of acetylcholinesterase in cholinergic, adrenergic and sensory neurons // J. Pharmacol. Exp. Ther. V.114. P. 167-184.

199. Kopcewicz J., Cymerski M., Porazinski Z. Influence of red and far red irradiation on acetylcholine and gibberellin content in Scots Pine seedlings //Bull. Acad.Pol. Sci. (Sevr. Sci. Biol.). 1977. V.25. N2. P.l 11-117.

200. Kovaleva L.V., Roshchina V.V. Does cholinesterase participate in the intercellular interactions in pollen-pistil system? //Biologia Plantarum. 1997. V.39. C. 207-213.

201. Ladeira A.M., Felippe G.M., Dietrich S.M. Detection of acetylcholine and effects of exogenous Ach on Rumex and Cucumis photoblasticity //Revta Brasil. Bot. 1982a. V.5. N1-2. P. 17-19.

202. Ladeira A.M., Dietrich S.M., Felippe G.M. Acetylcholine and flowering of photoperiodic plants // Revta Brasil. Bot. 19826. V.5. N1-2. P.21-24.

203. Lawson V.R., Brady R.M., Campbell A., Knox B.G., Knox G.D., Walls R.L. Interaction of acetylcholine chloride with IAA, GA3, and red light in the growth of excised apical coleoptile segments // Bull Torr. Bot. Club. 1978. V.l 05. N3. P. 187-191.

204. Levanony H., Bashan Y. Enhancement of cell division in wheat root tips and growth of root elongation zone iduced by Azospirillum brasilense Cd. //Canad. J. Bot. 1989. V. 7. P. 2213-2216.

205. Levanony H., Bashan Y., Romano В., Klein E. Ultrastructural localisation and identification of Azospirillum brasilense Cd on and within wheat root by immunogold labelling // Plant Soil. 1989. V. 117. N2. P.207-218.

206. Lin R.C.Y. Presence of acetylcholine in the Malayan jackfruit, Artocarpus integra //Brit. J. Pharmacol. 1955. V.10. N2. P.247-253.

207. Loewi O. Strychninerregung und Acetylcholingehalt des Zentralnervensystems//Naturwissenschaften. 1937. Bd.35. N.2. S. 526-529.

208. Maheshwari S.C., Gupta R., Charyal P.K. Cholinesterases in plants //Recent developments in plant sciences: SM Sircar memorial volume /Ed. By S.P.Sen. New Delhi: Today and Tomorrows printers and publishers, 1982. P. 145160.

209. Mansfield D.H., Webb G., Clark D.G., Taylor I.E. Partial purification and some properties of a cholinesterase from bush bean (Phaseolus vulgaris L.) roots //Biochem. J. 1978. V.175. N3. P.769-777.

210. Marquardt P., Falk H. Vorkommen und Syntheses von Acetylcholine in Pflanzen and Bakterien //Arzneimittelforschung. 1957. Bd.7. S.203-211.

211. Marquardt P., Spitznagel G. Bakterielle Acetylcholin Bilding in Kunstlichen Nahrboden//Arzneimittelforschung. 1959. Bd.9. S.456-465.

212. Miura G.A., Broomfield C.A., Lawson M.A., Worthley E.G. Widespreed occurence of cholinesterase activity in plant leaves //Physiol. Plant. 1982. V.56.N 1. P.28-32.

213. Miura G.A., Shin T.M. Cholinergic constituets in plants: characterization and distribution of acetylcholine and choline //Physiol. Plant. 1984. V.61. N3. P.417-421.

214. Molyneux D.E., McKinlay R.G. Observations on germination and acetylcholinesterase actyvity in wheat seeds //Ann. Bot. 1989. V.63. N1. P.81-86.

215. Momonoki Y. S. Occurrence of acetylcholine -hydrolysingactivity at the stele-cortex interface //Plant Physiol. 1992. Vol.99. N1. P. 130-133.

216. Momonoki Y. S. Momonoki T. Histochemical localization of acetylcholineesterase in leguminous plant, Siratro (Macroptilium atropurpureum) //Jpn. J. Crop Sci. 1993. V.62. P.571-576.

217. Momonoki Y. S. Momonoki Т., Whallon J.H. Acetylcholine as a signaling system to environmental stimuli in plants. 1. Contribution of Ca2+ in heat -stressed Zea mays seedlings //Jpn. J. Crop Sci. 1996. V.65. P.260-268.

218. Momonoki Y. S. Asymmetric Distribution of Acetylcholinesterase in Gravistimulated Maize Seedlings //Plant Physiology. 1997. Vol 114. N1. P.47-53.

219. Nakajima H., Hatano S. Acetylcholinesterase in the Plasmodium of the myxomycete, Phusarum polycephalum // J. Cell Сотр. Physiol. 1962. V.59. N3. P.259-264.

220. Oata A., Hoshino T. Diurnal chage in temperature sensitivity of Lemna gibba G-3 induced by acetylcholine in continuous light // Plant Cell Physiol. 1974. V.15.N6. P. 1063-1072.

221. Okon Y. Azospirillum.: phisiological properties, mode of assotiation with roots and its application for the benefit cereal and forage grass crops //Israel J. Botany. 1982. V.31. P. 214-220.

222. Okon Y., Kapulnik Y. Development and function of Azospirillum — inoculated roots // Plant Soil. 1986. V.90. P.3-16.

223. Oury A., Bacq Z.M. Ester instable de la choline sans cholinesterase dans la pomme de terre et un Champignon //Arch.Int.Physiol. 1938. V.47. N.l. P.92-101.

224. Parups E.V. Acetylcholine and synthesis of ethylene in etiolated bean tissue//Physiol. Plant. 1976. V.36. N2. P. 154-156.

225. Patil Т. M., Kulkarni К. K. Stomatal response to organophosphorus pesticide spray in Lycopersicon esculentum Mill. //Geobios (Jodhpur). 1989. V. 16. N2/3. P. 82—85.

226. Patriguin D.G., Dobereiner J., JainD.K. Sites and process association between diazotrophs and grasses //Can. J. Microbiol. 1983. V. 29. N 8. P. 900-915.

227. Penel C., Darimont E., Greppin H., Gaspar Th. Effect of acetylcholine on growth and isoperoxidases of the lentil (Lens culinaris) root II Biol. Plant. 1976. V.18. N4. P.293-298.

228. Raetz C.R.H. Enzymology, genetics and regulation of membrane phospholipid synthesis in E. coli //Microbiol. 1978. V.42. P. 614-659.

229. Raineri M., Modenesi P. Preliminary evidence for a cholinergic-like system in lichen morphogenesis //Histochem. J. 1986. V.18. N11-12. P.647-654.

230. Rama Sastry В. V., Sadavongviuad C. Cholinergic system in nonnervous tissues //Pharm. Rev. 1979. V. 30. N 1. P. 229—246.

231. Riov J., Jaffe M.J. Cholinesterase from mung bean roots and its ingibition by plant growth retardants // Experientia. 1973a. V.29. N3. P.264-265.

232. Riov J., Jaffe M.J. Cholinesterases from plant tissues. 1.Purification and characterization of a cholinesterase from mung ben roots //Plant Phisiol. 19736. V.51.N3. P. 520-528.

233. Riov J., Jaffe M.J. Cholinesterases from plant tissues. 2. Inhibition of bean cholinesterase by 2-isopropyl-4-dimethylamino-5-methylphenyl-l-peperedine car-boxylate methylchloride (AMO-I618) //Plant Phisiol. 1973c. V.52. N3. P. 233 -235.

234. Robertson P.A., Macfarlane W.V. Pain-producing substances from the stinging bush Laportea moroides // Australian Journal of Exper. Biol. 1957. V.35. Part.4. P. 381-394.

235. Roshchina V.V. Biomediators in chloroplasts of higher plants. 2. The acetylcholine-hydrolyzing proteins //Photosynthetica. 1990. V.24. N1. P.l 10-116.

236. Rousselet A., Guthmann C., Matricon J. et al. Study of the transverse diffusion of spin labeled phospholipids in biological membranes //Biochim. Biophys. Acta. 1976. V. 426. P. 357-371.

237. Rowatt E. The relatif of pantothenic acid to acetylcholine formation by a strain of Lactobacillus plantarum //J. Gen. Microbiol. 1948. V.2. N.l. P.25-30.

238. Sackman E., Trauble II., Galla H., Overath P. Lateral diffusion, protein mobility and phase transition in membranes //Biochemistry. 1973. V.12. P. 560569.

239. Satter R.L., Applewhite P.B., Gaslston A.W. Phytochrome-controlled nyctinasty in Albizzia julibrissian. V. Evidence against acetylcholine participation // Plant Physiol. 1972. V.50. N4. P.523-525.

240. Schroder M. Die Assimilation des Luftstickstoff durch einige Bakterien. //Centralbl. bakt. Parasitenkd. 1932. V.85. P. 178-212.

241. Smallman B.N., Manekjee A. The synthesis of acetylcholine by plants //Biochem. J. 1981. V.194. N1. P.361-364.

242. Stepanov S.A., Kalinina A.V., Shevchenko O.V. Cholinesterase activity in metameres of spring wheat shoot // Physical-chemical basis of plant physiology. Annual symp. 5-8 February, 1996, Penza. P. 74.

243. Tretyn A., Slezak E., Andersz A. Interaction of light and the cholinergic system in the process of seed germination // Light and Hormonal Interactions of Plants Symp.Occas. 175. Anniv.Humbold Univ. Berlin. 2-7 Sept. 1985. Abstr. Berlin, 1985. S.93-94.

244. Tretyn A., Slesak E., Kwiatkowska K. Localization of AchE activity in plant cells in LM/TEM/SEM //Folia Histochem. Cytobiol. 1986. V.24. N4. P.328-329.

245. Tretyn A., Bodkiewicz W., Tretyn M., Michalski L. The identification of acetylcholine and choline in oat seedlings by gas chromatography and nuclear magnetic resonance (NMR) // Acta Soc. Bot. Polon. 1987. V.56. N3. P.499-511.

246. Tretyn A., Tretyn M. Diurnal acetylcholine oscillation in green oat seedlings //Acta Physiol. Plantarum. 1988a. V.10. N3. P. 243-246.

247. Tretyn A., Tretyn M. Charakterystyka roslinnego systemu cholinergicznego acetylcholina // Postery Biologii Komorki. 19886. V.15. N4. P.477-494.

248. Tretyn A., Bossen M.E., Kendrick R.E. The influence of acetylcholine on the swelling of wheat (Triticum aestivum L.) protoplasts // J. Plant Physiol. 1990. V.136. N1. P.24-29.

249. Tzagoloff A. Metabolism of sinapine in mustard plants. II. Purification and some properties of sinapine esterase //Plant Physiology. 1963. V.38. N2. P.207-213.

250. Umali-Garsia M., Hubbell D.H., Qaskins M.H., Dazzo F.B. Associations^ of Azospirillum with grass roots //Appl. and Environ. Microbiol. 1980. V.39. P. 219-226.

251. Vackova К., Kutacek M., de Almeida R.M. Some properties of pea cholinesterase and its activity in plant parts at different growth stages //Biol. Plant. 1984. V.26.N4. P. 275-284.

252. Vassilev G.N. New biologically active substances with growthregulating activity // Plant Growth Regulators: Proc. 4th Int. Symp. Pamporova. Sept. 28- Oct. 4. 1986. Sofia, 1987. Pt.2. P.319-336.

253. Weigel P., Lerma C., Hanson A.D. Choline oxidation by intact spinach chloroplasts // Plant Physiol. 1988. V.86. N1. P.54-60.

254. White J.M., Pike C.S. Rapid phytochrome mediated changes in adenosine 5-triphosphate content of etiolated bean buds //Plant Physiol. 1974. V.53. N1. P.76-79.

255. Wong P. K., Chang L. The effects of 2,4—D herbicide and organophosphorous insecticides on growth, photosynthesis and chlorophyll a synthesis of Chlamydomonas reinhardtii (mitpositive) // Environ. Pollut. 1988. V. 55. N 3. P. 179—190.

256. Yunghans H., Jaffe M.J. Rapid respiratory changes due to red light or acetylcholine during the early events of phytochrome-mediated photomorphogenesis // Plant Physiol. 1972. V.49. N1. P. 1-7.

257. Zamudio M., Bastarrachea F. Adhesiveness and root hair deformation capacity of Azospirillum strains for wheat seedlings // Soil Biol. Biochem. 1994. V.26. N 6. P.791-797.