Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Биохимические особенности каротинсодержащего растительного сырья и его биологическая оценка

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Биохимические особенности каротинсодержащего растительного сырья и его биологическая оценка"

Николаенко Самвел Николаевич

На правах рукописи

БИОХИМИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ КАРОТИНСОДЕРЖАЩЕГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ И ЕГО БИОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА

Специальность: 03.00.04—Биохимия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата технических наук

Краснодар — 2005

Работа выполнена в ФГОУ ВПО "Кубанский государственный аграрный университет"

Научный руководитель: доктор сельскохозяйственных наук,

профессор Петенко А. И. Официальные оппоненты: заслуженный деятель науки и техники РФ, доктор

технических наук, профессор Щербаков В. Г. кандидат технических наук Зобеяко В, Я. Ведущая организация: Краснодарский научно исследовательский институт

овощного и картофельного хозяйства

Защита состоится {¡__ января 2006 г. в >У ч. на заседании диссертационного совета Д 212.100.05 при Кубанском государственном технологическом университете по адресу 350072 г. Краснодар, ул. Московская, 2, корп. А, конференц-зал.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Кубанского государственного технологического университета (г. Краснодар, ул. Московская, 2) Автореферат разослан 18 декабря 2005 г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

канд. техн. наук, доцент

Минакова А. Д.

2 2£Ш£

О 8 во£> 3

^ ^ 1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1 Актуальность темы. Интенсификация сельскохозяйственного производства предусматривает перевод животноводства на промышленную основу, что связано со значительной изоляцией животных от природной среды. Это, в свою очередь, требует полноценного кормления, сбалансированного по всем питательным и биологически активным веществам. В результате отсутствия каротин содержащих добавок снижается продуктивность животных, качество продукции и ее технологические свойства при переработке. Это определяется технологиями, применяемыми при переработке сырья. Нарушение технологических режимов, что очень часто случается из-за недостатка научно подтвержденной информации, приводит к ухудшению качества продуктов и снижению их положительного влияния на организм животных. Решить эту проблему можно только при опоре на натуральные источники витаминов.

Из жирорастворимых витаминов наиболее ценными являются предшественники витамина А — каротины. Достичь биохимически оптимизированного витаминного и провитаминного баланса только лишь за счет введения в рацион синтетических витаминов невозможно. Это, в первую очередь, связано с узким ассортиментом коммерческих витаминных добавок, высокой их стоимостью и сомнительностью с точки зрения экологической безопасности. Поэтому современное сельское хозяйство должно максимально сократить применение синтетических и неприродных кормовых добавок. Решить эту проблему можно только увеличивая использование натуральных источников витаминов: тыкву, люцерну, календулу и кукурузу.

1.2 Цель работы. Исследование биохимических особенностей расти-

тельного каротинсодержащего сырья и его риодшадщдея ОДЫМЙ Для дос-

БИБЛИОТЕКА 1

I ¿»-япМ

тижения поставленной цели решались следующие задачи:

— исследовать каротиноидный состав плодов тыквы различных сортов в период вегетации и хранения;

— изучить технологические особенности консервирования пасты получаемой из плодов тыквы сорта Витаминная;

— оценить влияние вида растительного сырья кормового назначения на его биохимический состав;

— провести биологическую оценку кормовых растительных кароти-ноидных добавок в опытах на белых лабораторных мышах;

— изучить биологическое влияние растительных каротиноидных добавок на продуктивность кур-несушек.

13 Научная новизна работы. Впервые проведена идентификация и количественная оценка каротиноидного состава плоде» тыквы сортов Витаминная, Мускатная, Лазурная и Дачная в период вегетации и хранения. Усовершенствованы методы консервирования тыквенной пасты с использованием биологических и химических консервантов, а также их комбинаций. Впервые проведена количественная оценка состава каротиноидов у 11 районированных в Краснодарском крае гибридов кукурузы. Впервые проведена комплексная оценка влияния растительных каротиноидосодерясащих добавок на рост, развитие и некоторые биохимические показатели белых лабораторных мышей. Впервые проведена комплексная оценка влияния каротиноидосодержащих добавок на развитие, продуктивность и некоторые биохимические показатели кур-несушек и изучено их влияние на содержание витамина А и каротина в тканях и яйцах птицы.

1.4 Практическая значимость. Рекомендовано для повышения эффективности использования в переработке плодов тыквы учитывать особенности наг

копления каротина в их плодах в зависимости от сорта и фазы вегетации и дополнительно использовать у сорта Витаминная плаценту, а у сорта Мускатная — плаценту и кору. Разработан способ консервирования плодов тыквы с использованием культур микроорганизмов и химических консервантов. Рекомендовано использовать при изготовлении комбикормов растительные добавки — тыквенную пасту, кукурузный глютен, ГОК из люцерны и биомассу цветков календулы.

1.5 Апробация работы. Результаты работы докладывались на научной конференции по итогам 2003 года (г. Краснодар, КГАУ, 2004); Всероссийской научно-практической конференции «Биотехнология — 2003» (22-26 сентября 2003, г. Сочи); конференции по итогам 2004 года (г. Краснодар, КГАУ, 2005); на научной конференции преподавателей и сотрудников экологического факультета (г. Краснодар, 2004); научной конференции факультета перерабатывающих технологий КГАУ (март 2005 г.).

1.6 Публикации. По теме проведенных исследований опубликовано 8 научных работ и получено 1 решение о выдаче патента РФ на изобретение.

1.7 Структура и объем работы. Диссертация изложена на 142 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания постановки экспериментов и методов исследования, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов. Работа содержит 34 таблицы и 19 рисунков. Список использованной литературы включает 161 научную публикацию, в том числе 36 — иностранных авторов.

2 СХЕМА, ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Объектами исследования служили плоды тыквы сортов Витаминная, Мускатная, Лазурная и Дачная. Так же исследовались 11 различных гибридов

кукурузы, протеиновый зеленый концентрат (ГОК) и лепестки календулы.

Лабораторные исследования проводили на кафедре биотехнологии, биохимии и биофизики ФГОУ ВПО "Кубанский государственный аграрный университет" в 2002-2005 гг. Научно-производственные испытания осуществляли на птицефабрике "Новомышастовская" Краснодарского края.

При проведении исследований использовали стандартные методики, а также модифииированный нами метод оценки содержания и идентификации каротиноидов в растительном сырье. Хроматотрафическое разделение каро-тиноидов проводили на колонке с окисью алюминия, в качестве элюента использовали смесь пепролейный эфир — бензин — и ацетон (80:15:5). Кароти-ноиды идентифицировали по их спектрам поглощения в области 300-980 нм на спектрофотометрах Spccord ML 80 и СФ126. Общий каротин определяли по ГОСТу 13496.17-95.

Консервирование измельченных плодов тыквы осуществляли бензойной кислотой, бисульфатом натрия, культурой микроорганизмов видов Clostridium pectinovarum 72 {CI. pectinovorum), Lactobacterium plcmtarum 52 (L. plantarum) и их комбинациями.

Биологическое тестирование проводили на лабораторных белых мышах и курах-несушках. Корм мышей и кур-песушек кросса HY-Line W-98 был сбалансирован по основным питательным и биологически активным веществам. В качестве источников каротина использовали тыквенную пасту, полученную из плодов сорта Витаминная, лепестки календулы, кукурузный плотен, микробиологический каротин. Результаты исследований обрабатывали методами математической статистики. Различия считали статистически достоверными при Р<0,05.

3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1 Исследования каротиноидного состава плодов тыквы

Плоды тыквы сорта Витаминная содержат каротина на момент сбора плодов — 53,82 мг/кг. Каротиноиды в плодах тыквы распределены неравномерно и в процессе вегетации и хранения их содержание значительно варьирует. Мы разделяли плод тыквы на три части — кору, мякоть, плаценту с семенами. Из полученных частей экстрагировали каротиноиды.

При тонкослойной хроматофафии каротиноиды тыквы делились на фракции (рис. 1 А). Наибольшая концентрация была у менее подвижной фракции (р-каротин), самая подвижная фракция имела наименьшую насыщенность (у-каротин), промежуточную хроматографическую подвижность имел а-каротин. Методом колоночной хроматографии получили индивидуальные фракции каротиноидов и идентифицировали с помощью спектрального анализа (рис. 1 Б).

3.2 Особенности каротиноидного состава частей плода тыквы разных сортов

В коре сорта Лазурная каротиноиды отсутствовали, а в остальных сортах их содержание на 3-й месяц хранения составило: Витаминная — 5,45мг/кг, Дачная — 19,4 мг/кг и Мускатная — 144,86 мг/кг. Таким образом, кору плодов сорта Мускатная можно использоваль для переработай. В мякоти плодов тыквы увеличивалось содержание всех форм каротиноидов как во время вегетации, так и в течение трехмесячного периода хранения за исключением плодов сорта Лазурная.

На третий месяц хранения в мякоти высокое содержание р-каротина было у тыквы сортов Дачная (рис. 2 В) и Мускатная (рис. 2 Г), однако Дачная уступала Мускатной по содержанию каротиноидов в четыре раза. У Витаминной

/

Т,%

400 500

Спектр поглощения а - каротина микоти тыквы

И

г>

л

400

X, им

Спектр поглощения 3 - каротина мякоти тыквы Рис. 1 — Хроматограмма каротиноидов тыквы (А) и спектры поглощения фракций (Б)

Время, суг. Время, сут.

Каропш, иг/кг

Рис. 2 - Содержание каротиноидов в мякоти плодов тыквы сортов: А — Витаминная, Б — Лазурная, В — Дачная, Г — Мускатная в процессе созревания и хранения плодов: 1 — -каротин, 2 — о(,-каротин, 3 — ^-каротин

концентрация ^-каротина оказалась в два раза ниже, чем у Мускатной. Изменение в содержании минорных форм было подобно динамике р-каротина. Последующее хранение приводило к значительному снижению содержания всех каротиноидов в мякоти, кроме тыквы сорта Витаминная.

В процессе вегетации накопление каротиноидов в плаценте наблюдали только у сорта Витаминная (рис. 3 А), однако при хранении их концентрация снижалась более чем в два раза. Вероятно, это связано с тем, что кароги-ноиды из плаценты аттрагируются мякотью, т.е. идет их перераспределение между частями плода, что подтверждается увеличением содержания их в мякоти на протяжении первых трех месяцев хранения.

У сорта Дачная (рис. 3 В) и Мускатная (рис. 3 Г) в процессе вегетации каротиноиды почти не накапливаются в плаценте, но с начала хранения и вплоть до третьего месяца их концентрация увеличивалась, и у сорта Мускатная почти в три раза превышала их содержание у сорта Витаминная, в то время как у Дачной эта величина составила для (3-каротина 65 мг/кг.

3.3 Изучение технологических особенностей консервирования плодов тыквы сорта Витаминная

Одним из способов долговременного сохранения питательных веществ в измельченной тыквенной массе является ее консервирование.

В качестве химических консервантов нами использовались бисульфат натрия и бензойная кислота в концентрации 0,3%, что обеспечивало накопление каротиноидов в тыквенной пасте (рис. 4).

Каротин, иг/кг 45

Вегетация Хранение

\ I

-*

10

20

110 170 Время, сут.

Рис. 3 - Содержание каротиноидов в плаценте плодов тыквы сортов: А — Витаминная, Б — Лазурная, В — Дачная и Г — Мускатная в процессе созревания и хранения плодов: 1 —^ -каротин, 2—¿[г каротин, 3— У-каротин

Каротин, иг/кг

20 30 40 50 £0 90 120 Врои,сут.

10 20 30 40 50 60 90 120

Время, сут.

Рис. 4 - Содержание каротинов в тыквенной пасте из плодов сорта Витаминная, консервированной бензойной кислотой (А) и бисульфатом натрия (Б) в концентрации 0,3%: ^ —р-каротинЦЩ — а-каротин; рЩ —у-каротин

При консервировании бензойной кислотой (рис. 4 А) вплоть до 20 суток в пасте происходило увеличение содержания каротиноидов и в последующие 120 дней не изменялось. Лучшие результаты получены при использовании бисульфата натрия (рис. 4 Б), где вплоть до 40 суток концентрация каротиноидов увеличивалась и превысила почти в два раза результат консервирования бензойной кислотой. Консервирование тыквенной массы бисульфатом натрия в течение 120 дней хранения не привело к разрушению каротиноидов, тогда как при хранении целой тыквы их разрушение начинается уже после 90 дней хранения. Таким образом, бисульфат натрия не препятствует накоплению каротиноидов при хранении тыквенной пасты.

Получение качественной тыквенной пасты требует снижения ее влажности. Поэтому нами была использована С/. ресИпокогит, которая, не являясь биологическим консервантом, способствует усилению сокоотделения разрушенной тыквы предположительно в результате гидролиза пектина, входящего в состав клеточной стенки.

Нами исследовано влияние этих микроорганизмов отдельно и в сочетании с химическими консервантами на скорость сокоотделения и накопления каротина в тыквенной пасте из плодов сорта Витаминная. При консервировании тыквенной пасты С1. ресСтоюгит (рис. 5) содержание общего каротина увеличивалось на протяжении всего периода хранения и было более 440 мг/кг, что выше, чем при химическом консервировании.

Время, сут. Время, сут

Рис. 5 - Динамика накопления об- Рис. б - Динамика выделения сока щего каротина при консервировании из тыквенной пасты плодов сорта тыквенной пасты С1. ресНпоуоггап в Витаминная: контроль (А); при кон-концентрации 12-107 (А) и 6-107 (Б) сервировании С1. ресйптогит

6-107(Б)н12Ю7(В)

Выход клеточного сока при консервировании паста С/, ресйптогит был почти в два раза выше, чем в контроле и достигал 23,5% (рис. 6). Увеличения со-

держания каротиноидов и выхода сока из тыквенной пасты с одновременным подавлением развития гнилостной микрофлоры можно добиться путем консервирования пасты бензойной кислотой и добавлением С1. ресвпакогит (рис. 7). При этом накопление каротина в пасте происходит вплоть до 90 суток хранения в обоих вариантах. Лучшие результаты 505,64 мг/кг получены в варианте с более высокой долей консерванта.

Динамика выхода сока из тыквенной пасты при использовании комбинации С1. ресНпаюгит и бензойной кислота (рис. 8) показала, что лучшие результаты получены при использовании консервантов с более высокой концентрацией, где выход сока достигал 34,8%, что выше, чем в контроле почти на 20%.

Время, сут. Время, сут

Рис. 7 - Динамика накопления общего каротина при консервировании тыквенной пасты бензойной кислотой (0,3%), С/. ресИпоуогит (12-107) (А) и бензойной кислотой (0,15%), С1. ресЧпочогит (6-107) (Б)

Рис. 8 - Динамика выделения сока из тыквенной пасты плодов сорта Витаминная: А — контроль; Б — при консервировании С/. ресН-птогит (6-107) и бензойная кислота (0,15%); В — С1. ресНгюуогит (12-10) и бензойной кислотой (0,3%)

Таким образом, лучшим вариантом консервирования тыквенной пасты из плодов сорта Витаминная является использование комбинированного консерванта (С/, pectinovorum 12-Ю7 и бензойная кислота 0,3%), при котором достигается наибольшее содержание каротиноидов и более интенсивное сокоотделение.

3. 4 Влияние вида растительного сырья кормового назначения на его биохимический состав

Технология влажного фракционирования трав позволяет получать ШК с высоким содержанием каротиноидов. Сок из люцерны, полученный нами, ферментировали с помощью силосных заквасок для получения ПЗК. Содержание сырого протеина в ПЗК составило 48%, токоферола — 118 мг/кг, витамина Bi — 14,5 мг/кг, витамина В2 — 21 мг/кг, витамина В3 — 44,8 мг/кг, содержание общего каротина составило 1400 мг/кг. Полученные нами результаты по содержанию каротиноидов в зерне кукурузы и в продукте ее переработай, кукурузном глютене, представлены в табл. 1.

Содержание общего каротина у гибридов достаточно различается: гибрид Краснодарский 620 СВ — 36,1 мг/кг, гибрид Российский 109 MB — 22,0 мг/кг. В глютене содержание общего каротина превышает его количество в гибриде Краснодарский 620 СВ в 7,5 раз. Поэтому при использовании зерна кукурузы и глюте-на в комбикормах необходимо учитывать содержание в сырье каротиноидов.

Перспективным источником каротиноидов являются цветки календулы. Хроматографическое разделение экстракта из цветков календулы позволило получить 6 различных фракций каротиноидов, три из которых удалось идентифицировать по спектрам поглощения: ликопин (1), виолаксантин (4), цитраксантин (6) (рис. 9). Суммарное содержание каротиноидов в цветках

А

Рис. 9 — Хроматограмма каротиноидов календулы (А) и спектры поглощения полученных фракций (Б)

400 450 500 А, нм

1-1—Г

400 450 500 X, нм

X, нм

1-1-Г

400 450 500 Х,нм

календулы составило 1630 мг/кг, при этом доля ликопина составила 973,11 мг/кг, виолаксантина — 398,64 мг/кг, цитраксантина — 260,89 мг/кг.

Таблица 1 - Содержание общего каротина, зеаксантина и лютеина (мг/кг) в

гибридах кукурузы и кукурузном глютене при натуральной влажности

Название гибрида Общий каротин Зеаксантин Лютеин

Российский 109 MB 22,0 17,0 0,12

Краснодарский 415 MB 23,1 19,5 0,23

Краснодарский 385 MB 23,4 19,8 0,27

Краснодарский 382 СВ 27,2 23,4 0,34

Краснодарский 290 АМВ 29,0 24,8 0,39

Краснодарский 632 MB 31,4 25,8 0,44

Краснодарский 403 MB 32,7 27,7 0,52

Краснодарский 395 УСВВ1 32,9 27,9 0,54

Краснодарский 410 MB 34,5 30,2 0,71

Российский 209 MB 353 31,0 0,83

Краснодарский 620 СВ 36,1 31,7 U

Плотен 280 210,0 110

3.5 Биологическая оценка кормовых растительных каротиноидных добавок в опытах на белых лабораторных мышах

Удобным объектом для исследования влияния кормовых добавок на физиологические и биохимические показатели животных являются лабораторные мыши, схема экспериментов на которых представлена в таблице 2.

Результаты роста мышей свидетельствуют, что во всех опытных группах скорость роста выше, чем в контроле, при этом наилучшие результаты были дос-

тигнугы в 1-ой и во 2-ой опытных группах, получавших тыквенную пасту.

Таблица 2 - Схема опыта на лабораторных белых мышах

Группа Характеристика кормления*

Контроль Стандартная кормосмесь (СК)

1 -я опытная СК с добавлением тыквенной пасты

2-я опытная СК с добавлением тыквенной пасты (в первой половине опыта)

3-я опытная СК с добавлением кукурузного глютена

4-я опытная СК с добавлением цветков календулы

5-я опытная СК с добавлением микробиологического каротина

* Примечание: группы содержат по 25 голов мышей и корма опыт-

ных групп выровнены по содержанию каротина

Наилучшая сохранность новорожденных мышей была отмечена в 1-ой, 2-ой, и 4-ой опытных группах (табл. 3).

Таблица 3 - Количество мышей в помете и их сохранность в группах

Груша Общее количество родившихся мышей в группе за весь период опыта, шт. Количество мышей от одной самки, шт. Сохранность, %

Контрольная 166 4 ±0,2 50

1-я опытная 499 12 ±0,6* 100

2-я опытная 492 12±0Д* 100

3-я опытная 324 8 ± 0,2* 75

4-я опытная 410 10 ±0,4* 100

5-я опытная 400 10 ±0,5* 80

Примечание: * Р<0,05

У групп, потреблявших тыквенную пасту, зафиксирована наивысшая рождаемость. Потребление календулы обеспечивало высокую сохранность, вероятно, за счет противовоспалительных и антиинфекционных свойств календулы.

Таким образом, во всех опытных группах, потреблявших растительные источники каротина, а особенно тыквенную пасту, наблюдалось положительное влияние добавок на физиолого-биохимические показатели у мышей.

3.6 Биологическая оценка растительных каротннондных добавок и их влияние на промышленную продуктивность кур-несушек

Важный научный и практический интерес представляет изучение влияния растительных каротиноидных добавок на яйценоскость кур-несушек и сохранность поголовья. Схема опыта представлена в табл. 4.

Таблица 4 - Схема опыта на курах-несушках

Группа Характеристика кормления*

Контроль Стандартная кормосмесь (СК)

1-я опытная СК с добавлением тыквенной пасты

2-я опытная СК с добавлением смеси содержащей тыквенную пасту 60%, ПЗК 30%, кукурузный плотен 10%

3-я опытная СК с добавлением цветков календулы

4-я опытная СК с добавлением ПЗК

5-я опытная СК с добавлением микробного каротина

6-я опытная СК с добавлением кукурузного глютена

Примечание: * Примечание: группы содержат по 100 голов кур-несушек и корма опытных групп содержат каротиноидов 50 г/т

Анализ содержания витамина А и каротина в желтке яйца показал, что за первые сутки опыта их концентрация во всех группах снизилась по сравнению с

первоначальным периодом, что, возможно, связано со стрессом (табл. 5), а на 14-е сутки уровень каротиноидов в контрольной группе вырос с момента начала опыта на 21,5%. В первой опытной группе концентрация каротиноидов возросла на 11,8%. Наибольшая их концентрация была обнаружена в шестой опытной группе, получавшей кукурузный плотен, и составила 58,0%.

Таблица 5 - Содержание каротиноидов и витамина А в желтке яиц у кур-несушек (мг/кг)

Группа 1-е сутки опыта 14 суток 28 суток

Кароти- Вита- Кароти- Вита- Кароти- Вита-

ноиды мин А новды мин А ноиды мин А

К И,6±0,3 9,1±0,3 14,1±0,5 7,3*0,2 14,5±0,5 7,0±0,2

1 10,2±0,3 7,8±0,2+ 11,4±03 8,5±0,3 25,3±0,8* 8,6±0,3

2 11,3±0,4 7,5±0,2* 14,7±0,4 7,8±0,2 26,4±0,7* 8,6*0,3

3 10,6±0,4 8,0±0,3 12,4±0,3 7,8±0,2 20,0±0,6 8,5*0,3

4 12,6±0,5 7,9±0,3 18,5*0,6 8,6±0,3 19,9*0,5 9,1 ±0,4

5 12,2±0,3 7,3±0,2* И,7*0,3* 8,1±0,3 13,7±0,5 8,2±0,3

6 13,1±0,3* 8,1 ±0,3 20,7±0,6* 8,8±0,3 32,4±и* 9,0*0,4

Примечание: * Р<0,05

Концентрация витамина А в контрольной группе на 14-е сутки опыта снизилась на 19,8%, в то время как в опытных группах его содержание незначительно возросло. На 28-е сутки опыта в контрольной группе содержание каротиноидов и витамина А не изменилось и вышло на уровень, близкий к уравнительному периоду. Во всех опытных группах содержание каротиноидов в желтке возросло как по сравнению с уравнительным периодом, так и с результатами полученными на 14-е сутки.

Таким образом, наши добавки значительно увеличили витаминную и коммерческую ценность яиц. Наибольшая пигментация яиц была достигнута в группах, потреблявших тыквенную пасту и кукурузный плотен. Конечным этапом наших исследований стала оценка интегральных характеристик — хозяйственных показателей кур несушек и качества получаемой продукции. Как видно из табл. 6, наименьшая потребляемость кормов была в 6-ой и 1-ой опытных группах, а наивысшая •— в контрольной. При этом опытные группы имели большую сохранность поголовья, чем контрольная.

Таблица 6 — Хозяйственные показатели кур-несушек

№ Живая масса Продук- Средняя потреб-

п/ Группа Сохран-

птицы на мо- тивность ность^ ляемость кормов

п мент убоя, г % на 1 гол. в сут., г

1 Контрольная 1650±24 82,0 96 122±3

2 1-я опытная 1740±14 96,3 100 110АЗ

3 2-я опытная 1710±13 85,3 98 112±5

4 3-я опытная 1650±24 90,7 100 120±6

5 4-я опытная 1805±24* 91,5 96 115±5

6 5-я опытная 1760±30 89,5 98 120±5

7 6-я опытная 1860±23* 96,0 100 108±3

Примечание: * Р<0,05

Продуктивность, которая выражается в количестве яиц за весь период опыта, была выше также во всех опытных группах. При этом наивысшая продуктивность была зарегистрирована в 1-ой и в 6-ой опытных группах. Аналогичные результаты были получены и по живой массе птицы.

22

ВЫВОДЫ

1. Тыква, кукуруза, и календула содержат различные каротиноиды. Из плодов тыквы выделено три каротиноида: ß-каротин, а-каропга и у-каротин. Доля p-каротина составляет около 80% от общего количества каротиноидов. Из цветков календулы выделено шесть каротиноидов, три из которых— лико-пин, виолаксантин, цитраксантин. У кукурузы обнаружены два вида каротиноидов — зеаксантин и лютеин.

2. Сорта тыквы значительно различались по содержанию общего каротина: в сорте Витаминная его концентрация составила 53,82 мг/кг, а в сорте Лазурная — 7,31 мг/кг.

3. Наибольшая концентрация каротиноидов нами была обнаружена в плаценте, наименьшая — в корке. У сорта Мускатная содержание каротиноидов в коре более чем в 50 раз превышает аналогичный показатель copra Витаминная.

4. В тыкве copra Лазурная к моменту уборки плодов содержание каротиноидов значительно снижалась. В процессе хранения плодов тыквы сортов Витаминная, Мускатная и Дачная в них наблюдалось увеличение содержания всех форм каротинов в мякоти и плаценте.

5. Наилучший результат по выходу клеточного сока, как необходимого условия для получения высококачественной тыквенной пасты, показал вариант комбинированного консервирования с использованием Clostridium pectinovorum 72 и бензойной кислоты (0,3%). Скорость сокоотделения в этом варианте был в два раза выше, чем в контроле.

6. Лучшими консервантами для хранения тыквенной пасты оказались бисульфат натрия, культуры Lactobacterium plantarum 52 и Clostridium pectinovorum 72 и их комбинации. Через 90 суток хранения тыквенной пасты, по-

лученной из плодов тыквы сорта Витаминная, при использовании комбинации Clostridium pectinovorum 72 и бензойной кислоты (0,3%) происходило увеличение содержания каротиноидов в два раза.

7. В цветках календулы, зерне кукурузы и ПЗК из люцерны выявлены различные ксантофиллы. Общее содержание ксантофиллов в 11 гибридах кукурузы варьировало в диапазоне от 22,0 до 36,1 мг/кг. В цветках календулы их суммарное содержание было 1630 мг/кг. При этом ликопина было 973,11 мг/кг, виолаксантина — 398,64 мг/кг, цитраксантина — 260,89 мг/кг. Содержание общего каротина в ПЗК составило 1400 мг/кг.

8. Биологическая оценка растительных каротинсодержащих добавок, проведенная на белых лабораторных мышах и курах-несушках, показала увеличение интенсивности обменных процессов и более высокое накопление витамина А и каротина в тканях при использовании этих добавок.

10. Наибольшая продуктивность кур-несугаек получена при использовании в комбикорме тыквенной пасты и кукурузного ппотена и составила 96% и 96,3% яйценоскости, соответственно, что выше контроля на 14%.

11. Экономический анализ показал, что наиболее эффективно введение в комбикорм тыквенной пасты, использование которой способствовало получению дохода 3229 рублей на 100 голов и позволило снизить на 19,7% расход корма в килограммах на 1 десяток яиц по сравнению с контролем.

СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Николаенко С.Н Исследование каротиноидов тыквы с целью создания экологически безопасных пищевых добавок / С.Н. Николаенко, А.Г. Кощаев, Г.А. Плутахин // Тр, 4-й Междунар. науч. практ. конф. / Гос. политехи, ун-т. — СПб., 2002. —С. 318-319.

2. Изучение каротиноидов тыквы Cucurbita Maxima и их распределение в плоде / С.Н. Николаенко, А.Г. Кощаев, Г.А. Плутахин, А.И. Петенко // Соврем, достижения биотехнологии / Сев.-Кавк. гос. техн. ун-т.— Ставрополь, 2002. — С. 17-18.

3. Некоторые общие принципы идентификации каротиноидов / А.Г. Кощаев, С.Н. Николаенко, Г.А. Плутахин, А.И. Петенко // 38 Всерос. научн. конф. по проблемам математики, информатики, физики, химии и методики преподавания естественнонаучн. дисциплин / Рос. ун-т. дружбы народов. — М, 2002. —С. 70.

4. Особенности накопления различных каротиноидов в плодах тыквы / А.Г. Кощаев, С.Н. Николаенко, Г.А. Плутахин, А.И. Петенко // Биотехнология 2003: Всерос. науч. практ. конф. — Сочи, 2003. — С. 42-44.

5. Николаенко С.Н. Влияние различных источников каротина на рост и развитие лабораторных мышей / С.Н. Николаенко // Сб. научн. тр. / КГАУ.

— 2003. — Вып. 400 С. 52-53.

6. Особенности химического состава некоторых сортов тыквы как перспективного источника экологически безопасных добавок / А.Г. Кощаев, С.Н. Николаенко, Г.А. Плутахин, А.И. Петенко Сб. науч. тр. / КГАУ. — 2004.

— Вып. 405(433) С. 63-69.

7. Николаенко С.Н. Изучение химического состава гибридов кукурузы / С.Н. Николаенко // Материалы 6-й регион, науч.-практ. конф. молодых ученых. — Краснодар, 2004. — С. 153-154.

8. Кощаев А.Г. Растительные источники каротиноидов для рационов с кур-несушек / А.Г. Кощаев, С.Н. Николаенко, А.И. Петенко //Технология

плем. и промышл. животноводства. —Краснодар, 2005. — С. 170-175.

9. Решение о выдачи патента на изобретение. МПК 7 А 23 К 1/16, 1/14. Способ получения витаминной кормовой добавки из зеленых растений / А.Г. Кощаев, А.И, Петенко, О.В. Кощаева, С.Н. Николаенко; заявитель и патентообладатель / КГАУ. — № 200410854/13; заявл. 22.03.2004.

Подписано в печать 16.12.2005. Формат 60x84/16. Печ. л. 1 Тираж 100. Заказ № 722

Кубанский государственный аграрный университет 350044г. Краснодар, ул. Калинина, 13

№26334

РНБ Русский фонд

2006-4 28606

Содержание диссертации, кандидата технических наук, Николаенко, Самвел Николаевич

Введение.

Ъ 1. Роль каротиноидов как биологически активных веществ, в изменении кормового статуса сельскохозяйственных животных и птицы.

1.1. Особенности строения каротиноидов и их функции в живых организмах

1.2. Краткая характеристика промышленных препаратов каротиноидов и направления их использования.

1.3. Биохимические особенности плодов тыквы как кормового сырья.

1.4. Растительное сырье как источник ксантофиллов.

2. Схема, объекты и методы исследований.

2.1. Схема проведения исследований.

2.2. Краткая характеристика объектов исследования.

2.3. Методы исследования биохимического состава растительного сырья и продуктов его переработки.

2.3.1. Собственные методы.

2.4. Методики проведения медико-биологической оценки кормовых добавок.

2.4.1. Методы интегральной оценки влияния каротиноидосодержа-щих добавок на животных.

3. Исследования каротиноидного состава различных сортов плодов тыквы в период вегетации и хранения.

3.1. Особенности биохимического состава различных сортов тыквы и содержания в них каротинов.

3.2. Каротиноидный составы плодов тыквы.

3.3. Особенности каротиноидного состава коры тыквы разных сортов.

3.4. Фракционный состав каротиноидов мякоти плодов тыквы.

3.5. Каротиноидный состав плаценты тыквы.

4. Изучение технологических особенностей консервирования плодов тыквы сорта Витаминная.

4.1. Химическое консервирование.

4.2. Биологическое консервирование.

4.3. Комбинированное консервирование.

4.4. Технологическая схема производства тыквенной пасты.

5. Влияние вида растительного сырья кормового назначения на его биохимический состав.

5.1 Биохимические особенности протеинового зеленого концентрата из сока люцерны.

5.2. Биохимический состав гибридов зерна кукурузы.

5.3. Изменение содержания каротиноидов в томатах в процессе хранения.

5.4. Выделение и идентификация каротиноидов цветков календулы.

5.5. Принципиальная технологическая схема получения кормовых добавок из исследуемого сырья.

6. Биологическая оценка кормовых растительных каротиноид-ных добавок в опытах на белых лабораторных мышах.

6.1. Накопление витамина А и каротина в тканях белых мышей.

6.2. Влияние каротиноидов на некоторые биохимические показатели крови у белых лабораторных мышей.

6.3. Влияние каротиноидных добавок на рост и репродукцию белых лабораторных мышей

7. Биологическая оценка растительных каротиноидных добавок и их влияние на промышленную продуктивность кур-несушек

7.1. Содержание витамина А и каротина в тканях и яйце кур-несушек

7.2. Влияние каротиноидосодержащих добавок на некоторые биохимические показатели сыворотки крови.

7.3. Влияние каротиноидных добавок на продуктивность кур несушек и качество получаемой продукции.

7.4. Экономическая оценка результатов исследования.

Выводы.

Практические предложения.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Биохимические особенности каротинсодержащего растительного сырья и его биологическая оценка"

Актуальность исследований. Интенсификация сельскохозяйственного производства предусматривает перевод животноводства на промышленную основу, что связано, со значительной изоляцией животных от природной среды, что в свою очередь требует полноценного кормления, сбалансированного по всем питательным и биологически активным веществам. В результате снижается продуктивность животных, качество продукции и ее технологические свойства при переработке. Один из путей решения этой проблемы повышения, что зависит от факторов, снижающих потери питательных и биологически активных компонентов в процессе заготовки и хранения. Это определяется технологиями, применяемыми при переработки сырья нарушения технологических режимов, что очень часто случается из-за недостатка научно подтвержденной информации, и приводит к ухудшению качества продуктов, и снижению их положительного влияния на организм животных.

Особенно велики потери питательных веществ при консервировании тыквы. В процессе консервирования и хранения тыквы в первую очередь происходят большие потери витаминов. Недостаток же витаминов в рационе приводит к снижению продуктивности, увеличению затрат на корма, снижению иммунитета [Вальдман, 1977]. Только оптимальная обеспеченность витаминами позволяет поддержать высокую продуктивность животных и птицы и ее воспроизводительные качества. Это требует введение в корма гарантированных витаминных добавок. [Хенинг, 1976].

Из витаминов наиболее ценными являются жирорастворимые в том числе и предшественники витамина А каротин. Достичь необходимого биохимически оптимизированного витаминного и провитаминного баланса только лишь за счет введения в рацион синтетических витаминов, невозможно. Это в первую очередь связано с узким ассортиментом коммерческих витаминных добавок, высокой их стоимостью, и сомнительностью с точки зрения экологической безопасности, [Емелина с соавт., 1970, Околелова, 1996]. поэтому современное сельское хозяйство должно максимально сократить применение синтетических и неприродных добавок. Решить эту проблему можно только увеличивая опору на натуральные источники витаминов. В настоящее время для этих целей наибольшее распространение получили: тыква, люцерна, календула и кукуруза.

Цель и задачи исследований. Целью работы является биохимический анализ растительного каротинсодержащего сырья и его биологическая оценка на животных. Для достижения поставленной цели решались следующие задачи: исследовать каротиноидный состав различных сортов плодов тыквы в период вегетации и хранения; изучить технологические особенности консервирования плодов тыквы сорта Витаминная; оценить влияния вида растительного сырья кормового назначения на его биохимический состав; провести биологическую оценку кормовых растительных каротино-идных добавок в опытах на белых лабораторных мышах; изучить Биологическое влияние растительных каротиноидных добавок на промышленную продуктивность кур-несушек.

Научная новизна. Впервые проведена идентификация и количественная оценка каротиноидного состава плодов тыквы сортов Витаминная, Мускатная, Лазурная и Дачная в период вегетации и хранения. Усовершенствованы методы консервирования тыквенной пасты с использованием биологических и химических консервантов, а также их комбинаций. Впервые проведена количественная оценка состава каротиноидов у 10 районированных в Краснодарском крае гибридов кукурузы. Впервые проведена комплексная оценка влияния растительных каротиноидосодержащих добавок на рост, развитие и некоторые биохимические показатели белых лабораторных мышей. Впервые проведена комплексная оценка влияния каротиноидосодержащих добавок на развитие, продуктивность и некоторые биохимические показатели кур-несушек и изучено их влияние содержание витамина А и каротина в тканях и яйце птицы.

Практическая значимость. Рекомендовано для повышения эффективности использования в переработке плодов тыквы учитывать особенности накопления каротина в плодах тыквы в зависимости от сорта и фазы вегетации и дополнительно использовать у сорта Витаминная плаценту, а у сорта Мускатная — плаценту и кору. Разработан способ консервирования плодов тыквы с использованием культур микроорганизмов и химических консервантов. Рекомендовано использовать при изготовлении комбикормов растительных добавок: тыквенный порошок, кукурузный глютен, ПЗК из люцерны и биомассу цветков календулы для увеличения уровня и качества продукции за счет улучшения витаминного состава яиц и тушек кур-несушек при более высокой резистентности птицы.

Апробация работы. Результаты работы докладывались на: научной конференции по итогам 2003 года (Краснодар, КГАУ 2004); Всероссийской научно-практической конференции «Биотехнология 2003» (22-26 сентября 2003 г. Сочи); Конференции по итогам 2004 года (Краснодар, КГАУ 2005); На научной конференции преподавателей и сотрудников экологического факультета (Краснодар, 2004); научной конференции факультета перерабатывающих технологий (март 2005 г.).

Публикации. По теме проведенных исследований опубликовано 8 работ и получено 1 решение о выдаче патента РФ на изобретения.

1. Роль каротиноидов как биологически активных веществ, в изменении кормового статуса сельскохозяйственных животных

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Николаенко, Самвел Николаевич

Выводы

1. Тыква, кукуруза, и календула содержат различные каротиноиды. Из плодов тыквы выделено три каротиноида: (3-каротин, а-каротин и у-каротин. Доля (3-каротина составляет около 80% от общего количества каротиноидов. Из цветков календулы выделено шесть каротиноидов, три из которых— ликопин, виолаксантин, цитраксантин. У кукурузы обнаружены два вида каротиноидов— зеаксантин и лютеин.

2. Сорта тыквы значительно различались по содержанию общего каротина: так, в сорте Витаминная его концентрация составила 53,82 мг/кг, а в сорте Лазурная 7,31 мг/кг.

3. Наибольшая концентрация каротиноидов нами была обнаружена в плаценте, наименьшая — в корке. У сорта Мускатная содержание каротиноидов в коре более чем в 50 раз превышает аналогичный показатель сорта Витаминной.

4. В тыкве сорта Лазурная к моменту уборки плодов концентрация каротиноидов значительно снижалась. В процессе хранения плодов тыквы сортов Витаминная, Мускатная, Дачная наблюдалось увеличение содержания всех форм каротинов в мякоти и плаценте.

5. Наилучший результат по выходу клеточного сока как необходимого условия для получения высококачественной тыквенной пасты показал вариант комбинированного консервирования с использованием Clostridium pectinovorum штамм 72 и бензойной кислоты (0,3%). Скорость сокоотделения в этом варианте был в два раза выше, чем в контроле.

6. Лучшими консервантами для хранения тыквенной пасты оказались бисульфат натрия, культуры Lactobacterium plantarum штамм 52 и Clostridium pectinovorum штамм 72 и их комбинации. Через 90 суток хранения тыквенной пасты из плодов сорта Витаминная при использовании комбинации Clostridium pectinovorum штамм 72 и бензойной кислоты (0,3%) происходило увеличение содержания каротиноидов в два раза.

7. В цветках календулы, зерне кукурузы и ПЗК из люцерны выявлены различные ксантофиллы. Общее содержание ксантофиллов в 11 гибридах кукурузы варьировало в диапазоне от 22,0 до 36,1 мг/кг. В цветках календулы суммарное содержание каротиноидов было 1630 мг/кг. При этом ликопина было 973,11 мг/кг, виолаксантина - 398,64 мг/кг, цитраксантина - 260,89 мг/кг. Содержание общего каротина в ПЗК составило 1400 мг/кг.

8. Биологическая оценка растительных каротинсодержащих добавок проведенная на белых лабораторных мышах и курах-несушках показала увеличение интенсивности обменных процессов, и более высокое накопление витамина А и каротина в тканях при использовании этих добавок.

9. Наибольшая продуктивность кур-несушек получена при использовании в комбикорме тыквенной пасты и кукурузного глютена, составив 96 и 96,3%, соответственно, что выше контроля на 14%.

10. Экономический анализ показал, что наиболее эффективно введение в комбикорм тыквенной пасты, использование которой способствовало получению дохода 3229 рублей на 100 голов, и позволила снизить на 19,7% расход корма в килограммах на 1 десяток яиц по сравнению с контролем.

ПРЕДЛОЖЕНИЕ ПРОИЗВОДСТВУ

1. Для повышения эффективности использования в переработке плодов тыквы следует учитывать особенности накопления каротина в плодах тыквы в зависимости от сорта. Для более рациональной переработки плодов рекомендовано дополнительно использовать у сорта Витаминная плаценту, а у сорта Мускатная — плаценту и кожуру.

2. В целях увеличения накопления каротина в пасте из плодов тыквы сорта Витаминная в процессе хранения рекомендовано при консервировании добавлять маточную культуру молочнокислых бактерий (0,3%), Clostridium pectinovorus (0.03%) или бисульфат натрия (0,3%), также возможно использовать комбинированное консервирование.

3. Для увеличения продуктивности и улучшения витаминных качеств яиц и тушек птицы рекомендовано использовать при изготовлении комбикормов растительные витаминные добавки: тыквенный порошок, кукурузный глютен, ПЗК из люцерны и биомассу цветков календулы.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата технических наук, Николаенко, Самвел Николаевич, Краснодар

1. Алпатов С.П. Иммунобромная активность p-каротина при старческих иммунодефицитах / С.П. Алпатов, Т.И. Сергеева // Человек и лекарство: тез. докл. Рос. науч. конф. М., 1996. — С. 6.

2. Аналитическая хроматография / К.И. Сакодынский, В.В. Бражников, С.А. Волков идр..-М., 1993.-464 с.

3. Арапсимович В.В. Биохимия тыквы / В.В. Арапсимович. // Биохимия культур, растений. Л., 1938. - Т.4. - С.56 - 107

4. Байтевлятов А.Б. Аминазин и витамины в профилактике стресса / А.Б. Байтевлятов, В.П. Николаенко //Ветеринария. 1977. - № 8. - С. 94-96.

5. Бета каротин: применение при воспроизводстве животных и птиц. / В.А. Антипов, А.Н. Турченко, B.C. Самойлов, и др.; Краснод. науч. -исслед. вет. ин-т; ЗАО «Роскарфарм». - Краснодар, 2002. — 120 с.

6. Бирюк В. А. Технологическое и фитохимическое исследование препаратов календулы: автореф. дис. . канд. фарм. наук. / В. А. Бирюк — Харьков, 1975. — 17 с.

7. Богданов Г.А. Силос и сенаж / Г.А. Богданов, О.В. Привало. — М.: Колос, 1983.-319 с.

8. Болотников И.А. Физиолого-биохимические основы иммунитета сельскохозяйственной птицы / И.А. Болотников, Ю.В. Конопатов. -Л.: Наука, 1987.- 164 с.

9. Боссэ Г. Витаминоносные растения СССР и их пищевое использование / Г. Боссэ. М.: Сов. наука, 1943. - 100 с.

10. Ю.Бремнер С.М. Витамины в домашнем питании / С.М. Бремнер. М., 1974.- 232 с.11 .Бриттон Г. Биохимия природных пигментов / Г. Бриттон. — М., 1986.—422 с.

11. Бугаев А.В. Исследование безвредности пищевых белковых концентратов из листостебельной биомассы люцерны / А.В. Бугаев,

12. И.К. Павлова // Пробл. общей и молекуляр. биологии. Киев, 1964. -С. 102-106.

13. Бураева Х.И. Справочная книга бахчевода / Х.И. Бураева. М., 1984. -152 с.

14. Вавилова Н. М. Гомеопатическая фармакодинамика / Н. М. Вавилова.

15. Смоленск: Гомеопат, центр; М.: Эверест, 1994. — Т. 2. — 457 с.

16. Вальдман А.Р. Витамины в животноводстве / А.Р. Вальдман. Рига: Зинатне, 1977.-352 с.

17. Варлыгин В.В. Эффективность применения бета каротина микробного синтеза в сравнении с бета - каротином травяной муки в рационах коров и нетелей: автореф. дис. . канд. биол. наук / В.В. Варлыгин., 1987. — 24 с.

18. Влияние бета — каротина микробного и химического синтеза на воспроизводство и продуктивность коров / И.Г. Пивняк, В. А. Будников, В.А. Заболотский, А.В. Рябкин //Зоотехния. 1989. -№ 2. -С. 46-47

19. Врыднык Ф.И. Приготовление кукурузного силоса с добавкой сульфитного щелока / Ф.И. Врыднык, З.А. Любинец, Е.Н. Ковальский // Тез. докл. Первого сов.-чех. симпоз. по использованию нетрадиц. кормов в питании с.-х. животных. М ., 1984. — С. 12-13.

20. Витамины в кормлении сельскохозяйственных животных и птицы / Н.Т. Емелина, B.C. Крылова, Е.А. Петухова, Н.Б. Бромлей. -М.: Колос, 1970.-321 с.

21. Гарин К.С. Орошение кукурузы / К.С. Гарин, В.Д. Коваль, Н.К Шульга. М., 1962. -165 с.

22. Гейсс Ф. Основы тонкослойной хроматографии / Ф. Гейсс; пер. с англ.- М., 1999.-Т. 1-2.-404 с.

23. Георгиевский В. П. Биологически активные вещества лекарственных растений / В. П. Георгиевский, Н. Ф. Комиссаренко, С. Е. Дмитрук. — М.: Наука, 1990.—333 с.

24. Герасименко В.Г. Биохимия продуктивности и резистентности животных / В.Г. Герасименко. Киев: Вища шк., 1987. - 224 с.

25. Гераскина Г.В. Белки и аминокислоты / Г.В. Гераскина. М., 1991.-46 с.

26. Гиталов А.В. Комплексная механизация возделывания кукурузы / А.В. Гиталов. М., 1962.- 230 с.

27. Гольдберг Я.М. Использование отходов в консервной промышленности / Я.М. Гольдберг. М: Пищевая пром-сть, 1971. - 370 с.

28. Горячковский A.M. Справочное пособие по клинической биохимии /

29. A.M. Горячковский. Одесса: ОКФА, 1994. - 415с.

30. ГОСТ 13496.17 95 Методы определения каротина. Дата введения 01.01.1997г.

31. Грушка Яр. Монография о кукурузе / Яр. Грушка; пер. с чеш. М., 1965 397 с.

32. Грысс 3. Использование отходов плодоовощной и консервной промышленности / 3. Грысс. М: Пищевая пром-сть, 1974. - 192 с.

33. Гудвин Т. Сравнительная биохимия каротиноидов / Т. Гудвин. М.: ИЛ, 1954.-395 с.

34. Двойченкова Е.Ю. Биотехнологическая утилизация отходов хранения и переработки плодоовощной продукции / Е.Ю. Двойченкова. М.: ЦБНТИминмедбиопром, 1987. -215 с.

35. Девяткин В.А. Использование каротина микробиологического синтеза в рационах крупного рогатого скота: автореф. дис. . канд. е.- х. наук /

36. B.А. Девяткин.- Дубровицы, 1990.-24 с.

37. Долгов И.А. Белки растительного происхождения из сока люцерны / И.А. Долгов, Н. И. Пройдак, В.В. Киреева // Химия пищ. веществ, свойства и использование биополимеров в пищ. продуктивности: тез. докл. на Всесоюз. конф. Могилев, 1990. - С. 158-159.

38. Донченко Л.В. Производство пектина / Л.В. Донченко, Н.С. Карпович, Е.Г. Симхович. Кишинев, 1994. - 182 с.

39. Дорофеева В.Ф. Руководство по апробации бахчевых культур / В.Ф. Дорофеева. М.: Агропромиздат, 1985. - 385 с.

40. Емелина Н.Т. Витамины в кормлении сельскохозяйственных животных и птицы / Н.Т. Емелина. М.: Колос, 1970. - 321 с.

41. Иванов Н.В. Заключение о результатах применения препарата «Каролин» у лиц, участвовавших в ликвидации аварии на Чернобыльской АЭС / Н.В. Иванов. Краснодар, 1995. - 25 с.

42. Капитанов А.Б. Каротиноиды как антиоксидантные модуляторы клеточного метаболизма / А.Б. Капитанов, A.M. Пименов // Успехи соврем, биологии. 1996. - Т. 116, вып. 2. - С. 183-186

43. Карнаухов В.Н. Накопление каротиноидов с возрастом в тканях теплокровных животных / В.Н. Карнаухов, Т.Б. Татарюнас // Доклады акад. наук СССР. 1972. - Т. 203, № 5. - С. 1197

44. Карнаухов В.Н. Каротиноиды: успехи, проблемы и перспективы / В.Н. Карнаухов. Пущино, 1986. - 160 с.

45. Карнаухов В.Н. Функции каротиноидов в клетках животных / В.Н. Карнаухов. -М.: Наука, 1973. 104с.

46. Кахана Б.М. Биохимия тыквы / Б.М. Кахана // Биохимия культур, растений Молдавии. Кишинев, 1967. - С. 91 - 124.

47. Козубенко В.Е. Селекция кукурузы / В.Е. Козубенко М., 1965. 156 с.

48. Колб В.Г. Клиническая биохимия / В.Г. Колб, B.C. Камышников. -Минск, 1976.-124 с.

49. Колесников В.В. Результаты применения препарата «Каролин» у больных с заболеваниями органов пищеварения / В.В. Колесников,

50. Н.П. Поддубный, Н.В. Иванов // Тез. докл. 1-го Междунар. конгр. по наруротерапии и рекреации. СПб., 1995. - № 1-2. - С. 25

51. Кондратенко В.В. Биохимическое обоснование технологии пектиновых веществ из тыквы: автореф. дис. . канд.тех.наук / В.В. Кондратенко. -Краснодар, 1999.-25с.

52. Кормление сельскохозяйственной птицы / В.Н. Агеев, Ю.П. Квиткин, П.Н. Панков, О.Д. Сингерова. М.: Колос, 1978. - 272 с.

53. Кочергин С. Исследование состава плодов тыквы / С. Кочергин // Изв. ТСХА. 1964. -№3. - С. 65 - 68

54. Кощаева О.В. Технология получения и оценка биологической ценности растительных белково-витаминных добавок для перепелов: автореф. . канд. с. х. наук / О.В. Кощаева. - Краснодар, 2003. - 24 с.

55. Кудрина В.Н. Химический состав и равновесная влажность семян овощных культур / В.Н. Кудрина // Докл. ТСХА. 1961. - Вып. 62. - С. 44-46

56. Кузнецов А.С. Ксантофиллы / А.С. Кузнецов: Фидленд, 2002. 15 с.

57. Курсанов A.JT. Углеводно-фосфорный обмен и синтез аминокислот в плодах тыквы Cucurbita реро / A.J1. Курсанов, О. Ф. Туева, А.Г. Верещагина // Физиология растений. 1954. - Вып.1. - С.76 - 79.

58. Лакин В.Н. Биометрия / В.Н. Лакин. М., 1990. - 234 с.

59. Лебедев Н.И. Использование микродобавок для повышения продуктивности жвачных животных / Н.И. Лебедев. — Л.: Агропромиздат, 1990. 220 с.

60. Леонов Ю.Д. Тыква / Ю.Д. Леонов // Семья. Земля. Урожай. 2002. — № 5.-С. 4-6

61. Леутский Н.Т. Взаимодействие витамина А с белками / Н.Т. Леутский. Черновцы: Изд-во Львовского ун-та, 1959. - Т.31. - С.314-321

62. Лившиц И.А. Спутники нашего здоровья / И.А. Лившиц. М., 1990. -56 с.

63. Лиепинын Г.К. Токсические вещества белковых коагулятов цитоплазматической фракции соков клевера и люцерны / Г.К. Лиепинып, Д.В. Рейнхолде, Э.В. Каминская // Биотехнология кормопроизводства и перераб. отходов. Рига, 1987. - С. 84 - 94

64. Лукьянов А.Н. Изменение содержания жира в семенах томатов / А.Н. Лукьянов // Консерв. пром-сть. 1973. - №6. - С. 4 - 8

65. Лукьянов М.И. Содержание витамина С и каротина в тыквенных овощах / М.И. Лукьянов, Р.С. Коган // Сад и огород. 1948. - №7. -С.23-25.

66. Макрушин П.В. О коррелятивных связях некоторых биохимических показателей крови с живым весом и ростом цыплят / П.В. Макрушин // Сб. науч. тр. / Сарат. СХИ. 1975. - Вып. 50. - С. 105-106.

67. Малахова М.В. Влияние каротиноидов на обмен холестирина в клетках человека: автореф. дис. . канд. биол. наук / М.В. Малахова. М. 1988.-24 с.

68. Мальцев B.C. Содержание свободных аминокислот в плазме и эритроцитах перепелок / B.C. Мальцев, Р. Ишбулатова, В. А. Потапенко // С.-х. биология. 1973. - Т. 8, № 3. - С.455-457.

69. Маслиева О.И. Витамины в кормлении птицы / О.И. Маслиева. М.: Колос, 1975.-208 с.

70. Матусис И.И. Витамины и антивитамины / И.И. Матусис. М.: Совет. Россия, 1975.-240 с.

71. Медико-биологические исследования концентрата каротиноидов в целях решения вопроса их безвредности и использования в лечебно -профилактических целях / И.Р. Бариляк, О.Д. Ольшевская, Т.К.

72. Лебская, В.Ф. Толкачева // Вопр. питания. 1999. - Т.68, № 3. - С. 12 -17

73. Мельник А.В. Пектиновые вещества бахчевых. Сообщ. 5. Пектолитические ферменты кормового арбуза. Пектинметилэстераза / А.В. Мельник // Изв. МФ АН СССР. 1959. - №5 - С. 45 - 48.

74. Мельник А.В. Пектиновые вещества бахчевых. Пектинметилэстераза / А.В. Мельник // Изв. МФ АН СССР. 1979. - №5. - С. 24 -27.

75. Мельфанова С.М. Химический состав и технологические свойства протеинового концентрата из люцерны / С.М. Мельфанова, P.M. Яншевский, Д.Е. Клявиня // Тез. докл. Всесоюз. конф. молодых ученых и аспирантов по птицеводству. Загорск, 1981. - С. 26-27.

76. Методические рекомендации по проведению научных исследований по кормлению сельскохозяйственной птицы. М., 1988. - 15 с.

77. Me дико-биологические аспекты каротиноидов / А.В. Сергеев, Л. А. Вакулова, М.Я. Шашкина, Т.А. Жидкова // Вопр. мед. химии. 1992. -№6.-С. 8-11.

78. Микулин А.Е. Функциональное значение пигментов и пигментации в онтогенезе рыб: автореф. дис. . д-ра биол. наук / А.Е. Микулин. М. 1998.-49 с.

79. Милованова Л.В. Тыква как источник каротина / Л.В. Милованова, А.И. Филов // Тр. по прикл. ботанике, генетике и селекции / ВИР. -1954. Т.31, вып. 1. - С.24-27.

80. Мингазов Т.А. Роль витамина А в предупреждении эмбриональной смертности / Т.А. Мингазов // Животноводство. 1974. - № 9. - С. 6369.

81. Митушников В.М. Естественная резистентность сельскохозяйственной птицы / В.М. Митушников. М., 1985. - 160 с.

82. Михов А. Хозяйственные качества мускатных тыкв / А. Михов // Овощеводство и виноградарство. 1954. - № 4. - С. 7-9.

83. Мусил Я. Основы биохимии патологических процессов / Я. Мусил. -М.: Медицина, 1985. 432 с.

84. Никитюк В.Г. Каротиноиды и их значение в живой природе и для человека / В.Г. Никитюк. Харьков: Гос. научн. центр лекарств, средств, 1974. - 150 с.

85. Никулина Т.М. Тыква ценная культура. Быковская селекционная станция / Т.М. Никулина // Картофель и овощи. 1995. - №5. - С. 26 -27.

86. Новиков Ю.Ф. Получение протеиновых концентратов из сока зеленых растений / Ю.Ф. Новиков // Сел. хоз-во за рубежом. 1983. — № 3. -С.33-37.

87. Пат. № 2004160 Российская Федерация, МКИ 5А23КЗ/02. Способ силосования витаминной тыквы и устройство для его осуществления / А.И. Петенко, М.Б. Кофман. № 4933035/15; заяв. 07.03.1991; опубл. 15.12.1993, Бюл.45.

88. Пигменты пластид зеленых растений и методика их исследования / Н.В. Бажанова, Т.Г. Маслова, И.А. Попова, О.Ф. Попова. М.; Л.: Наука, 1964.-120 с.

89. Петенко А.И. Витаминные резервы животноводства / А.И. Петенко. -Краснодар, 1992. 122 с.

90. Петенко А.И. Научное обоснование и практические решения эффективного использования витаминных ресурсов в животноводстве: автореф. дис. . д-ра с.-х. наук. Краснодар, 1992. - 46с.

91. Петенко А.И. Прогрессивные способы консервирования и хранения тыквы: рекомендации / А.И. Петенко. Краснодар, 1993. - 25 с.

92. Петрухин И.В. Корма и кормовые добавки / И.В. Петрухин. М.: Росагропромиздат, 1989. - 526 с.

93. Поддубный Н.П. Бета каротин: опыт и перспективы применения в медицине / Н.П. Поддубный, A.M. Сампиев; тез. докл. Куб. гос. мед. акад. — г. Краснодар, 2000г. С.32-33.

94. Покровский А.А. Биохимические методы исследования / А.А. Покровский. М., 1969. - 652 с.

95. Попов В.И. Лекарственные растения / В.И. Попов, Д.К. Шапиро, И.К. Данусевич. М., 1992. - 126 с.

96. Пройдак Н.И. Результаты комплексных исследований цитоплазматических фракций растительных белков / Н.И. Пройдак. // Прикладная биотехнология на пороге 21 века, тез. докл. М., 1995. - С. 178-179

97. Пташкина Н.М. Пектин из тыквы / Н.М. Пташкина, И.А. Данилова, А.Г. Ишин // Вестн. РАСХН. 1993. - №1,2. - С. 70 - 71.

98. Раецкий Ю.И. Методики зоотехнических и биохимических анализов кормов, животноводческой продукции и продуктов обмена / Ю.И. Раецкий, В.Н. Сухарев, В.Т. Самохин. Дубровицы, 1970. - 130 с.

99. Рачевский Ф. Каротин и каротинотерапия в офтальмологии / Ф. Рачевский. Ростов н/Д, 1937. - 6 с.

100. Рубин Б.А. Основы хранения плодов и овощей / Б.А. Рубин, JT.B. Метлицкий. М.: Изд-во АН СССР, 1955. - 135 с.

101. Рубин Б.А., Витамин С и окислительная активность растительной ткани / Б.А. Рубин, И.С. Спиридонова //Биохимия. 1940. - Вып. 2. -С. 125-129.

102. Савинов Б.Г. Каротин (провитамин А) и получение его препаратов / Б.Г. Савинов. Киев: Изд-во АН Укр. ССР, 1948. - 230 с.

103. Савинов Б.Г. Хромотографическое и спектрофотометрическое исследование каротиноидных веществ / Б.Г. Савинов, С.Е. Кудрицкая, Г.М. Фишман. Свердловск, 1972. - С. 23 -25.

104. Справочник по лекарственным растениям / A.M. Задорожный, А.Г. Мышкин, С.Я. Соколов, А.И. Шретер. М., 1992. - 176 с.

105. Симоненко А.П. Посади свое дерево / А.П. Симоненко, С.В. Лабазников. — Барнаул, 1999. 112с.

106. Соколова Б.П. Основы селекции и семеноводства гибридной кукурузы / Б.П. Соколова. — М., 1968. 567 с.

107. Технология производства, переработки и использования тыквы / под ред. В.Д. Кострова, И.Ф. Горлова. Волгоград, 1996. - 120 с.

108. Толстогузов В.Б. Искусственные продукты питания / В.Б. Толстогузов. М.: Наука, 1978. 232 с.

109. Феофилова Е.П. Пигменты микроорганизмов / Е.П. Феофилова. — М.: Наука, 1974.-218 с.

110. Филов А.И. Тыква высокого качества / А.И. Филов // Картофель и овощи. 1962. - №12. - С. 53 - 54.

111. Фисинин В.И. Производство бройлеров / В.И. Фисинин. М.: Агропромиздат, 1989. - 184 с.

112. И5.Хенинг А. Минеральные вещества, витамины, биостимуляторы в кормлении сельскохозяйственных животных / А. Хенинг. М.: Колос, 1976.-560 с.

113. Химическое изучение тритерпеновых гликозидов Calendula officinalis / JI. П. Вечерко, Э. П. Зинкевич, Н. И. Либизов, А. И. Баньковский // Сб. науч. работ / ВНИИ лекарств, растений.— 1970.— Вып. 1.— С. 169-171.

114. Холодова Ю.Д. Липопротеиды крови / Ю.Д. Холодова, П.П. Чаяло. -Киев: Наук, думка, 1990. 208 с.

115. Цвет М.С. Хромолипиды в растительном и животном мире / М.С. Цвет. Варшава, 1910. - 380 с.

116. Чеботаев Н. Тыква на корм / Н. Чеботаев, В. Данько. М.: Сельхозиздат, 1963. - 134 с.

117. Чиркин А.А. Бета -каротин активный фактор в борьбе с экопатологией человека / А.А. Чиркин, Р.В. Казарян, Н.П. Поддубный // Человек и лекарство: тез. докл. 3 нац. конгр. - М., 1996. - С. 295.

118. Шмальгаузен И.И. Определение основных понятий и методы определения роста / И.И. Шмальгаузен. — М., 1935. — 320 с.

119. Штейнбок С.Д. Получение из ноготков красителя заменяющего импортное «Аннато». (Состояние и перспективы изучения растительных ресурсов СССР) — М.; Л.: Изд-во АН СССР, 1958. -430 с.

120. Щербаков В.Г. Биохимия и товароведение масличного сырья / В.Г. Щербаков. М: Агропромиздат, 1991. - 290 с.

121. Экологически безопасный способ коагуляции и консервирования сока люцерны при фракционировании зеленой массы / А.Г. Кощаев, А.А. Панков, Г.А. Плутахин, А.И. Петенко // Экология. Право. Образование: тез. докл. Междунар. конф. Краснодар, 1999. - С.41.

122. Лшарсью рослини: енциклопедичний довщник /За ред. акад. А. М. Гродзинського.— Киев: Вид-во «Укра'шська eнциклoпeдiя», 1992.— 292 с.

123. Ahman В. The Stability of Beta-carotene in Leaf Concentrate (LC) and in Products Containing LC / Ahman B. // Proc. of the Fifth Inter. Congr. on1.af Protein Research "LeafPro-96". In 4 vol. Ed. N. I. Proydak, Rostov-on-Don, 1996. V. 2. - P. 113-118.

124. Bendich A. Carotinoids and immune pesponse / A. Bendich // J.Nutr. -1989. -V. 119,№1.-P. 112-115.

125. Bondi A. Vitamin A and carotene in animal nutrition / A. Bondi, D.Sklan // Progr. in Food Nutrit. Sc. 1984. - V. 8, N 1-2. - P. 165-191.

126. Cheeke R.P. Biological properties and nutritional significance of legume saponins / R.P. Cheeke // Leaf protein concentrates. Westport, 1983. - P. 396-423.

127. Chmielwaki T. Tomato / T. Chmielwaki. Warszawa, 1966. - №4: P. 389-399.

128. Gerloff E. D. Amino acid composition of leaf protein concentrates / E. D.h

129. Gerloff, I. H. Lima, M. A. Stohmann // J. Agr. Food Chem. 1965. - V. 13, № 2. -P.139-143.

130. Goodwin T.W. The Biochemistry of Carotenoids / T.W. Goodwin. // Chapman and Hall. 1984. - V. 2. - P. 224

131. Goodwin T.W. Chemistry and Biochemistry of plant pigments / T.W. Goodwin // Department of biochemistry, university of Liverpool. — England, 1976. V. 2. - P. 108-123

132. Goodwin T.W. The Biochemistry of Carotenoids / T.W. Goodwin. // * Chapman and Hall. 1980. - V. 1. - P.377

133. Gurcay R. Utilization of vitamin A by turkey poults / R. Gurcay, R. Bousher, A. Callebach // J. Nutr. 1950. - V.41. - P.565-582.

134. Hanczakowski P. The influence of the addition of synthetic methionine and lysine an the nutritive value of leaf protein concentrates / P. Hanczakowski // Rosz. Nauk. Zootechn. 1974. - № 1. - P. 139-145.

135. James Allen Olson. Biological actions of carotenoids / James Allen Olson // Iowa State University. 1989. - P. 94-95.

136. James Allen Olson. Provitamin A function of carotenoids: The conversion of P- carotene into vitamin A. Department of Biochemistry and Biophysics / James Allen Olson // Iowa State University. 1988. - P. 105-108.

137. Jenkins J.A. Econ. Bot / J.A Jenkins — 1948, V.2, №14- P. 379 392.

138. Johns D.C. Amino acid supplementation of leaf protein concentrate / D.C. Johns // Proc. South. Рас. Poultry Sci. 1980. - P 210 - 212.

139. Kamimura S. Supplementary effects of vitamin A on cows under different forage conditions / S. Kamimura, T. Ohgi, M. Takahashi, T. Tsukamato // Bull.Fac. — 1992. P. 222.

140. Kiosseoglou B. The composition of free and esterified sterols in tomato seeds oil / B. Kiosseoglou // Oleaginaux. 1989. - № 2. - P. 348.

141. Krinsky N.I. Retinoids: Progress in research and clinical application / N.I. ^ Krinsky, X.D. Wang, G. Tang, R.M. Russel, (Eds. Livrea M.A., Parcer L.).

142. N.Y.: Marcel Dekker, Inc., 1993.— 128 p.

143. Krinsry N.I. Free Rad. Biol / N.I. Krinsry. // Med. 1989. - V.7. - P.617.

144. Kuhn R. Les carotinoides des plantes / R. Kuhn, E. Lederer. Paris. 193432 p.

145. Liaaen- Jensen S. In: marine natural products, Scheuer P.J. (Ed.) // Acad. Press.-1978.-P. 1-73.

146. Pelzer P. Concentre proteique de luzerne / P. Pelzer // Cultivar. 1980. - №128.-P. 45.

147. Proidak N. Mechanico-Technological Basis of Designing the Equipment for the Juice Squeezing from the Vegeteble Raw Materials / N. Proidak //6th Intern. Congr. on Agr. Mech. and Energy. — Papars Ankara, 1996. - P. 81-92.

148. Proidak N. Strategy of the Development of Technology of Leafstalk Biomass Complex Retreatment on the Basis of Wet Fractionation / N. Proidak, I. Dolgov //XII World Congr. on Agr. Eng. Milano, 1994. - V. 2. - P. 14831489.

149. Phillips T. Phosphorylase and a branching enzyme in Sguash / T. Phillips W. Averill // Plant Phys. 1953. - V. 28, № 2. - P.78 - 81.

150. Ream H.W. On-farm Forago Harvesting: Plant juice protein produotionsystem in a humid temperate climate / H.W. Ream, N.AJorgensen, R.G Koegel // Leaf protein concentrates. Westport, 1983. - P. 467-489.

151. Rick Ch. M. Amer. J. Bot. / Ch. M. Rick. — 1956. — V.43. — P.687 -695.

152. Shellenberger Т. E. Effect of vitamin A level of diet of feet conferention and utilization of by growing chekens / Т. E. Shellenberger, D. B. Parrish, P. E. Sanford // Poultry Sci. 1960. - V.39, №6. - P. 1413-1417.

153. Stojsavljevic T. Hemijski sastov i fizicke osobine proteinskih hraniva ad lucerke / T.Stojsavljevic, N. Vucurevits, Delic Slavica Sredanovic // Savr. Poljoprivr. 1981. - V. 29, № 1/2. - P. 63-80.

154. Terapuntuwat S. Protein and amino acid digestability biological value of protein and energy metabolizabiliti of same leaf protein concentrates in chickens / S. Terapuntuwat, I. Tasaki // J. Poultry Sci. 1984. - V.21, № 2. -P.64-74.

155. Tswett M.S. Ber. Dtsch. Bot. Ges / M.S. Tswett. 1911. — V. 29. — P. 630636.

156. Woodham A.A. The nutritional evaluation of leaf protein concentrates / A. A. Woodham // Leaf protein concentrates. Westport, 1983. - P. 415 -433.

157. Zechmeister L. Carotinoide / L. Zechmeister. Berlin, 1934. - 72 p

158. Zechmeister L. Principles and practice of chromatography / L. Zechmeister, L. Cholnoky. New York, 1943. - 1522 p.141