Возрастные и тканеспецифические особенности перекисного окисления липидов и белков при остром стрессе и введении α-токоферола на разных этапах постнатального онтогенеза

Чумакова, Анна Сергеевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Возрастные и тканеспецифические особенности перекисного окисления липидов и белков при остром стрессе и введении α-токоферола на разных этапах постнатального онтогенеза
ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Возрастные и тканеспецифические особенности перекисного окисления липидов и белков при остром стрессе и введении α-токоферола на разных этапах постнатального онтогенеза"

На правах рукописи

ЧУМАКОВА АННА СЕРГЕЕВНА

ВОЗРАСТНЫЕ И ТКАНЕСПЕЦИФИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ

И БЕЛКОВ ПРИ ОСТРОМ СТРЕССЕ И ВВЕДЕНИИ О-ТОКОФЕРОЛА НА РАЗНЫХ ЭТАПАХ ПОСТНАТАЛЬНОГО

ОНТОГЕНЕЗА

Специальность 03.00.13 - физиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

1 с пш: 2000

Астрахань - 2009

003473954

Работа выполнена на кафедре физиологии и морфологии человека и животных Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Астраханский государственный университет», г. Астрахань

Научный руководитель: доктор биологических наук, доцент

Нестеров Юрий Викторович

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор

Клаучек Сергей Всеволодович

доктор биологических наук, профессор Сердюков Василий Гаврилович

Ведущая организация: ГОУ ВПО «Волгоградский

государственный университет»

Защита состоится « 26 » июня 2009 года в 12-00 часов на заседании объединенного диссертационного совета ДМ 212.009.01 при Астраханском государственном университете по адресу 414000, г. Астрахань, пл. Шаумяна, 1.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Астраханского государственного университета по адресу 414056, г.Астрахань, ул.Татищева, 20а

Автореферат разослан «2009 года.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор биологических наук

Нестеров Ю.В,

Список условных сокращений

АФК - активные формы кислорода

ОМ - окислительная модификация

ОМБ - окислительная модификация белков

ПОЛ - перекисное окисление липидов

ПОБ - перекисное окисление белков

СРО - свободнорадикальное окисление

АКМ - активные кислородные метаболиты

СР - свободные радикалы

СОД - супер оксид дисмутаза

АОС - антиокислительная система

МДА - малоновый диапьдегид

ОС - окислительный стресс

ПОС - прооксидантная система

ПОЗ - прооксидантная защита

АОЗ - антиоксидантная защита

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В настоящее время по-прежнему актуальной ; современной биологии и медицины остается проблема стресса и его влияш на различные функциональные системы организма. Стресс рассматривает как способ достижения резистентности организма к действию экстремальны факторов различного генеза (Тигранян P.A., 1988; Судаков К.В., 199 Ерохин И.А., 1993). Вместе с тем, стресс может стать факторо оказывающим повреждающее действие на органы и системы, ведущим развитию заболеваний (Судаков К.В., 1996; Тигранян P.A., 1988; Теплы Д.Л., 2008).

Важным проявлением стресс-реакции и адапционной перестройк является совершенствование деятельности регуляторных механизмо участвующих в поддержании оптимального уровня интенсивности обменны процессов на уровне целостного организма (Федоров Б.М., 1991). При это несомненно, должны существовать органоспецифические особенности осуществлении мобилизации различных механизмов при стрессе и пробле реализации стресс-реакции на уровне отдельных органов и тканей остает актуальной. В частности, малоизученным остается вопрос об изменения метаболических процессов при развитии стресс-реакции.

Как известно, одним из ведущих повреждающих факторов при стресс детерминирующих развитие вторичных изменений органов и ткане является интенсификация свободнорадикального окисления, которая наря с этим рассматривается как один из универсальных физиологически процессов - окисление биологических субстратов при действии АФ (Меерсон Ф.З., Пшенникова М.Г., 1988; Барабой В.А., 1991; Ланкин В.З 2001; Дубинина Е.Е., 2003). Анализ современной научной литератур позволяет прийти к заключению о том, что значительное количество раб посвящено перекисному окислению липидов (ПОЛ), в том числе стрес индуцированному, при этом окислительной деструкции белков клеток тканей уделяется меньшее внимание.

Механизмы и последствия стресс-реакции в организме зависят не тольк от метаболических возможностей различных тканей, но и от возра индивидуума. В то же время, возрастной аспект исследован! свободнорадикальной деструкции белковых и липидных компоненто тканей, незначительно представленный в литературе, должен дополни известные к настоящему времени закономерности стресс-реакции на разны этапах онтогенеза и позволит существенно углубить представления возрастных особенностях механизмов адаптации к экстремальным, стрес индуцирующим воздействиям.

Цель исследования состояла в изучении возрастных тканеспецифических особенностей перекисного окисления белков и липидо у крыс разных возрастных групп при остром стрессе и введении природног антиоксиданта альфа-токоферола.

Задачи исследования:

1.Провести сравнительное изучение интенсивности перекисного окисления белков и липидов интактных животных разных возрастных групп и выявить его тканеспецифические особенности в условиях фоновой активности.

2.На модели острого эмоционально-болевого стресса исследовать уровень липидной и белковой пероксидации в мозговой ткани и органах висцеральной системы у неполовозрелых, взрослых и старых крыс.

3.Провести сравнительный анализ выраженности возрастных и стресс-индуцированных изменений свободнорадикального окисления липидов и перекисной деструкции белков.

4.Изучить влияние природного антиоксиданта витамина Е на свободнорадикальное окисление липидных и белковых компонентов различных тканей в условиях фоновой активности, острого стресса и на разных этапах постнатального онтогенеза.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Свободнорадикальные процессы в условиях фоновой активности и стресса имеют тканевую специфичность, которая заключается в различной выраженности и направленности перекисного окисления белков и липидов в мозге, печени, легких и миокарде экспериментальных животных.

2. Процессы окислительной модификации белковых и пероксидного окисления липидных компонентов тканей не находятся в тесной зависимости друг от друга.

3. Реакция организма на однократное стрессорное воздействие зависит от возраста животного и отличается динамикой накопления продуктов перекисного окисления белков и липидов.

4. Антиоксидантное и (или) прооксидантное действие природного антиоксиданта а-токоферола зависит от ткани и возраста животного.

Научная новизна. Впервые исследованы и сопоставлены процессы белковой и липидной пероксидации в различных тканях на разных этапах постнатального онтогенеза. В эксперименте выявлены возрастные особенности стрессорной динамики показателей ПОЛ и ПОБ в мозге, печени, легочной ткани и миокарде. Показано, что процессы СРО в этих органах не всегда изменяются однонаправлено у крыс разного возраста в норме и после стрессирования животных.

Получены ранее не известные данные о достаточно высокой силе влияния возрастного фактора на фоновую активность процессов белковой и липидной пероксидации в мозге, легких и миокарде, а также на стрессорную динамику изучаемых параметров. В частности, показано сильное влияние возраста на стрессорный уровень МДА в конечном мозге и легких и ПОБ в миокарде, мозге и печени. В ходе исследования показано также, что предварительное введение а-токоферола приводит к его выраженному антиоксидантному действию в большинстве, но не во всех органах у молодых и половозрелых животных.

Теоретическая и практическая значимость. Результаты исследованн демонстрируют наличие возрастных и тканеслецифических различи свободнорадикальных процессов при остром стрессорном воздействии расширяют представления о механизмах ранней реакции антиоксидантно системы на стресс-индуцирующие воздействия.

Онтогенетические различия в динамике накопления продукте свободнорадикального окисления липидных и белковых компонентов ткане служат основанием для анализа результатов повреждающего действн эмоционально-болевого стресса в эксперименте и клинической практик Выявленные эффекты природного антиоксиданта а-токоферола открыва дальнейшие перспективы для его более широкого практическо использования в медицине и ветеринарии при профилактике и лечени стрессорных повреждений органов. Материалы диссертационно исследования могут быть включены в курсы лекций по физиологи! экологической физиологии для студентов биологических специальносте университетов.

Апробация работы. Результаты исследования доложены и обсуждены Международной конференции "Структурные преобразования органов тканей на этапах онтогенеза и при воздействии антропогенных фактор Экология и здоровье населения. Актуальные проблемы биологии медицины" (Астрахань, 2000), XX международном симпозиуме "Эколог физиологические проблемы адаптации" (Москва, Российский Университ Дружбы Народов, 2001), XXI международном симпозиуме "Эколо физиологические проблемы адаптации"(Москва, Российский Университ Дружбы Народов, 2003), Международной научной конференции «Свободн радикалы, антиоксиданты и старение» (Астрахань, 2006), V Международной научно-практической конференции «Эколого-биологическ проблемы бассейна Каспийского моря (Медико-биологическ исследования)» (Астрахань, 2007), на итоговых научных конференци студентов, аспирантов и преподавателей Астраханского государственно университета (2005-2008),.

По материалам диссертационного исследования опубликовано 9 работ.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 13 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литератур включающего четыре подглавы, главы материал и методы исследовани двух глав, посвященных результатам исследования и их обсуждени выводов и списка литературы. Текст иллюстрирован 8 таблицами и 2 рисунками. Библиографический список включает 321 источников, которых 184 иностранных.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследования проводились на белых крысах-самцах в трех серия опытов на 3-х возрастных группах животных: 1 - неполовозрелые недельного возраста массой 64 г; 2 - половозрелые животные 4-х месячног

возраста, средней массой 153 г.; 3 - старые животные 18-ти месячного возраста, средней массой 385 г, всего 84 животных. Животные были разделены на следующие группы: 1) интактные животные, 2) животные, подвергавшиеся эмоционально-болевому стрессу, 3) крысы, получавшие масляный раствор а-токоферолацетата в течение 14 дней per os в дозе 1 мг/100 г массы тела, 4) крысы, подвергавшиеся эмоционально-болевому стрессу с предварительном введением а-токоферола в той же дозе. Животные содержались в стандартных условиях вивария при естественном освещении и свободном доступе к воде и корму. По окончании опытов животных декапитировали после предварительной наркотизации крыс внутрибрюшинным введением нембутала в дозе 4 мг/100 г массы тела (Арушанян Э.Б., Толпышев Б.А., 1981). Перед экспериментом животных хендлировали (Жуков Д.А., ВиноградоваЕ.П., 1995; Виноградова Е.П., Чаадаева Е.В., 1994).

Моделью эмоционально-болевого стресса служило электрокожное раздражение, для чего использовали прямоугольную камеру с решетчатым металлическим полом, соединенным с источником переменного тока фиксированного сопротивления, получаемого с помощью лабораторного автотрансформатора. Крысу помещали в установку на 5 мин. для ознакомления с ней, а затем подавали электрический ток с напряжением 40 V на протяжении 15 мин. с интервалами 30 сек. (Буреш Я. И соавт, 1991). Животных забивали сразу после извлечения из камеры. После декапитации забирали кровь, выделяли большие полушария и гипоталамус, вскрывали грудную и брюшную полость и отпрепаровывали легкие, сердце и печень для последующей гомогенизации, экстрагирования тканей и биохимического анализа.

О развитии стресса у животных судили по изменению количества эозинофильных гранулоцитов (проба на эозинопению) и количеству адреналина в крови, а также относительной массе надпочечников (по отношению к массе тела).

Количество эозинофильных гранулоцитов в крови, забираемой из хвостовой вены, определяли после их окрашивания жидкостью Дунгера в камере Горяева с последующим пересчетом числа эозинофилов в 1 мм3 крови (Ронин B.C., Старобинец Г.М., 1989). Для окрашивания эозинофилов готовили основной раствор (эозин К, вода и 40% формалин) и рабочий раствор (2 части основного раствора, 2 части ацетона и 6 частей воды). Во флакон помещали 0,2 мл рабочего раствора, пипеткой от гемометра добавляли 0,02 мл крови, взятой из хвостовой вены, перемешивали и заполняли камеру Горяева. Подсчет проводили через 4 минуты при увеличении по всей поверхности сетки.

Количество адреналина в крови, получаемой после декапитации животных, проводили по методу, основанном на колориметрическом определении интенсивности синего окрашивания, возникающего при взаимодействии адреналина с реактивом Фолина (по Филиппович Ю.Б. и

соавт., 1975). Для этого к 1 мл плазмы крови добавляли 4 мл свежеприготовленного 10% раствора N2CC>3, 0,5 мл реактива Фолина и доводили объем пробы раствором N2CO3 до 10 мл. Параллельно готовили стандартный раствор адреналина с концентрацией 0,05 мг/1 мл. Экстинцию проб измеряли при Х=700. Расчет проводили по формуле: С х Еоп/Ест., где С - концентрация адреналина в стандартном растворе, Е - экстинция опытной и стандартной проб.

Уровень свободнорадикального окисления определяли по скорости перекисного окисления липидов и перекисного окисления белков (ПОБ) в гомогенатах больших полушарий, гипоталамусе, печени, легких и миокарде.

Для определения перекисного окисления белков использовали методику Дубининой Е.Е., Бурмистрова С.О., Леоновой Н.В. (1995 г.). Для анализа использовали 0,05-0,1 мл экстракта тканей, осаждение белков осуществляли с помощью 20% раствора трихлоруксусной кислоты (ТХУ). К денатурированным белкам приливали равный объем (1мл) 0,1 М 2,4-денитрофенилгидразина (2,4-ДФГ), растворенного в 2 М HCL. В контрольную пробу добавляли вместо 2,4-ДФГ равный объем 2 М HCL. Инкубацию осуществляли при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем пробы центрифугировали при 3000 g в течение 15-20 мин. Осадок промывали 3 раза раствором этанол - этилацетат (1:1). Полученный осадок подсушивали с целью устранения оставшегося растворителя этанол — этилацетат и затем растворяли в растворе мочевины. Мочевину приливали к осадку в объеме 2,5 мл и выдерживали в кипящей бане в течение 5 мин до полного растворения. Оптическую плотность образовавшихся денитрофенилгидразонов измеряли при длине волны 540 нМ.

Перекисное окисление липидов в гомогенатах тканей оценивали по скорости спонтанного и неферментативного аскорбатзависимого ПОЛ, содержанию в тканях конечного продукта ПОЛ - малонового диальдегида (МДА).

Метод определения малонового диальдегида и скорости пероксидного окисления липидов в гомогенатах тканей (Строев Е.А., Макарова Е.Г., 1986) основан на определении содержания конечного продукта ПОЛ - малонового диальдегида, который при взаимодействии с тиобарбитуровой кислотой образует окрашенный в розовый цвет триметиновый комплекс, имеющий максимум поглощения при Х=530-532. Навеску тканей 0,5 г гомогенизировали в 19,5 мл охлажденного 1,2% раствора хлорида калия. В одну пробирку наливали 2 мл гомогената и 0,2 мл дистиллированной воды, во вторую - 2 мл гомогената и по 0,1 мл растворов аскорбиновой кислоты (2,6 мМ) и соли Мора (4-10"5), в третью — те же вещества, что и во вторую и 1 мл 40% раствора трихлоруксусной кислоты. Все пробы помещали на 10 минут в водяную баню при 37°С, после чего в первые две пробирки прибавляли по 1 мл трихлоруксусной кислоты и центрифугировали 10 мин при 3000 об/мин. Далее отбирали по 2 мл надосадочной жидкости, добавляли по 1 мл 0,8% раствора тиобарбитуровой кислоты и помещали

пробы в кипящую водяную баню на 10 минут. После этого их охлаждали и измеряли экстинцию на фотоэлектроколориметре при 532 нм. Расчет проводили по формулам:

Х,(Х2) = EifE?) х 3 х 3,2 х б ; Х3 = Е,х 3x3,2

0,156x2 0,156

где Xj - скорость спонтанного ПОЛ (нмоль МДА/0,05 г/ за час инкубации), Х2 - скорость аскорбатзависимого неферментативного ПОЛ (нмоль МДА/0,05 г за час инкубации), Х3 - содержание МДА в исходном гомогенате (нмоль/0,05 г сырого веса ткани); Е - экстинции соответственно 1-й, 2-й и 3-й проб; 3,2 - общий объем исследуемых проб, мл; 2 - объем надосадочной жидкости, взятой на определение МДА, мл; 3 - объем проб, взятой на фотометрию, мл; 0,156 -экстинция 1 нмоль МДА в 1 мл при 532 нм.

Весь экспериментальный материал обрабатывался статистически с вычислением средней арифметической, ошибки средней, достоверности различий по критерию Стьюдента и проведением корреляционного и дисперсионного анализа с вычислением достоверности силы влияния по Фишеру (Плохинский Н.А, 1980; ЛакинГ.Ф., 1990).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

С целью подтверждения развития стресса и выявления возрастных различий в стресс-реактивности экспериментальных животных наряду с поведенческими реакциями изучались некоторые физиологические показатели до и после однократного электрокожного раздражения (табл. 1). В ходе эксперимента у половозрелых крыс наблюдалась выраженная реакция на электро-болевое воздействие со стороны крови и дыхания: частота дыхания увеличилась по сравнению с контролем на 73,1% у половозрелых и на 56,1 у старых животных. Причем частое и глубокое дыхание наблюдали у крыс в течение всего периода воздействия (15 минут) и сразу после извлечения крыс из камеры. По эозинопеническому критерию данное воздействие оказалось стресс-реализующим, что выражалось в значительном снижении числа эозинофильных гранулоцитов в крови половозрелых крыс (на 16%). Анализ крови на содержание адреналина выявил значительное его увеличение после стресса - на 34,8% (половозрелые) и на 16,6% (старые). При этом относительная масса надпочечников достоверно не изменялась, хотя тенденция к ее увеличению наблюдалась у крыс этих двух возрастов (на 10,8% и 11,3%) (табл.1).

Реакция неполовозрелых крыс на ЭКР имела свои особенности. Частота дыхательных движений у них при стрессе понижалась (на 21,2%). В отличие от выраженной гипервентиляции у взрослых крыс, у крысят наблюдали частое поверхностное дыхание, которое сопровождалось периодическими длительными остановками с видимым спазмом брюшной мускулатуры. Обращает на себя внимание разница в исходных значениях частоты дыхания (у взрослых - 87,4 ± 3,2, у крысят -124,0 ± 3,9, р<0,01). Можно полагать, что гиповентиляционные эффекты и недостаточная реактивность внешнего

дыхания к действию стрессора у неполовозрелых крыс связаны с незрелостью дыхательного центра, его меньшей чувствительностью к углекислому газу и, как следствие этого, быстрым функциональным истощением респираторной системы организма (табл.1).

Реакция крови крысят на ЭКР проявилась в выраженной эозинопении (число эозинофилов снизилось на 41 %) и повышением, хотя намного меньшим по сравнению с половозрелыми и старыми, уровня адреналина (на 5,9%). Исходный уровень катехоламина в крови крысят был значительно выше, чем у взрослых животных. При этом относительная масса надпочечников у крысят достоверно не изменялась и даже наблюдалась тенденция к ее снижению.

Таблица 1

Показатели стресс-реактивности животных разных возрастных групп в _условия» острого эмоционально-болевого стресса (Mim)

Показатели Возраст животных

Неполовозрелые Половозрелые Старые

Контроль Стресс Контроль Стресс Контроль Стресс

Частота дыхания, мин. 124,0±3,9 97,7±8,4 87,4±3,2 151,3±5,1 87,1±4,56 136,0±3,08

Р <0.01 <0.001 <0.001

Адреналин мг/мл плазмы 0,0776± 0,001 0,0822± 0,001 0,0453± 0,002 0,0611± 0,004 0,0301± 0,0008 0,0351± 0,0001

Р <0.05 <0.05 <0.001

Эозинофил ы, в 15мм крови 595,0±18,7 351,8± 23,0 513,3± 17,7 431,4± 21,3 185,0±12, 5 461,5±17,1

р <0.001 <0.02 >0.05

Масса надпоч£чи иков, мг/г 0,0953± 0,003 0,0855± 0,004 0,0775± 0,004 0,0859± 0,003 0,0623 ±0,005 0,0694± 0,002

Р >0.5 >0.05 >0.05

Примечаиие. Рдано в сравнении с контролем.

Повышение уровня катехоламинов в крови при остром стрессе является неоспоримым фактом (Филаретов А.А, 1987; Пшенникова М.Г. и соавт., 2000). Различные варианты реакции дыхательной системы на шок, по имеющимся в литературе данным, сопровождаются определенными изменениями нейрогормональных взаимоотношений. Так, стресс-вызванные гипервентиляционные эффекты (при наличии частого и глубокого дыхания) сопровождаются повышением функциональной активности симпатоадреналовой, холин- и серотонинергической систем, а стресс-индуцированная гиповентиляция (при наличии асинхронно частого и поверхностного дыхания) определяется усилением адренергических процессов

и падением активности систем ацетилхолин-холинэстераза и серотонин-моноамиоксидаза (Базаревич Г. Я., 1973). Наши данные позволяют сделать заключение о развитии стойкой стресс-реакции взрослых крыс в ответ на действие электрического тока, что подтверждается соответствующими изменениями показателей стресс-реактивности, которые сопровождаются адекватной реакцией со стороны внешнего дыхания. У неполовозрелых животных, наряду с выраженной стресс-индуцированной реакцией крови по гормональному и иммунному компонентам, имеют место гиповентиляционные эффекты при изначально высокой исходной частоте дыхания (табл. 1).

При анализе полученных в ходе экспериментов данных у интактных животных разного возраста нами обнаружены как онтогенетические, так и тканеспецифические особенности пероксидного окисления как белковых компонентов тканей так и липидной пероксидации. Так, уровень конечного продукта ПОЛ в гипоталамусе был более высоким у крысят по сравнению с половозрелыми, при этом у старых животных он заметно отличался от уровня МДА у неполовозрелых. В этой области мозга фоновый уровень ПОБ имел одинаковые значения у взрослых и старых (0,016 нмоль/ч), который превышал величину ПОБ у неполовозрелых крыс. Что касается кинетических характеристик ПОЛ, то скорость индуцированного ПОЛ у взрослых и старых крыс был ровно в два раза ниже, чем у крысят. Уровень спонтанного ПОЛ у половозрелых понизился на 13%, а у старых увеличился на 244% по сравнению с крысятами (табл. 2).

При биохимическом анализе ткани больших полушарий мозга возрастных различий в уровне малонового диапьдегида обнаружено не было. При этом, кинетические характеристики ПОЛ имели возрастные особенности: спонтанное ПОЛ повышалось у третьей возрастной группы по сравнению с крысятами и половозрелыми, скорость аскорбатзависимого ПОЛ так же у старых в полтора раза превышала его уровень у молодых и взрослых крыс. Такая же тенденция обнаружена нами и в отношении окислительной деструкции белков в конечном мозге животных.

Исследования показали, что в тканях висцеральных органов имела место достоверная разница в уровне МДА у животных разного возраста, что наблюдалось и в случае с ПОБ. Однако необходимо отметить, что более видимые возрастные отличия изучаемых параметров у интактных животных имели место в легочной ткани для ПОЛ и в легких и миокарде для ПОБ (табл.2).

Далее одной из задач исследования было изучение стресс-чувствительности различных органов крыс разных возрастных групп в отношении свободнорадикального окисления.

На модели острого электрокожного раздражения обнаружены разнонаправленные изменения уровня ПОЛ в различных тканях, причем это касалось как концентрации в гомогенатах тканей МДА, так и кинетических характеристик ПОЛ.

Уровень перекисной деструкции белков и свободнорадикального окисления лнпидов в различны!!

постнатального возраста в условиях острого эмоционально-б

Неполовозрелые Половозрелые

Воэдействи с МДА, нмоль/0,05 г ткани 1 е § а и с 2 5 г 111 ПОБ, нмоль/ч МДА. нмоль/0,05 г ткани 1 . £ в- щ и с: 2 м 2. II А О 8 с £ МДА. нмоль/0.05 г ткани 1 8 б 5 и с= 2

ГИПОТАЛАМУС

Контроль 2,35*0,003 411 0,39*0,0001 444 4,62*0,007 444 0,011*0,0001 444 2,18*0.017 •"444 0.34*0.0002 •••441 2.46*0.007 ••• 444 0,016*0,0001 *** 0,32*0,003 1,98*0.

Стресс 3,45*0,006 0,34*0,0005 444 5,67*0,012 414 0,021*0,0002 3,28*0,008 ••• 441 0.36*0.0003 •••441 4.79*0.018 ••• 441 0,012*0,0001 034*0,001' ** 2,06*0, **«

Р М.001 РС0.001 Ре0,00| Рс0,00| Р<0,001 Р<0,001 Р<0,001 Р<0,001 Рс0,05 Р>0,0

БОЛЬШИЕ ПОЛУШАРИЯ

Контроль 0,37*0,0003 дм 2,02*0,002 444 3,16*0,004 444 0,01110,0001 444 0,35*0,003 •••44 2,22*0,002 •••444 2,94*0,427 444 0,012*0,0002 •••444 0.34*0.0002 *** 3.083*0 »»«

Стресс 0,32*0,0004 444 2,33*0,002 444 3,97*0,006 444 0,014*0,0001 441 0,34*0,0004 ••» 444 2,26*0,002 •••444 4,52*0,014 •** 444 0,013*0,0002 •••444 0.35*0.0002 «*» здз*о. *•*

Р Р<0,001 РеО.ОО! Р<0,00! Р<0,001 Р<0.01 Р<0,001 Р>0,05 Р<0,001 Р<0.001 РсО.ОС

ПЕЧЕНЬ

Контроль 0,39*0,0003 444 2,06*0,0034 44 4,20*0,274 444 0,011*0,0002 0,35*0,003 •••411 2,48*0,003 •••444 2,94*0,427 * 0,012*0,0001 •••444 0,43*0,004 2,83*0,

Стресс 0,36*0,0004 444 2,72*0,003 441 4,24*0.010 444 0,015*0.0001 441 0,34*0,0004 ••» 441 2.27*0,001 •*» 444 4,52*0,014 •••444 0,011*0,0002 •••44 0,41*0,008 »»» 2,56±0,( *

Р Р<0,001 Р<0,И)1 Р<0.001 Р<0,00| Р<0,01 Р<0,001 Р>0,05 Р<0,001 Р<0,001 Р>0,0

ЛЕГКИЕ

Контроль 0,40*0,0004 444 1,90*0,001 444 1,97*0,002 444 0,011*0,0001 0,34*0,0004 ••• 444 2.04*0,002 •••444 2,11*0,003 •••444 0,010*0,0001 **• 0,33*0.0002 2,01*0,(

Стресс 0,33*0,0004 444 2,09*0,002 444 2.65*0,124 44 0,012*0,0001 44 0,34*0,0003 ••• 444 2,13*0,003 •••444 2,24*0,002 •• Д44 0,011*0,0002 ••• 444 0,32*0,0002 2*0,00 **»

Р Р<0,001 Р<0,001 Р<0,001 Р<0,001 Р<0,01 Р<0,001 Р<0,001 Р<0,001 Р<0,001 РеО.ОО

МИОКАРД

Контроль 0,33*0,0001 444 1,91*0,001 444 2,10*0,002 0,010*0,0001 Д44 0,37*0,0005 •••444 2,16*0,002 •••444 2.35*0,003 »*« 0,010*0,0002 444 0,30*0,006 * •« 1,78*0,С »»*

Стрссс 032*0,0004 239*0,001 444 4,92*0,013 444 0,011*0,0001 0.34*0,0004 *** 2,25*0,002 •••444 3,72*0,006 •••444 0,011*0,0001 031*0,016 1,76±0,С ф**

р Р>0,05 Р<0,001 Р0.001 1*0,001 Р<0,001 Р<0,001 Р<0,001 Р<0,001 Р<0,001 М.00

Примечание. Р дано в сравнении с контролем; * - р< 0.05 — 0.001 в сравнении с неполовозрелыми; л - р< 0,05 - 0,001 в сравнении со старыми животными

Так, в мозговой ткани (гипоталамус) электорокожное раздражение вызвало достоверное увеличение уровня МДА у всех возрастных групп животных. В то же время в больших полушариях была выраженная тенденция к понижению на фоне стресса уровня МДА у неполовозрелых и взрослых крыс, в отличие от старых животных, у которых этот показатель достоверно повысился после стресса. В легких и сердечной мышце значение этого показателя после электрокожного раздражения также понижалось у всех возрастных групп животных, за исключением миокарда старых животных где стресс не вызвал видимых изменений этого показателя (табл. 2, рис. 1).

Наряду с этим в ходе исследования после острого стрессирования мы наблюдали незначительное, но в большинстве случаев достоверное повышение интенсивности белковой пероксидации в сердце, легких и больших полушариях животных всех возрастных групп. Что касается гипоталамуса и печени, то у крысят и старых животных обнаружена такая же тенденция к стрессиндуцированному усилению ПОБ, при этом в этих тканях у половозрелых 4-х месячных крыс ЭКР спровоцировало снижение ПОБ по-сравнению с контрольными значениями. Особенно это проявилось в гипоталамусе, где уровень ПОБ снизился после ЭКР с 0,016 ± 0,0001 до 0,012 ± 0,0001 (р< 0,001) (табл.2, рис. 2).

Обращает на себя внимание выявленный нами факт возрастной специфики стрессорного уровня малонового диальдегида. Так, в гипоталамусе и миокарде стрессорный уровень МДА у старых крыс был значительно ниже такового у молодых крысят и взрослых животных; в ткани конечного мозга и легких возрастных изменений не наблюдали, при этом в печени стрессорный уровень МДА был гораздо выше у старых крыс (табл.2, рис.1). Что касается стрессорных значений ПОБ, то в легочной ткани и сердце его уровень был практически одинаков у всех возрастных групп, в печени - более высоким у неполовозрелых, в больших полушариях - также высоким у старых, а в гипоталамусе был выражено снижен у 4-х месячных крыс в сравнении с другими возрастными группами (табл.2, рис.2). Такая же тканевая специфичность в реакции на острый стресс имела место и в отношении спонтанного и индуцированного пероксидного окисления липидов.

Таким образом, вышеописанные результаты исследования позволяют прийти к заключению о том, что однократное стрессирование животных электрическим током сопровождается выраженными изменениями интенсивности свободнорадикальных процессов, которые выражаются, как правило, в усилении ПОЛ и ПОБ в большинстве изучаемых тканей и органов у животных разного возраста. Однако, имеют место тканевые и возрастные особенности, которые заключаются в разнонаправленности изменений параметров свободнорадикального окисления. Необходимо также отметить, что наиболее чувствительные к стрессу являются процессы лнпидной пероксидации по сравнению с белковой (табл. 2, рис.1, рис.2).

Учитывая выше изложенное, представляет интерес изучение взаимосвязи интенсивности двух процессов - ПОЛ и ПОБ, а также зависимость изменений изучаемых параметров от возраста животного. Зависимость уровня интенсивности ПОЛ и ПОБ в условиях стрессорного напряжения и в норме изучали путем корреляционного анализа.

Нами получены достаточно разнонаправленные значения коэффициента корреляции как в контрольных группах, так и в разных органах при стрессе. Тесная положительная корреляция между уровнем белковой пероксидации и накоплением в ткани малонового диальдегида имеет место в гипоталамусе, больших полушариях и печени контрольных крыс всех возрастов, в то время как для легких и миокарда достоверных корреляционных связей не выявлено и коэффициент корреляции имел невысокие, но отрицательные значения.

В условиях стресса между содержанием МДА и перекисным окислением белков в разных тканях также не прослеживается общей закономерной зависимости - коэффициент корреляции имеет различные величины и иногда прямопротивоположную направленность для разных органов и возрастных групп. Наиболее четкая положительная связь средней силы между ПОЛ и ПОБ обнаружена в гипоталамусе, больших полушариях и легких половозрелых крыс, легких старых животных и печени молодых. В то же время отрицательные значения коэффициента корреляции получены для гипоталамуса и миокарда крысят и для легких старых животных.

Таким образом, прослеживается следующая закономерность: наиболее тесная как положительная, так и отрицательная связь между ПОЛ и ПОБ наблюдается в печени, легких, мозге крыс, в миокарде же получены менее выраженные и недостоверные значения коэффициента корреляции. Обращает так же на себя внимание положительная корреляционная зависимость между этими двумя окислительными процессами на фоне стресса только у взрослых половозрелых крыс. В целом можно сделать заключение об отсутствии тесной однонаправленной связи между ПОЛ и ПОБ, значения показателей которых зависимо изменяются не во всех органах животных.

С целью изучения статистического влияния возрастного фактора на исследуемые параметры нами проведен дисперсионный анализ полученных данных (табл. 3).

Сила влияния возраста на изменение окислительной модификации белков и перекисного окисления липидов обнаружена нами как в контроле, так и в группах стрессированных крыс. Наиболее высокая сила влияния имеет место в мозговой ткани, легких и миокарде для контрольных значений ПОБ и так же в печени для контрольных значений ПОЛ. Влияние возрастного фактора на стрессорную динамику изучаемых параметров было так же достаточно высоко во всех органах для ПОБ. Особенно выражено влияние возрастного фактора на стрессорный уровень МДА в конечном мозге и легких и стрессорный уровень белковой пероксидации в миокарде, мозговой ткани и печени. Только в миокарде стрессированных крыс нами не

обнаружена достоверная сила влияния возраста в содержании малонового ди альдегида.

Таблица 3

Результаты дисперсионного анализа в опытах по изучению влияния возраста на окислительную модификацию белков и липидов в тканях крыс в условиях фоновой

активности и острого стресса

Ткань Группы ПОБ, нмоль/ч Содержание МДА, нмоль/0,05 г

„ г 1» Р л»2 Р

Гипоталамус Контроль 0.96±0.02 <0.001 0.96±0.02 <0.001

Стресс 0.98±0.01 <0.001 0.52±0.24 <0.01

Большие полушария Контроль 0.96±0.02 <0.001 0.93±0.035 <0.001

Стресс 0.97±0.015 <0.001 0.99±0.005 <0.001

Печень Контроль 0,39±0,31 <0.01 0.94±0.03 <0.001

Стресс 0.95±0.025 <0.001 0.74±0.13 <0.001

Легкие Контроль 0.71±0.15 <0.001 0.99±0.005 <0.001

Стресс 0.85±0.075 <0.001 0.99±0.005 <0.001

Миокард Контроль 0.71±0.15 <0.001 0.92±0.04 <0.001

Стресс 0.92±0.04 <0.001 0.16±0.42 >0.05

Примечание. Р - достоверность силы влияния по Фишеру г],2 - сила влияния

Следующим этапом нашей работы было изучение влияния природного антиоксиданта а-токоферола с целью выявления возможных его протекторных или регулирующих влияний на окислительные процессы в тканях в условиях фоновой активности и стрессорного воздействия. Для этого нами были выделены две группы опытных животных разных возрастных групп: крысы, которые в течение двух недель получали витамин Е в дозе 1 мг/100 г массы тела и животные, которые после 14-ти дневного перорального введения антиоксиданта подвергались стрессированию по выше описанной модели.

В ходе комплексной оценки изучаемых показателей у животных, подвергавшихся действию стрессора и предварительно получавших антиоксидант, выявлено выраженное, как правило в большинстве случаев стресс-протекторное антиоксидантное действие витамина Е во всех изучаемых тканях и по основным показателям. Однако имеются факты разнонаправленных изменений показателей свободнорадикального окисления у этой группы опытных животных (стресс + витамин Е) у разных возрастных групп по показателям, как перекисной деструкции белковых так и липидных компонентов тканей.

Так, при биохимическом анализе гипоталамической ткани показано значительное снижение под действием а-токоферола стрессорного уровня СРО у неполовозрелых животных: содержание МДА на 9%, скорости аскорбатзависимого ПОЛ на 39%, ПОБ - на 64%. Такая же тенденция по показателям ПОЛ имела место у взрослых и старых крыс, причем более выраженный антиоксидантный эффект проявился у половозрелых крыс, в

ГИПОТАЛАМУС

П БОЛЬШИЕ II N ПОЛУШАРИЯ ПЕЧЕНЬ ЛЕГКИЕ МИОКАРД

а и □ ш и у □ и и

с Е С+Е С Е С+Е С Е С+Е С Е С+Е С Е _1 С+Е

Рис. 1. Изменение содержания малонового диальдегида в различных тканях неполовозрелых (А), половозрелых (Б) и старых (В) крыс при остром стрессе

и введении витамина Е (в % к контрольным значениям) С - стрессорное воздействие, Е - введение а-токоферола, С+Е -предварительное стрессу введение а-токоферола

гипоталамусе которых уровень МДА снизился на 26%, скорость аскорбатзависимого ПОЛ на 50% по сравнению с крысами подвергавшимися электорокожному раздражению и не получавших антиоксидант. Совсем иная закономерность обнаружена нами в отношении белковой пероксидации у животных этих возрастов. Так под действием витамина Е уровень ПОБ у половозрелых крыс повысился на 91,6 %, а у старых достоверных изменений этого показателя не выявлено. Обращает на себя внимание факт значительного повышения ПОБ в гипоталамусе у 4-х месячных крыс у группы животных (стресс + витамин Е) не только по-сравнению со стрессом, но и с контрольным значением этого параметра. У старых же крыс значительных изменений уровня ПОБ не обнаружено, хотя так же наблюдалась тенденция к его повышению у этой опытной группы по сравнению с группой только стрессированных крыс (рис.1, рис.2).

Дальнейшее исследование мозговой ткани обнаружило такую же реакцию больших полушарий у группы (стресс + витамин Е), причем единственная тенденция к повышению уровня ПОБ наблюдалась только у старых крыс, у которых в то же время имело место увеличение аскорбатзависимого ПОЛ (на 14,5%) (рис.1, рис.2).

В ходе анализа результатов исследования СРО в органах висцеральной системы наряду с антиоксидантным действием витамина Е также было обнаружено и его прооксидантное действие по ряду показателей и у разных возрастных групп животных.

Результаты указывают на снижение стрессорного уровня МДА, спонтанного и индуцированного ПОЛ в печени у крысят и половозрелых животных. Величина этих параметров по сравнению с группой крыс, подвергавшихся только стрессу понижалась в 1.5-2 раза. Однако совсем иная закономерность показана у старых крыс, у которых предварительное введение а-токоферола вызвало повышение уровня МДА в печени на 27% и тенденциозное повышение скорости спонтанного ПОЛ. При этом уровень белковой пероксидации у молодых животных этой группы (стресс + витамин Е) по сравнению с ЭКР достоверно повышался на 26,6%, а у половозрелых и старых наблюдалось лишь незначительное, но повышение ПОБ (рис.1, рис.2).

В легких и миокарде неполовозрелых крысят предварительное введение токоферола также оказало протекторное действие, причем более выраженное в сердечной ткани, где уровень МДА снизился на 16%, скорость спонтанного и аскорбатзависимого ПОЛ на 21,4% и 60% соответственно. У половозрелых животных как и у старых предварительное введение витамина Е по ряду показателей не сопровождалось изменениями их значений, в некоторых случаях (аскорбатзависимое ПОЛ у взрослых и старых) снижало стрессорный уровень, а в некоторых случаях (МДА в миокарде у старых и аскорбатзависимое ПОЛ в легких у половозрелых) антиоксидант на фоне стресса приводил к достоверному повышению интенсивности СРО по сравнению с животными подвергшимися ЭКР и не получавших витамин Е (рис.1).

"ИПОТАПАМУС

1 БОЛЬШИЕ

ПОЛУШДРИ? МИОКЛРД

ПЕЧЕНЬ ЛЕГКИЕ п 1

п ш I 1 п п

Л_____

с Е С+Е С Е С+Е С Е С+Е С Е С+Е С Е С+Е

Рис. 2. Влияние острого электрокожного раздражения и природного антиоксиданта на интенсивность перекисного окисления белков в различных тканях неполовозрелых (А), половозрелых (Б) и старых (В) крыс (в % к контрольным значениям) С - стрессорное воздействие, Е - введение а-токоферола, С+Е -предварительное стрессу введение а-токоферола

Наряду с этим в наших опытах значительных изменений уровня ПОБ в печени, легких и миокарде обнаружено не было, однако практически во всех случаях наблюдалась тенденция к его повышению у этой опытной группы животных (стресс + витамин Е) всех возрастных групп (рис.2).

В контексте полученных нами данных о влиянии а-токоферола в условиях острого стрессирования несомненный интерес представляют эффекты антиоксиданта в условиях фоновой активности для чего мы провели сравнительный анализ его влияния, сопоставив значение изучаемых параметров у интактных (контрольных) животных и крыс, получавших супрафизиологические дозы а-токоферола на протяжении 14 дней.

Результаты исследования показали снижение практически во всех тканях содержания малонового диальдегида после введения витамина Е только у неполовозрелых и взрослых животных, в отличие от старых, у которых токоферол во всех случаях оказал выраженный прооксидантный эффект. Это выражалось в повышении уровня МДА на 12% в гипоталамусе, на 9% в больших полушариях, на 4,5% в печени, на 8,4% в легких и на 32% в сердечной мышце. Причем повышение уровня липидной пероксидации после введения антиоксиданта подтвердилось и кинетическими характеристиками перекисного окисления липидов во всех органах именно у старых животных. У молодых животных стабильное снижение уровня МДА во всех органах за исключением гипоталамической области мозга сопровождалось разнонаправленными изменениями спонтанного и индуцированного ПОЛ. В частности, в больших полушариях, легких и миокарде эти показатели по сравнению контролем имели большее значение, а в печени и гипоталамусе видимых изменений не обнаружено (рис.1).

На основании этого можно прийти к заключению о возрастной специфике влияния витамина Е на ПОЛ, которая выражается в его прооксидантном эффекте на позднем этапе онтогенеза и свойственном ему антиоксидантном действии у молодых и половозрелых животных. Исключение составляет гипоталамус крысят и 4-х месячных животных, где токоферол повысил исходный (контрольный) уровень МДА.

Интересным представляется обнаруженный нами факт увеличения перекисной деструкции белков после введения витамина Е по сравнению с контрольными значениями изучаемых параметров. Так, у крысят уровень ПОБ повысился в гипоталамусе на 136,3%, в конечном мозге на 56,5%, в печени на 27,2%, легких на 18% и миокарде на 10%. Такая же закономерность наблюдалась у взрослых 4-х месячных и старых крыс (рис.2).

В целом, вышеописанные результаты исследования влияния природного антиоксиданта позволяют прийти к следующим выводам. Сочетанное действие острого стресса и витамина Е вызвало выраженные антиоксидантные эффекты последнего в большинстве органов в отношении перекисного окисления липидов. При этом токоферол проявил такое стресс-лимитирующее действие только у молодых животных (крысят) и 4-х месячных. У старых крыс витамин Е в ряде органов (миокард, печень,

конечный мозг) не только не оказал протекторное действие, но и усилил накопление в них продуктов свободнорадикального окисления липидов при сочетанном действии острого стрессора (рис.1).

Что касается перекисной деструкции белков у крыс, подвергшихся ЭКР и предварительно получавших витамин Е, то эффекты последнего имели возрастную и тканевую специфичность. Так, у крысят под действием витамина Е с последующим стрессированием интенсивность перекисного окисления белков понижалась по сравнению только с ЭКР в мозге, а повышалась в печени, легких и миокарде. У 4-х месячных крыс во всех тканях обнаружено увеличение ПОБ в группе (стресс + витамин Е), причем наибольший прооксидантный эффект наблюдался в гипоталамусе. И, наконец, у старых опытных животных сочетанное воздействие ЭКР и антиоксиданта также привело к увеличению накопления окисленных белков во всех тканях за исключением легочной, где наблюдалась тенденция к его снижению по сравнению с группой крыс, подвергнутых только стрессированию (рис.2).

ВЫВОДЫ

1. На трех этапах постнатального онтогенеза обнаружены возрастные различия интенсивности свободнорадикальных процессов, которые заключаются в повышении уровня белковой пероксидации у старых крыс (мозг, миокард) и разнонаправленных тканезависимых изменениях уровня перекисного окисления липидов. Наиболее высокая сила влияния возраста на изучаемые параметры выявлена в мозговой ткани, легких и миокарде интактных животных для ПОБ и мозга, печени, легких и миокарда для ПОЛ.

2. На модели острого эмоционально-болевого стресса показана достоверная стресс-индуцированная активация перекисной деструкции белков, которая наиболее выражена в печени, конечном мозге крысят, гипоталамусе крысят и старых животных. Стрессорные изменения уровня липидной пероксидации носят разнонаправленный характер и зависят от возраста и ткани животного.

3. Наибольшей стресс-устойчивостью к свободнорадикальному окислению липидов обладают старые животные, у которых показана меньшая выраженность стрессорного усиления ПОЛ во всех изучаемых тканях. В разных органах молодых и половозрелых 4-х месячных крыс в условиях стресса показатели пероксидного окисления липидов отличаются разной направленностью и выраженностью изменений.

4. В ходе исследования выявлено влияние возрастного фактора на стрессорную динамику свободнорадикальных процессов во всех органах, что подтверждается результатами дисперсионного анализа полученных данных. Особенно выражено влияние возраста животного на стрессорный уровень малонового диальдегида в мозговой ткани, печени и миокарде для ПОБ и конечном мозге и легких для ПОЛ.

5. Процессы белковой и липидной пероксидации не находятся в тесной зависимости друг от друга; как в условиях фоновой активности, так и при

стрессорном воздействии не обнаружено тесной однонаправленной корреляционной связи между перекисной деструкцией белковых и липидных компонентов тканей.

6. Предварительное стрессированию введение альфа-ткоферола вызывает его выраженные антиоксидантные стресс-протекторные эффекты в большинстве органов в отношении ПОЛ только у молодых и половозрелых крыс. У старых животных витамин Е в ряде органов (миокард, печень, конечный мозг) оказывает прооксидантное действие.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Чумакова A.C. Тканеспецифические особенности возрастной и стрессорной динамики свободнорадикальных процессов в эксперименте / Ю.В. Нестеров, A.C. Чумакова // Естественные науки. - 2007. - №4(13). -С. 73-76. - 0,25 пл., личный вклад 50%.

2. Чумакова A.C. Возрастная динамика и тканеспецифические особенности свободнорадикальных процессов внутренних органов и центральной нервной системы белых крыс / Ю.В. Нестеров, Д.Л.Теплый, A.C. Чумакова// Естественные науки. -2008. - №2(23). - С. 73-76. - 0,25 п.л., личный вклад 33,3%.

3. Чумакова A.C. Влияние острого эмоционально-болевого стресса, а-токоферола и их сочетания на перекисное окисление белков и липидов у крыс разного постнатального возраста / Ю.В. Нестеров, A.C. Чумакова// Астраханский медицинский журнал. - 2008 - Т.З, №3. - С. 51-58., 0,504 пл., личный вклад 50%.

4. Чумакова A.C. Тканеспецифические и возрастные особенности свободнорадикальных процессов в условиях фоновой активности и острого стресса в эксперименте / Ю.В. Нестеров, A.C. Чумакова // Современные научные технологии: Тезисы и материалы научной конференции молодых ученых АГУ 28-29 сентября 2006 г. - Астрахань, 2007. - С. 101-104. - 0,25 пл., личный вклад 50%.

5. Чумакова A.C. Влияние стресса и введения витамина Е на процессы перекисного окисления липидов в разных тканях / A.C. Чумакова, Д.А. Круглова, Н.В. Некрасова, H.A. Ломтева // Тезисы докладов итоговой научной конференции Астраханского государственного университета. -Астрахань, 2003. - С. 23., 0,063 пл., личный вклад 25%.

6. Чумакова A.C. Динамика процесса перекисного окисления липидов при действии эмоционально-болевого стресса на ранних этапах постнатального онтогенеза / Ю.В. Нестеров, A.C. Чумакова, Е.В. Мамонтова // Свободные радикалы, антиоксиданты и старение: Материалы Международной научной конференции 2-3 ноября 2006 г. -Астрахань, 2006. - С. 102-105., 0,25 пл., личный вклад 33,3%.

7. Чумакова A.C. Тканеспецифические особенности перекисного окисления белков и липидов у крыс разного возраста / Ю.В. Нестеров, A.C.

Чумакова // Эколого-биологические проблемы бассейна Каспийского моря: Материалы IX Международной научной конференции 10-Поктября 2006 г. - Астрахань, 2006. - С. 177-179., 0,188 п.л., личный вклад 50%.

8. Чумакова A.C. Онтогенетические особенности свободнорадикальной деструкции белков и липидов мозговой ткани при остром стрессе и введении а-токоферола / Ю.В. Нестеров, A.C. Чумакова// Биологические исследования. - 2008. - №1. - С. 64-66., 0,188 пл., личный вклад 50%.

Подписано к печати 25.05.09. Заказ № 1797. Тираж 100 экз.

_Уч.-изд. л. 1,5. Усл. печ. д. 1,3._

Оттиражировано в Издательском доме «Астраханский университет» 414056, г. Астрахань, ул. Татищева, 20 факс (8512) 25-17-18, тел. (8512) 54-01-87, 54-01-89: E-mail: asupress@vandex.ru

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Чумакова, Анна Сергеевна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Современные представления о роли и механизмах свободнорадикальных процессов в организме человека и животных.

1.2. Значение окислительной модификации белков в норме, при старении, повреждающих экзо- и эндогенных факторов и её взаимодействие с продуктами перекисного окисления липидов.

1.3. Роль антиоксидантной системы и влияние природных и синтетических антиоксидантов в регуляции перекисного окисления.

1.4. Влияние возрастной инволюции и различных повреждающих факторов на свободнорадикальные процессы.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.1. Общая характеристика экспериментов.

2.2. Определение количества эозинофильных гранулоцитов.

2.3. Количественное определение адреналине::.

2.4. Методика определения перекисного окисления белков.

2.5. Методика определения перекисного окисления липидов.

2.6. Математическая обработка результатов.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Возрастные и тканеспецифические особенности перекисного окисления липидов и белков при остром стрессе и введении α-токоферола на разных этапах постнатального онтогенеза"

Актуальность темы. В настоящее время по-прежнему актуальной для современной биологии и медицины остается проблема стресса и его влияния на различные функциональные системы организма. Стресс рассматривается как способ достижения резистентности организма к действию экстремальных факторов различного генеза (Тигранян Р.А., 1988; Судаков К.В., 1996; Ерохин И. А., 1993). Вместе с тем, стресс может стать фактором, оказывающим повреждающее действие на органы и системы, ведущим к развитию заболеваний (Судаков К.В., 1996; Тигранян Р.А., 1988; Теплый Д.Л., 2008).

Важным проявлением стресс-реакции и адапционной перестройки является совершенствование деятельности регуляторных механизмов, участвующих в поддержании оптимального уровня интенсивности обменных процессов на уровне целостного организма (Федоров Б.М., 1991). При этом, несомненно, должны существовать органоспецифические особенности в осуществлении мобилизации различных механизмов при стрессе и проблема реализации стресс-реакции на уровне отдельных органов и тканей остается актуальной. В частности, малоизученным остается вопрос об изменениях метаболических процессов при развитии стресс-реакции.

Как известно, одним из ведущих повреждающих факторов при стрессе, детерминирующих развитие вторичных изменений органов и тканей, является интенсификация свободнорадикального окисления, которая наряду с этим рассматривается как один из универсальных физиологических процессов - окисление биологических субстратов при действии АФК (Меерсон Ф.З., Пшенникова М.Г., 1988; Барабой В.А., 1991; Ланкин В.З., 2001; Дубинина Е.Е., 2003). Анализ современной научной литературы позволяет прийти к заключению о том, что значительное количество работ посвящено перекисному окислению липидов (ПОЛ), в том числе стресс-индуцированному, при этом окислительной деструкции белков клеток и тканей уделяется меньшее внимание.

Механизмы и последствия стресс-реакции в организме зависят не только от метаболических возможностей различных тканей, но и от возраста индивидуума. В то же время, возрастной аспект исследования свободнорадикальной деструкции белковых и липидных компонентов тканей, незначительно представленный в литературе, должен дополнить известные к настоящему времени закономерности стресс-реакции на разных этапах онтогенеза и позволит существенно углубить представления о возрастных особенностях механизмов адаптации к экстремальным, стресс-индуцирующим воздействиям.

Цель исследования состояла в изучении возрастных и тканеспецифических особенностей перекисного окисления белков и липидов у крыс разных возрастных групп при остром стрессе и введении природного антиоксиданта альфа-токоферола.

Задачи исследования:

Основные положения, выносимые на защиту:

Теоретическая и практическая значимость. Результаты исследования демонстрируют наличие возрастных и тканеспецифических различий свободнорадикальных процессов при остром стрессорном воздействии и расширяют представления о механизмах ранней реакции антиоксидантной системы на стресс-индуцирующие воздействия.

Онтогенетические различия в динамике накопления продуктов свободнорадикального окисления липидных и белковых компонентов тканей служат основанием для анализа результатов повреждающего действия эмоционально-болевого стресса в эксперименте и клинической практике. Выявленные эффекты природного антиоксиданта а-токоферола открывают дальнейшие перспективы для его более широкого практического использования в медицине и ветеринарии при профилактике и лечении стрессорных повреждений органов. Материалы диссертационного исследования могут быть включены в курсы лекций по физиологии, экологической физиологии для студентов биологических специальностей университетов.

Апробация работы. Результаты исследования доложены и обсуждены на Международной научной конференции «Свободные радикалы, антиоксиданты и старение» (Астрахань, 2006), VIII Международной научно-практической конференции «Эколого-биологические проблемы бассейна Каспийского моря (Медико-биологические исследования)» (Астрахань, 2007), на итоговых научных конференциях студентов, аспирантов и преподавателей Астраханского государственного университета (2005-2008).

По материалам диссертационного исследования опубликовано 8 работ.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 158 страницах машинописного текста и состоит из Введения, Обзора литературы, включающего четыре подглавы, главы Материал и методы исследования, двух глав, посвященных результатам исследования и их обсуждению, Выводов и Списка литературы. Текст иллюстрирован 8 таблицами и 25

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Чумакова, Анна Сергеевна

выводы

5. Процессы белковой и липидной пероксидации не находятся в тесной зависимости друг от друга; как в условиях фоновой активности, так и при стрессорном воздействии не обнаружено тесной однонаправленной корреляционной связи между перекисной деструкцией белковых и липидных компонентов тканей.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Чумакова, Анна Сергеевна, Астрахань

1. Абрамова, Ж.И. Человек и противоокислительные вещества / Ж.И. Абрамова, Г.И. Оксенгендлер. Л.: Наука, 1985. - 230 с.

2. Абрамченко, В.В. Антиоксиданты и антигипоксиданты в акушерстве /

3. B.В. Абрамченко. СПб., 2001. - 400 с.

4. Агаджанян, Н.А. Адаптация и резервы организма / Н.А. Агаджанян. -М.:ФиС,1983. 175с.

5. Ажипа, Я.И. Медико-биологические аспекты применения метода электронного парамагнитного резонанса / Я.И. Ажипа. М.:Наука, 1983. — 527 с.

6. Аль-Хадиди, М. Влияние ГБО, антиоксидантной терапии и их комбинации на свободнорадикальные процессы и клиническое течение стенокардии напряжения: автореф. дис. .канд. мед. Наук / М. Аль-Хадиди. -М., 1987.-46 с.

7. Андреев, А.Ю. Метаболизм активных форм кислорода в митохондриях: Биохимия./ А.Ю. Андреев, Ю.Е. Кушнарева, А.А. Старков 2005. - Т.70, N2.1. C.246-264.

8. Анохина, И.П. Нейрогуморальные факторы индивидуальной устойчивости к эмоциональному стрессу/ И.П.Анохина // Мотивация и эмоциональный стресс. Механизмы эмоционального стресса. М., 1987. -Вып. 4 (2). - С. 3-8.

9. Анисимов, В.Н. Эволюция концепций в геронтологии / В.Н. Анисимов, М.В. Соловьев. СПб.: Эскулап, 1999. - 130с.

10. Арчаков, А.И. Биохимия / А.И. Арчаков, И.А. Мохосоева. 1989. - Т. 54. -179с.

11. Арутюнян, А.В. Методы оценки свободнорадикального окисления и антиоксидантной системы организма. Методические рекомендации под ред. В.Х.Хавинсона / А.В. Арутюнян, Е.Е. Дубинина, Н.Н.Зыбина. СПб., 2000. -103 с.

12. Афанасьев, Ю.И. Витамин Е: значение и роль в организме / Ю.И. Афанасьев, Т.В. Бронхина // Успехи современной биологии. 1987. - Вып.З, Т. 104. - С. 56-60.

13. Анисимов,В.Н. Возрастные изменения активности свободнорадикальных процессов в тканях и сыворотке крови крыс / В.Н. Анисимов, А.В. Арутюнян, Т.И. Опарина // Физиол. журн. им. И.М. Сеченова. 1999. -Вып.85, №4. - С.502-507.

14. Арушанян, Э.Б. Нейрофизиологические и фармакологические доказательства саморегуляции в нигро-стриарной системе / Э.Б. Арушанян, Б.А. Толпышев // Бюлл. эксперим. биологии и медицины. 1981. - № 1. - С. 133-136.

15. Арутюнян, А.В. Методы оценки свободнорадикального окисления и антиоксидантной системы организма / А.В. Арутюнян, Е.Е. Дубинина, Н.П. Зыбина// Методические рекомендации. СПб: ФОЛИАНТ, 2000. - 104с.

16. Анищенко, Т.Г. Половые аспекты проблемы стресса и адаптации / Т.Г. Анищенко // Успехи соврем, биологии. 1991. - Т.З, №3. - С. 460-475.

17. Анисимов, В.Н. Эволюция концепций в геронтологии: достижения и перспективы/ В.Н. Анисимов // Успехи геронтологии. 1999. - Вып. 3. - С. 32-53.

18. Базаревич, Г.Я. Медиаторные системы и функция дыхания при кровопотере и шоке: автореф. дисс. . докт. мед. наук / Г.Я. Базаревич. -Казань, 1973.-51с.

19. Барабой, В.А. Перекисное окисление и стресс / В.А. Барабой, И.И. Брехман, В.Г. Голотин, Ю.Б. Кудряшов. СПб.: Наука, 1991. - 148 с.

20. Барабой, В.А. Растительные фенолы и здоровье человека / В.А. Барабой. -М.: Наука, 1984.-160 с.

21. Богач, П.Г. Структура и функции биологических мембран / П.Г. Богач, М.Д. Курский, Н.Е. Кучеренко, В.К. Рыбальченко. К.: Вища школа, 1981. -336 с.

22. Бобырев, В.Н. Специфичность систем антиоксидантной защиты органов и тканей основа дифференцированной фармакотерапии антиоксидантами / В.Н. Бобырев, В.Ф. Почернява, С.Г. Стародубцев и др. // Эксперим. и клин. Фармакология. - 1994. - № 57(1). - С.47-54.

23. Болдырев, А.А. Роль активных форм кислорода в жизнедеятельности нейрона / А.А. Болдырев //Успехи физиол. Наук. 2003. - Т.34, N3. - С.21-34.

24. Болдырев, А.А. Роль свободных радикалов в функциональной активности нейронов / А.А. Болдырев //«Успехи функциональной нейрохимии» под ред. Дамбиновой С.А. и Арутюняна А.В. Изд. СПб университета. 2003. - С.301-317.

25. Буреш, Я. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения / Я. Буреш, О. Бурешова, Дж. П. Хьюстон. М.: Высшая школа, 1991.-113 с.

26. Бурлакова, Е.Б. Биоантиоксиданты в лучевом поражении и злокачественном росте / Е.Б. Бурлакова, А.В. Алесенко, Е.М. Молочкина и др.. М.: Наука, 1975. - 211 с.

27. Бурлакова, Е.Б. Перекисное окисление липидов мембран и природные антиоксиданты / Е.Б. Бурлакова, Н.Г. Храпова // Успехи химии. 1986. - Т. 54, №2.-С. 1540-1558.

28. Васильев, В.Н. Здоровье и стресс / В.Н. Васильев. М.: Наука, 1991. -115 с.

29. Ведерникова, Н.Н. Опиаты и эндогенные морфоподобные пептиды: системный подход к оценке их роли в интеграции нервной и эндокринной регуляции в организме / Н.Н. Ведерникова, А.И. Майский // Успехи соврем, биологии. -1981. -Т.91, №3. С. 380-392.

30. Веремеенко, К.Н. Протеолитические ферменты и апоптоз / К.Н. Веремеенко, В.Е. Досенко, B.C. Нагибин, А.И. Кизим, А.А. Мойбенко //Укр. 6ioxiM. журнал. 2003. - Т.75, N6. - С. 10-24.

31. Виноградова, Е.П. Изменение уровня тревожности у самок белых крыс в течение астрального цикла и в зависимости от хэндлинга / Е.П. Виноградова, Е.В. Чаадаева // Журн. высшей нервной деят. 1994. - Т.44, №2. - С. 217-282.

32. Виноградов,А.Д. Генерация супероксид-радикала КАОН:убихинон оксидоредуктазой митохондрий сердца. Биохимия / А.Д. Виноградов, В.Г. Гривенникова. 2005. - Т.70, N2. - С.150-159.

33. Владимиров, Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах / Ю.А. Владимиров, А.И. Арчаков. М.: Наука, 1972. — 252 с.

34. Владимиров, Ю.А.Роль нарушения свойств липидного слоя мембран в развитии патологических процессов / Ю.А.Владимиров // Патол. физиол. и эксперим. терапия. 1989. - №4. - С. 7-18.

35. Волчегорский, И.А. Возрастная динамика липопероксидации в различных отделах центральной нервной системы / И.А. Волчегорский, С.Е. Шемяков, И.Б. Телешева, Н.В. Малиновская, В.В. Турыгин //Физиология человека. -2005. Т.31, N2. - С.108-115.

36. Голубев, А.Г. Биохимия / А.Г. Голубев. М., 1996. - Вып.61. - С.2018-2039.

37. Гордеева, А.В. Апоптоз одноклеточных организмов: механизмы и эволюция. Биохимия / А.В. Гордеева, Ю.А. Лабас, Р.А. Звягильская 2004. -Т.69, N10. - С.1301-1313.

38. Горизонтов, П.Д. Стресс и система крови / П.Д. Горизонтов. М.: Медицина, 1983. - 239с.

39. Гродзинский, Д.М. Надежность и старение биологических систем / Д.М. Гродзинский, В.П. Войтенко, Ю.А. Кутлахмедов, В.К. Кольтовер. Киев: Наукова Думка, 1987. - 152 с.

40. Гуляева, Н.В. Ауторегуляция свободнорадикальных процессов при стрессе механизм, обеспечивающий адаптивные возможности мозга / Н.В. Гуляева // Бюлл. эксп. биол. мед. - 1994. - Т. 117, №2. - С. 202.

41. Горбатенкова, Е.А. Красный свет гелий-неонового лазера реактивирует супероксиддисмутазу / Е.А. Горбатенкова, Ю.А. Владимиров, Н.В. Парамонов, О.А. Азизова // Бюлл. эксп. биол. мед. 1989. - № 57. - С. 302305.

42. Горизонтова, М.П. Микроциркуляция при стрессе / М.П. Горизонтова //Патол. физиология и эксперим. Терапия. 1986. - №3. - С. 79-84.

43. Глоба, А.Г. Синтез плазма-мембранного сигнального АТФ нейтрофилами, активированными формилпептидом, при клинической и экспериментальной инфекции; связь с продукцией супероксида / А.Г. Глоба,

44. B.C. Демидова, В.Г. Темяков // Биохимические проблемы хирургии 1991.1. C. 222-232.

45. Гуськова, Р.А. Биофизика / Р.А. Гуськова, М.М.Виленчик, В.К. Кольтовер. 1998. - Т.25. - С.102-105.

46. Деев, А.И. Биофизика / А.И. Деев, Ю.Г. Осис, В.Е. Формазюк и др.. -1987.-Т. 32.-С. 629-636.

47. Дильман, В.М. Большие биологичекие часы. Введение в интегральную медицину / В.М. Дильман. М.: Знание, 1987. - 255 с.

48. Дупленко, Ю.К. Старение: очерки развития проблемы / Ю.К. Дупленко. -Л.: Наука, 1985.-122 с.

49. Дубинина, Е.Е. Роль активных форм кислорода в качестве сигнальных молекул в метаболизме тканей при состояниях окислительного стресса / Е.Е. Дубинина, С.О. Бурмистров, Д.А. Ходов, И.Г. Поротов //Вопр.мед.химии. -1995. Т.41, №5. - С.24-26.

50. Дубинина, Е.Е. Характеристика внеклеточной супероксиддисмутазы / Е.Е. Дубинина // Вопр. мед. химии. 1995. - Т. 41, Вып. 6. - С. 8-12.

51. Дубинина, Е.Е. Роль активных форм кислорода в качестве сигнальных молекул в метаболизме тканей при состояниях окислительного стресса / Е.Е. Дубинина//Вопр. мед. химии. 2001. - Т.47, N6. - С.561-581.

52. Дубинина, Е.Е. Роль окислительного стресса при патологических состояниях нервной системы / Е.Е. Дубинина //Сборник статей РАН «Успехи функциональной нейрохимии». Под ред. Дамбиновой С.А. и Арутюняна А.В. Изд. СПб университета. 2003. - С.285-301.

53. Дубинина, Е.Е. Окислительный стресс одна из возможных причин развития сосудистой деменции у пожилых людей / Е.Е. Дубинина, С.В. Ковругина, П.В. Коновалов, И.Б. Солитернова, М.Г. Морозова //Успехи геронтологии. - 2000. - N4. - С.97-101.

54. Ерин, А.Н. Кислородные радикалы в химии, биологии и медицине / А.Н. Ерин, В.И. Скрыпин, JI.JI. Прилипко, В.Е. Каган. Рига: Медицина, 1988. -с.109-129.

55. Ерохин, И.А. Элементы теории экстремального состояния организма / И.А. Ерохин // Физиол. журн. им. И.М. Сеченова. 1993. - Т.79, №9. - С. 98105.

56. Жуков, Д.А. Влияние хэндлинга на тревожность и кортикостерона плазмы у крыс с противоположными стратегиями поведения / Д.А. Жуков, Е.П. Виноградова // Физиолог, журн. СССР им. И.М. Сеченова. 1995. - Т. 81, №5.-С. 93-97.

57. Зенков, Н.К. Окислительный стресс / Н.К. Зенков, Е.Б. Меньшикова // Успехи современной биологии. 1993. - Т.113, Вып.З. - С.286-296.

58. Зенков, Н.К. Фенольные биоантиоксиданты / Н.К. Зенков, Н.В. Кондалинцева, В.З. Ланкин, Е.Б. Меньшикова, А.Е. Просенко. Новосибирск: СОРАМН, 2003. 328 с.

59. Зенков, Н.К. Окислительный стресс. Биохимический и патофизиологический аспекты / Н.К. Зенков, В.З. Панкин, Е.Б. Меныцикова М.: МАИК. Наука/Интерпериодика, 2001. - 343 с.

60. Зозуля, Ю.А. Свободнорадикальное окисление и антиоксидантная защита при патологии головного мозга / Ю.А. Зозуля, В.А. Барабой, Д.А. Сутковой -М.: Знание, 2000. 344 с.

61. Каган, В.Е. Молекулярные механизмы повреждения кислородом системы транспорта кальция в саркоплазматическом ретикулуме мышц / В.Е. Каган, Ю.В. Архипенко, Ю.П. Козлов. Иркутск: Изд-во Иркут. гос. ун-та, 1983.- 134 с.

62. Кассиль, Г.Н. Эндокринно-гуморальные аспекты физиологии спорта / Г.Н. Кассиль //Физиология человека. 1987. - № 2. - С.307-316.

63. Карни, Д. Свободнорадикальное окисление и старение / Карни Д. (D. Kami). СПб.: Наука, 1991.-327 с.

64. Кириллова, М.В. Окислительное повреждение белков при экспериментальном гломерулонефрите / М.В.Кириллова, М.М. Дебель// Нефрология. -2002. Т.6, № 2. - С. 73-76.

65. Коган, А.Х. Система антиоксидантной защиты организма и старение / А.Х. Коган, А.Н. Кудрин, JI.B. Кактурский и др. //Пат. физиол. 1992. -№.2. - С. 5-15.

66. Коган, А.Х. Моделирована роль С02 в действии актианых форм кислорода / А.Х. Коган //Вестник РАМН. 1999. - № 2. - С.7-10.

67. Коган, А.Х. Антиоксидантная защита сердца при экспериментальном инфаркте миокарда / А.Х. Коган, А.Н. Кудрин, Н.И. Лосев. М., 1987. - 105 с.

68. Козлов, Ю.П. Свободнорадикальное окисление липидов в биомембранах в норме и патологии / Ю.П. Козлов // Биоантиокислители. М., 1975. - Т.1. -С.5-14.

69. Кольтовер, В.К. Свободнорадикальная теория старения: исторический очерк / В.К. Кольтовер // Успехи геронтологии. 2000. - Вып. 4. - С. 33-40.

70. Кольтовер, В.К. Свободнорадикальная теория старения: современное состояние и перспективы / В.К. Кольтовер // Успехи геронтологии. 1998. -Вып. 2. - С. 37-42.

71. Кольтовер, В.К. Надежность митохондриальных электронно-транспортных мембран и роль супероксидных радикалов в старении / В.К. Кольтовер //Хим. физика. 1996. - Т. 15. - С. 101-106.

72. Кондратенко, Е.И. Функциональные взаимосвязи эндокринных и свободнорадикальных процессов у крыс разного пола при изменении освещенности / Е.И. Кондратенко. — Астрахань: АТУ, 1996. 123 с.

73. Коновалова, Г.Г. Биоантиоксиданты и антиоксидантные ферменты в регуляции перекисного окисления липидов / Г.Г. Коновалова, В.З. Ланкин, Н.Н. Бескровнова //Арх.патол. 1989. - Т.51, №6. - С. 19-24.

74. Коркушко, О.В. Гериатрия в терапевтической практике / О.В. Коркушко, Д.Ф. Чеботарев, Е.Г. Калиновская. Киев: Здоров'я, 1993. - 830 с.

75. Клебанов, Г.И. Оценка антиокислительной активности с применением желточных липопротеидов / Г.И. Клебанов, Э.М. Туркменова, М.В. Крейнина и др. //Биол.мембраны. 1987. - Т.4. - С. 1084-1092.

76. Кучеренко, Н.Е. Липиды / Н.Е. Кучеренко, А.Н. Васильев Киев: Вища школа, 1985. -247 с.

77. Кульберг, А.Я. Рецепторы клеточных мембран / А.Я. Кульберг, И.А. Елистратова, И.А. Тарханова и др. //Иммунология. 1986. №2. - С.14-18.

78. Кульберг, А.Я. Регуляция иммунного ответа / А.Я. Кульберг, И.М. Петяев, Н.Г. Замотаева //Иммунология. 1988. - №3. - С.37-40.

79. Лакин, Г.Ф. Биометрия / Лакин Г.Ф. М: Высшая школа, 1990. - 293 с.

80. Ланкин, В.З. Биоантиоксиданты и антиоксидантные ферменты в регуляции перекисного окисления липидов /В.З. Ланкин, А.Х. Коган, А.Л. Ковалевская и др. // Бюл. эксперим. биол. мед. 1982. - Т.93, №5. - С.58-60.

81. Панкин, В.З. Свободнорадикальные процессы в норме и при патологических состояниях / В.З. Ланкин, А.К. Тихазе, Ю.Н. Беленков. М.^ 2001.-71 с.

82. Ланкин В.З. Антиоксиданты в комплексной терапии атеросклероза: pro et contra / В.З. Ланкин, А.К. Тихазе, Ю.Н. Беленков. М.:Медпрактика, 2003. -41 с.

83. Ленинджер, А. Основы биохимии / А. Ленинджер. М., Мир, 1985. - Т.2. - 368 с.

84. Лисицына, Т.А. Свободные радикалы и восстановление повреждений ДНК в репарационно-дефектных клетках человека / Т.А. Лисицына, И.М. Васильева, А.Д. Дурнев, Г.Д. Засухина // ДАН. 1999. - Т.365, № 2. - С.263-266.

85. Лукьянова, Л.Д. Кислородзависимые процессы в клетке и ее функция / Л.Д. Лукьянова, Б.С. Балмуханов, А.Т. Уголев. М., 1982. - 301 с.

86. Лю, Б.Н. Кислородно-перекисная концепция апоптоза и возможные варианты его механизма / Б.Н. Лю //Успехи совр. биологии. 2001. - Т. 121, N5. - С.488-501.

87. Маеда, Х.Оксид азота и кислородные радикалы при инфекции, воспалении и раке / X. Маеда, Т. Акаике // Биохимия, 1998. — Т.63, вып.7. С. 45-48.

88. Малышев, И.Ю. Стресс-лимитирующая система оксида азота / И.Ю. Малышев, Е.Б. Манухина //Биохимия. 1998. - Т. 63, Вып. 7. - С.992-1006.

89. Маслова, М.Н. Молекулярные механизмы стресса / М.Н. Маслова // Росс, физиол. журнал. 2005. - Т. 91, №11. - С. 1283 - 1292.

90. Маянский, А.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге / А.Н. Маянский, Д.Н. Маянский. Новосибирск: Наука, 1983. - 264 с.

91. Меерсон, Ф.З. Двухфазный характер феномена адаптационной стабилизации структур в процессе длительной адаптации организма к стрессу / Ф.З. Меерсон, Ю.И. Малышев, А.В. Замотринский // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1993. - №1. — С.352-355.

92. Меерсон, Ф. 3. Адаптация к стрессорным ситуациям и физическим нагрузкам / Ф. 3. Меерсон, М. Г. Пшенникова. М.: Медицина, 1988. - 256 с.

93. Меерсон, Ф.З. Адаптация, стресс и профилактика / Ф.З. Меерсон. М.: Наука, 1981.- 125 с.

94. Меерсон, Ф.З. Патогенез и предупреждение стрессорных и ишемических повреждений сердца / Меерсон Ф.З. М.: Медицина, 1984. - 215 с.

95. Меерсон, Ф.З. О «цене» адаптации / Ф.З. Меерсон // Патол. физиол. и эксперим. терапия. 1986, №3. - С. 9-20.

96. Мелконян, М.М. Интенсивность липидной пероксидации и уровень витамина Е в тканях после иммобилизационного стресса / М.М. Мелконян, Э.А. Араратян, Э.М. Микаелян // Журн. эксперим. и клинич. медицины. -1978.-Т. 18, №4.-С. 25-30.

97. Меньшикова, Е.Б. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты / Е.Б. Меньшикова, В.З. Ланкин, Н.К. Зенков, И.А. Бондарь, Н.Ф. Круговых, В.А. Труфанкин. М.: Фирма «Слово», 2006. - 553с.

98. Меньшикова, Е.Б. Пероксидаза как компонент антиоксидантной системы живых организмов / Е.Б. Меньшикова, Н.К. Зенков // Тер.архив. 1991. -№11. - С.85.

99. Метелица, Д.И. Активация кислорода цитохромом Р-450 и другими гемопротеидами / Д.И. Метелица //Успехи химии. 1982. - Т. 51, № 11. - С. 1818-1848.

100. Мхитарян, В.Г. Динамика содержания а-токоферола в тканях крыс под влиянием различных органических перекисей / В.Г. Мхитарян, М.И.

101. Агаджанов, Е.А. Мелик — Агаян, Т.А. Вирабян // Журнал эксперимент, и клин. мед. 1974. - Т. 14, №1. - С. 9-17.

102. Наглер, Л.Г. Супероксиддисмутаза при ишемии печени. Биохимия/ Л.Г. Наглер, О.В.Макарова, Л.А.Замчук, Л.С. Вартаняи, Ю.А. Рашба, В.И. Кашо, О.А. Евтушенко. 1991. - Т.56, №4. - С.674-680.

103. Нестеров, Ю.В Липидный обмен и стресс-реактивность легких крыс разного возраста / Ю.В. Нестеров, Д.Л. Теплый // Успехи геронтологии. — 2003.-Вып. 11.-С. 49-53.

104. Обухова, Л.К. Роль свободнорадикальных реакций окисления в молекулярных механизмах старения живых организмов / Л.К. Обухова, Н.М. Эммануэль // Успехи химии. 1983. - Т. 32. - С. 353-372.

105. Оконенко, Л.Б. Перекисное окисление липидов при сальмонеллезе / Л.Б. Оконенко // Журнал микробиологии и эпидемиологии. 1994. - №6. - С. 5558.

106. Юб.Петяев, И.М. Клеточные мембраны / И.М. Петяев, А.Я. Кульберг // Иммунология. 1988. - №5. - С.12-14.

107. Петрович, Ю.А. Свободнорадикальное окисление и его роль в патогенезе воспаления, ишемии и стресса / Ю.А.Петрович, Д.В. Гуткин // Патолог, физиология и экспериментальная терапия. 1986. - № 5. - С. 85-92.

108. Плохинский, Н.А. Алгоритмы биометрии / Н.А. Плохинский. М.: МГУ, 1980.-114 с.

109. Рашба, Ю.Э. Влияние ионола на метаболизм супероксидных радикалов в печени мышей / Ю.Э. Рашба, Л.С. Вартанян, Л.А. Серегина, П.Г. Комаров, М.В. Биленко // Бюлл. экспер. биол. мед. 1986. - № 111. - С. 559-561.

110. Ш.Рочас, С.В. Закономерности реагирования гипофизарно-адренокортикальной системы на повторные стрессоры / С.В. Рочас, Т.Т.136

111. Подвигина, Т.С. Богданова, Т.Р. Бачаева, А.А. Филаретов // Успехи физиол. наук. 1994. - Т.25, №4. - С. 42.

112. Скулачев, В.Ц. Н202-сенсоры легких и кровеносных сосудов и их роль в антиоксидантной защите организма. Биохимия / В.Ц. Скулачев. 2001. - Т.66, N10. - С.1425-1429.

113. Скулачев, В.П. Старение организма особая биологическая функция, а не результат поломки сложной живой системы: биохимическое обоснование концепции Вейтмана / В.П. Скулачев // Биохимия. - 1997. - Т. 62., вып. 2. - С. 1369-1399.

114. Стефанов, А.В. Клинико-экспериментальное обоснование применения супероксиддисмутазы в медицине / А.В. Стефанов, JI.B. Деримедведь, И.В.Чурилова, С.М.Дроговоз, Т.А.Кучеико, Е.Г. Щукина //НФаУ. Золотые страницы. 2004. - 288 с.

115. Строев, Е.А. Практикум по биологической химии / Е.А. Строев, В.Г. Макарова. М.: Высшая школа, 1986. - С. 230.

116. Суслина, З.А. Антиоксидантная терапия при ишемическом инсульте / З.А.Суслина, Т.Н. Федорова, М.Ю. Максимова, Т.В. Рясина, С.Л. Стволинский, Е.В. Храпова, А.А. Болдырев //Журнал неврологии и психиатрии. 2000. - N10. - С.34-38.

117. Теплый, Д.Л. Влияние витамина Е на нейросекреторные клетки гипоталамуса белых крыс / Д.Л. Теплый // Цитология. 1990. - Т 48, №12. - С. 1161-1167.

118. Теплый, Д.Л. Нейрофизиологические эффекты витамина Е Текст.: монография / Д.Л. Теплый. Астрахань: ООО «ЛЕОН», 2008. - 310 с.

119. Тигранян, Р.А. Стресс и его значение для организма / Р.А. Тигранян. -М.: Наука, 1988. -86 с.

120. Тодоров, И.Н. Стресс и старение и их биохимическая коррекция / И.Н. Тодоров, Г.И. Тодоров. М.: Наука, 2003. - 479с.

121. Турпаев, К.Т. Активные формы кислорода и регуляция экспрессии генов. Биохимия / К.Т. Турпаев. 2002. - Т.67, N3. - С.339-352.

122. Уайт, А. Основы биохимии: в 3 томах / А. Уайт, Ф. Хендлер, Э. Смит, Р. Хилл, И. Леман. М., Мир, 1981. - Т.2. - 617 с.

123. Федоров, Б.М. Стресс и система кровообращения / Б.М. Федоров. М.: Медицина, 1991. - 319 с.

124. Филаретов, А.А. Закономерности функционирования гипофизарно-адреналовой системы при повторных стрессорных раздражителях / А.А. Филаретов, Т.Т. Подвигина, Т.С. Богданова // Физиол. журн. им. И.М. Сеченова. 1990. -Т.76, №7. - С. 913-918.

125. Филаретов, А.А. Принципы и механизмы регуляции гипофизарно-адренокортикальной системы / А.А.Филаретов. Л.: Наука, 1987. - 102 с.

126. Филиппович, Ю.Б. Практикум по общей биохимии / Ю.Б. Филиппович, Т.А. Егорова, Г.А. Севастьянова. М.: Просвещение, 1975. — 92 с.

127. Фролькис, В.В. Старение и увеличение продолжительности жизни / В.В. Фролькис. Л.: Наука, 1988. - 237 с.

128. Хавинсон, В.Х. Свободнорадикальное окисление и старение / В.Х. Хавинсон, В.А. Баринов, А.В. Аратюнян, В.В. Малинин. СПб.: Наука, 2003. - 327 с.

129. Храпова, Н.Г. Перекисное окисление липидов и системы, регулирующие его активность / Н.Г. Храпова. М.: Наука, 1983. - С. 147-155.

130. Хухо, Фернанд. Нейрохимия / Хухо Фернанд. М.: 1990 г. - 138 с.

131. Цавтян, Т.К. Апоптоз и его модуляция вирусами / Т.К. Цавтян, Ж.Г. Искандарян, А.А. Галоян //Нейрохимия. 2004. - Т.21, N3. - С. 165-182.

132. Ченеев, С.Б. Активность аминоксидазы и содержание серотонина в крови при раке желудочно-кишечного тракта /С.Б. Ченеев, А.Я. Кульберг // Иммунология. 1995. - №2. - С.9-12.

133. Ченеев, С.Б. Типы физиологических и патофизиологических реакций организма при действии стрессорных факторов / С.Б. Ченеев // Вестник РАМН, 1999. №2. - С.10-15.

134. Шанин, В.Н. Антиоксидантная терапия в клинической практике / В.Н. Шанин, В.Ю. Шанин, Е.В. Зиновьев. СПб.: ЭЛБИ, 2003. - 121 с.

135. Abu-Zidan, P.M. Severity of acute pancreatitis: a multivariate analysis of oxidative stress markers and modified / P.M. Abu-Zidan, M.J.Bonham, J.A.Windsor //Glasgow criteria. Br. J. Surg. 2000. - Vol.87, №8. - P. 1019-1023.

136. Alam, Z.I. A generalised increase in protein carbonyls in the brain in Parkinson's but not incidental Lewy body disease / Z.I. Alam, S.E.Daniel, A.J.Lees, D.C. Marsden, PJenner, B.Halliwell//Neurochem. 1997. - Vol.69, №3. - P.1326-1329.

137. Anderson, R. Ascorbic acid and immune Functions: Mechanism of immunostimulation / R. Anderson. London, 1981. - P. 249.

138. Anisimov, V.N. Progesterone suppresses tyrosine hydroxylase messenger ribonucleic acid levels in the arcuate nucleus on proestrus / V.N. Anisimov, S.V. Mylnikov, Kh. Khavinson //Mech.Ageing.Devel. 1998. - Vol.103. - P.123-132.

139. Andrus, P.K. Protein oxidative damage in a transgenic mouse model of familial amyotrophic lateral sclerosis / P.K. Andrus, T.J.Fleck, M.E.Gurney, E.D.Hall//Neurochem. 1998. - Vol.71,№5. - P.2041-2048.

140. Arrigo, A.-P. Identity of the 19S 'prosome' particle with the large multifunctional protease complex of mammalian cells (the proteasome)/ A.-P. Arrigo, K. Tanaka, A.L.Goldberg, W.J. Welch // Nature. 1988. - Vol.331, №6152.- P. 192-194.

141. Armstrong, W.A. Amino acid radicals produced chemically in aqueous solutions. Electron spin resonance spectra and relation to radiolysis products / W.A. Armstrong, W.G. Humphreys // Can. J. Chem. 1967. - Vol.45, №21. -P.2589-2597.

142. Ayene, I.S. Inhibition of lung tissue oxidation during ischemia/ reperfiision by 2-mercaptopropionylglycine / I.S. Ayene, A.B.Al-Mehdi, A.B. Fisher//Arch. Biochem. Biophys. 1993. - Vol.303, №2. - P.307-312.

143. Azbel, M.Ya. The cellular origin of pulmonary surfactant / M.Ya. Azbel // Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 1994. - Vol. 91. - P.12453-12457.

144. Babior, B.M. Acute increase in responsiveness of luteinizing hormone (LH)-releasing hormone nerve terminals to neuropeptide-Y stimulation before the preovulatory LH surge / B.M. Babior //N.Eng.J.Med. 1978. - Vol.298. - P.659-668.

145. Babior, B.M. Postnatal growth of the mammalian lung influence of exercise and theroid activity / B.M. Babior // N.Eng.J.Med. 1978. - Vol.298. - P.721-725.

146. Badway, J.A. Pulsatile variations in hormone levels / J.A. Badway, M.L. Karnovsky //Annu.Rev. Biochem. 1980. - Vol.49. - P.695-716.

147. Bautista, J. Brain mitochondrial complex 1 inactivation by oxydative modification/ J.Bautista, R.Corpus, R.Ramos, O.Cremades, J.F.Gutierrez, S. Alegre//Biochem. Biophys. Res. Commun. 2000. - Vol.275, №3. - P.890-894.

148. Baynes, J.W. Role of oxidative stress in development of complications in diabetes / J.W. Baynes, // Diabetes. 1991. - Vol.40, №4. - P.405-412.

149. Baynes, J.W. Role of metal-catalyzed autoxidation in Maillard reaction damage to proteins in vivo/ J.W. Baynes // Redox Report. 1994. - Vol.1, №1. -P.31-34.

150. Baynes, J. W. Thorpe S.R. Role of oxidative stress in diabetic complications: a new perspective on an old paradigm / J. W. Baynes //Diabetes. 1999. -Vol.48,№l. - P. 1-9.

151. Beisel, W.R. Single nutrients and immunity / W.R. Beisel // Amer. J. Clin. Nutr. 1982. № 35. - P.417.

152. Bendich, A. The atioxidant role of vitamin C. Adv. in Free Radical Biology & Medicine / A. Bendich, I.J. Machlin, O. Scandurra, G.W. Rurton. 1986. - № 2. -P. 419.

153. Bendich, A. Modulation of the immune system function of guinea pigs by dietary vitamin E and С following exposure to oxygen / A. Bendich, P. D'Apolito, E. Gabriel, I.J. Machlin // Fed. Proc. 1983. - Vol. 42. - P. 923.

154. Bennett, R.M. Evidence for the activation of the signal-responsive phospholipase A2 by exogenous hydrogen peroxide / R.M. Bennett, J.L. Skosey //Arthritis and Rheum. -1977. Vol.20. - P.84-90.

155. Bennett, R.M. Mechanism of stress on reproduction: evidence for complex intra hypothalamic circuin / R.M. Bennett, A.C. Eddie-Quartey, P.L. Holt //Arthritis and Rheum. 1973. - Vol.16. - P. 186-190.

156. Betteridge, D. What is oxidative stress? Metabolism / D. Betteridge // 2000. - Vol.49, №2. - P.3-8.

157. Bergendi, L. Chemistry, physiology and pathology of free radicals / L.Bergendi, L.Benes, Z.Durackova, M.Ferencik //Life Sci. 1999. - Vol.65, №18/19.-P.1865-1874.

158. Berlett, B.S. Protein oxidation in aging, disease, and oxidative stress /

159. B.S.Berlett, E.R. Stadtman // Biol. Chem. 1997. - Vol.272, №33. - P.20313-20316.

160. Berliner, J.A. The role of oxidized lipoproteins in atherogertesis / J.A. Berliner, J.W. Heinecke // Free Radic. Biol. Med. 1996. - Vol.20, №5. - P.707-727.

161. Bolzan, A.D. Comparative lipid chemistry of lungs / A.D. Bolzan, O.A. Brown, R.G. Goya, M.S. Bianchi //Exp.Gerontol. 1995. - Vol.30. - P.169-175.

162. Burton, G.W. Beta-carotene: an unusual type of antioxidant / G.W. Burton, K.U. Ingold // Science. 1984. - Vol.224. - P. 569-73.

163. Bongarzone, E.R. Oxidative damage to proteins and Hpids of CNS myelin produced by in vitro generated reactive oxygen species / E.R. Bongarzone, J.M.Pasquini, E.F. Soto //Neurosci. 1995. - Vol.41, №2. - P.213-221.

164. Buxton, G.V. Critical review of rate constants for reactions of hydrated electrons, hydrogen atoms and hydroxyl radicals in aqueous solution / G.V.Buxton,

165. C.L.Greenstock, W.P.Helman, A.B. Ross //Phys. Chem. Ref. Data. 1988. -Vol.17, №2.-P.513-886.

166. Butterfield, D.A. Free radical oxidation of brain proteins in accelerated senescence and its modulation by N-tert-butyl-alpha-phenylnitrone/

167. D.A.Butterfield, B.J.Howard, S.Yatin, K.L.Allen, J.M. Carney // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. - V.94, №2. - P.674-678.

168. Cameron, D.J. Stress and behaviorally induced reproductive dysfunction in primates / D.J. Cameron // Jap.J.Med. 1986. - Vol.56, № 4. - P.135-140.

169. Carney, J.M. Role of protein oxidation in aging and in age-associated neurodegenerative diseases / J.M.Carney, A.M. Carney // Life Sci. 1994. -Vol.55, №25/26. - P.2097-2103.

170. Cervera, J. Modulation of the hydrophobicity of glutamine synthetase by mixed-function oxidation / J. Cervera, R.L. Levine // FASEB. 1988. - Vol.2, №10. - P.2591-2595.

171. Chapman, M.L. Increased carbonyl content of proteins in synovial fluid from patients with rheumatoid arthritis / M.L. Chapman, B.R.Rubin, R.W. Gracy //Rheumatol. 1989. - Vol.16, №1. - P. 15-18.

172. Chavko, M. Regional lipid peroxidation and protein oxidation in rat brain after hyperbaric oxygen exposure/ M.Chavko, A.L. Harabin // Free Radic. Biol. Med. 1996. - Vol.20, №7. - P.973-978.

173. Cheng, M.L. Increased 3-nitro- and 3 chloro-tyrosine in plasma proteins of patients with coronary artery disease/ M.L. ChengChen, Y.L. Kor, Y.S.Lee, D.T.Y. Chiu // Free Radic. Biol. Med. 2002. - Vol.33,№ 2. - P. S329.

174. Chio, K.S. Inactivation of rebonuclease and other enzymes by peroxidizing lipids and by malonaldehyde / K.S. Chio, A.L. Tappel // Biochemistry. 1969. -Vol.8,№7. - P.2827-2832.

175. Chow, C.K. Vitamin E and oxidative stress. Free Radic / C.K. Chow // Biol. Med. 1991. - Vol. 11, № 2. - P. 215-232.

176. Cohen, А.В. The effects in vivo and vitro of oxidative damage to purified alpha-1- antitrypsin and to the enzyme inhibiting activity of plasma / A.B.Cohen // Am. Rev.Respir.Dis. - 1979. - Vol. 119, № 6. - P. 953-960.

177. Cutler, R. Oxidative stress: its potential relevance to human disease and longevity determinants / R. Cutler //Annu.N.Y.Acad.Sci. 1991. - Vol.621. - P.l-28.

178. Davies, K.J.A. Protein damage and degradation by oxygen radicals. I. General aspects. / K.J.A. Davies //Biol. Chem. 1987. - Vol.262,№20. - P.9895-9901.

179. Davies, K.J.A. Protein modification by oxidants and the role of proteolytic enzymes / K.J.A. Davies //Biochem. Soc. Trans. 1993. - Vol.21,№2. - P.346-353.

180. Davies, K.J.A. Intracellular proteolytic systems may function as secondary antioxidant defense system: a hypothesis / K.J.A.Davies // Free Radic. Biol. Med. -1986. Vol.2,№3. - P.155-173.

181. Davies, M.J Stable markers of oxidant damage to proteins and their application in the study of human disease / M.J. Davies, MJ.Davies, S.Fu, H.Wang, R.T. Dean // Free Radic. Biol. Med. 1999. - Vol.27,№11/12. - P.I 1511163.

182. Davies, K.J.A. Proteins damaged by oxygen radicals are rapidly degraded in extracts of red blood cells / K.J.A. Davies, A.L. Goldberg //Biol. Chem. 1987. -Vol.262,№17. - P.8227-8234.

183. Davies, K.J.A. Protein damage and degradation by oxygen radicals. IV. Degradation of denatured protein / K.J.A. Davies, S.W.Lin // Biol. Chem. 1987. - Vol.262,№20. - P.9914-9920.

184. Dean, R.T. Endogenous free radical generation may influence proteolysis in mitochondria / R.T. Dean, J.K. Pollak // Biochem. Biophys. Res. Commun. -1985. Vol.126,№3. - P.1082-1089.

185. Davies, K.J.A. Oxidatively denatured proteins are degraded by an ATP-independent proteolytic pathway in Escherichia coli / K.J.A. Davies, S.W. Lin // Free Radic. Biol. Med. 1988. - Vol.5,№4. - P.225-236.

186. Davies, K.J. Free radicals and tissue damage produced by exercise / K.J. Davies, A.T. Quintanilha, G.A.Brooks, L.Packer // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1982. - Vol.107,№4. - P.I 198-1205.

187. Davis, C. Inhibition of human surfactant protein a function by oxidation intermediates of nitrite / C.Davis, S.Zhu, J.B.Sampson, J.P.Crow, S.Matalon // Free Radic. Biol. Med. 2002. - Vol.33,№12. - P.1703-1713.

188. Dean, R.T. Changes in plasma lipoprotein during the oestrous cycle of the bitch / R.T. Dean, Sh. Fu, R. Stocker, M.J. Davies // Ibid. 1997. - Vol. 324, №1. -P.1-18.

189. Dean, R.T. Hypothesis a damaging role in aging for reactive protein oxidative products / R.T. Dean, J. Gebicki, S. Gieseg // Mutat. Res. 1992. - Vol. 275. - P. 387-393.

190. Dehaan, J.B. Tocopherol and the permeability to glucose and chromate of unsaturated liposomes / J.B. Dehaan, F. Cristiano, R.C. Ianello, I. Kola //Biochem.and Mol.Biol.Inter. 1995. - Vol.35. - P. 1281-1297.

191. Dempsy, S. Антиоксидантная терапия в клинической практике / S. Dempsy. СПб.: ЭЛБИ, 1987. - 121 с.

192. Dogru-Abbasoglu, S. Studies on the fate of pulmonary surfactant in the lung / S. Dogru-Abbasoglu, S. Tanger-Toptani, B. Ugernal etc. //Mech.Ageing.Devel. -1997.-Vol.98.-P. 177-180.

193. Dolle, M.E. The activity of catechol-O-methyltransferase and monoamine oxidase in the uterine artery of pigs during the oestrous cycle / M.E. Dolle, H. Giese, C.L. Hopkins etc. //Nature Genetics. 1997. - Vol.17. - P.431-434.

194. Dunlop, R.A. Recent developments in the intracellular degradation of oxidized proteins / R.A. Dunlop, K.J.Rodgers, R.T. Dean // Free Radic. Biol. Med.- 2002. Vol.33,№7. - P.894-906.

195. Esterbauer, H. The role of lipid peroxidation and antioxidants in oxidative modification of LDL / H. Esterbauer, J. Gebicki, H. Puhl, G. Jurgens // Free Radic. Biol. Med. -1992.- № 13. P.341-390.

196. Esterbauer, H. Chemistry and biochemistry of 4-hydroxynonenal, malondialdehyde, and related aldehydes / H. Esterbauer, RJ.Schaur, H.Zollner // Free Radic. Biol. Med. 1991. - Vol.ll,№l. - P.81-128.

197. Evans, R.M. The distribution of ascorbic acid between various cellular components of blood, in normal individuals, and its relation to the plasma concentration / R.M. Evans, L. Currie, A. Campbell // Brit. J. Nutr. 1982. - № 47. -P. 473.

198. Falkenburg, P.-E. Drosophila small cytoplasmic ribonucleoprotein is homologous to the rat multicatalytic proteinase / P.-E. Falkenburg, C. Haass, P.-M.Kloetzel, B.Niedel, F. Kopp, L. Kuehn, B. Dahlmann // Nature. 1988. -Vol.331,№6152. -P.190-192.

199. Farber, J.M. Oxidative modification of the glutamine synthetase of Escherichia coli enhances its susceptibility to proteolysis / J.M.Farber, R.L. Levine // Meeting abstract. Fed. Proc. 1982. - Vol.41,№4. - P.865.

200. Finley, E.L. Radiolysis-induced oxidation of bovine ot-crystallin / E.L. Finley, J.Dillon, R.K.Crouch, K.L. Schey // Photochem. Photobiol. 1998. - Vol.68, №1. -P.9-15.

201. Frei, B. Antioxidant defenses and lipid peroxidation in human blood plasma / B. Frei, R. Stocker, B.N. Ames // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1988. - Vol.85. - P. 9748-9752.

202. Frei, В. Content of antioxidants, preformed lipid hydroperoxides and cholesterol as predictors of the susceptibility of human LDL to metal ion-dependent and independent oxidation / B. Frei, J.M. Gaziano // Lipid Res. 1993. -Vol. 34.-P. 2135-2145.

203. Frei, B. Natural antioxidants in human health and disease / B. Frei. Orlando, FL: Academic Press. - 1993. - 93 p.

204. Fridovich, J. Cholinekinase and cholinephosphotransferase in developing fetal rat lung/ J. Fridovich. 1975, №44. - P. 147-159.

205. Frolich, L. Free radical mechanisms in dementia of Alzheimer type and the potential for antioxidative treatment / L.Frolich, P.Riederer // Arzneimittelforschung. 1995. - Vol.45, №3A. - P.443-446.

206. Garland, O. Role of site-specific, metal-catalyzed oxidation in lens-aging and cataract: a hypothesis / O.Garland // Exp. Eye Res. 1990. - Vol.50,№6. - P.677-682.

207. Garner W.H., Garner М.И., Spector A. H,0,-induced uncoupling of bovine lens Na+, K+-ATPase. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1983. V.80. N7. P.2044-"2048.

208. Gardner, H. W. Oxygen radical chemistry of polyunsaturated fatty acid / H. W. Gardner // Free Radic. Biol. Med. 1989. - Vol.7,№1. - P.65-86.

209. Gebicki, J.M. Protein hydroperoxides as new reactive oxygen species / J.M. Gebicki, // Redox Rep. 1997. - Vol.3,№2. - P.99-110.

210. Gieche, J. Protein oxidation and proteolysis in RAW264.7 macrophages: effects of PMA activation / J. Gieche, J.Mehlhase, A.Lick, T.Zacke, N.Sitte, T.Grime // Biochim. Biophys. Acta. 2001. - Vol. 1538,№2-3. - P.321-328.

211. Gladstone, I.M.Jr. Oxidation of proteins in neonatal lungs / I.M.Jr. Gladstone, R.L. Levine // Pediatrics. 1994. - Vol.93,№5. - P.764-768.

212. Grisham, M.B. Chemistry and cytotoxicity of reactive oxygen metabolites / M.B. Grisham, J.M. McCord. 1986. - P. 1-18.

213. Grune, T. Degradation of oxidized proteins in mammalian cells / T. Grune, T.Reinheckel, KJ.A. Davies // FASEB. 1997. - Vol.ll,№7. - P.526-534.

214. Grune, Т. Proteolysis in cultured liver epithelial cells during oxidative stress. Role of the multicatalytic proteinase complex, proteasome / T. Grune, T.Reinheckel, M. Joshi, KJ.A. Davies //Biol. Chem. 1995. - Vol.270,№5. -P.2344-2351.

215. Grune, T. Reduced 4-hydroxynonenal degradation in hearts of spontaneously hypertensive rats during normoxia and postischemic reperfusion/ T.Grune, K.Schonheit, I.Blasig, W. Stems // Cell Biochem. Funct. 1994. - Vol. 12,№2. - P. 143-147.

216. Grattagliano, I. Oxidation of circulating proteins in alcoholics: role of acetaldehyde and xanthine oxidase / I. Grattagliano, G.Vendemiale, C. Sabba, P.Buonamico, E. Altomare //Hepatol. 1996. - Vol.25,№1. - P.28-36.

217. Grune, T. Increased levels of 4-hydroxynonenal modified proteins in plasma of children with autoimmune diseases / T. Grune, P.Michel, N.Sitte, W.Eggert, H.Albrecht-Nebe// Free Radic. Biol. Med. 1997. - Vol.23,№3. - P.357-360.

218. Guptasarma, P. Hydroxyl radical mediated damage to proteins, with special reference to the crystalline / P.Guptasarma, D.Balasubramanian, S.Matsugo, I. Saito // Biochemistry. 1992. - Vol.31,№ 17. - P.4296-4303

219. Hagen, T.M. Course of psychiatric disorders across the menstrual cycle / T.M. Hagen, D.L. Yowe, J.C. Bartholemew et al. // Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 1997. -Vol. 94. - P.3064-3069.

220. Halliwell, B. Lipid peroxidation, oxygen radicals, cell damage, and antioxidant therapy / B. Halliwell, J.M.C. Gutteridge // Lancet. 1984. - P. 13961398.

221. Halliwell, B. Reactive oxygen species and the central nervous system / B. Halliwell // Free eadicals in the brain (aging, neurological and mental disorders). Berlini SpringerVerlag. 1992. - P. 21-40.

222. Halliwell, B. Reactive oxygen species and the central nervous system / В .Halliwell //Neurochem. 1992. - Vol.59,№5. - P.1609-1623.

223. Hawkins, C.L. Generation and propagation of radical reactions on proteins /

224. C.L. Hawkins, M.J. Davies // Biochim. Biophys. Acta. 2001. - Vol. 1504,№2/3. -P.196-219.

225. Harman, D. Aging: A theory based on free radicals and radiacian chemistry /

226. D. Harman // J. geront. 1956. - Vol.11. - P. 298-300.

227. Harman, D. Free-radical theory of aging: inversing functional life span / D. Harman//Annu. N.Y. Acad.Sci. 1994. - Vol.717. - P. 1-15.

228. Harman, D. Surfactant cholesterol metabolism of the isolated perfused rat lung / D. Harman // Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1991. - Vol. 88. - P.5360-5363.

229. Hejnecke, J.W. Course of psychiatric disorders across the menstrual cycle / J.W. Hejnecke //Free Rad.Biol.Med. 1987. - Vol.3. - P.65-76.

230. Hemila, H. Activated polymer-phonuclear leucocytes consume vitamin С / H. Hemila, P. Roberts, M. Wikstrom // Febs. Lett. 1985. - P. 178: 25.

231. Ho, Y.-S. Possibl modifier of surfactant function / Y.-S. Ho, J.-L. Magnenat, M. Gargano etc. // Environ.Health Perspect. 1998. - Vol.106. - P.1219-1228.

232. Honig, B. Classical electrostatics in biology and chemistry / B. Honig, A.Nicholls // Science. 1995. - Vol.268,№5214. - P.l 144-1149.

233. Hunt, J.V. Hydroperoxide-mediated fragmentation of proteins. Biochem / J.V. Hunt, J.A.Simpson, R.T. J. Dean 1988. - Vol.250,№1. - P.87-93.

234. S.K.Drake, N.B.Wehr, A.M.Weissman, T. La Vaute. 1998. - Vol.95,№9. -P.4924-4928.

235. Kato, Y. Oxidative fragmentation of collagen and prolyl peptide by Cu(II)/H202. Conversion of proline residue to 2-pyrrolidone / Y.Kato, K. Uchida, S.Kawakishi//Biol. Chem. 1992. - Vol.267,№33. - P.23646-23651.

236. Kato, Y. Immunohistochemical detection of dityrosine in lipofiiscin pigments in the aged human brain / Y. Kato, W.Maruyama, M.Naoi, Y. Hashizume, T.Osawa // FEBS. 1998. - Vol.439,№3. - P.231-234.

237. Kempner, E.S. Damage to proteins due to the direct action of ionizing radiation / E.S. Kempner // Q. Rev. Biophys. 1993. - Vol.26,№l. - P.27-48.

238. Kellog, E.W. Effect of dietary vitamin E on the antioxidant defense systems of rat / E.W. Kellog, I. Fridowich // J.Gerontol. 1976. - Vol.31. - P.405-408.

239. Kopoldova, J. LiebsterJ. The mechanism of the radiation chemical degradation of amino acids V. Radiolysis of norleucine, leucine and isoleucine in aqueous solution. Int / J.Kopoldova, J. Liebster //Appl. Radiat. Isot. 1963. -Vol.14. - P.493-498.

240. Kogan, A.Kh. Location of the neural structures triggering ovulation in the rat / A.Kh. Kogan, A.N. Kudrin //J. Molec. Cell. Cardiol. 1980. - Vol. 12. - Suppl.l. -P.75.

241. Koltover, V.K. Activation of lipid peroxidation and changes in vitamin E contents in the lungs under oxidative stress / V.K. Koltover //Age. 1995. - Vol.18, №.3. - P.85-89.

242. Klebanoff, S.J. The niutrophil: function and clinical disorders / S.J. Klebanoff, R.A. Clark. Amsterdam: North-Holland. - 1978. - 313 p.

243. Kroemer, G. Inhibition of lipid peroxidation in muscle homogenates by phospholipase A2 inhibitors / G. Kroemer // Cell Death and Differentiation. -1997. -Vol.4. -P.443-456.

244. Krinsky, N.L. Membrane antioxidants / N.L. Krinsky // Ann. NY. Acad. Sci. -1988. №551. P. 17-33.

245. Levine, R.L. Proteolysis induced by metal-catalyzed oxidation / R.L. Levine // Revis. Biol. Celular. 1989. - Vol.21. - P.347-360.

246. Levine, R.L., Stadtman E.R. Protein modification with aging / R.L. Levine, E.R. Stadtman. 1996. - P. 184-197.

247. Lee, C.M. Protection from O2 toxicity by preexosure to hypoxia: lung antioxidant enzyme role / C.M. Lee, R. Weindruch, J.M. Aiken // Free Radical Biol. Med. 1997. - Vol.22. - P.1259-1269.

248. Liebler, D.C. Antioxidant reactions of carotenoids / D.C. Liebler // Ann. NY. Acad. Sci. 1993. - Vol. 691. - P. 20-31.

249. Liu, Y. Inhibition of postcardiac arrest brain protein oxidation by acetyi-L-carnitine / Y.Liu, R.E.Rosenthal, P.Starke-Reed, G. Fiskum // Free Radic. Biol. Med. 1993. - Vol. 15,№6. - P.667-670.

250. Molecular and cellular processing of lung surfactant / C.M. Rubanyi //Free Radicals Biol, and Med. 1988. - Vol. 4. - P. 107.

251. Moser, R. Uptake of ascorbic acid by human granulocytes / R.Moser, F. Weber // Internal. J. Vit. Nutr. Res. 1983. - Vol. 54. - P. 47.

252. Mickel, H.S. Protein oxydation and myelinolysis occur in brain following rapid correction of hyponatremia / H.S. Mickel, C.N.Oliver, P.E. Starke-Reed // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1990. - Vol.172, №1. - P.92-97.

253. Murphy, M.E. Oxidation state of tissue thiol groups and content of protein carbonyl groups in chickens with inherited muscular dystrophy / M.E. Murphy, J.P.Kehrer // Biochem. 1989. - Vol.260,№2. - P.359-364.

254. Munakata, T. Langerhans cells in human cervical epithelium: an immunohistological study / T. Munakata, U. Semba, Y. Shibuya etc. // J.Immunol. 1985. - Vol.134. - №4. - P.2449-2455.

255. Nashio, E. Experimental studies on lung surfactant in deep hypothermia induced by surface cooling and warming / E. Nashio, Y. Watanabe //Biochem. Biophys. Res. Commun. 1992. - Vol. 232. - P. 1-4.

256. Neely, M.D. The lipid peroxidation product 4-hydroxynonenal inhibits neurite outgrowth, disrupts neuronal microtubules, and modifies cellular tubulin / M.D. Neely, K.R.Sidell, D.C.Graham, T.J. Montine // Neurochem. 1999. - Vol.72,№6. - P.2323-2333.

257. Nuttal, S.L. Cell fatty acid composition affects free radical for mation during lipid peroxidation / S.L. Nuttal, U. Martin, T. Hutchin etc. // Age&Ageing. -1998. Vol.27.-P.34.

258. Oberritter, H. Effect of functional stimulation on ascorbate content in phagocytes under physiological and pathological conditions / H. Oberritter, B. Glatthaar, U. Moser, K.H. Schmidt // Int. Archs. Allergy Appl. Immun. 1986. -№ 81. - P.46.

259. Oliver, C.N. Levine R., Stadtman E.R. Metal ion-catalyzed oxidation of proteins: biochemical mechanism and biological consequences / C.N. Oliver, R.Levine, E.R. Stadtman // Free Radic. Biol. Med. 1990. - Vol.9,№4. - P.315-325).

260. Oliver, C.N. Age-related changes in oxidized proteins / C.N. Oliver, B.-W. Ahn, E.J. Moerman, S.Goldstein, E.R. Stadtman //Biol. Chem. 1987. - Vol.262, №12. - P.5488-5491.

261. Oliver, C.N. Age-related alterations of enzymes may involve mixed-function oxidation reactions / C.N. Oliver, B.-W.Ahn, M.E.Wittenberger, R.L.Levine, E.R. Stadtman. 1985.-P.39-52.

262. Oliver, C.N. Inactivation of enzymes and oxidative modification of proteins by stimulated neutrophils / C.N. Oliver // Arch. Biochem. Biophys. 1987. -Vol.253,№1. - P.62-72.

263. Offermann, M.K. Glutathione disulfide inactivates, destabilizes, and enhances proteolytic susceptibility of fructose-1,6-bisphosphate aldolase / M.K. Offermann, M.J.McKay, M.W.Marsh, J.S. Bond //Biol. Chem. 1984. - Vol.259,№14. -P.8886-8891.

264. Orr, C.W.M. Studies on ascorbic acid. 1. Factors influencing the ascorbate-mediated inhibition of catalase / C.W.M. Orr // Biochemistry. 1967. - Vol.6,№10. - P.2995-2999.

265. Orr, C.W.M. Studies on ascorbic acid. II. Physical changes in catalase following incubation with ascorbate or ascorbate and and copper(II) / C.W.M. Orr // Biochemistry. 1967. - Vol.6,№10. - P.3000-3006.

266. Orr, W.C. Control of lung surfactant by ventilation, adrenergic mediators and prostaglandins in the rabbit / W.C. Orr, R.S. Sohal //Science. 1994. - Vol.18. - P. 127-137.

267. Ozawa, T. Genetic and functional changes in mitochondria associated with aging / T. Ozawa // Physiol. Rev. 1997. - Vol.77, № 2. - P. 425-464.

268. Pacifici, R.E. Protein, lipid and DNA repeir system in oxidative stress: free radical theory of aging revisited / Pacifici R.E., Davies K.J.A. // Gerontology. -1991.-Vol.37.-P. 166-180.

269. Panush, R.S. Modulation of certain immunologic responses by vitamin С III-Potentiation of in-vitro and in-vivo lymphocyte responses / R.S. Panush, J.C. Delafiiente, P. Katz and J. Johnson // Int. J. Vit. Nutr. Res. 1982. - № 23. - P. 35.

270. Pantke, U. Oxidized proteins as a marker of oxidative stress during coronary heart surgery / U. Pantke, T.Volk, M. Schmutzler, W.J.Kox, N.Sitte, T.Grune // Free Radic. Biol. Med. 1999. - Vol.27,№9/10. - P. 1080-1086.

271. Papa, S. Reactive oxygen species, mitochondria, apoptosis and aging / S. Papa, V.P. Skulachev // Molec. Cell. Biochem. 1997. - Vol. 174. - P. 305-319.

272. Retsky, K.L. Ascorbic acid oxidation product(s) protect human low density lipoprotein against atherogenic modification / K.L. Retsky, M.W. Freeman, B. Frei // J. Biol. Chem. 1993. - № 268. - P. 1304-1309.

273. Rao, P.S. The role of corticotropin-releasing factor and interleucin —1 in the regulation of neurons controlling reproductive function / P.S. Rao, H.S. Mueller //Advanc.Exp.Med. Biol. 1983. - Vol.161. - P.347-364.

274. Pryor, W.A. Free radicals and lipid peroxidation: what they are and how they got that way. In: Frei B. ed. Natural antioxidants in human health and disease / W.A. Pryor. Orlando, FL: Academic Press. - 1994. - P. 1-24.

275. Rivett, A.J. Covalent modification of proteins by mixed-function oxidation: recognition by intracellular proteases / A.J. Rivett, J.E.Roseman, C.N.Oliver, R.L. Levine, E.R. Stadtman // Prog. Clin. Biol. Res. 1985. - Vol.180. - P.317-328.

276. Rustgi, S. Radicals of spin-trapped radicals in aqueous solutions of amino acids. Reactions of the hydroxyl radical / S.Rustgi, A.Joshi, H.Moss, P. E.Riesz // Radiat. Biol. 1977. - Vol.31,№5. - P.415-440.

277. Sachs, L.M. Apoptosis in Xenopus tadpole tail muscles involves Bax-dependent pathways / L.M. Sachs, B.Abdallah, A.Hassan, G. Levi, A.De Luze, J.C.Reed, B.A. Demeneix// FASEB. 1997. - Vol.11,№10. - P.801-808.

278. Schuessler, H. Oxygen effect in the radiolysis of proteins. Lactate dehydrogenase / H. Schuessler, A.Herget // Radiat. Bioi. Relat. Stud. Phys. Chem. Med. 1980. - Vol.37, №1. - P.71-80.

279. Schuessler, H. Oxygen effect in the radiolysis of proteins / H.Schuessler, K.Schilling // Radiat. Biol. Relat. Stud. Phys. Chem. Med. 1984. - Vol.45,№3. -P.267-281.

280. See, V. Oxidative stress induces neuronal death by recruiting a protease and phosphatase-gated mechanism / V. See, J-P. Loeffler //Biol. Chem. 2001. -Vol.276,№37. - P.35049-35059.

281. Singh, H. Effect of gamma radiation E.coli ribosomes. II. Efficiencies of inactivation by free radicals / H.Singh, A.Singh //Radiat. Biol. Relat. Stud. Phys. Chem. Med. 1983. - Vol.44,№6. - P.607-613.

282. Singh, H. Effect of gamma radiation E.coli ribosomes. I. Inactivation by hydrogen atoms, hydroxyl radicals, hydrated electrons and secondary radicals / H.Singh, J.A. Vadasz //Radiat. Biol. Relat. Stud. Phys. Chem. Med. 1983. -Vol.44,№6. - P.601-606.

283. Sies, H. A relative deficit in antioxidant reserve may contribute in cardiac failure / H. Sies //Amer. J. Med. 1991. - Vol. 91. - P. 31.

284. Sitte, N. Proteasome-dependent degradation of oxidized proteins in MRC-5 fibroblasts / N. Sitte, K.Merker, T.Grune // FEBS. 1998. - Vol.440,№3. - P.399-402.

285. Sohal, R.S. Mitochondrial oxidative damage, hydrogen peroxide release, and aging / R.S. Sohal, A.M. Dabey // Free Radical biology Med. 1994. - Vol. 16. - P. 621-626.

286. Sokol, H.A. A marked effect of conformation in the radiolysis of poly-alpha-L-glutamic acid in aqueous solution / H.A. Sokol, W.Bennell-Corniea, W.M. Garrison // Am. Chem. Soc. 1965. - Vol.87,№6. - P. 1391-1392.

287. Skulachev, V.P. Uncoupling: new approaches to on old problem of bioenergetics / V.P. Skulachev // Biochim. et biophgis acta. 1998. - Vol. 1363, №2.-P. 100-124.

288. Stadtman, E.R. Reactive oxygen-mediated protein oxidation in aging and disease / E.R. Stadtman, B.S. Berlett // Chem. Res. Toxicall. 1997. - Vol. 10. - P. 485-494.

289. Stacker, R. Endogenous antioxidant defences in human blood plasma. In: Sies H. ed. Oxidative stress: oxidants and antioxidants / R. Stocker, B. Frei. London: Academic Press. - 1991. - P.213-243.

290. Suthanthiran, M. Transport of lipid across capillary endothelium / M. Suthanthiran, S.D. Solomon, P.S. Williams etc. //Nature. 1984. - Vol.307. -P.276-278.

291. Shilotri, P.G. Glycolytic, hexose monophosphate shunt and bactericidal activities of leukocytes in ascorbic acid-deficient quinea pigs / P.G. Shilotri // J. Nutr. 1977. - № 107. - P. 1507.

292. Shigenaga, M.K. Subcellular distribution, properties and interrelationship of oestrogen receptors in endometrium and other target tissues / M.K. Shigenaga, T.M. Hogen, B.N. Ames//Proc.Nat.Acad.Sci. USA, 1994. - Vol.91. - P. 1071.

293. Stadtman, E.R. Oxidation of free amino acids and amino acid residues in proteins by radiolysis and by metal-catalyzed reactions / E.R. Stadtman // Annu. Rev. Biochem. 1993. - Vol.62. - P.797-821.

294. Steinbrecher, U.P. Role of oxidatively modified LDL in atherosclerosis / U.P. Steinbrecher, H.F.Zhang, M.Lougheed // Free Radic. Biol. Med. 1990. -Vol.9,№2. - P.155-168.

295. Taniguchi, H. Free-radical intermediates in the reaction of the hydroxyl radical with amino acids / H. Taniguchi, K.Fukui, S.I.Ohnishi, H.Hatano, H. Hasegawa, T. Maruyama // Phys. Chem. 1968. - Vol.72,№6. - P. 1926-1931.

296. Taniguchi, H. Electron spin resonance studies of amino acid radicals produced by Fenton's reagent / H. Taniguchi, H.Hasumi, H.Hatano. 1972. - Vol.45,№11. -P.3380-3383.

297. Taniguchi, H. Free-radical intermediates in the reaction of the hydroxyl radical with amino acid derivatives and related compounds / H.Taniguchi, H.Hatano, H. Hasegawa, T.Maruyama //Phys. Chem. 1970. - Vol.74,№16. -P.3063-3065.

298. Ter Steege, J.C. Nitrotyrosine in plasma of celiac disease patients as detected by a new sandwich / J.C. Ter Steege, L.Koster-Kamphuis, E.A.van Straaten, P.P.Forget, W.A. Buurman // ELISA. Free Radic. Biol. Med. 1998. - Vol.25,№8. - P.953-963.

299. Van Kessel, K.P. Naloxone stimulation of luteinizing hormone secretion in the female monkey: influence of endocrine and experimental conditions / K.P. Van

300. Kessel, M.R. Visser, J.A. VanStrijp etc. //Immunology. 1987. - Vol.62, №4. -P.675.

301. Wiseman, H. Localization of oestradiol, progesterone and oxytocin receptors in the uterus during the oestrous cycle and early pregnancy of the ewe / H. Wiseman, B. Halliwell // Biochem J. 1998. - Vol.313, №1. - P. 17-29.

302. Wolff, S.P. Free radicals, lipids and protein degradation / S.P.Wolff, A.Garner, R.T. Dean // Trends Biochem. Sci. 1986. - Vol.11. - P.27-31.

303. Yan, L.-J. Influence of vitamin E on the level of lipids / L.-J. Yan, R.L. Levine, R.S. Sohal // Proc.Nat.Acad.Sci.USA. 1997. - Vol.94. - P.l 1168.

304. Yamamoto, O. Ionizing radiation-induced cross-linking in proteins / O.Yamamoto // Adv. Exp. Med. Biol. 1977. - V0I.86A. - P.509-547.

305. Yoritaka, A. Immunohistochemical detection of 4-hydroxynonenal protein adducts in Parkinson's disease / A.Yoritaka, N. Hattori Uchida, M.Tanaka, E.R. Stadtman, Y. Mizuno. 1996. - Vol.93, №7. - P.2696-2701.

Информация о работе

Чумакова, Анна Сергеевна
кандидата биологических наук
Астрахань, 2009
ВАК 03.00.13

Диссертация

Возрастные и тканеспецифические особенности перекисного окисления липидов и белков при остром стрессе и введении α-токоферола на разных этапах постнатального онтогенеза - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы