Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Влияние некоторых токсических тиосоединений на активность глутатион-S- трансфераз печени и эритроцитов крыс

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Влияние некоторых токсических тиосоединений на активность глутатион-S- трансфераз печени и эритроцитов крыс"

РРБ8 О0Д

Министерство здравоохранения рф

санкт-петербургский химико-фармацевтический институт

На правах рукописи

ГОЛОВАНОВА Наталья Эриковна

ВЛИЯНИЕ НЕКОТОРЫХ ТОКСИЧЕСКИХ ТИОСОЕДИНЕНИЙ НА АКТИВНОСТЬ ГЛУТАТИОН-Б-ТРАНСФЕРАЗ ПЕЧЕНИ И ЭРИТРОЦИТОВ КРЫС

03.00.04 — биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

САНКТ-ПЕТЕРБУРГ 1993

Работа выполнена в Санкт-Петербургском государственном санитарно-гигиеническом медицинском институте.

Научный руководитель:

доктор химических наук ¡профессор

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук доктор медицинских наук

В. А. ДАДАЛИ

В. Б. МАТЮШИЧЕВ Е. В. СЕМЕНОВ

Ведущее учреждение — Всероссийский научный центр по беоттасности биологически активных веществ, Купавна, Московская обл. ) . ^

Защита состоится «—г » ^¿¿¿^>1993 г. в ^ часов на заседании специализированного совета К 084.63.01 при

СПХФИ (197376, Санкт-Петербург, ул. пр. Попова, 14)

✓

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института.

Автореферат разослан

«|а оч

1993 г.

Ученый секретарь специализированного совета

Н. В. КИРИЛЛОВА

- 1 -

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТУ ¿кщалькость^сс.дейов2Щ1Я. Егрокий спектр промышленных процессов приводи? к М8ССНВКЮ* загрязнениям целых регионов различными меркаптанами, которнэ создав? серьезную опасность здоровью человека. • й если токсикологической стороне этой шюблемн ггосвя-г.еко значительное число исследований (Тимофеев Б.П.Д558; Села-;шщшЯ.Г.С.,1972г Уздавики Э.Р.,1382),.го оиоиашчзскао оскош тогссического действия меркаптанов» пути их биотрансформации и ло^сксьжащщ'йалолсслодоса^.' вся&дстскс ггого отсутствует па-учнке осноаи направленного поиска путей профилактики в коррекции токсических состояний» вызываемых этими ксенобиотиками.

В литературе имеется крайне ограниченная информация о ферментах бкотрансформащш и детоксикашш алифатических к ароматически меркаптанов о касающаяся действия; метйтрансфераз и УД&-глюкуронозилтраксфераа (Парк Д.', 1973). Роль кэ з этих процессах глутатионзввисимых ферментов детоксикации, в первую очередь со-мействг глутаткск-б-трппсфсггз (ГТ)ттгрж^ ястмпзчтггзльтга пгя-ную роль з дзтоксякошш широкого круга ксекобнотнкоз» практически не изучена, 1С тому же учитывая способность тиолов дшическк шдофэдкровать пизкомолзкулярдае тиоли клеткаг ррекде всего кофактор глутйтионэашсимых $еркеатов - гдутгтиок (ГЕН), и фун'.-цяскалыыс гоупгы белков, ззсь;.:; актуально изучение зй:К|ая меркаптанов (йрмептзтпвнуп активность ГТ5 в том число по от-асхввгш к другим ксенобиотикам, что проливает свот на биохимическую природу сочетанного действий различных токсикантов.

В тесной связй с изложенным выше находится'еще один' аспект проблей; -'понск путей акт^нагц,;; (сер^ентов антитоксической за-цйтн с цэлыо повышения эффективности оахитя организма от поз-реядаищего действия токсикантов, в частности высокотоксических ароматических тиолов. в этом плана особый интерес представляет поиск актаватороз и индукторов данной группы 'Ферментов в ряду ¡троназо¿'¿¡л >аллазола '.как" язлотоксичных соединений.

Целью работы являлось получении данных о системе гт тканей печени и эритроцитов крыс при «нток-епкадак згзшш алифатическими и ароматическими керкаптанакн к рдзрао'откз ряда соеюшеЕкй.црсйзводаых зкдазолз .как кндукгерев вышеназванного Фермента, с точки зрения подбора.возможного пре-паоата.заипты при отравлении меркаптанам!.-'

- 2 -

Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи;

1. Исследование ГГ активности печени и эритроцитов кркс в подостром токсическом эксперименте при ингаляционном и перорал^-ном поступлении алифатических меркаптанов.

2. Исследование ГТ активности печени и эритроцитов'крыс в подостром токсическом эксперименте при пероральном поступлении ароматического меркаптана (тиофенола).

3. Исследование производных имидазола (мономеров и.полимеров), как индукторов ГТ в сравнении, с соединениями других классов).

4. Исследование возможностей профилактики и коррекции токсических состояний животных при интоксикации меркаптанами с. помощью индукторов I и 2 фаз детоксикашш организма.

Шщчная_новизн§4 В настоящей работе впервые получены данные о влиянии тиосоединений на активность ГТ печени к эритроцитов . крыс. Обсуждается механизм токсического действия тиофенола через генерацию свободных форм кислорода. Выявлены и предложены новые соединения, являющиеся эффекторами этой группы ферментов.

В эксперименте впервые установлено защитное действие нола в предохранении токсических отравлений тиофенолом у крыс. Полученные результаты о возможности защиты организма данным соединением предполагают поиск необходимых препаратов в классе пространственно затруденшзых фенолов,

Практическая значимость, В целях профилактики токсического действия ароматических тиолов и дисульфидов, метгемоглобикообра-зования и гемолиза эритроцитов целесообразно использование антиоксид антов фенольноЗ природы (р-ионола, фенбутола и др.).

В целях предотвращения снижения активности ГТ под действием указанных выше токсикантов и увеличения детоксицирущей- функции печени по отношению к другим ксенобиотикам 'целесообразно1 использование б качестве индуктора ГТ дибазола, оказывающего одновременно и профилактическое активирующее действие.

Основные положения, выносимые на.защиту.

I. Влияние алифатических и ароматических меркаптанов и йх дисульфидов на ферментативную активность различных фракций ГТ печени и эритроцитов крыс, в том числе по отношению к другим ксенобиотикам (галоген- и нитрогалогенбензолам и нитропиридинам),

2-, .Некоторые .аспекты механизма токсинеского лёШсувщ арома-

'лУг^'С^т .'.тс

лро.¿-¿Моьоль и ^идерк«-зж: юг г'огог^^о? ::г:.: ■.г^уиопгн'.'Л '.¡ов'т---"':'.!- о-:■:;).•.■ ■

1. йй^йЗл^огическая запета" от остту^о токсгт*"'"?^ ■

о"г.о !.■:?•.■ дцс0ер»'<ащ»и х-одок-энн

и обсуз;до?Ег на:

..олсикулогик" ;йоскза513Э0);

- збсэдгкип секции "Бйснгопгсескоз действие органически со-еяшгегкй сера" из РСвСР {ЛешшградД890)?

- итоговой каучко-ясслвдоватвльской конференции ЛСГМК (1992);

- российской научной конференции "Создание, лекарствекадх средств" (Мсскв в„1892) с

Внедрение,в практику. Материалы пгг обоснованию ОЕУВ йюфе-нол» в е.7!юсф5хсм юздухе рАссмотоеиг гг п-оз-гнн оикгдгг "Гкгдап" зс^л^г1' ПросЗ'ю^хс: чодассл-: г.<

''Иг^-л^-. оснонь ЛНП'^Й.! скрун^дкч" срэдй'1 ^ГСОг;С;;О;: .-"г ог 23 ..

Пс °ог;-;.- ог;:/0.Я1Козгж- 3 р^ссги-

Л'-^саргащь'. состоим яг ру.сдь-шке обзора лпергт^рн е 3 содешощк чатериму соСсхкч: •шт. и«У;зжгзът.Я5 оокдачетш, выводовг сквока литература к цри-:>1ссс.гл-ацкг. йздокена я; 148 страницах машинописного .ашнаа -Ш рисунков и 19 таблиц.' Списо« литература вюш-чае^-181 .источник; ? то?» числе 155 т::;ь.;тра;шоу , ССКОВ; ЮЗ 00оЕР>ШПа РЛЕОК одмудо Я-5пв где й - алийата<темал и.™? йрожааичв^хмй радикал,, откосятся к числу соединений, содержащих активную в 7Л'шчбском отношении ищьвую группу. Ее ваша свойством ЯВЛЯЯ ?п<1 СПОТЯ;:;ОС7^

в чго ыггс'пг-госкло ъюж выступать лаг- протектора •ЗЯ и др. 5Ш& ксюатдасй ¿-руш белков. При э?ом5 как и-в дву-пу;"гф.э:1€.ссзл- всего окисле кип еронаткчее1«га к алнуага-

';ес!да; ткоди пгрыо.цят б соотес/отвужщк? днсульфада к продукта •болеэ глубокого окисления с-промегсуточннм образованием активных тшяьвд&радикалов 'из*и сульфеновых кислот'й-ЗгОН,. способах

- 4 -

запускать к стимулировать целый ряд других, ъ том числе и пе-рэ-кисных процессов. В ском очередь дисульфиды спо.сооны вступать в многочисленные реакции июл-дисулмТхщюго обмена как с белками. так и штомолекуляршдми внутриклеточными хшдои, из которых наиболее вааш является ГБН. Принимая во внимание изложенные выше соображения, можно оадать, что в качестве ми-шэней действия алифатических и особенно ароматических меркаптанов могут выступать различные белки-ферменты , в том числе глу-тэткон-зависшые. Гз настоящей работе ш сфокусировали свое внимание на одном из важнейших семейств ферментов, играющих важную роль б детоксикации ксенобиотиков - семействе IT, являвшихся одним из ochoBHU.4 Фзрментативных компонентов 2 фазы детокси-кации эндогенных соединений и ксеноблотиков.

Материалы и методы исследования

С учетом цели настсяцзй робота экспериментальные исследования проводились по трем направления;.!:

- исследоваше вди^тл олифагамесках и ароматических меркаптанов на FT цитозолькой и ьшкросоксльной фракций, печеьа к эритроцитов;

- исследоваше производных бензимидазола к имидазода, а также бензимицазол- и ¡мщазолсодержощих полимеров как соединений, стимулирующих РХ;

- профилактика индукторами IT токсических состояний-у крыс тгри интоксикации ароматическими меркаптана!,®.

Работа заполнена на 45Q животных, включая бзлкх беспородных крыс и крнс линии Вистар.

Влияние меркаптанов на активность ГТ печени и эритроцитов крас исследовали в экспериментах in vivo и in vitro. Б пэдост-ром эксперименте in vivo при ингаляционном пути введения были исследованы алифатические меркаптаны : отил-. бутил-'» амил- и смесь природах меркаптаноЕ (СШ) в дозе I/IO CLg0, что соответствовало II08+I2& ; 1075±199; 973+119; .1371+251 мг/м3. Последующие эксперименты проводили при внутрижелудочном введении токсиканта, т.к. такой путь изедения болов, предпочтителен при исследовании активности формантов печени. Таким образсм были, исследованы алифатический -• амилмеркаптан'(дезы 0,01; 0,1.и 1,0 мМ/кг веса в сутки? и ароматический тис-фенол (дозы'ЛД50 и 1/БО Мгп, соотвыспето 200 и 4 кг/кг веса в сутки)••

- 5 -

V, ¿-лсдддк-лдтчх .'д vitro "ltj:o гюслеговзко дря?ос доделил?1 различна: ¿аг ддодое. {г;дсЕл:«ркэд,плт!, тдсфедодл;; к:-' ддсудь-фпдев дафе1Ш5ул5г15^& на ¡ктозольщ'ю ц (якросшльху*» Г? île-пени 3 pî зритроштос. 3 ДОННЫХ SKCBeiK'.V3HT8S дспмдьзсгсдд '3 ОТЛ?ЛЬТТЧХ С.тучрях Г"»1 ттшгкубяШГЛ С НАЯФН (ВЛИЯНИЙ ткойзнола нз Г? о PS'î (дл/ллдл д'Дздллдд: Д- :":сдзддо!К;: 77/,

Г23Г к £ -аогала ии&ивз да^згиадкуль^а дд г* oprcpœc-r.}. Исследование производных бонзпмкдазола я шидазоло как по-

фярмакодайннх препарагов и получениях синтвтичесчи на навей ка-5*эдрз и в лаборатории НШ вякшга и сывороток (Благодарим проф. Абишева a.b. sa предоставленные нем для работы вополямэрк). Исследовали: конскер-ие соединения - дибазол, зтикизол, 2- (3 ' хлорфетшл ) бекзикидпзсл ( 4 ), 2- (3 • хлорфонм ) -I- ; 3 •диэтаяюмно-оксшропильбензимкдазол (5) и 2-(3^орфешш)--1-(3'?/;арфолин-оксипропил)- бензимияазол (6);-полимерные ( на сскове Н-вшкл-

"тмрродилопл} - иодлдал.11- (пдт.г, t rtejjg!1«п»»;и>д— /¡тскд) t* ицчаи«..

д'.м д^з-зи ;ПЕ7?'л; оздзз:;'сд: ? солоддмсгл.

Kcov-j "ого ьлд сдлздзлз''; дедлл:-зоззлл и дздлллвззл'дд л дззд С'-Т1! - лз-'оззн л здзлдрлч. лссделоо:.':з:; продо;.ддд дс дву.-i с-с !. .л-т ; 1', ;;дд.о'лз.з; тзсддлд дрздзгзтй ?■ дсдг: йо дг/л? дссз у ■гзл-ддз-' З-'-'. суток здрздел^ддед злтлдззедд Г? дссл: гз-

сл-ддюл лзчд препарат:;; 2; дсз^ (Т'/д'д/дг десз в гдтзл;

до «гдгсгдкт-птущо."! ехолз с- течей» ?.3 с? го;-:, Для оцо;сс-. wso-йдзглй дейетддя ;лл*дзз0;длд;л ддздзд^дддд да окткьйость 77 сддк проведены опктя 1п vitro, a также in vivo с использованием бгот?5тсгс!? стп*гозд - "ктдисдлгддгп я ~ зякгюгекспетз.

Прздззрителъко нз с:д'Л?рслс':с',л>''-ро Spccorî П 40 Сдлк снят;: спектры. гю»'лощ0Нйя ьсех исследуемых соединений в области 200700 тм и показано отсутствие перекрывания с контрольной длиной ЕОЛПН (340 JIV). •

Е"Л:;о""ссть Т7рздотлд?дддлд дохсд'д-^юго до?!с;дздя дж-фздс1!:) дсдользу;: две дродарата; I )клзтряиэзол {Щ)сдз^о;~юе ■имидазола) и 2) /à-иокол (антиокскдант). ,.-.._■■

На исследование- so всех случаях брздл ьгдкросокдлы'у?; цл-тозодьнуц Фрагдигл ГТ печеяк /ввделял!? методой, де^ревщалького. ультрацег^рифутс.'озаьдля на центрифуге К-32М0 с предварлтелькой nep'jjysïîeir и гокогйШ5а:с:ей тканей) и знпоннугэ ГТ еритроцигоа

в гемолизате по Beutler Б. (1975). Активность фермента определяли; для кккросом к эритроцитов с субстратом 204-ДШХВ0 для циозоля с 2.4-ДН-1-ХБ«, 1.2-ДК-4-НБ, бромсульфэфталешюм н Н-оксвдом шридана (Hablg W. ,1974). В рядз экспериментов было проведено определение активности цитохрома Р450 в реакции с п-нитроанизолом и амаранжем (1-я фаза детоксикащга), а тгкке глутатионрздуктазы (ГР) и каталазы (последние как показатель состояния антиоксидантной систеш) (Помойнэцкий В.А. ,19865 Beutler Е.Л975). Активность ферментов печени выракзла в кмоль/ мин м? белка, белок определяли по методу Лоури (Lov/ry О.Н,„. 1961). Активность ферментов эритроцитов вырааалк в шоль/мин iff гемоглобина, гемоглобин определяли стандартным методом»

Статистическая обработка данных проведена с использованием компьютера IBM PC/XT по программе PLOT 40.

Анализ полученных результатов

Результаты, полученные в ходе эксперимента при ингаляционной интоксикации крыс низшими алифатическими керкаптанаш С2--Cg и СШ свидетельствуют о том» что все исследованные меркаптаны, исключая аыил-, практически не влияют на активность мак-росомальной и зритроцитарной ГТ. В случае кзоферментов цито-зольной ГТ алифатические меркаптаны ведут себя по-разному. В реакции с 2.4-ДН-1-ХБ этилпроизводное сникаем .активность gep-мента на 25%, а амил - на 50%. Учитывая снижение активности ГТ в реакции с Х.2ДХ4НБ, обнаруженное для этилмеркаптана,■ здно ' полагатьо что воздействию тиола вддвргаются скорее -изоформы 3-3 и 3-4. При используемых дозах и экспозиции гибели животных не наблюдалось. При оценке результатов ингаляционного воздействия меркаптанов необходимо учитывать, что в первую очередь в процесс детоксикации включаются системы ферментативной защиты тканей дыхательных путей, в том числе и легочный ГТ, а ферменты печени фактически выступают в качестве следующего барьера при токсическом воздействии Поэтому в последующих исследованиях наш! и был выбран внутрижелудочный путь,введения токсиказтов как наиболее короткий путь к ферментам печени. Исследования наиболее активного - амилмеркаптана продемонстрировали,-что доза I мМ/кг Еесз в сутки на 14 день введения вызывает увеличение активности ГТ гепатоцитов. в первую.очередь:вдкросомальной

'- 7 -

фракции (на 75%) и снижение, почти двукратное, активности анионной Форш ГТ эритроцитов. Т.о.. картина наблюдаемая при двух путях введения агадаеркаптана - ингаляционном и внутргаселудоч-ном противоположна.

Знутрижелудочнсе ведение приводит к более быстрому включению (ферментов детоксикашм печени в биотрансформацию токсического агента. Очевидно» ■ функционирование ГТ печени защищает организм при данном типе интоксикации. Понаблюдали сохрзнелие активности Фермента в цитозод* и более того - увеличение иго активности в микроссмах, что способствует предохранению клеток от повреждения.

Иная картина наблюдается при воздействии ароматического меркаптана - тпофеясш. . Длительное поступление в организм крысы низких доз токсиканта обуславливает значительное (более чем трехкратное) снижение активности микросомалЬного фермента, тогда как цитозольная ГТ пнгибируется менее значительно (на ZQ%). При данной схеме поступления тиофекола сколько-нибудь зкачителыс/х изменений со сторокы ГТ эритроцитов ке наблюдалось. Несколько пеозмденнэя картина имеет мости яр;? внутрккелудочном введении тиофекола в дозе Так, как через б час» так и через 24 час достоверных изменений со стороны активности ГТ гепзтецитов не нв<5л»лалось, в то время как активность эритроци-гэрной ГТ изменялась достаточно заметно: через S час после интоксикации она снизилась на 13%, через 24 час - на 3SS. При , этой дозе» как и ожидалось, наблюдалась гибель гивотных, что однако не может быть связано с ГГ. По-видимому при остр-ой ira-тсксикэщш 'тиофенолом должны проявляться дополнительные по-вреждаюшэ фактора, б первую очередь активизация перекисных процессов, что поДтвйгжппп'тся ростом кггголазней. актлшности в цитозоле и'лдикросомэх гепатоцитов ( на 70S) и. снижением (почти двукратным) активности Г? з эритроцитах.

Эксперимент in vitro показали, что з целом и олпфатк-чэские и ароматические мэркзптэны и их дисульфида педззляют, хотя и в разной степени'*'активность ГТв йитозоле 'клеток' печени (рис.1). Причем ингиирукадй эффзкт дз^ешьядасульфкда (ЛФДС) на. ф?рмеаг. вдаое. превосходи? тзкс£;ой ;гаофено.73., Однозреиеннсе' введение'-в''.систему FSH-не изменяет иягаоирушшй эффект. ДФДС; йщройяйййая'. ft* -эдоязляв'*.'£ЙВ> '¿Шф М&^щШъйтедг.

Ачтивнгсть Г'1 (нкаль/мин мр Кгл^в)

200 Конпентпагтга тип лор (|,(М)

Рис.1. Активность ГТ цитозоля печени крыс при инкубации с различными дозами:1-тиофенэла; 2-дифвни.лдасульф^а5 З-ди-фбнилдисульшида и Г&Н(6мМ); 4-гексилиеркап?ана;о-ДЕгекс1Н дисульфида

200 Концентрация тиолов (рИ>

Рис.2. Активность ГТ микросоы печени крыс с различными дозами Х-л'Н^фйШла; 2-диф?нилдиеульфида: З-диф/пш л дисульфида и ГЬН (омМ); 4-тиоф«исла и НАДО] (б мМ).

- 9 -

яоо'Гъ д ддг^друл'К^ д-злтгдмд ЛИ0 -ov 'дяд-дд^ :'м. однако различая ¿¿eco <5о.;ее оущостьешьо. оооОсшо «гр* ¿соа-

¡д-д-гдддк Ю .".¡'Л!. Ддксддзд-дид--'' -дд-сд- г. -г.:

! ojite-v."' дшд/.д дд.'гд ."'"..с?", -v1"-'-

¿»»¡«тЧ&миЙ McpKauióa а в ГО ДйС>'ЛЬфйД о лОйпспХрЬиййд. Л" 200 ккМ 28 йктиэеость кикроссшлшой ГТ практически не вжявт.

upvmuinlvwóai l»u<rán Au/iulll««ri шичимтии i J. •

прачек явгябиругшШ эффект гекоилнюрк&птана превосходи? лаковой для соответствующего дисульфиа {ркс.1}..

Блаянке ыв на активность ГТ зратроцктов зависит с? ярйродн тиоаоз и дисульфидов; ароматические - сильно стимулируя? Фзр-мэвя (при' концентрации тиофэкола 150 акМ ускорение достигав? 4-краткого шачепия, при 200 ?лкМ'- семикратного) l алифзтЕческяе-шбо не влияют на активность» либо йпгибкруют {рис.3). При до-д льп':■ :>■ v'-эütijíítí"с,гтт/г-:"" "тг-"™г'™~'Т" ™-г Г;"'--

0пгЛ.~ - \ 'Л,:;!' Г:"Д!'С'Д:'' "ДДД. Д' : . ■■ ;Т ;. т , ' ■ •

Д:-:. :-Д-'0 " ОДОЯД:-',ДЛ'Л, CV О.'/У-'' 1 '

дд:"\ дед dvoíí y.-r-h:: лдчр:л;дд.?д с;locip гддддд; .гл" ,

'.■я-,:;:;':', кдпд д--д.{о?:д'" д?сдг; что. оддг;-'.-;. дсдд. ду • •

дпт/од Д'^с: "дтнексддч:-;-^ ¡. роддддтд'п.; ; ,—•<■-

дддллдд, о'есд/те.'ппого гдддддд под "дддго

тисхрекола» как гемолизирующего агента, а также защитное действу» а-впири тт^^гт"*:™ то? "дпд до до'.-роЙД.длдД '.Д!^''.:: ддо ^-уд д..> с'л-с.г::ч|дсгуео'иосдьд д лдодус;; ; гуд---

iClCUCIO OKiiCvlóníin- ó ñJieTKe.

Сопоставление изменения показаний■активности-разлкчпнх форм г? (яитозольшк я !гякросомальноЙ з яечейк, -изсфор;>.а;

капта-гтоз евидеуе л.ул'-зуе? о укйчптэлыых расдвтях г- ходктегд; действия -«ж токсикантов» особенно ln vivo, в саду резонгксяо-го ззащодедсаки SK-грушш с беяголиш aspo« жофегод дзрзк-теркзуетсй v& í порядка более, зысокой кислотно с '-хам ¿лифа-тическиа меркаптаны и.ноэтоглу'при ^экологическом рн - 7,2 - 80Ж. моле^л яюфексла; находятся' вдформе анкона,- - тогда' как ала-

Активность ГТ . (нмоль/мин мг гемоглобина)

О

б)

Рис.3. Активность ГТ эритроцитов крыс при инкубации с различными дозами:а) 1-т;юфрнола: 2-диф?нилдисульфида; 3-дифенилди-сульфида и Г&Н(6мМ); б) 1-гексилмсркаптана; 2-дигексилдисуль-фида; 3-цифенилсуяьфида. - . ■ ■

- II - •

фатический меркаптан не ионизирован. Это имеет принципиальное значение, поскольку: I) аутоокислению или другим еидзм окисления, генерирующим поврездашие клетку активные Форш кислорода (прежде всего 0| и Н^). подвергаются только анионные формы тиолов, а следовательно, в случае ароматических соединений процессы перекисного окисления протекают более интенсивно; 2) окисленная форма ароматических тиолов - ДФДС в реакциях тиол-ди-сульфидного обмена характеризуется значительно лучшей уходящей, группой РЬЗ-, чем диалкилсульфиды. Поэтому в первом случае эти реакции, например с ГБН (рКа=9,2) протекают значительно легче, и при более низких концентрациях дисульфидов, чем во втором. Это же относится к реакциям тиол-дисульфидного обмена с ЭН-группами белков, также имеющих рКа«9. С указанными особенностями алифатических и ароматических тиолов связан различный характер влияния на организм и их токсичность.

Подавление ГТ, как ферментов второй фазы детоксикации под действием ароматических тиолов. резко понижает уровень анти токсической защиты организма не только от данного, но и других, еопутствущих ксенобиотиков, прежде всего галоген- и нитрога-логенбензолов, штропиридиноь. Поэтому поиск малотоксичных соединений, стимулирующих указанную группу ферментов, либо предохраняющих их от ингибирущего или иноктивирующего действия токсикантов, является ванным фактором профилактики отравлений. В этом плане значительный интерес представляют производные ими-(бензимидазола), которые проявляют высокую актинность в отношении ферментов 1-ой фазы детоксикации. Изученные наш! производные имидазола можно выделить в-следующие группы; 2-производные бензимида'зел." - дибазол и соединений 4; 1,2-производ-нме бензимидазола, содержащие диэтиламино- а морфолино-2-гид-р»*?1Е!роп::.'ГЫ;ий - соединения 5 и 6; 1,4,5-тризаме-

. щенное производное - этишзол и пойнтеры, содержащие икидазоль-ныек бензишдазольные ядра (ГШ-4 ПВБИ, ПВЕКИ). Иоследовшш>> высокомолекулярных соединений представляет особый интерес .т.к. I) они обладают пролонгированным дегатвием и £) являития. имму-номодуляторзми.

Соединения 4, 5, 6 и дибазол при введении в дозл во мг/.чг, веса в сутки не-изменяют активности микросомальнсй и эритро-цитарной ГТ, тогда как вадяние на цитозоленые Форма зависит

- 12 -

от природа препарата» 1,2-дизамещешые производные Сензкми-дазола - соединения 5,6 не изменяют его активности, ¿-замощенные - соединение 4 и дибазол приводят к росту ферментативной активности в 1,3 и I,? раза соответственно. Обращает на себя внимание определенная избирательность действия всех четырех соединений, повышающих в среднем на 25% активность ГТ в реакции с бромсульфофтапешом, что свидетельствует о щ»отвзяя активности кгоформ, содержащим субъединицу 3. Зиксорип к ки-тотан (неимидазольныо препарата),также не влияя на активность ГТ макросом, увеличивают ее активность в щтсзоле, а митотан в 1,5 раза стимулирует активность эратроцктариой ГТ. Дибазол и этимнзол были испытанны нами с точки зрения стимуляций различных форм ГТ при введений по штерметтирущзй схеме. Лазке при :толь 1шзких дозах, но при длительном' до 28 суток введении они достоверно повышают суммарную активность цитозолькой ГТ. Т.о. среди низкоколекулярвнх соединений наиболее высокой активностью в отношении ГТ при двух, реакмах зводения обладают дибазол и соединение 4. Для выяснения их прямого.влияния на ГТ были проведены опыты in Yitro с соединением 4. Несмотря на увеличение активности в интервале- концентраций вещества Ю_8-Ю"6 М, нельзя однозначно говорить о прямом действии препарата на фермент. Активирующий эффект нкзксмолекуляршх производных имидазола обусловлен главным образом индукцией фермента. Зто согласуется к с литературшик дакавши (Ritter Ph., 1937).

Все соединения привели к росту активности-ГТ цитозоля-соответственно на 73% ШВИ), 58% (ПВБИ) к 922 (ПВБКИ). Более, того ПВй способствует росту активности манросомальной ГТ я ГТ еритроцитсв. Таким образом, сополимеры, содержаще имадазоль-шз и бензшадазольные ядра, даке при однократном введении в малых дозах, повкиают активность ГТ почти столь ко значительно,, что и сашэ активные из изученных низкомолекулярных производных бензшедазола при трехкратном введении и в значительно больших дозах. Сопоставление действия имидазола. и его сополимера показывет, что высокая активность шидазолсодержаще-го полимера не монет быть объяснена соответствующей "эффективной" концентрацией имидазольных ядер, а связана с его полимерной природой. ■ Указанное обстоятельство и больше размеры ко-.

кул (ЭбО'сДа) наводят на кнель, что мохаши-м их влияния ц» активность ГТ должен отличаться от такового в случае «онокеро-з, Поскольку проникновение этхх молекул через клеточные мембраны едва ж зозисшю» .мало вероятно действие полимеров по механиз-здэткцшг» характерному для низкеталекулярных нмиаазолсодержа-щих соединений, Доеолом б пользу этого являются результаты изучения влияния полимэров на ферментативную активность на

■¿¡^■лСнуо^анш Солшажо сюхьаа октикойшшшоы Л и цакло-¿-вьедоздом. Сохранишь» актиьируюш.оХ'о влияния сополимеров на ГТ на фоне блока синтеза белка снимает версию о механизме индукции. Следует, по-видимому, исключить и стабилизацию фермента, препятствующую его деградации, как фактор повышения активности ГТ. Очевидно, что полимеры оказывают свое влияние через клеточную мембрану, однако его механизм пока ке ясен. Принимая во внимание, что изученные наш сополимеры стимулируют я фермента 1-й фазн детоксикации, з также обладают им-мурозтамулзруэсщей активностью, их дальнейшее исследование как ;?!1кг1'ор:в активации защитных механизмов организма представляется г;ерспо;стив'шм,

<:гк следует '-¡з наших. данный- тиофекол криводат к изши~-ьп» ¡ктивнлтй группы ферментов антитоксической заката язче-аи. ■ ¡¡ю'Жзльноы;,' кзд&жннь состояния гемоглсоина (метгзмо-глойыооЗр гзовзше), вплоть до глуботшх деструктивных -лзмеае-нш! ого молекулн» лизису зрятродаоз ш т.д. Подавляя активность ферментов I к ;2 фаз детошкацна.ксанобиогиков. нарушая транспорт кислорода к тканям и его утилизацию, снижая уровень ГБН з клетках ::>. стимулируя процессу перекиского окисления» тио-фено.1 резко иеттгег зацшгшю функции клеток» з том .числе до

ОТ!;ОЫ«ййО К сопутствующим пОопиийи'шлад. Пиэтииу учитывал ви-

шеизложеннне соображения о возможных механизмах токсического поражения клеток, как потенциальные препараты защиты, наш были вгбрзны: I) производное имидазола - фармакопейный препарат - клггршаесл активный индуктор ГТ„. цатохрома ?450 и 2) /1-донсл - который помимо индударущзго действия на ГТ и ряд ферментов детоксикащш является еще и прямым антиоксидан-том и по нашим данным предохранил гемоглобин о® окисления в метгемоглобян, а эритроциты от окислительного гемолиза тиофе-нолш, .Критерием защитного.действия препаратов являлся процент

- 14 -

выживаемости животных при интоксикации тиофенолом в дозе ДЯ^. Исследование активности ряда ферментов (ГТ, ГР» цитохром Р450» каталазы) при действии индукторов на фоне тиофенола показало, что и клотримазол и р-ионол увежчивают активности ГТ, ГР цитозоля и микрссом клеток печени, при этом понижая до пределов контрольных значений активность каталазы в данных фракциях (^-ионол действует более эффективно). В эритроцитах оба препарата восстанавливают сниженную почти в два раза активность ГР до исходного уровня, активность ГТ восстанавливается лишь под действием р -ионола. Исследования цит. Р450 указывают, что несмотря на увеличение суммарной активности монооксигеназной . системы активность водоэкспонировагоих изоформ понижается при действии тиофенола. С такими формами фермента связывается устойчивость организма к аллергенному воздействию. К сожалению, ни один из препаратов.не восстановил данной активности. Из двух препаратов только уЗ -ионол предохранил животных от гибели.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что в деток-сицируютем действии препаратов против тиофенола важное значение имеет антиоксиданткое действие. Действительно, р -ионол является, -^о-первых, эффективным антиоксидантом.и это его свойство полностью проявилось, например, в предохранении эритроцита от окислительного гемолиза тиофенолом; во-вторых у?>-ко- зтимулирует биосинтез ген,, который сам является эндогенным &т:-'"<'идантом и кофактором глутатион-зависимых ферментов ГР, ГТ; ГЛ, сшшающих пероксидный " стресс в клетке. Логично заключить, что и другие антиоксиданты0 обладающие аналогичными свойствами могут быть потенциальными гфепаратами, • предохраняющими от токсического поражения тиофенолом и аналогичными токсикантами. ■ ' .■■Анализ наших результатов биохимического исследования действия алифатических и ароматических меркаптанов .и'их дисульфидов на активность фракций ГТ печени и эритроцитов, метгемоглоби-нообразование и деструкцию эритроцитов проливает свет на при--роду и уровень токсичности этих.соединений: более высокую в случае ароматических систем..

Такое отличие' имеет ряд аспектов.Один из них состоит в различном характере .влияния. на .активность -ГТ как ддног6 щ

- 15 -

--------- •-

-х^. ¿»заах (оаьзчовдах ,чрс:ычоскс:<!у ¡йздейстза» «ткх :шсшт~ -¿.'Ж- сушжвчтю гюдазллу? ьг-псрос. овальной ~о о"е-

•до:::о.\;пч к тоням субстратам как з.л-ДН-1-ХБ, 1,2~.!:С<-4-?3,

- • четочт,*^ с?""" по с?бе тгляятс^ "го--

¡ю'иотик^ми,, и соотззтстзенко галоге»:ое.-?огы.,

й.трсбонзо»тн» яйтрошридины, оол&дааада» высокой токсичность» и дата канцерогенностью и-широтдатакны)» Таким обиязом. гго-

тскснчэокого ¿¿йстби« аоомауичсокил. чдаюм и га дисульфидов эти токсиканты, подавляя ГТ печени» повышают чувствительность организма к действию других веществ, способных г: реакциям нуклеофильного замещения с ГЗН„

3 отличие от высокотоксичных ароматических» нйзкотокслчешс алифатические ..тколн» либо не влияют на'активность печеночных ГТ, либо (при достаточно высоких дозах) стимулируит фермент. Значительно более опасным проявлением токсического действия арошти-•^с'-тг тколотз "йгитстся стаиудяцш процессов :з иля^й,

Пгг. гтом ситугция усугубляется ток. что тиол; запуск?:®:?« що-•дгосу перолскдашш, л превракащийся з дисульфкл» ггнкякески вссо-.т.нав.т.каотся путем тшл-дкеульфноногс обмена с Г2Н. ™од--дергявая процессы перокнслого окисления. Поскольку одновременно ~од де'!стл;;ем тиолов я йисудьф»угое чрояскода "горэ«енче-крозегворкк органов,, пренде всего селззешш, становится коуим, что эти соединения поражают прекдз всего скстену "*кросзо& хро-з.ч"., 3 этом ЗЕ8Н0 они аналогичны другим гемнчесхнк щт, такси как феЕВЛгидразш» • ароматические. амины» фенолы» хивода а др.

Тйол-^ие^дъфидкнй обмвк о ГЗН, :тооте:;аицге с участие« зро-матпчозкчх тнолоз особенно легко, и зиекаий место нэ только в эритроцитах, но; и печени,-'Приводит к быстрому кстокенкэ внутриклеточного' пула ,Г8Н и 'способствует возникновению нарушений, обусловленных глутатиоиозой-недостаточностью. Зто не только ослабление аитиоксядантной'защита, обусловленное прямым анти-оксйдогтйкй эффектом ГЗН» но и пошшекиз уровня активности тлутатйоя-зашсишх ферментов, в том числе ГТВ за счет возня-каше го дефицита ГЗН как кофактора этих ферментов. Очевидно, этот аффект усугубляет дефицит Ферментативной активности» обу-

- 16 -

словленный упомянутым выше ингибирующим действием ароматических тиолов.

Тиол-диеульфоднкй обмен с FSH имеет ewe один аспект действия ароматических тиолов - нарушение регуляторшх механизмов функционирования ГТ в клетке. Как известно, соотиоште ГсН/rssг является вгдашм метаболическим фактором, регулирующим активность ГТ в физиологических условиях. Нарушение этого соотношения в легко протекающих обменных реакциях с ароматическими дисульфидами (как метаболитами тиолов» так и всегда присутствующих в пиле примесей) может стать фактором,, нарушающим этот регуляторный механизм. К сожалению, этот аспект токсического действия тиолов не коследовзн.

Тиол-лисульфидшй обмен ароматических дисульфидов с SH-грушами белков обуславливает образование продуктов ковалент-иого присоединения фрагмента S-Ph к SH груше белка и "сшиваний" белков, что, ¡сок уже рассматривалось выи;е,обуславливает выраженное аллергенное действие тиофенола и других тиолов.

Убедительным яодтверящеккем сказанного является установленный нами факт активного профилактического и заактного действия не индукции ГТ под действием, дзкс- одного из самых активных индукторов этого фермента - клотримззола, а эффективного гидрофобного антиоксицакта - ß-пополз. Это открывает првкципи-ольиую возможность профилактики токсического действия не толь-' ко ароматических тиолов, ко и других ароматических соединений,, повреждающее действие которых обусловлено активацией перекис-шх процессов. Потенциальными антиоксидантами могут служить ряд фармацевтических препаратов антиоксидантного действия, на-пршер, фенбутол.

ВЫВОДИ

1) Установлен-различный характер влияния алифатических и ароматических меркаптанов и соответствующих дисульфидов на активность фракций ГТ г.еч.?ни и эритроцитов, метгемоглобинообразовзние и резистентность эритрсцитарных мембран. Это обусловлено отличиями в кислотно-основных и окислительно-восстановительных свойствах обоих классов меркаптанов и связанной с этим их реакционной способностью в реакциях тиол-дисульфкдного обмена и инициировании процессов перекисного окисления.

2) Ароматические меркаптаны и дисульфиды при хроническом

- п - _______________________

4) Ус;,Ш1оа1№Н.ф8КТ-рвзкой-(в-5-?'р'1:т)~ло>>заы!и1;м -Я »пи Вс'УШ 1"Г ьрптроцитоь гол доЯетвнег.: ¿рс.татичеокпх 71Ч;лсл' дисульфядоз '/1 чю Оцуь связано с йк":г:тсу-яиум дейстейем образу^ихся кисркх с -«.да*! кй.

Ь) Пок&зьао, что ир-азводшгс $*ззк-й<дяасль и аиадазола, в о1* числе фармакопеПше ггреччряг..; / д/бзгг.л,. -

^ответе гаутано м.?..50и чда сущмпъен!'.'.' ■/> и

•'"/>■'• и" тктииюсть ..'Т ч-.-ч•-■ни и йоьишаюг детоксициругчцун фу;ис-цик> печени по отвооени» к токсикантам чвАкт'-с^иауй ж*»!*»»»!.

'•) гнж-тмудэзсл:; Шиидьымч»

от острого токсического действия ароматических тислэв и дисульфидов, тогда как лшорастворимый онтиоксидант - ¡Ь-яонол полностью предотвращает повреждающие эффекты тио-фенола и защищает животных от его среднесмертельних доз.

Практические рекомендации

1. При оценке токсичности меркаптанов и разработке подходов прсфилакп» 1Т отравлений необходимо учитывать рвзлнчдой биохимический' механизм я^осуки; лдаВ-й'.ч.'Г'ка» ц врпмьтгтс-

2. ^л'нг гчгц.ра'п; гчолов ^особенно лрО'-кУГиччО'Мл ,> :< ¿;у е?0"Л ЧОЧУГЧ с. примечи чччу^ь'рплоч. >

г ген:.-; ,:-Ч:Чечч£., т,к. дне/.':; в чтдп^ьччч случаях чм'ч ;ч.:-;р гглп доПс.гпи на ГТ, сблудавт более чмина;,' ;«>-• н'кр.м-Щ".'- дечсччл,:.';, с^ч-отствута*.« тио;^. (¡брпьог.а-

олчлл ткодч'Я"' : гу^.-но/юм) т; пччьоелнческмх пре-дксу; ьфи/,-» 1£,чМч1чд!!су.дь|;ид)г -д-оеобнах ьступать в разкччи ткмдисульфйдкого обмена с ГЕН, приводит к снижению работ» глутатионзаеиоимну '^р'.-чнтчп, например гт.ГС'Д'Я, что ур'лксхзгл;?ь спщпч органи-лла от процессов перекис-ногс очислчшя при действии широкого спектра ксенобиотиков.

3. При разработке препаратов, предохраняющих от повреждающего действия меркаптанами, целесообразно учитывать несколько фактсров: -1) они- долям обладать сгамулирунтим действием на систгга Фзрмзнтои детоксикзшга; 2) обладать антиоксшшнткшв свойг'оэш; .3) симулировать синтез ГЗН в клетках. Зтим .условиям з большей стелет* от^чоет р -конол и другие :,*алотоксич-нье фнолыш» соединения, которые мчгут бить рекомендована,

слозленнай упомянутым наш шгибируниик действием ароматических ТИС,КОВ.

Тяоя-дисульфадкый обман с ГЗН шее? еще одак аспект дейст-ии ароматических тиолов - нарушение регуляторшх механизмов функционирования ГТ в клетке» Как известно, соотносений ГБК/ГЗЗГ является вашим метаболическим фактором« регулирувщж активность ГТ в фззиологических условиях.

Тиол-дисульфщшй обмен ароматических дисульфидов с ЗН-грувпами белков обуславливает образование продуктов ковалект-кого присоединения фрагмента Б-РП к БН группе белка к "сшивание* белковс что» как уже рассматривалось вышесобуславливает внраЕен-ноз аллергенное действие тиофекола к других тиолов.

Убедительным подтверждением сказанного является установленный каш-факт активного щюфояактического и'защитного действия не индукции ГТ под действием, даяе одного из самых активных индукторов этого фермента - клотримазола, а эффективного гидрофобного актиокекданта - • р -ионола. -Это открывает принципиальную возможность профилактики токсического действия не только ароматических тиолов, но и других ароматических'созашеш-а, позрззкдзтее действие которых обусловлено активацией' переккс-зш процессов» Потенциальные аЕткоксйдантт могут служить-ряд фармацевтических препаратов антиокенданткого действия, например, фенбутол.

ВЫВОДЫ

1) Установлен различный характер влияния алифатических и ароматических меркаптанов и'соответствующих дисульфидов на.активность фракций ГТ печеш и эритроцитов, метгемоглобинообразованио в резистентность эритроцктаркшс мембран.

2) Ароматические меркаптана и тсулы&ш при хроническом воздействии существенно подавляют активность микросомалыюй и цитозольной фракций ГТ печени, тогда как при острой - токсический 8®с-кт керкаптанов обусловлен быстрым развитием перекисных процессово

3) Подавление качекочных ГТ при хроническое-воздействии ароматических иеркаптанов и. дисульфидов понижает., антитоксическую функцию печени по отношению к токсикантам элзктрофилъг.ой природы (галоген- й нктрогфоизводннм- бензола и'пирщшка).

- II -

------------- .. 4)-.Установлен, -факт резкой- (тг 5г-7 р-;.г> у тохзаьиеЛГ.;1 ~-Т..Т17"

КЛда Г? аритроцитой ПО/. ар>Л.':.г; ПеиеНЛХ

»: адсул54здоз 1п vil.ro, что ыолет сыть связано с мтгагоу-ьел-м .¡М'етепем оЗр&зуш»с.» тер-юогмх т "'ЛИК'-; I';-:,

Ь) доказано, что проиееод:ше бензп л'.чизолл и . а

юм числе <?»)рм9К0!теЯк!!? (этя.тгь' ¿рАъглч:. ■

.л глотлетсгвухлие 1:ол.е.'ерг с г<,г.:00 ::7.г, я ье .'¡ч ■ '/;..л;; ■■яныл мсиийюсть П шч«пи л ливншаыт дотоксицнрупцуп фу^ис-цкю печет по отношения к токсикантам адактг'СФйлько» "у'.'ро"!;.

с: Псхазацо, что лр^/юоиднь« оенлцмил^чо.»» «.м^розо,«» 1 не защищают от острого токсического действия ароматических тислов и дисульфидоЕ-, тогда как лигюраотворикыя антиоксидант - -ионол полностью предотвращает повреждающие эффекта тио-фенола и защищает животных от его среднесмертелышх доз.

Практические рекомендации I. При оценке токсичности меркаптанов и разработке подходов профилактики- отравлений необходимо учитывать различный г.клхммическ»й «йхаяяпк дпйс"-"- аж'лтг-.ч-'л'л-;; -

кг.х

ЪХ>т ;::>£л;,рат;.; хйолть (осо^'-нн;. :)ро-.;;л;-;!Чеел.1Х; ь лч-лу сроей о1слсЛ/.емзет;; стерла: :: .л.юул'.тлло*.-. ¿-у .х/еет

ж леей»; , т.к. .ипсул г, -.тле. и.ллх слу-'а.чх- елл^'кер лл^оёллл^-уг-Ь'Цл пхх ;;а ГГ, облета:;''' ''елее у-лу^г/ 1<н~

,.1бкр./!х,;:'"; дейошим, гикелл соо/тетотэднли- т.ноли. ч'р.пеота-арома'['5[-:ес;-л:м;: тко.ла'л* лтлл-чологл; г. ке': аГол^ч^лллх г:;:е ерщчлтилх дксу.-Л'Склов Ш^&ылисульЗДд), от.особшх уступать в реакции тиолдису.г.ьфидкого обмена с ГБН, приводит к снижению рабеп? глутат?';"1-а-:!с:1КиХ ^с-ру.онт'.-ч, аакр^лр ГТ.ГЫТ. что снквгкт аф{екгивко;ть гмции; орг&здш от процессов переписного окисления при действии широкого спектра ксенобиотиков.

3. При разработке препаратов, предохраняющих от повревда-ящеге действия меркаптанами, целесообразно учитывать несколько факт.~рос:'"} от должны обладать стимулируьжм деПсгьием на скст^/л Ферментов детоксикаши; 2) обладать антисксндантншж свойствами; 3) стимулировать синтез ГБН в клетках, Зтим условиям з большей степени отвечает р> -ионол и другие малотоксич-нье фгшыш» соединения, которые могут сип рексшадосакы,

- 18 -

словленный упомянутым выше ингибирумцим действием ароматических тиолов.

Тиол-дисульфидный обмен с ГБН имеет еще один аспект действия ароматических тиолов - нарушение регуляторных механизмов функционирования ГТ в клетке о Как известно, соотношение Г5Н/Г55Г является важным метаболический фактором, регулирующим активность ГТ в физиологических условиях.

Тиол-дксульфидный обмен ароматических дисульфидов с БН-грухшами белков обуславливает образование продуктов козалент-.кого присоединения фрагмента Б-Рй к БН группе белка к "сшивание" белково что, как уже рассматривалось выше¿обуславливает выраженное аллергенное действие тиофенола и других тиолов.

Убедительным подтверждением сказанного является установленный наш факт активного профилактического и: защитного действия не индукции ГТ под действием, дане одного из. самых активных индукторов этого фермента - клотриыазола0 а эффективного гвдро-фобкого антиоксиданта - ■ у&.-ионола. -Это открывает принципиальную) возможность профилактики токсического, действия не только ароматических тиолов, но и других ароматических'соединений, поврзкдающее действие которых.обусловлено активацией переккс-внх процессов. Потенциальными анткокевдантамя могут служить• ряд фармацевтических препаратов антиоксидантного действия, например, фенбутол,

ВЫВОДЫ

1) Установлен различный характер влияния алифзгических и ароматических меркаптанов,и соответствующих, дисульфидов аа.активность фракций ГТ печени и эритроцитов„ метгемоглобикообразовагше и резистентность эритроцитарных шлбрав.:

2) Ароматические меркаптана и дисульфида при хроническом воздействии суазствзнно подавляют активность мккросомальной и дитозольной фракций ГТ печена» тогда как при острой - токсический аффект меркаптанов обусловлен быстрым, развитием перекиешх процессов»

3) Подавление печеночных ГТ при хроническом.воздействии ароматических меркаптанов и. дисульфидов поникает, антитоксическую функцию печени по отношению к.токсикантам электрофилькой природа (галоген- й кктрощшзводннм-бензола и-пиридина К

- 19 -

•для -про^йлаглики-отравлений тш^еаолагя к другими ксвкобзсгм-кагк с аналогичным механизмом нозравдаэдего действия., •

4. ПзрсшктаЕНыш для дольаейяис наследований в стимуляторов активности ГТ являются шздазолсодэркедяэ соединения, в том 'числе к соотаетстзуксшэ сополимеры.

СПИСОК РАБОТ, ОШБШОйДШХ ПО ТЗЙ! ДИССЕРТАЦИЙ I» Мцдукцая производннш шодазола биохимически систеы датошисацик лекврстЕеккшс веществ к ксеш5зютикоз.//Сб. Актуальные проблемы лекарственной токсшсологш.-Ы. »1930.-0.72.

2. Исследование гепатотропкого действия ткофенолом в эксперименте.//Сб.Роль факторов окруааадей среда з комплексной влиянии на здоровье человека.-Л. гЛСГШ» 1991»

■ 3. Изучение взаимосвязи структуры производная шндазола и пиримидина"с аффектом индукции цитохрома Р450 к ГЗТ./УСб, Создание лекарственных средств.-Ы. „1992.-0,78..

Зак.96а. Подписано к печати 2S.04.93 г. РШ. Объем 1,25 печ.л. Тираж 100 экз. Булата 60x84 1/К Типография ВДНЮК