Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

ВЛИЯНИЕ ГАЗОВОГО СОСТАВА, ТЕМПЕРАТУРЫ И ВЛАЖНОСТИ ВОЗДУХА НА УСТОЙЧИВОСТЬ АЭРОЗОЛЕЙ ПРОТИВОПАРАТИФОЗНОИ ВАКЦИНЫ И МЕТОДЫ НЕПРЕРЫВНОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ ИХ И ДОЗЫ

ВАК РФ 03.00.02, Биофизика

Автореферат диссертации по теме "ВЛИЯНИЕ ГАЗОВОГО СОСТАВА, ТЕМПЕРАТУРЫ И ВЛАЖНОСТИ ВОЗДУХА НА УСТОЙЧИВОСТЬ АЭРОЗОЛЕЙ ПРОТИВОПАРАТИФОЗНОИ ВАКЦИНЫ И МЕТОДЫ НЕПРЕРЫВНОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ ИХ И ДОЗЫ"

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА СССР; ; :

. КАЗАНСКИП ОРДЕНА ЛЕНИНА ВЕТЕРИНАРНЫЙ ИНСТИТУТ

■".■■.■л;/:.^'; У км. Н.Э. БАУМАНА ■ г-:

■'V, ^ у ^^ " ; 'л - На правах рукописи

г.:.' V л: науменко V':;; >;'

-."■...". ■ .'/■ Александр Евтихневич * < - \ ' У;...:- '-'■

Влияние газового состава, температуры иЩ

аэрозолей протнвопаратифозной вакцины и методы непрерывного определенияV концентрации их и дозы

> ' . 03,00.02 —БИОФИЗИКА ^

;;':.■-. АВТОРЕФЕРАТ ■

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Кагань—1979 : _■■■■'■■

/"'■' Работа выполисна -на кафедрах эпизоотологии зг'физики '. Донского сельскохозяйственного.института. :^ ^■■х' ':'-:'::-.';^: ' "■'...■■■: ; ^

Научный руководитель — доктор ветеринарных наук про-* •Ч; ■ V Ч ^'/- у ' ; > фесоор В. К. Паракин. .

/ Официальные оппоненты: заслуженный деятель науки >У■■'■■■ ■..■;.■■.■ РСФСР, доктор ветеринарных

.'■■ у-у ."І наук .профессор Селиванов А. В.;

/■.г'у-У'".:' у;, у кандидат биологических наук

Чу у уЧ,У.-•.',;.' ч;/-учу , старший научный , сотрудник ^■уЧ-- Ч'у; і'.;-. .'-Ч.;'"у; Тукшаитов: Р. X. -Ч^'...- у;.

Чу Ведущая: организация » — Всесоюзный научно-нсследов'а- • тельский ветеринарный/икстнтут пти'иев:>дстіза (ВИИВИП). Ч

. Защита состойтоя « Ху - Л '979 "г. в « / ^ї > -часов на :

; '-■уС заседаний сиеииллизировганного совета К. 120.22.0 Г н Казанском ордена Леннна 'ветеринарном институте и.ч."Н. Э. Бау- »:■ ' ■ мана (420074, Казань, ветеринарный институт). ■,;■,-■; 4-у■: ,■■':.: :

■ ...■ С диссертацией можно' ознакомиться-в 'библиотеке- Казан-. , . 1 . свого ордена,' Ленина ветеринарного1 института им.; Н. Э. Бау-. у мана. 1 ; ч- -Ч.у '■■■■'\ -уЧу;-■' ^Ч'1"■ ■ Ч;' '

- -■■ .у-у Автореферат разослан «* ^ »у 1979 г, "■

: .'/'■,■ Ученый секретарь специализированной) совета у уЧ у у .-

■V--.. Ч-. у/ Ч\Ч' у ■■■у'.,.■ Верхолетов В. А.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ • 1 Актуальность проблемы

В связи с переводом животноводства на промышленную основу .возрастает , роль <груптювых методов профилактики лечения ряда заболеваний сельхозжшютных, Работами многих отечественных (С. Н. Муромцев, i960; Н. И. Александров и Н, Е. Гефен, 1962; В. А. Лебеднмский, 1971; И.,Е, Мозгов, 1961; В. С. Ярных, 1&62, 1969, 1973; А. В. Селиванов, 1966, 197.2; И.-М. Бондаренко, В. И. Бурцев, 1970, 1975;' В.'Д. Соколов, ,1972,. 1977j И. А. Бакулов, 1975 н др.) и зарубежных ■ (V. Andre, H.Móhlman, Р. Dorn, V. Schulz, К;, Hagen и др.) ученые в последние годы показаны значительные преимущества аэрозольного метода вакцинации и терапии w возможность применения его в жи&отновоаст.вє. Однако внедрение его в повседневную ветеринарную практику -сдерживается из-за нерешенности еще ряда, биологических'и физико-технических гтро-, блем, в частности, проблемы, обеспечения ввода в -организм животных за сеанс ингаляции .необходимой дозы препарата. Проблема; обусловлена неустойчивостью аэрозолей биологически активных веществ, спецификой условий использования их и наличием у животных защитных механизмов, . препятствующих поступлению в организм чужеродных веществ.'Для решения этой проблемы сделано многое: изучено влияние раз- . меров частиц на скорость процессов физического разрушения аэрозолей и степень проникновения vi задержки частиц в органах дыхания; исследовано действие таких физических факторов, (как тем"перату.ра -и .влажность іюздуха на жизнеспособность микроорганизмов, находящихся во взвешенных в воздухе ка-плях аэрозолей; установлені роль суспендирующих сред в повышении устойчивости аэрозолей. Закономерности же изменения основных характеристик таких аэрозольных систем 'За время »их функционирования* влияние «а устойчивость их некоторых компонентов дисперсионной среды, в частности, газов — продуктов выделений животных,; исследованы мало.

Не разработаны объективные » приемлемые;в широких; условиях" методы - контроля основных характеристик аэрозолей вакцин.и лекарственных препаратов и методы контроля инга-лируемой дозы. 'V '.." :

Цели н задачи исследования

; 1.' Исследовать возможные 'изменения физической и биологической устойчивости аэрозолмрованны« живых вакцин в условиях ¡контактирования их с такими , газами, как - аммиак, сероводороа, углекислый газ. ■ ■

: 2. Исследовать влияние - на физические характеристики .аэрозолей 'биологических препаратов следующих факторов: физические свойства жидкостей, продолжительность функционирования аэрозольной системы, размеры <н геометрия помещения и .других. ' . ,. ■' , . ...... . . - '

3. Предложить объективный и приемлемый в различных .условиях метод,,-контроля массовой концентрации аэрозолей вакцин'лекарственных препаратов и метод контроля инга-лнруемой дозы. '-''.- ' ; ,

Научная новизна результатов:: г

' - Впервые .исследовано влияние газон — щроауктон выделений Жглвопиых на.устойчивость аэрозолей биологических препаратов и уровень.постпакшшальных изменений в сыворотке крови ЖИВОТНЫХ 'И -скорость наступления их: '.Обоснована .принципиальная возможность определения массовой концентрации аэрозолей б иол отчески активных ве-' ществ оптическим абсорбционным методом. . " - ' Показано, что при -периодическом режиме, п&ревода .препарата в аэрозольное состояние можно стабилизировать массовую концентрацию-« .концентрацию микробов (при использовании живых вакцин). " . .; ,

Предложены метод и устройство для.'автоматической ста-' йилизадии концентрации аэрозолей на заданном уровне в течение сеанса ингаляции, ' , ' , ;

. .^.Ч.'.л Практическая ценность работы ~

Использование результатов наших .исследований в прак-" тике аэрозольной .вакцинации и аэрозольтератгин сельскохо-■ зяйственных животных сделает эти процессы более КОНТрОЛИ-;

руемыми, позволит значительно повысить их эффективность.

Предложенные нами метод стабилизации ^концентрации аэрозолей л устройство для реализации его применяются в ряде хозяйств Ростовской облает^ и Татарской АССР. Секция животноводства научно-технического совета лри Ростовском областном Совете народных депутатов рекомендовала их к внедрению в хозяйствах области. .-;■ . -■'.".

Апробация результатов исследований

Основные положения диссертации доложены: : 1

1. На II Всесоюзной-конференции по применению аэрозолей в народном хозяйстве,'г. Одесса, 1972 г.

1 2. На III Всесоюзной конференции1 по аэрозолям, г. Ереван, 1977 г. ■ ■ •

3. На ежегодных научных конференциях Донского сельхозинститута (1973—.;1978 гг.).

4. На заседании секции животноводства научно-технического совета при Ростовском областном Совете .народных депутатов, 1979 г. . „ >

- Публикация результатов исследований

Основные положения дисссртацишизложены в Ю статьях, опубликованных с'1972 по 1977 год: в ■материалах 2-й Всесоюзной конференции по применению. аэрозолей в народном хозяйстве, г. Одесса (1); и сборниках «Проблемы ветеринарной санитарии», г. А1осква (2); .в журнале¡; «Ветеринария», г. Москва (1); в трудах ДонСХИ, ст. Персиацовка (6) ; -

Объем и структура работы • \

Диссертация изложена на 148 страницах машинописи и состоит из введения, пяти глав, ш.которых три посвящены соб-ственным-тасследовалиям; заключения, выводов, и предложений и содержит 31 таблицу, 14 рисунков и фотографий. Библиография включает 173 научные работы, тз которых 51 — иностранная." В приложениях приведены обоснования ряда методик, разработанных нами и использованные в исследованиях; .. сведения о предложенных '. образцах технических устройств для измерения концентрации аэрозолей и автоматического регулирования работы распылителей; документы о внедрении. Приложения содержат 6,таблиц и 6 фотография.'

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ;

• ? : Материалы и методы .. Л :

Лабораторные исследования -проведены в отатаческойка мерс объемом 0,7 м3. . ' • : * - -.' .

В качестве моделей аэрозольных систем использовались аэрозоли вакцин; протнвопаратифозпой из штамма Т5-177; Ла-Сота; формолгзакцян ы; растворов: фи зи оло ги ческ ого; 5%чгого и 10%-иого глицерина; 5%-ного сухого обезжиренного молока; аэрозоли йодтриэтилепгликоля.•- , , .*:■■.■ ■

"Для определения размеров частиц аэрозолей и распреде-* лення их но размерам аспнрированные пробы воздуха с аэро: золем осаждались.электрическим колем на стекла.:- Осадок обследовался или 'непосредственно или после, фотографирова-: пня (выполнено б. 300 фото). Результаты измерения обрабатывались по методике, оснонашюн на логарифмически нормальном законе распределения, применимость которого к изучаемым аэрозольным системам проверена нами по критерию. «Ха» — хи-хвадрат, * "

• ^Массовая концентрация аэрозолей н сс относительные из-, мепския под влиянием «тослсдуемых факторов' определялись прибором ФЭН-90, :для;которого установлено наличие тесной, корреляционной 'связи (г=0,83) межзу фототоком л массовой концентрацией. В'производственных условиях .измерения концентрации проведены разработанным* нами устройством. : - :Концентрация, живых микробов в камере определялась известными методам'!!.-Так »как применяемый в подобных исследованиях зспнрзшюнный -метод отбора проб имеет.недостатки (а именно: воздух отсасывается из пристеночных участков камеры, где концентрация аэрозоля от опыта к опыту может-изменяться значительна, чем внутри камеры; ввиду малости объема ннокулума возрастают Ошибки и за счет неравномерности распределенпя-микробон в суспензии, и за счет различий в объемах.высеваемою материала), использовали еще мо--днфицнрованный нами осадочный метод: в момент .отбора-пробы определенный объем,воздуха в'камере изолируется от остальной массы его, и каплтг вакцины, оказавшиеся в этом объеме, осаждаются непосредственно па питательную, среду. Этим устранялся основной недостаток седимелтационного ме-, тода. Точность.определения концентрации повышается, т., к. пробы можно, отбирать из любого участка камеры; объемы, проб и 'шюкулумов менее вариабельны; меньше возмущения в камере в момент отбора пробы.

• Для оценки -измерения иммунологической активности;аэро-1 золированных вакцин ¡подвлиянием исследуемых факторов, помимо исследования-изменений Ж И 3 H С С П О СО б 11ост,к, ммкроор;' ганизмов, определял ись серологические н' биохимические- изменения в сыворотке 'крови, кроликов массой 2,5^3,5 кг, вакцинированных в нормальной газовой среде... и прц;'налнчнн ir камере ам-м.иака; ■. ■',,'v '-л 'V v.-/ }

И р и меч а н и я.1. По вопросам определения физических! параметров .аэрозолей автора консультировал ' кандидат технических"наук Тахо-Годк

А. 3, ■■ ■ >,-■.. -V ... ' ■ ■■

.•2, Опыты с живыми вакцинами'выполнены, при участии Калшшчёкко :Э.;Г1., производствеиные'исследоваиия — совместно с Веремсевым А. Н,

РЕЗУЛЬТАТЬГ ИССЛЕДОВАНИЙ'^ , : ^

, I. Изменение биологических параметров аэрозолей живых вакцин к условиях контактирования их с агрессивными газами

Закономерности -процессов абсорбции распылениымнжид• .костяMiH растворимых ;в »их газов достаточно ,полно изучены: экспериментально (A. Gug-ег, В. Tobler, R. Н. Farmer, - 103}, .1935;:К. Н. Шабэлин, 1^40; R. С. L. Bosworili,yl946) ^теоретически,- Составлены решены дифференциальные уравнения' массоотдавд для медленно оседающей еферичебкой кашли, при !! некоторых частных и 'более-общих граничных условиях (И. Тл ; Плит, 1965). Распыленные , вакцины могут; . абсорбировать . аммиак, сероводород,'углекислый газ,,т. к. они готовятся на водных растворах. Проведённый нами анализ скоростей про-v цессов абсорбции и .достигаемых при этом .концентраций по; казал возможность .накопления) указанных газовV-в каплях вакцин; а так как эти агазы вступают в реакции, с .водой,; может изменяться'рН среды, в/которой находятся -микроорганизмы; п конечном счете это приведет к дополнительной ни активации вакцины,, переведенной в аэрозольное, состояние.: * :

Для экспериментальной проверки предположениГГосушестг В Л СНЫ следующие две Группы ОПЫТОВ: ■ '.. :;.!- . . .. '.;"■/..

•/', , а) исследование !по методике двухфакторного диснерсион; •ного анализа Жизнеспособности микробов.в аэрозолях в зависимости от фактора А — относительная влажность воздуха {его градации: Ai-гсвыше90%; Ai —80-тт90%; As—60—70%) н фактора В —газовый состав возаула (его градации: Bi — ^нормальяый^газовый-состав; Вз, Вз. В< — наличие в воздухс . соответственно- COi^HjS ; н NHj в концентрациях!на . уровне ¡предельно допустимых для животноводческих помещений);;

б) исследование антигенных свойств азрозолнрова н н ьі х вакцин в зависимости от газового состава воздуха (нормальный газовый состав <н примеси NHs) .

I группа состояла -из 75 опытов, которые ставились сериями по 4 опыта в каждой; внутрн серии условия опыта различались лишь градациями фактора Б.

В каждом опыте в течение 5 мин распылялось по 6 мл. живой ващ-ины с концентрацией микробных тел'10® в мл. Исследуемый газ'вводился в камеру после распыления ,п отбора первых проб для определения концентраций (массовой и живых микро&ов) и размеров, капель. Последующие пробы от- , бнрали-сь через 30 и 60 мин. от начала опыта. Всего осуществлено 225 измерении .массовой концентрации, 198 измерении концентрации Живых микробов.

Установлено следующее:

— частицы аэрозоля довольно однородны по размерам: в первых дробах 997« частиц по диаметру не более 5 мкм; в последующих пробах степень однородности возрастает;

—.наличие в составе дисперсионной среды Ntb, H*S н СОа не оказывает существенного . влияния на размеры частин, ,и функцию распредел-ешш по размерам;. .

— массовые -концентра цші аэрозолей для одних и тех же моментов времени в контрольных опытах и прл наличии в камере NHa, HiS л СО.' различаются несущественно.

На этих выводах (»снована наша методика исследования биологической устойчивости тех же аэрозольных сисггем. Изменение числа выросших колоний (а следовательно, и изменение концентрация ж>шшх микробов) в пробах, отобранных в одинаковые моменты upe мен и, может произойти вследствие" дегидратации капель (фактор А), вследствие абсорбцш газов (фактор В") л вследствие «изменений общей клеточной концентрации. Но эти последние происходят только под влиянием случайных-факторов, упомянутых выше, т. к. если процессы абсорбции газов не изменяют массовой Концентрации, то не будет изменяться под влиянием этого фактора и частичная концентрация (благодаря значительной однородности аэрозольной системы по размерам 'частиц), а следовательно, н общая клеточная концентрация (нет основания считать, что , капли с микробами в присутствии NHs, HiS или COi будут оседать 'быстрее безмикробных частин). Чтобы выявить влияние каждого фактора (Л, В и фактора случайности) на изменение "жизнеспособности микроорганизмов, экспериментйль- . лыс данные о числе выросших колоний обработаны по мето-

-дййё Двухфа-кторного неравномерного . дисперсионного:комп-. ллекса, 'причем данные вторых проб составил« один такой 'комп-: леке, а данные третьих проб — другой; / ."■ <. , V

; Анализ^полученных результатов. приводит■ к таким „выводам'. 7 V" • ■ ' ■ -:',: ; ' ■ ; ' — ; ■ 1. Влияние процессов абсорбции газов достоверно на уровне'значимости 0,05. Сила влияния во вторых пробах — 0,168; в' третьих ~ 0,160, т. е.она ла определенном' интервале времени мало зависит от длительности этого интервала, Возмож-1 но,'это объясняется тем, 'что насыщение капли газами до рав-; новесной "концентрации происходит быстро. ■ .

■'.2. Наши.опыты подтвердили влияние на жизнеспособность ; микроорганизмов; . находящихся. в каплях аэрозоля, уровня относительной влажности воздуха, причем сила влияния возросла от .0,316 во вторых пробах до 0,540 —в последующих, С ^понижением- влажности уменьшалось- число вырастающих . колоний. .'• ; • ■ -' . ;

_ Чтобы определить степень влняшш каждого из Исследованных газов п отдельности, для всех опытов вычислено уменьшение числа .выросших колоний во шторыя и третьих пробах относительно первых. Затем для: каждой градации факторов'А н В определены средние арифметические значения уменьшений''!! достоверность различия средних по критерию Стьюден-та. Результаты эт.их расчетов - показывают, что уменьшение числа выросших колоний происходит при повышении концен-трацик^всех исследуемых газов,' попри наличии СОз и ШЗ уменьшения достоверны не во всех, проб ах. При абсорбции аммиака, - снижения -жизнеспособности .микробов^ наиболее значительны .и достоверны (кроме третьих- проб при влажности свыше 90%). .г/.. " " ■ ■ .

<'[Влияние аммиака на .'Жизнеспособность микроорганизмов проявилось и при концентрациях его, соответствующих 0,5 предельно-допустимой нормы (,по результатам - дополнительных "10 опытов)/хотя-и в меньшей степени , .и только при низких относительных влаЖностях воздуха. :1

'..,- 10 опытов, доставленных лри температуре 11 — 13°С, доказали. 'что и'при;низк'их температурах повышенное содержание в' воздухе МНз'И.НяЭ может привести к снижению жнзнеспособ-кости микроорганизмов, находящихся в каплях вакцин. - ' Вторая -группа опытов состояла' в Изучении биохимических и серологических изменений в-оргаипзме кроликов при вак-. цинация.нх живой и ротивопар а тифозной вакциной, приготов-ленигой :на ;2%-лом растворе глицерина,. в условиях лор-маль-

ного газового состава (I группа — & животных) и При нали-чип ЫНз (II группа — 8 животных). Контрольная группа (5 животных) не вакцинировалась. Пр;т 1-й вакцинации животные чшгалнровал'И. при мор но. .по 1 • 10° микр. тел, при 2-й (через 10 дней) —примерно, но 2 • 10а. Температура воздуха в опытах — 19—2ГС, влажность его около 80%. Пробы крови взяты через 10, 20, 30, 40 и 70 дней гм начала опыта (в дальнейшем .пробы № 1, 2, 3, 4 и 5). В каждой пробе определены: концентрация общего белка в сыворотке крови и содержание белковых фракций (в г%), а также титры специфических агглютининов (в ИЕ и logs). Средние арифметические значения указанных величин и их ошибка по каждой грулпе и пробе приведены в таблице 1.

- Таблица 1

Изменения общего белка, белковых фракций и гитров специфических агглютининов в сыворотке крови кроликов контрольной и опытных групп {средние арфметнческне значения к их ошибки)

Общий белок в г% Бета- н гамма-глобу-лпны в г % Титры спецкфич. агглютининов л ИЕ к loga

>о о с. а контр, группа 1 опытн. группа 11 опытн. группа контр, группа I опытн. группа It опытн, группа I опытн. группа 11 опытн, группа

I 6.40 6,73 6,59 1,83 2,14 .1,94 070 580

±0.27 ±0,13 ±0.11 ±0,12 ±0,12 ±0,06 (9,39) (9,13)

2 6,43 7.18 7,36' 4,86 2,26 2,36 3660 1970

±0,13 ±0,19 >±0,26 ±0j07 ±0,06 ±0,05 ;(.U,84) (1094)

3 6.63 6,90 7,01 ада . 2.24 2„16 3470 1170

±0i2S ±0,29 ±0,31 ±0,08 ±0,03 ±0,66 (11,76) (10,19)

4 6,33 6,95 ■ 6,98 1.91 2,17 2Л8 '' 1380 1050

±0.28 ±0,13 ±0,20 ±0,08 ±0.04 ±0,08 (10,43) (10,03)

5 6,65 6,89 : 7,02 2,11 . 2.41 980 &15

±0,25 ±0,03 ±OJ5 ±0,OG ±0,09 ±0,03 (9,95) (9,84)

У ншакцп.ни-рюван'ных животных все величины были в норме, У кроликов опытных групп концентрация общего белка во ■всех проба,х выше, чем, в .контроле, но если в I группе после 1-й вакцинации уровень белка возрос на 0,33 г%, то во II группе к тому,же сроку — только на 0,19%. Во ¡вторых пробах концентрация белка поднялась до 7,1в и 7,36 г% соответственно в I и II группах; в последующем уровень белка снизился, различие между группам1« незначительное. Рост концен-

грации белка произошел в основном за. счет роста бета- и гам'ма-глобулиновых фракций, уровень .которых во всех пробах выше, чем в,контроле. При этом; у животных 1-й группы в первой пробе рост на 0,31 г% (различие средних достоверно) , а во П-й группе рост на 0,11 г%" (различие недостоверно). В последующих пробах уровень этих фракций был, примерно; одинаковым.

Титры специфических агглютининов ;у животных 1-й группы в .первых трех пробах выше, чем у животных 11-й группы'; к моменту взятия 4-Й Пробы тигры к обеих группах сблизились и-оставалвсь, примерно, одинаковыми до конца опыта.

Таким образом, установлен факт запаздывания наступления-биохимических изменений н образования специфических антител.в сыворотке крови животных, вакцинированных в присутствие аммиана, и .несколько меньший уровень этих изменений то.сравнению с аналогичными показателями у животных, вакцинированных *в нормальной газовой среде. Причиной этого, . по .нашему мнению, является ухудшение антигенных 'свойств (вакцин, контактировавших с .аммиаком, в' присутствии'-которого происходит снижение жизнеспособности микроорганизмов, . ,.- .

II, Изменение физических параметров аэрозолей вакцин , в течение сеанса ингаляции .

. а)-закономерности распределения по размерам аэрозолей жидких вакцнн

.Так 'как используемые .при групповой аэрозольной обработке ■животны.х пневматические - ра с п ы ли т е л и жидкости создают полидисперсные системы частиц, причем и при наличии в генераторе сепараторов образуются частицы со сравнительно большими 'скоростями седиментации,\ то распределение по размерам' аэрозольной системы, образовавшейся 'в камере (помещений), будет отличаться от распределения по размерам системы частиц, выходящих-из генератора.: При решении вопросов, связанных с определением лнгалируемой дозы, -необходимо исходить из параметров первой/из упомянутых систем. Нами проведено исследование распределения по размерам аэрозолей для следующих моментов существования их: 1) через 1 минуту после окончания распыления (в дальнейшем именуется как первая проба); 2) через 25 и 55 минут от того же, момента! времени (2-я и 3-я пробы соответственно).

Температура воздуха'"й опытах Í9—21°С, относительная влаж- i 7 ■■'.*'.. пость его —'80—90%. •' , ; Л'. ' ; '.; г. -Д.- . >'' ■ г- Л'.:■ ■',

Данные опытов •свидетельствуют о сравнительной УЗОСТИ: У ■ ' диапазона 'размеров частиц псех жидкостей. Так/в 1-х пробах , ' . - капли размерам до'5'мкм включительно в аэрозолях физиоло-... - . :.."-■' Ническопо раствора составили 99,4% гасех частиц; в '.аэрозолях ' ■ - 5%-ного раствора глицерина, форм ол вакцины, 5%-ного раство--. - -'.'■ ра молока,"мясопсптонпого *б\гльона и 10%-ного раствора гли- V ::-*■' церина — соответственио 08,3; 97,84; 97,76; 95,1; 92,7%. В по: -';

' следующих пробах доля; мелких капель возрастает. В аэро- ■ .V, ч. ;;,.золях*физиологического растворадоля'капель до 5 мкм дна- '; У; г метром за .час существовании аэрозоля увеличивается с 99,4% V

1 до ,99,95%;в аэрозолях 10%-ного раствора глицерина доля та1 '., : v 1 ■' ких же капель возросла за час с92,6&% до 98,8%; ваэрозолях ; :';. ■'-. ' формол вакцины л мясопептонногр бульона уже' через 25 МИН. .; '

•после окончания распыления не обнаружено; частиц крупнее ■ '■;- '■-' -;.;-.-,: 5 мкм. ■ .' ■ ' ■'■■■ ' .[';■; ;"/

■ , Amaлиз средних объемных диаметров; (\v частит исследо- .

ванных аэрозолей показывает:. , . ..

.1. Чи-сленные значения средних объемных диаметров d¿ в , :

1-х пробах, невелики: от.2,20 мкм у аэрозолей физиологиче- . ' 'ii, ского раствора до 3,76 мкм у аэрозолей 10%-ного раствора ' -'у глицерина. .- ,. ■■■■■■ ■ ■

2.' Различие - между наибольшим и наименьшим d? частиц ■ ■ ^.различных жидкостей меньше, чем а 2 раза; если же рас- • -; ; сматривать- только следующие ' жидкости: - формолпакцину, /

V; 5%-йые растворы'глицерина и молока й мясопептонный буль* . - ■' v.;-■"■•■ он, то при среднем объемном диаметре частиц этих жидкостей : .у -. 2,88 М'Км вариация.составляет acero 0,3%. '■ ."i : ,'.;.' " :

' - 1 3. -В .последующих (пробах средние объемные диаметры Д'"': '■'•.■' уменьшились," но не одинаково .у различных жидкостей: -.у .V'.'":■':,■■ ' '.аэрозолен физиологического раствора з'а 25 мин.' áv умснь- , ' шился в 1,01 .раза, за 55 мин. — в 1,03 раза;* у аэрозолей фор- : : молвакцнны' -и м*ясопеитонного бульона уменьшение за .■:.'{;■;■.: у 25 мин,'" в 1,26 и'1,30 раза соответственно; , а у.аэрозолей л: , .'; 10%=ного раствора глицерина — в 1,23 й 1,41 раза за 25,и .. .м». ■>г ■ 55 мин. соответственно. Характерно то, что у всех' жидкостей

(кроме физраствора) уменьшение-d^ за 25 мин.;''примерно, ■ 1 / одинаковое, . Л' ■', . ■ ' 1 .■■ '■'"-■'.

;; * .';'.■'■ б) закономерности изменения концентрации аэрозолей - вакцин ^

: ' v ' Наши выводы о закономерностях изменения массовой кон: : , ■ цеитрации аэрозолей, занимающих небольшой объем (и силу Л,;';

чего еще иа 5тапе. образования системы происходит выравнивание концентрации--по всему об-ьему) ■ совпадают"с'выводами ■других исследователей этого вопроса (Л. И. Громыко с соавторами, 1966; И. И. Бопдаренко с ■■соавторами, 1970, 1971; ; В.-Е. Зуев, 1972):

1. Скорость нарастания концентрации аэрозоля п процессе ' образования .аэрозольной'системы нрн .неизменной производительности генераторов будет постоянной только до некоторого значения концентрация, начиная с которого она (скорость) убывает.'Эго можно объяснить ростом потерь аэрозоля за счет конвективной коагуляции частиц. . . ' ■

2. Уровень концентрации и определенный момент времени, а также-скорость нарастания.се зависят от температурно-влажносгных условий распыления п от физических свойств жидкостей. Влияние этих -факторов сводится, по-видимому, К тому,:что ¡изменяется функция распределения частиц по размерам, а, следовательно, изменяются скорости седиментации

■ частиц. ■

'3.-Убывание ¡концентрации после прекращения генерирования' происходит неравномерно, причем, температур но-вл а-ж; носпные условия оказывают существенное влияние. Наибольшие изменения происходят при влажности около 80%; Пан-' меньшие ¡изменения концентрации при ннзких влажиостях воздуха,, но н уровень концентрации для начального момента ' времени'.и соответственно для'других .проб ниже, чем при высоких влажностях. Следовательно, при низких влажностях уже в процессе распыления жидкости происхсЭдит значительное испарение водыиз капель вакцины, в следе тане чего капли становятся более однородными по своим размерам, причем, вырастает доля самых маленьких, тюэтому оседание капелек происходит медленнее. При влажностях свыше 90%, хотя скорости оседания, больше, чем при других'влажностях, но "сами частицы все же остаются более крупными, изменения концентрации меньше, чем при влажности около 80%,

...Предложено несколько .уравнений, описывающих процесс изменения концентрации аэрозолен (Н. Müller, Гольдмащ 1928; В. С. Ярных, 1972; Э. В. Суда, 1975). Некоторые из них относятся только к- периоду образования системы;" другие же достаточно полные, но сложные и решаются на ЭВМ. Вы-' шкая степень однородности ■ частиц аэрозолей вакцин Si£ n лекарственных препаратов по размерам, сравнительно, небольшие изменения средних объемных диаметров .частиц за 30;—40 мин. при определенных услогшях существования аэрозолей: да ют.возможность описать динамику концентрации ре-

альных систем аэрозолей вакцин' уравнениями для; монодисперсных аэрозолей. Мы составили такие уравнения для уело-" вий, которые осуществимы 'В небольших помещениях:

Ст — 1 — с| —для этапа образования системы .и ■ (1)

С .

С,„ = ---— — для этапа ее разрушения. (2)

I +аСа£ .

В них: с0 — удельная производительность генераторов;

С0 — концентрация азрозолт в начале эта<па разрушения; ' . А и а — коэффициенты относительной скорости убыва-" и ля массовой 'концентрации, усредненные по всем размерам частиц: Их значения могут <>ыть ; определены по экопериментальным данным. Если са невелико, то уравнение (1) можно за-, менить линейным:

V Ст (3)

Уравнения для определения счетной концентрации -аналогичны уравнениям (1), (2),:(-3).

Проинтегрировав (2) .-и'(3), получим формулу для расчета дозы препарата, аегшрировамной животными за сеанс ингаляции: - ' '

' О - УА+ ,

где V, дыхательный объем животных;

К — коэффициент 'задержки частиц аэрозоля в"-6рганах_ дыхания;

Ь '— продолжительность распыления; Ь=1—Ь — где і — общая продолжительность обработки'жи-вотных.

Для установления закономерностей изменений массовой концентрации аэрозольных систем, занимающих большой (но конечный) объем, а также влияння на ¡них различных-внешних факторов произведены измерения концентрации аэрозолей йодтриэтилеиглриколя'-в птяч.никах. В таблице 2 приведены средине но 'высоте значения" Концентрации в зависимости от Времени-и удэлеш*я: ОТ'распылителя для^двух-аналогичных.по

12 4

геометрии и сшіенчі герметизации зало® лигамка. Распылитель был установлен на середине центрального опрохода, измерения выполнены вдоль него.

- ' Таблица 2

Изменение концентрации аэрозолей в зависимости от времени и удаления от распылителя (точки измерении — вдоль центрального прохода). Концентрация — в мг/мз

3 а л ЛЇ 1

Удаление от распылителя, м Время измерения, мин. от качала

5 Ю 15 20 25 30 _

О 0,72 0,86 . 0,97 0,83 0,83 0,77

2 0,30 0,80 0,87 0,73 0,77 0,56

4 0,20 0,60 0,74 0,66 0,43 0,34

6 . 0,20 0,40 0,40 0,43 0,40 0,34

8 - 0,17 0,31 0,31 0,31 0.31

Зал ,№ 2

Удаление, м Время измерения, мин. от начала

5 10 15 | 20 | 30

0 "іІ.ОЗ 1,Н 1,23 1,00 1,08

2 0,91 1,08 1,00 1,20 ли

4 0,89 0^1 ■ 0,97 1,20

6 0,83 0,86 0,89 1,20 Ъ11

8 0,73 0,76 0,83 0,94 1,11

Таблица 3

Изменение концентрации аэрозолей в зависимости от времени и удаления от распылителя (точки измерения на линии, перпендикулярной центральному проходу). Концентрация — в мг/мз

Удаление, м

Иитервалы времени, мин.

7-Ю

17—20

27—30

}:

,4

0,76 ОДЗ 0,30

0.70

0,55 0,48

0,64 0,59 0,39

В таблице 3 — аналогичные данные для боковых проходов. Так'«а«' энергия частиц, выброшенных из распылителя, быстро расходуется на преодоление сопротивления воздуха,'кон-

Цёнтрация; уменьшается'' по"' мер^'удаления от распылнТеЛя. На уровень 'ее-влияет-наличие на'пути аэ-рбзольного; облака элементов 'внутреннего производственного оборудования/ геометрия помещения, степень герметизации его и ряд других - факторов' (ехем'З размещения распылителей, ; вид и: возраст животных,плотность размещения их .и т.'д.). Поэтому распределений аэрозоля по объему неравномерное, На ■ расстоянии в м от источника аэрозоля концентрация его может быть в' 2 раза ниже по сравнению е конценграцией вблизи распылителя. Выравнивание концентрации после окончания распыления может не нлетупнть. '-■■■,' \ ' ' ' !'■

Ilk : Метод, непрерывного дистанционного определения ;.''■. концентрации аэрозолей

■ Установленные особенности дисперсного состава, аэрозолей" биологических препаратов, сравнительно небольшие »измене-, нпя его за время - функционирование та ких систем -и невысокие массовые-концентрации -их дают основание использовать оптпчеокий абсорбционный метод для измерения массовых концентраций . биологических, аэрозолей в лабораторных л производственных условиях. Нами проверена возможность использования, фоторезисторов в качестве чувствительных элементов , датчиков измерителей концентрации. Установлено наличие тесной - корреляционной связи между ¡изменениями фототока " и массочзой'концентрацией. Так, для аэрозолей 5%-ного ратвора' глицерина при влажности воздуха <%% коэффициент корреляции 0,89, а уравнение связи — линейное.' Изготовленный нами образец работает удовлетворительно. С; электронным, блоком его "Можно связать два-три датчика и, таким образом,: практически одновременно измерять, концентрацию .в различных точках.. Такой прибор можно иопользо-вать и при ра-боте ic живыми вакиннаМ'И, т. к. между массовой' концентрацией аэрозолей таких вакцин .н их биологической активностью тесная корреляция. (Ferry R. М. et а!.). .у'-'

IV, Периодический режим перевода вакцины в аэрозольное ' состояние-как способ повышения точности определении-аспирнруемой животными дозы и способ ослабления действия* , отрицательныхфакторов на аэрозоли живых'вакцин v.;

Практикуемый ныне метод определения дозы пакцины основан на расчете ее по формуле Розбери: . ' у-

• , : D = R-CmVt4- ... ' ■■ '

Точность -метода уд об лет öopu тел ьн а . только при условии постоянства концентрации аэрозоля в течение всего сеанса обработки или при наличии возможности получить объективные данные об ее .изменении. Постоянство концентрации можно Обеспечить, осуществляя периодическое пополнение убыли тумана раопылением новых порций -вакцины, т, е. (применяя периодический режим перевода вакцины в аэрозолыное состояние. Пионеры его — Форту шный В, А., Гладенко Н. Н,, i960; Соколов В. Д„ Ляус Ц. Г., 1970 —регулировали работу генераторов но времени. Более совершенная стабилизация кошен грации может быть осуществлена при учете Закономерностей изменения концентрации аэрозолей: по уравнениям динамики .концентрации рассчитать программу работы распылителей или непрерывно контролировать фактическую - концентрацию и управлять работой ге-н-ор-а торов ш основе получаемой информации. Нами разработан образец устройства для автоматического осуществления периодического режима, ■ который позволяет выдерживать нужный уровбнь концентрации с точностью до 15%. -

Было пропарено влияние периодического режима на биологическую устойчивость аэрозолей живых бактерийных вакцин, В иерной серии опытов исследовалось влившие стабилизации массовой концентрации на изменение уровня концентра«»» живых микробов. Проведено 25 опытов, 7 при обычном (•непрерывном) режиме перевода вакцины в аэрозольное состояние, остальные — при периодическом. В каждом опыте, длившемся 'Но '10 мин., взято по 6 проб для определения концентраций — (Массовой и живых микробов. Для каждой про-,бы при обоих режимах определены средние значения концентраций по всем опытам, разности между шах и min уровнями концентраций массовой (Rm) и жхгвых микробов — R„ (в % от шах уровня), средневзвешенные для каждого режима кои^ центрацки: массовая — m (в мгУл) и живых микробов :— п (в условных ед.), а также коэффициенты вариации величии п —т- V (табл. 4).

Таблица 4

Влияние режима распыления на концентрацию живых микробов

В И Д д а н к ы к •

' Вид режима Rm Rn т я V

Непрерывный Периодический ЧЪ - 75% 25% 15 3,30 2,28 789 842 СО, 8% 3.1,4%

■-..'УН ;.Аналнз этих данных;показывает,<;.;что'лр-и периодическом /■■'"■','■ ■

^ режиме вырапнпиается и-концентрация ¡живых; микробов, что ,.; '.'. снижение . жизнеспособности ; микробов-.' при , таком режиме: . ; Л;. V меньше (за счет уменьшения;среднего'времени аэрозольного ;. ".,:/-./' состояния препарата). . ;

• 2-я серия опытов состояла'в'двукратной,,с интервалами ;V г (10 дней) вакцинации 4 групп кроликов и исследовании био-" ; '■'. химических^ и серологических изменений в сыворотке (К-рОВИ В : " ; ■ . 'поствакциналь'Ный нериод.;. ':Услов.ия1 обработки каждой груп- ' :' : ~ ; ' пы и лолученные.им'и дозы вакцины.приведены в таблице 5, \ ч

■. ;■. , ■ . \ ! ■ , '■.''■' . ' .Таблица 5

'*.Условия обработки животных н полученные ими дозы вакцины

: Номер .группы Режим распыления Газовый' ■ состав воздуха ; Расход вакцины,' мл Получение дозы: ■ п-108 ЄД. , \. Г •-Ч

1-я ■ ■ вакцин.. ■ 2-я ' вакцин. 1-я в'акцнн. 2-я вакцин, -

-Л . ' : непрер. НОрМ. г 6,0 .. ,.10,6 . 1,3 2.6 "'.[-.

= .2 , : норм. та - ■■ 7,0 . '■1.6 ' ■ .2,2

иепрер. .. с ЯН,- ' 0,0 2/. ■'' • ' ■ V ;

;*' + - ■ !ІЄ]»НОД, с. М!3 6,5 6,2 1,5 2,2 І І-;..--

' ! . Температура воздуха в опытах 19--2ГС. влажность его — • -

■ 80%. Контрольная группа животных ле вакциниршалась.: ^ ' .. V^ " .Пробы .крови взяты через"10, ¡20,';30.-;40; и 70 дней после 1-й '

; " вакцинации (соответственно.пробьг№" 1, 2, 3, 4 и 5).. ""'V'';;:'. ;. В контрольной группе.животных »се величины были а -* норме. У.кроликов ОПЫТНЫХ Групп концентрация общего" бел-.. / ■ : ка,во всех (пробах выше нормы, при этом во й-х пробах сред-' \ ^ ■;■■■" :ние значения концентрации белка 2,3 и'4 групп достоверно ' ,■;.' отличались от контроля; кроме .того, достоверным было раз- .-г;: чтич.не Средних внутри ОПЫТНЫХ групп, Т. е. между ! -и 2, З.И 4 : ■ ' группами. В последующих, пробах ■', различие между этими' ! . группамн'ио уровню белка [уменьшилось. Содержание бета- и <•..'•'. ■ ' гамма-глобулинов у .животных всех опытных групп во всех : >; у.:; « пробах выше, чем в контроле, при этом в 1-й пробе средние '.•••. , значения 1 н>2-й групп достоверно.отличаются от таковых

■ контрольной прушш; во,-2-й пробе средине значения уровня; ■ , . ,' этих фракций у всех опыгаых животных достоверно выше та-: копых у контрольных животных; -кроме того, достоверны раз-: '

личПя внутри опытных .групп (между I и 2, 3 и 4 — соответ- .':

ствённо), В последующнх'.лробах урорнн' этих фракций сближаются.; ... . .. ' , ■

Титры специфических агглютининов были выше'-у животных, обработанных при нормальном газовом составе ^ и при использовании периодического режима перевода вакцины в аэрозольное состояние., .' '

Все эти факты показывают, что биохимические и серологические изменения в крови животных, характерные для поствакцинального периода, то срокам наступления и уровню .лучше у животных, при вакцинации которых применялся пе риодичеакий режим перевода вакцины в аэрозольное состоя пне; эти.различия несколько более значительны,у животных, обработанных при наличии в камере аммиака (т. е. в группах^ и,4). ■

Таким образом, периодический режим обладает следующими'свойствами; - -

^ — способствует стабилизации концентраций —. массовой -ц.живых микробов, что создает условия для более точного определения ингалируемон дозы; V ;

• — способствует сохранению антигенных свойств аэрозоли--роВанных вакцин;

, ' —создаст условия для равномерного поступления вакцины в.организм животных. ^ ■".

Выводы

'." • 1. Наличие в1-составе дисперсионной среды газов, которые . могут абсорбироваться аэрозолями биологических' препаратов (аммиака,сероводорода, углекислого газа) не влияет на динамику .физических характеристик аэрозолей: размеров частиц,1 функции распределения то размерам, массовой концентрации.

'■2. При контактировании аэрозолей живой противопарати-фозной вакцины из штамма "[¿-177 с аммиаком, сероводородом происходит дополнительное "снижение жизнеспособности, микроорганизмов, находящихся во взвешенных и воздухе кап: лях, вакцин, причем, степень снижения зависит от вида газа," концентрации его и относительной влажности воздуха; Наиболее значительное влияние оказывает аммиак При низкой .влажности воздуха. ■ -'

3.. Аммиак в 'Концентрации уже до 0,02 мг/л -(предельно допустимая для животноводческих иомешенин) вызывает, снижение скорости наступления и уровня поствакцпнальных биохимических и серологических изменений > в сыворотке крови животных, вакцинированных а^рогенно иротир наратифа.1

4. Аэрозоли жидкостей, испрльзуемых в качестве суспендирующих сред(растворы глицерина, сухого обезжирен нога молока и др.) ири определенных условиях использования этих аэрозолей (средние температуры воздуха, влажность его Не ниже 80%, небольшая высота расположения распылителей) сосггоят 'из частиц диаметром 1—б мкм, с 'Преобладанием частиц .менее 5:мкм; изменения размеров частиц -и функций распределения по размерам за 30—40 мин. незначительны. При сходстве физических свойств, жидкостей ('ВЯЗКОСТеЙ, поверхностных натяжений) ; физические характеристики аэрозолей этих жидкостей, получаемых в одинаковых условиях, различаются мало.

б. Распределение по размерам частиц аэрозолей указанных «жидкостей, как-41 ряда'других аэрозольных систем, аналогичных' по дисперсному составу, соответствует -логарифмически нормальному закону. ■

6. В силу.значительной.однородности по размерам частиц рассматриваемых аэрозолей динамику концентрации их на этапе образования системы и при разрушении ее при условии первоначально равномерного распределения частиц по объему, занятому системой, можно описать уравнениями для моношшсперсных систем; действие отрицательных факторов учитывается введением среднего по всем размерам частиц коэффициента скорости убывания концентрации.

7. Массовую концентрацию аэрозолей биологических препаратов можно -измерять оптическим абсорбционным методом,' используя в .Качестве чувствительного элемента датчика фоторезисторы. Изготовленный образец измерителя концентрации имеет чувствительность не хуже 0,2 мг/м3. (при градуировке по растворам глицерина).

8. Распределение аэрозолей биологических препаратов в производственных помещениях может -быть неравномерным. Уровень концентрации в определенной точке н динамика изменения ее зависят от положения этой точки относительное^ источника <азрозоля^ элементов .внутреннего ■производственного оборудования и направления микротоков воздуха.

9. Массовую концентрацию аэрозолей вакцин и лекарствш-' ных препаратов, а та.кже концентрацию микробов (в случае^

использования живых вакцин) можно стабилизировать, примерно, .на одном уровне в течение заданного времени за счет прпмснешня периодического режима перевода препарата в

..аэрозольное состояние.' При таком режиме меньше инактивация вакцин; кроме того, создаются условия для более точного -.определения ингалтфуемой дозы.- , . ■ ' ■>■

10, Разработано сравнительно несложное устройство для автоматического осуществления периодического режима поре: вода препарата <га аэрозольное состояние, в котором применен оптический абсорбционный^ датчик концентрации аэрозоля. Устройство поддерживает заданный уровень концентрации с отклонением от него не более, чем ив 35%.

/¿■■..у ПРЕДЛОЖЕНИЯ

, . I; Возможность дополнительной инактивации живых' вакцин в.аэрозольном состоянии при контактировании их с аммиаком, сероводородом необходимо учитывать при организации ■ аэрогенной вакцинации животных, ' 2. Для повышения эффективности аэрозольных обработок животных необходимо стандартизировать условия их пропедс-лГия,. Предложенные уравнения динамики, концентрации аэро золей могут быть ¡использованы д.т, определения оптимлль ных условий и техники проведения обработок. . ', 3. При необходимости проведения обработок животных ПС ¿юсршственно в производственном помещении следует пред варительно исследовать фактическое 'распределение аэро золя'по -рабочему объему помещения и динамику копцен /грации его, с тем чтобы определить ■необхоаи'мос количество распылителей, схему размещения !гх и оптимальную продол жительность раопыления. Подобные исследования можно осу шестаять с помощью .предложенного нами устройства для непрерывного дистанционного измерения концентрации аэрозо" Мей.;' /

■ А. "При продолжительности сеанса обработки животных .^включая время распыления) более 20 минут целесообразно трнменять периодический -режим перевода вакцины (препарата) в аэрозольное состояние. Использование при этом .устройств для автоматического регулирования работы распылителей обеспечит стабилизацию концентрации аэрозолей на нужном уровне в течение всего сеанса обработки по всему помещению.

СПИСОК РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

A. Е. Науменко. «О возможности использовал и я прибора ФЭН-90 при изучении свойств аэрозолей в актины». В кн.: «Профилактика и лечение болезней сел ьхоз животных (труды Донского сельхозцнститута), ст. Пер* сиановка, 1972, 153—154. і .

B, К. Паракин, А. Е. Науменко, Э. П. Калнниченко. «Физическая и биологическая устойчивость аэрозолей аакаин в зависимости от температуры, влажности и газового состава воздуха помещений для иммунизации животных», В кн.: «Вторая Всесоюзная конференция по применению аэрозолей в народном хозяйстве* (тезисы), г, Одесса, 1972, 70,

~ В. К. Паракин, А. Е .Науменко, Э. П. Калнниченко. «Устойчивость а эр о-.золей вакцин при воздействии на них различных физических и химических факторов». В кн.: «Профилактика и лечеше болезней сельхозживотных» (труды ДдаСХИ),. ст. Персиаиоека, J973, 25—26.

А. Е, Науменко, Э. П. Калнниченко, В. К. Паракин. «Об аналитической выражении распределения частиц вакцинных аэрозолей по размерам», В кн.: «Профилактика и лечение, болезней сель хоз жнвотных» (груды ДонСХИ), ст. Перепаковка, 1974, 222—228,

A. Е. Науменко, «Фотореле для автоматического поддержании концентрации аэрозоля на заданном уровне. Там же, 60—63.

B. К, Паракин, А, Е, Науменко, Э. П. Калнниченко, «Физическая и биологическая устойчивость аэрозолей вакцин в зависимости от температуры, влажности и газового состава воздуха помещений для иммунизации животных». В кн.: «.Проблемы ветеринарной санитарии» (труды БНИИВС), г. Москва, 1974, 50, 200—205.

Л. Е, Науменко, Э. П. Калнниченко, В. К. Паракин, «Модификация сед имен та ци он ного метода отбора проб бактериальных аэрозолей. Там же, 197—'199. - :

В. К. Паракин, А,, Е. Науменко, Э. П. Калнниченко, «Автоматическое . поддержание концентрации аэрозоля». . Журнал «Ветеринария», № 3, 1975, 53—55, -

Л. Е. Науменко, Э. П. Калнниченко, «Вакцинация животных аэрозольным способом при наличии в камере аммиака», В .кн.; «Профилактика и ."лечение болезней сельхозжчтотных» . (труды ДонСХН), ст. Перепаковка, 1977, 76—79. «

Э, П. Калнниченко, Д. Е. Науменко. «Сравнительная йчЧлі у иоб и алогическая эффективность живой и убогой протнеонаратифоэиой . вакцины». Там же, 80—8Є.

M

І

»6. 13/VH 1979 г

ПК 14606.

Tum. ДонСХИ. Зак, Jft226. 18/V1 1979г. Объем 1,25 п. л. Тир, 100, Ст. Персиановка-Ростовской области.