Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Влияние аминокислот орнитина и аспартата на физиологическое состояние и неспецифическую резистентность телят
ВАК РФ 03.03.01, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Влияние аминокислот орнитина и аспартата на физиологическое состояние и неспецифическую резистентность телят"

На правах рукописи

484067»

Павлова Ирина Геннадьевна

Влияние аминокислот орнитнна и аспаргата на физиологическое состояние и неспецифическую резистентность телят

03.03.01 - физио логия

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

1 7 и АР 20»?

Нижний Новгород - 2011

4840679

Работа выполнена в ФГОУ ВПО «Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия» Минсельхоза РФ на кафедре анатомии, фармакологии с токсикологией.

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор

Великанов Валериан Иванович

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор

Еремин Сергей Петрович

кандидат биологических наук Кирпичев Валерий Владимирович

Ведущая организация: ГОУ ВПО «Мордовский государственный университет им. Н.П.Огарева»

оо

часов

Защита диссертации состоится «//». _ 2011 года в

на заседании диссертационного совета Д 220.047.01 в ФГОУ ВПО «Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия» по адресу: 603107, г.Н.Новгород, пр. - т Гагарина, д. 97, тел./факс (83 1 466-06-84)

С диссертацией можно ознакомится в библиотеке ФГОУ ВПО «Нижегородская сельскохозяйственная академия»

Автореферат разослан << /6 » (¿¡е^сииХ 201

1 года

Ученый секретарь диссертационного совета

(3¿мс£ас?,

Иващенко М.Н.

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы Выращивание здорового молодняка сельскохозяйственных животных является весьма актуальной проблемой. Одним из резервов увеличения продуктивности животных считается повышение жизнеспособности и сохранности молодняка, за счет поддержания иммунологического статуса организма в различные периоды жизни животных. Недостаточность защитных механизмов организма приводит к повышению уровня заболеваемости животных, невозможности адекватного ответа на чужеродные агенты, особенно в ранний постнатальный период развития (Маренков В.Г., 2004; Федоров Ю.Н., 2005, 2009; Самбуров Н.В., 2006 и др.). В раннем постнатальном онтогенезе, когда роль пассивного иммунитета уже снижается, а формирование собственного активного находится в начальной стадии, организм молодняка остается слабо защищенным. Именно в этот период телята подвержены возникновению заболеваний различной этиологии, которыми поражается до 70 - 80% животных, что отражается на их росте и развитии, снижая ш продуктивность во взрослом состоянии на 15% и более (Самбуров Н.В., 2006). В связи с этим считается наиболее приемлемым стимулирование иммуногенеза.

По повышению продуктивности и сохранности молодняка с минимальными экономическими потерями, связанными с низкой резистентностью животных, предлагается множество препаратов различного происхождения, участвующих в процессах жизнедеятельности организма: витамины, иммуностимуляторы, макро - и микроэлементы, пептиды и многие другие. Наиболее перспективным направлением является применение веществ природного происхождения, в том числе аминокислот, которые в организме выполняют пластическую, энергетическую роли, и регуляторную функцию, что отражается на иммунной системе. Известно, что аминокислоты в свободной форме или в составе пептидов участвуют в регуляции деятельности иммунной системы организма животных (Белокрылов Г.А. и др., 1986; Середа А.Д. а др.,

2001). При этом активность пептида чаще всего определяется какой-то одной из аминокислот. ,

Наибольшее значение аминокислоты имеют в питании новорожденных телят, составляя более 2/3 сухого вещества молозива, а также участвуют в регуляции всасывания иммуноглобулинов (Bygh L.S., StaleyT.E., 1980; Солдатов А.П. и др. 1989; Харитонов JI.B., 2000,2004), обеспечивая тем самым передачу колострального иммунитета от коровы к теленку.

Аминокислоты, их соли, смеси, и производные как препараты метаболической фармакотерапии характеризуются безвредностью, . малой выраженностью побочных аффектов и отсутствием аллергизириющего влияния. Во многих случаях они служат средствами патогенетической профилактики и лечения (Западнюк В.И. и др. 1982).

Изучению влияния аминокислот на формирование естественной резистентности молодняка сельскохозяйственных животных в нашей стране посвящено небольшое количество работ, хотя проблема повышения общей резистентности молодняка является актуальной и ее решение может служить одним из путей повышения продуктивности и рентабельности животноводства.

В совместных работах кафедры анатомии, фармакологии с токсикологией ФГОУ ВПО «НГСХА» и лаборатории белково-аминокислотного питания ВНИИФБиП (г.Боровск) Калужской области. В качестве иммуномодулирующих средств на телятах изучены препараты ряда аминокислот - таурин, глицин, аланин, глутаминовая и аспарагиновая кислоты, аргинин и др., с положительным результатом (Харитонов Л.В., Великанов В.И., и др. 1999-2010 гг.).

Выполненная нами научно - исследовательская работа явилась продолжением и углублением исследований названных авторов и направлена на изучение влияния препаратов аминокислот орнитинового цикла мочевинообразования - орнитина, аспарагика аспартата и препарата на их основе орнитина аспартата на физиологическое состояние и

неспецифическую резистентность организма телят молочного периода развития.

Цель и задачи исследований.

Целью наших исследований являлось - изучение влияния аминокислот орнитинового цикла мочевинообразования - орнитина, аспарагина аспартата и препаратов на их основе на физиологическое состояние и неспецифическую резистентность организма телят в постнатальный период развития.

Для достижения поставленной цели были намечены следующие задачи:

1. Определить влияние аминокислоты орнитина, входящего в состав свободных аминокислот молока и молозива, на поглощение иммуноглобулинов молозива и становление неспецифической резистентности у новорожденных телят.

2. Изучить влияние препарата аспарагина пролонгированной формы при парентеральном применении на физиологическое состояние и резистентность телят молочного периода выращивания.

3. Выяснить влияние парентерального введения пролонгированной формы препарата орнитина аспартата - орницетил (Гепа-Мерц) на физиологическое состояние и естественную резистентность телят молочного периода выращивания.

Научная новизна.

Впервые изучено влияние препаратов аминокислот орнитина, аспарагина и орнитина аспартата на физиологическое состояние и формирование естественной резистентности телят, их заболеваемость и продуктивность.

Показано, что аминокислота орнитин способствует активной регуляции всасывания иммуноглобулинов молозива из кишечника у новорожденных телят, положительно воздействуя на неспецифическую резистентность и прирост массы тела.

Препараты, изучаемых аминокислот пролонгированной формы при парентеральном введении телятам молочного периода выращивания стимулируют становление и развитие неспецифической резистентности этих животных, снижают заболеваемость и повышают прирост массы тела.

Полученные данные экспериментальных исследований позволяют расширить и углубить современные представления о влиянии этих аминокислот на стимуляцию неспецифической резистентности телят, их рост и развитие.

Теоретическая и практическая значимость работы.

Установлена возможность применения препаратов аминокислот орнитина, аспарагина и орнитина аспартата для стимуляции неспецифической резистентности организма телят молочного периода выращивания и в качестве средств метаболической фармакопрофилактики.

Результаты экспериментальных исследований физиологического состояния тепят и их изменения под влиянием препаратов аминокислот орнитина, апспарагина и орнитина аспартата расширяют и углубляют положения о действии аминокислот природного происхождения на иммунную систему организма животных. В теоретическом аспекте важным является то, что установлено активизация физиологического состояния и естественной резистентности у животных под влиянием применения препаратов исследуемых нами аминокислот. Полученные в экспериментах данные имеют практическое значение.

Установлено преимущество препаратов пролонгированной формы аспарагина и орнитина аспартата, вводимых парентерально, что стимулируют неспецифическую резистентность, тем самым способствуют снижению длительности и тяжести заболеваний, связанных с нарушением пищеварения, положительно отражаясь на приросте массы тела телят.

Материалы работы будут использованы при подготовке временного наставления по применению аминокислот в животноводстве и ветеринарии. Результаты исследований используются в учебном процессе на кафедре

анатомии, фармакологии с токсикологией ФГОУ ВПО «Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия». Внедрено в учебный процесс ФГОУ ВПО «Чувашская государственная сельскохозяйственная академия», ГОУ ВПО «Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарева». Результаты исследований внедрены в хозяйствах Кстовского, Дальне-Константиновского районов Нижегородской области и в хозяйствах Медведевского района Республики Марий Эл.

Положения, выносимые на защиту.

1 Аминокислота орнитин при пероральном применении новорожденным телятам активизирует регуляцию всасывания иммунных белков молозива из кишечника в течение первых суток, а в дальнейшем стимулирует формирование неспецифической резистентности и снижает нарушение процессов пищеварения, сопровождающиеся диарейным синдромом различной этиологии.

2. Препараты аминокислот аспарагина и орнитина аспартата пролонгированной формы, введенные парентерально телятам-молочникам, корректируют физиологическое состояние, повышая неспецифическую резистентность, тем самым снижают заболеваемость и повышают прирост живой массы этих животных.

Апробация работы.

Основные положения диссертационной работы были доложены и обсуждены на: межкафедральных заседаниях сотрудников НГСХА (Н.Новгород, 2006 - 2010 гг.), I Международном конгрессе ветеринарных фармакологов «Эффективное и безопасное лекарственное средство» посвященное 200-летию высшего ветеринарного образования Санкт-Петербурской государственной академии ветеринарной медицины (Санкт-Петербург; 2008 г.), II Съезде физиологов СНГ, Кишинэу, Молдова (Москва -Кишинэу, 29-31 октября 2008 г.), V Международной конференции посвященной

50-летию ВНИИФБиП «Актуальные проблемы биологии в животноводстве» (г.Боровск, 10-12 сентября 2010 г.).

Публикации.

По материалам диссертации опубликовало 6 статьей, в том числе 2 в ведущем научном издании, рекомендованном ВАК Министерства образован."« и науки РФ.

Структуры и объем диссертации.

Диссертация изложена на 134 страницах компьютерного набора и состоит из введения, обзора литературы, характеристики материала, методов исследования, результатов собственных исследований, заключения, выводов, практических предложений, библиографического указателя и приложения. Список цитируемой литературы включает 208 источников, в том числе 31 иностранных. Работа иллюстрирована 17 таблицами и 9 диаграммами.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Было проведено 3 научно-производственных опыта на молодняке крупного рогатого скота в виварии института ГНУ ВНИИФБиП (г.Боровск) Калужской области, в СПК „Нижегородец" Дальне-Хонстантиновского района и СПК „Ждановский" Кстовского района Нижегородской области.

Были изготовлены препараты аминокислот, для перорального применения новорожденным телятам и целлюлозные микросферы пролонгированной формы в лаборатории белково-аминокислотного питания ВНИИФБиП (г.Боровск) Калужской области.

Для опытов было отобрано 60 голов. При формировании подопытных групп подбирали животных по принципу пар-аналогов (Овсянников А.И., 1976) с учетом породности, возраста, живой массы. Животных контрольной и опытной групп содержали в одинаковых условиях, соответствующих ветеринарно-зоогигиеническим требованиям.

В первом опыте изучали действие аминокислоты орнитина в форме водного раствора, в виварии института ГНУ ВНИИФБиП (г.Боровск) Калужской области на новорожденных телятах холмогорской породы. Препарат аминокислоты орнитин задавали телятам в 1-е сутки после рождения трехкратно в дозе 0,3 г на голову через 15 минут после выпаивания молозива. Со второго дня жизни три раза в день по 1,0 г на голову и в течение 6 дней, телятам контрольной группы выпаивали 50 мл физиологического раствора поваренной соли.

Пробы кровч для исследований отбирали через 24 часа после выпаивания орнитина новорожденным телятам и на 10, 20, 30 дни после перорального применения препарата.

Во втором и третьем опытах использовали инъекционную форму препарата аспарагина и «Орницетил» Гела-Мерц (орнитин аспартата) пролонгированного действия. Опыты проводили в СПК „Нижегородец" Дальне-Константиновского района и СПК „Ждановский" Кстовского района Нижегородской области на телятах 20-30 дневного возраста.

Пробы крови телят отбирали, во II и в III опытах, на 10-й, 20-й, 30-й дни исследования после введения препаратов аспарагина и орнитина аспартата пролонгированной фор:.!Ы.

Анализы проб крови выполнялись в лаборатории белково-аминокислотного питания ВНИИФБиП (г.Боровск) Калужская область совместно с сотрудниками этой лаборатории; на кафедре анатомии, фармакологии с токсикологией ФГОУ ВПО «НГСХА»; исследовательском сертификационном центре НГСХА; в медицинском центре «Тонус» (г.Н.Новгород).

Пробы крови телят брали утром до кормления из яремной вены. Количество эритроцитов и лейкоцитов в крови подсчитывали в камере Горяева; лейкоцитарную формулу определяли путем подсчета числа лейкоцитов разных видов в мазках, окрашенных по Романовскому-Гимза; уровень гемоглобина — методом Сали; скорость оседания эритроцитов - методом Панченкова;

сывороточные иммуноглобулины — по реакция помутнения с сульфатом цинка (Кондрахин И.П. и др., 1985); лизоцимная активность определялась фотоэлектроколориметрическим методом с использованием тест-культуры Micrococcus lysodeikticus (Марков Ю.И. и др., 1974); бактерицидная активность сыворотки крови фотоэлектроколориметрическим методом в модификации Смирновой О.В. и Кузьминой Т.А. (1966) с применением тест культуры Staphylococcus epiderrnidis (Кондрахин И.П. и др., 1985); фагоцитарная активность нейтрофилов по Е.А.Кост и М.И.Стенко (Кондрахин И.П. и соавт., 1985); общий белок в сыворотке крови - рефрактометрическим методом на рефрактометре ИРФ-20 (Кондрахин И.П. и соавт., 1985); глутатион - по методу Вудворда и Фри (Петров А.В. и соавт., 1973); кальций - трилонометрическим

методом с флуорексином (Караканов А.В., Вичев Е.П., 1968); неорганический

1

фосфор - с молибдатом аммония (В.И.Волгин, 1969); Т-лимфоциты методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана (Е-РОК) и В-клеток -методом розеткообразования с эритроцитами барана в системе ЕАС;

Телята контрольных и опытных групп, с целью изучения влияния препаратов аминокислот на физиологическое состояние подвергались ежедневному общему клиническому исследованию, при наблюдении, учитывалась заболеваемость телят их длительность и тяжесть болезни (Смирнов A.M. и соавт,, 1988). Ежемесячно проводили индивидуальное взвешивание телят.

Для выявления статистически значимых различий использован критерий Стьюдента-Фишера по Плохинскому Н.А. (1961). Результаты рассматривались как достоверные, начиная со значения Р < 0,05.

3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 3.1. Действие аминокислоты орнитина на всасывание иммуноглобулинов молозива, обмен веществ и естественную резистентность новорожденных телят.

В первом опыте при определении стимулирующей способности всасывания иммунных белков молозива в кишечнике у новорожденных телят, в первые сутки их жизни, на физиологическое состояние и становление неспецифической резистентности телят, исследовали кровь на содержание количества иммуноглобулинов, мочевины, глюкозы и свободных аминокислот. Результаты анализа представлены в таблице 1, 2.

Таблица 1. Динамика биохимических показателей крови телят после

применения орнитина

Показатели Возраст телят, сут.

1 сутки, М±т 10 суток, М±т 20 суток, М±т

контроль п=6 опыт п=б контроль п=6 опыт п=6 контроль п=6 опыт п-6

Иммуноглобулины, мг/мл 15,2±],4 17,7±1,2 11,7± 1,0 15,0±0,7* 11,2±1,2 13,6±0,9

Эритроциты, млн/мл 6,9« ±0,25 7,35±0,1б 6,24±0,31 б,79±0,12 5,60±0,29 6,(4*0,¡4

Лейкоциты, тыс/мл 6,78±0,28 7,21 ±0,13 5,68±0,33 6,37±0,!5 4,66±0,11 5,15±0,08*

Гемоглобин, % 10,7±0,08 11,2±0,13* ! 0,5±0,14 10,1±0,07* 11,3±0,10 11,1±0,12

Мочевина, ммоль/л 4,71±0,35 4,9б±0,39 4,85±0,29 5,14±0.41 4,09±0,28 3,7г±0,19

Глюкоза, ммоль/л 8,32±0,64 7,5! ±0,53 6,13±0,42 6,70±0,38 6,08*0,46 5,94±0,б 1

Примечание: * - здесь и далее в таблицах достоверно по сравнению с контролем при Р<0,05.

Исследования показали, через сутки после выпаивания водного раствора орнитина новорожденным телятам в дозе 0,3 г, в их крови увеличивался уровень иммуноглобулинов на - 16,4% по сравнению с контрольными животными. На 10 сутки можно отметить достоверное увеличение содержания иммуноглобулинов в крови телят опытной группы на - 28,2%, что свидетельствует об увеличении уровня всасывания свободных аминокислот в кишечнике в первые сутки жизни телят. Повышенное содержание иммуноглобулинов в крови опытных животных наблюдалось в течение месяца, так как со 2-го дня после рождения телята получали орнитин в дозе 1,0 г и в течение 6 дней. Снижение уровня иммуноглобулинов в крови телят с возрастом

связано с исчезновением белков колострального происхождения, в то время как образование собственных иммуноглобулинов клетками иммунной системы возрастает лишь к концу первого месяца жизни (Коваленко Я.Р., 1979. Плященко С.И., Сидоров В.Т., 1979). При последующих анализах крови различия по изучаемым показателям между группами увеличились в относительном выражении, при возрастном снижении абсолютных величин у животных обеих групп.

Одновременно отмечено повышение количества эритроцитов, лейкоцитов и достоверное увеличение (Р<0,05) уровня гемоглобина через сутки и на 10-й день исследования по сравнению с контролем. Количество эритроцитов в крови телят опытной группы через сутки на - 5,3%, а на 20-е сутки на - 9,6% (таблица 1), в значительной мере обуславливающих уровень иммунобиологических реакций; наблюдалось увеличение количества лейкоцитов на - 6,3% по сравнению с контролем, причем на 20-й день это изменение носило достоверный характер (Р<0,05), что говорит о том, что орнитин влияет на клеточный иммунитет новорожденных (Шамберев Ю.Н. к Др.,2004).

В опытной группе на протяжении всего исследования наблюдали понижение уровня глюкозы в крови, что свидетельствовало об интенсивном всасывании иммуноглобулинов молозива в кишечнике. На 10-й день отмечено незначительное увеличение содержания глюкозы в крови телят опытной группы в сравнении с контролем и обеспечивалось, вероятно^ в основном за счет расщепления лактозы молозива.

Уровень мочевины в крови свидетельствует об эффективности и направленности азотистого обмена, является показателем усвояемости аминокислот. У телят опытной группы в течение 10 дней постнатального периода отмечался более высокий уровень мочевины в крови, что связано со стимуляцией цикла мочевинообразования орнитином, увеличением всасывания белка и мочевины в первые сутки. На 20-е сутки исследования в опытной группе наоборот наблюдалось понижение уровня мочевины в крови на — 9,9%,

указывая, что аминокислоты использовались по своему основному назначению, то есть меньше подвергались дезаминированию (окислению) и использовались для образования белков.

Применяя препарат, орнитин в форме водного раствора через 10-15 минут после выпаивания молозива, тем самым стремились избежать влияния препарата на процесс свертывания молозива в сычуге, изменения качества образующегося сгустка и скорости его переваривания и эвакуации продуктов расщепления.

Таким образом, препарат аминокислоты орнитин, задаваемый в форме водного раствора, новорожденным телятам, увеличивал интенсивность всасывания коллостральных иммуноглобулинов из кишечника, количество лейкоцитов и эритроцитов в крови, что обуславливает повышенный уровень иммунобиологических реакций в организме.

При выпаивании телятам аминокислоты орнитина в дозе - 1,0 г на голову, необходимо учитывать и то, что в этом в возрасте 2-7-и суток жизни у телят идет переваривание молочных белков, и образующиеся аминокислоты могли нивелировать влияние небольшой дозы препарата орнитина.

Воздействие препарата аминокислоты орнитин на процессы всасывания иммуноглобулинов молозива в кишечнике новорожденных телят могло осуществляться за счет образующегося из аргинина оксида азота, являющегося регулятором сосудистого тонуса и активности клеток иммунной системы. Уровень аргинина в опыте повышался за счет образования аргинина из орнитина.

Орнитин тесно взаимосвязан в обменных процессах с аминокислотами орнитинового цикла - цитруллина, аргинина и орнитина, а также гистидина и лейцина во фракции свободных аминокислот через сутки после рождения телят (таблица 2). В дальнейшем эти различия в сравнении с контролем снизились.

Таблица 2. Свободные аминокислоты крови телят после применения орнитина

Аминокислоты 1-й день 10-й день 20-Я день

контроль опыт контроль опыт контроль опыт

мг% % мг% % мг% % мг% % мг% % мг% %

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13

Таурин 1,38 9,2 1,21 7,3 1,17 8,1 1,52 9,9 1,17 9,9 1,26 10,2

Аспартат 1,07 7,1 1,14 6,8 1,13 8,1 1,23 8,0 1,14 9,7 1,17 9,5

Треонин 1,11 7,4 1,16 7,0 0,71 5,1 0,77 5,0 0,57 4,8 0,53 4,3

Серии 0,95 6,3 0,76 4,5 0,62 4,5 0,68 4,4 0,59 5,0 0,51 4,2

Глутамат 1,66 11,1 1,79 10,7 1,53 11,0 1,68 10,9 1,08 9,2 1,19 9,6

Глицин 1,10 7,3 1,04 6,2 0,93 6,7 0,88 5,7 0,81 6,9 0,75 6,1

Алании 0,77 5,1 0,81 4,8 0,76 5,5 0,82 5,3 0,57 4,8 0,63 5,1

Цитруллин 0,42 2,8 0,68 4,1 0,32 2,3 0,25 1,6 0,15 1,3 0,18 1,5

В алии 1,12 7,4 1,55 9,3 1,04 7,5 1,21 7,9 9,81 6,9 0,91 7,4

Цистин 0,06 0,4 0,07 0,4 0,04 0,3 0,09 0,6 0,05 0,4 0,06 0,5

Метионин 0,18 1,2 0,29 1,7 0,16 1,2 0,15 1,0 0,15 1,3 0,13 1,1

Изолейцин 0,45 3,0 0,54 3,2 0,51 3,7 0,55 3,6 0,48 4,1 0,44 3,6

Лейцин 0,86 5,7 1,02 6,1 0,90 6,5 0,98 6,4 0,85 7,2 0,76 6,2

Тирозин 0,42 2,8 0,49 2,9 0,48 3,4 0,63 4,1 0,41 3,5 0,45 3,6

Фенилаланин 0,35 2,3 0,41 2,4 0,55 4,0 0,61 4,0 0,37 3,1 0,40 3,2

Орнигин 0,32 2,1 0,46 2,7 0,42 3,0 0,49 3,2 0,29 2,5 0,43 3,5

Лизин 0,70 4,6 0,74 4,4 1,11 8,0 1,16 7,5 0,82 7,0 0,98 7,9

Гистидин 1,28 8,5 1,52 9,1 0,74 5,2 0,76 4,9 0,60 5,1 0,65 5,3

Аргинин 0,78 5,2 0,87 5,2 0,79 5,7 0,97 6,3 0,89 7,5 0,96 7,8

Сумма 14,98 16,55 13,91 15,43 11,80 12,39

В данном опыте наблюдали незначительное изменение живой массы телят в сравнение с контролем. Это связано с отсутствием признаков иммунодефицита у новорожденных телят и коров-матерей, удовлетворительными условиями кормления и содержания животных.

Привесы телят опытной группы, по сравнению с контрольной увеличились в среднем за 2 месяца на - 7,6%, что свидетельствует о стимуляции препарата аминокислоты орнитина на процессы пищеварения (секрецию, активность пищеварительных ферментов и т. д.); образование из

орнитина аминокислот, например, аргинина, цитруллина и других. Которые активировали синтез белка в клетках непосредственно, не затрагивая гормональную регуляцию; выработку инсулина и СТГ, тем самым регулировало иммунную систему организма и повышало прирост массы тела телят.

Таким образом, выпаивание препарата аминокислоты орнитин в форме водного раствора новорожденным телятам способствует повышению интенсивности всасывания иммуноглобулинов молозива, становлению неспецифической резистентности организма и жизнеспособности молодняка.

3.2. Влияние пролонгированной формы препарата аспарагина на физиологическое состояние и неспецифическую резистентность телят молочного периода выращивания.

Парентеральное применение препарата аспарагина в пролонгированной форме в дозе 5 мл (200 мг действующего вещества) на животное стимулировало обменные процессы организма телят молочного периода выращивания, что отражено в таблицах 3,4,5.

Таблица 3. Динамика морфологических показателей крови телят

после введения аспарагина

Показатели 10-й день, М±гг. 20-й день, М±т

контроль, пЧО опыт, п=10 контроль, п=10 ОПЫТ, П=] 0

Эритроциты, млн/мкл 5,11 ±0,31 5,86 ± 0,56 5,61 ±0,76 5,85 ±0,35

Лейкоциты, тыс/мкл 6,49 ±0,18 6,62 ± 0,25 7,05 ± 0,47 7,54 ±0,38

в том числе, %:

нейтрофилы 37.9 35,4 36,3 36,1

эозинофилы 3,5 1,4 2,0 1,1

базофилы 0,9 0,5 0,7 0,5

моноциты 1,8 2,5 2,1 2,6

лимфоциты 55,9 ±1,8 60,2 ±2,4 58,9 ± 2,0 59,7 ±2,7

Анализ динамики абсолютных и относительных изменений содержания количества эритроцитов, лейкоцитов и гемоглобина в нитратной крови телят показывает, повышение уровня эритроцитов у животных опытной группы на 10 день на - 15,0%, а на 20 день увеличение всего на - 4,3% по отношению

к контролю, что свидетельствует о более широкой их физиологической роли в организме телят в данный период. Наблюдалось увеличение количества гемоглобина на - 20,2% и - 21,2 %, причем на 20 день носил достоверный характер Р<0,05, так же наблюдалось повышение резервной щелочности на -14,3 % и - 8,4 %; некоторое увеличение уровня цветного показателя что свидетельствовало об улучшении снабжения организма кислородом и более интенсивном течении окислительно-восстановительных процессов в их организме (таблица 5). Низкое количество эритроцитов при высоком уровне гемоглобина в сравнении с контролем указывает на насыщение эритроцитов кислородом, что увеличивало окислительно-восстановительные и иммунобиологические реакции в организме.

Определение общего количества лейкоцитов в крови хотя и имеет большое диагностическое значение, однако недостаточно, так как не дает представления о соотношении между отдельными видами лейкоцитов и об их качественных изменениях при различных физиологических состояниях организма, характер течения которых накладывает существенный отпечаток на лейкограмму крови (Мишанин Ю.Ф., 1992).

Таблица 4. Динамика показателей неспецифической резистентности крови

телят после введения аспарагина

Показатели 10-й день, М±т 20-й день, М±ш

контроль, п=10 опыт, п=10 контроль, п=10 опыт, п=10

Бактерицидная активность, % 15,90 ± 1,19 17,11 ± 1,51 22,54 ±0,65 29,54 ±0,75*

Лизоцимная активность, % 12,13 ± 1,21 15,18 ± 1,31 14,21 ±0,11 18,9.1 ± 0,37*

Фагоцитарная активность, % 48,9 ± 1,27 52,8 ± 2,30 38,2 ± 0,9 45,7 ± 0,2*

Фагоцитарный индекс 1,22 ±0,08 1,64 ±0,11* 1,29 ±0,2 1,69 ±0,1*

Примечание: * - здесь и далее в таблицах достоверно по сравнению с контролем при Р < 0,05.

Показатели неспецифической резистентности крови телят опытной группы были достоверно выше, чем у контрольных животных (таблица 4). Важным показателем неспецифической резистентности является активность лизоцима - фермента, способного лизировать живые и мертвые клетки

(Фримель X., 1986). Выраженное нарастание лизоцимной активности сыворотки крови у телят опытной группы на 10 и 20-дни на - 25,1 и - 33,2 % по сравнению с контролем, связано с активацией макрофагов, поскольку лизоцим секретируется этими клетками, а также выделяется при дегрануляции полиморфноядерными нейтрофилами. Лизоцим усиливает бактерицидность секреторных иммуноглобулинов (Плященко С.И., 1979).

Отмечено увеличение бактерицидной активности на 10-й и 20-й дни на -7,6 и -31,2%, которая, как известно, по данным Коваленко Я.Р. (1979) отражает суммарное Действие гуморального и клеточного факторов защиты.

Так же претерпела изменения на 10-й и 20-й дни фагоцитарная активность на - 7,9 и - 20,1%, которая не коррелирует с уровнем нейтрофилов, которые в основном обуславливаю'" реакцию фагоцитоза. Увеличение фагоцитарного индекса в определенной мере объясняет причину такого несоответствия. Вероятно, это связано с активностью внутриклеточных систем фагоцитов и повышением опсонических свойств иммуноглобулинов.

В таблице 5 можно отметить увеличение уровня общего белка в крови телят опытной группы, более выражено увеличение на 20-й день на - 14,6 % в сравнении с контрольными животными, отражающее воздействие аминокислоты на процессы обмена веществ организма. При дальнейших анализах крови (через 30 дней) эти различия сгладились.

Таблица 5. Динамика биохимических показателей крови телят

после введения аспарагина

Показатели 10-й день, М±т 20-й день, М±т

контроль, п=10 опыт, п=10 контроль, п=10 опыт, 11=10

Общий белок, % 5,04 ± 0,64 5,75 ± 0,45 5,61 л 0,57 6,43 ± 0,43

Глюкоза, мг % 78,7 ± 3,2 80,4 ± 3,8 82,3 ± 3,7 79,5 ±4,1

Мочевина, мг % 27,5 ± 1,4 29,8 ± 2,9 30,6 ± 1,8 28,8 ± 2,3

Свободные аминокислоты, мг % 14,72 ±0,89 15,37 ±0,68 16,68 ±0,81 15,64 ±0,97

Резервная щелочность, мг % 242,0 ±4,2 276,6 ± 4,4* 301,2 ±8,8 326,4 ± 4,6

Общий кальций, мг % 10,17 ±0,47 9,5б± 0,36 8,33 ± 0,37 7,95 ± 0,41

Неорганический фосфор, мг % 4,SO ± 0,50 4,18 ±0,58 4,06 ± 1,8 4,87 ± 2,3

I 2 3 4 5

Лигшды, мг % 230,5 ± 11,8 256,5 ± 12.5 262,8 ± 13,8 328,4 ± 15,2

Глутатион: общий, мг % 43,54 ± 0,34 42,98 ±0,38 41,05 ±0,56 41,15 ±0,65

восстановленный, мг % 29,21 ±0,21 30,70 ±1,12 30,21 ± 0,25 30,42 ± 0,45

окисленный, мг% 14,33 ±0,68 12,28 ±0,35 10,84 ±0,40 10,73 ±0,55

восстановленный, % 67,09 ±0,38 71,43 ±0,79 73,59 ± 0,32 73,92 ± 0,53

окисленный, % 32,91 ± 0,42 28,57 ±0,88 26,41 ±0,46 26,07 ±0,74

Отношение восстУокисл. 2,04 ±0,29 2,51 ±0,31 2,79 ±0,42 2,84 ± 0,46

Гемоглобин, мг % 8,9 ± 0,48 10,7 ±0,73 9,25 ± 0,57 11,21 ±0,46*

Среднее содержание гемоглобина в эритроците (СГЭ) 16,9 ±0,2 18,3 ±0,4 18,9 ±0,5 19,9 ±0,7

Цветной показатель 0,9 ±0,19 1,1 ±0,7 0,8 ± 0,2 1,0 ±0,4

Примечание: * - Р < 0,05 достоверно в сравнении с контролем.

Показатели концентрации общего белка, глюкозы, свободных аминокислот и мочевины в крови отражают уровень и направленность азотистого обмена у животных, что позволяет сделать заключения о благоприятном влиянии введенного препарата на данные процессы.

Введение телятам опытной группы препарата аспарагина аспартата пролонгированной формы способствовало повышению содержания липидов в крови на - 11,3 % и - 25,1% на 10-й и 20-й дни в сравнении с контролем, которое свидетельствовало о высокой переваримости жира молока в организме телят в результате воздействия преджелудочных эстераз и поджелудочных липаз (таблица 5).

Некоторое снижение уровня свободных аминокислот в крови телят опытной группы по отношению контрольной - 6,2% связано, вероятно, с повышенным использованием треонина, изолейцина и тирозина на синтез белка у животных, имеющих более высокую интенсивность роста. При этом повысилось относительное содержание глюкогенных аминокислот - аспартата, аланина на 24,0%-12,7%, а также цистина, гистидина и аргинина на 14,3%-7,6%-13,4%. Вероятно, изменения в регулирующих системах организма телят произошли под воздействием непрерывно поступающего из места введения

аспарагина. Аспарагин выполнял функцию своеобразного регулятора, имитируя действие пептидов, включающих эту аминокислоту.

Таблица 6. Содержание Т- и В-лимфоцитов в крови телят после введения аспарагина

Показатели 10-й день, М±т 20-й день, М±т

контроль, п=10 | опыт, п=10 контроль, п= 10 | опыт, п= ] 0

Лимфоциты: %

55,9 ± 1,8 60,2 ± 2,4 58,9 ±2,0 59,7 ± 2,7

тыс/мкл 3,2 ±0,14 3,8 ±0,14 3,4 ±0,13 4,1 ±0,19

Т-клетки

% 54,6 59,8 59,5 61,9

тыс/мкл 1,80 ±0,(9 2,29 ±0,10 2,08 ±0,14 2,51 ±0,18

В-клетки

% 22,5 22,3 25,6 21,5

тыс/мкл 0,72 ± 0,80 0,75 ±0,18 0,99 ± 0,04 1,31 ±0,08

Количество лимфоцитов на 10-й и 20-й дни у телят опытной группы превышало на - 7,8 и - 1,4% по сравнению с контрольными животными. Абсолютное количество 'Г-лимфоцитов повысилось по сравнению с контрольной группой на - 17,8%, а число В-лимфоцитов несколько уменьшилось — 4,9%, что отражает влияние введения аспарагина аспартата на клеточный иммунитет, воздействие на пролиферацию Т-лимфоцитов. Повышение иммунобиохимических показателей крови и неспецифической резистентности телят опытной группы привело к стимуляции пищеварения и межуточного обмена, то есть заболеваемость гелят молочный период развития была ниже в 2 раза. Результатом повышения неспецифической резистентности телят опытной группы и изменения направленности азотистого обмена в сторону синтеза белка в организме, явилось, повышение увеличения прироста массы тела в среднем за 3 месяца на - 13,2%, что носил достоверный характер по отношению к контролю.

Выявлена определенная однонаправленность воздействия аминокислоты аспарагина на процессы обмена веществ в организме телят отражающаяся в биохимических показателях крови, на достоверное увеличение содержания белка, общего глутатиона, липидов и показателя резервной щелочности, так как они взаимосвязаны между собой.

Таблица 7. Среднесуточный прирост массы тела телят

после введения орнитина аспартата, г/сут

Группы телят Месяцы опыта ..... Среднее за 3 мес.

1-й, М±т 2-й, М±т 3-й, М±т

контрольная, п-10 466 ± 14 533 ± 13 614 ±23 538 ± 11

опытная, п=10 507 ± 21* 589 ±28* 706 ±40+ 607±17*

±г + 41 + 56 + 92 + 69

±% + 9,3 % + 10,4 + 14,1 + 13,2

Примечание: * - Р < 0,05 достоверно в сравнении с контролем

Таким образом, проведенный научно-производственный опыт показал, что парентеральное введение препарата аспарагина в пролонгированной форме телятам молочного периода выращивания стимулирует становление у них неспецифической резистентности, снижает их заболеваемость и увеличивает прирост массы тела.

I

3.3. Влияние парентерального введения пролонгированной формы препарата «Орницетил» (Гепа-Мерц) на физиологическое состояние и неспецифическую резистентность телят молочного периода выращивания.

Показатели лабораторных исследований крови телят при воздействии препарата орницетила позволяют проанализировать динамику абсолютных и относительных изменений, указывающих на стимуляцию физиологических процессов и неспецифической резистентности организма.

У телят опытной группы отмечалось, повышение количества эритроцитов на 10 и 20-й дни на - 7,3% и - 10,4%; лейкоцитов на - 3,2% и - 5,4% в основном за счет палочкоядерных нейгрофилов и лимфоцитов. Однако у этих животных наблюдалось снижение количества базофилов в крови в пределах нормативных значений (- 50,1% и - 20,3%), что косвенно свидетельствует о повышении функциональной активности щитовидной железы (Назаренко Г.И., Кишкун А.А, 2002). Увеличение количества гемоглобина на - 19,1% и - 28,2%, одновременно повышение СГЭ и цветного показателя, указывающее на активное участие в окислительно-восстановительных процессах организма телят опытной группы по отношению к контролю.

Таблица 8. Динамика морфологических показателей крови телят после

введения орнитина аспартата

Показатели 10-й день, М±ш 20-й день, М±т

контроль, г = 10 опыт, п=10 контроль, п=10 опыт, п=10

Эритроциты, млн/мкл 5,62 ±0,29 5,98 ± 0,33 5,53 ±0,31 6,03 ± 0,23

Лейкоциты, тыс/мкл 8,66 ±0,30 8,94 ± 0,38 8,36 ± 0,42 8,78 ± 0,29

Лейкоформула,%:

палочкоядерные нейтрофилы 4,2 5,1 4,8 5,4

сешентоядерные нейтрофилы 30,1 28,9 30,9 29,2

эозинофилы 2,9 2,8 2,8 2,4

базофилы 1,2 0,8 1:8 1,5

монсциты 4,8 4,7 3,8 3,9

Лимфоциты: % 56,8 57,7 55,9 57,1

Гемоглобин, г % 8,6 * 0,4 10,2 ±0,90 9,7 ± 0,5 12,5 ±0,9

СГЭ 17,10 ±0,62 17,42 ± 1,52 17,54 ±0,59 18,06 ±0,55

Цветной показатель 0,60± 0,50 0,70 ± 0,53 0,80 ±0.52 1,00 ±0,55

Отмеченные изменения отдельных видов лейкоцитов отразились и на показателях неспецифической резистентности организма телят. Число Т-лимфоцитов опытных животных имело тенденцию к увеличению на - 14,3% через 20 дней после введения аспарагина, а число В-лимфоцитов не имело существенных отличий в сравнении с контрольными животными.

Применение препарата орнитина аспартата оказало стимулирующий эффект на неспецифическую резистентность организма телят, в частности на бактерицидную активность сыворотки крови телят опытной группы на 10-й и 20-й дни оказалась выше на -18,3 % и - 29,1 %, что свидетельствует о стимуляции гуморального звгка естественной резистентности организма (Коваленко Я.Р., 1979).

Таблица 9. Динамика показателей неспецифической резистентности крови телят после введения орнитина аспартата

Показатели резистентности 10-й день, М±ш 20-й день, М±ш

контроль, п=10 опыт, п= 10 контроль, п=10 сгыт, п=10

Бактерицидная активность, % 11,78±1,42 12,94±1,47 17,35±1,24 ' 19,60±2,14

Лизоцимная активность, % 13,15±1,13 14,63±1,56 19,02±1,81 23,87^1,62*

Фагоцитарная активность, % 49,51 ±2,25 54,25±2,99 54,16±2,43 63,12±2,55*

Фагоцитарный индекс 1,33±0,04 1,69±0,12* 1,24±0,05 1,58±0,03*

Примечание: * - Р < 0,05 достоверно в сравнении с контролем

В наибольшей степени изменения претерпела фагоцитарная и лизоцимная активности сыворотки крови, особенно на 20 день исследования и носили достоверный характер в сравнении с контролем, в опытной группе телят в период исследования они были выше на - 9,7 и - 16,6% и на - 12,3 и - 25,1 чем в контроле. Вместе с тем лизоцим, секретируемый макрофагами, усиливает бактерицидность секреторных иммуноглобулинов (Плященко С.И., 1979). Повышение фагоцитарной активности слабо коррелирует с уровнем нейтрофилов, которые в основном обуславливают реакцию фагоцитоза. Увеличение фагоцитарного индекса в определенной мере объясняет причину такого несоответствия: изменилась активность фагоцитарных клеток крови.

Анализируя результаты исследований, отмечается то, что орнитин аспартата пролонгированной формы при парентеральном введении активизировал клеточные и гуморальные звенья неспецифической резистентности молодняка.

Концентрация в крови глутатиона и его форм (восстановленного и окисленного) является одним из показателей функциональной активности, определяющей в основном способность защищать иммунокомпетентные клетки от атаки свободных радикалов и активных форм кислорода, что отражалось и в наших исследованиях увеличение содержания общего глутатиона на - 7,1% и - 13,8%, тем самым свидетельствовало о выраженной защитной и детоксицирующей силе организма животного.

Другие биохимические показатели крови опытных (белок, кальций, фосфор) практически не отличались от таковых контрольных животных.

При исследовании крови на содержание свободных аминокислот отметили в опытной группе, снижении их уровня на 14,2%, в сравнении с контрольной, что вероятно связано с повышенным использованием аминокислот в организме животных. Особенно метионина, изолейцина, фенилаланина и лизина, имеющих более высокую скорость роста и синтез белка в организме.

Применение пролонгированной формы орнитина аспартата оказало положительное влияние на физиологическое состояние организма и естественную резистентность, что отразилось на течении и тяжести заболеваний желудочно-кишечного тракта телят сопровождающихся диарейным синдромом. В результате, в опытной группе заболел 1 теленок, что составляет - 10% , а в контрольной - 3 - 30%. Препарат орнитин аспартата стимулировал неспецифическую резистентность под действием которого наблюдали снижение заболеваемости телят в молочный период выращивания в 2,5 раза в сравнении с контролем. Наблюдали повышение прироста массы тела в среднем за 3 месяца исследования на - 18,3% (507 и 600 г/сут в контрольной и опытной группах, соответственно), что более отчетливо проявилось в 1-й месяц выращивания - 20,6% (428 и 516 г/сут в контрольной и опытной группах).

Проведенный научно-производственный опыт показал, что парентеральное введение препарата «Орницетил» (Гепа-Мерц) в пролонгированной форме телятам молочного периода выращивания, стимулирует становление у них неспецифической резистентности за счет увеличения в крови телят количества лимфоцитов, уровня бактерицидной, лизоцимной и фагоцитарной активностей, снижая тяжесть и длительность заболевания телят тем самым, увеличивая прирост массы тела.

ВЫВОДЫ

1. Аминокислота орнитин, задаваемая в форме водного раствора новорожденным телятам в первые сутки, повышает интенсивность поглощения коллостральных иммуноглобулинов из кишечника на -16,4% по сравнению с контрольными животными, увеличивает количество лейкоцитов и эритроцитов в их крови, что обуславливает повышенный уровень иммунобиологических реакций.

2. Перорапьное применение орнитина в течение 7 суток новорожденным телятам способствовало становлению их резистентности, повысило уровень аминокислот орнитинового цикла мочевинообразования в крови - цитруллина, аргинина и орнитина во фракции свободных аминокислот. У телят опытной группы за 2 месяца выращивания прирост массы тела был выше на - 7,6 % в сравнении с контрольными животными.

3. Парентеральное введение аспарагина в пролонгированной форме телятам 20-30-дневного возраста стимулировало развитие неспецифической резистентности, что проявилось в повышении количества Т-лимфоцитов в крови телят на - 17,8%, показателей лизоцимной на - 25,1%, бактерицидной на - 7,6% и фагоцитарной на - 7,9% активностей, а также числа эритроцитов 15,0% в сравнении с контролем.

4. Инъекции препарата аспарагина повысили эффективность усвоения аминокислот корма телятами, снизили их заболеваемость в 2 раза по сравнению с контролем и увеличили прирост массы тела на 13,2%.

5. Разработана пролонгированная форма препарата «Орницеткл» (орнитина аспартат) для парентерального применения телятам молочного периода выращивания. Подкожное введение препарата телятам 20-30-дневного возраста в дозе 4 мг на кг массы тела стимулировало развитие неспецифической резистентности этих животных, что проявилось в повышении количества Т- и В-

лимфоцитов на -14,3% и -9,0% соответственно, показателей лизоцимной на - 25,1%, бактерицидной на -29,1%, фагоцитарной активностей на-16,6% (Р < 0,05).

б. Применение препарата «Орницетил», повысило прирост массы тела телят в среднем на - 18,3% за три месяца выращивания молодняка, что обусловлено снижением их заболеваемости в 2 раза по сравнению с контролем, повышением усвоении питательных веществ корма.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Для повышения неспецифической резистентности новорожденных телят предлагается пероральное применение аминокислоты орнитина в течение 7 дней: в первый день по 0,3 г трехкратно через 15 минут после выпаивания молозива, в последующие дни по 1,0 г три раза в день.

2. В целях стимуляции естественной резистентности и повышения иммунологического статуса организма телят молочного периода выращивания, рекомендуется вводить парентерально препараты аспарагина и орнитина аспартата в пролонгированной форме в дозе 200 мг на голову (~ 4 мг/кг массы тела).

Выражаем искрению глубокую благодарность главному научному сотруднику лаборатории белково-аминокислотного питания ВНИИФБиП сельскохозяйственных животных, д.б.н. JI.E!.Харитонову за всестороннюю научно-методическую помощь в выполнении работы.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Павлова, И.Г. Действие препаратов аминокислот на всасывание иммуноглобулинов и становление резистентности у новорожденных телят. / В.И; Великанов, И.С. Шумов, М.А. Маслова, H.A. Калина, Л.В. Харитонов, А.И. Тимофеева, И.Г. Павлова. // Ученые записки ФГОУ ВПО КГАВМ, - Казань, 2006. - Т. 186. - С. 75-84.

2. Павлова, И.Г. Результаты формирования естественной резестентности у телят при применении препаратов аминокислот. / В.И. Великанов, И.Г. Павлова, Л.В. Харитонов, Е.А. Пронькина. // Материалы первого международного конгресса ветеринарных фармакологов «эффективное и безопасное лекарственное средство», посвященного 200-летию высшего ветеринарного образования и Санкт-Петербургской государственной академии ветеринарной медицины, - Санкт-Петербург, 2008. - С. 37.

3. Павлова, И.Г. Морфологические и биохимические показатели крови телят на фоне применения препарата аминокислот. / В.И. Великанов, И.Г. Павлова, Л.В. Харитонов, Д.Е. Пронькин // Научно-теоретический медицинский журнал «Морфология», «ЭСКУЛАП». - Т. 133 (4), - Санкт -Петербург,2008.-С. 61.

4. Павлова, И.Г. Показатели формирования естественной резистентности у телят при применении препаратов аминокислот. / В.И. Великанов, И.Г. Павлова, Л.В. Харитонов, М.В. Кузнецова, Е.А. Муравьева, Л.Ю. Воронова. // Научные труды II Съезда физиологов СНГ, Кишинэу, Молдова, 29-31 октября 2008, Москва - Кишинэу, Медицина - Здоровье. - Кишинэу, 2008. - С. 288.

5. Павлова, И.Г. Некоторые показатели формирования естественной резистентности у телят при применении препаратов аминокислот. /В.И. Великанов, И.Г. Павлова, Л.В. Харитонов, М.В. Кузнецова, Е.А. Муравьева, Л.Ю. Воронова. // Материалы научно-практической конференции преподавателей и студентов по итогам 2007-2008 учебного года «Проблемы сельскохозяйственного производства». - Нижний Новгород, 2008. - С. 24-25.

6. Павлова, И.Г. Влияние препаратов аминокислот на всасывание иммуноглобулинов у новорожденных телят и становление общей резистентности. / Л.В. Харитонов, В.И. Великанов, И.Г. Павлова, С.Н. Бормотов. П Материалы V Международной конференции посвященной 50-летию ВНИИФБиП. «Актуальные проблемы биологии в животноводстве». -Боровск, 2010.-С. 235-237.

Формат 60x84 1/16. Печать офсетная Печл. 1 Тираж 100 экз. Заказ № 50 Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия 603107, г. Нижний Новгород, проспект Гагарина, 97

Типография НГСХА

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Павлова, Ирина Геннадьевна

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ м » ■

1.1. Особенности пищеварения и обмена веществ у телят молочного периода выращивания

1.2. Возрастные особенности неспецифической резистентности телят и их иммунитета

1.3. Биологическая функция аминокислот в организме животных

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Действие аминокислоты орнитина на всасывание иммуноглобулинов молозива, обмен веществ и естественную резистентность новорожденных телят

3.2. Влияние пролонгированной формы препарата аспарагина на физиологическое состояние и неспецифическую резистентность телят молочного периода выращивания

3.3. Влияние парентерального введения пролонгированной формы препарата «Орницетил» (Гепа-Мерц) г,на физиологическое состояние и неспецифическую резистентность телят молочного периода выращивания

Введение Диссертация по биологии, на тему "Влияние аминокислот орнитина и аспартата на физиологическое состояние и неспецифическую резистентность телят"

г

Актуальность проблемы

Выращивание здорового молодняка сельскохозяйственных животных является весьма актуальной проблемой. Одним из °резервов увеличения" продуктивности животных считается повышение жизнеспособности и сохранности молодняка, за счет поддержания иммунологического статуса организма в различные периоды жизни животных. Недостаточность защитных механизмов организма приводит к повышению уровня заболеваемости животных, невозможности адекватного ответа на чужеродные агенты, особенно в ранний постнатальный период развития (Маренков В.Г., 2004; Федоров Ю.Н., 2005, 2009; Самбуров Н.В., 2006 и др.). В раннем постнатальном онтогенезе, когда роль пассивного иммунитета уже снижается, а формирование собственного активного находится в начальной стадии организм молодняка остается слабо защищенным. Именно в этот период телята подвержены возникновению заболеваний различной этиологии, которыми поражается до 70 — 80% животных, что отражается на их росте и развитии, снижая их продуктивность во взрослом состоянии на 15% и более (Самбуров Н.В., 2006). В связи с этим считается наиболее приемлемо стимулирование иммуногенеза.

По повышению продуктивности и сохранности молодняка с минимальными экономическими потерями, связанными с низкой резистентностью животных, предлагается множество препаратов различного происхождения, участвующих в процессах жизнедеятельности организма: витамины, иммуностимуляторы, макро - и микроэлементы, пептиды и многие другие. Наиболее перспективным направлением является применение веществ природного происхождения, в том числе аминокислот, которые в организме выполняют пластическую, энергетическую роли, и регуляторную функцию, что отражается на иммунной системе. Известно, что аминокислоты в свободной форме или в составе пептидов участвуют в регуляции деятельности иммунной системы организма животных (Белокрылов Г.А. и др., 1986; Середа А.Д. и др., 2001). При этом активность пептида чаще всего определяется какой-то одной из аминокислот.

Наибольшее значение аминокислоты имеют в питании новорожденных телят, составляя более 2/3 сухого вещества молозива, а также участвуют в регуляции всасывания иммуноглобулинов (Bygh L.S., StaleyT.E., 1980; Солдатов А.П. и др. 1989; Харитонов JI.B., 2000, 2004), обеспечивая тем самым передачу колострального иммунитета от коровы к теленку.

Аминокислоты, их соли, смеси, и производные как препараты метаболической фармакотерапии характеризуются безвредностью, малой выраженностью побочных эффектов и отсутствием аллергизириющего влияния. Во многих случаях они служат средствами патогенетической профилактики и лечения (Западнюк В.И., 1982).

Изучению влияния аминокислот на формирование естественной резистентности молодняка сельскохозяйственных животных в нашей стране посвящено небольшое количество работ, хотя проблема повышения общей резистентности молодняка является актуальной и ее решение может служить одним из путей повышения продуктивности и рентабельности животноводства.

В совместных работах кафедры анатомии, фармакологии с токсикологией ФГОУ ВПО «НГСХА» и лаборатории белково-аминокислотного питания ВНИИФБиП (г.Боровск) Калужской области. В качестве и мму номодулирую щих средств на телятах изучены препараты ряда аминокислот — таурин, глицин, аланин, глутаминовая и аспарагиновая кислоты, аргинин и др., с положительным результатом (Харитонов JI.B., Великанов В.И., и др. 1999-2010 гг.).

Выполненная нами научно — исследовательская работа явилась продолжением и углублением исследований названных авторов и направлена на изучение влияния препаратов аминокислот орнитинового цикла мочевинообразования — орнитина, аспарагина аспартата и препаратов на их основе - орнитина аспартата на физиологическое состояние и неспецифическую резистентность организма телят молочного периода развития.

Цель и задачи исследований

Целью наших исследований являлось — изучение влияния аминокислот орнитинового цикла мочевинообразования - орнитина, аспарагина, аспартата и препаратов на их основе на физиологическое состояние и неспецифическую резистентность организма телят в постнатальный период развития.

Для достижения поставленной цели были намечены следующие задачи:

1. Определить влияние аминокислоты орнитина, входящего в состав свободных аминокислот молока и молозива, на поглощение иммуноглобулинов молозива и становление неспецифической резистентности у новорожденных телят.

2. Изучить влияние препарата аспарагина пролонгированной формы при парентеральном применении на физиологическое состояние и резистентность телят молочного периода выращивания.

3. Выяснить влияние парентерального введения пролонгированной формы препарата орнитина аспартата — орницетил (Гепа-Мерц) на физиологическое состояние и естественную резистентность телят молочного периода выращивания.

Научная новизна

Впервые изучено влияние препаратов аминокислот орнитина, аспарагина и орнитина аспартата на физиологическое состояние и формирование естественной резистентности телят, их заболеваемость и продуктивность.

Показано, что аминокислота орнитин способствует активной регуляции всасывания иммуноглобулинов молозива из кишечника у новорожденных телят, положительно воздействуя на неспецифическую -резистентность и прирост массы телят.

Препараты, изучаемых аминокислот пролонгированной формы при парентеральном введении телятам молочного периода выращивания стимулируют становление и развитие неспецифической резистентности этих животных, снижают заболеваемость и повышают прирост массы тела.

Полученные данные экспериментальных исследований позволяют расширить и углубить современные представления о влияние этих аминокислот на стимуляцию неспецифической резистентности телят, их рост и развитие.

Теоретическая и практическая значимость работы

Установлена возможность применения препаратов аминокислот орнитина, аспарагина и орнитина аспартата для стимуляции неспецифической резистентности организма телят молочного периода выращивания и в качестве средств метаболической фармакопрофилактики.

Результаты экспериментальных исследований физиологического состояния телят и их изменения под влиянием препаратов аминокислот орнитина, апспарагина и орнитина аспартата расширяют и углубляют положения о действии аминокислот природного происхождения на иммунную систему организма животных. В теоретическом аспекте важным является то, что установлено активизация физиологического состояния и естественной резистентности у животных под влиянием применения препаратов исследуемых нами аминокислот. Полученные в экспериментах данные имеют практическое значение.

Установлено преимущество препаратов пролонгированной формы аспарагина и орнитина аспартата, вводимых парентерально, что стимулируют неспецифическую резистентность, тем самым способствуют снижению длительности и тяжести заболеваний, связанных с нарушением пищеварения, положительно отражаясь на приросте массы тела телят.

Материалы работы будут использованы при подготовке временного наставления по применению аминокислот в животноводстве и ветеринарии. Результаты исследований используются в. учебном процессе на кафедре анатомии, фармакологии с токсикологией ФГОУ ВПО «Нижегородская • государственная сельскохозяйственная академия». Внедрено в учебный процесс ФГОУ ВПО «Чувашская государственная сельскохозяйственная академия», ГОУ ВПО «Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарева». Результаты исследований внедрены в хозяйствах Кстовского, Дальне-Константиновского районов Нижегородской области и в хозяйствах Медведевского района Республики Марий Эл.

Положения, выносимые на защиту

1. Аминокислота орнитин при пероральном применении новорожденным телятам активизирует регуляцию всасывания иммунных белков молозива из кишечника в течение первых суток, а в дальнейшем стимулирует формирование неспецифической резистентности и снижает нарушение процессов пищеварения, сопровождающиеся диарейным синдромом различной этиологии.

2. Препараты аминокислот аспарагина и орнитина аспартата пролонгированной формы, введенные парентерально телятам-молочникам, корректируют физиологическое состояние, повышая неспецифическую резистентность, тем самым снижают заболеваемость и повышают прирост живой массы этих животных.

Апробация работы

Основные положения диссертационной работы были доложены и обсуждены на: межкафедральных заседаниях сотрудников НГСХА (Н.Новгород, 2006-2010 гг.), I Международном конгрессе ветеринарных фармакологов «Эффективное и безопасное- лекарственное средство» посвященное 200-летик>1 высшего ветеринарного образования, Санкт

Петербурской государственной академии ветеринарной медицины (Санкт

Петербург, 2008 г.), И Съезде физиологов СНГ, Кишинэу, Молдова (Москва -Кишинэу, 29-31 октября 2008 г.), V Международной конференции посвященной 50-летию ВНИИФБиП (Боровск, 10-12 сентября 2010 г.).

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 6 статей, в том числе 2 в ведущем научном издании, рекомендованном ВАК Министерства образования и науки РФ.

Структуры и объем диссертации

Диссертация изложена на 134 страницах компьютерного набора и состоит из введения, обзора литературы, характеристики материала, методов исследования, результатов собственных исследований, заключения, выводов, практических предложений, библиографического указателя и приложения. Список цитируемой литературы включает 208 источников, в том числе 31 иностранных. Работа иллюстрирована 17 таблицами и 9 диаграммами.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Павлова, Ирина Геннадьевна

выводы

1. Аминокислота орнитин, задаваемая в форме водного раствора новорожденным телятам в первые сутки, повышает интенсивность поглощения коллостральных иммуноглобулинов из кишечника на — 16,4% по сравнению с контрольными животными, увеличивает количество лейкоцитов и эритроцитов в их крови, что обуславливает повышенный уровень иммунобиологических реакций.

2. Пероральное применение орнитина в течение 7 суток новорожденным телятам способствовало становлению их резистентности, повысило уровень аминокислот орнитинового цикла мочевинообразования в крови - цитруллина, аргинина и орнитина во фракции свободных аминокислот. У телят опытной группы за 2 месяца выращивания прирост массы тела был выше на - 7,6 % в сравнении с контрольными животными.

3. Парентеральное введение аспарагина в пролонгированной форме телятам 20-30-дневного возраста стимулировало развитие неспецифической резистентности, что проявилось в повышении количества Т-лимфоцитов в крови телят на — 17,8%, показателей лизоцимной на — 25,1%, бактерицидной на - 7,6% и фагоцитарной на - 7,9% активностей, а также числа эритроцитов 15,0% в сравнении с контролем.

4. Инъекции препарата аспарагина повысили эффективность усвоения аминокислот корма телятами, снизили их заболеваемость в 2 раза по сравнению с контролем и увеличили прирост массы тела на 13,2%.

5. Разработана пролонгированная форма препарата «Орницетил» (орнитина аспартат) для парентерального применения телятам молочного периода выращивания. Подкожное введение препарата телятам 20-30-дневного возраста в дозе 4 мг на кг массы тела стимулировало развитие неспецифической резистентности этих животных, что проявилось в повышении количества Т- и В-лимфоцитов на —14,3% и —9,0% соответственно, показателей лизоцимной на

- 25,1%, бактерицидной на -29,1%, фагоцитарной активностей на -16,6% (Р <

0.05.

6. Применение препарата «Орницетил», повысило прирост массы тела телят в среднем на — 18,3% за три месяца выращивания молодняка, что обусловлено снижением их заболеваемости в 2 раза по сравнению с контролем, повышением усвоении питательных веществ корма.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Для повышения неспецифической резистентности новорожденных телят предлагается пероральное применение аминокислоты орнитина в течение 7 дней: в первый день по 0,3 г трехкратно через 15 минут после выпаивания молозива, в последующие дни по 1,0 г три раза в день.

2. В целях стимуляции естественной резистентности и повышения иммунологического статуса организма телят молочного периода выращивания, рекомендуется вводить парентерально препараты аспарагина и орнитина аспартата в пролонгированной форме в дозе 200 мг на голову 4 мг/кг массы тела).

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Незащищенность организма в ранний постнатальный период, снижение уровня естественной резистентности и приобретенные, (вторичные) иммунодефицитные состояния сельскохозяйственных животных на-современном этапе развития животноводства получили широкое распространение. В начальной стадии развития эти иммунологические изменения, как правило, проявляются в результате нарушения условий кормления и содержания животных, и других причин технологического характера.

Внедрение интенсивных методов животноводства, в том числе выращивания молодняка крупного рогатого скота, поставило новые задачи по увеличению продуктивности сельскохозяйственных животных. Одним из резервов может послужить повышение резистентности животных, с помощью применения специальных препаратов. Несмотря, на множество предложенных для этих целей препаратов, большой интерес вызывают биологически активные вещества, в том числе отдельные специфические аминокислоты, которые оказывают стимулирующее действие на имунно - эндокринную систему организма (Шамберев КШ., 1998; Иванов И.О. и др;, 2004, 2007; Прозоровский В.Б., 2008).

Известно, что аминокислоты в свободной форме или в составе пептидов участвуют в регуляции деятельности иммунной системы организма животных (Белокрылов Г.А. и др., 1986; Середа А.Д. и др., 2001), в том числе оказывают влияние на всасывание иммуноглобулинов. При этом биологическая активность пептида чаще всего определяется одной из аминокислот.

Изучению влияния аминокислот на формирование естественной резистентности молодняка сельскохозяйственных животных в нашей стране посвящено небольшое количество работ (Харитонов Л.В; и др., 2001, 2002; Иванов И.С. и др., 2004, 2007): Проблема повышения общей; резистентности молодняка является, актуальной, и ее решение может служить одним из путей повышения продуктивности и рентабельности животноводства.

Предпосылкой проведению опытов- также послужили работы Белокрылова Г.А и сотр. (1986, 1999), в которых выявлена способность ряда аминокислот in vitro, и на лабораторных животных ускорять дифференцировку предшественников Т-клеток в Т-лимфоциты и усиливать ответ на гетерологические эритроциты. Эти аминокислоты входят в состав ряда иммуноактивных пептидов и в основном определяют их активность. Наибольшую активность в этом отношении проявляли аспарагиновая кислота и аспарагин, глутаминовая кислота, аланин, цистеин и другие. Авторы считают, что применение препаратов аминокислот более целесообразно по сравнению с пептидами, поскольку последние труднее синтезировать. Они же применяли многократные инъекции растворов аминокислот, что делает невозможным использование подобного приема в производственных условиях. Кроме того, опыты проводились на лабораторных животных или на спленоцитах in vitro, что затрудняет установление дозировки препаратов для животных. Полученные авторами результаты также не могут быть полностью перенесены на сельскохозяйственных животных из-за особенностей их эмбрионального и~ постнатального развития, условий' кормления и содержания. В проведенных опытах изучен не весь спектр аминокислот, содержащихся в организме животных.

В качестве лекарственных препаратов иммуномодуляторов в ветеринарной практике испытано небольшое количество аминокислот в связи с недостаточной изученностью фармакодинамики и терапевтической эффективности. Этому должно предшествовать изучение влияния препаратов аминокислот на различные функции, организма в нормальных физиологических условиях, что и явилось предметом наших исследований.

Ранее было изучено влияние глицина, аспартата, аргинина и других аминокислот и их смесей на интенсивность! всасывания иммуноглобулинов белков у новорожденных телят и становление их резистентности (Харитонов Л.В. и др., 2001, 2002; Великанов В.И. и др., 2006).

В медицине рекомендуется применение ряда аминокислот и их смесей при различных патологиях организма человека. Использование аминокислот применяемых в медицинской практике, приемлемо и для сельскохозяйственных животных в производственных условиях, только необходимо учитывать их дозу и кратность применения.

В последние годы появились новые данные о роли аминокислот в регуляции физиологических процессов в организме, и об особенностях обмена, что позволило разработать препараты для метаболической коррекции при целом ряде патологических состояний (Нефедов Л.И., 1995; Хохлов А.П. и др., 2003).

Используются аминокислоты и в качестве иммуномодуляторов (Воробьев A.A. и др., 1995; Хавинсон В.Х. и др., 2002).

Исследователи отмечают, что аминокислоты во многих случаях являются средствами патогенетической профилактики и терапии (Западнюк В.И. и др., 1982).

Препараты этих аминокислот нашли применение в медицине в качестве гипоаммониемических средств (орницетил), для стимуляции выделения инсулина, СТГ и др. Данные аминокислоты наряду с аргинином, глутамином и другими аминокислотами, играют важную роль в организме, активируют цикл образования мочевины и тем самым усиливают детоксикацию аммиака. Участвуют в стимуляции цикла Кребса, который является основным источником энергии для гепатоцитов, играют определенную роль в иммуногенезе.

Нами были определены задачи, изучить действие аминокислот орнитина и аспартата на интенсивность всасывания иммуноглобулинов молозива в кишечнике новорожденных телят, становление неспецифической резистентности и ее стимуляции у телят молочного периода выращивания.

Новорожденный теленок в первые часы после рождения весьма восприимчив к различной патогенной микрофлоре окружающей среды, так как рождается практически «стерильным», что может отразится на физиологическом состояние организма. Отсутствие у теленка в крови иммуноактивных белков объясняется тем, что иммуноглобулины, как высокомолекулярные белковые вещества, не проходят через плацентарный барьер материнского организма. Поэтому необходимо своевременное скармливание молозивом, так как происходит перенос иммуноглобулинов от коровы к теленку через молозиво, и при кишечной абсорбции в кровеносное русло телят не меняют своей структуры и функции, что говорит о наличии свободных аминокислот. Иммуноглобулины появляются в сыворотке крови только спустя 3-4 часа после скармливания молозива, и на 2-3-и сутки их жизни концентрация этих иммуноактивных белков достигает максимального уровня (Холод В.М., 1983). Пассивно приобретенные антитела обладают высокой* активностью против различных антигенов микробного и вирусного происхождения.

Аминокислоты* имеют большое значение в питании и жизнеобеспечении новорожденных телят, вместе взятые аминокислоты составляют более % всех питательных веществ молозива и покрывая более половины энергетических затрат организма. Через молозиво осуществляется^ передача пассивного иммунитета от матери к новорожденному теленку путем кишечной абсорбции, что играет особую роль, как биологический регулятор жизнедеятельности теленка.

Ранее предпринимались попытки повышения биологической ценности молозива различными способами с помощью добавок к нему биологически активных веществ (Эпштейн H.A., 1980; Папилов Н.А., Неймарк Т.Ю., 1984; Чадюк Т.И. 1985; Шамберев Ю.Н., 1996).

В ранний постнатальный период — «иммунная брешь», когда' снижается колостральный иммунитет, а собственный активный еще не сформировался, установлена связь между низким содержанием иммуноглобулинов в крови1 новорожденных телят и их заболеваемостью, поэтому считается целесообразным применение стимуляторов иммуногенеза.

Иммуноглобулины различных классов, поступившие в организм теленка, распределяются в нем неравномерно. Наибольшее количество, находится в сыворотке крови, затем в других биологических жидкостях и межклеточном пространстве. Можно отметить, что молозиво с повышенным содержанием иммуноглобулинов является стартером для дальнейшего роста и развития молодняка.

Считается, что абсорбция иммуноглобулинов у новорожденных телят более интенсивно и в неизмененном виде протекает лишь впервые 24 часа, а затем эпителиальные клетки кишечника теряют способность к поглощению макромолекул. Затем уровень иммуноглобулинов понижается, достигая минимума между 2-й и 5-й неделями жизни животного. Скорость снижениям зависит от количества иммуноглобулинов, полученного теленком с молозивом и абсорбированного в желудочно-кишечном тракте, а также от интенсивности • их эндогенного синтеза, который начинается с первых дней жизни теленка. В наших исследованиях, это учитывалось при выпаивании орнитина сразу после рождения и последующие 6 дней.

Абсорбцию иммуноглобулинов стимулируют ряд веществ молозива — это низкомолекулярные протеиновые фракции, соединения фосфора, соли молочной и ряда летучих жирных кислот. Уменьшают всасывание иммуноглобулинов гистамин, большие количества глюкозы и лактозы (Солдатов А.П. и др., 1989).

При исследованиях влияния аминокислоты орнитина об интенсивности всасывания иммуноглобулинов в кишечнике, судили по их концентрации в сыворотке крови телят через сутки после рождения.

Изучаемая аминокислота орнитин, имеется в составе свободных аминокислот молока и* молозива (Lykos Т. and Varga G.A., 1997). Назначение свободных аминокислот молока и молозива точно не установлено. Высказываются предположения (Бакрадзе Д.С., 1977), что они являются легко доступными питательными веществами, однако низкий уровень этих веществ в молоке и молозиве и существенное отличие от аминокислотного состава белков молока позволяют предположить участие свободных аминокислот в регуляции процессов пищеварения, всасывания, выделения гормонов и возможно в стимуляции неспецифической резистентности

Пероральное применение орнитина новорожденным телятам в первые сутки после рождения трижды в дозе 0,3г на животное и увеличивало концентрацию иммуноглобулинов в их крови на 16,4 % в сравнении с контрольными животными. При этом в крови опытных телят были более высокими показатели резистентности: количество эритроцитов и лейкоцитов -5,3% - 9,6% и 6,3 % - 12,1 %, а также уровень свободных аминокислот орнитинового цикла — цитруллина, аргинина, орнитина, а также гистидина и лейцина. Наблюдалось некоторое снижение уровня содержания аминокислот валина, треонина, что указывает на их активное использование, на синтез белка и других азотосодержащих веществ. Дальнейшее применение изучаемой аминокислоты трижды в день в дозе 1,0 г на голову и в течение 6 суток сдерживало снижение уровня иммуноглобулинов в крови телят.

Пероральное применение орнитина оказало воздействие на процессы пищеварения телят, что нашло отражение в уровне и направленности азотистого и углеводного обменов в организме. Стимуляция на процессы пищеварения и межуточного обмена, а также становление неспецифической резистентности в ранний постнатальный период способствовала снижению заболеваемости животных и повышению их среднесуточных приростов массы тела за 3-месячный период в среднем на 7,6% в сравнении с контролем.

Вероятно, изучаемая аминокислота играет роль своеобразного медиатора в процессах регуляции пиноцитоза в эпителиальных клетках кишечника, характерных для раннего постнатального периода. В опытах И.Л. Кузнецова и др. (2001), проведенных по аналогичной схеме, применяя^ не одну аминокислоту, а смесь аминокислот с разветвленной цепью (лейцин + изолейцин + валин), снижала интенсивность всасывания иммуноглобулинов на 20%. Известно, что названные аминокислоты молозива лишь в незначительных количествах присутствуют во фракции свободных аминокислот, хотя в составе белков молока составляют более 20 %.

Вероятно, свободные аминокислоты молозива в период всасывания иммуноглобулинов у новорожденных телят играют присущие им физиологические функции и биохимические превращения, характерные для других возрастных периодов животных: стимуляция всасывания глюкозы и ряда аминокислот, микро- и макроэлементов; влияние на моторику желудочно-кишечного тракта и эвакуацию; воздействие на секреторную деятельность желудка, поджелудочной железы и печени; стимуляция выделения интестинальных гормонов и гормонов «общего» действия, и многое другое. При этом физиологический механизм действия использованной аминокислоты в опыте сложен и многогранен.

При пероральном применение орнитина происходит прямое воздействие на элементы иммунной, системы и желудочно-кишечного тракта — активность пищеварительных ферментов, выделение соматотропного гормона'и инсулина, так как применялись большие дозы аминокислоты и многократно.

Отмечено, через сутки и на 10-й день после выпаивания орнитина увеличение уровня мочевины в крови на 5,3% и 6,1%, а на 20 день исследования снижение на 9,9% в опытной группе в сравнении с контролем. Это связано с усилением всасывания азотистых веществ молозива и превращением орнитина в цикле мочевинообразования.

Содержание глюкозы в крови опытной группы в сравнении с контролем находилось на более низком уровне, что связано с ее использованием в энергетических целях и синтезе ряда веществ.

Полученные результаты раскрывают некоторые стороны регуляции всасывания иммуноглобулинов - молозива у телят в ранний постнатальный период и становления. естественной резистентности. Это может послужить основной разработки физиологически обоснованных способов стимуляции неспецифической резистентности новорожденных телят, сокращая их заболеваемость.

Как профилактическое и лечебное средство при болезнях телят, сопровождающихся диарейным синдромом, некоторые аминокислоты могут тормозить развитие патологического процесса (Захаренко И.А. и др., 1992), учитывая многообразие физиологической функции и биохимических свойств этих аминокислот. Помимо обнаруженных в опытах стимуляции неспецифической резистентности организма телят, орнитин мог оказать положительное воздействие благодаря детоксикации аммиака, фенолов и других конечных продуктов метаболизма, нейтрализации свободных радикалов^ и перекисей липидов и белков.

При болезнях желудочно-кишечного тракта телят, как и при других патологиях, обычно возрастает образование свободных радикалов и перекисей липидов и белков, в нейтрализации которых может участвовать орнитин как активный» антиоксидант среди аминокислот (Маркова И.В., Шабалов Н.П., 1993). Орнитин обладает также целым рядом других свойств, проявление которых возможно при состоянии пониженной резистентности и нормализации процессов пищеварения и межуточного обмена.

Следующие опыты были посвящены изучению влияния пролонгированных форм препаратов аспарагина и орнитина аспартата. на физиологическое состояние и резистентность телят молочного периода выращивания. Опыты проводились на телятах 20-30- дневного возраста в условиях животноводческого хозяйства.

Как ранее было отмечено,, что предпосылкой проведения опытов послужили работы Белокрылова Г.А и сотр. (1986, 1999), которые выяснили, своеобразным лидером оказалась аспарагиновая кислота, а на втором месте по воздействию на иммунную систему стоит аспарагин.

Разработаны и испытаны пролонгированные формы аминокислот аспарагина и орнитина аспартата для парентерального применения. Инъекционная пролонгированная форма изучаемых нами препаратов, как и других, ранее изученных - аспартат, аргинин, глицин (Харитонов Л.В., Великанов В.И. и др., 2000-2010), имеет технологическое и экономическое преимущество в применении, поскольку вводится однократно и в микродозах.

При парентеральном применении воздействие аминокислоты, в основном идет на гистиоциты и макрофаги.в подкожной клетчатке, которые активируют другие иммунокомпетентные клетки. Использование перорального и парентерального введения аминокислот, дало положительные результаты по стимуляции неспецифической резистентности, хотя пути воздействия различны.

При анализе крови телят по показателям неспецифической резистентности на 10-й день после введения препарата аспарагина в опытной группе телят существенных изменений не наблюдалось, однако на 20-й день было отмечено повышение бактерицидной и лизоцимной активности крови на 31,2% и 33,2% в сравнении с контролем.

В крови телят опытной группы в сравнении, с контрольными животными через 10 дней после введения аспарагина наблюдалось увеличение уровня белка на 14,6 % и гемоглобина на 20,2% причем на 20 день 21,2 % и носил достоверный характер Р<0,05, что позволяет сделать вывод о повышении эффективности использования азотистых веществ в организме животных на синтетические цели. Снизилось содержание в крови свободных аминокислот, в основном за счет лизина, метионина и других, использованных, вероятно, на синтез белка. При этом повысилось относительное содержание глюкогенных аминокислот — аспартата, аланина, а также цистина, гистидина и аргинина.

Вероятно, изменения в регулирующих системах организма телят произошли под воздействием непрерывно поступающего из места введения аспарагина. Аспарагин выполнял функцию своеобразного регулятора, имитируя действие пептидов, включающих эту аминокислоту.

Стимуляция неспецифической резистентности позволила животным легче переносить различные заболевания, наблюдающиеся в период исследования, или избежать их. Не исключается действие аспарагина через стимуляцию выделения соматотропного гормона (Западнюк В.И. и др., 1982) или инсулина (Шамберев Ю.Н. и др., 1999, 2001), однако, судя по исследованиям других авторов, для ощутимых эффектов необходимы более высокие дозы аминокислот (Балаболкин М.И., 1978).

Результатом повышения неспецифической резистентности и направленности азотистого обмена в сторону улучшения синтеза белка в организме явилось увеличение прироста массы тела животных опытной группы в сравнении с контролем на протяжении всего периода исследования, в среднем за 3 месяца на 13,2%.

Анализируя проведенный опыт, инъекции пролонгированной формы, препарата орнитина аспартата оказало разностороннее действие на организм животных, стимулируя неспецифическую резистентность и процессы прироста массы тела опытных животных.

Применение и направленность действия препарата орнитина аспартата на организм опытных животных были сходными с аспарагином, но имелись существенные различия динамики изменения прироста живой массы телят, неспецифической резистентности животных опытной группы в сравнении с контролем.

Изменение показателей неспецифической резистентности крови опытной группы в сторону увеличения отмечено на 10-й и на 20-й дни опыта и на этом уровне сохранялось в течение 2-х месяцев. Сходные закономерности наблюдались в изменении количества эритроцитов и лейкоцитов в крови телят.

Характерным при этом было увеличение Т-лимфоцитов на 14,3%у опытных телят в сравнении с контролем.

О благоприятном влиянии препарата орнитина аспартата на состояние окислительных процессов в организме животных позволяет судить увеличение уровня гемоглобина на 28,2%, восстановленной формы глутатиона на 35,2%, повышение СГЭ и цветного показателя, указывающее на активное участие в окислительно-восстановительных процессах организма телят опытной группы по отношению к контролю.

Бактерицидная активность, как известно, отражает состояние как гуморального, так и клеточного звеньев иммунитета, поэтому можно считать объективным повышение показателя уровня Т-лимфоцитов под воздействием инъекций орнитина аспартата.

Лизоцимная активность крови телят опытной группы превышала подобный показатель животных контрольной группы на Л 2,3% и 25,1%, и в то же время увеличилась величина фагоцитарной активности на 9,7% и 16,6%, и оба изменения показателя были достоверными.

Опыты проводились на физиологически здоровых животных, хотя в процессе исследования у телят наблюдалась незначительная патология, сопровождающаяся расстройством пищеварения. Благодаря повышению неспецифической резистентности телят опытных групп, они в меньшей степени подвергались влиянию неблагоприятных факторов окружающей среды в условиях производства и легче переносили заболевания, с диарейным синдромом.

Существенные изменения наблюдались в увеличении прироста массы тела телят опытной группы за весь период исследования (20,6% - 19,7% - 15,6 %), а в среднем за 3 месяца опыта на 18,3 % против контроля.

Таким образом, установлено, что нами изучаемые аминокислоты, участвуют в регуляции, всасывания иммуноглобулинов в кишечнике и формировании' неспецифической резистентности. Отмеченные физиологические предпосылки могут быть использованы в практике животноводства после разработки соответствующих препаратов аминокислот и методик их применения.

Результаты исследований позволяют рекомендовать препараты орнитина и пролонгированных форм аспарагина и орнитина аспартата в качестве адаптогенных и стимулирующих резистентность телят препаратов, профилактирующих их заболевания, вызванные нарушением кормления и содержания.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Павлова, Ирина Геннадьевна, Нижний Новгород

1. Абрамов, В.В. Взаимодействие иммунной и нервной систем. /В.В. Абрамов. // Новосибирск: Наука, -1988. - 165 С.

2. Адо, А.Д. Вопросы общей нозологии. / А.Д. Адо // М.: Медицина, -1985.-240 С.

3. Адо, А.Д. Иммунофлюоресцентные исследования иммуноглобулиновых рецепторов В-лимфоцитов./А.Д. Адо, Т.А. Алексеева// Бюлл. эксперим. биологии и медицины. 1979. - №10. - С.455- 457.

4. Алмазов, В.А. Лейкопении./ В.А. Алмазов, Б.В. Афанасьев, А.Ю. Зарицкий, А.Л.Шишков.// М.: Медицина, -1981. - 238 С.

5. Альциванович, К. Л. Орнитин, как гепатотропный препарат и обладающий анаболическим эффектом./К.Л. Альциванович.// -Медицина, М., 1999. - С. 10-11.

6. Анохин, Б.М. О сычужном пищеварении телят./Б.М. Анохин. // Ветеринария, -1973. 2, - С. 90-93.

7. Анохин, Б.М. Профилактика болезней телят./Б.М. Анохин.// Воронеж. Центрально-черноземное издательство, — 1986. — 68 С.

8. Арансон Максим. Аспарагиновая кислота, как антигипоксант. Musle Nutrition, www.Steelfactor.ru/Food/ 24.html.

9. Аскарова, А.Н. Биохимия. /А.Н. Аскарова, Н.З. Хазипов.// Казань. -2001,-54 С.

10. Асатиани, B.C. Новые методы биохимической фотометрии./ B.C. Асатиани. // М., - 1965, - 543 С.

11. Аршавский, И.А. Очерки по возрастной физиологии./ И.А. Аршавский.// — Медицина, 1969, - С. 246-263.

12. Аршавский, И.А. Доминанта беременности и проблема физиологически полноценного онтогенеза./И.А. Аршавский.// Труды института биологиибиологического факультета Харьковского университета. Харьков, — 1956.-С. 24.

13. Аршавский, И. А. К механизму возникновения физиологической незрелости новорожденных. /И.А. Аршавский. // Труды института морфологии животных им.Северцова А.Н. СССР, вып.22. М, изд-во АН СССР,- 1957.-С. 37-39.

14. Бабкин, В.П. Секреторный механизм пищеварительных желез./В.П. Бабкин.//-Л., -1950.- 196 С.

15. Бакрадзе, Д.С. Динамика содержаний свободных аминокислот в молозиве коров. /Д.С. Бакрадзе, И.Н. Медведев. //Бюллетень ВНИИФБ и П, -Боровск. 1977, Вып.2(45), - С.21-23.

16. Балаболкин, М.И. Секреция гормона роста в норме и патологии./М.И. Балаболкин.// М., Медицина, - 1978. - 128 С.

17. Белокрылов, Г.А. Аминокислоты как стимуляторы иммуногенеза./ Г.А. Белокрылов, И.М. Молчанова, Е.И.Сорочинская // Доклады АН СССР. — М., 1986 -№2, - Т.289. - С.471-473.

18. Белокрылов, Г. А. Детоксикация аминокислотными и пептидными препаратами бензола и афлотоксана В1 у цыплят. /Г .А. Белокрылов, О.Я. Попова, Е.И. Сорочинская, О.М. Деревина, Р.Н. Коровин.// Доклады РАСХН. 2000. - №2. - С.51-52.

19. Бирих, В.Н. Некоторые данные развития пищеварительной системы крупного рогатого скота во внутриутробный период./В.Н. Бирих // Труды Пермского сельскохозяйственного института, — №13, —1966. — С. 17.

20. Беклемешев, Н.Д. Иммунопатология и иммунорегуляция (при инфекциях, инвазиях и аллергиях). / Н.Д. Беклемешев.// М.: Медицина, —1986. — 256 С. - встречается чаще!

21. Берман, В.М. Завершенный' фагоцитоз. Сообщ. 1 .Новый методический принцип изучения завершенной фагоцитарной реакции./В.М. Берман, Е.М! Славская.// Микробиология, 1958. - №3: — С.8 —13.

22. Бессарабов, Б.Ф. Влияние изотизона на естественную резистентность организма животных./ Б.Ф. Бессарабов, JT.H. Миролюбова.// Ветеринария. -№5,-1994,-С.50-51.

23. Боголюбский, С.М. Эмбриология сельскохозяйственных животных. /С.М. Боголюбский.// М, - 1968. - С.32.

24. Браунштейн, А.Е. Главные пути ассимиляции и диссимиляции азота у животных. /А.Е. Браунштейн.// Баховские чтения, 1957, т. 12;

25. Браун, Ф. Сравнительная физиология животных./ Ф. Браун, Л. Проссер. // Перевод с англ., М., - 1967. - С. 29.

26. Бростофф, Дж. Иммунология./ Дж. Бростофф, Д. Мейл, Д.Б.Рот, А. Ройтт. //Пер. с англ. М: Логосфера, - 2007, - С. 127, 187.

27. Бузлама, B.C. Общая резистентность животных при стрессе и ее регуляция адаптогеннами./В.С. Бузлама.//Доклады Россельхозакадемии, — 1996. — №1. — С.36-38.

28. Бузлама, B.C. Методическое пособие по изучению процессов перикисного окисления липидов и системы антиоксидантной защиты организма животных./В.С. Бузлама.// РАСХН, — Воронеж, — 1997 — 40 С.

29. Бухарин, О.В. Лизоцим и его роль в биологии и медицине. / О.В. Бухарин, Н.В'. Васильев.// Томск, - 1974, - 204 С.

30. Вагралин, M.B. Гипотамическая регуляция иммунологической реактивности организма. / М.В. Вагралин.// Регуляция иммунного гомеостаза. Л., - 1982. - С.11-12.

31. Василевская, Л.С. Участие аминокислот в регуляции желудочной секреции./ Л.С. Василевская, А.Г. Соколова, О.В. Прокопенко.// Вопросы питания. 1987. - С.48-53.

32. Васильев, A.B. Гематология сельскохозяйственных животных./ A.B. Васильев.// М.: ОГИЗ - Сельхозиздат, - 1984. - 434 С.

33. Великанов, В.И. Влияние препаратов аминокислот на неспецифическую резистентность телят / В.И. Великанов, И.Л. Кузнецов, Е.А. Пронькина,

34. Л.В. Харитонов, И.В. Водопьянов // Материалы 15 научно практическойконференции „Новые лекарственные средства в ветеринарии". — Сп.Б. -2003.-С. 101-102.

35. Вестер, И. Физиология и патология преджелудков у животных. / И. Вестер.//Сельхоз. издат., М. - Л., - 1936, гл.6.

36. Воронин, Е.С. Иммунология. / Е.С. Воронин, A.M. Петров, М.М. Серых, Д.А. Девришов. Под редакцией Е.С.Воронина. //- М.: Колос — Пресс. — 2002. 408 С.

37. Воскресенский, A.M. Макрофаги в неспецифическом взаимодействии с инфекционными агентами./А.М. Воскресенский, Г.Е. Аркадьева. // Иммунология, 1984. — №3, — С. 10-16.

38. Вышинский, Г.В. Исследование становления секреторной функции сычуга новорожденных телят радиотелеметрическим и индикаторным методами./ Г.В. Вышинский.// — М. — 1978. — С. 16-51.

39. Галактионов, В.Г. Эволюционная иммунология./ В.Г. Галактионов.// — М.: ИКЦ «Академкнига», 2005.- 408 С.

40. Гапонов, H.H. К вопросу желудочного пищеварения у здоровых и больных диспепсией новорожденных телят./ H.H. Гапонов// Сборник научных трудов Рязанского с.-х. института. Выпуск XI, зоотехнический. — 1963.-С.146- 152.

41. Гапонов, H.H. К вопросу пищеварения в желудке новорожденных телят. /H.H. Гапонов// Индивидуальное развитие сельскохозяйственных животных и формирование их продуктивности. (Межвузовская научная конференция, тезисы докладов). — Киев, 1966. — С.229 — 230.

42. Гимерих, Ф.И. К определению глутатиона крови. /Ф.И. Гимерих.// Лабораторное дело, — 1967. — №9. С.564.

43. Горизонтов, П.Д. Гомеостаз, его механизмы и значение. В кн. Гомеостаз./ П.Д. Горизонтов; под ред. П.Д. Горизонтова. //— М.: Медицина, — 1976. — С.5-12.

44. Гриневич, Ю.А. Иммунобиология гормонов тимуса./Ю.А. Гриневич, В.Ф. Чеботарев, И.С. Никольский и др. Под ред. Ю.А.Гриневича и др.// М.: 1989. — С.124—125.

45. Гугушвили, Н.Н. Гематологические показатели коров при беременности и после родов в зависимости от периода года. / Н.Н. Гугушвили.// Сельскохозяйственная биология. 2004.- №4. - С. 103-106.

46. Денисенко, В.Н. Динамика лизоцима, комплемента и пропердина у телят./В.Н.Денисенко // Ветеринария. -1976. -№6. С.82-84.

47. Дранник, Г.М. Иммунотропные препараты ./Г.М. Дранник,. Ю.Я. Гриневич, Г.М. Дизик.// К.: Здоров'я, 1994. - 288 С.

48. Жаков, М.С. Морфология иммунной системы домашних животных./М.С. Жаков, И.М; Карпуть. // В кн.: Патоморфология, патогенез и* диагностика болезней сельскохозяйственных животных.

49. Жирков, И.Н. Участие аминокислот в регуляций сычужной секреции у. телят./И.Н. Жирков, Л.В. Харитонов.// Тезисы докладов научной конференции. Физиологические основы повышения продуктивности с/х животных. Дивово, -1995. - С.76-80.

50. Замарин, Л.Г. Некоторые. данные к обоснованию течения диспепсии у телят./Л.Г. Замарин // Тезисы докладов на научной конференции, посвященной итогам п.и. работы за 1954 и 1955 гг. — Саратов; — 1956. -С.175-176:

51. Зароза, В.Г. Желудочно-кишечные болезни телят и меры борьбы с ними./ В.Г. Зароза.//-М. 1985. - 62 С.

52. Здродовский, П.Ф. Проблемы инфекции, иммунитета и аллергии./ П.Ф. Здродовский.// М.: Медгиз. —1963. - 466 С.

53. Земсков, А.М: Немедикаментозная иммунокоррекция./А.М. Земсков, В:М. Земсков, Ю.В: Сергеев и др. // — М.: Национальная академия микологии. — 2002. —164 С.

54. Земсков, A.M. Клиническая иммунология: учеб. для мед. вузов./ A.M. Земсков, В.М. Земсков, A.B. Караулов; под ред. А.М.Земсков.// М.: ГЕОТАР - Медиа. - 2005. - 319 С.

55. Зенкович, Е.И. Адаптационные реакции лошадей верховых порд при различных системах тренинга: автореферат дисс.: д-ра биол. наук. /Е.И.Зенкович.// Дивово, -1993.-40 С.

56. Зотова, В.В. Об участии высших вегетативных центров в модуляции иммунологических процессов./ В.В. Зотова, А.И. Полек, Л.П. Сизякина и др. // Регуляция иммунного гомеостаза. Л., - 1982. - С. 14-15.

57. Иванов, И.С. Повышение резистентности животных при инъекции аспарагиновой кислоты. /И.С.Иванов, Ю.Н. Шамберев, В.И. Гаврищук. // Известия ТСХА, Издательство МСХА. Вып. 3,2,- 1996. - С. 101-106.

58. Иванов, И.С. Аминокислоты как стимуляторы резистентности и роста животных. /И.С. Иванов, Н.П. Буряков, В.И. Гаврищук.// РГА МСХА им. К.А. Тимирязева. РощВетИнформ . - №5.- 2007. - С.35- 38

59. Иванов, И.С. Повышение резистентности животных при инъекции аспарагиновой кислоты. /И.С. Иванов, Ю.Н. Шамберев, В.И. Гаврищук//. Известия ТСХА, Вып. 3.2. 2004. - С.42-51

60. Игнатенко,'Л.Г. Влияние аминокислот с разветвленной углеродной цепью на желудочную секрецию./ Л.Г. Игнатенко.// Вопросы питания. 1984. — №3. — С.51-53.

61. Игнатов, П.Е. Иммунитет и инфекция./П.Е. Игнатов.// М.: Время, -2002. - ил.табл. - 352 С.

62. Кавенецки, А.Ч. К вопросу о сычужном пищеварении у телят в онтогенезе. /А.Ч. Кавенецки// доклад ТСХА. - 1957. - т.30, - С.60-62.

63. Каральник, Б.В. Эритроциты, их рецепторы и иммунитет. / Б.В. Каральник. // Успехи современной биологии. М.: Наука, — 1992, т.112. Вып.1. — С.52-61.

64. Карпуть, И.М. Иммунология лактации при аутоиммунных заболеваниях и ее роль в этиопатогенезе диспепсия новорожденных./ И.М. Карпуть, JI.M. Пивовар. // Вест. Ан БССР. Сер. С.х. наук. 1983. - № 3. - С.108-110.

65. Кашкин, Н.П. Иммунная реактивность организма и антибиотическая терапия./ К.П. Кашкин, З.О. Караев.// Л.: Медицина, - 1984. - 200 С.

66. Кисилев, А.Л. Резистентность животных в онтогенезе и способы ее повышения./ А.Л. Кисилев, д.б.н. Е.В. Обязуева.// 2007; - С 54-55.

67. Кирилов, H.A. Реакция организма на введение биостимуляторов в зависимости от сезона./ H.A. Кирилов, М.В. Васильев, М.И. Иванова.// Материалы 2 Всероссийского съезда фитобиологов. Пущино, — 1998. — С.158-160.

68. Коваленко, Я.Р. Формирование иммунологического статуса у молодняка сельскохозяйственных животных. / Я.Р. Коваленко.//Вестник с/х науки. — 1979.-№2.-53 С.

69. Козинец, Г.Н. Атлас клеток крови и костного мозга./ Г.Н. Козинец, Т.Г. -Сорычева, Г.Д. Ашуров, Ю.С. Арустамян, O.A. Дягилева, Ю.К. Новодержкина, Е.А. Стрелецкая.// М.: Триада- х, — 1998. — С.24.

70. Корнева, Е.А. Гормоны и иммунная система./Е.А. Корнева, Э.К. Шкинек. // Л.: Наука. - 1988. - 180 С.

71. Колб, В.Г. Клиническая биохимия. /В.Г. Колб, B.C. Камышников.// — Минск: Беларусь, 1976. - 350С.

72. Колб, В.Г. Справочник по клинической биохимии./ В.Г. Колб, B.C. Камышников.// — Минск: Беларусь, 1982. — 366С.

73. Колычев, Н.М. Ветеринарная микробиология и иммунология./Н.М. Колычев, Р.Г. Госманов. 3-е изд., перераб. и доп. - М.: Колос С, - 2003. -432 С.

74. Кондрахин, И.П. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики: справочник./ И.П. Кондрахин, A.B. Архипов, В.И. Левченко, Г.А. Талаков, Л.А. Фролова, В.Э. Новиков. Под ред. И.П. Кондрахина.// М.: Колос, - 2004. - 520С.

75. Кретович, В.Л. Обмен азота в растениях./В.Л. Кретович //— М., 1972, гл.6. - С.76-78.

76. Кудрявцев, A.A. Клиническая гематология животных./А.А Кудрявцев, . Л.А. Кудрявцева.// М.: Колос. - 1974. - 399 С.

77. Кулаков, В.В. Влияние некоторых иммуномодуляторов на функциональную активность нейтрофилов здоровых доноров./ В.В. Кулаков, Б.В. Пинегин.// Иммунология, 1997. -№5. — С.44-47.

78. Лебедев, К.А. Иммунограмма в клинической практике./ К.А. Лебедев, И.Д. Понякина. //-М.: Наука, 1990. - 224 С.

79. Лебедева, Е.Л. Защитные свойства молозива в первые 10 дней лактации коров./Е.Л. Лебедева, Н.В. Клекина, B.C. Антонов. //Проблемы ветеринарной иммунологии. М.: Агропромиздат. - 1985. - С.58-60.

80. Ленинджер, А. Биохимия. /А. Ленинджер// Пер.с англ.- М. 1974. - 957 С.

81. Литвинова, Л.С. Морфометрические характеристики эозинофилов при описторхозной инвазии. /Л.С. Литвинова, Ю.В. Колобовникова, Б.В. Шилов, Н.П. Чернышова, Е.С. Григорьева и др.//Клиническая лабораторная диагностика, 2007. - №10. - С.6-9.

82. Луговская, С.А. Иерархия гемопоэтических клеток: кинетика, структура и функции./С.А. Луговская, Г.И. Козинец.//Клиническая лабораторная диагностика. 2009. - №5. - С.21-37.

83. Маевский, Е.И. Фармакологическая коррекция гипоксических состояний./ Е.И. Маевский.//-М.Медицина, 1989. - С. 145-148.

84. Манухина, Е.Б. Стресс лимитирующая система оксида азота./ Е.Б Манухина, Н.Ю. Малышев. //Российский физиологический журнал им. И.М.Сеченова, - 2000,' -Т.86, -№10. - С. 1283-1292.

85. Манько, В.М. Макрофаги: гетерогенность и роль в иммуногенных реакциях./В.М. Манько, P.M. Хаитов. // Успехи современной биологии. — 1985. Т 99. Вып.1. — С.110-123.

86. Маркова, И.В. Клиническая фармакология новорожденных. /И.В. Маркова, Н.П. Шабалов.//СОТИС, Санкт-Петербург, 1993. -374 С.

87. Маянский, А.Н. Очерки о нейтрофиле и о макрофаге./ А.Н. Маянский, Д.Н. Маянский. //- Новосибирск: Наука. Сиб. отд-ние, -1989. — 344 С.

88. Маянский, А.Н. Реактивность нейтрофилов./А.Н. Маянский, А.Н. Галлиулин.//— Казань: Издательство Казанского университета, — 1984. — 158 С.

89. Мозжерин, В .И: Влияние биостимуляторов на естественную резистентность организма телят. / В.И. Мозжерин, Р.Г. Камимулина, Ф.Ф. Асадулина и др.// Ветеринария. 2000. - №6. - С.38-41.

90. Мотузко, Н.С. Неспецифическая резистентность овец в ранний постнатальный период./ Н.С. Мотузко, Ю.И. Никитина.// Физиология продуктивных животных — решению продовольственной программы СССР. Материалы Всес. конф. Тарту. -1989. ч.1- С.41-42.

91. Мечников И.И. Лекции по сравнительной патологии воспаления. / И.И. Мечников. //- СПБ. 1892. - 148 С.

92. Минделл, Э. Справочник по витаминам и минеральным веществам. /Э. Минделл.// М. «Медицина и питание». — 1997. - С.77-81.

93. Михальцов, К.П. Физиологические особенности преджелудков у телят в связи с возрастом./ К.П. Михальцов.// Автореферат. Оренбург. — 1971. — 26 С.

94. Мишанин, Ю.Ф. Иммунобиологические показатели крови коров и телят при нормировании селена в рационе. /Ю.Ф. Мишанин // Вестник с.-х. науки. 1992. - №2. - С.86-91.

95. Мушинский, Н.С. Секреторная функция сычуга у новорожденных телят./ Н.С. Мушинский.// В.кн.: Профилактика и лечение внутренних незаразных болезней с.-х. животных. — Рига. — 1966. С. 211-221.

96. Мушинский, Н.С. Зондирование сычуга и вопросы сычужного пищеварения в первые дни жизни телят в норме и при диспепсии./ Н.С. Мушинский.// Автореферат. Оренбург. - 1967. - 22 С.

97. Мушинский, Н.С. Сычужное пищеварение в первые дни жизни./ Н.С. Мушинский.// В сб.: Механизмы нейрогуморальной регуляции вегететивных функций. М. - 1970. - С.112-113.

98. Никитин, В.Н. Труды Харьковского зовет, института./ В.Н. Никитин.// Т.2. 1939. - С.62-69.

99. Никольский, В.В. Основы иммунитета сельскохозяйственных животных./

100. B.В. Никольский.//-М.: Колос. 1968.-321 С.

101. Нейланд, Я.А. Изменение протеинограммы сыворотки крови в молозивный период./ Я.А. Нейланд, Р.Я. Беккере.// Повышение резистентности животных в условиях их концентрации. — Рига. — 1982. —1. C.27-31.

102. Нефедов, Л.И. Аминокислотный фонд печени, на фоне активации синтеза глутатиона /Л.И. Нефедов, Е.М. Дорошенко, И.И. Климович // Украинский биохимический журнал. — 1995. -Т.6. —№12. -С. 45-49.

103. Овсянников, А.И. Основы опытного дела в животноводстве./А.И. Овсянников.// М.: Колос. - 1976. - 304 С.

104. Папилов, H.A. Молозиво и иммунное состояние новорожденных телят./ H.A. Папилов, Т.Ю. Неймарк. // Методы профилактики и лечения инфекционных заболеваний сельскохозяйственных животных в Нечерноземье. Горький. — 1984. — С.61-66.

105. Пигаревский, В.Е. Зернистые лейкоциты и их свойства./ В.Е. Пигаревский. -М.: Медицина, 1978. 128 С.

106. Плецитый, К.Д. НИИ Общей патологии и патофизиологии РАМН./ К.Д. Плецитый.// М. - 1970. - С.42-46.

107. Плецитый, К.Д. Ретикойды как иммуностимуляторы и иммуннокоректоры./ К.Д. Плецитый.// НИИ Общей патологии и• патофизиологии РАМН, М., -1978,- 1981а. - С. 54-59.

108. Прозоровский, В.Б. Аминокислоты пептиды — лекарства. / В.Б. Прозоровский. // Наука и жизнь №3, 2008. - С. 24-26.

109. Пронькин, Д.Е. Физиологическое действие препаратов аминокислот на функциональное состояние и неспецифическую резистентность организма. Автореферата. 03.00.13. /Д.Е. Пронькин.// Н^Новгород, — 2002. - 23 С.

110. Прянишников, Д.Н. Азот в жизни растений и в земледелии СССР. /Д.Н. Прянишников.// М-Л. - 1945. - С.53-55.

111. Радионов, Г.В. Стресс и стрессоустойчивость./ Г.В. Радионов// Ветеринария сельскохозяйственных животных, — 2007. — №8. — С. 13-17.

112. Радченков, В.П. Т-лимфоциты крупного рогатого скота. Функции и маркерные молекулы./В.П. Радченков, B.C. Хлопонин.// Сельскохозяйственная биология. — 2005. — №2. С.23-31.

113. Раевский, К.С. Медиаторные аминокислоты. /К.С.Раевский, В .П.Георгиев//- М., 1996.

114. Риган, В. Атлас ветеринарной гематологии: пер. с англ. Е.Махиянова./ В. Риган, Т. Сандерс, Д. Деникола.// М.: ООО «Аквариум ЛТД», - 2000. -С.54-55.

115. Рослый, И.М. Сравнительные подходы в оценке состояния человека и животных: цитолитический синдром или фундаментальный механизм. /И.М. Рослый, М.Г. Водолажская.// Вестник ветеринарии, — 2007. В.43. — С.63-76.

116. Ройтт, А. Иммунология: пер. с англ./А. Ройтт, Дж. Бростофф, Д. Миел.// -М.: МИР,-2000.-592 С.

117. Рой, Дж. Х.Б. Выращивание телят: перевод с англ./Дж. X. Б. Рой.// 1982. -358 С.

118. Сапов, И.А. Неспецифические механизмы адаптации человека./ И.А. Сапов, B.C. Новиков.// Л.: Наука. 1984. - С.116, 198.

119. Сапин, М.Р. Иммунная система человека./М.Р. Сапин, Л.Е. Этинген. //М.: Медицина, 1996. - 304 С.

120. Середа, А.Д. Иммуностимуляторы. Классификация, характеристика, область применения (обзор). / А.Д. Середа, B.C. Кропотов, М.М. Зубаиров.// Сельскохозяйственная биология. 2001, — №4, — С.83-86.

121. Серых, М.М. Общая и экологическая иммунология./М.М. Серых, О.Н.

122. Манурина, A.M. Петров, Г.Л. Рытов, С.А. Симак.// Самара: Самарский1университет, 2000. - 175 С.

123. Смирнов, A.M. Реактивность организма у поросят, больных бронхопневмонией до и после лечения. /A.M. Смирнов, М.В. Васильев: //Ветеринария. 1977. - № 2. - С.85-90.

124. Синичкин, A.A. Иммунология: основные понятия, термины и сокращения: (словарь-справочник)./ A.A. Синичкин, А.Б. Сагакянц, Л.П. Лымарь составители; под ред. В.В. Внукова.// — Ростов Н/Д: Издательство Ростовского университета, — 2006. — 256 С.

125. Соколовский, В.В. Вопросы медицинской биохимии./В.В. Соколовский.// -34,6.- 1988.-С.2-10.

126. Солдатов, А.П. Биологические свойства и основы рационального использованного молозива коров. /Обзорная информация.//А.П. Солдатов, H.A. Эпштейн, К.Е. Эдель. М.: - 1989. - 50 С.

127. Сорвачев, К.Ф. Биологическая химия./ К.Ф. Сорвачев.// — М.: Просвещение, 1970. - 432 С.

128. Сошенко, Л.П. Гуморальные факторы естественной резистентности у коров черно- пестрой породы, и их помесей./ Л.П. Сошенко// Сельскохозяйственная биология,. 1993. - С.120- 123;

129. Тримарки, Г. Стимулирующее действие аспарагина на привесы животных. /Г. Тримарки, П. Макканти.// (Реферат) Италия. 1961, 61,7, -С.229-235.

130. Ульянов, А.Г. Цитологический состав молозива коров и влияние его на лейкопоэз у новорожденных телят./ А.Г. Ульянов, И.М. Карпуть. // Ветеринарная наука — производству. — Минск: Ураджай. — 1983. — Вып.21.- С.69-71.

131. Урбан, В.П. Болезни молодняка в промышленном животноводстве./ В.П. Урбан, И.А. Найманов.// М. - 1984. - С.207.

132. Учитель, И.Я. Макрофаги в иммунитете./И.Я. Учитель.// — М.: Медицина,- 1978. 162 С.

133. Федоров, Ю.Н. Иммунопрофилактика болезней новорожденных телят./ Ю.Н. Федоров.// Ветеринария. — 1996. — №11. — С.10-11.

134. Федоров, Ю.Н. Иммунодефицита крупного рогатого скота: характеристика, диагностика и пути коррекции. / Ю.Н. Федоров.// Ветеринария сельскохозяйственных животных. — 2009. №3. С.4-8.

135. Фрейдлин, И.С. Современные представления о фагоцитарной теории. /И.С.Фрейдлин. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2008. - №5. - С.4-10.

136. Фриммель, Г. Иммунологические методы. /Г. Фриммель.// — Москва, -Медицина. 2007. - С.51-57.

137. Фурдуй, Ф.И. Становление иммунного статуса у телят в раннем постнатальном« периоде. / Ф.И. Фурдуй. // Институт физиологии АН Республики Молдова. -- Кишинев. 1994. - 4С.

138. Хавинсон, В.Х. Пептидные биорегуляторы и старение. / В.Х. Хавинсон, В.Н. Анисимов. //- С-Петербург. Наука. 2003. - 223С.

139. Хаитов, P.M. Иммунология. /P.M. Хаитов, Г.А. Игнатьева, И.Г. Сидорович.// М.: Медицина. -2000. - 432 С.

140. Харитонов, JI.B. Секреторная функция сычужных желез и ее связь с уровнем рубцовых процессов у овец. / JI.В. Харитонов, Н.В. Курилов.// В кн.: Труды ВНИИФБиП, — Боровск. 1970. - Т.7. - С.61-68.

141. B.А. Матвеев, В.И. Великанов; Д.Е: Пронькин.// Материалы . 3-й международной конференции «Актуальные проблемы биологии в животноводстве». — Боровск, — 2001. — С. 177-188.

142. Харитонов, Л.В. Влияние препаратов аминокислот на функциональное состояние и неспецифическую резистентность организма телят./ Л.В. Харитонов, И.Л. Кузнецов, Д.Е. Пронькин, В.И. Великанов. // Труды ВНИИФБиП. Боровск. - 2002. -Т.41. - С. 83-96.

143. Хайнацкий, Ю.Я. Альтернативные сосуды желудка крупного рогатого скота. / Ю.Я. Хайнацкий. // Автореферат. Оренбург. — 1964. 22 С.

144. Холод, В.М. Иммуноглобулины молозива и пассивный иммунитет новорожденных животных (обзор) /В.М. Холод // Сельскохозяйственная биология. №6. - 1983. - С. 127-132.

145. Холод, В.М. Химический состав молозива и здоровье новорожденных животных./В.М. Холод// Ветеринария. — 1984. — №7. — С.61-63.

146. Хохлов, А.П. Перспективы использования аминокислот в неврологии и онкологии. /А.П. Хохлов, А.Н. Доценко.// Европ. науч. жур. «ОМ& Ernährung», Цюрих Штутгарт - Зальцбург, — 2003, - №105. - 84 С.

147. Хруцкий, Е.Т. О нервно-гуморальной регуляции моторной деятельности многокамерного желудка у телят и ягнят. /Е.Т. Хруцкий // Автореферат докт. дисс. — Чкалов, —1950. — 23 С.

148. Хруцкий, Е.Т. Образование, развитие и функциональная деятельность желудка жвачных животных в эмбриональном периоде. / Е.Т. Хруцкий // Труды Оренбургского отделения Всесоюзного физиологического общества им. И.П. Павлова. Вып.З. - 1964. - С.78-80.

149. Чадюк, T.I. Згодовцвания опромшенного молока i ф13юло1чный стан телят./ T.I. Чадюк, B.I. Левченко, М.М. Лученко. //BicH. сшьскогоспод.н. -1985. №5. - С.55-57.

150. Чернушенко, Е.Ф. Иммунологические исследования в клинике./ Е.Ф.Чернушенко, Л.С.Когосова. — Киев:Здоров'я, -1978. 160 С.

151. Черешнев, В.А. Физиология иммунной системы и экология./В.А. Черешнев, H.H. Кеворков, Б.А. Бахметьев, и др. //Иммунология. 2001. -№3. - С.12-16.

152. Чечеткин, A.B. Биохимия животных. /A.B. Чечеткин, И.Д. Головацкий, П.А. Калиман, В.И. Воронянский.// Под ред. A.B. Чечеткина.- М.: Высшая школа, — 1982. 511 С.

153. Чумаченко, В.Е. Определение естественной резистентности и обмена веществ у сельскохозяйственных животных./В.Е. Чумаченко, A.M. Высоцкий, H.A. Сердюк, В.В. Чумаченко.// — Киев: Урожай, — 1990. 136 С.

154. Шамберев, Ю.Н. Рост и обмен веществ у телят при разных методах введения гистидина. /Ю.Н. Шамберев, И.С. Иванов, В.И. Гаврищук и др. // Известия ТСХА, Издательство МСХА. Вып. 4. -1996. С. 163-172.

155. Шамберев, Ю.Н. Повышение эффективности препарата лизина в стимуляции роста телят./Ю.Н. Шамберев, И.С. Иванов, В.И. Гаврищук// Известия ТСХА. Издательство МСХА. -1999. -Вып.4. С.344-347.

156. Шамберев, Ю.Н. Естественная резистентность и гормональный профиль у телят раннего возраста при пероральном введении стеройдных препаратов./Ю.Н. Шамберев, H.A. Эпштейн, К.Е. Эдель. // Известия ТСХА.-Вып.1.- 1987.-С.138-148.

157. Ширяева, О.Ю. Влияние препаратов йода и лактоамиловорина на естественную резистентность и продуктивность — кур-несушек: Автореферат, канд. биол. наук /О.Ю. Ширяева.// Оренбургский -государственный аграрный университет. Оренбург, - 2007. - С. 148.

158. Щетинов, JI.A. Анатомические компоненты камер желудка крупного рогатого скота красной степной породы в онтогенезе. В кн.: Научные исследования по животноводству и птицеводству. Научные труды Омского с.-х. института. Т. 128, - Омск, — 1975. - С. 15-22.

159. Якубке, Х.Д. Аминокислоты, пептиды, белки. /Х.Д. Якубке, X. Эшкайт.// Москва. «Мир». - 1985. - 241С.

160. Alired, J. Chamym leay hitrogen metabolism and ornithine cycle function. /J. Alfred//Physiological review. 1990.-Vol. 3.-№70.-P. 580-591.

161. Anderson, I.C. Cell Immunol. / I.C. Anderson. //- 1977. 37. - №1. - P.145-155.

162. Balfour, W. E. Comline R. S. S. Physiol. / E.W. Balfour.//- Lond. 1962. - P. 160, 234.

163. Bangham, D.R. Proc. R. Sog.B. / D.R. Bangham, P.L. Ingram, S.H.B. Roy, K.W.G. Shilam, P.S. Terry. //-1958. P. 148, 184.

164. Bertran, T.A. Neutrophilic leukocyte structure and function in domestic animals. / T.A. Bertran.// Adv. In Veter Sei. Ccomp. Med. NY. London, -1985. — V.30. - P.91-129.

165. Buriana, M.L. Influence heterrozusului asupra actionatatii transaminanazelor din organe su ser la gaini. /M.L. Buriana, M. Suteanu.// Luer. Sti. at Inst. Argon. N. Balsescu. 1973. -№15. -P.89.

166. Bush, L.S. Absorption of colostral immunoglobulins in newborn calves / L.S. Bush, T.E. Staley // J. Dai. 1980. - Vol.- 63. № 4. - P.672-680.

167. Deutsch, H. F. Am. J. Physiol. /H. F. Deutsch, V. R. Smith. // 1957. - Vol.-191,-P. 271.

168. Homan, AI. Dg. The Babcock Institute for International Dairy Research and Development University of Wisconsin Madison. / Al. Dg. Homan, M. Battio. // Wisconsin. USA. - 1994. - P.23-30;

169. Hill, K. S. Q. The glande of the mucous membrane of the goat abomasums. / K. S. Q. Hill. //- J.Anat. 1951. - P.85, 215.

170. Hill, K. S. Q. J. exp. Physiol. /K. S. Q. Hill. //- 1956. Vol. - 41. - P. 421.

171. Huber, J. Relationship of age and diet to digestive enzyme activity in the calf. /J. Huber. //M.S. tesis Jowa, State University, Amer. 1958. - P. 132-135.

172. Kapp, J.P. Zuz Kenntring der Fundusdrusen im Labmagen des Hausrindes unter besondereg Berucksichtgung des Lebenselters. / J.P. Kapp. // Acta Snat. 67. — №1. — 1967. — P.89.

173. Kovacik, J. The effect of brea on interior milien in dairy cows. / J. Kovacik, P. Cupka, Z. Salagova. // Zivoc. Vyroba. 1998. - №43, 9. - P.407.

174. La Buc M. Dosage window of selenium on phagocytes and natural killer Cytotoxic responses. / M. La Buc, J. Tose, B.H.C. Dosage.// Int.Clinic Nutrition Reviev. 1988. - №8. - PI98-203.

175. Laskowski, M. Jr. Fedn Pros. Am. socsexp. Biol. / M. Jr. Laskowski, M. Laskowski.// 1950. - №9. - P. 194.

176. Lincoff, W.D. The bovine Kemplement System. In: The ruminant immuns system (Ed, by Butler I. E.). / W.D. Lincoff, R.P. Triglis. // -№4, 1. 1981. -P. 433.

177. Meyer, F. Der Einflubs einer restriktiven Futterung auf Parameter des Blutserums wachsen der Rinder. /F. Meyer, B. Senft, U. Manteuffel.// Luchtungskunder. 1974. - Bd.46, y.5. - P.339-349.

178. Mulder, A.H. Patassium induced release of amino acid from cerebral cortex and spinal cord slices of the rat. /A.H. Mulder, S.H. Snyder.// - Brain Res. -1974. 76. -P.297-308.

179. Mc Donald, J. W. Biochem. /J.W. Mc. Donald.// 1948. - Vol.42, - №4. - P. 584-587.

180. Mc Donald, J. W. Biochem. / J.W. Mc. Donald. // 1952. - Vol. 51. - №6 - P. 86-90.

181. Roberts, E. The inhibited nervous system: roles of GABA ergis neurons. /E. Roberts. // Neuropharmacology. 1984. -23. - №7B. - P.863-864.

182. Sato, H. Plasma metabolite levels and relations to weight gain in young Japanese Shorthorn calves. /H. Sato, Y. Nagamine, Nayashi.// Japan. J. Zootechn.Sci. 1989. - 60, 7. - P.644-647.

183. Synge, R. L. M. Nutz. / R. L. M. Synge, J.Brit. // 1952, - №6. - P. 100-104.

184. Smith, V. R. Dairy Sei. / V. R. Smith, E. S. J. Erwin. // -1959. Vol.-42. - P. 364:

185. Tizard, J. Veterinary Immunology. / J. Tizard. // Philadelphia, London, Toronto,-1987.-483 P.

186. Kim, I. Colostral Milchaufnahme neugeborener Kalber in der Mutter Kuhaltung /I. Kim, F. Schmidt, H. Langhols, e. a. // Geitshzizift F. Tierzuchtung, guchtungs Biologie. 1983. - Vol. -100, -№3. - P. 187-195.

187. Gurran P. Active transport of amino acid and sugars. Arch. Intern. Med., -1972.-P. 129, 258-269.

188. Ортомолекулярная медицина 2001-2007; www.ortho.ru Е- mail: info@ortho.ru