Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Терапия оллуланоза и морфофункциональное состояние желудка свиней
ВАК РФ 03.00.19, Паразитология

Автореферат диссертации по теме "Терапия оллуланоза и морфофункциональное состояние желудка свиней"

На правах рукописи

I I

Шкиль Светлана Петровна

ТЕРАПИЯ ОЛЛУЛАНОЗА И МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ЖЕЛУДКА СВИНЕЙ

Специальность 03.00.19- паразитология, 03.00.13 - физиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Тюмень - 2003

Работа выполнена в Институте экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока СО РАСХН, Новосибирском Государственном аграрном Университете

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук,

профессор, заслуженный

деятель науки РФ_

Волков Феликс Андреевич

Научный консультант:

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор

Солопов Николай Васильевич

доктор биологических наук Размашкин Даниель Анатольевич

доктор биологических наук, профессор

Бакшеев Анатолий Филиппович

Ведущая организация: Институт ветеринарной медицины

Омского государственного Агроуниверситета

Защита диссертации состоится 2003 года

в /& часов на заседании диссертационного совета Д.006.009.01. при Всероссийском научно-исследовательском институте ветеринарной энтомологии и арахнологии, по адресу: 625041, г.Тюмень, ул.Институтская, 2, ВНИИЭВА.

. С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Всероссийского научно-исследовательского института энтомологии и арахнологии.

Автореферат разослан « года

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор биологических наук,

профессор Домацкий В.Н.

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Существенным фактором, сдерживающим увеличение производства животноводческой продукции являются инвазионные заболевания свиней.

Одним из малоизученных гельминтозов свиней является ол-луланоз. О широком распространении оллуланоза в нашей стране свидетельствуют результаты исследований: на Дальнем Востоке (А.В.Казелло, 1972), в Западной Сибири (Ф.А.Волков, 1979, 1983, 1983а, 1988), в Удмуртии (М.Ф.Михайлов, Ф.А.Волков, 1981), в Ростовской области, в зонах Северного Кавказа и Нижнего Поволжья (З.Г.Воронкова, М.А.Попов, 1983), в Белорусси (М.В.Якубовский, А.В.Ежелев, 1988), на Кубани (Ю.Ю.Семенов, 1989). Экстенсивность инвазии (ЭИ) у взрослых свиней по отдельным хозяйствам колеблется от 55,5-60 до 80-90%, интенсивность инвазии - от десятков экземпляров до 100 и более тысяч. Минимальная зараженность свиней оллуланами регистрируется в личных подсобных хозяйствах, на свиноводческих комплексах она значительно выше. Установлено, что максимальная экстенсивность и интенсивность инвазии наблюдается у свиноматок в возрасте старше 2,5 лет (З.Г.Воронкова, 1987, Ф.А.Волков, 1988, М.В.Якубовский, А.В.Ежелев, 1988).

Отсутствие прижизненной диагностики гельминтоза не позволяет получить объективные данные о его распространении. Посмертная диагностика часто не проводится, а патоморфологичес-кие изменения желудка напоминают картину гастритов различного характра (А.В.Казелло с соавт., 1974,1976, М.Ф.Михайлов, 1981, З.Г.Воронкова, Г.А.Алтапова, М.А.Попов, 1984, А.КоИап, ХМосву, 1933,, Т. НешсЬеп, М.А НаввШ^ег, 1977, М.ТгасЬ, 1981).

Локализация оллулан в фундальной зоне желудка не может не сказаться на функциональном состоянии пищеварительных желез, и, соответственно, на процессе пищеварения и обмене веществ животных.

У инвазированных свиноматок снижается молочность на 11,6 кг, масса поросят при рождении от таких свиноматок меньше на 103,8 г. В то же время к 28-дневному возрасту средний вес поро-

сят, рожденных от свиноматок, свободных от оллулан, выше на 157 граммов. Наряду с этим количество мелких и слаборожден-ных поросят больше у свиноматок, инвазированных оллулана-ми. Различие в живой массе между экспериментально зараженными и контрольными животными составляет 21,7 кг, а отход среди экспериментально инвазированных оллуланами свиней составляет в среднем 41,75% (З.Г.Воронкова, 1989).

Паразитирование гельминтов в желудочно-кишечном тракте всегда вызывает серьезные морфо-функциональные изменения в слизистой оболочке, изучение которых необходимо для получения более полного представления о патогенезе заболевания. Вместе с тем, в литературе отсутствуют сведения о влиянии оллулан на пищеварительную функцию желудка. Сведения о морфо-функциональных изменениях, возникающих в желудке свиней, больных оллуланозом позволяют определить направление рациональной терапии. При довольно широком распространении оллуланоза в специализированных свиноводческих хозяйствах с высокой ЭИ и ИИ среди свиноматок, наряду с поиском эффективных антгельминтиков при этом заболевании более подробного изучения требует выживаемость оллулан во внешней среде, что и определяет актуальность и целесообразность работы.

Цель и задачи исследований. Целью настоящих исследований явилось изучение влияния оллулан на морфологическое состояние слизистой оболочки желудка свиней и его секреторную функцию, определение эффективности антгельминтиков при оллула-нозе и выживаемости оллулан во внешней среде.

В связи с этим были поставлены следующие задачи:

1. Определить выживаемость оллулан в почвах разного типа.

2. Изучить в динамике кислотообразующую функцию желудка свиней и протеолитическую активность желудочного содержимого при оллуланозе.

3. Выяснить морфофункциональные изменения слизистой оболочки желудка свиньи и их связь с его секреторной функцией при экспериментальном оллуланозе.

4. Установить терапевтическую эффективность тивидина, ивомека и препарата ВК-168 при оллуланозе свиней.

Научная новизна.

- определена выживаемость оллулан в зависимости от температуры и глубины нахождения в почве; нематоды не переносят высушивания, погибают при 0°С; при температуре 5...15°С остаются жизнеспособными не более 4-х суток; более устойчивы во внешней среде самки; тип почвы на выживаемость оллулан существенно не влияет;

- впервые изучены кислотообразующая и пепсинообразую-щая функции желудка в динамике при экспериментальном оллу-ланозе; установлено снижение кислотообразующей функции; у животных с субклиническим течением оллуланоза при гипацид-ном состоянии пепсинообразующая функция желудка не нарушается, проявление выраженных клинических признаков заболевания сопровождается анацидным состоянием и резким снижением протеолитической активности;

- показано, что причиной понижения кислотообразующей функции желудка при оллуланозе являются деструктивные изменения и распад большого числа обкладочных клеток;

- установлены эффективные дозы тивидина и ивомека инъекционного при оллуланозе свиней.

Практическая ценность работы. Установлено влияние оллулан на секреторный аппарат желудка, что дополняет имеющиеся сведения о патогенезе этого малоизученного гельминтоза.

Определены терапевтические дозы тивидина, ивомека инъекционного при оллуланозе свиней, что позволяет эффективно проводить дегельминтизацию свиней при ассоциативных инвазиях. Результаты исследований использованы в рекомендациях «Проведение профилактических мероприятий против основных гель-минтозов в свиноводстве»

Результаты исследований по вопросам морфофункциональных изменений желудка, выживаемости оллулан во внешней среде, ан-тгельминтной эффективности испытанных при оллуланозе препаратов включены в ветеринарные справочники, учебники, а также используются в лекционных и практических материалах по паразитологии для студентов ветеринарных вузов и техникумов.

Апробация научных результатов. Материалы диссертации доложены на научно-практических конференциях:

1. Проблемы инфекционной патологии сельскохозяйственных животных (Новосибирск, 1988).

2. Проблемы животноводства и как их решать (Новосибирск, 1990).

3. 11-й международный конгресс по болезням свиней (Лазан-на, 1990).

4. Проблемы энтомологии и арахнологии (Тюмень, 2001).

5. Паразитология - приоритеты и перспективы развития (Новосибирск, 2002).

По материалам диссертации опубликовано 10 научных работ.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Выживаемость оллулан в почвах разного типа.

2. Влияние оллулан на секреторную функцию и морфофун-кциональные изменения слизистой оболочки желудка свиньи.

3. Результаты испытания антгельминтиков при оллуланозе свиней.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 135 страницах машинописного текста. Содержит 20 таблиц, 9 рисунков. Состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, выводов и практических предложений. Список литературы включает 180 источников, из них 157 отечественных и 23 иностранных авторов.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1. Материалы и методы

Работа выполнена в лаборатории по изучению гельминто-зов сельскохозяйственных животных ИЭВС и ДВ СО РАСХН и на факультете ветеринарной медицины НГАУ.

Изучение выживаемости оллулан в песчаной и черноземной почвах проводилось в лабораторных и полевых условиях. Желу-

дочное содержимое инвазированных оллуланами свиней помещалось на поверхность почвы и на глубине 2 и 5 см. Пробы хранились при температуре от -20° до 40°С. Жизнеспособность нематод определялась через каждые 24 часа. Регистрировались отдельно живые и мертвые самцы и самки, личинки. В каждом случае учитывалось не менее 100 гельминтов.

Для изучения влияния оллулан на секреторную функцию желудка свиней было прооперировано 25 поросят 2-2,5-месячного возраста - наложена хроническая фистула по А.В.Басову (1943).

Для определения фона секреторной деятельности желудка у всех животных через две недели после операции проводилось исследование желудочного содержимого. Учитывая избирательную локализацию оллулан, материал для заражения брали из фундаль-ной зоны желудка спонтанно инвазированных свиноматок. Для заражения определялось количество оллулан в трех граммах со-скоба слизистой оболочки и пересчитывалось на вес каждой пробы. Выделение нематод для подсчета проводилось методом переваривания в искусственном желудочном соке (Ф.А.Волков, 1986). Инвазионный материал скармливался подопытным поросятам с кормом.

На протяжении опытного периода велись наблюдения за животными, а именно: аппетит, показатели клинического статуса, консистенция и характер фекалий, случаи рвоты, исследовались рвотные массы на наличие оллулан.

Для определения интенсивности инвазии от каждого зараженного животного брались по две пробы из желудка: проба желудочного содержимого и соскоб слизистой оболочки фундальной зоны. Желудочное содержимое исследовалось на наличие оллулан методом последовательных промываний. Соскобы слизистой оболочки - методом переваривания в искусственном желудочном соке.

Для изучения кислотообразующей функции желудка свиней при оллуланозе в опыте использовались 10 опытных и 5 контрольных поросят. Животные опытной группы заражались оллуланами трехкратно с интервалом 1-2 дня в дозе по 2,5 тыс. гельминтов. Каждому животному всего было инвазировано 7,5 тыс. оллулан. Взятие и исследование желудочного содержимого для

определения кислотообразующей функции желудка проводилось через две недели после операции - двукратно до заражения и на 15-й, 26-й, 33-й, 63-й дни после заражения. Для оценки функционального состояния желудочных желез желудочное содержимое бралось через фистулу и исследовалось фракционным методом по следующей схеме:

1 проба - содержимое, собранное натощак в течение 15 минут. Затем животному давался пищевой раздражитель - 400 мл болтушки из комбикорма.

2 проба - содержимое, собранное через 25 минут после дачи пищевого раздражителя; 3, 4, 5, 6 пробы - содержимое, собранное за каждые последующие 15 минут. Таким образом, были получены данные о стимулированной секреции - часовое напряжение секреции после стимуляции. Всего было исследовано 540 проб желудочного содержимого.

О кислотообразующей функции желудка судили по следующим показателям: общей кислотности, свободной соляной кислоты, связанной соляной кислоты, величине рН, количеству жидкой части желудочного содержимого в каждой порции, дебит-часам общей кислотности, свободной и связанной соляной кислоты. Общая кислотность, свободная и связанная соляная кислота в желудочном содержимом определялись методом Тепфера (1965). Реакция желудочного содержимого по рН - рН-метром (рН-673 рН-метр-милливольтметр).

Для определения протеазной активности желудочного содержимого в опыте использовалось 5 опытных и 5 контрольных поросят 2-3-месячного возраста с фистулами в области дна желудка. Поросята опытной группы инвазировались оллуланами в дозе 16 тыс. экз.

Желудочное содержимое поросят исследовалось на про-теазную активность до и после заражения на 5-й, 12-й, 21-й, 30-й и 46-й дни. Содержимое исследовалось фракционным методом: протеазная активность определялась в порциях натощак, через 40 и 60 минут после дачи энтерального раздражителя по В.Н.Ту-голукову (1965).

Патоморфологические изменения желудка при оллуланозе

изучались на материале от 110 поросят. Подопытным животным в возрасте 30 дней задавались с кормом от 489 до 16000 экз. оллу-лан. Контрольные и опытные поросята содержались в разных клетках. Материал для исследования брался через 14,30,52,89,115 дней после инвазирования.

На вскрытии определялся цвет, целостность, влажность, величина и рисунок органа, характер и количество содержимого. Для гистологического исследования брались пробы из кардиаль-ной, пилорической и фундальной частей желудка, двенадцатиперстной кишки. Материал фиксировался в 10%-ном нейтральном формалине, парафиновая проводка проводилась по методике Н.М.Алексеевой и др. (1959). Срезы толщиной 5-7 мк окрашивались гемотоксилин-эозином. Изучая патоморфологические изменения, вызванные паразитированием оллулан в слизистой оболочке желудка, обращали внимание на состояние структуры фундальных желез и качественные изменения составляющих их клеток.

Для установления терапевтической эффективности тивиди-на предварительно в четырех опытах определялась поедаемость корма с разными дозами препарата - от 30 до 60 мг/кг массы тела. Затем в трех опытах определялась его антгельминтная активность в дозах 30 мг/кг однократно на 15 свиноматках, 30 мг/кг двукратно с интервалом 24 часа на 15 свиноматках и 40 мг/кг групповым методом 12 свиноматкам однократно. Содержимое желудка и соскобы слизистой оболочки желудка опытных и контрольных животных бралось на 5-е сутки.

При изучении эффективности препарата ВК-168 испытыва-лось три серии: ВК-168-54-П-400 (1:9) , ВК-168-П-400 - каждая серия испытана на 9 свиноматках, ВК-168-П-1500(1:9) - на 4 свиноматках в дозе по 5 мг/кг, однократно, индивидуально с кормом. Материал от опытных и контрольных животных брался на 7 сутки.

Изучение эффективности ивомека при оллуланозе свиней проводилось в пяти опытах на 96 опытных и 100 контрольных свиноматках. Опытным свиноматкам вводился ивомек в дозах 1 мл/50 кг (10 голов) и 1 мл/ЗЗкг массы тела (86 голов) подкожно

однократно. Контрольных животных не дегельминтизировали. Материал для исследования брался на 10-й день.

Содержимое желудка исследовалось методом последовательных промываний. Соскобы слизистой оболочки - методом переваривания в искусственном желудочном соке. В случае обнаружения оллулан определялась их жизнеспособность по подвижности в 50%-ном растворе диметилсульфоксида. Велся дифференцированный учет погибших и живых оллулан по трем группам: самцы, самки, личинки. При определении эффективности препаратов в расчет брались только те свиньи, у которых обнаруживались живые или мертвые нематоды (Ф.А.Волков, 1980, М.Ю.Пас-кальская, Ф.А.Волков, 1982). Определение нематоцидной и ляр-воцидной эффективности испытуемых антгельминтиков проводилось путем соотношения живых личинок в опытной и контрольной пробах (Ф.А.Волков, А.П.Симонов, 1977)

Статистическая обработка полученных данных проводилась с использованием программы Microsoft Excel 97.

2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 2.2.1. Выживаемость оллулан в зависимости от типа почвы

Результаты проведенных исследований показали, что оллу-ланы погибают в почве значительно быстрее, чем яйца и личинки других гельминтов. В замороженных песчаной и черноземной почвах уже через сутки живых оллулан не обнаруживали.

Как в песчаной, так и в черноземной почвах менее устойчивыми при разных температурах оказались личинки оллулан. Их обнаруживали в малых количествах на 3-й сутки при 5°С (5,17,1%) и при 25°С (11%), при повышении температуры до 30°С лишь небольшое их количество (до 9,9%) сохраняло жизнеспособность в почве в течение 2-х суток. Самки выживали более длительное время по сравнению и самцами и личинками на разной глубине. Единичные их экземпляры были обнаружены живыми на 4-е сутки - 0,1-10,5%.

При температуре почвы 20 и 25°С выживаемость оллулан на

глубине 2 и 5 см была выше в черноземной почве, чем в песчаной на 7,2-9,1 и 10,1-12,3%.

При 25°С в песчаной почве жизнеспособность оллулан сократилась до 2-х суток, при 35°С на поверхности самки и самцы оллулан оставались живыми 1 сутки (21,3-и 11,1%, соответственно), на глубине 2 и 5 см - 2-е суток (1,3,2,2 и 0,8,0,7%, соответственно). На поверхности черноземной почвы при 25°С самки и самцы выживали 2-е суток (60,4 и 12,8%, соответственно), на глубине - до 3-х суток выживали лишь самки (10,1-12,3%). При 30-35°С самки и самцы оллулан в течение 2-х суток были живы на поверхности почвы (29,7, 26,0 и 8,3, 14,2%), соответственно) и на глубине (11,7-45,6 и 0,4-30, Г/о), личинки - 1 сутки при 30°С - 8,0-9,%.

Таким образом, при температуре 30-35°С в черноземной почве значительная часть оллулан остается жизнеспособными на сутки дольше, чем в песчаной.

При сравнении разницы в выживаемости между самками и самцами на поверхности песчаной почвы и на глубине 2 и 5 см выяснилось, что максимальных значений она достигает при температуре 15-25°С в течение первых двух суток. При 15°С разность между живыми самками и самцами оллулан составила 6,9-30,6, при 20°С - 30,9-38,9 через одни сутки и 4,1-49,3 %- через двое суток. При температуре песчаной почвы 25°С эта разность равнялась 28,9-39,8 через первые сутки и 49,3-55,5% - через двое суток.

В черноземной почве самки оллулан выживали дольше самцов и в большем количестве при температуре 20°С. Через одни сутки в почве было живых самок на 6,7-39% больше, чем самцов, через двое - на 2,6-41,2%, причем выживаемость самок была выше на поверхности и на глубине 2 см. Лишь в отдельных случаях регистрировали несколько большую выживаемость самцов, чем самок - в песчаной почве на 0,9-4,4, в черноземной - на 0,9-7,8%.

Исследования показали, что оллуланы малоустойчивы во внешней среде. При всех изученных условиях в почве наиболее устойчивыми оказались самки. Несколько меньше выживаемость у самцов и еще меньше у личинок. Оллуланы являются живородящими нематодами, развивающимися по эндоциклу, и более высокая выживаемость самок в неблагоприятных условиях внеш-

ней среды играет положительную роль в распространении оллу-ланоза.

2.2.2. Динамика кислотообразующей функции пищеварительных желез желудка при оллуланозе

При изучении килотообразующей функции желудочых желез у контрольных животных отмечена устойчивая тенденция повышения и сохранения общей кислотности как в голодных порциях, так и после стимуляции секреции на высоком уровне до 63-го дня инвазии. Показатель общей кислотности по опытной группе в голодных порциях на 15-й, 26-й, 33-й, 63-й дни после заражения равняется 69,6±13,8, 57,7 ± 8,4, 72,0 ± 9,6, 77,8 ± 15,3 ммоль/ЮОмл, соответственно. В сравнении с контролем уровень общей кислотности голодных порций в опытной группе на 15-й, 26-й, 33-й и 63-й дни понижается на 24, 44, 46, и 36%, соответственно. Относительное количество общей кислотности желудочного содержимого контрольных животных в период после стимуляции секреции достигает высоких величин: минимальные значения этого показателя равнялись 93,6 ±2,93 - 104,0 ± 5,93 и максимальные - 136,0 -110,4 ммоль/ЮОмл в разных порциях на протяжении всего периода наблюдений.

У опытных животных к 15-му дню инвазии максимальный показатель общей кислотности достигает 70,8 ± 14, к 26-му - 69,4 ± 8,56, к 33-му 73,4 ± 9,31, к 63-му -81,8± 17,9 ммоль/ЮОмл, что составляет по отношению к контролю 52, 58, 60 и 66 %, соответственно. Минимальный показатель равняется 56,0 ± 11,31 ммоль/ 100мл, а по отношению к таковому контрольной группы составляет 60%. Количество связанной соляной кислоты в голодных порциях у инвазированных животных понижается на 27-57% по сравнению с контрольными. Максимальные показатели связанной соляной кислоты после стимуляции в опытной группе по сравнению с контрольной оказываются ниже на 12,8-37,5%.

Количество свободной соляной кислоты в порциях натощак у контрольных животных увеличивается с 15-го по 26-й день от 18,8 ±4,6 до 44,8 ± 14,1, а на 33-й и 63-й день -49,2 ±13,2 и 48,4

± 6,8 ммоль/ЮОмл, соответственно. У поросят опытной группы на 15-й день инвазии этот показатель в голодной порции равняется 23,6 ± 7,8 ммоль/ЮОмл, т.е. на 25,5% выше, чем в контрольной группе и на 37-47% выше, чем до заражения. К 26-му дню происходит его снижение до 10,4 ± 2,9, то есть на 76,8% меньше, чем в контроле, на 33-й и 63-й день исследования отмечаются незначительные колебания - 17,8 ±4,3 и 14,8 ± 4,3 ммоль/ЮОмл, соответственно, т.е. на 63,9 и 69,4% меньше, чем в контрольной группе. Минимальный показатель свободной соляной кислоты после стимуляции секреции у инвазированных поросят на 15-й день инвазии равняется 12 ± 3,8, на 26-й - 5,1 ± 4,0, на 33-й - 16,6 ± 4,0, на 63-й - 22,9 ± 8,3 ммоль/ЮОмл, то есть меньше, чем у контрольных животных на 79,2, 88,7, 73,9, 58,6%, соответственно.

В порциях натощак жидкая часть желудочного содержимого у инвазированных животных увеличивается на 16,8 и 25% по сравнению с контрольными на 15-й, 26-й и 63-й дни, соответственно. Уровень секреции после стимуляции несколько ниже - к 15-му дню инвазии - на 3, в последующие дни исследования - на 1316% по сравнению с контролем.

Дебит общей кислотности, свободной и связанной соляной кислоты порций натощак и дебит-час после стимуляции в контрольной группе, в основном, превышает соответствующие значения в опытной. Лишь на 15-й день инвазии отмечается увеличение дебита свободной соляной кислоты у инвазированных животных в порции натощак (0,3±0,09 мэкв) по сравнению с контрольными (0,2±0,07 мэкв) на 50%. Если до заражения отношение дебитов общей кислотности в голодных порциях контрольных к таковым опытных животных равняется 1,1 и 0,8, то к 15-му, 26-му, 33-му, 63-му дням оно возрастает до 1,2,1,8, 2,4,1,3, соответственно. Такая же тенденция отмечается в отношении дебитов связанной и свободной соляной кислоты. Особенно выражено снижение кислотной продукции у инвазированных животных на 26-й и 33-й дни инвазии. В эти дни дебит общей кислотности натощак в контрольной группе в 1,8 и 2,4 раза, соответственно превышает показатели опытной, дебит-час общей кислотности после стимуляции в контрольной группе равен 5,7±0,7, в опытной -

2,9±0,4 (Р<0,01) то есть в 1,9 больше на 26-й день, на 33-й день - в 2 раза ; дебит связанной соляной кислоты натощак в 2,5 и 1,5, дебит-час после стимуляции - в 2,0 и 1,7; дебит свободной соляной кислоты натощак в 3,8 и 3,0, соответственно, но особенно существенная разница между опытной и контрольной группами отмечается в эти дни в показателях дебет-час свободной соляной кислоты после стимуляции - в 7,6 раза на 26-й день. На 33-й день дебит-час свободной соляной кислоты в контрольной группе равен 3,9±0,4, в опытной - 0,9±0,2 мэкв (Р<0,01), то есть выше в 4,3 раза.

Значение рН желудочного содержимого в голодных порциях у инвазированных животных на 15-й день достигает 3,2±0,05, у контрольных - 2,4±0,07 ( Р<0,01), на 26-й - 4,5±0,04 и 3,1 ±0,07, на 33-й - 4,3±0,05 и 2,4±1,3, на 63-й - 3,7±0,05 и 1,7±0,02, то есть увеличивается по сравнению с контрольными на 15-й день в 1,3 раза, на 26-й - в 1,5, на 33-й - в 1,8 и на 63-й день - в 2,2 раза. В пробах после стимуляции секреции на 15-й день значение рН в опытной и контрольной группах равно 3,9±0,02 и 1,8±0,04 (Р<0,01), на 26-й - 4,3±0,02 и 2,2±0,02 (Р<0,01), на 33-й - 3,9±0,02. и 2,6±0,04 (Р<0,01),на 63-й - 3,3±0,02 и 1,8±0,001 (Р<0,01), соответственно, то есть у инвазированных животных по сравнению с контрольными выше на 15-й день в 2,2 раза, на 26-й - в 2 раза, на 33-й день - в 1,5 раза, на 63-й - в 1,8 раза.

2.2.3. Протеазная активность желудочного содержимого при оллуланозе

Изучение динамики ферментообразующей функции желудка при оллуланозе показывает, что как у здоровых, так и у инвазированных оллуланами поросят наблюдается тенденция роста протеазной активности желудочного содержимого, но обострение заболевания у инвазированных поросят (46-й день инвазии) приводит к резкому снижению содержания пепсина. При инвази-ровании в дозе 16 тыс.экз. на животное на 18-й день инвазии отмечается ухудшение общего состояния - угнетение, бледность слизистых оболочек, снижение аппетита, у отдельных поросят -жажда. В последующие дни у опытных животных также регист-

рировали вышеуказанные клинические признаки, общее состояние характеризовалось чередованием кратковременных периодов улучшения с периодами ухудшения. На 46-й день инвазии кроме выраженных клинических признаков, происходит резкое снижение количества пепсина: в порции натощак до 6,68 мг/%, через 40 минут после стимуляции секреции - до 4,2 мг/%, через 60 минут -до 8,16 мг/%, что меньше на 94, 96 и 92% по сравнению с предыдущим исследованием (таблица 1). В порциях содержимого желудка отсутствует свободная и связанная соляная кислота. Через два дня в опытной группе погибло два поросенка. Патологоана-/ томическое вскрытие выявляет катарально-геморрагическое воспаление слизистой оболочки желудка.

У животных опытной группы в порциях натощак и через 60 минут после стимуляции секреции нарастание протеолитической активности происходит более выражено, хотя и не превышает такового у контрольных.

Таблица 1. Сравнительная динамика количества пепсина в желудочном содержимом поросят в зависимости от срока инвазии, мг%

Срок инвазии Порции желудочного содержимого

1 (натощак) 2(через 40 минут) 3 (через 60 минут)

Опытная группа

0 61,6±6,8 92,4+9,7 84±11,3

5 82±7,6 (Т 32%) 96,2±4,3 (Т2%) 110,2+16,4 (Т 31%)

12 88,4±2,2 (Т7%) 92+19,6 ^ 4%) 96,2+4,3 (¿13%)

21 80,8+8,9 (4-9%) 99,4+5,3 (\'1%) 96,8±1,2 (ТО,6%)

30 103+12,9 (Т27%) 106±Ю (?7%) 101,6±4,8 (Т 5%)

46 6,68+1,1 (¿94%) 4,2±0,7 (¿96%) 8,16±0,6 (¿92%)

Контрольная группа

0 81,6±16,9 92,2±8 102+12

5 84+9,9 (Т2%) 94,5+4,7 (Т3%) 101,6±1, (¿0,4%)

12 89,8+7,3 (Тб%) 111,6±8,7 (Т17%) 106,8+1,9 (Т5%)

21 111,2±10,6 (Т23%) 105,6+2,2 (¿6%) 105,2+1,9 (¿ 2%)

30 95,2±6,7 (¿14%) 99,2+3 (¿6%) 103,2±0,9 (¿2%)

46 86,2+3,9 (¿9%) 102±1,5 (Т3%) 102,8+0,9 (¿0,2%)

2.2.4. Морфофункциональные изменения слизистой оболочки желудка свиньи при оллуланозе

При инвазировании поросят относительно малыми дозами -489-845 экз.оллулан слизистая оболочка имеет признаки острого катарального воспаления, при котором отмечаются дистрофические изменения покровного эпителия, его слущивание, наличие обильной пристеночной слизи. Главные и обкладочные клетки тела и дна фундальных желез в состоянии набухания, в цитоплазме обкладочных клеток - появление единичных вакуолей, пикноз ядер. Присходит десквамация клеток в просвет желез, слизистая дистрофия клеток эпителия.

При инвазировании в дозе 1250 экз. оллулан в фундальной части желудка отмечается некоторое утолщение размеров желез за счет увеличения количества главных и обкладочных клеток. В трубчатой концевой части железы наблюдается частичная гиперплазия главных клеток. Отмечается кистозное расширение этих желез. В просвете кисты кроме слизистого содержимого встречаются отторгнутые клетки желез, происходит увеличение слизистого содержимого в мукоцитах. Соединительная ткань между железами имеет повышенное содержание гистиоцитов. В подсли-зистой основе отмечается гиперплазия лимфатических фолликулов за счет увеличения числа лимфоидных клеток. Все это указывает на то, что гипертрофия желез происходит за счет гиперплазии железистых клеток желудка и сопровождается гиперсекрецией. Таким образом, гиперсекреция происходит за счет выработки секрета главными и обкладочными клетками, а также муко-цитами. В кардиальной части желудка отмечается пролиферация лимфоцитов. Одновременно наблюдается увеличение числа бокаловидных гастроцитов, а в просвете желез содержится большое количество слизи.

В больших дозах инвазирования - 5 тыс.-16 тыс. экз. в слизистой оболочке развиваются глубокие деструктивные изменения со стороны главных и, особенно, обкладочных клеток - вакуольная или крупноячеистая цитоплазма, пикнотичные ядра, у многих клеток наблюдается разрушение стенок вакуолей, в отдель-

ных случаях - распад поверхностного слоя оболочки клетки, лизис и распад большого числа обкладочных клеток, что сопровождается их массовой десквамацией, происходит разрушение и отторжение клеток эпителия стенки желудочных желез, а также обнажение их основы. Кроме того, под влиянием оллулан в стенке желудка отмечается выраженная воспалительная гиперемия поверхностного слоя слизистой оболочки, частично пререходя-щая в диапедезные кровоизлияния, обильное образование слизи клетками покровного эпителия желудка. В подслизистой основе увеличение фолликулов, в результате пролиферации их клеток. Нередко при длительном паразитировании оллулан (89-115 дней) наблюдается кистозное расширение просвета протока желез, а также их крипт, как результат нарушения отделения сока. В кар-диальной части желудка наблюдается увеличение числа бокаловидных гастроцитов. Повышенное содержание слизи в желудочном соке является одним из факторов нарушения процесса пищеварения, так как ослизнение пищевого кома препятствует воздействию на него желудочного сока.

Кроме поражения слизистой оболочки желудка, особенно его фундальной части, при инвазировании большими дозами также отмечаются изменения в двенадцатиперстной кишке, соответствующие слизисто-десквамативному катару.

В печени развивается острая зернистая или зернисто-жиро-вая дистрофия гепатоцитов, особенно вокруг центральной венки. Кроме того, при длительном воздействии оллулан отмечает-I ся интерстициальное воспаление органа. В легких - картина раз-

1 вивающегося интерстициального воспаления. Выраженность из-

менений в органах зависит от степени инвазирования оллулана-ми, а также от продолжительности течения заболевания.

2.2.5. Терапевтическая эффективность тивидина, ивомека и препарата ВК-168 при оллуланозе свиней

Наблюдение за поедаемостью корма с тивидином в дозе 60 мг/кг проводили в течение трех часов. Животные корм не поедали, он практически оставался нетронутым. Корм с тивидином,

добавленным из расчета 50 мг/кг поедался плохо. За три часа наблюдения свиноматки поедали 30-35% корма. При добавлении в корм тивидина из расчета 40 мг/кг остаток составил 20-25%. Корм с препаратом в дозе 30 мг/кг свиноматки съели полностью. Угнетения, саливации и диареи не отмечали.

Тивидин в дозе 30 мг/кг при однократной даче показал ЭЭ 60%. Гибель самок оллулан составила 66,1, НЭ - 63,1, самцов -76,1, НЭ - 73,9, личинок - 91,1, ЛЭ - 89,2%.

В дозе 30 мг/кг при двукратном применении тивидин проявил ЭЭ 77,7%. Гибель самок оллулан в содержимом желудка свиноматок составила 10-100%, самцов - 35,9-100, личинок - 100%, а в слизистой оболочке желудка соответственно 28,6-100, 20,0-100, 90,5-100, НЭ была равна 89,8, 90,3 и ЛЭ - 98,8%.

Тивидин в дозе 40 мг/кг живой массы при групповой даче показал ЭЭ 37,5%. Число погибших самок оллулан колебалось от 5,9 до 100, самцов - от 56 до 100, личинок - 61,3 - 100% (НЭ составила 71,4 для самок и 80,6 для самцов, ЛЭ - 75%).

Полученные результаты свидетельствуют о том, что отечественный препарат тивидин обладает губительным действием в отношении оллулан. Однако получению более высокой антгель-минтной эффективности препятствует плохая поедаемость корма из-за горького вкуса препарата. Таким образом, рекомендуемой дозой тивидина при оллуланозе свиней является 30 мг/кг двукратно.

Результаты исследований показали, что препарат ВК-168-54-П-400 (1:9) в дозе 5 мг/кг массы тела вызвал гибель самок оллулан от 14,3 до 66,6% (НЭ - 37,9%), самцов - от 20,7 до 78,6 (НЭ -55,1%), личинок - от 65,9 до 100 (ЛЭ - 85,9%).

Серия ВК-168-П-400 показала следующую эффективность: гибель самок составила 12,9 - 83,2 (НЭ - 46,4%), самцов - 22,3 -87,4 (НЭ - 54%), личинок - 74,4 - 100 (ЛЭ - 87,8%).

Серия ВК-168-П-1500 (1:9): гибель самок оллулан - 1,7 - 83,7 (НЭ - 30,4%), самцов 18,6 - 81,6 (НЭ -41,3%), личинок - 71,2 - 96.8 (ЛЭ - 78,2%). (таблица2).

Таблица 2. Антгельминтная активность ВК-168 при оллуланозе свиней

№ группы Серия препарата Доза, мг/кг Количество животных НЭ самки НЭ самцы лэ

1 ВК-168-54-П-400( 1.9) 5 9 37,9 55,1 85,9

2 ВК-168-П-400 5 9 46,4 54,0 87,80

3 ВК-168-П-1500(1:9) 5 4 30,4 41,3 78,2

Таким образом, препарат ВК-168 в дозе - 5 мг/кг обеспечивает невысокую эффективность при оллуланозе свиней.

В результате изучения ивомека в пониженой дозе -1 мл/50 кг живой массы была получена ЭЭ равная 62,5%, причем немато-цидная эффективность была равна 61,3-86,9%), лярвоцидная -100%). Высокую эффективность проявил препарат в рекомендуемой дозе - 1 мл/33 кг. В двух опытах на 42 свиноматках была получена ЭЭ равная 100%), в двух - на 44 свиноматках - 96,599,9%, НЭ - 99,9-100%, ЛЭ - 100% (таблица 3).

Таблица 3. Антгельминтная эффективность ивомека при оллуланозе

свиней

№ опьп Доза препарата Количество животных ЭЭ, % НЭ, % лэ, %

Опытные Контрольные

1 1 мл/50 кг 10 10 62,5 61,3-86,9 100

2 1 мл/33 кг 16 28 99,9 99,0 100

3 1 мл/33 кг 21 12 100 100 100

4 1 мл/33 кг 21 25 100 100 100

5 1 мл/33 кг 28 25 96,5 99,9 100

! 1

выводы

1. Оллуланы малоустойчивы во внешне среде. При температуре 5...15°С они остаются жизнеспособными до 4 суток. Более устойчивы во внешней среде самки, менее - личинки. При температуре выше 15°С и низкой влажности воздуха гибель оллулан на поверхности почвы происходит значительно быстрее, чем в глубине 2-5 см. Оллуланы не переносят высушивания, погибают при температуре 0°. Тип почвы на выживаемость оллулан существенного влияния не оказывает.

2. Нарушения секреторной функции желудка свиней при ол-луланозе наступают раньше проявления клинических признаков болезни. В начальной стадии заболевания наблюдается кратковременное умеренное повышение секреторной - на 8-16% и кислотообразующей - на 50%) функций желудка в голодных порциях. При хроническом течении оллуланоза присходит снижение кислотообразующей функции желудка. Дебит-час свободной соляной кислоты в желудочном содержимом больных оллуланозом животных на 26-33 дни снижается в 4,3-7,6 раза, показатель активной кислотности повышается в 1,5-2,2 раза.

3. У животных с субклиническим течением оллуланоза при значительном снижении кислотообразующей функции (гипацид-ное состояние) ферментообразующая функция желудка не нарушается. Проявление выраженных клинических признаков оллуланоза сопровождается торможением секреторной функции желудка, что приводит к анацидному состоянию и резкому снижению протеолитической активности (на 92-96%>).

4. Основные макроскопические и морфологические изменения наблюдаются в местах локализации оллулан - фундальной зоне желудка, менее выраженные - в его кардиальной части (увеличение числа бокаловидных гастроцитов) и 12-перстной кишке (слизисто-десквамативный катар). Патоморфологические изменения в слизистой оболочке желудка имеют деструктивно-атро-фический характер и зависят от интенсивности и продолжительности инвазии.

5. Инвазирование в дозе 489-845 экз. оллулан вызывает дис-

трофию и слущивание покровного эпителия, начальные изменения в клетках фундальных желез - их набухание, появление вакуолей, пикноз ядер. При инвазировании в дозе 1250 экз. оллулан происходит увеличение числа и гиперплазия главных и обкла-дочных клеток, кистозное расширение желез, гиперсекреция му-коцитов, что свидетельствует о гиперсекреции желудочного сока. Инвазирование в дозе 5-7,5 тыс. вызывает кистозное расширение желез, главные клетки фундальных желез подвергаются распаду и отторжению. Особенно глубокие нарушения отмечены в структуре обкладочных клеток: происходит вакуолизация цитоплазмы, лизис и распад большого числа обкладочных клеток.

6. Установлена зависимость между морфологическими изменениями в фундальных железах желудка и их функциональным состоянием. Причиной понижения кислотообразующей функции желудка при оллуланозе являются деструктивные изменения и распад большого числа обкладочных клеток.

7. У поросят, инвазированных в дозе 7,5 тыс. оллулан выраженных клинических признаков заболевания не регистрируется. При экспериментальном инвазировании поросят в дозе 16 тыс,-оллулан летальный исход составил 40%.

8. Тивидин в дозе 30 мг/кг массы тела двукратно через 24 часа обеспечивает 77%-ную эффективность при оллуланозе свиней. Увеличение однократной дозы антгельминтика снижает поедае-мость корма из-за горького вкуса, что препятствует повышению экстенсэффективности препарата. Ивомек инъекционный в дозе 1 мл/ЗЗкг обеспечивает 96,5-100%-ную эффективность при оллуланозе свиней. Из испытанных серий препарата ВК-168 максимальную эффективность при оллуланозе - НЭ 46,4-54%, ЛЭ - 87,8% -обеспечила серия П-400 в дозе 5 мг/кг массы тела однократно.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. В комплексе лечебно-профилактических мероприятий при оллуланозе наряду с дегельминтизацией необходимо применение средств заместительной терапии, способствующих нормализации желудочного пищеварения.

2. Разработаны рекомендации «Проведение профилактических мероприятий против основных гельминтозов в свиноводстве», утвержденные ученым советом ИЭВСиДВ СО РАСХН.

3. Результаты исследований, изложенные в диссертационной работе, включены в лекционный материал и для проведения ла-бораторно-практических занятий со студентами ветеринарного факультета по дисциплине «Паразитология и инвазионные болезни сельскохозяйственных животных».

Список опубликованных работ по теме диссертации

1. Волков Ф.А. Выживаемость оллулан в почве/Ф.А.Волков, С.П.Шкиль //Профилактика и лечение незаразных и инфекционных болезней.-Новосибирск, 1985.-С. 19-28.

2. Волков Ф.А. Клинические признаки при экспериментальном оллуланозе поросят / Ф.А.Волков, С.П.Шкиль //Профилактика паразитарных болезней сельскохозяйственных животных.-Новосибирск, 1986.-С. 3-8.

3. Волков Ф.А. Патоморфологические изменения при экспериментальном оллуланозе свиней / Ф.А.Волков, А.И.Аверихин, К.Г.Щелканов, С.П.Шкиль, Н.Г.Казанков // Профилактика и меры борьбы с инфекционными болезнями сельскохозяйственных животных.-Новосибирск, 1987.-С. 104-112.

4. Волков Ф.А. Эффективность ивомека при оллуланозе свиней / Ф.А.Волков, С.П.Шкиль //Протоколы 11 международного конгресса по болезням свиней. Лазанна, 1990.- С.55-56.

5. Проведение профилактических мероприятий против основных гельминтозов в свиноводстве: Рекомендации / Ф.А.Волков,

A.И.Лапшин, В.А.Апалькин, С.П.Шкиль, В.В.Тарасов . -Новосибирск, 1990.-24 с.

6. Тарасов В.В. Поиск новых антгельминтных препаратов при смешанных инвазиях желудочно-кишечного тракта свиней /

B.В.Тарасов, С.П.Шкиль // Профилактика гельминтозов животных,- Новосибирск, 1991.- С. 19-24.

7. Шкиль С.П. Кислотообразующая функция желудка свиней при экспериментальном оллуланозе.//Эпизоотология, диаг-

ностика, профилактика и меры борьбы с инфекционными болезнями животных.-Новосибирск, 1992.- С. 94-103.

8. Шкиль С.П. Влияние оллуланозной инвазии у поросят на содержание пепсина. // Диагностика болезней животных.-Ново-сибирск, 1993.- С. 102-108.

9. Шкиль С.П. Влияние оллуланозной инвазии на секреторную функцию желудка поросят //Проблемы энтомологии и арах-нологии.-Екатеринбург, 2001,- С. 325-327.

Шкиль С.П. Нарушение секреторной функции желудка поросят при оллуланозе / С.П.Шкиль // Материалы межрегиональной науч.-практич. конф., посвящ. памяти проф. Волкова Ф.А., февр. 2002г.-С 147-151.

На правах рукописи

Шкиль Светлана Петровна

ТЕРАПИЯ ОЛЛУЛАНОЗА И МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ЖЕЛУДКА СВИНЕЙ

Специальность 03.00.19- паразитология, 03.00.13 - физиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Подписано в печать 22.04.2003 г. Формат 60x84 1/16 Объем 1 п.л. Заказ № 204 Тираж 100 экз. Отпечатано в типографии ООО «Ревик-К» 630500, НСО, п. Краснообск

I

!

)

Д

Я

! I I

i

I

!

<

с

2oo J ~/\

Р "8 42 4

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Шкиль, Светлана Петровна

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 .Распространение оллуланоза, выживаемость яиц и личинок гельминтов во внешней среде.

1.2.Видовые особенности желудочного пищеварения свиней.

1.3.Влияние гельминтов на секрецию желез желудочно-кишечного тракта.

1 АПатоморфологические изменения слизистой оболочки желудка животных при гельминтозах.

1.5.Этиотропная терапия оллуланоза свиней.

2.СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1.МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1.1.Кислотообразующая функция желудка свиней при экспериментальном оллуланозе.

2.1.2.Определение протеазной активности желудочного содержимого при оллуланозе.

2.1.3.Патоморфологические изменения желудка свиньи при экспериментальном оллуланозе.

2.1.4. Изучение выживаемости оллулан в почвах разного вида.

2.1.5. Изучение терапевтической эффективности тивидина, ВК-168 и ивомека инъекционного при оллуланозе свиней.

2.2.РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

2.2.1 .Динамика кислотообразующей функции пищеварительных желез желудка при экспериментальном оллуланозе.

2.2.2.Протеолитическая активность желудочного содержимого при оллуланозе

2.2.3.Патоморфологические изменения слизистой оболочки желудка свиней при инвазировании разными дозами оллулан.

2.2.4.Влияние типа почвы на выживаемость оллулан.

2.2.5.Терапевтическая эффективность тивидина, ВК-168 и ивомека инъекционного при оллуланозе свиней.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Терапия оллуланоза и морфофункциональное состояние желудка свиней"

Актуальность проблемы. Существенным фактором, сдерживающим увеличение производства животноводческой продукции, в частности, производства свинины, являются инвазионные заболевания. Одним из малоизученных гельминтозов свиней является оллуланоз.

О широком распространении оллуланоза в нашей стране свидетельствуют результаты исследований: на Дальнем Востоке (А.В.Казелло,1972) в Западной Сибири (Ф.А.Волков, 1979, 1983, 1983а, 1988), в Удмуртии (М.Ф.Михайлов, Ф.А.Волков, 1981), в Ростовской области, в зонах Северного Кавказа и Нижнего Поволжья (З.Г.Воронкова, М.А.Попов, 1983), в Белорусси (М.В.Якубовский, А.В.Ежелев, 1988), на Кубани (Ю.Ю.Семенов, 1989).

Экстенсивность инвазии (ЭИ) у взрослых свиней по отдельным хозяйствам колеблется от 55,5-60 до 80-90%, интенсивность инвазии (ИИ) - от десятков экземпляров до 100 и более тысяч.

Установлено, что максимальная ЭИ и ИИ наблюдается у свиноматок старше 2-2,5 лет (Ф.А.Волков, 1988, З.Г.Воронкова, 1987, М.В.Якубовский, А.В.Ежелев, 1988). Авторы указывают, что минимальная зараженность свиней оллуланами регистрируется в личных подсобных хозяйствах, на свиноводческих комплексах она значительно выше.

Отсутствие прижизненной диагностики этого гельминтоза не позволяет получать истинную картину его распространения. Посмертная диагностика часто не проводится, а патоморфологические изменения напоминают картину гастритов различной этиологии.

Характер воспаления и глубину патологического процесса авторы связывают с интенсивностью инвазии и ее продолжительностью (А.В.Казелло, 1974, А.В.Казелло, В.Е.Симаков, 1976, З.Г.Воронкова, Г.А.Алтапова, М.А.Попов, 1984, A.Kotlan, J.Mocsy, 1933, Т. Henichen, М.А. Hasslinger 1977, M.Trach, 1981).

Локализация оллулан в фундальной зоне желудка не может не сказаться на функциональном состоянии желудочных пищеварительных желез, а значит и на самом процессе пищеварения, на обмене веществ у животных.

У инвазированных свиноматок снижается молочность на 11,6 кг, масса поросят при рождении от таких свиноматок меньше на 103,8 г. В то же время к 28-дневному возрасту средний вес поросят, рожденных от свиноматок, свободных от оллулан, был выше на 157 граммов (Ф.А.Волков, 1983, 1985). Наряду с этим количество мелких и слаборожденных поросят больше у свиноматок, инвазированных оллуланами. Потери живой массы поросят при оллуланозе за девять месяцев откорма составляют в среднем 21,9 кг, а у экспериментально инвазированных оллуланами свиней отход составляет в среднем 41,75% (З.Г.Воронкова, 1986).

Паразитирование гельминтов в желудочно-кишечном тракте всегда вызывает серьезные морфофункциональные изменения в слизистой оболочке, изучение которых необходимо для получения более полного представления о патогенезе заболевания. Вместе с тем, в литературе отсутствуют сведения о влиянии оллулан на пищеварительную функцию желудка. Сведения о морфо-функциональных изменениях, возникающих в желудке свиней, больных оллуланозом, позволяют определить направление рациональной терапии при довольно широком распространении оллуланоза в специализированных свиноводческих хозяйствах с высокой ЭИ и ИИ среди свиноматок. Наряду с поиском эффективных антгельминтиков при этом заболевании более подробного изучения требует выживаемость оллулан во внешней среде, что и определяет актуальность и целесообразность работы.

Цель и задачи исследований. Целью настоящих исследований явилось изучение влияния оллулан на морфологическое состояние слизистой оболочки желудка свиней и его секретоную функцию, определение эффектвности атгельминтиков при оллуланозе и выживаемости оллулан во внешней среде.

В связи с этим были поставлены следующие задачи:

1. Определить выживаемость оллулан в почвах разного типа.

2. Изучить в динамике кислотообразующую функцию желудка свиней при оллуланозе и протеолитическую активность желудочного содержимого при олуланозе.

3. Выяснить морфофункциональные изменения слизистой оболочки желудка свиньи и их связь с его секреторной функцией при экспериментальном оллуланозе.

4. Установить терапевтическую эффективность тивидина, ВК-168 и ивомека при оллуланозе свиней.

Научная новизна.

- определена выживаемость оллулан в зависимости от температуры и глубины нахождения в почве; нематоды не переносят высушивания, погибают при 0°С; при температуре 5.15°С остаются жизнеспособными не более 4-х суток; более устойчивы во внешней среде самки; тип почвы на выживаемость оллулан существенно не влияет;

- впервые изучены кислотообразующая и пепсинообразующая функции желудка в динамике при экспериментальном оллуланозе; установлено снижение кислотообразующей функции; у животных с субклиническим течением оллуланоза при гипацидном состоянии пепсинообразующая функция желудка не нарушается, проявление выраженных клинических признаков заболевания сопровождается анацидным состоянием и резким снижением протеолитической активности;

- показано, что причиной понижения кислотообразующей функции желудка при оллуланозе являются деструктивные изменения и распад большого числа обкладочных клеток;

- установлены эффективные дозы тивидина и ивомека инъекционного при оллуланозе свиней;

Практическая ценность работы. Установлено влияние оллулан на секреторный аппарат желудка, что дополняет имеющиеся сведения о патогенезе этого малоизученного гельминтоза.

Определены терапевтические дозы тивидина, ивомека инъекционного при оллуланозе свиней, что позволяет эффективно проводить дегельминтизацию свиней при ассоциативных инвазиях. Результаты исследований использованы в рекомендациях «Проведение профилактических мероприятий против основных гельминтозов в свиноводстве»

Результаты исследований по вопросам морфо-функциональных изменений желудка, выживаемости оллулан во внешней среде, антгельминтной эффективности испытанных при оллуланозе препаратов включены в ветеринарные справочники, учебники, а также используются в лекционном и практическом материалах по паразитологии для студентов ветеринарных вузов и техникумов.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на научно-практических конференциях:

1. Паразитарные болезни животных и меры по их профилактике (Новосибирск, 1985).

2. Молодые ученые Сибири и Дальнего Востока ветеринарному обеспечению продовольственной программы (Новосибирск, 1987).

3. Проблемы инфекционной патологии сельскохозяйственных животных (Новосибирск, 1988).

4. Проблемы животноводства и как их решать (Новосибирск, 1990).

5. 11-й международный конгрес по болезням свиней (Лазанна, 1990).

6. Проблемы энтомологии и арахнологии (Екатеринбург, 2001).

7. Паразитология - приоритеты и перспективы развития (Новосибирск, 2002).

Публикации: По теме диссертации опубликовано 10 научных работ.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Выживаемость оллулан в почвах разного типа.

2. Влияние оллулан на секреторную функцию и морфофункциональные изменения слизистой оболочки желудка свиньи.

3. Результаты испытания антгельминтиков при оллуланозе свиней.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 135 страницах машинописного текста. Содержит 20 таблиц, 9 рисунков. Состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, выводов и практических предложений. Список литературы включает 180 источников, из них 157 отечесвенных и 23 иностранных авторов.

Заключение Диссертация по теме "Паразитология", Шкиль, Светлана Петровна

ВЫВОДЫ

1. Оллуланы малоустойчивы во внешне среде. При температуре 5.15°С они остаются жизнеспособными до 4 суток. Более устойчивы во внешней среде самки, менее - личинки. При температуре выше 15°С и низкой влажности воздуха гибель оллулан на поверхности почвы происходит значительно быстрее, чем в глубине 2-5 см. Оллуланы не переносят высушивания, погибают при температуре 0°С. Тип почвы на выживаемость оллулан существенно не влияет.

2. Нарушения секреторной функции желудка свиней при оллуланозе наступают раньше проявления клинических признаков болезни. В начальной стадии заболевания наблюдается кратковременное умеренное повышение секреторной - на 8-16% и кислотообразующей - на 50% функций желудка в голодных порциях. При хроническом течении оллуланоза присходит снижение кислотообразующей функции желудка. Дебит-час свободной соляной кислоты в желудочном содержимом больных оллуланозом животных на 26-й - 33-й дни снижается в 4,3-7,6 раза, показатель активной кислотности повышается в 1,52,2 раза.

3. У животных с субклиническим течением оллуланоза при значительном снижении кислотообразующей функции (гипацидное состояние) ферментообразующая функция желудка не нарушается. Проявление выраженных клинических признаков оллуланоза сопровождается торможением секреторной функции желудка, что приводит к анацидному состоянию и резкому снижению протеолитической активности (на 92-96%).

4. Основные морфологические изменения наблюдаются в местах локализации оллулан - фундальной зоне желудка, менее выраженные - в его кардиальной части (увеличение числа бокаловидных гастроцитов) и 12-перстной кишке( слизисто-десквамативный катар). Патоморфологические изменеия в слизистой оболочке желудка имеют деструктивно-атрофический характер и зависят от интенсивности и продолжительности течения инвазии.

5. Инвазирвание в дозе 489-845 экз. оллулан вызывает дистрофию и слущивание покровного эпителия, изменения в клетках фундальных желез - их набухание, появление вакуолей, пикноз ядер. При инвазировании в дозе 1250 экз. оллулан происходит увеличение числа и гиперплазия главных и обкладочных клеток, кистозное расширение желез, гиперсекреция мукоцитов, что свидетельствует о гиперсекреции желудочного сока. Инвазирование в дозе 5-7,5 тыс. вызывает кистозное расширение желез, главные клетки фундальных желез подвергаются распаду и отторжению. Особенно глубокие нарушения отмечены в структуре обкладочных клеток: происходит вакуолизация цитоплазмы, лизис и распад большого числа обкладочных клеток.

6. Установлена зависимость между морфологическими изменениями в фундальных железах желудка и их функциональным состоянием. Причиной понижения кислотообразующей функции желудка при оллуланозе являются деструктивные изменения и распад большого числа обкладочных клеток.

7. У поросят, инвазированных дозой 7,5 тыс. оллулан выраженных клинических признаков заболевания не регистрируется. При экспериментальном инвазировании поросят в дозе 16 тыс. оллулан летальный исход составил 40%.

8. Тивидин в дозе 30 мг/кг массы тела двукратно через 24 часа обеспечивает 77%-ную эффективность при оллуланозе свиней. Увеличение однократной дозы снижает поедаемость корма из-за горького вкуса препарата, что препятствует повышению экстенсэффективности препарата. Ивомек инъекционный в дозе 1 мл/ЗЗкг обеспечивает 96,5-100%-ную эффективность при оллуанозе свиней. Из испытанных серий приепарата ВК-168 масимальную эффективность при оллуланозе - НЭ 46,4-54%, ЛЭ - 87,8% - обеспечила серия П-400 в дозе 5 мг/кг массы тела однократно.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. В комплексе лечебно-профилактических мероприятий при оллуланозе наряду с дегельминтизацией необходимо применение средств заместительной терапии, способствующих нормализации желудочного пищеварения.

2. Разработаны рекомендации «Проведение профилактических мероприятий против основных гельминтозов в свиноводстве», утвержденные ученым советом ИЭВСиДВ СО РАСХН.

3. Результаты исследований, изложенные в диссертационной работе, включены в лекционный материал и для проведения лабораторно-практических занятий со студентами ветеринаоного факультета по дисциплине «Паразитология и инвазионные болезни сельскохозяйственных животных».

ЗАКЛЮЧЕНИЕ ПО ОБЗОРУ ЛИТЕРАТУРЫ

Обзор данных литературы показал, что оллуланы (паразиты животных семейств кошачьих и всеядных) распространены повсеместно. Установлено, что данная инвазия получила особенно широкое распростанение среди свиней на крупных свинокомплексах, специализированных и племенных фермах. Сезонность заболевания выражена слабо - небольшой рост ЭИ отмечен в весенне-летний период. Выражена возрастная динамика заболевания -нарастание экстенсивности инвазии у свиноматок 2-3-летнего возраста Местом паразитирования оллулан является содержимое и слизистая оболочка желудка свиней, причем отмечена избирательная локализация гельминтов - фундальная зона желудка.

Установлено, что при паразитировании гельминтов желудочно-кишечного тракта у животных происходит нарушение секреторной функции желудка и кишечника. Характер нарушений зависит от вида паразита, его локализации, интенсивности инвазии, срока инвазирования и других факторов. Отмечено, что в первые дни инвазирования при некоторых гельминтозах наблюдается повышенная деятельность желудочных желез (М.С.Крикунов, 1958, Ю.Г.АртеменкоЮ 1968, Н.Е.Дидковский, 1969,1969а). В течение инвазии в некоторых случаях наблюдали чередование периодов нарастания кислотностной продукции с периодами угнетения ее секреции, а в дальнейшем гипацидное состояние. Паразитирование гельминтов влияет и на переваривающую способность желудочного сока. С увеличением срока инвазирования протеазная активность претерпевает существенные колебания, происходит постепенное ее понижение.

Ряд авторов установили достоверное снижение переваримости и усваиваемости питательных веществ корма, нарушение биоценоза в желудочнокишечном тракте, снижение ферментной активности при гельминтозах пищеварительной системы.

Данные литературы указывают на ряд закономерных морфологических изменений, возникающих в слизистой оболочке желудка при паразатировании в нем гельминтов. Это атрофические, альтеративно-некробиотические, пролиферативно-гиперпластические изменения.

Острая стадия инвазии сопровождается альтеративными изменениями в клетках поверхностного эпителия и железистой ткани. На фоне гиперсекреции слизи происходит массовая гибель и отторжение эпителиальных клеток поверхностого слоя слизистой оболочки, дистрофические изменения в эпителии желез желудка. Слизистая дистрофия железистого эпителия приводит к образованию кист и вздутий в протоках вследствие закупорки их слизью. Локализация гельминтов в слизистой оболочке желудка вызывает атрофию железистой ткани от механического давления как самими гельминтами, так и разрастающейся соединительной тканью. По мере роста гельминта, особенно при высокой ИИ наступает атрофия и дегенерация железистой ткани, что приводит к функциональной недостаточности, что и является одной из главных причин нарушения пищеварения.

В результате изучения гистологических изменений в слизистой оболочке желудка при оллуланозе установлено, что паразитирование оллулан вызывает катарально-десквамативные изменеия с разрастанием соединительной ткани, преимущественно в слизистой оболочке фундальной зоны, авторы подчеркивают связь патоморфологических изменений с интенсивностью инвазии и продолжительностью ее течения. Не достаточно полно изучена и представлена в отечественной и зарубежной литературе функциональная морфология органов при оллуланозе. В частности, нет сведений о динамике морфологических изменений в желудке свиней при инвазировании разными дозами оллулан. Имеющиеся данные о патоморфологических изменениях при оллуланозе свидетельствуют о серьезных структурных изменениях в секреторном аппарате желудка. В доступной литературе мы не обнаружили сведений о влиянии оллулан на функциональное состояние пищеварительных желез желудка, в частности на динамику кислотностной продукции, протеолитической активности пепсина у животных, инвазированных оллуланами. При оллуланозе установлено снижение продуктивности у маточного поголовья, недополучение прироста живой массы у поросят-сосунов и на откорме. На основании этих данных можно предположить, что оллуланы вызывают серьезные изменения в физиологии пищеварения. Изучение динамики морфологических изменений и функционального состояния секреторного аппарата желудка, расширит представление о патогенезе оллуланоза, о взаимодействии в системе паразит-хозяин, позволит разработать обоснованную как специфическую, так и патогенетическую терапии заболевания.

Анализ данных литературы так же показал, что высокую эффективность при оллуланозе свиней проявили антгельминтики бензимедазольного ряда (панакур, албендазол, мебенвет, тетрамизол, ринтал) в дозах, необходимых для дегельминтизации при смешанных нематодозах желудочно-кишечного тракта свиней. Поочередная дегельминтизация нафтамоном и пиперазином (схема "напина") оказала слабый эффект на оллулан, кремнефтористый натрий также проявил слабое лярвоцидное действие, а антгельминтная эффективность пиперазаина при оллуланозе оказалась равной нулю.

В литературе не достаточно сведений об эффективности отечественных и импортных антгельминтиков при оллуланозе. Вместе с тем, испытание отечественных аналогов пирантела тартрата - тивидина, фенбендазола - ВК-168 при гельминтозах сельскохозяйственных животных подтвердило их высокую нематоцидную эффективность, но определения действия этих препаратов на оллулан проведено не было. Среди большого количества работ об эффективности лекарственных форм ивомека при гельминтозах желудочно-кишечного тракта свиней также мало сообщений о действии ивомека инъекцинного на оллулан. Поскольку вышеуказанные антгельминтики имеют довольно широкий спектр действия, их применяют при смешанных инвазиях. Оллуланоз свиней часто не диагностируется, ввиду отсутствия прижизненных методов диагностики, но распространен наряду с другими гельминтозами свиней достаточно широко, причем инвазия протекает с высокой интенсивностью. Поэтому необходимо проводить дальнейший поиск средств специфической терапии при оллуланозе свиней.

Многочисленными исследованиями установлено, что среди яиц гельминтов, представляющих опасность для свиней, наиболее устойчивыми к неблагоприятным факторам внешней среды - низким и высоким температурам воздуха и почвы - являются яйца аскаридат. Они остаются жизнеспособными после замораживания до -27,7°С около полутора месяцев и до 4-х месяцев в -обезвоженной среде в летний период. Яйца эзофагостом, трихоцефал, аскаропсов, макраканторинхусов и др., а также личинки, вышедшие из яиц, но не достигшие инвазионной стадии, являются менее устойчивыми. Повышение температуры оружающей среды до 35-37°С, как и понижение от 0°С вызывает их гибель, а понижение от 5°С приводит к замедлению развития зародышей. И все же жизнеспособность их, особенно инвазионных яиц и личинок сохраняется в довольно широком диапозоне температур в течение достаточного времени для распространения инвазии. Сохранность яиц и зародышей биогельминтов повышается за счет пребывания их в промежуточных хозяевах. Таким образом, яйца и личинки гео- и биогельминтов несмотря на разную устойчивость к неблагоприятным факторам внешней среды, в силу присущим им циклам развития, являются хорошо приспособленными к различным условиям внешней среды. Развитие оллулан происходит по эндоциклу и нахождение их во внешней среде является лишь условием распространения инвазии. Поэтому представляет интерес устойчивость оллулан к факторам внешней среды (температура, влажность, глубина их нахождения в почве).

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1 .МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Работа выполнена в лаборатории по изучению гельминтозов сельскохозяйственных животных ИЭВС и ДВ СО РАСХН, на факультете ветеринарной медицины НГАУ.

2.1.1. Кислотообразующая функция желудка свиней при экспериментальном оллуланозе

И.П.Павловым (1894) разработан метод хирургической подготовки животных к хроническому эксперименту. Метод позволяет изучать моделируемый процесс в многократных повторениях и получил широкое применение и развитие в эксперименте на сельскохозяйственных животных. Развивая это направление А.В.Басов (1943), А.А.Алиев (1974) и другие авторы внесли ценный вклад в создание ряда оригинальных методов фистулирования пищеварительного тракта.

Для изучения влияния оллулан на секреторную функцию желудка свиней было прооперировано 40 поросят 2-2,5-месячного возраста - наложена хроническая фистула по А.В.Басову (1943).

За двенадцать часов до операции поросят лишали корма и ограничивали дачу воды. Премедикацию проводили смесью: 2,5%-ный аминазин, 1%-ный анальгин, 1%-ный димедрол по 2 мл внутримышечно. Через 20 минут после премедикации внутримышечно вводили кетамин гидрохлорид - 1,5 мл.

ХОД ОПЕРАЦИИ. Животных фиксировали в спинном положении. Операционное поле готовили по правилам антисептики. Разрез проводили по белой линии живота, отступив 3-4 см от мечевидного отростка. После вскрытия брюшной полости извлекали желудок, в области его дна между кровеносными сосудами накладывали кисетный шов на серозный, мышечный и под слизистый слои ( Рис.1). Рассечение тканей стенки желудка для введения фистулы сделали в области дна на границе между фундальной и пилорической зонами. После введения фистулы в полость желудка затянули наложенный кисетный шов, вывели трубку фистулы за пределы брюшной полости, зашивали послойно операционный разрез: брюшину - кетгутом, непрерывным швом по Шмидену (Рис.2), мышцы и кожу - шелком, прерывистым узловатым швом (Рис.3, 4). Вставленные канюли изготовлены из полиэтилена.

Для определения фона секреторной деятельности желудка у всех опытных животных через две недели после операции дважды провели исследование желудочного содержимого (О,, 02).

Материал для заражения брали от спонтанно инвазированных свиноматок на Новосибирском мясокомбинате. Учитывая избирательную локализацию оллулан, материал для заражения - соскобы с поверхности слизистой оболочки желудка - брали из фундальной зоны желудка. Определяли количество оллулан в трех граммах соскоба слизистой оболочки и пересчитывали на вес каждой пробы. Выделение нематод для подсчета проводили методом переваривания в искусственном желудочном соке (Ф.А.Волков, 1986). Инвазионный материал (соскоб слизистой оболочки желудка свиньи) скармливали подопытным поросятам с кормом.

В пробах желудочного содержимого, полученых через фистулу, определяли показатели общей кислотности, свободной, связанной соляной кислоты, значение рН, протеазную активность (И.П.Кондрахин, Н.В.Курилов, А.Г.Малахов и др., 1985). На протяжении опытного периода вели наблюдение за животными: следили за поедаемостью корма, общим клиническим состоянием животных, консистенцией и характером фекалий, регистрировали случаи рвоты, исследовали рвотные массы на наличие оллулан.

Этапы операции - наложение фистулы по А.В.Басову (1943)

Рис. 1. Наложен кисетный шов на серозную и подслизистую оболочки области дна желудка (фото автора).

Рис.2. Наложение шва на брюшину по Шмидену (фото автора)

Рис.3. Наложение прерывистого узловатого шва на кожу (фото автора)

Рис. 4. Завершение опрации (фото автора).

По завершении опыта, животных убивали. Для определения интенсивности инвазии от каждого зараженного животного брали по две пробы из желудка: пробу желудочного содержимого и соскоб слизистой оболочки фундальной зоны. Желудочное содержимое исследовали на наличие оллулан методом последовательных промываний. Соскобы слизистой оболочки -методом переваривания в искусственном желудочном соке.

Для изучения кислотообразующей функции желудка свиней в опыте использовали 10 опытных и 5 контрольных поросят. Животных опытной группы заражали оллуланами трехкратно с интервалом 1-2 дня в дозе 2,5 тыс. оллулан. Таким образом, каждое животное было инвазировано 7,5 тыс. оллулан. Взятие и исследование желудочного содержимого для определения кислотообразующей функции желудка проводили через две недели после операции - двукратно до заражения и на 15-й, 26-й, 33-й, 63-й дни после заражения. Желудочное содержимое брали через фистулу и исследовали фракционным методом по следующей схеме:

1 проба — содержимое, собранное натощак в течение 15 минут. Затем животному давали пищевой раздражитель - 400 мл болтушки из комбикорма.

2 проба - содержимое, собранное через 25 минут после дачи пищевого раздражителя;

3, 4, 5, 6 пробы - содержимое, собранное за каждые последующие 15 минут.

Таким образом, в результате одного опыта получали шесть проб желудочного содержимого. Всего проведено 90 опытов, исследовано 540 проб желудочного содержимого.

О кислотообразующей функции желудка судили по следующим показателям в каждой пробе желудочного содержимого:

- общей кислотности, которая соответствует концентрации водородных ионов и неионизированного водорода т.е. сумма свободной соляной кислоты, связанной соляной кислоты, органических кислот, кислых фосфорнокислых солей; свободной соляной кислоты - избыток кислоты, оставшийся после связывания с белком, не вступившей в соединения с белковыми веществами; связанной соляной кислоты - соляная кислота, связанная с белками, нестойкие кислые соединения;

- величине рН, которая соответствует активности водородных ионов и является количественной характеристикой кислотности (основности) среды, количеству жидкой части желудочного содержимого в каждой порции;

- дебит общей кислотности, свободной и связанной соляной кислоты.

Общую кислотность, свободную и связанную соляную кислоту в желудочном содержимом определяли методом Тепфера (1965).

В качестве индикаторов при определении общей и свободной соляной кислоты использовали 0,5%-ный раствор 4-диметиламдоазобензол и 1%-ный раствор фенолфталеина. Для определения связанной соляной кислоты применяли 1%-ный водный раствор ализаринового красного. Профильтрованные пробы содержимого титровали 0,1%о-ным раствором едкого натра. Известно, что 1 мл 0,1%>-ного раствора едкого натра нейтрализует 0,00365 мл абсолютной соляной кислоты, таким образом, одна условная титрационная единица равна 1 ммоль/л.

Дебит-час соляной кислоты определяли по формуле: Д = 0,001 E,V,+0,001 E2V2+. Д - дебит-час соляной кислоты в миллиэквивалентах V - объем порции желудочного содержмиого,мл

Е - концентрация соляной кислоты в титрационных единицах в той же порции 0,001 - количество миллиэквивалентов соляной кислоты в 1 мл исследуемого содержимого при концентрации ее, равной одной титрационной единице.

Реакцию желудочного содержимого - рН - определяли рН-метром (рН-673 рН-метр-милливольтметр).

2.1.2. Изучение протеазной активности желудочного содержимого свиней при оллуланозе

Для определения протеазной активности желудочного содержимого в опыте использовали 5 опытных и 5 контрольных поросят 2-3-месячного возраста с наложенными фистулами в области дна желудка по Басову. Поросят опытной группы инвазировали оллуланами в дозе 16 тыс. экз/гол.

Желудочное содержимое поросят исследовали на протеазную активность до и после заражения на 5-й, 12-й, 21-й, 30-й и 46-й дни. Содержимое исследовали фракционным методом: протеазную активность определяли в порциях натощак и через 40 и 60 минут после дачи энтерального раздражителя по В.Н.Туголукову (1965). Метод основан на расщеплении сухой плазмы сыворотки крови лошади пепсином, содержащимся в желудочном соке. Об активности пепсина судили по количеству нерасщепившегося субстрата, осаждаемого трихлоруксусной кислотой. Концентрацию пепсина выражали в мг% фармакопейного препарата.

2.1.3. Патоморфологические изменения желудка свиней при экспериментальном оллуланозе

Экспериментальный оллуланоз изучали на 110 поросятах. Подопытным животным в возрасте 30 дней скормили от 489 до 16000 экз. оллулан. Контрольных и подопытных поросят содержали в разных клетках. Материал для исследования брали через 14, 30,52,89,115 дней после инвазирования.

Определяли консистенцию, цвет, целостность, влажность, величину и рисунок органа, характер и количество содержимого. Для гистологического исследования брали кусочки из кардиальной, пилорической и фундальной частей желудка, двенадцатиперстной кишки. Материал фиксировали в 10%-ном нейтральном формалине, парфиновую проводку проводили по общепринятой методике (Н.М.Алексеева, Л.Л.Ванников, В.В.Виноградов и др., 1959). Серийные срезы толщиной 5-7 мк окрашивали гемотоксилин-эозином.

2.1.4. Изучение выживаемости оллулан в почвах разного вида

Нами проведено изучение выживаемости оллулан в песчаной и черноземной почвах в лабораторных и полевых условиях. Инвазионный материал - содержимое желудка - брали на мясокомбинате от свиней, спонтанно инвазированных оллуланами.

В емкости объемом 500 см3 помещали почву, в которую добавляли оллулан в поверхностный слой, на глубину 2 и 5 см. Пробы хранили при -20°, -10°, -5°, 0, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40°С с колебаниями ± 1°. Опыты проводили в почве с влажностью 25% при влажности воздуха 55-75%.

Жизнеспособность нематод определяли через каждые 24 часа. Для этого брали по 10-20 г почвы с разной глубины, последовательно промывали водой комнатной температуры, осадок процеживали. После 10-15-минутного отстаивания осадок просматривали на наличие оллулан и определяли их жизнеспособность. Регистрировали отдельно живых и мертвых, самцов, самок, личинок. В каждом случае учитывали не менее 100 гельминтов. Замороженную почву с оллуланами оттаивали постепенно при 5, 20°.

2.1.5. Изучение терапевтической эффективности тивидина, ВК-168 и ивомека инъекционного при оллуланозе свиней

Тивидин, серия 27, содержимое суммы цис- и трансизомеров 99,2%, изготовлен в Институте органической химии РАН по аналогии с зарубежным образцом - пирантелом тартратом. В химическом отношении препарат представляет: 1, 4, 5, 6-тетрагидро-1-метил-2(2-тиенилвинил) пиримидин тартрат.

Препарат имеет горький вкус. Поэтому необходимо было, кроме изучения его эффективности, определить поедаемость корма с добавлением разного количества антгельминтика. Тивидин испытывали в дозах 60, 50, 40, и 30 мг/кг. Работа была проведена в два этапа. На первом этапе в четырех опытах определили поедаемость корма с тивидином, на втором - в трех опытах - его антгельминтную активность.

Опыт 1. После 7 - часовой голодной диеты двум свиноматкам задали тивидин в дозе 60 мг/кг. Навеску препарата тщательно перемешали с полужидким комбикормом СК-1 в индивидуальных кормушках, наблюдали за поедаемостью корма.

Опыт 2. По схеме опыта № 1 пяти свиноматкам задали тивидин в дозе 50 мг/кг.

Опыт 3. Тивидин скормили 12 свиноматкам групповым методом в дозе 40 мг/кг.

Опыт 4. Тивидин скормили 15 свиноматкам групповым методом в дозе 30 мг/кг.

Опыт 5. Тивидин в дозе 30 мг/кг назначили 15 свиноматкам однократно. Контрольные животные (7 голов) препарат не получали.

Опыт 6. Тивидин назначили 15 свиноматкам в дозе 30 мг/кг двукратно с интервалом 24 часа. Контрольные животные (11 голов) препарат не получали.

Опыт 7. Тивидин в дозе 40 мг/кг назначили групповым методом 12 свиноматкам однократно. Контрольные животные препарат не получали. Опытные и контрольные животные были убиты на 5-е сутки.

Препарат ВК-168 (аналог фенбендазола), синтезированный в лаборатории экспериментальной терапии Всесоюзного института гельминтологии им. К.И.Скрябина. Были испытаны несколько серий этого препарата.

Препарат ВК-168-54-П-400 (1:9) назначали девяти свиноматкам в дозе по 5 мг/кг, однократно, индивидуально с кормом.

Препарат ВК-168-П-400 назначали девяти свиноматкам в дозе 5 мг/кг, однократно, индивидуально.

Препарат ВК-168-П-1500(1:9) назначали четырем свиноматкам в дозе 5 мг/кг однократно, индивидуально.

Опытные и контрольные животные были убиты на 7 сутки.

Ивомек инъекционный испытан многими исследователями на разных видах сельскохозяйственных животных, представляет 1%-ный стерильный раствор ивермектина. Рекомендуемой дозой для свиней при нематодозах является 1 мл/33 кг живого веса.

Эффективность ивомека при оллуланозе изучали в пяти опытах на 96 опытных и 100 контрольных свиноматках. Опытным свиноматкам вводили ивомек в дозах 1 мл/50 кг (10 голов), и 1 мл/3Зкг массы тела (86 голов) подкожно однократно. У контрольных животных дегельминтизацию не проводили. Животные были убиты на 10-12 день.

При убое на мясокомбинате брали пробы для исследования на наличие оллулан - содержимое желудка и соскобы слизистой оболочки желудка из зоны дна. Содержимое исследовали методом последовательных промываний. Соскобы слизистой оболочки - методом переваривания в искусственном желудочном соке. В случае обнаружения оллулан определяли их жизнеспособность по подвижности в 50%-ном растворе диметилсульфоксида. Вели дифференцированный учет погибших и живых оллулан по трем группам: самцы, самки, личинки. При определении эффективности препаратов в расчет брали только тех свиней, у которых обнаруживали живых или мертвых нематод (Ф.А.Волков, 1980,

М.Ю.Паскальская, Ф.А.Волков, 1982). Количество погибших нематод и личинок в контроле не превышало 10%.

Определение нематоцидной и лярвоцидной эффективности испытуемых антгельминтиков проводили путем соотношения живых личинок в опытной и контрольной пробах (Ф.А.Волков, А.П.Симонов, 1977):

ЛЭ -100% - — х\ 00; , a\xb У2 a\xb

У1 - количество живых личинок и нематод в опытной и контрольной (у2) пробах от числа в %; аь а2 - количество живых личинок от всех исследованных личинок в опытной (ai) и контрольной (а2) пробах;

С], с2 - количество личинок, взятых для определения жизнеспособности в опытной ( С]) и контрольной (с2) пробах; b - условное число личинок, взятое для расчета (100).

Математическая обработка материала проведена с использованием вариационных методов статистики. Вероятность достоверности различий определялась на основании критерия Стьюдента. Различия между средними величинами считались достоверными при Р < 0,05.

Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием программы Microsoft Excel 97.

2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

2.2.1. Динамика кислотообразующей функции пищеварительных желез желудка при оллуланозе

До экспериментального заражения у поросят дважды был определен фон желудочной секреции по показателям общей кислотности, свободной и связанной соляной кислоты (0,02). Как в опытной, так и в контрольной группах оказались животные с различными уровнями кислотной продукции. Так, в контрольной группе в порциях желудочного содержимого, взятых перед дачей энтерального раздражителя, отмечали колебания общей кислотности от 24 до 146 ммоль/100мл (74,8 ± 20,2), в опытной группе - от 12 до 170 ммоль/100мл (71,8 ± 15,1). Результаты первого исследования фона секреции до заражения (Oi) показали, что в порциях натощак общая кислотность по контрольной группе была выше, чем в опытной на 4%. По результатам второго определения фона секреции уровень общей кислотности в опытной группе (85,6±10) на 30% превышал таковой в контрольной (60±15,6). Такие колебания показателей кислотности вызваны течением восстановительных процессов в послеоперационный период и физиологически объяснимы.

Анализируя результаты относительного количества общей кислотности, свободной и связанной соляной кислоты при фракционном исследовании, можно отметить следующее. На 15-й день опытного периода общая кислотность у контрольных животных в порциях натощак была равна 91,6 ± 18,9, к 26-му дню - 102,4 ± 24,1, к 33-у - 132,8 ± 17,8, к 63 - у дню - 122,0 ± 20,3 ммоль/ЮОмл. Таким образом, у контрольных животных отмечается устойчивая тенденция повышения и сохранения общей кислотности в порциях натощак на высоком уровне до конца опытного периода (таблица 1).

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Шкиль, Светлана Петровна, Тюмень

1. А.с. № 967471. Способ определения жизнеспособности гельминтов и их личинок / Паскальская М.Ю., Волков Ф.А., Офицеров В.И. Заявл. 7.08.80, № 2972561/30-15. Опубл. в Б.И., 1982, № 39.

2. Александрова Р.Б. Желудочная секреция у поросят в подсосный период.-Дис. .канд. вет.наук. М., 1955.-156с.

3. Алексеева, Н.М. Основы общей гистологии и гистологическая техника / Н.М.Алексеева, Л.Л.Ванников, В.В.Виноградов, М.С.Виноградова и др.: -Учебн. пособие.-М., 1959.-210с.

4. Алиев А.А. Оперативные методы исследований с.-х. животных: Монография / А.А.Алиев.-Л., 1974.-334с.

5. Алиев А.А. Современные концепции пищеварения. Энтеральный гомеостаз и плазмоформирующая функция пищеварительной системы //Сб.науч.трудов/Всесоюзный НИИ физиологии и биохимии с.-х. животных.-1985.-Т. 30.-С. 3-10.

6. Антипов А.А. Сравнительная эффективность некоторых антгельминтиков при метастронгилезе свиней // Материалы науч. конф. « Легочные и желудочно-кишечные нематодозы человека и животных и меры борьбы с ними».-М., 1993.-С.8.

7. Артеменко Ю.Г. Клиническое течение и некоторые вопросы патогенеза парамфистоматидоза молодняка крупного рогатого скота:- Автореф. дис.канд. вет наук М., 1968.-25с.

8. Архипов И.А. Изучение эффективных средств против онхоцеркоза крупного рогатого скота//Бюл.ВИГИС.-М., 1988.-Вып.51 .-С.15-19.

9. Ю.Архипов И.А. Эффективность ивомека и отсутствие эффективности фасковерма против преимагинальных онхоцерк крупного рогатого скота //Бюл.ВИГИС.-М., 1989.-Вып.52.-С. 75.

10. П.Ашетов И.К. Влияние соединения ВК-168 на овец в терапевтической и повышенных дозах / И.К.Ашетов, Н.В.Демидов //Бюл.ВИГИС.-М., 1985.-Вып.40.-С.7-10.

11. Бакеева Е.Н. К вопросу о желудочном пищеварении у поросят в подсосном периоде //Сб.науч.тр.НИИ свиноводства.-1940.-Вып. 15.-С.56-58.

12. Бакеева Е.Н. Физиологические основы кормления свиней: Монография.-Киев, 1963.

13. Бараков А.Г. Ферментативная активность желудочного и кишечного соков у больных с атрофическим гастритом / А.Г.Бараков, П.П.Еращенко // Терапевтич. архив,- 1980.-Т.52.-№ 2.-С. 24-26.

14. Басов В.А. Замечание об искусственном пути в желудок животных //Записи по части врачебных наук.-1943.-Вып.4-5.-№ 2.-С.83-85.

15. Бокуняева Н.И. Справочник по клиническим лабораторным методам исследования/Н.И. Бокуняева, Р.П.Золотницкая .-М., 1975.-С.246-263.

16. Боровский В.В. О первой фазе желудочной секреции у свиней / В.В.Боровский, Б.Н.Бакеева, А.В.Квасницкий //Тр. ВНИИИС .-1932.-Т.8.-С. 182.

17. Бурделев Т.Е. Новая нематода Ollulanus skxjabini nov.sp. из пищевода и желудка льва//Докл. АН СССР.-1950.-Т.1.-С.163-164.

18. Василенко В.Х. Справочник по гастроэнтерологии. -М., 1976.-384с.

19. Волков Ф.А. К обнаружению оллулан у свиней в Сибири //Науч,-техн.бюл./ВАСХНИЛ. Сиб. отд.-ие.-1979.-Вып.13.-С. 17-22.

20. Волков Ф.А. Диагностика оллуланоза свиней с помощью искусственного желудочного сока //Профилактика болезней с.-х. животных.-Новосибирск., 1980.-С. 85-89.

21. Волков Ф.А. Изыскание средств дегельминтизации свиней при оллуланозе //Незаразные и паразитарные болезни с.-х. животных.-Новосибирск, 1981.-С. 166-168.

22. Волков Ф.А. Диагностика оллуланоза свиней //Ветеринария.-1983.-№ 2.-С. 42-43.

23. Волков Ф.А. Влияние оллулан на продуктивность свиней //Сибирский вестник с.-х. науки.-1983-а.-№ 4(76).-С. 68-72.

24. Волков Ф.А. Географическое распространение оллулан //Эпизоотология и иммунопрофилактика болезней с.-х. животных.-Новосибирск, 1983-6.-С. 101106.

25. Волков Ф.А. Сезонная и возрастная динамика оллуланоза свиней //Диагностика болезней животных и профилактика их на фермах и комплексах/ВАСХНИЛ. Сиб. отд-ние.- Новосибирск, 1984.-С. 23-29.

26. Волков Ф.А. Дегельминтизация свиней при оллуланозе / Ф.А.Волков, И.Г.Солоненко //Свиноводство.-1984а.-№ 8.-С.31.

27. Волков Ф.А. Влияние оллулан на рост поросят//Сиб. вест. С.-х. науки.-1985.-№ 4.-С.103-105.• 30. Волков Ф.А. Дегельминтизация свиней при оллуланозе//Ветеринария.1985а.-№ 5.-С.53.

28. Волков Ф.А. Морантел тартрат при оллуланозе свиней //Профилактика и лечение незаразных и инвазионных болезней животных,-1985-6.-С 29-31.

29. Волков Ф.А. Оллуланоз свиней и его профилактика ( рекомендации).-Новосибирск, 1986.-26с

30. Ф 33.Волков Ф.А. Видовой состав оллулан у свиней в Сибири // Профилактикагельминтозов с.-х. животных. НТБ, Новосибирск, 1988.-Вып. 1.-С.4-8.

31. Волков Ф.А. Испытание новых антгельминтиков при оллуланозе свиней /Ф.А.Волков, С.П. Шкиль //Особенности эпизоотического процесса и профилактика болезней на промышленных комплексах.-Новосибирск, 1988а.-С.47-52.

32. Волков Ф.А. Патоморфологические изменения желудка поросят при• суперинвазии оллуланами /Ф.А.Волков, Шкиль С.П /Науч.-техн.бюл. ИЭВСиДВ.-19886.-Вып. 1 .-С. 8-11.

33. Волков Ф.А. Эффективность препаратов макроциклических лактонов при оллуланозе свиней // Эпизоотология, диагностика, профилактика и меры борьбы с болезнями животных- Новосибирск, 1997.-С. 194-197.

34. Вопросы патогенеза и диагностика гастроэнтеритов у свиней: Отчет о• НИР/Витебский гос.вет.ин-т; руководитель П.Я.Конопелько М., 1982,- 28с.

35. Воронкова З.Г. Обнаружение стронгилят из рода Ollulanus у свиней в Ростовской области / З.Г.Воронкова, М.А.Попов //Бюл./Всесоюзн.ин-т гельминтологии.-1983.-Вып. 35.-С. 52-53.

36. Воронкова З.Г. Патоморфологические изменения при оллуланозе у свиней / З.Г.Воронкова, Г.П.Алтапова, М.А.Попов //Бюлл. ВИГИС.-М., 1984.• Вып.39.-С.57-58.

37. Воронкова З.Г. Оллуланоз свиней (гистологические изменения в желудке)/ З.Г.Воронкова, Г.П.Алтапова, А.Попов //Ветеринария.-1985.-№ 1.-С. 46-47.

38. Воронкова З.Г. Лечение свиней при оллуланозе / З.Г.Воронкова, Е.И.Малахова//Бюл. ВИГИС.-М., 1986.-Вып. 46.-С.78-79.

39. Воронкова З.Г. Оллуланоз свиней в зоне Северного Кавказа: Дисс. .канд.вет.• наук.-М., 1987.-186с.

40. Всеволодов Б.П. Изучение тканевых реакций организма животных при некоторых гельминтозах, как патологоморфологический критерий в исследовании взаимоотношений между паразитом и хозяином //Тез. докл.науч.конф. патологоанатомов.-Казань,1948.-С. 38-39.

41. Всеволодов Б.П. Патоморфология и патогенез важнейших гельминтозов домашних и промысловых животных: Монография. -А-Ата, 1953.-107с

42. Всеволодов Б.П. Основные этапы в развитии патоморфологии гельминтозов

43. Сб.науч.тр./Алма-Атинский зоовет. ин-т.-1959.-Т.2.-С.249-252.

44. Геллер Л.И. Клиническая физиология желудка: Монография. Хабаровск, 1978.-13 5с.

45. Гильденблат А.А. Материалы по изучению физоцефалеза свиней / Науч. конф., посвященная 40-летию МВА.-1960.-С. 75-80.

46. Гильденблат А.А. Патоморфологические изменения в желудке свиней икроликов при физоцефалезе / А.А.Гильденблат, Т.П.Кудрявцева //Материалы 7-й науч.конф.по инфекц. и инваз. заболеваниям с.-х. животных.-М., 1961.-С.40-43.

47. Глинер С.М. Глисты как фактор секреторных расстройств желудка и общих функциональных нарушений организма //Советская врачебная газета.-1934.-№ 5.-С.2.

48. Головин О.В. Нематоды-гнатостомы и особенности их биологии: Дис. .канд.биолог, наук. Л., 1954.-123с.

49. Горшков В.А. Топография протеолитической активности в гастродуоденальной области при некоторых заболеваниях желудка и 12-перстной кишки //Терапевтич. архив.-1980.-Т.52.-№ 2.-С.14-18.

50. Гребень А.Л. Нейрогуморальная регуляция пищеварения/ А.Л.Гребень Т.В.Цодиков.-Л., 1983.-135с.

51. Гридин Н.Я. Влияние различных кормов и веществ на желудочную секрецию свиней //Сб.науч.тр./Харьковский зоотехн. ин-т.-1957.-Т. 9.-С. 111 — 119.

52. Гридин Н.Я. Желудочное сокоотделение у свиней //Сб.науч.тр./Харьковский зоовет. ин-т.-1967.-С. 126.

53. Гридин Н.Я.К динамике желудочного сокоотделения у свиней на отдельные виды кормов //Физиол.журнал СССР.-1956,- Т.17.-№ 9,- С.773.

54. Губарь В.Л. Физиология и экспериментальная патология желудка и 12-пестной кишки: Монография -М., 1970.-306с.

55. Даугалиева Э.Х. Эффективность ивомека при трихоцефалезе овец / Э.Х.Даугалиева, В.Е.Абрамов //Бюл.ВИГИС.-М., 1984.-Вып.38.-С.5-7.

56. Демидов Н.В. Антгельминтики в ветеринарии: Справочник -М., 1982.-338с.

57. Диденко П.П. Тивидин при стронгилятозах овец / П.П.Диденко, Н.В.Демидов // Ветеринария,- 1983.-№ 7.-С. 45-46.

58. Дидковский Н.Е. Влияние эзофагостомозной инвазии на секреторную функцию желудка поросят//Ветеринария,-1969.-№ 12.-С. 45-46.

59. Дидковский Н.Е. Секреторная функция тонкого кишечника у свиней при экспериментальном эзофагостомозе //Ветеринария, Респ.межвед.ф темат.науч.сб., Вып.23, Киев, 1969а.-с. 24-27.

60. Дидковский Н.Е. Изменения секреторной функции желудочно-кишечного тракта и картина крови у свиней при экспериментальном эзофагостомозе //Науч.записки/Белоцерковский с.-х. ин-т, 1970.-С.19.

61. Ежелев А.В. Эпизоотология и профилактика оллуланоза свиней в Белоруссии: Дисс.канд. ветнаук: Спец. 03.00.20.-М., 1989.-146с.

62. Ф 64. Ершов B.C. Гельминтозы свиней / В.С.Ершов, М.И.Наумычева,

63. Е.И.Малахова ,-М., 1963.-253с.

64. Желудочная секреция и механизмы ее регуляции у здорового человека// Геллер Л.И.; АН СССР, Науч.совет по комплексным проблемам физиологии человека и животных.-Л., 1975.-131 с.

65. Жидков А.Е. Результаты испытания новых антгельминтиков при желудочно-кишечных нематодозах овец //Эпизоотология, диагностика и профилактикаинфекционных и инвазионных болезней животных.-Омск, 1988.-С. 14-29.

66. Забашта С.Н. Метастронгилез свиней в Краснодарском крае / С.Н.Забашта, Б.Л.Гаркави // Материалы науч. конф. « Легочные и желудочно-кишечные нематодозы человека и животных и меры борьбы с ними» -М., 1993.-С. 32.

67. Захрялов Я.Н. Испытание оллюляноцидного действия препаратов наэкспериментально зараженных котятах / Я.Н.Захрялов, Т.В.Чекушкина //Тр.• ДальзНИВИ.-Благовещенск, 1980.-Т.11.-С.24-26.

68. Иргашев И.Х. Изменение состава крови и секреторной функции желудка свиней при экспериментальном трихоцефалезе / И.Х.Иргашев, Р.Х.Хаитов, В.А.Палиев, И.В.Сысоев //Гельминты человека, животных и растений и меры борьбы с ними. М., 1968.-С. 183-188.

69. Казелло A.B.Ollulanus suis nov. нематода из желудка свиньи //Проблемы ветеринарии Дальнего Востока.-Хабаровск, 1972.-С.80-84.

70. Казелло А.В. Морфогенез и сроки развития оллюлян / А.В. Казелло, Я.Н. Захрялов //Борьба с болезнями животных на Дальнем Востоке.-Благовещенск, 1974.-С. 74-79.

71. Казелло А.В. Выживаемость оллулан во внешней среде // Борьба с болезнями животных на Дальнем Востоке.-Благовещенск, 1974а.-С. 24-25.

72. Казелло А.В. Патоморфологические изменения в желудке свиней при спонтанном оллуланозе / А.В.Казелло, В.Е.Симаков // Профилактика болезней сельскохозяйственных животных: Сб.науч. тр./ВАСХНИЛ Сиб. отд-ние.-Новосибирск, 1976.-С. 189-193.

73. Канакбаев М.Ф. Сроки выживания инвазионных элементов овисного цистицерка в лабораторных условиях и во внешней среде /М.Ф.Канакбаев, И.Л.Цивирко //Сб.науч.тр./Терапия и профилактика паразитозов с.-х. животных.-Алма-Ата, 1992.-С.62-68.

74. Квасницкий А.В. К вопросу о методике изучения желудочного пищеварения свиней//Физиологический журнал СССР.-1935.-№ 4.-С. 678-682.

75. Квасницкий А.В. О желудочной секреции и пищеварении у порлсят в подсосный период /А.В.Квасницкий, Е.И.Бакеева //Тр.науч.-исслед. ин-та свиноводства.-1940.-Вып.15.-С. 43-45.

76. Квасницкий А.В. Физиология пищеварения у свиней: Монография -М., 1951.-231с.

77. Квасницкий А.В. Итоги научных исследований по физиологии и биохимии пищеварения и обмена веществ//Пищеварение и обмен веществ у свиней.-М., 1971.-С. 4-9

78. Козловский И.В.Протеолитические ферменты желудочного сока у больных хроническим гастритом и хроническим холециститом / И.В.Козловский,

79. В.Н.Михайлова // Врачебное дело.-Киев, 1979.-№ 8.-С. 70-72.

80. Кондрахин И.П. Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии// И.П Кондрахин, Н.В.Курилов, А.Г.Малахов, А.В.Архипов, А.Д.Белов, И.М.Беляков, Н.И.Блинов, А.В.Коробов, Л.А.Фролова, Н.А.Севастьянова-М., 1985.-286с.

81. Коробов А.В. Секреторная, моторно-эвакуаторная, ферментативная функции ф желудочно-кишечного тракта у поросят в раннем постнатальном онтогенезеи при острых расстройствах пищеварения:- Автореф. дис. .канд.вет. наук.-М., 1970.-25с.

82. Коротько Г.Ф. Введение в физиологию желудочно-кишечного тракта.Л., 1987.-258с.

83. Коротько Г.Ф. Выделение ферментов железами желудка.-Ташкент, 1971.-45с.

84. Крикунов М.С. Нарушение секреторной функции желудка свиней приаскаридозе //Науч.зап. Белоцерк.с.-х. ин-та.-1958.-Т.8.-С.133-148.

85. Крикунов М.С. Кишечная секреция у свиней при аскаридозе//Тез. докл. науч.конф. ВОГ.-М., 1960.-С. 60-62.

86. Крикунов М.С. Секреторная функция желудка свиней при аскаридозе//Ветеринария.-1965.- Вып.4, Киев.

87. Лемехов П.А. Эффективность ивомека при диктиокаулезе крупного рогатого скота в производственных условиях //Бюл.ВИГИС.-М., 1987.-Вып.48.-С.5354.

88. Магдиева С.Р. Состояние желудочной секреции при кишечных гельминтозах / С.Р.Магдиева, Р.Т.Зиганшина, Р.Т.Радаева //Медицинская паразитология и паразитарные болезни.-1985.-№ 5.-С. 20-25.

89. Матчанов Н.М. Об эффективности препаратов ивомека и морантел тартрата против некоторых гельминтозов каракульских овец / Н.М.Матчанов,ф С.Дадаев, А.С.Назаров, Н.В.Демидов, А.Н.Назаров, И.А.Махмудов //Докл.

90. АН УзССР.-1985.-№ 6.-С. 53-55.

91. Медяков Ф.С. О возбудителях желудочного сокоотделения у свиней//Сб.науч.тр./Троицкий вет. Ин-т.-1960.-Вып.7.-С. 72-74.

92. Михайлов М.Ф., Волков Ф.А. Оллуланоз свиней в Удмуртии /М.Ф.Михайлов,Ф. А. Вол ков//Бюл./Всесоюзн.ин-т гельминтологии,-1981 .-вып.30.-С. 62-63.

93. Мосолов В.В. Протеолитические ферменты: Монография -М., 1971.-404с.

94. Надыкто М.В., Полуэктов В.Ш., Тимофеев В.Д. Эффективность ивомека при легочных и желудочно-кишечных стронгилятозах овец / М.В.Надыкто, В.Ш.Полуэктов, В.Д.Тимофеев//Бюл. ВИГИС.-М., 1986.-Вып.46.-С. 20-23.

95. Никольский С.Н., Овсянникова Ю.П. Ивермектин как средство борьбы с паразитами / С.Н.Никольский, Ю.П.Овсянников //10 конф. Укр. об-вапаразитологов.-Киев, 1986.-Часть 2.-С.64.

96. Нурхаметов Х.Г. Некоторые показатели первичного, межуточного обмена у овец при трихоцефалезе и после дегельминтизации их тетрамизолом //Сб.науч.тр./Ульяновский с.-х. ин-т, Башкирский с.-х. ин-т.-1985.-С.

97. Нурхаметов Х.Г. Переваримость питательных веществ корма у овец при фасциолезе, дегельминтизации и стимуляции //Инвазионные болезни с.-х. животных,-Л., 1989.-С. 134-138.

98. Павлов И.П. К хирургической методике исследования секреторных явлений желудка: Полное собрание трудов, М., 1946.-С. 300-304.

99. Петрухин М.А. Разработка мероприятий по борьбе с нематодозами свиней //Гельминты и меры борьбы с ними. -Новосибирск, 1990.-Вып. З.-С. 16-21.

100. Поливода Д.И. Физиология пищеварения у свиней//Физиология с.-х. животных.-Л., 1976.-С.48-52.

101. Поникаров А.В. Эффективность инъекционного ивомека -ф при лечении овец //Бюл. ВИГИС.-1989.-Вып.52.-С.85.

102. Попова-Батуева А.В. Заболевание органов пищеварения у свиней //Болезни свиней.-М.,1958.- 168с.

103. Романов И.В. Гельминофауна промысловых зверей Красноярского края и ее зависимость от условий обитания хозяев:Автореф.дис .канд.биол.наук-М., 1956,- 16с.

104. Сапунов А .Я. Испытание ивомека при экспериментальном трихинеллезе животных//Бюл. ВИГИС.-1991.-Вып.55.-С. 123.

105. Сафиуллин Р.Т. Тивидин при аскаридозе и эзофагостомозе свиней //Ветеринария .-1986.-№ 12.-С.27-28.

106. Сафиуллин Р.Т. Эффективность и экономичность тивидина при аскаридозе и эзофагостомозе свиней //Бюл. ВИГИС.-1986а.-Вып.44.-С.53-63.

107. Сафиуллин Р.Т. Эзофагостомоз свиней: профилактика и меры борьбы (буклет).-М., 1990.-6с.

108. Сафиуллин Р.Т. Эффективность цидектина, ивомека и пиперазина при кишечных нематодозах свиней //Материалы докл. науч.конф. «Легочные и желудочно-кишечные нематодозы человека и животных и меры борьбы с ними».-М., 1993.-С. 76-77.

109. Сафиуллин Р.Т. Премикс с ивермектином эффективность при паразитарных болезнях свиней // Ветеринарная газета. -1995.-№ 7 (69).-С.4.

110. Сафиуллин Р.Т. Оптимальные сроки дегельминтизации свиноматок при смешанных нематодозах // Ассоциативные паразитарные болези, проблемы экологии и терапии.-М., 1995а.-С. 157-158.

111. Семенов Ю.Ю. Оллуланоз свиней на Кубани//Сб.науч.тр./Ленинградский ветер. ин-т.-Л., 1989,-Вып. 104.-С. 170-171.

112. Сергеев П.В. Рецепторы физиологически активных веществ: Монография.-1987.-146с.

113. Сидорова Т.Н. К новой экономике через здоровье животных // Ветеринарная газета.- 1995.-№ 15 (77).

114. Синещеков А.Д. Влияние различных кормовых режимов на работу пищеварительного тракта и на использование кормов у свиней //Вестник с.-х. науки,-1940.-№ 4.-С. 90-105.

115. Синещеков А.Д. Биология питания с.-х. животных.-М., 1965.- 246с.

116. Скалинский Е.И. Материалы по патологической анатомии спонтанного стронгилоидоза свиней //Работы по гельминтологии к 75-летию акад. К.И.Скрябина.-М., 1953.-С.658-668.

117. Скворцов А.А. Цикл развития метастронгилид свиней в промежуточном хозяине //Зоологический журнал,-1940.-Т. 19.-Вып.5.-С. 751-756.

118. Скородумов М.Г. К патогенезу так называемой диспепсии поросят отъемного возраста / М.Г.Скородумов, А.Л.Коршак, А.Е.Шестеренко //Материалы Всесоюзной конференции по болезням молодняка сельскохозяйственных животных и птиц.-М., 1964.-С. 146.

119. Смирнов A.M. Учебное пособие по лабораторным диагностическим исследованиям содержимого преджелудков и желудка, кала и мочи у животных/А.М.Смирнов, Г.Л.Дугин.-Л., 1974.-68с.

120. Солинский З.Ф. Патологическая анатомия при спонтанном и экспериментальном заражении овец гемонхозом: Автореф. дис. канд.вет.наук.-Ульяновск, 1952.-14с.

121. Солоненко И.Г. ВК-168 новое соединение с антгельминтными свойства / И.Г.Солоненко, А.П.Михайлюк, В.М.Косарева //Бюл. ВИГИС.-М., 1984,-Вып.39.-С.79.

122. Старовойтов A.M. Возрастные особенности желудочной секреции у свиней //Тр. науч. севещ. по проблемам физиологии и патологии пищеварения.-Киев, 1954.-С. 172-174.

123. Стартан Н.М. Эффективность соединения ВК-168 при дикроцелиозе овец / Н.М.Стартан, Н.В.Демидов, А.Н.Михайлюк //Бюл.ВИГИС.-М.,1984,-Вып.44.-С.64-66.

124. Тарасов В.В. Эффективность ивомека при паразитозах свиней //Профилактика паразитарных болезней животных ивермектиномю-Новосибирск, 1991.-С. 16-22.

125. Тарасов В.В. Смешанные нематодозы свиней и их профилактика// Эпизоотология, диагностика, профилактика и меры борьбы с инфекционными болезнями животых/ ВАСХНИЛ. Сиб. отд-ие.-Новосибирск, 1992.-С. 104-111.

126. Тищенко В.В. Выживаемость яиц автеллин во внешней среде / В.В.Тищенко, Л.Г.Тищенко // Сб.науч.тр./Терапия и профилактика паразитозов с.-х. животных.-Алма-Ата, 1992.-С.123-130.

127. Ткачев Е.З. Оптимальные параметры пищеварительных и обменных функций желудочно-кишечного тракта свиней //Тр. Вссоюзного НИИ физиологии и биохимии с.-х. животных.-1967.-С. 107.

128. Ткачев Е.З. Физиология питания свиней: Монография -М., 1981.-239с

129. Ткачев Е.З. Оптимальные параметры пищеварительных и обменных функций желудочно-кишечного тракта свиней //Сб.науч.тр./Всесоюзный НИИ физиологии и биохимии с.-х. животных.-1985.-Т.30.-С.107-111.

130. Туголуков В.Н. Современные методы функциональной диагностики состояния слизистой оболочки желудка и их клиническое значение: Монография -М., 1965.

131. Тукалевский И.М. Развитие власоглава в организме хозяина //Тр. Полтавского с.-х. ин-та.- 1949.-Вып. 4,- С. 111-118.

132. Фазлаев Р.Г. Переваримость и усвояемость питательных веществ корма при спонтанном лиорхозе крупного рогатого скота //Инвазионные болезни с.-х. животных.- Л., 1989.-С. 190-192.

133. Федий Е.М. Пищеварение у свиней в зависимости от структуры рациона / Е.М.Федий, А.И.Рудаков //Сб. науч. тр./Ин-т кормления с.-х. животных. М.Д950.-Т.1.-С. 78-81.

134. Хачатурян М.М. Антгельминтная эффективность ивомека, ринтала и фенкура при протостронгилидозах овец //Бюл. ВИГИС.-М., 1989.-Вып.52.-С.94-95.

135. Цветаева Н.П. Динамика патоморфологических изменений ранних стадий гельминтозов//Тез. Докл. науч.конф. ВОГ, 11-15 дек. 1957.-М., 1957.-С. 123126.

136. Цветаева Н.П. Патогенное значение гельминтов на ранних стадиях их развития //Докл. советских ученых к 17 Междунар. ветерин. конгрессу.-М., 1963.-С.127-128.

137. Цветаева Н.П. Об изменениях реактивности организма хозяина при повторных заражениях гельминтами //Материалы 1-го Междунар. паразитол. Конгресса.-Рим, 1964.-С.48-60.

138. Цветаева Н.П. Изучение патогенеза гельминтозов с.-х. животных //Тр. ВИГИС.-1968.-Т.14.-С.48-60.

139. Цветаева Н.П. Патоморфологические изменения при ранних стадиях эхинуриоза у домашних уток и гусей /Н.П.Цветаева, В.П.Гуменыцикова //Гельминты человека, животных и растений и меры борьбы с ними.-М., 1968.-С. 329-341.

140. Цветаева Н.П. Патоморфология основных гельминтозов птиц: Монография -М., 1971.-255с.

141. Цуцунова М.И. О состоянии желудочно-кишечного тракта при анкилостоматозах //Медицинская паразитология и паразитарные болезни.-1952.-№ 5.-С.409-411.

142. Чебышев Н.В. Гельминтозы: органо-системные процессы в их патогенезе и лечении / Н.В.Чебышев, Ю.Г.Богоявленский, Е.А.Гришина. -М., 1998.» 236с.

143. Чередкова А.Н. О влиянии кормов на процессы пищеварения и механизм регуляции функции пищеварительных желез у свиней //Сб. науч. тр. /Белорусский НИИЖ.-Минск.-1969,- Т.10.-С. 163.

144. Шарабрин И.Г. Применение носопищеводных и желудочных зондов в ветеринарной практике: Учеб.пособие -М., 1944.- 45с.

145. Ф 149. Шевченко И.А. Лабораторные методы исследования при заболеванииорганов пищеварения: Справочник.-Л., 1982.-200с.

146. Шеховцов B.C. Эффективность ивомека при легочных и кишечныхIстронгилятозах овец / В.С.Шеховцова, Л.И.Луценко, Т.Е.Мишарова, З.Г.Сумцова //Бюл.ВИГИС.-М., 1988.-Вып.49.-С.59-62.

147. Шлыгин Г.К.Некоторые механизмы саморегуляции деятельности желудка //Сб.статей/Акад.наук СССР.-Л.,1968.-С. 145-152.

148. Шубникова Е.А. Секреция желез / Е.А.Шубникова, Г.Ф. Коротько .-М.,1986.-128с.

149. Шульц Р.С. Основы общей гельминтологии. Т.З. / Шульц Р.С, Е.В.Гвоздев .-М.Д976.-С.68-88.

150. Щербаха Ю.И. Изменение структуры мышечных трихинелл и их капсул под воздействием некоторых антгельминтиков / Ю.И.Щербаха, А.Я.Сапунов

151. Гельминтозоонозы меры борьбы и профилактики / Материалы докл.науч.конф.-М., 1994.-С. 189-190.

152. Якубовский М.В. Меры борьбы и профилактики паразитозов животных / М.В.Якубовский, И.С.Жариков, С.С.Липицкий, И.В.Сафронов, В.И.Орловский, Т.Я.Мясцова, М.А.Ананчикова, Н.Н.Швыдков, М.Н.Яскевич, З.Г.Грязнова.-Минск, 1987.-16с.

153. Якубовский М.В. Оллуланоз свиней на территории Белоруссии / М.В.Якубовский, А.В.Ежелев //Возбудители и переносчики паразитов имеры борьбы с ними.-Алма-Ата, 1988.-С.221.

154. Якубовский М.В. Паразитарные болезни животных: Справочное пособие -Минск, 1991.-254с.

155. Alicata J.E. Early developmental stages of nematodes occurring in swine // Tech. Bull. -№ 489. -Tidschr. Vergrlisk., Genese.- V.10.-1935.

156. Ф 159. Bearup A.J. Occurrence of Ollulanus tricuspis in Australia.//Austr.J.Sci.-1958.21.-P.149-150.

157. Bearup A.J. Parasitic infection in cats in Sydney, with special reference of the occurence of Ollulanus tricuspis //Austr.vet. J.-1960.-36.-P.352-354.

158. Boch J. Veterinarmedicinische Parasitologic.-Aufl., Verlag Plaul Parey// Boch J., SuppererR.: Berlin/Hamburg, 1944.

159. Brglez J. The pathogenecity of Ollulanosis in wild cat (Felis silvestris schreber)

160. J. Brglez. Z.Zeleznic // Verhandlungsbericht des 18 Jnternationalen Symposiums uber die Erkrankungen der Zootiere vom 16, Juni bis 20, Juni 1976 in Junsbruck:j Berlin, 1976.-S. 233-235.

161. Cameron T.W.M. On the liefe history of the lungworm Synthetocaulus abstrusus hithere confused with that of Ollulanus tricuspis in cats. //J.Htlminthol.-1926.-4.-№ 2.-P.53-60.

162. Cameron T.W.M. On the pathogenicity of the stomach and lung worms of thecat. //J. Helminthol.-1932.-10.-P.231-234.

163. Cameron T.W.M.Observation of the life history of Ollulanus tricuspis Leuck., the stomach worm of the cat. //J. Helminthol.-1927.-5.-P.67-80.

164. Cameron T.W.M.The lung worm and the stomach worm in the cat. //Vet.J.-1929.-85.-P.97-112.

165. Chauver G.A.G. Chaband Ollulanus du lion.//Ann.Parasit.hum.comp.-1964.-39.-P.791-793.

166. Dennis R. A case of hyperplastic gastropathy in a cat / R.A.Dennis, M.E.Heritage, A.R.Jefferies, S.E.Matic, R.A.White // J.Small Anim. Pract.- 1987.-28.-№6.-P.491-504.

167. Hall M.C. Nematode parasites of Mammals of the Orders Rodentia, Zagomorpha and Hyracoidea. //Proc. U.S. Mus.Wach.-1916.-50.-P. 1-259.

168. Hargis A.M. A gastric nematode (Ollulanus tricuspis) in cats in the Pacific Northwest / Hargis F.M., D.J. Prieur, R.B.Wescott // Journal of the American Veterinary Medical Association.-198l.-178(5).-P. 475-478.

169. Hargis A.M. Diagnosis of Ollulanus tricuspis infection in living cats. // Hargis A.M.,Blanchard J.L., Prieur D.J. Feline Practice.-1983.-13(3).-P.16-19.

170. Hargis A.M. Ollulanus tricuspis found by fecal flotation in a cat with diarrhea / A.M. Hargis, K.H. Haupt, J.L.Blanchard // J.Amer. Vet. Med. Assoc.-1983.-182, № 10.-P. 1122-1123.

171. Hasslinger M.A. The teil morphology of different developmental stages of Ollulanus tricuspis (Leuckart, 1865) Nematoda: Trichostrongyloidea // Hasslinger M.A., Wittmann F.X., J. Helmintolog.-1982.-56. № 4.-S.351-353.

172. Henichen Т., Hasslinger M.A. Chronishe Gastritis durch Ollulanus tricuspis (Leuck., 1865) bei einer kati. Berlin und Munchen tierarztl/ Wocheschr., 1977.-90.-№ 3.-P. 59-62.

173. Hinaidy H.K. Ein weiterer Beitrag zun Papasitenfauna des Rotfuchses, vulpes (L), in Osterreich.//Z.Vet.Med.-l976.-23.-S.66-73.

174. Kotlan A. Helminthologie. Die Helminthosen der haus- und nutztiere unter Berucksichtigung der Helminthosen des Menschen.-Akademie -Verlage: Budapest, I960,- S.34-40.

175. Kotlan A. Ollulanus Tricuspis Leuck., als ursache einer chronische Magenwunnseuche beim Schwein. H Kotlan A., Mocsy J.V. Dtsch. Tierarztl.Wschr.-1933.-44.-S. 689-692.

176. Leuckart R. Bericht uber die wissentchaftlichen Leistungen in der Naturgeschichte der niederen Tiere wnrend der lahre 1864 und 1865. // Arch, f. Naturgeschichte-1865.-31.- 2.-S. 229-268.

177. Trah M. Ein Beitrag zii Diagnose und Biologic von Ollulanus tricuspis (Leuckart, 1865): Jnaugural-Dissertation.-Munchen, 1981,-43s.

178. Wittmann FX. Ollulanus tricuspis (Leuckart, 1865): IJntersuchungen sur Diagnose, Morphologie, Entwicklung, Therapie sowie sum Wirtsspektrum: Jnaugural-Dissertation-Munchen, 1982, -55 s.