Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВИТАМИНОВ В , В2 И С В РАСТЕНИЯХ С ПРИМЕНЕНИЕМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ И ОСОБЕННОСТИ ХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА РАСТЕНИЙ, КУЛЬТИВИРУЕМЫХ В ИСКУССТВЕННЫХ УСЛОВИЯХ ФИТОТРОНОВ

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВИТАМИНОВ В , В2 И С В РАСТЕНИЯХ С ПРИМЕНЕНИЕМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ И ОСОБЕННОСТИ ХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА РАСТЕНИЙ, КУЛЬТИВИРУЕМЫХ В ИСКУССТВЕННЫХ УСЛОВИЯХ ФИТОТРОНОВ"

\ і

\/ МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА СССР

МОСКОВСКАЯ ОРДЕНА ЛЕНИНА И ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ имени К. А. ТИМИРЯЗЕВА

На правах рукописи

КАЮКОВА Валентина Анатольевна

шт

СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВИТАМИНОВ В., В2 и С В РАСТЕНИЯХ С ПРИМЕНЕНИЕМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ И ОСОБЕННОСТИ ХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА РАСТЕНИИ, КУЛЬТИВИРУЕМЫХ В ИСКУССТВЕННЫХ УСЛОВИЯХ ФИТОТРОНОВ

Специальность 03.00.04 — биохнмня растений

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

МОСКВА —1973

Работа выполнена в лаборатории-фитотроне при кафедре растениеводства ТСХА.

Научные руководители: академик ВАСХНИЛ И. С. Шатилов, кандидат с.-х. наук Н. Ф. Розов.

Официальные оппоненты: профессор доктор биологических наук Б. П. Плешков (ТСХА), доктор биологических наук 3. С. Каган (ВНИВИ).

Ведущее предприятие — Институт физиологии растений им. К. А. Тимирязева.

Автореферат разослан ........... 1973 г.

Защита диссертации состоится........ 1973 г

на заседании Ученого совета факультета агрохимии и почвоведения Московской сельскохозяйственной академии им. К- А. Тимирязева.

С диссертацией можно ознакомиться в ЦНБ ТСХА,

Отзывы на автореферат просим направлять по адресу: Москва 125008, Тимирязевская ул., ТСХА, корпус 8, Ученому-секретарю.

Ученый секретарь Совета академии доцент

Ф. А. Девочкмн.

; ;* По оценке "специалистов, в сельском хозяйстве .2000 года

■X . теплины в ах современном виде, будут .вытеснены, оранжерея- ^"

'.> '"ми с. автоматическим ,-' управлением': параметрами 'внешней •'' . среды растений. Фактически-прототипамн этих оранжерей уже : ^ теперь являются современные фитотроны.. '.Сочетание свето- .\ 1.-V;-/ ' культуры н'гидропоники в условиях фитотронов с управляє- / V:.;,, : - ".-Г- мымн параметрами среды позволяет; создать новую техноло- •' V. ;> і ; гию выращивания растений самых, разнообразных ботаннче-'' . •. скн'х видов на промышленной основе,-В этих фитотронах боль- , , > ' шое. теоретическое »1 , практическое значение приобретает " ;;;.■■ ■; -Г ' .-'•- изучение химического состава . культивируемых растений. От "' 'Л ; ;

• '. изменения в фитотроїшх основ'ньїхЧіараметров среды в значи- : Ч;-^; ■V ,;■ : тельй^Гі мере может меняться пищевая и общая терапевтнче- . • 'V.

. . екая ценность растений,,то'есть:качество урожая. • • - ; ' • -

■ ;'.'. В наших исследованиях была поставлена' задача изучения . ■ г;. і;.;-' ,: закономерностей изменения химического состава-растении, вы- ' '. \ . ращиваемых в искусственных условиях фитотрона, подвлйя-', . ' .X нием ряда'основных факторов.их-произрастания,- в то>1 числе -

нзмёненпя витаминного и углеводного составов,-'азота н мине- , ';'' -: >" р а льных. элементов, таких,' как-: фосфор, калий, кальцин,' ї- магний. V;; иЬ'-";;,: .V'-."■ :

' При .этом существенную'часть исследований заняла раз- ■ ■ ■■ работка методик количественного определения/витаминов,, в ; ; основу которых был положен'іірннцнп снектрофотометрни :С; ■ : , .■'■:■•; очисткой от сопутствующих соединений методом хроматогра- '■',.'

фнн на тонком слое енлнкагеля. Обладая, большой "нагляд- • ■ ' ностью, способ оказался очень.'удобным для массовых анали-. ' -'. у. зов, позволив одновременно-обнаруживать все трн витамина» . ; ч Разработка подобных методик диктовалась, необходимостью ' : »Чу/У-'' V' і получения более надежных результатов сравнительно.быст-

. рыми, НО.ВЫСОКОТОЧНЫМИ-чувствительными методами^С ИСПОЛЬ;;,,у.: зоваїпіем современной аналитической аппаратуры. •'•". у у:'у • " / В;диссертационной работе описаны результаты исследова- ;У у

• , нііГі її даныновые.методики спектрофотометрического опреде-

; ления в. растениях.в6дорастворимцх-.витаминов Ві,:В2 н С с у .у 'V- у их раздельным и одновременным'выделенпе.ч.на'_тонком слое,: ■''.! V Уу-

■ у'У"' у^; -; ■ -ЛгТтжПг У- ■ •' /■ ■ ■ 'V У'- V

ШбШ-^ШШШРЖМШШтШ,

[/ простоте 311 а л изо в; - с 1 пом Ьщь ю: ра зр аботан н ых ■ м< К'ЯЛЯ д ик. получен ы^г^прп ведены : данные: подсоле р ж а н и ю'эт их; вита -л- ^ : ;; \ V М и ЛОВ г" В ,р а сте 1П [Я х' различ иых£бота н и ческих 'семе йств, '¡кул ЬТ) •• Г " - — г ^ ¡виру ем ы х - в *; ф нто тр о н е; ;П ров еден а * се ри я экспер и м ё нтов - в - ф и - ^ ^

V,-; Д иссерта цион н а я а р абота: охв атыв а ет/с л ед ующн е-э т а п ы; ис V:"

"'V'-Л следовании;л;V,;-; » ^^

• Р азработка методик р а з дел ы [ о г о' о п ределе и и я в н та м и н о в^ ;; ■ -;

:; ■ ^^ , г разработка методик ч ; . , СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ

ВИТАМИНОВ Вь В2 и С В РАСТЕНИЯХ ^

• С ХРОМАТО ГРАФИЧЕСКИМ ВЫДЕЛЕНИЕМ :

^ У НА ТОНКОМ СЛОЕ СИЛИКЛГЕЛЯ 7, ■ Ч

'■■.'Г.. ;У. ..,'••.. Принцип метода '■. ^ "'■_::'

Принцип разработанного метода количественного опреде-■ 7, ления внтаминоп-В|, Вг и С заключается в их предваритель-■ , ном выделении на тонкослойной хроматограмме из раститель- ■

; ных лштнжек, проявлении в УФ-свсте (витаминов В2 и С— по ~ V . ; ' собственному поглощению, тиамина — после предварительного

переведения в ткохром путем'окисления щелочным: раствором; . '■.; ■'■; ; ■ ^еррнцианида' калия), последующем, элюнровашш каждого ■.:..■■■-..*. из них (рибофлавина — водой, витамина С — подкисленной , водой при. рЙ 2,5, тиамина после окисления —- изоамилоэым' спиртом), и,.наконец, спектрофотометрироваини элюатов при ; . : ^ ... найденных экспериментально максимумах поглощения в УФ-Л'-г^' области. - ".V';; V" .'-';■ -'Л"'.' "'■;■,

У'■;';■',.■.-.■: Применяли две системы, растворителей: пиридин — вода — •ледяная уксусная кислота (10: 40 : I) и бензол — ацетон —, - метанол — ледяная уксусная; кислота (35 г2,5 : 10 : 2,5). Вита-. ' .'■ мини из растений выделяли:одноступенчатой хроматографи- 1 Ч • чен с применением/первой системы и ■."двухступенчатой с НС-;

пользованием обеих систем; а также' второй в, соотношении '. - . ,;компонентов'Л0 356;": ; У'УУУ -"¿У:УУ,.У:. : .'■■■■

-: .-■" Подготовка растительных образцов к хроматографирова--' У нйю включала следующие стадии: 1) получение водных экст- У:. трактов, 2) ферментативный гидролиз .''.-'пепсином, 3) очистка, , '...■' - избытком трихлоруксусной кислоты," 4) концентрирование но- У- . • ';. • ;. лученных ■ вытяжек 'для витаминов В) ;и"Вг,1'5) нанесение ,на (' хромато графическую пластинку'нужного объема-экстракта.'; " . -; - Сорбентом служил енлнкагель марки К.СК.-2 в смеси с гпп- • :•' :"'., сом (10 : I). : . 7« .■■■,УУ^у'-У'-'.у1 '"У •

■ • Идентификацию; выделенных витаминов . на;,тонкослойной- :. .хроматограмме ; проводили с помощью УФ-спектрофотометрни,. снятием\слектров поглощения соединений, проведением неко-: . торых качественных реакций, доказывающих подлинность витамина, определением температуры' плавления, по. виду кри-." сталлоп под микроскопом, а также по характеру растворимо-- . '7 .-■';.: сти:веществ.. :•;.',„.•-• '...• • т : . : • • . :. .•..'•.:.

s--v., л •'ч. /і' ^ nui иіі^іш и vri i v » ^сі j д w < x ц« і » } л*-"' * илгш „ vj ^ ijü j ,

vj, е^гси вйо 'cu Heñí ф .îy оресцеіі ці і й < т і io xp о м ä5- после Г on рыск н ван 11 я -

^J'^.fVi ж а щи м ; ф л у о ресцнру ra щих п р и м ее є и. Э л ю à тьГ;С пе ктрюфото^ ЙХЙ ''' ij't' Уметрїіро'в ал_і г пр и-На Гіде il ii ых'1 м аксим умах по гл оше ни я на

'Л -: ; лаїп livra' пля Í ruifíniliinmmn'Л'і nfiMÍ9KK', ті'■■*,' л л її s. тііп

ттжжїтштт ш^шшшшё®

Результаты дисперсионного анализа экспериментальнь - в растениях с хроматографнческим выделением

-■''■■'■ ■■■'"■. - Одноступенчатая хроматография i-'-'-Î

I пластинка' ■ II пластине;

' салат кочанный. мг% свекла листовая,"

Витамин С ••'j В, В2. С ■ | ; 'л В(;

Среднее х- 2 (xî-IÔ1 42,6 ■ 0,84 0,044 36-10-® 0,073 36 • ю-® 80,0' ; 1,04 ■ 0,101 35- 10-« ;

" (Xi-xp

Выборочная дисперсия-S!= 2^- ^_^

S*

0,07636

Средняя квадратичная ошибка : : Э | 0,276

Коэффициент вариаций .

О;65

W.JÇ.S

3,27. 10-® 1,8Ï. Ю-1 4,11 :

3,27 ■ 10-® . 0,09455

1,81-10-'

2,48

0,307

0,38

Выборочная дисперсия среднего значения ~> 0,0063'

X п (п—I) 0,273- 10-® | 0,273.10-®.| 0,007879 Средняя квадратичная ошибка среднего арифметического

S -х

0,0796

0,522 • Ю-3

0,522 • 10-s

0,0887

Точность прямых измерений ео,я=1«> k-Sx- to.«; 11—2,201

«О.Я

0,175

0,00115

Вероятная относительная погрешность

100%

х

Х±ео,и

0,41

42,6 ±0,18

2,59

0,044 ±0,0011

0,00115

1,58

0,073 ±0,0011

0,195

0,24

so.o : ±0,19

3,19 • 10-«

1,77-10-»

1,75

0,265;'10^®

0,51- Ю-3

.0,00110

1,09

0,101 . +0,0011

Для выявления существенности различий данных двух вариантов пользова Во всех.случаях вычисленное значение Ро,и<Ртабл,о.я.

"Салат кочанный . " .

1,4

Рвыч.<Рга<>, 1.4 <2,2

В, . 1,5 ;

Раыч,<Ргаб. 1,5 <2,2

Bj 2.09

Рвыч.<Ртаб. 2.09 <2,2 ,

'-'."V . Таблица З

данных количеств єн ного, о и ре дел єн и я витаминов В1( В2 и С тонком слое; среднее из 12 повторносте!)

Двухступенчатая хроматография » • ' "

Ш пластинка IV пластинка

Ьалат.кочанный, мг% свекла листовая, мг%

- в2 С -В, В2 .С В) ■■ '

0,016 42,8 ' .; 0,046 0,075 80,1 0,102 0,016

5- Ю-6 - ' 0.94 . 24-10-«. .25-10-« 1,28 93 ■ Ю-6 ; 34 - 10-Е ■

36 ■ |0-в 0,0855 2,18- 10-« 2,27 ■ 10-е 0.1164 8,45 - 10-« 3,09 • Ю-6

17- Ю-а - 0,292 1,47.-50-* 1,51 • 10-» 0,342 ' 2,91 • І0-' 1,76- ІО-а

1,74. . 0,68 3,20 2,02, 0,43 2,85 1,10 ' '

.113- ю-а 0,007121 0,182-10-6 , 0,189* Ю-6 0,009700 0,704 • Ю-« 0,258- Юг*'

336; Ю-* 0,0845 0,427 -10-» 0,435- Ю-3 0,0985 0,840 -10-» 0,508 Ю-1 . :

1,00245 0,186. 0,000940 0,000957 0,217 0,00184 0,00119

,51 0,43: 2,05 1 1,28 0,27 1,80 6,99

42,3 ■ 0,046 0,075 80,1 0,102 0,016 ' ,

>,0024 .±0,19 ±0,00094 ±0,00096. ±0,22 ±0,0018 ±0,0011.

, критерием Фишера.

Свекла листовая

V С В, Вг

2,09 2,08 2,08

' Роыч. <Ртаб. Рвыч. <Рт,аб, Рвыч.<Ртаб,

2,09 <2,2 2,08<2,2 2,08<2,2

|>лавнна'в 'растениях : по .визу набл ю дению пя тенв, У Ф-свете, 8 сравнении со -спектрофотометрически» 1, у .•¿/определением; мг на-100 г сырого вещества ./у• ■ '//

j .;■' ^ ■".-.-.¿у -у^ ;>wl'.-/:W-/ *;/'.;./ ';'• Т а б л п и а . 4 ' Содержание*:тиамннай рибофлавина* в.'.растениях.'по;,визуальному

■.-' г'?-'-"' ■ Тиамии ■ Рнбофлавин /

Ч 'Т- * Культура . • /У. > /■ •'/ г'-./:'' - ■.■>•'■-,■■> ■ ■ ,■ о* ; '■•ЗУ ir; 1 . V* Ä"J 1 и > г:. о '' > ■Т В «'S ■."-fc.'W =1 -'S - О «i fr i = S. з. ■ 'й а к -■ - 2-■^ ■ , та ' fo ■ ■ со спектр о-фотомет- . рическим / концом ■ ■ ' ■ £ ^ л У-.ч S 3 .„ о 5 rt о" в/' .

' ' GQ '' 1 ... t) -©■ о. ье : "5® ... ер ; н g о

■ V.. ■■■>- ■■■/'"i'V/.U-/' Ревень (черешки) .--у ; ■ Щавель .. . ".;/ / перси: v-/. ; . - ■ * Свекла .чистовая .' : 'Салат кочанный . / •'•'. л • Петрушка ;;'■■: . /./v ; / ■.г / Сельдерей у...-.>;.'■'. 0,2000,150" 0.100 Г 0,120 0,060 0,100 0,050 . • 0,216' ' 0,158 /0,087' ■'¿0,107'',-■/'0.048*,', 0,008 "0.059, r .. .7,3 i * V-; 5.0/, 11.3. .12,1 ' .25.0-2.о < .- /15,2;; ■ .. J 0,015' 0,025/ 0,010 0,01 о:. 0,070: 0,030 0,020'' ^,0,012-• о.озо; -"■'0,014' /0,0150,071 "0,028 . ■Г0,022 »v .-".■/v '■ 25.0 х' " :i6,c • ■ 28,5 . 33,3 ■•/■■' • 14,0 -7,1 . 0,1,

Л"./ ' -. N

iу/

i v-

, / ' и: ВЛИЯНИЕЭКОЛОГИЧЁСКИХ УСЛОВИЙ ; ФИТОТРОНА-НА СОДЕРЖАНИЕ ВИТАМИНОВ ; И УГЛЕВОДОВ В РАСТЕНИЯХ '

у *-v ■ '■. ^/S' х-уЛ/?-^vvV^ у ;-'/-/''

; В исследованиях по культивнрованпю pacTeimfi' в фитотроне ■ определенное значение имеет ; вопрос; изучения; ИХ ХИМНЧЙ-; , ciiorofcöcTaBa 11 особенно факторов, вл!шющих на 'содержание', тех или иных; соединений: в/растнтельном ;органнзме,/в(том 1 числе1 витаминов,.углеводов;У минеральных элементов. Учиты-у .вая то обстоятбльство/нто-'для искусственных услов11Г( выращи-, :вания растении такие данные весьма -'малочисленны;' нами: бы-: :;ла^проведена серйя^^экспериментов-и^"проанализированьГгре-,' • зультаты других Исследований/выполненных, в /'фитотроне в/ течение ряда:'лет пбду научным-^'рукооодством** профессора''; И. С. Шатилова^ которыё'вГсовокупностн ; имеют определен-' . ную научную, н .практнческую /це]ш0сть,.-позволяют^ сделать . . определенные выводы и отношении*.возможностей повышения,.: пищевого" качества растительных продуктов.. / ' './V. У / Растения, вьфащивалй'в'фитотроне при iicкусствеiшом' осве- / Мщении методом гидропоники; суавтоматнческим^ . р'егулирова-■ нием:всех; основных .'параметров внешней среды, "в том , числе", температуры воздуха, его; относительной влажности, суточио--го фотопериодизма. В ка,честв*е источников света нспользова- : ли лампы накаливания типа ЗН-8 с водным экраном, люминесцентные лампы белого света типа ЛБ-80 и в- некоторых услучаях<дуговые ртутно-люминесцентные ДРЛ:500.;, Субстра- . ■том служнл/керамзит;. Во ' всех /опытах применяли- питатель- :1 ный раствор Кнопа: Полив растений производили'от 2 до '

-» і», і • . .TV

f-B1 сутки-U'

■1 ■ —■ ■ ■ - і - ■ , Декорбик 0='" tr ¿V.: "

новая кисло- -j-y/, * в ее ->, -- "'і

■'»¿ТЧ^-ч*?-.і • * - X

зз

.'¿"їі-тїчг-і

¿r 5,22 >^■5,87^

üvi^i л-

o L ,t> t., -

л ^Источник света ',"

Ї-у,\;л« ■ Ч'з-У-■,;,^ ^ : л-■»*■" ^ -■-■ *■ ■ г

ФАР,-

""'Лампы Л Б-80,.

¡•листы": ; сформированные

растущие

■й'ґА'ЙЧ-.

84.7±-0,53 і,

44,0±

^ іг

Ч1 82,8+' '■ •Г-0,22 г і 40,7±1'

Л0,93±;ЇІ Й0,001;,> :0Д22±;

растущие

*■ 0,088 С 0.001,^

и і- ¡, і Ї0,027±.;' -0,0009 *-'

о,оі8±'<;

Сформи-^.-ровашше

¿у у;>"

: пппіVі--: .і

Л .--

■V:' ■ Таблица .7

: ; Влияние спектрального состава света и мощности ФАР на' химический -I. " - состав листовой китайской капусты в фитотроне.'Мощность ФАР ; ■ ^люминесцентных-ламп Л 72—81 вт/м% ламп ДРЛ-=55—60 вт/м!

Сорт

'і---

Хибинская

.Японская:-« ■' Бай -на и:

Л' ■ ■'

-Источник света;' д лампы ■ ; •

;' і г ^ - * ■ * ' . .Ґ7' 1 ■ >.:

І

ь-ІР О. = и Д Оїо

Углевод ы.%Иа - .,.. сырой вес

глюкоза

•С.50^

7,00' 5,87 '7,52 ' 6.33 .7,02,.

44,8'

32,8 42,2' 40,4 44,1 38,7

2,47

0,87 2,08 , .0.92 2,32 0,74

сахароза

1,40':'

0,16 1,41 Л 0,22 1.38 , 0,17

крах-, мал*

0,53

0,34 0,60 0.30 0,70, 0,34

X, -

Люминесцентные"белого ' света' ЛБ-80 .г"'.. Дуговые ■ ртутно-люминесцентные'ДРЛ-500 ЛБ-80 ■ . ,: ДРЛ-ЗОО .' .• . . ....■■ ЛБ-80 -С'.'

ДРЛ-500 Г.-.

. леводои но сравнению с л а м п а м і г, . Д Р Л - 500. Р а сп р еде л енне ■'знергии в спектре - последних несколько сдвинуто длинно- , \ волновую'сторону ближе к \ спектральному р а'сп р ед елей ню

■ энергии ::ла;мп', накаливания ' по сравнению с люмтшецент-,иымн лампами; При совместном действии этих; гдвухфакто-ров — мощности :све;га и спектрального состава света — прей-/' муществённое влияние в области сравнительно низкнх величин . ФЛР оказывается на мощности радиации. .уЛл'.^л^;'^:'-;.-. '

" '.'При выращивании иод лампами накаліівання по:.сравне-:,-: нию с люминесцентными лампами* в растениях содержалось

■ меньше .Сахаров, несмотря на идвосЛ большую, интенсивность • облучения, что наглядно нллюстируется данными табл. 8.

^Очевидно',; для синтеза углеводов в: процентном отношении ко'/ всему сухому.растительному;веществу большее значение.име->ёт,-спёктральный 'состав света. По суточной же продуктивно; ' сти.сухих веществ с единицы посевной площади преимущество ламп накаливания несомненно. ''; ■ ■ ) . > '.'і 7<-

■■■.' ■.>■"■>/.-;..' ^'іг ' ■ Л''^ "■':': ,';■ ■ ■ ■■ т а'бл пца| 8''

^/Содержание'углеводов, в растениях кочанного салата, сорта Берлинский, _-

■."', . ' выращенного под разными источниками света различной / »V * . '■■■ -. - ; .-•:мощности ФАР; % на сырой вес : ■ ■^ / .

• • .. ; '4 'Источник света, лампы ^ Сухих веществ Тлю-: коза Сахароза Крахмал - ! .. '' V:'

': ы" 2 ■ ■ ' 3 £ ч ' и. V - -:/ -Л. ' % Л-

. ' ЛБ-80, ФАР бо вт/мг' -.■ .:. .;-;>. :--■'. > ЗН-8, ФАР 103-140 > вт/м2 Л- -'г • і ' • • ч •• • - '.- • . г • ■■. 8,06 -15,18 .- 5,50 ::"■' 4,27 V ■■■ 1,67' 0,5 Г 1,60: 0,03; ■ к і / 0,-15 0,08, . :',

.■ной lí2S04 (рИ 2,5),' рибофлавина —водой (pH G.0), тиами-, 1 -на — изоам иловым спиртом пі' количественном: определенииíна .v:;- - ' \ . спектрофотометре при найденных экспериментально УФ-мак-симумах, поглощения. Витамины' В«, и С выявляли'; на хрома-. ; ; ^ 'тограмме по собственному поглощению в УФ-свете,1 а Ві -', ; после окисления в, т и о хромще л о ч н ым'р а ство р о м- КД Fe (QN ) б] -Предложено несколько вариантов, количественного опре^. деления указанных витаминов, различающихся nó способу их ~ хроматографического выделения и проявления. •

7■ ' • ■;■'.. Для раздельного определения витаминов В2 и С одинако-\ ■ г во эффективны системы растворителей пиридин — вода — ле-■; дяная уксусная кислота (10 : 40 : 1) н бензол — ацетон — ме-. танол — ледяная ускусная кислота (35 : 2,5 : 5 : 2,5). По чет- кости пятен предпочтительнее первая система. Витамин В( ' : выделяли только в системе с пиридином, т. к. вторая система

■;■ . :■■ медленно перемещает его со старта. ■ V.y, ; v/. yy, •

^ Для одновременного обнаружения витаминов B¡ и В2 при;

.,: годна двухступенчатая хроматография "с системой бензол — ' ; ацетон —метанол — ледяная уксусная* кислота (35 : 2,5 : 5 : < , .': 2,5) н nnpifдин —вода'— ледяная уксусная кислота, (10 :40 :

: ]), -а;также одноступенчатая^ применением второй системы . : (10 : 35 : б), дающей четкое разделение витаминов.' ' :'

При одновременном анализе трех витаминов удобнее на-, носить на хроматограмму из одной вытяжки два параллель-7 ; - ных- ¿бразца, предварительно обрабатывая один из них на -;; 1 ■:■■ , старте щелочным .раствором феррицианидакалия.'В о к пелен-ном образце' определяют витаішн Ві в виде тнохрома,' в нео- ' кислённом — В2 и С. Определение трех витаминов из одного пятна возможно в видоизмененной-, системе сннриднном ,, ' (10 ; 35 : 6),; обнаруживая вУФ-свете по собственному погло- < '-':'щешш и элюнруя скачала-витамины В2 и С, а затем Вt после ",':/■ -"■'.. окисления в тиохром.ч ,''.-/'.. --г" ■ ',."■' /.".*■■'■ ; ¡у-"; ■;.■.■*■

' : . ' / Для анализа растительных объектов с большим' содержанием витамина С применяли экстрагирование три.хлоруксус- • . ' . нон кислотой. : ■ "■:,..'"> -л •"•"• : ..••'. :•-'••".•;'.• ;^ /.. ; _ V ' v ' Снектрофотометрнческий; метод высокочувствителен »позволяет обнаруживать на хроматограмме витамин В] до .':'■■ 0,05 мкг, витамин В5 до 0,005 мкг, витамин СдоЗ мкг; без .

•* элюнровання пятен по их величине возможна полуколичеств ■ :"' ; венная оценка содержания витаминов. '.■.-.""''.'■;'.у- ;v> ';'■-'■-<■.

' На содержание в растениях витаминов Bi, В2 и С, кароти-

на и углеводов (моно- ди- и голисахаров) прямое влияние в 1- ' .■'-;,'. искусственных: условиях - культивировання - оказывает' , ^ряд внешних и внутренних - факторов, управляя которыми можно -■■. - . существенно изменять углеводный /и витаминный состав -ра-' ./,'■'■'.--; * стеніїй. .. • " ••.'••' ..... -у;» ■;■■'■;..,

-л -л--г-,-.;-:. .¿.■.у^..,- ^.-.г^ч*."

V''ч У вели чен и 6; м о щ н ости ;ч|> изн ол о ги ч е ей к ¿а ктив но и г рад на цни у

Ч'Ч.^Л си г11лпоа-г' пллгпппипп'г-атрпм/пино. пмтп мнипп'.Г 'м Я* -

сравнению с,литературными)1

;С:^^:>10ВНЙ;.у\растеНИЙ'■В;фитотроне''в у СЛОВИЯ X V;- более су Ж е Н ИОГО1 ^Д/ '; Ч-' й/ ' 4 эколог ического ::'« кор и дор а »^со держ и тсяка к',п р ави м ен ь-^, />VV*

"" " 1 .....■■ ■ ■ ■ ....... ■ ■ .................^ ч

1(^■■■'■1'

'.:" ' /'.2.' Каюкооа В. Л., Розов Н. Ф.1: Ш^тнлов Й. С.-Спектрофо-4-7 тометрическое определение витаминов В| и В2 п, растениях с '■■■ V Г.-4' *;''одновременным' выделением нх методом тонкослойной.хрома-- .,;■■ *

• , ;; слойной хроматографии. Извёстйя ТСХА,4 1973 вып.ис:218—;>

^ ' 223. .-,•.;•••

4. Каюкова В: Л., Розов Н.\Ф., Шатилов И. С; Спектрофо- * • тометрическое определение ьитаминов В|, Вг н.С в растениях

влияющие, на содержание витаминов-н.углеводов в растениях, ;/ ; .

; ' • культивируемых в фитотроне.": Известия ТСХЛ, 1973, вып. '-Г ■

С. 9—16. .:V-■ ■ V;;;";^^V^Д^'^:-

Объем Г и. л. . , Заказ 964/'г - . Тираж 150.

Г■ ' '^ТипографияМосковской с.-х. академии им. К.» Л. .Ткммрязеца . ■ ■

1 'V." ; 1 ; , ^ ■ Москва 125008, Тимирязевская ул.,.44 ■■