Реакция здоровых и опухолевых клеток организма животных на воздействие физических факторов

Сергеева, Екатерина Юрьевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Реакция здоровых и опухолевых клеток организма животных на воздействие физических факторов
ВАК РФ 03.00.16, Экология

Автореферат диссертации по теме "Реакция здоровых и опухолевых клеток организма животных на воздействие физических факторов"

На правах рукописи

Сергеева Екатерина Юрьевна

РЕАКЦИЯ ЗДОРОВЫХ И ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК ОРГАНИЗМА ЖИВОТНЫХ НА ВОЗДЕЙСТВИЕ ФИЗИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ

03.00.16 - экология ,

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

□ОЗОБ47Э2

Красноярск - 2007

003064732

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Красноярская государственная медицинская академия Росздрава» Научные консультанты: доктор медицинских наук, профессор доктор технических наук, профессор

Людмила Георгиевна Клймацкая Николай Васильевич Цугленок

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор доктор биологических наук, профессор доктор биологических наук, профессор

Вадим Игоревич Полонский Лидия Николаевна Меняйло Марина Игоревна Литовская

Ведущая организация: Государственное учреждение «Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера» СО РАМН

Защита состоится « »_2007 г. в_часов на заседании диссертационного совета Д 220.037.01 при Красноярском государственном аграрном университете по адресу: 660049, г. Красноярск, пр. Мира, 90 Тел/факс: 8(3912) 278-652.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Красноярского государственного аграрного университета.

Автореферат разослан « »_2007 г.

Ученый секретарь диссертационного совета Полонская Д.Е.

Актуальность проблемы.

Организм представителей животного мира биосферы, с одной стороны, тесно связанных с ней посредством обменно-трофических и рекреационных связей, с другой стороны, являясь субъектом происходящих в природе преобразований, подвергается воздействиям вредных факторов окружающей среды и вынужден постоянно мобилизовывать свои компенсаторно-приспособительные механизмы, резервы которых ограничены и со временем могут истощаться (Галицкий, 2003, Заридзе, 2004). В итоге интенсивное и длительное воздействие экологически неблагоприятных факторов сопровождается перенапряжением и нарушением адаптационных механизмов организма. Последнее предрасполагает к развитию онкологических заболеваний, которые, вследствие этого, содержат в себе определенные черты экологической обусловленности и являются маркерами экологического неблагополучия (Гичев, 2002; Долгих, 2001).

Традиционные методы воздействия на опухолевые клетки - лучевая и , химиотерапия имеют целый ряд побочных последствий, в частности, снижение иммунитета (Дадали, 2006).

Однако есть ряд физических факторов, которые могут способствовать стимуляции защитно-приспособительных процессов в организме опухолено-сителей, что приведет к повышению показателей выживаемости. Поиск таких факторов и определил актуальность диссертационной работы по избранной теме.

Цель: выявить ответную реакцию здоровых и опухолевых клеток организма животных на воздействие лазерного излучения и магнитных полей. Основные задачи:

1. Изучить процессы гибели опухолевых и здоровых клеток мышей-опухоленосителей и здоровых мышей под воздействием лазера с длиной волны 533 нм по параметрам ее жизнеспособности in vitro и in vivo.

2. Исследовать процессы гибели опухолевых и здоровых клеток мышей-опухоленосителей и здоровых мышей под воздействием магнитных полей по параметрам ее жизнеспособности in vitro и in vivo.

3. Описать механизмы, происходящие в клетках, при воздействии на них лазерного излучения и магнитных полей.

4. Изучить возможность использования комбинированных слабых постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей для инициации гибели опухолевых клеток.

Установлено, что интактные клетки тоже подвержены цитотоксическому действию лазерного излучения с длиной волны 533 нм, что приводит к их гибели путем некроза.

Показано, что действие магнитных полей с используемыми параметрами не приводит к инициации гибели шггактных клеток как мышей-опухоленосителей, так и здоровых мышей.

Определено, что активация антиоксидантной системы, приводящая к повышению адаптационных возможностей организма, является результатом установленных при исследованиях параметров и режима действия магнитных полей.

Выявлено, что увеличение показателей продолжительности жизни живот-ных-опухоленосителей связано с инициацией гибели опухолевых клеток по типу апоптоза.

Защищаемые положения.

1. Повышение продукции АФК, являющееся результатом действия лазерного излучения с длиной волны 533 нм, приводит к гибели как опухолевых, так и здоровых клеток путем некроза.

2. Активация антиоксидантной системы клеток печени и костного мозга животных-опухоленосителей происходит в результате действия комбинирован-

пых постоянного и зшзкочастотного переменного магнитных полей, обладающих цитотоксическим действием на опухолевые клетки и цитопротекторным - на здоровые.

3. Улучшение противоопухолевой защиты организма животных-опухоленосителей, в результате действия комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей, приводит к гибели опухолевых клеток путем апоптоза, что отражается в увеличении показателей продолжительности жизни.

Практическая значимость. Разработаны и внедрены критерии определения мембрано- и цитотоксического действия факторов различной природы по инициации блеббинга плазматической мембраны клеток, позволяющие проводить определение различных типов клеточной гибели при действии этих факторов.

Достоверное увеличение средней и максимальной продолжительности жизни животных-опухоленосителей происходит при действии установленных оптимальных параметров магнитных полей и режима воздействия.

Получено решение о выдаче патента на изобретение «Способ инициации гибели опухолевых клеток», заявка №2006101192/14(001290).

Апробация. По теме диссертации опубликовано 28 научных работ, в том числе четыре статьи, предусмотренные перечнем ВАК, согласно Постановлению Правительства РФ № 227 от 20 апреля 2006 г. «О внесении изменений в Постановление Правительства РФ № 74, пункт 11 от 30 января 2002 г.», четыре статьи в международной печати и монография в издательстве «Наука».

практической конференции с международным участием «Достижения науки и техники — развитию сибирских регионов», Красноярск, 1999 г.; VII Японо-Российском медицинском симпозиуме, Хиросаки, 1999 г., научной конференции «Актуальные проблемы патофизиологии», Санкт-Петербург, 1999 г.; VIII Российско-Японском медицинском симпозиуме, Благовещенск, 2000 г.; ЕХ Японо-Российском медицинском симпозиуме, Каназава, 2001 г.; межвузовской конференции молодых ученых «Актуальные проблемы патофизиологии», Санкт-Петербург, 2003 г.; международном симпозиуме «Гомеостаз и экстремальные состояния», Красноярск, 2003 г.; Ш Всероссийской конференции с международным участием, посвященной 175-летию со дня рождения Ф.В.Овсянникова, Санкт-Петербург, 2003 г.; международной конференции «Окружающая среда и здоровье», Санкт-Петербург, 2003 г.; X Российско-Японском международном симпозиуме, Якутск, 2003 г.; международном симпозиуме «Физическая культура и спорт, формирование здоровья и здоровьесберегающие технологии в системе образования: опыт, проблемы, исследования и перспективы», Красноярск, 2006 г.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 276 страницах машинописного текста и состоит из введения, 5 глав, выводов и списка литературы. Работа иллюстрирована 63 рисунками и 73 таблицами. Список литературы представлен 413 источниками, из которых 165 отечественных и 248 зарубежных.

Личный вклад автора. Формулировка идеи, планирование и координация экспериментов, получение и обработка первичных материалов, теоретический и статистико-математический анализ результатов, а также написание работы выполнены автором лично. Исследования активности ферментов антиоксидантной системы, степени фрагментации ДНК и изменения мембранного потенциала клеток осуществлены в составе межвузовских творческих коллективов при личном вкладе автора 80%.

Благодарности. Автор выражает глубокую благодарность научным консультантам доктору медицинских наук, профессору Людмиле Георгиевне

Климацкой и доктору технических наук, профессору Николаю Васильевичу Цугленку, сотрудникам кафедр биохимии и физиологии человека и животных, радиотехники, «Электротехиология и электротехника» Сибирского федерального университета.

ГЛАВА 1

МЕТОДОЛОГИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ

Первая глава посвящена аналитическому обзору отечественной и зарубежной литературы по изучаемой проблеме. Приведены данные, касающиеся выбора оптимальной опухолевой модели - асцитной карциномы Эрлиха для изучения действия различных факторов на опухолевый процесс, являющийся маркером экологического неблагополучия.

Приведены данные, касающиеся преимуществ использования магнитных полей для инициации гибели опухолевых клеток по сравнению с традиционными методами, приводящими к целому ряду неблагоприятных последствий для организма. Делается вывод об отсутствии комплексных исследований изменения адаптационных возможностей организма опухоленосителей при действии магнитных полей и лазерного излучения.

ГЛАВА2

ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В работе были использованы 1250 белых беспородных мышей массой 20-25 г. Животные содержались на стандартной диете, при 12 часовом световом режиме.

Онкологические заболевания — маркеры экологического неблагополучия и для имитации действия канцерогенных факторов окружающей среды и результата их влияния на организм — опухолевого процесса была использована экспериментальная опухолевая модель — асцитная карцинома Эрлиха (Рис. 1). Асцитную карциному Эрлиха перевивали внугрибрюшшшо в дозе 107 клеток в 0,2 мл раствора Хенкса(Гвичия, 1983).

Выбор модели обусловлен быстрым ростом, полной тканевой анаплазией, крайне низким критичным минимумом клеток, обеспечивающим перевиваемость,

отсутствием межклеточной адгезии. Забор материала производился в соответствии с используемым режимом облучения.

Для изучения влияния лазерного излучения была разработана экспериментальная лазерная установка для изучения АавЬ-фотолиза с перекрещивающимися пучками. Установка включала: импульсно-периодический №-УАО лазер с удвоением частоты Я.=533 нм; зондирующего осветителя лампы накаливания мощностью 25 Вт, излучение которого пропускалось через светофильтр ЖС-16; мо-нохроматора «МСД-2»; фотоэлектроумножителя (ФЭУ-39); графопостроителя; термостатируемой герметичной кюветы объемом 3 мл; теплового фильтра.

Рис. 1 Роль социально-экологической напряженности в развитии опу-

холевого процесса.

Для изучения влияния магнитных полей была разработана экспериментальная установка, состоящая из генератора сигналов, усилителя-регулятора сиг-

нала с градуировкой по индукции, источника постоянного тока стабилизированного, блока создания сочетания постоянного магнитного поля с интенсивностью 25 мкТл и переменного магнитного поля с интенсивностью 5 мкТл.

Для исследования in vivo проводили облучение в течение 1 ч в одно и тоже время (с 16-00 до 17-00) от 1-го до 10-ти дней, со 2-х суток от момента инокуляции.

При эксперименте in vitro нативный асцит или взвесь клеток облучали в течете 15, 30, 60 минут. С целью получения информации о величине солидной формы карциномы Эрлиха взвесь клеток в количестве 0,5x106 перевивали подкожно в область правой лопатки, забор материала производился на 20 день эксперимента (Музалевская, 1997).

Процессы блеббинга плазматическиой мембраны изучали методом фазово-контрастной микроскопии. Под иммерсией (><900) анализировали по 200 клеток в каждом препарате. Отмечали и подсчитывали образование мелких пузыреподоб-ных выпячиваний по периметру клетки (начальный блеббинг), формирование более крупных пузырей (терминальный блеббинг), наличие некроза (Mills, 1999).

Цитотоксическое действие лазерного излучения и магнитных полей определяли методом МТТ - теста: тетразольную 3-(4,5-диметилтиазол — 2 — ил)-2,5 — дифенштгетразолбромид (МТТ «Sigma») добавляли по 50 мкл в каждую пробу. Клетки инкубировали в течение 1,5 ч при 37°С. В конце инкубационного периода кристаллы формазана растворяли путем добавления 500 мкл 0,1 Н НС1 - изопро-панола. Оптическую плотность исследуемых проб определяли на спектрофотометре «СФ-26» при длине волны 570 нм, фоновую плотность при длине волны 640 нм, искомую величину находили по разности двух измерений (Berridge, 1993).

Для оценки мембранного потенциала клетки нагружали потенциало-чувствительным зондом родамин-123 (10 мкг/мл инкубационного раствора) (Добрецов, 1987).

Метод оценки межнуклеосомной фрагментации ДНК в экспериментах in vivo: выделение ДНК производили с использованием протеиназы К и

стандартной фенол-хлороформной экстракцией (Херрингтон, 1999) с небольшими модификациями.

Статистическая обработка результатов включала сравнение генеральных дисперсий выборочных данных и проверку их соответствия закону нормального распределения для применения параметрических (t-критерий Стьюдента) и непараметрических (U-критерий Манна-Уитни) критериев оценки межвыборочных различий. В работе использовали пакеты программ «Statistica 6,0».

ГЛАВА 3.

ДЕЙСТВИЕ ЛАЗЕРНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ С ДЛИНОЙ ВОЛНЫ 533 НМ НА ОПУХОЛЕВЫЕ И ЗДОРОВЫЕ КЛЕТКИ МЫШЕЙ-ОПУХОЛЕНОСИТЕЛЕЙ И ЗДОРОВЫХ МЫШЕЙ IN VITRO И IN VIVO

В последнее время лазерное излучение стали использовать для инициации гибели опухолевых клеток. Чаще всего для данных целей используют инфракрасное лазерное излучение. Однако для достижения эффективности воздействия необходимо использовать фотосенсибилизаторы, введение которых в организм опухоленосителя может спровоцировать целый ряд нежелательных побочных последствий (Долгих, 2001).

Сделано предположение, что излучение второй гармоники Nd-YAG лазера с длиной волны 533 нм будет способствовать инициации гибели опухолевых клеток. Установлено, что действие излучения Nd-YAG лазера с длиной волны 533 нм приводит к достоверному увеличению процессов перекисного окисления липидов 3,2 раза и достоверному снижению показателей МТТ-теста в 2,1 раза, что отражает выраженное цитотоксическое действие лазерного излучения с длиной волны 533 нм на клетки асцитной карциномы Эрли-ха (Табл. 1,2).

Таблица 1 - Изменение продукции МДА во взвеси клеток асцитной карциномы Эрлиха при воздействии второй гармоники Nd-YAG лазера с длиной волны 533 нм (М ± шх)

Время воздействия Контроль (ммоль/л) (п=30) Лазер (¿.=533 нм) (п=29)

0 минут 1,28 ±0,26 1,28 ±0,26

15 минут 1,70 ±0,27 2,56 ±0,36

30 минут 1,75 +0,27 3,14 ±0,21

60 минут 1,79 ±0,27 5,81±0,45**

Примечание: Достоверность отличий от контроля здесь и далее обозначена: * -р<0,05; ** - р<0,01; *** -р<0,001; п-объем выборки.

Таблица 2 - Влияние действия лазерного излучения с длиной волны 533 нм на показатели МТТ-теста во взвеси клеток асцитной карциномы Эрлиха (экспозиция - 60 мин) (М ± шх)

Вид воздействия Д1 (усл. ед.)

Контроль(п=29) 0, 47±0,03

Лазер (п=29) 0,21±0,02***

В результате исследований установлено, что действие излучения N(1-УАО лазера на суспензию клеток костного мозга мышей-опухоленосителей приводит к снижению морфологически неизмененных клеток в 1,3 раза (р<0,01), что достоверно отличалось от контроля, этот эффект сопровождался достоверным увеличением процессов перекисного окисления липидов в 3,3 раза и достоверным снижением показателей МТТ-теста в 2,2 раза.

При исследовании действия лазерного излучения с длиной волны 533 нм на клетки костного мозга здоровых мышей установлено, что при экспозиции, равной 15 минут происходит снижение морфологически неизмененных клеток в 1,3 раза, что достоверно отличается от контроля (р<0,01), этот эффект сопровождался достоверным увеличением процессов перекисного окисления липидов в 2,9 раза и достоверным снижением показателей МТТ-теста в 2 раза (р<0,01). Такая же тенденция установлена при исследовании действия данного вида лазерного излучения на гепатоциты мышей-опухоленосителей и здоровых мышей.

ГЛАВА 4

ДЕЙСТВИЕ МАГНИТНЫХ ПОЛЕЙ НА ОПУХОЛЕВЫЕ И ЗДОРОВЫЕ КЛЕТКИ МЫШЕЙ-ОПУХОЛЕНОСИТЕЛЕЙ И ЗДОРОВЫХ МЫШЕЙ IN VITRO И IN VIVO

Магнитные поля — это естественная составляющая окружающей среды. Жизнь на Земле зародилась и развивалась в «магнитной колыбели», что не могло не отразиться на структурных и функциональных особенностях всего живого (Бинги, 2005).

Однако, в результате деятельности человека, появились искусственные магнитные поля, обладающие неблагоприятным влиянием на биологические объекты (Pirozzoli, 2003).

Исследовано цитотоксическое действие комбинированных постоянного

и различных частот переменного магнитных полей на опухолевые клетки,

клетки печени и костного мозга мышей-опухоленосителей и здоровых мышей.

Таблица 3 - Влияние действия комбинированных постоянного и переменного магнитных полей на показатели МТТ-теста в клетках асцитной карциномы

Вид воздействия AI (усл.ед.)

Контроль 0,47±0,03

50 Гц 0,47±0,04

40 Гц 0,46±0,03

30 Гц 0,47±0,04

20 Гц 0,45±0,03

10 Гц 0,47+0,03

5 Гц 0,45+0,03

4 Гц 0,45±0,04

3,9 Гц 0,45±0,04

3,8 Гц 0,47+0,04

3,7 Гц 0,46±0,03

3,6 Гц 0,45+0,01

3,5 Гц 0,43±0,01

3,4 Гц 0,40±0,01

3,3 Гц 0,35+0,01

3,2 Гц 0,31+0,01*

3,1 Гц 0,21+0,01**

3,0 Гц 0,32+0,01* '

2,9 Гц 0,40±0,01

2,8 Гц 0,44±0,01

2,7 Гц 0,46+0,01

Таблица 4 - Влияние действия комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей на показатели МТТ-теста клеток печени мышей с асцитной карциномой Эрлиха (экспозиция - 60 мин) (п=30) (М±шх)

Вид воздействия AI (усл. ед.)

Контроль 0, 47±0,01

50 Гц 0,45±0,02

40 Гц 0,45+0,02

30 Гц 0,45+0,04

20 Гц 0,46±0,03

10 Гц 0,46+0,03

5 Гц 0,4710,04

3,9 Гц 0,5510,02

3,8 Гц 0,64+0,03

3,7 Гц 0,6610,01

3,6 Гц 0,6810,02

3,5 Гц 0,6810,01

3,4 Гц 0,69+0,03*

3,3 Гц 0,69+0,01*

3,2 Гц 0,71+0,02**

3,1 Гц 0,8510,05***

3,0 Гц 0,7910,04***

2,9 Гц 0,70+0,03**

2,8 Гц 0,61+0,05*

2,7 Гц 0,4910,03

Достоверное снижение показателей МТТ-теста в 2,2 раза, в клетках асцитной карциномы Эрлиха получено при частоте переменного магнитного поля равной 3,1 Гц. Показатели МТТ-теста в клетках печени мышей с асцитной карциномой Эрлиха увеличивались в 1,9 раза; в клетках печени здоровых мышей увеличивались в 2,1 раза; в клетках костного мозга мышей с асцитной карциномой Эрлиха - в 1,8 раза и здоровых мышей - в 2 раза (Табл. 3, 4, 5, 6, 7).

Известно, что МТТ-тест является индикатором МАЕ)(Р)Н и сохранности функции митохондрий. Его уровень отражает соотношение восстановленной и окисленной форм никотинамидных коферментов (Вегпс^е, 1993). Следовательно, чем меньше величина этого параметра, тем ниже жизнеспособность клеток и наоборот.

Таблица 5 - Влияние действия комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей на показатели МТТ-теста клеток пе-

Вид воздействия Д1 (усл. ед.)

Контроль (п=29) 0,47+0,01

50 Гц 0,4810,01

10 Гц 0,48±0,03

5 Гц 0,49+0,04

3,8 Гц 0,71 ±0,03

3,6 Гц 0,78+0,02*

3,4 Гц 0,83±0,04**

3,2 Гц 0,89+0,07**

3,1 Гц 1,01+0,02***

3,0 Гц 0,85±0,09**

2,9 Гц 0,74±0,02*

2,7 Гц 0,57+0,03

Таблица б - Влияние действия комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей на показатели МТТ-теста в суспензии клеток костного мозга мышей с асцитной карциномой Эрлиха (экспозиция — 60 мин) (п=30) (М ± тх)

Вид воздействия Д1 (усл. ед.)

Контроль 0,47+0,01

50 Гц 0,46+0,01

10 Гц 0,46±0,02

5 Гц 0,46+0,04

3,8 Гц 0,63±0,01

3,6 Гц 0,68+0,03*

3,4 Гц 0,71+0,04**

3,2 Гц 0,72±0,06**

3,1 Гц 0,83+0,01***

3,0 Гц 0,75+0,02**

2,9 Гц 0,63+0,01**

2,7 Гц 0,48+0,02

Таблица 7 - Влияние действия комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей на показатели МТТ-теста в суспензии клеток костного мозга здоровых мышей (экспозиция - 60 мин.) (п=30) (М ± тх)

Вид воздействия Д1 (усл. ед.)

Контроль 0,47±0,01

50 Гц 0,46+0,02

10 Гц 0,46±0,03

5 Гц 0,54+0,01

3,8 Гц 0,69±0,01*

3,6 Гц 0,71±0,04**

3,4 Гц 0,75+0,01**

3,2 Гц 0,76+0,03**

3,1 Гц 0,92±0,02***

3,0 Гц 0,7410,01**

2,9 Гц 0,72±0,01**

2,7 Гц 0,54±0,06

Данная частота входит в диапазон частот микропульсации геомагнитного поля Земли (Беркутов, 2000). Таким образом, действие естественной электромагнитной составляющей окружающей среды обладает цитотоксиче-ским действием на опухолевые клетки и цитопротекторным действием по отношению к здоровым клеткам как мышей-опухоленосителей, так и интакт-ных мышей.

При проведении эксперимента по исследованию продолжительности жизни животных-опухоленосителей за основу была взята модель, описанная в литературе и показавшая свою высокую эффективность (Музалевская, 1997). Небольшая величина инокулята, использовавшаяся в литературном источнике, составляла 106 клеток и обусловливала длительный латентный период, низкие темпы увеличения объема асцитической жидкости, большую продолжительность жизни животных-опухоленосителей.

гу: I ■

50-

Щ-

35 " 30 " IS -

so ■■

15 -10 "

□ KOH-rpOJIL*

□ Oni.iT

средняя ОрОДОЛ Ж1[[ CJJ ьносгь жизни

максимальная Продолжительность

Рис. 2. Средняя и максимальная продолжительность жшни мышей с асцит-ной карциномой Эрлиха при действии 5-ти сеансов облучения маг нитными полями

В работе были исследованы курсы, состоящие из одного до десяти сеансов воздействия магнитными палями. Наиболее эффективным являлся курс, состоящий из 5-та сеансов, при котором средня продстжителыюсяь жшни животных увеличилась в 1,8 раза, а максимальная продолжительное^ жизни - и 2 раза (Рис. 2). Дальнейшее увеличение количества сеансов не привело к достоверному увеличению показателей продолжительности жизни животныхчтухоленосителей

Известно, что блеббинг клеточной мембраны - одно из важнейших проявлений процесса ацоптоза, либо некроза. Таким образом, инициация блеббинга при воздействии магнитных полей с данными параметрами может свидетельствовать о том, что опухолевая клетка находится на начальных этапах гибели.

При исследовании действия комбинированных слабых постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей на процессы блеббинга и пе-рек ясное окисление лип идо в клеток асцитной карциномы Эр л ила in vitro установлено, что количество морфологически неизмененных клеток при действии магнитного поля достоверно снижалось в 1,9 раза (Табл. 8).

Таблица 8 - Динамика количества морфологически неизмененных клеток при действии комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей на суспензию клеток асцитной карциномы Эрлиха (М ± тх)

Время воздействия Контроль (%) (п=30) Магнитные поля (п=25)

0 минут 89,6±0,27 89,6±0,27

15 минут 80+0,01 71,5±0,12

30 минут 78±0,28 69,1 ±0,14

60 минут 76,910,29 39,2±0,12**

Количество клеток с морфологическими признаками начального блеб-бинга увеличивалось в 2,1 раза, клеток - с морфологическими признаками терминального блеббинга- в 6,3 раза (Табл. 9 и 10).

Таблица 9 - Динамика количества клеток с морфологическими признаками начального блеббинга при действии комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей на суспензию клеток асцитной карциномы Эрлиха (М ± тх)

Время воздействия Контроль (%) (п=30) Магнитные поля (п=25)

0 минут 5,2±0,57 5,2±0,57

15 минут 10±0,18 17+0,21*

30 минут 11±0,71 18,2±0,25**

60 минут 11,5±0,41 24,6±0,06***

Таблица 10 - Динамика количества клеток с морфологическими признаками терминального блеббинга при действии комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей на суспензию клеток асцитной карциномы Эрлиха (М ± тх)

Время воздействия Контроль (%) (п=30) Магнитные поля (п=25)

0 минут 3.8±0,77 3.8+0,77

15 минут 5,2±0,71 8±0,44

30 минут 4,3±0,18 9+0,37*

60 минут 4,5±0,27 28,4±0,31**

Количество клеток с морфологическими признаками некроза достоверно не изменялось. (Табл. 11).

Таблица 11 - Динамика количества клеток с морфологическими признаками некроза при действии комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей на суспензию клеток асцитной карциномы Эр-лиха (М ± тх)

Время воздействия Контроль (%) (п=30) Магнитные поля (п=25)

0 минут 1,4±0,36 1,4±0,36

15 минут 4,8+0,14 3,5±0,14

30 минут 6,7±0,04 3,7±0,17

60 минут 7,1+0,72 7,8+0,28

Таким образом, действие комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей приводит к снижению морфологически неизмененных клеток, за счет повышения клеток с морфологическими признаками начального и терминального блеббинга, а не некроза.

Следовательно, действие магнитных полей вызывает повышение клеток с морфологическими признаками начального и терминального блеббинга, при этом количество некротических клеток достоверно не увеличивается, что не сопровождается выраженным повышением процесса перекисного окисления липидов.

Установлено, что клетки печени и костного мозга как мышей-опухоленосителей, так и здоровых мышей не восприимчивы к цитотоксиче-скому действию магнитных полей с данными биотропными параметрами в отличие от клеток асцитной карциномы Эрлиха, так как показатели продукции малонового диальдегида и количество морфологически неизмененных клеток, определенное методом фазово-контрастной микроскопии в опыте достоверно не отличались от контроля.

В опухолевых клетках увеличивается активность супероксиддисмутазы в 2 раза и глутатион-Я-трансферазы в 5,6 раза, снижается активность глута-тионпероксидазы на 48% (Рис. 4). Активность каталазы не обнаружена, что согласуется с литературными данными (Франциянц, 2002). Увеличение активности супероксиддисмутазы в опухолевых клетках при сниженной активности глутатионпероксидазы и отсутствии каталазы приводит к увеличению

концентрации пероксида водорода. Это, в свою очередь, может свидетельствовать об усилении свободно-радикальных процессов, следствием которых является повреждение мембран, ДНК, окисление белков и апоптоз.

СОД ГТЮ Г'ЗТ Г'ЗН

I I контроль [и ОПЫТ

Рис. 4. Влияние постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей на ферменты антиоксидантиой системы в клетках АКЭ. СОД - суперок-сиддисмутаза, ГПО — глу татион пероксидаза, Г8Т — глутатион-Э-трансфераза, Г 811 - восстановленный глу татион

В печени воздействие магнитными полями с данными параметрами достоверно повысила активность супероксиддисмутазы на 25%, а активность глутатионпероксидазы после облучения не изменилась, просматривается тенденция к увеличению активности каталазы (Рис. 5).

В результате облучения в антиоксидантиой системе печени достоверные изменения наблюдаются в отношении глу татион-Б-трансферазы, ее активность достоверно увеличивается в 1,5 раза. Концентрация гяутатиопа в печени достоверно не различается.

У контрольных мышей с опухолью активность глутатиои-8-трансферазы ниже, чем у здоровых мышей, повышение активности после облучения происходит до уровня здоровых мышей (Рис. 5). Данные факты позволяют предположить, что это вызвано непосредственным влиянием облучения на этот фермент.

106

□ опит

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 ] 1 12 13 14 15

сод кат то гет ген

Рис. 5. Влияние постоянного и низко час точно го переменного магнитных полей на антиоксидантную систему печени мышей с асцитной карциномой Эр-лиха и здоровых мышей. СОД - су перо кс ндди с му таза, КАТ - катал а за, П Ю - гяутатионпер оксидаза, Г5Т - г ну тати он-К-тр анефераза, ГКН - восстаноь-ленный глутатион

В костном мозге ситуация в отношении активности супероксиддисмутазы аналогична таковой в печени. Активность супероксиддисмутазы в опытной группе выше в 2,3 раза чем в контроле. В результате облучения активность глутатмонперокендазы достоверно не изменилась. Активность глу-татиО№$-трансферазы возросла в 2,3 раза и концентрация глутатиова а 1,7

раза (Рис. 6). % -

300

12 3 4 5 6 7 8 9 10 П 12

сод гпо гет ген

Рис. б. Влияние постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей на антиоксидантн VIо систему в костном мозге мышей с асцитной карциномой Эрлиха и здоровых мышей.

Таким образом, действие магнитных полей с данными параметрами приводит к достоверному повышений) активности супероксиддисмутазы,

здоровые контроль опыт

□ чдоровыс П контроль

глутатион-8-трансферазы как в клетках асцитной карциномы Эрлиха, так и в клетках печени и костного мозга мышей-опухоленосителей. Однако в опухолевых клетках происходит одновременное снижение активности глутатион-пероксидазы, а в здоровых клетках активность этого фермента сохранна. Это приводит к накоплению пероксида водорода в опухолевых клетках и цито-токсическому эффекту магнитных полей именно на опухолевые клетки, а не на здоровые.

При действии мапштных полей зафиксирована тенденция к снижению мембранного потенциала асцитных клеток, мембранный потенциал клеток костного мозга имел тенденцию к увеличению, мембранный потенциал митохондрий гепатоцитов увеличивался в 2,6 раза, в то время как мембранный потенциал митохондрий асцитных клеток уменьшался в 2,1 раза.

Таким образом, действие комбинированных постояшюго и низкочастотного переменного магнитных полей приводит к достоверному снижению мембранного потенциала митохондрий асцитных клеток. Мембранный потенциал клеток асцита при этом тоже снижается, но менее значительно. Мембранный потещиал клеток костного мозга и митохондрий клеток печени достоверно повышается, что подтверждает цитотоксическое действие магнитных полей с данными параметрами на опухолевые клетки и цитопротекторное — на здоровые.

Одним из специфических признаков апоптоза является межнуклеосомная деградация хроматина. Хроматин подвергается распаду на кратные нуклеосомам фрагменты, образуя при электрофоретическом разделении характерную картину так называемой «лесенки». Данный процесс инициируется эндогенными эндонук-леазами (ВигБсЬ, 2005).

В экспериментах при действии комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей была обнаружена выраженная межнуклеосомная фрагментация ДНК (Рис. 7). При этом степень фрагментации достоверно увеличивалась на 25% при воздействии магнитных полей.

фрагм С H TEllllï 54,

усл.ед

4.S х

4.0 • ..-:.• ..... ••••-... . ' •

3.5 s л'..;1;;;/ :f

г ' ;■:■:. ■. ". :

3.0 s

2.S у '.'..' .i.'.; .. . J . . - ^г . . i

2.0 I

г У

контроле магнитные лолл

Рис. 7 Изменение степени фрагментации ДНК при действии комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных нолей.

ГЛАВА 5.

МЕХАНИЗМЫ ДЕЙСТВИЯ КОМБИНИРОВАННЫХ

ПОСТОЯННОГО И НИЗКОЧАСТОТНОГО ПЕРЕМЕННОГО M ATI 1ИТНЫХ П ОЛЕЙ И ЛАЗ ЕР1ЮГО ИЗ ЛУЧЕНИ Я H А ИНИЦИАЦИЮ ГИБЕЛИ ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК

Действие лазерного излучения с длиной полны 533 нм приводит к критическому повышению уровня продукции АФК, при котором доминирует их токсическое действие, что проявляется инициацией некроза как опухолевых сак и здоровых клеток.

Существуют данные, что активные формы кислорода могут и инициировать, и ингибировать апоптоз (Lu, 2005; Jiang, 2005; Izeradjene, 2005; Koba-yashi, 2005; Cacicedo, 2005). Высокая концентрация АФК блокирует Fas-медиируемую активность каспач и апоптоз. Специфические клеточные рецепторы Fas (АРО- 1/CD95), зкспрессмруются на поверхности большинства клеток. Лиганд этих рецепторов (FasLJ экс премируется на лимфоцитах или находится во внеклеточной среде в растворенном состоянии. При взаимодействии Fa s-рецептор а с Fas-лигандом происходит активация специфического

комплекса примембранных белков, формирующих Fas-ассоциированный домен клеточной гибели и запускающий каскад каспаз. Известно, что именно каспазы отвечают за реализацию программы апоптоза. Это протеолитиче-ские ферменты, активируемые реакцией ограниченного протеолиза и вызывающие протеолиз белков-мишеней (негистоновые белки хроматина, белки цитоскелета, клеточные рецепторы) по остаткам аспартата (Kobayashi, 2005; Peng, 2005; Ceruti, 2005; Liu, 2005; Arima, 2005; Gao, 2005). Регуляция активности каспаз может осуществляться и через обратимое окисление/восстановление остатков цистеина в молекуле каспаз, что, очевидно, играет немаловажную роль при воздействии магнитных полей с используемыми параметрами. Ингибирование апоптоза при гиперпродукции АФК - явление временное, но, в такой ситуации происходит альтернативный путь гибели клетки — некроз.

Таким образом, незначительно выраженный окислительный стресс, развивающийся при действии магнитных полей с данными параметрами, является причиной апоптоза. При выраженном же окислительном стрессе вследствие действия лазерного излучения с длиной волны 533 нм происходит некротическая гибель клетки.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Действие экологически неблагоприятных факторов приводит к истощению защитно-приспособительных резервов организма, к числу которых относятся и механизмы противоопухолевой защиты, подразделяющиеся на антиканцерогенные, антимутационные и антицеллюлярные. Установлено, что на этапе опухолевого процесса, соответствующего фазе экспоненциального роста, седьмой день с момента инокуляции, в гепатоцитах мышей-опухоленосителей выявляется снижение активности глутатион-Б-трасферазы и глутатионпероксидазы. Действие комбинированных постоянного и переменного магнитного поля с частотой 3,1 Гц, входящей в диапазон частот естественного геомагнитного поля Земли, приводит к повышению адаптационных возможностей организма животных-опухоленосителей. Одной из причин

данного эффекта является повышение активности ферментов антиоксидант-ной системы клеток печени и костного мозга мышей с асцитной карциномой Эрлиха.

Повышение активности компонентов антиоксидантной системы в клетках асцитной карциномы Эрлиха и в асцитической жидкости под воздействием комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей может послужить одной из причин снижения процессов перекис-ного окисления липидов. Это проявляется в тенденции к уменьшению образования малонового диальдегида — вторичного продукта липидной перокси-дации, а также в увеличении концентрации медленных сульфгидрильных групп.

Процесс ослабления интенсивности перекисного окисления липидов и активация ряда антиоксидантных ферментов в гепатоцитах, возможно, является одной из причин увеличения продолжительности жизни животных-опухоленосителей.

Другой причиной корригирующего влияния при системном воздействии на организм опухоленосителя магнитных полей с данными параметрами может являться увеличение количества клеток асцитной карциномы Эрлиха в состоянии апоптоза.

Можно предположить, что в основе индукции апоптоза лежит снижение выраженности окислительного стресса, а также активация механизмов антибластомной резистентности.

Таким образом, при действии магнитных полей происходит инициация гибели опухолевых клеток, что приводит к увеличению средней и максимальной продолжительности жизни (Рис. 8).

Рис. 8. Механизм действия магнитных полей, вызывающий инициацию табели опухолевых клеток.

ВЫВОДЫ

1. Действие лазерного излучения с длиной волны 533 нм обладает мем-брано- и цитотоксическим эффектом на клетки асцитной карциномы Эрлиха, клетки костного мозга и печени как мышей-опухоленосителей, так и здоровых мышей, инициируя их гибель путем некроза.

2. Действие комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей обладает мембрано- и цитотоксическим эффектом на клетки асцитной карциномы Эрлиха, при этом максимальная эффективность достигается при частоте переменного поля, равной 3,1 Гц и 5-тн сеансах воздействия.

3. Повышение жизнеспособности клеток костного мозга и печени как мышей с асцитной карциномой Эрлиха так и здоровых мышей происходит при действии комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей, что связано с активацией ферментов антиоксидантной системы в этих клетках.

4. Гибель опухолевых клеток по типу апоптоза при действии комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей связана с инициацией и модификацией окислительного стресса в этих клетках.

5. Действие комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей на животных-опухоленосителей приводит к достоверному повышению средней и максимальной продолжительности их жизни.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для оценки экологического здоровья использовать санитарно-эпидемиологической службой критерии жизнеспособности клеток по показателям фазово-контрастной микроскопии, микровязкости мембран, МТТ-тесту, продукции малонового диальдегида, активности ферментов антиокси-дантной системы.

2. При оценке воздействия экологически неблагоприятных факторов среды обитания использовать службой Роспотребнадзора критерии жизнеспособности клеток (показатели фазово-контрастной-микроскопии, микровязкость мембран, МТТ-тест, продукция малонового диальдегида, активность ферментов антиоксидантной системы)

3. Коррекцию состояния организма опухоленосителей в лечебных учреждениях проводить с использованием метода воздействия комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей.

Основные материалы диссертации опубликованы в работах:

1. Stavitskaya, E.Yu. Pathophysiological aspects of laser application / E.Yu. Stavitskaya, A.B. Egorova, V.V. Salmin // Proc. Intern. Conf. "Laser Optics". — S-Peterburg. - 1995. - P. 130-135.

2. Stavitskaya. E.Yu. Kinetic associated with carbon monoxide rebindind to hemoglobin following ligand photolysis / E.Yu. Stavitskaya, A.B. Egorova, V.V.

Salmin, V.V. Patrin // Proceedings or the third Russian-Chinese symposium on laser physics and laser technology. - 1996. - P.l 13-114

3. Ставицкая. E.IO. Роль кальция в патогенезе повреждения клеточных биомембран акрилонитрилом: Сб. научи, тр. / Е.Ю. Ставицкая. С.В. Михут-кина, А.Б. Егорова, В.В. Иванов // «Реконструкция гомеостаза» IX Международный симпозиум. - Красноярск. - 1998. - С. 31-35.

4. Stavitskaya. E.Yu. Molecula mechanism of carbon monoxide impact action as pathogenic basis for development of biological monitoring / E.Yu. Stavitskaya. V.V. Salmin, A.B. Egorova, A.S. Provorov // Abstracts of VI Russia-Japan medical symposium, Khabarovsk. - 1998. - P.67-68.

5. Stavitskaya. E.Yu. Biological monitoring of CO based upon the laser-induced alterations of conformation of HbCO / E.Yu. Stavitskaya // Abstracts of 10th European conference for students and young doctors. — Berlin. — 1999. — P.74-75.

6. Stavitskaya. E.Yu. Acute and chronic intoxication with carbon monoxide: approaches for hypoxia correction / E.Yu. Stavitskaya // Proceeding of Japan-Russia International Medical Symposium VII. - Hirosaki. — Japan. - 1999. — P.61-62.

7. Ставицкая. Е.Ю. Нарушение клеточных сигнальных систем в патогенезе экзогенных интоксикаций / ЕЛО. Ставицкая. А.Б. Егорова, С.В. Михутки-на, Ю.А. Успенская // Вестник Красноярского регионального отделения РАЕН.-1999.-Вып. 1.-С. 99-107.

8. Ставицкая. ЕЛО. Повреждение митохондрий нейронов в патогенезе нейроденеративных процессов / Е.Ю. Ставицкая. А.Б. Егорова, С.В. Михут-кина, Ю.А. Успенская // Вестник Красноярского регионального отделения РАЕН.-2000.-Вып. 2.-С. 141-147.

9. Stavitskaya. E.Yu. Some aspects of the action of laser radiation on Ehrlich as-cite tumor cells / .E.Yu. Stavitskaya. S.N. Zobova, A.L. Anisimov, V.V. Salmin // Abstracts of VIII Russia-Japan medical symposium. — Blagoveshchensk. — 2000. — P. 377-378.

Ю.Ставицкая Е.Ю. Модификация мембранотоксического эффекта Nd-YAG лазера предварительной индукцией цитохрома Р-450 в клетках костного

мозга / Е.Ю. Ставицкая. А.Б. Егорова, В.В. Салмин, С.Н. Зобова // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2001. - №8. — С. 232-234.

11 .Stavitskaya. E.Yu. Pathogenesis of plasma membrane blebbing induced by chemical and physical agents / E.Yu. Stavitskaya. S.V. Mikhutkina, Yu.A. Uspen-skaya, S.N. Zobova // Abstracts of Ninth International Symposium of the Japan-Russia Medical Exchange. - Kanazawa. - Japan. - 2001. -P.213-214.

12.Ставицкая. Е.Ю. Повреждение цитоскелета и клеточных мембран при апоптозе / Е.Ю. Ставицкая, А.Б. Егорова, Ю.А. Успенская, С.В. Михуткина // Успехи современной биологии. - 2001. - №5 - С. 502-510.

13 .Ставицкая. Е.Ю. Некоторые эффекты воздействия низкочастотного магнитного поля на клетки асцитной карциномы Эрлиха / Е.Ю. Ставицкая, С.Н. Зобова, Н.В. Сергеев, Л.Г. Климацкая // Актуальные проблемы патофизиологии: Материалы конференции. — Ст-Петербург. — 2003. — С. 88-89.

14.Ставицкая. Е.Ю. Низкочастотное магнитное поле как фактор, изменяющий гомеостаз клеток / Е.Ю. Ставицкая, С.Н. Зобова, Н.В. Сергеев, Е.А. Савченко // «Гомеостаз и экстремальные состояния организма»: Тез. докл. IX Международного симпозиума. - Красноярск. — 2003. — С. 136-137.

15.Ставицкая. ЕЛО. Изменение физико-химических свойств биологических мембран у мышей с асцитной карциномой Эрлиха при воздействии магнитного поля / Е.Ю. Ставицкая. А.А. Борисова// Механизмы функционирования висцеральных систем: Тез. докл. III Всеросс. конф. с международным участием - Ст-Петербург. - 2003. - С. 43-44.

16. Stavitskaya. E.Yu. Magnetic fields as an important environmental risk factor / E.Yu. Stavitskaya, S.N. Zobova, N.V. Sergeev, G.I. Shaidurov // Environment and human health: Proc. Intern. Conf. - St-Peterburg. - 2003. - P.255-256.

17. Stavitskaya. E.Yu. The influence of low-frequency magnetic fields on Ehrlich ascite carcinoma cells in vitro / E.Yu. Stavitskaya // Yakutia — 2003: Abstracts of X Russia-Japan International medical symposium. - Yakutsk. -2003. - P. 151-152.

18. Ставицкая. Е.Ю. Мембранотоксический эффект инфракрасного лазерного излучения и низкочастотного магнитного поля при изолированном и со-

четанном воздействии в клетках асцитной карциномы Эрлиха / Е.Ю. Ставицкая, С.Н. Зобова, Н.В. Сергеев, Г.Я. Шайдуров // Бюллетень СО РАМН. -2003.-№4.-С. 48-51.

19.Ставицкая, Е.Ю. Здоровьесберегающие факторы: влияние магнитных полей на антиоксидантную систему / Е.Ю. Ставицкая. Н.М. Титова, Е.В. Маркова, Л.Г. Климацкая и др. // Физическая культура и спорт в системе образования. Здоровьесберегающие технологии: Международный симпозиум. Тез. докл. - Красноярск. - 2004. - С. 16-18.

20.Ставицкая, Е.Ю. Молекулярно-клеточные механизмы токсичности ксенобиотиков, патогенетическая профилактика профессионально обусловленных и экологических заболеваний / Е.Ю. Ставицкая, В.В. Иванов, Ю.В Кот-ловский., Л.Г Климацкая. // «Наука» Новосибирск, 2004. С. 23-27.

21. Сергеева, Е.Ю. Низкочастотные магнитные поля и лазерное излучение как фактор, влияющий на процессы жизнедеятельности клеток / Е.Ю. Сергеева // Сибирское медицинское обозрение. - 2005. - №2-3. - С. 3-5.

22.Сергеева, Е.Ю. Зависимость морфологических изменений клеток печени и костного мозга мышей-опухоленосителей от воздействия экологических факторов / Е.Ю.Сергеева, Л.В. Федюкович, Г.М. Климина // «Актуальные проблемы морфологии»:сб. тр. — Красноярск, 2006. - С. 147-149.

23.Сергеева, Е.Ю.Влияние частоты переменного магнитного поля при взаимодействии комбинированных слабых постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей и инфракрасного лазерного излучения на адаптационные возможности гепатоцитов мышей / Е.Ю.Сергеева // Физическая культура и спорт, формирование здоровья и здоровьесберегающие технологии в системе образования: опыт, проблемы, исследования и перспективы: сб. мат-лов междунар. симп. — Красноярск, 2006. — С. 231-234.

24. Сергеева, Е.Ю. Изменение адаптационных возможностей клеток костного мозга мышей при взаимодействии комбинированных слабых постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей и инфракрасного лазерного излучения / Е.Ю.Сергеева // Физическая культура и спорт, формирова-

ние здоровья и здоровьесберегающие технологии в системе образования: опыт, проблемы, исследования и перспективы: сб. мат-лов междунар. симп. — Красноярск, 2006. - С. 234-237.

25. Сергеева, Е.Ю. Изменение функционального состояния митохондрий печени и клеток асцитной карциномы Эрлиха при действии слабых магнитных полей / Е.Ю.Сергеева // Сибирь-Восток - 2006. - №1. - С. 17-19.

Отпечатано на ротапринте Сибирского федерального университета. 660074, Красноярск, ул. Киренского, 26. Тираж 100 экз. Заказ № 627

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Сергеева, Екатерина Юрьевна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. МЕТОДОЛОГИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ.

1.1. Асцитная карцинома Эрлиха как модель для инициации различных видов клеточной гибели.

1.2. Особенности апоптоза и некроза в опухолевой ткани.

1.3. Регуляторная роль АФК и характеристика ферментативного звена антиоксидантной системы.

1.4. Механизмы биологических эффектов лазерного излучения и магнитных полей.

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Экспериментальная модель.

2.2. Исследование блеббинга плазматической мембраны клеток асцит-ной карциномы Эрлиха in vitro.

2.3. Определение степени ПОЛ по содержанию малонового диальдегида

2.4. Получение раствора карбоксигемоглобина для опытов in vitro.

2.5. Определение сульфгидрильных групп в белках.

2.6. Методика определения активности супероксиддисмутазы.

2.7. Методика определения активности каталазы.

2.8. Методика определения активности глутатионпероксидазы.

2.9. Методика определения активности глутатион-Б-трансферазы.

2.10. Методика определения концентрации глутатиона.

2.11. Измерение микровязкости мембран клеток.

2.12. Измерение мембранного потенциала и функции митохондрий методом МТТ-теста.

2.13. Определение дыхания митохондрий и неорганического фосфата

2.14. Методы выделения и электрофореза ДНК.

2.15. Статистическая обработка результатов.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ДЕЙСТВИЯ ЛАЗЕРНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ С ДЛИНОЙ ВОЛНЫ 533 НМ НА ОПУХОЛЕВЫЕ И ЗДОРОВЫЕ КЛЕТКИ МЫШЕЙ-ОПУХОЛЕНОСИТЕЛЕЙ И ЗДОРОВЫХ МЫШЕЙ IN VITRO И IN VIVO.

3.1. Влияние излучения второй гармоники Nd-YAG лазера с длиной волны 533 нм на процесс блеббинга, ПОЛ, показатели МТТ-теста клеток асцитной карциномы Эрлиха и концентрацию карбоксигемоглобина in vitro.

3.2. Влияние излучения второй гармоники Nd-YAG лазера с длиной волны 533 нм на процесс блеббинга, ПОЛ и показатели МТТ-теста клеток костного мозга мышей с асцитной карциномой Эрлиха и здоровых мышей in vitro.

3.3. Влияние излучения второй гармоники Nd-YAG лазера с длиной волны 533 нм на процесс блеббинга, ПОЛ и показатели МТТ-теста клеток печени мышей с асцитной карциномой Эрлиха и здоровых мышей in vitro.

ГЛАВА 4. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ДЕЙСТВИЯ МАГНИТНЫХ ПОЛЕЙ НА ОПУХОЛЕВЫЕ И ЗДОРОВЫЕ КЛЕТКИ МЫШЕЙ-ОПУХОЛЕНОСИТЕЛЕЙ И ЗДОРОВЫХ МЫШЕЙ IN VITRO И IN VIVO.

4.1. Влияние различных частот переменного магнитного поля на выживаемость клеток асцитной карциномы Эрлиха, печени и костного мозга мышей-опухоленосителей и здоровых мышей по показателям МТТ-теста in vitro.

4.2. Влияние различных режимов воздействия магнитными полями на среднюю и максимальную продолжительность жизни мышей-опухоленосителей, скорость накопления асцитической жидкости, величину опухолевого узла и концентрацию карбоксигемоглобина в крови in vivo.

4.3. Изменение количества быстрореагирующих и медленнореагирующих SH-групп при действии комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей в клетках асцитной карциномы Эрлиха и асцитной жидкости.

4.4. Действие комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей на процессы блеббинга и перекисное окисление липидов клеток асцитной карциномы Эрлиха in vitro.

4.5. Действие комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей на процессы блеббинга и перекисное окисление липидов клеток печени мышей с асцитной карциномой Эрлиха и здоровых мышей in vitro.

4.6. Действие комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей на процессы блеббинга и перекисное окисление липидов клеток костного мозга мышей с асцитной карциномой Эрлиха и здоровых мышей in vitro.

4.7. Изменение ферментативной активности каталазы, супероксиддисмутазы, глутатионпероксидазы, глутатион-8-трансферазы и количества глутатиона при действии комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей в асцитных клетках, клетках печени и костного мозга мышей с асцитной карциномой Эрлиха и здоровых мышей in vivo.

4.8. Изменение мембранного потенциала митохондрий клеток печени и асцитных клеток, клеток костного мозга, асцитных клеток мышей с асцитной карциномой Эрлиха при действии комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей in vivo.

4.9. Изменение микровязкости мембран асцитных клеток, клеток костного мозга, мембран митохондрий асцитных клеток мышей с асцитной карциномой Эрлиха при действии комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей in vivo.

4.10. Фрагментация ДНК при действии комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей.

ГЛАВА 5. МЕХАНИЗМЫ ДЕЙСТВИЯ КОМБИНИРОВАННЫХ ПО СТОЯННОГО И НИЗКОЧАСТОТНОГО ПЕРЕМЕННОГО МАГ НИТНЫХ ПОЛЕЙ И ЛАЗЕРНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ ДЛЯ ИНИЦИА

ЦИИ ГИБЕЛИ ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК.

5.1. Механизм действия излучения Nd-YAG лазера с длиной волны нм для инициации гибели опухолевых клеток.

5.2. Механизм действия комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей для инициации гибели опухолевых клеток.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Реакция здоровых и опухолевых клеток организма животных на воздействие физических факторов"

Актуальность проблемы.

Однако есть ряд физических факторов, которые могут способствовать стимуляции защитно-приспособительных процессов в организме опухоленосителей, что приведет к повышению показателей выживаемости. Поиск таких факторов и определил актуальность диссертационной работы по избранной теме.

Цель: выявить ответную реакцию здоровых и опухолевых клеток организма животных на воздействие лазерного излучения и магнитных полей.

Основные задачи:

3. Описать механизмы, происходящие в клетках, при воздействии на них лазерного излучения и магнитных полей.

Научная новизна. Впервые выявлено, что индукция гибели опухолевых клеток мышей с асцитной карциномой Эрлиха, обусловлена действием излучения Nd-YAG лазера с длиной волны 533 нм, при этом доминирует клеточная гибель по типу некроза. Установлено, что ин-тактные клетки тоже подвержены цитотоксическому действию лазерного излучения с длиной волны 533 нм, что приводит к их гибели путем некроза. Показано, что действие магнитных полей с используемыми параметрами не приводит к инициации гибели интактных клеток как мышей-опухоленосителей, так и здоровых мышей. Определено, что активация антиоксидантной системы, приводящая к повышению адаптационных возможностей организма, является результатом установленных при исследованиях параметров и режима действия магнитных полей. Выявлено, что увеличение показателей продолжительности жизни животных-опухоленосителей связано с инициацией гибели опухолевых клеток по типу апоптоза.

Защищаемые положения.

2. Активация антиоксидантной системы клеток печени и костного мозга животных-опухоленосителей происходит в результате действия комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей, обладающих цитотоксическим действием на опухолевые клетки и цитопротекторным - на здоровые.

Получено положительное решение от 19 января 2007 г. о выдаче патента на изобретение «Способ инициации гибели опухолевых клеток», заявка №2006101192/14(001290).

Основные положения работы докладывались на I Всероссийской конференции токсикологов, Санкт-Петербург, 1995 г.; VII Всероссийском симпозиуме «Коррекция гомеостаза», Красноярск, 1996 г.; IV симпозиуме Японо-Российского Фонда медицинского обмена, Иркутск, 1996 г.; III Российско-Китайском симпозиуме «Лазерные технологии», Красноярск, 1996 г.; VIII Международном симпозиуме «Гомеостаз и окружающая среда», Красноярск, 1997 г.; Международном симпозиуме «Реконструкция гомеостаза», Красноярск, 1998 г.; VI Русско-Японском медицинском симпозиуме, Хабаровск, 1998; Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Достижения науки и техники - развитию сибирских регионов», Красноярск, 1999, VII Японо-Российском медицинском симпозиуме, Хиросаки, 1999 г., научной конференции «Актуальные проблемы патофизиологии», Санкт-Петербург, 1999 г., VIII Российско-Японском медицинском симпозиуме, Благовещенск, 2000 г.; IX Японо-Российском медицинском симпозиуме, Каназава, 2001 г.; межвузовской конференции молодых ученых «Актуальные проблемы патофизиологии», Санкт-Петербург, 2003 г.; международном симпозиуме «Гомеостаз и экстремальные состояния», Красноярск, 2003 г.; III Всероссийской конференции с международным участием, посвященной 175-летию со дня рождения Ф.В.Овсянникова, Санкт-Петербург, 2003 г.; международной конференции «Окружающая среда и здоровье», Санкт-Петербург, 2003 г.; X Российско-Японском международном симпозиуме, Якутск, 2003 г.; международном симпозиуме «Физическая культура и спорт, формирование здоровья и здоровьесбере-гающие технологии в системе образования: опыт, проблемы, исследования и перспективы», Красноярск, 2006.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 243 странице машинописного текста и состоит из введения, 5 глав, выводов и списка литературы. Работа иллюстрирована 62 рисунками и 73 таблицами. Список литературы представлен 400 источниками, из которых 159 отечественных и 241 зарубежных.

Заключение Диссертация по теме "Экология", Сергеева, Екатерина Юрьевна

ВЫВОДЫ

1. Действие лазерного излучения с длиной волны 533 нм обладает мембрано- и цитотоксическим эффектом на клетки асцитной карциномы Эрлиха, клетки костного мозга и печени как мышей-опухоленосителей, так и здоровых мышей, инициируя их гибель путем некроза.

3. Повышение жизнеспособности клеток костного мозга и печени как мышей с асцитной карциномой Эрлиха так и здоровых мышей происходит при действии комбинированных постоянного и низкочастотного переменного магнитных полей, что связано с активацией ферментов ан-тиоксидантной системы в этих клетках.

194

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Сергеева, Екатерина Юрьевна, Красноярск

1. A.c. 826587 СССР, МКЛ3 А 61 N 1/42. Магнитотерапевтический аппарат./ Д.А. Синицкий. №1543649/28-13; опубл. 15.02.82, Бюл.№6. - 2 с.

2. Абезгауз, A.M. Отравления угарным газом / A.M. Абезгауз. Л.: Медицина, 1977 - 186с.

3. Акимов, A.A. Апоптоз и лучевая терапия злокачественных новообразований / A.A. Акимов, С.Д. Иванов, К.П. Хансон // Вопр. онкологии. 2003. -№3. - С.261-269.

4. Активация молекулярного кислорода инфракрасным лазерным излучением в аэробных системах, не содержащих пигментов. / A.A. Красновский, H.H. Дроздова, A.B. Иванов и др. // Биохимия.-2003.-№ 9.-С. 1178 1182.

5. Активация поли (АДФ рибозо) полимеразы ингибирует апоптоз тимоцитов, вызванный коротковолновым ультрафиолетовым излучением / В.А. Долгачев, В.Н. Афанасьев, H.H. Долгачева и др. // Биофизика.- 2000,- № 5,- С. 894 - 898.

6. Барабой В.А. Механизмы стресса и перекисное окисление липи-дов / В.А. Барабой // Успехи соврем, биологии. 1991. - №6. -С.923 - 931.

7. Белецкий, И. П. Пути передачи цитотоксического сигнала рецепторами семейства TNF-Rs / И.П. Белецкий, А.Б. Мошникова, О.В. Прусакова // Биохимия. 2002. -№ 3. - С. 377-395.

8. Бинги, В.Н. Вращение биологических систем в магнитном поле, расщепление спектров некоторых магнитобиологических эффектов / В.Н. Бинги // Биофизика. 2000. -№4. - С.757-759.

9. Бинги, В.Н. Стохастический резонанс магнитосом, закрепленных в цитоскелете / В.Н. Бинги, Д.С. Чернавский // Биофизика. 2005. -№4. - С.684-688.

10. Биохимические основы патологических процессов / под ред. Е.С. Северина. М.: Медицина, 2000. - 304с.

11. Блохин, Д.Ю. Программированная гибель клеток в механизмах циторедуктивной терапии опухолевых заболеваний / Д.Ю. Блохин // Патогенез. 2004. - № 1. - С. 54-60.

12. Болдырев, A.A. Антиоксидантные системы в тканях мышей линии SAM, характеризующейся ускоренным старением / A.A. Болдырев, М.О. Юнева, Е.В. Сорокина //Биохимия. 2001. -№10.-С.1430-1438.

13. Букина, JI.П. Спектрофотометрическое определение карбок-сигемоглобина / Л.П. Букина, Л.И. Ушакова // Судеб.-мед. экспертиза.- 1979.- №2,- С. 18-23.

14. Бурлакова, Е.Б. Система окислительно-восстановительного гомеостаза при радиационно индуцируемой нестабильности генома / Е.Б. Бурлакова, В.Б. Михайлов, В.К. Мазурик // Радиоэкология. - 2001. - №5. - С.489-499.

15. Бурлакова, Е.Б. Сверхслабые воздействия химических соединений и физических факторов на биологические системы / Е. Б. Бурлакова, A.A. Конрадов, Е.Л. Мальцева //Биофизика. 2004. -№ 3. - С. 551-564.

16. Бышевский, А.Ш. Влияние антиоксидантов на интенсивность ПОЛ, агрегацию тромбоцитов модифицированную прооксидан-том, тромбином или антиагрегантом / А.Ш. Бышевский, С.Л. Га-лян, И.А. Дементьева // Здравоохранение Башкоркостана. 1997. - №3. - С.11-14.

17. Вайман, A.B. Цитохромы р450 семейства 1 в эмбриональной клеточной культуре крысы при иммортализации вирусом Рауше-ра / A.B. Вайман, Н.П. Щербак, В.А. Кобляков // Биохимия,-2004.-№ 1.-С. 380 385.

18. Ванаг, В.К. Первичные механизмы действия магнитных полей и спиновые эффекты, биологические эффекты электромагнитных полей. Вопросы их использования и нормирования / В.К. Ванаг, А.Н. Кузнецов. Пущино, 1989.- С. 15 - 49.

19. Вашаков, Г.А. Структурно функциональные изменения гемоглобина человека, индуцированные уф - светом и серотонином / Г.А. Вашаков // Биофизика,- 2001.- № 1.- С. 27 - 31.

20. Введение в биомембранологию / под ред. A.A. Болдырева. -М.: Изд-во МИ, 1990. 127 с.

21. Введение в молекулярную медицину / под ред. М. А. Пальце-ва. М.: Медицина, 2004. - 496 с.

22. Взаимосвязь между активными формами кислорода и кальцием в живых клетках / A.B. Гордеева, P.A. Звягильская, Ю.А. Jla-бас // Биохимия. 2003. - №10. - С.1318-1322.

23. Видовая специфичность реакции бактерий на магнитное поле частотой 50 Гц / В.И. Лобышев, Д.И. Никитин, Л.Е. Никитин и др. // Биофизика,- 2003.- № 4,- С. 673 677.

24. Винокуров, М.Г. Ионы ртути ингибируют апоптоз нейтрофи-лов человека, индуцированный ультрафиолетовым излучением диапазона с / М.Г. Винокуров, М.М. Юринская, В.А. Печатников // Биофизика,- 2002,- № 4.- С. 683 685.

25. Владимиров, Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах / Ю.А. Владимиров, А.И. Арчаков. М.: Наука, 1972. - 252с.

26. Владимиров, Ю.А. Свободные радикалы и антиоксиданты / Ю.А. Владимиров // Вестн. РАМН. 1998. -№7. - С.43-51.

27. Владимиров, Ю.А. Фотобиологические основы терапевтического применения лазерного облучения / Ю.А. Владимиров, А.Н. Осипов, Г.И. Клебанов // Биохимия,- 2004.- Вып. 1,- С. 103 -113.

28. Влияние ингибиторов цитоскелетных структур на развитие апоптоза, индуцированного фактором некроза опухолей / JI.B. Домнина, О.Ю. Иванова, Б.В. Черняк, и др. // Биохимия.- 2002 -№ 7,-С. 890-900.

29. Влияние крайневысокочастотного электромагнитного излучением низкой интенсивности на показатели гуморального иммунитета здоровых мышей / К.В. Лушников, А.Б. Гапеев, В.Б. Садовников и др. // Биофизика.- 2001.- № 4.- С. 753 760.

30. Влияние миллиметровых волн на иммунную систему мышей с экспериментальными опухолями / Е.Г. Новоселова, В.Б. Огай, O.A. Синотова и др. // Биофизика,- 2002.- № 5,- С. 933-942.

31. Влияние низкоинтенсивных электромагнитных волн сантиметрового диапазона на уровень антителообразования у мышей / О.В. Глушкова, Е.Г. Новоселова, В.Б. Огай и др. // Биофизика.-2001,- № 1.-С. 126-130.

32. Влияние переменного магнитного поля крайне низкой частоты на метаболические процессы в печени животных с разными индивидуально типологическими особенностями / З.А. Овечки-на, B.C. Мартынюк, С.Б. Мартынюк и др. // Биофизика,- 2001.-№ 5.-С. 915-918.

33. Влияние слабых магнитных полей на свойство ряда белков и полиаминокислот образовывать комплексы с ДНК / В.В. Новиков,

34. B.В. Кувичкин, Н.И. Новикова и др. // Биофизика,- 2000 № 2 —1. C. 240-244.

35. Влияние электромагнитных волн сантиметрового диапазона на продукцию фактора некроза опухолей и интерлейкина 3 иммунизированных мышей / O.A. Синотова, Е.Г. Новоселова, В.Б. Огай и др. // Биофизика.- 2002,- № 4.- С. 78-82.

36. Галицкий, В.А. Канцерогенез и механизмы внутриклеточной передачи сигналов /В.А. Галицкий// Вопр. онкологии. 2003. -№3. - С.278-293.

37. Гапеев, А.Б. Модельный анализ особенностей действия модулированных электромагнитных полей на клеточном уровне при различных параметрах модулирующих сигналов / А.Б. Гапеев, П.А. Соколов, Н.К. Чемерис // Биофизика,- 2001.- № 4,- С. 661675.

38. Гапеев, А.Б. Модельный подход к анализу действия модулированного электромагнитного излучения на клетки животных / А.Б. Гапеев, Н.К. Чемерис // Биофизика.- 2000,- № 2,- С. 299312.

39. Гвичия, А.Ш. Морфология поверхности асцитных опухолевых клеток / А.Ш. Гвичия. Тбилиси: Мецинереба, 1983. - 306с.

40. Голиков, П. П. Оксид азота в клинике неотложных заболеваний / П. П. Голиков. М.: Медпрактика-М, 2004. - 180с.

41. Голиков, С.Н. Общие механизмы токсического действия СО / С.Н. Голиков, И.В. Саноцкий, JI.A. Тиунов.- Л.: Медицина, 1986.- 150с.

42. Дас, Д.К. Превращение сигнала гибели в сигнал выживания при редокс сигнализации / Д.К. Дас, Н.К. Молик // Биохимия-2004.-№ 1.-С. 16-24.

43. Дедов, В.Н. Действие белка ингибитора митохондриальной АТФ - фазы в интактных тимоцитах крысы и клетках асцитной карциномы Эрлиха / В.Н. Дедов, B.J1. Габай, Б.В. Черняк // Биохимия. - 1995. -№2. - С.1138-1145.

44. Демецкий, A.M. Современные представления о механизмах лечебного действия магнитных полей / A.M. Демецкий // Экспе-рим. магнитология.- 1991.- №3.- С. 6-11.

45. Диагностика и лечение окислительного стресса при остром панкреатите / Д.В. Черданцев, Ю.С. Винник, Э.В. Каспаров и др.-Красноярск: Кларетианум, 2002 202с.

46. Добрецов, Г.Е. Флуоресцентные зонды в исследовании клеток, мембран и липопротеинов/ Г.Е. Добрецов. М.:Наука, 1987. -277 с.

47. Дубинина, Е.Е. Биологическая роль супероксидного анион -радикала и супероксиддисмутазы в тканях организма / Е.Е. Дубинина // Успехи соврем, биологии. 1989. - №1. -С.3-8.

48. Егорова, А.Б. Молекулярные механизмы окислительного стресса в клетках нервной системы / А. Б. Егорова // Экстремальные состояния клеточных систем. М., 2000. - С.344-356.

49. Еремин, А.Н. Соиммобилизация СОД, каталазы и пероксида-зы / А.Н. Еремин // Прикл. биохимия и микробиология. 2001. -№1.-С.53-62.чины переменного поля / В.В. Новиков, И.М. Шейман, A.C. Лисицын и др. // Биофизика.- 2002.- № 3.- С. 564-567.

50. Заводник, И.Б. Процессы окисления гемоглобина человека / И.Б. Заводник, Е.А. Лапшина // Биохимия.- 1996.- № 1- С. 2734.

51. Заридзе, Д.Г. Канцерогенез / Д.Г. Заридзе. М.: Медицина, 2004. - 576с.

52. Зобова, С.Н. Закономерности процессов гибели и метаболизма клеток асцитной карциномы Эрлиха при комбинированном действии слабых магнитных полей (экспериментальное исследование): автореф. дис. . канд. мед. наук / С.Н. Зобова. Иркутск, 2006. - 23 с.

53. Иванов, В.В. Перспективы развития исследований клеточных и молекулярных механизмов действия химических факторов производственной среды / В.В. Иванов // Гигиена труда и проф. заболевания.- 1988,-№9.-С. 1-4.

54. Иванов, В.В. Типовые патологические факторы в действии химических факторов окружающей среды /В.В. Иванов // Патол. физиология и эксперим. терапия.- 1989.- №6.- С. 8-11.

55. Ивков, В.Г. Липидный слой биологических мембран / В.Г. Ивков, Г.Н. Берестовский.-М.: Наука, 1982.- 224с.

56. Измерения в соотношении мембранносвязанной и растворимой форм CD95 (Fas) при отборе опухолевых клеток in vivo / A.B. Пирогов, С.Г. Аббасова, H.A. Дьякова и др. // Биохимия.- 2002,-№ 2.- С. 286 292.

57. Глушкова, Е.Г. Новоселова, O.A. Синотова и др. // Биофизика,-2003.-№ 2.-С. 281-288.

58. Иммуномодулирующее действие низкоинтенсивных электромагнитных волн на продукцию фактора некроза опухолей у мышей с различной скоростью опухолевого роста / О.В. Глушкова, Е.Г. Новоселова, O.A. Синотова, и др. // Биофизика- 2002.- № 2.-С. 376-381.

59. Ингибирование растворенной и соиммобилизованой с катала-зой СОД полидисульфидом галловой кислоты / А.Н. Еремин, Ю.П. Лосев, Д.Н. Метелица // Биохимия. 1997. - №7. - С.897-904.

60. Индукция апоптоза с миокарде в условиях аноксии. / В.Б. Сапрунова, С.А. Казимирчук, A.A. Тонынин, и др. // Биохимия.-2002.-№ 2,-С. 293-302.

61. Иржак, Д.И. Изменение физико химических и функциональных свойств гемоглобина человека под влиянием лазерного облучения in vitro / Д.И. Иржак, Е.А. Зотова, С.А. Мамаева // Бюл. эксперим. биологии и медицины - 1997,- №1.- С. 35-37.

62. Исследование перехода между спиновыми состояниями железа в миоглобине: анализ рентгеновского поглощения / A.B. Сол-датов, Г.Э. Яловега, Г.Ю. Смоленцев и др. // Биофизика 2001.-№ 4,- С. 595-600.

63. Исследование функционального состояния синтетического аппарата лимфоцитов крови при действии слабых низкочастотных магнитных полей / H.A. Карнаухова, Л.А. Сергиевич, Л.П. Барсукова и др. // Биофизика,- 2000.- №4,- С. 716-722.

64. Казьмин, С.Д. Влияние гидрокортизонацетата на углеводный обмен клеток асцитного рака Эрлиха / С.Д. Казьмин, Е.А. Баглей // Биохимия.- 1971,- № 4.- С. 816-821.

65. Казьмин, С.Д. Влияние моновалентных катионов на синтез и кинетику распада РНК в клетках рака Эрлиха. / С.Д. Казьмин, М.И. Данко, В.Г.Пинчук // Биохимия 1982,- №7,- С. 1165 -1171.

66. Карнаухов, A.B. Диссипативные структуры в слабых магнитных полях / A.B. Карнаухов // Эксперим. биофизика,- 2000.-№6.-С. 1009-1014.

67. Клебанов, Г.И. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения красного диапазона на активность супероксиддисмутазы макрофагов / Г.И. Клебанов, Е.А. Полтанов, Ю.А. Владимиров // Биофизика,- 2003. № 3.- С. 462-473.

68. Козлов, Ю.П. Свободные радикалы и их роль в нормальных и патологических процессах / Ю.П. Козлов. М.: МГУ, 1973. -175с.

69. Кольцов, Ю.В. Двухступенчатое воздействие на биологические объекты инфракрасного лазерного и микроволнового излучений. / Ю.В. Кольцов, В.Н. Королев, С.А. Кусакин // Биофизика.- 1999.-№ 2,-С. 378-381.

70. Конев, C.B. Фотобиология живой клетки / C.B. Конев, И.Д. Волотовский.-JI.: Наука, 1979 186с.

71. Конин, К.П. Мишени действия онкогенов и опухолевых су-прессоров: ключ к пониманию базовых механизмов канцерогенеза / К.П. Конин // Биохимия. 2000. - Т.65. - С.5-33.венной резистентности / Н.П. Коновалова // Вопр. онкологии. -2003.-№1. С. 71-75.

72. Красновский, A.A. Фотодинамическое действие и синглетный кислород. / A.A. Красновский // Биофизика.- 2004.- № 2.- С. 305321.

73. Лазо, В.В. Влияние некоторых физических параметров импульсного лазерного излучения на кинетику пролиферации ас-цитного рака Эрлиха / В.В. Лазо, К.Г. Москалик // Эксперим. онкология.- 1983 №2.- С. 51-54.

74. Лукьянова, Н.Ю. Роль генов р53 и bcl-2 в апоптозе и лекарственной резистентности опухолей / Н.Ю. Лукьянов, Г.И. Кулик, В.Ф. Чехун // Вопр. онкологии. 2000. -№2. - С. 121-128.

75. Лушников, К.В. Влияние крайне высокочастотного электромагнитного излучения низкой интенсивности на показатели гуморального иммунитета здоровых мышей / К.В. Лушников // Биофизика. 2001. - Т.46, №4. - С.753-760.

76. Лущак, В.И. Окислительный стресс и механизмы защиты от него у бактерий / В.И. Лущак // Биохимия. 2001. - №5. - С.592-607.

77. Марков, K.M. Окись азота и окись углерода новый класс сигнальных молекул / K.M. Марков // Успехи физиол. наук.-1996.-№3.-С. 29-32.

78. Мартышек, B.C. Влияние экологически значимого переменного магнитного поля на метаболические параметры в головном мозге животных /B.C. Мартышек, С.Б. Мартынюк // Биофизика.-2001.-№ 5.-С. 910-914.

79. Маршал, JI. Бездетная, Ф. Гимя // Биохимия 2004 - Вып. 1- С. 57-63.

80. Матушкин, Ю.Г. Особенности эволюции цитохромов р450 / Ю.Г. Матушкин, И.Н. Морозова, П.С. Морозов // Биофизика-1999.-№4.-С. 624-627.

81. Матюшин, Б.Н. Активность антиоксидантных ферментов в крови при хронических повреждениях печени / Б.Н. Матюшин // Вопр. мед. химии. 1995. - №1. - С.54-56.

82. Мелыцикова, Е.Б. Биохимия окислительного стресса: окси-данты и антиоксиданты / Е.Б. Мелыцикова, Н.К. Зенков, С.М. Шергин. Новосибирск:Наука, 1994. - 203с.

83. Меныцикова, Е.Б. Антиоксиданты и ингибиторы радикальных окислительных процессов / Е.Б. Меныцикова, Н.К. Зенков // Биохимия. 2000. - № 4. - С.485-503.

84. Метелица, Д.И. Активация кислорода ферментативными системами / Д.И. Метелица. М.: Наука, 1982. - 155с.

85. Молекулярно-клеточные механизмы действия низкоинтенсивного лазерного излучения / Ю.А. Владимиров, Г.И. Клебанов, Г.Г. Борисенко и др. // Биофизика,- 2004,- № 2,- С. 339-350.

86. Москалик, К.Г. О влиянии гидрокортизона и некоторых других адаптогенов на гематогенную диссеминацию клеток опухоли Эрлиха / К.Г. Москалик // Патол. физиология и эксперим. терапия.- 1970.- № 5.- С. 73-74.

87. Музалевская, Н.И. Противоопухолевое действие слабого сверхнизкочастотного стохастического магнитного поля со спектром 1/f / Н.И. Музалевская, В.М. Урицкий // Биофизика. 1997. -№4.-С. 961-970.

88. Новик, A.A. Апоптоз / A.A. Новик, Т.А. Камилова, В.Н. Цыган // Введение в молекулярную биологию канцерогенеза / под. ред. Ю.Л. Шевченко. М.: ГЭОТАР-МЕД, 2004. - 224 с.

89. Новиков, В.В. Влияние слабых комбинированных постоянного и переменного низкочастотного магнитных полей на собственную флуоресценцию ряда белков в водных растворах / В.В. Новиков, В.В. Кувичкин, Е.Е. Фесенко // Биофизика.- 1999.- № 2 — С. 224-230.

90. Новиков, В.В. Гидролиз ряда пептидов и белков в слабых комбинированных постоянном и низкочастотном переменном магнитных полях / В.В. Новиков, Е.Е. Фесенко // Биофизика-2001.-№2.-С. 235-241.

91. Новиков, В.В. Кооперативные эффекты при действии слабых магнитных полей на опухолевый процесс in vivo / В. В. Новиков, Н. И. Новикова, А.К. Качан // Биофизика. 1996. -№ 4. - С. 934938.

92. Новиков, В.В. Кооперативные эффекты при действии слабых магнитных полей на опухолевый процесс in vivo / B.B. Новиков, Н.И. Новикова, А.К. Качан // Биофизика.- 1996,- № 4,- С. 934939.

93. Новиков, B.C. Программированная клеточная гибель / B.C. Новиков.- СПб.: Наука, 1996.- 186с.

94. О локальном сопряжении процессов дыхания и фосфорили-рования в митохондриях печени крысы / И.М. Солодовникова, A.A. Тоньшин, В.И. Юрков и др. // Биофизика.- 2004.- Вып.1- С. 47-56.

95. Панченко, Л.Ф. Роль пероксисом в патологии клетки / Л.Ф. Панченко, A.M. Герасимов, В.Д. Антоненков. М.: Медицина, 1981.-208с.

96. Патрушев, В.К. Роль оксида азота в иммуносупрессорной и противоопухолевой активностях естественных супрессорных клеток (экспериментальное исследование): автореф. дис. . канд. мед. наук / В.К. Патрушев. Томск, 2004. - 22с.

97. Перераспределение ионов Ca в клетках асцитной карциномы Эрлиха под действием дезоксиглюкозы и ингибиторов внутриклеточных Са2+ транспортирующих систем / Ю.В. Евдотьенко,

98. B.В. Теплова, С.С. Седаш и др. // Биохимия. 1995. -№3.1. C.1336-1343.

99. Повреждение цитоскелета и клеточных мембран при апоптозе / А.Б. Егорова, Ю.А. Успенская, C.B. Михуткина и др. // Успехи соврем, биологии,- 2001,-№5,-С. 502-510.

100. Подавление неспецифической резистентности организма при действии крайневысокочастотного электромагнитного излучения низкой интенсивности / А.Б. Гапеев, М.П. Коломыцева, В.Б. Садовников и др. // Биофизика.- 2002,- №1,- С. 71-77.

101. Подавление программируемой смерти внутриклеточным CAMP не связано с экспрессией генов, кодирующих ингибитор апоптоза / С. Тора, Г.Г. Ряжский, Н.В. Максимова и др. // Биохимия.-2002,-№ 2,-С. 303-310.

102. Программированная клеточная гибель / под ред. B.C. Новикова. СПб.: Наука, 1996. - 276 с.

103. Проскуряков, С .Я. Оксид азота в неопластическом процессе / С. Я. Проскуряков // Вопр. онкологии. 2001. -№ 3. - С. 257-269.

104. Распад амилоидного ß-протеина под действием слабых магнитных полей / Е.Е. Фесенко, В.В. Новиков, Н.В. Бобкова и др. // Биофизика.- 2003.- № 2.- С. 217-220.

105. Реутов, В.П. Проблема оксида азота в биологии и медицине и принцип цикличности: Ретроспективный анализ идей, принципов и концепций / В.П. Реутов. М. - Едиториал УРСС, 2003. - 96с.

106. Реутов, В.П. Цикл оксида азота в организме млекопитающих и принцип цикличности / В.П. Реутов // Биохимия.- 2002,- № 3.-С. 353-376.

107. Роль фактора некроза опухоли альфа и активации сфинго-миелинового цикла в индукции апоптоза в условиях ише-мии/реперфузии печени / A.B. Алесенко, Э.И. Гальперин, Л.Б. Дудник и др. // Биохимия,- 2002,- № 12.- С. 1632-1642.

108. Романенко, A.M. Апоптоз и рак / A.M. Романенко // Арх. патологии,- 1996,-№3,-С. 18-21.

109. Самарцев, В.Н. Термодинамическая характеристика путей свободного окисления в митохондриях печени / В.Н. Самарцев, Л.С. Полищук, А.П. Пайдыганов // Биофизика.- 2003.- №1,- С. 49-53.

110. Сидоренко, В.М. Механизм влияния слабых электромагнитных полей на живой организм / В.М. Сидоренко // Биофизика.-2001.-№3.-С. 500-504.

111. Системы комплексной электромагнитотерапии / A.M. Беркутов, Г.А. Жулев, Г.А. Кураев и др.-М.: Бином, 2000. 186с.

112. Слобожанина, Е.И. Структурная модификация мембран эритроцитов при окислительном стрессе активность мембрансвязы-вающей NADP метгемоглобинредуктаза / Е.И. Слобожанина, JI.M. Лукьяненко, H.H. Козлова // Биофизика. - 2000. - № 2. -С.288-292.

113. Смирнова, Л.П. Зависимость активности антиоксидантных ферментов от выраженности процессов пролиферации и типа тканевой организации карциномы Эрлиха / Л.П. Смирнова, И.В. Кондакова // Биомед. химия. 2004. - №5. - С.566-575.

114. Снижение интенсивности клеточного иммунного ответа и неспецифического воспаления при действии электромагнитного излучения крайне высоких частот / К.В. Лушников, А.Б. Гапеев, Ю.В. Шумилина и др. // Биофизика,- 2003,- №5,- С. 918-925.

115. Стальная, И.Д. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты / И.Д. Стальная, Т.Г. Гари-швили // Современные методы в биохимии / под ред. В.Н. Орехо-вича. М., 1977. - С.66-68.

116. Стародуб, Н.Ф. Гетерогенная система гемоглобина / Н.Ф. Стародуб, В.И. Назаренко,-Киев: Наук, думка, 1987.- 325с.

117. Степаненко, И.Л. Интерференция генных сетей апоптоза и ответа на тепловой шок / И.Л. Степаненко // Молекуляр. биология.- 2001.- № 6,- С. 1063-1071.

118. Стимуляция естественных киллерных клеток мышей, подвергнутых действию слабых электромагнитных волн сантиметрового диапазона. / Е.Е. Фесенко, Е.Г. Новоселова, Н.В. Семилетова и др. //Биофизика,- 1999. №4.- С. 737-741.

119. Странадко, Е.Ф. Современное состояние проблемы фотодинамической терапии рака и неопухолевых заболеваний / Е.Ф. Странадко, A.B. Иванов // Биофизика.- 2004.- №2,- С. 380-383.

120. Структура и электронные свойства комплексов тема с различными лигандами / Т.А. Романова, A.A. Кузубов, И.О. Краснов и др. // Биофизика.- 2003.- Т. 48,- С. 613-627.

121. Тарасьев, М.Ю. Фотопревращения форм гемоглобина в буферных растворах под действием ультрафиолетового и видимого излучений. / М.Ю. Тарасьев, В.В. Рыльков // Биохимия.- 1991-№ 2.- С. 32-33.

122. Темурьянц, H.A. Роль некоторых компонентов диффузной нейроэндокринной системы в реализации магнитобиологических воздействий / H.A. Темурьянц, A.B. Шехоткин, B.C. Мартынюк // Биофизика.-2001.-Вып.5.-С. 901-904.

123. Теплова, В.В. Цитотоксическое действие ингибиторов систем энергообеспечения на клетки асцитной карциномы Эрлиха / В.В. Теплова, П.Р. Макаров, A.A. Кудрявцев // Известия РАН. 1999. - №1. - С.5-11.

124. Тиунов, JI.A. Токсикология окиси углерода / JI.A. Тиунов, В.В. Кустов,- М.: Медицина, 1980,- 276с.

125. Торчинский, М.Ю. Сера в белках / М.Ю. Торчинский,- М.: Наука, 1977. 302с.

126. Тронов, B.JI. Роль эксцизильных механизмов репарации ДНК в индукции апоптоза / В.Л. Тронов, Е.М. Константинов, И.И. Крамаренко // Биохимия,- 2002,- № 7 с. 882-889.

127. Уайт, A.M. Основы биохимии: пер. с англ. / A.M. Уайт.-М.:Мир, 1981.-Т.З. 379с.

128. Увеличение образования оксида азота и супероксида под действием сукцината А-токоферола, его способность вызывать апоп-тоз и противораковые свойства / К. Фукузава, К. Когуре, М. Мо-рита и др. // Биохимия,- 2004,- № 1.- С. 64-73.

129. Углекислый газ универсальный ингибитор генерации АФК клетками / А.Х. Коган, C.B. Грачев, C.B. Елисеева и др. // Известия РАН. Сер. Биология. - 1997. - №2. - С.204-217.

130. Урманский, С.Р. Апоптоз: молекулярные и клеточные механизмы / С.Р. Урманский // Молекуляр. биология.- 1996,- №3 С. 487-502.

131. Фильченков, A.A. Каспазы: регуляторы апоптоза и других клеточных пункций / A.A. Фильченков // Биохимия.- 2003 № 4.- С. 453-466.

132. Флуоресцентные зонды в исследовании биологических мембран / Ю.А. Владимиров, Г.Е. Добрецов, H.H. Петров и др. . -М.:Наука, 1980. - 214 с.

133. Фоменко, Е.Ю. Метаболические изменения в лимфоцитах и опухолевых клетках у мышей в динамике роста асцитной карциномы Эрлиха (экспериментальное исследование): автореф. дис. . канд. мед. наук / Е.Ю. Фоменко. Иркутск, 2006. - 23 с.

134. Фотовосстановление флавоцитохрома р450 2в4 / В.В. Шу-мянцева, Т.В. Булко, Р.Д. Шмид и др. // Биофизика,- 2000 № 6-С. 1011-1018.нитных полей / Е.М. Франциянц, А.И. Шихлярова, Т.И. Кучерова // Вопр. онкологии. 2002. -№2. - С.216-222.

135. Херрингтон, С. Выделение ДНК. Молекулярная клиническая диагностика. Методы: пер. с англ. / С. Херрингтон, Дж. Макги,-М.: Мир, 1999. 504 с.

136. Шапот B.C. Биохимические аспекты опухолевого роста / B.C. Шапот. М.: Медицина, 1974. - 304с.

137. Шлыгин, В.В. Влияние магнитного поля на проведение возбуждения в иннервирующем кровеносный сосуд нервном волокне. / В.В. Шлыгин, А.П. Тюляев, Г.В. Максимов // Биофизика.-2001.-№3.-С. 537-540.

138. Щепина, J1.A. Апоптоз клеток Hela и антиапоптозное действие онкобелка Вс1-2 не зависят от дыхания и мембранного потенциала митохондрий / JI.A. Щепина // Биохимия. 2002. -№2. -С.265-270.

139. Wong, C. Brandts et al. // Mol. Cell. Biol. 2000. - Vol. 20. -P.6860-6871.

140. Accumulation of hydrogen peroxide is an early and crucial step for paclitaxel-induced cancer cell death both in vitro and in vivo / J. Alexandre, F. Batteux, C. Nicco et al. // Int. J. Cancer. — 2006. -Vol.119. -P.41-48.

141. Acinus is a caspase-3-activated protein required for apoptotic chromatin condensation / S. Sahara, M. Aoto, Y. Eguchi et al. // Nature. 1999. - Vol. 401. - P.168.

142. Activation of Akt (protein kinase B) in mammary epithelium provides a critical cell survival signal required for tumor progression / J. Hutchinson, J. Jin, R.D. Cardiff et al. // Mol. Cell. Biol. 2001. -Vol. 21. - P.2203-2212.

143. Activation of an MDM2-specific caspase by p53 in the absence of apoptosis / R. Pochampally, B. Fodera, L. Chen et al. // J. Biol. Chem. 1999. - Vol. 274. - P.271-277.

144. Activation of membrane-associated procaspase-3 is regulated by Bcl-2 / J.F. Krebs, R.C. Armstrong, A. Srinivasan et al. // J. Cell Biol. 1999. - Vol. 144. - P.915-926.

145. Activation of neuronal caspase-3 by intracellular accumulation of wild-type -Alzheimer amyloid precursor protein / T. Uetsuki, K. Takemoto, Y. Nishimura et al. // J. Neurosci. 1999. - Vol. 19. -P.6955-6964.

146. Activation of NF-kB by RANK requires tumour necrosis receptor associated factor (TRAF) 6 and NF-kB inducing kinase / B.G. Dar-nay, J. Ni, P.A. Moore et al. // J. Biol. Chem. 1999. - Vol. 274. -P.724.

147. Activation of nitric oxide synthase in endothelial cells by Akt-dependent phosphorylation / F. Dimmeler, I. Fleming, B. Fisslthaler et al. // Nature. 1999. - Vol. 399. - P.601-605.

148. Adenoviral gene transfer of activated phosphatidylinositol 3'-kinase and Akt inhibits apoptosis of hypoxic cardiomyocytes in vitro // T. Matsui, L. Li, F. de Monte et al. // Circulation. 1999. - Vol. 100. -P.2373-2379.

149. Administration of a CO-releasing molecule at the time of reperfusion reduces infarct size in vivo. / Y. Guo, A.B. Stein, W.J. Wu et al. // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2004. - Vol.286. - P. 16491653.

150. Agar, N.S. Erythrocyte catalase: a somatic oxidant defens? / N.S. Agar // J. Clin. Invest. 1986. - Vol. 77. - P.319-321.

151. Akt phosphorylates and negatively regulates apoptosis signal-regulating kinase 1 / A.H. Kim, G. Khursigara, X. Sun et al. // Mol. Cell Biol. 2001. - Vol. 21. - P.893-901.

152. Akt phosphorylation site found in human caspase-9 is absent in mouse caspase-9 / E. Fujita, A. Jinbo, H. Matuzaki et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1999. - Vol. 264. - P.550-555.

153. Akt protein kinase enhances human telomerase activity through phosphorylation of telomerase reverse transcriptase subunit / S.S. Kang, T. Kwon, D.Y. Kwon et al. // J. Biol. Chem. 1999. - Vol. 274.-P.85-90.

154. Akt regulates cell survival and apoptosis at a postmitochondrial level / H. Zhou, X.M. Li, J. Meinkoth et al. // J. Cell Biol. 2000. -Vol. 151. -P.483-494.

155. Akt/Protein kinase B inhibits cell death by preventing the release of cytochrome c from mitochondria / S.G. Kennedy, E.S. Kandel, T.K. Cross et al. // Mol. Cell Biol. 1999. - Vol. 19. - P.5800-5810/

156. Alexander, H.R. A phase I-II study of isolated hepatic perfusion using melphalan with or without tumor necrosis factor for patients with ocular melanoma metastatic to liver / H.R. Alexander // Clin. Cancer Res. 2000. - Vol.6, N 8. - P.3062-3070.

157. Ames, B.N. Endogenous DNA damage is related to cancer and aging / B.N. Ames // Mutat. Res. 1989. - Vol.214. - P.41-46.

158. An APAF-1 cytochrome c multimeric complex is a functional apoptosome that activates procaspase-9 / H. Zou, Y. Li, X. Liu et al. // J. Biol. Chem. 1999. - Vol. 274. - P.549-556.

159. Angiotensin II induces carbon monoxide production in the perfused kidney: relationship to protein kinase C activation / P. Li, H. Jiang, L. Yang et al. // Am. J. Physiol. Renal. Physiol. 2004. - Vol. 287.-P.914-920.

160. Antiapoptotic action of carbon monoxide on cultured vascular smooth muscle cells / X.M. Liu, G.B. Chapman, K.J. Peyton et al. // Exper. Biol. Med. 2003. - Vol. 228. - P.572-575.

161. Apaf-1 and caspase-9 in p53-dependent apoptosis and tumor inhibition / M.S. Soengas, R.M. Alarcon, H. Yoshida et al. // Science. -1999. Vol. 284. -P.156.

162. Apoptotic cytosol facilitates Bax translocation to mitochondria that involves cytosolic factor regulated by Bcl-2 / M. Nomura, S. Shimizu, T. Ito et al. // Cancer Res. 1999. - Vol. 59. - P.5542.

163. Apoptotic nuclear morphological change without DNA fragmentation / H. Sakahira, M. Enari, Y. Ohsawa et al. // Curr. Biol. 1999. -Vol. 9. - P.543.

164. Apoptotic signaling pathways induced by nitric oxide in human lymphoblastoid cells expressing wild-type or mutant p53. / O.Q. Li, A.I. Robles, C.L. Hanigan et al. // Cancer Res. 2004. - Vol.64. -P.3022-3029.

165. ATP-dependent steps in apoptotic signal transduction. / Y. Egu-chi, A. Srinivasan, K.J. Tomaselli et al. // Cancer Res. 1999. - Vol. 59.-P.2174.

166. Autocrine motility factor signaling induces tumor apoptotic resistance by regulations Apaf-1 and Caspase-9 apoptosome expression / A. Haga, T. Funasaka, Y. Niinaka et al. // Int. J Cancer. -2003. Vol. 107 N 5. - P.707-714.

167. BAD Ser-155 phosphorylation regulates BAD/Bcl-x(L) interaction and cell survival / Y. Tan, M.R. Demeter, H. Ruan et al. // J. Biol. Chem. 2000. - Vol. 275. - P.865-869.

168. Baisch, H. Relationship between cell kinetics and apoptotic effects in TNF alpha and IFN-gamma-treated humam tumour cell lines. Eur. / H. Baisch // Cytokine Netw. - 2001. - Vol.12, N 4. -P.604-613.

169. Barkoudah, E. The permissive role of endothelial NO in CO-induced cerebrovascular dilation / E. Barkoudah, J.H. Jaggar, C.W. Leffler // Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. 2004. - Vol.287. -P.1459-146.

170. Bartsch, H.H. Intralesional application of recombinant human tumor necrosis factor alpha induces local tumor regression in patients with advanced malignancies / H.H. Bartsch // Eur. J. Cancer Clin. Oncol. 1989. - Vol.25, N 2. - P.287-291.

171. Bato, B. Modulation of Akt kinase activity by binding to Hsp90 / B. Bato, N. Rujita, I. Ilsuruo // Proc. Natl. Acad. Sei. USA. 2000. -Vol. 97.-P.832-837.

172. Bauer, M. Heme oxygenase-1: redox regulation and role in the hepatic response to oxidative stress / M.Bauer, I. Bauer // Antioxid. Redox. Signal. 2003. - Vol. 4. - P.749-758.

173. Bax is present as a high molecular weight oligomer / complex in the mitochondrial membrane of apoptotic cells / B. Antonsson, S. Montessuit, B. Sanchez et al. // J. Biol. Chem. 2001. - Vol. 276. -P.615-623.

174. Bcl-2 family members do not inhibit apoptosis by binding the caspase activator Apaf-1 / K. Moriishi, D.C. Huang, S. Cory et al. // Proc. Natl. Acad. Sei. USA. 1999. - Vol. 96. - P.9683.

175. BcL-2, BCL-XL sequester BH3 domain-only molecules preventing BAX- and BAK-mediated mitochondrial apoptosis / E.H. Cheng, M.C. Wei, S. Weiler et al.// Mol. Cell. 2001.-Vol. 8. - P.705-711.

176. Bcl-xL/ElB 19 kDa-interacting protein 3-like protein (Bnip3L) interacts with Bcl-2/Bcl-xL and induces apoptosis by altering mitochondrial membrane permeability / T. Imazu, S. Shimizu, S. Tagami et al. // Oncogene. 1999. - Vol. 18. - P.523.

177. Bellavite, P. The superoxide forming enzymatic system of phagocytes / P. Bellavite // Free Radic. Biol. Med. - 1988. - Vol.4. -P.225-261.

178. Bentz, B.G. Nitric oxide synthase type 3 is increased in squamons, hyperplasia, dysplasia, squamons, cell carcinoma of thehead and neck / B.G. Bentz // Ann. Otol. Rhinol. Laryngol. 1999. -Vol. 108.-P.781-787.

179. Beraud, C. Involvement of regulatory and catalytic subunits of phosphoinositide 3- kinase in NF-kappaB activation / C. Beraud, W.J. Henzel, P.A. Baeuerle // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1999. - Vol. 96. - P.429-434.

180. Bernadi, P. Mitochondria and cell death mechanistic aspects and methodological issues / P. Bernadi, L. Scorrano, R. Colonna // Eur. J. Biochem. 1999. - Vol. 264. - P.687-701.

181. Bernardi, P. Mitochondrial transport of cations: channels, exchangers, and permeability transition / P.Bernardi // Physiol. Rev. -1999.-Vol. 79, N4.-P. 1127-1155.

182. Bid induces the oligomerization and insertion of Bax into the outer mitochondrial membrane / R. Eskes, S. Desagher, B. Antonsson et al. // J. Mol. Cell. Biol. 2000. - Vol. 20. - P.929-935.

183. A. Osen-Sand, A. Nichols et al. // Cell Biol. 1999. - Vol. 144. -P.891-901.

184. Biondi, R.M. Identification of a pocket in the PDK1 kinase domain that interacts with PIF and the C-terminal residues of PKA / R.M. Biondi, P.C. Cheung, A. Casamayor et al. // EMBO J. 2000. -Vol. 19. - P.979-988/

185. Blitterswijk, W.J. Sphingolipids related to apoptosis from the point of view of membrane structure and topology / W.J. Blitterswijk //Biochem. Soc. Trans. -2001. Vol. 29. - P.819-824/

186. Blume-Jensen, P. Oncogenic kinase signaling / P.Blume-Jensen, T.Hunter //Nature. 2001. - Vol. 411. -P.355 - 365.

187. Borner, C. Apoptosis without caspases: an inefficient molecular guillotine? / C. Borner, L. Monney // Cell Death Differ. 1999. -Vol. 6. - P. 497- 507.

188. Bossy-Wetzel, E. Caspases induce cytochrome c release from mitochondria by activating cytosolic factors / E. Bossy-Wetzel, D.R. Green // J. Biol. Chem. 1999. - Vol. 274. - P.484.

189. Brown, D.A. Functions of lipid rafts in biological membranes / D.A. Brown. E. London // Annu, Rev. Cell. Dev. Biol. 1998. - Vol. 14.-P.111-136.

190. Ca -induced apoptosis through calcineurin dephosphorylation of BAD / H.G. Wang, N. Pathan, I.M. Ethell et al. // Science. 1999. -Vol. 284. -P.339.

191. Cancer statistics, 2006 / A. Jemal, R. Siegel, E. Ward et al. // CA Cancer J. Clin. 2006. - Vol.56. - P.106-130.

192. USA. 1999. - Vol. 96. - P.4240-4245.

193. Cao, L. Inhibitors of nitric oxide synthase block carbon monoxide-induced increases in cGMP in retina / L. Cao, W.D. Eldred // Brain Res. 2003. - Vol.988. - P.78-83.

194. Carbon monoxide inhalation protects rat intestinal grafts from ischemia/reperfusion injury / A. Nakao, K. Kimizuka, D.B. Stolz et al. // Am. J. Pathol. 2003. - Vol. 163, №4. - P.1587-1598.

195. Carbon monoxide inhibits t lymphocyte proliferation via caspase-dependent pathway / R. Song, R.S. Mahidhara, Z. Zhou et al. // J. Immunol. 2004. - Vol. 172, №2. -P.1220-1226.

196. Carbon monoxide neurotransmission activated by CK2 phosphorylation of heme oxygenase-2 / D. Boehning, C. Moon, S. Sharma et al. // Neuron. 2003. - Vol.40. - P.129-137.

197. Carbon monoxide protects against cardiac ischemia-reperfusion injury in vivo via MAPK and Akt-eNOS pathways / H. Fujimoto, M. Ohno, S. Ayabe et al. // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 2004. -Vol.24. -P.1848-1853.

198. Carbon monoxide protects against hyperoxia-induced endothelial cell apoptosis by inhibiting reactive oxygen species formation / X. Wang, Y. Wang, H. Kim et al.// J. Biol. Chem. 2007. - Vol. 282. -P.1718-1726.

199. Carbon monoxide protects pancreatic P-cells from apoptosis and improves islet function/survival after transplantation / L. Gunther, P.O. Berberat, M. Haga et al. // Diabetes. 2002. - Vol.51. - P.994-999.

200. Carbon Monoxide: endogenous production, physiological functions, and pharmacological applications / L. Wu, R. Wang // Pharmacol Rev. 2005. - Vol.57. - P.585-630.

201. Casano, L.M. Inactivation and degradation of Cu, Zn Superoxide Dismutase by active oxygen species in chloroplasts exposed to photooxidative stress / L.M. Casano, L.D. Gomes, H.R. Laskano // Plant and Cell Physiol. - 1997. - Vol.38, №4. - P.433-440.

202. Caspase-12 mediates endoplasmic-reticulum-specific apoptosis and cytotoxicity by amyloid-beta / T. Nakagawa, H. Zhu, N. Mon-ishima et al. // Nature. 2000. - Vol. 403. - P.98-103.

203. Caspase-8 and caspase-3 small interfering RNA decreases ische-mia/reperfusion injury to the liver in mice / J.L. Contreras, M. Vila-toba, C. Eckstein et al.// Surgery. 2004. - Vol. 136. - P.390-400.

204. Caspase-8 is required for cell death induced by expanded poly-glutamine repeats / L. Sanchez, C.J. Xu, P. Juo et al. // Neuron. -1999.-Vol. 22.-P.623-633.

205. Caspase-8-mediated apoptosis in human RPE cellslnvest / P. Yang, J.J. Peairs, R. Tano et al. // Ophthalmol. Vis. Sci. 2007. -Vol.48. -P.3341-3349.

206. Caspase-independent apoptosis induced by evening primrose extract in Ehrlich ascites tumor cells / T. Arimura, A. Kojima-Yuasa, M. Suzuki et al. // Cancer Lett. 2003. - Vol. 201, №1. - P.9-16.

207. Cell damage-induced conformational changes of the pro-apoptotic Protein Bale in vivo precede the onset of apoptosis / G.J. Grffiths, L. Dubrez, C.P. Morgan et al. // J. Cell Biol. 1999. - Vol. 144.-P.903.

208. Cell survival promoted by the Ras-MAPK signaling pathway by transcription-dependent and -independent mechanisms / A. Bonni, A. Brunet, A.E. West et al. // Science. 1999. - Vol. 286. - P.1358-1362.

209. Chan, T.O. AKT/PKB and other D3 phosphoinositide-regulated kinases: kinase activation by phosphoinositide-dependent phosphorylation / T.O. Chan, S.E. Rittenhouse, P.N. Tsichlis // Annu. Rev. Biochem-1999. Vol. 68. - P.965-1014.

210. Characterization of rat heme oxygenase-3 gene. Implication of processed pseudogenes derived from heme oxygenase-2 gene / S. Ha-yashi, Y. Omata, H. Sakamoto et al. // Gene. 2004. - Vol.336. -P.241-250.

211. A chemical perspective on the interplay between NO, reactive oxygen species, and reactive nitrogen oxide species / M.G. Espey, K.M. Miranda, D.D. Thomas et al. // Ann. N Y Acad. Sci. 2002. -Vol. 962. - P. 195-206.

212. Cholesterol impairs the adenine nucleotide translocator-mediated mitochondrial permeability transition through altered membrane fluidity / A. Colell, R. Garcia, I. Carmen et al. // J. Biol. Chem. 2003. - Vol. 278, Iss. 36. - P.928-935.

213. Christofori, G. The role of fibroblast growth factors in tomour progression and angiogenesis / G. Christofori // Tumour Angiogenesis / Eds R. Bicknell, C.E. Lewis, N.Ferra. Oxford: Oxford Univ. Press. -1996. - P.201-237.

214. The combined functions of proapoptotic Bcl-2 family members bak and bax are essential for normal development of multiple tissues / T. Lindsten, A.I. Ross, A. King et al. //Moll. Cell. 2000. - Vol. 6. -P.1389-1399.

215. Complexes of horseradish peroxidase with formate, acetate and carbon monoxide / Carlsson G.H., Nicholls P., Svistunenko D. et al. // Biochemistry. 2005. - Vol.44. - P. 635-642.

216. Conclin, K.A. Dietary antioxidants during cancer chemotherapy: impact on chemotherapeutic effectiveness and development of side effects / K.A.Conclin // Nutr.Cancer. 2000. - Vol.37. - P. 18

217. Continuous inhalation of carbon monoxide attenuates hypoxic pulmonary hypertension development presumably through activation of BKCa channels / E. Dubuis, M. Potier, R. Wang et al. // Cardiovasc. Res. 2005. - Vol.65. - P.751-761.

218. Covas, M.I. Biological variation of Superoxide Dismutase in erythrocytes and Glutation Peroxidase in whole blood / M.I. Covas, L. Coca, C. Ricos // J. Clin. Chem. 1997. - Vol.43. - P. 1991-1993.

219. Creighton, T.E. Disulfide bonds as probes of protein folding pathways / T.E. Creighton // Methods in Enzymology. 1986. -Vol.131. - P.83-135.

220. Desagher, S. Mitochondria as the central control point of apoptosis / , S. Desagher, J. C. Martinou // Trends Cell. Biol. 2000. -Vol.10, N9,-P.369-377.

221. Devasagayam, T.P. Caffeine as an antioxidant: Inhibition of lipid peroxidation induced by oxygen spicies / T.P. Devasagayam, I.P. Katman // Biochem. Biophys. Acta. Biomembranes. 1996. -Vol.1282, №l.-P.63-70.

222. Developmental neurotoxicity of carbon monoxide / M.R. Caatu, R. Cagiano, M.A. De Salvia et al. // Arch. Toxicol .- 1994 N 17 .P. 295-301.

223. Different faces of the heme-heme jxygenase system in inflammation / A.D. Frank, T.G. Wagener, V. Hans-Dieter et al. // Pharmacol. Rev. 2003. - Vol. 55. - P.551-571.

224. DNA damage and apoptosis in the immature mouse cerebellum after acute exposure to a 1 mT, 60 Hz magnetic field / J.P. McNamee, P.V. Bellier, J.R.N. McLean et al. // Mutât. Res.Genet. Toxicol. Environ. Mutagenesis. 2002. - Vol. 513, №1. -P.121-133.

225. Doxorubicin increases intracellular hydrogen peroxide in PC3 prostate cancer cells / B.A. Wagner, C.B. Evig, K.J. Reszka et al. // Arch. Biochem. Biophys. 2005. - Vol. 440. - P.181-190.

226. Effect of 7 mT static magnetic field and iron ions on rat lymphocytes apoptosis, necrosis and free radical processes / J. Jajte, J. Grze-gorczyk, M. Zmylony et al. // Trends Cell Biol. -2002.- Vol. 57, N 2.- P.107-111.

227. Effect of Heme iron valence state on the conformation of cytochrome c and its association with membrane interfaces / I.L. Nantes, M.R. Zucchi, O.R. Nascimento et al. // J. Biol. Chem. 2000,- Vol. 276, №1. -P. 153-158.

228. Effects of 50 Hz electromagnetic field exposure on apoptosis and differentiation in a neuroblastoma cell line / M.C. Pirozzoli, C. Marino, G.A. Lovisolo et al. // Bioelectromagnetics.- 2003.- Vol. 24, №1.-p.510-516.

229. Effects of a magnetic fields on the various functions of subcellular organelles and cells / I. Rumi, T. Kanno, Y. Inai et al. // Pathophysiology. 2000. - Vol. 7, №2. - P.149-152.

230. Effects of tin-protoporphyrin IX on blood flow in a rat tumor model / F.K. Amel, E.P. Vivien // Exp. Biol. Med. 2003. - Vol. 228. -P.481-485.

231. Enhanced cell death in NR-S1 tumor by photodynamic therapy; possible involvement of Fas and Fas ligand system / T. Yokota, H. Ikeda, T. Inokuchi et al. // Lasers Surg. Med. 2000. — Vol. 26, №5.1. P.449-460.

232. Equine herpesvirus-2 E10 gene product, but not its cellular homologue activates NF-kappa B transcription factor and c-Jun N-terminal kinase / M.L. Thome, F. Maritnon, K. Hofmann et al. // J. Biol. Chem. 1999. - Vol. 274. - P.9962.

233. Evan, G. Proliferation, cell cycle and apoptosis in cancer / G. Evan, K. Vousden//Nature. -2001. Vol. 411. - P. 342-348.

234. Ewhank, J.J. The molten globule conformation protein by disulfide bonds / J.J Ewhank, T.E. Creighton // Nature. 1991. - Vol.350. -P.518-520.

235. Extremely low frequency (ELF) pulsed-gradient magnetic fields inhibit malignant tumour growth in different biological levels / Z. Xinchen, Z. Husheng, Z. Congyi et al. // Cell Biol. Int. 2002. - Vol. 26, №7.-P.599-603.

236. Fadok, V.A. Apoptosis: giving phosphatidylserine recognition an assist with a twist / V.A. Fadok, P.M. Henson // Curr. Biol. - 2003. - Vol.13, N 16. - P.655-657.

237. Femtosecond near-infrared laser pulse induced strand breaks in mammalian cells / U.K. Tirlapur, K. Konig // Cell Mol. Biol. 2001. -Vol. 47. - P.131-134.

238. Femtosecond near-infrared laser pulses elicit generation of reactive oxygen species in mammalian cells leading to apoptosis-like death / U.K. Tirlapur, K. Konig, C. Peuckert et al. // Exp. Cell Res. 2001. - Vol. 263, №1. - P.88-97.

239. Forkhead transcription factors are critical effectors of cell death and cell cycle arrest downstream of PTEN / N. Nakamura, S. Ramas-wamy, F. Vazquez et al. // Mol. Cell. Biol. 2000. - Vol. 20. -P.8969-8982.

240. Gallo, O. Role of nitric oxide in angiogenesis and tumor progression in head and neck cancer / O.Gallo // J.Nat. Cancer Inst. 1998. -Vol. 90. - P.587-596.

241. Gebicki, S. Formation of peroxides in amino acids and proteins exposet to oxygen free radicals / S Gebicki, J.M. Gebicki // Biochem. J. 1993. - Vol.289. - P.743-749.

242. Gerber, M. Tumor progression and oxidant antioxidant status / M. Gerber, C. Astre, C. Segala // Cancer Lett. - 1997. - Vol. 114. -P.41-46.

243. Gershenfeld, H.K. Cloning and chromosomal assignment of a human c DNA encoding a Tcell and natural killer cell - specific trypsin - like serine protease /H.K. Gershenfeld // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1998. - Vol. 85. - P.1184-1188.

244. Ghandermarzi, M. Influence of different tipes of effectors on the kinetic parameters of suicide inactivation of catalaseby hydrogen peroxide / M. Ghandermarzi, A.A. Moosav-Movahedi // Biochem. Bio-phys. Acta. 1999. - Vol.1431. - P.30-36.

245. Gopalakrishna, R. Calcium and phospholipid-independent activation of protein kinase C by selective oxidative modification of the regulatory dormain / R. Gopalakrishna // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1989. - Vol. 86. - P.6758-6762.

246. Gotoh, T. Arginas II downregulates nitric oxide (NO) production and prevents NO-mediated apoptosis in murine macrophage-derived RAW 264.7 Cells / T. Gotoh, M. Masataka // J. Cell Biol. -1999. -Vol. 144, N3.-P.427-434.

247. Gross, A. BcL-2 family members and the mitochondria in apop-tosis / A. Gross, J.M. McDonnell, S.J. Korsmeyer // Genes Dev. -2000.-Vol. 13. P.1899-1911.

248. GW274150, a potent and highly selective inhibitor of iNOS, reduces experimental renal ischemia/reperfusion injury. / P.K. Chatter-jee, N.S.A. Patel, A. Sivarajah et al. // Kidney Int. 2003. - Vol.63. -P.853-865.

249. Haddad, P. Structral organization of the hCTLA-1 gene encoding human granzyme B / P. Haddad // Gene. 1990. - Vol. 87. - P.265-271.

250. Heather, F.A. UV-induced apoptosis is mediated independent of caspase-9 in MCT-7 cells. A model for cytochrome c resistance / A.F. Heather, M.M. Peter, L. Van Den Berg Carla // J. Biol. Chem. 2003. - Vol. 278, Iss. 46. - P.793-800.

251. Heldin, C. Signal transduction: multiple pathways, multiple options for therapy / C. Heldin // Stem Cells. 2001. - Vol. 19. - P. 295-303.

252. Heme oxygenase 1 gene transfer prevents CD95/Fas ligand-mediated apoptosis and improves liver allograft survival via carbon monoxide signaling pathway / B. Ke, R. Buelow, X.D. Shen et al. // Hum. Gene Ther. 2002. - Vol.13. - P.1189-1199.

253. Heme oxygenase inhibitor restores arteriolar nitric oxide function in Dahl rats. / F.K. Johnson, W. Durante, K.J. Peyton et al. // Hypertension. 2003. - Vol.41. - P.149-155.

254. Heme oxygenase-1 and its reaction product, carbon monoxide, prevent inflammation-related apoptotic liver damage in mice / G. Sass, M.C. Scares, K. Yamashita et al. // Hepatology. 2003. -Vol. 38, №4. - P.909-918.

255. Heme oxygenase-2 is activated by calcium-calmodulin / D. Boehning, L. Sedaghat, T.W. Sedlak et al. // J. Biol. Chem. 2004. -Vol.279. -P.30927-30930.

256. Heme oxygenase-2 protects against lipid peroxidation-mediated cell loss and impaired motor recovery after traumatic brain injury / E.F. Chang, R.J. Wong, H.J. Vreman et al. // J. Neurosci. 2003. -Vol.23.-P.3689-3696.

257. Hepatocellular oxidative DNA injury induced by macrophage-derived nitric oxide. / N. Watanabe, S. Miura, S. Zeki et al. // Free Radic. Biol. Med. -2001. Vol.30. - P.1019-1028.

258. A high expression of heme oxygenase-1 in the liver of LEG rats at the stage of hepatoma: the possible implication of induction in un-involved tissue / A. Matsumoto, R. Hanayama, M. Nakamura et al. // Free Radic. Res. 1998. - Vol. 28, №4. - P. 383-391.

259. Hozak, R.R. The BIR motifs mediate dominant interference and oligomerisation of inhibitor of apoptosis Op-IAP / R.R. Hozak, G.A. Manji, P.D. Friesen // Mol. Cell. Biol. 2000. - Vol. 20. - P. 1877.

260. Identification of DIABLO, a mammalian protein that promotes apoptosis by binding to and antagonizing IAP proteins / A.M. Verhagen, P.G. Ekert, M. Pakusch et al. // Cell. 2000. - Vol. 102. - P.43.

261. IL-2 mediated apoptosis of kidney tubular epithelial cells is regulated by the caspase-8 inhibitor c-FLIP. / C. Du, Q. Guan, Z. Yin et al. // Kidney Int. 2005. - Vol.67. - P. 1397-1409.

262. Improvement of the therapeutic index of anticancer drugs by the superoxide dismutase mimic mangafodipir / J. Alexandre, C. Nicco, C. Chereau et al. // J. Natl. Cancer Inst. 2006. - Vol.98. - P.236-244.

263. In vivo antitumor activity of pegylated zinc protoporphyrin: Targeted inhibition of heme oxygenase in solid tumor / J. Fang, T. Sawa, T. Akaike et al. // Cancer Res. 2003. - Vol.63. - P.3567-3574.

264. Increased mouse survival, tumor growth inhibition and decreased immunoreactive p53 after exposure to magnetic fields / S. Tofani, M. Cintorino, D. Barone et al. // Bioelectromagnetics. 2002. - Vol. 23, №3. - P.230-238.

265. Increased Noxl and hydrogen peroxide in prostate cancer / S.D. Lim, C. Sun, J.D. Lambeth et al. // Prostate. 2005. - Vol.62. -P.200-207.

266. Inducible nitric oxide synthase and heme oxygenase-1 in rat heart: direct effect of chronic exposure to hypoxia. / A. Grilli, M.A. De Lutiis, A. Patruno et al. // Ann. Clin. Lab. Sci. 2003. - Vol. 33. -P.208-215.

267. Induction of heme oxygenase-1 inhibits NAD(P)H oxidase activity by down-regulating cytochrome b558 expression via the reduction of heme availability / C. Taille, J. El-Benna, S. Lanone et al. // J. Biol. Chem. 2004. - Vol.279. - P.28681-28688.

268. Induction of NADPH-dependent diaphorase and nitric oxide synthase activity in aortic smooth muscle and cultured macrophages / J.A. Mitchell, K.L. Kohlhaas, T. Matsumoto et al. // Mol. Pharmacol. 1992. - Vol. 41. - P. 1163-1165.

269. Inhibition of inducible nitric oxide synthase reduces renal ische-mia/reperfusion injury. / P.K. Chatterjee, N.S. Patel, E.O. Kvale et al. // Kidney Int. 2002. - Vol.61. - P.862-871.

270. The inhibitor of apoptosis, cIAP2, functions as a ubiquitin-protein ligase and Dromotes in vitro monoubiquitination of caspases 3 and 7 / H.K. Riuang, C.A. Joazeiro, E. Bonfoco et al. // J. Biol. Chem. 2000. - Vol. 275. - P.661.

271. Insulin-mediated stimulation of protein kinase Akt: A potent survival signaling cascade for endothelial cells / C. Hermann, B. Assmus, C. Urbich et al. //Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 2000. -Vol. 20.-P. 402-409.

272. Integrin-linked kinase (ILK): a 'hot' therapeutic target / T.N. Yoganathan, P. Costello, X. Chen et al. // Biochem. Pharmacol. -2001,-Vol. 60.-P. 111-119.

273. Involvement of p38 in apoptosis-associated membrane blebbing and nuclear condensation / R.G. Deschesnes, J. Huot, K. Valerie et al. // Mol. Biol. Cell.-2001.-Vol. 12.-P. 1569-1582.

274. Jacobson, M.D. Constitutive expression of the machinery for programmed cell death / M.D. Jacobson, M. Weil, M.C. Raff // J. Cell Biol. 1996.-Vol.133.-P. 1041-1051.

275. Jentsch, S. Ubiquitin and its kin: how close are the family ties? / S. Jentsch, G. Pyrowolakis // Trends Cell Biol. 2000. - Vol. 10. -P.335.

276. Kato, H. Expression of nitrotyrosine is associated with angio-genesis in esophageal squamous cell carcinoma / H. Kato, T. Miyazaki, M. Yoshikawa // Anticancer. Res. 2001. - Vol.21. - P.3323-3329.

277. Kepper, D. Export pumps for glutathione S - conjugates / D. Kepper // Free Radic. Biol. Med. - 1999. - №27. - P.985-991.

278. Kirschvink, J.L. Magnetite biomineralization in the human brain / J.L. Kirschvink, A. Kobayashi Kirschvink, B.J. Woodford // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1992. - Vol.89, N 16. - P. 7683-7687.

279. Kolesnik, R. The therapeutic potential of modulating the cera-mide / sphingomyelin pathway / R. Kolesnick // J.Clin. Invest. -2002. Vol. 110, N 1. - P. 3-8.

280. Kroemer, G. The mitochodrial death / life regulator in apoptosis and necrosis / G. Kroemer, B.Dallaporta, M. Reshe Rigon // Annu. Rev. Physiol. - 1998. - Vol. 60. - P.619-642.

281. Lagadec, P. Evidencer for control of nitric oxide synthesis by intracellular transforming factor beta-1 in tumor cells-implications for tumor development / P. Lagadec // Amer. J. Pathol. 1999. - Vol. 154. - P.1867-1876.

282. Lakics, V. Lipopolysaccharide and ceramide use divergent signaling pathways to induce cell death in murine macrophages / V. Lakics, S.N. Vogel // J. Immunol. 1998. - Vol.161. - P. 2490-2500.

283. Leydig cell-derived heme oxygenase-1 regulates apoptosis of premeiotic germ cells in response to stress / N. Ozawa, N. Goda, N. Makino et al. // J. Clin. Invest. 2002. - Vol. 109, №4. - P. 457-467.

284. Li, C.Q. Genotoxicity, mitochondrial damage, and apoptosis in human lymphoblastoid cells exposed to peroxynitrite generated from SIN-1 / C.Q. Li, L.J. Trudel, G.N.Wogan // Chem. Res. Toxicol. -2002. Vol.15. - P.527-535.

285. Li, C.Q. Nitric oxide-induced genotoxicity, mitochondrial damage, and apoptosis in human lymphoblastoid cells expressing wildtype and mutant p53. / C.Q. Li, L.J. Trudel, G.N.Wogan // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2002. - Vol.99. - P.10364-10369.

286. Lopes-Lasaro, M. Dual role of hydrogen peroxe in cancer: possible relevance to cancer chemoprevention and therapy / M. LopesLasaro // Cancer Letters. 2007. - Vol.253. - P. 1-8.

287. Lu, S. Common principles in protein folding and antigen presentation / S. Lu // Tibtech. 1991. - Vol.9. - P.238-242.

288. Maarten, F.C. Glutation and glutation related enzymes in reproduction / F.C. Maarten, M. Knapen, L.M. Obrado Petra //Eur. J. Abstr. Gynet. Reproductive Biol. - 1999. - Vol.82. - P.171-184

289. Maines, M.D. Carbon monoxide and nitric oxide homology differential modulation of heme oxygenases in brain and detection of protein and activity / M.D. Maines // Methods Enzymol. 1996. -Vol. 68.-P. 473-479.

290. Maines, M.D. Expression of heme oxygenase-1 (HSP32) in human prostate: normal, hyperplastic, and tumor tissue distribution / M.D. Maines, P.A. Abrahamsson // Urology. 1996. - Vol. 47, №5. -P. 727-733.

291. Mainster, M.A. Transpupillary thermotherapy for age-related macular degeneration: long-pulse photocoagulation, apoptosis, and heat shock proteins / M.A. Mainster, E. Reichel // Ophthalm. Surg. Lasers. 2000. - Vol. 31, №5. - P. 359-373.

292. McLaughlin, L.M. Nitric oxide-induced apoptosis in lymphoblas-toid and fibroblast cells dependent on the phosphorylation and activation of p53 / L.M. McLaughlin, B. Demple // Cancer Res. 2005. -Vol.65. - P. 6097-6104.

293. Mechanism of apoptosis induced by doxorubicin through the generation of hydrogen peroxide / H. Mizutani, S. Tada-Oikawa, Y. Hiraku et al. // Life Sci. 2005. - Vol.76. - P. 1439-1453.

294. Mitochondria and cell death / P. Bernardi, L. Sorano, R. Colonna et al. // Eur. J. Biochem. 1999. - Vol. 264. - P. 687-701.

295. Mitochondrial complex III is required for hypoxia-induced ROS production and cellular oxygen sensing / R.D. Guzy, B. Hoyos, E. Robin et al. // Cell Metab. 2005. - Vol. 1. - P.401-408.

296. Mitochondrial dysfunction resulting from loss of cytochrome c impairs cellular oxygen sensing and hypoxic HIF-alpha activation / K.D. Mansfield, R.D. Guzy, Y. Pan et al. // Cell. Metab. 2005. -Vol.1. -P.393-399.

297. Mitochondrial glutathione depletion by glutamine in growing tumor cells / J. Carretero, E. Obrador, J.A. Pellicer et al. // Free Radic. Biol. Med. 2000. - Vol. 29, №9. - P. 913-923.

298. Mitochondrion as a novel target of anticancer chemotherapy / P. Constantini, E. Jacotot, D. Decaudin et al. // J. Natl. Cancer Inst. -2000. -Vol. 92, №13. P. 1042-1054.

299. Motexafm gadolinium generates reactive oxygen species and induces apoptosis in sensitive and highly resistant multiple myeloma cells / A.M. Evens, P. Lecane, D. Magda et al. // Blood. 2005. -Vol.105. -P.1265-1273.

300. Muzio, M. FLICE, a novel FADD-homologous ICE/CED-3-like protease, is recruited to the CD95 (FAS/APO-1) death-inducing signaling complex / M. Muzio // Cell. 1996. - Vol. 85. - P. 817-827.

301. Nagata, S. The Fas death factor / S. Nagata, P. Golstein // Science. 1995. - Vol.267. - P. 1449-1456.

302. Nicotera, P. Regulation of the apoptosis-necrosis switch / P. Nicotera, G. Melino // Oncogene. 2004. - Vol.23. - P.2757-2765.

303. Nitric oxide as a bioregulator of apoptosis / H.T. Chung, H.O. Pae, B.M. Choi et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2001. -Vol.282. - P.1075-1079.

304. Nitric oxide induces apoptosis in renal tubular epithelial cells through activation of caspase-8 / C. Du, Q. Guan, H. Diao et al. // Am. J. Physiol. Renal Physiol. 2006. - Vol.290 . - P.1044-1054.

305. Nitric oxide induces murine thymocyte apoptosis by oxidative injury and a p53-dependent mechanism / S.A. Gordon, W. Abou-Jaoude, R.A. Hoffman et al. // J. Leukoc. Biol. 2001. - Vol.70. -P.87-95.

306. Nitric oxide induces phosphorylation of p53 and impairs nuclear export. / N. Schneiderhan, A. Budde, Y. Zhang et al. // Oncogene. -2003. Vol.22. - P.2857-2868.

307. Nitric oxide suppresses the expression of Bcl-2 binding protein BNIP3 in hepatocytes / R. Zamora, L. Alarcon, J. Vodovotz et al. //J. Biol. Chem. 2001. - Vol.276. - P. 46887-46895.

308. Nitric oxide-induced cell death of cerebrocortical murine astrocytes is mediated through p53- and Bax-dependent pathways / H.W. Yung, A.K. Bal-Price, G.C. Brown et al. // J. Neurochem. 2004 . -Vol.89. - P.812-821.

309. Noxa, a BH3-only member of the Bcl-2 family and candidate mediator of p53-induced apoptosis / E. Oda, R. Ohki, H. Murasawa et al. // Science. 2000. - Vol. 288. - P. 1053-1058.

310. Oxidized phospholipids induce expression of human heme oxygenase-1 involving activation of cAMP-responsive heme oxygenase element binding protein / X. Chen, V.N. Bochhov, J. Huber et al. // J. Biol. Chem. -2003. Vol. 278. - P. 1031-1038.

311. Oxygen sensing requires mitochondrial ROS but not oxidative phosphorylation / J.K. Brunelle, E.L. Bell, N.M. Quesada et al. // Cell. Metab. 2005. - Vol. 1. - P.409-414.

312. P21-activated kinase 1 phosphorylates the death agonist bad and protects cells from apoptosis / A. Schurmann, A.F. Mooney, L.C. Sanders et al. // Mol. Cell. Biol. 2000. - Vol. 20. - P. 453-461.

313. Pegylated zinc protoporphyrin: a water-soluble heme oxygenase inhibitor with tumor-targeting capacity / S.K. Sahoo, T. Sawa, J. Fang et al. // Bioconjug. Chem. 2002. - Vol. 13. №5.-P. 1031-1038.

314. Pervaiz, S. Superoxide anion: oncogenic reactive oxygen species? / S. Pervaiz, M. Clement // Int. J. Biochem. Cell Biol. 2007. -Vol.39.-P.1297-1314.

315. Pharmacologic ascorbic acid concentrations selectively kill cancer cells: action as a pro-drug to deliver hydrogen peroxide to tissues / Q. Chen, M.G. Espey, M.C. Krishna et al.// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2005. - Vol.102. - P.13604-13609.

316. Piantadosi, C.A. Biological chemistry of carbon monoxide / C.A. Piantadosi // Antioxid. Redox. Signal. 2002. - Vol.4 . - P.259-270.

317. Poh, T.W. LY294002 and LY303511 sensitize tumor cells to drug-induced apoptosis via intracellular hydrogen peroxide production independent of the phosphoinositide 3-kinase-Alct pathway /

318. T.W. Poh, S. Pervaiz // Cancer Res. 2005. - Vol. 65. - P.6264-6274.

319. Polyak, K.A model for p53 induced apoptosis / K. Polyak // Nature. - 1997. -Vol. 389. - P.300-305.

320. Ponder, B. Cancer Genetics / B. Ponder // Nature. 2001. - Vol. 411. -P. 336-341.

321. Possible mechanisms for tumour cell sensitivity to TNF- alpha and potential therapeutic applications / E. Obrador, J. Carretero, J.A. Pellicer et al. // Curr. Pharm. Biotechnol. 2001. - Vol. 2, №2. - P. 119-130.

322. Potentiation of nitric oxide-induced apoptosis in p53-/- vascular smooth muscle cells / M.R. Kibbe, J. Li, S. Nie et al. // Am. J. Physiol. Cell Physiol. 2002. - Vol.282. - P.625-634.

323. Protein kinase C theta and epsilon promote T cell survival by a Rsk- dependent phosphorylation and inactivation of BAD / C. Ber-tollo, L. Maulon, L. Pillipa et al. // J. Biol. Chem. - 2000. - Vol. 275. -P. 246-250.

324. Ragsdale, S.W. Life with carbon monoxide / S.W. Ragsdale // Crit Rev Biochem Mol Biol. 2004. - Vol.39. - P.165-195.

325. Ramis, I. Differential activity of nitric oxide synthase in human nasal mucosa and polyps / I. Ramis // Eur. Respir. J. 1996. - Vol. 9. - P.202-206.

326. Ranger, A.M. Mouse models of cell death / A.M. Ranger, B.A. Malynn, S.J. Korsmeyer // Nature Genet. 2001. - Vol. 28. - P. 113118.

327. Razani, B. Caveolae: from cell biology to animal physiologi /B.Razani, S.E.Woodman, M.P. Lisanti // Pharmacol. Rev. 2002. -Vol.54, N3.-P. 431-467.

328. Regulation of BAD by cAMP-dependent protein kinase is mediated via phosphorylation of a novel site, Serl55 / J.M. Lizcano, N. Morrice, P. Cohen et al. // Biochem. J. 2000. - Vol. 349. - P. 547557.

329. Rskl mediates a MEK-MAP kinase cell survival signal / A. Shi-mamura, B.A. Ballif, S.A. Richards et al. // Curr. Biol. 2000. - Vol. 10. -P. 127-135.

330. Saito, M. BAX-dependent transport of cytochrome c reconstituted in pure liposomes / M. Saito, S.J. Korsmeyer, P.H. Schlesinger // Nat. Cell. Biol. 2000. - Vol. 2. - P. 553-555.

331. Salvesen, G.S. Caspase activation: the induced -proximity model /G.S. Salvesen, V.M. Dixit // Proc. Natl.Acad. Sci. USA. 1999. -Vol. 96. - P.10964-10967.

332. Scheid, M.P. Protein kinases: six degrees of separation? / M.P. Scheid, J.R. Woodgett// Curr. Biol. 2000. - Vol. 10.-P. 191-194.

333. Semenza, G.L. Development of novel therapeutic strategies that target HIF-1 / G.L. Semenza // Exp. Opin. Ther. Targets. 2006. -Vol. 10. - P. 267-280.

334. Simons, K. Cholesterol, lipid rafts, and disease / K.Simons, R.Ehehalt // J.Clin. Invest. 2002. - Vol. 110, N 5. - P 597-603.

335. Skulachev, V.P. Programmed death phenomena: from organelle to organism / V.P. Skulachev // Ann. N Y Acad. Sci. 2002. - Vol. 959. -P.214-237.

336. Smac, a mitochondrial protein that Dromotes cytochrome c-dependent caspase activation by eliminating IAP inhibition / C. Du, M. Fang, Y. Li et al. // Zell. 2000. - Bd. 102. - S.33-42.

337. Spatially localized generation of nucleotide sequence-specific DNA damage / D.H. Oh, B.A. King, S.G. Boxer et al. // Proc. Natl.Acad. Sci. USA 2001. - Vol. 98. - P. 271-276.

338. Static and ELF magnetic fields induce tumor growth inhibition and apoptosis / S. Tofani, D. Barone, M. Cintorino et al. // Bioelec-tromagnetics. 2001. - Vol. 22. - P. 419-428.

339. Susin, S.A. Cytofluorometric assay of nuclear apoptosis induced in a cell-free system. Application to ceramide-induced apoptosis / S.A. Susin // Exp. Cell Res -1997. Vol. 236. - P.397-403.

340. Tafazoli, S. Prooxidant and antioxidant activity of vitamin E analogues and troglitazone / S. Tafazoli, J.S. Wright, P.J. O'Brien, // Chem. Res. Toxicol. 2005. - Vol.18. - P.1567-1574.

341. Taylor, S.T. Epigenetic determinants of resistance to etoposide regulation of Bcl-xL and Bax by tumor microenvironmental factors / S.T. Taylor, J.A. Hickman, C. Dive // J. Natl. Cancer Inst. 2000. -Vol.92. - P. 18-23.

342. Thiol compounds interact with nitric oxide in regulating heme oxygenase-1 induction in endothelial cells / R. Foresti, J.E. Clark, C.J. Green et al. // J. Biol. Chem. -2000. — Vol. 272, N. 29. P. 411-417.

343. Thomsen, L.L. Niric oxide synthase activity in human gynecological cancer / L.L. Thomsen // Cancer Res. 1994. - Vol. 54. -P. 1352-1354.kahara, F.R. Tian et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2001. -Vol. 286. - P. 953-957.

344. Vasoactive properties of CORM-3, a novel water-soluble carbon monoxide-releasing molecule / R. Foresti, J. Hammad, J.E. Clark et al. // Br. J. Pharmacol. 2004. - Vol.142. - P.453-460.

345. Wallach, D. Tumor necrosis factor receptor and Fas signaling mechanisms / D. Wallach // Annu. Rev. Immunol. 1999. - Vol. 17. -P. 331-367.

346. Wang, H.H. B 16 melanoma cell arrest in the mouse liver induces nitric oxide release and sinusoidal defense against metastasis / H.H. Wang // Cancer Res. 2000. - Vol.60, N 20. - P.5862-5869.

347. Wang, X. Nitric oxide promotes p53 nuclear retention and sensitizes neuroblastoma cells to apoptosis by ionizing radiation / X. Wang, A. Zalcenstein, M. Oren // Cell Death Differ . 2003 . -Vol.10 . -P.468-476.

348. Wilson, E.B. Extremely low frequency electromagnetic fields the question of cancel / E.B. Wilson. Columbus: Batelle, 1991. — 113p.

349. Wilson, K.T. Increased expression of inducible nitric oxide synthase and cyclooxygenase -2 in Barrett's esophagus and associatedadenocarcinomas / K.T. Wilson // Cancer Res. 1998. - Vol. 58. -P.2929-2934.

350. Xie, K. Activation of nitric oxide gene for inhibition of cancer metastasis / K. Xie, Z Dong, I.J. Fidler // J. Leukocyte Biol. 1996. -Vol.797. -P.797-803.

351. Yang, Y.L. The IAP family: endogenous caspase inhibitors with multiple biological activities / Y.L. Yang, X.M. Li // Cell Res. -2000.-Vol. 10.-P. 169-177.

352. Yodoni, J. Diseases associated with HTLV-1: virus, II-2 receptor deregulation and re-dox regulation / J. Yodoni, T. Uchiyama // Immunol. Today. 1992.-Vol.13, N 10. - P.405-411.

353. Yonehara, S. A cell-killing monoclonal antibody (anti-Fas) to a cell surface antigen co-downregulated with the receptor of tumor necrosis factor / S. Yonehara, A. Ishii, M. Yonehara // J. Exp. Med. -1989.-Vol.169.-P. 1747-1756.

354. Young, L.J. Pathobiochemisty of CO poisoning / L.J. Young, W.S. Caughey //FEBS Lett. 1990. — Vol. 272, №1. - P. 1-6.

355. Zhu, L. Coordinating cell proliferation and differentiation / L. Zhu, A. Skoultchi // Curr. Opin. Genet. Dev. 2001. - Vol. 11. - P. 91-97.

356. Zoratti, M. The mitochondrial permeability transition / M. Zoratti, I. Szabo // Biochem. Biophys. Acta Rev. Biomembranes. -1995.-Vol. 1241.-P. 139-176.

Информация о работе

Сергеева, Екатерина Юрьевна
доктора биологических наук
Красноярск, 2007
ВАК 03.00.16

Диссертация

Реакция здоровых и опухолевых клеток организма животных на воздействие физических факторов - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы