Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Реакция модельных организмов на низкие уровни нефтезагрязнения среды
ВАК РФ 03.02.08, Экология (по отраслям)

Автореферат диссертации по теме "Реакция модельных организмов на низкие уровни нефтезагрязнения среды"

Бородулина Татьяна Сергеевна

РЕАКЦИЯ МОДЕЛЬНЫХ ОРГАНИЗМОВ НА НИЗКИЕ УРОВНИ НЕФТЕЗАГРЯЗШШИЯ СРЕДЫ

03.02.08 - экология (биология)

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

1 8 СЕН 2011

Красноярск - 2011

4852820

Работа выполнена на кафедре ботаники и физиологии растений в ФГОУ ВПО «Красноярский государственный аграрный университет»

Научный руководитель - доктор биологических наук, профессор Полонский Вадим Игоревич

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, доцент

Иванова Елена Анатольевна

доктор биологических наук, профессор Степень Роберт Александрович

Ведущая организация - Институт почвоведения и агрохимии СО РАН

Защита состоится «23» сентября 2011 г. в 14— часов на заседании диссертационного совета Д 220.037.04 при ФГОУ ВПО «Красноярский государственный аграрный университет» по адресу: 660049, г. Красноярск, пр. Мира, 90. Телефон (факс): 8(391)227-36-09

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Красноярский государственный аграрный университет»

Автореферат разослан «//>> августа 2011 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор биологических наук, профессор

Г.А. Демиденко

Актуальность темы. Загрязнение природной среды нефтью и продуктами ее переработки — острейшая экологическая проблема, затрагивающая многие страны. Химическое загрязнение почвенного покрова происходит практически на всех стадиях технологического процесса нефтедобычи. Негативное воздействие нефтедобычи обусловлено как непосредственной деградацией почвенного покрова на участках разлива нефти, так и воздействием ее компонентов на сопредельные среды, вследствие чего продукты трансформации нефти обнаруживаются в различных объектах биосферы (Бурмистрова и др., 2003).

Нефть отрицательно воздействует на все группы живых организмов, обитающих как в поверхностном слое, так и в толще воды, а также почве (ПДК нефти для воды рыбохозяйственных водоемов соответствует 0,05 мг/л, ПДК для почвы - 300 мг/кг) (Перечень, 1999; Предельно , 2006).

Нефтезагрязнение окружающей среды сопровождается сильньм негативным воздействием на растения (Солнцева, 1998) вследствие изменения физико-химических свойств почвы, а также прямого токсического действия углеводородов нефти (Халимов и др., 1996). Под влияние нефти изменяется активность ряда ферментов (Исмаилов, 1998; Kiss et al, 1998), что сказывается на жизнедеятельности почвенного микробоценоза (Рахимова и др., 2005; Полонская, Полонский, 2007). Одним из перспективных методов восстановления нефтезагрязненных почв является их фиторемедиация. Положительная роль растений в очищении почв связана с их способностью поглощать и трансформировать химические токсиканты, активировать деятельность микробного сообщества почв и, как следствие, интенсифицировать биохимические и химические процессы удаления чужеродных соединений (Meagher et al., 2000).

Эффективная защита окружающей среды от опасных химических реагентов невозможна без достоверной информации о степени загрязнения почвы. Удобньм методом определения интегральной токсичности почвы является биотестирование. Показателем степени токсичности при биотестировании служит изменение выбранной функции тест-организма при его взаимодействии с пробой среды. В качестве таких организмов могут быть использованы животные, растения, грибы, микроорганизмы (Киреева и др., 2004). Выполненные многими исследователями работы в основном посвящены изучению воздействия на живые организмы средних и высоких уровней нефти (10-50 г/кг почвы и выше). О влиянии низких концентраций поллютанта на живые организмы сведений в литературе недостаточно.

Целью работы является установление закономерностей влияния низких концентраций нефти на процессы жизнедеятельности представителей наземной и водной биоты.

Основные задачи:

1 исследовать морфо-физиологические характеристики растений пшеницы и салата, выращиваемых различное время в почве, загрязненной нефтью;

2 измерить активность оксидоредуктаз в почве при разном уровне ее загрязнения нефтью;

3 разработать простой и оперативный способ определения уровня ч фитотоксичности нефтезагрязненной почвы; vV.

4 изучить эффект фиторемедиации в снижении уровня токсичности нефтезагрязненной почвы;

5 выявить влияние нефти на выживаемость рачков Daphnia magna Straus, изменение количества клеток водоросли Chlorella vulgaris Beijer и их фотосинтетическую активность.

Научная новизна. Впервые проведены исследования влияния низких концентраций нефти в среде на морфо-физиологические показатели растений, выращиваемые различное время. Установлены уровни загрязнения нефтью, при которых происходит ингабирование физиологических процессов растений, активности почвенных ферментов, выживаемости рачков и водоросли. Выявлены концентрации нефти, при которых наблюдается стимуляция физиологических показателей растений, активности почвенных ферментов. Экспериментально доказан физический механизм отрицательного воздействия нефти на исследуемые организмы. Установлены пороги чувствительности различных показателей и модельных организмов к поллютанту. Выявлено, что растения салата лучше восстанавливают загрязненную нефтью почву, чем растения пшеницы. Предложен способ оценки фитотоксичности почв и грунтов, подвергнутых загрязнению нефтью и нефтепродуктами, по измерению относительной интенсивности гуттации проростков пшеницы.

Защищаемые положения:

1. Негативное влияние низких концентраций нефти на жизнеспособность исследованных модельных организмов обусловлено, в большей степени, физическим механизмом, а не токсическим химическим действием.

2. Чувствительность растений к нефтезагрязнению почвы повышается с увеличением продолжительности воздействия поллютанта.

3. Фитотоксичность нефтезагрязненной почвы можно определить по изменению относительной интенсивности гуттации проростков пшеницы.

4. Предварительное выращивание в нефтезагрязненной почве пшеницы и салата снижает последующее негативное влияние поллютанта на процессы прорастания растений.

Практическая значимость. Доказана возможность использования способа оценки фитотоксичности нефтезагрязненных почв и грунтов по измерению относительной интенсивности гуттации 1 и 3-4 суточных проростков пшеницы.

Апробация работы. По теме диссертации опубликовано 10 научных работ, 6 из которых входят в Перечень ведущих рецензируемых научных изданий, определенных ВАК РФ. Результаты исследований и основные положения диссертационной работы были представлены на конференциях: Межрегиональной научно-практической конференции «Проблемы развития АПК Саяно-Алтая» (Абакан, 2009), Международной заочной конференции «Проблемы современной аграрной науки» (Красноярск, 2010; 2011), Всероссийской очно-заочной научно-практической конференции с международным участием «Инновации в науке и образовании: опыт, проблемы, перспективы развития» (Красноярск, 2011).

Личный вклад автора. Автор провел аналитический обзор литературы, участвовал в планировании и выполнении экспериментальных исследований, обработке и интерпретации полученных результатов, написании работы.

Структура и объем диссертационной работы. Диссертация состоит из введения, пяти глав, заключения, выводов, списка литературы, включающего 227 источников, в том числе 57 на иностранных языках. Работа изложена на 123 страницах компьютерного текста, иллюстрирована 19 рисунками и содержит 21 таблицу.

Благодарности. Автор выражает огромную благодарность и признательность за неоценимую помощь и поддержку научному руководителю д.б.н., профессору В.И. Полонскому, а также соавторам публикаций: д.б.н., профессору Д.Е. Полонской, к.б.н., доценту И.Ю. Борцовой, к.б.н., доценту Ю.С. Григорьеву.

Глава 1. Влияние нефтезагрязнения на окружающую среду (обзор литературы)

Приведен обзор литературы по действию нефти на структуру, механический состав, химические, физические и биологические показатели почвы. В литературе показано влияние нефтяного загрязнения почвы на физиологические показатели растений. Выявлено воздействие разных уровней нефтезагрязненных почв на жизнедеятельность микроорганизмов. Рассмотрены публикации по проблемам влияния нефти на микроводоросли и зоопланктон. Проанализирована возможность использования приемов снижения уровня нефтезагрязнения почвы. На основе критического анализа данных литературы определены методология и основные направления исследования (Зволинский, 2005; Киреева и др., 2006; Wang et al., 2008).

Глава 2. Объекты и методы исследования

Для отработки методик и постановки модельных опытов (которые были выполнены в 2008-2011 гг.), использовались обычно применяемые в исследованиях тест-объекты: два вида растений, принадлежащих к различным семействам - пшеница мягкая (Triticum aestivum L.) сорт Новосибирская 29, салат листовой {Lactuca sativa L.) сорт Парниковый, и два вида водных организмов -одноклеточная зеленая водоросль (Chlorella vulgaris Beijer) и рачки (Daphnia magna Straus) (Киреева и др., 2004; Лозова и др., 2006). Также исследовалась активность ферментов-оксидоредуктаз почвы, в которой выращивались опытные растения. Изучали влияние поллютанта на данные объекты исследования по следующей схеме (рис. 1,2).

Этапы исследования. Варианты опытов и ггх продолжительность

Рисунок 1 - Схема проведения исследований

I Изучаемые показатели I

|_Результаты н выводы исследования_

Рисунок 2 - Схема проведения исследований

Исследовали влияние нефти на растения пшеницы и салата: в чашках Петри с почвой выращивали 4-суточные проростки (Иванов и др., 2001); в вегетационных сосудах (пищевой полиэтилен) емкостью 0,5 л выращивали 10-суточные проростки под лампами ЛБ-30; в вегетационных (пластмассовых) сосудах емкостью 3 л в остекленной теплице выращивали 40-суточные растения пшеницы и 30-суточные растения салата.

Прирост хлореллы определяли посредством измерения величины оптической плотности тест-культуры при длине волны 560 им, а также интенсивности ее замедленной флуоресценции (ЗФ). Измерение ЗФ производилось на флуориметре Фотон-10 (Григорьев, 2007). Выживаемость дафний определяли согласно методике Ю.С. Григорьева, Т.Л. Шашковой (2006), пробирки с пробами воды и тест-организмами помещали на 48 часов во вращающуюся кассету устройства для экспонирования рачков (УЭР-03). По истечению времени экспонирования подсчитывали количество выживших дафний.

Результаты обработаны статистически с помощью пакета программ Microsoft Excel 2007.

Глава 3. Влияние нефти на модельные живые организмы. Результаты краткосрочных экспериментов

3.1. Влияние нефтсзагрязнения почвы на прорастание семян пшеницы и салата

Было выявлено, что доля проросших семян заметно уменьшалась, начиная с уровня нефтезагрязнения 6 г/кг почвы (табл. 1). Проведенные исследования влияния различного уровня нефтезагрязнения почвы на процессы прорастания семян пшеницы и салата позволяют говорить о выявленной видоспецифичности в амплитуде ответной реакции. При уровнях нефтезагрязнения почвы 3-6 г/кг позитивная ростовая реакция салата проявлялась сильнее, чем у пшеницы, а негативный ответ (при концентрациях нефти 12-15 г/кг почвы) был выражен существенно слабее (табл. 1).

Таблица 1 - Ростовые показатели проростков пшеницы и салата при различных уровнях нефтезагрязнения почвы (здесь и далее значения в колонках с разными буквами существенно различаются между собой в пределах одного вида растений при Р<0,05)___

Объект Концентрация нефти в почве, г/кг Доля проросших семян, % Масса корней 25 проростков, г Масса побегов 25 проростков, г Длина побега проростка, мм Длина максимального корня проростка, мм

Пшеница 0 90±0,6а 0,99±0,07а 1,10±0,01г 52,5±1,3в 78,0±0,8в

0,3 92±0,8а 1,16±0,02аб 1,21±0,04в 57,8±1,0г 74,5±0,6бв

1,0 94±0,2б 1,19±0,04б 1,20±0,04в 54,8±2,2вг 75,8±2,2бв

3,0 91±0,5а 1,30±0,02г 1,20±0,02в 57,8±1,2г 85,5±1,5г

6,0 88±0,4в 1,30±0,06г 1,17±0,04вг 60,2±1,8г 86,2±2,2г

9,0 80±0,9г 0,97±0,001а 0,82±0,001б 25,4±1,4а 54,7±0,2а

12,0 71±1,8д 0,53±0,05в 0,57±0,05а 32,0±2,8аб 68,0±2,8б

15,0 72±0,4д 0,63±0,001в 0,60±0,001а 31,8±0,9б 53,6±0,6а

Салат 0 86±0,2а 0,06±0,001а 0,15±0,01б 13,0±0,5в 30,5±1,8б

0,3 82±0,6б 0,06±0,001а 0,16±0,01б 12,5±0,8бв 24,8±1,8аб

1,0 86±0,4а 0,06±0,001а 0,15±0,01б 11,8±0,6бв 23,8±0,9а

3,0 86±0,9а 0,12±0,001г 0,27±0,02в 19,2±1,2г 57,0±4,2г

6,0 64±1,0г 0,09±0,02в 0,21±0,02в 17,5±1,2г 53,0±7,4г

9,0 70±1,8в 0,07±0,001б 0,12±0,04аб 8,7±1,7аб 25,3±1,9аб

12,0 72±0,7в 0,07±0,001б 0,11±0,001а 10,3±0,4б 40,2±1,3в

15,0 71±1,8в 0,06±0,001а 0,11±0,001а 8,8±0,4а 28,4±0,3б

Для обоснования возможного механизма негативного влияния нефти на процессы прорастания семян во второй серии опытов использовали в качестве имитатора нефти нерафинированное подсолнечное масло (в аналогичных концентрациях). В результате было обнаружено четкое ингибирование всех изучаемых ростовых параметров у проростков пшеницы, начиная от содержания масла 6 г/кг. Исходя из полученных данных, можно предположить, что основной причиной угнетения процессов прорастания семян при использованных выше уровнях нефтезагрязнения является образование на поверхности семян и корней проростков, а также почвенных частиц гидрофобной пленки, затрудняющей газообмен и поступление воды в семена и корни.

Зарегистрированный в экспериментах эффект стимуляции ростовых процессов при добавлении нефти в почву можно объяснить тем, что нефть может выступать в качестве дополнительного источника минеральных элементов. В случае использования водных растворов сульфата аммония наблюдалась четкая стимуляция всех ростовых показателей у пшеницы, положительное влияние этого вещества на рост корней салата и накопление надземной части биомассы. В вариантах с добавлением сернокислого аммония к эмульсии масла у проростков пшеницы и салата все ростовые показатели не отличались от уровня контроля.

3.2. Рост и водный режим проростков пшеницы и салата в условиях нефтезагрязнения почвы

Выполненные исследования при выращивании 10-суточных проростков пшеницы показали, что при концентрации нефти в почве от 9 до 15 г/кг в опытах регистрировалось ингибирование физиологических показателей проростков пшеницы и салата, связанное с водным режимом и видимым ростом. При этих уровнях поллютанта. в почве происходили: 1) резкий спад испарения влаги из сосудов без растений (рис. 3); 2) уменьшение интенсивности транспирации пшеницы и салата (рис. 4).

2 4 б 8 10

Время, сутки

Рисунок 3 - Динамика интенсивности испарения воды из почвы вегетационных сосудов без растений. 1 - контроль; 2,3,4,5,6,7,8 - варианты опыта с концентрацией нефти соответственно: 0,3; 1,0; 3,0; 6,0; 9,0; 12; 15 г/кг сухой

почвы

При этом концентрация поллютанта в почве, при которой отмечался спад активности работы нижнего концевого двигателя, совпадала с таковой, когда наблюдалось падение испарения воды из почвы (как с растениями, так и без них).

4 6 8

Возраст, сутки

Рисунок 4 - Возрастная динамика интенсивности транспирации салата. 1 -контроль; 2,3,4,5,6,7,8 - варианты опыта с концентрацией нефти соответственно: 0,3; 1,0; 3,0; 6,0; 9,0; 12; 15 г/кг сухой почвы

Следовательно, можно предположить, что в основе снижения водопоглотительной способности 10-суточных проростков лежит физический механизм образования гидрофобной пленки на частицах почвы и корнях растений. Отметим, что салаг в 10-суточном возрасте по показателям интенсивности выделения пасоки и скорости накопления сухой биомассы проявил себя более толерантным видом к нефтезагрязненню по сравнению с пшеницей (как и в фазе прорастающих семян).

3.4. Влияние загрязнения воды нефтью на замедленную флуоресценцию водоросли Chlorella vulgaris Beijer и выживаемость рачков Daphnia magna Straus

Результаты исследования влияния поллютанта на одноклеточную зеленую водоросль (Chlorella vulgaris Beijer) и рачков (.Daphnia magna Straus) показали, что нефть негативно действует на данные биологические объекты. Присутствие ее в культуральной среде приводило к снижению интенсивности замедленной флуоресценции культуры водоросли (рис. 5). Однако уменьшение свечения клеток наблюдалось только при очень высоком содержании нефти в среде, более 1 г/л. При концентрации поллютанта 4 г/л интенсивность ЗФ снижалась по сравнению с контролем на 63%. Показатель ЕС50 был равен около 3 г/л.

Что же касается влияния подсолнечного масла на интенсивность ЗФ изучаемой микроводоросли, то с увеличением концентрации этого имитатора нефти (при концентрации масла 4 г/л интенсивность ЗФ уменьшилась на 50%) также происходило снижение уровня свечения культуры водоросли, но к нефти хлорелла была более чувствительней, чем к воздействию масла (рис, 5).

к 0,25 0,5 I 2 4 Концентрация нефти, г/л

к 0,25 0,5 1 2 4 Концентрация масла, г/л

Рисунок 5 - Сравнение интенсивности замедленной флуоресценции суспензии водоросли СЫогеПа уи^апв после 22 часов культивирования в среде с различной концентрацией нефти и масла. К - контроль; 0,25; 0,5; 1; 2; 4 г/л нефти в среде - варианты опыта

Результаты исследований по оценке действия водной эмульсии нефти на выживаемость дафний показали, что гибель 50% особей (ХС50) за время экспонирования происходила при концентрации нефти в воде равной 2 мг/л. При увеличении содержания поллютанта до 200 мг/л регистрировалась гибель всех тест-организмов уже в первые часы эксперимента. При уменьшении концентрации нефти до 0,02 мг/л (ниже ПДК в 2,5 раза) выживаемость дафний была на уровне контроля. Была зарегистрирована отрицательная реакция дафний на присутствие подсолнечного масла в воде, выражающаяся в снижении показателя их выживаемости. При концентрации масла 200 мг/л наблюдалась гибель всех тест-организмов в первые часы эксперимента.

Исходя из полученных результатов о концентрациях нефти и масла, ингибирующих ростовые характеристики изучаемых организмов, можно допустить, что главным образом гидрофобная пленка, образующаяся на поверхности воды, оказывает негативное влияние на рачки, обволакивая их и, вероятно, затрудняя дыхание. Заметная разница в концентрации масла и нефти для ЬС30 для дафний, по-видимому, может объясняться дополнительным негативным химическим механизмом. Задержка роста водоросли хлорелла, наблюдаемая при очень высоких ее концентрациях поллютанта, очевидно, обусловлена слипанием клеток в нефтяных каплях.

Глава 4. Влияние нефти на модельные живые организмы. Результаты

4.1. Влияние нефтезагрязнения почвы на морфо-физиологические показатели растений

В проведенных длительных опытах по выращиванию пшеницы и салата нами была выявлена тенденция к закономерному уменьшению ростовых показателей растений (табл. 2, 3).

многосуточных экспериментов

Таблица 2 - Ростовые показатели пшеницы при разных уровнях нефтезагрязнения почвы

Концентрация нефти в почве, г/кг Толщина листа-флага, мкм Площадь листьев главного побега 1 растения, см2 Содержание воды в надземной части биомассы, % Сухая масса надземной части 10 растений, г

0 135±10,2а 45,4±0,9а 80,3±0,2а 2,6±0,2а

0,3 131±7,7а 49,8±0,7б 78,3±0,2б 2,6±0,2а

1,0 129±8,6а 45,8± 1,1 а 79,4±1,2аб 2,0±0,2а

3,0 119±8,4аб 37,6±0,8в 79,9±0,7аб 1,6±0,1б

6,0 111±7,7аб 32,9±0,5г 75,5±0,6в 1,2±0,1в

9,0 100±6,7б 24,0±0,9д 75,7±1,4в 1,1±0,1в

Однако, при концентрации поллютанта 0,3 г/кг почвы наблюдалось достоверное увеличение ростовых показателей растений салата по сравнению с контролем.

Таблица 3 - Ростовые показатели растений салата при разных уровнях нефтезагрязнения почвы

Концентрация нефти в почве, г/кг/ Высота растения, см Среднее количество листьев 1 растения, шт. Площадь листьев 1 растения, см2 Содержание воды в надземной части биомассы, % Сухая масса надземной части 10 растений, мг

0 44±3аб 5,7±0,3а 15,1±1,1б 96,4±1,1а 30±0,7б

0,3 51±4а 6,0±0,4а 22,4±1,8а 96,5±1,2а 42±0,5а

1,0 34±3бв 5,0±0,6а 8,5±0,9в 96,3±1,3а 20±0,5в

3,0 30±2в 4,9±0,5а 6,4±0,6вг 95,9±1,2а 18±0,3в

6,0 25±3вг 4,9±0,4а 5,5±0,6г 95,8±1,1а 18±0,4в

9,0 20±2г 4,6±0,4б 3,3±0,4гд 95,7±1,0аб 11±0,3г

Следует отметить, что присутствие поллютанта в почве в концентрациях от 0,3 до 6 г/кг никак не влияло на темпы развития растений пшеницы: фаза колошения во всех вариантах наступила в один срок - на 35 сутки вегетации. Четкое проявление отрицательного воздействия нефти при использовании концентрации 9 г/кг на потенциальную продуктивность растений отразилось на длине колоса, величине его озерненности, количестве побегов и высоте растений.

Показатель интенсивности испарения воды из сосудов с почвой без

растений в вариантах с внесением нефти практически не отличался от контроля за исключением варианта с максимальным уровнем нефтезагрязнения. В течение вегетации в случае контроля интенсивность транспирации закономерно повышалась по классической кривой большого роста. Что касается вариантов опыта, то даже малое добавление нефти в сосуды сопровождалось снижением скорости транспирации. При этом в течение вегетации отмечалось нарастающее отставание указанного физиологического показателя в вариантах опыта от контроля.

Логично допустить, что нарастающее в онтогенезе отрицательное влияние нефти на растения может быть обусловлено либо снижением уровня устойчивости организмов, либо прогрессирующим повреждающим действием поллютанта. Последнее может представлять, во-первых, физический механизм (усиливающийся дефицит кислорода, воды, минеральных элементов вследствие образования гидрофобной пленки на корнях) и, во-вторых, фитотоксический эффект (вследствие накопления в почве ядовитых соединений, которые образует развивающаяся специфическая микрофлора (Киреева и др., 2003; Назарюк и др., 2007)).

4.2. Влияние загрязнения почвы нефтью на активность пероксидазы и нолнфенолоксидазы в экспериментах с растениями пшеницы и салата

Показано, что активность пероксидазы (ПО) при внесении нефти в концентрации 0,3 г/кг почвы снижалась в 2-2,5 раза, а при повышении содержания поллютанта, начиная с 1 г/кг, возрастала как в почве с 40-суточными растениями пшеницы, так и без них (табл. 4).

В опытных вариантах с растениями пшеницы при концентрациях нефти в почве, равных 0,3, 1,0 и 6,0 г/кг отмечалось снижение активности полифенолоксидазы (ПФО) в 1,5-2 раза по сравнению с вариантами без растений. В наших экспериментах наблюдалось снижение активности ПО в вариантах с 30-суточными растениями салата в нефтезагрязненной почве (0,3-6 г/кг нефти), но в почве без растений снижение активности фермента проявлялось при уровне нефтезагрязнения 0,3 и 1 г/кг почвы, а дальнейшее увеличение загрязнения поллютантом приводило к повышению активности ПО. В вариантах опытов без растений влияние поллютанта обнаруживалось в снижении активности ПФО при максимальном уровне загрязнения почвы (6 г/кг), а также незначительном повышении активности этого фермента при уровне нефтезагрязнения почвы 0,33 г/кг.

Установлено, что результаты учета активности ПО и ПФО в почве без растений при 40-суточной экспозиции значительно отличались от 30-суточных вариантов. Так, при уровне загрязнения поллютантом почвы 6 г/кг на 40-е сутки наблюдалось повышение активности ПО и ПФО, а в 30-суточных опытах отмечалось ингибирование. Таким образом, можно предположить, что длительность экспозиции нефти в почве влияет на активность ферментов-оксидоредуктаз.

Таблица 4 - Показатели активности ферментов при загрязнении нефтью почвы в модельных экспериментах с пшеницей и салатом

Объект Концен- Активность Активность ПФО, Коэффициент

трация ПО, мг пурпу- мг пурпурогаллина корреляции

нефти в рогаллина на 5 на 5 г почвы за 30 между актив-

почве, г/кг г почвы за 30 мин " ностью ПО и

мин ПФО

Почва с пшеницей, 40 суток 0 0,040±0,001* в 0,011±0,001 а** г = 0,508 t= 1,02, р>0,05

0,3 0,015±0,001 а 0,014±0,001 а

1,0 0,027±0,001 б 0,012±0,001 а

3,0 0,03 8±0,001 в 0,040±0,001 в

6,0 0,062±0,001 г 0,030±0,001 б

Почва без растений, 40 суток 0 0,054±0,001 в 0,023±0,002 а г = 0,832 t = 2,6, р>0,05

0,3 0,021±0,001 а 0,019±0,001 а

1,0 0,030±0,001 б 0,021±0,001 а

3,0 0,052±0,001 в 0,040±0,001 б

6,0 0,068±0,001 г 0,060±0,002 в

Почва с салатом, 30 суток 0 0,056±0,001 а 0,045±0,002 б г = - 0,130

0,3 0,039±0,001 б 0,054±0,001 а

1,0 0,040±0,002 б 0,038±0,001 в

3,0 0,040±0,001 б 0,037±0,002 в

6,0 0,048±0,002 в 0,029±0,001 г

Почва без растений, 30 суток 0 0,043±0,001 б 0,046±0,001 в г = 0,372

0,3 0,042±0,002 б 0,052±0,001 а

1,0 0,037±0,001 в 0,044±0,001 бв

3,0 0,052±0,001 а 0,051±0,001 а

6,0 0,045±0,001 б 0,041±0,001 б

♦Стандартное отклонение; **3начения с разными буквами различаются существенно между вариантами опыта в пределах одного объекта при Р<0,05.

4.3. Последействие различных уровней нефтсзагрязнепия почвы на процессы прорастания семян пшеницы и салата

Экспериментально показано, что при максимальной первоначальной концентрации нефти в почве, которая ранее использовалась для выращивания растений пшеницы в течение 40 суток и растений салата в течение 30 суток, происходило снижение ингибирующего последействия нефти на показатели роста проростков пшеницы и на долю прорастания семян салата, в отличие от эксперимента, в котором нефть вносилась непосредственно перед опытом с данными тест-культурами (табл. 5;,рис. 6).

Таблица 5 - Действие и последействие различных уровней нефтезагрязнения почвы на ростовые показатели проростков пшеницы (значения в колонках с разными буквами существенно различаются между собой в пределах одного

Вариант опыта* Концентрация нефти в почве, г/кг Доля проросших семян, % Масса корней 25 проростков, г Масса побегов 25 проростков, г Длина побега проростка, мм Длина максимального корня проростка, мм

А 0 90±0,6а 0,99±0,07а 1,10±0,01а 52,5±1,3а 78,0±0,8а

9,0 80±0,9г 0,97±0,03а 0,82±0,05в 25,4±1,4г 54,7+0,15д

Б 0 90±1,4а 1,24±0,06б 1,21±0,01б 55,1±1,3а 77,1±1,6а

9,0 89±1,7аб 1,18±0,06б 1,19±0,01а 45,1±1,6б 67,1±2,1г

В 0 91±2,0а 1,21±0,05б 1,21±0,01б 56,2±1,8а 57,3±2,1д

9,0 85±2,7бв 1,21±0,05б 1,19±0,01а 52,6+ 1,2а 57,6±2,1д

*Вариант А: нефть соответствующих концентраций внесена в почву непосредственно перед опытом с тест-культурами; вариант Б: почва перед опытом использовалась для 40-суточного выращивания пшеницы с предварительным внесением нефти аналогичных концентраций; вариант В: почва перед опытом использовалась для 30-суточного выращивания салата с предварительным внесением нефти аналогичных концентраций.

Установлено, что снижение негативного действия на ростовые показатели проростков пшеницы и салата существенно выражены в эксперименте, в котором почва перед опытом использовалась для выращивания салата, чем в эксперименте, где почва перед опытом использовалась для выращивания пшеницы с внесением нефти соответствующих концентраций. В связи с этим можно предположить, что растения салата лучше восстанавливают загрязненную нефтью почву, чем растения пшеницы. Иначе говоря, для фиторемедиации более подходит салат, чем пшеница.

Рисунок 6 - Относительные показатели доли проросших семян салата при различных уровнях нефтезагрязнения почвы, % к контролю. (А, Б, В - см. табл. 5)

15

Глава 5. Диагностика токсичности нефтезагрязненной почвы 5.1. Чувствительность различных показателей и модельных организмов к поллютаиту

Исходя из полученных результатов следует, что наиболее чувствительными показателями к уровню нефтезагрязнения почвы являются следующие: 1) по негативной реакции тест-объекта - интенсивность гуттации 2-4-суточных проростков пшеницы, активность пероксидазы (ПО) (Табл. 6); 2) по позитивной реакции тест-объекта - масса и длина 4-суточных проростков пшеницы, интенсивность выделения пасоки 10-суточными проростками салата, площадь листьев главного побега 40-суточных растений пшеницы, сухая надземная биомасса и высота 30-суточяых растений салата, активность почвенной полифенолоксидазы (ПФО).

Таблица 6 - Чувствительность показателей, отражающих влияние нефтезагрязненной среды на почвенные ферменты_

Объекты Пороговая концентрация нефти при появлении ответной реакции объекта, г/кг* Регистрируемые показатели, активность

Положительная реакция Отрицательная реакция

Почва из-под пшеницы, 40 суток 6,0 0,3 ПО

3,0 отсутствие реакции ПФО

Почва без растений, 40 суток 6,0 0,3 ПО

3,0 отсутствие реакции ПФО

Почва из-под салата, 30 суток отсутствие реакции 0,3 ПО

0,3 1,0 ПФО

Почва без растений, 30 суток 3,0 1,0 ПО

0,3 отсутствие реакции ПФО

*ПДК для нефти в почве 0,3 г/кг.

5.2. Способ оценки фитотоксичности нефтезагрязненной почвы

Нами предложен подход, который может быть использован для оценки на фитотоксичность почв, подвергнутых загрязнению нефтью (табл. 7).

Таблица 7 - Отношение интенсивностей гуттации проростков и соответствующий уровень фитотоксичности почвы при ее загрязнении нефтью

Показатель* Относительный уровень фитотоксичности нефтезагрязненной почвы

ИГ2/ИГ,> 1 Отсутствие токсичности

ИГ2/ИГ, = 1 Низкий уровень токсичности

ИГ2/ИГ1 < 1 Высокий уровень токсичности

*ИГ1 - интенсивность гуттации 1-суточных проростков; ИГ2 -интенсивность гуттации 3-4 суточных проростков.

Способ оценки фитотоксичности нефтезагрязненной почвы включает посев

в эту почву наклюнувшихся семян злаков, их проращивание при постоянных оптимальных внешних условиях, измерение интенсивности гуттации в 1-суточиом и 3-4-суточном возрасте проростков и вычисление отношения этих величин. Оценка уровня фитотоксичности почвы осуществляется в соответствии с градацией, показанной в табл. 7.

Эффект от внедрения предложенного способа состоит в экономии материальных средств и времени при анализе почвенных образцов на уровень их фитотоксичности в результате нефтезагрязнения.

Выводы:

1. При увеличении интенсивности и длительности загрязнения почвы нефтью происходило усиление ингибирования роста растений пшеницы и салата. При концентрации нефти в почве 6 г/кг и выше у 4-суточных проростков пшеницы и салата снижались процессы прорастания семян и показатели роста растений, а при концентрациях нефти в почве от 0,3 до б г/юг был найден эффект стимуляции процессов прорастания семян растений.

Отрицательная реакция растений пшеницы после 40-суточного воздействия нефти начиналась при уровне загрязнения почвы 3 г/кг, которая проявлялась в снижении илощади листьев главного побега, сухой массы надземной части растений. Более высокие концентрации нефти в почве приводили к снижению толщины листа флага, содержания воды в надземной части биомассы, длины листовых пластинок, потенциальной хозяйственной продуктивности пшеницы. Отрицательное воздействие нефти при 30-суточной экспозиции на растения салата проявлялось, начиная с концентрации 1 г/кг, которое регистрировалось по снижению площади листьев и надземной биомассы растений.

2. При нефтезагрязнении почвы на уровне 0,3-1 г/кг активность пероксидазы снижалась, а активность полифенолоксидазы не изменялась. При содержании нефти в почве около 6 г/кг происходила существенная стимуляция активности обеих оксидоредуктаз.

3. Предварительное выращивание в нефтезагрязненной почве растений пшеницы и салата снижало последующее ингибирующее действие нефти на растения, оцененное по показателям прорастания семян.

4. При одной и той же концентрации нефти и масла в среде регистрировалось: снижение фотосинтетической активности хлореллы (1 г/ли выше), уменьшение выживаемости дафний (0,2 мг/л и выше), снижение доли прорастания семян пшеницы и салата (6 г/кг и выше), что свидетельствует о физическом механизме действия поллютанта.

5. Разработан метод оценки уровня фитотоксичности нефтезагрязненной почвы, который основан на определении относительной интенсивности гуттацхш 1-суточных проростков пшеницы к интенсивности гуттации 3-, 4-суточных проростков.

Практические рекомендации:

1. Рекомендуем при контроле степени нефтезагрязнения почв использовать метод определения фитотоксичности нефтезагрязненной почвы по измереншо интенсивности гуттации проростков пшеницы (филиал ФГУ «ЦЛАТИ» по Сибирскому ФО - центр лабораторного анализа и технических измерений по Красноярскому краю; управление Роспотребнадзора по Красноярскому краю) (на способ подана заявка на изобретение № 2011108?75 от 09.03.2011 г.).

2. Результаты исследования используются в учебном процессе института агроэкологических технологий ФГОУ ВПО «Красноярский государственный аграрный университет» при подготовке бакалаврских и магистерских работ (справка Дирекции ИАЭТ КрасГАУ от 22.03.2011).

Список работ по теме диссертации В журналах из перечня, определенного ВАК РФ:

1. Бородулина Т.С., Полонский В.И., Власова Б.С., Шашкова T.JI., Григорьев Ю.С. Влияние нефтезагрязнения воды на медленную флуоресценцию водоросли Chlorella vulgaris Beijer и выживаемость рачков Daphnia magna Str. Н Сибирский экологический журнал. 2011. № 1. С. 107-111.

2. Borodulina T.S., Polonskiy V.l., Vlasova E.S., Shashkova T.L., Grigor'ev Yu.S. Effect of oil-pollution of water on slow fluorescence of the Chlorella vulgaris Beijer and survival rate of the Daphnia magna Str. // Contemporary Problems of Ecology. 2011. V. 4. No. 1. P. 1-5.

3. Полонский В.И., Борцова И.Ю., Полонская Д.Е., Бородулина Т.С. Влияние низких уровней нефтезагрязнения почвы на активность оксидоредуктаз // Вестник КрасГАУ. 2011. №6. С. 90-94.

4. Бородулина Т.С., Полонский В.И. Последействие различных уровней нефтезагрязнения почвы на процессы прорастания пшеницы и салата // Вестник КрасГАУ. 2011. № 5. С. 33-38.

5. Бородулина Т.С., Полонский В.И. Рост и водный режим проростков пшеницы и салата в условиях нефтезагрязнения почвы // Вестник КрасГАУ. 2011.№ 3. С. 50-54.

6. Бородулииа Т.С., Полонский В.И. Влияние нефтезагрязнения почвы на физиологические характеристики растений пшеницы // Вестник КрасГАУ. 2010. № 5. С. 50-55.

Другие научные издания:

1. Бородулина Т.С., Полонский В.И. Возрастная зависимость реакции растений салата на воздействие нефти // Экологические альтернативы в сельском и лесном хозяйстве: сб. науч. ст. аспирантов и магистрантов. Красноярск, КрасГАУ, 2011. Вып. 1. С. 9297.

2. Бородулина Т.С., Полонский В.И. Прорастание семян пшеницы и салата под влиянием загрязнения почвы нефтью // Материалы Международной заочной научной конференции «Проблемы современной аграрной науки». Красноярск, КрасГАУ, 2011. С. 48-50.

3. Бородулина Т.С. Влияние нефтезагрязнения окружающей среды на ростовые и физиологические характеристики опытных живых организмов // Материалы Международной заочной научной конференции «Проблемы современной аграрной науки». Красноярск, КрасГАУ, 2010. С. 39-41.

4. Бородулина Т.С., Полонский В.И. Влияние нефтезагрязнения почвы на прорастание семян пшеницы и салата // Проблемы развития АПК Саяно-Алтая: материалы межрегион, науч.-практ. конф. Абакан: Хакасское кн. изд-во, 2009. Ч. 2. С. 78-81.

Подписано в печать 29.07.2011. Печать ризограф. Бумага офс. 80 гр/м2. Формат 84х108732. Усл. печ. л. 1,2.

Тираж 100 Заказ № 2671.

Отпечатано в типографии ООО «Версо». 660079, г. Красноярск, ул. А. Матросова, ЗОк. Тел.: 2588-354, 235-05-89, 235-04-89.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Бородулина, Татьяна Сергеевна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. Влияние нефтезагрязнения на окружающую среду (обзор литературы) 1. Действие нефти на структуру, механический состав, химические, физические и биологические показатели почвы

1.2. Влияние нефти на физиологические показатели растений

1.3. Воздействие разных уровней нефтезагрязненных почв на жизнеспособность микроорганизмов

1.4. Влияние нефти на микроводоросли и зоопланктон

1.5. Приемы снижения уровня нефтезагрязнения почвы

ГЛАВА 2. Объекты и методы исследования

ГЛАВА 3. Влияние нефти на модельные живые организмы. Результаты краткосрочных экспериментов

3.1. Влияние нефтезагрязнения почвы на прорастание семян пшеницы и салата

3.2. Рост и водный режим проростков пшеницы и салата в условиях нефтезагрязнения почвы

3.3. Влияние загрязнения воды нефтью на замедленную флуоресценцию водоросли Chlorella vulgaris Beijer и выживаемость рачков

Daphnia magna Straus

ГЛАВА 4. Влияние нефти па модельные живые организмы. Результаты многосуточных экспериментов

4.1. Влияние нефтезагрязнения почвы на морфо-физиологические показатели растений

4.2. Влияние загрязнения почвы нефтью на активность пероксидазы и полифенол оксид азы в экспериментах с растениями пшеницы и салата

4.3. Последействие различных уровней нефтезагрязнения почвы на процессы прорастания семян пшеницы и салата

ГЛАВА 5. Диагностика токсичности нефтезагрязненной почвы

5.1. Чувствительность различных показателей и модельных организмов к поллютанту

5.2. Способ оценки фитотоксичности нефтезагрязненной почвы 92 ЗАКЛЮЧЕНИЕ 97 ВЫВОДЫ 99 Список используемой литературы

Введение Диссертация по биологии, на тему "Реакция модельных организмов на низкие уровни нефтезагрязнения среды"

Актуальность темы. Загрязнение природной среды нефтью и продуктами ее переработки — острейшая экологическая проблема, затрагивающая многие страны. Химическое загрязнение почвенного покрова происходит практически на всех стадиях технологического процесса нефтедобычи. Негативное воздействие нефтедобычи обусловлено как непосредственной деградацией почвенного покрова на участках разлива нефти, так и воздействием ее компонентов на сопредельные среды, вследствие чего продукты трансформации нефти обнаруживаются в различных объектах биосферы [21].

Нефть является сложной смесью парафиновых, циклопарафиновых, ароматических углеводородов с простыми и разветвленными цепями. Помимо этих основных составляющих, она . содержит соединения серы и азота, органические кислоты, микроэлементы. Нефть может также содержать нафтеновые кислоты и фенольные соединения, хлороформенные битумоиды, в составе которых имеются такие экологически особо опасные соединения, как полиароматические углеводороды [93]. Наиболее экологически опасными являются хорошо растворимые, трудно окисляемые нефтяные углеводороды, водорастворимая фракция которых может содержать до 90% токсичных ароматических соединений [22].

Нефть отрицательно воздействует на все группы живых организмов, обитающих как в поверхностном слое, так и в толще воды, а также почве (ПДК нефти для воды рыбохозяйственных водоемов соответствует 0,05 мг/л, ПДК для почвы - 300 мг/кг) [118, 128, 134]. В первую очередь от повышенных концентраций нефти страдают планктонные ракообразные и личиночные формы многих беспозвоночных и рыб [216].

Поступая в почву, нефть ухудшает ее биологические, химические и физические свойства [32]. Нефтезагрязнение окружающей среды сопровождается сильным негативным воздействием на растения [46, 147], вследствие изменения физикохимических свойств почвы, главным образом из-за увеличения гидрофобности и заполнения нефтью почвенных капилляров, а также прямого токсического действия 4 углеводородов нефти (фитотоксичности) [159]. Под влиянием нефти изменяется активность ряда ферментов [59, 195], что сказывается на жизнедеятельности микробоценоза [136, 182]. Несмотря на предупредительные меры, осуществляемые при добыче и транспортировке нефти, вследствие аварий становится малопригодным использование больших площадей плодородных земель. Одним из перспективных методов восстановления нефтезагрязненных почв является их фиторемедиация. По сравнению с существующими физическими и химическими способами использование растений для инактивации загрязнителей более эффективно в экологическом и экономическом плане. Положительная роль растений в очищении почв связана с их способностью поглощать и трансформировать химические токсиканты, активировать деятельность микробного сообщества почв и, как следствие, интенсифицировать биохимические и химические процессы удаления чужеродных соединений [69, 196, 204].

Эффективная защита окружающей среды от опасных химических реагентов невозможна без достоверной информации о степени загрязнения почвы. В настоящее время основой мониторинга ядовитых веществ в окружающей среде являются их предельно допустимые концентрации (ПДК) в воде, воздухе, почве и продуктах питания. Однако следует отметить, что превышение ПДК химических веществ в указанных средах служит лишь косвенным показателем их токсичности. Не всегда удается установить прямую зависимость между содержанием загрязнителя в среде и ее пригодностью для обитания живых организмов. Почва может быть сильно загрязненной, но нетоксичной или слаботоксичной и, наоборот, слабо загрязненной, по сильно токсичной. Токсичное действие одних компонентов может быть нейтрализовано или усилено присутствием других, поэтому токсичность почвы не определяется вредоносностью отдельных соединений, содержащихся в ней. Целесообразно оценивать интегральную токсичность почвы, отражающую влияние всего комплекса химических веществ. Удобным методом определения интегральной токсичности почвы является биотестирование. Показателем степени токсичности при биотестировании служит изменение выбранной тест-функции биоиндикаторного организма при его взаимодействии с пробой среды. В качестве биоиндикаторов могут быть использованы организмы практически всех таксономических групп: животные, растения, грибы, микроорганизмы [67]. Выполненные многими исследователями работы в основном посвящены изучению воздействия на живые организмы средних и высоких уровней нефтезагрязнения. О влиянии низких концентраций поллютанта на живые организмы сведений в литературе недостаточно.

Целью работы является установление закономерностей влияния низких концентраций нефти на процессы жизнедеятельности представителей наземной и водной б йоты.

Основные задачи:

1. исследовать морфо-физиологические характеристики растений пшеницы и салата, выращиваемых различное время в почве, загрязненной нефтью;

2. измерить активность оксидоредуктаз в почве при разном уровне ее загрязнения нефтью;

3. разработать простой и оперативный способ определения уровня фитотоксичности нефтезагрязненной почвы;

4. изучить эффект фиторемедиации в снижении уровня токсичности нефтезагрязненной почвы;

5. выявить влияние нефти на выживаемость рачков Daphnia magna Straus, изменение количества клеток водоросли Chlorella vulgaris Beijer и их фотосинтетическую активность.

Научная новизна. Впервые проведены исследования влияния низких концентраций нефти в среде на морфо-физиологические показатели растений, выращиваемые различное врехмя. Установлены уровни загрязнения нефтью, при которых происходит ингибирование физиологических процессов растений, активности почвенных ферментов, выживаемости рачков и водоросли. Выявлены концентрации нефти, при которых наблюдается стимуляция физиологических показателей растений, активности почвенных ферментов. Экспериментально доказан физический механизм отрицательного воздействия нефти на исследуемые организмы. Установлены пороги чувствительности различных показателей и модельных организмов к поллютанту. Выявлено, что растения салата лучше восстанавливают загрязненную нефтью почву, чем растения пшеницы. Предложен способ оценки фитотоксичности почв и грунтов, подвергнутых загрязнению нефтью и нефтепродуктами, по измерению относительной интенсивности гуттации проростков пшеницы. Защищаемые положения:

1. Негативное влияние низких концентраций нефти на жизнеспособность исследованных модельных организмов обусловлено, в большей степени, физическим механизмом, а не токсическим химическим действием.

2. Чувствительность растений к нефтезагрязнению почвы повышается с увеличением продолжительности воздействия поллютанта.

3. Фитотоксичность нефтезагрязненной почвы можно определить по изменению относительной интенсивности гуттации проростков пшеницы.

4. Предварительное выращивание в нефтезагрязненной почве пшеницы и салата снижает последующее негативное влияние поллютанта на процессы прорастания растений.

Практическая значимость. Доказана возможность использования способа оценки фитотоксичности нефтезагрязненных почв и грунтов по измерению относительной интенсивности гуттации 1 и 3-4 суточных проростков пшеницы.

Апробация работы. По теме диссертации опубликовано 10 научных работ, 6 из которых входят в Перечень ведущих рецензируемых научных изданий, определенных ВАК РФ. Результаты исследований и основные положения диссертационной работы были представлены на конференциях: Межрегиональной научно-практической конференции «Проблемы развития АПК Саяно-Алтая» (Абакан, 2009), Международной заочной конференции «Проблемы современной аграрной науки» (Красноярск, 2010; 2011), Всероссийской очно-заочной научно-практической конференции с международным участием «Инновации в науке и образовании: опыт, проблемы, перспективы развития» (Красноярск, 2011).

Заключение Диссертация по теме "Экология (по отраслям)", Бородулина, Татьяна Сергеевна

2. Результаты исследования используются в учебном процессе института агроэкологических технологий ФГОУ ВПО «Красноярский государственный аграрный университет» при подготовке бакалаврских и магистерских работ (справка Дирекции ИАЭТ КрасГАУ от 22.03.2011).

Практические рекомендации:

1. Рекомендуем при контроле степени нефтезагрязнения почв использовать метод определения фитотоксичности нефтезагрязненной почвы по измерению интенсивности гуттации проростков пшеницы (филиал ФГУ «ЦЛАТИ» по Сибирскому ФО - центр лабораторного анализа и технических измерений по Красноярскому краю; управление Роспотребнадзора по Красноярскому краю) (на способ подана заявка на изобретение № 2011108775 от 09.03.201 I г.).

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Бородулина, Татьяна Сергеевна, Красноярск

1. Агрохимические методы исследования почв / Ответственный редактор А. В. Соколов. М. : Наука, 1975. 656 с.

2. Алиев С. А., Гаджиев Д. А. Влияние загрязнения нефтяным органическим веществом на активность биологических процессов почв // Изв. АН АзССР. Сер. биол. наук. 1977. № 2. С. 46-49.

3. Антоненко А. М., Занина О. В. Влияние нефти па ферментативную активность аллювиальных почв Западной Сибири // Почвоведение. 1992. № 1. С. 38-43.

4. Аринушкина Е. В. Руководство по химическому анализу почв. М. : Изд-во Московского гос. ун-та, 1970. 487 с.

5. Ахмедов А. Г., Ильин Н. П., Исмаилов Н. М. и др. Особенности деградации тяжелой нефти в светлых серо-коричневых почвах сухих субтропиков Азербайджана // Добыча полезных ископаемых и геохимия природных экосистем. М. : Наука, 1982. С. 217-227.

6. Бабаев М. Г., Довмат Т. А., Нурыев Б. Н. В я жуп юс для г.-.крепления песков // Тезисы докладов 5 Всесоюзной научной конференции. VI., 19''Н. С. 43-45.

7. Бакулин М. К., Захаров В. Ю., Чеботарев Е. В. Интенсификация биодеградации микроорганизмами нефти и нефтепродуктов под влиянием перфтордекалина // Прикл. биохимия и микробиология. 2004. Т. 40. № 3. С. 317-322.

8. Баландина Л. П., Шабанова А. В. Оценка качества рекультивации нефтезагрязненных почв методом биотестирования // Экология и промышленность России. 2007. Ноябрь. С. 46-47.

9. Бенашвили Е. М. Разделение углеводородных и гетероатомных соединений нефти. Тбилиси: Мецниереба, 1987. 152 с.

10. Берестецкий О. А., Надкеречный С. П. Содержание грибов-продуцентов фитотоксических веществ в почве при бессменном выращивании и в севообороте // Фитотоксические свойства почвенных микроорганизмов. Л. : ВНИИСХМ, 1978. С. 94-104.

11. Боер И. В., Борцова И. Ю., Коломейцев А. В. и др. Агроэкосистемы пригородной зоны города Красноярска / Под ред. Д. Е. Полонской. Красноярск: Изд. Красноярского гос. аграрного ун-та, 2010. 191 с.

12. Бородулина Т. С., Полонский В. И. Влияние нефтезагрязнения почвы на прорастание семян пшеницы и салата // Проблемы развития АПК Саяно-Алтая: материалы межрегион, науч.-практ. конф. Ч. 2. Абакан: Хакасское кн. изд-во, 2009. С. 78-81.

13. Бородулина Т. С., Полонский В. И. Влияние нефтезагрязнения почвы на физиологические характеристики растений пшеницы // Вестник КрасГАУ. 2010. № 5. С. 50-55.

14. Бурлака В. А., Шинкевич М. Ю. Способ восстановления плодородия земель, загрязненных нефтью // Экология и промышленность России. 2003. Июнь. С. 41-44.

15. Бурмистрова Т. И., Алексеева Т. П., Перфильева В. Д., Терещенко Н. Н. Стахина Л. Д. Биодеградация нефти и нефтепродуктов в почве с использованием мелиорантов на основе активированного торфа // Химия растительного сырья. 2003. № 3. С. 69-72.

16. Ващенко М. А. Загрязнение залива Петра Великого Японского моря и его биологические последствия // Биология моря. 2000. № 3. С. 149-159.

17. Веселовский В. А., Вшивцев В. С. Биотестирование загрязнения среды нефтью по реакции фотосинтетического аппарата растений // Восстановление нефтезагрязненных почвенных экосистем. М. : Наука, 1988. С. 99-112.

18. Водопьянов В. В., Киреева Н. А., Тарасепко Е. М. Фитотоксичность нефтезагрязненных почв (математическое моделирование) // Агрохимия. 2004. № 10. С. 73-77.

19. Возняковская Ю. М. Взаимоотношения растений с микроорганизмами ризосферы и филлосферы// Агрономическая микробиология. Л. : Колос, 1976. С. 144-179.

20. Габбасова И. М. Деградация и рекультивация почв Южного Приуралья: Автореф. дис. . д-ра с.-х. наУ К. М. : ТСХА, 2001.45 с.

21. Гайнутдинов М. 3., Самосова С. М., Артемьева Т. И. и др. Рекультивация нефтезагрязненных земель лесостепной зоны // Восстановление нефтезагрязненных почвенных экосистем. М. : Наука, 1988. С. 177-197.

22. Гашев С. Н., Гашева М. Н., Соромотин А. В. Влияние нефти на появление п развитие проростков сосны обыкновенной // Лесоведение. 1991. № 2. С. 74-77.

23. Гашева М. Н., Гашев С. Н., Соромотин А. В. Состояние растительности как критерий нарушенное™ лесных биоценозов при нефтяном загрязнении // Экология. 1990. № 2. С. 77-78.

24. Гилязов М. Ю. Агроэкологическая характеристика нарушенных при нефтедобыче черноземов и приемы их рекультивации в условиях Закамья Татарстана: Автореферат. Дис. . д-ра с.-х. наук. Саратов: СГАУ, 1999. 43 с.

25. Гилязов М. Ю. Изменение некоторых агрохимических свойств выщелоченного чернозема при загрязнении его нефтью // Агрохимия. 1980. № 12. С. 72-75.

26. Горникова С. В., Середина П. В. Влияние нефги на физико-химические свойства почв нефтегазоносных районов Томского Севера. Томск, 1985. 34 с.

27. Гриргорян К. В. Экологическая оценка компонентов биоценоза по активности ферментов почв в условиях техногенного загрязнения. Автореф. дис. . д.б.н. М. : Изд-во МГУ, 1990. 32 с.

28. Грищенко О. М. Ботанические аномалии как поисково-разведочный критерий нефтегазоносности//Экология. 1982. № 1.С. 18-22.

29. Громов Б. В., Павленко Г. В. Экология бактерий. Л. : 11зд-во Ленинградского университета, 1989. 248 с.

30. Гузев В. С., Левин С. В., Селецкий Г. И. и др. Роль почвенной микробиоты в рекультивации нефтезагрязпенных почв // Микроорганизмы и охрана почв. М. : изд-во МГУ, 1989. С. 121-150.

31. Данилин А. Л., Сабиров М. К. Meiоды создания кусiарниковых пастбищ на подвижных песках Узбекской ССР // Тр. Среднеазиатского НИИ лесного хозяйства. 1986. Т. 24. С. 42-45.

32. Демидиенко А. Я., Демурджан В. М. Пути восстановления нефтезагрязненных почв черноземной зоны Украины // Восстановление нефтезагрязненных почвенных экосистем. М.: Наука, 1988. С. 197-206.

33. Демидиенко А. Я., Демурджан В. М., Шеянова А. Д. Изучение питательного режима почв, загрязненных нефтью // Агрохимия. 1983. № 9. С. 100-103.

34. Донец Е. В. Влияние нефти на прорастание семян хвойных лесообразующих видов древесных растений подзоны южной тайги Омской области //Автореф. канд. дисс. -Омск: Изд-во ОмГПУ, 2009. 19 с.

35. Дубенок Н. Н., Мажайский 10. А., Дронник Е. А., Давывова И. Ю. Агроэкологическая индикация самовосстановления неф ^загрязненных почв лесостепи в условиях глеегенеза // Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук. 2008. № 5. С. 29-31.

36. Егоров Н. Н., Шипулин 10. К. Особенности загрязнения при родных вод и грунтов нефтепродуктами // Водные ресурсы. 1998. № 5. С. 598-602.

37. Ежегодник загрязнения почв Советского Союза токсикантами промышленного происхождения. ИЭМ. Обнинск. 1990. №4226-87 от 13.03.87; № 4233-87 от 30.10.87.

38. Ермаков Е. И., Панова Г. Г. Стратетя бпореставрации химически загрязненных почв в зонах экологического риска // Освоение Севера и проблемы природовосстановленпя. Тез. докл. международп. конф. Сыктыкар, 2001. 84 с.

39. Етеревская Л. В., Шеянова П. Д. Изменения свопспз почвы в связи с загрязнением их при разведке и добыче нефти и Iаза // Агрохимия и почвоведение. Киев, 1975. Вып. 29. С. 3-7.

40. Етеревская Л. В., Яранцева Л. Д. О влиянии на растеши загрязнений почвы при бурении и разведке на нефть и газ // Рас1енпя и про.\ мыленная среда. Киев: Наук, думка, 1976. С. 73-75.

41. Журбицкий 3. И. Теория и практика вегетационпо! о метода. М. : Наука, 1968. 260 с.

42. Зволинский В. П., Батовская Е. К., Черных Н. Д. Влияние нефти и нефтепродуктов па свойства почв и почвенные микроорганизмы // Агрохимический вестник. 2005. № 2. С. 22-25.

43. Звягинцев Д. Г., Гузев В. С., Левин С. В., Селецкип Г. И., Оборин А. А. Диагностические признаки различных уровней загрязнения почв нефтью // Почвоведение. 1989. № 1. С. 72-78.

44. Звягинцев Д. Г., Добровольская Т. Г., Лысак Л. В. Растения как центры формирования бактериальных сообществ // Журнал общей биологии. 1993. Т. 54. №2. С. 183-199.

45. Звягинцев Д. Г. Методы почвенной микробиологии и биохимии. М. : МГУ, 1991. 302 с.

46. Злотников А. К., Садовникова Л. К., Баландина А. Г«., Злотников К. М., Казаков А. В. Использование биопрепарата Альбт для рекультивации нефтезагрязнённых почв // Вестник РАСХН. 2007. № 1. С. 65-67.

47. Иванов В. Б., Плотникова И. В., Живухина Е. А. |п др. Практикум по физиологии растений. М., 2001. 144 с.

48. Илларионов С. А. Экологические аспекты восстановления нефтезагрязненных почв. Екатеринбург: УрО РАН, 2004. 194 с.

49. Ильин Н. П., Калачникова И. Г., Каркишко Т. И. и др. Наблюдения за самоочищением почв от сырой нефти в средней и кглпоп тайге // Добыча полезных ископаемых и геохимия природных экоси М: Наука, 1982. С. 245-249.

50. Исмаилов Н. М. Влияние нефтяного загрязнения па кр\: ^ юрот азота в почве// Микробиология. 1983. Т. 52. № 6. С. 1003-1007.

51. Исмаилов Н. М. Микробиология и ферме! м швная активность нефтезагрязненных почв // Восстановление нефтезш . пленных почвенных экосистем. М. : Наука, 1998. С. 42-46.

52. Кабиров Т. Р. Использование биопрепара: л «ленойл» для биотехнологической очистки нефтезагрязненных поч! Проблемы экологиив современном мире. Матер. IV всеросс. 1п1ете- >пф. Тамбов, 2007.1061. С. 172-175.

53. Калакуцкий Л. В., Шарая Л. С. Актиномицеты и высшие растения // Успехи микробиол. 1990. Т. 24. С. 26-65.

54. Калачникова И. Г., Масливец Т. А., Базенкова Н. М. и др. Влияние нефтяного загрязнения на экологию почв и почвенныч микроорганизмов // Экология и популяционная генетика микроорганизмов. Свердловск: УНЦАН СССР, 1987. С. 23-26.

55. Калугина А. А., Миловидова И. Ю., Свиридова 'Г. П., Уральская И. В. О влиянии загрязнений на морские организмы Новороссийской бухты Черного моря// Гидробиологический журнал. 1967. № 1. С. 47-5").

56. Карасёва Э. В., Гирич И. Е., Худокормов А. А., Алешин;! 11. Ю., Карасёв С. Г. Биоремедиация черноземной почвы, загрязненной нефтью // Биотехнология. 2005. № 2. С. 67-72.

57. Киреева Н. А., Бакаева М. Д., Мифтахова А. ¡VI. Ли I ическая активность микромицетов нефтезагрязнепных почв как мчпн из факторов фитотоксичности // Агрохимия. 2006. № 9. С. 75-81.

58. Киреева Н. А., Бакаева М. Д., Тарасснко Е. М., Галпмзяпова Н. Ф., Новоселова Е. И. Снижение фитотоксичности нефгезагрязненноп схр.'й лесной почвы при биорекультивации// Агрохимия. 2003. № 2. С. 50-55.

59. Киреева Н. А., Бакаева М. Д., Тарасенко Е. М. Комплексное биотестирование для оценки загрязнения почв нефгыо // Экология и пр 4 мтленность России. 2004. Февраль. С. 26-29.

60. Киреева Н. А., Водопьянов В. В., Мифтахова Л. М. Биологическая активность нефтезагрязнепных почв. Уфа: Гилем, 2'1"!. 376 с.

61. Киреева Н. А., Водопьянов В. В. Новоселова Е. И., Опс ва Т. С., Жданова Н. В. Микробиологическая рекультивация нефтезагрязнс .ых почв. М. : ОАО ВНИИОЭНГ, 2001. 40 с.

62. Киреева Н. А., Галимзянова А. М., Мифтахова А. ' Микромицеты почв, загрязненных нефтью, и их фтотоксичность // Мико :я и фитопатология. 2000. Т. 34. Вып. 1. С. 36-41.

63. Киреева Н. А., Галимзянова Н. Ф. Влияние загрязнения почв нефтью и нефтепродуктами на численность и видовой сося* микромицетов // Почвоведение. 1995. № 2. С. 21 1-216.

64. Киреева Н. А., Дубовик И. Е., Закирова 3. Р. К'онсортивные связи цианобактерий типичного чернозема при загрязнении нефтью // Почвоведение. 2007. № 6. С. 749-755.

65. Киреева Н. А., Мифтахова Д. М., Кузахметов Г. Г. "ишяние загрязнения нефтью на фитотоксичность серой лесной почвы // Агрохимия. 2001. № 5. С. 64-69.

66. Киреева Н. А., Мифтахова А. М., Кузяхметов Г. Г. '"¡пяние удобрений на продуктивность викоячменной смеси на почвах, зшр 1 ?ненных нефтью // Агрохимия. 2004. № 7. С. 72-76.

67. Киреева Н. А., Мифтахова А. М., Салахова Г. М. Рос и развитие растений яровой пшеницы на нефтсзагрязненных почвах и с и биоремедиации // Агрохимия. 2006. № 1. С. 85-90.

68. Киреева Н. А., Новоселова Е. И., Онегова Т. С. Ai i явность каталазы и дегидрогеназы в почвах загрязненных нефтью г < :ефтепродуктами // Агрохимия. 2002. № 8. С. 64-72.

69. Киреева Н. А., Новоселова Е. П., Хазиев ср. X. Акс чосгь карбогидраз в нефтезагрязненных почвах //Почвоведение. 1998. № !Г 1444-1448.

70. Киреева Н. А., Новоселова Е. И., Ямалетдино>' ■ Г. Ф. Активность оксидоредуктаз в нефтезагрязненных и рекульп" руемых почвах // Агрохимия. 2001. №4. С.53-60.

71. Киреева Н. А., Салахова Г. М., Мифтахова А. М. Bjht 1 ^ загрязнения почвы нефтью и нефтепродуктами на рост и развитие рас • ! пй // Растительные ресурсы: опыт, проблемы п перспективы. Матер. В осс. н.-практ. конф. Бирск: БГПУ, 2005. С. 143-146

72. Киреева Н. А., Тарасенко Е. М., Бакаева 4 Д. Детоксикация нефтезагрязненных почв под посевами люцерны ' !icago sativa L.) // Агрохимия. 2004. № 10. С. 68-72.

73. Киреева H. А., Тарасенко Е. М. Шамаева А. А., Ново* слова Е. И. Влияние нефти и нефтепродуктов на активность липазы о ^ mí лесной почвы // Почвоведение. 2006. № 8. С. 1005-1011.

74. Киреева Н. А., Юмагузина X. А., Кузяхметов Г. Г. Рост и р почвах, загрязненных нефтьтю // С.-х. биология. 1996. jYí с

75. Киреева Н. А., Ямалетдинова Г. Ф., Новоселов. Ферменты серного обмена в пефтезагрязненных по 2002. № 4. С. 474-480.

76. Кожевин П. А. Микробные популяции в природе. М. : И >,

77. Кокшарова H. Е. Методы создания защитных пасаждени побережья Арала // Тр. Среднеазиатского НИИ лесного С. 65-74.

78. Колесников С. И., Казеев К. LLL, Велпгонова П. Азнаурьян Д. К., Вальков В. Ф. Изменение микроорганизмов при загрязнении чернозема обьн нефтепродуктами // Агрохимия. 2007. № 12. С. 44-4<^

79. Колесников С. И., Казеев К. ILI., Гатосян М. Л., I загрязнения нефтью и нефтепродуктами на от чернозема обыкновенного //1 ¡очвоведение. 2006. № 5. (

80. Колесников С. И., Татосян M. Л., Азнаурьян Д. К. Из.-11 активности чернозема обыкновенного при м нефтепродуктами в модельных экспериментах // академии сельскохозяйственных наук. 2007. № 5. С 32

81. Кочетков И. А., Лазарева PI. О. Влияние некой показатели биологической активности почвы // Boni111И // Популяции в кой попул. семинара.11 ие растений овса на -18-54.

82. И., Хазиев Ф. X. ix // Почвоведение.• > МГУ, 1989. 175 с. ! донных отложениях :яйства. 1986. Т. 24.

83. Красильников Н. А. Микроорганизмы почвы и высшие рас* сипя. M., 1958. 462 с.

84. Крупкин П. И. Черноземы Красноярского края. Краспо5 рек. КрасГАУ. 2002. 332 с.

85. Леднев А. В. Влияние комплекса агрохимических п/пемов на скорость разложения нефти в загрязненных дерново-нодзолне ■ ьг почвах // Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук. 20! . "и 2. С. 30-32.

86. Леонтьев А. А., Ким В. И. Новые методы икреплеш ¡ ,i облесения песков // Защитное лесоразведение на пеечанных 1еррпториях Сре/чей Азии. Вып. XV. Ташкент: СредазНИИЛ, 1973. С. 43-48.

87. Лиханова И. А., Арчегова И. Б., Хабибуллина Ф. М. -i> скшовление лесных экосистем на антропогенно нарушенных ч , чггориях подзоны крайнесеверной тайги европейского северо-востока Pu они. Екатеринбург: УрОРАН, 2006. 112 с.

88. Лозова Д. В., Саксонов M. Н., Балаян А. Э. Д. И. Влияние эмульгированных нефтепродуктов на разновоз) "ы\ Cladocera // Сибирский экологический журнал. 2006. № 5. С. 619-(>2

89. Мазманиди Н. Д. Исследование действия растворсш ¡.г нефтепродуктов на некоторых гидробионтов Черного моря//Рыб. хоз-во. 5 С. 7-10.

90. Максименко О. Е., Червяков Н. А., Каркишко Т и др. Динамика восстановления растительное гп антропогенно нарушенной) сфагнового болота на территории нефтепромысла в Среднем Приобье // " v^k.iihi. 1997. № 4. С. 243-247.

91. Миловидова Н. 10. Действие нефти на некоюрых прг , лмых ракообразных110

92. Черного моря // Гидробиологический журнал. 1974. № 4. С. 96—100.

93. Миронов О. Г. Биологические ресурсы моря и нефтян-ю загрязнение. М. : Пит пром-сть, 1972. 105 с.

94. Миронов О. Г. Взаимодействие морских оргашглюв с нефтяными углеводородами. Л. : Гидрометеоиздат, 1985. 129 с.

95. Мирчинк Т. Г. Почвенная микология. М. : Изд.-во М! У. 1988. 220 с.

96. Михайлова Л. В. Действие водорастворимой фракции У.ть-Балыкской нефти на ранний онтогенез стерляди Асчрепзег ги1Ьепиь 7 Гидробиологический журнал. 1991. Т. 27. № 3. С. 77-86.

97. Михайлова Л. В. Особеннос ти поведения водораство: г ">й фракции нефти в модельных опытах // Водные ресурсы. 1986. № 2. С. 125-' 34.

98. Михайлова Л. В., Шорохова О. В. Особенности сосгпг, и трансформации в водорастворимой фракции тюменской нефти // Водные ресурсы. 1992. № 2. С. 130-139.

99. Мочалова О. С., Антонова Н. М., Гурвич Л. М. ;Ч> диспергирующих средств в процессах трансформации и окисле.!': нефти в водной среде // Водные ресурсы. 2002. Т. 29. № 2. С. 221 2

100. Надиров Н. К. Нефть и газ Казахстана. Алматы, 1995. 1. !. -400 с.

101. Назаров А. В., Иларионов С. А. Изучение ир1 п 1 фитотоксичности нефтезагрязненных почв // Письмо в Междунаро,м.: 1 научный журнал «Альтернативная энергетика и экология». 2005. № 1. С. Ч)-65.

102. Назарюк В. М., Кленова М. И., Калимуллина Ф. Р. Ро: 1 перальнош питания в повышении продуктивности растений и регулировании • .-¡чмо режима почвы, загрязненной нефтью//Агрохимия. 2007. № 7. С. 64-73.

103. Неганова Л. Б., Шилова И. И., Штииа Э. А., Нлыиипа ". '. Влияние способов биологической рекультивации земель, загрязненных ■ >, на почвенную альгофлору в условиях таежной зоны // Экология. 198' . . 2. С. 149-154.

104. Нельсон-Смит А. Нефть и экология моря. М. : Прогре е. 1>77. 302 с.

105. Оборин А. А., Колесникова Н. М., Масливец . !^азенкова Е. И.

106. Трансформация нефтяных углеводородов почв, за четных нефтью //111

107. Влияние промышленных предприятий на окружай чо среду. Пушино, 1984. С. 189-240.

108. Панкратова Е. М. Роль азотфиксирующпх сине люиых водорослей (цианобактерий) в накоплении азота и повышен! п плодородия почвы: Автореф. дис. . д.б.н. М., 1981. 40 с.

109. Панкратова К. Г., Щелоков В. И., Сазонов Ю. Г. Опе 'ча загрязнения почв нефтепродуктами с использованием диффузной • • рожательной ИК-спектрометрии// Агрохимия. 2004. № 12. С. 51-58.

110. Патин С. А. Нефть и экология континентального шел' г :. .V!. : ВНИРО, 2001. 247 с.

111. Патин С. А. Экологические проблемы освоения ¡к '.газовых ресурсов морского шельфа. М. : ВНИРО, 1997. 350 с.

112. Ц8. Перечень ПДК и ОБУВ вредных веществ для во м Зохозяйственных водоемов. М., 1999. 304 с.

113. Пиковский Ю. И., Геннадиев А. Н., Чернянскпп С ' Сахаров Г. Н. Проблемы диагностики и нормирования загрязнит I почв нефтью и нефтепродуктами // Почвоведение. 2003. № 9. С. 1132- !

114. Пиковский Ю. И. Природные и техногенные поп углеводородов в окружающей среде. М. : И^д-во Моск. ун-та, 1993. 20<Ч с.

115. Пиковский Ю. И., Солнцева Н. П. Геохимическая чр; и1 тллция дерново-подзолистых почв под влиянием потоков нефти < .могенные потоки вещества в ландшафтах и состояние экосистем. !. : Наука, 1981. С. 149-154.

116. Пиковский Ю. И. Трансформация техногенных пок' -> .е'>ги в почвенных экосистемах// Восстановление нефтезагрязненных по'. • ■ ых экосистем. М. : Наука, 1988. С. 7-22.

117. Плешакова Е. В., Дубровская Е. В., Турковская О. Г. 1 ■! мы стимуляции аборигенной нефтеокисляющей микрофлоры // Кил 1 ' >гия. 2005. № 1. С. 42-50.

118. Подгорнов А. С. Закрепление подвижных песков \ipmi ими способами //112

119. Природные условия и ресурсы пустынь СССР, их рациона ".мое использование. М., 1984. С. 402-406.

120. Полонская Д. Е., Золотухин Г. Е. Влияние выбора ¡ , одшественника на гумусовое состояние чернозема в агроценозах ¡срновых культур Красноярской лесостепи // Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. 1992. № 4. С. 3-7.

121. Полонская Д. Е., Полонский В. И. Реакция пом; -того микробного сообщества на низкие уровни нефтезагрязпспия // Per. конф. «Аграрная наука на рубеже веков». Красноярск: Изд-во КрасГАУ, 2007 С. " '--М.

122. Полонский В. И., Полонская Д. Е. Какова должна бы и. i; е *пьно допустимая концентрация нефти в почве? // Per. копф. «Аграрпаг ч; ; i >а рубеже веков». Красноярск: Изд-во КрасГАУ, 2005. С. 18-20.

123. Полонский В. И., Полонская Д. Е.,Лушникова Е. С. По; , ;а Л. Е. Влияние низких концентраций нефти в почве на рост растений // . ¡. конф. «Аграрная наука на рубеже веков». Красноярск: Изд-во КрасГАУ. С. 20-22.

124. Полонский В. И., Полонская Д. Е. Реакция растопи • низкие уровни нефтезагрязнения // Сибирский вестник сельскохо о 1 ■ юй науки. 2009. № 8. С. 18-22.

125. Полонский В. И., Сурпп И. А. Оценка зерновых ; ч па устойчивость к неблагоприятным экологическим факторам. НовоспС, pe i ')3. 128 с.

126. Пономарева Л. В., Цветкова Н. П., Осипов А. И. По го- , пкация процесса очистки почв от нефтепродуктов // Агрохимпчесг."" "пик. 2005. jY" 3. С. 5-8.

127. Порядок определения ра шеров ущерба от загрязнс oí ль химическими веществами. Методическ'оо письмо МПР, Роскомзем ■ и сльхозпрода РФ. М., 1993.

128. Предельно допустимые концентрации загрязняющп Гигиенические нормативы ГН 2.1.7.2041-06. М., 2006.

129. Райда В. С., Иваницкип А. Е., Минин А. С., ТолеI Iм о возбуждаемой солнечным излучением флуор чч фотолюминофоров на основе соединений европия п полиэтиленовых пленок с их добавками // Вести и г Г1 43. Серия: естественные и точные науки. С. 40-44.

130. Рахимова Э. Р., Гарусов А. В., Зарипова С. К. Ь нефтезагрязненной почвы при засолении // Поч'.о! С. 481-485.

131. Реппо Э.-Х. А. Способ определения фитотоксич.-ос 1 СССР № 682183. БИ № 32, 1979.

132. Рыбак В. К., Овчарова Е. П., КовалI. Э. 1 I загрязненной нефтью // Микробиологический ж\ ^ л С. 29-32.

133. Салем К. М., Перминова И. В., Гречишева М '( Мещеряков С. В. Биорекультивация нефтезагрязн -ч препаратами // Экология и промышленность России. ~

134. Сваровская Л. И., Иванов А. А., Юдина !! Стимулирующее влияние гуминовых кис ¡^ активность микроорганизмов нефтезагрязпенны п 2007. № 6. С. 60-64.

135. Свинцов И. П. Особешюс I и фитомелиорации иодвижн' -вяжущих веществ // Природные условия и рес\ рациональное использование. М., 1984. С. 422-428.

136. Седых В. Н., Игнатьев Л. А. Влияние отходи-физиологическое состояние растений // Спбирскпч 2002. № 1. С. 47-52.

137. Седых В. Н., Игнатьев Л. А., Семепюк М. В. Ре.веществ в почве.

138. А. Исследования щи и дисперсных I о корректирующих 2004. Вып. 6. №поская активность ■пче. 2005. № 4.почвы. Авт. свид.1.юфлора почвы, ¡'>84. Т. 46. № 4.1

139. Мурыгина В. П., • )чв гуминовыми ' "рель. С. 19-21.

140. Скворцова Т. А. Биоремидиация почвы ассоциацией углеводородоокис-ляющих микроорганизмов // Бюл.ВИУА. 2002. № 116. С. 445-447.

141. Славнина Т. П., Кахаткина М. И., Середина В. П., Изерская J1. А. Загрязнение нефтью и нефтепродуктами // Основы использования и охраны почв Западной Сибири. Новосибирск: Наука. Сиб. Отдние, 1989. С. 186-207.

142. Слейбо У., Персоне Т. П. Общая химия. М. : Мир, 1979. 551 с.

143. Солнцева Н. Р. Добыча нефти и геохимия природных ландшафтов. М. : Изд-во МГУ, 1998. 376 с.

144. Сопрунова О. Б. Использование цианобактериального комплекса для ремедиации нефтезагрязнеппых сред // Биотехнология. 2006. № 5. С. 52-56.

145. Стом Д. И., Балаян А. Э., Саксонов М. Н., Лозова Д. В. Токсикологическая оценка нефтезагрязненных вод с помощью ракообразных // Сибирский экологический журнал. 2003. № 5. С. 565-567.

146. Стом Д. И., Потапов Д. С., Балаян А. Э., Матвеева О. Н. Трансформация нефти в почве микробиологическим препаратом и дождевыми червями // Почвоведение. 2003. № 3. С. 359-361.

147. Таскаев А. И., Маркарова М. 10., Заикин И. А. Восстановление нефтезагрязненных земель на Севере // Экология и пром-сть России. 2004. Спец. вып. С. 19-23.

148. Терещенко Н. П., Лушников С. В., Пышьева Е. В. Рекультивация нефтезагрязненных почв // Экология и промышленность России. 2002. Октябрь. С. 17-20.

149. Трофимов С. Я., АммосоваЯ. М., Орлов Д. С., Осипова Н. Н., Суханова Н. И. Влияние нефти на почвенный покров и проблема создания нормативной базы по влиянию нефтезагрязнения на почвы 7/ Вестн. Моск. ун-та. Сер. 17 почвоведение. 2000. № 2. С. 30-34.

150. Трофимов С. Я. Рекультивация и инвентаризация загрязненных земель // Современные технологии и оборудование. 2006. № 3. С. 56-59.

151. Тульская Е.- М., Звягинцев Д. Г. Специфика иммобилизованных ферментов почв // Экологическая роль микробных метаболитов. М. : Изд-во Моск. ун-та, 1986. С. 5-28.

152. Хазиев Ф. X., Тишкина Е. И., Киреева Н. А. Влияние нефтепродуктов на биологическую активность почв // Биол. науки. 1988. № 10. С. 93-99.

153. Хазиев Ф. X., Тишкина Е. И., Киреева Н. А., Кузяхметов Г. Г. Влияние нефтяного загрязнения на некоторые компоненты агроэкосистемы // Агрохимия. 1988. №2. С. 56-61.

154. Хазиев Ф. X., Фатхиев Ф. Ф. Изменение биохимических процессов в почвах при нефтяном загрязнении и активация разложения нефти // Агрохимия. 1981. № 10. С. 102-111.

155. Халимов Э. Н., Левин С. В., Гузев В. С. Экологические и микробиологические аспекты повреждающего действия нефти на свойства почвы // Вестн. МГУ.

156. Сер. 17. Почвоведение. 1996. №.2. С. 59-64. \

157. Хейдеккер У. Регулирование внешней среды. М., 1961.

158. Черножуков Н. И., Обрядчиков С. Н. Химия нефти и нефтяных газов. М.-Л. : Гостоптехиздат, 1946. 254 с.

159. Чиркова Т. В. Физиологические основы устойчивости растений. Санкт-Петербург: изд-во С-Петербургского ун-та, 2002. 242 с.

160. Чупрова В. В. Экологическое почвоведение. Красноярск. КрасГАУ. 2007. 172 с.

161. Шашурин M. М. Влияние хронического действия экотоксикантов на физиолого-биохимические свойства растений, ферментный потенциал почв Центральной и Южной Якутии: Автореф. дне. .канд. биол. наук. Якутск, 2006. 24 с.

162. Шилова И. И. Биологическая рекультивация нефтезагрязненных земель в условиях таежной зоны // Восстановление нефтезагрязненных почвенных экосистем. М. : Наука, 1988. С. 159-168.

163. Шилова И. И. Влияние загрязнения нефтью на формирование растительности в условиях техногенных песков нефтегазодобывающих районов Среднего Приобья // Растения и промышленная среда. Свердловск, 1978. Вып. 5. С. 44-52.

164. Шилова И. И. Первичные сукцессии растительности на техногенных песчаных обнажениях в нефтегазодобывающих районах Среднего Приобья // Экология. 1977. №6. С. 5-15.

165. Шуйцев Ю. К. Деградация и восстановление растительных сообществ тайги в сфере влияния нефтедобычи // Добыча полезных ископаемых и геохимия природных экосистем. М.: Наука, 1982. С. 70-81.

166. Щербакова Т. А. Почвенные ферменты, их выделение, свойства и связь с компонентами почвы // Почвоведение. 1980. № 5. С. 102-113.

167. Эшмуратов Б. X., Мирзажанов К. М. Определение оптимальных доз противодефляционных химических препаратов // Тр. Союз НИХИ. 1989. Т. 62. С. 62-66.

168. Amadi A., Dickson A. A., Maate G. О. Remediation of Oil Polluted Soils: 1. Effect of organic and inorganic Nutrient supplements on the Performance of Maize {Zea may L). // Plant and Soil. 2005. № 270. P. 23-30.

169. Baker J. M. Seasonal effects of oil pollution on salt marsh vegetation // Oikos. 1971. Vol. 22. № 1. P. 106-110.

170. Banks M. K., Schultz К. E. Comparison of Plants for Germination Toxicity Tests in Petroleum — Contaminated Soils // Environmental Geochemistry and Health. 2005. № 27. P. 529-538.

171. Baran S., Bielinska J., Oleszczuk P. Enzymatic activity in an airfield soil polluted with polycyclic aromatic hydrocarbons // Geoderma. 2004 V. 118. N. 3-4.1. P. 221-232.

172. Batterton J. I., Winters К. V, Vaalen C. N. Van. Toxicity of crude oils and fuel oils presented directly to microalgae // J. Phycol. 1977. № 13: 2. P. 6-11.

173. Blankenship D. W., Larson R. A. Plant growth inhibition by water extract of a crude oil // Water, Air and Soil Pollut. 1978. Vol. 10. № 4. P. 471-473.

174. Bobra A. M., Shin W. L., Mackay D. G., Ronald U. K. Acute toxicity of dispersed fresh and weathered crude oil and dispersants to Original Research Article // Chemosphere. 1989. Vol. 19: 8-9. P. 1199-1222.

175. Budai F., Torok G., Gergely Z. Microbiological recultivation of oil-polluted agricultural areas//Proceedings. 1987. Vol. 2. P. 585-589.

176. Carls M. G., Marty G. D., Hose J. E. Synthesis of the toxicological impacts of the Exxon Valdez oil spill on Pacific herring (Clupea pallasi) in Prince William Sound,- Alaska, U.S.A. // Can. J. Fish. Aquat. Sci. 2002. Vol. 59. P. 153-172.

177. Chung M. K., Hu R., Wong M. PL, Cheung K. C. Comparative toxicity of hydrophobic contaminants to microalgae and higher plants // Ecotoxicology. 2005. № 14. P. 397-412.

178. Cohen Y., Aizenshtat Z. Oil degradation by cyanobacterial mats // 10th Int. Symp. Phototroph. Prokaryotes: Program and Abstr. Barcelona, 2000. P. 85.

179. El-Sheekh M. M., El-Naggar A. H., Osman M. E. H., Haieder A. Comparative Studies on the Green Algae Chlorella Homosphaera and Chlorella Vulgaris with to Oil Pollution in the River Nile // Plant and Soil. 2004. Vol. 267. P. 191 -206.

180. Freedman W., Hutchinson T. C. Physical and biological effects of experimental crude oil spills on Low Arctictundrainthevicinityof Tuktoyaktuk, N.W.T. Canada // Canad. J. Bot. 1976. Vol. 54. № 19. P. 2219-2230.

181. Giddens J. Spent Motor Oil Effects on Soil and Crops // Plant Soil Environ. 2005. Vol. 51. №8. P. 360-367.

182. Gong Z., Wilke B.-M., Alef K., Li P. Influence of soil moisture on sunflower oil extraction of polycyclic aromatic hydrocarbons from a manufactured gas plant soil // Science of The Total Environment. 2005. Vol. 343. May. P. 51-59.

183. Gong Z., Wilke B.-M., Alef K., Li P., Zhou Q. Removal of polycyclic aromatic hydrocarbons from manufactured gas plant-contaminated soils using sunflower oil: Laboratory column experiments // Chemosphere. 2006. Vol. 62. February. P. 780-787.

184. Hadzon R. E., Azam F., Lee R. F. Effects of four on marine bacterial population: controlled ecosystem pollution experiment // Bull. Mar. Sci. 1997. Vol. 27. P. 119-127.

185. Huang X.-D., El-Alawi Y., Gurska J., Glick B. R., Greenberg B. M. A multiprocess phytoremediation system for decontamination of persistent total petroleum hydrocarbons (TPIis) from soils // Microchemical Journal. 2005. Vol. 81. August. P. 139-147.

186. Hunt P. G., Ricard W. E., Denece F. J. Terrestrial oil spills in Alaska: Environmental effects and recovery // Proc. of joint conf. on precention and control of oil spills. Washington, 1973. P. 733-740.

187. Ilangovan K., Vivekanandan M. Effect of oil pollution on soil respiration and growth of Vigna mungo (L.) // The Science of The Total Environment. 1992. Vol. 116. P. 187-194.

188. Kalediene L., Giedraityte G. Influence of mineral fertilisers on microbial degradation of fuel oil in soil // Biologija. 2000. № 4. P. 41-44.

189. Kirkpatrick W. D., White Jr. P. M., Wolf D. C., Thoma G. J., Reynolds C. M. Selecting Plants and Nitrogen Rates to Vegetate Crude-Oil-Contaminated Soil // International Journal of Phytoremediation. 2006: December. P. 285 -297.

190. Kiss S., Pasca D., Dragan-Bularda M. Enzymology of Disturbed Soils. Amsterdam: Elsevier, 1998. P. 3-62.

191. Kramer U., Chardonnens A. N. The use of transgenic plants in the bioremediationof soils contaminated by trace elements // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2001.i ia55. P. 661-672.

192. Kucerova P., Wolter M., Macek T., Zadrazil F., Mackova M. The ability of different plant species to remove polycyclic aromatic hydrocarbons and polychlorinated biphenyls from incubation media //Plant and Soil. 2008. № 304. P. 249-255.

193. Lee E., Swindoll M. Bioventing for in situ remediation // Hidrol. Sci. J. 1993. Vol. 24. P. 113-125.

194. Maila M. P., Cloete T. E. Germination of Lepidium sativum as a method to evaluate polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) removal from contaminated soil // International Biodeterioration & Biodégradation. 2002. Vol. 50. September. P. 107-113.

195. Malallah G., Afzal M., Gulshan S., Abraham D., Kurian M., Dhami M.S.I. Vicia faba as a bioindicator of oil pollution // Environmental Pollution. 1996. Vol. 92.2. P. 213-217.

196. Markkola A. M., Tarvainen O., Ahonen-Jonnarth U. et al. Urban polluted forest soils induce elevated root peroxidase activity in Scots pine {Pinus sylvestris L.) seedlings // Environmental Pollution. 2002. V. 116. N. 2. P. 273-278.

197. McGrath D. Oil spillage on grassland effects on grass and soil // Farm Food Res. 1988. T. 19. №5. P. 28-29.

198. Meagher R. B. Phytoremediation of toxic elemental and organic pollutants // Cuit. Opin. Plant. 2000. № 3. p. 153-162.

199. Merkl N., Schultze-Kraft R., Arias M. Effect of the tropical grass Brachiaria brizantha (Hochst. ex A. Rich.) Stapf on microbial population and activity in petroleum-contaminated soil // Microbiological Research. 2006. Vol 161. № 1. P. 80-91.

200. Merkl N., Schultze-Kraft R., Infant C. Assessment of Tropical Grasses and1.gumes for Phytoremediation of Petroleum-Contaminated Soils // Water, Air, and120

201. Soil Pollution. 2005. № 165. P. 195-209.

202. Merkl N., Schultze-Kraft R., Infante C. Phytorémediation in the tropics influence of heavy crude oil on root morphological characteristics of graminoids // Environmental Pollution. 2005. November. P. 86-91.

203. Meudec A., Poupart N., Dussauze J., Deslandes E. Relationship between heavy fuel oil phototoxicity and polycyclic aromatic hydrocarbon contamination in Salicornia fragilis II Science of The Total Environment. 2007. Vol. 381. August.1. P. 146-156.

204. Minai-Tehrani D. Effect of heavy crude oil-contaminated soil on germination and growth of Poa trivialis (Rough meadow-grass) // Archives of Agronomy and Soil Science. 2008. February. P. 83-92.

205. Muratova A., Pozdnyakova N., Golubev S. et al. Oxidoreductase activity of sorghum root exudates in a phenanthrene-contaminated environment // Chemosphere. 2009. V. 74. N. 8. P. 1031-1036.

206. Offor U. S., Akonye L. A. Amendment of crude oil contaminated soil with sawdust and chromoleana leaves for optimum plant protection // African Journal of• Biotechnology. 2006. Vol. 5. № 9. P. 770-774.

207. Percy J. A., Mullin T. S. Effects of crude oils on the locomotory activity.of Arctic marine invertebrates//Mar. Poll. Bull. 1977. Vol. 8. № 2. P. 35-39.

208. Percy J. A. Responses of Arctic marine benthic crustaceans to sediments contaminated with crude oil//Environ. Poll. 1977. Vol. 13. P. 1-10.

209. Percy J. A. Responses of Arctic marine crustaceans to crude oil and oil-tainted food//Environ. Poll. 1976. Vol. 10. P. 155-162.

210. Rice S. D., Short J. W, Karinen J. F. Comparative oil toxicity and comparative animal sensitivity // Fate and Effects of Petroleum Hydrocarbons in Marine Ecosystems and Organisms. N. Y. : Pergamon Press, 1977. P. 78-94.

211. Rice S. D., Short J. W., Karinen J. F. Fate and Effects of Petroleum Hydrocarbons in Marine Ecosystems and Organisms. N. Y. // Pergamon Press. 1977. № 3. P. 78-94.

212. Riviere J., Galellier C. Evalution de la microflore d'un sol empregne d'hydrocarbures //Ann. Agron. 1976. Vol. 27. №1. P. 85-99.

213. Robson D. B., Knight J. D., Farrell R. E., Germida J. J. Ability of Cold-Tolerant Plants to Grow in Hydrocarbon-Contaminated Soil // International Journal of

214. Phytoremediation. 2003. April. P. 105-123.

215. Skujins J. History of abiotic soil enzyme research // Soil Enzymes / Ed. Burns R.G. N. Y.: Academic Press Inc., 1978. P. 1-49.

216. Suleiman M. K., Bhat N. R. Performance of Ornamental Plantsin Bioremediated Soil // Arid Land Research and Management. 2003. Vol. 17. April. P. 169-176.

217. Tang J., Wang R., Niu X. et al. Enhancement of soil petroleum remediation by using a combination of ryegrass (Lolium perenne) and different microorganisms // Soil and Tillage Research. 2010. V. 110. N. 1. P. 87-93.

218. Udo E. J., Fayemi A. A. The effect of oil pollution of soil on generation, growth and nutrient uptake of com//Environ. Qual. 1975. Vol. 4. № 4. P. 537-540.

219. Vaajasaar K., Joutti A., Schultz E., Selonen S., Westerholm H. Comparisons of Terrestrial and Aquatic Bioassays for Oil-Contaminated Soil Toxicity // JSS J

220. Soils & Sediments. 2002. Vol. 2. № 4. P. 194-202.

221. Wang J., Zhang Z., Su Y., He W., He F., Song H. Phytoremediation of petroleum polluted soil // Petroleum Science. 2008. Vol. 5. № 2. P. 167-171.

222. Zhan X., Wu W., Zhou L. et al. Interactive effect of dissolved organic matter and phenanthrene on soil enzymatic activities // Journal of Environmental Sciences. 2010. V. 22. N. 4. P. 607-614.