Постнатальный морфогенез обонятельных луковиц белой крысы в норме и после химической деафферентации

Невзорова, Марина Николаевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Постнатальный морфогенез обонятельных луковиц белой крысы в норме и после химической деафферентации
ВАК РФ 03.03.04, Клеточная биология, цитология, гистология

Автореферат диссертации по теме "Постнатальный морфогенез обонятельных луковиц белой крысы в норме и после химической деафферентации"

На правах рукописи

НЕВЗОРОВА Марина Николаевна

ПОСТНАТАЛЬНЫЙ МОРФОГЕНЕЗ ОБОНЯТЕЛЬНЫХ ЛУКОВИЦ БЕЛОЙ КРЫСЫ В НОРМЕ И ПОСЛЕ ХИМИЧЕСКОЙ ДЕАФФЕРЕНТАЦИИ

(экспериментально-морфологическое исследование)

03.03.04 - клеточная биология, цитология, гистология 14.03.01 - анатомия человека

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

2 2 СЕН 2011

Санкт-Петербург 2011

4853243

Работа выполнена на кафедре физиологии человека и животных Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Ярославский государственный университет им. П.Г. Демидова» Министерства образования и науки Российской Федерации

Научные руководители:

доктор биологических наук, профессор

доктор медицинских наук, профессор

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор

доктор медицинских наук, профессор

Тятенкова Наталия Николаевна Филимонов Владимир Иванович

Чумасов Евгений Иванович Макаров Феликс Николаевич

Ведущая организация: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И.П. Павлова» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию.

Защита состоится «... ^ »> 2011 года в часов на

заседании диссертационного совета^. 208.087.01 при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Санкт-Петербургская государственная педиатрическая медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации по адресу (194100, Санкт-Петербург, ул. Литовская д. 2).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО СПбГПМА Минздравсоцразвития России (194100, Санкт-Петербург, ул. Кантемировская, д. 16).

Автореферат разослан

Ученый секретарь диссертационного совета д.м.н., профессор

2011 года.

' у Н.Р. Карелина

Актуальность. Чувство обоняния играет важную роль в жизни человека и животных, поскольку химическая коммуникация является наиболее древним, общим для всех видов животных и конкретным каналом получения информации. Каждый предмет или химическое соединение имеет определенный, только ему свойственный запах, чего нельзя сказать про цвет или вкус (Бахтин Е.К., Субботин М.Я., 1983; Соколов В.Е., Зинкевич Э.П., 1987; Макарчук Н.Е., Калуев A.B., 2000).

Большое значение в процессах восприятия и обработки сенсорного сигнала имеют обонятельные луковицы. Вопреки классической точке зрения об обонятельных луковицах, как о простом «передаточном звене» проводящих путей от обонятельного эпителия в мозг, существующие сегодня данные позволяют говорить о важной роли луковиц в процессах первичной обработки, запоминания и эмоциональной оценки хемосенсорной информации. Повреждение обонятельных луковиц не только блокирует обонятельный анализатор, но и приводит к серьезным нарушениям поведения и всей эмоциональной сферы человека или животного (Шеперд Г., 1987; Калуев A.B., Кирюхина Н.В., 2003).

Традиционно считалось, что чувствительная иннервация выполняет чисто «афферентную» функцию, воспринимая изменения химических и физических параметров среды и передавая информацию в ЦНС, что рефлекторно активирует эфферентную систему и тем самым обеспечивает поддержание гомеостаза. На сегодняшний день в результате экспериментов доказано, что чувствительные терминали выполняют кроме афферентной еще и вторую - местную эффекторную функцию. Благодаря применению методов перерезок и антидромной стимуляции чувствительных нервов были накоплены доказательства местной эффекторной функции афферентных нейронов в регуляции кровотока, проницаемости сосудов, трофических и иммунных процессов, активности вегетативных ганглиев (Permkumar L., 2001; Albutaihi I. et al., 2004; Demirbilek S. et al., 2004; Lo Y. et al., 2005).

Хирургическая невротомия не позволяет проводить чистую деафферентацию, так как все периферические нервные стволы смешанные (Жукова Е.М., 2007). Решением послужило открытие селективной чувствительности афферентных нейронов к растительному алкалоиду капсаицину (Geppctti Р. et al., 1988). В настоящее время перспективно использование капсаицина для создания моделей клинической денервации и исследования эффекторной функции афферентной нервной системы.

В последние десятилетия активно исследовалось влияние химической деафферентации на сосудистое русло (Спиридонов В.К. с соавт., 2004; Воробьева Н.Ф. с соавт., 2005; Anand Р., 2003; Chen S. et al., 2007), кожу и подкожную соединительную ткань, легкие, печень, лимфоидные органы (Спиридонов В. К., 1994; Воробьева Н. Ф. с соавт., 1997; Жукова Е. М., Воробьева Н. Ф., 1998; Жукова Е.М., 2000, 2003; Толочко 3. С., 2001, 2002; Толочко З.С., Спиридонов В.К., 2004), нейроны различных отделов нервной системы (Румянцева Т.А., Шнлкин В.В., 2001; Румянцева Т.Д., 2002; Воробьева О.Б., 2005 и др.). В доступной литературе сведений о влиянии нейротоксических доз капсаицина на обонятельную луковицу не обнаружено.

Таким образом, вышесказанное позволяет заключить, что обонятельные луковицы играют существенную роль в восприятии и обработке сенсорной информации. Их повреждение может вызвать серьезные нарушения в поведении животных и человека. В связи с этим и, учитывая недостаточность сведений по данному вопросу в литературе, исследование химической деафферентации обонятельных луковиц и оценка степени обратимости этого процесса представляется актуальным.

Цель работы заключалась в выявлении закономерностей постнатальных морфологических преобразований обонятельных луковиц белой крысы в норме и в условиях химической деафферентации.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить возрастные преобразования ламинарной организации, клубочков и митральных нейроцитов обонятельных луковиц крысы в постнатальном онтогенезе.

2. Исследовать морфологические особенности и возрастные изменения сосудистого русла обонятельных луковиц белой крысы в раннем постнатальном онтогенезе.

3. Оценить секторальную асимметрию строения обонятельных луковиц крысы и ее возрастную динамику.

4. Выявить влияние химической деафферентации на морфометрические характеристики и состояние сосудистого русла обонятельных луковиц.

Научная новизна исследования. В результате исследования получены оригинальные данные о возрастных преобразованиях ламинарной организации, клубочков, митральных нейроцитов, а также формировании микроциркуляторного русла обонятельных луковиц белой крысы в постнатальном онтогенезе. Установлены общие закономерности постнатального развития обонятельной луковицы крысы и сроки достижения дефинитивного состояния.

Впервые показано, что в процессе развития темпы роста слоев обонятельной луковицы различны, в связи с этим меняется доля отдельных слоев в совокупной толщине.

Установлено, что в периферической зоне обонятельной луковицы плотность сосудов больше, чем в центральной. С возрастом неравномерность распределения сосудов в центральной и периферической зонах обонятельных луковиц усиливается.

В результате исследования выявлено, что обонятельные луковицы белой крысы имеют выраженное асимметричное строение.

Вентральный, дорсальный, медиальный и латеральный сектора обонятельных луковиц характеризуются различной толщиной слоев, размерами и плотностью клубочков, митральных клеток и плотностью

сосудов. Исключение составляет диаметр сосудов, который на всех участках обонятельных луковиц не различается.

В работе впервые оценено влияние химической деафферентации на морфометрические характеристики обонятельных луковиц белой крысы. Выявлено, что химическая деафферентация капсаицином вызывает незначительные изменения размеров и ламинарного строения обонятельных луковиц. Деафферентация вызывает изменение количества и размеров клубочков обонятельной луковицы крысы, приводит к патологическим изменениям митральных клеток обонятельных луковиц крысы и гибели части митральных нейроцитов. Выявлены качественные изменения и увеличение диаметра сосудов обонятельных луковиц деафферентированных животных.

Теоретическая и практическая значимость работы. В результате проведенного исследования получены нормативные возрастные характеристики ламинарной организации, клубочков, митральных нейроцитов и сосудистого русла обонятельных луковиц белой крысы в постнатальном онтогенезе, которые могут служить основой для морфологических исследований органов и тканей в эксперименте. Установлено, что обонятельные луковицы имеют выраженное асимметричное строение, что необходимо учитывать в экспериментальной и клинической работе. Показано, что данная схема введения нейротоксина может использоваться для моделирования состояния дефицита афферентной иннервации, в целях фундаментальных исследований структуры и функции органов, адаптивных возможностей организма в целом и отдельных его систем при воздействии различных факторов, а также механизмов действия лекарственных препаратов.

Полученные нормативные данные относительно строения и развития обонятельных луковиц используются в учебном процессе при подготовке специалистов на кафедре морфологии Ярославского государственного университета им. П.Г. Демидова и кафедре анатомии человека Ярославской государственной медицинской академии.

На защиту выносятся следующие положения:

1. Становление обонятельных луковиц наиболее интенсивно проходит в течение первого месяца жизни крыс, а морфологическая зрелость наступает к третьему месяцу.

2. Обонятельные луковицы белой крысы имеют выраженное асимметричное строение.

3. Неонатальная химическая деафферентация оказывает влияние на морфологическое строение обонятельных луковиц и их возрастные преобразования.

Апробация работы. Материалы исследования доложены на Пироговской студенческой научной конференции (Москва, 2001); IV Международной конференции по функциональной нейроморфологии «Колосовские чтения» (Санкт-Петербург, 2002); III Всероссийской конференции с международным участием, посвященной 175-летию со дня рождения Ф.В. Овсянникова «Механизмы функционирования висцеральных систем» (Санкт-Петербург, 2003); Международной научной конференции «Гемореология в макро- и микроциркуляции» (Ярославль, 2005); Всероссийской научной конференции «Актуальные вопросы эволюционной, возрастной и экологической морфологии» (Белгород, 2006); Международных конференциях студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов» (Москва, 2007, 2008, 2010); V Всероссийской конференции с международным участием, поев. 100-летию со дня рождения В.Н. Черниговского «Механизмы функционирования висцеральных систем» (Санкт-Петербург, 2007); Международной НПК «Актуальные вопросы морфологии» (Гродно, 2008).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 26 научных работ, из них 6 в рецензируемых профильных журналах.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 190 страницах текста, содержит 10 таблиц, 24 приложения и иллюстрирована 57 рисунками. Состоит из введения, обзора литературы, главы с описанием методов исследования, двух глав с изложением полученных результатов, анализа

результатов исследования, выводов, списка литературы, содержащего 213 источников, в том числе 118 иностранных.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В настоящем исследовании, исходя из его цели и задач, предпринято изучение строения и постнаталыюго развития обонятельных луковиц белой крысы в норме и эксперименте.

В работе проведены 2 серии опытов. В первой серии опытов изучен постнатальный морфогенез обонятельных луковиц интактной белой крысы. Животные исследовались »a 1,3, 5, 7, 10, 14, 21, 30, 60, 90, 180-е сутки после рождения.

Во второй серии опытов исследовали строение и развитие обонятельных луковиц белой крысы в условиях химической деафферентации. Деафферентация осуществлялась однократным подкожным введением крысятам на вторые сутки жизни раствора капсаицина (100 мг/кг), содержащего ТВИН-80 в качестве наполнителя. Контролем деафферентации служило убывание количества нейроцитов в спинномозговых узлах на 3060% (Румянцева Т.А., 2002). Животных выводили из опыта на 5, 10, 14, 21, 30, 60, 90 и 180-е сутки жизни.

Для исследования из каждой возрастной группы использовалось по 3 крысы. Всего было исследовано 486 обонятельных луковиц от 243 животных.

В исследовании применялись стандартные анатомические, гистологические, гистохимические и морфометрические методики. Для изучения клеточных элементов и слоев обонятельных луковиц проводилась заливка в парафин с последующей окраской срезов по Нисслю и гематоксилином-эозином. С целью исследования характеристик микроциркуляторного русла обонятельных луковиц методом азосочетания выявлялась щелочная фосфатаза эндотелия сосудов.

Измерялись и рассчитывались по стандартным формулам следующие показатели: диаметры, площадь и форма обонятельных луковиц на поперечном сечении, толщина их слоев, плотность расположения, диаметры,

форма и площадь клубочков, площадь перикариона, площадь ядра, ядерно-цитоплазматическое отношение, количество ядрышек и форма митральных нейроцитов, периметр, площадь, диаметр и плотность расположения сосудов. Для оценки формы обонятельных луковиц и клеток использовали форм-фактор (FF). Ввиду асимметричности обонятельных луковиц все описанные параметры были исследованы в четырех секторах обонятельных луковиц: медиальном, латеральном, вентральном и дорсальном.

Статистическая обработка полученных данных проводилась с помощью программы «Microsoft Excel». Достоверность различия средних оценивалась по t - критерию Стьюдента (р < 0,05).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Согласно полученным результатам, в постнатальном морфогенезе обонятельных луковиц интактной белой крысы можно выделить три основных периода. Первый период - интенсивный рост - наблюдается в течение первого месяца жизни. За это время площадь поперечного сечения луковицы увеличилась в три раза. Второй период - стационарный -характеризуется стабильными морфометрическими показателями и отмечен с 30-х по 90-е сутки. Третий период - регрессивный - наступает после 90-х суток, в течение этого времени площадь поперечного сечения луковицы уменьшилась на 21 %. Возможно, это явление связано с ростом лицевого черепа, вытягиванием обонятельных луковиц и перераспределением клеточного материала.

Интенсивное развитие обонятельных луковиц в раннем постнатальном периоде можно объяснить появлением сенсорной стимуляции, которая по данным ряда авторов (Benson Т.Е., 1984; Stahl В. et al., 1990) необходима в первые дни жизни для нормального развития обонятельного анализатора. Кроме того, установление связей между периферической и центральной частями обонятельного анализатора сопровождается наиболее интенсивными

процессами гистологической дифференцировки как в периферической, так и в центральной его частях (Винников Я.А., Титова Л.К., 1957).

Зрелость обонятельных луковиц определяется по степени дифференцировки нервной ткани: наличию клубочков, обособлению слоев и др. Все основные слои обонятельной луковицы крысы (слой клубочков, наружный плексиморфный, митральных клеток, внутренний плексиморфный, клеток-зерен) к моменту рождения уже сформированы. Однако в этот период не всегда четко дифференцируется внутренний плексиморфный слой, не сформирована капсула клубочков и характерная структура слоя клеток-зерен. Клубочки единичны и расположены в один ряд.

Наличие основных слоев и таких функционально значимых морфологических структур как обонятельные клубочки и митральные клетки в обонятельных луковицах новорожденных крыс может свидетельствовать о потенциальной готовности животных к восприятию запахов. С другой стороны, не всегда выделяемый внутренний плексиморфный слой и не структурированный слой клеток-зерен у новорожденных говорят о том, что связи обонятельных луковиц с высшими отделами обонятельного анализатора еще не сформированы. Эти связи формируются уже в постнатальном периоде (Пилипенко В.И., 1968; ВгшуеБ С.,1994).

В течение первой недели жизни животных формируется структура внутреннего плексиморфного слоя и слоя клеток-зерен, что отражает образование связей обонятельных луковиц с высшими отделами обонятельного анализатора и развитие клеток-зерен. По истечении двух недель закрывается полость обонятельной луковицы.

Отсутствие у новорожденных животных характерной структуры плексиморфных слоев и слоя клеток-зерен, а также клеточной капсулы клубочков подтверждается данными о постнатальном формировании основной части популяций пучковых, гранулярных (клеток-зерен) и перигломерулярных клеток (Пилипенко В.И., 1968; ВпиуеБ Б.С.,1994). Образование после рождения локальной сети интернейронов обонятельных

луковиц, состоящей из перигломерулярных клеток и клеток-зерен, позволяет производить тонкое распознавание запаха (Майоров В.А., 2006; Sallivan S.L., Dryer L., 1996).

У новорожденных животных клеточные слои на стандартном поперечном сечении имели разную толщину. В порядке уменьшения доли, занимаемой в совокупной толщине обонятельной луковицы, слои располагались следующим образом: СКЗ>СК>СМК>НПОВПС.

Толщина выявляемых клеточных слоев обонятельных луковиц на протяжении всего периода наблюдения изменялась не однозначно. Наиболее интенсивно развивается наружный плексиморфный слой. Его толщина за шесть месяцев увеличивалась в 4,4 раза. Толщина слоя клубочков увеличивалась первые два месяца в 2,6 раза, толщина слоя клеток-зерен нарастала первые три недели в 2,2 раза, толщина внутреннего плексиморфного слоя увеличивалась в течение первых двух недель в 1,3 раза. Толщина слоя митральных клеток уменьшалась на 41% (в течение всего исследованного периода). Очевидно, что наибольшее развитие претерпевали периферические слои клеток, расположенные кнаружи от митральных. Вследствие неравномерного роста, доля слоев в совокупной толщине луковицы на стандартном сечении изменялась: СКЗ>НПОСК>ВПО СМК.

В течение трех недель усложнялась структура слоя клубочков: клубочки располагаются вплотную, иногда группами по 3-4 образования в 12 ряда. Увеличение количества клубочков происходило в течение первых трех месяцев после рождения. Увеличение размеров и количества клубочков, а следовательно и толщины соответствующего слоя, объясняется продолжением формирования синапсов между дендритами митральных клеток и аксонами обонятельных рецепторных клеток в постнатальном периоде жизни крыс (Винников Я.А.,1971). Увеличение количества клубочков в обонятельных луковицах крыс до шестимесячного возраста подтверждено данными литературы (Liu W.L., 1998).

Средняя площадь сечения клубочков после рождения увеличивалась и достигала максимальных значений к 21 суткам. В дальнейшем она прогрессивно уменьшалась, убыль с 21 по 180 сутки составила 42%. Вероятно, процесс уменьшения данного морфометрического показателя отражает закладку более мелких клубочков.

Количество митральных клеток за период исследования сокращалось, а число их рядов уменьшалось - у трехнедельных животных они располагаются в один ряд, это позволяет предположить, что данные клетки закладываются в избытке. Динамика мерных характеристик митральных клеток обонятельных луковиц позволяет выделить периоды интенсивного роста (1-5 сутки жизни), уменьшения темпов роста (5-30 сутки) и мерных характеристик. После 30-х суток наступает стабилизация - отсутствие изменений в мерных характеристиках митральных клеток. Уменьшение ядерно-цитоплазматического отношения и количества ядрышек митральных клеток в первое полугодие жизни крыс может свидетельствовать об изменении интенсивности белкового синтеза этих нейронов.

В результате исследования микроциркуляторного русла обонятельных луковиц выявлено, что плотность сосудов в центральной и периферической зонах данных образований различна. В периферической зоне (соответствует слою клубочков, наружному плексиморфному, слою митральных клеток и внутреннему плексиморфному слою) количество сосудов на единицу площади значительно больше, чем в центральной (соответствует слою клеток-зерен). Неравномерность распределения сосудов на поперечном срезе исследуемого органа, вероятно, связана с функциональной активностью и размерами клеток клубочкового и митрального слоев. Митральные клетки постоянно участвуют в проведении информации о запахах в корковый отдел обонятельного анализатора. Крупные нейроны, к числу которых относятся и митральные, снабжаются кровью из 2-3-х и более капилляров (Иванов К.П., 2002). Диаметр сосудов обонятельной луковицы крысы не зависел от их локализации.

Плотность сосудов в периферической зоне увеличивалась в первый месяц жизни, а в центральной зоне обонятельной луковицы - уменьшалась в первые три недели жизни животных. Диаметр сосудов уменьшался вплоть до 3 месяцев. Отрицательная возрастная динамика диаметра сосудов может свидетельствовать об усилении сосудосуживающих влияний в результате становления симпатической нервной системы и/или закладке более мелких сосудов.

По большинству исследуемых показателей (исключение составляет диаметр сосудов) выявлена асимметрия в строении разных секторов обонятельной луковицы. При этом градиент асимметрии с возрастом изменялся, а различия между секторами увеличивались (исключение составляли морфометрические показатели слоя митральных клеток). В начале жизни животных максимальными значениями изученных параметров характеризуются вентральный и медиальный секторы, а минимальными -латеральный и дорсальный (толщина слоя клубочков и слоя митральных клеток, площадь и плотность митральных клеток, площадь и плотность клубочков и т. д.). К концу исследования максимальными значениями морфометрических показателей обладают медиальный и латеральный секторы, промежуточными - вентральный, минимальными - дорсальный. Изменение градиента асимметрии в раннем постнатальном онтогенезе обусловлено неравномерными темпами роста секторов. Максимальными темпами роста, как правило, характеризуются латеральный и медиальный, минимальными - вентральный и дорсальный секторы.

Происхождение асимметрии, возможно, объясняется несимметричной иннервацией обонятельных луковиц. Известно, что волокна обонятельного нерва подходят к обонятельной луковице спереди и снизу (Огородникова Е.В., 1998; Тятенкова Н.Н.,1998). Кроме того, клубочки и митральные клетки, ответственные за восприятие разных по химической природе одорантов, топографически обособлены. Аминокислоты возбуждают активность клубочков вентро-латерального, углеводороды - вентрального,

алифатические кислоты, альдегиды и амины - дорсального сектора обонятельной луковицы (Katoh et al., 1993; Fuss S.H., 2002; Uchidaet al., 2000; Takahashi et al., 2004). Возможно, клубочки и митральные клетки, воспринимающие разные запахи, характеризуются различной величиной и плотностью.

Таким образом, исследование постнатального развития обонятельных луковиц показало, что у новорожденных они представляют незрелое морфологическое образование, однако наличие клубочков свидетельствует о возможности тестирования одорантов уже в первые дни жизни. Становление обонятельных луковиц наиболее интенсивно проходит в течение первого месяца жизни, а морфологическая зрелость наступает к третьему месяцу.

Неонатальная химическая деафферентация капсаицином вызывает изменение морфометрических характеристик обонятельной луковицы крысы, в меньшей степени затрагивающее размеры и ламинарное строение, и в значительной степени - тонкое строение органа, а именно, клубочки, нейроны и микроциркуляторное русло.

Площадь сечения деафферентированной обонятельной луковицы и совокупная толщина слоев в большинстве исследованных сроков не отличается от площади интактной.

Толщина слоя клубочков на протяжении всего периода исследования у деафферентированных и интактных животных не различалась. Толщина наружного плексиморфного слоя у двух исследуемых групп животных не отличалась, лишь у двухнедельных деафферентированных крыс была меньше контрольных значений. Слой митральных клеток у деафферентированных животных в течение первых двух недель истончался, а в дальнейшем не отличался от контроля. Толщина внутреннего плексиморфного слоя в эксперименте на 10, 14, 30 и 180-е сутки была меньше, чем в контроле, в другие сроки различия не выявлены. Слой клеток-зерен деафферентированных крыс был меньше, чем у интактных животных с 14 по 21 сутки. Уменьшение толщины слоев обонятельной луковицы не превышает

19%. Оно может объясняться уменьшением количества клеточных элементов и нервных волокон или уменьшением их размеров.

Деафферентация вызывает изменение количества и размеров клубочков обонятельных луковиц. Количество клубочков на срезе обонятельной луковицы деафферентированной крысы с 10 по 30 сутки превышает, а с 60 по 180 - достоверно меньше данного показателя у интактных животных (рис. 1). Площадь клубочков в результате химической деафферентации уменьшалась, максимальные различия зафиксированы к концу 1-го месяца жизни (52%), но в отдаленные сроки (90, 180 суток) достигает уровня интактных крыс. Увеличение количества клубочков в начале жизни деафферентированных животных, сопровождающееся уменьшением их размера, может говорить о фрагментации этих структур. Меньшее количество клубочков у деафферентированных крыс с двухмесячного по шестимесячный возраст, вероятно, свидетельствует об уменьшении их новообразования в результате деафферентации.

Рис. 1. Изменение количества клубочков на поперечном срезе обонятельной луковицы крысы при химической деафферентации.

Химическая деафферентация капсаицином вызывает патологические изменения митральных клеток обонятельных луковиц крысы. Выявлялись гипохромные митральные нейроны, у которых отмечался периферический хроматолиз, а также «сморщенные» гиперхромные клетки с гиперхроматозом или пикнозом ядра. Были отмечены клетки с периферическим положением ядра и безъядерные. В соответствии с данными Ю.Ю. Жаботинского (1965) и Н.Е. Ярыгина с соавт. (1973) эти изменения можно рассматривать как разные фазы дистрофических и деструктивных процессов.

Неонаталыюе введение сенсорного нейротоксина капсаицина вызывает гибель части митральных нейроцитов - вторых нейронов обонятельного анализатора (рис. 2). Уже на 5 сутки гибнет 31 % нейронов, что свидетельствует о прямом влиянии на них нейротоксина. Гибель митральных клеток в ранние сроки не заканчивается, у 2-месячных животных она составляет 49%, отражая вторичные нейродистрофические изменения. В течение всего периода наблюдения в обонятельной луковице деафферентированной крысы количество митральных клеток снижено и сохраняются патологически измененные нейроны. Гибель чувствительных нейронов спинномозговых узлов при введении капсаицина отмечали Т.Р. Ковригина (2000), Т.А. Румянцева (2002), В.В. Порсева (2006).

В условиях химической деафферентации изменялись площадь перикариона и площадь ядра митральных клеток обонятельных луковиц крысы. Площадь перикариона митральных клеток деафферентированной крысы в начале жизни (5, 10 суток) не отличалась от значения данного показателя у интактных животных. Затем на 14, 30, и 180-е сутки площадь митральных нейроцитов деафферентированных животных уступала таковой интактных клеток, уменьшение составило 31%. Аналогичные изменения происходили и с площадью ядра митральных клеток, которая при деафферентации была меньше нормы на 14, 30, 90, 180-е сутки. Уменьшение площади митральных нейроцитов, а соответственно и их ядер в условиях химической деафферентации капсаицином в начале жизни можно объяснить

нарушением роста клеток в результате изменения нормальной трофики, а затем появлением гиперхромных «сморщенных» нейронов. Нельзя исключать также гибель наиболее крупных нейроцитов.

Рис. 2. Изменение количества митральных клеток на поперечном срезе обонятельной луковицы крысы при химической деафферентации.

Наряду с изменением размера в результате деафферентации меняется и форма митральных клеток. Митральные нейроциты деафферентированных животных имеют более круглую (РР=0,71) по сравнению с нормой форму, что возможно объясняется отечными изменениями. В дальнейшем появляются гиперхромные «сморщенные» нейроны, имеющие вытянутую форму (РР=0,57).

В некоторые сроки (21 и 180-е сутки) ядерно-цитоплазматическое отношение митральных клеток деафферентированных животных было выше, чем у интактных, в другие сроки - не отличалось. Количество ядрышек митральных нейронов деафферентированных крыс в течение первых двух

месяцев жизни было больше, чем у интактных животных, а на 90 и 180-е сутки - меньше. Увеличение размеров ядра по отношению к цитоплазме, увеличение количества ядрышек в течение первых двух месяцев свидетельствуют о функциональном напряжении нервных клеток. Дальнейшее уменьшение количества ядрышек совпадает с увеличением количества «сморщенных» клеток, функциональная активность которых резко снижена.

Полученные данные согласуются с данными исследователей (Шилкин В.В. с соавт., 1999; Румянцева Т.А. с соавт., 1999; Румянцева Т.А., Воробьева О.Б., 2000; Порсева В.В., 2006; Фоканова O.A., 2006), отмечавших после введения капсаицина изменение морфометрических характеристик нейроцитов в спинномозговых узлах, каудальном узле блуждающего нерва, тройничном узле, интрамуральных ганглиях глотки, желудка, двенадцатиперстной кишки и прямой кишки.

Сравнение срезов обонятельных луковиц интактных и химически деафферентированных животных выявило качественные изменения стенки сосудов последних: сосуды имели неровные контуры, их просвет был неравномерно расширен. Одновременно у деафферентированных животных наблюдалось увеличение диаметра сосудов по сравнению с контролем. В литературе отмечено набухание эндотелия, утолщение стенки капилляров и уменьшение их просвета при введении нейротоксических доз капсаицина (Воробьева Н.Ф. с соавт., 1997; Толочко З.С., 2001; Holzer Р., 1992). Возможно, утолщение эндотелиальной стенки приводит в итоге к увеличению диаметра сосуда при деафферентации. Указанные изменения в стенке сосудов могут возникать в связи с недостаточностью влияния нейропептидов, которым отводят роль трофических регуляторов в нервной системе (Никифоров А.Ф., 1973; Немечек С., 1978; Поленов С.А., 2001).

Вслед за увеличением диаметра сосудов при химической денервации уменьшалась плотность сосудов, что совпадает с данными литературы (Румянцева Т.А., 2002). Снижение плотности сосудов у

деафферентированных животных относительно контроля было наибольшим в два месяца и составило в периферической зоне обонятельных луковиц 16%. Уменьшение плотности сосудов может быть вызвано угнетением ангиогенеза или разрушением сосудов. По данным Н.Ф. Воробьевой с соавт., (1997) после введения капсаицина отмечались капилляры с признаками деструкции.

Обонятельные луковицы деафферентированной крысы, как и у интактной, сохраняли асимметричное строение. В разных секторах обонятельной луковицы морфометрические показатели (толщина слоев, размеры и плотность клубочков, митральных клеток и сосудов) были различны. После химической деафферентации сохранялся секторальный градиент асимметрии обонятельных луковиц. Специфичной реакции на капсаицин со стороны морфометрических показателей отдельных секторов не выявлено.

Таким образом, химическая деафферентация вызывает отклонения от нормального постнатального развития обонятельных луковиц белой крысы, наиболее выраженные в течение первого месяца, и в большей степени затрагивающие клубочки и митральные клетки, непосредственно участвующие в проведении обонятельной информации. В течение первых шести месяцев постнатальной жизни восстановление всех морфометрических показателей обонятельных луковиц животных не происходит.

ВЫВОДЫ

1. Постнатальное развитие обонятельных луковиц белой крысы характеризуется гетерохронным достижением дефинитивных значений ее морфометрических показателей. К десятым суткам заканчивается рост внутреннего плексиморфного слоя, к третьей неделе - слоя клеток-зерен, к концу второго месяца - слоя клубочков, к концу третьего месяца -наружного плексиморфного слоя. Толщина слоя митральных клеток уменьшается в течение первых трех месяцев жизни.

2. У новорожденных крыс обонятельные луковицы полностью не сформированы, морфологическая зрелость наступает к третьему месяцу, однако наличие клубочков свидетельствует о возможности тестирования одорантов уже в первые дни жизни.

3. В периферической зоне обонятельных луковиц плотность сосудов микроциркуляторного русла больше, чем в центральной, тогда как диаметр сосудов на всех участках обонятельных луковиц не различается. С возрастом неравномерность распределения сосудов в центральной и периферической зонах обонятельных луковиц усиливается. Диаметр сосудов с возрастом уменьшается во всех зонах.

4. Установлено, что обонятельные луковицы белой крысы имеют выраженное асимметричное строение. Вентральный, дорсальный, медиальный и латеральный сектора обонятельных луковиц характеризуются различной толщиной слоев, размерами и плотностью клубочков, митральных клеток и плотностью сосудов.

5. Неонатапьная химическая деафферентация вызывает отклонения от нормального постнатального развития обонятельных луковиц белой крысы, наиболее выраженные в течение первого месяца жизни. У шестимесячных животных восстановление всех морфометрических показателей обонятельных луковиц не происходит.

6. Дефицит афферентной иннервации приводит к качественным и количественным изменениям следующих показателей обонятельных луковиц: уменьшение толщины отдельных слоев, уменьшение количества и размера клубочков, патологические изменения и гибель части митральных нейроцитов, изменение их ядерно-цитоплазматического отношения и количества ядрышек, патологические изменения микрососудов, уменьшение их плотности и увеличение диаметра.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Невзорова М.Н., Огородникова Е.В., Тятенкова H.H. Постнатальное развитие обонятельного эпителия белой крысы // Современные проблемы биологии и химии. Ярославль: Ярославский государственный университет им. П.Г. Демидова, 2000. - С. З-б.

2. Невзорова М.Н. Морфогенез носовой полости в раннем постнаталыюм онтогенезе белой крысы // Сборник научных работ студентов и молодых ученых Ярославской государственной медицинской академии. Ярославль: Ярославская государственная медицинская академия, 2001. - С. 21-22.

3. Невзорова М.Н. Раннее постнатальное развитие периферической части обонятельного анализатора // Вестник Российского государственного медицинского университета: материалы Пироговской студенческой научной конференции (Москва, 22 марта 2001 г.). Москва, 2001,- № 2 (17). -С. 149.

4. Невзорова М.Н., Огородникова Е.В., Тятенкова H.H. Становление обонятельной системы белой крысы // Современные проблемы биологии, химии, экологии и экологического образования. Ярославль: Ярославский государственный университет им. П.Г. Демидова, 2001.- С. 291-294.

5. Невзорова М.Н., Тятенкова H.H., Филимонов В.И. Топография сосудистого русла обонятельных луковиц белой крысы в раннем постнатальном онтогенезе // Колосовские чтения - 2002: 4 Международная конференция по функциональной нейроморфологии (Санкт-Петербург, 29-31 мая 2002 г.). СПб.: Институт физиологии им. И.П. Павлова РАН, 2002. - С.195-196 .

6. Румянцева Т.А., Ковригина Т.Р.. Невзорова М.Н., Филимонов В.И., Румянцева O.A. Изменение структур нервной системы при химической десимпатизации // Морфология, 2002.- Т. 121,- № 2-3. -С.133-134.

7. Невзорова М.Н. Изменения микроциркуляторного русла обонятельных луковиц белой крысы после химической десимпатизации // Сборник научных работ студентов и молодых ученых Ярославской государственной медицинской академии. Ярославль: Ярославская государственная медицинская академия, 2003. - С. 14.

8. Тятенкова H.H., Невзорова М.Н., Филимонов В.И. Особенности постнатального развития сосудов обонятельной луковицы интактной и десимпатизированной крысы // Механизмы функционирования висцеральных систем: III Всероссийская конференция с международным участием, посвященная 175-летию со дня рождения Ф.В. Овсянникова (29 сентября - 1 октября 2003 г., Санкт-Петербург). СПб.: Институт физиологии им. И.П. Павлова РАН, 2003. - С. 324-325.

9. Филимонов В.И., Невзорова М.Н., Тятенкова H.H. Характеристика сосудов обонятельных луковиц в постнатальном онтогенезе белой крысы // Морфологические ведомости, 2003. - №3-4. С. 41-42.

Ю.Невзорова М.Н., Тятенкова H.H., Огородникова Е.В., Филимонов В.И. Постнатальное становление обонятельных луковиц белой крысы // Вопросы физиологии и водной токсикологии: Межвузовский сборник научных трудов / Под ред. проф. И.Ю. Мышкина. - Ярославль, 2003. - С. 58-60.

П.Невзорова М.Н., Огородникова Е.В., Тятенкова H.H. Формирование клеточных слоев и микроциркуляторного русла обонятельных луковиц белой крысы в первый месяц постнатального развития // Региональный сборник научных трудов молодых ученых "Современные проблемы биологии, экологии, химии". - Ярославль: ЯрГУ, 2003. - С. 106-109.

12.Невзорова М.Н., Тятенкова H.H., Филимонов В.И. Морфометрические характеристики микроциркуляторного русла обонятельной луковицы десимпатизированной белой крысы // Морфология. С-Пб.: «Эскулап», 2004. Т 125. №3. С.86-88.

13.Филимонов В.И., Невзорова М.Н. Влияние химической деафферентации на морфометрические характеристики сосудов обонятельной луковицы белой крысы // Морфология. С-Пб.: «Эскулап», 2004. Т 126. №4. С.128-129.

14.Филимонов В.И., Невзорова М.Н. Влияние химической денервации на морфометрические характеристики сосудов обонятельной луковицы белой крысы // Актуальные проблемы морфологии. Сборник научных трудов. Красноярск, 2004. С. 260-262.

15.Невзорова М.Н., Тятенкова H.H..Филимонов В.И. Зональные особенности строения и кровоснабжения обонятельной луковицы белой крысы // Международной научная конференция «Гемореология в макро- и микроциркуляции». Ярославль, 2005.

16.Невзорова М.Н., Тятенкова H.H., Филимонов В.И. Постнатальное развитие митральных клеток обонятельных луковиц белой крысы // Материалы Всероссийской научной конференции «Актуальные вопросы эволюционной, возрастной и экологической морфологии». Белгород. 2006. С. 118.

17.Филимонов В.И., Невзорова М.Н., Тятенкова H.H. Морфометрические характеристики обонятельной луковицы белой крысы // Морфология. 2006. Т.129. № 2. С.97.

18.Невзорова М.Н. Закономерности развития обонятельных луковиц // XIV Международная конференция молодых ученых «Ломоносов - 2007». Москва, 2007. С.

19.Невзорова М.Н., Тятенкова H.H. Становление обонятельных луковиц в пре- и постнаталыюм онтогенезе белой крысы // Астраханский медицинский журнал. Астрахань, 2007, Т. 2. №2. С. 128.

20.Невзорова М.Н., Тятенкова H.H., Филимонов В.И. Постнатальное становление обонятельных луковиц белой крысы // Материалы Всероссийской научно-практической конференции «Экологические проблемы уникальных природных и антропогенных ландшафтов». Ярославль, 2007. С. 92-98.

21.Невзорова М.Н., Тятенкова H.H., Филимонов В.И. Влияние химической деафферентации на постнатальное развитие обонятельной луковицы белой крысы // Механизмы функционирования висцеральных систем // V Всероссийская конференция с международным участием, поев. ЮО-летию со дня рождения В.Н. Черниговского - С.-Пб, 2007.- С. 218-219.

22.Невзорова М.Н. Изменение обонятельной луковицы крысы под действием химической деафферентации // XV Международная конференция молодых ученых «Ломоносов - 2008». Москва, 2008. С. 220-221.

23.Невзорова М.Н., Тятенкова H.H., Филимонов В.И., Бубенкова Е.В. Постнатальное развитие обонятельных луковиц крысы в условиях химической деафферентации капсаицином // Вопросы физиологии и водной токсикологии /межвузовский сборник научных трудов. Ярославль: ЯРГУ, 2008. С. 85-89.

24.Невзорова М.Н., Тятенкова H.H., Филимонов В.И. Ассиметрия строения обонятельной луковицы белой крысы // Актуальные вопросы морфологии/Сб.трудов Международной НПК. Гродно, 2008. С.83-84.

25.Филимонов В.И., Невзорова М.Н., Тятенкова H.H. Возрастные изменения морфометрических характеристик обонятельной луковицы белой крысы // Морфологические ведомости. № 1-2. М., 2008. С.111-113.

26.Невзорова М.Н. Влияние химической деафферентации на митральные клетки обонятельной луковицы крысы // XVII Международная конференция студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов -2010». Москва, 2010. С. 282-283.

Список сокращений

CK - слой клубочков

НПС - наружный плексиморфный слой

СМК - слой митральных клеток

ВПС - внутренний плексиморфный слой

СКЗ - слой клеток-зерен

FF - форм-фактор

Подписано в печать 18.08.11. Формат 60x84/16. Объём усл. печ. л. 1,0. Бумага оф. Отпечатано на ризографе.

Тираж 100 экз. Заказ 21/11. Отдел оперативной полиграфии ЯрГУ 150000, Ярославль, ул. Советская ,14.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Невзорова, Марина Николаевна

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1 Значение обонятельной системы

1.2 Строение обонятельных луковиц

1.3 Развитие обонятельных луковиц

1.4 Химическая деафферентация

1.4.1 Значение афферентной нервной системы

1.4.2 Свойства капсаицина

1.4.3 Последствия химической деафферентации

1.4.4 Деафферентация обонятельных луковиц

Глава 2. Обоснование материалов и методов исследования

Глава 3. Постнатальный морфогенез обонятельных луковиц интактной белой крысы (результаты собственных исследований).

3.1 Постнатальные изменения морфометрических характеристик обонятельных луковиц

3.2 Преобразование ламинарной организации

3.3 Преобразование клубочков

3.4 Преобразование митральных клеток

3.5 Преобразование сосудистого русла.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Постнатальный морфогенез обонятельных луковиц белой крысы в норме и после химической деафферентации"

Чувство обоняния играет важную роль в жизни человека и животных, поскольку химическая коммуникация является наиболее древним, общим для всех видов животных и конкретным каналом получения информации. Каждый предмет или химическое соединение имеет определенный,. только ему свойственный, запах,, чего нельзя сказать про цвет или вкус (Соколов В:К, Зйнкевич Э;ГБ, 1987).

Обоняние охватывает практически все; стороны жизни животных-макросматиков. Оно играет важную, роль в пищевом, репродуктивном, социальном, территориальном и оборонительном поведении. Запахи возбуждают инстинкты, привычки, положительное или отрицательное отношение к новым предметам (Корытин С.А., 1978; Соколов В.Е., Зйнкевич-Э.П., 1978; Бахтин Е.К., 1982; Бахтин Е.К., Субботин М.Я., 1983; Макарчук Н.Е., Калуев А.В., 2000).

Большое значение в процессах восприятия! и обработки. сенсорного сигнала имеют обонятельные луковицы. Вопреки классической точке зрения об обонятельных луковицах, как о простом «передаточном звене» проводящих путей от обонятельного эпителия в мозг, существующие сегодня данные: позволяют говорить о важной роли луковиц в процессах первичной обработки, запоминания и эмоциональной оценки хемосенсорной информации. Повреждение обонятельных луковиц не только блокирует обонятельный- анализатор, но и приводит к. серьезным нарушениям поведения и всей эмоциональной сферы человека или животного (Шеперд Г., 1987; Калуев А.В^ Кирюхина Н.В;, 2003);

Традиционно считалось, что чувствительная иннервация- выполняет чисто «афферентную» функцию, воспринимая' изменения химических и физических параметров среды и передавая информацию в; ЦНС, что рефлекторно активирует эфферентную систему и тем самым обеспечивает поддержание гомеостаза. На сегодняшний день в результате экспериментов доказано, что чувствительные терминали выполняют кроме афферентной еще и вторую — местную эффекторную функцию. Благодаря применению методов перерезок и антидромной стимуляции чувствительных нервов были накоплены доказательства местной эффекторной функции афферентных нейронов в регуляции кровотока, проницаемости сосудов, трофических и иммунных процессов, активности вегетативных ганглиев (Permkumar L., 2001; Albutaihi I. et al., 2004; Demirbilek S. et al., 2004; Lo Y. et al., 2005).

Хирургическая невротомия не позволяет исключать эффекты оперативного вмешательства и проводить чистую деафферентацию, так как все периферические нервные стволы смешанные (Жукова Е.М., 2007). Решением послужило открытие селективной чувствительности афферентных нейронов к растительному алкалоиду капсаицину (Geppetti PI et al., 1988). В настоящее время перспективно использование капсаицина для создания моделей клинической денервации и исследования эффекторной функции афферентной нервной системы.

В последние десятилетия активно исследовалось влияние химической деафферентации на сосудистое русло (Спиридонов В.К. с соавт., 2004; Воробьева Н.Ф. с соавт. 2005; Anand Р., 2003; Chen S. et al., 2007), кожу и подкожную соединительную ткань, легкие, печень, лимфоидные органы (Спиридонов В. К., 1994; Воробьева Н. Ф. с соавт, 1997; Жукова Е. М., Воробьева Н. Ф., 1998; Жукова Е.М., 2000, 2003; Толочко 3. С., 2001, 2002; Толочко З.С., Спиридонов В.К., 2004), нейроны различных отделов нервной системы (Румянцева Т.А., Шилкин В.В., 2001; Румянцева Т.А., 2002; Воробьева О.Б., 2005 и др.). В доступной литературе сведений о влиянии нейротоксических доз капсаицина на обонятельную луковицу не обнаружено.

Таким образом, вышесказанное позволяет заключить, что обонятельные луковицы играют существенную роль в восприятии и обработке сенсорной информации. Их повреждение может вызвать серьезные нарушения в поведении животных и человека. В связи с этим и, учитывая недостаточность сведений по данному вопросу в литературе, анатомогистологическое исследование обонятельных луковиц белой крысы в норме и эксперименте, а также оценка степени обратимости этого процесса представляется актуальным.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

3. Оценить секторальную асимметрию строения обонятельных луковиц крысы и ее возрастную динамику.

Впервые показано, что в процессе развития темпы роста слоев обонятельных луковиц различны, в связи с этим меняется доля отдельных слоев в совокупной толщине исследуемого органа. Наибольший рост характерен для наружного плексиморфного слоя, в меньшей степени увеличивались толщина слоя клубочков, слоя клеток-зерен и внутреннего плексиморфного слоя, толщина слоя митральных клеток уменьшилась.

Впервые установлено, что в периферической зоне обонятельных луковиц плотность сосудов больше, чем в центральной. С возрастом неравномерность распределения сосудов в центральной и периферической зонах обонятельных луковиц усиливается.

В результате исследования выявлено, что обонятельные луковицы белой крысы имеют выраженное асимметричное строение. Асимметрия проявляется в различных значениях морфометрических показателей: толщины слоев, размеров и плотности клубочков, митральных клеток и сосудов в вентральном, дорсальном, медиальном и латеральном секторах обонятельных луковиц. Исключение составляет диаметр сосудов, который на всех участках обонятельных луковиц не различается.

В работе впервые оценено влияние химической- деафферентации на морфометрические характеристики обонятельных луковиц белой крысы. Выявлено, что химическая деафферентация капсаицином вызывает' незначительные изменения размеров и ламинарного строения обонятельных луковиц. Существенные преобразования затрагивают тонкое строение органа: клубочки, нейроны и микроциркуляторное русло. Деафферентация вызывает изменение количества, и размеров» клубочков обонятельной луковицы крысы, приводит к патологическим изменениям митральных клеток и гибель части митральных нейроцитов. Выявлены качественные изменения и увеличение диаметра сосудов обонятельных луковиц деафферентированных животных.

Теоретическая и практическая значимость работы. В результате проведенного исследования получены нормативные возрастные характеристики ламинарной организации, клубочков, митральных нейроцитов и сосудистого русла обонятельных луковиц белой крысы в раннем постнатальном онтогенезе, которые могут служить основой для морфологических исследований органов и тканей в эксперименте. Установлено, что обонятельные луковицы имеют выраженное асимметричное строение, которое необходимо учитывать в экспериментальной и клинической работе. Показано, что данная схема введения нейротоксина может использоваться для моделирования состояния дефицита афферентной иннервации, в целях фундаментальных исследований структуры и функции органов, адаптивных возможностей организма в целом и отдельных его систем при воздействии различных факторов, а также механизмов действия лекарственных препаратов.

Апробация работы. Материалы исследования доложены на Пироговской студенческой научной конференции (Москва, 2001); IV Международной конференции по функциональной нейроморфологии «Колосовские чтения»- (Санкт-Петербург, 2002); III , Всероссийской конференции с международным участием, посвященной 175-летию со дня, рождения Ф:В. Овсянникова «Механизмы функционирования висцеральных систем» (Санкт-Петербург, 2003); Международной* научной- конференции-«Гемореология. в макро- и микроциркуляции» (Ярославль, 2005); Всероссийской научной конференции «Актуальные вопросы эволюционной, возрастной и экологической морфологии» (Белгород, 2006); Международных конференциях студентов, аспирантов, и. молодых ученых «Ломоносов» (Москва, 2007, 2008, 2010); V Всероссийской конференции с международным участием, поев. 100-летию со дня рождения В.Н. Черниговского «Механизмы функционирования висцеральных систем» (Санкт-Петербург, 2007); Международной НПК «Актуальные вопросы морфологии» (Гродно, 2008).

На защиту выносятся следующие положения:

2. Обонятельные луковицы белой крысы имеют выраженное асимметричное строение.

Заключение Диссертация по теме "Клеточная биология, цитология, гистология", Невзорова, Марина Николаевна

Выводы

1. Постнатальное развитие обонятельных луковиц белой крысы характеризуется гетерохронным достижением дефинитивных значений ее морфометрических показателей. К десятым суткам заканчивается рост внутреннего плексиморфного слоя, к третьей неделе — слоя клеток-зерен, к концу второго месяца — слоя клубочков, к концу третьего месяца — наружного плексиморфного слоя. Толщина слоя митральных клеток уменьшается в течение первых трех месяцев жизни.

2. У новорожденных крыс обонятельные луковицы полностью не сформированы, морфологическая зрелость наступает к третьему месяцу, однако наличие клубочков свидетельствует о возможности тестирования, одорантов уже в первые дни жизни.

4. Установлено, что обонятельные луковицы белой крысы имеют выраженное асимметричное строение. Вентральный, дорсальный, медиальный и латеральный сектора обонятельных луковиц характеризуются различной толщиной слоев, размерами,и плотностью клубочков, митральных клеток и плотностью сосудов.

5. Неонатальная химическая деафферентация вызывает отклонения от нормального постнатального развития обонятельных луковиц белой крысы, наиболее выраженные в течение первого месяца жизни. У шестимесячных животных восстановление всех морфометрических показателей обонятельных луковиц не происходит.

4.6. Заключение

После химической деафферентации постнатальное становление обонятельных луковиц белой крысы проходило следующим образом. Форма обонятельной луковицы с возрастом изменялась, форм-фактор увеличивался по 21 сутки жизни, с 21 по 60 уменьшался, что свидетельствует «вытягиванию» поперечного сечения обонятельной луковицы в дорсо-вентральном направлении. Площадь стандартного поперечного сечения обонятельной луковицы в условиях деафферентации на протяжении всего периода наблюдения увеличилась в 2,1 раза и достигла максимальных значений у трехмесячных животных. В динамике данного показателя можно выделить три периода: период интенсивного роста (с 5 по 21 сутки), период медленного роста (с 21 по 90-сутки) и период регресса (с 90 по 180-е сутки).

У 5-суточных деафферентированных животных на срезе обонятельных луковиц выявляются основные клеточные слои: волокон, клубочков, митральных клеток, клеток-зерен. С возрастом- структура обонятельных луковиц усложняется. У двухнедельных деафферентированных животных увеличивается количество рядов клубочков, они располагаются группами по 3-4, формируется капсула клубочков, уменьшается число рядов митральных клеток, приобретают характерную структуру наружный плексиморфный, внутренний плексиморфный и клеток-зерен, исчезает внутренняя полость

Совокупная толщина клеточных слоев обонятельной луковицы деафферентированной крысы характеризовалась периодом интенсивного роста (5-30 сутки) и стабилизации (30-180 сутки). Клеточные слои деафферентированной обонятельной луковицы на протяжении наблюдения изменялась не одинаково. Наибольший рост характеризовал наружный плексиморфный слой, затем по мере убывания шли слой клеток зерен, слой клубочков, внутренний плексиморфный слой, толщина слоя митральных клеток уменьшалась. Вследствие неравномерного роста, доля слоев в совокупной толщине деафферентированной обонятельной луковицы на стандартном сечении изменялась. В обонятельной луковице 5-суточных деафферентированных крыс наибольшую долю занимал слой клеток-зерен, затем - слой клубочков, наружный плексиморфный слой, слой митральных клеток, а наименьшую - внутренний плексиморфный слой. У шестимесячных деафферентированных животных наибольшую долю также занимал слой клеток-зерен, затем - наружный плексиморфный слой, слой клубочков, внутренний плексиморфный слой, а наименьшую - слой митральных клеток.

Сроки становления слоев обонятельных луковиц деафферентированных крыс были различны. Толщина внутреннего плексиморфного слоя увеличивалась с 5 по» 21 сутки жизни животных, слоя клеток зерен — с 5 по 30-е, толщина слоя клубочков - с 5 по 30-е сутки, наружного плексиморфного слоя — с 5 по 60 сутки. Слой митральных клеток утончался с 10 суток до конца исследованного периода.

Размер клубочков увеличивается с 5 по 60 сутки жизни деафферентированных животных. Количество клубочков на срезе обонятельной луковицы деафферентированных крыс наиболее интенсивно растет с 5 по 30 сутки жизни и продолжает незначительно увеличиваться до трехмесячного возраста.

На протяжении- всего периода исследования у дефферентированных • животных выявляются патологически измененные митральные клетки, у молодых животных преобладали гипохромные нейроны с периферическим хроматолизом, а к концу исследования - гиперхромные «сморщенные» клетки с гиперхроматозом или пикнозом ядра. Размер митральных клеток был стабилен с 5 по 21 сутки и с 90 по 180-е сутки и уменьшался с 21 по 30-е и с 90 по 180-е сутки жизни деафферентированных крыс. Количество митральных клеток увеличивалось с 5 по 30 сутки.

Под влиянием деафферентации в обонятельной луковице выявляются патологически измененные сосуды, которые имеют неровные, вздутые контуры, активность щелочной фосфатазы их эндотелия стала неравномерной.

У деафферентированных крыс сохраняется зональное распределение сосудов в обонятельной луковице. Плотность сосудов в периферической зоне органа было выше, чем в центральной. Количество сосудов в перифериферической зоне обонятельной луковицы деафферентированной крысы значительно возросло с 5 по 30 сутки, менее быстрое увеличение количества сосудов продолжалось с 30 по 60-е сутки, затем данный показатель стабилизировался. Количество сосудов в центральной зоне увеличивалось с 5 по 21 сутки, а с трех недель до конца исследования уменьшалось. Диаметр сосудов обонятельной луковицы деафферентированных животных до двухмесячного возраста уменьшается; а с 60 по 90-е сутки увеличивается.

У деафферентированных животных сохраняется секторальная, асимметрия строения обонятельных луковиц. Она проявляется в различных значениях таких морфометрических показателей как толщина клеточных слоев, площадь и плотность клубочков, площадь, и плотность митральных клеток, плотность сосудов в медиальном, латеральном и дорсальном секторах обонятельных луковиц; Такой показатель как диаметр сосудов существенных различий в разных секторах не имеет. У 5 -суточных: животных минимальными значениями морфометрических показателей характеризуется дорсальный сектор, а максимальными - вентральный; а в ряде случаев также медиальный и латеральный секторы; Отмечены неравномерные темпы роста секторов. Максимальными темпами роста, как правило, характеризуются латеральный и медиальный, минимальными — вентральный и дорсальный секторы. Благодаря неодинаковым темпам' роста различия между секторами обонятельной луковицы с возрастом увеличиваются (исключение составляют морфометрические показатели слоя митральных клеток). У шестимесячных животных максимальными значениями характеризуются медиальный и латеральный секторы, средними — вентральный, минимальными -дорсальный сектор.

Глава 5. Обсуждение результатов исследования

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Невзорова, Марина Николаевна, Ярославль

1. Альтнер X. Физиология обоняния. Основы сенсорной физиологии. М.: Мир, 1984.-С. 274-255.

2. Афанасьев Ю.И., Юрина H.A. Гистология. -М.: Медицина, 1989. С. 349352.

3. Ахметов И.З. Лабораторные и дикие грызуны (содержание, разведение и использование в опытах). Ташкент: Фан, 1981. - 123 с.

4. Батуев A.C., Куликов Г.А. Введение в физиологию сенсорных систем. — М.: Высшая школа, 1983. 247с.

5. Бахтин Е.К. Кто как нюхает // Химия и жизнь, 1982. №1. - С.49.

6. Бахтин Е.К., Субботин М.Я. Орган обоняния. — Новосибирск, 1983. 232 с.

7. Бобкова Н.В., Нестерова И.В., Медвинская А.Н. Активация компенсаторных механизмов в мозге при бульбэктомии // Российск. Физиол. журн. 2004. - Т. - № - С. 199-200.

8. Бронштейн A.A. Вкус и обоняние. М.-Л.: Изд. АН СССР, 1950 - 308 с.

9. Винников Я.А. Цитологические и молекулярные основы обонятельной рецепции. Эволюция органов чувств. Л.: Наука, 1971. - С. 151-178.

10. Ю.Винников Я.А. Эволюция вкуса и обоняния // Успехи совр. биол. М.: Наука, 1976.-Т. 81. Вып. 1.-С. 355-364.

11. И.Винников Я.А., Титова Л.К. Морфология органа обоняния.- М.: Медгиз, 1957.-290 с.

12. Волкова О.В. Нейро-дистрофический процесс. М.: Медицина, 1978.

13. И.Воробьева Н.Ф., Князев Г.Г., Лазарев В.А., В.К. Спиридонов В.К. Структурные изменения тканей белых крыс после введения капсаицина. // Морфология, 1997. Т. 111. №2. С.59-63.

14. Воробьева Н.Ф., Спиридонов В.К., Никитенко Е.В. Морфологические особенности тканей печени при повреждении капсаицин-чувствительныхнейронов и индукции воспаления формалином и зимозаном. // Бюллетень СО РАМН, 2005. Т. 117. №3. С.91-95.

15. Воробьева О.Б. Возрастные преобразования сократительной активности двенадцатиперстной кишки белой крысы в норме и при химической денервации: Автореферат дисс. кандидата биол. наук. Ярославль, 2005. -26 с.

16. Ганжа Б.Л., Глаголев В.П. Методика выключения обоняния у собак в хроническом эксперименте // Физиологический журнал СССР им. И.М. Сеченова, 1975. Т. 61.-№ 1.-С. 162-165.

17. Гамбарян П.П., Дукельская Н.М. Крыса. — М.: Советская наука, Медгиз, 1955.-С. 231-232.

18. Гистология / Под ред. В.Г. Елисеева.- М.: Медицина, 1972.- С. 296-298.

19. Гуревич Е.В., Бобкова Н.В., Катков Ю.А., Отмахова H.A., Нестерова И.В. Поведенческие и биохимические последствия удаления обонятельных луковиц у мышей // Журнал ВНД, 1992. Т. 40. - С. 778-787.

20. Гусельникова К.Г., Гусельников В.И. Электрофизиология обонятельного анализатора.- М.: Изд-во моек, ун-та, 1975. -256 с.

21. Гусельников В.И., Плетнев O.A. Обонятельный анализатор позвоночных: электрофизиологическое изучение реакций на запах. М.: МГУ, 1985. 171 с.

22. Демиденко Л.Г. Действие стирола на слизистую оболочку верхних дыхательных путей и обонятельный анализатор: Автореферат дисс. канд. биол. наук.-Киев, 1973.-21 с.

23. Ермолин И.Л. Морфология спинномозгового узла в норме и в условиях деафферентации у взрослой крысы: автореф. д.б.н., Н. Новгород, 2006.

24. Жаботинский Ю.М. Нормальная и патологическая морфология нейрона. Л.: Медицина, 1965. -323 с.

25. Жукова Е. М. Участие афферентных капсаицин- чувствительных нейронов в контроле гомеостаза венозной крови и биологических жидкостей// Успехи современного естествознания, 2003. № 4. - С. 45.

26. Жукова Е. М. Роль капсаицин-чувствительных нейронов в регуляции клеточных реакций лимфоидной ткани; биологических жидкостей и капиллярно-венознои проницаемости. Автореф. дисс. д.б.н. Томск, 2007. -35с. ■

27. Жукова Е.М., Воробьева Ы.Ф. Некоторые, морфофункциональные параметры селезенки после капсаициновой блокады периферических; афферентных нейронов // Морфология, 1998. Т. 114. JV«6. С.44-46;

28. Калу ев A.B., Кирюхина Н.В. Ассоциативное эмоционально-селективное «обоняние» при- аносмии; анализ^ и- перспективы терапии // Бехтеревские чтения,-Киров, 2003. -С. 203-209:

29. Ковригина Т.Р. Энзимохимическая характеристика: нейромышечного синапса икроножной мышцы деафферентированной белой крысы: Автореферат дисс. кандидата биол. наук. -Ярославль,,2000. -26 с.

30. Константинов А.И., Соколов В.А., Быков К.А. Основы физиологии сенсорных систем. Л.: Изд-во Ленин градского ун-та. 1980. - С. 156-170.

31. Корытин С.А. Запахи в жизни животных. — MI: Знание, 1978- 128 с.

32. Майоров В.А. Запахи, их восприятие, воздействие, устранение. М.: Мир, 2006.-366 с.

33. Макаренко А.Н., Григорьева Т.И., Калуев A.B. Морфо-функциональные особенности организации обонятельного анализатора и проблема аксонального транспорта веществ // Нейронауки, 2006. Т. 2. -№ 4. - С. 18-28.

34. Калуев A.B., Макарчук Н.Е., Рытикова JI.C. Экспериментальная аносмия у крыс как динамическая модель тревожно-депрессивного синдрома // XXX Всеросс: сов. Пробл. ВНД. СПб, 2000. - С. 275 - 276.

35. Мельник С. А., Троицкая В.Т. К вопросу о корреляции между массой гонад и массой обонятельного мозга // Архив клинической и экспериментальной медицины, 2001-. - №2. С. 187.

36. Меркулов Г. А. Курс патогистологической техники. JL: Медицина, 1969. - 423 с.

37. Мохорт В.А. Капсаицин физиологически активное вещество // Эксперимент, и клинич. фармакол., 1993. Т. 56. №1. С. 67-69.

38. Немечек С. Введение в нейробиологию. — Прага: Avicenum издательство медицинской литературы. 1978.— 413 с.

39. Никифоров А.Ф. Афферентный нейрон и нейродистрофические процессы. -М.: Медицина, 1973.- 190 с.

40. Ноздрачев А. Д., Поляков E.JI. Анатомия крысы (лабораторные животные). СПб.: изд-во «Лань», 2001. - 464 с.

41. Огородникова Е.В. Строение периферической части обонятельного анализатора у новорожденнеой крысы // Морфология, 1998. Т. 113. - № З.-С. 68-73.

42. Основы сенсорной физиологии / Под. ред. Р. Шмидта. -М.: Мир, 1984. -287 с.

43. Остапкович В.Е. Изменение слизистой оболочки носа кроликов при хронической лучевой болезни, вызванной длительным введением радиоактивного железа (Fe59) // Журнал ушных, носовых и горловых болезней. 1967. - №6. - С. 33-36.

44. Троицкая В.Т., Гладышева О.С. Морфофункциональное исследование обонятельного органа мыши после воздействия сульфата цинка // Нейрофизиология. 1987. -Т. 19. -№ 6. - С. 796-802.

45. Пажетнов B.C., Пажетнов C.B., Пажетнова С.И. Развитие реакций на сенсорную стимуляцию у бурого медведя в ранний постнатальный период // Зоологический журнал, 1998. Т. 77. - № 9. С. 31-37.

46. Пилипенко В.И. К сравнительной морфологии межнейронных связей в системе обонятельного анализатора // Бюлл. эксп. биол. и мед. — 1966. Т. 62. №9. -С. 99- 104.

47. Пилипенко В.И. Развитие структурной организации обонятельного анализатора в онтогенезе // Бюлл. эксп. биол. и мед. 1968. - Т. 66. № 10. -С. 105- 108.

48. Пилипенко В.И. Материалы по изучению структурной организации обонятельного анализатора в онто- и филогенезе // Труды VII всесоюзного съезда анатомов, гистологов и эмбриологов. — Тбилиси, 1969. — С. 965-966.

49. Пирс Э. Гистохимия теоретическая и прикладная. М.: Изд-во иностранной литературы, 1962. — 963 с.

50. Поленов С.А., Дворецкий Д.П., Чернявская Г.В. Вазомоторные эффекты нейропептидов // Физиол. журнал им. И.М. Сеченова, 1995. Т.81, №6. С. 29-47.

51. Поленов С.А. Эффекторная функция афферентных нейронов // Материалы XVI сессии Академической школы-семинара имени A.M. Уголева «Современные проблемы физиологии и патологии пищеварения», 2001. Т. XI. №4. С.44-51.

52. Полетаева И.И. Поиск пищи мышами при решении задачи на экстраполяцию после выключения обоняния сульфатом цинка // Журн. высшей нервной деятельности им. И.П. Павлова, 1986.- Т. 36.- вып. 4.- С. 680-689.

53. Порсева В.В. Возрастные преобразования ядер спинного мозга и спинномозговых ганглиев в норме и в условиях химической деафферентации: Автореферат дисс. кандидата биол. наук. Ярославль, 2006.-19 с.

54. Пятаев Г.Е. О состоянии обонятельной функции у рабочих цинкового производства // Журнал ушных, носовых и горловых болезней. 1971.-№4.-С. 17-21.

55. Пяткина Г.А. Развитие рецепторных клеток обонятельного органа у животных и человека // Системы органов чувств: Морфофункциональные аспекты эволюции. — JL: Наука, 1987. С.80-98.

56. Райт Р.Х. Наука о запахах. М.: Мир, 1966. - 224 с.

57. Ромер А., Парсонс Т. Анатомия позвоночных. М.: Мир, 1992. - Т. 2. - С. 204-209.

58. Ружинская Н.Н, Гдовский П.А. Ультраструктурная локализация ацетилхолинэстеразы в обонятельной луковице карпа // Журнал эвол. Биохимии и физиологии. 1992. Т28. -№6. С. 715-719.

59. Румянцева Т.А. Влияние химической денервации на нейроциты экстра- и интрамуральных ганглиев в постнатальном онтогенезе белой крысы: Автореферат дисс. доктора мед. наук. — Ярославль, 2002. 36 с.

60. Румянцева Т.А., Ковригина Т.Р., Филимонов В.И., Шилкин В.В., Воробьева О.Б. Влияние введения капсаицина на нейроциты спинномозговых ганглиев // Макро- и микроморфология. Саратов: Изд-во СГМУ, 1999.-Вып. 4.-С. 117-119.

61. Румянцева Т.А., Шилкин В.В. Энзимохимическая характеристика нейроцитов шейно-грудного узла симпатического ствола деафферентированной белой крысы // Морфология. 2001 .Т. 119, N 2. С. 25-28.

62. Рязанцев C.B. Тайна запахов и звуков. Нос. М:: ACT, 2005. - 274 с.

63. Савельев C.B. Происхождение мозга. М.: Веди, 2005. — 367 с.

64. Савченко Е.А., Андреева H.A., Дмитриева Т.Б. Чехонин В.П. Культивирование специализированных глиальных клеток (Olfactory Ensheathing Cells) обонятельного эпителия человека // Клеточные технологии в биологии и медицине. 2005. №2. - С. 95-98.

65. Сафаров Х.М., Нуритдинов Э.Н., Ивазов Н.И. Вопросы физиологии сенсорных систем. Душанбе, 1988. — 93 с.

66. Соколов В.Е., Зинкевич Э.П. Химическая сигнализация животных. М.: Знание, 1978.-63 с.

67. Спиридонов B.K. Роль капсаицин-чувствительных афферентных нервов в регуляции углеводного обмена печени // Физиол. журнал им. И.М.Сеченова, 1994. Т.80, №4. С. 101-106.

68. Спиридонов В.К., Воробьева Н.Ф., Толочко З.С., Костина Н.Е., Хощенко О.М. Эффекторное действие стимуляции и повреждения капсаицин-чувствительных афферентных нейронов. // Бюллетень СО РАМН, 2004. Т. 112. №2. С. 135-140.

69. Спиридонов В.К., Жукова Е.М. Влияние блокады капсаицин-чувсвительных нервов на развитие экссудативной реакции при иммунном ответе и асептическом воспалении,// Бюл. эксперим. биолог, и мед., 1995.№ 10. С. 434-436.

70. Субранова С.Л., Любимова З.В. Роль болевого компонента в организации вкусовой чувствительности // Бюлл. экспер. биол. и мед., 1991. №8. С.205-208.

71. Сыроежкин Ф.А., Решетняк Ю.А. К вопросу методики изучения обонятельного анализатора у рабочих металлургического производства // Журнал ушных, носовых и горловых болезней. — 1970.- №5. С.78-79.

72. Тамар Г. Основы сенсорной физиологии, М., 1976. 520 с.

73. Троицкая В.Т., Гладышева О.С. Морфофункциональное исследование обонятельного органа мыши после воздействия сульфата цинка // Нейрофизиология.-. 1987.-Т. 19. №6.- С. 796-802.

74. Толочко З.С. Изменения проницаемости микрососудов кожи у нормальных и обработанных капсаицином крыс после разрушения мамилло-тегментальных путей // Физиол. журнал им. И.М.Сеченова, 2001. Т.87, №1. С. 137-141.

75. Тятенкова H.H. Пренатальный морфогенез структурных компонентов носовой полости млекопитающих: Автореферат дисс. доктора биол. наук. -Москва, 1998.-37 с.

76. Фалин Л.И. Эмбриология человека: Атлас. М.: "Медицина", 1976. С.1-543.

77. Фельдман Н.Г., Байков Б.К. Применение нейрогистологических методов для изучения обонятельного анализатора в гигиенических исследованиях // Гигиена и санитария.- 1971. -№11.- С. 61-65.

78. Физиология сенсорных систем. Л.: Наука, 1972. - Часть II. - С. 515-561.

79. Физиология сенсорных систем / Под ред. A.G. Батуева. — Л:¡ Медицина, 1976.-339 с. .

80. Фоканова O.A. Возрастные преобразования центров иннервации прямой кишки в норме и в: условиях химической десимпатизации и деафферентации: Автореферат дисс. кандидата биол. наук. — Ярославль, 2006.-22 с.

81. Шеврыгин Б.В. Анатомия, физиология и методы- исследования обонятельного анализатора у взрослых и детей. — М.: Мир, 1971. 51 с.

82. Шеперд Г. Нейробиология М;: Мир; 1987. - Т. 1. - G. 287-315.,

83. Шмидт Р. Основы сенсорной физиологии. М.: Мир, 1984.- 287 с.

84. Шульговский В.В. Основы нейрофизиологии. М.: Аспект Пресс, 2000. -277 с.

85. Ярыгин H.E., Ярыгин В ;Н. Патологические и приспособительные изменения нейрона. М.: Медицина. 1973. - 190 с.

86. Akerman K.E., Gronblad M. Intracellular free (Ca) and (Na) in response to capsaicin in cultured dorsal root ganglion cells // Neurosci. Lett., 1992. Vol. 147.-№1.- P. 5-13.

87. Albutaihi I. A.M., DeJongste M. J.L., Horst G. J. T. An Integrated Study of Heart Pain and Behavior in Freely Moving Rats (Using Fos as a Marker for Neuronal Activation) //Neurosignals, 2004. V.13. P. 207-226.

88. Allison A.C., Warwik R.T.T. Quantitative observation on the olfactory system of the rabbit // Brain, 1949. V. 72. P. 186-197.

89. Anand P. Capsaicin and menthol in the treatment of itch and pain: recently cloned receptors provide the key // Gut., 2003. V. 52. - P. 1233-1235.

90. Andres K.H. Der Feinbau des Bulbus olfactorius der Ratte unter besonderer Berücksichtigung der synaptischen Verbindungen // Z. Zellforsch, microsk. Anat., 1965. №65. S. 530-560.

91. Arbuckle J. B., Docherty R. J. Expression of tetrodotoxin-resistant sodium channels in capsaicin-sensitive dorsal root ganglion neurons of adult rats // Neuroscience Letters, 1995. V 185. - №1.-P. 70-73.

92. Astic L., Saucier D. Anatomical mapping of the neuroepithelial projection to the olfactory bulb in the rat // Brain Res., 1986. Bull. 16. - P. 445-454.

93. Bailey M.S., Puche A.C., Shipley M.T. Development of the olfactory bulb: evidence for glia-neuron interactions in glomerular formation // J.Comp. Neurol., 1999. V.415. N4. P. 423 - 448.

94. Barnett S. C., Riddell J. S. Olfactory ensheathing cells (OECs) and the treatment of CNS injury: advantages and possible caveats // J. Anat., 2004. V. 204.-P. 57-67.

95. Beirith A., Santos A. R. S., Calixto J. B. The role of neuropeptides and capsaicin-sensitive fibres in glutamate-induced nociception and paw oedema in mice // Brain research, 2003. V. 969. №1-2. P. 110-116.

96. Benson T.E., Ryugo D.K., Hings I.W. Effects of sensory deprivation on the developing mouse olfactory system; a light and electron microscopie, morphometric analisis // J. Neurosci., 1984.-№3.- P. 638-653.

97. Brunjes, P. C. Unilateral odor deprivation: Time course of changes in laminar volume // Brain Research Bulletin, 1985.- № 14. P. 233-237.

98. Brunjes P.C. Unilateral closing of nostril and development of olfactory system // Brain Res., 1994.- №19. P. 146-160.

99. Brunjes P.C., Borror M.J. Unilateral odor deprivation: differential effects due to time of treatment// Brain Res., 1983. Bull. 11, P.501-503.

100. Buck L., Axel R. A novel multigene family may encode odorant receptors: a molecular basis for odor recognition // Cell., 1991. V. 65. - № 1. - P. 175187.

101. Chao T.I., Kasa P., Wolff J.R. Distribution of astroglia in glomeruli of the rat main olfactory bulb: exclusion from the sensory compartment of neuropil // J. Comp. Neurol., 1997.-V. 338.-P. 191-210.

102. Clancy A.N., Schoenfeld T.A., Forbes W.B., Macrides F. The spatial organization of the peripheral olfactory system of the hamster. Part II: Receptor surfaces and odorant passageways within the nasal cavity // Brain Res., 1994. — Bull. 34.-P. 211-241.

103. Constanzo R.M., O'connell R.J. Receptive fields of second-order neurons in the olfactory bulb of the hamster // Journal of General Physiology, 1980. — V. 76.-P. 53-68.

104. Corotto F. S., Henegar J. A., Maruniak J. A. Neurogenesis persists in the subependymal layer of the adult mouse brain // Neurosci. Lett., 1993. — V. 149. P.111-114.

105. Cumming D.M., Henning H.E., Brunjes P.C. Olfactory bulb recovery after early sensory deprivation // J Neurosci, 1997. V. 17. - P. 7433-7440.

106. Dellovade T.L., Pfaff D.W., Schwanzel-Fukuda M. Olfactory bulb development is altered in small-eye (Sey) mice // J. Comp. Neurol. 1998. — V. 402. -№3.- P. 402-418.

107. Demirbilek M., Ersoy O:, Demirbilek S., Karaman A., Gurbuz N., Bayraktar N., Bayraktar M. Small-Dose Capsaicin Reduces Systemic Inflammatory Responses in Septic Rats // Anesth. Analg., 2004. V. 99. - №5. - P. 15011507.

108. Domek M.J., Blackman E.I., Kao J. Functional ablation of afferent nerves aggravates dextran sulphate sodium induced colonic damage in rats // J. Gastroenterol. Hepatol. — 1977. — Vol. 11. — № 12. — P. 698-702.

109. Donnerer J., Amann R. Capsaizin-evoked neuropeptide release is not dependent on membrane potential changes // Neurosci. Lett., 1990, V. 117.' P. 331-334.

110. Doucette Y.R., Kiernan I.A., Flumerfelt B.A. The ( re-innervation of olfactory glomeruli following transection of primary olfactory axons in the central or periferal nervous system // J. Anat. -1983. №1. -P. 137.

111. Doucette Y.R. Olfactory ensheathing cells: Potential for glial cell transplantation into areas of CNS injury // Histol. Histolopathol., 1995. V. 10. - 503-507.

112. Evans C, Baxi S, Neff R, Venkatesan P, Mendelowitz D Synaptic activation of cardiac vagal neurons by capsaicin sensitive and insensitive sensory neurons // Brain. Res., 2003 V.979. P. 210-215.

113. Feron F., Perry C., Cochrane J. Autologous olfactory ensheathing cells transplantation in human spinal cord injury // Brain, 2005. — V. 128. — P. 29512960.

114. Frazier EL, Brunjes PC. Unilateral odor deprivation: early postnatal, changes in olfactory bulb cell density and number // J Comp Neurol., 1988. V. 269. - P. 355-370.

115. Friedrich R.W., Korsching S.I. Combinatorial and chemotopic odorant coding in the zebrafish olfactory bulb visualized by optical imaging // Neuron, 1997.-V. 18.-P. 737-752.

116. Ganchrow J.R., Seltzer Z. The effect of neonatal treatment on gustatory behavior in the albino rat // Phisiol. Behav., 1992. Vol. 52. №6. P. 1037-1042.

117. George F, Sampol J. Circulating endothelial cells: a marker of vascular lesion//Nouv. Rev. Fr. Hematol., 1993 Jun;35(3):259-61.

118. Gräfe M.R., Leonard C. M. Developmental changes in the topographical distribution of cells contributing to the lateral olfactory tract // Brain Research, 1982. V.3. - P. 387-400.

119. Graziadei G.A., Graziadei P.P. Neurogenesis and neuron regeneration in the olfactory system of mammals: II. Degeneration and reconstitution of the olfactorysensory neurons after axotomy // J. Neurocytol., 1979. V. 8. - P. 197213

120. Graziadei P.P., Graziadei G.A. Neurogenesis and neuron regeneration in the olfactory system of mammals. I. Morphological aspects of differentiation and structural organization of the olfactory epithelium. // J. Neurocytol. 1979; 8: 118.

121. Graziadei P.P.S., Graziadei M.G.A. Neurogenesis and neuron regeneration in the olfactory system of mammals // J. Neurosci. -1980. №2.- P. 145-162.

122. Hinds J.W., Mcnelly N.A. Aging of the rat olfactory bulb: Growth and atrophy of constituent layers and changes in size and number of mitral cells // Journal of Comparative Neurology, 1977. V. 171. - P.345.368.

123. Hiura A., Ishizuka H. Quantitative elektron-microscopic analyses of pulpal nerve fibres in the mouse lower incisor after neonatal capsaicin treatment // Arch. Oral Biol., 1992. Vol. 37. №12. P. 1085-1090.

124. Hatten, M. E. Central nervous system neuronal migration // Annu. Rev. Neurosci., 1999.-V. 22.-P. 511 -539.

125. Holzer P. Capsaicin: cellular targets, mechanisms of action, and selectivity for thin sensory neurons // The Regulatory Peptide Lett., 1991. Vol.43. №2. P. 143-201.

126. Holzer P. Peptidergic sensory neurons on the control of vascular functions mechanisms and significance of the cutaneous and splanchnic vascular beds / P. Holzer // Rev. Physiol. Biochem. Pharmacol. — 1992. — Vol. 121. — P. 49146.

127. Holzer P. Neurogenic vasodilatation and plasma leakage in the skin // Gen Pharmacol., 1998.-V. 30.-P. 5-11.

128. Johnson B. A., Leon M. Chemotopic odorant coding in a mammalian olfactory system // Journal of Comparative Neurology, 2007. V. 503. - P. 134.

129. Jones N.L., Shabib S., Sherman P.M. Capsaicin as an inhibitor of the gastric pathogen Helicobacter pylori // FEMS Microbiol. Lett., 1997. V. 146. - P. 223-227.

130. Kasowski H.J., Kim H., Gree C.A. Compartmental organization of the olfactory bulb glomerulus // J. Comp. Neurol., 1999. V. 407. - P. 261-274.

131. Katkov Y.A., Otmakhova N.A., Gurevich E.V., Nesterova I.V., Bobkova N.V. Antidepressants suppress bulbectomy-induced augmentation of voluntary alcohol consumption in C57Bl/6j but not in DBA/2j mice // Physiol, and Behav., 1994.-V. 56.-P. 501-509.

132. Katoh K., Koshimoto H., Tani A., Mori K. Coding of odor molecules by mitral/tufted cells in rabbit olfactory bulb. II. Aromatic compounds. // J Neurophysiol., 1993. V. 70. - P. 2161-2175.

133. Kiyohara S., Tucker D., Activity of new receptors after transection of the primary olfactory nerve in pigeons // Phisiol. Behav., 1978.- №6.- P. 987-994.

134. Koenig H. An Autoradiographic Study of Nucleic Acid and Protein Turnover in the Mammalian Neuraxis // J. Biophys. Biochem. Cytol., 1958. -V. 25. -№4(6). -P. 785-792.

135. Kornack D.R., Rakic P. Cell proliferation without neurogenesis in adult primate neocortex // Science, 2001. V. 294. - P. 2127-2130.

136. Korol D.L., Brunjes P.S. Unilateral naves closure and vascular development in the rat olfactory bulb // Neuroscience, 1992. -№3. -P. 631-641.

137. Laing D.G., Panhuber H. Neural and behavioural changes in rats following continuous exposure to an odour // Journal of Comparative Physiology, 1978. -V.124.-P. 259-265.

138. Land L.J. Localized projection of olfactory nerves to rabbit olfactory bulb // Brain Research, 1973. V. 23. - P. 250-254.

139. Lima C., Patas-Vital J., Escada P. Olfactory mucosa autografts in human spinal cord injury: a pilot clinical study. // J. Spinal Cord Med., 2006. V. 29. — P. 191-203.

140. Liu W.L. Die Geterogenitat und postnatale Entwicklung der Glomeruli in Bulbus olfactorius von Albinoratten // Versammlung der Anatomischen Gesellschaft, Greifswald. 1998. № 27. S. 90-91.

141. Livai O., Breer H., Strotmann J. Subzonal organization of olfactory sensory neurons projecting to distinct glomeruli within the mouse olfactory bulb // J. Comp. Neurol., 2003. V. 458. - P. 209-220.

142. Lois C., Alvarez-Buy 11a A. Long-distance neuronal migration in the adult mammalian brain // Science, 1994. V. 264. - P. 1145-1148.

143. Lötz M., Vaughan J.H., Crason D.A. Effect of neuropeptideson production of inflammatory cytokines by human monocytes // Science, 1988. V.241 P. 1218-1220.

144. Luskin M.B. Restricted proliferation and migration of postnatally generated neurons derived from the forebrain subventricular zone // Neuron, 1993. № 11.-P. 173-189.

145. Macrides F., Schneider S.P. Laminar organization of mitral and tufted cells in the main olfactory bulb of the adult hamster // Journal of Comparative Neurology, 1982. V. 208. - P. 419-430.

146. Maggi C.A. Tachykinins and CGRP as co-transmitters released from peripheral endings of sensory nerves // Prog. Neurobiol., 1995, 45, P. 1-98.

147. Mair R.G., Gellman R.L., Gesteland R.G. Postnatal proliferation and maturation of olfactory bulb neurons in the rat // Neuroscience. 1982. - № 12. -P. 3105-3116.

148. Mapp, C.E., Chitano P., Fabbri L.M., Patacchini R., Santicioli P., Geppeti P., Maggi C.A. Evidence that toluene diisocyanate (TDI) activates the efferent function of capsaicin-sensitive primary afferents // Eur. J. Pharmacol., 1990, V.100, P.886-888.

149. Marschner C. Qualitative und quantitative Untersuchungen am Bulbus olfactorius des Elefanten im Vergleich mit dem desMenschen und des Schweines // Acta Anatómica, 1970, № 75. S. 578-595.

150. Maruniak J.A., Henegar J.R., Sweeney T.R. Effects of long-term unilateral naves closure on the olfactory epithelia of adult mice // Brain Res., 1990.- 526. №1. P. 65-72.

151. Matulionis D.H. Effects of the aging process on olfactory neuron plasticity // Olfact. and Endocrine Regul. Proc. 4th Eur. Chemorecept. Res. Organ. Symp., Essen, 11-15 Oct., 1981.-London, 1982.-P. 299-307.

152. Mazelin L., Theodorou V., More J. Protective role of vagal afferents in experimentallyinduced colitis in rats // J. Auton. Nerv. Syst. — 1998. — Vol. 73. —№ 1.—P.38-45.

153. Meisami E, Noushinfar E. Early olfactory deprivation and the mitral, cells of the olfactory bulb: a golgi study // Int. J. Dev. Neurosci., 1986. V. 4. - P. 431444.

154. Meisami E., Safari L. A quantitative study of the effects of early unilateral olfactory deprivation on the number and distribution of mitral and tufted cells and glomeruli in the rat olfactory bulb // Brain Res., 1981.- 221. №1. P. 81107.

155. Meister M., Bonhoeffer T. Tuning and topography in an odor map on the rat olfactory bulb //J. Neurosci., 2001. -V. 21. P. 1351-1360.

156. Mombaerts P., Wang F., Dulac C., Chao S.K., Nemes A., Mendelsohn M., Edmondson J., Axel A. Visualizing an olfactory sensory map // Cell, 1996. -V. 87.-P. 675-686.

157. Mori K., Nagao H., Yoshihara Y. The olfactory bulb: coding and processing of odor molecule information // Science, 1999. V. 286. - P. 711-715.

158. Nagy I., Rang H.P. Similarities and Differences between the Responses of Rat Sensory Neurons to Noxious Heat and Capsaicin // The Journal of Neuroscience, 1999, V19. - №24. P. 10647-10655.

159. Nikonov AA, Caprio J. Electrophysiological evidence for a chemotopy of biologically relevant odors in the olfactory bulb of the channel catfish // J. Neurophysiol., 2001. -V. 86. P. 1869-1876.

160. Price J.L., Powell T.P.S. The mitral and short axon cells of the olfactory bulb //J. Cell. Sci., 1970. -V. 7,-P. 631-651.

161. Ramer L., Au E., Richter M.W. Peripheral olfactory ensheathing. cells reduce; scar and cavity formation and promote regeneration after spinalcord injury // J.Comp.Neurol., 2004. V. 473. - P. 1-15,

162. Ressler K.J:, Sullivan S.L., Buck L.B. A zonal organization of odorant receptor gene expression in the olfactory epithelium // Cell., 1993. — V. 73. P. 597-609.

163. Ressler K.J., Sullivan S.L., Buck L.B. Information coding in the olfactory system: evidence for a stereotyped and highly organized epitope map in the olfactory bulb // Cell., 1994. -V. 79. P. 1245-1255.

164. Rosselli-Austin L., Altman J. The postnatal development of the main olfactory bulb of the rat // Journal of Developmental Physiology, 1979. V. 1. -P. 295-313.'

165. Royet J. P., Distel H., Hudson R., Gervais R. A re-estimation of the number of glomeruli and mitral cells in the olfactory bulb of rabbit // Brain research, 1998. V. 788. - №1-2. - P. 35-42.

166. Sallivan S.L., Dryer L. Information processing in mammalian olfactory system // Journal of neurobiology. 1996. - V. 30. - № 1. — P. 20-36.

167. Scardina, G.A., Carini, F., Valenza, V., Messina, P. Topical capsaicin application and axon reflex vasodilatation of the tongue: A videocapillaroscopic study // Methods Find Exp. Clin. Pharmacol., 2006, V. 28. №10. P.707.

168. Schoenfeld T.A., Clancy A.N., Forbes W.B., Macrides F. The spatial organization of the peripheral olfactory system of the hamster. I. Receptor neuron projections to the main olfactory bulb // Brain Res., 1994. Bull. 34. -P. 183-210.

169. Schoenfeld T.A., Cleland T.A. The anatomical logic of smell // Trends. Neurosci., 2005. -V. 28.- P. 620-627.

170. Serizawa S., Miyamichi K., Sakâno H. One neuron-one receptor rule in the mouse olfactory system //Trends. Genet., 2004. V. 20. - P. 648-653.

171. Slotnick B. M., Hersch S. A stereotaxic atlas of the rat olfactory system // Brain Research, 1980. V. 5, - P. 1-55.

172. Stahl B., Distel H., Hudson R. Effects of revers nave occlusion of the development of the olfactory epithelium in the rabbit nasal septum // Cell. And Tissue Res., 1990.- №2.- P. 275-281.

173. Struble R.G., Beekman S.L., Fesser E., Nathan B.P. Volumetric and horseradich peroxidase tracing analysis of rat olfactory bulb following reversible olfactory nerve lesions // Chem. Senses, 2001. V. 26. - P. 971-981.

174. Szallasi A., Blumberg P.M., Vanilloid (capsaicin) receptors and mechanisms. //Pharmacol. Rev.,1999. Vol. 51. №2. P. 159-211.

175. Takahashi Y.K., Kurosaki M., Hirono S., Mori K. Topographic representation of odorant molecular features in the rat olfactory bulb // J. Neurophysiol., 2004. V. 92. - P. 2413-2427.

176. Taupin P., Gage F.H. Adult neurogenesis and neural stem cell of the central nervous system in mammals // Journal of Neuroscience Research, 2002. V. 69. - P. 745-749.

177. Theiler K. The House Mouse: Atlas of Embryonic Development. New York: Springer-Verlag, 1989. - 178 p.

178. Treolar H.B., Purcell A.L., Greer C.A. Glomerular formation in the developing rat olfactory bulb // J.Comp. Neurol., 1999. V. 413. - P. 289- 304.

179. Treloar H.B., Feinstein P., Mombaerts P., Greer C.A. Specificity of glomerular targeting by olfactory sensory axons // J. Neurosci., 2002. V. 22. -P. 2469-2477.

180. Tropepe V., Sibilia, M., Ciruna, B.G., Rossant J., Wagner E.F., Kooy D. Distinct Neural Stem Cells Proliferate in Response to EGF and FGF in the Developing Mouse Telencephalon // Developmental Biology, 1999. V. 208. — P. 166-188.

181. Uchida N., Takahashi Y.K., Tanifuji M., Mori K. Odor maps in the mammalian olfactory bulb: domain organization and odorant structural features //Nat. Neurosci., 2000. V. 3. - P. 1035-1043.

182. Valverde F. Building an olfactory glomerulus // J.Comp. Neurol., 1999. V. 425.-N4. -P. 419-422

183. Vassar R, Chao S.K., Sitcheran R., Nuvez J.M., Vosshall L.B., Axel R. Topographic organization of sensory projections to the olfactory bulb // Cell., 1994.-V. 79- P. 981-991.

184. Vizzard M.A. Increased expression of neuronal nitric oxide synthase in dorsal root ganglion neurons after systemic capsaicin administration // Neuroscience, 1995. V. 67. -№1. - P. 1-5.

185. Wachowiak M., Cohen L.B. Correspondence between odorant-evoked patterns of receptor neuron input and intrinsic optical signals in the mouse olfactory bulb // J. Neurophysiol., 2003. V. 89. - P. 1623-1639.

186. Webster H.H., Flores G., Marcotte E.R. , Cecyre D., Quirion R., Lalit K. Srivastava L.K. Olfactory bulbectomy alters NMDA receptor levels in the rat prefrontal cortex // Synapse, 2000. V. 37. - P. 159-162.

187. Webster D.B., Webster M. Neonatal sound deprivation affects brain stem auditory nuclei // Archives of Otolaryngology, 1977. V. 103, 392-396.

188. Wiesel T.N., Hubel D.T. Effects of visual deprivation on morphology and physiology of cells in the cat's lateral geniculate body // Journal of Neurophysiology, 1963. -V. 26. P. 978-993.

189. Xue, Q., Jong B., Chen T., Schumacher M.A., Transcription of rat TRPV1 utilizes a dual promoter system that is positively regulated by nerve growth factor//Journal of Neurochemistry 2007. V. 101. № 1. P. 212-222.

190. Zhang X., Firestein S. The olfactory receptor gene superfamily of the mouse //Nat. Neurosci., 2002. -V. 5. P.124-133.интактной крысы (мкм)

Информация о работе

Невзорова, Марина Николаевна
кандидата биологических наук
Ярославль, 2011
ВАК 03.03.04

Диссертация

Постнатальный морфогенез обонятельных луковиц белой крысы в норме и после химической деафферентации - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы