Последствия воздействий ионизирующих излучений: цитогенетические изменения в лимфоцитах крови человека

Снигирева, Галина Петровна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Последствия воздействий ионизирующих излучений: цитогенетические изменения в лимфоцитах крови человека
ВАК РФ 03.00.01, Радиобиология

Автореферат диссертации по теме "Последствия воздействий ионизирующих излучений: цитогенетические изменения в лимфоцитах крови человека"

На правах рукописи

@@4Ь1170'

СНИГИРЕВА ГАЛИНА ПЕТРОВНА

Последствия воздействий ионизирующих излучений: цитогенетические изменения в лимфоцитах крови человека

03.00.01 - радиобиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

Москва - 2009

004611487

Работа выполнена в Российском научном центре рентгенорадиологии

«Росмедтехнологий»

Научный консультант:

доктор биологических наук, профессор

Шевченко Владимир Андреевич

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор

Мазурик Виктор Константинович

доктор биологических наук, профессор

Севанькаев Александр Васильевич

доктор биологических наук

Нугис Владимир Юрьевич

Ведущая организация - Российский научный центр радиологии и хирургических технологий «Росмедтехнологий», г. Санкт-Петербург

Защита состоится « 24 » декабря 2009 г. в 15 час 30 мин на заседании диссертационного совета Д.501.001.65 при Московском Государственном Университете им. М.В.Ломоносова по адресу: 119991, Москва, Ленинские горы, дом 1, МГУ, корп. 12, Биологический факультет, ауд. 557.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Биологического факультета МГУ им. М.В.Ломоносова. Отзывы просим присылать по адресу: 119991, Москва, Ленинские горы, МГУ, биологический факультет. Факс (495) 939-11-15

Автореферат разослан «23» // 2009 г.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Человеку приходится сталкиваться с источниками ионизирующего излучения при самых разных обстоятельствах. Наряду с медицинским облучением населения в диагностических и терапевтических целях, использование радиоактивных источников в различных областях науки, промышленности и медицины не исключает возможности профессионального облучения специалистов. В условиях постоянного повышенного радиационного фона работают космонавты, которые совершают длительные полеты на околоземной орбите.

Применение ядерных технологий с использованием источников ионизирующего излучения в военных и мирных целях могут создавать опасность радиационных аварий, когда в результате радиоактивного загрязнения местности облучению могут подвергаться многочисленные группы людей, а внештатные ситуации на предприятиях атомного комплекса могут приводить к переоблучению персонала. Примерами таких ситуаций являются аварии на ядерном реакторе в Селлафилде в Англии в 1957 г., на производственном объединении «Маяк» на Урале в 1957 г., на атомной станции Три Майл Айленд в США в 1979 г. и Чернобыльской атомной станции в 1986 г.

Для того чтобы предсказать тяжесть радиационного поражения организма, вовремя оказать эффективную помощь, а также оценить возможные последствия облучения, необходимо иметь достоверную информацию о полученной дозе ионизирующего излучения. При радиационных авариях и в других случаях неконтролируемого облучения данные физической дозиметрии часто бывают ограничены, нуждаются в уточнении или могут полностью отсутствовать. Подобные ситуации имели место при облучении населения в результате ядерных взрывов на Семипалатинском полигоне, сброса радиоактивных отходов в р. Теча в Челябинской области, аварии на Чернобыльской АЭС. В таких случаях особое значение приобретают биологические маркеры радиационного воздействия. На сегодняшний день общепризнанно, что наиболее информативными и чувствительными (наряду с ЭПР-спекгроскопией эмали зубов) являются цитогенетические показатели, а именно хромосомные аберрации в лимфоцитах периферической крови (Дубинина, 1977; Севанькаев, Насонов, 1979; Пяткин, Нугас, 1981; Bender et ah, 1988; Tawn, Whitehouse, 2003; Terzoudi, Pantelias, 2006; Simon et al., 2007; Obe, 2007).

Принципы цитогенетического метода индикации радиационного воздействия достаточно убедительно обоснованы во многих отечественных и зарубежных исследованиях, результаты которых послужили основой для выработки рекомендаций ВОЗ, МАГАТЭ и НКДАР ООН по практическому использованию анализа хромосомных аберраций в лимфоцитах крови в качестве тест-системы для количественной оценки действия мутагенных факторов радиационной природы (WHO, 1976; IAEA, 1986, 2001; UNSCEAR, 1986, 1988). Информация о «биологической» дозе, полученная с помощью цитогенетических методов, шире, чем ее физическое значение, т.к. она отражает не только результат радиационного воздействия на организм человека, но и его индивидуальную радиочувствительность, что позволяет более корректно прогнозировать ранние и отдаленные последствия облучения.

Анализ хромосомных аберраций в лимфоцитах периферической крови нашел широкое применение при молекулярно-эпидемиологическом обследовании людей, подвергшихся облучению (Brogger, Hagmar, 1990, 1994; Brooks, 1999; Bonassi et al., 2000,2001, 2002; Durante et al., 2001).

Известно, что повреждение генетического аппарата клетки, которое может проявляться на уровне структурных перестроек хромосом в виде симметричных транслокаций, в ряде случаев лежит в основе радиационного канцерогенеза (Rowley, 1998; Bonassi, 1999; Mitelman et al., 1997, 2006; Rossner et al., 2005). Однако к нерешенным вопросам относится роль соматических мутаций в развитии неопухолевой патологии. Повышенный уровень хромосомных аберраций в лимфоцитах периферической крови может предшествовать развитию патологических процессов или просто быть индикатором неблагополучия в организме человека. Имеющиеся данные о взаимосвязи хромосомных аберраций с соматическими заболеваниями у лиц, подвергшихся облучению в процессе профессиональной деятельности или в результате радиационных аварий, не являются однозначными и свидетельствуют о необходимости проведения систематических исследований в этом направлении для получения более детальной информации.

В настоящее время в большинстве случаев, при которых люди подвергаются воздействию радиации, как от естественных, так и от техногенных источников, речь идет об облучении в небольших дозах. Поэтому главную озабоченность вызывают последствия радиационного воздействия в малых дозах, особенности биологических эффектов которых до сих пор являются предметом активных дискуссий (Воробцова, 1974, 1991, 2006; Кузин, 1977, 1991, 1995; Шевченко, Померанцева, 1985; Спитковский, 1992; Бурлакова, 1994; Пелевина и соавт., 1996, 2003; Upton, 2001; Bonner, 2003; Morgan, 2003; Preston, 2003; Булдаков, Калистратова, 2003, 2005; Enns et al., 2004; Mothersill, Seymour, 2004; Москалев, Зайнуллин, 2004 и др.). При этом количественная оценка величин малых доз и возможных клинических последствий их действия остаются проблемами, решение которых сталкивается с серьезными научными и методическими трудностями. В связи с этим одной из актуальных задач радиационной биологии является разработка чувствительных критериев, с помощью которых можно объективно судить об опасности воздействия радиации, особенно в малых дозах, на организм человека. Естественно, что эта задача может быть успешно решена только на основе данных цитогенетического мониторинга людей, подвергшихся облучению при различных аварийных и чрезвычайных ситуациях.

Цель и задачи исследования

Основной целью работы было изучение цитогенетических эффектов облучения преимущественно в низких дозах в лимфоцитах периферической крови человека и возможность их применения для количественной оценки воздействия ионизирующего излучения и прогноза неблагоприятных медицинских последствий.

Поставленная цель потребовала решения следующих задач:

1) оценить частоту и спектр хромосомных аберраций стабильного и нестабильного типов в лимфоцитах периферической крови лиц, подвергшихся облучению при различных ситуациях:

• у профессионалов, подвергшихся радиационному воздействию в процессе производственной деятельности и при внештатных ситуациях;

• у жителей загрязненных радионуклидами территорий;

• у участников ликвидации последствий аварии на Чернобыльской

АЭС;

2) изучить дозовую зависимость частоты хромосомных аберраций при воздействии гамма - и бета-излучения in vitro при разных мощностях дозы и построить калибровочные кривые «доза-эффект»;

3) изучить цитогенетические эффекты разных видов ионизирующего излучения (гамма-, бета- и космическое излучение) и определить их относительную биологическую эффективность;

4) оценить индивидуальные и среднегрупповые дозы радиационного воздействия по частоте хромосомных аберраций стабильного и нестабильного типов в обследованных группах с использованием построенных кривых «доза-эффект»;

5) исследовать взаимосвязь между заболеваемостью и уровнем цитогенетических повреждений в лимфоцитах периферической крови в группах профессионалов и участников ликвидации аварии на Чернобыльской АЭС.

На защиту выносятся следующие положения:

1. Цитогенетические повреждения в лимфоцитах периферической крови лиц, подвергшихся облучению в низких дозах в результате аварийных и чрезвычайных ситуаций, являются объективным показателем радиационного воздействия и могут быть использованы для биологической оценки дозы.

2. Хромосомные аберрации нестабильного типа являются чувствительным биологическим маркером, который может быть использован для прогноза неблагоприятных медицинских последствий облучения и формирования групп риска в отношении развития соматической патологии.

Научная новизна работы. Впервые проведено масштабное цитогенетическое обследование людей, которые подвергались облучению преимущественно в низких дозах вследствие радиационных аварий (население, проживающее на загрязненных радионуклидами территориях) и при различных нештатных ситуациях (профессионалы, подвергшиеся радиационному воздействию в процессе производственной деятельности и участники ликвидации аварии на Чернобыльской АЭС).

Впервые представлены результаты многолетнего цитогенетического мониторинга космонавтов, принимавших участие в полетах на станции «Мир» и Международной космической станции (МКС).

Впервые проведено сравнение цитогенетической эффективности разных видов ионизирующего излучения (гамма - , бета -, космическое излучение) и определены коэффициенты их относительной биологической эффективности (ОБЭ) как in vitro, так и in vivo при профессиональном облучении.

Получены калибровочные кривые «доза-эффект» для хромосомных аберраций стабильного и нестабильного типов, позволившие оценить индивидуальные и среднегрупповые дозовые нагрузки в ранние и отдаленные периоды после радиационного воздействия.

Установлена взаимосвязь между цитогенетическими показателями в лимфоцитах периферической крови и результатами медицинского обследования лиц, подвергшихся радиационному воздействию в процессе профессиональной деятельности и при аварийной ситуации.

Практическое значение работы. Результаты работы используются в практической деятельности Республиканского экспертного совета Российского научного центра рентгенорадиологии по установлению связи заболеваний с предшествовавшим радиационным воздействием (цитогенетическое обследование участников ликвидации аварии на Чернобыльской АЭС, а также лиц, подвергшихся облучению в результате других аварийных и чрезвычайных ситуаций). По частоте стабильных хромосомных аберраций проводится оценка доз облучения, а результаты цитогенетического обследования являются одним из критериев при формировании групп риска в отношении развития соматической патологии. Полученная информация позволяет более эффективно применять профилактические и лечебные мероприятия, направленные на снижение и возможное предотвращение негативных последствий облучения.

Результаты работы использованы при подготовке методических указаний и методических рекомендаций МЗ РФ, а также пособий для врачей.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на: Международном рабочем совещании «Методы в радиационной цитогенетике», 1991 (Мюнхен, Германия); Международном совещании «Определение доз у населения после аварии на Чернобыльской АЭС», 1994 (Мюнхен, Германия); III Международном рабочем совещании «Методология реконструкции доз», 1995 (Брюссель, Бельгия); Международной конференции «Радиация и здоровье», 1996 (Беэр Шева, Израиль); Рабочем совещании НАТО, 1997 (Киев); XII Международном симпозиуме «Человек в космосе», 1997 (Вашингтон, США); III и V съездах по радиационным исследованиям, 1997, 2006 (Москва); IV Международной конференции по экологическому образованию, 1998 (Пущино); XI конференции по космической биологии и авиакосмической медицине, 1998 (Москва); Международном симпозиуме «Хроническое радиационное воздействие: возможности биологической индикации», 2000 (Челябинск); Международной конференции «Радиоактивность при ядерных взрывах и авариях», 2000 (Москва); Международной конференции «Проблемы радиационной генетики на рубеже веков», 2000 (Москва); Международной научной конференции в рамках года России на Украине, 2003 (Одесса); II Международном рабочем совещании «Радиационная безопасность пилотируемых полетов на Марс», 2003 (Дубна); Международных конференциях «Генетические последствия чрезвычайных и радиационных ситуаций», 2002, 2005 (Москва, Дубна); I и II Международном совещании «Человек и электромагнитные поля», 2003, 2007 (Саров); II Международной конференции «Современные проблемы генетики, радиобиологии, экологии и эволюции», 2005 (Ереван); VI Международной научной конференции «Экология человека и природа», 2004 (Плес); XVII рабочем совещании NASA, 2006 (Санкт-Петербург); VII Международной конференции по применению источников радиации в промышленности, 2008 (Прага, Чехия); XXXVI Международной конференции Европейского общества по радиационным исследованиям, 2008 (Тур, Франция); Международной научно-практической

конференции «Чернобыльские чтения - 2008», 2008 (Гомель); Международной конференции «Системы жизнеобеспечения как средство освоения человеком дальнего космоса», 2008 (Москва); научно-практической конференции РНЦРР, 2009 (Москва); V съезде радиобиологического общества Украины, 2009 (Ужгород).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 137 печатных работ, в том числе: 25 статей в российских и зарубежных журналах из списка ВАК, 29 статей в сборниках и журналах, 5 методических указаний и рекомендаций МЗ РФ и 54 тезиса международных конференций.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на ¿8 / стр. машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы (глава I), описания объектов и методов исследования (глава II), изложения полученных результатов и их обсуждения (главы III, IV, V), заключения, выводов и списка литературы. Текст иллюстрирован 67 таблицами и 4J_ рисунком. Список литературы включает HS отечественных и $о9 зарубежных работ.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Характеристика групп обследования. По ситуационному отношению к облучению все обследованные в рамках представленной работы люди разделены на три группы. Первая группа объединяет профессионалов, т.е. лиц, которые постоянно или временно контактируют с источниками ионизирующего излучения в процессе производственной и научной деятельности. Вторая группа включает население, которое подверглось радиационному воздействию в результате различных аварийных ситуаций. В отдельную группу выделены участники ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС («ликвидаторы»). Характеристика групп (включая и группы сравнения) представлена в таблице 1.

Цитогенетическое обследование включало анализ нестабильных хромосомных аберраций с применением классического цитогенетического метода и стабильных хромосомных аберраций с применением метода флуоресцентной гибридизации in situ с ДНК-пробами (FISH метод). С помощью классического цитогенетического метода обследовано 2084 человека, с применением FISH метода -191 человек.

Методика проведения цитогенетического анализа. Культивирование лимфоцитов периферической крови и приготовление хромосомных препаратов проводили с использованием стандартного протокола (Moorhead et al., 1960; Bauchinger et al., 1998). Культуральная среда RPMI 1640 содержала 15% эмбриональной телячьей сыворотки, 2,5% фитогемагглютинина, 10 мМ 5-бромдезоксиуридина и антибиотики. Инкубацию клеточной культуры проводили при 37°С в течение 48 часов.

Препараты метафазных хромосом, предназначенные для анализа нестабильных хромосомных аберраций, окрашивали с использованием технологии «флюоресценция плюс краситель Гимза» (FPG-метод), позволяющей учитывать

хромосомные аберрации в лимфоцитах, находящихся на стадии первого после их стимуляции к делению в культуре митотического цикла (Арек е1 а1., 1981). При микроскопировании учитывали все типы хромосомных аберраций, распознаваемые без кариотипирования.

Таблица 1

Характеристика обследованных групп

Группы Число обследованных Возраст, лет Период обследования, гг.

Лица, профессионально контактирующие с ионизирующим излучением

Сотрудники РФЯЦ-ВНИИЭФ (г. Саров) «гамма» группа* 108 45-85 1998 - 2000

«бета» группа** 79 45-84 2003 - 2005

Космонавты 48 29-61 1992 - 2008

Участники ликвидации последствий аварии на ЧАЭС

Ликвидаторы аварии на ЧАЭС 1986 - 1989 гг. 1044 29-73 1990-2007

Ликвидаторы-профессионалы* * * 60 36-72 1995 - 2003

Жители территорий, загрязненных радионуклидами вследствие радиационных аварий

Жители Брянской обл. 80 27-68 1992 - 1994

Жители Алтайского края 226 25-75 1992- 1994

Жители Павлодарской обл. Казахстана 18 55-59 2007

Жители с. Муслюмово Челябинской обл. 116 5-78 1993 - 1994

Жители окрестности АЭС «Три Майл Айленд», США 29 25-75 1994-1995

Группы сравнения (контрольные группы)

Жители Московского региона 114 15-69 1990-2006

Жители г. Сарова 49 45-79 1998-2000

Жители с. Тюменцево (Алтайский край) 30 45-79 1992- 1994

Жители Павлодарского района Казахстана 47 50-56 2004 - 2007

Космонавты до 1-го полета 51 26-60 1992 - 2008

* - сотрудники, подвергавшиеся воздействию гамма-излучения в процессе профессиональной деятельности; ** - сотрудники, контактировавшие с бета-излучением трития и его окиси; *** - ликвидаторы, работающие на предприятиях атомной промышленности

Анализ стабильных хромосомных аберраций проводили с помощью метода окрашивания, основанного на молекулярной гибридизации ДНК зонда с ДНК метафазных хромосом, фиксированных на предметном стекле (in situ), с

последующим использованием флуоресцентной микроскопии для детекции результатов гибридизации (FISH метод). Для анализа использовали коктейль проб: меченые биотином ДНК-пробы для 1, 4 и 12 хромосом в комбинации с меченой дигоксигенином панцентромерной пробой. Процедуру окрашивания проводили по методу (Pinkel et al.,1986) в модификации (Bauchinger et al., 1993). Для выявления гибридных молекул ДНК применяли иммунохимическое окрашивание препаратов хромосом с использованием FITC-меченого стрептавидина и конъюгированного с биотином антистрептавидина для хромосомных проб и АМСА - меченых антител для панцентромерных проб. Часть препаратов обрабатывали с помощью коммерческих наборов фирмы MetaSystems GmbH, которые включают ДНК зонды, меченные прямыми флюорохромами и специфичные к I, 4 и 12 хромосомам человека. При проведении цитогенетического анализа учитывали «полные» (реципрокные, tc) и «неполные» (нереципрокные, tj транслокации, инсерции и комплексные хромосомные обмены. Пересчет частоты обменных аберраций с участием окрашенных хромосом на геномную частоту этих событий осуществляли по формуле, приведенной в работе (Lucas et al., 1992).

Статистический анализ результатов исследования, проводившийся с применением параметрических и непараметрических методов, включал анализ различий и связей (Гланц, 1999; Савилов и соавт., 2004; Реброва, 2006). Для расчетов использовали пакет программ STATISTICA (StatSoft USA-Russia, версия 6.1). Достоверность статистических гипотез оценивалась при пороговом уровне значимости р<0,05. На рисунках для характеристики полученных данных представлены значения стандартной ошибки среднего (т).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

1. Спонтанный уровень хромосомных повреяедений в лимфоцитах периферической крови

Для корректной оценки результатов цитогенетического обследования у лиц, подвергшихся радиационному воздействию при различных ситуациях, проведен анализ уровня хромосомных повреждений в группах сравнения, в которые вошли • люди, никогда ранее не подвергавшиеся сверхфоновому воздействию ионизирующего излучения (кроме медицинских диагностических исследований).

Нестабильные хромосомные аберрации. Средняя частота хромосомных аберраций в группе жителей Московского региона в 1,5-2 раза достоверно ниже аналогичного показателя в других группах сравнения (табл. 2). Повышенный уровень хромосомных аберраций обусловлен, главным образом, аберрациями хроматидного типа и ацентрическими парными фрагментами. Одной из причин повышенного уровня ацентрических парных фрагментов может быть хроническое воздействие малых доз ионизирующего излучения с низкой ЛПЭ (Balakrischan, Rao, 1999; Севанькаев и соавт., 2005). Повышенный уровень хроматидных аберраций свидетельствует о загрязнении окружающей среды мутагенами нерадиационной природы, в том числе различными химическими веществами и пестицидами.

Особого внимания заслуживает частота дицентриков и центрических колец - маркеров радиационного воздействия. По полученным данным, этот показатель имеет наибольшее значение в группе жителей Павлодарского района Казахстана, у

космонавтов, обследованных до первого полета, и у жителей г. Сарова, статистически значимо превышая при этом в 8, 5 и 4 раза, соответственно, аналогичный показатель в группе жителей Московского региона. По-видимому, уровень дицентриков и центрических колец в крови космонавтов до полета отражает радиационную нагрузку, полученную за счет рентгенодиагностических исследований, которые неоднократно проводят космонавтам в процессе подготовки к полету. Одной из причин более высокой частоты дицентриков и центрических колец в группе жителей г. Сарова может быть влияние повышенного радиационного фона, обусловленного деятельностью предприятия атомного комплекса.

Стабильные хромосомные аберрации. Средняя частота транслокаций с участием окрашенных хромосом (FISH метод), в группе жителей Павлодарского района Казахстана в 2 раза выше аналогичного показателя в группе жителей Московского региона (табл. 2). Такие различия нельзя объяснить только с позиции возраста: средний возраст в контрольной группе из Москвы составляет 44 года, а у жителей Казахстана - 55 лет. Скорее всего, повышенный уровень стабильных хромосомных аберраций может быть результатом воздействия на организм мутагенных факторов радиационной и химической природы. Подтверждением данного предположения является наблюдаемый повышенный уровень аберраций хромосомного и хроматидного типов при анализе с помощью классического цитогенетического метода.

В группе космонавтов средняя дополетная частота транслокаций также почти в 2 раза выше по сравнению с группой жителей из Москвы. Результаты, полученные с помощью FISH метода при обследовании космонавтов, подтверждают предположение о возможном цитогенетическом эффекте многократных рентгенодиагностических процедур.

Таким образом, цитогенетическое обследование групп сравнения показало, что спонтанный уровень хромосомных аберраций зависит в первую очередь от места проживания, т.е. определяется экологическими условиями. Существенное влияние на уровень хромосомных аберраций могут оказывать рентгенодиагностические исследования, а также производственные и бытовые факторы генотоксического характера, с которыми человеку приходится сталкиваться на протяжении всей жизни. Статистически значимых различий по частоте нестабильных хромосомных аберраций в зависимости от пола, возраста и курения не выявлено. В целом, все обследованные группы лиц характеризуются достаточно низкими значениями частот стабильных и нестабильных хромосомных аберраций, которые сопоставимы с данными других исследователей.

2. Цитогенетические повреждения в лимфоцитах крови лиц, подвергшихся радиационному воздействию при различных ситуациях

2.1 Профессиональное облучение 2.1.1. Космонавты

Во время космических полетов (КП) космонавты, находясь в экстремальных условиях, постоянно подвергаются воздействию комплекса неблагоприятных для

функционирования организма факторов (невесомость, перегрузки, измененный газовый состав, стресс и др.), среди которых следует особо выделить ионизирующее излучение. Контроль уровня облучения во время КП, осуществляемый с помощью физических методов дозиметрии, не всегда позволяет получить полную и объективную информацию о степени опасности космического излучения для организма космонавтов. Это обусловлено особенностями космического излучения, а также пролонгированным характером облучения в течение длительного времени.

Пребывание человека в космосе приводит к четко прослеживающемуся увеличению общей частоты хромосомных аберраций, а также частот ацентрических парных фрагментов, дицентриков и центрических колец с увеличением продолжительности КП.

Если в лимфоцитах крови космонавтов, принимавших участие в краткосрочных полетах (экспедиции посещения, ЭП), частота дицентриков и центрических колец в 2 раза превышает дополетный уровень, то после длительных полетов (основные экспедиции, ЭО) этот показатель выше почти в 4 раза (табл. 3).

Таблица 3

Результаты цнтогенетического обследования космонавтов после первого КП

Группы Число обследованных (число клеток) Частота хромосомных аберраций на 100 кл ± ш

Все хромосомные аберрации Диценрики + центрические кольца Ацентричес кие парные фрагменты Хроматид- ные аберрации

До 1-го полета 51 (44716) 1,20 ±0,05 0,10 ±0,01 0,43 ± 0.03 0,62 ± 0,043

После ЭП 17 (17373) 1,41 ±0,09 0,19 ± 0,03* 0,54 ± 0,06 0,60 ± 0,06

После ЭО 20 (16478) 1,92 ±0,10* 0,38 ± 0,05* 0,63 ± 0,06* 0,80 ± 0,06

* - статистически значимые различия с доподетным уровнем, р<0,05, {-критерий Стьюдента

При смене космической станции в 2001 г. (переход космонавтов со станции «Мир» на Международную космическую станцию - МКС) радиационная нагрузка на космонавтов по данным физической дозиметрии снизилась примерно в 2,5 раза для ЭО и в 3 раза для ЭП. Данные цитогенетического анализа также свидетельствуют о снижении радиационной нагрузки - частота маркеров радиационного воздействия уменьшилась в 1,6 раза как у космонавтов, участвовавших в ЭП, так и у участников ЭО (рис. 1).

Результаты цитогенетического обследования групп сравнения (контрольные группы)

Таблица 2

Группы Классический цитогенетический метод FISH метод

Число обследованных (число клеток) Частота хромосомных аберраций на 100 кл ± m Число обследованных (число клеток) Частота транслокаций Бр на 100 кл ± т

Все хромосомные аберрации Диценрики + центрические кольца Ацентрические парные фрагменты Хроматидные аберрации

Московский регион 114(51430) 0,66 ± 0,04 0,02 ±0,01 0,23 ± 0.02 0,4 1± 0,03 16 (29043) 0,17 ±0,03

г. Саров 49 (51893) 0,92 ±0,04* 0,08 ±0,01* 0,32 ± 0,02 0,51 ±0,03 Нет данных Нет данных

с. Тюменцево 36 (9377) 1,07 ±0,12* 0,03 ± 0,02 0,57 ± 0,09* 0,47 + 0,08 Нет данных Нет данных

Павлодарский р-он, Казахстан 47 (34940) 1,49 ±0,06* 0,16 ±0,02* 0,45 ± 0,04* 0,88 ± 0,04* 46(50562) 0,34 ± 0,03*

Космонавты до 1-го полета 51 (44716) 1,20 ±0,05* 0,10 ±0,01* 0,43 ± 0,03* 0,62 ± 0,04* 5(9710) 0,30 ± 0,02*

* - статистически значимые различия с группой сравнения из Московского региона (р<0,05, Меритерий Стьюдента). - частота транслокаций с участием только окрашенных хромосом

До

полета

эп эп

"Мир" МКС

эо

"Мир"

Рис. 1. Средняя частота дицентриков и центрических колец в лимфоцитах крови космонавтов после первого полета на станции «Мир» и МКС.

эо мкс

Одним из дополнительных факторов, оказывающих влияние на уровень хромосомных аберраций, является внекорабельная деятельность космонавтов (ВКД). Анализ связи частоты хромосомных аберраций с длительностью работы в открытом космосе показал, что у космонавтов, которые находились в открытом космосе 18 и более часов, наблюдается статистически значимое увеличение частоты дицентриков и центрических колец в лимфоцитах крови (рис. 2).

0,6 т

Рис. 2. Влияние про-_ должительности рабо-

ты в открытом космосе на частоту хромосомных аберраций в !11|||| сЙЙ" ЛИМфоЦИТЭХ кроВИ

!!!!!|! космонавтов.

0,3-6,4 10,0-17,8 17,9-35,2

Продолжительность ВКД, ч

Большинство обследованных космонавтов участвовали в полетах неоднократно. Длительность межполетных периодов у космонавтов, участвовавших в нескольких полетах, варьировала от 200 до 2000 дней. Это позволило проследить динамику частоты нестабильных аберраций хромосом (дицентриков и центрических колец) в группе космонавтов в послеполетном периоде (рис. 3). Видно, что уже в течение первого года после завершения полета происходит существенное снижение частоты дицентриков и центрических колец. При этом их частота остается повышенной по сравнению с

дополетным значением и сохраняется такой на протяжении всего периода наблюдения.

Рис. 3. Послеполетная динамика средней частоты дицентриков и центрических колец в лимфоцитах крови космонавтов (I - до первого КП; П - сразу после первого КП; III -через 0,6-1,8 лет; IV - через 1,9-3,1 лет; V - через 3,45,9 лет).

Стабильные хромосомные аберрации. Индивидуальная частота транслокаций для большинства из 12 космонавтов, обследованных FISH методом, превышает контрольный уровень как в дополетном, так и послеполетном периоде. Однако только у 3-х космонавтов были отмечены статистически значимые различия с контрольным уровнем (контрольная группа из Московского региона). Более высокий дополетный уровень транслокаций наблюдался у космонавтов, которые в период обследования участвовали в одном и более КП. Основываясь на данных физической дозиметрии во время КП, были выделены 3 группы космонавтов. Первую из них составили космонавты, обследованные до первого КП. Во вторую группу вошли космонавты, обследованные после первого КП. Третья группа объединила космонавтов, обследованных после второго и третьего КП. Следует отметить, что во всех трех группах средняя частота транслокаций превышает контрольный уровень (рис. 4). Для космонавтов, обследованных после второго и третьего КП, наблюдается статистически значимое, по сравнению с дополетным периодом, увеличение в 1,5 раза средней частоты транслокаций.

Таким образом, результаты цитогенетического обследования космонавтов показали, что КП приводят к увеличению частоты стабильных и нестабильных аберраций хромосом в лимфоцитах периферической крови. Частота дицентриков и центрических колец, являющихся маркерами радиационного воздействия, зависит от продолжительности КП и, соответственно, величины накопленной дозы космического излучения. Работа в открытом космосе приводит к дополнительному увеличению частоты цитогенетических повреждений и, следовательно, к увеличению радиационного риска для космонавтов. В межполетном периоде отмечается снижение частоты аберраций хромосом, однако даже через несколько лет после окончания полета в лимфоцитах крови космонавтов сохраняется повышенный уровень хромосомных аберраций

0,6 -

ч а

Рис. 4. Средняя частота транслокаций (Бр) в лимфоцитах крови космонавтов до и после КП (К -контроль, I - до 1-го КП, II -после 1-го КП, III - после 2-3-го КП).

—I

2.1.2. Цитогенетическое обследование профессионалов г. Сарова

«Гамма» группа объединяет участников полигонных испытаний ядерных боеприпасов, а также сотрудников Всесоюзного научно-исследовательского института экспериментальной физики (ВНИИЭФ), работавших на исследовательских реакторах. Примерно у половины профессионалов (52%) суммарная доза, накопленная за период работы, не превышала 200 мЗв, остальные имели дозы более 500 мЗв, при этом у 7 из них доза превышала 1000 мЗв. «Бета» группа объединяет сотрудников ВНИИЭФ, которые подвергались воздействию бета-излучения трития и его окиси в процессе производственной деятельности. Суммарные дозы, накопленные за период работы, составили от 20 до 990 мЗв, при этом около 85% специалистов имели суммарные дозы менее 200 мЗв. Стаж работы в радиационно-опасных условиях производства для профессионалов обеих групп составляет в среднем 30 - 40 лет.

Нестабильные хромосомные аберрации. Общая частота хромосомных аберраций, частота ацентрических парных фрагментов, а также аберраций хроматидного типа в «гамма» и «бета» группах профессионалов примерно в 2 раза превышает аналогичные показатели в группе сравнения из г. Сарова и в 2,5 раза - в группе сравнения из Московского региона (табл. 4). Что касается маркеров радиационного воздействия - дицентриков и центрических колец, то их частота в «гамма» группе почти в 3 раза выше, а в «бета» группе в 2 раза выше контрольного уровня. Частота ацентрических парных фрагментов в обеих группах профессионалов превышает в 2 раза аналогичный показатель в группе сравнения из г. Сарова. Повышенная частота ацентрических парных фрагментов, по-видимому, является результатом хронического воздействия малых доз радиации с низкой ЛПЭ и свидетельствует о пролонгированном характере облучения. Статистический анализ зависимости частоты дицентриков и центрических колец от суммарной дозы радиационного воздействия в «гамма» группе (были исключены курящие члены группы) выявил наличие статистически значимой корреляции - коэффициент корреляции равен 0,49

(р=0,003).

Исследование зависимости частоты хромосомных аберраций от накопленной за период работы дозы в «бета» группе показал, что подгруппы с наименьшими (< 36 мЗв) и наибольшими (>100 мЗв) значениями доз статистически значимо отличаются по частоте дицентриков и центрических колец. Частота этих обменных аберраций составила 0,14 ± 0,02 в первой подгруппе и 0,24 ± 0,04 на 100 клеток во второй подгруппе.

Таблица 4

Результаты цитогенетического обследования профессионалов г. Сарова

Группы Число Обследован ных (число клеток) Частота хромосомных аберраций на 100 кл ± m

«Гамма» 108 (104536) 1.82 ± 0.04* 0.21 ±0.01* 0.61 ± 0.02* 0.92 ± 0.03*

«Бета» 79 (65557) 1,79 ± 0,05* 0,17 ± 0,02* 0,63 ± 0,03* 0,94 ± 0,04*

Контроль (Саров) 49 (51893) 0,92 ± 0,04 0,08 ± 0,01 0,32 ± 0,02 0,51 ±0,03

Контроль (Москва) 114 (51430) 0.66 ± 0.04 0.02 ±0.01 0.23 ± 0.02 0.41+0.03

* - статистически значимые различия с группами сравнения из г. Сарова и Московского региона, р<0,05, t-критерий Стьюдента

Стабильные хромосомные аберрации. С помощью FISH метода обследовано 17 человек из «гамма» группы и 20 человек из «бета» группы (табл. 5). Средняя частота транслокаций (Fp) в «гамма» группе превысила аналогичный показатель в группе сравнения в 3,5 раза, а в «бета» группе - в 4 раза.

Интересным фактом является обнаружение инсерций у 12 человек из «бета» группы. При этом не выявлено зависимости уровня инсерций от поглощенной дозы, оцененной физическими методами дозиметрии. При цитогенетическом обследовании профессионалов «гамма» группы было обнаружено только две инсерции у одного профессионала, который подвергся смешанному гамма-нейтронному облучению в дозе 480 мЗв. Особенность излучений с высокой ЛПЭ индуцировать наряду с внутрихромосомными нарушениями - инверсиями межхромосомные - инсерции легла в основу ретроспективного метода биоиндикации плотноионизирующих излучений (Griffm et al., 1995; Anderson et al., 2000, 2003; Barquinero et al., 2004; Johannes et al., 2004). По мнению авторов (Anderson et al., 2000, 2003; Johannes et al., 2004), способность инсерций и инверсий беспрепятственно переходить в последующее поколение клеток позволяет использовать эти хромосомные повреждения в качестве потенциальных маркеров воздействия альфа-излучения на организм человека. В этом свете факт обнаружения инсерций в лимфоцитах крови профессионалов, подвергавшихся длительному воздействию бета-излучения трития, заслуживает особого внимания. Учитывая, что средняя плотность

ионизации бета-частиц трития, равная 4,7 КэВ/мкм, значительно превосходит соответствующие значения для рентгеновского излучения с энергией 200 КэВ (1,7 КэВ/мкм) и гамма-излучения 60Со (0,22 КэВ/мкм) (ICRU Report 16, 1970; Кеирим-Маркус, 1980), нет оснований считать выявленный факт случайным. Дополнительным свидетельством, подтверждающим особенность воздействия бета-излучения трития, является обнаружение в крови профессионалов из «бета» группы клеток с комплексными хромосомными перестройками, частота которых составляет 0,08 на 100 клеток и достоверно превышает аналогичный показатель в «гамма» группе. Как известно, такие клетки с большей вероятностью и частотой встречаются именно при воздействии плотноионизирующих излучений (Tawn et al., 2005, 2006).

Таблица 5

Результаты цитогенетического анализа в группах профессионалов г. Сарова (FISH метод)

Группы Число обследованных (число клеток) Частота транслокаций Fp на 100 кл ± m Частота инсерций на 100 кл ± m Частота клеток с комплексными аберрациям на 100 кл ± m

«Гамма» 17(15561) 0,59 ± 0,06* 0,01 ±0,01 0,01 ±0,01

«Бета» 20 (46549) 0,67 ±0,09* 0,05 ±0,01* 0,08 ± 0,04

Контроль (Москва) 16 (29043) 0,17 ±0,03 - -

* - статистически значимые различия с группой сравнения, р<0,05, t-критерий Стьюдента. Fp - частота транслокаций с участием только окрашенных хромосом

Транслокации, являясь стабильными хромосомными аберрациями, обладают способностью беспрепятственно проходить клеточное деление, и, естественно, накапливаться в течение жизни, отражая влияние генотоксических факторов на организм человека, т.е. они должны коррелировать с накопленной за период профессиональной деятельности дозой ионизирующего излучения. Статистический анализ выявил достоверную связь частоты транслокаций у профессионалов «гамма» группы и накопленной за период работы дозы ионизирующего излучения - коэффициент корреляции составил 0,5 (р=0,04). В тоже время какой-либо значимой связи между этими показателями вплоть до дозы 500 мЗв в «бета» группе не выявлено. Более чем пятикратное превышение контрольного уровня наблюдалось только у двух профессионалов с накопленными дозами бета-излучения 645 и 994 мЗв. Учитывая, что нижний предел чувствительности FISH метода составляет около 250 мЗв (IAEA, 2001),

полученные данные вполне объяснимы, т.к. большинство профессионалов данной группы (85%) имели накопленные дозы, не превышающие 200 мЗв.

Таким образом, представленные результаты цитогенетического обследования профессионалов г. Сарова, подвергавшихся длительному воздействию гамма- и бета-излучения, позволяют заключить, что в отдаленные сроки, через 50 и более лет после начала работы в радиационно-опасных условиях производства, средняя частота хромосомных аберраций стабильного и нестабильного типов превышает контрольный уровень. При этом частота маркеров радиационного воздействия - дицентриков и центрических колец - в 23 раза превышает аналогичный показатель в группе сравнения и коррелирует с величиной дозы ионизирующего излучения, накопленной за период профессиональной деятельности. Частота стабильных хромосомных аберраций -транслокаций превышает уровень дицентриков и центрических колец и также коррелирует с величиной накопленной дозы. В группе профессионалов, подвергшихся воздействию бета-излучения трития, выявлен повышенный уровень инсерций, что может свидетельствовать о хроническом воздействии ионизирующего излучения с высокой ЛПЭ.

2.2. Население, подвергшееся радиационному воздействию в результате аварийных и чрезвычайных ситуаций и проживающее на территориях, загрязненных радионуклидами

Радиоактивное загрязнение окружающей среды в результате испытаний ядерного оружия, а также аварий на атомных станциях и предприятиях атомной промышленности обусловило облучение значительных контингентов населения как в малых, так и, в отдельных случаях, в относительно высоких дозах. Для людей, проживающих на загрязненных радионуклидами территориях, характерно длительное комбинированное воздействие внешнего и внутреннего излучения в сочетании с нерадиационными факторами. Следует подчеркнуть, что из-за неоднородности загрязнения и разного радионуклидного состава выпавших осадков, а также широкого диапазона биогеохимических характеристик местности, цитогенетическое обследование населения с целью оценки повреждающего действия радиации имеет особую актуальность.

2.2.1. Жители Алтайского края и Казахстана, подвергшиеся облучению в результате ядерных взрывов на Семипалатинском полигоне

Нестабильные хромосомные аберрации. Спустя 40-45 лет после первого ядерного взрыва на Семипалатинском полигоне в 1949 г. у жителей всех обследованных населенных пунктов Алтайского края (Угловское, Лаптев Лог, Топольное, Зеленая Дубрава, Беленькое и Наумовка), за исключением с. Озерное-Кузнецово, выявлена повышенная частота нестабильных аберраций хромосом, в первую очередь, дицентриков и центрических колец (рис. 5).

Установлена статистически значимая связь (коэффициент корреляции 0,7; р<0,05) частоты клеток с дицентриками и центрическими кольцами в группе жителей Алтайского края с величиной средней эффективной дозы, полученной с помощью расчетных и физических методов дозиметрии.

Стабильные хромосомные аберрации. Средние значения частоты транслокаций, измеренные FISH методом, для жителей трех наиболее пострадавших населенных пунктов Алтайского края статистически значимо превышают контрольный уровень (Московский регион) (р<0,05) - в 2,4 раза для жителей с. Лаптев Лог и с. Топольное и в 3,3 раза для жителей с. Беленькое (рис. 6).

0,5

Рис. 5. Средняя частота дицен-

d 0,25

триков и центрических колец в лимфоцитах крови жителей Алтайского края (1 - Тюменцево, 2 - Озерное-Кузнецово; 3 -Зеленая Дубрава; 4 - Беленькое; 5 - Топольное; 6 - Наумовка; 7 -7 8 Лаптев Лог; 8 - Угловское).

2,5

1,5 1

0,5

■Йм

Рис. 6. Средняя частота транслокаций, рассчитанная на геном (Рс), У жителей населенных пунктов Алтайского края (К - контроль, I - Лаптев Лог, II - Беленькое, III - Топольное).

Примерно 80% дозы внешнего облучения пришлось на взрыв 1949 г., поэтому люди, родившиеся до 1949 г., получили наибольшую дозовую нагрузку. Так, в группу обследованных жителей с. Лаптев Лог вошли люди, родившиеся до 1949 г. и позже. Средняя частота транслокаций для людей, родившихся до 1949 года, более чем в 5 раз превышает аналогичный показатель в группе сравнения (р<0,05, ^критерий Стьюдента). Показано также, что для жителей, родившихся после 1949 г., частота стабильных хромосомных аберраций не отличается от контрольного уровня (рис. 7).

2 1

S О

Рис. 7. Средняя частота транслокаций, рассчитанная на геном (Рс), у жителей с. Лаптев Лог Алтайского края (I - рожденные до 1949 г.; II - рожденные после 1949 г.).

Цитогенетическое обследование, проведенное в четырех населенных пунктах Казахстана (Долонь, Знаменка, Карааул, Кайнар) FISH методом показало, что средняя частота транслокаций у жителей всех населенных пунктов превышает контрольный уровень (группа сравнения из Павлодарского района).

Наибольшая частота стабильных хромосомных аберраций зарегистрирована у жителей пос. Долонь (в 2,2 раза статистически значимо выше, чем в группе сравнения), для которых была определена с помощью расчетных методов дозиметрии и наибольшая средняя эффективная доза - 670 мЗв (рис. 8).

'= 2 -

Р- I

'А

I #

7/,

У/

I 1

Рис. 8. Средняя частота транслокаций, рассчитанная на геном (Рс), у жителей населенных пунктов Казахстана (К - контрольная группа из Павлодарского района; I - Долонь; II - Знаменка; III - Карааул; IV - Кайнар; V- вся обследованная группа).

2.2.2. Жители с. Муслюмово, расположенного на берегах реки Теча в Челябинской области

В конце сороковых годов на Южном Урале создано производственное объединение (ПО) «Маяк», задачей которого было получение оружейного плутония и переработка радиоактивных продуктов. Процесс интенсификации производства плутония на предприятии в 1948-55 гг., а также отсутствие надежных технологий переработки и хранения радиоактивных отходов привели

к тому, что с 1949 г. часть сточных вод, содержащих радиоактивные вещества, сбрасывалась в открытые водоемы бассейна реки Теча. Это привело к значительному радиоактивному загрязнению речной системы Теча-Исеть-Тобол и облучению жителей прибрежных населенных пунктов. Среди невыселенных сел наиболее серьезная радиационная обстановка в период проведения цитогенетического обследования (1993-1994 гг.) сохранялась в с. Муслюмово, находящемся в 78 км от ПО «Маяк».

Нестабильные хромосомные аберрации. В соответствии с задачами исследования все жители были разделены на группы (рис. 9). Средняя частота маркеров радиационного воздействия во всех группах значительно превышает контрольный показатель (в 5-10 раз), что может свидетельствовать о продолжающемся облучении. Наиболее высокая частота дицентриков и центрических колец отмечена в первой и второй группах, т.е. у жителей, подвергшихся облучению в первые годы функционирования ПО «Маяк».

Стабильные хромосомные аберрации. Статистически значимое превышение в 4 раза средней частоты транслокаций, рассчитанной на геном, по сравнению с группой сравнения (2,24 и 0,54 на 100 клеток, соответственно) было зарегистрировано при цитогенетическом обследовании с помощью FISH метода у 6 жителей с. Муслюмово.

Рис. 9. Средняя частота дицентриков и центрических колец у жителей с. Муслюмово (К - контрольная группа, Тюменцево; I - жители, родившиеся до 1949 г. (начало радиационного загрязнения реки Теча) и проживающие в с. Муслюмово постоянно; II - жители, родившиеся в период с 1949 по 1956 гг. (период, характеризующийся наиболее высоким уровнем загрязнения реки Теча); Ш -жители, родившиеся после 1957 г; IV -мигранты, т.е. люди, приехавшие в с. Муслюмово в разное время, в том числе эвакуированные из деревень, подвергшихся радиоактивному загрязнению).

0,3

,0,2

ОД

2.2.3. Жители Брянской области, проживающие на территории, загрязненной радионуклидами в результате аварии на Чернобыльской АЭС

Среди радиационных аварий, приведших к загрязнению окружающей среды, самой значительной по количеству выброшенных радионуклидов, по площади загрязненных территорий, а также по числу пострадавших является авария на Чернобыльской АЭС.

Нестабильные хромосомные аберрации. Цитогенетическое обследование жителей Брянской области, проживающих в районах, загрязненных радионуклидами, выявило повышенный уровень хромосомных аберраций - общая частота хромосомных аберраций в 2 раза превышает аналогичный показатель в группе сравнения, а частота дицентриков и центрических колец в 5 раз выше по сравнению с контрольным уровнем (табл.

6). Обращает на себя внимание высокая частота аберраций хроматидного типа, более чем в 2 раза превышающая аналогичный показатель в группе сравнения. Это может быть связано как с непосредственным влиянием на организм химических (лекарственные средства, химические соединения бытового назначения, сельскохозяйственные ядохимикаты) или биологических (вирусная инфекция) генотоксикантов, так и с проявлением эффекта радиационно-индуцируемой нестабильности генома, которая реализуется в виде повышенной чувствительности к воздействию мутагенов различной природы.

Таблица 6

Результаты цитогенетического обследования жителей

Брянской области

Группы Число обследо ванных (число клеток) Частота хромосомных аберраций на 100 кл ± т

Все хромосомные аберрации Дицентрики + центрические кольца Ацентрические парные фрагменты Хроматид- ные аберрации

Жители 80 (21027) 1,43±0,08* 0,10 ± 0,02* 0,36 + 0,04 0,93 ± 0,07*

Контроль (Москва) 114 (51430) 0,66 ± 0,04 0,02 + 0,01 0,23 ± 0,02 0,41 ±0,03

* - статистически значимые различия с группой сравнения (р<0,05, 1-критерий Стьюдента)

2.2.4. Население, проживающее в окрестности атомной электростанции Три Майл Айленд (США)

28 марта 1979 г. на атомной станции Три Майл Айланд (ТМА), (Пенсильвания, США), на блоке N2 произошла авария. Согласно официальным данным, изложенным в докладе Комиссии по ядерному регулированию США в 1980 г. (Ыакао, 1980) никаких последствий от этой аварии на население, флору и фауну не ожидается. Однако, расчеты специалистов о масштабах возможных выбросов радиоактивных инертных газов, обнаружение в окружающей среде радиоактивного йода, а также научные публикации о наблюдаемых радиационных эффектах при обследовании деревьев и животных до сих пор не позволяют однозначно оценить масштабы и последствия этой аварии (МиМгО-0738 ЕРА 600/4-80-049, 1980).

Нестабильные хромосомные аберрации. Цитогенетическое обследование жителей окрестности АЭС ТМА показало, что на фоне относительно нормального общего уровня хромосомных аберраций наблюдается значительное увеличение частоты маркеров радиационного воздействия -дицентриков и центрических колец (рис. 10). Этот показатель в 10 раз превышает аналогичный показатель в группе сравнения из Московского региона. Так как не представлялось возможным получить данные по спонтанному уровню хромосомных аберраций для жителей того же региона, где проводилось обследование, то данные цитогенетического анализа сравнивали с

контрольными значениями, полученными при обследовании жителей с. Тюменцево, г. Сарова и Павлодарского района Казахстана. В этом случае также наблюдали статистически значимое превышение частоты дицентриков и центрических колец в группе жителей окрестности атомной станции ТМА

Рис. 10. Средняя частота дицентриков и центрических колец в группе жителей окрестности АЭС ТМА и группах сравнения (I -контрольная группа из Московского региона, II -жители с. Тюменцево (Алтайский край); III -жители г. Сарова; IV -жители Павлодарского района Казахстана; V жители окрестности АЭС ТМА, США).

Стабильные хромосомные аберраций. Для 6 жителей из обследованной группы был проведен анализ частоты стабильных хромосомных аберраций, который показал, что средняя частота транслокаций в пересчете на весь геном статистически значимо превышает аналогичный показатель для группы сравнения из Московского региона почти в 3 раза (1,55 и 0,54 на 100 клеток соответственно).

Таким образом, анализ результатов цитогенетического обследования населения, пострадавшего вследствие радиационных аварий, позволяет заключить, что повышенный уровень хромосомных аберраций стабильного и нестабильного типов, выявленный спустя десятилетия после облучения, свидетельствует не только о факте облучения, но и о продолжающемся мутагенном воздействии на организм человека факторов радиационной природы. При этом частота клеток с хромосомными аберрациями (группы жителей Алтайского края, Казахстана, с. Муслюмово) коррелирует со значениями средних эффективных доз, предположительно полученными жителями обследованных населенных пунктов.

2.3. Участники ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС

Участники ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС при выполнении работ подвергались, в основном, воздействию внешнего гамма-излучения с разной мощностью дозы, в меньшей степени - воздействию внешнего бета-излучения на кожные покровы, а также внутреннему облучению за счет ингаляции изотопов йода. Дозы радиационного воздействия, полученные ликвидаторами, особенно в первые месяцы после аварии, были определены с высокой степенью неопределенности. Погрешность в оценке доз, по данным

(соответственно в 3, 2,5 и 1,25 раз).

специалистов, могла составлять в зависимости от использованного метода от 50 до 500 % (Иванов и соавт., 1992, 1999).

Нестабильные хромосомные аберрации. Для анализа результатов цитогенетического обследования ликвидаторов были сформированы 4 группы -в зависимости от времени первого въезда в зону аварии - с 1986 по 1989 гг. (табл. 7). Такое разделение соответствовало радиационной обстановке, которая существенно изменялась в Чернобыле в указанные периоды. Наиболее сложной и опасной радиационная обстановка была в 1986 г. в период сооружения «Саркофага».

По всем цитогенетическим показателям (исключение составляет частота дицентриков и центрических колец в группе ликвидаторов 1989 г.) были выявлены статистически значимые различия между группой сравнения и всеми группами ликвидаторов, независимо от времени первого въезда в зону аварии. Общая частота хромосомных аберраций, а также частота ацентрических парных фрагментов и аберраций хроматидного типа примерно в 2-3 раза превышает аналогичные показатели в контрольной группе. Частота дицентриков и центрических колец имеет наибольшие значения в группе ликвидаторов, работавших в 1986 г. - примерно в 5 раз выше по сравнению с контролем. В группах ликвидаторов, работавших в последующие годы, наблюдается постепенное снижение уровня цитогенетических показателей.

Таблица 7

Результаты цитогенетического обследования ликвидаторов, принимавших участие в восстановительных работах в разные годы после аварии

Время работы, год Число обследо ванных (число клеток) Частота хромосомных аберраций на 100 кл ± т

Все хромосомные аберрации Диценрики + центрические кольца Ацентрические парные фрагменты Хроматид- ные аберрации

1986 788 (304883) 1,81±0,02* 0,11±0,01* 0,62±0,01* 1,00±0,02*

из них:

однократно 692 (269015) 1,77±0,03 0,11±0,01 0,60+0,01 0,98+0,02

многократно 96 (35868) 2,10±0,08 0,14±0,02 0,73±0,05 1,17+0,06

1987 205 (70107) 1,63±0,05* 0,09±0,01* 0,54+0,03* 0,93±0,04*

1988 41 (13657) 1,35±0,10* 0,07±0,02* 0,44±0,06* 0,80±0,08*

1989 10 (2935) 2,35±0,28* 0,07±0,05 0,48±0,13* 1,70±0,24*

Контроль (Москва) 114 (51430) 0,66±0,04 0,02±0,01 0,23±0,02 0,41 ±0,03

*- статистически значимые различия с группой сравнения, р<0,05, ^критерий Стьюдента

В обследованной группе только у 60% ликвидаторов имелись официальные данные о дозе облучения. Статистический анализ не выявил значимых различий по частоте дицентриков и центрических колец между группами с разными величинами средних доз (рис. 11).

Среди ликвидаторов 1986г. 692 человека работали в зоне аварии однократно, а 96 человек приезжали на работу несколько раз в течение 3-4 лет (табл. 7). В группе ликвидаторов, работавших в Чернобыле многократно, частота всех цитогенетических показателей была выше. Получены статистически значимые различия между группами по общей частоте хромосомных аберраций, частоте ацентрических парных фрагментов и частоте хроматидных аберраций.

0-49 50-99 100-149 150-200 Диапазон доз, мЗв

>200

Рис.11. Средняя частота дицентриков и центрических колец в группах ликвидаторов с разными значениями доз по документам.

В отдельную группу выделены 60 ликвидаторов, которые работали на предприятиях атомной промышленности, являясь специалистами в области радиационной физики, радиохимии, дозиметрии, и которые подвергались радиационному воздействию в процессе профессиональной деятельности. Средняя частота дицентриков и центрических колец в этой группе в 1,5 раза достоверно выше аналогичного показателя в группе ликвидаторов, работавших в зоне аварии в наиболее опасное время - в 1986 г.

При анализе результатов цитогенетического мониторинга ликвидаторов, работавших в 1986 г., полученные данные были разделены на 4 группы в зависимости от времени проведения цитогенетического анализа - через 4-5 лет (I группа), 6-10 лет (II группа), 11-15 лет (III группа) и 15-20 лет (IV группа) после аварии (рис. 12).

На протяжении всего периода обследования, начиная с 1990 г. и вплоть до 2007 г., частота всех типов хромосомных аберраций оставалась более высокой по сравнению с контрольными значениями,

Необходимо подчеркнуть, что не было выявлено статистически значимых различий по частоте дицентриков и центрических колец в зависимости от сроков проведения цитогенетического обследования. При этом частота ацентрических парных фрагментов и аберраций хроматидного типа снизилась со временем. В группах ликвидаторов, обследованных через 11-15 лет и 16-20 лет (III и IV группы), средняя частота этих показателей примерно в 2 раза ниже по сравнению с группами ликвидаторов, обследованных в более ранние периоды (I и II группы).

Стабильные хромосомные аберрации. Цитогенетический анализ, проведенный с помощью FISH метода, показал, что средняя частота транслокаций в группе ликвидаторов превышает контрольный уровень в 2,2 раза (табл. 8). 17 ликвидаторов работали в Чернобыле периодически в течение 1986-1995 гг., т.е. подвергались длительному фракционированному облучению. Частота транслокаций в этой группе в 3,3 раза выше, чем в контрольной группе и в 2 раза превышает аналогичный показатель для группы ликвидаторов, которые работали в Чернобыле только в 1986 г.

Среди обследованных FISH методом ликвидаторов у 34 человек имелись официальные сведения о дозе облучения. Статистический анализ не выявил статистически значимой корреляции частоты транслокаций с накопленной (по документам) за время работы в Чернобыле дозой ионизирующего излучения (коэффициент корреляции составил 0,08 при р=0,65).

0,15

0,1

0,05

III IV

§ 1>5

2 0,5

II II IV

£ 0,5-

0 -

I II III IV

Рис. 12. Средняя частота хромосомных аберраций в группе ликвидаторов 1986 года в разные сроки обследования (а - частота дицентриков и центрических колец; б - частота ацентрических парных фрагментов; в - частота хроматид-ных аберраций)

К-контрольная группа из Московского региона; I - 1990-91 гг. (111 чел); II - 1992-96 гг. (351 чел); III - 1997-01 гг. (229 чел); IV - 200207 гг. (96 чел).

Таким образом, подводя итоги многолетнего изучения цитогенетических эффектов у участников ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС, необходимо отметить, что на протяжении всего периода наблюдения средняя частота хромосомных аберраций в группах ликвидаторов, работавших в зоне аварии в 1986 - 1989 гг., превышает контрольный уровень. Со временем после облучения наблюдается постепенное снижение частоты ацентрических парных фрагментов и аберраций хроматидного типа. При этом частота дицентриков и центрических колец - маркеров радиационного воздействия - фактически не изменяется и превышает аналогичный показатель в контрольной группе в 3,5 - 5 раз в зависимости от сроков работы и длительности нахождения в зоне аварии. Частота транслокаций, исследованная с помощью FISH метода, также превышает контрольный уровень (в 1,5 - 3 раза) и зависит от продолжительности работы в зоне аварии. Не обнаружено связи частоты дицентриков и центрических колец, а также частоты транслокаций с величиной дозы, официально зарегистрированной в документах ликвидаторов.

Результаты цитогенетического обследования свидетельствуют, что более надежными показателями при анализе последствий облучения ликвидаторов являются дата въезда в зону радиоактивного загрязнения или, иными словами, год работы в Чернобыле и продолжительность проведения восстановительных работ.

Таблица 8

Средняя частота транслокаций у ликвидаторов Чернобыльской аварии

(FISH метод)

Группы Число обследованных (число клеток) Доза по документам ± т, мЗв Частота транслокаций Fg ± m наЮО кл.

Все обследованные ликвидаторы 52 (44283) 251 ±42 1,21 ±0,16*

Ликвидаторы 1986 г. 35 (27767) 200 ± 20 0,86 ± 0ДЗ*3

Ликвидаторы 1986-1995 гг. 17(15516) 380 ±46 1,81 ±0,34*

Контроль (Москва) 16(29043) - 0,54 ±0,10

* - статистически значимые различия с группой сравнения, р<0,05, (.-критерий Стьюдента; а - статистически значимые различия с группой ликвидаторов, работавших в Чернобыле в 1986 - 1995 гг. (р<0,05,1- критерий Стьюдента). Рс -частота транслокаций, рассчитанная на весь геном.

3. Применение цитогенетических показателей крови для биологической индикации и дозиметрии ионизирующего излучения

3.1. Анализ зависимостей «доза-эффект» при воздействии гамма - и бета-излучения и построение калибровочных кривых для частоты дицентриков и транслокаций

3.1.1. Гамма-излучение

Зависимость «доза-эффект» для гамма-излучения 60Со исследована при двух режимах облучения образцов крови - при мощности дозы 0,102 Гр/мин и 0,47 Гр/мин. Для построения калибровочной кривой выбраны дозы в диапазоне от 0 до 4 Гр.

С целью построения максимально адекватной калибровочной кривой «доза-эффект» проанализированы результаты цитогенетического исследования для пяти (облучение с мощностью дозы 0,102 Гр/мин) и трех (облучение с мощностью дозы 0,47 Гр/мин) доноров. При обоих режимах облучения данные, полученные для разных доноров, после предварительной проверки на однородность были объединены. Всего проанализировано 55007 метафаз, т.е. около 5000 клеток на каждую точку кривой при облучении образцов крови с мощностью дозы 0,1 Гр/мин и 10510 метафаз, т.е. около 1500 клеток на каждую точку кривой при облучении образцов крови с мощностью дозы 0,47 Гр/мин.

Регрессионные уравнения, описывающие дозовую зависимость, вычислены с помощью метода наименьших квадратов с весами, величины которых обратно пропорциональны дисперсиям частот хромосомных аберраций. Установлено, что наиболее значимым для оценки дозы показателем является частота дицентриков и центрических колец (р=6 х 10"14 при облучении с мощностью дозы 0,102 Гр/мин и р=3 х 10'" при облучении с мощность дозы 0,47 Гр/мин). Дозовые зависимости для этого показателя лучше всего описываются линейно-квадратичным уравнением. Сравнение двух дозовых зависимостей, полученных при разных режимах облучения образцов крови, не выявило существенных различий (рис. 13). Значения линейных и линейно-квадратичных коэффициентов практически не отличаются или отличаются в пределах ошибки (р>0,05).

Таким образом, результаты экспериментального исследования позволяют констатировать, что мощность дозы в исследуемом диапазоне не оказывает влияния на частоту хромосомных аберраций.

В дальнейшем для реконструкции доз по частоте дицентриков применяли калибровочные кривые «доза-эффект», полученные при облучении образцов крови гамма-излучением 60Со с мощностью дозы 0,102 Гр/мин. Соответствующая регрессионная зависимость имеет вид:

у = 0,1 + 1,5хБ +6,ЗхБ2 ,

где у - частота аберраций на 100 клеток, В - доза облучения (Гр). Значимость модели высокая: р=6хЮ"'4.

Рис. 13. Зависимость «доза-эффект» для частоты дицентриков и центрических колец при двух режимах облучения

Дозовая зависимость для частоты стабильных хромосомных аберраций -транслокаций при облучении образцов крови гамма-излучением 60Со с мощностью дозы 0,102 Гр/мин получена с помощью FISH метода. Всего проанализировано 21087 метафаз, т.е. в среднем 2636 метафаз на каждую точку кривой. При построении калибровочной кривой использовали суммарное значение частот реципрокных и нереципрокных транслокаций (tc + t; ). Соответствующая регрессионная зависимость имеет вид:

у = 0,24 + 0,70х D +0,14xD2,

где у - частота транслокаций с участием хромосом 1, 4 и 12 на 100 клеток, D - доза облучения (Гр). Значимость модели: р=6,3х10"4.

Известно, что клетки с нестабильными хромосомными аберрациями (дицентриками, центрическими кольцами, ацентрическими парными фрагментами) постепенно элиминируют из циркулирующей крови в силу особенностей структурной организации, что и является основной причиной, не позволяющей использовать их для ретроспективной дозиметрии. При анализе стабильных хромосомных аберраций - транслокаций, с увеличением дозы радиационного воздействия повышается вероятность появления клеток, содержащих как стабильные, так и нестабильные хромосомные аберрации. Элиминация таких клеток в пострадиационном периоде может привести к тому, что доза, рассчитанная по частоте транслокаций, будет недооценена. Поэтому очень важно иметь достоверную информацию о том, в каком диапазоне доз можно применять анализ стабильных хромосомных аберраций для ретроспективной дозиметрии, не вводя поправку на снижение частоты нестабильных клеток, в которых могут содержаться транслокации. Анализ частоты клеток со стабильными хромосомными аберрациями показал, что только в диапазоне доз до 2 Гр можно проводить ретроспективную оценку

уровня облучения по частоте транслокаций, не учитывая процессы элиминации (рис. 14).

Доза, Гр

----для трапслокаций во всех клетках

-для транслокаций в стабильных клетках

Рис. 14. Зависимость «доза-эффект» для частоты транслокаций

Анализ частоты дицентриков и центрических колец, проведенный с помощью FISH метода после облучения образцов крови гамма-излучением (мощность дозы 0,102 Гр/мин) позволил установить, что зависимость «доза-эффект» очень близка к полученной при применении классического цитогенетического метода (рис. 15). Различия между показателями статистически недостоверны. Этот, несомненно, важный результат является подтверждением корректности формулы, предложенной (Lucas et al., 1992) для пересчета частоты транслокаций с участием окрашенных хромосом на весь геном.

3.1.2. Бета-излучение оксида трития (НТО)

Зависимость «доза-эффект» после воздействия бета-излучения НТО изучена при двух режимах облучения - при постоянном времени облучения - 24 ч (мощность дозы изменялась от 0,042 до 1,03 мГр/мин) и при постоянной мощности дозы бета-излучения НТО - 0,522 мГр/мин (время облучения варьировало от 1,6 до 48 ч) в диапазоне доз от 0,05 до 1,5 Гр.

На основании результатов цитогенетического анализа (посчитано 15329 клеток, в среднем по 2000 клеток на точку), применяя метод наименьших квадратов с весами, получены уравнения регрессии, описывающие дозовую зависимость при двух режимах облучения. Результаты экспериментального исследования показали, что при пролонгированном радиационном воздействии в течение 24 ч с низкой мощностью доз, варьирующей от 0,042 до 1,03 мГр/мин, дозовая зависимость частоты дицентриков и центрических колец лучше всего соответствует линейной модели регрессии (у=0,21+10,76xD, р=4х10'6).

При облучении с постоянной мощностью дозы 0,522 мГр/мин при разном времени радиационного воздействия (от 1,6 до 48 ч) дозовая зависимость имеет линейно-квадратичный вид (y=0,07+4,47xD+9,03xD2, р=2х10~6).

Рис.15. Дозовая зависимость для частоты дицентриков и центрических колец (FISH метод). Сплошной линией обозначена калибровочная кривая для частоты дицентриков и

центрических колец, полученная с

0 1 1 ' ' ' 1 помощью классического метода.

0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 3,5 4,0 4,5

Доза, Гр

Анализ экспериментальных данных показал, что дозовые зависимости для обоих режимов облучения в диапазоне до 1 Гр практически одинаковые. И только при дальнейшем увеличении дозы наблюдаются различия. При облучении образцов крови с постоянной мощностью дозы - 0,522 мГр/мин в течение 48 ч резко возрастает частота хромосомных аберраций. По-видимому, в исследуемом диапазоне доз (1 Гр и выше) определяющим фактором могло быть время радиационного воздействия, отличающееся в 1,5 - 2 раза, и которое в совокупности с особенностями биологического действия бета-излучения трития, привело к наблюдаемому эффекту.

3.2. Относительная биологическая эффективность излучений разного

качества

Для количественной оценки биологического действия разных по качеству ионизирующих излучений определяют коэффициенты относительной биологической эффективности (ОБЭ). Численные значения ОБЭ не только представляют самостоятельный интерес для радиобиологии, определяя степень опасности излучения, но и служат основанием для оценки весового множителя излучений (Wr), который является поправочным коэффициентом при определении качества излучения и необходим для преобразования поглощенной дозы (Гр) в эквивалентную (Зв) (МКРЗ, публикация 60, 1990).

3.2.1. Оценка относительной биологической эффективности бета-излучения НТО in vitro

Определение коэффициента ОБЭ бета-излучения НТО проводили, сравнивая частоту дицентриков и центрических колец с данными, полученными при облучении in vitro гамма-излучением 60Со с мощностью дозы 0,102 Гр/мин.

Максимальное значение коэффициента ОБЭ трития, равное 2,2, было получено при дозе 0,03 Гр. При увеличении дозы значение коэффициента ОБЭ плавно снижается, приближаясь к величине 1,2 при дозе в I Гр.

Причины более высокой эффективности бета-излучения трития обусловлены в первую очередь особенностями его биологического действия и внутриклеточного распределения. Известно, что из-за низкой энергии и малого пробега бета-частиц трития средняя плотность ионизации значительно возрастает, что может приводить к повышению ЛПЭ на порядок (Pinson et al., 1980). Важным фактором является включение тритиевой воды в гидратированные оболочки ДНК, что приводит к дополнительным повреждениям молекул ДНК (Mathur-de Vre, Binet, 1984; Baumgartner, 2002).

Также важно учитывать, что при радиационном распаде трития проявляется трансмутационный эффект - превращение атома трития в атом гелия, что реализуется в более выраженной деструкции генетических структур (например, замена пар оснований) и может проявляться в виде точечных мутаций. Возникновение таких точечных повреждений в молекуле ДНК трудно обнаруживается системой репарации, что постепенно приводит к накоплению дефектов в молекулярной структуре и, как следствие, к потере генетической информации. Показано, что эффект трансмутации может значительно превосходить эффект ионизации (Грачева, Королев, 1977; Commerford, 1984; Balonov et al., 1984).

Наиболее важная с практической точки зрения информация о значениях ОБЭ бета-излучения трития касается области малых доз. Увеличение ОБЭ при действии низких доз может быть связано как с нарушением взаимоотношений между основными системами клетки, ответственными за реализацию радиационных повреждений, так и с повышением продукции активных форм кислорода, губительно влияющих на структуры клеток (Федоренко, 2006). При малых дозах излучения степень повреждения клеток за счет образования свободных радикалов на единицу поглощенной дозы значительно возрастает по сравнению с областью высоких доз.

3.2.2. Оценка относительной биологической эффективности бета-излучения трития и космического излучения in vivo

Для определения ОБЭ бета-излучения трития и космического излучения при их действии in vivo был проведен сравнительный анализ результатов цитогенетического обследования профессионалов г. Сарова и космонавтов, имевших близкие значения частот стабильных хромосомных аберраций (транслокаций). У этих людей, подвергавшихся радиационному воздействию в процессе профессиональной деятельности, имеется достаточно надежная информация о дозе, полученная с помощью физических и расчетных методов дозиметрии.

Значение коэффициента, характеризующего ОБЭ бета-излучения трития и космического излучения по сравнению с гамма-излучением, определяли как отношение средних равноэффективных доз, индуцирующих одинаковую частоту транслокаций (табл. 9).

Значение коэффициента ОБЭ для бета-излучения трития составило 2,5 при средней дозе бета-излучения НТО 157 мЗв. Эта величина несколько превышает значение ОБЭ трития, полученное в экспериментальной части работы. Однако представленные результаты позволяют с уверенностью говорить о большей

эффективности бета-излучения трития по сравнению с гамма-излучением, особенно в области малых доз.

В группе космонавтов дозы, вызывающие эффект, близкий наблюдаемому в группе профессионалов, подвергавшихся действию гамма-излучения, в 1,9 раз ниже. Это значение вполне реально и не противоречит данным, представленным в работах по экспериментальной оценке ОБЭ космического излучения (Bailarín, Ottolenghi, 2005; Cucinotta et al., 2008). Полученные данные являются наглядным подтверждением более высокой ОБЭ космического излучения, обусловленной входящими в его состав тяжелыми ионами высокой энергии.

Оценка ОБЭ космического излучения и бета-излучения трития проведена непосредственно по реакции организма, с учетом его индивидуальных особенностей. Естественно, эти результаты нельзя считать бесспорными. Однако такой подход, на наш взгляд, позволяет реально оценить степень опасности разных видов ионизирующего излучения и может быть полезен при разработке рекомендаций по обеспечению радиационной безопасности лиц, профессионально контактирующих с источниками излучения.

Таблица 9

Средние значения коэффициентов ОБЭ бета-излучения трития и космического излучения, рассчитанные по частоте транслокаций in vivo

Группы Доза, мЗв Частота транслокаций FG на 100кл±т Коэффициент ОБЭ

Профессионалы, бета-излучение 157 1,94± 0,50 2,5

Космонавты 203 1,84±0,61 1,9

Профессионалы, гамма-излучение 386 1,77±0,71 -

Fg - частота транслокаций, рассчитанная на весь геном

3.3. Реконструкция доз ионизирующего излучения по частоте хромосомных аберраций в лимфоцитах периферической крови (биологическая дозиметрия)

Для оценки и прогноза последствий облучения в первую очередь важно иметь достоверную информацию о дозе радиационного воздействия. Одним из возможных подходов в случае отсутствия или ограничения данных физической дозиметрии является оценка доз с помощью цитогенетических методов (WHO, 1976; IAEA, 1986, 2001; UNSCEAR, 1986). Располагая результатами цитогенетического обследования людей, подвергшихся облучению в результате аварийных и чрезвычайных ситуаций, нам представлялось вполне обоснованным применить их для оценки доз, используя калибровочные кривые, полученные в настоящей работе. Принимая во внимание, что все обследованные лица подвергались пролонгированному или хроническому облучению в течение длительного времени, для определения доз использовали линейную часть полученных уравнений регрессии: у= c+axD (Obe, 2007).

3.3.1. Космонавты

Только для космонавтов была возможность оценить дозы по частоте нестабильных хромосомных аберраций, т.к. цитогенетический анализ проводился сразу после окончания КП. По частоте дицентриков были рассчитаны дозы, полученные космонавтами за время первого КП (табл. 10).

Таблица 10

Биологическая оценка доз у космонавтов по частоте дицентриков и центрических колец (классический метод)

Экспедиция Станция Среднее значение физической дозы (диапазон), мГр Число обследованных Частота дицентриков + центрических колец на 100 кл ± m «Биологическая» доза (диапазон), мЗв

ЭП «Мир» 6 (2-И) 4 0,26 ± 0,09 107 (47- 167)

МКС 2 (1-3) 13 0,18 ±0,04 53 (27-80)

ЭО «Мир» 71 (7 -109) 14 0,44 ± 0,06 227 (187-267)

МКС 29 (18-46) 6 0,27 ± 0,07 113 (67-160)

Необходимо отметить, что значения доз рассчитаны без учета реальных условий облучения в космосе, а именно, без учета ОБЭ космического излучения, а также величины мощности дозы, представляя, таким образом, некий гамма-эквивалент дозовых нагрузок. Несмотря на это, данные биологической дозиметрии свидетельствуют о более значительном воздействии космического излучения на организм космонавтов, чем это следует из данных физической дозиметрии. Причем в случае краткосрочных полетов различия между биологическими и физическими оценками доз достигают значений в 17-26 раз, в то время как в случае длительных полетов эта величина составляет всего 3-4 раза. Одним из объяснений данного факта может быть длительное (около полугода) пролонгированное облучение, во время которого в циркулирующей крови космонавтов во время КП протекают одновременно два противоположных процесса - образование хромосомных аберраций под воздействием радиации и элиминация клеток с нестабильными хромосомными аберрациями. Оценка дозы проводилась после окончания КП, т.е. по остаточной частоте дицентриков, что, естественно, могло привести к недооценке радиационного эффекта у космонавтов, участвующих в ЭО. Также нельзя не учитывать и возможность влияния на уровень хромосомных аберраций дополнительных факторов КП, таких как стресс, невесомость, перегрузки, измененный состав газовой среды. Сочетанное воздействие факторов радиационной и нерадиационной природы может приводить к аддитивному или даже синергетическому эффекту. Непропорционально высокий уровень хромосомных аберраций, наблюдаемый у космонавтов после краткосрочных полетов, может быть связан и с

особенностями космического излучения, характеризующегося высокой плотностью ионизации, при действии которого в поврежденных клеточных структурах отсутствуют или крайне слабо выражены восстановительные процессы. Именно вследствие этого ОБЭ излучений с высокой ЛПЭ возрастает по мере снижения суммарной дозы и достигает максимальных значений при хроническом воздействии в малых дозах (Москалев, 1983).

Биологическая оценка доз у космонавтов проведена также по частоте стабильных хромосомных аберраций - транслокаций, которые были проанализированы с помощью FISH метода (табл. 11). Среднее значение дозы, рассчитанное по частоте транслокаций в группе космонавтов после первого КП (ЭО, МКС), оказалось близким к дозе, которая была определена по частоте дицентриков. Несколько сниженное значение последней, возможно, обусловлено процессом элиминации клеток с дицентриками из циркулирующей крови космонавтов во время длительного КП. Как и в случае оценки доз по частоте дицентриков, доза после первого КП, рассчитанная по частоте транслокаций, в 4 раза превышает значение дозы, полученной на основании данных физической дозиметрии.

Таблица 11

Биологическая оценка доз у космонавтов (ЭО, МКС) по частоте транслокаций (FISH метод)

Группа Число обследованных Данные физической дозиметрии (суммарная доза), мГр Частота транслокаций Fp на 100 кл. ± m «Биологическая» доза (диапазон), мЗв

До 1-го КП 5 - 0,30 ± 0,06 -

После 1-го КП 10 45 ±4 0,43 ± 0,09 186(0-314)

После 2-го и 3-го КП 8 181 ± 18 0,46 ± 0,06 229(143 -314)

3.3.2. Профессионалы г. Сарова

Индивидуальная оценка доз проведена спустя несколько десятилетий с начала работы в радиационно-опасных условия производства только для тех профессионалов, у которых частота транслокаций достоверно отличалась от контрольного уровня.

В «гамма» группе значения доз составили от 243 до 1757 мЗв. Несмотря на наблюдаемую тенденцию связи между дозами, полученными с помощью физических и расчетных методов дозиметрии, и «биологическими» дозами статистический анализ не выявил (коэффициент корреляции 0,64, р=0,06).

Оценка доз у профессионалов «бета» группы проведена с использованием двух подходов:

- по частоте транслокаций с помощью калибровочной кривой «доза-эффект», для бета-излучения трития, представленной в работе (Deng et al., 1998);

- по частоте транслокаций с помощью собственной калибровочной кривой «доза-эффект» для гамма-излучения б0Со с учетом коэффициента ОБЭ бета-излучения трития, полученного в настоящей работе.

Значения индивидуальных доз при использовании первого подхода составили от 94 до 1280 мЗв, второго - от 115 до 2530 мЗв, т.е. в 1,5 - 2 раза в среднем выше. Установлена статистически значимая корреляция между дозами, полученными расчетными методами дозиметрии и дозами, реконструированными по частоте транслокаций. Коэффициенты корреляции составили 0,68 (р=0,004) для доз, рассчитанных по калибровочной кривой для бета-излучения трития и 0,8 (р=0,0002) для доз, рассчитанных по калибровочной кривой для гамма-излучения °Со с учетом коэффициента ОБЭ трития.

Наибольшие различия между расчетными и «биологическими» значениями наблюдаются в области малых доз - до 100 мЗв (табл. 12). При низких уровнях облучения (по данным физической дозиметрии) значения «биологических» доз превышают расчетные как минимум в 6 раз. В области более высоких доз (>100 мЗв) данные физической и биологической дозиметрии очень близки, особенно при оценке доз по калибровочной кривой для бета-излучения трития. При определении доз по калибровочной кривой для гамма-излучения Со с учетом ОБЭ трития данные физической и биологической дозиметрии отличаются в 2 раза.

Таблица 12

Соотношения «биологических» доз и доз, полученных расчетными методами дозиметрии у профессионалов «бета» группы

Группы, диапазон доз, мЗв Число обследованных Расчетная доза, мЗв «Биологическая» доза, мЗв Соотношение ДОЗ

<100 8 35 212а (23 8)8 6,1 (6,8)

>100 8 386 407 (820) 1Д (2,1)

а - доза, рассчитанная по калибровочной кривой для бета-излучения НТО;

° - доза, рассчитанная по калибровочной кривой для гамма-излучения с учетом коэффициента ОБЭ

Полученные результаты наглядно свидетельствуют о более высокой биологической эффективности воздействия бета-излучения трития в области малых доз. К сожалению, данный факт не учитывается при реконструкции доз с использованием расчетных и физических методов дозиметрии, что приводит, в конечном итоге, к недооценке опасности воздействия бета-излучения трития на организм человека

3.3.3. Участники ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС

Определение доз облучения у ликвидаторов проводили спустя 7-10 лет после окончания работы в Чернобыле с помощью калибровочной кривой «доза-эффект» для транслокаций (ВаисЫгщег е1 а1., 1993). Средняя доза для всей группы (52 человека) составила 270 мЗв, для группы ликвидаторов, которые неоднократно работали в Чернобыле в период с 1986 по 1995 гг. - 390 мЗв, а для ликвидаторов, работавших только в 1986 г. - 190 мЗв. Следует отметить, что

средние значения доз, рассчитанные по частоте транслокаций, для ликвидаторов 1986 г. не противоречат данным, полученным с помощью физических методов дозиметрии (Иванов и др., 1992).

Для 18 ликвидаторов, у которых частота транслокаций достоверно отличалась от контрольного уровня, определены индивидуальные дозы облучения, значения которых составили от 270 до 1000 мЗв.

3.3.4. Жители территорий, загрязненных радионуклидами вследствие радиационных аварий

Оценка средних доз по частоте транслокаций у жителей загрязненных радионуклидами территорий показала, что наиболее пострадавшее население -это жители Казахстана и Алтайского края, подвергшиеся облучению в результате ядерных испытаний на Семипалатинском полигоне, и жители с. Муслюмово, расположенного на берегу р. Теча (табл. 13). Следует отметить, что значения доз были рассчитаны с помощью калибровочной кривой для гамма-излучения, полученной при конкретной мощности дозы. При этом не были учтены такие важные факторы, как реальная мощность дозы, характер радиационного воздействия (внутреннее или внешнее облучение), распределение дозы во времени и ОБЭ излучения, так как такие данные отсутствуют. Естественно, что существует также большая доля неопределенности, связанная с влиянием на уровень транслокаций факторов нерадиационной природы, таких как возраст, условия проживания, производственные факторы. Однако, несмотря на это, результаты цитогенетического анализа позволяют ретроспективно оценить степень радиационного воздействия на население пострадавших регионов в условиях отсутствия точных данных физической дозиметрии.

Таблица 13

Биологическая оценка доз у жителей, пострадавших в результате радиационных аварий

Группы Число обследованных Частота транслокаций Р'р на 100 кл ± т «Биологическая» доза, мЗв

Лаптев Лог (Алтайский край) 8 0,58±0,12 490

Беленькое (Алтайский край) 6 0,56±0,153 460

Топольное (Алтайский край) 4 0,40±0,12 230

Долонь (Казахстан) 5 0,75 ±0.10 730

Кайнар (Казахстан) 3 0,42 ± 0,09 250

Карааул (Казахстан) 5 0,64 ± 0.09 570

Знаменка (Казахстан) 5 0,41 ± 0.06 240

Муслюмово (Ю.Урал) 6 0,71 ±0,15 670

Окрестности АЭС ТМА 6 0,49±0,07 360

Попытка сравнения доз, рассчитанных с помощью физических и расчетных методов дозиметрии, с данными цитогенетического анализа, на наш взгляд, не всегда корректна. Отсутствие четкой зависимости между уровнем

хромосомных аберраций и физическими дозами может быть связано и с неточностями оценки последних. Как известно, ретроспективная оценка доз населения часто проводится с учетом усредненных данных (условия облучения, время радиационного воздействия, время наблюдения и др.).

Следует отметить, что на основании полученных результатов представляется преждевременным говорить о невозможности применения цитогенетических показателей лимфоцитов крови для оценки доз в отдаленные сроки после радиационного воздействия. Учитывая, что одной из основных целей ретроспективной дозиметрии является прогноз возможных отдаленных последствий облучения, любой метод, с помощью которого можно получить информацию о дозовых нагрузках, имеет право на существование. Преимущество биологических методов, в данном случае цитогенетических, состоит в том, что оценивается непосредственная реакция организма на радиационное воздействие, которая учитывает специфические особенности организма, в первую очередь его индивидуальную радиочувствительность. Иными словами, «биологическая» доза - это интегральный показатель повреждающего действия радиации, условно выраженный в единицах эффективной дозы.

4. Применение цитогенетических показателей для прогноза последствий облучения

К настоящему времени накоплены данные, свидетельствующие о взаимосвязи мутагенеза в соматических клетках с канцерогенезом, что позволяет вполне правомерно использовать цитогенетические показатели в качестве прогностических тестов развития онкопатологии (Sorsa et al., 1992; Hagmar et al., 1998; Wild et al., 2002; Rossner et al., 2005). Существует мнение, что дестабилизация генома является основным патогенетическим механизмом развития соматических заболеваний. Появляется все больше сведений о вкладе соматических мутаций в развитие неопухолевой патологии (Пелевина и соавт., 2005; Воробцова, Семенов, 2006; Михайлова, 2006; Неронова и соавт., 2008).

Принимая во внимание, что хромосомные аберрации являются чувствительным показателем радиационного воздействия на организм человека, а также, учитывая роль радиационного фактора в развитии соматической патологии, была проанализирована связь уровня заболеваемости с частотой хромосомных аберраций в лимфоцитах крови облученных лиц. В анализ включены две группы - сотрудники ВНИИЭФ г. Сарова и участники ликвидации последствий аварии на ЧАЭС, проходившие медицинское обследование в Российском научном центре рентгенорадиологии.

4.1 Анализ взаимосвязи цитогенетических повреждений и заболеваемости в группе профессионалов г. Сарова

Структура заболеваемости, классифицированная в соответствии с международной классификацией болезней - МКБ 10, проанализирована в группах, для которых проведен цитогенетический анализ, т.е. 108 человек основной группы и 49 человек контрольной группы. В группе профессионалов преобладала патология сердечно-сосудистой системы (67%), нервной системы и

органов чувств (63%), а также костно-мышечной системы и соединительной ткани (58%). Приблизительно у половины профессионалов выявлены заболевания желудочно-кишечного тракта, у трети - болезни органов дыхания.

Для анализа связи показателей заболеваемости с уровнем хромосомных повреждений в лимфоцитах периферической крови были выделены две группы -со значениями цитогенетических показателей выше («верхняя» группа) и ниже крайних квартилей («нижняя» группа). В качестве критериев выбраны два цитогенетических показателя - общая частота хромосомных аберраций и частота дицентриков и центрических колец. Каждая группа включала 27 человек. В «нижнюю» группу вошли профессионалы, у которых частота цитогенетических показателей не отличалась от контрольного уровня. «Верхняя» группа объединяла профессионалов, цитогенетические показатели которых достоверно превышают контрольные значения (рис. 16).

В "верхняя", ХА 0 "нижняя", ХА В "верхняя", диц.+ц.к. 0 "НИЖНЯЯ", ДИЦ.+Ц.К.

1,8

1,2

0,6

0 -г'

2 3 4

Классы заболеваний

Рис. 16. Структура заболеваемости в группах профессионалов г. Сарова, выделенных по критерию «общая частота хромосомных аберраций» (ХА) и «частота дицентриков и центрических колец» (диц. + ц.к.) 1 - сердечно-сосудистые заболевания; 2 - заболевания костно-мышечной системы и соединительной ткани; 3 - заболевания нервной системы и органов чувств; 4 - желудочно-кишечные заболевания; 5 - заболевания органов дыхания.

При сравнительном анализе установлено, что среднее количество диагностированных на момент цитогенетического обследования заболеваний сердечно-сосудистой системы и нервной системы выше в группах профессионалов с высоким уровнем общей частоты хромосомных аберраций и частоты дицентриков и центрических колец (р<0,05, точный критерий Фишера). При этом общее число профессионалов, страдающих сердечно-сосудистыми заболеваниями, практически не отличалось в сравниваемы группах.

В группе профессионалов с высоким уровнем хромосомных аберраций и, соответственно, с высокой частотой заболеваний нервной системы и органов чувств отмечено статистически значимое увеличение случаев заболеваний

катарактой. При этом большинство профессионалов, для которых был установлен диагноз «катаракта», имеют высокий уровень общей частоты хромосомных аберраций и клеток с дицентриками и центрическими кольцами. У одного профессионала катаракта является лучевой, возникшей в возрасте 33 лет после аварийного облучения в дозе 5100 мЗв. Важно отметить, что при анализе заболеваемости в контрольной группе не выявлено ни одного случая катаракты. Так как нет данных, подтверждающих радиационную природу катаракты у остальных профессионалов, можно только предполагать, что одной из причин повышенного уровня заболеваемости является радиационно-индуцированное ускорение процессов старения у лиц, подвергавшихся длительному воздействию ионизирующего излучения. Нельзя также отрицать и роль индивидуальной радиочувствительности в развитии данной патологии.

По остальным классам заболеваний статистически значимых различий между группами с разным уровнем хромосомных аберраций выявлено не было, за исключением патологии желудочно-кишечного тракта, которая чаще встречалась в группе обследованных профессионалов с низким уровнем дицентриков и центрических колец.

4.2. Анализ взаимосвязи цитогенетических повреждений и

заболеваемости в группе участников ликвидации аварии на Чернобыльской АЭС

Для анализа связи заболеваемости с уровнем хромосомных аберраций в лимфоцитах крови была сформирована группа ликвидаторов, участвовавших в восстановительных работах в Чернобыле в 1986 г. (324 человека). Установлено, что в этой группе преобладала патология сердечно-сосудистой системы (81,5%), нервной системы и органов чувств (95%), а также костно-мышечной системы и соединительной ткани (89,5%). Приблизительно у половины всех обследованных ликвидаторов выявлены болезни эндокринной системы (52%), у 44% - болезни органов дыхания. Анализ связи цитогенетических повреждений с заболеваемостью проведен по двум классам болезней - сердечно-сосудистые заболевания и заболевания нервной системы и органов чувств. Этот выбор обусловлен с одной стороны, имеющимися в настоящее время данными о наиболее частой патологии этих систем организма среди ликвидаторов, а с другой стороны, результатами, полученными при обследовании профессионалов г. Сарова. В качестве цитогенетических критериев были выбраны: общая частота хромосомных аберраций, частота дицентриков и центрических колец, частота ацентрических парных фрагментов и частота аберраций хроматидного типа.

Для определения возможной связи цитогенетических показателей с заболеваемостью применяли корреляционный анализ, который предполагал последовательное вычисление парных и частных коэффициентов корреляции, и регрессионный анализ.

Принимая во внимание значительное влияние возраста на уровень заболеваемости, группа ликвидаторов была ранжирована по этому признаку и разделена на 10 возрастных групп в диапазоне от 26 до 78 лет. Для каждой группы вычислялись значения средних частот хромосомных аберраций, среднее количество диагнозов на момент цитогенетического обследования и средний возраст. При парном сравнении двух варьирующих признаков (диагноз - возраст,

диагноз - хромосомные аберрации, хромосомные аберрации - возраст) получена статистически значимая корреляция сердечно-сосудистых заболеваний с частотой хромосомных аберраций (табл. 14). Связь заболеваний нервной системы с уровнем хромосомных нарушений также статистически значима, но носит отрицательный характер - наблюдается снижение заболеваемости при увеличении частоты хромосомных нарушений.

Реально существует статистически значимая связь сердечно-сосудистых заболеваний с возрастом. Коэффициент корреляции г=0,94 (р=0,01). Заболевания нервной системы, как показал анализ, не зависят от возраста, хотя и наблюдается тенденция к снижению уровня данной патологии с возрастом.

Было получено также, что общая частота хромосомных аберраций и частота дицентриков и центрических колец с возрастом растут (г=0,79 и г=0,84, соответственно, при р=0,01).

Таблица 14

Корреляция между заболеваемостью и частотой хромосомных аберраций в лимфоцитах крови ликвидаторов (парные коэффициенты корреляции)

Цигпогенетический показатель Парные коэффициенты корреляции, г

Сердечно-сосудистая система Нервная система и органы чувств

Все хромосомные аберрации 0,89 (р=0,01) - 0,64 (р=0,05)

Дицентрики+центрические кольца 0,90 (р=0,01) -0,48 (н.д.)

Ацентрические парные фрагменты 0,28 (н.д.) -0,70 (р=0,05)

Хроматидные аберрации 0,78 (р=0,01) -0,37 (н.д.)

Принимая во внимание, что корреляция между изучаемыми признаками может возникать в силу чисто случайных причин, связанных с малой выборкой, с некорректностью данных, либо когда один или оба признака зависят от третьего, данные результаты нельзя рассматривать как окончательные. Дальнейший анализ предполагал определение частных коэффициентов корреляции, которые характеризуют связь только двух признаков (хромосомные аберрации - заболеваемость), при условии постоянного значения третьего учитываемого признака (возраст), который находится в зависимости от первых двух. Значения частных коэффициентов корреляции представлены в таблице 15.

Таблица 15

Корреляция между заболеваемостью и частотой хромосомных аберраций в лимфоцитах крови ликвидаторов (частные коэффициенты корреляции)

Цитогенетический показатель Частные коэффициенты корреляции, г

Сердечнососудистая система Нервная система и органы чувств

Все хромосомные аберрации 0,70 (р=0,05) - 0,36 (н.д.)

Дицентрики+центрические кольца 0,65 (р=0,05) 0,03 (н.д.)

Ацентрические парныефрагменты - 0,03 (н.д.) -0,67 (н.д.)

Хроматидные аберрации 0,78 (р=0,01) 0,01 (н.д.)

Исходя из полученных значений частных коэффициентов корреляции, можно утверждать, что существует статистически значимая связь сердечнососудистых заболеваний с хромосомными аберрациями (общая частота хромосомных аберраций, частота дицентриков и центрических колец, частота хроматидных аберраций).

Статистический анализ позволил установить, что существует связь частоты сердечно-сосудистых заболеваний с возрастом - частный коэффициент корреляции г=0,85 (р=0,01). Связь между частотой хромосомных аберраций всех типов и возрастом при исключении влияния третьего признака - заболеваний сердечно-сосудистой и нервной системы, отсутствует.

Таким образом, частные коэффициенты корреляции подтвердили взаимосвязь уровня хромосомных аберраций в лимфоцитах периферической крови ликвидаторов с частотой сердечно-сосудистых заболеваний и отсутствие связи с частотой заболеваний нервной системы и органов чувств.

Для того, чтобы получить представление насколько в среднем может измениться один из признаков (в нашем случае это частота сердечно-сосудистых заболеваний) при изменении другого (частота хромосомных аберраций), связанного с ним, проведен анализ регрессионной зависимости и построена линейная регрессионная модель, имеющая следующий вид:

У = - 0,80 + (1,48±0,44) х X,

где У - показатель, характеризующий уровень заболеваемости сердечнососудистой системы (отн. ед.), X - частота хромосомных аберраций на 100 клеток. Уровень значимости коэффициента линейной регрессии р=0,02.

Естественно, что давать какую-либо количественную оценку на основании полученных данных представляется преждевременным, т.к. далеко не все факторы, влияющие на развитие сердечно-сосудистой патологии, были учтены при проведении анализа. Даже при установленной связи частоты хромосомных аберраций с уровнем заболеваемости еще остается невыясненным вопрос, какова доля участия анализируемого фактора среди прочих, в нашем случае, многочисленных факторов, систематически влияющих на состояние здоровья ликвидаторов. Однако полученные результаты, свидетельствующие о взаимосвязи уровня хромосомных нарушений с частотой сердечно-сосудистых заболеваний, имеют, несомненно, большое значение, т.к. позволяют обоснованно прогнозировать развитие постлучевой патологии и целенаправленно подходить к вопросу о выборе критериев для формирования групп риска относительно развития неопухолевой патологии среди лиц, подвергавшихся радиационному воздействию преимущественно в низких дозах.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Цитогенетическое обследование людей, подвергшихся радиационному воздействию при различных ситуациях, позволяет сделать следующее обобщение.

индикации ионизирующего излучения и оценки полученной дозы. В отдельных случаях по результатам цитогенетического анализа можно не только судить о дозе облучения, но и определять характер радиационного воздействия и вид ионизирующего излучения.

Корректная интерпретация результатов цитогенетического обследования облученных людей возможна только при наличии надежной информации о спонтанном уровне хромосомных аберраций, который зависит от места и условий проживания, а также влияния производственных и бытовых факторов генотоксического характера, с которыми человеку приходится сталкиваться на протяжении всей жизни.

Анализ нестабильных хромосомных аберраций позволяет провести количественную оценку радиационного воздействия только в ранние сроки после облучения. Однако даже при значительном периоде времени, прошедшем после облучения, в крови пострадавших людей наблюдается повышенная частота нестабильных хромосомных аберраций, в том числе маркеров радиационного воздействия - дицентриков и центрических колец, которая в ряде случаев коррелирует с уровнем дозовых нагрузок.

Достоверная ретроспективная оценка доз в случае аварийных и чрезвычайных ситуаций возможна только по частоте стабильных хромосомных аберраций - транслокаций. При этом очень важно учитывать характер радиационного воздействия, вид излучения, диапазон доз, а также возраст обследуемых.

В отличие от доз, полученных с помощью физических или расчетных методов дозиметрии, «биологическая» доза, оцененная по частоте хромосомных аберраций, является интегральным показателем повреждающего действия радиации, который учитывает индивидуальную радиочувствительность. Информация о «биологической» дозе позволяет более точно прогнозировать возможные последствия радиационного воздействия.

Установленная статистически значимая связь заболеваний сердечнососудистой и нервной системы с частотой нестабильных хромосомных аберраций в лимфоцитах крови облученных людей имеет, несомненно, большое значение для обоснованного применения результатов цитогенетического анализа при формировании групп риска развития неопухолевой патологии среди лиц, подвергшихся радиационному воздействию в результате аварийных и чрезвычайных ситуаций.

ВЫВОДЫ

1. В результате проведения масштабного цитогенетического обследования лиц, подвергшихся радиационному воздействию при различных ситуациях, убедительно продемонстрирована возможность применения цитогенетических показателей крови для количественной индикации облучения и прогноза его последствий для организма.

а) частота нестабильных хромосомных обменов у космонавтов, принимавших участие в полетах на станции "Мир" и МКС, зависит от длительности полета, величины накопленной дозы и продолжительности работы в открытом космосе;

б) у профессионалов г. Сарова через 40 и более лет после начала работы в радиационно-опасных условиях производства увеличенная частота аберраций хромосом, обусловленная воздействием гамма - и бета-излучения, коррелирует с величиной дозы излучения, накопленной за период работы;

в) в группе ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС частота нестабильных хромосомных обменов в лимфоцитах крови не связана с величиной дозы, официально зафиксированной в документах, а зависит от времени первого въезда в зону аварии и продолжительности выполнения восстановительных работ;

г) у жителей, подвергшихся облучению в результате радиационных аварий (жители Алтайского края и жителей с. Муслюмово Челябинской области) частота дицентриков и центрических колец в лимфоцитах периферической крови коррелирует с уровнем радиоактивного загрязнения и, соответственно, величиной накопленной эффективной дозы.

3. Исследованы зависимости "доза-эффект" для хромосомных аберраций в лимфоцитах крови человека после облучения in vitro гамма - и бета-излучением при разных режимах и получены калибровочные кривые для определения доз радиационного воздействия по частоте дицентриков и транслокаций. Установлено, что при ретроспективной оценке доз по частоте транслокаций в диапазоне до 2 Гр можно не вводить поправку на снижение частоты нестабильных клеток, содержащих транслокации.

4. На основании анализа частоты дицентриков и центрических колец в эксперименте in vitro определен коэффициент ОБЭ бета-излучения трития, максимальное значение которого составляет 2,2 при дозе 0,03 Гр, приближаясь к значению 1,2 при дозе 1 Гр.

5. Впервые при сравнительном анализе результатов цитогенетического обследования профессионалов г. Сарова и космонавтов установлена более высокая биологическая эффективность космического и бета-излучениий по сравнению с гамма-излучением в области малых доз. Коэффициент ОБЭ, рассчитанный по частоте транслокаций, для бета-излучения трития составляет 2,5, а для космического излучения - 1,9.

6. Количественная оценка степени радиационного воздействия, проведенная по частоте стабильных хромосомных аберраций в группах профессионалов, участников ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС и жителей загрязненных радионуклидами территорий продемонстрировала преимущество биологических методов дозиметрии в условиях аварийного облучения и при чрезвычайных ситуациях. Доза, оцененная непосредственно по реакции организма на радиационное воздействие, позволяет учесть такой важный фактор как индивидуальная радиочувствительность, что очень важно для прогноза возможных последствий облучения.

группе участников ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС установлена статистически значимая корреляция уровня цитогенетических показателей крови с частотой сердечно-сосудистых заболеваний. При этом не выявлено взаимосвязи нестабильных хромосомных аберраций в лимфоцитах крови с заболеваниями нервной системы и органов чувств.

Список публикаций по теме диссертации

Статьи в журналах из списка ВАК

1. Снигирева Г.П., Любченко П.Н., Шевченко В.А., Новицкая Н.Н., Борисова Н.М., Дубинина Е.В., Масленникова В.Г. Результаты цитогенетического обследования участников ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС через 5 лет. // Гематология и трансфузиология. -1994. -Т.39. - №3. - С. 19-21.

2. Хандогина Е.К., Агейкин В.А., Зверева С.В., Марченко Л.Ф., Мутовин Г.Р., Снигирева Г.П., Ленская Р.В., Буянкин В.М., Шахтарин В.В., Акифьев А.П. Цитогенетическое обследование различных групп детей, проживающих в районах Брянской области, загрязненных в результате Чернобыльской аварии. // Радиационная биология. Радиоэкология. - 1995. - Т.35. - Вып.5. -С.618-625.

3. Шевченко В.А., Снигирева Г.П., Сусков И.И., Акаева Е.А., Елисова Т.В., Иофа Э.Л., Нилова И.Н., Костина Л.Н., Новицкая Н.Н., Сидорова В.Ф., Хазинс Е.Д. Цитогенетические эффекты у населения Алтайского края, подвергшегося воздействию ионизирующих излучений в результате ядерных взрывов на Семипалатинском полигоне. // Радиационная биология. Радиоэкология. - 1995. - Т.35. - Вып.5,- С. 588-596.

4. Снигирева Г.П., Шевченко В.А., Новицкая Н.Н. Использование FISH метода для реконструкции поглощенных доз, полученных участниками ликвидации аварии на Чернобыльской АЭС. // Радиационная биология. Радиоэкология. 1995. - Т.35.- Вып.5. - С.654-661.

5. Snigiryova G., Braselmann Н., Salassidis К., Shevchenko V., Bauchinger М. Retrospective biodosimetry of Chernobyl clean-up workers using chromosome painting and conventional chromosome analysis. // International Journal of Radiation Biology. - 1997. - V.71.-N.2. - P. 119-127.

6. Bauchinger M., Salassidis K., Braselmann H., Vosilova A., Press S., Stephan G., Snigiryova G., Kozheurov V.P., Akleev A. FISH-based analysis of stable translocations in a Techa River population.// International Journal of Radiation Biology. - 1998. - V. 73. - N.6. - P. 605-612.

7. Salassidis K., Braselmann H., Okladnikova N.D., Pressl S., Stephan G., Snigiryova G., Baughinger M. Analysis of symmetrical translocations for retrospective biodosimetry in radiation workers of the Mayak nuclear-industrial complex (Southern Urals) using FISH-chromocome painting. // International Journal of Radiation Biology. - 1998. - V.74. - N.4. - P.431-439.

8. Федоренко B.C., Ворожцова C.B., Герасименко B.H., Дружинин C.B., Юдаева Л.А., Снигирева Г.П., Шевченко В.А. Цитогенетические нарушения в клетках экспериментальных животных и человека при действии ускоренных

заряженных частиц и космического излучения. // Физика элементарных частиц и атомного ядра. - 1999. -Т.30. - Вып.2. - С.469-526.

9. Новицкая Н.Н., Снигирева Г.П., Хазинс Е.Д., Шевченко В.А. Результаты цитогенетического обследования участников ликвидации последствий аварии на ЧАЭС. // Медицина труда и промышленная экология. - 2000. - №8.

- С.16-20.

10. Федоренко Б.С., Шевченко В.А., Снигирева Г.П., Дружинин С.В., Репина JI.A., Новицкая Н.Н., Акатов Ю.А. Цитогенетические исследования лимфоцитов крови космонавтов после длительных полетов. // Радиационная биология Радиоэкология. - 2000. - Т.40. - №5. - С.596-602.

11. Любченко П.Н., Снигирева ГЛ., Широкова Е.Б. Некоторые клинико-цитогенетические сопоставления у ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС в отдаленном периоде. // Медицинская радиология и радиационная безопасность. - 2001. - Т.46. - №3.- С. 17-21.

12. Fedorenko В., Druzhinin S., Yudaev L., Petrov V., Akatov Yu., Snigiryova G., Novitskaya N., Shevchenko V., Rubanovich A. Cytogenetic studies of blood lymphocytes from cosmonauts after long-term space flights on Mir station. // Advances in Space Research. - 2001. - V.27. - N.2.- P.355-359.

13. Bauchinger M., Braselmann H., Savage J. R., Natarajan А. Т., Terzoudi G. I., Pantelias G. E„ Darroud F„ Figgitt M., Griffin C. S., Knehr S., Okladnikova N. D., Santos S. and Snigiryova G. Collaborative exercise on the use of FISH chromosome painting for retrospective biodosimetry of Mayak nuclear-industrial personnel. // International Journal of Radiation Biology. - 2001. - V.77. - N3. -P.259-267.

14. Fedorenko B.S., Druzhinin S.V., Snigiryova G.P., Shevchenko V.A., Novitskaya N.N., Bogomazova A.N., Rubanovich A.V. Radiation-induced chromosomal aberrations in cosmonauts' blood lymphocytes. // Microgravity and Space Station Utilization. - 2002. - V.3. - N.2. - P. 5-9.

15. Федоренко Б.С., Воронков Ю.И., Снигирева Г.П., Шевченко В.А., Дружинин С.В., Акатов Ю.А., Цетлин В.В. Изучение влияния факторов космического полета на здоровье космонавтов в ближайшие и отдаленные сроки после космических полетов. // Радиационная биология. Радиоэкология.

- 2002. - Т. 42. № 6. - С.765-768.

16. Greco О., Durante М., Gialanella G., Grossi G., Pugliese M., Scampoli P., Snigiryova G., Obe G.. Biological dosimetry in Russian and Italian astronauts. // Advances in Space Research. - 2003. - V. 31. - N. 6. - P. 1495-1503.

17. Durante M., Snigiryova G., Akaeva E., Bogomazova A., Druzhinin S., Fedorenko В., Greco O., Novitskaya N., Rubanovich A., Shevchenko V., Recklinhausen U. von and Obe G.. Chromosome aberration dosimetry in cosmonauts after single or multiple space flights. // Cytogenetic Genome Research. - 2003. - V.103.- P.40-46.

18. Шевченко B.A., Снигирева Г.П. Значимость цитогенетического обследования для оценки последствий Чернобыльской катастрофы. // Радиационная биология. Радиоэкология. - 2006. - Т.46.- №2. - С.133-139.

19. Рубанович А.В., Снигирева Г.П., Шевченко В.А. Теория и практика построения калибровочных кривых в биодозиметрии. // Радиационная биология. Радиоэкология. - 2006. - Т.46. - №4. - С.447-456.

20. Шевченко В.А., Снигирева Г.П. Значимость цитогенетического обследования для оценки последствий Чернобыльской катастрофы. // Альманах клинической медицины, 2006. - Т.10. - С. 165-176.

21. Шайхаев Г.О., Кузьмина Н.С., Мязин А.Е., Панушкина О.Г., Рубанович A.B., Хаймович Т.И., Снигирева Г.П. Изучение частоты мутаций в мини - и микросателлитных локусах ДНК в семьях работников атомной промышленности, работавших с тритием и его окисью. // Радиационная биология. Радиоэкология. - 2008. -Т.48. - №6. - С.690-697.

22. Федоренко Б.С., Снигирева Г.П., Богомазова А.Н., Новицкая H.H., Шевченко В.А. Цитогенетическое эффекты малых доз космического излучения в лимфоцитах космонавтов. // Авиакосмическая и экологическая медицина. - 2008. - Т.42. - №3. - С.13-17.

23. Снигирева Г.П., Богомазова А.Н., Новицкая H.H., Хазинс Е.Д. Результаты многолетнего цитогенетического наблюдения за участниками ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС. // Медицинская радиология и радиационная безопасность. - 2008. - №4. - С.38-45.

24. Рожкова Н.И., Меских Е.В., Снигирева Г.П., Пуртова Г.С., Шерстнева Т.В. Радиологические и цитогенетические технологии в оценке состояния молочной железы у женщин, проживающих в экологически неблагоприятных районах. // Вестник PAP. - 2009. - №1. - С.51-53.

25. Асеева Е.А. , Снигирева Г.П., Неверова АЛ., Новицкая H.H., Хазинс Е.Д., Домрачева Е.В. Клетки с множественными хромосомными нарушениями в группах лиц, подвергшихся облучению при различных ситуациях, и их возможная биологическая роль. // Радиационная биология. Радиоэкология. -2009. - т.49. - №5. - С.552-562.

Статьи в журналах и сборниках

1. Снигирева Г.П., Любченко П.Н., Шевченко В.А., Новицкая H.H., Борисова Н.М., Дубинина Е.В., Масленникова В.Г. Результаты обследования участников ликвидации последствий аварии на ЧАЭС спустя 5 лет. // Медицина труда и промэкология. - 1993. -№11-12. - С. 34-36.

2. Шевченко В.А., Платонов Е.С., Снигирева Г.П. Генетические последствия Чернобыльской аварии. // Чернобыльская авария. - Минск: «Тест», 1993,- 2.-С.85-137.

3. Шевченко В.А., Сусков И.И., Снигирева Г.П., Елисова Т.В., Семов А.Б.. Генетический статус населения, подвергшегося воздействию ядерных испытаний. // Вестник научной программы «Семипалатинский полигон -Алтай» - 1994. - №3. - С.2-33.

4. Шевченко В.А., Снигирева Г.П. Цитогенетические последствия воздействия ионизирующих излучений на популяции человека. // Последствия Чернобыльской катастрофы. /Под ред. Е.Б.Бурлаковой. - М: Центр экологической политики России. Научный совет по радиобиологии РАН, 1996. - С.24-49.

5. Шевченко В.А, Снигирева Г.П. О возможности реконструкции поглощенных доз с использованием FISH-метода у жителей Алтайского края, пострадавших от ядерных взрывов на Семипалатинском полигоне. //

Вестник научной программы «Семипалатинский полигон - Алтай»,- 1996.-№1(9).- С.40-49.

6. Shevchenko V., Snigiryova G. Cytogenetic effects of the action of ionizing radiations on human populations. // Report of the 1995. Research Grant from the Toyota Foundation. - Kyoto University, December 1996. - P.27-40.

7. Шевченко B.A., Снигирева Г.П. Использование цитогенетических методов для оценки поглощенной дозы. // Проблемы биохимии, радиационной и и космической биологии. Труды Международного Симпозиума. - Дубна, 1997.

- С.57-93.

8. Shevchenko V., Snigiryova G. Biological dosimetry in contaminated areas: Semipalatinsk nuclear test site, Techa river, Three Mile Island. // Radiation Exposure by Nuclear Facilities, Evidence of the Impact on Health. International workshop. Germany society for radiation protection. / Munster, Bremen. - 1996. -P.216-226.

9. Shevchenko V., Snigiryova G. Applicability of translocation in chromosomes of lymphocytes for retrospective assessment of absorbed doses (FISH-method). // International workshop. Germany society for radiation protection. / Munster, Bremen. - 1996. - P.329-331.

10. Новицкая H.H., Снигирева Г.П., Хазинс Е.Д., Шевченко В.А. Результаты цитогенетического обследования участников ликвидации аварии на Чернобыльской АЭС. // Материалы научно-практической конференции «Результаты и задачи медицинского наблюдения за состоянием здоровья участников ликвидации последствий катастрофы на Чернобыльской АЭС в отдаленном периоде». - М., 1998. - С.80-89.

11. Shevchenko V., Snigiryova G. Cytogenetic effects of the action of ionizing radiations on human populations. // Report of an International Collaborative Work under the Research Grant of the Toyota Foundation in 1995-1997. - Kyoto University, March 1998,- P.203-215.

12. Shevchenko V., Snigiryova G., Rubanovich A. Estimation of absorbed doses on the basis of cytogenetic methods.// Report of an International Collaborative Work under the Research Grant of the Toyota Foundation in 1995-1997. - Kyoto University, March 1998. - P.216-222.

13. Попова Г.М., Дружинин Ю.О., Снигирева Г.П. Технологические средства автоматизации цитогенетического мониторинга. // Труды Четвертой Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Новое в экологии и безопасности жизнедеятельности». - С.-П., 1999. - Т.2. - С.219-222.

14. Shevchenko V.A., Snigiryova G.P. Cytogenetic effects of the action of ionizing radiation on human populations. // Consequences of the Chernobyl catastrophe on human health. / E.B. Burlakova Editor. - New York: Nova Science Publishers, Inc., 1999.- P.39-64.

15. Федоренко B.C., Снигирева Г.П., Шевченко B.A., Дружинин С.В., Новицкая Н.Н. Влияние эмоционального стресса на частоту спонтанных аберраций хромосом в культуре лимфоцитов крови человека. // Сб. «Основные результаты исследований психофизиологического состояния операторов в эксперименте с длительной изоляцией в гермообъекте». - М.: «Слово», 2000.

- С.87-88.

16. Gorbunova I.N., Ivanov K.Yu., Nagiba V.I., Nikanorova E.A., Profe O.S., Khaimovoch T.I., Akayeva E.A., Yelisova T.V., Iofa E.L., Nilova I.N., Kostina L.N., Rubanovich A.V., Shevchenko V.A., Bogomazova A.N., Vilkyina G.A., Novitskaya N.N., Kharchenko V.P., Khazins E.D., Snigiryova G.P. Reconstruction of absorbed dose by the frequency of stable and unstable chromosome aberrations in nuclear specialists at distant periods after exposure. // Proceedings of IV ISTC scientific advisory committee seminar on «Basic science in ISTC activities». - Novosibirsk, 2001. - P. 370-377.

17. Федоренко Б.С., Снигирева Г.П., Шевченко В.А., Дружинин С.В., Новицкая Н.Н., Богомазова А.Н. Влияние психологического стресса на частоту аберраций хромосом в лимфоцитах периферической крови человека. // Сб. «Модельный эксперимент с длительной изоляцией: проблемы и достижения». - М.: «Слово», 2001. - С.525-530.

18. Fedorenko B.S., Voronkov Yu.I., Snigiryova G.P., Shevchenko V.A., Druzhinin S.V., Tsetlin V.V. Influence of space flight factors on cosmonauts' health in short- and long-term periods after space flights. // Proceedings of International Conference «Genetic Consequences of Emergency Radiation Situations». -Moscow, 2002.-P. 302-312.

19. Snigiryova G.P., Bogomazova A.N., Novitskaya N.N., Khazins E.D., Vilkyina G.A., Gorbunova I.N., Ivanov K.Yu., Nagiba V.I., Nikanorova E.A., Profe O.S., Khaimovoch T.I., Akayeva E.A., Yelisova T.V., Iofa E.L., Nilova I.N., Kostina L.N., Rubanovich A.V., Shevchenko V.A. The study of cytogenetic effects in the nuclear specialists of Sarov. // Proceedings of International Conference «Genetic Consequences of Emergency Radiation Situations». - Moscow, 2002. - P. 313-328.

20. Snigiryova G., Shevchenko V. Analysis of chromosome aberrations in human lymphocytes after accidental exposure to ionizing radiation. // Recent research activities about the Chernobyl NPP accident in Belarus, Ukraine and Russia. / Ed. by Imanaka T. - Research Reactor Institute, Kyoto University, 2002. - P. 256-267.

21. Горбунова И.Н., Иванов К.Ю., Нагиба B.H., Никанорова Е.А., Профе О.С., Хаймович Т.И., Акаева ЭЛ., Елисова Т.В., Иофа Э.Л., Нилова И.Н., Костина Л.Н., Рубанович А.В.. Шевченко В.А., Богомазова А.Н., Вилкина Г.А., Новицкая Н.Н., Хазинс Е.Д., Сиигирева Г.П. Реконструкция поглощенных доз у профессионалов-атомщиков в отдаленные сроки после облучения с помощью цитогенетических методов. // Сб. «Охрана природы и экологическая безопасность на предприятиях Минатома России». - М., 2002. - С.225-233.

22. Snigiryova G.P., Shevchenko V.A. The use of cytogenetic methods in examining people exposed to ionizing radiation. // Proceedings of International Conference «Unification and optimization of radiation monitoring on NPP location regions» /Armenia, Yerevan, September 22-26. - 2004. - P.234-242.

23. Федоренко Б.С., Снигирева Г.П., Новицкая H.H., Богомазова A.H., Шевченко В.А., Дружинин С.В. Изучение частоты хромосомных аберраций в культуре лимфоцитов крови человека при психоэмоциональном стрессе. // Сб. научных трудов под редакцией чл.кор. РАН и РАМН И.Б.Ушакова. - М., 2004. - С.54-55.

24. Shevchenko V.A., Snigiryova G.P., and Fedorenko B.S. Cytogenetic effects in human beings exposed to irradiation on the Earth and in space. // In: «The

Chernobyl Nuclear Disaster». / Edited by E.Burlakova and V.Naidich. - Boston, 2004. - P. 30-49.

25. Холодова Н.Б., Зубовский ГЛ., Снигирева Г.П. Состояние соматического здоровья и цитогенетические изменения у пациентов в отдаленные сроки после облучения малыми дозами (участники ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС в 1986-1987 гг.). // Труды III научно-практической региональной конференции «Состояние здоровья ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС в отдаленном периоде». - М., 2004.- С.176-182.

26. Shevchenko V.A., Snigiryova G.P. The significance of cytogenetic examination for assessment of the Chernobyl catastrophe consequences. // 20 Years After the Chernobyl Accident: Past, Present and Future. / E.Burlakova and V.Naidich Editors. New York: Nova Science Publishers, Inc., 2006. - P.l-10.

27. Snigiryova G.P., Shevchenko V.A. Chromosome aberrations in the blood lymphocytes of people exposed as a result of the Chernobyl accident. // ECRR Chernobyl: 20 Years On. Health effects of the Chernobyl accident. European Committee on Radiation Risk. Documents of ECRR, N 1. / Edited by C.Busby, A. Yablokov. / European Committee on Radiation Risk. - 2006.- P.95-103.

28. Снигирева Г.П., Богомазова A.H., Новицкая A.H., Хазинс Е.Д. Многолетний цитогенетический мониторинг участников ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС. // Материалы Международной научно-практической конференции «Чернобыльские чтения-2008». - Гомель: «Сож», 2008. -С.269-273.

29. Снигирева Г.П., Богомазова А.Н., Новицкая Н.Н., Федоренко Б.С., Хазинс Е.Д. Опыт применения цитогенетического метода в радиационных исследованиях. // Вестник Российской военно-медицинской академии. -2008. Приложение 1. - №3(23). - С. 184-185.

Методические указания и рекомендации

1. Снигирева Г.П., Богомазова А.Н., Хазинс Е.Д., Методические указания № 99/134 «Организация цитогенетического обследования лиц, пострадавших в результате радиационных аварий». - М., 1999. - 33 с.

2. Снигирева Г.П., Богомазова А.Н., Хазинс Е.Д., Домрачева Е.В., Рубанович А.В. Методические рекомендации "Цитогенетические исследования участников ликвидации последствий радиационных аварий".-М., 2001.- 15 с.

3. Снигирева Г.П., Богомазова А.Н., Новицкая Н.Н., Хазинс Е.Д., Шевченко В.А., Ануфрикова Е. Методы оценки клеточной радиочувствительности в лучевой терапии. // Пособие для врачей. - М., 2002. - 18 с.

4. Снигирева Г.П., Хаймович Т.И., Шевченко В.А. Использование цитогенетических методов для биологической дозиметрии. Методические рекомендации. - Саров, 2003. - 46 с.

5. Снигирева Г.П., Богомазова А.Н., Новицкая Н.Н., Хазинс Е.Д., Рубанович А.В. «Биологическая индикация радиационного воздействия на организм человека с использованием цитогенетических методов». Медицинская технология. Регистрационное удостоверение №ФС-2007/015-У. - М., 2007. -29 с.

Автор выражает искреннюю благодарность и глубокую признательность за помощь и ценные советы академику РАМН проф. В.П. Харченко, проф. Б.С. Федоренко, проф. И.Е. Воробцовой, проф. И.И. Пелевиной, проф. A.B. Яблокову, д.б.н. A.B. Рубановичу, д.б.н. Е.К.Хандогиной, к.ф-м.п. Г.М. Поповой, к.б.н. Т.П. Хаймович, к.б.н. А.Н. Богомазовой, к.б.н. В.И. Нагибе, к.б.н. ЭААкаевой, к.б.и. Т.В. Елисовой, к.6.н. Л.Н.Костиной, ЭЛ. Иофа и И.Н. Ниловой.

Особую благодарность за помощь в осуществлении этой работы и поддержку выражаю моим ближайшим коллегам H.H. Новицкой, Е.Д. Хазинс и М.В. Захаренко.

Подписана к печати i6.44.OS Тираж 400 Заказ 470.

Отпечатано в отделе оперативкой печати физического факультета МГУ

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Снигирева, Галина Петровна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Цитогенетические изменения в лимфоцитах крови человека при радиационном воздействии и их применение для оценки последствий облучения.

1.2. Классический цитогенетический метод - анализ нестабильных хромосомных аберраций в лимфоцитах крови.

1.3. FISH метод — анализ стабильных хромосомных аберраций в лимфоцитах крови.

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Характеристика групп обследования.

2.2. Методы исследования.

2.2.1. Методика проведения цитогенетического анализа.

2.2.2. Статистическая обработка результатов исследования.

ГЛАВА 3. СПОНТАННЫЙ УРОВЕНЬ ХРОМОСОМНЫХ ПОВРЕЖДЕНИЙ В ЛИМФОЦИТАХ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА.

3.1. Нестабильные хромосомные аберрации.

3.2. Стабильные хромосомные аберрации.

ГЛАВА 4. ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ПОВРЕЖДЕНИЯ В ЛИМФОЦИТАХ

КРОВИ ЛИЦ, ПОДВЕРГШИХСЯ РАДИАЦИОННОМУ ВОЗДЕЙСТВИЮ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ СИТУАЦИЯХ.

4.1. Профессиональное облучение.

4.1.1. Космонавты, принимавшие участие в полетах на станции «Мир» и МКС.

4.1.2. Профессионалы ВНИИЭФ г. Сарова.

4.2. Население, подвергшееся радиационному воздействию в результате аварийных и чрезвычайных ситуаций и проживающее на территориях, загрязненных радионуклидами.

4.2.1. Жители Алтайского края и Казахстана, подвергшиеся облучению в результате ядерных взрывов на Семипалатинском полигоне. 100 4.2.1.1. Жители Алтайского края.

4.2.1.2. Жители Казахстана.

4.2.2. Жители Муслюмово, расположенного на берегах реки Теча в Челябинской области.

4.2.3. Жители Брянской области, проживающие на территории, загрязненной радионуклидами в результате аварии на Чернобыльской АЭС.

4.2.4. Население, проживающее в окрестностях атомной электростанции Три Майл Айленд (США).

4.3. Цитогенетическое обследование участников ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС.

ГЛАВА 5. ПРИМЕНЕНИЕ ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КРОВИ ДЛЯ БИОЛОГИЧЕСКОЙ ИНДИКАЦИИ

И ДОЗИМЕТРИИ ИОНИЗИРУЮЩЕГО ИЗЛУЧЕНИЯ.

5.1. Анализ зависимостей «доза-эффект» при воздействии гамма - и "бета-излучения и построение калибровочных кривых для частоты дицентриков и транслокаций.

5.1.1. Анализ зависимости «доза-эффект» и построение калибровочных кривых для частоты дицентриков и транслокаций при воздействии гамма излучения.

5.1.1.1. Дозовые зависимости для частоты нестабильных хромосомных аберраций.

5.1.1.2. Оценка уровня облучения по частоте дицентриков в лимфоцитах периферической крови.

5.1.1.3. Дозовые зависимости стабильных хромосомных аберраций и оценка уровня облучения по частоте транслокаций в лимфоцитах периферической крови.

5.1.1.4. Дозовая зависимость для частоты дицентриков, полученная с помощью FISH метода.

5.1.2. Зависимость «доза-эффект» и построение калибровочных кривых для частоты дицентриков при радиационном воздействии бета-излучением оксида трития.

5.2. Относительная биологическая эффективность излучений разного качества.

5.2.1.Оценка относительной биологической эффективности бета-излучения оксида трития in vitro.

5.2.2. Оценка относительной биологической эффективности бета-излучения оксида трития и космического излучения in vivo.

5.3. Реконструкция доз ионизирующего излучения по частоте хромосомных аберраций в лимфоцитах периферической крови (биологическая дозиметрия).

5.3.1. Биологическая оценка доз ионизирующего излучения у космонавтов.

5.3.2. Биологическая оценка доз у профессионалов г. Сарова.

5.3.3. Биологическая оценка доз у участников ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС.

5.3.4. Биологическая оценка доз у населения, проживающего на территориях, загрязненных радионуклидами вследствие радиационных аварий.

ГЛАВА 6. ПРИМЕНЕНИЕ ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ

КРОВИ ДЛЯ ПРОГНОЗА ПОСЛЕДСТВИЙ ОБЛУЧЕНИЯ.2Ю

6.1. Анализ взаимосвязи цитогенетических повреждений и заболеваемости в группе профессионалов г. Сарова.

6.2. Анализ взаимосвязи цитогенетических повреждений и заболеваемости в группе участников ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС

Введение Диссертация по биологии, на тему "Последствия воздействий ионизирующих излучений: цитогенетические изменения в лимфоцитах крови человека"

Актуальность исследования

Человеку приходится сталкиваться с источниками ионизирующего излучения при самых разных обстоятельствах. Наряду с медицинским облучением населения в диагностических и терапевтических целях, использование радиоактивных источников в различных областях науки, промышленности и медицины не исключает возможности профессионального облучения специалистов. В условиях постоянного повышенного радиационного фона работают космонавты, которые совершают длительные полеты на околоземной орбите.

Применение ядерных технологий с использованием источников ионизирующего излучения в военных и мирных целях могут создавать опасность радиационных аварий, когда в результате радиоактивного загрязнения местности облучению могут подвергаться многочисленные группы людей, а внештатные ситуации на предприятиях атомного комплекса могут приводить к переоблучению персонала. Примерами таких ситуаций являются аварии на ядерном реакторе в Селлафилде в Англии в 1957 г., на производственном объединении «Маяк» на Урале в 1957 г., на атомной станции Три Майл Ай-ленд в США в 1979 г. и Чернобыльской атомной станции в 1986 г.

АЭС. В таких случаях особое значение приобретают биологические маркеры радиационного воздействия. На сегодняшний день общепризнанно, что наиболее информативными и чувствительными (наряду с ЭПР-спектроскопией эмали зубов) являются цитогенетические показатели, а именно хромосомные аберрации в лимфоцитах периферической крови (Дубинина, 1977; Севанька-ев, Насонов, 1979; Пяткин, Нугис, 1981, 1989; Bender et ab, 1988; Tawn, Whi-tehouse, 2003; Terzoudi, Pantelias, 2006; Simon et al., 2007; Obe, 2007).

Принципы цитогенетического метода индикации радиационного воздействия достаточно убедительно обоснованы во многих отечественных и зарубежных исследованиях, результаты которых послужили основой для выработки рекомендаций ВОЗ, МАГАТЭ и НКДАР ООН по практическому использованию анализа хромосомных аберраций в лимфоцитах крови в качестве тест-системы для количественной оценки действия мутагенных факторов радиационной природы (WHO, 1976; IAEA, 1986, 2001; UNSCEAR, 1986, 1988, 2000). Информация о «биологической» дозе, полученная с помощью цитогенетических методов, шире, чем ее физическое значение, т.к. она отражает не только результат радиационного воздействия на организм человека, но и его индивидуальную радиочувствительность, что позволяет более корректно прогнозировать ранние и отдаленные последствия облучения.

В настоящее время в большинстве случаев, при которых люди подвергаются воздействию радиации, как от естественных, так и от техногенных источников, речь идет об облучении в небольших дозах. Поэтому главную озабоченность вызывают последствия радиационного воздействия в малых дозах, особенности биологических эффектов которых до сих пор являются предметом активных дискуссий (Воробцова, 1974, 1991, 2006; Кузин, 1977, 1991, 1995; Шевченко, Померанцева, 1985; Спитковский, 1992; Бурлакова, 1994; Пелевина и соавт., 1996, 2003; Upton, 2001; Bonner, 2003; Morgan, 2003; Preston, 2003; Булдаков, Калистратова, 2003, 2005; Enns et al., 2004; Mothersill, Seymour, 2004; Москалев, Зайнуллин, 2004 и др.). При этом количественная оценка величин малых доз и возможных клинических последствий их действия остаются проблемами, сталкивающимися с серьезными научными и методическими трудностями. В связи с этим одной из актуальных задач радиационной биологии является разработка чувствительных критериев, с помощью которых можно объективно судить об опасности воздействия радиации, особенно в малых дозах, на организм человека. Естественно, что эта задача может быть успешно решена только на основе данных цитогене-тического мониторинга людей, подвергшихся облучению при различных аварийных и чрезвычайных ситуациях.

Цель и задачи исследования

Поставленная цель потребовала решения следующих задач:

• у жителей загрязненных радионуклидами территорий;

• у участников ликвидации последствий аварии на Чернобыльской

АЭС;

Положения, выносимые на защиту:

Заключение Диссертация по теме "Радиобиология", Снигирева, Галина Петровна

ВЫВОДЫ

1. В результате проведения масштабного цитогенетического обследования лиц, подвергшихся радиационному воздействию при различных ситуациях, убедительно продемонстрирована возможность применения цитоге-нетических показателей крови для количественной индикации облучения и прогноза его последствий для организма.

2. Показано статистически значимое увеличение частоты стабильных и нестабильных хромосомных аберраций в лимфоцитах периферической крови облученных людей независимо от времени, прошедшего после радиационного воздействия. При этом установлено, что: а) частота нестабильных хромосомных обменов у космонавтов, принимавших участие в полетах на станции "Мир" и МКС, зависит от длительности полета, величины накопленной дозы и продолжительности работы в открытом космосе; б) у профессионалов г. Сарова через 40 и более лет после начала работы в радиационно-опасных условиях производства увеличенная частота аберраций хромосом, обусловленная воздействием гамма - и бета-излучения, коррелирует с величиной дозы излучения, накопленной за период работы; в) в группе ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС частота нестабильных хромосомных обменов в лимфоцитах крови не связана с величиной дозы, официально зафиксированной в документах, а зависит от времени первого въезда в зону аварии и продолжительности выполнения восстановительных работ; г) у жителей, подвергшихся облучению в результате радиационных аварий (жители Алтайского края и жителей с. Муслюмово Челябинской области) частота дицентриков и центрических колец в лимфоцитах периферической крови коррелирует с уровнем радиоактивного загрязнения и, соответственно, величиной накопленной эффективной дозы.

5. Впервые при сравнительном анализе результатов цитогенетиче-ского обследования профессионалов г. Сарова и космонавтов установлена более высокая биологическая эффективность космического и бета-излучениий по сравнению с гамма-излучением в области малых доз. Коэффициент ОБЭ, рассчитанный по частоте транслокаций, для бета-излучения трития составляет 2,5, а для космического излучения — 1,9.

7. Установлена связь уровня нестабильных хромосомных аберраций в лимфоцитах крови с частотой заболеваний сердечно-сосудистой и нервной системы у профессионалов г. Сарова, отмечено их статистически значимое увеличение в группах с высоким уровнем цитогенетических повреждений. В группе участников ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС установлена статистически значимая корреляция уровня цитогенетических показателей крови с частотой сердечно-сосудистых заболеваний. При этом не выявлено взаимосвязи нестабильных хромосомных аберраций в лимфоцитах крови с заболеваниями нервной системы и органов чувств.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Цитогенетические повреждения в лимфоцитах периферической крови являются объективным, высокочувствительным критерием степени радиационного воздействия в раннем и отдаленном периодах после низкоуровневого облучения и могут успешно использоваться для биологической индикации ионизирующего излучения и оценки полученной дозы. В отдельных случаях по результатам цитогенетического анализа можно не только судить о дозе облучения, но и определять характер радиационного воздействия и вид ионизирующего излучения.

Достоверная ретроспективная оценка доз в случае аварийных и чрезвычайных ситуаций возможна только по частоте стабильных хромосомных аберраций — транслокаций. При этом очень важно учитывать характер радиационного воздействия, вид излучения, диапазон доз, а также возраст обследуемых.

В отличие от доз, полученных с помощью физических или расчетных методов дозиметрии «биологическая» доза, оцененная по частоте хромосомных аберраций, является интегральным показателем повреждающего действия радиации, который учитывает индивидуальную радиочувствительность. Информация о «биологической» дозе позволяет более точно прогнозировать возможные последствия радиационного воздействия.

Установленная достоверная связь заболеваний сердечно-сосудистой и нервной системы с частотой нестабильных хромосомных аберраций в лимфоцитах крови облученных людей имеет, несомненно, большое значение для обоснованного применения результатов цитогенетического анализа при формировании групп риска относительно развития неопухолевой патологии среди лиц, подвергшихся радиационному воздействию в результате аварийных и чрезвычайных ситуаций.

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Снигирева, Галина Петровна, Москва

1. Алексанин С.С. Патогенетические закономерности формирования соматической патологии после радиационных аварий в отдаленном периоде // Вестник Российской Военно-Медицинской Академии. 2008. -№3 (23). - С.10-13.

2. Бебешко В.Г., Базыка Д.А., Логановский К.Н. Биологические маркеры ионизирующего излучения // Украшьский медичний часопис. 2004. — Т.39. - №1. - С.85-104.

3. Беловодский Л.Ф., Гаевой В.К., Гришмановский В.И. / Тритий. Москва: Энергоатомиздат, 1985.

4. Березина И.Г., Чечеткин В.А., Хотулева М.В. и др. Радиоактивное загрязнение биологических объектов и природных сред в районе пос. Муслюмово (Челябинская обл.) // Радиационная биология. Радиоэкология. 1993. - Т.ЗЗ. - вып.2(5). - С.748-958.

5. Бондаренко В.А. Оценка радиационных нагрузок на космонавтов МКС с использованием геометрической модели тела человека: Автореф. дис. канд. тех. наук: 05.26.02 / ФГУ ИМБП РАН. Москва, 2007. - 26с.

6. Бочков Н.П. Хромосомы человека и облучение. / Бочков Н.П. Москва: Атомиздат, 1971. - 168с.

7. Бочков Н.П., Кулешов Н.П., Журков B.C. Анализ спонтанных хромосомных аберраций в культуре лейкоцитов человека // Цитология. — 1972.-Т. 14. №10. -С.1267-1273.

8. Бочков Н.П., Катосова Л.Д. Генетический мониторинг популяций человека при реальных химических и радиационных нагрузках // Вестник РАМН. 1992. - №4. - С. 10-14.

9. Бочков Н.П., Катосова Л.Д., Новиков В.П. и др. Цитогенетическое обследование детей, проживающих в зонах с различной степенью радиоактивного загрязнения // Медицинская радиология. 1994. - №5. -С.35-38.

10. Бочков Н.П., Попова H.A., Катосова Л.Д. и др. Необычайно высокий уровень хромосомной изменчивости в культуре лимфоцитов периферической крови человека // Генетика. 1999. - Т.35. - №5. - С.735-742.

11. Бочков Н.П., Чеботарев А.Н., Катосова Л.Д., Платонова В.И. База данных для анализа количественных характеристик частоты хромосомных аберраций в культуре лимфоцитов периферической крови человека // Генетика. 2001. - Т.37. - №4. - С.549-557.

12. Булатов В.И. Россия радиоактивная. / Новосибирск: ЦЭРИС, 1996. -272с.

13. Бурлакова Е.Б. Эффект сверхмалых доз // Вестник РАН. — 1994. — Т. 64. №5. - С. 425.

14. Булдаков JI.A., Калистратова B.C. Радиоактивное излучение и здоровье. / Москва: Информ-атом, 2003. 165с.

15. Булдаков JI.A., Калистратова B.C. Радиационное воздействие на организм. Положительные эффекты. / Москва: Информ-атом, 2005. 246с.

16. Василенко И.Я., Булдаков JI.A. Радионуклидное загрязнение окружающей среды и здоровье населения. / Москва: Медицина, 2004. — 400с.

17. Волков А.Н., Дружинин В.Г. Многолетняя динамика цитогенетических нарушений у подростков из крупного промышленного города. // Генетика. -2001. Т.37. - №9. - С. 1296-1299.

18. Воробцова И.Е. Особенности потомков облученных биологических объектов // Медицинская радиология. 1974. - № 11. - С. 76-83.

19. Воробцова И.Е. Соматические и генетические последствия действия радиации. // // Радиационная биология. Радиоэкология. 1991. - Т.31. -№4. - С.568-570.

20. Воробцова И.Е., Богомазова А.Н. Стабильные хромосомные аберрации в лимфоцитах периферической крови лиц, пострадавших в результате аварии на ЧАЭС // Радиационная биология. Радиоэкология. — 1995. — Т.35. №5. - С.636-639.

21. Воробцова И.Е., Михельсон В.М., Воробьева М.В. и др. Результаты ци-тогенетического обследования ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС, проведенного в разные года //Радиационная биология. Радиоэкология. 1994. - Т.34. - №6. - С.798-803.

22. Воробцова И.Е., Такер Дж.Д., Тимофеева Н.М. и др. Влияние возраста и облучения на частоту транслокаций и дицентриков, определяемых методом FISH, в лимфоцитах человека // Радиационная биология. Радиоэкология. 2000. - Т.40. - №2. - С.142-148.

23. Воробцова И.Е. Трансгенерационная передача радиационно-индуцированной нестабильности генома // Радиационная биология. Радиоэкология. 2006. - Т.46. - № 4. - С. 441-446.

24. Воробцова И.Е., Семенов A.B. Комплексная цитогенетическая характеристика лиц, пострадавших в результате аварии на Чернобыльской АЭС // Радиационная биология. Радиоэкология. — 2006. Т.46. - № 2. -С. 140-151.

25. Воронин B.C. Количественная оценка остаточного радиационного поражения при хроническом действии окиси трития и внешнем у-облучении//Радиобиология. 1980. - Т.20. - №5. - С.772-775.

26. Генетические структуры и тритий. /Под редакцией Булдакова JI.A. Москва: Энергоатомиздат, 1994. 192с.

27. Георгиева В., Цонева М. Наследственность и окружающая среда. / Москва: «Наука», 1985.

28. Гланц С. Медико-биологическая статистика. / Москва: Практика», 1999.-459с.

29. Голуб Е.В. Оценка отдаленных цитогенетических эффектов у ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС // Радиационная биология. Радиоэкология. 2009. - Т.49. - №5. - С.563-567.

30. Грачева Л.М. Генетические эффекты распада радионуклидов в клетках. / Грачева Л.М., Королев В.Г. Москва: Атомиздат, 1977. - 100с.

31. Григорьев Ю.Г. Соматические эффекты хронического гамма-облучения. / Григорьев Ю.Г., Попов В.И., Шафиркин A.B. Москва: Энергоатомиздат, 1986. - 196с.

32. Гриневич Ю.А., Демина Э.А. Иммунные и цитогенетические эффекты плотно и редкоионизирующих излучений. - Киев: «Здоров'я», 2006. -200с.

33. Губицкая Е.Г., Ахматуллина Н.Б., Всеволодов Э.Б. и др. Частота аберраций хромосом у жителей Семипалатинской области // Генетика. -1999. Т.35. - №6. - С.842-846.

34. Гуськова А.К. Лучевая болезнь человека. / Гуськова А.К., Байсоголов Г.Д.- Москва, 1971. 384с.

35. Даренская Н.Г., Акоев И.Г., Невская Г.Ф. Относительная биологическая эффективность излучений. / Москва: Атомиздат, 1968. 375с.

36. Домрачева Е.В. Цитогенетические эффекты малых доз облучения в лимфоцитах крови и клетках костного мозга: Дис. докт.мед. наук: 14.00.29 / ГНУ ГНЦ РАМН. Москва, 2000. - 208с.

37. Дубинина Л.Г. Хромосомные мутации в лейкоцитах человека и проблема тест-систем при анализе мутагенности факторов биосферы // Доклады АН СССР. 1974а. - Т.217. - №4. - С.943.

38. Дубинина Л.Г. Лейкоциты крови человека тест-система для оценки мутагенов среды. / Дубинина Л.Г. - Москва: Наука, 1977. — 152с.

39. Дурнев А.Д. Мутагены. / Дурнев А.Д., Середин С.Б. Москва: Медицина, 1998.-328с.

40. Елисеева И.М., Иофа Э.Л., Стоян Е.Ф., Шевченко В.А. Анализ аберраций хромосом и СХО у детей из радиационно-загрязненных районов Украины // Радиационная биология и радиоэкология. 1994. - Т.34. -№2. - С. 163-171.

41. Елисова T.B. Стабильные и нестабильные аберрации хромосом у человека и других млекопитающих в связи с вопросами биологической дозиметрии // Радиационная биология. Радиоэкология. 2008. — Т.48. -№1. - С.14-27.

42. Зайнуллин В.Г. Результаты цитогенетического обследования лиц, принимавших участие в ликвидации аварии на Чернобыльской АЭС // Научные доклады АНСССР Коми научный центр.- 1990. — 29с.

43. Зборовский Э., Гракович А. Динамика ИБС и основных факторов ее риска среди населения, пострадавшего в результате аварии на Чернобыльской АЭС // Врач. 1996. - №4. - С.32-33.

44. Иванов В.К. Ликвидаторы Чернобыльской катастрофы: Радиационно-эпидемиологический анализ медицинских последствий. / Иванов В.К., Цыб А.Ф., Иванов С.И. и др. Москва: Галанис, 1999. - 312с.

45. Иванов В.К. Медицинские радиологические последствия Чернобыля для населения России: оценка радиационных рисков / Иванов В.К., Цыб А.Ф. Москва: Медицина, 2002. - 392с.

46. Ильинских H.H. Проблема иммунного контроля цитогенетических последствий инфекционного мутагенеза // Бюллетень СО АМН СССР. — 1984. №6. — С.72-76.

47. Кеирим-Маркус И.Б. Эквидозиметрия. / Москва: Атомиздат, 1980. -191с.

48. Киселев В.И., Лобарев В.М., Шойхет Я.Н. Проблемы количественной оценки воздействия Семипалатинского полигона на население алтайского края // Вестник научной программы «Семипалатинский полигон Алтай». 1994. - №1. - С. 1-9.

49. Комар В.Е. Современное состояние проблемы биологической индикации лучевых поражений // Радиобиология. — 1992. Т.32. - вып.1. -С.84-97.

50. Кудряшов Ю.Б. Радиационная биофизика (ионизирующее излучение). / Москва: Физматлит, 2004. 448 с.

51. Кузин A.M. Стимулирующее действие ионизирующего излучения на биологические процессы (к проблеме биологического действия малых доз). / Москва: Атомиздат, 1977. 135 с.

52. Кузин A.M. Проблема малых доз и идеи гормезиса в радиобиологии Радиобиология. — 1991 б. Т.31. - вып. 1. - С. 16-21.

53. Кузин A.M. Идеи радиационного гормезиса в атомном веке. / Москва: Наука, 1995.- 158 с.

54. Кузнецов А.И., Кружалов А.И., Илющенко В.Г., Зыков И.А., Кудриц-кий Ю.К. Возрастно-половая зависимость спонтанной частоты хромосомных аберраций и аберрантных клеток в лимфоцитах периферической крови // Генетика. 1980. -Т.16. - №7. - С.1284-1293.

55. Кузьмина Н.С. Изучение геномной нестабильности у детей, проживающих на территориях с радионуклидными загрязнениями: Автореф. дис. канд. мед. наук.: 03.00.15 /РУДН. Москва, 2003. - 18с.

56. Лобарев В.М., Судаков В.В., Зеленов В.И. и др. Реконструкция доз облучения населения Алтайского края от ядерного взрыва 29 августа 1949 года // Вестник научной программы «Семипалатинский полигон Алтай». 1994. - №1. - С.27-56.

57. Любимова Н.Е., Воробцова И.Е. Влияние возраста и низкодозового облучения на частоту хромосомных аберраций в лимфоцитах человека // Радиационная биология. Радиоэкология. 2007. — Т.47. - №1. — С.80-85.

58. Лютых В.П., Долгих А.П. Клинические аспекты действия малых доз ионизирующего излучения на человека (общесоматические заболевания) // Медицинская радиология и радиационная безопасность. 1998. - Т.43. - №2. - С.28-34.

59. Мазник H.A. Цитогенетическое исследование лимфоцитов периферической крови при профессиональном облучении медицинских радиологов // Цитология и генетика. 1987. - Т.21. - №6. - С.437-440.

60. Мазник H.A., Винников В.А. Динамика цитогенетических эффектов в лимфоцитах периферической крови ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС // Генетика. 1997. - Т.31. - №6. - С.41-46.

61. Мазник H.A. Результаты динамического цитогенетического обследования и биологической дозиметрии у лиц, эвакуированных из 30-километровой зоны ЧАЭС // Радиационная биология. Радиоэкология. -2004. Т.44. - №5. - С 566-573.

62. Мазник H.A., Винников В.А. Ретроспективная цитогенетическая дозиметрия по результатам классического хромосомного анализа у ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС // Радиационная биология. Радиоэкология. 2005. - Т.45. - №6. - С.700-708.

63. Мазурик В.К. Радиобиологические основы биохимической индикации лучевого поражения. // Итоги науки и техники. Сер. Радиационная биология. Т. 3. Биологическая индикация лучевого поражения // Под редакцией Е.Ф. Романцева / Москва: ВИНИТИ, 1980, С. 39-102.

64. Мазурик В.К. Биохимическая индикация лучевого поражения // Под редакцией Кудряшова Ю.Б. / Москва: Изд-во МГУ, 1987. С. 100-103.

65. Маренный А.М., Ковалев Е.Е., Шойхет Я.Н. и др // Вестник научной программы "Семипалатинский полигон Алтай". 1994. - №4. -С.73-78.

66. Материалы Российского государственного медико-дозиметрического регистра. /Бюллетень Национального радиационно-эпидемиологи-ческого регистра. Радиация и риск. — 2006. — Т. 15. № 3-4. - С.7—85.

67. Медико-биологические и экологические последствия радиоактивного загрязнения реки Теча. / Под редакцией Аклеева A.B., Киселева М.Ф. -Москва: ФУ «Медбиоэкстрем», 2000. — 531с.

68. Мельнов С.Б. Биологическая дозиметрия: теоретические и практические аспекты / Минск: Белорусский комитет «Дети Чернобыля», 2002. 192с.

69. Мельнов С.Б., Лебедева Т.В. Молекулярно-генетический статус детей и подростков, проживающих в условиях хронического низкодозового воздействия // Радиационная биология. Радиоэкология. 2004. — Т.44. -№6. - С.627-631.

70. Методические указания. Тритий и его соединения. Контроль величины индивидуальной эффективной дозы внутреннего облучения при поступлении в организм человека. МУ 2.6.1.1.5.-М., 2001. 44с.

71. Мешков H.A., Куликова Т.А. Хроническая цереброваскулярная патология у ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС/ Москва, «Комтехпринт», 2006. 204 с.

72. Митрикас В.Г., Цетлин В.В. Проблемы обеспечения радиационного контроля на ОСП «Мир» в 22-м цикле солнечной активности // Космические исследования. 2000. - Т.38. - №2. - С. 121-126.

73. Михайлова Г.Ф. Анализ результатов цитогенетических исследований населения, проживающего на радиоактивно-загрязненных территориях после Чернобыльской аварии: Дис. докт. биол. наук: 03.00.01 / ГНЦРМ РАМН. Обнинск, 2006. - 203с.

74. Москалев Ю.И. Зависимость биологических эффектов ионизирующей радиации от мощности дозы // Биологические эффекты малых доз радиации. Москва: «Институт биофизики», 1983. - С.149-160.

75. Москалев Ю.И., Зайнуллин В.Г. Изучение скорости старения после хронического облучения малыми дозами ионизирующей радиации у линии дрозофилы с нарушением апоптоза // Радиационная биология. Радиоэкология. 2004. - Т.44. - №2. - С.156-161.

76. Неронова Е.Г., Слозина Н.М., Макарова Н.В. Цитогенетические нарушения и заболеваемость у ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС // Медицинская радиология и радиационная безопасность. 2008. - Т.53. - №2. - С.5-9.

77. Неронова Е.Г. Цитогенетическая показатели нестабильности генома у ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС в отдаленный период. — СПб.: Автореф. дис. канд. биол. наук: 03.00.01 / С-Петербург, 1997. — 17 с.

78. Новицкий П.В., Зограф И.А. Оценка погрешностей результатов измерений /Лениниград: Энергоатомиздат, 1991. — 304с.

79. Нугис В.Ю., Дудочкина Н.Е. Закономерности элиминации аберраций хромосом у людей после острого облучения по данным культивирования лимфоцитов периферической крови в отдаленные сроки // Радиационная биология. Радиоэкология. 2006. — Т.46, №1. — С. 5-15.

80. Нугис В.Ю., Дудочкина Н.Е. Цитогенетические показатели в отдаленные сроки после острого облучения людей. Компьютерный метод ретроспективной оценки дозы // Радиационная биология. Радиоэкология. — 2007. Т.47. - №1. - С.74-79.

81. Нягу А.И. Психоневрологические и психологические аспекты последствий аварии на Чернобыльской АЭС // Вестник АМН СССР. 1991. -№11. -С.31-32.

82. Обухова Т.Н., Домрачева Е.В. Регистрация стабильных аберраций в лимфоцитах периферической крови методом G-дифференциального окрашивания хромосом и FISH // Радиационная биология. Радиоэкология. 1998. - Т.38. - №6. - С.793-799.

83. Отчет МНТЦ №2115-03 «Молекулярно-генетическое исследование клеток крови профессионалов-атомщиков, работавших с тритием и его окисью». Москва, 2006. - 181

84. Очнев В.К., Севанькаев A.B. Результаты исследования аберраций в лимфоцитах периферической крови персонала мощных радиоизотопных у-установок // Улучшение условий и охраны труда. Москва, 1982. -С.110-113.

85. Пелевина И.И., Готлиб В.Я., Кудряшова О.В. и др. Нестабильность генома после воздействия радиации в малых дозах (в 10-километровойзоне аварии на ЧАЭС и в лабораторных условиях) // Радиационная биология. Радиоэкология. — 1996. — Т.36. №4. - С.546-560.

86. Пелевина И.И., Алещенко A.B., Антощина М.М. и др. Реакция популяции клеток на облучение в малых дозах // Радиационная биология. Радиоэкология. 2003. - Т.43. - №2. - С. 161-166.

87. Пелевина И.И., Алещенко A.B., Готлиб В.Я. и др. Реакция лимфоцитов крови индивидуумов с соматическими заболеваниями на воздействие радиации в малых дозах // Радиационная биология. Радиоэкология. — 2005. Т.45. - №4. - С.412-415.

88. Петрова С.П. Цитогенетический анализ лимфоцитов периферической крови у лиц, подвергавшихся действию ионизирующих излучений в малых дозах // Медицинская радиология. 1982. - Т.27. - №3. - С.70-73.

89. Петрушова H.A., Зверева Г.И., Косенко М.М., Дегтева М.О. Цитогене-тические исследования у населения в связи со сбросом радиоактивных отходов в реку Теча // Медицинская радиология. 1993. - Т.38. - №2. -С.35-38.

90. Пилинская М.А., Дыбский С.С. Частота хромосомных аберраций в лимфоцитах периферической крови детей, проживающих в районах с различной радиоэкологической обстановкой // Цитология и генетика. -1992.-Т. 26. № 2. - С. 11-16.

91. Пилинская М.А., Шеметун A.M., Дыбский С.С. и др. Цитогенетический эффект в лимфоцитах периферической крови, как индуктор действия начеловека факторов Чернобыльской аварии // Радиобиология. — 1992. — Т.32. №5. - С.6320-6329.

92. Пилинская М.А., Шеметун A.M., Дыбсьсий С.С. и др. Цитогенетиче-сьсий мониторинг лиц, пострадавших от аварии на Чернобыльской АЭС // Цитология и генетика. 1994. - Т.28. - №3. - С. 18-24

93. Пилинская М.А., Дыбский С.С. Частота хромосомных обменов в критических группах жертв Чернобыльской аварии по данным традиционного цитогенетического анализа и метода FISH // Международный журнал радиационной медицины. 2000. — № 1. - С.83-95.

94. Померанцева М.Д., Балонов М.И., Рамайя JI.K. и др. Сравнительное изучение генетического эффекта различных соединений трития у самцов мыши // Генетика. — 1989. Т.25. - С.277-282.

95. Прокофьева-Бельговская A.A. Основы цитогенетики человека. / Про-кофьева-Бельговская A.A., Бочков Н.П., Гринберг К.Н. и др. Москва: Медицина, 1969. - 544с.

96. Пяткин E.K., Нугис В.Ю. Элиминация радиационно-индуцированных повреждений хромосом в культуре лимфоцитов периферической крови человека. I. Частота аберраций в первом и втором митозе // Цитология. -1981.-Т. 23.-№ 11.- С.312-318.

97. Пяткин Е.К., Покровская В.Н., Нугис В.Ю. Элиминация радиационно-индуцированных повреждений хромосом в культуре лимфоцитов периферической крови человека // Цитология. — 1982. — Т. 24. № 11. — С. 1346-1350.

98. Пяткин Е.К., Филюшкин И.В., Нугис В.Ю. Оценка равномерности облучения по результатам цитогенетического исследования лимфоцитов периферической крови человека // Терапевтический архив. 1986. — Т.58. - №9. - С.30-33.

99. Пяткин Е.К., Нугис В.Ю. Зависимость выхода аберраций хромосом от дозы при облучении in vitro и in vivo // Медицинская радиология медицина. 1986.- Т.31. - №9. - С.30-35.

100. Пяткин Е.К., Нугис В.Ю., Чирков A.A. Оценка поглощенной дозы по результатам цитогенетических исследований культур лимфоцитов у пострадавших при аварии на Чернобыльской АЭС // Медицинская радиология медицина. 1989.- Т.34. - №6. - С.52-57.

101. Распоряжение Правительства РФ от 10 февраля 1994г. №162-р (с изменениями от 4 декабря 1995г., 8 февраля 2002г.). 6с.

102. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA. / Москва: «МедиаСфе-ра», 2006.-312 с.

103. Рубанович A.B. Популяционные исследования растений, животных и человека в зонах радиационных аварий: Автореф. дис. докт. биол. наук: 03.00.01 / МГУ, 2006.-65с.

104. Русинова Г.Г., Турдакова В.А., Шорохова В.Б., Мушкачева Г.С. Сравнение структуры и катаболизма ДНК вилочковой железы крыс придействии окиси трития и у-облучения в равных дозах // Радиобиология. 1984. - Т.24. - №3. - С.344-347.

105. Русинова Г.Г., Турдакова В.А., Мушкачева Г.С. Структура ДНК ви-лочковой железы крыс при длительном воздействии окиси трития и внешнего у-облучения // Медицинская радиология. — 1985. №7. - С.58-62.

106. Савилов Е.Д., Мамонтова JI.M., Астафьев В.А., Жданова С.Н. Применение статистических методов в эпидемиологическом анализе. / Москва: «Медпресс-информ», 2004. 112с.

107. Севанькаев A.B., Козлов В.М., Гузеев Г.Г., Измайлова H.H. Частота спонтанных хромосомных аберраций в культуре лимфоцитов человека // Генетика. 1974. - Т. 10. - №6. - С.114.

108. Севанькаев A.B., Насонов А.П. Биологическая дозиметрия по хромосомным аберрациям в культуре лимфоцитов человека // Методические рекомендации. Обнинск: МЗ СССР, 1979. - 13с

109. Севанькаев A.B. Радиочувствительность хромосом лимфоцитов человека в митотическом цикле. / Севанькаев A.B. — Москва: Энергоатом-издат, 1987.- 160с.

110. Севанькаев A.B., Голуб Е.В., Хвостунов И.К. и др. Ретроспективная оценка доз в отдаленный пострадиационный период разными биологическими методами // Радиационная биология. Радиоэкология. — 2004. — Т.44. №6. - С.637-652.

111. Севанькаев A.B., Моисеенко В.В., Цыб А.Ф. Возможности применения методов биологической дозиметрии для ретроспективной оценки доз в связи с последствиями аварии на Чернобыльской АЭС. Оценка доз на

112. Спитковский Д.М. Концепция действия низких доз ионизирующей радиации на клетки и ее возможное использование для интерпритации медико-биологических последствий аварии на ЧАЭС // Радиационная биология. Радиоэкология. 1992. - Т.32. - №3. - С.З82-400.

113. Федоренко Б.С. Радиобиологические эффекты корпускулярных излучений. Радиационная безопасность космических полетов. — Москва: Наука, 2006.- 189с.

114. Федоров H.A. Нормальное кровообращение и его регуляция / Москва: Медицина, 1966. -467с.

115. Филюшкин И.В., Нугис В.Ю., Чистопольский A.C. Ретроспективная оценка дозы облучения по распределению дицентриков в лимфоцитах периферической крови // Атомная энергия. 1995. - Т.79. - №4. — С.285-294.

116. Цетлин В.В., Акатов Ю.А., Архангельский В.В. и др. Некоторые результаты мониторинга радиационных условий на борту PC МКС (20002003 гг.) // Космические исследования. 2005. - Т. 43. - №5. - С.330-334.

117. Цетлин В.В., Акатов Ю.А., Архангельский В.В. и др. Результаты мониторинга радиационных условий внутри PC МКС (2000-2005гг.) // Авиакосмическая и экологическая медицина. — 2006. № 5. - С.21-26.

118. Цыб А.Ф., Будагов H.A., Замулаева H.A. и соавт. Радиация и патология: Учебное пособие под общ. ред. А.Ф.Цыба — Москва.: Высшая школа, 2005.-341с.

119. Чеботарев А.Н., Бочков Н.П., Катосова Л.Д., Платонова В.И. Временные колебания спонтанного уровня хромосомных аберраций в культуре лимфоцитов периферической крови человека // Генетика.- 2001. Т.37. -№6.-С.848-853.

120. Шаляпина А.В. Структура и динамика развития сердечно-сосудистых заболеваний и у лиц, перенесших острую лучевую болезнь, и у ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС // Медицинская радиология и радиационная безопасность. — 2007. — Т.52. №6. — С.21-28.

121. Шевченко В.А., Померанцева М.Д. Генетические последствия действия ионизирующих излучений. / Москва: Наука. 1985. — 279 с.

122. Шиманец Т.В., Мельнов С.Б. Цитогенетический статус лиц, пострадавших в результате аварии на Чернобыльской атомной электростанции // Экологическая антропология. Ежегодник. 2001. - С.281-284.

123. Шрам Р. Наследственность человека и окружающая среда / Шрам Р., Кулешов Н.П. Москва: Наука, 1984. — 35с.

124. Abdel-Ghani А.Н., El-Naggar A.M., El-Kadi A.A. Incidence probability of delayed health consequences of the Chernobyl accident // International Journal of Radiation Medicine. 1999. - №2. - P.51-59.

125. Akatov Yu.A., Arkhangelsky V.V., Petrov, V.M. Individual doses for cosmonauts on Mir Station // Abstr. of XI Conference on Space Biology and Aviaspace Medicine. Moscow. 1998. - p.15.

126. Anderson R.M., Marsden S.J., Wright E.G. et al. Complex chromosome aberrations in peripheral blood lymphocytes as a potential biomarkers of exposure to high-LET alpha-particles // International Journal of Radiation Biology. 2000. - V.76. - P.31-42.

127. Apelt F., Kolin-Gerresheim J. And Bauchinger M. Analysis of chromosome damage and see in lymphocytes after exposure in vivo and in vitro // Mutation Research. 1981. -V. 88. - P. 61-72.

128. Au W.W., Walker D.M., Ward JB. Jr. et al. Factors contributing to chromosome damage in lymphocytes of cigarette smokers // Mutation Research. — 1991. -Y.260. — P.137-144.

129. Awa A.A. Review of thirty years study of Hiroshima and Nagasaki atomic bomb survivors. 2. Biological effects. G. Chromosome aberration in somatic cells // Radiation Research. 1975. - V.16. - P.122-131.

130. Awa A., Sofuni T., Honda T. et al. Relationship between the radiation dose and chromosome aberrations in atomic bomb survivors of Hiroshima and Nagasaki // Journal of Radiation Research. 1978. - V. 19. - P.126-140.

131. Awa A.A., Neel J.V. Cytogenetic "rogue" cells: what is their frequency, origin, and evolutionary significance // Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA.- 1986. V.83. - №4. - P.1021-1025

132. Awa A.A. Chromosome aberrations in A-bomb survivors, Hiroshima and Nagasaki. / In: «Chromosomal aberrations», (G. Obe, A.T. Natarajan Eds.). P. 181-190. Springer-Verlag, Berlin, Heidelberg, New York, London, 1990.

133. Awa A.A., Nakano M., Ohtaki K. et al. Factors that determine in the in vivo dose-response relationship for stable chromosome aberration in A-bomb survivors // Radiation Research. 1992. - V.38. - P.206-214.

134. Badhwar G.D., Atwell W., Reitz G. et al. Radiation measurements on the Mir Orbital Station // Radiation Measurement. 2002. - V.35. - №5. -P.393-422.

135. Bajerska A., Liniecki J. The influence of x-ray dose and time of its delivery in vitro on the yield of chromosomal aberrations in the peripheral blood lymphocytes // International Journal of Radiation Biology. — 1969. V.16. -№5. -P.467-481.

136. Bajerska A., Liniecki J. The yield of chromosomal aberrations in rabbit lymphocytes after irradiation in vitro and vivo // Mutation Research. 1975. V.27. - №2. - P. 271-284.

137. Balakrishnan S., Rao S.B. Cytogenetic analysis of peripheral blood lymphocytes of occupational workers exposed to low levels of ionizing radiation // Mutation Research. 1999. - V.442. - P.37-42.

138. Ballarini F., Ottolenghi A. A model of chromosome aberrations induction: applications to space research // Radiation Research. 2005. - V.164. — P.567-570.

139. Balonov M.I., Liktarev I.A. and Moskalev Yu.I. The metabolism of 3H compounds and limits for intake by workers // Health Physics. — 1984. — V.47. №.5. — P.761-773.

140. Balonov M.I., Muksinova K.N., Mushkacheva G.S. Tritium radiobiological effects in mammals: review of experiments of the last decade in Russia // Health Physics. 1993. - V.65. - №6. -P.713-726.

141. Barquinero J.F., Cigarran S., Cabellin M.R. et al. Comparison of X-ray dose-response curves obtained by chromosome painting using conventionaland PAINT nomenclatures // International Journal of Radiation Biology. — 1999. V.75. -№12. - P.1557-1566.

142. Bauchinger M., Götz G. Distribution of radiation lesions in human chromosomes and dose-effect relation analyzed with G-banding // Radiation Environment Biophysics. 1979. -V. 16. - №2. — P.355-366.

143. Bauchinger M., Kolin-Gerresheim J., Schmid E., Dresp J. Chromosome analyses of nuclear-power plant workers // International Journal of Radiation Biology. 1980. - V.38. - №5. - P.577-581.

144. Bauchinger M., Dresp J., Schmid E., Häuf R. Chromosome changes in lymphocytes after occupational exposure to pentachlorophenol (PCP) // Mutation Research. 1982. -V. 102. - №1. - P.83-88.

145. Bauchinger M., Shmid E., Braselmann H. et al. Time-effect relationship of chromosome aberrations in peripheral lymphocytes after radiation therapy for seminoma // Mutation Research. 1989. -№211.- P.265-272

146. Bauchinger M., Schmid E., Braselmann H., Kulka U. Chromosome aberrations in peripheral lymphocytes from occupants of houses with elevated indoor radon concentrations //Mutation Research. 1994. - V.310. - №.1. -P.135-142.

147. Bauchinger M. Chromosome painting and biological dosimetry of absorbed radiation // Tenth International Congress of Radiation Research. 1995. -V.2-Congress Lectures. - P. 485-488.

148. Bauchinger M. Cytogenetic research after accidental radiation exposure // Stem Cells.-1995.-V. 13 (Suppl. 1).-P. 182-190.

149. Bauchinger M. Quantification of low-level radiation exposure by conventional chromosome aberration analysis // Mutation Research. — 1995. — V.339. -P.177-189.

150. Bauchinger M., Salassidis K., Braselmann H. et al. FISH-based analysis of stable translocations in a Techa River population // International Journal of Radiation Biology. 1998. - V.73. - №6. - P605-612.

151. Bauchinger M., Schmid E. LET dependence of yield ratios of radiation-induced intra- and interchromosomal aberrations in human lymphocytes // International Journal of Radiation Biology. 1998. - V.74. - №1. - P. 17-25.

152. Bauchinger M., Schmid E., Braselmann H. Time-course of translocation and dicentric frequencies in a radiation accident case // International Journal of Radiation Biology. 2001. - V.77. -P.553-557.

153. Baumgartner F. Theoretical Foundation and Experimental Proof of the Accumulating Transfer of Tritium from Water into DNA and other Biomole-cules in vitro and in vivo // Radiation Biology: Radiology (Check) Moscow. 2002. - V. 40. - № 5. - P.495-499.

154. Bender M.A., Gooch P.C., Kondo S. The Gemini-3 S-4 spaceflight-radiation interaction experiment // Radiation Research. — 1967. — V.31. №1. - P.91-111.

155. Bender M.A. Somatic chromosomal aberrations. Use in the evaluation of human radiation exposures // Arch. Environ. Health. — 1968. V.16. №4. — P.556-564.

156. Bender M.A., Gooch P.C., Kondo S. The Gemeni-XI S-4 spaceflight radiation interaction experiment: the human blood experiment // Radiation Research. - 1968. - V.34. -P.228-238.

157. Bender M.A., Awa A., Brooks A.L. et al. Current status of cytogenetic procedures to detect and quantify previous exposures to radiation // Mutation Research. 1988. - V.196. -P.103-159.

158. Bender M.A., Preston R.J., Leonard R.C. et al. Chromosomal aberration and sister-chromatid exchange frequencies in peripheral blood lymphocytes of a large human population sample // Mutation Research. 1988. - V.204. - №3. -P.421-433.

159. Bloom A.D., Neriishi S., Kamada N. et al. Cytogenetic investigation of survivors of the atomic bombings of Hiroshima and Nagasaki // The Lancet. — 1966. September 24. - P.672-674.

160. Bocian E., Ziemba Zak B., Rosiek O., Sablinski J. Chromosome aberration in human lymphocytes exposed to tritiated water in vitro // Current Topics in Radiation Research Quarterly. - 1977. - №12. - P. 168 - 181.

161. Boei J.J., Vermeulen S., Natarajan A.T. Differential involvement of chromosomes 1 and 4 in the formation of chromosomal aberrations in human lymphocytes after X-irradiation // International Journal of Radiation Biology. -1997. V.72. - №2. -P.139-145.

162. Bogen K.T. Reassessment of human peripheral T-lymphocyte lifespan deduced from cytogenetic and cytotoxic effects of radiation // International Journal of Radiation Biology. 1993. - V.64. - №2. - P. 195-204.

163. Bonassi S. Combining environmental exposure and genetic effect measurements in health outcome assessment // Mutation Research. —1999. — V.428. — -P.177-185.

164. Bonassi S., Hagmar L., Stromberg U. et al. Chromosomal aberrations in lymphocytes predict human cancer independently of exposure to carcinogens // Cancer Research. 2000. - V.60. - P.1619-1625.

165. Bonassi S., Neri M., Puntoni R. Validation of biomarkers as early predictors of disease// Mutation Research.- 2001. -V. 480-481. P. 349-358.

166. Bonassi S., Znaor A., Norppa H., Hagmar I. Chromosomal aberrations and risk of cancer in humans: an epidemiologic perspective // Cytogenetics Genome Research. 2004. - V.104. -P.376-382.

167. Bonassi S., Kirsh-Volders M., Stromberg U. et al. Human population studies with cytigenetic biomarkers; review of literature and future prospectives // Environment Molecular Mutagenesis. 2005. - V.45. - №2-3. - P. 258270.

168. Bonner W.M. Low-dose radiation: thresholds, bystander effects and adaptive responses //Proceeding National Academy of Science USA. -2003. V.100. - №9. — P.4973-4975.

169. Bothwell A.M., Whitehouse C.A., Tawn E.J. The application of FISH for chromosome aberration analysis in relation to radiation exposure // Radiation Protection Dosimetry. 2000. - V.88. - P.7-14.

170. Braselmann H., Schmid E., Bauchinger M. Chromosome analysis in a population living in an area of Germany with the highest fallout deposition from the Chernobyl accident // Mutation Research. 1992. - V.283. - №3. -P.221-225.

171. Braselmann H., Schmid E., Bauchinger M. Chromosome aberration in nuclear power plant workers: the influence of dose accumulation and lymphocyte life-time // Mutation Research. 1994. - V.306. - P. 197-202.

172. Braselmann H., Kulka U., Huber R. et al. Distribution of radiation-induced exchange aberrations in all human chromosomes // International Journal of Radiation Biology. 2003. - V.79. - №6. - P.393-403.

173. Brenner D.J., Sachs R.K. Chromosomal "fingerprints" of prior exposure to densely ionizing radiation // Radiation Research. — 1994. -V.140. №1. — P. 134-142.

174. Brewen J.G., Preston R.J., Littlefield L.G. Radiation-induced human chromosome aberration yields following an accidental whole-body exposure to 6OCo y-rays // Radiation Research. 1972. - V. 49. - P.647-656.

175. Brogger A., Hagmar L., Heim S. et al. An Inter-Nordic prospective study on Cytogenetic endpoints and cancer risk // Cancer Genet Cytogenet. 1990. -V.45/ - P. 85-92.

176. Brogger A Hagmar L., Hansteen I-L. et al. //Cancer risk in humans predicted by increased levels of chromosomal aberrations in lymphocytes: Nordic study group on the health risk of chromosome damage. // Cancer Research. 1994. -V. 54. - P. 2919-2922

177. Brooks A.L. Biomarkers of exposure and dose: state of the art // Radiation Protection Dosimetry. 2001. - V.97. - №1. - P.39-46.

178. Buckton K.E., Brown W.M.C., Smith P.G. Lymphocyte survival in men treated with X-rays for ankylosing spondylitis // Nature. 1967. - V.214. -P.470-473.

179. Buckton K.E., Langlands A.O., Smith P.G. et al. Further studies on chromosome aberration production after whole body irradiation in man. International Journal of Radiation Biology. 1971. - V.19. - P.369-378.

180. Buckton K.E. Identification with G and R banding of the position of breakage points induced in human chromosomes by in vitro X-irradiation // International Journal of Radiation Biology. 1976. - V.29. - P.475-488.

181. Buckton K.E., Evans H.J. Cit. personal communication. (1986) // Mutation Research.- 1988a.- V.196.-P.103-159.

182. Buckton K.E., Hamilton G.E., Paton L. et al. Chromosome aberrations in irradiated ankylosing spondylitis patients.// Mutagen-induced chromosome damage in man. 1978. - P. 142-150.

183. Carbone P., Barbata G., Tomasino A., Granata G. // Caryologia. — 1984. -V.37. -№1-2. — P.161.

184. Carbonell E., Peris F., Xamena N., Creus A., Marcos R. Chromosomal aberrations analysis in 85 control individuals // Mutation Research. — 1996. -V.370. — P.29-37.

185. Chen W.L., Tuan C.L., Tai J.J. et al. Chromosome study in lymphocytes from subjects living or working in buildings constructed with radioactively buildings rebar // Mutation Research. 1997. - V.377. - №2. - P.247-254.

186. Chen F.D., Chen K.Y., Ngo F.Q. et al. Chromosomal damage in long-term residents of houses contaminated with 60Co // Lancet. 2000. - V.335. -P.726.

187. Chen Y., Jin C.Z., Zhang X.O. et al. Seventeen-year follow-up study on chromosomal aberrations in five victims accidentally exposed to several Gy of 60Co gamma-rays // Radiation Environmental Biophysics. 2009. - V.48. - №1. - P.57-65.

188. Chung H.W., Ryu E.K., Kim Y.J., Ha S.W. Chromosome aberrations in workers of nuclear-power plants // Mutation Research. 1996. — V.350. -P.307-314.

189. Chung H.W., Kim S.Y., Sohn E.H., Ha S.W. Analysis of chromosome aberrations in nuclear-power-plant workers considering the lifetime of lymphocytes // International Journal of Radiation Biology. 2000. - V.76. - №7. — P.923-927.

190. Commerford S.L. Tritium metabolism in mammals // Health Physics. -1984. №.11. - P.235-250.

191. Cremer T., Popp S., Emmerich P., and Cremer C., Rapid metaphase and interphase detection of radiation-induced chromosome aberrations in human lymphocytes by chromosomal suppression in situ hybridization // Cytometry. 1990. - V. 11. - P. 110-118.

192. Cucinotta, F.A., Kim, M.H.Y., Willingham, V., George, K.A. Physical and biological organ dosimetry analysis for international space station astronauts // Radiation Research. 2008. - V. 170. - №1. - P. 127-138.

193. Darby S.C., Kendall G.M. et al. A summary of mortality and incendence of cancer in men from the United kingdom who participated in the United kingdomrs // Dritish Medical Journal. 1988. - №296. - P.332-338.

194. Degteva M.O., Kozheurov V.P., Vorobiova M.I. General approach to dose reconstruction in the population exposed as a result of the release of radioactive wastes into the Techa River // Science of the Total Environment. -1994. V. 142. - №1-2. - P.49-61.

195. Deng W, Morrison D.P., Gale K.L. et al. Biological dosimetry of beta-ray exposure from tritium using chromosome translocations in human lymphocytes analyzed by fluorescence in situ hybridization // Radiation Research. -1998.- V.150. P.400-405.

196. Dolphin G.W. Biological dosimetry with particular reference to chromosome aberration analysis. A review of methods. / In: Handling of radiation accidents. STI/PUB/229 IAEA SM 119/4. Vienna. 1969. - P. 215-224.

197. Doneda L, Basilisco G, Bianchi P, Larizza L. High spontaneous chromosomal damage in lymphocytes from patients with hereditary megaduodenum // Mutation Research. 1995. - V. 348. - №1. - P.33-36.

198. Durante M., Bonassi S., George K., Cucinotta F.A. Risk estimation based on cromosomal aberrations induced by radiation //Radiation Research. — 2001. -V.156. P.662-667.

199. Durante M., Snigiryova G., Akaeva E., et al. Chromosome aberration dosimetry in cosmonauts after single or multiple space flights // Cytogenetic Genome Research. 2003. - V.103. - №1-2. - P40-46.

200. Durante M. Biomarkers of space radiatin risk //Radiation Research. 2005. -V.164. - P.467-473.

201. Dutrillaux B., Viegas-Pequignot E., Prohome M., Sportes M. Distribution of the various radiation-induced chromosomal rearrangements in relation to the dose and sample time // Mutation Research. 1985. - V.152. - P.197-203.

202. Edwards A.K., Wood R.M., Ezell R.L. Double ionization of helium by He+ projectiles // Physics Review A. 1985. - 32. - №3. - P.1346-1347.

203. Edwards A.A., Lloyd D.C., Prosser J.S. et al. Chromosome aberrations induced in human lymphocytes by 8.7 MeV protons and 23.5 MeV helium-3 ions // International Journal of Radiation Biology. 1986. - V.50. - №1. — P.137-145.

204. Edwards A., Maznik N., Moquet J. et al. Choosing metaphases for biological dosimetry by fluorescence in situ hybridization (FISH) // Radiation Research. 2002. - V. 157. - P.467-471.

205. Edwards A., Voisin P., Sorokine-Durm I. et al. Biological estimates of dose to inhabitants of Belarus and Ukraine following the Chernobyl accident // Radiation Protection Dosimetry. 2004. - V.l 11. №2. - P.211-219.

206. Edwards A.A., Lindholm C., Darroudi F. et al. Review of translocations detected by FISH for retrospective biological dosimetry applications // Radiation Protection Dosimetry. 2005. - V.l 13. - P.396-402.

207. Ellett W.H., Braby L.A. The microdosimetiy of 250 kVp and 65 kVp x-rays, 60Co gamma rays, and tritium beta particles // Radiation Research. 1972. — V.51. - P.229-243.

208. Enns L., Bogen K.T., Wizniak J. Et al. Low dose radiation hipersensitivity in associatted with p 53-dependent apoptosis //Molecular Cancer Research. — 2004. V.2 - №10. — P. 557-566.

209. Evans HJ., Buckton K.E., Hamilton G.E., Carothers A. Radiation-induced chromosome aberrations in nuclear-dockyard workers // Nature. 1979. -V.277. - №5697. - P.531-534.

210. Fedorenko B., Druzhinin S., Yudaeva L. et al. Cytogenetic studies of blood lymphocytes from cosmonauts after long-term space flights on Mir station // Advances in Space Research. 2001. - V.27. - №2. - P.355-359.

211. Fedorenko B.S., Voronkov lu. I., Snigireva G.P. et al. Effect of space flight factors on health of cosmonauts in the near and late term after space flights // Radiats Biol Radioecol. 2002. - V.42. - №6. - P.765-768.

212. Fernander J.L., Campos A., Goyanes V. et al. X-ray biological dosimetry performed by selective painting of human chromosomes 1 and 2 // International Journal of Radiation Biology. 1995. - V.67. - №3. - P.295-302.

213. Fernandes T.S., Lloyd D., Amaral A. A comparision of different citological stains for biological dosimetry // International Journal of Radiation Biology. 2008. - V.84. - №8. - P.703-711.

214. Galloway S.M., Berry P.K., Nichols W.W. et al. Chromosome aberrations in individuals occupationally exposed to ethylene oxide, and in a large control population //Mutation Research. 1986. - V.170. - №1-2. - P.55-74.

215. Ganguly B.B. Cell division, chromosomal damage and micronucleus formation in peripheral lymphocytes of healthy donors: related to donor's age // Mutation Research. 1993. - V.295. - №3. - P. 135-148.

216. Garaj-Vrhovac V., Kopjar N., Poropat M. Evaluation of cytogenetic damage in nuclear medicine personnel occupationally exposed to low-level ionizing radiation // Arh Hig Rada Toksikol. 2006. - V.57. - №1. - P.31-38.

217. Gardner S.N., Tucker J.D. The cellular lethality of radiation-induced chromosome translocations in human lymphocytes // Radiation Research. — 2002. V.157. — P.539-552.

218. Goh K.O. Total-body irradiation and human chromosomes IV. Cytogenetic follow-up studies 8 and 101/2 years after total-body irradiation // Radiation Research. 1975. - V.62. -P.364-373.

219. Greco O., Durante M., Gialanella G., et al. Biological dosimetry in Russian and Italian astronauts // Advances in Space Research. 2003. - V.31. - №6. -P. 1495-1503.

220. Griem M.L., Robotewskyj A., Nagel R.H. Potential vascular damage from radiation in the space environment // Advance Space Research. 1994. -V.14. - №10.- P.555-563.

221. Gundy S., Varga L.P. Chromosomal aberrations in healthy persons // Mutation Research. 1983. -V. 120. - №2-3. - P. 187-191.

222. Hagmar L., Bonassi S., Stromberg U. et al. Chromosomal aberrations in lymphocytes predict human cancer: a report from the European Study Group on Cytogenetic Biomarkers and Health (ESCH) // Cancer Research. — 1998. V.58.-№18.-P.4117-21.

223. Health Effects in the Three Island Area. Investigation of Reported Plant and Animal. / NUREG-0738 EPA 600/4-80-049. Washington, 1980. V.33. -P.31)

224. Hedner K., Hogstedt B., Kolnig A.M. et al. Sister chromatid exchanges and structural chromosome aberrations in relation to age and sex // Human Genetics. 1982. - V.62. -P.305-309.

225. IAEA: Cytogenetic analysis for radiation dose assessment. Technical Report series №405. International Atomic Energy Agency. Vienna 2001.

226. IAEA: Technical Report series №260, «Biological dosimetiy: chromosomal aberration analysis for dose assessment». IAEA, Vienna 1986. - P. 1-69.

227. ICRP-1990. Recommendations of the International Comission on Radiological Protection (ICRP). Publication 60. / Oxford: Pergamon Press. 1991.

228. Ivanov B., Praskova L., Mileva M., Bulanova M., Georgieva I. Spontaneous chromosomal aberration level in human peripheral blood lymphocytes // Mutation Research. 1978. - V.52. - P.421-426.

229. Jaworowski Z. Stimulating effects of ionizing radiation: new issue for regulatory policy // Regulatory Toxicology and Pharmacology. — 1995. — V.22. -№2.-P. 172-179.

230. Jin C.Z., Lui X.L., Zhang Z.Y., Luo Y.S. Present status and prospects for biological dosimetry using chromosome aberration analysis // Radiation Protection Dosimetry. 1998. - V.77. - P.29-32.

231. Johannes C., Horstmann M., Durante M. et al. Chromosome intrachanges and interchanges detected by multicolor banding in lymphocytes: searching for clastogen signatures in the human genome // Radiation Research. 2004. - V.161. -P.540-548.

232. Johnson H.A. The quality factor for tritium radiation in Tritium (Edited by A.A. Moghissi and M.W. Carter). - 1973. - P.231-239.

233. Joksic G., Spasojevic-Tisma V. Chromosome analysis of lymphocytes from radiation workers in tritium-applying industry // International Archives of Occupational and Environmental Health. 1998. - V.71. - P.213-220

234. Joseph G.M., Buler M.G., Rames L.J. et al. // Amer. J. Human Genet. -1986. -V.39. № 3. - P. 137.

235. Kamiguchi Y., Tateno H., Mikamo K. Dose-response relationship for the induction of structural chromosome aberrations in human spermatozoa after in vitro exposure to tritium ß-rays // Mutation Research. 1990a. - V.228. -P.125-131.

236. Kamiguchi Y., Tateno H. and Mikamo K. Types of structural chromosome aberrations and their incidences in human spermatozoa X-irradiated in vitro // Mutation Research. 1990b. - V.228. - P. 133-140.

237. Kasuba V., Sentija K., Garaj-Vrhovac V., Fucic A. Chromosome aberrations in peripheral blood lymphocytes from control individuals // Mutation Research. 1995. - V.346. - P. 187-193.

238. Kellerer A.M., Rossi H.H. RBE and the primary mechanism of radiation action // Radiation Research. 1971. - V.47. - №1. - P. 15-34.

239. King C.M., Gillespie E.S., McKenna P.G., Barnett Y.A. An investigation of mutation as a function of age in human // Mutation Research. 1994. — V.316. -P.79-90.

240. Kodama Y., Nakano M., Ohtaki K. et al. Biotechnology Contributes to Biological Dosimetry. RERF; Winter 1992-93. -P.6-7.

241. Kossenko M.M., Degteva M.O. Cancer mortality and radiation risk evaluation for the Techa River population // Science of the Total Environment. — 1994. -V.142. №1-2.- P.73-89.

242. Kourakis A., Mouratidou M., Kokkinos G. et al. Frequencies of chromosomal aberrations in pesticide sprayers working in plastic green houses // Mutation Research. 1992. - V.279. - №2. -P.145-148.

243. Lalic H. Cytogenetic monitoring of medical staff professionally exposed to Gamma and X radiation // Neoplasma. 2005. - V.52. - №4. -P.307-313.

244. Lalic H., Radosevic-Stasic B. Chromosome aberrations in peripheral blood lymphocytes in subjects occupationally exposed to ionizing radiation or chemical clastogens // Folia Biologica. 2002. - V.48. - №3. -P.102-107.

245. Larizza L., Doneda L., Stefanini M. et al. Liability to chromosome damage in lymphocytes of "cancer family" subjects: a study of spontaneous and induced chromosomal fragility // International Journal of Biology Markers. — 1987. V.2. - №1. - P.9-17.

246. Lazutka J.R., Dedonyte V. Increased frequency of sister chromatid exchanges in lymphocytes of Chernobyl clean-up workers // International Journal of Radiation Biology. 1995. - V.67. - №6. - P.671-676.

247. Lazutka J.R. Chromosome aberrations and rogue cells in lymphocytes of Chernobyl clean-up workers // Mutation Research. — 1996. V.350. № 2. -P. 315-329.

248. Lazutka J.R., Lekevicius R., Dedonyte V. et al. Chromosomal aberrations and sister-chromatid exchanges in Lithuanian populations: effects of occupational and environmental exposures // Mutation Research. 1999. - V.445.-№2. -P.225-39.

249. Leonard A., Deknudt Gh., Leonard E.D., Decat G. Chromosome aberrations in employees from fossil-fiieled and nuclear-power plants // Mutation Research. 1984. - V.138. -P.205-212.

250. Leonard A., Deknudt Gh. and Leonard E.D. Persistence of chromosome aberrations in an accidentally irradiated subject // Radiation Protection Dosimetry. 1988. - V.22. - № 2. - P.55-57.

251. Leonard A., Baltus I., Leonard E.D. et al. Dose-effect relationship for in vivo and in vitro induction of dicentric aberrations in blood lymphocytes of children // International Journal of Radiation Biology. 1995. - V. 141. -№1. - P.95-98.

252. Lindholm C., Salomaa S. Dose assessment of past accidental or chronic exposure using FISH chromosome painting // Radiation Protection Dosimetry.- 2000. V.88. — P.21-25.

253. Lindholm C., Edwards A. A. Long-term persistence of translocation in stable lymphocytes from victims of a radiological accident // International Journal of Radiation Biology. 2004. - V.80. - P.559-566

254. Littlefield L.C., Goh K.O. Cytogenetic studies in control men and women. I. Variations in aberration frequencies in 29,709 metaphases from 305 cultures obtained over a three-year period // Cytogenetics and Cells Genetics. 1973.- V.12. -№1.-P.17-34.

255. Littlefield L.G., Kleinerman R.A., Sayer A.M. et al. Chromosome aberrations in lymphocytes biomonitors of radiations exposure // New Horizons in Biological Dosimetry. - 1991. - Wiley-Liss. - P.387-397.

256. Livingston G.K., Falk R.B., Schmid E. Effect of occupational radiation exposures on chromosome aberration rates in former plutonium workers // Radiation Research. 2006. - V.166. - P.89-97.

257. Lloyd D.C., Purrott R.J., Dolphin G.W. et al. The relationship between chromosome aberrations and low LET radiation dose to human lymphocytes // International Journal of Radiation Biology. 1975. - V.28. - №1. - P.75-90.

258. Lloyd D.C., Purrott R.J., Reeder E.J. The incidence of unstable chromosome aberrations in peripheral blood lymphocytes from unirradiated and oc-cupationally exposed people // Mutation Research. 1980. - V.72. - №3. -P.523-532.

259. Lloyd D.C., Edwards A.A., Szluinska M. The minimum detectable dose by biodosimetry in a radiation accident // Mutation Research. 1982. - V.92. — P.360.

260. Lloyd D.C., Edwards A.A. Chromosome aberrations in human lymphocytes: effect of radiation quality, dose, and dose rate // Radiation-Induced Chromosome Damage in Man. 1983. - P.23-49.

261. Lloyd D.C., Troup J.D. Recurrent back pain and its prediction // Journal of the Society of Occupational Medicine. 1983. - V.33. - №2. -P.66-74.

262. Lloyd D.C., Edwards A.A., Prosser J.S. et al. Accidental intake of tritiated water: a report of two cases // Radiation Protection Dosimetry. — 1986. -V.15. P.191-196.

263. Lloyd D.C., Edwards A.A., Natarajan A.T. Biological dosimetry applied to in vitro simulated partial body irradiation // In CEC Report. Treatment and biological dosimetry of exposed persons. European Comission, Luxemburg. -1991.

264. Lloyd D.C., Moquet J.E., Oram S. et al. Accidental intake of tritiated water: a cytogenetic follow-up case on translocation stability and dose reconstruction // International Journal of Radiation Biology. 1998. - V.73. -№5. -P.543-547.

265. Lloyd D.C., Lucas J.N., Edwards A.A. et al. Study to verify a reported excess of chromosomal aberrations in blood lymphocytes of Namibian Uranium Miners // Radiation Research. 2001. - V.155. - P.809-817.

266. Lucas J.N., Tenjin T., Straume T. et al. Rapid human chromosome aberration analysis using fluorescence in situ hybridization // International Journal of Radiation Biology. 1989. -V. 56. -№1. - P.35-44.

267. Lucas J.N., Roggensee M., Straume T. The persistence of chromosome translocations in a radiation worker accidentally exposed to tritium // Cytogenetics and Cell Genetics. 1992. - V.60. - P.255-256.

268. Lucas J.N., Awa A., Straume T. et al. Rapid translocation frequency analysis in humans decades after exposure to ionizing radiation // International Journal of Radiation Biology. 1992. - V. 62. - №1. - P.53-63.

269. Lucas J.N., Deng W. Views on issues in radiation biodosimetry based on chromosome translocations measured by FISH // Radiation Protection Dosimetry. 2000. - V.88. - P.77-86.

270. Luomahaara S., Lindholm C., Mustonen R. and Salomaa S. Distribution of radiation induced exchange aberrations in human chromosomes 1, 2 and 4 // International Journal of Radiation Biology. 1999. - V.75. - P.1551-1556.

271. Maes A., Hilali A., Leonard E.D. et al. Stable chromosome aberrations 25 years after severe accident radiation exposure // Radiation Environmental Biophysics. 1993. - V.32. - №4.-319-324.

272. Maffei F., Angelini S., Forti G. et al. Spectrum of chromosomal aberrations in peripheral lymphocytes of hospital workers occupationally exposed to low doses of ionizing radiation // Mutation Research. — 2004. V.547. - №1-2. -P.91-99.

273. Major J., Hudak A., Kiss G. et al. Follow-up biological and genotoxicologi-cal monitoring of acrylonitrile- and dimethylformamide-exposed viscose rayon plant workers // Environmental Molecular Mutagenesis. 1998. -V.31. - №4. -P.301-310.

274. Mathur-de Vre R. and Binet J. Molecular aspects of tritiated water and natural water in radiation biology // Prog. Biophys. Mol. Biol. 1984. - V.43. -P.161-193.

275. Matsuda Y., Takeshi Y., Tobari I. Chromosome aberrations induced by tri-tiated water or 60Co-rays at early pronuclear stage in mouse eggs // Mutation Research. 1986. - V.160. - P.87-93.

276. Matsumoto K., Ramsey M.J., Nelson D.O., Tucker J.D. Persistence of radiation-induced translocations in human peripheral blood determined by chromosome painting // Radiation Research. 1998. - V.149. - P.602-613.

277. Mattei M.G., Ayme S., Mattei J.F. et al Distribution of spontaneous chromosome breaks in man // Cytogenetics and Cells Genetics. — 1979. — V.23. -№1-2. -P.95-102.

278. Maznik N.A., Vinnikov V.A. Retrospective cytogenetic biodosimetry using fluorescence in situ hybridization (FISH) technique in persons exposed to radiation due to the Chernobyl accident // Украшсысий Радюлогичнш Журнал. 2005. - T. 13. - C.66-72.

279. Mendelsohn M.L., Mayall B.H., Bogart E., et al. DNA content and DNA-based centromeric index of 24 human chromosomes. // Science. 1973 - V. 179. -№78.-P. 1126-1129.

280. Meyne J., Littlefield L.G., Moyzis R.K. Labeling of human controllers using an alphoid DNA consensus sequence: application to the scoring of chromosome aberrations // Mutation Research. 1989. - V. 226. - P.75-76.

281. Milillo C.P., Gemignani F., Sbrana I. et al. Chromosome aberrations in humans in relation to site of residence // Mutation Research. 1996. -V.360.-№3.-P.173-179.

282. Mitrikas V.G., Tsetlin V.V., Teltsov M.V., Shumshurov V.l. Radiation dose measurements aboard the Mir using the R-16 instrument // Radiation Measurement. -2002. -V.35. -P.515-525.

283. Moorchead P.S., Nowell P.C., Mellman W.L. et al. Chromosome preparation of leukocytes cultured from human peripheral blood // Experimental Cell Research. 1960. - V.20. - №3. - P.613-616.

284. Moore D.H., Tucker J.D., Jones I.M. et al. A study of the effects of exposure on clean-up workers at the Chernobyl nuclear reactor accident using multiple end points // Radiation Research. 1997. - V. 148. - P.463-475.

285. Moquet J., Edwards A., Lloyd D., Hone P. The use of FISH chromosome painting for assessment of old doses of ionizing radiation // Radiation Protection Dosimetry. 2000. - V.88. - P.27-33.

286. Morgan W.F., Crossen P.E. The frequency and distribution of sister chromatid exchanges in human chromosomes // Human Genetics. 1977. - V.38. - №3. - P.271-278.

287. Morgan W.F. Non-targeted and delayed effects of exposure to ionizing radiation: I. Radiation-induced genomic instability and bystander effects in vitro // Radiation Research. 2003 a. - V.159. - №5. - P.567- 580.

288. Mothersill C., Seymour C.B. Radiation-induced bystander effects implications for cancer // National Review of Cancer // 2004. - V.4. - №2. - P. 158164.

289. Morstin K., Kopec M., Olko P. et al. Microdosimetry of tritium // Health Physics. 1993. - V.65. - №.6. - P.648-656.

290. Nakao H. Three Mile Island. / Kyoto, Japan. 1980. - 280p.

291. Natarajan A.T., Balajee A.S., Boei JJ. et al. Mechanisms of induction of chromosomal aberrations and their detection by fluorescence in situ hybridization // Mutation Research. 1996. - V.372. - P.247-258.

292. Natarajan A.T., Boei J.J., Darroudi F. et al. Current cytogenetic methods for detecting exposure and effects of mutagens and carcinogens // Environ Health Perspectives. 1996. - V.104. - Supply 3. -P.445-448.

293. Nazarov A.G., Burlakova E.B., Osanov D.P. et al. Resonance. Conclusions of the Unified Scientific Group on the Enviromental Protection. / Penyagin AN, Editor. Chelyabinsk: South-Ural Publishing House, 1991. - 55p.

294. Nyagu A.I., Loganovsky K.N., Yuryev K.L., Zdorenko L.L. Psychophysiological aftermath of irradiation. // Inernational Journal of Radiation Medicine. 1999. - V.2. - №2. - P.3-24.

295. Obe G., Herhs J. Chromosomal aberrations in heavy smokers // Human Genetics. 1978. - V.41. - P.259-263

296. Obe G., Vogt H.-J., Madle S. et al. Double-blind study on the effect of cigarette smoking on the chromosomes of human peripheral blood lymphocytes in vivo // Mutation Research. 1982. - V.92. - P.309-319.

297. Obe G., Beek B. The human lymphocyte system // Chemical Mutagenesis and Methods for their Detection. 1982. - V.7. - P.337-400.

298. Obe G., Johannes I.5 Johannes C. et al. Chromosomal aberrations in blood lymphocytes of astronauts after long-term space flights // International Journal of Radiation Biology. 1997. - V.72. - №6. - P.727-734.

299. Obe G., Facius R., Reitz G. et al. Manned missions to Mars and chromosome damage // International Journal of Radiation Biology. 1999. - V.75. -№4. -P.429-433.

300. Obe G. and Vijayalaxmi (Editors). Chromosomal Alterations. Methods, Results and Importance in Human Health. — Springer — 2007. 515 p.

301. Ohtaki K. G-banding analysis of radiation-induced chromosome damage in lymphocytes of Hiroshima A-bomb survivors // Japanese Journal of Human Genetics. 1992. - V.37. - №4. - P.245-262.

302. Padovani L., Caporossi D., Tedeschi B. et al. Cytogenetic study in lymphocytes from children exposed to ionizing radiation after the Chernobyl accident//Mutation Research. 1993. - V.319. - №1. -P.55-60.

303. Pilinskaya M.A. Cytogenetic effects in somatic cells of Chernobyl accident survivors as biomarker of low radiation doses exposure // International Journal of Radiation Medicine. 1999. - V. 2. - №2. - P.60-66.

304. Pinkel D., Straume T. and Gray J., Cytogenetic analysis using quantitative, high-sensitivity, fluorescence hybridization. // Proceeding of the National Academy of Sciences (USA). 1986. - V.83. - P.2934-2938.

305. Pinson E. A., Langham W.H. Physiology and toxicology of tritium in man // Health Physics. 1980. - V.38. -№6. - P. 1087-1110.

306. Pluth J.M., Ramsey M.J., Tucker J.D. Role of maternal exposures and newborn genotypes on newborn chromosome aberration frequencies // Mutation Research. 2000. - V.465. - P.101-111.

307. Pohl-Ruling J., Haas O., Brogger A., Obe G. et al. The effect on lymphocyte chromosomes at additional radiation burden due to fallout in Salzburg (Austria) from the Chernobyl accident // Mutation Research. 1991. - V.262. -P.209-217.

308. Pouzoulet F., Roch-Lefevre S., Giraudet A. et al. Monitoring translocations by M-FISH and three-color FISH painting techniques: a study of two radiotherapy patients // Journal of Radiation Research. — 2007. V.48. - №5. — P.425-434.

309. Pressl S., Romm H., Ganuly B., Stephan G. Experience with FISH-detected translocations as an indicator in retrospective dose reconstructions // Radiation Protector Dosimetry. 2000. - V.88. - P.45-49.

310. Presser J. S., Lloyd D. C., Edwards A. A., Stather J. W. The induction of chromosome aberrations in human lymphocytes by exposure to tritiated water // Radiation Protection Dosimetiy. 1983. - V.4. - №1. - P.21-26.

311. Radford I.R. Chromosomal rearrangement as the basis for human tumouri-genesis // International Journal of Radiation Biology. 2004. - V.80. - №8. -P.543-557.

312. Ramalho A.T., Nascemento A.C.H. The fate of chromosomal aberrations in 137Cs-exposed individuals in the Goiania radiation accident // Health Physics. 1991. - V.60. - №1. - P. 67-70.

313. Ramsey M.J., Moore D.H., Briner J.F. et al. The effects age and lifestyle factors on the accumulation of cytogenetic damage as measured by chromosome painting // Mutation Research. 1995. - V.338. - P.95-106.

314. Rodriguez P., Montoro A., Barquinero J.F. et al. Analysis of translocations in stable cells and their implications in retrospective biological dosimetry // Radiation Research. 2004. - V.162. - P.31-38.

315. Romm H., Stephan G. Wissenschaftlicher Bericht Institut fur Strahlen Hygiene. /Munich: Bundesgesundheitsamt, 1985. P. 20.

316. Romm H., Stephan G. Chromosome analysis — a routine method for quantitative radiation dose assessment // Kernetchnik. — 1990. — V.55. — 219-225.

317. Romm H., Stephan G. Dose dependency of FICH-detected translocations in stable and unstable cells after Cs gamma irradiation of human lymphocytes in vitro // Cytogenetic and Genome Research. 2004. - V.104. - P.162-167.

318. Rossner P., Boffetta P., Ceppi M. et al. Chromosomal aberrations in lymphocytes of healthy subjects and risk of cancer // Environment Health Perspective. 2005. -V. 113. - №5. - P.517-520.

319. Salassidis K., Schmid E., Peter R.U. et al. Dicentric and translocation analysis for retrospective dose estimation in humans exposed to ionizing radiation during the Chernobyl nuclear power plant accident // Mutation Research. — 1994.-V. 311.-P.39-48.

320. Salomaa S., Koivistoinen A., Paile W. et al. Chromosomal aberration analysis of Byelorussion children exposed to Chernobyl fallout // Proceedings 8th IRPA Congress. 1992. - V.l. -P.801-804.

321. Salomaa S., Sevan'kaev A.V., Zhloba A.A. et al. Unstable and stable chromosomal aberrations in lymphocytes of people exposed to Chernobyl fallout in Bryansk, Russia // International Journal of Radiation Biology. 1997. -V.71. - №1. - P.51-59.

322. Salomaa S., Lindholm C., Tankimanova M.K. et al. Stable chromosome aberrations in the lymphocytes of a population living in the vicinity of the Se-mipalatinsk nuclear test site // Radiation Research. 2002. - V.158. - №5. -P.591-596.

323. Salassidis K., Schmid E., Peter R.U. et al. Dicentric and translocation analysis for retrospective dose estimation in humans exposed to ionizing radiation during the Chernobyl nuclear power plant accident // Mutation Research. -1994.-V. 311.-P.39-48.

324. Sasaki M.S., Miyata H. Biological dosimetry in atomic bomb survivors // Nature. 1968. - V.220. - P. 1189-1193.

325. Savage J.R.K., Simpson P.J. FISH 'painting' patterns resulting from complex exchanges // Mutation Research. 1994a. - V.312. - P.51-60.

326. Savage J.R.K., Simpson P.J. On the scoring of FISH-'painted' chromosome-type exchange aberrations // Mutation Research. 1994b. - V.3 07. -P.345-353.

327. Savage J.R.K. The transmission of FISH-painted patterns derived from complex chromosome exchanges // Mutation Research. 1995. — V. 347. -P. 87-95.

328. Scarpa G., Vulpis N., De Santis M.E., Vulpis G. The dose absorbed by lymphocytes irradiated in vitro with tritiated water // Physics in Medicine and Biology. 1981. - V.26. - №6. - P. 1137-1144.

329. Scarpato R, Migliore L. Comparison of spontaneous structural chromosome aberration frequency in 48 h-cultured human lymphocytes mitotically arrested by different colcemid treatments // Mutation Research. 1996. -V.361.- №1. -P.35-39.

330. Scheid W., Weber J., Traut H. Chromosome aberrations induced in human lymphocytes by an X-radiation accident: results of a 4-year postirradiation analysis. // International Journal of Radiation Biology. -1988. — V.54. №3. -P.3 95-402.

331. Sevan'kaev A.V., Lloyd D.C., Braselmann H. et al // A survey of chromosomal aberrations in lymphocytes of Chernobyl liquidators // Radiation Protection Dosimetry. 1995. - V. 58. - P.85-91.

332. Seyama T., Yamamoto O., Kinomura A. and Yokoro K. Carcinogenic effects of tritiated water (HTO) in mice: In comparison to those of neutrons and gamma-rays // Journal of Radiation Research. 1991. - Supplement 2. -P.132—142.

333. Sigurdson A.J., Ha M., Hauptmann M. et al. International study of factors affecting human chromosome translocations in peripheral blood lymphocytes // Mutation Research. 2008. - V.652. - P. 112-121.

334. Simon S.L., Bailiff I., Bouville A., et al. Biodos EPR-2006 consensus committee report on biodosimetric methods to evaluate radiation doses at long times after exposure // Radiation Measurements. 2007. - V.42. - P. 948971.

335. Simpson PJ. and Savage R.K. Estimating the true frequency of X-ray-induced complex chromosome exchanges using fluorescence in situ hybridization. // International Journal of Radiation Biology. 1995. - V.67. - №1. -- P.37-45.

336. Sinues B, Izquierdo M, Perez Viguera J. Chromosome aberrations and urinary thioethers in smokers // Mutation Research. 1990. - V.240. - №4. -P.289-293.

337. Slozina N., Neverova E., Kharchenko T., Nikiforov A. Increased level of chromosomal aberrations in lymphocytes of Chernobyl liquidators 6-10 years after the accident // Mutations Research. 1997. - V.379. - P.121-125.

338. Sorokine-Durm I., Durand V., Delbos M. et al. A French view on FISH painting as a biodosemeter // Radiation Protection Dosimetry. 2000. — V.88. -P.35-44.

339. Sorokine-Durm I., Whitehouse C., Edwards A. The variability of translocation yields amongst control populations // Radiation Protection Dosimetry. -2000.-V.88.-P.93-99.

340. Sorsa M., Wilbourn J., Vainio H. Human cytogenetic damage as a predictor of cancer risk // International Agency for Research on Cancer. Science Publication. 1992. - V.l 16. -P.543-554.

341. Spruill M.D., Ramsey M.J., Swiger R.R. et al. The persistence of aberrations in mice induced by gamma-radiation as measured by chromosome analysis // Mutation Research. 1996. - V.356. - P. 135-145.

342. Sreedevi B. and Rao B.S. Cytogenetic Effects of Tritiated Water (HTO) in Human Peripheral Blood Lymphocytes in vitro // International Journal of Human Genetics. 2004. - V.4. - №4. - P.237-242.

343. Stephan G., Oestreicher U. Chromosome investigation of individuals living in areas of southern Germany contaminated by fallout from the Chernobyl reactor accident // Mutation Research. 1993. - V.319. - №3. - P. 189-196.

344. Stephan G., Pressl S. Chromosomal aberrations in peripheral lymphocytes from healthy subjects as detected in first cell division // Mutation Research. 1999. - V.446. - P.231-237.

345. Stephan G., Pressl S., Koshpessova G., Gusev B.I. Analysis of FISH-painted chromosomes in individuals living near the Semipalatinsk nuclear test site //Radiation Research. 2001. - V. 155. - №6. - P.796-800.

346. Stephan G., Kampen W.U., Nosske D., Roos H. Chromosomal aberrations in peripheral lymphocytes of patients treated with radium-224 for ankylosing spondylitis // Radiation Environmental Biophysics. 2005. - V.44. - №1. -P.23-28.

347. Straume T. and Lucas J.N. A comparison of the yields of translocations and dicentrics measured using fluorescence in situ hybridization // International Journal of Radiation Biology. 1993. -V. 64. -P.185-187.

348. Straume T., Carsten A.L. Tritium radiobiology and relative biolpgical effectiveness // Health Physics. 1993. - V65. - №6. - P.657-672.

349. Streffer C. Carcinogenesis after ionizing irradiation // International Journal of Radiation Medicine. 1999. - №3-4. - P.4-6.

350. Tanaka K., Sawada S., Kamada N. Relative biological effectiveness and dose rate effect of tritiated water on chromosomes in human lymphocytes and bone marrow cells // Mutation Research. — 1994. — V.323. №1-2. -P.53-61.

351. Tanaka K., Iida S., Takeichi N. et al. Unstable-type chromosome aberrations in lymphocytes from individuals living near Semipalatinsk nuclear test site // Journal of Radiation Research (Tokyo). — 2006. — V.47. Suppl A. — P.159-164.

352. Tawn E.J. The frequency of chromosome aberrations in a control population //MutationResearch. 1987. - V.182. - P.303-308.

353. Tawn E.J., Binks K. A cytogenetic study of radiation workers: the influence of dose accumulation patterns and smoking // Radiation Protection Dosimetry. 1989. - V.28. -P.173-180.

354. Tawn E.J., Whitehouse C.A., Holdsworth D. et al. Chromosome analysis of workers occupationally exposed to radiation at the Sellafield nuclear facility // International Journal of Radiation Biology. 2000. - V.76. - P.355-365.

355. Tawn E.J., Whitehouse C.A. Persistence of translocation frequencies in blood lymphocytes following radiotherapy: implications for retrospective radiation biodosimetry // Journal of Radiology Protection. 2003. - V. 23. -№4. -P.423-30.

356. Tawn E.J., Whitehouse C.A. Stable chromosome aberration frequencies in men occupationally exposed to radiation // Journal of Radiology Protection.- 2003. -V. 23. №3. - P.269-78.

357. Tawn E.J., Whitehouse C.A., Tarone R.E. FISH chromosome aberration analysis on retired radiation workers from the Sellafield nuclear facility // Radiation Research. 2004. - V.162. - P.249-256.

358. Tawn E.J., Whitehouse C.A., Riddell A.E. FISH chromosome analysis of plutonium workers from the Sellafield nuclear facility // Radiation Research.- 2006. V.165. - №5. - P.592-597.

359. Terzoudi G.I., Pantelias G.E. Cytogenetic method for biodosimetry and risk individualization after exposure to ionizing radiation // Radiation Protection Dosimetry. 2006.-V.122.-P.513-520.

360. Testa A., Stronati L., Ranaldi R., Spano M. et al. Cytogenetic biomonitoring carried out in a village (Dolon) adjacent to the Semipalatinsk nuclear weapon test site // Radiation Environmental Biophysics. 2001. - V.40. -P.125-129.

361. Testard I., Ricoul M., Hoffschir F. et al. Radiation-induced chromosome damage in astronauts' lymphocytes // International Journal of Radiation Biology. -1996. -V.70. №4. P.403-411.

362. Tucker J.D., Sentt J.R. Analysis of naturally occurring and radiation-induced breakpoint locations in human chromosomes 1, 2 and 4 // Radiation Research. 1994. - V. 139. -P.31-36.

363. Tucker J.D., Lee D.A., Ramsey MJ. et al. On the frequency of chromosome exchanges in a control population measured by chromosome painting // Mutation Research. 1994. - V.313. - № 2/3. -P.193-202

364. Tucker J.D., Lee D.A. and Moore D.H. Validation of chromosome painting. II. A detailed analysis of aberrations following high doses of ionizing radiation in vitro // International Journal of Radiation Biology. 1995. - V.67. -№1. — P.19-28.

365. Tucker J.D., Morgan W.F., Awa A.A. et al. A proposed system for scoring structural aberrations detected by chromosome painting // Cytogenetics and Cell Genetics. 1995. - V.68. - P.211-221.

366. Tucker J.D., Moore D.H. The importance of age and smoking in evaluating adverse cytogenetic effects of exposure to environmental agents. // Environmental Health Perspectives. 1996. - V.l 04. -P.489-492.

367. Tucker J.D. Sensitivity, specificity and persistence of chromosome translocations for radiation biodosimetry // Military Medicine. 2002. - V.l67 (2 Suppl.)-P.8-9.

368. Tucker J.D., Cofield J., Matsumoto K. et al. Persistence of chromosome aberrations following acute radiation: I. Paint translocations, dicentrics, rings, fragments and insertions // Environmental and Molecular Mutagenesis. -2005. V.45. - P.229-248.

369. Tucker J.D. Low-dose ionizing radiation and chromosome translocations: A review of the major considerations for human biological dosimetry // Mutation Research. 2008. - V.659. - №3. - P.211-220.

370. Ueno A.M. et al. Induction of Cell Killing , Micronuclei, and Mutation to 6-Thioguanine Resistance after Exposure to Low Dose-Rate y-rays and Tritiated Water in Cultured Mammalian Cells // Radiation Research. 1982. -V.91, P.447-456.

371. Ujeno Y. Relative biological effectiveness (RBE) of tritium P rays in relation to dose rate // Health Physics. 1983. - V.45. - P.789-791.

372. United Nations. Sources, Effects and Risk of Ionizing Radiation.United Nations Scientific Committee on the Effects of Atomic Radiation, 1988, Report to the General Assembly, with annexes. United Nations, New York, 1988

373. UNSCEAR, 2000 Report to the General Assembly. Annex J. Exposure and effects of the Chernobyl accident // International Journal Radiation Medicine. -2000. Special issue 2-4 (6-8). -P.3-109.

374. Upton A.C. Radiation hormesis: data and interpretations // Crit. Rev. Toxicology. 2001. -V.31. - №4-5. - P.681-695.

375. Venkatachalam P., Solomon F.D.P., Mohankumar M.N. et al. Higher frequency of dicentrics and micronuclei in peripheral blood lymphocytes of cancer patients // Mutations Research. 1999a. - V.425. - P. 1-8.

376. Vennart J. The quality factor for low-energy beta-emitters // Health Physics. 1968. - V.14. - №6. -P.541-548.

377. Verschaeva L., Domracheva E.V., Kuznetsov S.A., Nechai V.V. Chromosome aberrations in inhabitants of Byelorussia: consequence of Chernobyl accident. / Mutation Research. 1993. - V.287. - P.253-259.

378. Vijayalaxmi, Evans H.J. In vivo and in vitro effects of cigarette smoking on chromosomal damage and sister chromatid exchange in human peripheral blood lymphocytes // Mutation Research. 1982. - V.92. - P.321-332.

379. Vulpis N. The induction of chromosome aberrations in human lymphocytes by in vitro irradiation with particles from tritiated water // Radiation Research. 1984. - V.97. - P.511 — 518.

380. Wahab M.A., Nickless E.M., Najar-M'Kacher R. et al. Elevated chromosome translocation frequencies in New Zealand nuclear test veterans // Cytogenetic Genome Research. 2008. - V.121. - P.79-87.

381. Walker J. Samuel. Three Mile Island: A Nuclear Crisis in Historical Perspective. / Berkeley: University of California Press, 2004. 231 p.

382. Wang Z., Boice J.D., Wei L., Beebe G.W. et al. Thyroid modularity and chromosome aberrations among women in areas of high background radiation in China // Journal National Cancer Institute. 1990. - V.82. - №6.

383. Whitehouse C.A., Edwards A., Tawn EJ. et al. Translocations yield in peripheral blood lymphocytes from control populations // International Journal of Radiation Biology. 2005. - V.81. - №7. - P. 139-145.

384. WHO. Method of human chromosome aberrations analysis. / Eds. K.Buckton. Geneva, 1976. - 64p.

385. Wild C.P., Law G.R., Roman E. Molecular epidemiology and cancer promising areas for future research in the post-genomic era // Mutations Research. 2002. - V.499. - №1. - P.3-12.

386. William W.Au., Walker D.M., Ward J.B. et al. Factors contributing damage in lymphocytes of cigarette smokers // Mutation Research. 1991. - V.260. -P. 137-144.

387. Wolf G., Obe G., Bergau L. Cytogenetic investigations in flight personnel // Radiation Protection Dosimetry. 1999. - V.86. - №4. - P.275-278.

388. Wong F.L., Yamada M., Sasaki H. et al. Noncancer diseases incidence in atomic bomb survivors: 1958-1986 // Radiation Research. 1993. - V.135. -P.418-430.

389. Zaire R., Griffin C.S., Simpson P.J., et al. Analysis of lymphocytes from uranium mineworkers in Namibia for chromosomal damage using fluorescence in situ hybridization (FISH) // Mutation Research. 1996. - V.371. -№1-2. — P.109-113.

390. Zhang W., Wang C., Chen D. et al. Effect of smoking on chromosomes compared with that of radiation in the residents of a high-background area in China // Journal of Radiation Research. (Tokyo). 2004. - V.45. - №3. -P.441-446.

391. Zhou X.Y. et al. Experimental Study on RBE of Tritium and Risk Estimates of Genetic Damage // Chinese Medical Journal. 1989. - V.102. -№11. -P.872-878.

Информация о работе

Снигирева, Галина Петровна
доктора биологических наук
Москва, 2009
ВАК 03.00.01

Диссертация

Последствия воздействий ионизирующих излучений: цитогенетические изменения в лимфоцитах крови человека - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы