Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Парамагнитные параметры крови человека, работающего во вредных условиях

ВАК РФ 03.00.16, Экология

Автореферат диссертации по теме "Парамагнитные параметры крови человека, работающего во вредных условиях"

л 5 9 7

Чт "форж'

АГЕНТСТВО БИОИНФОРМАТИКИ И ЭКОЛОГИИ ЧЕЛОВЕКА

На правах рукописи

УДК 54а 422. 27+ 616.151+613. 63

СОБОЛЕВА Мария Вадимовна

ПАРАМАГНИТНЫЕ ПАРАМЕТРЫ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА, РАБОТАЮЩЕГО ВО ВРЕДНЫХ УСЛОВИЯХ.

(03.00.16 - экология)

Автореферат Диссертации на соискание ученой степени . кандидата биологических наук

Москва - 1991

Работа выполнена в Ордена Ленина Институте химической физики им. Е Е Семенова АН СССР

Научный руководитель - доктор физико-математических наук профессор Л. П. Кашин

Официальные оппоненты: доктор биологических наук Григорян Г. Л.

кандидат биологических наук Комаров А.М.

Ведущая организация: Биологический факультет МГУ им. М. Е Ломоносова кафедра биофизики

Защита диссертации состоится " ^ " июня 1992 года в II час. 00 мин. на заседании Специализированного Совета Д. 170.01.01 при Агентстве биоинформатики и экологии человека ШК> "Форум" по адресу: 117342, Москва, ул. Бутлерова, 15*

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Агентства биоинформатики и экологии человека.

Автореферат разослан " 6 " мая 1992 г.

Ученый секретарь

Специализированного Совета

доктор физ.-мат. наук- Добряков С.Е

', !

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность. Задача экспресс-оценки состояния здоровья человека при работе с профессиональными вредностями возникает в связи с проблемой повышения безопасности работающих ч увеличения эффективности использования трудовых ресурсов. Традиционные средства, используемые при профессиональных медицинских осмотрах, не отвечают сегодняшнему уровню требований. . Поэтому ведется интенсивный поиск и внедрение новых методов. Один из них - изучение крови методом электронного парамагнитного резонанса ( ЭПР ).

Кровь является тканью, наиболее доступной для биопсии. Она подвергается широким исследованиям на предмет обнаружения изменений, свидетельствующих о нарушении здоровья человека, с привлечением самых различных, имеющихся на вооружении у медицины и биологии методов исследования.

Простота отбора проб делает метод ЭПР в применении для анализа крови уникальным при контроле и оценке состояния здоровья человека.

• Спектры ЭПР содержат уникальную информацию об . электронном состоянии парамагнитной структуры и о динамике молекулярной среды. Надо отметить, что парамагнетизм биологических структур может бьггь эндогенного и экзогенного происхождения. В первой случае он возникает благодаря обме'ну вещэств и связан прежде всего с окислительно-восстановительными реакциями метаболизма. Во-втором - парамагнетизм возникает в структуре.из-за действия парамагнитных продуктов окружающей среды, действия ионизирующего излучения, введения в биологический объект специальных парамагнитных маркеров, изменения парамагнитного состояния таких ионов как железо, медь, марганец, кобальт, молибден, ванадий.

Мэтод ЭПР пока не нашел широкого распространения в медико-био-

- г -

логической практике. , Это вызвано, главным образом, сложностью об] ботки данных, их интерпретацией, недоступностью для неспециалистс Однако в настоящэе время уже имеется значительный задел и в теорем ческом и в техническом аспектах, позволяющих' считать перспектив* применение ЭПР - спектроскопии для. анализа спектров ЭПР крови люде работающих во вредных условиях. Актуальным является решение задачи соотношении характеристик спектров ЭПР крови с традиционными клин ческими показателями, снимаемых менее технологичными ( с точки зр ния автоматизации) методами и оценки на основании парамагнитных х рактеристик состояния здоровья обследуемых.

Тема диссертационной работы соответствует плану научно-иссж довательских. работ, проводимых в ИХФ АН СССР им. Е . Н Семенова выполненными с соответствии с постановлением ЦК ЫЮС и СЫ СССР 137-47 от 27.10.86. "

Дель работы состояла в анализе парамагнитных свойтв крови лк дей, работающих во вредных для здоровья условиях, и определении воа можности использования ЭПР - спектроскопии для характеристики состо я ния организма человека.

Задачи исследования:.

- разработать методы анализа крови при помощи ЭПР - спекгроско пии при массовых ос мэтрах и при осмотрах в клинических условиях;

- применить ыалшнно -статистические • методы, для сопоставлени данных ЭПР - спектроскопии с показателями состояния человека используемыми в медицине:

- оценить информативность парамагнитных свойств крови для оценки состояния здоровья человека;

- оценить влияние работы во вредных условиях ( пыль кремния, углеводородные волокна и эпоксидные смолы , напыление тяжелых металлов, контакт с бериллием) на парамагнитные свойства крови человека.

, работающего в этих условиях.

Научная новизна.

- Впервые'ЭПР - спектроскопия использована для оценки состояния парамагнетизма крови человека, работающего в контакте с бериллием;

- Возможности ЗПР - спектроскопии были применены при профилактических осмотрах и в клинических условиях. Выявлено, что параметры парамагнитных спектров крови являются информативными и могут служить интегральной характеристикой состояния человека; '

- Показана эффективность применения машинно-статистических методов для сопоставления показателей парамагнитных характеристик крови и клинических данных .

Практическое значение работы заключается- в установлении перспективности применения ЭПР - спектроскопии в клинике и при массовых профилактических осмотрах и эффективности корреляционного анализа данных клинических и спектроскопических измерений.

Апробация работы. Основные результаты и отдельные положения работы доложены на Всесоюзном семинаре "Оптические зеркала из нетрадиционных, материалов" (Ленинград, 1990), на УШ Всесоюзной конференции " Магнитный реэонанс в биологии и медицине" (Звенигород, 1990), ка 1У Шдцунорадном семинаре по проблеме "Вэриллий"( Ленинград, 1991).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 10 работ.

■ Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, 1У глав,.заключения, выводов, списка литературы п приложения.

ГЛАВА 1. ПАРАМАГНИТНЫЕ ЦЕНТРЫ КРОВИ ЧБЛОВЕКА (обзор литературы).

Приводится обзор литературных данных по исследованию крови методом ЭПР .

Как объект исследования методом ЭПР, кровь удобно рассматривать

как смесь трех различных компонентов: плазмы, красных кровяных клеток или эритроцитов и белых кровяных клеток . Физиологически эти трз составляющих крови, безусловно, взаимодействуют и представляют собо! единую систему, но их парамагнитные центры являются достаточно независимыми друг от друга, взаимодействуют между собой незначительно I могут рассматриваться отдельно.

Основными парамагнитными центрами плазмы являются церулоплаз-мин, содержащий медь и трансферрин, в состав которого входит железо. Кроме того, в плазме представлены свободнорадикальные центры, являющиеся семихинонными формами некоторых коферментов крови, а также свободнорадикальные состояния аскорбиновой кислоты. Первые два центра широко исследованы при изучении их структуры и свойств в модельных системах, а также в аспекте изменения их содержания в плазме * цельной крови при различных патологических состояниях организма.

Метод ЭПР широко применялся для исследования гемоглобина. Расшифровка структуры и функции этого белка и особенно его простатической группы была достигнута благодаря применению метода ЭПР.

В обзоре дана детальная характеристика свойств парамагнитных центров крови человека. Отмечено, что в литературе рассматриваются, главным образом, спектры ЭПР крови больных людей.

Анализ литературы позволил составить сводную таблицу метаболических парамагнитных центров крови человека и животных в норме и пру патологии (табл.1).

Таким образом, анализ литературных данных позволяет сделать вывод о перспективности применения ЭПР - спектроскопии парамагнитных центров крови (церулоплазмина,- трансферрина, гемоглобина и свободных радикалов) для оценки состояния здоровья человека

Табл. 1.

Метаболические парамагнитные центры в крови человека и животных в норме и при патологии.

ПАРАМАГНИТНЫЕ ЦЕНТРЫ

Метгемоглобин Трансферрин

Церулоплазмин

Радикалы аскорбиновой кислоты

Радикалы "несвязанного" адреналина

Свободно-радикальные центры типа 1 (активныые гормон-ре-цепторные комплексы, акти-виров синтез цАМФ)

Свободно-радикальные центры типа 2 (блокатор-рецепторные комплексы, подавлен синтез цАШ)

Радикалы адренохррома

"Свободное" далезо Fe-гатном состоянии

в агре-

Нитрозильные комплексы гембел-ков Hb-Fe N0

Нитрозильные комплексы железо-серусодержащих белков, ЖСБ-NO

Комплексы СОД I Си - НО I Церулоплазмин | Си - НО |

РАДИОСПЕКТРОСКОПИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ

£Гх - 6. О

анизотропный сигнал - 4. 3, g„ - 9. 3

s± - 2.056, g„ -2.209

при 77 К синглет Н = 0,8 мТ

ст в 2 0057 при 300 К* дублет с а - 0,18 мТ

при 77 К синглет Н =- 0,57 мТ g = 2. 003

синглет. Н - 1,4 мТ g„ - 2. 003

синглет, Я - 0,8 мТ g„ - 2.009

синглет. Н - 0,9 мТ g„ - 2.003

•окий синглет, " МТ.-е - 2.3 - 2.4

анизотропный сигнал с триплетной сверхтонкой структурой, бцентр — 2.01 а - 1,4 мТ

анизотропный сигнал г - 2.03

gx - 2.01, g„ - 2.03

ГЛАВА П. ВРЕДНЫЕ ПРОИЗВОДСТВЕННЫЕ ФАКТОРЫ (обзор литературы).

Приводится обзор литературных данных по путям проникновения в организм и влиянию на здоровье работающего вредных условий производственной среды ( контакт с бериллием, пыль кремния, углеводородные волокна и эпоксидные смолы , напыление тяжелых металлов ).

Бериллий - химический элемент, обладающий высокой биологической активностью и токсичностью. Во всех его соединениях, как растворимых, так и нерастворимых, поражающим объектом в биологическом действии является . ион бериллия. Бериллий и его соединения действуют поливалентно: они обиетоксичны , обладают аллергическими, канцерогенными и эмбриогенными свойствами. Кроме того, для растворимых соединений в целом характерно первичное раздражающее действие. Все это определяет своеобразие развития и характера поражений, вызываемых бериллием.

Из-за токсичности бериллия были установлены достаточно низкие нормы его содержание в воздухе.

Схема щгсей проникновения и распределения бериллия в' организме приведена на рис.1.

РИС.1, схема путейрп^ове^распределения

Отличительной особенностью бериллиоза является отсутствие корреляции между дозой воздействующего вещества и возможностью возник-

новения заболевания. Возникновение заболевания сильно связано с сопутствующими факторами: с какой-либо стрессовой ситуацией, перенесенной инфекцией, тяжелой операцией, нервно-эмоциональной нагрузкой, родами .

Заболеваемость силикозом (заболевание, вызываемое пылью кремния) находится в прямой зависимости от количества вдыхаемой пыли и содержания в ней свободной двуокиси кремния. Наибольшей агрессивностью обладают мелкие частицы , которые, попадая в глубокие разветвления бронхиального дерева, достигают легочной паренхимы и задерживается в ней. Наряду с размерами частиц имеет значение и масса пыли. В основе цитотоксического действия кварцевой частицы лежат сложные биохимические и энзимные механизмы. Электронно-обменный характер взаимодействия двуокиси кремния со структурными компонентами мембран дает основание полагать, что особое значение для развития силикоза имеет свободно-радикальная реакция.

Эпоксидные смолы обладают сенсибилизирующими свойствами и могут вызывать аллергические заболевания кожи (аллергический дермит, экзема) , реже - другие аллергозы, в частности бронхиальную астму.

Твердые сплавы в порошковой металлургии изготовляются главным образом из карбида вольфрама и кобальта, в состав сплавов могут также входить титан, молибден, никель, хром, тантал и др. Однако патогенные эффекты более всего приписываются кобальту.

При хронической интоксикации кобальтом наблюдают нарушения со стороны органов дыхания, проявляющихся в нарушении обоняния. В наиболее тяжелых случаях отравление проявляется в виде хронического бронхита. Наблюдаться нарушения аппетита, изменения в крови: зрит-роцитоз, повышение количества гемоглобина, ретикулоцитов, реже анемия. Возможны нарушения печени. Кобальт относят к подозреваемым канцерогенам.

На основе литературных данных, приведенных во второй глав можно сделать вывод о том, что влияние вредных производственных фа торов на организм человека может быть обнаружено на основе изменен парамагнитных свойств крови человека, работающего в этих условиях.

ГЛАВА III. МЕТОДЫ И МАТЕРИАЛЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Для определения основных парамагнитных характеристик, кровь ш ловека , полученную из кубитальной вены (2,5 смЗ ) после добавлен] 0,1 мл гепарина центрифугировали для разделения на фракции красной белой крови. Затем плазму и эритроцитарную массу заливали по 0,5 i в специаьные тефдоновые пресс-формы м замораживали в жидком азоте.

Для записи спетров ЭПР замороженный образец выдавливали i пресс-формы и помещли в кварцевый сосуд Дыоара. Запись спектр< производили на радиоспектрометре ЛАРС ЭПР. ЭПР-спектрометр бит coi ряжен с персональным компьютером IBM PC XT/AT.

С помощью специализированного пакета программ "EPRO" вычисля. количество парамагнитных центров крови и их g-фактор. Правильное: расчета g-факт opa контролировали при помощи стандартизированного oí разца оксида марганца: Еа рис. 2 приведены исследуемые ЭПР-спект] крови.

Рис.2. Регистрируемые ЭПР - спектры крови, а - метгемоглобин б - транеферрин в - церухоплазмин г - свободные радикалы

Для обработки и анализа данных; полученных методом ЭПР , а такие для их сопоставления с клиническими исследованиями использовали пакет статистических прикладных программ "STATGRAF" v. 3.0, адаптированных для персональных компьютеров IBM PC XT/AT.

Нровь для анализа брали у следующих групп работников (табл.2):

Обследованные группы работников.

Табл. 2

NN п/п . Место исследования Дата Количество людей Примечания

1 новый Бор сентябрь 41 Профессиональный осмотр, щкрмрши специалистами

2 новйй Бор ш0рь 27 (из них 20 _ человек из 1 группы) Профессиональный осмотр, пЩёолймьш специалистами

3 ПШЧ N 119, г.химки январь- та .23, из них: 10 - сахарный „ диабет 3 - терапевтические больные 10 - Больные с ангио-патиями Больные, находящиеся на лечении

4 НПО,"Композит. г. Калининград ?8§8рь 103, из них: 37-мужчины „работ, с ТЗе 6 - мужчины плавилыци ки- 35 - .женподы „..работ. с Т5е 35 - контрольная гр. Еро&ссиональный осмотр. ЩюводишМ^пшшалистащ ийститута^Биойгаики Минздрава РСйСР.

5 ргра Петербург. сещ^рь -ш 132, из них: _ _ 27 - контакт с пылью 5Ю " с углеродными волокнами 10 - контакт с дылью тяжелых металлов 5 - контакт-с Ве • 2 - контакт с пылью А1 и лазерным из 3 - кгшгаетИс пылью БЮ и синт. смола 34 - вольные с бериллиевого произволе 10 - Зольные с уранового производства

ГЛАВА 1У. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. По материалам, собранным во время проведения профессионального осмотра в Сосновом Бору в 1989 и 1900 г. г., при анализе содержания

свободных радикалов и парамагнитных центров церулоплазмин; трансферрина и метгемоглобина наблюдается значительный разброс в в< личине содержания парамагнитных центров по отношении к количестз свободных радикалов у лвдей, прошедших профосмотр в разные годы, то же время аналогичные отношения для трансферрина и свободных рад! калов в пределах ошибки среднего не меняются.

Был проведен анализ формы гистограмм (рис.3) распределения сс держания парамагнитных центров для церулоплазмина, трансферриш свободных радикалов и метгемоглобина . Содергание параыагнитш центров церулоплазмина имеет распределение, близкое по форме к но{ мальному, трансферрина - полозштельно-ассиметричную форму, тогда кг свободные радикалы и «зтгемоглобин - вырожденную положительно-ас« метричную форму. 4ориа гистограмм оставалась постоянной для грут обследованных в разные годы. _

А Б В Г

Рис. 3. Гистограммы частотного распределения количества парамагнитных центров церулоплазмина (А), трансферрина СБ), свободных радикалов (В) и метгемоглобина ГГ) среди обследованных в ходе профессионального осмотра в Сосновом Еооу._х - обследованные в 1989 г. , и - обследованные в 1990 Г. ,■» и 5 -соответственно обследованные в 1989 и 1990 г.г. (20 чел.).

- и -

В случае больных с ангиопатияки низала конечностей (ЦМСЧ N 119,

г.Хтки) установлено (табл.3), что лазерное облучение крови влияет на изменение содержания свободных радикалов ( уменьшает в 1,6 раза ) и метгемоглобина ( увеличивает в 1,9 раза). Гемолиз крови существенно изменяет содержание парамагнитного церулоплазмина ( увеличивает в 4,6 раза ), не столь значительно изменяет количество метгемоглобина ( увеличивает в 2,4 раза) и почти не влияет на содержание свободных

радикалов ( имеется тенденция к уменьшению-) и трансферрина

* Табл. 3.

Средние значения и ошибка среднего количества парамагнитных центров свободных радикалов/^ Церулоплазмина, трансшеррина и метгемоглобина в группе боЛшнйх ангиопатиямйи нижних конечностей ( 10 человек^:

видл воздействия количество парамагнитных центров св. радикалов количество парамагнитных центров церулоплазмина количество парамагнитных центров трансферрина количество парамагнитных центров мет-' гемоглоьина

до воздействия 165+30 12577+1783 27060±3495 32331+ 8367

гемолиз крови 161±19 53472+4538 30941±3477 78515+ 9262

лазерное облучение крови 102+11 14130+1588 28240±3392 59914+10677

Как видно (табх 4), на изменение соотношений количества парамагнитных центров влияет гемолиз крови. В то же время лазерное облучение крови влияет только на изменение отношений содержания парамагнитных центров церулоплазмина к свободным радикалам, метгемоглобина к це руло плаз мину и метгемоглобина к свободным радикалам.

^ Табл.4

Значения отношений количества парамагнитных центров церулоплазмина 7 свободных .радикалов ЧТКСРТ. ^церулоплазмина / транстеррина ГП/Т1, трансшеррина / свободных радикалов СТ7СРТ. метгембглорйна. 7 цертаоплазмина ГЩДУ1лметг§шглоои-на /.трансферрина Гщт) и метгемоглооина / свббодных радикал ^д | группе больных ангиопатиямии нижних конечностей

видл воздействия Ц/СР Ц/Т Т/СР М/Ц м/т М/СР

до воздействия 8:5* 8:9 ^

гемолиз крови 1:8* 2§8+- И ± 8:84

лазерное облучение крови 1!6± 8:?± 41

Гистограмма распределения парамагнитных центров церулоплазм! имеет форму с положительной ассиметрией. Лазерное облучение крови влияет на форму распределения, тогда как гемолиз приводит к тоь что распределение становится ближе к нормальному. Для трансферина воздействия гистограмма имеет двухвершинное, близкое к нормально распределение. Шсле лазерного облучения крови пропадает первый m распределение становится более похожим на нормальное, с незначите: ной отрицательной ассиметрией. Гемолиз крови приводит к исчезнове* второго пика, распределение также становится почти нормальным, не незначительной положительной ассиметрией. Лазерное облучение кров* гемолиз крови не приводит к изменению превоначальной формы распред ления содержания свободных радикалов. Если до воздействия гистогрг ма парамагнитных центров метгемоглобина имеет форму вырожденно-по! жительно ассиметричного распределения, то после лазерного облучен крови оно становится близким к нормальному распределению, ассиметр ей. Гемолиз крови приводит к значительному изменению формы распред ления - оно пробретает отрицательную ассиметрию.

Следует отметить, что зависимо от первоначального (до во действия) количества парамагнитных центров после воздействия измен югея следующие характеристики: содержание церулоплазмина ( после л зерного облучения)трансферрина ( после лазерного облучения'и ген лиза крови) и метгемоглобина (после гемолиза крови). Во всех случ ях, кроме метгемоглобина, изменения имеет положительный коэффицие корреляции.

Для больные сахарньы диабетом (ЦЫСЧ N 119, г.Химки) при анали изменений средних значений количества парамагнитных центров свобо ных радикалов, церулоплазмина, трансферрина и метгемоглобина моя отметить однонаправленные сдвиги в их значениях для свободных'рад калов и метгемоглобина при гемолизе крови и ее лазерном облучени

При гемолизе крови наблюдается меньшее изменение содержания свободных радикалов ( уменьшение в 1,6 раза ) по сравнению с~лазерным облучением ( уменьшение в 2 раза ). тогда как содержание метгемоглоби-на изменяется при гемолизе больше (увеличивается в 1,6 раза), чем при лазерном облучении крови (увеличивается в 1,5 раза). Значение количества парамагнитного церулоплазмина незначительно увеличивается ( в 1,1 раза) при лазерном облучении крови, гемолиз же никак не влияет на количество этого белка в- крови. При гемолизе наблюдается уменьшение ( в 1,2 раза) содержание трансферрина. Лазерное облучение крови на этот показатель не влияет.

Наибольшее влияние на отношения содержания парамагнитных центров (табл. 5) в крови оказывает гемолиз . После лазерного облучения крови изменения наблюдаются в меньшем количестве случаев, но их амплитуда более значима.

воздей- Ц/СР ц/т Т/СР ы/ц м/т ■ и/СР

до воздействия а* 8:94 1:9*

гемолиз крови 8:2± ?:В±

лазерное облучение крови щ ± 8:е± в+- ш

При анализе зависимости между венозным давлением в левой руке, в левой и правой ногах и изменением количества парамагнитных центров церулоплазмина, трансферрина, свободных радикалов и метгемоглобина отмечаются зависимые изменения в содержании метгемоглобина после лазерного облучения крови ( изменения количества однонаправлены с из-лененими давления ) и в содержании церулоплазмина после гемолиза срови ( изменения разнонаправлены с изменением давления ).

При анализе отношения давления в левой руке, левой ноге и правой ноге и отношений количества парамагнитных центров ( церулоплаз-мин / трансферрин, церулоплазмин / свободные радикалы, метгемоглобин / церулоплазмин, метгемоглобин / трансферрин и метгемоглобин / свободные радикалы)-, можно отметить, что изменений не наблюдается не зависимо от вида воздействия. ' - ■

2 случае терапевтических больных (ЦМСЧ К 119, г. Хижи) в качестве примера отметим, что после гемолиза крови у одного из больных с осложнением в виде ангиопатии нижних конечностей (Б1) из этой группы меняется интегральная интенсивность сигнала ЭПР свободных радикалов - возрастает в три раза Бри этом увеличивается и ошибка среднего. Это можно объяснить тем, что после каждой из процедур содержание свободных радикалов меняется в различной степени. Содержание парамагнитного церулоплазмина не меняется в зависимости от вида

г1

воздействия и колеблется в пределах среднего значения до воздействия. Шсле лазерного облучения крови происходит изменение' содержания трансферрина Оно' увеличивается в 1.5 раза: Наиболее мобильным,. в зависимости от воздействия, оказалось содержание метге-моглобина Так, после теыолиза крови происходит увеличение среднего содержание этого белка в 1.6 раза, а после, лазерного облучения -увеличение в 3.4 раза ' " .

Цри анализе отношений ( табл.6 ) содержания парамагнитных центров церулоплазмина / трансферрина (Ц/Т), церулоплазмина / свободных радикалов (Ц/СР), церулоплазмина / метгемоглобина (Ц/М), трансферрина ' / свободных радикалов (Т/СР),' трансферрина / метгемоглобина (Т/Ы), метгемоглобина / свободных радикалов (Ы/СР) следует отметить, что у больных с ангиопатиями нижних конечностей (Б1 и Б2) после гемолиза крови отношение Ц/СР уменьшается в 2 раза, тогда как лазерное облучение крови незначительно увеличивает это значение. У терапевти-

\

■ Табл.6.

Значения отношений содержания парамагнитных центров церулоп-лазмина/свободных. радикалов /ТшСР). уерулоплаамна/ трансферрина ГЦ/Т), трансф^рина/свободных радикаловТт/СРГ, не вулоплаз мина/ме т ге мог лобина Гп/Щ,, метгемоглоби-РжЕдансферрина ГИ/Т) и^метгемоглобина/свободных радикалов Гм/СРГ уЧ?ерапевтячесКих больных.

Возщйст- Ц/СР . Ц/Т Т/СР ц/м ы/т М/СР

до воздей ствия III m ) 1 * V » V ШШ ш §:| »н J t с* М

гемолиз крови . 1Й1 ш 111 № 9 ? 9 Л ш

лазерное облучение крови 18! Ш 9 1 • 9 1 • И Ш! ш 1:1 4W

ческого больного без осложнений в виде ангиопатии (БЗ) это отношение в пределах среднего значения не изменяется. Отношение Ц/Т у трех больных не зависит от вида воздействия и не меняется по сравнению со значением до воздействия. У Б1 и Б2 гемолиз крови значительно уменьшает значение отношение Т/СР (в 3,5 и в 1,9 раза соответственно), тогда как лазерное облучение приводит к незначительному увеличению этого значения ( в 1,4 раза). Проведение процедур влияет однонаправ-ленно на-значение отношения Т/СР у БЗ и приводит к уменьшению в 4,3 раза. Отношение Ц/М у больных с ангиопатиями увеличивается как после гемолиза крови, так и после лазерного облучения. У больного без осложнений.в виде ангиопатии нижних конечностей только лазерное облучение крови приводит к изменению. значения отношения Ц/М - оно .уменьшается в 1,7 раза. Изменения отношения М/Т не зависит от типа заболевания. У всех трех больных гемолиз крови приводит к значительному уменьшению значения отношения М/СР. Однако лазерное облучение крови у Б1 и Б2 привод к значительному увеличению этого отношения, тогда как у БЗ наблюдается значительное уменьшение значения отношения М/СР.

■Цри проведении прсфосмотра ка НПО "Композит" (г. Калининград) выяснено, что содержание парамагнитных центров церулоплазмина,

трансферрина, метгемоглобина и свободных радикалов в группе женщин, контактировавших с бериллием, среднее содержание всех парамагнитных центров является наиболее вариабельным". Количество церулоплазмина в общей контактной группе по сравнению с общим контролем увеличивается в 1.6 раза При анализе по контактировавшим с бериллием группам по сравнению с соответствуюей группой контроля наибольшее увеличение наблюдается у женщин С в 1.6 раза), затем следует группа мужчин, занятых плавкой . беридлиевой бронзой ( в 1.2 раза). В группе мужчин, работающих в контакте с бериллием, изменение содержания церулоплазмина практически отсутствует (наблюдаемое увеличение в 1,1 раза можно отнести за счет ошибки среднего). Количество трансферрина во всех анализируемых группах изменяется очень незначительно, но можно проследить тенденцию к уменьшению его содержания, причем наиболее существенную ( в 1.1 раза) в группе контактировавших с бериллием женщин. Среднее значение содержания свободных радикалов при контакте с бериллием изменяется не столь однозначно. В группах контактировавших с бериллием мужчин и женщин наблюдается уменьшение значения этой величины, причем в группе мужчин - достоверное при анализе по критерию Стьюдента ( в 1.6 раза). В группе мужчин, работавших на плавке бронзы, происходит незначительное увеличение ( в.1.14 раза) содержание свободных радикалов. Количество метгемоглобина в крови при контакте с бериллием также меняется неоднозначно. Так, в группе контактировавших с бериллием женщин 'наблюдается уменьшение содержания в 1.2 раза, тогда как во всех обследованных группах мужчин - тенденция к увеличение, причем в группе занятых у печей она более значительна С в 1.1 раза по сравнению с 1.06 ).

Следует отметить (табл.7), что все контактировавшие с бериллием группы, за исключением мужчин - плавильщиков,, имеют большее, по сравнению с соответствующей контрольной группой, значение, отношение

Значения отношений содет лазмина / свос-------

яа лов

ррина группа

Вансшеррина / I церулбплазмина и метгемоглобина / < шедших профосмотр на

плазмина /

кол-во людей в группе Ц/СР ц/т Т/СР М/Ц Ы/Т М/СР

все, работайте в контакте с бериллием 78 °о?о{ ад

общий контроль 25 6?5± ад ад

хеншины.работающие в контакте с бериллием 35 Чг+- 2§1 4 Уз1 ад

женщины из. контрольной ■ группы 16 5?2+- °0203 ад

мужчины, работающие в контакте с бериллием 37 ад. 2§|± ад ад 7?2±

мужчины-пла вйлышки.за нятые на производстве.берилли-вой бронзы 6 43?± ад ад- ад ееб±

мужчины изл контрольной группы 9 ад Щ* ад ад

церулоплазмина / свободным радикалам. В то же время отношения церу-.лоплазмин / трансферрин и метгемоглобин / трансферрин не зависят от наличия контакта с бериллием. Значение отношения метгемоглобина / церулоплазмина отличается в группе женщин, работавших в контакте с бериллием, от соответствующего значения контрольной группы женщин. Группа мужчин, занятых на производстве бериллиевой бронзы, сильно отличается от контрольной группы значениями отношений трансферрин /свободные .радикалы и церулоплазмин / свободные радикалы.

Гистограммы частотного распределения' (рис.Ь) парамагнитного церулоплазмина в общей контрольной группе и в группе контроля женщин близка по форме к нормальному распределению, тогда как у всех контактировавших с бериллием групп форма распределения отличается от нормального . Гистограммы трансферрина в общих группах ( в группе

1

щ:

ж

■]Ря-

ни

т 1

и

сЕ

РЬ-

Щ

гщ

1

тР

IV!"

г

т.г „п

1 и

ШГа~

А'

Рис. 4. Гистограмма частотного ных центров цес ных радикалоз

ходе профессЕонального осмотра стограмма - соответствующая контр

ва парамагнит-. СБ), свооод-обследованных в мпозит". Верхняя ги-|Ная группа, нижняя

па людей, работающих в контакте с бериллием.I- все, прошедшие осмотр, л - гужчины, Е-- "плавильщики"оериллиевой бронзы, Ту-- женщины.

контактировавших с бериллием и контрольной группе) имеют форму, близкую к нормальной. При этом следует отметить, что в группе контактировавшие с бериллием женщин пика два, тогда как в контрольной группе 'женщин пиков три. Гистограммы парамагнитного трансферрина у мужчин имеет распределение с положительной ассиметрией. Гистограмма распределения содержания свободных радикалов 'общей группы работавших с бериллием имеет положительную симметрию, пик сдвинут в область меньших значений ш сравнению с пиком группы общего контроля, тогда как гистограмма частотного распределения этого сигнала группы жен-

щин, работавших в контакте с бериллием, имеет форму, близкую к нормальному распределению, и два пика. Причем значение первого пика совпадает со значением первого пика контрольной группы женщин, а

второй пик сдвинут в сторону меньших значений по сравнению со вторым 1

пиком контроля. Гистограмма частотного распределения содержания свободных радикалов у группы мужчин, работавших в контакте с бериллием, имеет сильно сжатую форму по оси абсцисс, близкую к нормальному распределению. Пики распределений Есех групп мужчин не совпадают по своим значениям. Наименьшее значение - в группе контроля, затем -работавшие в контакте с бериллием. Наибольшее значение имеет пик в группе мужчин - плавильщиков. Гистограммы частотного распределения метгемоглобина всех обследованных групп имеют форму с' положительной симметрией и несколькими пиками (общие группы - по два пика, женщины, и мугсчины - по три). Общие группы имевших контакт с бериллием и не имевших его имеют одинаковые по значениям пики, причем еслл в группе контактировавших с бериллием женщин первый пик совпадает по значению с первым пиком группы контрольных жешзш, то у группы контактировавших мужш и у группы кулжгн, занята на плавке бериллиевой бронзы, пики совпадают по своим значениям, но не совпадают по' значению с пиками группы контрольных мужчин.

Для обследоЕанюа в клинике НИН ГИГ' установлено, что содержание церулоплазмина достоверно ниже в грушах 1 и 2 ( контакт с пылью кремния и пылью углеводородных волокон и эпоксидными смолами). При анализе средних значений количества трансферрина в крови можно разбить полученные данные по группам на три. В первую (колебания от 28000 до 40000 условных.единиц) входят группы 1, 4 и 7 (контакт с пылью кремния и с бериллием), во вторую (среднее значение колеблется от 17000 до 27000 условных единиц) - 2 и 3 группы (напыление тяжелых металлов и контакт с пылью углеводородных волокон и с эпоксидными

смолами) и в третью (средняя от 13000 до 21000 условных единиц) входит 8 группа (больные из Краснокаменска - контакт с ураном). Содержание свободных радикалов достоверно меньше в группах 2 и 8 (контакт с пылью углеводородных волокон и эпоксидных смол и с ураном). Анализ количества метгемоглобина разбивает группы по другому: в первое объединение входят 1, 7 и 8 группы (контакт с пылью кремния, бериллием и ураном); во второе объединение - 2 и 3 группы (контакт с углеводородными волокнами и эпоксидными смолами и работа по напылению тяжелых металлов). Четвертая группа не входит ни в одно из объединений , т.к. благодаря своей большой ошибке (501 от среднего) может быть от-

~ ' Табл.8.

Значения отношений содержания парамагнитных центров церулоп-, лазмива__7_.свородных радикадовдТРСР!, _ _ц&рулбплазмйна_ /

* лансшеоБина 1м/п и метгемоглпоина / евооолных пап____

кли-

нике

на /.трансферрина (м/Т) и метгемоглооина / свободных радикалов (ЩЕРГв группе прошедших обследование и лечение в г~"

N вредности Кол-во лю|еи группе Ц/СР Ц/Т Т/СЕ м/ц Ш1 М/СР

оВследов. 132 ± 8:5 ± щ± ±

1 кремниевая пыль 27 77 + 4 8:5 ± ?§ ь Ш ±

2 углеводородное волокно+ эпоксидные смолы 26 Щ ± 8;§± ?6± е:е± ш

3 напыление тяжелых металлов 10 8:1 ± щ1

4 бериллий 5. 8:1 ± 14 1:8+- Ш-

5 лазерное излучение + пыль аллюминия 2 8:Ь7+- 1§а± №

6 кремний + синтетич. смолы 3 8:Р: щ ± в Ш

7 больные из Усть-камено- (Ве{шлли) 34- 179 + 49 8:1 ы±

8 больные из Крас-каменска Гуран) 5 8:е+- г- в+-

несена как к первой, так и ко второй. 5 и 6 группы исключены из сравнения среднего из-за небольшого количества обследованных людей и, как следствие этого, большой ошибки среднего.

Однонаправленно изменяются ( табл.8) отношения церулоплазмина / свободные радикалы в группах контактировавших с пылью кремния, лазерным излучением и пылью аллюминия, работавшие на напылении тяжелых металлов, больных из Усть-Каменогорска и Краснокаменска. У больных из Усть-Каменогорска и у контактировавших одновременно с пылью кремния и синтетическими смолами значительно больше по значению отношение трансферрина / свободные радикалы по сравнению с другими обследованными группами. В группах контактировавших с металлами (1, 5, 6, 7 и 8) значение отношения метгемоглобин / свободные радикалы было больше по сравнению с другими группами.

Получены ( рис. 5) однотипные кривые гистограмм частотного распределений количества церулоплазмина во всех группах, кроме "первой ( пик сильно сдвинут в сторону меньших давлений, при этом имеется широко растянутый хвост единично встречающихся больших значений). Гистограмма 1 группы отличается наличием двух пиков значений слева от основного пика. Исходя из анализа графиков распределения содержания трансферрина, можно отметить, что гистограммы отличаются лишь более или менее четко выраженной положительной ассиметрией ( вплоть до односкатных в 7 и 8 группах), наличием как правило двух классов значений ( за исключением 7 группы - 1 класс и 8 группы - отсутствует) слева от пика и полимодальной формой ( 1 и 2 группы - 2 пика, 3 и 8 группы - 1 пик, 7 группа - 4 пика). Гистограммы распределения частот количества свободных радикалов по группам, обследованным в НИИ ГШ, имеет положительную ассиметрию ( в 2, 3 и 8 группах - вырожденную до'односкатной) и полимодальную форму ( от 2 до 3 вершин). Гистограмма распределения частот парамагнитного метгемоглобина во

всех группах имеет односкатный положительный график, фи этом в 1,- 2

Рис. 5. Гистограмма частотного распределения

змина С А)

.... _ количества парамагнитных центров церулоплазмкна (, А), трансферрина ГБ), свобод- . ных радикалов ГВ] и метгемоглооина (Г) среди обследованных в клинике НЩ ГКГ.х- все обследованные;- работавшие Е - с пылью кремния и и - сУглеродными волокнами и эпоксидными смолами: - больные с диагнозом бериллиоз .

и 7 группах - полимодальную форму (1 группа - три вершины, 2 группа - две и 7 группа- 4 вершины).

С содержанием в крови церулоплазмина коррелируют количество свободных радикалов (1, 2 и 3 групп); содержание сиаловой'кислоты (1 и 7 группы); содержание ионов хлора (1 и 7 группы); протромбиновый индекс плазмы крови (1 и 7 группы); содержание кальция (2,- 4 и' 7 группы);, содержание альбуминов, глобулинов и рН крови (4 и 7 группы). Очевидно, что наиболее- схожи своими связями с клиническими показателями 1 ( контакт с пылью кремния) и 7 ( больные с бериллиевого производства) группы, 4 ( контакт с бериллием) и 7 группы. С коли-

чеством церулоплазмина не коррелируют содеряание метгемоглобина ( 1 и 2 группы); общего белка (1, 2 и 3 группы); активность аспаркам- (1 и 2 группы) и аланинаминотрансферазы ( 1,2,3,4 и 7 группы, щелочной фосфатазы (1 и 4 группы); содеряание палочкоядерных нейтрофилов (1 и

2 группы), мочевой кислоты (2 и 3 группы), мочевины (2 и 4 группы), ионов натрия (2 и 4 группы); давления С02 в крови (2 и 7 группы): значение сулемовой пробы (2 и 7 группы). Наиболее близки своей независимостью от клинических-показателей 1 и 2 (контакт с углеродными волокнами и ЭС) группы, 2 и 3 (контакт с пылью тяяелых металлов) группы, 2 и 7 группы.

Содержание трансферрина коррелирует с количеством свободных радикалов (. 1 и 2 группы), с содержанием альбуминов (1 и 2 группы), мочевой кислотой (1,3 и 7 группы), гемоглобина (1 и 7 группы), калия (2 и 3 группы), ретикулоцитов (2 и 7 группы); с метгемоглобина ( 2 и

3 группы); с СОЭ (2 и 3 группы). Можно отметить, что по своим связям с клиническими показателям близки 1 и 2 группы, 1 и 7 группы и 2 и 3 группы. Отсутствует взаимосвязь с количеством трансферрина у следующих клинических показателей: содержание общего белка и натрия ( 1 и 3 группы); давление 02 ( 1 и 2 группы); активность аланинаминотрансферазы (1,3 и 7 группы); содержание общего бшширубина (2 и 3 группы), базофилов (3 и 7 группы). Схожи по отсутствиям корреляционных заввисимостей 1 и 3 и 3 и 7 группы.

С количеством свободных радикалов есть корреляция у содержания альбуминов (1,2 и 3 группы) и лимфоцитов (1 и 2 группы). Коррелирует также отношение содержания альбуминов к. содержанию глобулинов (1,2 и 7 группы). Следует отметить, что у 1 и 2 групп существует связь со всеми клиническими показателями. С содержанием свободных радикалов не коррелирует содержание сахара в крови ( 1 и 3 группы)', общих бил-лирубинов (1 и 2 группы), базофилов (1 и 3 группы), ретикулоцитов (1

и 2 группы), зозинофилов (2 и 3 группы), альбуминов 2 (2 и 7 группы), калия (3 и 7 группы); давление 02 (1 и 7 группы) и активность щелочной фосфаггазы (1 и 7 группы). Схожи по отсутствию корреляционных зависимостей 1и2, 1иЗи1и7 группы.

Наибольшее количество корреляционно-зависимых клинических показателей с содержанием парамагнитных центров могшо отметить у сигналов ЭПР метгеюглобина Они связаны с возрастом обследованных (1 и 7 группы), с содержанием сиаловых кислот ( 1 и 2 группы), общих липи-дов (1 и 2 группы), моноцитов и тромбоцитов (1 и 3 группы), общего белка (2 и 3 группы); -эритроцитов, зозинофилов и базофилов (2 и 7 группы), альбуминов (3 и 7 группы), мочевины (3,4 и 7 группы); с фибринолитической ¡активностью плазмы (1 и 2 группы); давление 02 (1 и 2 группы) и С02 (2 и 7 группы); с тимоловой пробой (1 и 3 группы); с активностью аспаркам- (2 и 7 группы) и аланинаминотрансферазы (4 и 7 группы); соотношением количества альбумминов к количеству глобулинов ( З и 7 группы). Ш связям с клиническими показателями схожи 1 и

2 группы ( б показателей)), 2 и 7 группы ( 5 показателей), а так же

3 и 7, 1 и 3 2 4 и 7 группы. С содержанием метгемоглобина в крови не коррелируют следующие клинические показатели: содержание альбуминов (1,2 и 4 группы), общего биллирубина (1 и 4 группы), глобулинов (2,4 и 7 группы), лейкоцитов (2 и 7 группы), кальция (4 и 7 группы); активность аспаркаыаминотрансферазы (1, 3 и 4 группы); щелочная фосфа-таза (1,2 и 7 группы); рН крови (2 и 4 группы). Близки по отсутствию связей 1 и 2, 1 и 4, 2и7, 2и4 группы.

В ходе обследования было-обнаружено, что у больных, входящих в-группу больных, с диагнозом "берилдиоз", содержание в крови церулоп-лазмина не отхячаются.в общей группе, в группах хронического бронхита, легочного гранулематоза и кожного гранулематоза В группе с хроническим бронхитом количество свободных радикалов выше в 1,3 раза,

чем общее среднее значение. При этом в этой же группе наблюдается увеличение и среднего содержания трансферрина в 1,3 раза. В группе с легочным гранулематозом не происходит увеличения содержания свободных радикалов в эритроцитарной массе. Однако у этих больных можно отметить уменьшение количества трансферрина в плазме ( в 1,7 раза ) и возрастание количества парамагнитного метгемоглобина в 1,3 раза У больных с гранулематозом кожи наблюдается уменьшение содержания в крови свободных радикалов (в 1,8 раза ), трансферрина ( в 1,4 раза ) и метгемоглобина ( в 1,4 раза ) относительно общих средних значений.

Анализируя значения (табл. 9) отношений содержания парамагнитных

г^ л Табл.,9.

Значения отношений^диамагнитных центров церулоплазмина/свр-оодных радикалов,ГД/СРГ. церулоплаямйна/ трансферрина. ПКТТ, трЕИсшеррн^вдбодаых Ьаркалов Гх/СРГ,. йетгЩэгдорина/ц^ рулоплазмина Гм/ЦТ, метгеыоглобина/тпанйферрина ГШ") и мет-гемоглобина/своботшых „ радикалов Г й/СРг в группе людей, поступивших из- г. Уст^ДСайейогорска и прошедших обследование и лечение в клинике ЯЖТмГ.

заболевание кол-во лю|еи группе Ц/СР ц/т Т/СР м/ц м/т М/СР

общее 34 № 4Ш: 1± №

,хрон. бронхит 14 • 8: Ш4 Ш

легочный гран^лема- 14 ь-ж- Ж.Г-

гран^лема-•кожи 5 Ш

центров , следует отметить, что в группах больных легочным гранулематозом и гранулематозом кожи отношения церулоплазмин / свободные радикалы, церулоплазмин / трансферрин и метгемоглобин / свободные радикалы больше, чем в группе больных хроническим бронхитом. В то же время у больных легочным гранулематозом отношения количества метгемоглобин / церулоплазмин и метгемоглобин / трансферрин выше, чем в других группах. Гистограммы распределения содержания церулоплазмина имеют форму, близкую к нормальной, во всех сравнимаемых группах

больных, поступивших с бериллиевого производства, тогда как форма распределения содержания трансферрина имеет положительную ассимет-рию, наиболее выраженную в группе больных с гранулематозом кожи. Анализируя формы гистограмм частотного распределения количества свободных радикалов, нужно отметить, что у группы больных с гранулематозом кожи распределение имеет отрицательную симметрию, тогда как группы больных с хроническим бронхитом и с гранулематозом легких -положительную. Гистограмма частотного распределения парамагнитного метгемоглобина группы больных с гранулематозом кожи также сильно отличается от гистограмм групп с хроническим бронхитом и гранулематозом легких. У больных с гранулематозом кожи распределение имеет отрицательную ассимгтрию, тогда как в других группах - положительную, при этом необходимо отметить бимодальную форму у распределения в группе больных с хроническим бронхитом.

Как видно , во всех сравниваемых группах больных с содержаниием церулопдазмина имеет достоверное различие и не коррелирует с содержанием в крови гемоглобина и лейкоцитов и коррелирует с содержанием фибриногена, бериллия в крови и с рН крови. Количество метгемоглобина не коррелирует с содержанием общего билирубина и коррелирует с количеством в крови альбуминов, р-глобулинов, гемоглобина и эритроцитов, а также с отношением содержания альбуминов к содержанию глобулинов. Содержанке трансферрина и свободных радикалов не имеет такой строгой связи с клиническими показателями и поэтому нельзя говорить об их корреляции с ними.

ОСНОВНЫЕ "ВЫВОДЫ

1. Спектры ЭПР крови человека, работающего во вредных условиях ( пыль кремния, углеводородные волокна и эпоксидные смолы , напыле-

ние тяжелых металлов, контакт с бериллием) в основном представляют собой наложение сигналов со значениями е-фактора 2,00, 2,05 , 4,3 и 6,0, то есть обусловлены свободными радикалами и парамагнитными центрами церулоплазмина, трансферрина и метгемоглобина

2. ЭПР - спектроскопия была применена при профилактических осмотрах и в клинических условиях. Выявлено, что параметры парамагнитных спектров крови (количество парамагнитных центров) являются информативными и могут служить интегральной характеристикой состояния человека .

3. Пэказана эффективность применения машинно-статистических методов для сопоставления показателей парамагнитных характеристик крови и клинических данных .

4. ЭПР - спектроскопия использована для оценки состояния парамагнетизма крови человека, работающего в контакте с бериллием.

СПИСОК РАБОТ. ОПУБЛИКОВАННЫХ Ш ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ.

1. Л П. Кашин, Ы. Е Соболева Спин - иммунологическая ЭПР -спектроскопия для анализа биологических сред. // Всесоюзный котгакви-ум Ш - 89. Сборник материалов Всесоюзного семинара "Оптические зеркала из нетрадиционных материалов", Москва, 1989 - Ленинград, 1989. Т.1. С. 292 - 293.

2. Л. П. Кашин, Е П. Ранчелюс, Ы.Е Соболева Создание биологических тест - систем на содержание бериллия. // Всесоюзный колоквиуь ДО - 89. Сборник материалов Всесоюзного семинара "Оптические зеркала из нетрадиционных материалов", Москва, 1989 - Ленинград, 1989. Т. 1. С. 294 - 297. •

3. Ы. Е Соболева Возможные негативные последствия контакта с бериллием для организма работающее. // Всесоюзный колоквиум Ш - 89. Сборник материалов Всесоюзного семинара "Оптические зеркала из нет-

радиционных материалов", Москва, 1989 - Ленинград, 1989. Т. 1. С. 298 - 300.

4. К П. Реутов, £ И. Ажипа, Л П. Каипин, М. К Соболева, Е. С. Еишнев-кий, Э. М. Шекшеев. Востановление нитритов в окись азота в организме млекопитающих. // Тезисы устных докладов и стендовых сообщений УШ Всесоюзной конференции " Магнитный резонанс в биологии и медицине", Звенигород, 1990. С. 33.

5. ЕЕ Истомин, М.Э. Соколов, М. Ф. Шс ленников, К Б. Малеванная, О. Д. Туркова, К Е Соболева. Состояние переферического сосудистого русла у персонала, занятого производством изделий из бериллия. // Научные достижения в практическую работу. Сборник клинической больницы N 119 и Института повышения квалификации руководящих работников и специалистов Минздрава РСФСР, Вып. 5, Химки, 1991. С. 95-98.'

6. Ы.Е Бочарова. Исследование парамагнитных свойств крови при работе с профессиональными вредностями. // Тезисы Международного Ко-локвиума "Швые информационные технологии", Москва, 1991.- в печати.

7. Ы. В. Бочарова. Исследование парамагнитных свойств крови у людей, работающих с бериллием. // Тезисы Международного Колоквиума "Новые информационные технологии", Шсква, 1991.- в печати.

8. М. Е Бочарова, А. Е Стенин. Опыт использования ЭПР -спектроскопии для оценки изиенений антиоксидантной активности в крови при контакте с бериллием. // Тезисы Международного Колоквиума "Ыэвые информационные технологии", Мэсква, 1991.- в печати.

9. М. Е Бочарова, А. Е Стенин. Опыт использования электронного. парамагнитного резонанса при обследовании персонала, работающего с бериллием. // Тезисы 1У Междунорадного семинара по проблеме "Берил- " Лий", Ленинград, 1991. С.55-57.

10. М. Е Бочарова Парамагнитные свойства крови у людей, работающих с профессиональными вредностями. // Тезисы ¿У Мэждунорадного семинара по проблеме "Беримий", Ленинград, 1991. С. 58-61.