Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Оптимизация выращивания молоди севрюги Acipenser stellatus donensis zovetzky при искусственном воспроизводстве
ВАК РФ 03.00.06, Вирусология

Автореферат диссертации по теме "Оптимизация выращивания молоди севрюги Acipenser stellatus donensis zovetzky при искусственном воспроизводстве"

0041

На правах рукописи

ДУДКО ЮРИЙ ВИКТОРОВИЧ

ОПТИМИЗАЦИЯ ВЫРАЩИВАНИЯ МОЛОДИ СЕВРЮГИ АС1РЕ№ЕЛ ятЕНлтт ооттю гоУЕтгку ПРИ ИСКУССТВЕННОМ ВОСПРОИЗВОДСТВЕ

(03.00.06 • Ихтиология)

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

2 3 СЕН ?010

Астрахань, 2010

004609076

Работа выполнена на кафедре «Водные биоресурсьг и аквакультура» филиала ГОУВПО «Московский государственный университет технологий и управления» в г. Ростове-на-Дону (РО ГОУВПО МГУТУ)

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор

Абросимова Нина Акоповна

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Пономарев Сергей Владимирович

кандидат биологических наук Дубов Василий Ерофеевич

Ведущая организация: Краснодарский научно-исследовательский институт рыбного хозяйства (КрасНИИРХ)

Защита состоится «2 %» 0 9 2010 г. в часов 00 минут

на заседании Диссертационного Совета Д.307.001.05 при Астраханском государственном техническом университете по адресу: 414025, РФ, Астраханская область, г. Астрахань, ул. Татищева, 16 Факс: 8 (8512) 54 91 03

С диссертацией можно познакомиться в библиотеке Астраханского государственного технического университета

Автореферат разослан «2<Ъ> аолдсуа^ 2010 г.

Ученый секретарь

Диссертационного Совета Д.307.001.05 канд. биол. наук, доцент

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Под влиянием хозяйственной деятельности экосистема южных морей России, особенно Азовского моря, испытывает существенные шменения, неблагоприятные для рыбного хозяйства (Воловик и др., 1995; Макаров и др., 1995, 2000; Воловик, 2000; Серобаба, Малышев, 2001; Ходоревская и др., 2007; Иванов, Комарова, 2008). Эти изменения в полной мере относятся и к состоянию естественной популяции севрюги в Азовском бассейне, которая в настоящее время находится в крайне депрессивном состоянии. Начиная с конца прошлого столетия, в области искусственного воспроизводства севрюги отмечался резкий спад, обусловленный, в первую очередь, дефицитом производителей. Так, выпуск молоди в 2008 г. по сравнению со среднегодовыми показателями до 2000 г. сократился: на Кубани - более чем в 120 раз, на Дону - в 4 раза.

В условиях острейшего дефицита производителей и, соответственно, снижения масштабов искусственного воспроизводства все большее значение придается заводскому разведению рыб по интенсивной технологии, которое с учетом перспективы должно быть реализовано на основе как существенной коррекции традиционных методов, так и разработки новых технологий. Следует отметить, что севрюга является одним из сложных объектов воспроизводства, что обусловлено более интенсивным обменом веществ и энергозатратами на рост и развитие, меньшей устойчивостью к дефициту кислорода и низкой сформированностью защитной системы, особенно на ранних этапах постэмбриогенеза (Гершанович, 1982; Гершанович и др., 1987 и др.). Одним из путей повышения жизнестойкости севрюги и сохранения молоди на всех этапах выращивания является индивидуальный подход при разработке рецептуры корма и метода кормления с учетом особенности обмена веществ севрюги. Кроме того, восстановление приоритета отечественных специализированных стартовых комбикормов для осетровых рыб может иметь определенное экономическое и социальное значение для южных регионов России.

Цель и задачи исследований. Основная цель настоящей работы заключается в повышении биологического и продуктивного действия стартовых кормов и оптимизации кормления севрюги с учетом особенности обмена веществ для повышения эффективности искусственного воспроизводства на интенсивной основе.

Для достижения этой цели поставлены следующие задачи:

- изучить возможность оптимизации белкового питания ранней молоди севрюги;

- изучить метаболизм липидов и жирных кислот в раннем постэмбриогенезе севрюги как показатель физиологической потребности в липидах и незаменимых жирных кислотах;

- изучить воздействие жирнокислотного состава кормов с различными жировыми добавками на рост и жирнокислотный состав молоди севрюги;

- изучить углеводное питание ранней молоди севрюги и определить наиболее эффективную композицию углеводов в стартовых комбикормах;

- определить оптимальное количество витамина Н2 в составе стартового корма для севрюги;

- разработать стартовый комбикорм для севрюги с высоким биологическим и продуктивным действием за счет оптимизации белкового, липидного, жирнокислотного и

з

углеводного питания и биологически активных компонентов;

- оценить неспецифическую резистентность молоди севрюги, выращенную на стартовых комбикормах.

Научная новизна и теоретическое значение. В настоящей работе проведено комплексное исследование для оптимизации кормления личинок и мальков севрюги при интенсивном выращивании в условиях осетровых заводов Азовского бассейна. Проведен подбор компонентов для улучшения физиологической питательности стартового корма. Показано, что при использовании в комбикормах рыбных гидролизатов, нанесенных на пшеничные зародышевые хлопья с целью ускорения сушки, в период становления пищеварительной функции на ранних этапах постэмбриогенеза севрюги снижается биологическое и продуктивное действие корма Установлены оптимальное для личинок и мальков севрюги соотношение соЗ/шб и сумма жирных кислот 18:3 и 22:6 линоленового ряда в липидах корма. Определено оптимальное соотношение в стартовом корме легко-и трудногидролизуемых углеводов. Показано, что введение в комбикорма витамина Н2 способствует повышению питательности корма в начальный период кормления, определена его норма для ранней молоди севрюги.

На основании собственных данных по оптимизации белкового, липидного и углеводного питания разработаны стартовые корма 1-го и 2-го порядка и предложен регламент кормления ими молоди севрюги. Впервые определена неспецифическая резистентность молоди севрюги при выращивании на искусственных кормах на интенсивной основе.

Практическая значимость работы. Практическим завершением исследований являлась разработка основных элементов промышленной технологии кормления молоди севрюги при искусственном воспроизводстве.

Материалы исследований дают возможность повысить эффективность искусственного воспроизводства севрюги за счет повышения темпа роста, выживаемости и улучшения физиологического состояния.

Апробация работы. Материалы диссертации представлялись, обсуждались и докладывались на курсах повышения квалификации «Современные принципы и методы управления водными экосистемами и организация предприятий товарного рыбоводства различных форм собственности» (Новочеркасск, 2007); IX Международной научно-практической конференции (Москва, 2003), «Действующее законодательство, охрана и управление водными биоресурсами» (Ростов-на-Дону, 2008, 2009) и «Ветеринарный надзор за объектами аквакультуры» (Ростов-на-Дону, 2008, 2009), на 2-й и 3-й Международной научной конференции «Актуальные проблемы биологии, нанотехнологий и медицины» (Ростов-на-Дону, 2008), а также на заседаниях кафедр «Водные биоресурсы и аквакультура» (Ростов-на-Дону) и «Биоэкология и ихтиология» МГУТУ (Москва).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 работ, из них 2 в изданиях, рекомендованных ВАК РФ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 144 страницах и состоит из введения, 4 глав, заключения, выводов, практических рекомендаций и приложения (акт производственной проверки). Список цитируемой литературы включает 209 работ, из которых 33 на иностранных языках. Работа содержит 31 таблицу и иллюстрирована 29 рисунками.

1. СОСТОЯНИЕ ПОПУЛЯЦИИ И ИСКУССТВЕННОГО ВОСПРОИЗВОДСТВА СЕВРЮГИ В БАССЕЙНЕ АЗОВСКОГО МОРЯ (аналитический обзор)

В данной главе рассмотрены особенности биологии донской и кубанской популяций севрюги, современное состояние популяций азовской севрюги и искусственного воспроизводства, особенности питания в естественных и заводских условиях.

Показано, что современное состояние популяции азовской севрюги является следствием действия ряда факторов, которые оказывали влияние на протяжении всего прошлого столетия, однако более остро проявились на рубеже веков. С 1996 года азовская севрюга занесена в Международную (МСОП) и национальную Красную книгу. Статус по Красным книгам - VII.

С 2000 г. промысел севрюги в Азовском бассейне запрещен и разрешается только вылов для заводского разведения. Ввиду острого дефицита производителей масштабы искусственного воспроизводства азовской севрюги к 2008 году снизились в среднем по Азовскому бассейну - более чем в 78 раз по сравнению с периодом до 2000 г.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Сбор материала, данных и опыты проводили в течение 2003-2008 гг. на Азовских рыборазводных заводах в зависимости от наличия производителей. Объектами исследования послужили икра, личинки и мальки азовской севрюги. Исследования проводили в условиях научно-производственного эксперимента. Для нивелирования фактора разнокачественное™ в опытах использовали предличинок массового вылупления в течение первых 3-х часов. Основные направления исследований приведены в таблице 1.

Таблица 1

Основные направления исследований_

Оптимизация белкового, липидного и углеводного питания Разработка стартовых кормов и технология кормления Гематологические исследования

Рыбоводно- Физиолого-биологические биохимические исследования: исследования Гемоглобин, формулы красной и белой крови

Темп роста Выживаемость Химический статус Обмен веществ Неспецифическая резистентность

Упитанность ЭИП* и ЭИЭ** ПОЛ и антиоксидантная система

Производственная проверка оптимального варианта корма Практические рекомендации

* ЭИП - эффективность использования протеина.

** ЭИЭ - эффективность использования энергии.

Рыб содержали в бассейнах ИЦА-1 или ИЦА-2 с круговым током воды и начальной плотностью посадки по 5 или 15 ООО экз./бассейн, соответственно. Кормление личинок и мальков севрюги в опытах и контроле проводили по единой методике с учетом массы рыб и температуры воды. Биологическое и продуктивное действие опытных кормов оценивали по рыбоводно-биологическим и физиолого-биохимическим показателям в сравнении с контрольным вариантом корма.

Рыбоводно-биологические исследования. Изучали весовой рост, выживаемость, упитанность по Фультону, затраты кормов на единицу прироста, эффективность использования протеина и энергии на рост, накопление различных групп органических (протеин, липиды, углеводы) и минеральных веществ, а также энергии в теле рыб по общепринятым методикам (Щербина, 1983).

Физиолого-биохимические исследования Общий химический анализ кормов и рыб проводили по стандартным методикам (Щербина, 1983; Абросимова и др., 2005). Для разделения липидов на классы использовали метод тонкослойной хроматографии (Шталь, 1965), с предварительным экстрагированием их по Фолчу (Folch et all., 1957).

Холестерин определяли по методу Либермана-Бурхарда в модификации С. Илька, эфиры холестерина - с использованием дигитонина (Ilea, 1962), глицеринов - по цветной реакции с хромотроповой кислотой, НЭЖК - колориметрически (Yang Jeun-Sing, Biggs, 1971), липоидного фосфора - по Исао с соавторами (Isao et all., 1967).

Жирные кислоты определяли методом газожидкостной хроматографии на хроматографе «ЦВЕТ-5».

Содержание диеновых конъюгатов оценивали по характерному для них ультрафиолетовому спектру поглощения раствора липидов, малонового диальдегнда - по Коро-бейниковой (1989), основания Шиффа - по спектрам флуоресценции растворов липидов в хлороформе. Определение активности СОД проводили гидроксиламиновым методом (Yasuhira, 1983), а-токоферола - флуорометрическим методом (Taylor, 1980).

Кровь для анализа брали из хвостовой артерии. Концентрацию гемоглобина определяли по Сали, мазки фиксировали и окрашивали по Палпснгейму. Клетки крови идентифицировали по Н.Т. Ивановой (1983). Содержание катионных белков определяли путем расчета среднего цитохимического коэффициента - СЦК (Пигаревский, 1978,1979).

Статистическую обработку полученных результатов проводили по общепринятой методике (Лакин, 1980) с помощью прикладной программы «Excel 2003». Достоверность различий определяли по t - критерию Стьюдента.

Испытано 17 вариантов кормов, в том числе 2-е гидролизатами, 5-е различным составом жирных кислот и 4 - углеводов, 2 дозировки витамина Нг, 4 варианта опытных кормов, отличающихся структурой протеина, липидов и добавками витамина Н2 и ß-каротина, апробированных в 3 вариантах кормления.

В рыбоводно-биологических анализах использовано 2070 рыб. Проведено 1179 биохимических определений, в том числе, общих анализов тела рыб и кормов - 460, фракционного состава общих липидов - 302, фосфолипидов - 240, жирных кислот - 52, продуктов ПОЛ - 75, антиоксидантов - 50, гематологических анализов - 82, в т.ч. катионных белков - 40.

В тексте, таблицах и рисунках приняты следующие обозначения: ОЛ - общие липи-

ды; ФЛ - фосфолипиды, ТАГ - триацилглицерины, X - холестерин; ЭХ - эфиры холестерина; МАГ - моноацилглицерины; ДАГ - диацилглицерины; НЭЖК - неэстерифициро-ванные жирные кислоты; ИФ - инозитфосфатиды; ЛФХ - лизофосфатидилхолины; СФМ - сфингомиелины; ФХ - фосфатидилхолины; ФС - фосфатидилсерины; ФЭА - фосфати-дилэтаноламины; К+ПГФ - кардиолипины+полиглицерофосфатиды; ДК - диеновые конъюгаты; МДА - малоновый диальдегид; ОШ - основания Шиффа; СОД - суперок-сиддисмутаза.

3. ОПТИМИЗАЦИЯ КОРМЛЕНИЯ МОЛОДИ СЕВРЮГИ

3.1. Оптимизация белкового питания

Перспективными компонентами стартовых комбикормов для рыб остаются рыбные гидролизаты (Абросимова, Саенко, 1996; Пономарев, 1996 и др.). Несмотря на высокую физиологическую ценность, использование их представляет определенные трудности, связанные со сложностями сушки, в процессе которой ухудшаются их питательные свойства. Как один из вариантов решения этой проблемы применяют нанесение гидро-лизатов на пшеничные зародышевые хлопья - ПЗХ, или Вигазар (Пономарев, Зубкова, 1999; Абросимова, Саенко, 2000). Однако остается неизученной реакция ранней молоди севрюги на введение в рацион рыбного гидролизата, нанесенного на ПЗХ после сушки. Для оценки питательного свойства таких кормов для севрюги апробированы гидролизаты из салаки и данный гидролизат, нанесенный на ПЗХ в соотношении 3:1 по 10 и 15 % каждого в составе комбикормов.

По содержанию основных групп органических и минеральных веществ опытные и контрольный комбикорма были достаточно близки и соответствовали физиологической потребности ранней молоди осетровых. При введении в комбикорма гидролизатов содержание растворимых белков в кормах повысилось в 1,5-2,5 раза. Гидролизаты+ПЗХ обеспечивали в комбикормах (варианты 1 и 2) соотношение белки:полипептиды: олигопелтиды в пределах 1:2,1-2,7:1,8-2,2, а собственно гидролизат (варианты 3 и 4) -1:2,6-2,7:2,6-2,7. Данный показатель в контроле составил 1:1,8:0,8.

3.1.2. Рыбоводно-биологические результаты выращивания молоди. Кормление личинок севрюги начинали при переходе на активное питание при средней массе 30 мг. По завершению экспериментального кормления средняя индивидуальная масса молоди всех опытных вариантов достоверно превышала контрольную группу более чем на 13 % (Р<0,05). Причем наибольшей средней массы достигла молодь 4 (15 % гидролизата), затем 1 (10 % гидролизата+ПЗХ) и 3 (10 % гидролизата) вариантов. Выживаемость личинок на опытных кормах превышала контрольную группу более чем на 20 % при максимальном различии у личинок 4 варианта - на 45,7 %.

Гидролизаты в составе кормов оказывали белок- и энергосберегающий эффект, что выразилось в большем накоплении протеина и энергии у опытной молоди, соответственно fia 23-40 % и 24,5-35,2 %. Но, при этом отмечали усиление липолиза - повысилось содержание МАГ и НЭЖК более чем на 34 % и снизился уровень ТАГ на 5-8 %. Однако уровень структурных липидов (ФЛ и X) по отношению к контролю практически не изменился.

Соотношение соЗ/'юб, являющееся адекватным показателем физиологического со-

стояния рыбы, как в общих лшшдах, так и фосфолипидах составило 0,7-0,9 и 0,9-1,0, что ниже контроля и нормы более чем в 1,5 раза. Однако уровень гидроперекисей у опытных рыб, как и контрольных, находились и пределах физиологической нормы, хотя в теле молоди опытных рыб их уровень имел тенденцию к снижению. При этом активность СОД возрастала на 17,5-27,9 % при незначительном повышении активности а-токоферола.

3.2. Оптимизации липндного пи киши

Для оптимизации липндного питания молоди севрюги изучали утилизацию липи-дов и жирных кислот от вылупления до перехода личинок севрюги на активное питание, как показатель потребности в липидах и жирных кислотах, и влияние липндного и жир-нокислотного состава кормов на рост, выжкваемоегь, жирнокислотный состав и состояние алтиоксидантной защиты молоди севрюги.

3.2.1. Метаболизм липидов и жирных кислот севрюги в раннем постэмбриогенезе. В процессе эндогенного питания предличинки липиды расходуются более чем на 24 % при одновременной утилизации почти на 23 % фосфолипидов и уменьшение на 25 % соотношения шЗ/свб в утилизированной части жирных кислот. Это свидетельствует об избирательной утилизации липидов и жирных кислот в процессе развития предличинок.

3.2.2. Влияние состава липидов кормов на фосфолипидный и жирнокислотный статус молоди севрюги. Для уточнения и корректировки липндного и жирнокислотного питания ранней молодя севрюги, нами проведена серия экспериментального кормления рационами, содержащими 49,7-52,2 % протеина с близкими по фракционному составу белками, 10,2-11,5 % липидов и 11,3-12,1 % зольных элементов. Комбикорма отличались по содержанию ФЛ, соЗ и соб жирных кислот и были разделены на 5 групп (табл. 2).

Таблица 2

Уровень фосфолипидов и шЗ/саб в ¡мпидах комбикормов

Показатели Группы кормов

1 2 1 4 5

Фосфолипи-д ы* 1,2 5,66,6 0,9-1,0 1,2 10,913,3

шЗ/соб 2,6 2-2,1 2,4 0,80,9 0,9-1,1

18:3-22:6 юЗ 1,31,5 1,92,4 1Д-1,4 0,81.1 0,8-1,7

* В процентах общих липидов.

Согласно результатам кормления на ранних этапах формирования организма, когда системы поддержания жирнокисяопгого гомеостаза менее развиты, потребность молоди в эссснциальных жирных кислотах наилучшим образом удовлетворяется при содержании в корме фосфолипидов 5,6-6,6 %, суммы 18:3 и 22:6 - 1,9-2,4 %, шЗ/шб = 2 (2 вариант, где использовали композицию рыбий жир+линетол+льняные фосфатиды). Темп роста рыб при таком рационе повышался на 30-37 %, выживаемость - на 18-20 %, что свидетельствует о высокой потребности севрюги в кислотах семейства ©3 в форме эс-сенциальпых жирных кислот с 20 и 22 углеродными атомами.

8

3.3. Оптимизация углеводного питания

Углеводы наряду с белками и жирами являются неотъемлемой частью кормов для рыб. Недостаточность углеводов в пище компенсируется белковыми (аминокислотами) и липидными (глицеринами) компонентами, что отрицательно сказывается на пластическом обмене (Сорвачев, 1982; Озолс, 1984).

Согласно поставленной задаче были скорректированы 4 варианта кормов, отличающихся содержанием углеводов и их фракционным составом (табл. 3).

Таблица 3

Варианты корма Сумма Сахара ЛГУ* уру** ЛГУ/ТГУ

клетчатка лигнин

1 26,99 5,57 14,08 3,35 4,01 2,7

2 29,68 3,99 14,04 L 4,51 7,14 1,5

3 24,63 5,84 16,75 1,76 0,28 11,1

4 26,22 5,92 15,62 4,28 0,40 4,6

*ЛГУ - легкогидролизуемые углеводы.

**ТГУ - трудногидролизуемые углеводы.

Кормление личинок начинали со стадии смешанного питания при средней массе 22,82±0,28 мг. В первой пятидневке лучшими показателями весового роста характеризовались личинки 4-го, а затем 3-го вариантов, средняя масса которых через 5 суток кормления достигла 32,91±1,36 и 32,05±1,67 мг, соответственно при достоверных отличиях (Р<0,05) от других вариантов.

Такая зависимость объясняется тем, что поступающие в организм углеводы подвергаются перевариванию в желудочно-кишечном тракте и всасываются в кровь в виде моносахаридов, в основном глюкозы (Уголев, 1970, 1972; Сорвачев, 1982; Озолс, 1984). В последующие 7 суток максимальный темп роста сохранялся на 4 варианте корма -94,54±5,06 мг. В среднем за 12 суток максимальная скорость роста была у личинок 4-го варианта (ЛГУЛГУ - 4,6), а затем 1-го варианта (ЛГУ/ТГУ - 2,7) при снижении кормовых затрат на 0,5 ед.

Следует предположить, что наиболее физиологически полноценными являются 4-й, затем 1-й варианты с соотношением ЛГУ к ТГУ равным 4,6 и 2,7, количеством Сахаров -5-6 г, ЛГУ в виде декстринов и крахмала - 15-18 г, клетчаткой - 4-5 г, лигнином - до 0,5 г на 100 г корма.

3.4. Оптимизация питания за счет введения в рацион витамина Н2

Учитывая особенности физиологии пищеварения севрюги в раннем онтогенезе, а также характеристику кормового сырья, используемого в отечественной комбикормовой промышленности, важная роль в повышении эффективности искусственных кормов отводится биологически активным веществам, направленно стимулирующим обмен веществ в организме. Из таких веществ недостаточно изученным является витамин Н2 (биотин, витамин В7).

Минимальная потребность в витамине Н2 незначительна, но рыбы очень чувсгви-

тельны к его дефициту (Остроумова, 2001; КЬатига е1 а1., 1967 и др.). Экспериментально определенные нормы витамина Н2 в кормах для осетровых варьируют от 0,1 до 0,3 мг/кг (Киянова, 1998; Пономарев и др., 2002). Однако на ранней молоди севрюги они не испытывались. Мы изучали влияние 2 доз витамина Н2 - 0,05 и 0,1 мг/кг корма (соответственно 1 и 2 варианты).

Через 15 суток масса личинок на кормах с витамином Н2 достоверно превышала контроль почти в 2 раза. За последующие 20 суток среднесуточный темп роста молоди 1-го варианта превышал контроль на 13,8 %, 2-го - не более 4 % при близких других рыбоводных показателях.

По показателям направленности обмена веществ, на начальном этапе кормления до массы в среднем 400 мг, введение витамина Н2 оказывает белок- и энергосберегающий эффект. В дальнейшем его действие снижается и сохраняется некоторое преимущество при количестве 0,05 мг/кг, что подтверждается балансом соЗ и соб жирных кислот. Согласно полученным данным введение в корм витамина Н2 в количестве более 0,05 мг на 1 кг корма для молоди массой более 400 мг недостаточно эффективно.

4. РЕЗУЛЬТАТЫ ВЫРАЩИВАНИЯ МОЛОДИ СЕВРЮГИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ КОМБИКОРМОВ С ПОВЫШЕННЫМ БИОЛОГИЧЕСКИМ И ПРОДУКТИВНЫМ ДЕЙСТВИЕМ

Разработанные нами корма основаны на оптимизации белкового, липидного и углеводного питания, а также введения в рацион витамина Н2 (0,05 мг/кг ) и Р-каротина (2,04 мг/кг) (Абросимов, Абросимова, 1991 и др.). Испытано 4 варианта кормления по следующей схеме (табл. 4).

Таблица 4

Варианты Период Корма

кормления кормления, сут.

1 1-32 4 вар.+линетол+вит.Н2

2 1-32 4 вар.+линетол+вит.Н2 + р-каротин

3 1-15 4 вар.+Ачиа-Ого;у+ вит.Н2 +р-каротин

16-32 2 вар.ч^иа-Ого\у+р-каротин

Контроль 1-32 4 вар.+линетол

В качестве базового и контрольного корма использовали разработанный нами 4 вариант комбикорма с 15 % рыбного гидролизата, обогащенного 2 % линетола (протеин -55,3 %, в т.ч. 35,5 % поли- и олигопептиды) и 2 вариант корма с 15 % рыбного гидроли-за+ПЗХ (протеин - 53,3 %, в т.ч. 23,5 % поли- и олигопептиды). В 3 варианте кормления по достижении средней массы 320 мг молодь севрюги переводили с модифицированного 4-й (корм 1 порядка) на 2-й (корм 2 порядка) комбикорм, в которых 2 % линетола и 2 % рыбьего жира заменяли липидным препаратом из водорослей «Ациа-^ои», что обеспечивало в этих кормах соотношение шЗ/ш6=0,7 (Абросимов, Дудко, 2009б), в кормах с линетолом - юЗ/шб = 0,4.

Выращивание личинок и мальков севрюги проводили в пластиковых бассейнах

ИЦА-2 с начальной плотностью посадки 15 тыс./бассейн. Кормление личинок начинали при температуре воды 22,2 °С (среднесуточная температура воды в период выращивания - 21,0-25,6 °С), кислород - 6,1-6,8 мг/л, рН - 7,4-8,2. Эффективность кормления оценивали по рыбоводно-биологическим и физиолого-биохимическим показателям.

4.1. Рыбоводно-биологические показатели

Кормление севрюги начато в возрасте 14 суток при переходе на активное питание и средней массе личинок 34+1,0 мг (табл. 5).

Таблица 5

Рыбоводно-биологические результаты выращивания молоди севрюги

Показатели Варианты кормления Контроль

1 2 3

Конечная масса, мг 1522+90 1654+96* 1830±102* 1389±95

Темп роста, мг/сут. 46,5 50,6 56,1 42,3

Выживаемость, % 49,8 58,5 62,5 50,3

Упитанность 0,63±0,01 0,63±0,01 0,69+0,02* 0,66±0,02

Затраты корма, г/г прироста 1,2 0,7 0,5 1,2

Молодь >1,5 г, % 52 58 60 42

ЭИП, % 19,8 30,3 41,3 22,0

ЭИЭ, % 13,7 21,8 29,6 15,9

* Р<0,05.

На 32 сутки наибольшей средней массы и упитанности достигла молодь 3, а затем 2 варианта при достоверном отличии от контроля по массе соответственно на 31,7 и 19,1 %, большей выживаемости на 24,2 и 16,3 % и снижении кормовых затрат на прирост более чем в 1,5-2 раза. Среднесуточный темп роста молоди 3 варианта превышал данный показатель у других рыб на 10,8-32,5 %. Большая часть рыб опытных вариантов превысила весовой стандарт (1,5 г) для выпускаемой молоди севрюги более чем в 1,2-1,7 раза.

При кормлении молоди важным аспектом является преимущественное использование протеина на рост и компенсация энергетических трат за счет липидов и углеводов пищи. Самые высокие показатели ЭИП и ЭИЭ отмечены в 3 варианте кормления, затем во 2, которые превышали контрольный вариант соответственно на 86-87 и 37-38 %.

4.2. Физиолого-биохимическне показатели

Разнокачественные корма и технология кормления не оказали существенного влияния на биохимический состав ранней молоди севрюги. При этом наибольшие различия отмечены в направленности обмена углеводов, где их накопление в сухом веществе молоди 1 и 2 вариантов почти в 2 раза было меньше, чем у рыб 3 и контрольного вариантов.

По завершении кормления содержание общих липидов в теле молоди 1, 3 и контрольного вариантов практически не отличалось. Отличия по данному показателю у рыб 2 варианта составили в среднем 17 %. Отмечено изменение баланса отдельных липидов как по отношению к контролю, так и между опытными вариантами (табл. 6).

п

Таблица 6

Липидный состав тела молоди севрюги, %

* Р< 0,05. **Р<0,01.

Показатели 1 вариант 2 вариант 3 вариант Контроль

Общие липиды, %

ТАГ 61,2±0,8 55,2±0,6 43,6+1,1* 57,9±0,7

ФЛ 15,2±0,3 21,9±0,4* 28,9±0,6* 13,8±0,2

X 8,0±1,1 7,7±0,1 9,6±0,2 8,7±1,3

ЭХ 4,2±0,1 4,Э±0,1 7,3+0,1 4,5±0,1

МАГ 1,8±0,2* 1,4±0,1* 1,6+0,1* 2,9±0,2

ДАГ 3,6±0,1 3,0±0,1* 2,4±0,3* 4,0±0Д

НЭЖК 6,1±0,1** 6,1±0,1** 5,9±0,8** 8,2±0,1

Фосо юлипиды, % ФЛ

ИФ 2,2±0,1 * 1,8±0,1 2,7±0,1 * 1,6±00,1

ЛФХ 1,9±0,2 2,1±0Д 1,2±0,1 1,9±0,1

СМ 7,1±0,5 8,9±0,2 7,4±0,1 7,9±0,1

ФХ 52,7+0,5 55,3±0,9 54,9±0,7 55,1±0,8

ФС 5,4+0,4 4,3±0,1 6,3±0,9* 4,5±0,2

ФЭА 30,3+0,3 27,5±0,3 27,2±0,4 28,8±0,3

КЛ+ПГФ 0,5+<0,1* 0,1±<0,1* 0,4±<0,1* 0,2±<0,1

Так, наибольшее снижение уровня ТАГ (на 24,7 %) по сравнению с контролем отмечено у молоди 3 варианта, у рыб 1 варианта данный показатель незначительно увеличился. У опытных рыб содержание ФЛ увеличилось: в 1 варианте на 10 %, во 2 и 3 - более чем в 1,5 и 2 раза. Уровень же МАГ, ДАГ и НЭЖК у рыб опытных вариантов достоверно снизился по отношению к контролю у рыб 1 варианта от 10,0 до 37,9 %, 2-го - от 25,0 до 51,7 % и 3-го - от 44,8 до 28,0 %. Эти изменения баланса отдельных липидов свидетельствуют об улучшении физиологического статуса опытной молоди за счет большей обеспеченности энергетическим материалом по сравнению с контролем (Саутин, 1989 и др.).

Известно, что основными компонентами фосфолипидной фракции являются ФХ и ФЭА, составляющие соответственно около 60 и 20 % (Kanazawa et all., 1979; Гершано-вич и др., 1991), что мы наблюдали у молоди севрюги.

Характерным для молоди опытных вариантов было увеличение доли ИФ на 12,568,7 % и КЛ+ПГФ в 2-2,5 раза, что можно рассматривать как положительный фактор, способствующий повышению способности организма отвечать на внешний раздражитель (Лескова, 2001), стабилизации окислительно-восстановительных реакций и активации клеточного дыхания, что согласуется с повышением а-токоферола (Бурлакова и др., 1990; Карагезян и др., 1990). Снижения уровней СМ и ФХ согласовывались с повышением содержания ФС, что может свидетельствовать о повышении интенсивности энергетического клеточного обмена (Евстигнеева и др., 1976; Мецлер, 1980).

Согласно показателям липидного обмена наиболее оптимален баланс ТАГ, ФЛ, X,

ФХ и ФЭА у молоди севрюги 2 и 3 вариантов, у которых величина ФЛ/ТАГ и ФХ/ФЭА больше в 1,6-2,2 раза при уменьшении коэффициента Дьёрдии на 44.4-47,6 %, что может свидетельствовать о большей стабильности мембран у этих групп рыб.

Существенные различия жирнокислотного статуса отмечены у молоди 1 варианта. Соотношение аЗ/аб у них было ниже нормальных показателей для осетровых рыб, в ■

том чксде севрюги, в 2-3 раза, что обусловлено повышением уровня 18:2 кислоты и \

уменьшением, в основном, кислот 22:5 почти в 1,3 раза и более и 22:6 более чем в 2,7 |

раза (табл. 7). !

Таблица 7

Содержание кислот соб и тоЗ в липидах молоди севрюги, %___

Жирные кислоты Варианты опыта Контроль

1 ^ 2 3

ОЛ ФЛ ОЛ ФЛ ОЛ ФЛ ОЛ ФЛ

18:2 9,30 8.67 4,39 3,71 4,50 4,24 4,00 3,71

18:3 3,50 3,71 4,82 5,33 2,20 2,83 2,06 2,52

20:4 1,92 2,06 3,17 2,92 2,99 2,65 3,95 3,71

22:5 2,05 2,28 2,28 2,91 2,27 3.42 2,88 3,62

22:6 3,74 5,16 11,29 13,02 10,20 13.16 11.76 14.14

2>б 16,14 14,02 9,06 7,94 9,23 8,30 10,15 9,05

2>з 11,81 13,97 23,45 26.90 _19,57 25.13 21,10 25.74

соЗ./соб 0,7 1,0 ( 2,6 3,4 2,1 3,0 2,1 2.8

Примечание: ОЛ - % суммы общих липидов, ФЛ - % суммы фосфолипидов.

Следует отметить, что во всех опытных вариантах уровень гидроперекисей был ниже, чем в контроле (рис. 1).

Рис. 1. Показатели процессов ПОЛ у молоди севрюги, ед. акт.

Наибольшими отличиями характеризовались рыбы 2 и 3 вариантов при достовер-

ных различиях (Р<0,01-0,05).

Так, содержание ДК у молоди 2 варианта уменьшилось на 24,6; МДА - на 41,8 и ОШ - на 24,9 %. Аналогичные показатели у молоди 3 варианта составили, соответственно, 22,3; 27,6 и 31,5 %. Активность СОД у опытной молоди в сравнении с контролем была невысока. Причем отмечается определенная закономерность: небольшие различия активности СОД компенсируются существенным (Р<0,05) повышением активности а-токоферола от 39 % в 1-м до более чем в 2,3 раза - в 3 варианте.

В завершение следует отметить, что по комплексу рыбоводно-биологических и фи-зиолого-биохимических показателей наиболее благоприятное воздействие на рост, выживаемость, конверсию корма, формирование липидного и жирнокислотного статуса, антиоксидантной защиты организма молоди севрюги и, соответственно, адаптационно-компенсаторные свойства оказывают 3, а затем 2 варианты кормления.

5. НЕСПЕЦИФИЧЕСКАЯ РЕЗИСТЕНТНОСТЬ МОЛОДИ СЕВРЮГИ

Развитие интенсивных форм рыбоводства, основанных на использовании искусственных кормов и высоких плотностей посадок, повышает возможность заражения рыб патогенной микрофлорой. Поэтому важным условием жизнестойкости рыб при искусственном воспроизводстве является сформированность их неспецифической антиинфекционной резистентности, которую определяют по лизосомальному-катионному тесту (Пигаревский, 1978; Кокряков, 1998).

Неспецифическая антиинфекционная резистентность рыб, основанная на цитохимии и биохимии катионных белков гранулоцитов, практически не изучена. Известно лишь, что гранулоциты осетровых содержат катионные белки, однако пероксидаза в них отсутствует (Фомина и др., 1984; Абросимова и др., 1986) и снижается содержание катионных белков в гранулоцитах при сапролегниозе (Абросимова др., 1986), причем гранулоциты, в которых цитохимически выявлены катионные белки, являются эозино-филами (Иванова, 1983; Фомина и др., 1984; Абросимова и др., 1986; Абросимов, 1988).

Согласно результатам гематологических исследований, содержание гемоглобина, формула красной и белой крови на всех вариантах соответствовали физиологической норме (Баденко и др., 1984).

В периферической крови севрюги эозинофилы были представлены всеми формами онтогенеза Общим для всех рыб являлось преобладание зрелых форм эозинофилов, при этом наблюдалось преобладание более чем на 14 % палочкоядерных гранулоцитов над сег-ментоядерными за исключением 1 варианта, где указанные различия составляют 34,5 %.

Несмотря на это, полученные значения среднего цитохимического коэффициента, величина которого составила 2,85±0,05...2,93±0,03, свидетельствуют о достаточно высокой неспецифической антимикробной резистентности молоди севрюги, выращенной на испытуемых рационах.

ВЫВОДЫ

Проведенные исследования направлены на оптимизацию кормления личинок и мальков азовской севрюги с целью повышения темпа роста, выживаемости и жизнестойкости. Основные выводы диссертационной работы заключаются в следующем:

1. Повышение в растворимой фракции протеина белков с 27 до 33,7 %, пептидов - с 38,1 до 47,4 % способствует повышению скорости роста ранней молоди севрюги на 46 % в первые 15 суток выращивания (после перехода на активное питание).

2. На ранних этапах формирования организма потребность молоди в эссенциальных жирных кислотах наилучшим образом удовлетворяется при содержании в корме ФЛ - 5,6-6,6 % и соотношении соЗ/шб равном 2 и суммы 18:3 и 22:6 - 1,9-2,4 %.

3. Темп роста ранней молоди севрюги и эффективность использования кормов зависят от фракционного состава углеводов пищи при содержании в кормах Сахаров 5-6, ЛГУ (декстрины и крахмал) 15-18, клетчатки 4-5, лигнина до 0,5 г на 100 г корма

4. Оптимальным для молоди севрюги до массы 300-400 мг является 0,05 мг/кг корма витамина Н2, что подтверждается рыбоводно-биологическими показателями и их физиологическим статусом. Введение в корма витамина Н2 для молоди массой более 400 мг недостаточно эффективно.

5. Кормление молоди севрюги кормами с содержанием сырого протеина 55,3 %, в том числе растворимого белка около 40 %, из которых 32 % представлены поли- и оли-гопептидами примерно в равном соотношении, жира - 10,2 %, соотношении шЗ/соб равном 0,4-0,7, обогащенные витамином Н2 в количестве 0,05 мг/кг корма, fS-каротином в количестве 2,4 мг/кг корма и липидным препаратом «Aqua-grow» с высоким содержанием докозагексаеновой кислоты способствует повышению темпа роста на 16,3-32,5 %, выживаемости - на 16,3-24,2 %, эффективности использования протеина и энергии корма на прирост, соответственно, на 86-87 и 37-38 %. Кроме того, эти корма обеспечивают высокий физиологический статус (антиоксидантную защиту и адаптационно-компенсаторные возможности).

6. Эффективность новых кормов повышается при поэтапном кормлении рационами 1 и 2 порядка, при котором корм 1 порядка содержит высокодисперсный протеин, витамин Н2 и p-каротин. В корме 2 порядка дисперсность протеина снижается в 1,3-1,5 раз я исключается витамин Н2. Смена кормления при достижении молодью массы 400 мг. При таком кормлении темп роста молоди возрастает на 10,8 %, выживаемость - на 6,8 %, эффективность использования протеина и энергии корма на прирост соответственно на 36,3 и 35,8%.

7. При кормлении новыми кормами содержание гемоглобина, интенсивность эри-тропоэза, формула красной и белой крови на всех вариантах находятся в пределах физиологической нормы, а средний цитохимический коэффициент, величина которого составила 2,85-2,93, свидетельствует о достаточно высокой неспецифической резистентности молоди севрюги при интенсивном выращивании.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Для повышения эффективности искусственного воспроизводства севрюги за счет повышения темпа роста и выживаемости, улучшения физиолого-биохимического статуса и соответственно повышения жизнестойкости при выращивании на интенсивной основе рекомендуем:

- в течение 15 суток с перехода на активное питание до массы около 400 мг личинок севрюги кормить стартовым комбикормом 1 порядка, затем до стандартной массы -

стартовым комбикормом 2 порядка;

- стартовый комбикорм 1 порядка должен содержать 45 % животного сырья, 32 % растительного сырья, дополнительно 15 % рыбного гидролизата, 4 % липидного препарата «Aqua-grou», 0,05 мг/корма витамина Н2 и 2,4 мг/кг корма ß-каротина;

- стартовый комбикорм 2 порядка должен содержать 49 % животного сырья, 29 % растительного, дополнительно 15 % рыбного гидролизата+пшеничные зародышевые хлопья (ПЗХ), 4 % липидного препарата «Aqua-grou» и 2,4 мг/кг корма ß-каротина;

- при отсутствии таких кормов в течение всего периода выращивания комбикормом целесообразно использовать комбикорм с содержанием 45 % животного, 32 % растительного, дополнительно 15 % рыбного гидролизата, 2 % линетола, 0,05 мг/кг корма витамина Н2 и 2,4 мг/кг корма ß-каротина.

При выполнении рекомендаций у молоди севрюги повышается среднесуточный темп роста более чем на 19 %, выживаемость - более чем на 16 %, кормовые затраты на прирост уменьшаются в 1,5 и более раз, сроки выращивания до стандартной массы снижаются на 10-13 суток.

Список печатных работ, опубликованных по теме диссертации

1. Говорунова В.В., Дудко Ю.В. Состояние популяций азовских осетровых и мероприятия по их сохранению//Стратегия развития пищевой промышленности. Социально-экономические и гуманитарные проблемы современности: Труды IX Международной научно-практической конференции (13-14 мая 2003 г.).- М., 2003,- Вып. 8.- Т.1.- С. 214-219.

2. Дудко Ю.В. Влияние витамина Н2 на рост и выживаемость ранней молоди сев-рюги//Актуальные проблемы биологии, нанотехнологий и медицины: Материалы 2-й Междунар. научн. конференции, Ростов-на-Дону, 8-10 октября 2008 г.- Ростов-на-Дону: Изд. ЮФУ, 2008. - С. 24-25.

3. Дудко Ю.В. Особенности углеводного питания личинок севрюги//Научный, прикладной и специальный журнал «Научная Мысль Кавказа»,- Изд-во Северо-Кавказского научн. центра высшей школы ЮФУ. - 2009.- №1 (09).- С. 45-49.

4. Дудко Ю.В. Неспецифическая резистентность молоди севрюги при кормлении разнокачественными рационами/Акхуальные проблемы современной науки и образования: межвузовский сборник научных трудов,- Ростов н/Д: изд-во ЮФУ, 2009. - С. 407-413.

5. Абросимова H.A., Дудко Ю.В. Результаты использования рыбных гидролизатов в составе стартового корма для севрюги/Актуальные проблемы современной науки и образования: межвузовский сборник научных трудов - Ростов н/Д: изд-во ЮФУ, 2009. - С. 392-397.

6*. Абросимов С.С., Дудко Ю.В. Влияние жирнокислотного состава корма на рост и физиолого-биохимическое состояние молоди севрюги//Научный журнал. Тр. Кубанского гос. аграрного ун-та, 2009. - Вып. 1(16). - С. 116-119.

7*. Абросимов С.С., Дудко Ю.В. Совершенствование липидного состава стартовых комбикормов севрюги/ЛГруды Кубанского гос. аграрного университета,- 2009.- № 2 (17).-С. 151-155.

8. Дудко Ю.В. Оптимизация кормления молоди севрюги при бассейновом выращивании / Мат-лы межд. конф. «Современное состояние водных биоресурсов и экосистем морских и пресных вод России: проблемы и пути решения» в г. Ростове-на-Дону.- Ростов н/Д: ФГУП «АзНИИРХ», 2010,- С. 275-279.

* Публикация в журналах, рекомендованных ВАК.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Дудко, Юрий Викторович

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. СОСТОЯНИЕ ПОПУЛЯЦИИ СЕВРЮГИ И ЕЕ ИСКУССТВЕННОГО ВОСПРОИЗВОДСТВА В БАССЕЙНЕ АЗОВСКОГО МОРЯ

АНАЛИТИЧЕСКИЙ ОБЗОР).

1.1. Биология и распространение севрюги.

1.2. Современное состояние естественной популяции азовской севрюги.

1.3. Состояние искусственного воспроизводства азовской севрюги Аз1ретег stellatus сЬпетчя Zovetzky.

1.4. Особенности питания севрюги в естественных и заводских условиях.

1.5. Катионные белки гранулоцитов и их функции.

Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ. 32

Глава 3. ОПТИМИЗАЦИЯ КОРМЛЕНИЯ МОЛОДИ СЕВРЮГИ

3.1. Оптимизация белкового питания

3.1.1. Характеристика гидролизатов и опытных комбикормов.

3.1.2. Рыбоводно-биологические результаты выращивания молоди.

3.2. Оптимизация липидного питания.

3.2.1. Метаболизм липидов. и жирных кислот севрюги в раннем постэмбриогенезе.

3.2.2. Влияние состава липидов кормов на фосфолипидный и жирнокислотный статус молоди севрюги.

3.3. Оптимизация углеводного питания.

3.4. Оптимизация питания за счет введения в рацион витамина Н2.

Глава 4. РЕЗУЛЬТАТЫ ВЫРАЩИВАНИЯ МОЛОДИ

СЕВРЮГИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ КОМБИКОРМОВ С ПОВЫШЕННЫМ БИОЛОГИЧЕСКИМ И ПРОДУКТИВНЫМ ДЕЙСТВИЕМ.

4.1. Рыбоводно-биологические показатели:.

4.2. Физиолого-биохимические показатели.

Глава 5. НЕСПЕЦИФИЧЕСКАЯ РЕЗИСТЕНТНОСТЬ

МОЛОДИ СЕВРЮГИ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Оптимизация выращивания молоди севрюги Acipenser stellatus donensis zovetzky при искусственном воспроизводстве"

Актуальность проблемы. Под влиянием хозяйственной деятельности экосистема южных морей России, особенно Азовского моря, испытывает существенные изменения, неблагоприятные для рыбного хозяйства. В результате антропогенных воздействий снижается их продуктивность, уменьшается биоразнообразие, сокращается численность гидробионтов, включая осетровых рыб (Воловик и др, 1995; Макаров и др., 1995, 2000; Воловик, 2000; Серобаба, Малышев, 2001; Ходоревская и др., 2007; Иванов, Комарова, 2008). Эти изменения в полной мере относятся и к состоянию естественной популяции севрюги в Азовском бассейне, которая в настоящее время находится в крайне депрессивном состоянии.

Нарушение путей нерестовых миграций и уничтожение нерестилищ азовской севрюги, вызвавшие снижение численности популяции, усугубилось также интенсивной промысловой добычей и браконьерским ловом, который, по некоторым подсчетам, превышал официальные квоты в 10-50 раз (Реков, 2000, 2002). Воспроизводственный потенциал севрюги в современный период остается за гранью критического. Вследствие малой численности, севрюга более не способна к самостоятельному восстановлению популяций. В связи с этим искусственное воспроизводство становится важнейшим альтернативным направлением для сохранения ее не только как вида, но и восстановления популяции.

Начиная с конца прошлого столетия, в области искусственного воспроизводства отмечался резкий спад, обусловленный, в первую очередь, дефицитом производителей. Так, до 2000 г. среднегодовой выпуск молоди севрюги с кубанских рыборазводных заводов составлял около 15 млн штук, донских - около 0,3 млн штук (Зайдинер, Грибанова, 2000; Грибанова, Зайдинер, 2003). В период 2001-2007 гг., согласно официальным данным, воспроизводственные работы с севрюгой были крайне незначительны в связи с острым дефицитом производителей. Выпуск молоди в 2008 г. существенно был ниже по сравнению со среднегодовыми показателями до 2000 г.: на Кубани - более чем в 120 раз, на Дону - в 4 раза, в среднем по Азовскому бассейну - более чем в 78 раз.

В условиях острейшего дефицита производителей и, соответственно, снижения масштабов искусственного воспроизводства все большее значение придается заводскому разведению рыб по интенсивной технологии, которое с учетом перспективы должно быть реализовано на основе, как существенной коррекции традиционных методов, так и разработки новых технологий. Причем все большее значение придается* заводскому разведению. Кроме того, необходимым становится формирование ремонтно-маточных стад» в качестве резерва для пополнения естественных популяций. Это, в свою очередь, требует повышения выживаемости молоди и улучшения ее физиологического состояния.

Известно, что наиболее уязвимым этапом при любой форме аквакультуры является выращивание ранней молоди, особенно личинок, наиболее чувствительных к различным изменениям внешней среды. Следует отметить, что севрюга является одним из сложных объектов воспроизводства. По сравнению с осетром севрюга, особенно на ранних этапах постэмбриогенеза, характеризуется более интенсивным обменом веществ и энергозатратами на рост и развитие, меньшей устойчивостью к дефициту кислорода и низкой сформированностью защитной системы (Гершанович, 1982; Гершанович и др., 1987; Абросимов, 2003, 2008а). Учитывая эти физиологические особенности, одним из важнейших элементов технологии выращивания молоди севрюги является рациональное кормление.

Использование интенсивной технологии позволяет в значительной степени регулировать основные факторы внешней среды, но почти полностью ограничивает доступность естественной пищи, что придает особое значение разработке физиологически полноценных кормов, учитывающих видовую специфичность рыб.

При выпуске в естественные водоемы к качеству молоди рыб предъявляются определенные требования. Так, согласно/ размерно-весовым: стандартам; при выпуске;с рыбоводных заводов в возрасте 40-50'суток молодь,севрюги; должна иметь.массу 1-2 г. Выпуском молоди в этом- возрасте, по данным В.И; Лукьяненко с соавторами (1984); обеспечивается их высокая адаптационная способность к новым условиям среды? естественных: водоемов-: Вместе:: с тем известно; что- повышение' жизнестойкости молоди,. мигрирующей к местам нагула, предполагает, в первую очередь, повышение ее; размеров и улучшение физиологического состояния;

Отечественные: стартовые1 комбикорма; разработанные в начале: 90-х годов; успешно • использовались на рыбоводных заводах при выращивании личинок, мальков и других возрастных групп различных видов и гибридов осетровых, рыб. Однако продуктивное действие и физиологическую питательность этих кормов оценивали в основном при выращивании русского и ленского осетра, гибридов.осетровых рыб, в частности - бестера.

В: сложившейся ситуации одним из путей повышения жизнестойкости севрюги, и сохранения молоди на всех этапах, выращивания является индивидуальный подход при разработке рецептуры корма и метода кормлениям учетом особенности обмена веществ.

Кроме того, восстановление приоритета отечественных специализированных стартовых комбикормов для осетровых рыб может иметь определенное экономическое и социальное значение для южных ретоЩш&остишдачи исследований. Основная цель настоящей работы заключается в повышении биологического и продуктивного действия стартовых кормов и оптимизации кормления севрюги с учетом особенности обмена веществ для повышения эффективности искусственного воспроизводства на интенсивной основе.

Для достижения этой цели поставлены следующие задачи: - изучить возможность оптимизации белкового питания ранней молоди севрюги;

- изучить метаболизм, липидов и жирных кислот в раннем постэмбриогенезе севрюги как показатель физиологической потребности в липидах и незаменимых жирных кислотах;

- изучить воздействие жирнокислотного состава кормов с различными жировыми*добавками на рост и жирнокислотный состав молоди»севрюги;

- изучить углеводное питание ранней молоди- севрюги и> определить наиболее эффективную композицию углеводов в стартовых комбикормах;

- определить оптимальное количество витамина Н2 в составе стартового корма для севрюги;

- разработать стартовый комбикорм для севрюги с высоким биологическим и продуктивным действием-за счет оптимизации,белкового, липидного, жирнокислотного и углеводного питания- и биологически активных компонентов; оценить неспецифическую резистентность молоди севрюги, выращенную на стартовых комбикормах.

Научная новизна и теоретическое значение. В настоящей работе проведено комплексное исследование для оптимизации кормления личинок и мальков севрюги при интенсивном выращивании в условиях осетровых заводов Азовского бассейна.

Проведен подбор компонентов для улучшения физиологической питательности стартового корма. Показано, что при использовании в комбикормах рыбных гидролизатов, нанесенных на пшеничные зародышевые хлопья с целью ускорения сушки, в период становления пищеварительной функции на ранних этапах постэмбриогенеза севрюги снижается биологическое и продуктивное действие корма.

Установлено оптимальное для личинок и мальков севрюги соотношение соЗ/со6 и сумма жирных кислот 18:3 и 22:6 линоленового ряда в липидах корма. Определено оптимальное соотношение в стартовом корме легкогид-ролизуемых и трудногидролизуемых углеводов. Показано, что введение в комбикорма витамина Нг способствует повышению питательности корма в начальный период кормления, определена его норма для ранней молоди севрюги.

На основании собственных данных по« оптимизации белкового, липидного и углеводного питания разработаны, стартовые корма 1-го и 2-го порядка и предложен регламент кормления ими молоди севрюги. Впервые-определена неспецифическая' резистентность молоди севрюги при выращивании на искусственных кормах на интенсивной основе.

Практическая значимость работы, Практическим завершением исследований являлась разработка основных элементов промышленной технологии кормления молоди севрюги при искусственном воспрозводстве.

Материалы исследований дают возможность повысить эффективность искусственного воспроизводства севрюги за счет повышения темпа роста, выживаемости и улучшения физиологического состояния.

Апробация работы. Материалы диссертации представлялись, обсуждались и докладывались на курсах повышения квалификации «Современные принципы и методы управления водными экосистемами и организация предприятий товарного рыбоводства различных форм собственности» (Новочеркасск, 2007); «Действующее законодательство, охрана и управление водными биоресурсами» (Ростов-на-Дону, 2008, 2009) и «Ветеринарный надзор за объектами аквакультуры» (Ростов-на-Дону, 2008, 2009), на 2-й и 3-й Международной научной конференции «Актуальные проблемы биологии, нанотехнологий и медицины» (Ростов-на-Дону, 2008), а также на заседаниях кафедр «Водные биоресурсы и аквакультура» (Ростов-на-Дону) и «Биоэкология и ихтиология» МГУТУ (Москва).

Декларация личного участия. Автор лично участвовал в сборе, обработке и анализе материалов 2003-2008 гг. Разработал схему исследования и провел эксперименты по изучению влияния гидролизатов, липидных добавок, углеводов и витамина Нг на рыбоводно-биологические и биохимические показатели личинок и мальков севрюги. Оценил биологическое и продуктивное действие новых кормов и технологии кормления ранней молоди севрюги по рыбоводным, физиологическим и гематологическим показателям. Провел производственную апробацию результатов исследований на Темрюкском ОРЗ Краснодарского края.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 работ, из них 2 в издании, рекомендованном ВАК.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 144 страницах и состоит из введения, 4 глав, заключения, выводов, практических рекомендаций и приложения (акт производственной проверки). Список цитируемой литературы включает 209 работ, из которых 33 на иностранных языках. Работа содержит 31 таблицу и иллюстрирована 29 рисунками.

Заключение Диссертация по теме "Вирусология", Дудко, Юрий Викторович

Основные выводы диссертационной работы заключаются в следующем:

1-. Повышение в растворимой-фракции протеина водорастворимых белков с 27 до 33,7 %, пептидов - с 38,1 до 47,4 % и свободных аминокислот с 0,9 до 2,9 %, способствует повышению скорости роста ранней молоди севрюги на 46 % в первые 15 суток выращивания (после перехода на активное питание).

2. На ранних этапах* формирования организма, когда системы поддержания жирнокислотного гомеостаза менее развиты, потребность молоди« в эссенциальных жирных кислотах наилучшим образом удовлетворяется при содержании в корме фосфолипидов — 5,6-6,6 % и соотношении соЗ/соб равном 2 и суммы 18:3 и 22:6 - 1,9-2,4 %.

3. Темп роста ранней молоди севрюги и эффективность использования кормов зависят от фракционного состава углеводов пищи. Оптимальным при этом является содержание в кормах Сахаров 5-6, легкогидролизуемых углеводов (декстрины и крахмал) 15-18, клетчатки 4-5, лигнина до 0,5 г на 100 г корма.

4. Оптимальным для ранней молоди севрюги до массы 300-400 мг является витамин Н2 в количестве 0,05 мг/кг корма. Это количество оказывает ростостимулирующий эффект, способствует повышению выживаемости и эффективности использования кормов, формированию благоприятного ли-пидного и жирнокислотного статуса. Введение в корма витамина Н2 для молоди массой более 400 мг недостаточно эффективно.

5. Кормление молоди севрюги кормами с содержанием сырого протеина 55,3 %, в том числе растворимого белка около 40 %, из которых 32 % представлены поли- и олигопептидами примерно в равном соотношении, жира - 10,2 %, соотношением юЗ/соб равном 0,4-0,7, обогащенные витамином Н2 в количестве 0,05 мг/кг корма, (З-каротином в количестве 2,4 мг/кг корма и

119 липидным препаратом «Aqua-grow» с высоким содержанием докозагексаено-вой кислоты способствует повышению темпа роста на 16,3-32,5 %, выживаемости - на< 16,3-24,2 %, эффективности использования протеина и * энергии корма на прирост соответственно на 86-87 и 37-38 %. Кроме того, эти корма обеспечивают высокий физиологический - статус (антиоксидантную защиту и адаптационно-компенсаторные возможности).

6. Эффективность новых кормов повышается при поэтапном кормлении рационами 1 и 2 порядка, при котором корм 1 порядка содержит высокодисперсный протеин, витамин Н2 и p-каротин. В корме 2 порядка - дисперсность-протеина снижается в 1,3-1,5 раз и исключается витамин Н2. Смена кормления при достижении молодью массы 400 мг. При таком кормлении темп роста молоди возрастает на 10,8 %, выживаемость - на 6,8 %, эффективность использования протеина и энергии корма на прирост соответствен- ч, но на 36,3 и 35,8 %.

7. При кормлении новыми кормами, несмотря на некоторые различия в содержании гемоглобина, интенсивности эритропоэза и соотношении клеток лейкоцитов, формулы красной и белой крови на всех вариантах находятся в пределах физиологической нормы. При этом в крови молоди преобладают палочкоядерные гранулоциты, количество которых более чем на 14 % выше сегментоядерных. Несмотря на это, молодь севрюги характеризуется достаточно высокой неспецифической резистентностью (средний цитохимический коэффициент - 2,85-2,93).

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ Для повышения эффективности искусственного воспроизводства севрюги за счет повышения темпа роста и выживаемости, улучшения физиоло-го-биохимического статуса и соответственно повышения жизнестойкости в условиях интенсивной аквакультуры рекомендуем:

- в течение 15 суток с перехода на активное питание до массы около 400: мг личинок севрюги кормить стартовым комбикормом 1 порядка, затем до стандартной массы - стартовым комбикормом 2 порядка;

- стартовый комбикорм 1 порядка должен содержать 45 % животного сырья, 32 % растительного: сырья, дополнительно 15 % рыбного гидролизата, 4 % липидного препарата <<Aqua-grou>>, 0,05 мг/корма витамина Н2 и 2,4 мг/кг корма (З-каротина; '

- стартовый: комбикорм 2 порядка должен содержать 49 % животного сырья; 29 % растительного, дополнительно 15 % рыбного гидролизата+ пше-. ничные зародышевые хлопья (ПЗХ),. 4 % липидного препарата «Aqua-gr6u» и 2,4 мг/кг корма: [З-каротина;

- при; отсутствии таких кормов в течение всего периода выращивания комбикормом* целесообразно использовать комбикорм с; содержанием; 45 % животного сырья, 32 % растительного, дополнительно 15 % рыбного гидролизата; 2 % линетола, 0,05 мг/кг корма витамина Н2 и 2,4 мг/кг корма р-каротина.

При выполнении рекомендации у. молоди севрюги повышается среднесуточный темп роста более чем. на 19 %, выживаемость - более чем на 16 %, кормовые затраты на прирост уменьшаются в 1,5 и более раз, сроки выращивания до стандартной массы снижаются на 10-13 суток.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Дудко, Юрий Викторович, Астрахань

1. Абросимов С.С. Формирование неспецифической резистентности молоди, осетровых в раннем онтогенезе//Тез. докл. IV Всесоюзной конференции по раннему онтогенезу рыб; Мурманск, 1988. Сб.Т. -С.2-4.

2. Абросимов, С.С. Влияние каротиноидов на эффективность использования питательных веществ кормов'молодью осетра //Сб.научн. тр.ВНИИПРХ: Индустриальное рыбоводство в замкнутых системах. М., 1991. - Вып.64. - С.46-50.

3. Абросимов С.С. Влияние каротиноидов на рост и состояние ранней молоди севрюги (Acipenser stellatus Pall.)// Известия Высших учебных заведений. Северо-Кавказский регион. Естественные науки. Ростов-на-Дону, 2003. - № 10 (10).-С. 52-59. <

4. Абросимов С.С. Стабилизация свободнорадикального окисления; липи-дов у молоди Acipenser stellatus при интенсивном выращивании//Научный журнал. Тр. Кубанского гос. аграрного ун-та, 2008а. Вып. 3(12). - С. 77-81.

5. Абросимов С.С. Стресс-факторы и их влияние на физиолого-биохимический статус молоди осетровых// Научный журнал. Тр. Кубанского гос. аграрного ун-та, 20086.- Вып. 3(12). С. 93-98.

6. Абросимов С.С., Абросимова H.A. Белоксберегающий эффект каротиноидных пигментов в составе стартовых комбикормов для осетра // Корма и кормление лососевых рыб в аквакультуре: Сборник научных трудов.- М.: ВНИИПРХ, 1991.-Вып. 62. С. 37-41.

7. Абросимов С.С., Дудко Ю.В. Влияние жирнокислотного состава корма на рост и физиолого-биохимическое сотояние молоди севрюги// Научный журнал. Тр. Кубанского гос. аграрного ун-та, 2009а. Вып. 1(16). - С. 116-119.

8. Абросимов'С.С., Дудко Ю.В. Совершенствование липидного состава стартовых комбикормов севрюги/ Труды Кубанского гос. аграрного университета.- 20096.- № 2 (17).- С. 151-155.

9. Абросимова Е.Б. Особенности аммиачной интоксикации рыб в- интенсивной аквакультуре. Автореф. дисс.канд. биол. наук.- Астрахань, 2009. 25 с.

10. Абросимова H.A. Эффективность кормления молоди севрюги в зависимости от водообмена //Сб. научн. тр.: Биологические основы рационального кормления рыб.- М., 1986.- Вып.49.- С.127-132.

11. Абросимова H.A. Корма и кормление молоди осетровых рыб в индустриальной аквакультуре/ Автореферат на соиск. учен. степ. докт. биол. наук.-М.ВНИИПРХ, 1997.- 76 с.

12. Абросимова H.A., Абросимов С.С., Киянова Е.В. Стартовые комбикорма для севрюги// Рыбоводство и рыболовство, №2 2001 г - С.22-23.

13. Абросимова H.A., Абросимов С.С., Саенко Е.М. Кормовое сырье и добавки для объектов аквакультуры.- Ростов-на-Дону: «Эверест», 2005.- 144 с.

14. Абросимова H.A., Дудкин: С.И., Тарасов Е.К. Способ диагностики инфицирования молоди; осетровых рыб саиролегнией. A.c. 1559922, Заявл. 16.04.1986 г. '

15. Абросимова-H^Ä., Кушак Белов, Е.Г., Саенко Е.М., Кузнецов А.П. Стартовый корм для рыб.- A.c. N 1635302 /СССР/.-1990.- ДСП.- 13 с.

16. Аверкиев Ф.В. Сборник статистических сведений по рыбной промышленности в Азово-Черноморском бассейне в 1927-1959 гг.// Тр. АзНИИРХ, 1960. -Т. 2.- Вып. 2.- 94 с.

17. Аврова Н.Ф. Биохимические механизмы, адаптации к изменяющимся условиям! среды у. позвоночных:. роль липидов // Журнал, эволюционной биохимии и физиологии, 1999: Т.35, № 3. - С. 170-180.

18. Берг Л.С. Рыбы пресных вод СССР и сопредельных стран. M.-JL, 1948. -Ч. 1.-468 с.

19. Бергельсон Л.Д. Биологические мембраны.- М.: Наука, 1975.- 182 с.

20. Биологический энциклопедический словарь) / Гл. ред. М.С. Гиляров, Редкол.: A.A. Баев, Г.Г. Винберг, Г.А. Заварзин и др. М.: Сов. Энциклопедия, 1986.-831 с.

21. БойкоЕ.Г. Избранные труды.- Ростов-на-Дону: Эверест, 2005.- С. 9-129.

22. Бойко Е.Г., Макаров Э;В. Рыбопродуктивность Азовского моря в условиях изменяющегося режима// Материалы к науч. совещ. по вопросам изучения и рационального использования естеств. ресурсов.- Ростов-на-Дону, 1971.- С. 1718.

23. Бондаренко Л.Г. Биологические основы разработки сухих гранулированных кормов для личинок осетровых рыб на примере бестера и русского осетра. Автореф. дис . учен. степ. канд. биол. наук. - М.: ВНИРО, 1985.- 24 с.

24. Бурлакова Е.Б., Сторожок Н.М., Храиова Н.Г. Исследование роли функциональных групп; в. действии, фосфолипидов как синергистов окисления //Биологические мембраны. 1990. - Т. 7, № 6, с. 612-6171

25. Вещев П.В. Созревание волжской севрюги// Рыбное хозяйство. 1998.-№ 3.- С. 23-25.

26. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М., 1972'. 143 с.

27. Гершанович А.Д., Ланин В.И., Шатуновский- М.И. Особенности обмена липидов у рыб // Успехи современной биологии. 1991. - Т. 111, вып. 2. - с 207-219.

28. Гершанович А.Д. Эколого-физиологическая характеристика Молоди осетровых в связи с их выращиванием,- Автореф. дис. на соиск. учен, степ канд. биол. наук.- М., 1982.- 24 с.

29. Гершанович А.Д., Пегасов В.А., Шатуновский М.И. Экология и физиология молоди осетровых. М.: Агропромиздат, 1987. - 215 с.

30. Гиряев A.C. Физиолого-биохимическая характеристика молоди карповых рыб, выращиваемых в поликультуре в условиях II-IV зон рыбоводства.- Автореф. дис. на соиск. учен. степ. канд. биол. наук.- М.: ВНИИПРХ, 1990.- 33 с.

31. Головачев С.А. Повышение эффективности выращивания личинок сиговых рыб путем улучшения жирнокислотного состава стартовых кормов//Сб. на-учн. трудов ГосНИОРХ, 1988. Вып. 281. - С. 105-115.

32. Головин П.П. Стресс у рыб. В кн.: Вопросы паразитологии и патологии рыб. - Л: Зоол. ин-т АН СССР, 1987. - Т.171. - С. 22-32.

33. Головина H.A. Итоги и перспективы гематологических исследований в ихтиопагологии//Вопросы паразитологии и патологии рыб. Л.: Зоол. ин-т АН СССР, 1987, - т.171. - С.115-125.

34. Головина H.A., Тромбицкий И.Д. Гематология прудовых рыб. Кишинев; Штиинца, 1989. - 160 с.

35. Грибанова С.Э., Зайдинер Ю.И. Воспроизводство рыбных запасов'в; бассейне Азовского моря-и в российском Черноморье (1996-2000 'гг.)/ Статистико-экономический сборник. Ростов-на-Дону: «Эверест», 2003. - 52 с.

36. Гринштей C.B., Кост O.A. Структурно-функциональные особенности мембранных белков // Успехи биологической химии, 2001. Т. 41. С. 77-104.

37. Детлаф Т.А., Гинзбург A.C., Шмальгаузен О.И. Развитие осетровых рыб. М.: «Наука», 1981.- 224 с.

38. Дойников К.Г. Материалы по биологии и оценке запасов осетровых рыб Азовского моря// Работы Доно-Кубанской Научной Рыбохозяйственной Станции. Ростов-на-Дону, 1936.- Вып. 4.- С. 5-214.

39. Дудко Ю.В. Неспецифическая резистентность молоди севрюги при кормлении разнокачественными рационами/ Актуальные1 проблемы современной науки и образования: межвузовский сборник научных трудов. Ростов н/Д: изд-во ЮФУ, 2009. - С. 407-413.

40. Евстигнеева Р.П., Серебренникова Г.А., Звонкова E.H., Филлипович Е.А., Митрофанова Т.К., Мягкова Г.И., Скляр Ю.Е. Химия биологически активных природных соединений. М.: Химия, 1976. - 456 с.

41. Зайдинер Ю.И., Попова JI.B. Уловы рыб и нерыбных объектов рыбохозяйственных организаций Азово-Черноморского бассейна (1990-1995 гг.)/ Стат. сборник.- Ростов-на-Дону, 1997. С. 3-98.

42. Зыкова Г.Ф., Журавлева O.JL, Красиков Е.В. Оценка неучтенного и браконьерского вылова русского осетра в р. Волге и Каспийском море // Осетровыена- рубеже XXI' века: Тез; докл. Междунар; конф. Астрахань: Изд-во Касп-НИРХа; 2000:- С. 54-56.

43. Иванов В.П:, Комарова.Г.В. Рыбы Каспийского моря (систематика;, биология, промысел).Астрахань:Изд-воАГТУ,2008.-224с.

44. Иванова Н.Т. Атлас клеток- кровна рыб. Сравнительная; морфология и классификациям форменных элементов^кровшрыб; М;: «Лёгкаяшшищеваяшро-мышленность», 1983. - 110 с.

45. Красная книга Российской,Федерации (Животные)/ Под ред. В.А. Мйно-ранского.- М.: Аст. Астрель, 2001. 864 с. !75;. Калунянц К.А., Ездаков Н.В., Пивняк И.Г. Применение продуктов мик-робиального синтеза в животноводстве. 1980. М.: Колос. - 288 с.

46. Канидьев А.Н., Еамыгин Е.А., Боева Т.М., Милославова Е.А. Теория? и практика использования искусственных кормов в аквакультуре рыб. Аквакуль-тура в ССР и США: Материалы,сов.-амер.Симпозиума: по аквакультуре;,М.: ВНИРО, 1985. С. 52-62.

47. Карагезян К.Т., Овсепян Л.М., Адонц К.Г. Окислительные-процессы и обмен фосфолипидов в мембранных структурах гепатоцитов при.аллоксановом диабете // Клиническая лабораторная диагностика, 1990. №4. - С. 10.

48. Карнаухов В.Н. Биологические функции каротиноидов. М.: Наука, 1988.-240 с.79; Карнаухов Г.И. Белковый полиморфизм и генетическая изменчивость осетровых рыб в современных экологических уеловиях.-Краснодар: КЦПИГШН «Потенциал», 2001. 110 с.

49. Киянова Е.В. Физиолого-биохимическая характеристика молоди русского осетра при введении в рацион кормовых антибиотиков, эубиотиков и анти-оксидантов Автореф. на соиск. учен. степ. канд. биол. наук. - Ростов-на-Дону, 1998. - 23 с.

50. Климов А.Н., Никульчева Н.Г. Обмен липидов и липопротеидов и его нарушения. СПб:Питер Ком,1999. - 512 с.

51. Ковальчук. Л;И, Ружинская Л.П. Влияние качества икры на онтогенез донской севрюги// Основные проблемы рыбного хозяйства и охраны рыбохо-зяйственных водоемов Азово-Черноморского бассейна: сб. научных трудов АзНИИРХ.- Ростов-на-Дону, 1996.- С. 256-258.

52. Кокряков'В:Н. Биохимические основы антимикробной активности неи-трофильных гранулоцитов//Клиническая* морфология нейтрофильных . грану-лоцитов. Л.: 1998. - С. 12-51.

53. Корниенко Г.Г., Кожин A.A., Воловик С.П., Макаров Э.В: Экологические аспекты биологии репродукции. Ростов-на-Дону:Изд-во «Эверест», 1998.-238 с.

54. КорниенкоХ.Г., Бойко Н.Е., Бугаев Л .Я. и др. Физиолого-биохимические и генетические исследования ихтиофауны Азово-Черноморского бассейна/ Методическое руководство. Ростов-на-Дону: Эверест, 2005. - 105 с.

55. Коробейникова Э.Н. Модификация определения перекисного окисления липидов в,реакции с тиобарбитуровой кислотой. //Лабораторное дело.- 1989. -№7.- С. 8-10.

56. Коуи К., Сарджент Дж. Питание // Биоэнергетика и рост рыб /под. ред. У.Хоара, Д.Рендолла, Дж.Бретта. М.: Легк. и пищ. пром-ть, 1983. - С. 8-69.

57. Крепе Е.М. Липиды клеточных мембран:- Ленинград: «Наука», 1981'. С. 116-122.

58. Лакин Г.Ф. Биометрия: М.: Высшая школа, 1980. - 352 с.

59. Легеза М.И. Роль абиотических факторов среды при распределении осетровых (сем. Acipenseridae, Pisces) в Каспийском море// Вопросы ихтиологии.- 1972. Т. 121. - Вып.1. - С. 13-24.

60. Лепилина И.Н. Особенности предличиночного развития севрюги в современных экологических условиях/ Автореф. дисс.канд. биол. наук. Астрахань, 2000. - 23 с.

61. Лескова Г.Ф. Роль нарушений липидного обмена в патогенезе геморрагического шока и пути их коррекции // Успехи современной биологии, 2001. -Т.121, №1. С. 79-90.

62. Лукьяненко В. И., Касимов Р. Ю.<, Кокова А. А. Возрастно-весовой стандарт заводской молоди'каспийских осетровых. Волгоград: Волгоградская - правда, 1984. -229 с.

63. Мазинг Ю.А. Результаты применения лизосомально-катионного теста в клинической практике//Клиническая! морфология нейтрофильных гранулоци-тов.-Л., 1988. С.102-137.

64. Макаров Э.В. Воспроизводство азовских осетровых и современное- состояние их запаса// Тр. ВНИРО. М., 1964. - Т. 54. - Сб. 2. - С. 203-210.

65. Макаров Э.В. Динамиками структура,стада азовских осетровых: Автореф. дис. на соиск. учен. степ. канд. биол. наук.- М., 1970.- 32 с.

66. Макаров Э.В. Проблемы сохранения и восстановления популяций осетровых и перспективы развития осетроводства в Азовском бассейне: Автореф. дис. в виде научн. докл. на соиск. учен. степ. докл. биол. наук. М., 2000. - 69 с.

67. Макаров Э.В., Воловик С.П., Баландина Л.Г. Современное состояние рыбных ресурсов Азовского моря. // Тез. докл. VI Всерос. конф. по проблемам промысл, прогнозир., 4-6 октября 1995 г.- Мурманск: ВНИРО-ПИНРО, 1995.-С. 93-95.

68. Макаров Э.Д., Житенева Л.Д., Абросимова Н.А. Живые ископаемые близки к вымиранию: Научный очерк об осетровых.- Ростов-на-Дону, 2000.138 с.

69. Матишов F.F., Пономарев C.B., Пономарева E.H. Инновационные: технологии индустриальной аквакультуры в осетроводстве//Под общей ред. Проф. Пономарева C.B. Ростов-на-Дону: Изд-во ЮНЦ РАН, 2007. - 368 с.

70. Мецлер Д. Биохимия. М.: Мир, 1980.- Т.1,- 407 с.104' Микряков В.Р.,. Балабанова; JI.B. Клеточные основы иммунитета; рыб// Физиология и паразитология пресноводных животных. Л.: Наука, 1979. -С.105-124. ,

71. Миноранский В.А., Велик В.П., Закугский В.П., Лихачев A.C., Казаков Б.А., Лукина Г.П. Редкие, исчезающие и нуждающиеся в охране животные Ростовской области/ Под, общ. ред.- В;А.Мйноранского.т Ростов-на-Дону: Изд-во Ростовского ун-та; 1996.-С. 243.

72. Моисеев П:А., Азизова Н.А.,.Куранова И.И. Ихтиология.- М.: «Легкая и пищевая промышленность», 1981. С. 198-199.

73. Мусатова Г.Н. Осетровые рыбы реки Кубани и их воспроизводство.-Краснодар: Краснодарское книжное изд-во,. 1973:- 335 с:

74. Озолс А.Я. Энтеральное усвоение углеводов.- Рига: Зинатне, 1984.-211 с.

75. Орлинский Б.С. Добавки и премиксы в рационах. 1984., М.: Россель-хозиздат. - 173 с.

76. Осетровые южных морей СССР/ Сборник 2 М.: Изд-во «Пищевая промышленность», 1964. - 240 с.

77. Остроумова И.Н. Проблема белка и биостимуляторов в кормлении рыб// Изв. ГосНИОРХ. 1977. Т. 127. - С. 3-13.

78. Остроумова И.Н; Особенности пищевых потребностей у рыб с различной температурой обитания и пути повышения эффективности их кормления // Сб. научн. тр. ГосНИОРХ: Эффективное кормление сиговых и лососевых рыб.-Л.: Промрыбвод, 1988.- С.5-25.

79. Остроумова И.Н. Биологические основы кормления рыб. Санкт-Петербург, 2001. - 372 с.

80. Остроумова И.Н., Ильина И.Д. Физиологические основы разработки стартовых кормов, типа «Эквизо для рыб». Сб. научн. трудов ГосНИОРХ, 1981. ВыпЛ75. - С. 66-92.

81. Остроумова И.Н., Тимошина Л.А. Влияние качества белка в гранулированных кормах на интенсивность роста-и физиологические показатели карпа в условиях теплых вод. Рыбо'хоз. изучение внутр. водоемов; 1976, № 18. - С. 3667.

82. Пб.Петрухин И.В. Корма и кормовые добавки. М.: Росагропромиздат, 1989. - 526 с.

83. Пигаревский В.Е. Зернистые лейкоциты и их свойства. Mr. «Медицина», 1978. - 128 с.

84. Н8.Пигаревский В.Е. Лизосомально-катионный тест и перспективы его применения в патоморфологической и лабораторно-диагностической практи-ке//Арх.патол., 1979. - Том 41, № 5. - С.74-80.

85. Пигаревский В.Е. О секреторной активности полиморфноядерных лей-коцитов//Арх. Патолг. 1982, т.44, № 5. - С.3-12.

86. Пигаревский В.Е. Новое в клинико-морфологической оценке функционального состояния нейтрофильных гранулоцитов/ТКиническая морфология нейтрофильных гранулоцитов. Л., 1988. - С.3-11.

87. Пигаревский В.Е., Кокряков В.Н., Мазинг Ю.А., Селиверстова В.Г., Алешина Г.М. Наследственные и возрастные дефициты антимикробных систем нейтрофильных гранулоцитов// Клиническая морфология нейтрофильных гранулоцитов. Л., 1988. - С. 76-86.

88. Плотников Г.К. Активность пищеварительных ферментов у осетровых рыб на ранних стадиях онтогенеза/ Автореф. дисс.канд. биол. наук. Краснодар, 1984. - 24 с.

89. Плотников Г.К., Проскуряков М.Г. Пищеварительные ферменты осетровых на ранних стадиях онтогенеза//Ж. эволюц. биохим. и физиолог. 1984. - Т.20, № 1.- С.21-25.

90. Пономарев C.B. Жирные кислоты и жирорастворимые витамины в искусственных комбикормах для личинок сиговых рыб//Сб.научных трудов: Вопросы физиологии и биохимии питания рыб, М.: ВНИИПРХ, 1967. Вып. 52. -С. 48-55.

91. Пономарев C.B. Биологические основы кормления лососевых рыб в раннем постэмбриогенезе: Автореф. дисс. . д.ра биол. наук. М., 1996. 25 с.

92. Пономарев C.B., Зубкова Е.Б. Применение витазара в комбикормах для осетровых рыб//Ресурсосберегающие технологии в аквакультуре: Мат-лы докл. II Международного симпозиума. Краснодар, 1999. С. 212-213.

93. Пономарев C.B., Пономарева E.H. Биологические основы разведения осетровых и лососевых рыб на интенсивной основе: Моногр. / Астрахан. Гос. Тех. Ун-т. Астрахань: Изд-во АГТУ, 2003. - 256 с.

94. Пономарева E.H. Критические этапы в раннем онтогенезе лососевых и осетровых рыб/ Сб. научн. ст. М.: Наука. Поиск, 2002. - С. 300-303.

95. Пучков Н.В. Физиология рыб. М.: Промпищеиздат, 1954. - 371 с.

96. Рабинович А.Л., Рипатти П.О. Полиненасыщенные углеводородные цепи липидов: структура, свойства, функции// Успехи современной биологии. -1994. Т.114, вып. 10. - С.581-593

97. Распопов В.М. Сравнительная морфофизиологическая характеристика севрюги каспийской и азовской популяций// Осетровое хозяйство водоемов

98. СССР; Краткие тезисы научных докладов, к предстоящему Всесоюзному совещанию. Астрахань, 1989. - Ч: 1". - С. 276.

99. Реков Ю:И1 Изменения запасов • азовских осетровых рыб// Основные проблемы, рыбного хозяйства и охраны рыбохозяйственных водоемов Азово-Черноморского бассейна: сб. научных трудов- АзНИИРХ (1998-1999). Ростов-на-Дону, 2000. - С. 84-87.

100. Реков Ю.И. Запасы азовских осетровых рыб: современное состояние и ближайшие перспективы// Сб. научных трудов АзНИИРХ 2000-2001 гг. М.: «Вопросы рыболовства», 2002. - С. 265-271.

101. Ресурсы живой фауны. Часть I. Водные животные/ Под ред.Битехтиной В.А., Бойко Е.Г., Житеневой Л.Д., Макарова Э.В. Ростов-на-Дону: Изд. РГУ, 1980.- 295 с.

102. Ржавская Ф.М. Жиры рыб и морских млекопитающих. М: Пищевая промышленность, 1976. - 470 с.

103. Рипатти П.О., Рабинович А.Л. О роли докозагексаеновой кислоты вiбиологических мембранах // Тез. докл. IV Всесоюзн. конф. по эколог, физиологии и биохимии рыб.- Вильнюс, 1986.- С.203-204.

104. Рипатти П.О., Рабинович А.Л:, Богдан В.В.//Биохимия молоди пресноводных рыб. Петрозаводск, 1985. С.27.

105. Саенко Е.М. Биологические основы оптимизации белкового питания молоди осетра при искусственном кормлении.- Автореф. дис.учен. степ; канд. биол. наук. Ростов-на-Дону, 1998. - 24 с.

106. Саутин Ю.Ю. Проблема регуляции адаптационных изменений липоге-неза, липолиза и транспорта липидов у рыб//Успехи современной биологии. -1989. Т.107. Вып. 1.-С.131-149

107. Сергеева Н.Т. Физиолого-биохимические основы повышения эффективности питания радужной форели (Salmo gardian Rich) в аквакультуре. Автореф. дисс. . .докт.биол.наук. М., 1989.-51с.

108. Сергеева Н.Т., Жданов Ю.И., Котельникова Л.А. Обмен жирных кислот и индивидуальных фосфолипидов у форели, выращиваемой на комбикормах PFM-5B и РГМ-13В // Биологические основы рационального кормления-рыб.- М., 1986.-С.132-140.

109. Серобаба И. И:, Малышев В: И. Проблемы сохранения экосистемы и рационального использования биоресурсов Азово-Черноморского бассейна// Рыбное хозяйство Украины.- 2001- №6.- С. 4-5.

110. Сидоров B.C. Экологическая биохимия рыб. Липиды.- Л.: Наука, 1983.- 240 с.

111. Скляров В.Я. Биологические основы рационального использования протеина в комбикормах для рыб при индустриальном рыбоводстве: Автореф. Дис. . д-ра с.-х. наук. Краснодара 1985. 43 с.

112. Соколов Л.И., Цепкин Е.А. Осетровые Азово-Черноморского и Каспийского бассейнов (исторический обзор)//Вопросы ихтиологии.- 1996.-Т. 36.- №1 -С. 15-27.

113. Сорвачев К.Ф: Основы биохимии питания рыб. М.: Легкая и пищевая промышленность, 1982.- 247 с.

114. Состояние воспроизводства основных промысловых рыб в Азово-Кубанском районе в 2005 году/ Департамент биологических ресурсов, экологии и рыбохозяйственной деятельности Краснодарского края, 2005-2006.- Сайт: http: priroda.kubangov.ru.- 2009.

115. Строганов Н.С. Акклиматизация и выращивание осетровых рыб в прудах.- М.: Изд-во МГУ, 1968.- 377 с.

116. Титов В.Н. Становление в филогенезе поглощения клетками жирных кислот//Успехи современной биологии. 1999. - Т.119, №6. - С.578-589.

117. Троицкий С.К., Цуникова Е.П. Рыбы бассейнов Нижнего Дона и Кубани: руководство по определению видов.- Ростов-на-Дону: Книжное издательство, 1988.- С. 24-27.

118. Труфанов А.И. Биохимия витаминов и антивитаминов. 1972. М.: Колос. - 328 с.

119. Угол ев A.M. Естественные технологии биологических систем. Л.: Наука, 1987.-317 с.

120. Уголев A.M. Организация и регуляция-процессов мембранного пищеварения и транспорта.// Физиол. журн. СССР им. И.М1 Сеченова, 1970, т. 56, №44 -С: 651-662.

121. Уголев A.M. Мембранное пищеварение. Полисубстратные процессы, организация и регуляция: JIl, 1972.- 358 с.

122. Уголев'А.М., Кузьмина В.В. Пищеварительные процессы и адаптации у рыб СПб, Гидрометеоиздат, 1993. 238 с.

123. Фомина В.А., Роговин В.В., Бавыкина И.В. Цитохимическое исследование активности пероксидазы в лейкоцитах хрящевых и костнохрящевых рыб//Вопрооы ихтиологии. 1984-. - Т.24; № 4, - С.685 - 686.

124. Хоар У., Рендолл Д., Бретт Дж. Биоэнергетика и рост рыб: Пер. с англ.-М.: Легкая и пищевая промышленность, 1983.- 407 с.

125. Ходоревская Р.П., Рубан Г.И., Павлов Д.С. Поведение, миграции, распределение-и запасы осетровых рыб Волгл-Каспийского бассейна. М:: Товарищество научных изданий КМК, 2007. 242 с.

126. Цветненко Ю.Б. Эффективность и генетические последствия интродукции севрюги Asipenser stellatus из Каспийского в Азовский бассейн// Вопросы ихтиологии.- 1993.- Т. 33.- С. 382-387.

127. Чебанов М.С. Экологические основы воспроизводства проходных и полупроходных рыб в условиях зарегулирования стока (на примере реки Кубани)// Автореф. дисс.докт. биол. наук. М., 1996.- 47 с.

128. Чихачев A.C., Цветненко Ю.Б. Оценка влияния искусственного воспроизводства и интродукции на генетическую структуру популяции азовских осетровых// Воспроизводство рыбных запасов Каспийского и Азовского морей.- М.: ВНИРО, 1984.- С. 114-125.

129. Чугунов Н.Л., Чугунова-Н.И. Сравнительная промыслово-бйологичес-кая характеристика.осетровых Азовского .моря// Сб. научн. трудов ВНИРО.- М.:. ;Иищевая;промышленность, 1964V-87-1^83:,.

130. Шилина-iН.М., Конь,И.Я. Роль пищевых веществ.в функционировании системы; aiггиоксидантной защиты организма/. Вопросы детской« диетологии, 2003. Т. 1, № 4. - 53-57. ,

131. Шталь Э. Хроматография в тонких слоях- Mi: Мир, 1965;- 633с:.

132. Шульман Г.Е.; Юнева Т.В. Докозагексаеновая кислотам и ненасыщенность липидов у рыб// Гидробиологический*журнал: -1990а. Т. 26, №6. С 5055. ; ; ■ . : ■ "■. ■

133. Щербина М.А. Методические указания по физиологической оценке питательности кормов для рыб. М: ВАСХНИИЛ, 1983. - 83 с.

134. Щербина М.А., Гамыгии Е.А. Кормление рыб в пресноводной аквакуль-туре. М.: Изд-во ВНИРО, 2006. - 360 с.

135. Экологический-вестник Дона. О состоянии окружающей среды и природных ресурсов Ростовской области в 2002 году. Ростов-на-Дону, 2003. Гл. 6. - С. 86-104; ;. ' ■■

136. Экологический вестник Дона. О состоянии окружающей среды и природных ресурсов Ростовской области, в 2003 году. Ростов-на-Дону, 2004. Гл. 6.-С. 77-100.

137. Экологический вестник Дона. О состоянии окружающей среды и природных ресурсов Ростовской области в 2004 году. Ростов-на-Дону, 2005. Гл. 6.-С. 42-93.

138. Экологический вестник Дона: О состоянии? окружающей«;среды и: приг . родных ресурсов' Ростовской? области« в 2005 году. Ростов-на-Дону, 2006. Ел; 6.-е: 25-49: ■'■

139. Castell J.D., Lu D.J;, Suinhubes R.O. Essential fatty acids in the diet of rainbow trout (Salmo gairdneri) Lipid metabolism and fatty acid composition//!;. Nutr., 1972.-B. 102.- P. 93-100.

140. Gowey C.B. Aspects of protein utilization by fish//Proc. Nutr. Soc:, 1975. -№ 34;- P. 57-63;

141. Finn J.P., Nulson N.O. The inflammatory process of rainbow trout//J; Immunol;,.1971. V. 116, № 9. - P. 1547-1553.

142. FolchJ., Less M., Sloane K., Stanley Z. A Simple method for the isolation and pyrification of total lipids from animal tissues // J. Biol. Chem., 1957. V. 226, № 1. -P. 497-510.

143. Halver J.E. The vitamins required for cultivated Salmonids//Comp. Bio-chem.Physiol., 1982. V. 73, № 1. - P. 43-50.

144. Hung S.O., Fynn-Aikins F.K., Lutes P.B., Xu R. Ability of juvenile white stutgeon (Acipenser transmontanus) to utilize different carbohydrate sources// J.Nutr., 1989.-V. 119. P. 727-733.

145. Jakowska S., Nigrelli R.F.Localizied responses in fish to experimental inflammation caused by pathogenic bacteria//Annat. Record., 1953. V. 117. - P. 526.

146. Ju T.C., Sinnhubes R.O. Reproduction andsurvival of rainbow trout (Salmo gairdneri) linolenic acid as the only source of essential fatty acids lipids. 1979: - 14 B.-P. 572-575.

147. Kanazawa A., Teshima S.R., Onok. Relations pip. Beween essential fattyacid requirements of aquatic animals and the capacity for bioconwersion of linolenic-and to heg hey unsaturater fatty acids// Com. Biochem Physiol., 1979. 63 B. - P. 295298.

148. Kayama M., Hiruta M., Hisai T.//Bull. Japan. Soc. Sci. Fish., 1986. V.52, №5.-P. 853.

149. Ketola H.G. Nutrient Requirement of Warm water // Fishes-Comruittee on Animal Nutrion Board on Aquaculture and Renewable Resources National Acad. Of Sci. Washington D.C. 1977. P. 69.

150. Kitamura S., Suwa T., Ohara S., Nakagawa N. Studies on vitamin requirements of rainbow trout. II. The deficiency symptoms of fourteen kings of vitamin/ ' Bull. Soc. Sci. Fish, 1967. - V. 33, № 12. - P. 1120-1125.

151. Leger C., Latesonpe E.J., Mateiller R. Effect of dietary fatty acids differing chain lenghs and series on the growth and lipid composition of turbot soophihalmus maximus J.//Comp. Biochem. Physiol., 1979. 64 B. - P. 310-350.

152. Lovell R.T. Nutrition and feeding of fish//New-York, Auburn University, 1987.-253 p.

153. Phillips A.M. Trout feeds and feeding/Manual of Fish Culture, 1970. Part 3 management. Sec. B., Hatchery operations. Ch 5, Waschington D.C. - 49 p.

154. Shiau S.Y. Utilization of carbohydrates in warm water fish-with particular reference to tilapia, Oreochromis niloticus x O. aureus // Aquaculture, 1997. V. 151. № 1-4.-P. 79-96.

155. Steffens W. Grundlagen der Fischernahrung. VEB Gustav Fischer Verlag Jena, 1985. - 226 p.

156. Takeuchi T., Arai S., Watanabe T., Shimmaj. Requirement of eel Anguilla japonica for essential fatty acids//Bull. Jap. Soc. Sci Fish, 1980. 46 B. - P. 345-353.

157. Takeuchi T., Watanabe T. Effect of eicosapentaenoic acid docosahexaenoic acid composition of rainbow trout //Bull. Jap: Soc. Sci. Fish, 1977 a. 43 B. - P; 947953.

158. Takeuchi T., Watanabe T. Requirement of carp for essential fatty acids//Bull. Jap. Soc. Sci Fish, 1977 6. B. 43. - P. 541-551.

159. Takeuchi T., Watanabe T. Effect of exass amounts of essential fatty acids on growth of rainbow trout //Bull. Jap. Soc. Sci Fish, 1979. 45 B. - P. 1517-1519.

160. Taylor S.L., Lamden M.P., Tappel A.L. Sensitive Fluoremtric Metod for Tissue Tocopherol analys // Lipids, 1980. V. 10. - № 6. - P. 407-412.

161. Walton M.J., Cowey C.B.//Compar. Biochem. and!Physiol. B., 1982. V.73, №1. - P. 59.

162. Watanabe T. Lipid nutrition offish comp//Biochem. Physiol., 1982. - 73B. -№1. - P. 3-15.

163. Watanabe T., Kobajashi J., Utsue O., Ogino C. Effect of dietary methyl lino-lenate on fatty acid composition of lipids in rainbow trout//Bull. Jap. Soc. Sci. Fish, 1974. 40 B.-P. 387-392.

164. Weinreb E., Weinreb S. A stady experimentally induced endocytosis in a teleost. Light microscopy of peripheral blood cell responses// Zoological. New York: Zoological Society, 1969. - V. 54, №1. - P. 25-34.

165. Yang Jeun-Sing, Biggs H.J. Rapid reliable method for measuring serum lipase activity// Clin. Chem., 1971. V. 17, № 6. - P. 512- 518.

166. Yasuhira Kono. Generation of Superoxid radical during Antioxidation of Hydroxylamine and assay for SOD // Biochemistry and Biophys , 1983.- V. 186,- № 6.- P. 119-195.

167. Основная задача повысить темп роста и выживаемость молоди, сократить сроки выращивания севрюги до стандартной массы - 1,5 г.

168. Температура воды в период выращивания составляла 20,2-26,7 °С, содержание в воде кислорода не менее 5,4 мг/л, рН - 7,4-8,2 ед.

169. Кормление молоди стерляди данными кормами начинали с перехода личинок на активное питание. В течение 15 суток активного питания молодь кормили стартовым кормом 1 порядка, затем с постепенным переводом (в течение 3 суток) на стартовый корм 2 порядка.

170. Физиологическое состояние опытной молоди оценивали методом полифункциональных нагрузок по В.И. Лукьяненко (1989).

171. Установлено что выживаемость экспериментальной молоди севрюги в воде соленостью 12°/оо за первые 12 ч составила 98%, тогда как в контроле 56%.

172. При выдерживании при температуре 32°С выживаемость экспериментальной молоди севрюги через 3 суток составила 32,2%, в контроле выжили единичные экземпляры. При этом гибель рыб в эксперименте началась на 2 сутки, в контроле через 1 час.