Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Оппортунистическая инфекция криптоспоридами и разработка регламента лабораторной диагностики

ВАК РФ 03.00.19, Паразитология

Автореферат диссертации по теме "Оппортунистическая инфекция криптоспоридами и разработка регламента лабораторной диагностики"

'О О Ж 9 2

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ ПО САНИТАРН0-ЭГШДН.«!0.ТОП!ЧЕСК01.{У НАДЗОРУ ПРИ ПРЕЗИДЕНТЕ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ИНСТИТУТ МЕДИЦИНСКОЙ ПАРАЗИТОЛОГИИ и- ТРОПИЧЕСКОЙ МЕДИЦИНЫ имени Е. И. МАРЦШОБСКОГО

На правах рукописи

РАПМОВ АБИДНН АЙДДО оглы

ОППОРТУНИСТИЧЕСКАЯ ИНФЕКЦИЯ КРШОСПОРИДИЯШ . И РАЗРАБОТКА РЕГЛАМЕНТА ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ

03.00.19 - Паразитология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой сепени кандидата медицинских наук

МОСКВА, 1й'Э2

Работа в«полнена в Институте медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е. И. Марциновского Госкомэпиднадаора Российской Федерации

■ Научные руководители:

кандидат биологических наук, ст.н.с. Гордеева Л.М. доктор медицинских наук, профессор Сергиев В.П.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, ст.н.с. Иуйкина Э.Е. кандидат медицинских наук Акимова Р.Ф.

Ведущая организация:

НИИ эпидемиологии и микробиологии им. почетного академика Н.Ф.Гамалеи АШ Российской Федерации

• Зацига состоится марта 1992 г. в "_" часов на засе-

дании' специализированного совета Д.074.39.01 при Институте медицинской паразитологии и тропической медицину им.Е.И.Марцинов-ского Гоекомсадапиднадзора Российской Федерации, по адресу: 119830, Москва ГСП 3, ул. Малая Пироговская, 20.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института. Автореферат разослан

февраля 1992 г.

Учений секретарь ■ специализированного совета Фролова A.A.

>T0V"

ivj:!»• 'Актуальность проблеш. Крнптоспсридшз представляет новую проблему в патологии человека, хотя его возбудитель Cryptosporidium sp., относящийся к кокцидпям, известен более 60 лет (Tyzzer, 1907 - 1912.). Интенсивное научение этого кпиечного протозооза началось в проилом десятилетни в связи с пандемией СПИДа, для н )торого криптоспоридиоз оказался маркерной оппортунистической инфекцией <Лисенко А.Я., 198?; Братанов М., 1969; Casemore, 1990). Криптоспоридии выделяется у детей раннего возраста, страдаицих диареей и гастроэнтеритами; у лиц о имнунодефицитами, в том числе вторичньми, обусловленными интоксикацией, новообразованиями, неправильным применением лекарственных средств, иннуносупресивнш лечением, инфекционными болезнями и т.д. У инмунокоипрометированных больных криптоспоридиоз приобретает характер изнуряицей болезни о особо плохим прогнозен у больньк СПИД. Распространение кршттоспоридибза варьирует от 0,5 '/• до 32У, в разных странах (Casemore, 1990).

Распространение криптоспоридиоза у нас в стране неизвестно, первые случаи этого кокцидиоза описаны в Вильнюсе, Ленинграде, Москве (Марцинкуте А.В., 1989; Бейер Т.В. с соавт., 1990; Плотников А.В. с соавт., 1990 и др.).

Паразителогические методы исследования занимает ведущее нес-то в лабораторной диагностике криптоспоридиоза (Garcia, Bruckner, 1988; Moodley efc al., 1991 и др.). Многие разработанные за рубежом методы диагностики малодоступны у нас в стране.

Возбудители ю щечных протозоозов, вылеляемие из организяа хозяина, характеризуются нестопкостьм трофозоитов-вегетативных форн простейиш. требук>цш максимально быстрой фиксации, а также неравномерным выделением устойчивых в окручеагецей среде цист и

ооцист требунших концентрации для эффективной диагностики. Эти особенности являются основанием к применению комбинации консервантов, методов обогащения и селективной окраски для диагностики возбудителей гашечньк протозооаов. Выбор каждого из этих состав-ляшццх равно как и последовательность их использования представляют по сути разработку регламента лабораторной диагностики .

Основная цель исследования - усовершенствование лабораторной диагностики криптоспоридиоза - требовала решения следующих задач:

- изучить диагностический потенциал доступных и применяемых лабораторной службой страны паразитологических методов, включая консерванты и обогащение для .диагностики криптоспоридиоза и других кишечных протозоозов;

- определить возможность интеграции модифицированного метода Циля-Нилъсена в систему отечественный консервант - обогащение единого комбпнированого метода обследования на.кишечные паразиты и, на его основе разработать регламент лабораторной диагнортикн криптоспоридиоза; - .

' - применить единый комбинированный метод, дополненный методом Щшя-Нильсена, согласно разработанному регламенту лабораторной диагностики для определения частоты криптоспоридиоза ;

- применить единый комбинированный метод, дополненный методом Циля-Нильсена, согласно разработанному регламенту лабораторной диагностики для определения частоты криптоспоридиоза на фоне других паразитов в разных группах населения и в разных географических зонах.

иауЧпол пОсИоНа.

I. Установлено преимущество разработанной системы консервант Турдьюва - формалин-эфирное каждение - референс-метод Ци-ля-Нильсена как наиболее информативного стандартного комбннпро-

ванного метода паразитологического обследования на кишечные паразиты, включая крилтоспоридии.

2. Впервые на территории Узбекистана и Азербайджана у детей первых лет жизни выявлена инфекция криптоспоридиями и.определен ее удельный вес в структуре пораженноетн.

3. Впервы > представлено сравнительное распространение всей совокупности кишечных паразитов в рапных географических ¡зонах, выявленных стандартным методом.

Практическая ¡значимость.

1. Разработан регламент лабораторной диагностики криптоспоридий, позволяющий в одной пробе выявлять трофозоиты, цисты и ооцисты простейших и яйца гельминтов, н пригодный для использования лабораториями практических лечебно-профилактических и са-нитарно-профилактических учреждений.

2. Выявлены новые свойства консерванта Турдыева, позволяюьще более корректно определять ооцисты криптоспоридий во влажном мазке - по эффекту негативного окрашивания, в постоянном окрашенном препарате - по четкой визуализации спорозоитов в ооцпсте. Установлена пригодность отечественных консервантов Турдоевь, и Сафарашева (без красителя) для сбора и хранения материала, под-лежацего исследовании на ооцисты криптоспоридий.

Положения, выносимые на защггу.

1. Лабораторная диагностика криптоспоридиоза и опътг ее отработки для практики.

2. Частота криптоспоридиоза в разных группах населения.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на заседании специализированной коииоспп по предварительной экспертизе диссертаций при ИМПиТМ нн.Е. И.Марцшювекого с приглащеиием сотрудников г.тднла эпидечнологин и экопопш трзнсииссцвных парали-

тарнш болезнен.

Публикации. По материалам диссертация опубликована 1 работа.

Структура и объеи диссертации. Диссертация включает введение, обзор литературы, 4 главы собственных исследований, заключение, выводы, список использованной литературы.Объем диссертации. $.19.. страниц машинописного текста, включая таблиц, 1 рисунок и 3 ышрофотографии. Список литературы содержит ¿^Уисточш-ков, в том числе $77■. отечественных и Лй ?Г зарубежных авторов .

. СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Глага I - обзор литературы - содержит данные о таксономическом положении криптосгюридий н ш ролл в патологии человека; изложены особенности патогенеза, клиники и эпидемиологии. Подробно .проанализированы принципы лабораторной диагностики крнптоспори-диоза и обоснованы пути повышения ее эффективности.

Глава II содержит характеристику материалов и методов исследования. В ссноау работы положены собственные результаты паразитолог ического обследования на криптоспоридии и другие кииечные паразиты, проведенные в трех республиках: Москва (Россия), Баку (Азербайджан) н о.Ургаидаи Бувайдинского района (Узбекистан). Паразитологическое обследование сельского населения в Узбекистане было организовано в 1930 г. в соответствии с Приказом Минод-СССР Н .'?<? от 24.ТПНЯ г. "0 комплексном изучении состоягеи дороаья населения" в связи о проведением Всесоюзной перешю населения. .'

Всего обследовано 1695 челов? в том числе практически здо ровые пица (472), дети дома ребенка (55), стационарные 'больные

с диареями (476), с заболеваниями желудочно-кишечного тракта (10), с иммунодефицитним состоянием после пересадки сердца или почки (23), с лейкозом (7), с нефрологическими заболеваниям! (16), инфицированные БИЧ (104); консультативные больные с желу-дучда-кииечной патологией (40). От обследованных 1695 человек собрано 1813 гроб, в тон числе в консервант Турдыева (1161), в консервант Сафаралиева без красителя (80), в 10 У. раствор нейтрального формалина (574), а также 58 мазков фекалий. Все 1735 проб, собранные в консервирующие жидкости, до и после обогащения формалин эфирным осаждением исследованы влажним иаоком с раствором Люголя; из осадка готовили постоянные препараты, окрашенные модифицированным методдм по Цилю-Нильсену. Дополнительно проведена оценка эфиктивности 9 методов гараситологической диагностики параллельно на материале от 14 доноров с обцим числом анализов 401. Всего выполнено 5275 анализов. *

Проанализированы истории болезни больных с наличием инфекции криптоспоридияыи; картьг медицинского осмотра детей, обследованных в соответствии с Приказом H 779. Составлена краткая характеристика населенных пунктов и объектов, где проводили обследования . Приведены описания основных методов исследования: состав и методика использования консервантов, методов обогащения и окраски материала.

Полученные результаты обработаны статистически ( Янко Я., i960; Лакин Г., 1980).

Глава III, посвящена разработке регламента лабораторной диагностики криптоспорпдиояа. Проведено определение диагностического потенциала применяемых лабораторной службой страны парази-тологическнх методов с использованием отечественных консервантов и методов обогащения для лабораторной дидгностит» крппто^порпди-

оза. В камеральных ошггах да материале от 14 доноров сравнили 9 методов, ьклгачая консерванты Турдыева и 10 У. раствор нейтрального формалина, по отдельности и в сочетании с обогащением флотацией по Фаусту и (или) седиментацией по Рнтчи н окраской карболовым фуксином модифицированным методом Циля-Нильсена. Об эффек-т1шности методов судили по количеству положительных проб с каждым из 14 видов паразитов. Методом Циля-Нильсена выявлены все пробы с ооцистаыи кршггоспориднй. Все виды простейших п гельминтов вьивлены в пробах, собранных в консервант Турдыева. По количеству обнаруженных положительных проб консервант Сафаралиева уступает консерванту Турдыева.. Наименее элективный консервантом оказался 10 У. растзор нейтрального формалина, поскольку в ней не сохранились вегетативные формы простейших. Показано преимущество формалин-эфирного осаждения перед флотационным методом с сернокислым цинком.

При исследовании 47 парнш проб, собранных в полевых условиях в консерванты Турдыева и Сафаралиева, после обогащения выявлено; в консерванте Турдшва - лямблии - I проба, криптоспоридш - 7, бластоцнста - 17, грибы - 10, паразиты отсутствовали в 17 пробах;.в консерванте Сафаралиева - бластоцисга 13, криптоспори-дии - 6, гриоы - И, паразиты отсутствовали в 23 пробах; только нетрдоц Циля-Нильсена - крштгоспоридии - 4, грибы - 10, паразиты отсутствовали в 34 пробах; всего по результатам всех исследований •• лямблии - 1, крштгоспоридии - 7, бластоцнста - 22, грибы -11, паразиты отсутствовали - 13 проб. Эти результаты свидетелъ-

».-готпгп А ПП£,1!»ПЛ.1<ЭГ«Г50 пя по ПГЛД ЯНРКИТ<1 п

прямим методом исследования на криптоспоридии.

Сравнение эффективности комбк дарованного метода с разными консервантами проведено на 77 пробах от больных с диареями и

праетически здоровых лиц. Ни одним методом не удалось выявить все 58 положительных проб. Системой с консервантом Турдыева выявлено 47 проб (81 У.) и 46 (79 У.) - с консервантом Сафаралнева. Однако результаты совпали только по 23 положительным пробам (39 У.) и 19 отрицательным.

При сходь ч'| эффективности обоих вариантов комбинированного метода при сравнении совокупности полученных результатов анализ результатов по отдельный видам паразитов выявил некоторые различия между этими вариантами. Так, процент совпадения положительных проб, выявленных двумя вариантами комбинированного метода ( консервант Гурдыева/Сафаралиева - обогащение - окраска по Цн-лв-Нильсену ) был следующим: крнптоспоридил - 75,0 У., лямблия -О, острица - 50,0 '/., бластоциста - 32,5 '/., амеба Гартманна - О, кииечная амеба - 44,4 '/., карликовая амеба - 0, хилоыаетикс .50,0 У., грибы - 84,0 У..

Совокупность полученных результатов свидетельствует о возможности использования в полевых условиях отечественных консервантов для сбора и хранения материала, содержацего ооцисты крип-тоспоридий; преимущество применения обоих консервантов в визуализации спорозоитов в ооцнсте крпптоспоридий, что делает их диагностику более корректной. Наиболее важным результатом является установление возможностей интеграции селективного метода окраски по Штлм-Нпльсену в качестве референс-метода в системе комбинированного метода, что существенно позшпет его информативность. Впервые система консервант Турдыева (Сайаралиева) - форма-лин-эФпрное осаждение - ноднйпщироваиннй метод Циля-Нильсена ус-пеино применена для обнаружения ооцист крпптоспоридий.

Анализ полученных результатов ппкаэнвает, что '„'-этапное псе -гедовднпе, которое ле'клт р основ» разрзбот энного единого метода

паразлтологического обследования, шжет быть рекомендовано в качестве регламента лабораторной диагностики криптоспорпдий диагностическим лабораториям клинических и инфекционных больниц и санэпидстанций.

Схематическое представление регламента лабораторной диагностики крпптоспорпдиоаа

I Фиксация в консерванте Турдыева. Готовят влажный мазок из | | консерванта ( негативное окрашивание раствором Люголя ) |

I

ло.чцеиграцня материала формалин-эфирный осаждением. |

Яс осада. готовя1? вгажкьй мазок с раствором Люголя. . |

I

[ Кв осадка готовят мазки, фиксируют и окрашивают карбоповш I,. \ фуксином г,о Цнлю-Нильсену. |

В главе IV, посменной апробации регламента лабораторной диагностики криютоспоридгюга,- обобщены результате паразитологи-ческого обследования белый® острыаш кшечньгаи заболеваниями, болькьх с вторнчныши пмыунодефиц:; ;нши состояниям» и ¡здоровых лиц. в ток числе входили а групп»; риска.

При паразитологическон обследовании, выполняемом рекомендуемый единым комбинировании! методом, вклгачаюцим стандартные унифицированные нетодики диагностики, у перечисленных контингентов кроме криптоспоридий выявлены другие кишечные паразиты, что позволяет судить о спектре кишечных паразитов на разных территориях.

В с.Ургандаи обследованы 63 семьи - 2.30 взрослых и 209 детей. Выявлено всего И видов паразш'ов: у детей 10 видов простейших и 1 вид гельминтов, у взрослых соответственно 9 и 1. При общей зараженности паразитами детей в 73,7 У. доля криптоспоридий была менее 1,0 У., а у взрослого населения криптоспоридий не обнаружены совсем при обцей зараженности в 67,8 У.. В структуре зараженности лямблии составили 37,0 7. и бластоцисты - 64,3 '/.. Удельный вес других клинически значимых видов паразитов ниже: дизентирийная амеба - 5,8 '/., дпэнтаыеба - 0,6 У., карликовый цепень - 12,9 /., Выявлена зараженность детей младших возрастов: дизентерийной амебой в 10 месяцев, лямблией в 4 месяца, бласто-цистой в 5 месяцев, карликовым цепнем в 10 месяцев, криптоспори-длем в 19 месяцев. Преобладали сочетанные инфекции. Фактически все случаи инфекции дизентерийной амебой, лямблией, бпастоцистой н карликовым цепнеы были представлены внутрисемейными очагами. В 92,0 У. семей выявлено наличие 2-3 видов возбудителей у 5 - 7 человек, в 3,0 % - 4 вида (лямблия, дизентерийная амеба, бласто-» циста и карлиКовьа! цепень).

Были обследованы дети, посецаицие детские дошкольные учреждения, часто болеющие 'дети и работники' мясокомбината, В этих группах риска инфекция крпптоспоридияни обнаружена только в сак-рытом коллектива - дош ¡аебенка, где удеяь»!й вес ¡мршугострэдий в структуре поражекности дс«зтигал 13,6 отмечен также вьюогай

/дельный вес инфекидт бластоцистои <54,5 У.).

Среди детей, посещаищих детские дошкольные учреждения г.Баку, не выявлено ни одного случая инфекции криптоспоридиями. Но при обшей зараженности в 61,6 У. у детей выявлены лямблии, удельный вес которых достигал 48,3 У., бластоцисты - 23,0 '/., карликового цепня - 5,4 К, трихостронгилуса - 0,5 К, грибов - 22,6 '/•■

Удельный вес бластоцисты у детей первых лет жизни в Баку -32,0 %, в Москве - 13,0 '/., удельный вес лямблий в Баку - 53,0 У., в Москве - 29,7 У.. Бластоциста встречается с первого года жизни у бакинских детей, но отсутствует у московских на первом году жизни. Высокий удельный вес бластоцисты в структуре пораженное™ в ранней возрасте можно оценить как показатель длсбактериоза.

У работников мясокомбината из клинически значимых водов паразитов выявлены только лямблии, удельный вес которых 3,6 '/., бластоциста - 64,3 У. и острица - 7,1 X.

• Б группе лиц с иммунодефицитныии состояниями, включая ВНЧ-положительных, не вьивлено ни одного случая инфекции криптоспоридиями. Высокая зараженность этого контингента бластоцис-той п грибами (71,0 У.) свидетельствуют о выраженном дисбактерио-зе (особенно у перенесиих пересэцку органов и у детей с лейкозом).

Б Узбекистане среди детей с острыми кишечными инфекциями удельнмй вес инфекции криптоспоридиями в структуре пораженности достигал 5,8 У.. Тогда как в Баку при обследовании детей в 3 больницах удельный вес крпптоспоридпоза составлял в среднем 17,и У. < 14,3 /., ¡6,6 у. п ¿0,5 '/.).

Среди оОолелованньк у 31 человека было обнаружено паразпти-рование криптоепорндий. Из них у 15( 48,0 у. ) человек одновременно с криптоспоридиями' в кииечяпке присутствовали и другие па,-

разпты: нигеллы + бластоцпста * грибы (у 2. чел.); токсигенные эшерпхин * протей * бластоцпста; сальмонеллы + бластоцпста; ток-снгенные эшерихии » бластоцпста; лямблии ♦ грибы; карликовая амеба ♦ хиломастикс; нигеллы; сальмонеллы (у 2 чел.); протей; лямблии; бластоцисты; грибы.

Как показал анализ записей в истории болезней, ни у одного ' из выявленных больных простейшие в лабораториях больниц обнаружены не были.

Вольные криптоспоридпозом были обнаружены в Азербайджане -26, Узбекистане --3. Из выявленных 2 больных в Москве 1 был из г.Твери, а другой возвратился из Гвинеи-Виссау. Возраст больных колебался от 2. месяцев до 3,5 лет. Из ннх до 1 года - 20 человек (64,5 X);1 год - 9 человек (29,0 X); 2 года - 1 человек (3,2Х); 3 года - 1 человек (3,2 У.). ;

Всего мальчиков - 22 <70,9 У.) и девочек - 9 (29,0 У.), в тон числе в возрасте до 1 года - .16 (51,6 '/,) мальчиков и 4 (12,9 У.) девочки; в возрасте от 1 года до 2 лет - 4 (12.9 У.) мальчиков и 5 (18,1 У.) девочек. МоноинВазия криптоспоридиями выявлена у 12 (75,0 У.) мальчиков н 4 (25 У.) девочек.

В главе Y зараженность разных групп населения кишечными простейшими анализирована на основе оценки распространенности кишечных простерших среди детей разных 'групп населения в разных регионах. • •

При обследовании здоровых детей в г.Москве, г.Баку и с.Ур-ганджи были выявлены 10 видов простейших (Entamoeba histolytica, Lamblia intestinalis, Cryptosporidium sp.,'Blastocystis hominis, Chilomastix mesnili, Dientam'oeba fragil is, Entamoeba coli, Entamoeba hartmanni, Jodamoeba .butsclilii, Endolimax папа) и 3 вида гельминтов (Enteroblus vermicularis, Hymenolepia nana,

Г г ichosirongy lus sp.), а также грибы. Среди простейших повсеместно обнаруживали лямблии, бластоцисту, кишечную амебу и амебу Гартманна, а также грибы.

Наибольшее число видов паразтов выявили в Узбекистане, включая дизентерийную амебу, криптоспоридия, диэнтаыебу, йодамебу и хиломастнкс. В Баку не обнаружили дизентерийную амебу и диэнта-мебу. Наименьшее число видов паразитических простейших - 5 выявили в Москве. Повсеместно сохранялась тенденция увеличения числа регистрируемых паразитов с увеличением- возраста обследуемых.

Сравнение числа вьщелляемых видов паразитов у детей с диареей и у здоровых показало отсутствие амебы Гартманна у детей младшге возрастов и ее обнаружено у детей старшего возраста.

Тенденция сокращения видов паразитов у больных острыми кишечными заболеваниями отмечена на всех территориях, где проводили обследование. Б Баку у детей больных ОКЗ не обнаруживали амебу Гартманна, карликовую амебу и йодаиебу. В с.Ургандаи у больных детей не выявили диэнтамебу и хиломастикс.

У взрослых отмечали такую же закономерность. У больных ОКЗ обнаруживали только 3 вида - бластоцисту, кишечнум и карликовую анебы, у здоровых взрослых выделяли 6 видов простейших, в тон числе лямблию, хиломастикс и амебу Гартманна. Наиболее бедный видовой состав фауны простейших установлен у стационарных больных. Среди ВИЧ-инфицированных пациентов выявили 4 в ¡да простей-чих, в том числе дизентерийную и кишечную амебы, лямблию и бластоцисту; всего 2 вида - бластоцисту и кишечную амебу регистрировал у Сольных гематологического, неврологического гастроэнтеро-логческого отделений; только 1 вид (бластоциста) был обнаружен в послеоперационном периоде у лиц с трансплантацией органов.

Вбгавле.чи» широкого Спектра параоитнчеслмх организмов, а так-

же различий видового состава кишечных простейших у разных категорий обследованных контингентов свидетельствует о пригодности разработанного и апробированного комбинированного метода для выявления кишечных паразитов человека при эпидемиологических и диагностических исследованиях. В результате использования рекомендуемого метода удалось впервые изучить сравнительное распространение всей совокупности кишечных паразитов в разных географических зонах. Благодаря такому ыетоду, каким является комбинации консерванта Турднева с обогащением по Ритчи ( модификация Алле-на, Ридли) и окраской по Цилю-Нильсену, учреждена здравоохранения имеют возможность получать значительно более информативные данные об уровне здоровья обслуживаемого населения при существенном сокращении трудозатрат.

ВЫВОДЫ

1. Разработан регламент лабораторного обнаружения криптоспо-ридий на основе трехэтапного исследования - консервант - формалин-эфирное осаждение - референс-ыетод.

Установлена возможность интеграции модифицированного метода Циля-Нильсена как.референс-метода в систему лабораторного осле-довання на кишечные паразиты комбинированным методом. Рекомендуемый комбинированный метод позволяет выявлять трофозоитм, цисты и ооцисти простейших- яйца гельминтов в одной и той же пробе.

2,. Впервые представлено сравнительное распространение всей совокупности шшечнш паразитов у населения разных регионов стандартным методом. Определен удельный вес инфекции■ криптоспо-ридиями в Узбекистане и Азербайджане, который'достигает 5,8 У. н 17,0 У. соответственно у детей с диареями. 0,6 X - у практически здоровых детей и 13,6 X - у.часто болеюцн* детей." ;

3. Проведена оценка диагностического потенциала доступных и применяемых лабораторной службой паразпгологических методов с использованием консервантов и обогащения для диагностики криптоспоридий.

4. Установлена пригодность отечественных консервантов Турдыева н Сафаралиева (без красителя) для сбора и хранения материала, подлежащего исследования на ооцисты криптоспоридий.

5. Выявлены новые свойства консерванта Турдовва, позволяющие более корректно определять ооцисты криптоспоридий: во влажном мазке - по эффекту негативного окрашивания, в постоянной окрашенном препарате - по четкой визуализации спорю зонтов в ооцисте.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕК0МЕНДАЦ1Ш

1. Разработанный трехэтапный комбинированный метод диагностики криптоспорндиоза (консервант Турдыева - формалин-эфирное осаждение - референе-метод по Цилм-Нильсену) позволяет выявлять в единой пробе трофозоиты, цисты ооцисты килечных простейших и яйца гельминтов. Этот метод рекомендуется клиническим диагностическим лабораториям для дифференциальной диагностики острых кишечных заболеваний центрам Госсанэпиднадзора при расшифровке этиологической структуры вспышек кишечных заболевании и при анализе ситуации по паразтарным болезням на разных территориях.

ВНЕДРЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ В ПРАКТИКУ

Разраоотаннш комбинированный метод диагностики был применен в паразитологическом обследовании населения, организованном в соответствии с Приказом Минздрава СССР II 779 от 24. 10. 0У г. "0

комплексном . изучении состояния здоровья населения" в связи с проведением Всесоюзной переписи населеня.

СПИСОК НАУЧНЫХ РАБОТ. ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ Гордеева JI.M., Ратинов A.A., Сергиев В.П,, Исаков Э.З.

Паразитарную кишечные инвазии среди детского населения сельской местности Узбекистана // В сб.: Региональные особенности заболеваемости детского населения. M.-I991.-С.51.