Морфологические закономерности ранних стадий развития головного мозга в условиях пренатальной алкоголизации

Солонский, Анатолий Владимирович

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Морфологические закономерности ранних стадий развития головного мозга в условиях пренатальной алкоголизации
ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации по теме "Морфологические закономерности ранних стадий развития головного мозга в условиях пренатальной алкоголизации"

На правах рукописи

Солонский Анатолии Владимирович

МОРФОЛо!ИЧьСКИь ЗАКОНОМькНОСI И РАННИХ СТАДИЙ РАЗВИТИЯ ГОЛОВНОГО МОЗГА В УСЛОВИЯХ ПРЕНАТАЛЬНОЙ АЛКОГОЛИЗАЦИИ

03 00 25 - гистология, цитология,

клеточная биология 14 00 45 - наркология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

□G34489B3

Томск - 2008

003448963

Работа выполнена в ГУ НИИ психического здоровья Томского научного центра СО РАМН и ГОУ ВПО Сибирский государственный медицинский университет Росздрава

Научные консультанты:

доктор медицинских наук,

профессор Логвинов Сергей Валентинович

доктор медицинских наук,

профессор, академик РАМН Семке Валентин Яковлевич

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Склянов Юрий Иванович

доктор медицинских наук, доцент Плешко Раиса Ивановна

доктор медицинских наук, профессор Мандель Анна Исаевна

Ведущая организация:

ГОУ ВПО Омская государственная медицинская академия Росздрава

заседании специализированного совета Д 208 096 03 при СибГМУ (634050, г Томск, Московский тракт, 2)

С диссертацией можно ознакомиться в научно-медицинской библиотеке ГОУ ВПО Сибирский государственный медицинский университет Росздрава

Защита диссертации состоится

в 10 00 часов на

Автореферат разослан « ^ » 0к 2008 г

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор медицинских наук

Герасимов А В

Общая характеристика работы

Актуальность медицинских и социальных проблем, связанных с употреблением алкоголя и алкоголизмом, постоянно возрастает По своей значимости эти проблемы (по прогнозам Всемирной Организации Здравоохранения) в первые годы нынешнего тысячелетия будут занимать первое место В той же мере актуальным остается появление патологии в потомстве злоупотребляющих этанолом и больных алкоголизмом Особое место отводится изучению патологии мозга, которая во многом определяет как развитие заболевания, так и формирование его клинических проявлений, особенности течения и исхода, эффективность лечения, возможности социальной адаптации больных (Семченко 3 В , Боголепов H H , Степанов С С , 1995, Бочков H П , Васечкин В Б, 2004)

Важнейшим аспектом проблемы алкоголизма является влияние употребляемого этанола на потомство Речь идет о широком круге вопросов

- от психологического влияния страдающих алкоголизмом родителей на детей (психологическая атмосфера семьи, дефекты воспитания) и «материнского фактора», до генетических и тератогенных воздействий самого алкоголя (Моховиков АН, 1986, 1987, Astley S J, Omnell LM, Clarren S К, 2000, Bannaga M , 2000, Gardner J , 2000, Bichenkov E , Ellingson J S , 2001, Schonfeld AM et al 2001, Gilger J W , Kaplan В J , 2002, Yelin R et al, 2007, Pollard 1,2007)

В связи с изучением повышенного риска развития психической патологии в потомстве больных алкоголизмом большой интерес представляет женский алкоголизм Хорошо известны факты, когда злоупотребление алкоголем приводит к появлению на свет детей со значительными сомато-неврологическими и психическими аномалиями (Viljoen D , 1999, Moore ES et al, 2001, Moor ES et al 2002, Viljoen D , et al, 2002, Ostrea E M Jr, et al, 2006)

Благодаря работам многих исследователей, проведенных на животных и человеке, был установлен широкий диапазон влияния алкоголя на потомство

- от легких поведенческих отклонений до тяжелых форм органического мозгового синдрома, который получил название «алкогольного синдрома плода» (АСП) (Lemome Р , Harousseau H , Borteyru J P , Menuet J С , 1968, Jones К L , Smith D W 1973, 1975, Bhatara V S , et al 2002, Moore E S , et al, 2002) Основой этих расстройств являются разной степени выраженности изменения функции и структуры мозга В наиболее легких формах алкогольного поражения мозга допускают существование измененной реакции на внешние воздействия («алкогольные эффекты») (Taylor AN,

1983, Earnest DJ, Chen WJ, West JR, 2001), тогда как при алкогольном синдроме плода были обнаружены нарушения его развития Эти исследования были проведены в основном в модельных опытах на животных, соответствующих же исследований при аналогичном синдроме у человека еще недостаточно Существуют лишь единичные работы, касающиеся нейроморфологии мозга в потомстве больных алкоголизмом (Biesold D, Matthies Н , 1977, Clarren S К, Smith D W 1978, Clarren S К 1981, Tanaka H, Nasu F, Inomata К, 1991, Ikonomidou С et al, 2000) В этих работах имеется описание структурных нарушений мозга в постнатальном периоде (16 случаев), и только в трех наблюдениях использован пренатальный материал (17,18 и 20 недель развития) Понятно, что столь малое число наблюдений не позволяет выявить различные варианты повреждающего действия этанола на эмбриональный мозг при алкоголизме матери Необходимо изучить различные участки мозга в процессе его развития, а также исследовать ультраструктурные проявления этих нарушений

Для изучения патологии мозга эмбрионов, развивающихся в организме больной алкоголизмом матери, нами были использованы методы световой и трансмиссионной электронной микроскопии Эти методы позволяют изучить ультраструктуру клеточных элементов развивающегося мозга, охарактеризовать степень повреждения или сохранности их органелл, мембранных структур, дать оценку уровню дифференцировки клеток и внутриклеточных образований

В процессе настоящего исследования изучались все типы клеточных элементов эмбриональной мозговой ткани нейробласты, глиобласты, микроглиальные клетки, а также эндотелиальные клетки развивающихся сосудов Кроме того, большое внимание уделялось формированию межклеточных связей, характеризующихся установлением синаптических контактов Требует решения вопрос о характере влияния злоупотребления алкоголем на процесс синаптогенеза, который имеет решающее значение для реализации функций мозга Известно также, что дифференцировка нейробластов и глиобластов зависит от степени развития и сохранности сосудистого русла растущего мозга, поэтому было проанализировано состояние сосудов

Дополнительно к методам световой и электронной микроскопии использовался метод электронной цитохимии, который позволяет выявить некоторые особенности метаболизма клеток, а также принадлежность отдельных органелл к той или иной функциональной и биохимической системе В качестве маркера для установления этих показателей использовался фермент кислая фосфатаза

В связи с изложенным, имеется достаточно оснований утверждать, что изучение особенностей поражения мозга плодов у злоупотребляющих алкоголем матерей может иметь значение не только для познания патогенеза алкоголизма и профилактики его последствий у детей, но и более широкий интерес для теоретической и клинической психиатрии в рамках проблемы роли врожденной патологии мозга, как фактора риска развития психической патологии в потомстве больных с различными психическими заболеваниями

Цель исследования.

Изучить общие закономерности и морфологические особенности влияния алкоголизации матери на нервные и глиальные клетки, а также морфометрические параметры кровеносных сосудов и синаптических контактов коры головного мозга эмбрионов и плодов 7-12 недель развития

Задачи исследования.

] Выявить ультраструктурные особенности нейробластов и глиобластов коры эмбрионального мозга, развивающегося в условиях алкоголизации матери в период беременности,

2 Выявить особенности формирования синаптических контактов в промежуточном слое коры головного мозга в процессе развития и провести компьютерно-морфометрический анализ параметров синаптических соединений в процессе дифференцировки,

3 Изучить ультраструктурные особенности строения капилляров эпендимного и промежуточного слоев коры развивающегося мозга,

4 Провести компьютерно-морфометрический анализ параметров развивающихся сосудов стенки переднего мозга в норме и при алкоголизации материнского организма и оценить степень ее воздействия на васкуляризацию ткани мозга

Положения, выносимые на защиту:

1 Пренатальная алкоголизация приводит к нарушениям формирования корковой пластинки эмбрионального мозга человека

2 Прием алкоголя во время беременности является причиной нарушений ультратонкого строения клеточных элементов развивающегося мозга человека Алкоголь вызывает изменения мембран нейробластов и глиобластов, влияет на структуру органелл, нарушает синаптогенез, приводя к отставанию в формировании синаптических контактов клеток промежуточного слоя

3 Алкоголизация материнского организма в период беременности оказывает значительное воздействие на динамику развития кровеносной системы эмбрионального мозга человека, что выражается в изменении характера васкуляризации растущего мозга

4 Алкоголизация материнского организма в период беременности приводит к преходящим изменениям активности ацетилхолинэстеразы в ряде образований переднего мозга новорожденных животных

Научная новизна исследования. В результате настоящего исследования получены ранее отсутствовавшие в научной литературе данные об ультраструктуре развивающегося мозга при алкоголизации матери в период беременности Были впервые выявлены следующие изменения повреждение цитоплазматической мембраны и внутренних мембранных систем клеток, появление и последующая трансформация разного типа сферических образований в першгуклеарном пространстве, многообразие вариантов митохондрий, как нормального строения, так и с признаками функциональной и структурной патологии; усиленное развитие комплекса Гольджи, появление липофусцина, мультивезикулярных телец и миелиноподобных образований, задержка развития синаптических контактов везикулярного типа, проявляющаяся в уменьшении длины постсинаптических уплотнений синаптических контактов, уменьшении площади, а также периметра пресинаптических терминалей в основной группе исследования, изменение характера васкуляризации ткани мозга, что выражалось в снижении средней площади сосудов, увеличении их

количества на единицу площади и уменьшении периметра сосудов мозга Существенно, что перечисленные сдвиги развиваются на фоне достаточной зрелости ткани мозга в целом

Практическая ценность работы. Результаты, представленные в настоящем исследовании, свидетельствуют о том, что при алкоголизме матерей и в случаях употребления женщинами алкоголя в период беременности в мозге развивающегося плода возможно возникновение целого комплекса ультраструктурных изменений, которые могут быть биологической основой широкого диапазона поведенческой патологии в потомстве больных алкоголизмом, а также более тяжелых нарушений в виде умственной отсталости Полученные данные могут служить основой для дальнейшей разработки проблем врожденной мозговой патологии, а также общих вопросов развития мозга на его эмбриональной стадии Это делает результаты настоящего исследования ценными для разработки профилактических (биологических и психологических) мероприятий, а также корригирующих воздействий в соответствующих группах пациентов Полученные результаты внедрены в учебный процесс на кафедрах гистологии, цитологии и эмбриологии, морфологии и общей патологии СибГМУ при изучении развития нервной системы

Апробация материалов диссертации. Основные положения диссертации были доложены и обсуждены на отечественных и международных конференциях, симпозиумах и конгрессах, в том числе на региональной конференции «Психическое здоровье Региональные аспекты» (Владивосток, 1992), на конференции «Современные аспекты эндогенной и экзогенно-органической патологии» (Томск, Кемерово, 1995), на заседании Президиума ТНЦ СО РАМН (Томск, 1998), на конференциях и Ученых советах ГУ НИИ ПЗ ТНЦ СО РАМН (1994, 1996, 1997, 2000, 2001, 20022008), на заседании Президиума Сибирского Отделения РАМН «Коморбидность аддиктивных состояний патобиологические механизмы и возможности профилактики» (Новосибирск, апрель 2001 г), на Всероссийской конференции с международным участием «Современные проблемы биологической психиатрии и наркологии» (Томск, март 2003 г), на XII национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, апрель 2004), на VII конгрессе международной ассоциации морфологов (Казань, сентябрь 2004 г), на VIII Европейской коллегии по нейропсихофармакологии (Москва, апрель 2005 г), на V Сибирском физиологическом съезде (Томск, июнь 2005 г), на XIII Всемирном конгрессе по психиатрии (Египет, Каир, сентябрь 2005 г), на XIV

национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, апрель 2007 г), на региональной научно-практической конференции «Клинико-биологические проблемы охраны психического здоровья материнства и детства» (Томск, октябрь 2007 г), на Второй Всероссийской конференции с международным участием «Современные проблемы биологической психиатрии и наркологии» (Томск, март 2008 г)

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 42 печатные работы, из которых 17 статей опубликованы в журналах, рекомендованных ВАК для изложения материалов диссертаций на соискание ученой степени доктора наук

Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследования, 2 глав результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов и списка литературы Общий объем работы составляет 243 страницы машинописного текста Список литературы включает 386 источников, из которых 126 наименований отечественных и 260 иностранных изданий Иллюстративный материал представлен на 52 рисунках, в 8 таблицах и 2 схемах

Материал и методы исследования

Для решения поставленных задач было изучено 53 эмбриона 7-12 недель развития Составившие основную группу 23 эмбриона, были получены от матерей, употреблявших алкоголь в период беременности и страдающих алкоголизмом I - II стадии (F 10 201, F 10202) Контрольную группу составили 30 эмбрионов, взятые от психически и соматически здоровых женщин

Головной мозг эмбрионов получали непосредственно в процессе проведения операции по искусственному прерыванию беременности в роддомах и гинекологических отделениях больниц г Томска, при этом все процедуры выполнялись с учетом требований этического комитета

Больные, входящие в основную группу, состояли на учете в Областном наркологическом диспансере г Томска Диагностика осуществлялась специалистом-наркологом этой службы и врачами-наркологами отделения аддиктивных состояний ГУ НИИ ПЗ ТНЦ СО РАМН по Международной классификации болезней (МКБ-9, МКБ-10) В зависимости от времени набора материала, соответственно, шифр заболевания 303 1 и 303 2 (алкоголизм I стадии, алкоголизм II стадии) - по МКБ-9, F10 201 и F10 202 -по МКБ-10 (психические и поведенческие расстройства в результате

употребления алкоголя, синдром зависимости, в настоящее время -воздержание)

Возраст пациенток был от 25 до 41 года (средний возраст 37,1 лет) По срокам беременности они распределялись следующим образом 7-8 недель -7 случаев, 9-10 недель - 5, 11-12 недель - 11 Давность заболевания у обследованных больных составляла от 3 до 13 лет

В период беременности больные употребляли в зависимости от толерантности от 500 до 800 мл 40% алкоголя в день Все женщины лечились ранее от алкоголизма и прошли от 1 до 10 курсов лечения, но никто из них в период, предшествующий аборту не находился на лечении дисульфирамом

Всего в контрольной группе было 30 женщин По возрасту они распределялись следующим образом 19-29 лет - 19 человек, 30-39 лет - 9 человек, 40-49 лет - 2 человека Срок беременности у них к моменту ее прерывания был соответственно 7-8 недель - 13 случаев, 9-10 недель - 7 случаев, 11-12 недель - 10 случаев

Главным критерием для отбора женщин в контрольную группу являлся факт отсутствия употребления алкоголя в течение одного месяца до зачатия и в течение беременности Кроме того, в эту группу включали только тех женщин, которые не страдали хроническими заболеваниями, не употребляли лекарств и не имели в быту и на производстве контакта с токсическими веществами, радиацией и др

Головной мозг эмбрионов при подготовке к изучению методами световой микроскопии фиксировали 10% нейтральным формалином Материал заключали в целлоидин, после чего изготавливали срезы толщиной 15 мкм и окрашивали крезиловым фиолетовым по Нисслю

Для изучения влияния хронической алкогольной интоксикации материнского организма на холинергическую систему мозга у потомства крыс использовалась активность ацетилхолинэстеразы (АХЭ) в различных структурах мозга АХЭ (КФ 3 117) является ферментом, расщепляющим ацетилхолин Она участвует в регуляции ионных сдвигов (в частности, ионов натрия и калия), обеспечивает быстрый эффект действия квантов ацетилхолина и ограничивает область постсинаптического распределения каждого кванта При гистохимическом исследовании АХЭ обнаруживается в телах нейронов, их отростках и терминалях Волокна, богатые АХЭ, имеют, подобно дофаминергическим, вполне определенную локализацию в человеческом мозге АХЭ-содержащие волокна проходят через ствол мозга к структурам лимбической системы, полосатому телу, а также к коре больших полушарий

Экспериментальная часть исследования заключалась в изучении головного мозга крысят в возрасте 5, 10, 15, 20 и 30 дней На каждый срок

были взяты по 3 - 4 особи из разных пометов экспериментальной и контрольной материнских групп животных Активность АХЭ определяли в хвостатом ядре, латеральном септальном, прилежащем (аккумбенс) ядрах и в диагональной полоске Брока (определение локализации проводили по атласу J de Groot (1959)

В материнские группы были взяты самки беспородных белых крыс с массой тела 200 - 250 г Животных содержали на стандартной диете (брикеты № 2) с добавлением свежих овощей, растительного масла и поливитаминов 1-я (экспериментальная) группа крыс получала в качестве единственного источника жидкости раствор этанола, концентрация которого была повышена с 15 до 40% в течение 1-го месяца экспозиции При таких условиях крысы находились в течение 3-5 мес до зачатия, весь период беременности и вскармливания, потребляя в среднем 48 мл 40% этанола на 1 кг массы в сутки 2-я (контрольная) группа животных получала вместо этанола воду без ограничения количества Крысы обеих групп спаривались с самцами, не получавшими этанол От них получили потомство соответственно 20 и 16 животных

Мозг крысят, взятый после быстрой декапитации, разрезали сагиттально и из двух половинок, принадлежащих животным 1-й и 2-й групп, формировали один блок При монтаже соблюдалась идентичность плоскости фронтального среза Материал замораживали в жидком азоте Приготавливали срезы толщиной 15 мкм и помещали их в свежеприготовленную среду для выявления активности АХЭ по методу Карновского - Руте на 120 мин при температуре 22 С° Затем срезы постфиксировали в 1% СаСЬг, приготовленном на 10% нейтральном формалине, и обезвоживали в растворах этилового спирта, просветляли толуолом и заключали в бальзам

Фотометрировали идентичные участки соответствующих структур мозга, принадлежащих подопытным и контрольным животным Интенсивность реакций оценивали в условных единицах на микроскопе «Люмам Р—3», с приставкой ФМЭЛ-1 при длине волны 487 нм

Оптическую плотность продукта реакции определяли по формуле Е- lg h/I,

где Е - оптическая плотность продукта реакции, /о - интенсивность света, прошедшего через препарат без среза (фон), I - интенсивность света, прошедшего через препарат со срезом

В каждом препарате промеряли по 20 значений фона и 20 значений интенсивности света, прошедшего через идентичные участки того и другого среза Диаметр зонда на плоскость препарата для фотометрии нейропиля

составлял 135 мкм, для фотометрии нейронов - 25 мкм при увеличении объектива соответственно в 3,7 и 20 раз

Для морфологического исследования головной мозг эмбрионов фиксировали в 0,5% глутаральдегиде на фосфатном буфере pH 7 3-7 4, дофиксировали в осмиевой кислоте, обезвоживали в спиртах восходящей концентрации и заливали в аралдит по общепринятой методике Полутонкие и ультратонкие срезы изготавливали на ультратоме «Ultracut-E» (Reichert, Австрия), окрашивали по Рейнольдсу и просматривали в электронных микроскопах «JEM-100B», «JEM-100CX» (JEOL, Япония) и «ЕМ-201» (Philips, Голландия)

Морфометрический анализ применялся для получения количественных параметров нервных клеток, клеточных органелл, синапсов и сосудов коры головного мозга эмбсионов на различных стадиях развития с целью выяснения зависимости изменений структуры указанных компонентов от степени их дифференцировки и оценки влияния патологических воздействий на процесс синаптогенеза и васкулогенеза

Для решения этой задачи была разработана программа анализа изображений, позволяющая с помощью персонального компьютера производить цифровой обсчет параметров развивающихся синапсов Нами был разработан алгоритм программы, который был реализован в виде программного продукта «Measure Maker» Эта программа позволяет измерять параметры изображения сканированных электронограмм (микрофотографий) непосредственно на экране монитора Она также позволяет количественно оценить длину и площадь пре- и постсинаптических структур Для сопоставления условных величин длины, полученных с помощью разработанной программы (количество пикселей экрана монитора), и реальных значений, принятых в электронной микроскопии для измерения протяженности объектов (микрометры, нанометры), была взята паспортная электронограмма реплики дифракционной решетки, снятая с помощью электронного микроскопа Фотография была отсканирована с необходимыми установками, промерена с использованием программы измерения изображений и выявлено соотношение условных величин экрана и реальных размеров объекта Таким образом, достигнуто согласование различных методов определения длины Величины площади измеряемых структур вычисляются путем математических расчетов и также могут быть представлены в виде реальных значений

Нами установлено, что данные, полученные с помощью этой программы, полностью сопоставимы с результатами измерений, проведенных с использованием программы анализа изображений «Scion Image for Windows» (based on the NIH Image on the Macintosh platform) Ha начальном этапе исследований преимущественно использовалась программа

«Measure Maker», в дальнейшем все измерения были произведены с помощью программы «Scion Image for Windows»

Для морфометрического анализа использовали фотоотпечатки с негативов формата 6x9 см, полученных с помощью электронного микроскопа Отпечатки с негативов делали контактным способом 1 1, затем изображение сканировали в градациях серого с разрешением 300 dpi, с сохранением в формате TIFF без компрессии Часть негативов оцифровывали с помощью сканера без промежуточных бумажных фотокопий

Для компьютерной морфометрии сосудов использовали полутонкие (толщиной 0,5-1 мкм) срезы на уровне промежуточного слоя, окрашенные метиленовым синим С помощью цифровой камеры, встроенной в световой микроскоп, получали снимки в формате BMP На снимках при помощи программы Scion Image for Windows были исследованы средняя площадь сосудов обшая площадь сосудов, деленная на общее количество сосудов, относительная площадь сосудов общая площадь сосудов, деленная на площадь ткани на снимке и умноженная на 100, количество сосудов на единицу площади, а также периметр сосудов в контрольной и основной группах

Для морфометрического анализа синапсов электронные микрофотографии эмбрионального мозга делали с одним и тем же увеличением - 48 000 Это связано с такими особенностями эмбриональной ткани, как незначительное количество синапсов на ранних стадиях развития и величиной самих синаптических соединений Для анализа брали по 5 случаев из каждого возрастного периода в контрольной и опытной группах Из каждого случая использовали по 15-20 микрофотографий различных участков промежуточного слоя Были выбраны для анализа следующие параметры синапсов 1 - периметр пресинаптической терминали, 2 -площадь пресинаптической терминали, 3 - длина постсинаптического уплотнения Результаты измерений представлены в относительных значениях, выражающих число пикселов (р), при оценке длины, и число пикселов изображения в квадрате (р2) при оценке площади структурных компонентов синапсов

В процессе изучения клеточных органелл использовали также маркер лизосом - реакцию на кислую фосфатазу Для ее выявления был применен электронно-цитохимический метод (Бухвапов И Б , 1982)

Для статистической обработки данных применяли программу Statistica 6 0, параметрические и непараметрические методы вариационной статистики t-критерий Стьюдента, //-критерий), различия считали значимыми при Р<0,05

Результаты и обсуждение

1. Морфологические изменения корковой пластинки эмбрионального мозга

По степени выраженности выявленные нарушения развития корковой пластинки головного мозга эмбрионов условно были разделены на три группы легкие, умеренные и выраженные

В число первых вошли нарушения, выражающиеся в появлении на протяжении корковой пластинки мелких пилообразных зубцов различной высоты (от 10 до 15 мкм) Как правило, такого рода нарушения проявлялись симметрично, в обоих полушариях На некоторых участках наряду с появлением неровностей, появлялись углубления в виде кавеон. глубина которых достигала 30-45 мкм

В группу с умеренными нарушениями развития корковой пластинки вошли дефекты, отличающиеся от вышеописанных большей величиной зубцов (до 50 мкм) и их протяженности (до 250 мкм)

В передних и средних отделах полушария встречались высокие зубцы корковой пластинки, достигающие высоты 150 мкм и шириной 250 мкм

В группу с выраженными нарушениями развития корковой пластинки вошли те случаи, где корковая пластинка наиболее сильно отличалась по своему строению от нормы В этих случаях часто изменяется толщина корковой пластинки от 15 до 50 мкм, вследствие чего она становится бугристой В латеральной стенке левого полушария в переднем и среднем его отделах обнаружены участки удвоения корковой пластинки Эти изменения прослеживаются на нескольких серийных срезах Между двумя слоями удвоенной корковой пластинки может иметься микрополость, либо в ней могут находиться клеточные элементы

Приведенные результаты исследования структуры головного мозга эмбрионов показывают, что на 8-12 неделе развития продолжается рост всех его слоев, но наиболее выражен он в области корковой пластинки Период усиленного роста, как правило, является критическим и именно в этот период мозг более всего подвержен всевозможным влияниям А поскольку развитие осуществляется при влиянии этанола, то вероятнее всего, происходит нарушение ориентировки клеток формирующейся коры, отклонение путей миграции нейробластов, результатом чего являются локальные удвоения коры, формирование зубцов и ниш

2. Ультраструктурные изменения клеток мозга эмбрионов и плодов под влиянием алкоголя

При изучении мозга эмбрионов контрольной группы было установлено, что в период 7-12 недель развития мозговая ткань на ультраструктурном уровне является достаточно хорошо структурно сформированной, как в отношении клеточного состава, так и развития субклеточных структур Выявлены нейробласты и глиобласты, а также хорошо развитые мозговые сосуды и находящиеся в процессе развития межклеточные контакты Это подтверждает существующие в литературе данные (Соловьева Ж В и соавт, 1972, Соловьева ЖВ, Орловская ДД, 1980, Соловьева ЖВ, 1980) В дополнение к ним в настоящей работе были более подробно изучены структуры клеточного ядра, что позволило выявить целый ряд существенных особенностей.

Клеточное ядро К числу указанных особенностей относится расширение перинуклеарного пространства с увеличением протяженности (разрастанием) внутренней и наружной ядерных мембран В отдельных клетках были видны выросты наружной ядерной мембраны, глубоко проникающие в цитоплазму Прослеживалась связь между этими выростами и формирующимся эндоплазматическим ретикулумом (ЭПР) В перинуклеарном пространстве между внутренней и наружной ядерными мембранами во многих клетках можно было различить сферические, типа глобул, структуры Было выделено три типа таких образований Глобулы 1-го типа образуются путем проникновения внутренней мембраны ядра в полость перинуклеарного пространства с последующим отделением от нее При этом содержимым глобул является вещество ядра, окруженное частью внутренней ядерной мембраны В местах расположения глобул 1-го типа сохраняется целостность мембраны ядра Поровые комплексы, хорошо заметные в других участках ядерной оболочки, здесь отсутствуют По электронной плотности содержимое глобул не отличается от содержимого кариоплазмы Такие глобулы располагаются обычно отдельно одна от другой, либо группами по несколько штук Глобулы 2-го типа также располагаются в перинуклеарном пространстве, но при этом, в отличие от 1-го типа этих структур, часто имеют контакт с внутренней ядерной мембраной, примыкая к ней Эти глобулы также содержат ядерный материал, но они имеют меньшие размеры, меньшую электронную плотность и лишены оболочки Глобулы 3-го типа также окружены оболочкой, но она образована за счет проникновения в перинуклеарное пространство не внутренней, а наружной ядерной мембраны и последующего отделения ее с частью цитоплазмы Последнее подтверждается тем, что в содержимом глобул могут быть обнаружены единичные рибосомы и полисомы звездчатого типа В одной и той же клетке

в области расширенного перинуклеарного пространства могли одновременно выявляться все типы описанных глобул

Выраженный процесс образования сферических структур был отмечен в 63% контрольных наблюдений При этом в рамках изученных нами сроков развития эмбрионов (7-12 недель) его наличие более выражено на 8-11 неделях

Кроме отмеченных особенностей наблюдались также, перераспределение хроматина, локальная фрагментация наружной и внутренней оболочек ядра, без выхода кариоплазмы в цитоплазму Разрастание внутренней и наружной мембран приводили в части случаев к появлению внутриядерных мембранных включений (в основном за счет глубоких инвагинаций оболочки внутрь ядра)

При сравнении материала основной и контрольной групп было отмечено, что многие клеточные элементы эмбрионального мозга, в тех случаях, когда он развивался в организме больной алкоголизмом матери, не имели существенных отличий от нормы Но вместе с тем имелись и достаточно выраженные количественные и качественные особенности многих структур клеток (нейробластов и глиобластов), межклеточных контактов и капилляров головного мозга Данные представлены обобщенно по нейробластам и глиобластам, т к. как правило соответствующие изменения встречали в обоих типах клеток

Уже описанные выше особенности строения ядерных структур у эмбрионов 7-12 недель развития встречались в материале основной группы Образование глобул у эмбрионов, развивающихся в организме больных алкоголизмом матерей, встречалось с той же частотой, что и в контрольной группе - соответственно в 61,5% и в 63% Не было также каких-либо особенностей в формировании глобул, их количестве и типе, а также расположении и размерах в материале основной группы по сравнению с контрольной

Появление описанных структурных образований в перинуклеарном пространстве и в непосредственной близости от ядерной мембраны можно объяснить и особенностями прохождения уровня срезов при подготовке материала к электронно-микроскопическому исследованию, когда в плоскость среза попадают различные по своей конфигурации неровности поверхности ядра нейробластов и глиобластов

Что касается других показателей состояния ядра, то частота таких изменений, как перераспределение хроматина, фрагментация участков наружной и внутренней мембран ядра, изменение величины перинуклеарного пространства встречались в основной группе достоверно чаше, чем в контроле (р<0,001)

Эндоплазматический ретикулум практически одинаково развит в основной и контрольной группах В изучаемый период развития он представлен в основном короткими канальцами с редко расположенными на их мембранах рибосомами В целом на изученной стадии развития он еще слабо развит Можно лишь подчеркнуть связь канальцев ЭПР с выростами наружной мембраны ядра, что является характерной особенностью клеток эмбрионального мозга Рибосомы хорошо заметны в цитоплазме и представлены в основном элементами звездчатого типа Они выявляются в цитоплазме нейробластов и глиобластов

Митохондрии в основном и контрольном материале содержались в нервных клетках приблизительно в равным количестве, однако число органелл с признаками набухания было различным Как в основной, так и в контрольной группах встречались органеллы измененной величины и формы, но без нарушения их внутренней структуры, выявлялись также частичное или тотальное набухание, изменение организации крист, изменение плотности матрикса, разрыв наружной или внутренней мембраны, фрагментация митохондрий Если в контрольном материале преобладали палочковидные органеллы, то в основной группе увеличивалось число гантелевидных форм (они принимали такую форму за счет набухания концов митохондрий), булавовидных митохондрий (в результате локального набухания) В отдельных клетках основной группы эмбрионов присутствовали гигантские формы митохондрий, диаметром более 0,2 мкм Изменения внутренней структуры митохондрий были более разнообразными, что выражалось в измененной организации крист в виде многоугольника, креста, кольца, появлялись вытянутые, продольно ориентированные кристы, встречающейся более чем в половине исследованных случаев Как правило, при частичном разрушении мембран плотность матрикса органелл значительно снижалась Фрагментация митохондрий наблюдалась редко

Учитывая все варианты изменений можно отметить, что они в материале основной группы встречались достоверно чаще по сравнению с контролем (р<0,01)

Комплекс Гольджи в отличие от всех других клеточных органелл во многих нейробластах и глиобластах был более развитым, по сравнению с нормой Выражалось это в увеличении размеров его элементов -увеличивалось количество пузырьков, удлинялись цистерны Форма комплекса в основном вытянутая, либо изогнутая в виде дуги Вблизи клеточного ядра иногда можно было видеть 2-3 рядом лежащие комплекса Гольджи По краям органелл были заметны округлые структуры с темным содержимым диаметром 0,3-0,5 мкм, окруженные мембраной Электронноцитохимическая реакция на кислую фосфатазу позволила

идентифицировать их как лизосомы Они определялись уже на стадии 7-8 недель развития

В большинстве случаев основной группы (69,5%) в нейробластах и глиобластах были видны мембранные тельца, которые также давали реакцию на кислую фосфатазу Речь идет о скрученных в спираль и плотно упакованных элементарных мембранах, которые на электроннограммах представляли собой чередование более светлых и темных полос, ширина которых составляла соответственно 5 и 3 нм Форма этих включений была округлой или овальной, а количество образующих их мембран могло быть разным - от 1-2 до большего их числа Большему числу мембран соответствовала и увеличенная электронная плотность мембранных структур Количество мембран и разная степень спирализации определяли и большую или меньшую сложность мембранных структур Внутри них нередко располагалось электронноплотное гомогенное вещество В контрольной группе мембранные тельца встречались редко (в 10%)

Как в нейробластах, так и глиобластах встречались и мультивезикулярные тельца Они представляли собой окруженные мембраной скопления пузырьков различной величины (от 50 до 90 нм в диаметре) Форма телец была округлой, либо вытянутой Количество пузырьков варьировало от 5-7 до нескольких десятков в плоскости среза Располагались мультивезикулярные тельца, как правило, на периферии цитоплазмы, часто встречались и в отростках клеток Пузырьки этих образований светлые, окруженные мембраной, расположенные либо плотно друг к другу, либо на некотором расстоянии, в зависимости от их количества в образованиях В основной группе они имелись в 43,5% случаев, в контрольной - в 6,6%

Более типичными для мозга эмбрионов, полученных от больных алкоголизмом матерей, было наличие в них гранул липофусцина Он в развивающихся нейробластах и глиобластах был представлен достаточно большими, до 1-3 мкм гранулами высокой электронной плотности, окруженными мембраной Гранулы обычно располагались в цитоплазме вблизи ядра, часто заполняя собой большую часть цитоплазмы В скоплениях гранул можно видеть отдельные более светлые или более темные включения Характерным для них является наличие темных участков, располагающихся на периферии гранул в виде точек В плоскости ультратонкого среза количество гранул липофусцина варьировало от 2-5 до нескольких десятков, причем величина и форма их была весьма разнообразной Встречались округлые, зубчатые структуры, либо образования в виде кленового листа или бутона Появление липофусцина было отмечено нами в 13,3% случаев основной группы, но он не встречался в контрольной выборке

Некоторые особенности в основной группе эмбрионов имела также плазматическая мембрана, на протяжении которой определялось нарушение ее непрерывности (в литературе для обозначения таких изменений используется термин «пунктирность»), но без выхода содержимого цитоплазмы за пределы клетки Аналогичные изменения были нами отмечены и со стороны внутриклеточных мембран (эндогшазматический ретикулум, митохондрии, ядерная мембрана)

Межклеточные контакты Проведенное нами исследование подтвердило данные литературы (Боголепов Н Н и соавт, 1987-2000), что развитие межклеточных контактов в мозге человека начинается с несинаптических форм соединений

Доказательством этому служит наличие многочисленных соединений между клетками, которые относятся к десмосомовидным, наиболее распространенных в мозгу 7-недельных эмбрионов Различаются контакты между собой характером расположения парамембранного электронноплотного материала на контактирующих мембранах Первый вариант - парамембранные утолщения симметричны и синаптическая щель имеет одинаковую ширину на всем протяжении контакта Электронноплотный материал имеет форму двух прямоугольников, вытянутых вдоль щели Второй вариант - при аналогичном расположении всех составляющих компонентов контакта, парамембранные уплотнения обеих мембран имеют неровный контур Контакты этого типа обнаружены нами между телами клеток (сома-соматические), между телом клетки и отростками (соматодендритические), а также между отростками клеток (дендро-дендритические, аксо-дендритические)

В более поздние сроки развития, начиная с 8-й недели, указанных типов соединений становится меньше, но одновременно появляются контакты, в одной из контактирующих зон которых появляются везикулярные элементы Синаптические пузырьки, как правило, имели округлую форму, светлый центр, и диаметр их составлял около 40 нм Ширина щели таких незрелых везикулярных синапсов имела размер около 20 нм В пресинаптических отделах выявлялись плотные проекции, являющиеся специализированными образованиями синаптического цитоскелета, протяженность которых достигала 0,1-0,15 мкм Появление одиночных синаптических пузырьков вблизи пресинаптической мембраны мы считаем переходным этапом от синаптоидных контактов (авезикулярных) к истинно синаптической их форме В целом такие синапсы можно назвать функционально компетентными Они располагаются уже преимущественно в области нижней границы промежуточного слоя коры головного мозга

На стадии развития 10-12 недель количество синапсов с относительно зрелой структурой увеличивается С большей вероятностью их можно было обнаружить как на границе вентрикулярного и промежуточного слоев (маргинальный сдой), так и в промежуточном слое нервных клеток На этой стадии синаптические контакты имеют все необходимые компоненты, отличаясь от синапсов зрелого мозга меньшим числом синаптических пузырьков Все описанные выше особенности свойственны как контрольной, так и основной группам эмбрионов.

На материале, полученном от женщин, больных алкоголизмом, установлено замедление формирования синаптических структур Если формы несинаптических соединений по частоте и структуре не отличались от контрольных, и десмосомовидные контакты различной структуры и немногочисленные щелевидные соединения в этом мозге достаточно распространены, то везикулярных синапсов было значительно меньше Даже при полностью сформированной структуре синаптического соединения появление синаптических пузырьков в них запаздывает по сравнению с контролем, как правило, меньшей была и площадь активной зоны синапса

Для компьютерно-морфометрического анализа электронные микрофотографии синапсов эмбрионального мозга были подразделены на четыре группы, соответственно сроку развития эмбрионов 1 группа - сроки развития 7-8 нед, 2 группа - 9-10 нед , 3 группа - 10-11 нед и 4 группа -11-12 нед Соответствующее разделение производили в контрольной и основной изучаемых группах эмбрионов

Были проанализированы следующие параметры синапсов 1 -периметр пресинаптической терминали, 2 - площадь пресинаптической терминали и 3 - длина срезов постсинаптического уплотнения Соответствующее разделение производили в контроле и основной изучаемой группах эмбрионов (см рис 1,2,3,4)

Анализ морфометрических показателей синапсов был начат с общей оценки контрольной и опытной групп Сравнивая суммарные показатели периметра пресинаптических терминалей, площади пресинаптических терминалей и длины постсинаптических уплотнений, были обнаружены значительные различия изученных параметров Различия состояли в достоверном (Р<0 01) снижении всех параметров развивающихся синаптических соединений в опытной группе по сравнению с группой контроля

Рис 1 Статистический анализ суммарных морфометрических показателей периметра, площади пресинаптических терминален, длины постсинаптических уплотнений контрольной и основной групп

Затем был произведен более детальный анализ параметров синапсов с учетом срока развития эмбрионов и плодов Первая группа, 7-8 недель развития, оказалась наиболее трудной для анализа, поскольку к этому сроку развития, как уже было указано, количество синаптических соединений весьма невелико Результаты исследования показали, что на 7-8 неделе развития длина постсинаптического уплотнения была наименьшей в изучаемых группах, различия статистически недостоверны (р>0,1) Недоступной для анализа в указанной группе оказались периметр пресинаптической термина™ и ее площадь, тк к этому сроку развития пресинаптический отдел синаптических соединений локализуются, как правило, на крупных дендритах

1300

контрольная группа

срок развития (недели)

9 10 11 основная группа

□ Значения ~Т~ ±1 Эб'ЭЕ

Рис 2 Статистический анализ морфометрических показателей периметра пресинаптических терминалей в контрольной и основной группах по неделям развития

9 10 11 контрольная группа

9 10 11 основная группа

срок развития (недели)

Рис 3 Статистический анализ морфометрических показателей площади пресинаптических терминалей в контрольной и основной группах в динамике развития

а «б

контрольная группа

а Значения П±5Е Т ±1 96*ЭЕ

срок развития (недели)

Рис 4 Статистический анализ морфометрических показателей длины постсинаптических уплотнений в контрольной и основной группах в динамике развития

Таким образом, на стадии 7-8 недель развития нами выявлены незначительное уменьшение длины постсинаптических уплотнений в опытной группе, но эти различия не достигают уровня значимости

Вторая группа, 9 недель развития, характеризовалась рядом особенностей, по сравнению с первой Синаптические соединения в этом периоде более структурированы и встречались чаще, особенно на верхней границе промежуточного слоя Длина постсинаптических уплотнений периметр и длина пресинаптических терминалей в контрольной и основной группах различались статистически достоверно (р<0,01) Различия значений площади, измеренные для пресинаптической терминали в контрольной и основной группах, также оказались достоверными (р<0,01)

Таким образом, количественные параметры синаптических соединений на 9-й неделе развития в основной и контрольной группах отличаются достоверно, причем в опытной группе показатели немного ниже, что повторяет тенденцию, выявленную при анализе предыдущей группы По нашим данным, алкоголь в этот период развития оказывает модифицирующее влияние на становление межклеточных взаимосвязей

При изучении следующей группы, 10 недель развития, также наблюдались отклонения в сторону уменьшения значений морфометрических параметров в основной группе по сравнению с контрольной В этой группе отмечено уменьшение длины постсинаптических уплотнений и площади пресинаптических терминалей (р<0,01) Количественные параметры периметра пресинаптических терминалей не отличались от контрольных значений

В группе 11-12 недель развития выявлены достоверные отличия морфометрических параметров длины постсинаптических уплотнений синаптических контактов (р<0,01), уменьшение площади пресинаптической терминали в основной группе исследования (р<0,01), а также периметра пресинаптических терминалей (р<0,01)

Кроме количественных показателей, было обращено внимание на то, что большинство проанализированных синапсов в сроки развития 11-12 недель были представлены аксодендритическими положительно изогнутыми синапсами с небольшим количеством синаптических пузырьков и одиночными митохондриями в пресинаптических отделах синапсов

Таким образом, в результате компьютерно-морфометрического анализа, мы выявили задержку развития синапсов и их структурную незрелость, которая, вероятно, связана с прямым действием алкоголя на нервные клетки, в первую очередь за счет его мембранотропного действия Следствием этого являлось «разжижение» структуры элементарных мембран, а поврежденные мембраны в меньшей степени способны устанавливать прочные контакты

друг с другом, что, вероятно, связано также и со сниженной способностью клеток, находящихся в постоянном контакте с этанолом, синтезировать медиаторы, наполняющие синаптические пузырьки Это существенно нарушало формирование нейрональных механизмов, лежащих в основе восприимчивости и обработки информации, что в свою очередь может неблагоприятно сказываться на психической деятельности индивида

Сосуды эмбрионального мозга К 7-й неделе развития стенка капилляров состоит из клеток эндотелия, в это же время появляется материал базальной мембраны Сами клетки имеют большое ядро и обильную цитоплазму, которая довольно хорошо дифференцирована, имея митохондрии, комплекс Гольджи, ЭПР и мелкие пузырьки В более поздние сроки развития изменения эмбриональных сосудов идут в направлении формирования более плотной базальной мембраны и истончения эндотелиальных клеток

Прослеживая развитие капилляров в норме и у эмбрионов, подвергшихся воздействию алкоголя, можно заметить, что формирование структуры капилляров по сравнению с нормой не изменено Как в том, так и в другом случаях поверхность эмбриональных эндотелиоцитов остается достаточно гладкой без значительных выбуханий этих клеток в просвет сосудов, просвет которых остается свободным Не выявлено также различий во времени появления и структуре базальной мембраны капилляров. Все эти факты указывают на хорошую сохранность клеточных и неклеточных элементов сосудов, что создает основу для выполнения ими своих функций

Количественное компьютерно-морфометрическое исследование сосудов позволило установить ряд особенностей, которые отличают ткань развивающегося мозга в условиях алкоголизации (см таблицу 1)

На основании проведенного компьютерно-морфометрического анализа развития капилляров эмбрионального мозга в условиях пренатальной алкоголизации нами установлено, что влиянию пренатальной алкоголизации наиболее подвержены сосуды головного мозга эмбрионов 11-й недель развития Это выражалось в снижении средней площади сосуда, увеличении их количества на единицу площади и уменьшении периметра сосудов мозга Как известно, один из механизмов действия алкоголя - способность вызывать спазм сосудов пуповины и, как следствие, гипоксию плода, приводящую к замедлению роста и развития, наблюдаемому при алкогольном синдроме плода Поскольку ткань мозга в условиях пренатальной алкоголизации также подвержена гипоксии, то для компенсации этого состояния в мозге происходит увеличение количества сосудов на единицу площади ткани, однако, при уменьшении их периметра и средней площади

Таблица 1

Показатели площади и периметра сосудов мозга в исследуемых группах в динамике с 10-й по 12-ю недели внутриутробного развития

| Исследуемая группа Контрольная группа Основная группа

Показатель 10 неделя п=3 М±ш 11 неделя п=3 М±ш 12 неделя п=3 М±ш 10 неделя п=3 М±т 11 неделя п=3 М±т 12 неделя п=4 М±т 48,26± 1,67

Средняя плошаль | 45,61± сосудов, (мкм2) I 0,81** 65,73± 2,77 59,25± 5,38 49,08± 2,61 51,82± 3,07*

Относительная площадь | сосудов в ткани мозга, 1 0,79±0,11 (%) 1,26±0,11 1,38±0,2 1,02± 0,34 5,96± 1,003* 7,59± 1,44*

Количество сосудов на | 0 000]7± единицу площади 0;0{Ю023 1 мкм 1 0,000189 ± 0,000013 0,00023± 0,000025 0,000214± 0,000078 0,001137 | 0,000624 ± I * 0,000189 I 0,000314 * I Ф

| Периметр сосудов, (мкм) 349,44± 18,24 492,71± 34,28 269,83± 26,0 340,58± 35,87 292,20± 16,87* 244,6» 16,41

Примечание * - достоверные отличия по сравнению с контролем (р<0 05)

** - достоверные отличия параметров по сравнению с таковыми на 11,12 неделях в контроле (<0 01)

Таким образом, при ультраструктурном изучении мозговой ткани эмбрионов, развивающихся в организме больных алкоголизмом матерей, было установлено, что на фоне общего соответствующего исследованному сроку развития мозговых структур (наличие нейробластов и глиобластов с достаточно сформированной внутренней структурой, межклеточных контактов) выявляется ряд нарушений со стороны субклеточных структур Наиболее важным из них является задержка развития межклеточных контактов везикулярного типа, большая частота различных типов изменений ядра и митохондрий, усиленное развитие комплекса Гольджи, появление лизосом и липофусциновых гранул

При сопоставлении результатов контрольного и основного материала мы обращали внимание на то, чтобы дифференцировать изменения, возникающие как результат развития, от тех, которые являются следствием воздействия алкоголя на мозг эмбриона

Одним из первых феноменов, заставивших обратить на себя внимание, были встречающиеся в материале из основной группы участки мембран с нарушенной структурой Эти участки могли располагаться как на поверхности плазматической мембраны, так и на мембранах органелл клеток эмбрионального мозга Изменения плазматической мембраны и внутренних

мембранных систем при алкоголизме матери мы связываем с возможностью прямого и непрямого действия алкоголя на изучаемые мембраны - в организме матери мембраны клеток испытывают дестабилизирующее действие на липидный слой, причем следствием этого является увеличение «текучести» мембран и появление возможности для увеличения ее проницаемости (Altura В М, et al, 1982, Gomez R А , et al, 1992, Bannaga M , 2000, Бохан Н А , Прокопьева В Д, 2004)

Указанные повреждения мембран были нами обнаружены и при исследовании митохондрий Кроме этих изменений необходимо остановиться на отличительных особенностях митохондрий клеток из основной группы эмбрионов, таких как наличие многочисленных органелл с элементами набухания Объяснение их появления вытекает из мембранотропного влияния этанола, причем митохондрии являются весьма чувствительными к этому воздействию, также как и к недостатку кислорода (Лазричев И А , 1980, Семченко В В , Степанов С С , 1982, 1987, 1997, 1997, 1994, Семченко В В и соавт, 1984, 1995) Накопление поврежденных таким образом митохондрий приводит к снижению энергообеспеченности роста и дифференцировки клеток, что отражается на синтетических процессах В условиях гипоксии нарушаются процессы выработки энергии в митохондриях за счет их частичного разрушения (Haorah J, Knipe В , Leibhart J , et al, 2005)

Как отмечалось, нами отмечено появление увеличенного количества мембранных телец в нейробластах и глиобластах эмбрионов основной группы Описан также случай, в котором мембранные тельца встречались практически во всех клетках промежуточного слоя мозга Необходимо остановиться на появлении большого разнообразия мембранных телец, что выражается в сложности их структурной организации Анализируя материал, мы пришли к выводу, что все многообразие организации этих структур может отражать последовательный процесс созревания мембранных телец Основанием для этого служат следующие факты увеличение степени спирализации структур в динамике созревания, увеличение электронной плотности при уплотнении расположения мембран, а также тот факт, что в одной и той же клетке вполне возможно одновременное обнаружение мембранных структур с разной степенью спирализации - от 2-3-спиральных до 10-20-спиральных включений На уплотненных мембранах эрелых мембранных телец располагается фермент кислая фосфатаза, что служит косвенным признаком происхождения этих структур либо из комплекса Гольджи, либо их предшественниками являются лизосомы, в которых мы также выявили кислую фосфатазу Усиленное образование мембранных телец мы связываем не с деструктивным действием повреждающих

факторов, а с повышением активности клеточного метаболизма, выражающейся в ускоренном развитии внутренних мембранных систем клетки.

В нашем случае степень деструктивных изменений клеточных органелл невелика, а если судить по активности мембранных компонентов ядра и комплекса Гольджи, то заметна и пролиферативная составляющая процесса воздействия этанола. В этом случае необходимо признать, что взаимодействие этанола и мембран не столь просто и не исчерпывается только физико-химическими изменениями

Обнаруженный нами факт полной сохранности мембран клеток, имеющих отношение к системе сосудов, таких как эндотелиоциты, еще более усложняет объяснение взаимодействия этанола и мембран, а также систем мембран Именно поверхность эндотелия сосудов мозга первой встречается с находящимся в крови этанолом, легко проникающим через гемато-энцефалический барьер (Kusch-Poddar М, Drewe J , Fux I, et al, 2005, Kim JH, Park J A, et al, 2006, Burd L, et al, 2007) Логично было бы предположить и достаточно хорошо выраженный эффект воздействия алкоголя на мембраны эндотелия, через который он проникает в клетки мозга Однако эти предположения не оправдываются - структура плазматической мембраны, а также внутриклеточных мембранных систем имеют хорошую сохранность, причем даже легкоранимые мембраны митохондрий не имеют явных участков повреждения Вероятнее всего при наличии достаточного количества кислорода, доставляемого кровью, степень выраженности воздействия этанола на мембраны снижается, что может быть связано с возможностью клетки быстро запускать регенеративные процессы и ликвидировать поврежденные участки Наличие хорошо выраженных органелл, свидетельствующих об усиленной работе синтетических механизмов, поддерживает это предположение

Момент появления, степень развитости и структура базапыюй мембраны сосудов по большинству параметров не имеют отличий в контрольном материале и материале основной группы эмбрионов Это позволяет сделать вывод об устойчивости мембранных систем клеток сосудов к мембранолитическому действию этанола на ранних стадиях развития Этого действия также не заметно при анализе ширины просвета сосудов, которая независимо от материала была вполне достаточной для прохождения эритроцитов и других форменных элементов крови по сосудам Не наблюдалось также и стимулирующего действия этанола на развитие отдельных компонентов и систем сосудов эмбрионального мозга, доступных для исследования, что подчеркивает отсутствие активной реакции мембранных систем на воздействие этанола

Однако, морфометрические исследования привели к заключению о модифицирующем действии алкоголя на характер васкуляризации мозга Нами установлено, что влиянию пренатальной алкоголизации наиболее подвержены сосуды головного мозга эмбрионов 11-и недель развития Это выражалось в снижении средней площади сосудов, увеличении их количества на единицу площади и уменьшении периметра сосудов мозга Как известно, один из механизмов действия алкоголя - способность вызывать спазм сосудов пуповины и, как следствие, гипоксию плода, приводящую к замедлению роста и развития, наблюдаемому при алкогольном синдроме плода Поскольку ткань мозга в условиях пренатальной алкоголизации также подвержена гипоксии, то для компенсации этого состояния в мозге происходит увеличение количества сосудов на единицу площади ткани, однако, при уменьшении их периметра и средней площади, что отмечали и другие исследователи (Капка О, УаЬвек Р, руогакоуа М, й а1, 2006) Интересным является факт обнаружения достоверного снижения средней площади сосудов в ткани мозга контрольной группы на 10-й неделе развития, причем такая же тенденция имеет место и в основной группе, но различия показателей средней площади сосудов не достигают уровня значимости По времени это совпадает с началом дифференцировки сосудов стенки мозга на артериолы и венулы

Следует отметить, что исследователи посмертных изменений сосудов головного мозга в результате острого отравления алкоголем указывают на уменьшение диаметра капилляров, что объясняют выявленным падением тонуса церебральных артерий и снижением давления крови, поступающей в микроциркуляторное русло В то же время число этих сосудов на стандартной площади растет Последнее, видимо, связано с раскрытием резервных капилляров и должно рассматриваться как компенсаторная реакция церебральной сосудистой системы на отравление этиловым спиртом (Шорманов С В , Шорманов Н С , 2004)

Таким образом, можно заключить, что влияние этанола на мембранные структуры клеток, находящихся в разных регионах стенки мозга, различно и обладает избирательностью в то время как в нейробластах и глиобластах оно достаточно выражено, в эндотелиоцитах это влияние отсутствует Сходным же образом можно оценить и реакцию нейропиля, в частности дендритов и аксонов, на воздействие тех доз алкоголя, которые достигают уровня клеток стенки мозга Как указывалось в предыдущей главе, степень повреждения этих образований минимальна и отмечена только на уровне микротрубочек и нейрофиламентов Это свидетельствует о том, что влияние этанола на отростки клеток выражается, скорее всего, на процессах транспортировки веществ к окончаниям отростков Это предположение подтверждается тем,

что выяснено при изучении структуры синаптических образований, причем тех, которые относятся к везикулярному типу. Было показано, что при сравнении степени функциональной зрелости синаптических контактов в норме и при алкоголизме матери, выявляется задержка их развития в тех клетках, которые были подвержены воздействию этанола По-видимому, оно сказывается именно на времени появления синаптических пузырьков из-за нарушения процессов транспорта активных веществ, содержащихся в пузырьках Анализируя развитие синаптических контактов, необходимо обращать внимание и на состояние пре- и постсинаптических мембран Как показали морфометрические исследования, влияние алкоголизации сказывается на развитии важных, с точки зрения структурной организации синапса, его частей - уменьшается периметр и площадь пресинаптической терминали Это еще раз может подчеркнуть сниженную способность данных синапсов участвовать в передаче импульсов, адресованных соседним клеткам Вполне логичным является в этой ситуации уменьшение протяженности постсинаптических уплотнений Необходимо отметить, что сходные нарушения развития синаптических контактов наблюдали и другие исследователи, о чем идет речь в статье Р А Уапш и Т А ЬтсЫеу (2000), выполненной на культуре ткани гиппокампа при внесении в нее раствора этанола Авторы показали, что внесение этанола в культуру ткани приводило к уменьшению длины дендритов клетки, количества дендритов клетки и количества синапсов на дендритах, но не влияли на выживание клетки В отличие от результатов, полученных Р А Уапш и Т А 1лпё51еу, в наших исследованиях не отмечено снижение длины дендритов, однако, синапсы изменялись сходным образом

Поскольку несинаптические формы контактов развивались практически одновременно в контрольном материале и в основной группе, можно заключить, что этанол не оказывает воздействия на эти структуры, или они не могут быть выявлены используемыми нами методами

Таким образом, анализ механизмов воздействия этанола на клетки и субклеточные структуры позволяет сделать предположение, что наиболее значимые процессы происходят на границах раздела, т е на мембранах На пути к нервным клеткам этанолу необходимо преодолеть как минимум три границы Первая - это мембраны клеток эндотелия сосудов, вторая -мембраны глиальных клеток и их сосудистых ножек, наконец, третья -мембраны нейронов Попав в клетку и став составной частью вещества цитоплазмы, этанол взаимодействует с мембранами органелл и включается в метаболизм самой клетки Основные метаболические процессы, направленные на поддержание гомеостаза клетки, происходят в комплексе Гольджи Он своеобразно реагирует на воздействие этанола - его размеры

увеличиваются, повышается также и число составляющих его элементов -эти изменения отражают ускоренное развитие этой органеллы в условиях алкоголизации

Отражается присутствие алкоголя в клетках и на процессе синаптогенеза Появление измененных синапсов и задержку их развития мы связываем с активным воздействием алкоголя на нервные клетки, в первую очередь за счет его мембранотропного действия, которое приводит к увеличению проницаемости элементарных мембран (Бохан Н А , Прокопьева В Д, 2004) Поврежденные мембраны в меньшей степени способны устанавливать прочные контакты друг с другом, что связано, в том числе, и со сниженной способностью клеток, находящихся в постоянном контакте с этанолом, синтезировать медиаторы Это существенно нарушает формирование нейрональных механизмов, лежащих в основе восприимчивости и обработки информации

Динамика активности ацетилхолинэстеразы в образованиях переднего мозга

В срезах хвостатого, латерального септального и прилежащего (аккумбенс) ядер фотометрировали нейропиль, а в диагональной полоске Брока - нейроны

Результаты исследования представлены в таблице 2

Из приведенных данных видно, что активность АХЭ у животных, родившихся от алкоголизированных самок, в ее количественном выражении и общей динамике изменений по большинству структур в срок от 5 до 30 дней не отличается от соответствующих контрольных показателей - в этот период происходит нарастание ферментной активности Исключение составляют лишь прилежащее ядро и диагональная полоска Брока В первом случае имеет место отставание показателей активности АХЭ от контроля на 5-й день, а во втором - на 20-й, когда в контроле отмечается максимум этой активности Однако в дальнейшем происходило постепенное увеличение активности АХЭ, и к 30-му дню она не отличалась от показателей в контроле Употребление алкоголя самками до зачатия, а также в течение беременности, т е достаточно длительное время (3-5 мес), влияет на становление АХЭ в структурах мозга незначительно, и его действие проявляется лишь в некоторых из них. К числу последних относятся прилежащее ядро и диагональная полоска Брока, где в ранние сроки (5-й и

Таблица 2

Активность АХЭ (единицы оптической плотности) в разных структурах мозга контрольных (К) и родившихся от алкоголизированных самок (А) крыс

День Структура мозга

Хвостатое ядро Латеральное септальное ядро Прилежащее (аккумбенс) ядро Диагональная полоска Брока

К О К О К О К О

5-й 63,26 ± 14,30 87,0 ± 13,4 46,1 ± 16,43 38,3± 10,16 58,96 ± 2,54 39,47 ± 5,73 * - -

10-й - - - - 75,38 ± 11,26 73,75 ± 17,69 252,56± 15,54 243,17 ± 8,68

15-й 157,1± 36,62 141,4± 26,55 51,9± 5,91 55,4 ± 4,42 - - 272,46 ± 37,37 254,43 ± 33,04

20-й 196,78 ± 12,38 194,98 ± 7,74 97,80 ± 9,08 90,58 ± 7,42 101,73 ± 12,13 100,69 ± 11,43 350,22 ± 9,50 322,47 ± 7,91*

30-й 198,20 ± 12,27 202,73 ± 12,76 65,37 ± 5,1 72,1 ± 2,64 100,93 ± 6,24 104,94 ± 7,90 320,76± 18,34 322,76 ± 11,57

Примечание звездочкой отмечены достоверные (Р<0 05) различия по сравнению с контролем К - контрольная гр)ппа, О -опытная группа животных

20-й дни соответственно) отмечалось отставание изменений активности АХЭ по сравнению с контролем

Особенностью наших наблюдений является быстрое возвращение указанных отклонений к норме Таким образом, показано, что интенсивная алкогольная интоксикация самок крыс до и во время беременности может вызвать у их потомства временно наступающее отклонение в активности АХЭ в некоторых структурах мозга Это ставит вопрос о проведении соответствующего скрининга и других структур мозга, прежде всего тех, которые при алкогольной эмбриопатии поражаются особенно часто

Отмеченные сдвиги, относящиеся к становлению обмена медиаторов в ЦНС, представляют интерес, так как они могут быть основой тех случаев дизонтогенеза мозга, которые клинически проявляются не органическими дефектами, а различной степенью выраженности изменениями поведения

ВЫВОДЫ

1 Алкоголизм матери и продолжающееся употребление алкоголя во время беременности является причиной дизонтогенеза корковой пластинки головного мозга легкой, умеренной и тяжелой степени у плодов 9-12 недель развития, что проявляется возникновением в ее структуре зубцов, каверн и ниш, а также участками удвоения и изменением толщины в результате нарушения миграции нервных клеток

2 Патологическое влияние алкоголя на развитие мозга эмбрионов и плодов при алкоголизме матерей выявляется на фоне соответствующего изучаемому периоду развития уровня дифференцировки ткани мозга определяются нейробласты и глиобласты с полным набором цитоплазматических органелл, имеются межклеточные контакты различного типа и степени зрелости, а также сформированы капилляры мозга

3 Пренатальное влияние алкоголя на мозг выражается комплексом ультраструктурных изменений, качественно и количественно отличающих мозг эмбрионов и плодов, развивающихся в организме больной алкоголизмом матери, от таковых в норме Этот комплекс включает изменения функционального и пролиферативного характера, а также элементы ускоренного развития

Первый компонент включает в себя различные по степени выраженности изменения ядра, митохондрий и включений К элементам пролиферативного характера относятся увеличение протяженности внутренней и наружной ядерных мембран с образованием выростов, появление внутриклеточных мембранных структур с образованием многочисленных мембранных телец Ускоренное созревание органелл относится к комплексу Гольджи, который в клетках эмбрионов от больных алкоголизмом матерей более развит, чем в соответствующем материале контрольной группы

4 Для изучавшейся стадии развития мозга эмбрионов и плодов характерна морфологически выявляемая связь процессов, происходящих в ядре и цитоплазме нервных и глиальных клеток появление в перинуклеарном пространстве различного типа сферических образований с последующим их проникновением в цитоплазму с помощью выростов ядерной мембраны Эти особенности характеризуют как мозг эмбрионов от больных алкоголизмом матерей, так и контрольные наблюдения

5 Отличительной особенностью развивающихся клеток мозга при алкоголизме матери является накопление гранул липофусцина в клеточных элементах, что свидетельствует о существенном изменении метаболизма

6 Алкоголь, воздействующий на плод в период беременности, замедляет образование синаптических контактов на 9-12 неделях развития, вызывая

снижение длины постсинаптических уплотнений, уменьшение периметра и площади пресинаптической терминали

7 Алкоголь, действующий на мозг в пренатальном периоде, не влияет на время появления и структуру капилляров мозга, но изменяет характер васкуляризации мозга за счет увеличения числа капилляров на единицу площади, снижения их периметра и площади

8 Алкоголизация материнского организма в условиях эксперимента приводит к снижению уровня активности ацетилхолинэстеразы в образованиях переднего мозга новорожденных крыс (прилежащем ядре и диагональной полоске Брока)

9 Обнаруженные проявления повреждающего действия алкоголя на ультраструктуру клеточных элементов мозга в период их продолжающейся дифференцировки являются структурной основой нарушения формообразования мозговых структур и разного рода аномалий, определяющих в дальнейшем нарушения психического развития и поведения больных

Практические рекомендации

1 Результаты настоящего исследования рекомендуется использовать в качестве информационных при проведении плановой диспансеризации женщин детородного возраста и беременных, имеющих пристрастие к алкоголю и другим психоактивным веществам, с целью профилактики возможных неблагоприятных последствий их пагубной привычки для психического здоровья детей.

2 Учитывая высокую вероятность появления структурных и функциональных нарушений мозга у потомства в результате алкоголизма матери или употребления женщинами алкогольных напитков в период беременности, необходимо рекомендовать полный отказ от приема алкоголя на протяжении всей беременности, обратив особое внимание на период 3-8 недель, когда у плода формируются закладки всех систем органов, в том числе нервной системы

3 Результаты, полученные в настоящей работе, необходимо рекомендовать к изучению на кафедрах гистологии, цитологии, эмбриологии, морфологии и наркологии при рассмотрении тем, связанных с развитием нервной системы и влиянем экзогенных факторов на структурные основы функционирования мозга

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1 Ковецкий, Н С Формирование синапсов головного мозга эмбрионов в норме и при алкоголизме матери /НС Ковецкий, А В Солонский, Е Г Ярыгина // Журнал невропатологии и психиатрии - № 2 - 1991 - С 91-93

2 Ковецкий, Н С, Дизонтогенез головного мозга потомства матерей, употреблявших алкоголь в период беременности /НС Ковецкий, Г В Коновалов, Д Д Орловская, В Я Семке, А В Солонский // Журнал невропатологии и психиатрии - № 10 - 1991 - С 58-62

3 Солонский, А В Состояние дендритов и аксонов нейро-глиальных элементов эмбрионального головного мозга человека в норме и при алкоголизме матери / А В Солонский // Психическое здоровье Региональные аспекты - Владивосток, 1992 - С 271-273

4 Солонский, А В Сопоставление изменений ультраструктуры эмбриональных клеток мозга при алкоголизме матери и других психических заболеваниях / А В Солонский // Профилактика нервно-психических заболеваний Томск, 1993 - С 201-203

5 Ковецкий, Н С Патология головного мозга плодов, полученных от матерей, употреблявших алкоголь в период беременности /НС Ковецкий, А В Солонский, TJ1 Моисеева // Актуальные вопросы психиатрии-Томск, 1993-С 36-39

6 Солонский, А В Динамика структурных и биохимических изменений синапсов и синаптических рецепторов развивающегося головного мозга эмбрионов человека в норме и при алкоголизме матери / А В Солонский, Т В Шушпанова // Региональные аспекты современной аддиктологии -Томск- 1994-С 113-116

7 Солонский, А В Ультраструктурные нарушения при воздействии этанола in vivo и in vitro / А В Солонский, Т Н Мельникова // Региональные аспекты современной аддиктологии - Томск - 1994 - С 87-90

8 Солонский, А В Нейроморфологические особенности эмбриональных клеток головного мозга при алкоголизме матери и культивировании нервной ткани / А В Солонский, Т Н Мельникова, Н С Ковецкий // Современные аспекты эндогенной и экзогенно-органической патологии-Томск, Кемерово, 1995 - С 143-147

9 Ковецкий, Н С Нарушения развития головного мозга плодов, полученных от матерей, употреблявших алкоголь в период беременности / Н С Ковецкий, А В Солонский, Т J1 Моисеева // Журн неврологии и психиатр - 1995 - №3 - С 58-63

10 Солонский, А В Влияние алкоголизации матери на ультраструктуру коры головного мозга эмбрионов / А В Солонский / Сибирский вестник психиатрии и наркологии - Томск, 1996,- № 2 - С 75-77

11 Солонский, А В Комплекс нейроморфологических параметров при алкогольном синдроме плода как проявление алкогольной эмбриопатии мозга / А В Солонский, Н С Ковецкий // В сб Современные технологии психиатрического сервиса, 1997,-С 110-111

12 Solonskn, А V. Alcohol-induced alterations of human embryos brain synapses / A V Solonskn // Biological psychiatry -1997 -V 42 - №1 - P 33

13 Солонский, А В Применение количественной оценки параметров для изучения синаптогенеза / А В. Солонский, А В. Данилец, К Г Языков // Актуальные вопросы психиатрии -Томск -1997-Вып 8 -С 117-118

14 Солонский, А В Ультраструктура клеток эмбрионального головного мозга при алкоголизме матери / А В Солонский, В Я. Семке // В кн Реабилитация в психиатрии (клинические и социальные аспекты) под ред В Я Семке-Томск, 1998-С 180-182

15 Solonskn, AV The ultrastructural especially m neuronal cells of embryos from healthy and alcohol dependent women - comparative aspects / AV Solonskn, V Semke// J Pathophisiology-v 5 -1998-P 213

16 Бохан, НА Нейроморфологические, нейрохимические и поведенческие характеристики экспериментального изучения алкогольной зависимости / Н А Бохан, О К Галактионов, А В Солонский, Л И Дорофеева, А В Савоненко, ВД Прокопьева // Сибирский вестик психиатрии и наркологии - № 1-2 - Томск, 1998 - С 43 - 49

17 Бохан, Н А Мультиаксиальная модель изучения региональных проблем алкоголизма основные итоги комплексных исследований /НА Бохан, О К Галактионов, И А Артемьев, А В Солонский, А П Агарков // Сибирский вестник психиатрии и наркологии - Томск, 1998- Вып 1-2 -С 20 - 24

18 Солонский, А В Алкогольный синдром плода клинико-морфологический аспект / А В Солонский, Семке, В Я // В кн Превентивная психиатрия - 1999 - Томск, из-во 7ГУ - С 294-298 (соавт )

19 Солонский, А В Нейроморфологические особенности клеток мозга при перинатальном действии этанола in vivo и in vitro / А В Солонский, Т Н Мельникова, Н А Бохан // Актуальные вопросы психиатрии под ред В Я Семке-Томск - 1999-С 139-142

20 Солонский, А В Особенности клеток эмбрионального головного мозга при алкоголизме матери / А В Солонский, В Я Семке П Бюллетень

экспериментальной биологии и медицины- 1999- Вып 1 - прил 1-С119-121

21 Солонский, А В Особенности структуры синапсов и свойств синаптосомальных бензодиазепиновых рецепторов в онтогенезе мозга человека в норме и при алкоголизации матери /ТВ Шушпанова, В Я Семке // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины- 2000-прил 1,Т 129 С 121-124

22 Солонский, А В Динамика развития эмбриональных клеток промежуточного слоя головного мозга человека / А В Солонский // Актуальные вопросы психиатрии и наркологии - Томск, 2001 - С 219-220

23 Солонский, А В Количественная оценка синаптогенеза как характеристика воздействия алкоголя на эмбриональное развитие мозга / А В Солонский, А В Данилец, К Г Языков // В сб Современные технологии психиатрического и наркологического сервиса- 2001 -С 122-124

24 Solonskn, А V Mother's alcoholism and dendrites and axons in embryonic brain / A V Solonskn // World psychiatric association - EP AEN SEPB International Congress 2001 - Madrid (Spain) September 30th - October 4th,

2001 -P 136

25 Солонский, А В Реакция дендритов и аксонов клеток эмбрионального головного мозга человека на алкоголизацию матери / А В Солонский // Сибирский вестник психиатрии и наркологии - № 1 -Томск, 2002 -С 22-26

26 Солонский, А В Синаптогенез в коре головного мозга эмбрионов при алкоголизации матери в период беременности / А В Солонский // Организация психиатрической помощи Материалы межрегиональной научно-практической конференции - Под ред акад РАМН В Я Семке Томск-Омск Изд-во "РАСКО", 2002 - С 168-173

27 Солонский, А В Влияние алкоголизации матери в период беременности на развитие синапсов коры головного мозга эмбрионов человека / А В Солонский //Сибирский вестник психиатрии и наркологии - № 4 -Томск,

2002 - С 25-29

28 Солонский, А В Влияние алкоголизации матери на ультраструктуру клеток коры большого мозга эмбрионов / А В Солонский // Тезисы докладов VII конгресса международной ассоциации морфологов, Казань, 16-18 сентября 2004 г - Морфология - №4 - 2004, С 115

29 Солонский, А В Пренатальная алкоголизация и формирование сосудов эмбрионального мозга / А В Солонский, С В Логвинов, Н А Кутенева,

А В Данилец // Сибирский вестник психиатрии и наркологии - 2005 -№3-С 17-20

30 Solonskii, А V Influence of maternal alcoholism on ultrastructural alterations of cells of human embryonic brain / A V Solonskii, // VIII Europe College neuropsichopharmacology - Moscov, 2005 - P 294

31 Кутенева, H А Влияние пренатальной алкоголизации на развитие эмбриональных капилляров головного мозга /НА Кутенева, А В Солонский, А В Данилец, О В Сапрыгина, // Бюллетень сибирской медицины - Т 4,приложение 1 -2005-С 163

32 Solonsky, А V Ultrastructure of brain cortex cells of embryos / A V Solonsky // XIII World congress of psychiatry Cairo, September 10-15, 2005 -P 474

33 Солонский, А В Компьклерно-морфометрическая характеристика формирования эмбриональных сосудов головного мозга человека в условиях пренатальной алкоголизации / А В Солонский, Н А Кутенева // XIV съезд психиатров России - Москва, 2005 - С 371

34 Солонский, А В Структурно-функциональные особенности мембран клеток крови и мозга при алкогольной интоксикации / В Д Прокопьева, Н А Бохан // Сибирский вестник психиатрии и наркологии - 2006 - №3, С 36-39

35 Солонский, А В Нейроморфологическая характеристика клеточных элементов мозга эмбрионов в норме и при алкоголизации матери / А В Солонский, Н А Кутепова //Сибирский вестник психиатрии и наркологии, - 2006 - приложение 41 - С 142-143

36 Солонский, А В Компьютерно-морфометрический анализ эмбриональных сосудов мозга человека при алкоголизации в период беременности / А В Солонский, Н А Кутепова // ХШ российский национальный конгресс «Человек и лекарство» (сборник трудов) - 2006 -С 458

37 Солонский, А В Компьютерно-морфометрический анализ ангиогенеза в характеристике эмбрионального мозга человека / А В Солонский // Сб Современные технологии психиатрического и наркологического сервиса-Томск, 2006-С 165-166

38 Солонский, А В Формирование кровеносных сосудов эмбрионального мозга человека в условиях пренатальной алкоголизации / А В Солонский // Журнал неврологии и психиатрии им С С Корсакова - 2006 - Том 106 -№ 12 - С 71-73

39 Солонский, А В Развитие сосудов мозга эмбрионов и плодов человека в условиях пренатального воздействия алкоголя / А В Солонский, С В Логвинов, НА Кутепова//Морфология - 2007 - Том 131 -№ 2 -С 63-66

40 Солонский, А В Количественная динамика синаптогенеза и васкулогенеза мозга эмбрионов и плодов человека в условиях пренатального воздействия этанола / А В Солонский, С В. Логвинов, H А Кутепова, А В Данилец // Сибирский вестник психиатрии и наркологии, -2008 -№1- С 79-83

41 Солонский, А В Ультраструктурные и морфометрические особенности синаптогенеза мозга эмбрионов и плодов человека в условиях пренатального воздействия этанола / А В Солонский, С В Логвинов // Бюллетень сибирской медицины - № 2 - 2008 - С 35-39

42 Solonskii, А V Development of bram vessels m human embryos and fetuses in conditions of prenatal exposure to alcohol / A V Solonskn, S V Logvmov, N A Kutepova // Neuroscience and Behavioral Physiology - 2008 - Vol 38(4) -P 373-376

Тираж 100 Заказ №812 Томский государственный университет систем управления и радиоэлектроники 634050, г Томск, пр Ленина, 40

Содержание диссертации, доктора медицинских наук, Солонский, Анатолий Владимирович

ВВЕДЕНИЕ.

Глава I. СТРУКТУРНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ЭМБРИОНАЛЬНОГО ГОЛОВНОГО МОЗГА ЧЕЛОВЕКА В НОРМЕ И ПРИ НЕКОТОРЫХ ПСИХИЧЕСКИХ 3АБОЛЕВАНИХ (обзор литературы).

1.1. СТРУКТУРА ГОЛОВНОГО МОЗГА ЧЕЛОВЕКА НА СТАДИИ ЭМБРИОНАЛЬНОГО РАЗВИТИЯ (7-12 недель).

1.1.1. Общие данные об эмбриогенезе мозга.

1.1.2. Развитие клеточных элементов мозга.

1.1.3. Ультраструктура мозга эмбрионов.

1.1.3.1. Клеточные элементы.

1.1.3.2. Межклеточные контакты.

1.1.3.3. Сосуды эмбрионального мозга.

1.2. СТРУКТУРА ЭМБРИОНАЛЬНОГО МОЗГА, РАЗВИВАЮЩЕГОСЯ В ОРГАНИЗМЕ МАТЕРЕЙ с ПСИХИЧЕСКОЙ ПАТОЛОГИЕЙ.

1.2.1. Структура мозга эмбрионов, развивающихся в организме злоупотреблявших алкоголем женщин.

1.2.2. Экспериментальные исследования пренатального влияния алкоголя на развитие и структуру синаптических контактов.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА II. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Характеристика эмбрионального материала и организация его сбора.

2.2 Характеристика матерей контрольной и основной групп.

2.3. Методы нейроморфологического изучения эмбриональной ткани мозга.

ГЛАВА III. НЕЙРОМОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ

СТРУКТУР ПЕРЕДНЕГО МОЗГА ЭМБРИОНОВ ПО ДАННЫМ СВЕТОВОЙ МИКРОСКОПИИ.

3.1. Результаты исследования корковой пластинки эмбрионального головного мозга человека.

3.2. Организация коры эмбрионального мозга по результатам анализа полутонких срезов.

3.3. Результаты морфометрического исследования сосудов развивающегося мозга человека.

3.4. Динамика АХЭ-активности в образованиях переднего мозга новорожденных крыс в норме и при воздействии алкоголя.

ГЛАВА IV. УЛЬТРАСТРУКТУРНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ГОЛОВНОГО МОЗГА ЭМБРИОНОВ И ПЛОДОВ ПРИ АЛКОГОЛИЗАЦИИ В

ПЕРИОД БЕРЕМЕННОСТИ.

4.1. Клеточное ядро.

4.2. Цитоплазма.

4.3. Дендриты и аксоны.

4.4. Межклеточные контакты.

4.5. Результаты изучения структуры капилляров эмбрионального мозга.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Морфологические закономерности ранних стадий развития головного мозга в условиях пренатальной алкоголизации"

Актуальность медицинских и социальных проблем, связанных с употреблением алкоголя и алкоголизмом, постоянно возрастает. Согласно прогнозам Всемирной Организации Здравоохранения по своей значимости, а также по социально-экономическим аспектам указанные проблемы окажутся на первом месте в начале нынешнего тысячелетия. В той же мере остается актуальной и проблема появления патологии в потомстве злоупотребляющих этанолом и больных алкоголизмом. Особое место отводится изучению патологии мозга, которая во многом определяет как развитие заболевания, так и формирование его клинических проявлений, особенности течения и исхода, эффективность лечения, возможности социальной адаптации больных (Семченко В.В., Боголепов Н.Н., Степанов С.С., 1995; Бочков Н.П., Васечкин В.Б., 2004).

Важнейшим аспектом проблемы алкоголизма является влияние употребляемого этанола на потомство. Речь идет о широком круге вопросов - от психологического влияния страдающих алкоголизмом родителей на детей (психологическая атмосфера семьи, дефекты воспитания) и «материнского фактора», до генетических и тератогенных воздействий самого алкоголя (Моховиков А.Н., 1986, 1987; Astley S.J., Omnell L.M., Clarren S.K., 2000; Barinaga M., 2000; Gardner J., 2000; Bichenkov E., Ellingson J.S., 2001; Schonfeld A.M. et al. 2001; Gilger J.W., Kaplan B.J., 2002; Yelin R. et al., 2007; Pollard I., 2007).

В связи с изучением повышенного риска развития психической патологии в потомстве больных алкоголизмом большой интерес представляет женский алкоголизм. Хорошо известны факты, когда злоупотребление алкоголем приводит к появлению на свет детей со значительными сомато-неврологическими и психическими аномалиями

Viljoen D., 1999, Moore E.S. et al., 2001; Moor E.S. et al. 2002; Viljoen D., et al., 2002; Ostrea E.M. Jr, et al., 2006).

Благодаря работам многих исследователей, проведенных на животных и человеке, был установлен широкий диапазон влияния алкоголя на потомство - от легких поведенческих отклонений до тяжелых форм органического мозгового синдрома, который получил название «алкогольного синдрома плода» (АСП) (Lemoine P., Harousseau Н., Borteyru J.P., Menuet J.C., 1968, Jones K.L., Smith D.W., 1973, 1975; Bhatara V.S., et al. 2002; Moore E.S., et al., 2002). Основой этих расстройств являются разной степени выраженности изменения функции и структуры мозга. В наиболее легких формах алкогольного поражения мозга допускают существование измененной реакции на внешние воздействия («алкогольные эффекты») (Taylor A.N., 1983; Earnest D.J., Chen W.J., West J.R., 2001), тогда как при алкогольном синдроме плода были обнаружены нарушения его развития. Эти исследования были проведены в основном в модельных опытах на животных, соответствующих же исследований при аналогичном синдроме у человека еще недостаточно. Существуют лишь единичные работы, касающиеся нейроморфологии мозга в потомстве больных алкоголизмом (Biesold D., Matthies Н., 1977; Clarren S.K., Smith D.W. 1978; Clarren S.K. 1981; Tanaka H., Nasu F., Inomata K., 1991; Ikonomidou C. et al., 2000). В этих работах имеется описание структурных нарушений мозга в постнатальном периоде (16 случаев) и только три наблюдения сделаны на пренатальном материале (17, 18 и 20 недель развития). У плодов показано появление гетеротопий нервных и глиальных клеток в белом веществе мозга, гидроаненцефалия, микродисплазия зубчатого ядра мозжечка и другие нарушения. Понятно, что столь малое число наблюдений не позволяет выявить различные варианты повреждающего действия этанола на эмбриональный мозг при алкоголизме матери. Необходимо изучить различные участки мозга в процессе его развития, а также исследовать ультраструктурные проявления этих нарушений.

В связи с важностью рассматриваемой проблемы в ГУ НИИ психического здоровья Томского научного центра СО РАМН было начато изучение мозга плодов, развивающихся в организме алкоголизированных животных (Дремов Д.П., Муравьева Л.И., Солонский А.В., 1984, Дремов Д.П., Солонский А.В., Муравьева Л.И., 1985). Позднее были установлены разной степени выраженности нейрогистологические аномалии, вплоть до нарушения развития мозга эмбрионов и плодов человека (Ковецкий Н.С., Филатова Г.А.,1988; Ковецкий Н.С., 1989, 1989; Ковецкий Н.С., Коновалов Г.В., 1989; Коновалов Г.В., Федорова Л.А., Ковецкий Н.С., 1989; Ковецкий Н.С. и соавт., 1995; Солонский А. В., Прокопьева В. Д., Бохан Н. А., 2006). В настоящем исследовании отражены светооптический, ультраструктурный и морфометрический аспекты соответствующей программы исследований. Указанные аспекты изучения мозга при алкоголизме представляют интерес также в связи с вопросом о специфичности нейроморфологических изменений в мозге плодов, развивающихся в организме психически больной матери. В современной психиатрии обнаруженные изменения в мозге таких плодов обсуждаются с различных точек зрения — как отражение влияния «материнского эффекта», прямое биологическое влияние организма матери (в том числе содержащихся в нем связанных с патогенезом болезни токсических продуктов) на мозг плода, как выражение генетической предрасположенности к развитию заболевания. Последнее имеет отношение к установлению факторов риска по соответствующей психической патологии (Орловская Д.Д., Соловьева Ж.В. 1980; O'Malley K.D., Nanson J. 2002; Viljoen D. et al. 2002).

Для изучения патологии мозга эмбрионов, развивающихся в организме больной алкоголизмом матери, нами были использованы методы световой и трансмиссионной электронной микроскопии. Эти методы позволяют изучить ультраструктуру клеточных элементов развивающегося мозга, охарактеризовать степень повреждения или сохранности их органелл, мембранных структур, дать оценку уровню дифференцировки клеток и внутриклеточных образований.

В процессе настоящего исследования изучались все типы клеточных элементов эмбриональной мозговой ткани: нейробласты, глиобласты, микроглиальные клетки, а также эндотелиальные клетки развивающихся сосудов. Кроме того, большое внимание уделялось формированию межклеточных связей, характеризующихся установлением синаптических контактов. Этот процесс, как известно, начинается на 7-8 неделе пренатального развития и идет путем усложнения организации структур. Требует решения вопрос о характере влияния злоупотребления алкоголем на процесс синаптогенеза, который имеет решающее значение для реализации функций мозга. Известно также, что дифференцировка нейробластов и глиобластов зависит от степени развития и сохранности сосудистого русла растущего мозга, поэтому было проанализировано состояние сосудов.

Дополнительно к методам световой и электронной микроскопии использовался метод электронной цитохимии, который позволяет выявить некоторые особенности метаболизма клеток, а также принадлежность отдельных органелл к той или иной функциональной и биохимической системе. В качестве маркера для установления этих показателей использовался фермент кислая фосфатаза.

Цель исследования:

Задачи исследования:

1. Выявить ультраструктурные особенности нейробластов и глиобластов коры эмбрионального мозга, развивающегося в условиях алкоголизации матери в период беременности;

2. Выявить особенности формирования синаптических контактов в промежуточном слое коры головного мозга в процессе развития и провести компьютерно-морфометрический анализ параметров синаптических соединений в процессе дифференцировки;

3. Изучить ультраструктурные особенности строения капилляров эпендимного и промежуточного слоев коры развивающегося мозга;

4. Провести компьютерно-морфометрический анализ параметров развивающихся сосудов стенки переднего мозга в норме и при алкоголизации материнского организма и оценить степень ее воздействия на васкуляризацию ткани мозга.

Положения, выносимые на защиту:

1. Пренатальная алкоголизация приводит к нарушениям формирования корковой пластинки эмбрионального мозга человека.

2. Прием алкоголя во время беременности является причиной нарушений ультратонкого строения клеточных элементов развивающегося мозга человека. Алкоголь вызывает изменения мембран нейробластов и глиобластов, влияет на структуру органелл, нарушает синаптогенез, приводя к отставанию в формировании синаптических контактов клеток промежуточного слоя.

3. Алкоголизация материнского организма в период беременности оказывает значительное воздействие на динамику развития кровеносной системы эмбрионального мозга человека, что выражается в изменении характера васкуляризации растущего мозга.

4. Алкоголизация материнского организма в период беременности приводит к преходящим изменениям активности ацетилхолинэстеразы в ряде образований переднего мозга новорожденных животных.

Научная новизна исследования.

В результате настоящего исследования получены ранее отсутствовавшие в научной литературе данные об ультраструктуре развивающегося мозга при алкоголизации матери в период беременности. Были впервые выявлены следующие изменения: повреждение цитоплазматической мембраны и внутренних мембранных систем клеток; появление и последующая трансформация разного типа сферических образований в перинуклеарном пространстве; многообразие вариантов митохондрий, как нормального строения, так и с признаками функциональной и структурной патологии; усиленное развитие комплекса Гольджи; появление липофусцина, мультивезикулярных телец и миелиноподобных образований; задержка развития синаптических контактов везикулярного типа, проявляющаяся в уменьшении длины постсинаптических уплотнений синаптических контактов, уменьшении площади, а также периметра пресинаптических терминалей в основной группе исследования; изменение характера васкуляризации ткани мозга, что выражалось в снижении средней площади сосудов, увеличении их количества на единицу площади и уменьшении периметра сосудов мозга. Существенно, что перечисленные сдвиги развиваются на фоне достаточной зрелости ткани мозга в целом.

Практическая ценность работы.

Результаты, представленные в настоящем исследовании, свидетельствуют о том, что при алкоголизме матерей и в случаях употребления женщинами алкоголя в период беременности в мозге развивающегося плода возможно возникновение целого комплекса ультраструктурных изменений, которые могут быть биологической основой широкого диапазона поведенческой патологии в потомстве больных алкоголизмом, а также более тяжелых нарушений в виде умственной отсталости. Полученные данные могут служить основой для дальнейшей разработки проблем врожденной мозговой патологии, а также общих вопросов развития мозга на его эмбриональной стадии. Это делает результаты настоящего исследования ценными для разработки профилактических (биологических и психологических) мероприятий, а также корригирующих воздействий в соответствующих группах пациентов. Полученные результаты внедрены в учебный процесс на кафедрах гистологии, цитологии и эмбриологии, морфологии и общей патологии СибГМУ при изучении развития нервной системы.

Апробация материалов диссертации.

Основные положения диссертации были доложены и обсуждены на отечественных и международных конференциях, симпозиумах и конгрессах, в том числе на региональной конференции «Психическое здоровье. Региональные аспекты» (Владивосток, 1992); на конференции «Современные аспекты эндогенной и экзогенно-органической патологии» (Томск, Кемерово, 1995); на заседании Президиума ТНЦ СО РАМН (Томск, 1998); на конференциях и Ученых советах ГУ НИИ ПЗ ТНЦ СО РАМН (1994, 1996, 1997, 2000, 2001, 2002—2008); на заседании Президиума Сибирского Отделения РАМН «Коморбидность аддиктивных состояний: патобиологические механизмы и возможности профилактики» (Новосибирск, апрель 2001 г.); на Всероссийской конференции с международным участием «Современные проблемы биологической психиатрии и наркологии» (Томск, март 2003 г.); на XII национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, апрель 2004); на VII конгрессе международной ассоциации морфологов (Казань, сентябрь 2004 г.); на VIII Европейской коллегии по нейропсихофармакологии (Москва, апрель 2005 г.); на V Сибирском физиологическом съезде (Томск, июнь 2005 г.); на XIII Всемирном конгрессе по психиатрии (Египет, Каир, сентябрь 2005 г.); на XIV национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, апрель 2007 г.); на региональной научно-практической конференции «Клинико-биологические проблемы охраны психического здоровья материнства и детства» (Томск, октябрь 2007 г.); на Второй Всероссийской конференции с международным участием «Современные проблемы биологической психиатрии и наркологии» (Томск, март 2008 г.).

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 42 печатные работы, из которых 17 работ опубликованы в журналах, рекомендованных ВАК для изложения материалов диссертаций на соискание ученой степени доктора наук.

Объём и структура диссертации.

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследования, 2 глав результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов и списка литературы. Общий объем работы составляет 243 страницы машинописного текста. Список литературы включает 386 источников, из которых 126 наименований отечественных и 260 иностранных изданий. Иллюстративный материал представлен на 52 рисунках, в 8 таблицах и 2 схемах.

Заключение Диссертация по теме "Гистология, цитология, клеточная биология", Солонский, Анатолий Владимирович

ВЫВОДЫ

1. Алкоголизм матери и продолжающееся употребление алкоголя во время беременности является причиной дизонтогенеза корковой пластинки головного мозга легкой, умеренной и тяжелой степени у плодов 9-12 недель развития, что проявляется возникновением в ее структуре зубцов, каверн и ниш, а также участками удвоения и изменением толщины в результате нарушения миграции нервных клеток.

2. Патологическое влияние алкоголя на развитие мозга эмбрионов и плодов при алкоголизме матерей выявляется на фоне соответствующего изучаемому периоду развития уровня дифференцировки ткани мозга: определяются нейробласты и глиобласты с полным набором цитоплазматических органелл, имеются межклеточные контакты различного типа и степени зрелости, а также сформированы капилляры мозга.

3. Пренатальное влияние алкоголя на мозг выражается комплексом ультраструктурных изменений, качественно и количественно отличающих мозг эмбрионов и плодов, развивающихся в организме больной алкоголизмом матери, от таковых в норме. Этот комплекс включает изменения функционального и пролиферативного характера, а также элементы ускоренного развития.

Первый компонент включает в себя различные по степени выраженности изменения ядра, митохондрий и включений. К элементам пролиферативного характера относятся увеличение протяженности внутренней и наружной ядерных мембран с образованием выростов, появление внутриклеточных мембранных структур с образованием многочисленных мембранных телец. Ускоренное созревание органелл относится к комплексу Гольджи, который в клетках эмбрионов от больных алкоголизмом матерей более развит, чем в соответствующем материале контрольной группы.

4. Для изучавшейся стадии развития мозга эмбрионов и плодов характерна морфологически выявляемая связь процессов, происходящих в ядре и цитоплазме нервных и глиальных клеток: появление в перинуклеарном пространстве различного типа сферических образований с последующим их проникновением в цитоплазму с помощью выростов ядерной мембраны. Эти особенности характеризуют как мозг эмбрионов от больных алкоголизмом матерей, так и контрольные наблюдения.

5. Отличительной особенностью развивающихся клеток мозга при алкоголизме матери является накопление гранул липофусцина в клеточных элементах, что свидетельствует о существенном изменении метаболизма.

6. Алкоголь, воздействующий на плод в период беременности, замедляет образование синаптических контактов на 9-12 неделях развития, вызывая снижение длины постсинаптических уплотнений, уменьшение периметра и площади пресинаптической терминали.

7. Алкоголь, действующий на мозг в пренатальном периоде, не влияет на время появления и структуру капилляров мозга, но изменяет характер васкуляризации мозга за счет увеличения числа капилляров на единицу площади, снижения их периметра и площади.

8. Алкоголизация материнского организма в условиях эксперимента приводит к снижению уровня активности ацетилхолинэстеразы в образованиях переднего мозга новорожденных крыс (прилежащем ядре и диагональной полоске Брока).

9. Обнаруженные проявления повреждающего действия алкоголя на ультраструктуру клеточных элементов мозга в период их продолжающейся дифференцировки являются структурной основой нарушу формообразования мозговых структур и разного рода ^ определяющих в дальнейшем нарушения психического развития и поведу больных.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Результаты настоящего исследования рекомендуется использо^; в качестве информационных при проведении плановой диспансера:^ женщин детородного возраста и беременных, имеющих пристрас^-^^ алкоголю и другим психоактивным веществам, с целью профила^-^, возможных неблагоприятных последствий их пагубной привычкя

Для психического здоровья детей.

2. Учитывая высокую вероятность появления структурны^сзма и функциональных нарушений мозга у потомства в результате алкогол^-. матери или употребления женщинами алкогольных напитков в ие»^

ЛРйод беременности, необходимо рекомендовать полный отказ от приёма ajibco j-0 на протяжении всей беременности, обратив особое внимание на период ^ g недель, когда у плода формируются закладки всех систем органов, s

Том числе нервной системы.

3. Результаты, полученные в настоящей работе, необход^д^ рекомендовать к изучению на кафедрах гистологии, цитологии, эмбриологии морфологии и наркологии при рассмотрении тем, связанных с развит нервной системы и влиянием экзогенных факторов на структурные ocijOB функционирования мозга.

193

Библиография Диссертация по биологии, доктора медицинских наук, Солонский, Анатолий Владимирович, Томск

1. Авцын, А.П. Ультраструктурные основы патологии клетки /

2. A.П. Авцын, В.А. Шахламов // М., Медицина. 1979. - 320 с.

3. Акулинин, В.А. Пластичность дендритов пирамидных нейронов слоя V сенсомоторной коры крыс в постишемическом периоде /

4. B.А. Акулинин, В.В. Семченко, П.В. Беличенко // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1993. - Т. 16. - №7. - С. 94-96.

5. Алексеева, В.К. Некоторые особенности диалектики развития человеческого эмбриона // Учен, записки Моск. обл. пед. ин — М., 1971Вып.З 02.- С. 147-150.

6. Белкина, А.П. Влияние вредных факторов, действующих в период беременности на развитие мозга плода и ребенка / А.П. Белкина // Автореф. дис. канд. мед. наук —М., 1958.- 19 с.

7. Бернар, В. Клеточное ядро / В. Бернар // Пер. с англ.- М., Мир, 1972.-156 с.

8. Биохимия и алкоголизм (1): метаболические процессы при алкоголизме / И.М. Рослый, С.В. Абрамов, В.Р. Агаронов и др. // Вопросы наркологии. 2004. - № 2 . - С. 70-79.

9. Боголепов, Н.Н. Возможные механизмы формирования синапсов в онтогенезе / Н.Н. Боголепов // Арх. анатомии, гистологии и эмбриологии 1987 - Вып.5 - С.20 -27.

10. Боголепов, Н.Н. Методы электронно-микроскопического исследования мозга / Н.Н. Боголепов // М., Медицина.- 1976- 103 с.

11. Боголепов, Н.Н. Пластичность и стабильность синапсоархитектоники большого мозга / Н.Н. Боголепов //

12. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины — 1996 —№ 3, с. 321-323.

13. Боголепов, Н.Н. Ультраструктура синапсов в норме и патологии / Боголепов Н.Н. // М., Медицина 1975. - 96 с.

14. Бодемер, Ч. Современная эмбриология / Ч. Бодемер // М., Мир — 1971.- 446 с.

15. Борзяк, Э.И. Анатомия человека / Э.И. Борзяк // М., Медицина — 1986.- 480 с.

16. Бохан, Н.А. Молекулярные механизмы влияния этанола и его метаболитов на эритроциты in vitro и in vivo / Н.А. Бохан, В.Д. Прокопьева // Томск: Изд-во Том. Университета, 2004.- 166 с.

17. Бочков, Н.П. Влияние психоактивных веществ на развитие эмбриона и плода : Обзор лит. / Н.П. Бочков, В.Б. Васечкин // Наркология. — 2004. — № 2. — С. 23 — 30.

18. Буравлев, В.М. Цитоморфологическое и кариологическое исследование эксплантатов мозга эмбрионов, абортированных у женщин больных шизофренией / В.М. Буравлев: Автореф. дис. . канд. мед. наук.-М., 1972.-23 с.

19. Бухвалов, И.Б. Ультрацитохимия фосфогидролаз / И.Б. Бухвалов // Арх. анатомии, гистологии и эмбриологии — 1982 — № 8 — С. 5—12.

20. Гайер, Г. Электронная гистохимия / Г. Гайер // М., Мир, 1974. — 448 с.

21. Гармашева, H.JL Повреждения мозга в генезе алкогольного синдрома плода / H.JL Гармашева, Н.Н. Константинова // Вестник АМН СССР.- 1988.-№ 3.-С.59-64.

22. Георгиев, Г.П. Гены высших организмов и их экспрессия / Г.П. Георгиев //М, Наука, 1989.- 254 с.

23. Герасимович, Г.И. Влияние эндогенных и экзогенных повреждающих факторов на эмбрион и плод / Г.И. Герасимович // Медицинская панорама. 2003. - № 9 . - С. 5-8.

24. Глебов, Р.Н. Функциональная биохимия синапсов / Р.Н. Глебов, Г.Н. Крыжановский // М., Медицина, 1978. 326 с.

25. Гошева, А.Е. Культивирование нервной ткани человека и животных и использование ее при изучении некоторых заболеваний центральной нервной системы / А.Е. Гошева, В.М. Буравлев // Журн. невропатологии и психиатрии.- 1972 — Вып.7.— С. 1091—1097.

26. Грей, Е.Г. Ультраструктура синапсов / Е.Г. Грей // Нейротрансмиттерные системы В 2-х т.- М., Медицина, 19821125 с.

27. Гунин, А.Г. Гистология в таблицах и схемах / А.Г. Гунин // Москва: Медицинское информационное агентство, 2005.- 192 с.

28. Диксон, М. Ферменты / М. Диксон, Э. Уэбб // В 3-х т.- М., Мир, 1982.-2 т.-346 с.

29. Дмитриева, Н.И., Влияние некоторых факторов среды на развивающийся мозг / Н.И. Дмитриева, В.Г. Кассиль // Арх. анатомии, гистологии и эмбриологии 1982.- № 9 — С.84-90.

30. Дремов, Д.П. Активность ацетилхолинэстеразы в мозге крыс в условиях моделирования алкогольной эмбриопатии / Д.П. Дремов, А.В. Солонский, Л.И. Муравьева // Журн. невропатологии и психиатрии.- 1985. Вып. 7.- С. 993-996.

31. Дремов, Д.П. Динамика ацетилхолинэстеразной активности мозга алкоголизированных крыс / Д.П. Дремов, Л.И. Муравьева, А.В. Солонский // Тез. докл. Всесоюз. симпоз. «Развивающийся мозг».— Тбилиси, 1984. С.73-74.

32. Зимина, И.С. Липофусцин в клетках эмбрионального мозга человека по данным люминисцентной микроскопии / И.С. Зимина, А.И. Ойфа, Ж.В. Соловьева // ВНЦПЗ АМН СССР.- М., 1980.- С. 24-30.- Деп. во ВНИИМИ МЗ СССР, № 2955-80.

33. Зимина, И.С. Ультраструктурные особенности клеток эмбрионального головного мозга человека в условиях культуры ткани / И.С. Зимина // : Дис. канд. биол. наук — М., 1980 156 с.

34. Иванец, Н.Н. Психиатрия и наркология / Н.Н. Иванец // Гэотар-Медиа.- 2006.- 832 с.

35. Иваншина, А.З. Развитие синаптических контактов в головном мозге человека на ранних стадиях эмбриогенеза / А.З. Иваншина // Журн. невропатологии и психиатрии 1976 - Вып.7 - С.983-989.

36. Карлсон, Б. Основы эмбриологии по Пэттену / Б. Карлсон // В 2-х т.- М., Мир, 1983.-Т.1.-358 с.

37. Кирющенков, А.П. Влияние вредных факторов на плод / А.П. Кирющенков // М., Медицина 1978.-214 с.

38. Клоссовский, Б.Н. Некоторые принципы развития конструкции мозга / Б.Н. Клосовский // Структура и функция нервной системы .М., Медицина, 1962.- С. 209-216.

39. Ковецкий, Н.С. Нарушение развития мозжечка при алкогольной эмбриопатии / Н.С. Ковецкий // Журн. невропатологии и психиатрии 1989.- Вып.7.- С.45^9.

40. Ковецкий, Н.С. Нарушения развития среднего мозга при алкогольной эмбриопатии мозга / Ковецкий Н.С., Филатова Г.А. // Пробл. алкоголизма и наркоманий.- Хабаровск, 1988.- С.58-62.

41. Ковецкий, Н.С. О происхождении порэнцефалий и других нарушений формообразования мозга при алкогольной эмбриопатии / Н.С. Ковецкий // Журн. невропатологии и психиатрии- 1989 — Вып. 2.-С. 117-122.

42. Ковецкий, Н.С., Нарушение развития сосудистых сплетений при алкогольной эмбриопатии мозга / Н.С. Ковецкий, Г.В. Коновалов // Пробл. наркологии-Душанбе, 1989-С.83-85.

43. Коган, М.Е. Возможности и ограничения стереологии синапсов / М.Е. Коган // Журн. невропатологии и психиатрии им. С. С. Корсакова. 1985. - Т.85.- №7. - С. 1974-1977.

44. Коновалов, Г.В. Нарушение развития головного мозга человека под влиянием неблагоприятных факторов внешней среды / Г.В.

45. Коновалов, JI.A. Федорова, Н.С. Ковецкий // VII Всесоюз. конф. по экологической физиологии Ашхабад, 1989-С.156-157.

46. Коновалов, Г.В. Нарушения развития головного мозга эмбрионов, полученных от злоупотреблявших алкоголем матерей / Г.В. Коновалов, Н.С. Ковецкий, А.В. Солонский, А.Н. Моховиков // Журн. невропатологии и психиатрии 1988.- Вып.7 — С.60-66.

47. Коржевский, Д.Э. Начальная стадия формирования сосудистого русла конечного мозга у эмбриона человека / Д.Э. Коржевский, В.А. Отеллин // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины.- 2000.- Т. 129.- № 5.- с. 598-600.

48. Коржевский, Д.Э. Структурные и цитохимические особенности базальных мембран в зоне формирования гемато-энцефалического барьера в пренатальном онтогенезе человека / Д.Э. Коржевский, В.А. Отеллин // Ж. эвол. биохим. и физиол.-2004.-Т.40.-№4.- С. 365369.

49. Коуэн, У. Развитие мозга / У. Коуэн // Мозг М.: Мир, 1982. -С.113-141.- 957 с.

50. Лазричев, И. А. Ультраструктурные особенности нейронов и синапсов коры головного мозга при циркуляторной гипоксии / И.А. Лазричев, И.К. Сванидзе, А.Ш. Цицишвили, Э.И. Дзамоева // Цитология,- 1980.- Т. 22.- № 2.- С.139-143.

51. Лазюк, Г.И. Медицинская тератология: достижения и перспективы развития / Г.И. Лазюк // Генетика аномалий развития- Киев, Наукова думка, 1986.-С. 33—41.

52. Лазюк, Г.И. Общая тератология / Г.И. Лазюк— М., Медицина, 1979.- С. 18-69.

53. Ленинджер, А. Биохимия / А. Ленинджер // М., Мир, 1976. —460 с.

54. Ломакин, А.В. Развитие капилляров мозга человека / А.В. Ломакин, В.М. Черток // Журн. невропатологии и психиатрии 1983-Вып.7 - С. 1004-1007.

55. Мастюкова, Е.М. Профилактика и коррекция нарушений психического развития детей при семейном алкоголизме / Е.М. Мастюкова, Г.В. Грибанова, А.Г. Московкина // Владос, 2006 115 с.

56. Бюл. экспериментальной биологии и медицины. Приложение 1. — 2000. — Т.129. С.101—104.

57. Милохин, А.А. Дифференцирование и миграция нейробластов в развивающемся мозге человека в первой половине пренатального онтогенеза / Милохин А.А., Чернова И.В., Якушова A.M. // Бюл. эксперим. биологии и медицины — 1979 Т. 86 — С. 352-354.

58. Милохин, А.А. Микротрубочки и их взаиморасположение с субсинаптическими структурами и ядерной оболочкой в нейробластах человека / А.А. Милохин, С.С. Решетников, И.В. Чернова // Бюл. эксперим. биологии и медицины.— 1978 — Т. 85.— С.368—370.

59. Милохин, А.А. Новые данные о раннем синаптогенезе в спинном мозге эмбрионов человека / А.А. Милохин, И.В. Чернова // Бюл. эксперим. биологии и медицины 1982. - Т. 1— С. 95-98.

60. Милохин, А.А. Новые данные по тонкой структурной организации субсинаптической зоны нервной клетки / А.А. Милохин // Бюл. эксперим. биологии и медицины 1977.- Т. 84 - С.502-505.

61. Милохин, А.А. Развитие межнейрональных синаптических связей у нейробластов передних рогов спинного мозга в раннем пренатальном онтогенезе человека (7-12 недель беременности) / А.А. Милохин // Бюл. эксперим. биологии и медицины 1977 - Т. 84.-С. 233-235.

62. Милохин, А.А. Синапсы головного мозга человека / А.А. Милохин, A.M. Якушова // Бюл. эксперим. биологии и медицины 1988 - № 3.-С.357-359.

63. Морозов, Г.В. Морфинизм / Г.В. Морозов, Н.Н. Боголепов // М., Медицина, 1984 174 с.

64. Москаленко, В.Д. Дети больных алкоголизмом (возраст от 0 до 18 лет) / В.Д. Москаленко // М., НПО Союзмединформ, 1990 68 с.

65. Моховиков, А.Н. Женский алкоголизм и алкогольная эмбриопатия потомства / А.Н. Моховиков: Автореф. дис. . канд.мед.наук — Томск, 1986 19 с.

66. Моховиков, А.Н. Эмбриопатически-дизонтогенетические синдромы при патохарактерологических нарушениях у потомства родителей больных алкоголизмом / А.Н. Моховиков // Журн. невропатологии и психиатрии 1987 —Вып. 11— С.1716—1723.

67. Мусеридзе, Д.П. Влияние этанола на рост и дифференцировку мотонейронов спинного мозга и возможность коррекции этого влияния в условиях in vitro / Д.П. Мусеридзе // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 2005. Том 139 - № 5. -С. 597-600.

68. Новиков, B.C. Программированная клеточная гибель / B.C. Новиков // СПб., 1996. 276с.

69. Орловская, Д.Д. Изменения ультратонкого строения капилляров головного мозга эмбрионов при шизофрении у матерей / Д.Д.

70. Орловская, Ж.В. Соловьева // Журн. невропатологии и психиатрии 1976 — Вып.7 — С. 1043-1046.

71. Орловская, Д.Д. Некоторые ультраструктурные особенности клеток головного мозга эмбрионов от больных шизофренией женщин / Д.Д. Орловская, Ж.В. Соловьева, И.С. Зимина // Журн. невропатологии и психиатрии 1975 —Вып.7 —С. 1041 -1044.

72. Отеллин, В.А. Пренатальное развитие головного мозга на фоне воздействий неблагоприятных факторов среды / В.А. Отеллин // Физиологическое общество им. И.П. Павлова.- М.: Издат.дом «Русский врач», 2007.- С.- 70-71.

73. Отеллин, В.А. Ультратонкая организация участков соприкосновения ликвора и крови с тканью головного мозга. / В.А. Отеллин, B.JI. Рыбаков, М.Н. Байковская // Гистогематические барьеры и нейрогуморальная регуляция,- М., Наука, 1981- С. 192— 201.

74. Панченко, JI. Ф. Постнатальный онтогенез опиодных рецепторов у крыс: влияние алкоголя и альфа-интерферона / Л. Ф. Панченко, Т. Н. Алябьева, О. Б. Петриченко, А. М. Балашов // Наркология. -2003.-№1 .-С. 2-6.

75. Поляков, Г.И. Некоторые данные по раннему эмбриогенезу нейронов коры головного мозга человека / Г.И. Поляков // Журн. высш. нервн. деятельности — 1954 Т.4.- Вып.1- С. 123—128.

76. Поляков, Г.И. Основы систематики нейронов новой коры большого мозга человека / Г.И. Поляков // М., Медицина, 1973. 309 с.

77. Попова, Э.Н. Влияние алкоголя на потомство / Э. Н. Попова // Журн. невропатологии и психиатрии — 1983.- № 2.-С.115-126.

78. Попова, Э.Н. Ультраструктура нейронов и межнейрональных связей сенсомоторной коры у потомства алкоголизированных крыс / Э.Н. Попова // Бюл. экспер. биол.-1984.- Т.98.- №12.- С.743-746.

79. Прокопьева, В.Д. Окислительный стресс при алкоголизме / В.Д. Прокопьева, О.В. Тюлина // Сибирский вестник психиатрии и наркологии. 2004. - № 2 . - С. 61-66.

80. Прядухин, Ю.И. Методические рекомендации по сбору зародышей с врожденной патологией / Ю.И. Прядухин, Н.С. Ковецкий, В.Б. Соломатин, А.В. Солонский, М.Н. Лицарев .- Томск, 1987.-17 с.

81. Пушкарь, Н.С. Введение в электронно-микроскопическую технику для биологических исследований / Н.С. Пушкарь, А.С. Капрельянц // Киев, Наукова думка 1982 - 191 с.

82. Пэттен, Б.М. Эмбриология человека / Б.М. Пэттен // М, Мир, 1959.156 с.

83. Рыжавский, Б .Я. Состояние важнейших систем в эмбриогенезе: отдаленные последствия / Б.Я. Рыжавский // Хабаровск, издательство Хабаровского краевого центра психического здоровья, 1999. — 203 стр.

84. Савельев, С.В. Эмбриональные механизмы развития spina bifida у человека / С. В. Савельев // Архив патологии. 2004. - Том 66.- № . -С. 21-25.

85. Савельев, С.В. Стадии эмбрионального развития мозга человека / С.В. Савельев // М.: Веди, 2002.- 112 с.

86. Савулев, Ю.И. Клеточные контакты в головном мозгу человека на ранних стадиях эмбрионального развития / Ю.И. Савулев, Ж.В. Соловьева // Конвергенция и синапсы — М 1973.— С. 149-151.

87. Самарина, О.П. Ядерные РНП, содержащие информационную РНК. Общие принципы структурной организации / О.П. Самарина, Е.М. Луканидин, Г.П. Георгиев // Молекулярная биология 1968 — Т. 2 — № 1.— С.7989.

88. Светлов, П.Г. Проблемы наследственных и ненаследственных нарушений онтогенеза, вызываемых действием радиации / П.Г. Светлов // Вест. АМН СССР.- 1959.- Вып.11.- С.29-37.

89. Светлов, П.Г. Теория критических периодов развития и ее значение для понимания принципов действия среды на онтогенез / П.Г. Светлов // Вопр. цитологии и общ. физиологии Л., I960 - С. 263— 285.

90. Селиванова, А.Т. Холинергические механизмы высшей нервной деятельности / А.Т. Селиванова, С.Н. Голиков // Д., 1975 126 с.

91. Семченко, В.В. Пластические перестройки синапсов коры большого мозга в постишемическом периоде / В.В. Семченко, С.С. Степанов // Арх. анатомии, гистологии и эмбриологии. — 1987. — Т.93—№11. -С.43-48.

92. Семченко, В.В. Пластичность синапсов коры большого мозга человека при гипоксии (морфометрическое исследование) / В.В. Семченко, С.С. Степанов, А.Ю. Савченко // Журн. невропатологии и психиатрии. 1984. -Т.84.-№7. - С. 1038-1042.

93. Семченко, В.В. Пластичность синапсов неокортекса в постреанимационном периоде / В.В. Семченко, С.С. Степанов // Бюл. эксперим. биологии и медицины. — 1982. —Т. 93- №4— С.9-11.

94. Семченко, В.В. Синаптоархитектоника коры большого мозга /В.В. Семченко, Н.Н. Боголепов, С.С. Степанов // Омск, 1995 167 с.

95. Семченко, В.В. Система субсинаптических единиц как универсальный системообразующий и регулирующий фактор синапсов головного мозга / В.В. Семченко, С.С. Степанов II Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1997. - Т. 124, №7. -С.4-12.

96. Семченко, В.В. Структурные механизмы эпилептизации мозга в постреанимационном периоде и ее коррекция / В.В. Семченко, С.С. Степанов // Анестезиология и реаниматология. — 1994. -Т. 5. -С.38-41.

97. Семченко, В.В. Структурные основы изменения кривизны синаптических контактов сенсомоторной коры и коры мозжечка в норме и при острой ишемии / В.В. Семченко, С.С. Степанов, Е.Д.

98. Сергеева // Бюл. эксперим. биологии и медицины. — 1995. -Т. 119 — № 4. С.443-445.

99. Скакун, Н.П. Алкогольный синдром плода: обзор литературы / А.А. Воронцов, Г.К. Скакун, В.И. Шендевицкий // Вопр. охраны материнства и детства 1980 - Т. 25 - № 4 — С. 58-62.

100. Соловьева, Ж.В. Клетки типа микроглии в головном мозге эмбрионов человека в норме и патологии / Ж.В. Соловьева, Д.Д. Орловская // Журн. невропатологии и психиатрии. 1979 —Вып.7 — С.852—857.

101. Соловьева, Ж.В. Ламеллярные образования в клетках головного мозга эмбрионов при шизофрении у матерей / Ж.В. Соловьева // Журн. невропатологии и психиатрии— 1980 — Вып.7- С. 10551058.

102. Соловьева, Ж.В. Липофусцин в клетках головного мозга эмбрионов на ранних стадиях развития (К вопросу о патологии мозга при шизофрении) / Ж.В. Соловьева, Д.Д. Орловская // Журн. невропатологии и психиатрии 1977 - Вып.7 - С. 1040- 1045.

103. Соловьева, Ж.В. Патология нервной системы в потомстве больных шизофренией (функционально-органический аспект) / Ж.В. Соловьева, Д.Д. Орловская // Журн. невропатологии и психиатрии 1980 - Вып. 10.- С. 1554-1564.

104. Соловьева, Ж.В. Электронномикроскопическое исследование головного мозга эмбрионов человека / Ж.В. Соловьева, Ю.И. Савулев, В.М. Буравлев // Журн. невропатологии и психиатрии.— 1972.—Вып.7.-С. 1076-1082.

105. Соловьева, Ж.В. Элементы адаптационных изменений в клетках мозга эмбрионов, развивающихся в организме больныхшизофренией матерей / Ж.В. Соловьева // Материалы Всесоюз.симпоз. «Адаптивные функции головного мозга».- Баку— 1980.-С. 174-176.

106. Солонский, А.В. Структурно-функциональные особенности мембран клеток крови и мозга при алкогольной интоксикации / А.

107. B. Солонский, В. Д. Прокопьева, Н. А. Бохан // Сибирский вестник психиатрии и наркологии. 2006. - № 3 . - С. 36-39.

108. Табакофф, Б. Нейробиологические эффекты алкоголя / Б. Табакофф, П. JI. Хоффман // Вопросы наркологии. 2003. - № 5.1. C. 27-42.

109. Таболин, В.А. Алкогольный синдром плода (обзор литературы) / В.А. Таболин, Г.А. Урывчиков // Вопр. охраны материнства и детства.- 1986. Т. 31.- № 5.- С.48-52.

110. Токин, Б.П. Общая эмбриология / Б.П. Токин // М., Высшая школа, 1987.-480 с.

111. Токин, И.Б. Электронно-микроскопический анализ процесса дифференцировки и додифференцировки клеток / И.Б. Токин // Арх. анатомии, гистологии и эмбриологии — 1972 — Вып.6 — С. 4662.

112. Уайт, А. Основы биохимии / Уайт А., Хендлер Ф., Смит Э. // В 3-х т.-М., Мир, 1981.-Т. 1.-450 с.

113. Уикли, Б. Электронная микроскопия для начинающих / Б. Уикли // М., Мир, 1975.-324 с.

114. Фалин, Л.И. Эмбриология человека: Атлас / Л.И. Фалин // М.: Медицина, 1976.-543 с.

115. Хухо, Ф. Нейрохимия / Ф. Хухо // М.: Мир, 1990. 348 с.

116. Чернышевская, И. А. Гистохимия холинэстераз коры головного мозга / И. А. Чернышевская // М., 1983 — 156 с.

117. Шорманов, С.В. Морфометрическая характеристика структур головного мозга человека в норме и условиях острой интоксикации этанолом / С.В. Шорманов, Н.С. Шорманов // Морфология. 2004. -Том 126.-№ 3 . - С. 56-60.

118. Шулейкина, К.В. Структура и функция развивающегося нейрона // Нейронные механизмы развивающегося мозга / К.В. Шулейкина //М., Наука, 1979.-С.24-42.

119. Яковлева, Н.И. Изменения конфигурации синаптических мембран мозга человека при старении и сосудистой патологии / Н.И. Яковлева, Д.Е. Фрумкина, Н.Н. Боголепов // Бюл. эксперим. биологии и медицины. -1993.- Т.116, №11.- С. 544-548.

120. Яковлева, Н.И. Влияние тканевой гипоксии на структуру нейронов коры мозга (свето-электронно-микроскопическоеисследование) / Н.И. Яковлева, Т.С. Матвеева, Н.Н. Боголепов // Журн. невропатологии и психиатрии 1979.— Вып.7.- С. 864-872.

121. Ярыгин, Н.Е. Патологические и приспособительные изменения нейрона / Н.Е. Ярыгин, В.Н. Ярыгин // М., Медицина, 1973 191 с.

122. Ярыгин, Н.Е. Эмбриональный морфогенез кровеносной системы человека / Н.Е. Ярыгин, А.В. Кораблев. М. : РГМУ, 2004. - 112 с.

123. Abel, E.L. In utero alcohol exposure: functional and structural brain damage / E.L. Abel, S. Jacobson, B.T. Sherwin // Neurobehav. Toxicol. Teratol.- 1983.-Vol.5.-№ 3.-P. 363-366.

124. Abel, E.L. Fetal alcohol syndrome is now leading cause of mental retardation (letter) / E.L. Abel, R.J. Socol // Lancet.- 1986.- Vol. 22.- № 2(8517).-P. 1222.

125. Abel, E.L. Maternal and fetal characteristic affecting alcohol's teratogenicity / E.L. Abel, R.J. Socol // Neurobehav. Toxicol. Teratol — 1986.-Vol.8.-№ 4.-P. 329-334.

126. Ailing, C. The biological mechanisms underlying alcohol dependence / C. Ailing // Lakartidningen.- 1999.- Vol. 14.- №96(28-29).- P. 3248-3252.

127. Altura, B.M. Alcohol produces spasm of human umbilicalis blood vessels: relationship to fetal alcohol syndrome (FAS) / B.M. Altura, A.

128. Carella, M. Chatterjee, S. Halevy, N. Tejani // Eur. J. Pharmacol 1982-Vol. 86.- № 2.- P. 311-312.

129. Amankwah, K.S. Ultrastructure of human placenta: effects of maternal drincing / K.S. Amankwah // Gynecol. Obstet. Invest— 1984— Vol. 18.-P. 311-316.

130. Andreasen, N.C. Brave new brain / N.C. Andreasen // Oxford University Press, 2001.- 355 p.

131. Anstrom, J.A. Germinal matrix cells associate with veins and a glial scaffold in the human fetal brain / J.A. Anstrom, C.R. Thore, D.M. Moody, V.R. Challa, S.M. Block, W.R. Brown // Brain Res. Dev. Brain Res.- 2005.- Vol. 7.- № 160(1).- P. 96-100.

132. Astley, S.J. Fetal alcohol syndrome: changes in craniofacial form with age, cognition, and timing of ethanol exposure in the macaque / S.J. Astley, S.I. Magnuson, L.M. Omnell, S.K. Clarren //Teratology 1999-Vol. 59.- №3.- P. 163-72.

133. Bakkum, B.W. Effects of ligh-dark and dark-rearing on synaptic morphology in the superior colliculus and visual cortex of the postnataland adult rat / B.W. Bakkum, L.A. Benevento, R.S. Cohen // J. Neurosci. Res.-1991.-Vol. 28.-№ l.-P. 65-80.

134. Barinaga, M. Neurobiology. A new clue to how alcohol damages brains / M. Barinaga // Science.-2000.- Vol.11.- №287(5455).- P. 947948.

135. Bartles, H. Intercellular junction in the human fetal membranes. A freeze—facture study / H. Bartles, T. Wang // Anatom. Embriol.— 1983 — V. 166.-P. 103-120.

136. Bearer, C.F. Developmental neurotoxicity. Illustration of principles / C.F. Bearer // Pediatr. Clin. North. Am.- 2001.- Vol. 48.- № 5.- P. 1199-1213.

137. Bearer, C.F. Mechanisms of brain injury: LI cell adhesion molecule as a target for ethanol-induced prenatal brain injury / C.F. Bearer // Semin. Pediatr. Neurol.-2001.-Vol. 8.-№ 2.-P. 100-107.

138. Beattie, I.O. Alcohol and the fetal brain / I.O. Beattie // Lancet— 1981.-V. l.-№ 8223.-P. 788.

139. Bellinger, F.P. Neonatal ethanol exposure reduces AMPA but not NMDA receptor levels in the rat neocortex / F.P. Bellinger, M.S. Davidson, K.S. Bedi, P.A. Wilce 11 Brain Res. Dev. Brain Res.- 2002-Vol. 30-№ l.-P. 77-84.

140. Bernhard, W. A new steining procedure for electron microscopical cytology / W. Bernhard // J. Ultrastruct. Res.- 1969.- Vol. 27.- P. 250265.

141. Bhatara, V.S. Brain function in fetal alcohol syndrome assessed by single photon emission computed tomography / V.S. Bhatara, F. Lovrein, J. Kirkeby, V. Swayze // S. D. J. Med. 2002. - Vol. 55.- № 2.-P.59-62.

142. Bhave, S.V. Chronic ethanol exposure attenuates the anti-apoptotic effect of NMD A in cerebellar granule neurons / S.V. Bhave, L.D. Snell, B. Tabakoff, P.L. Hoffman // J. Neurochem.- 2000.- Vol. 75.-№ 3.- P. 1035-44.

143. Bieder, J. Embryofcetopathie alcoolique (syndrome de Lemoine) / J. Bieder, H. Callens // Ann. Med. Psychol.- 2002 .-№ 160.- P. 67-71.

144. Biesold, D. Neurobiologie / D. Biesold, H. Matthies // Jena: Fischer Verlag, 1977.-268 s.

145. Birkholz, J.C. Ultrasomic studies of human fetal brain development / J.C. Birkholz // Trends in Neurosciences.- 1986.- Vol. 9 № 7 p. 329 -333.

146. Bisaga A., In search of a new pharmacological treatment for drug and alcohol addiction: N-methyl-D-aspartate (NMDA) antagonists / A. Bisaga, P. Popik // Drug Alcohol. Depend.- 2000.- Vol. 59(1).- P. 1-15.

147. Bisaga, A. The NMDA antagonist memantine attenuates the expression of opioid physical dependence in humans / A. Bisaga, S.D.

148. Comer, A.S. Ward, P. Popik, H.D. Kleber, M.W. Fischman // Psychopharmacology, Berl-2001 Vol. 157(1).-P. 1-10.

149. Bock, J. Blockade of N-methyl-D-aspartate receptor activation suppresses learning-induced synaptic elimination / J. Bock, K. Braun// Proc. Natl. Acad. Sci. U S A.- 1999. Vol. 96(5).-P. 2485-2490.

150. Bookstein, F.L. Creases as local features of deformation grids / F.L. Bookstein // Med. Image Anal.- 2000.- Vol. 4(2).- P. 93-110.

151. Bookstein, F.L. Geometric morphometries of corpus callosum and subcortical structures in the fetal-alcohol-affected brain / F.L. Bookstein, P.D. Sampson, A.P. Streissguth, P.D. Connor // Teratology-2001.-Vol. 64(1).-P. 4-32.

152. Borowski, T.B. Amphetamine and antidepressant drug effects on GAB A- and NMDA-related seizures / T.B. Borowski, R.D. Kirkby, L. Kokkinidis // Brain Res. Bull. 1993.- Vol. 30(5-6).- P. 607-610.

153. Bovill, J.G. Mechanism of action of anaesthetic drugs / J.G. Bovill //Minerva Anestesiol.- 1999.-Vol. 65(5).-P. 210-214.

154. Bowen, C.A. An investigation of endogenous neuroactive st induced modulation of ethanol's discriminative stimulus effects / I C.A., Purdy R.H., Grant K.A.// Behav. Pharmacol. 1999.- Vol. 1 P. 297-311.

155. Burd, L. Ethanol and the placenta: A review / L. Burd, D. R M. Olson, H. Odendaal // J. Matern. Fetal Neonatal. Med 200 20(5).-P. 361-375.

156. Burdge, G.C. The role of docosahexaenoic acid in development and fetal alcohol syndrome / G.C. Burdge, // Biocher Trans.- 1998.-Vol. 26(2).-P. 246-252.

157. Cajal, S. Ramon y. Histologie du Systeme Nerveux de l'Ho des Vertebres / S. Ramon у Cajal // Paris, Maloine. 1911.

158. Calverley, R.K.S. Contribution of dendritic spines and per synapses to synaptic plasticity / R.K.S. Calverley, D.G. Jones L Res. Rev. -1990. Vol. 15. - P. 215-249.

159. Cartwright, M.M. Ethanol-induced neural crest apoptc coincident with their endogenous death, but is mechanistically dis M.M. Cartwright, L.L. Tessmer, S.M. Smith // Alcohol Clin. Exp 1998.-Vol. 22(1).-P. 142-9.

160. Chandler, L.J. Ethanol tolerance and synaptic plasticity-Chandler, R.A. Harris, F.T. Crews // Trends Pharmacol. Sci — 199 19(12).-P. 491—495.

161. Chen, W.J. Zinc supplementation does not attenuate a: induced cerebellar Purkinje cell loss during the brain growth spurt W.J. Chen, E.C. Berryhill, J.R. West // Alcohol Clin. Exp. Res-Vol. 25(4).-P. 600-605.

162. Chudley, A.E. Challenges of diagnosis in fetal alcohol syndrome and fetal alcohol spectrum disorder in the adult / A.E. Chudley, A.R. Kilgour, M. Cranston, M. Edwards // Am. J. Med. Genet. C. Semin. Med. Genet. 2007.- Vol. 15(3).-P. 261-272.

163. Clarren, S.K. The fetal alcohol syndrome. Experience with 65 patients and review of the world literature / S.K. Clarren, D.W. Smith // New Engl. J. Med.- 1978.-V.298.-№ 19.-P. 1063-1067.

164. Clarren, S.K. Recognition of fetal alcohol syndrome / S.K. Clarren // JAMA.- 1981.- V.245- № 23.- P. 2436-2439.

165. Cohen-Kerem, R. Hearing in children with fetal alcohol spectrum disorder (FASD) / R. Cohen-Kerem, B. Bar-Oz, I. Nulman, V.A. Papaioannou, G. Koren // Can. J. Clin. Pharmacol.- 2007.- Vol. 14(3).-P. 307-312.

166. Coles, C.D. Auditory and visual sustained attention in adolescents prenatally exposed to alcohol / C.D. Coles, K.A. Platzman, M.E. Lynch, D. Freides // Alcohol Clin. Exp. Res.- 2002.- Vol. 26(2).- P. 263-271.

167. Connor, P.D. Direct and indirect effects of prenatal alcohol damage on executive function / P.D. Connor, P.D. Sampson, F.L. Bookstein, H.M. Barr, A.P. Streissguth // Dev. Neuropsychol.- 2000.- Vol. 18(3).- P. 33154.

168. Connor, P. D. Direct and Indirect Effects of Prenatal Alcohol Damage on Executive Function / P. D. Connor; P. D. Sampson; F. L. Bookstein; H. M. Barr; A. P. Streissguth // Developmental Neuropsychology.- 2002.- Vol.l 8.- № 3. P. 331 - 354.

169. Constantine-Paton, M. Effects of NMD A receptor antagonists on the developing brain / M. Constantine-Paton // Psychopharmacol. Bull— 1994-Vol. 30(4).-P. 561-565.

170. Costa, E.T. A review of the effects of prenatal or early postnatal ethanol exposure on brain ligand-gated ion channels / E.T. Costa, D.D. Savage, C.F. Valenzuela // Alcohol. Clin. Exp. Res. 2000 Vol. 24(5).-P. 706-15.

171. Devon, R.M. Synaptic terminal parameters in unanesthetized rat cerebral cortex / R.M. Devon, D.G. Jones // Cell Tissue. Res. -1979. -Vol. 203.-№ 2. P. 189-200.

172. Duckett, S. The chemo-architectonic patterns of the cerebral cortex of the embrionic and foetal human brain / S. Duckett, A.G. Pearse // Proc. 5 th Intern. Congr. of Neuropatol. Amsterdam.: Exepta med. pub I., 1966— P.73 8-739.

173. Duguid, R. Acid phosphatase activity of human gingival fibroblasts measured using a simultanions coupling semi-permeable membrane technigue / R. Duguid, L.M. Rumgay // Histochemical Jornal- 1983— Vol. 15.-P. 815-824.

174. Dyson, S.E. Quantitation of terminal parameters and their interrelationships in maturing central synapses: a perspective for experimental studies / S.E. Dyson, D.G. Jones // Brain Res. -1980. -Vol.183.-№ l.-P. 43-59.

175. Earnest, D.J. Developmental alcohol and circadian clock function / D.J. Earnest, W.J. Chen, J.R. West // Alcohol Res. Health.- 2001.- Vol. 25(2).-P. 136-140.

176. Elia, J. Teratogenicity of psychotherapeutic medications / J. Elia, I.R. Katz // Psychopharmacol. Bull.- 1987.- Vol. 23.- № 4.- P.531 -586.

177. Engel, S.R. Characterization of discriminative stimulus effects of the neuroactive steroid pregnanolone / S.R. Engel, R.H. Purdy, K.A. Grant // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2001.- Vol. 297(2).- P. 489-495.

178. Eriksson, C.J. The role of acetaldehyde in the actions of alcohol (update 2000) / C.J. Eriksson // Alcohol Clin. Exp. Res.- 2001.- Vol. 25(5).—P. 15-32.

179. Felder, E. Neurotrophic factors acutely alter the sorting of the vesicular acetyl choline transporter and the vesicular monoamine transporter 2 in bimodal sympathetic neurons / E. Felder, G. Dechant // Mol. Cell. Neurosci. 2007.- Vol. 34(1).- P. 1-9.

180. Flohr, H. Sensations and brain processes / H. Flohr // Behav. Brain Res. 1995. - Vol. 71.- №1-2.- P. 157-161.

181. Fritschy, J.M. Synapse-specific localization of NMDA and GABA(A) receptor subunits revealed by antigen-retrieval immunohistochemistry / J.M. Fritschy, O. Weinmann, A. Wenzel, D. Benke //J. Сотр. Neurol. 1998.-Vol. 12.-P. 194-210.

182. Fukuda, A. Differential ontogenesis of presynaptic and postsynaptic GABAB inhibition in rat somatosensory cortex / A. Fukuda, I. Mody, D.A. Prince // J. Neurophysiol. 1993.- Vol. 70(1).- P. 448^152.

183. Fuseler, J.W. Maternal ethanol consumption induces transient compensatory hyperplasia of developing cardiac tissue in the neonatal rat / J.W. Fuseler // Alcohol and Alcoholism.- 1993.- Vol. 28.- P. 657-666.

184. Gardner, J. Living with a child with fetal alcohol syndrome / J. Gardner // MCN Am. J. Matern. Child Nurs.- 2000.- Vol. 25(5).- P. 252-257.

185. Geinisman, Y. Unbiased stereological estimation of the total number of synapses in a brain region / Y. Geinisman, H.J. Gundersen, E. van der Zee, M.J. West // J. Neurocytol. -1996. Vol. 25,- № 12. - P. 805-819.

186. Gilger, J.W. Atypical Brain Development: A Conceptual Framework for Understanding Developmental Learning Disabilities / J.W. Gilger, B.J. Kaplan // Developmental Neuropsychology- 2002- Vol. 20(2).-P. 465-481.

187. Gill, J.S. Reported levels of alcohol consumption and binge drinking within the uk undergraduate student population over the last 25 years / J.S. Gill // Alcohol and Alcoholism.- 2002.- Vol. 37.- № 2 .- P. 109-120.

188. Golden, N.L. Maternal alcohol use and infant development / N.L. Golden, R.J. Sokol, B.R. Kuhnert, S. Bottoms // Pediatrics 1982.- Vol. 70 - № 6 - P.931-934.

189. Goldstein, D.B. The alcohol withdrawal syndrome. A view from the laboratory / D.B. Goldstein // Recent Dev. Alcohol 1986.- Vol. 4.- P. 231-240.

190. Gomez, R.A. Effect of acute ethanol exposure during pregnancy on dentate gyrus synaptic plasticity in 45-day-old rats / R.A. Gomez, S. Fulginiti, O.A. Ramirez // Pharmacol. Biochem. Behav- 1992 .- Vol. 42(1).-P. 85-89.

191. Gonzales, R.A. Receptor-gated ion channels may be selective CNS targets for ethanol / R.A. Gonzales, P.L. Hoffman // Trends Pharmacol. Sci.- 1991.-Vol. 12(1).-P. 1-3.

192. Gonzalez, L.P. Alcohol withdrawal kindling: mechanisms and implications for treatment / L.P. Gonzalez, L.M. Veatch, M.K. Ticku, H.C. Becker // Alcohol Clin. Exp. Res.- 2001.- Vol. 25(5).- P. 197-201.

193. Grant, K.A. Pharmacological analysis of the mixed discriminative stimulus effects of ethanol / K.A. Grant, G. Colombo // Alcohol Alcohol Suppl. 1993.- Vol. 2.- P. 445-449.

194. Grant, K.A. Cellular and behavioral neurobiology of alcohol: receptor-mediated neuronal processes / K.A. Grant, D.M. Lovinger // Clin. Neurosci. 1995.-Vol. 3(3).-P. 155-64.

195. Green, R.F. Alcohol dehydrogenase IB genotype and fetal alcohol syndrome: a HuGE minireview / R.F. Green, J.M. Stoler // Am. J. Obstet. Gynecol.-2007.-Vol. 197(1).-P. 12-25.

196. Greenough, W.T. Synaptic regulation of protein synthesis and the fragile X protein / W.T. Greenough, A.Y. Klintsova, S.A. Irwin, R. Galvez, K.E. Bates, I.J. Weiler // Proc. Natl. Acad. Sci. US. 2001. Vol. 98(13).-P. 7101-7106.

197. Gruol, D.L. Neonatal alcohol exposure reduces NMDA induced Ca2+ signaling in developing cerebellar granule neurons / D.L. Gruol, A.E. Ryabinin, K.L. Parsons, M. Cole, M.C. Wilson, Z. Qiu // Brain Res. 1998.-Vol. 793(1-2).-P. 12-20.

198. Haeuv, J.-J. Electron microscopic study of the developing capillaries of human brain / J.-J. Haeuv, B. Berger, R. Escourolle // J. Acta Neuropatologica — 1975.-Vol. 31-P. 229-242.

199. Haorah, J. Alcohol-induced oxidative stress in brain endothelial cells causes blood-brain barrier dysfunction / J. Haorah, B. Knipe, J. Leibhart, A. Ghorpade, Y. Persidsky // J. Leukoc. Biol 2005 -Vol. 78(6).-P. 1223-1232.

200. Hatta, S. Effects of ethanol on intracellular signal transduction / S. Hatta, N. Amemiya, H. Ohshika // Nippon Rinsho. 1997 - Vol. 55 - P. 49-54.

201. Himwich, W.A. Metabolic studies on perinatal human brain / W.A. Himwich//J. Appl. Physiol.- 1959.-Vol. 14.-№ 6.-P. 873-877.

202. Hoff, S.F. Synaptogenesis in the hippocampal dentate gyrus: effects of in utero ethanol exposure / S.F. Hoff // Brain. Res. Bull 1988. - Vol. 21(1).-P. 47-54.

203. Hoffman, P.L. Alcohol dependence: a commentary on mechanisms / P.L. Hoffinan, B. Tabakoff// Alcohol Alcohol. 1996.- Vol. 31(4).- P. 333-340.

204. Hoffman, P.L. To be or not to be: how ethanol can affect neuronal death during development / P.L. Hoffman, B. Tabakoff // Alcohol Clin. Exp. Res.- 1996.-Vol. 20(1).-P. 193-195.

205. Holtorff, V J. Alkoholembriopatie / V J. Holtorff, G.K. Hinkel // Z. ges. inn. Med.- 1981.- № 36.- S.587-593.

206. Hsiao, S.H. Postnatal ethanol exposure blunts upregulation of GABAA receptor currents in Purkinje neurons / S.H. Hsiao, J.R. West, J.C. Mahoney, G.D. Frye // Brain Res.- 1999.- Vol.19.- № 832(1-2).- P. 124-135.

207. Hughes, P.D. Effect of prenatal ethanol exposure on the developmental profile of the NMDA receptor subunits in rat forebrain and hippocampus / P.D. Hughes, Y.N. Kim, P.K. Randall, S.W. Leslie // Alcohol Clin. Exp. Res. 1998.-Vol. 22(6).-P. 1255-1261.

208. Hungund, B.L. Role of gangliosides in behavioral and biochemical actions of alcohol: cell membrane structure and function / B.L. Hungund, S.P. Mahadik // Alcohol Clin. Exp. Res.- 1993.- Vol. 17(2).- P. 329-339.

209. Igarashi, H. The effect of methotrexate on the development of synapses in the neonatal rat hippocampus / H. Igarashi, K. Inomata, A. Tateno //Neuropediatrics- 1989.-Vol. 20(4).-P. 196-198.

210. Ikonomidou, С. Neurotransmitters and apoptosis in the developing brain / C. Ikonomidou, P. Bittigau, C. Koch, K. Genz, F. Hoerster, U. Felderhoff-Mueser, T. Tenkova, K. Dikranian, J.W. Olney // Biochem. Pharmacol. -2001.-Vol. 15.-№ 62(4).-P. 401-405.

211. Ismail, M. Craniofacial alterations in adult rats after acute prenatal alcohol exposure / M. Ismail, M.Z. Janjua // J. Ayub. Med. Coll. Abbottabad.-2001.-Vol. 13(3).-P. 7-10.

212. Jeffery, K.J. Modifiable neuronal connections: an overview for psychiatrists / K.J. Jeffery, I.C. Reid // Am. J. Psychiatry. 1997. - Vol. 154.-№2.-P. 156-164.

213. Jones, D.G. An ultrastructural study into the effects of pentobarbitone on synaptic organization / D.G. Jones, R.M. Devon // Brain Res. 1978. - Vol. 147.- № 1. - P.47-63.

214. Jones, D.G. Influence of ethanol on neuronal and synaptic maturation in the central nervous system—morphological investigations / D.G. Jones // Prog. Neurobiol.- 1988.- Vol. 31(3).- P. 171-197.

215. Jones, D.G. An analysis of contemporary morphological concepts of synaptic remodelling in the CNS: perforated synapses revisited / Jones D.G., Hanis R.J. // Rev. Neurosci. 1995.- Vol. 6.- № 3.- P. 177-219.

216. Jones, K.L. Recodnition of the fetal alcohol syndrome in early infancy / K.L. Jones, D.W. Smith // Lancet.- 1973.- Vol.2.- № 7836.- P. 999-1001.

217. Jones K.L., Smith D.W. The fetal alcohol syndrome / K.L. Jones, D.W. Smith//Teratology.- 1975.-Vol. 12.-P. 1-10.

218. Karnovsky, M. / M. Karnovsky, L. Roots // J. Histochem. Cytochem. 1967. - Vol. 12.-P. 218 -225.

219. Keith, L.M. / L.M. Keith, L.-D. Elke // Embriologie: Lerbuch und Atlas der Entwicklungsgeschichte- Stuttgart, New York: Schattauer, 1985.-531 s.

220. Kellogg, C.K. Neurosteroid action at the GABAA receptor in fetal rat forebrain / C.K. Kellogg, V.G. Olson, G.L. Pleger // Brain Res. Dev. Brain. Res.-1998.- Vol. 15.-№ 108(1-2).-P. 131-137.

221. Kim, J.H. Blood-neural barrier: intercellular communication at glio-vascular interface / J.H. Kim, J.H. Kim, J.A. Park, S.W. Lee, W.J. Kim, Y.S. Yu, K.W. Kim // J. Biochem. Mol. Biol.- 2006,- Vol. 31.- № 39(4).-P. 339-345.

222. Kimura, K.A. Ethanol neurobehavioral teratogenesis and the role of the hippocampal glutamate-N-methyl-D-aspartate receptor-nitric oxide synthase system / K.A. Kimura, J.N. Reynolds, J.F. Brien // Neurotoxicol Teratol. 2000.- Vol. 22(5).- P. 607-616.

223. Kocova, I. Development of the vascular wall in the human limb / I. Kocova //Folia Morphol.- 1972.- Vol. 20.- № 3.- P. 265-267.

224. Kraigher, D. Pregnancy and substance dependency / D. Kraigher, S. Schindler, R. Ortner, G. Fischer // Gesundheitswesen- 2001- Vol. 63.— № 2 S. 101-105.

225. Kuge, T. Effect of ethanol on the development and maturation of synapses in the rat hippocampus / T. Kuge // Arukoru Kenkyuto Yakubutsu Ison.- 1992.- Vol. 27(2).- P. 201-213.

226. Kuge, T. Effect of ethanol on the development and maturation of synapses in the rat hippocampus: a quantitative electron-microscopic study / T. Kuge, T. Asayama, S. Kakuta, K. Murakami, Y. Ishikawa, M.

227. Kuroda, Т. Imai, К. Seki, M. Omoto, К. Kishi // Environ. Res.- 1993-Vol. 62(1).-P. 99-105.

228. Kumar, S.P. Fetal alcohol syndrome mechanism of teratogenesis / S.P. Kumar // Ann. Clin. Lab. Sci.- 1982.- Vol. 12.- № 4.- P. 254-257.

229. Kumari, M. Regulation of NMDA receptors by ethanol / M. Kumari, M.K. Ticku // Prog. Drug. Res.- 2000 .- Vol. 54.- P. 152-159.

230. Lam, M.K. Second generation effects of maternal alcohol consumption during pregnancy in rats / M.K. Lam, J. Homewood, A.J. Taylor, E.J. Mazurski // Prog. Neuropsychopharmacol Biol. Psychiatry 2000.- Vol. 24(4).-P. 619-631.

231. Langbehn, D.R. The adult antisocial syndrome with and without antecedent conduct disorder: comparisons from an adoption study / D.R. Langbehn, R.J. Cadoret // Compr. Psychiatry.- 2001 Vol. 42(4).- P. 272-282.

232. Lemoine, P. Les enfants des parents alcooliques. Anomalies observees a propos de 127 cases / P. Lemoine, H. Harousseau, J.P. Borteyru, J. C. Menuet // Arch. Franc. Pediat.- 1968.- Vol. 25.- P. 831838.

233. Leonard, B.E. Is ethanol a neurotoxin? The effects of ethanol on neuronal structure and function / B.E. Leonard // Alcohol Alcohol — 1986.-Vol. 21(4).-P. 325-338.

234. Levitt, P. Prenatal effects of drugs of abuse on brain development / P. Levitt // Drug Alcohol Depend.- 1998.- Vol. 51(1-2).- P. 109-25.

235. Light, K.E. Ethanol-induced alterations of neurotrophin receptor expression on Purkinje cells in the neonatal rat cerebellum / K.E. Light,

236. D.P. Brown, B.W. Newton, S.M. Belcher, С J. Kane // Brain Res 2002 .-№ 4 .-Vol. 924(1).-P. 71-81.

237. Lindgren, C. High alcohol concentration in blood in rats resulted in massive apoptosis / C. Lindgren // Lakartidningen- 2001 — № 31- Vol. 98(5) .-P. 445.

238. Lipson, A.N. Fetal alcohol syndrome, a great paediatric immitator / A.N. Lipson, D.A. Walsh, W.S. Websler // Med. J. Aust.- 1983.- Vol. 19.- №6.- P. 266-269.

239. Little, E.P. Effects of alcohol on the fetus: impact and prevention /

240. E.P. Little, A.P. Streissguth // CMA Jornale.- 1981- Vol.125 .- № 15.-P. 159-164.

241. Little, R.E. Fetal alcohol effects: an overview / R.E. Little // J. Am. Med. Womens Assoc.- 1983.-Vol. 38(2).-P. 46-48.

242. Lolova, I. Changes in the synapses of rat hippocampus following pre- and postnatal alcohol exposure /1. Lolova, V. Lolov, V.V. Petkov, J. Vaglenova // Anat. Anz.- 1989.-Vol. 169(4).-P. 285-294.

243. Lundqvist, C. Long-term effects of intermittent versus continuous ethanol exposure on hippocampal synapses of the rat / C. Lundqvist, B. Volk, R. Knoth, C. Ailing // Acta Neuropathol. (Berl) 1994.- Vol. 87(3).-P. 242-249.

244. Malinska, J. A guantitative analisis of fibres in the spinal cord of man during prenatal development / J. Malinska, J. Malinsky // Acta Univ. Palac. Olomus. Fac. med.- 1971.-Vol. 59.- P.175-183.

245. Malinska, J. A guantitative anatomical study of the cervical part of the human spinal cord during its prenatal development / J. Malinska, J. Malinsky, J.A. Zrzavy // Acta Univ. Palac. Olomus. Fac. med- 1972-Vol. 61.-P. 77-85.

246. Malinska, J. Volume changes of human spinal cord during its prenatal development / J. Malinska // Acta Univ. Palac. Olomus. Fac. med. 1972.-Vol. 63.-P. 185-201.

247. Malinsky, J. Ontogenetic development of glial cells in the grey matter of the human spinal cord / J. Malinsky // Neuropatol. Pol 1972 — Vol. 10.-№ 2.-P. 331-335.

248. Martinez, S.E. Novel molecular targets for the prevention of fetal alcohol syndrome / S.E. Martinez, G. Egea // Recent Patents CNS Drug Discov.- 2007.- Vol. 2(1).- P. 23-35.

249. Mayes, L.C. Developing brain and in utero cocaine exposure: effects on neural ontogeny / L.C. Mayes // Dev. Psychopathol 1999 — Vol. 11 (4).-P. 685-714.

250. Medina, A.E. Neocortical plasticity deficits in fetal alcohol spectrum disorders: lessons from barrel and visual cortex / A.E. Medina, Т.Е. Krahe // J. Neurosci Res. 2008.- Vol. 86(2).- P.256-63.

251. Mennerick, S. Neural activity and survival in the developing nervous system / S. Mennerick, C.F. Zorumski // Mol. Neurobiol — 2000— Vol. 22(1-3).-P. 41-54.

252. Metea, M.R. Glial cells dilate and constrict blood vessels: a mechanism of neurovascular coupling / M.R. Metea, E.A. Newman //J. Neurosci.- 2006.- Vol. 26(11).- P. 2862-2870.

253. Miki, T. Neurons in the hilus region of the rat hippocampus are depleted in number by exposure to alcohol during early postnatal life / T. Miki, S.J. Harris, P. Wilce, Y. Takeuchi, K.S. Bedi // Hippocampus — 2000.-Vol. 10(3).-P. 284-295.

254. Miller, M.W. Effects of alcohol on the generation and migration of cerebral cortical neurons / M.W. Miller // Science- 1986 Vol. 23. -P.1308-1311.

255. Mitchell, J.J. The antioxidants vitamin E and beta-carotene protect against ethanol-induced neurotoxicity in embryonic rat hippocampal cultures / J.J. Mitchell, M. Paiva, M.B. Heaton // Alcohol.- 1999.- Vol. 17(2).-P. 163-168.

256. Mody, I. Synaptic plasticity in kindling / I. Mody // Adv. Neurol-1999.-Vol. 79.-P. 631-643.

257. Molliver, M.E. The development of synapses cerebral cortex of human fetus / M.E. Molliver, I. Kostovik, H. Van der Loos // Brain Res-1973 .-Vol. 50 — № 2 P.403-407.

258. Monk, C.S. Prenatal Neurobiological Development: Molecular Mechanisms and Anatomical Change Developmental / C.S. Monk, S.J. Webb, C.A. Nelson // Neuropsychology.- 2002.- Vol. 19.- № 2.- P. 211 -236.

259. Mooney, S.M. Long-term effect of postnatal alcohol exposure on the number of cells in the neocortex of the rat: a stereological study / S.M. Mooney, R.M. Napper, J.R. West // Alcohol Clin. Exp. Res.- 1996.-Vol. 20(4).-P. 615-623.

260. Mooney, S.M. Effects of prenatal exposure to ethanol on the expression of bcl-2, bax and caspase 3 in the developing rat cerebral cortex and thalamus / S.M. Mooney, M.W. Miller // Brain Res 2001 -Vol. 17.-P. 71-81.

261. Moore, C.M. Fatty acid ethyl esters in meconium: biomarkers for the detection of alcohol exposure in neonates / C.M. Moore, D. Lewis // Clin. Chim. Acta.- 2001.- Vol. 312(1-2).-P. 235-237.

262. Moore, D.B. Effects of prenatal ethanol exposure on parvalbumin-expressing GABAergic neurons in the adult rat medial septum / D.B.

263. Moore, A.C. Ruygrok, D.W. Walker, M.B. Heaton // Alcohol Clin. Exp. Res.- 1997.-Vol. 21(5).- P. 849-856.

264. Moore, E.S. The subtle facial signs of prenatal exposure to alcohol: an anthropometric approach / E.S. Moore, R.E. Ward, P.L. Jamison, C.A. Morris, P.I. Bader, B.D. Hall // J. Pediatr.- 2001.- Vol. 139(2).- P. 215219.

265. Moore, E.S. New perspectives on the face in fetal alcohol syndrome: what anthropometry tells us / E.S. Moore, R.E. Ward, P.L. Jamison, C.A. Morris, P.I. Bader, B.D. Hall // Am. J. Med. Genet-2002.-Vol. 15.-P. 249-260.

266. Morrow, A.L. GABAA and NMDA receptor subunit mRNA expression in ethanol dependent rats / A.L. Morrow, L.L. Devaud, D: Bucci, F.D. Smith // Alcohol Alcohol Suppl.- 1994.- Vol. 2.- P. 89-95.

267. Muller, F. The development of the human brain from a closed neural tube at stage 13 / F. Muller, R. O'Rahilly // Anatomy and Embriology- 1988.-Vol. 177.-P. 203-224.

268. Nanka, O. Experimental hypoxia and embryonic angiogenesis / O. Nanka, P. Valasek, M. Dvorakova, M. Grim // Dev. Dyn. 2006.- Vol. 235(3).- P. 723-33.

269. Nag, T.C. Differential expression of syntaxin-1 and synaptophysin in the developing and adult human retina / T.C. Nag, S. Wadhwa // J. Biosci.-2001.-Vol. 26(2).-P. 179-191.

270. Napper, R.M. Permanent neuronal cell loss in the inferior olive of adult rats exposed to alcohol during the brain growth spurt: a stereological investigation / R.M. Napper, J.R. West // Alcohol Clin. Exp. Res 1995.-Vol. 19(5).-P. 1321-1326.

271. Nestler, V.M. Die Alkoholembriopatie: Merdimensionale Studien zu der Folgen des Alkoholismus in der Schwengerschaft / V.M. Nestler, H.S. Spohr, H.C. Steinhausen // Stuttgart: Ferdinand Enhe Verlag — 1981.- 95 s.

272. Niccols, A. Fetal alcohol syndrome and the developing socio— emotional brain / Niccols A. // Brain Cogn.- 2007.- Vol. 65(1).- P. 135— 142.

273. Noronha, A.B. Maternal ethanol consumption and synaptic membrane glycoproteins in offspring / A.B. Noronha, M.J. Druse // J. Neurosci Res.- 1982.-Vol. 8(1).-P. 83-97.

274. Olney, J.W. Ethanol-induced apoptotic neurodegeneration and fetal alcohol syndrome / J.W. Olney // Science.- 2000.- Vol. 11- P. 10561060.

275. Olney, J.W. Ethanol-induced apoptotic neurodegeneration in the developing brain / J.W. Olney, M.J. Ishimaru, P. Bittigau, C. Ikonomidou //Apoptosis.-2000.-Vol. 5(6).-P. 515-521.

276. Olney, J.W. Ethanol-induced apoptotic neurodegeneration in the developing C57BL/6 mouse brain / J.W. Olney, T. Tenkova, K. Dikranian, Y.Q. Qin, J. Labruyere, C. Ikonomidou // Brain Res. Dev. Brain Res.- 2002.- Vol. 28(2).- P. 115-126.

277. O'Malley, K.D. Clinical implications of a link between fetal alcohol spectrum disorder and attention-deficit hyperactivity disorder / K.D.

278. O'Malley, J. Nanson // Can. J. Psychiatry.- 2002.- Vol. 47(4).- P. 349354.

279. O'Rahilly, R. Les stades de developpment de l'embrion humain / R. O'Rahilly, E. Gardner // Bull. Assoc. anat.- 1974.- Vol. 58.- № 160.-P. 177-182.

280. O'Rahilly, R. Atlas of the stades of development of the nervous system in the intact human embryo. / R. O'Rahilly, F. Muller, J. Bossy // Arch. Anat. Histol. Embriol. (Strasb.).- 1982.-Vol. 65.-P. 57-76.

281. O'Rahilly, R. The embrionic period (letter) / R. O'Rahilly // Teratoligy. 1986.- Vol.34.- № 1.- P.l 19.

282. O'Rahilly, R. Developmental Stages in Human Embryos / R. O'Rahilly, F. Muller // Washington, Carnegie Inst.,- 1993.- 306 p.

283. Ouelette, E.M. The fetal alcohol syndrome / E.M. Ouelette // Bol. Assoc. Med. PR- 1984.-Vol. 76.-№ 11.-P. 492-494.

284. Oyedele, O.O. Acute ethanol administration causes malformations but does not affect cranial morphometry in neonatal mice / O.O. Oyedele, B. Kramer// Alcohol.- 2008,- Vol. 42(1).-P. 21-27.

285. Pantazis, N.J. Vulnerability of cerebellar granule cells to alcohol-induced cell death diminishes with time in culture / N.J. Pantazis, D.P. Dohrman, C.R. Goodlett, R.T. Cook, J.R. West // Alcohol Clin. Exp. Res.- 1993.-Vol. 17(5).-P. 1014-1021.

286. Pappas, G.D. Electron Microscopy of Immature Human and Feline Neocortex / G.D. Pappas, D.P. Purpura // Progr. in Brain Res. Amsterdam: Elsevier Pubbl. Сотр.- 1964.-P. 176-186.

287. Peadon, E. Impacts of alcohol use in pregnancy—the role of the GP / E. Peadon, C. O'Leary, C. Bower, E. Elliott // Aust. Fam. Physician-2007.- Vol. 36(11).- P. 935-939.

288. Peiffer, J. Alcohol embryo and fetopathy / J. Peiffer, F. Majewski, H. Fishback, J.R. Bierich, Volk B. // J. neurol. Sci.- 1979.- Vol. 41.- P. 125-137.

289. Pennington, S.N. The molecular mechanism of fetal alcohol syndrome (FAS) / S.N. Pennington // Neurobehav. Toxicol. Teratol — 1983.- Vol. 5.- № 2.- P. 259-262.

290. Peoples, R.W. Differential alcohol modulation of GABA(A) and NMDA receptors / R.W. Peoples, F.F. Weight // Neuroreport- 1999.-Vol. 10(1).-P. 97-101.

291. Peppiatt, C.M. Bidirectional control of CNS capillary diameter by pericytes / C.M. Peppiatt, C. Howarth, P. Mobbs, D. Attwell // Nature. 2006.-Vol. 12 (7112).-P. 700-704.

292. Pessacd, T.P. Structural aspects of vasculogenesis in the central nervous system / T.P. Pessacd, N.I. Reissenweber // Acta anat- 1972-Vol. 81.-№ 3.-P. 439-447.

293. Petit, T.L. Synaptic development in the human fetus: a morphometric analysis of normal and Down's syndrome neocortex / T.L. Petit // Exp. Neurol.- 1984.- Vol. 1.- P. 13-23.

294. Petit, T.L. Synaptic plasticity and the structural basis of learning and memory / T.L. Petit, G. O. Ivy // Neurology and Neurobiology.

295. Neural Plasticity: a Lifetime Approach- Vol. 36 N.Y. Alan Liss. — 1988.-P. 201-234.

296. Pohorecki, R. Synaptic pharmacology of the hippocampus / R. Pohorecki, E.F. Domino // Rev. Clin. Basic Pharm.- 1987.- Vol. 6(3).- P. 189-211.

297. Pollard, I. Neuropharmacology of drugs and alcohol in mother and fetus / I. Pollard // Semin. Fetal Neonatal. Med.- 2007.- Vol. 12(2).- P. 106-113.

298. Povlishock, J.T. Dense core vesicles in cerebral cortex of the human fetus / J.T. Povlishock // Experientia.- 1975.- Vol. 31.- № 12.-P. 14471449.

299. Povlishock, J.T. The fine structure of the axons and growth cones of the human fetal cerebral cortex / J.T. Povlishock // Brain Res—1976 — Vol.3.- P. 376-389.

300. Puia, G. Neurosteroids on our minds / G. Puia, D. Belelli // Trends Pharmacol Sci.- 2001.- Vol. 22(6).- P. 266-267.

301. Randall, C.L. Alcohol, pregnency and prostaglandins / C.L. Randall, R.F. Anton, H.C. Becker // Alcohol. Clin. exp. Res 1987 - Vol. 11.-№ l.-P. 32-36.

302. Randall, C.L. Alcohol and pregnancy: highlights from three decades of research / C.L. Randall // J. Stud. Alcohol.- 2001.- Vol. 62(5).- P. 554-561.

303. Retz, W. Neurotransmission and the ontogeny of human brain / W. Retz, J. Kornhuber, P. Riederer // J. Neural. Transm— 1996-Vol. 103(4).-P. 403-419.

304. Reyndols. E.S. The use of lead citrate at high pH as an electronopague stein in electron microscopy / E.S. Reyndols // J. of Cel. Biol. 1963.-Vol. 17.-P. 208-212.

305. Reynolds, J.D. Ethanol neurobehavioural teratogenesis and the role of L-glutamate in the fetal hippocampus / J.D. Reynolds, J.F. Brien. // Can. J. Physiol. Pharmacol.- 1995.- Vol. 73(9).-P. 1209-1223.

306. Riley, E.P. Fetal alcohol effects: mechanisms and treatment / E.P. Riley, J.D. Thomas, C.R. Goodlett, A.Y. Klintsova, W.T. Greenough, B.L. Hungund, F. Zhou, Y. Sari, T. Powrozek, Т.К. Li // Alcohol Clin. Exp. Res.-2001.-Vol. 25(5).-P. 110-116.

307. Ryugo, D.K. Activity-related features of synapse morphology: a study of endbulbs of held / D.K. Ryugo, M.M. Wu, T. Pongstapom // J. Сотр. Neurol. -1996. -Vol. 365. -№ 1. P. 141-158.

308. Sakata-Haga, H. Abnormalities of cerebellar foliation in rats prenatally exposed to ethanol / H. Sakata-Haga, K. Sawada, S. Hisano, Y. Fukui //Acta Neuropathol. (Berl).- 2001.-Vol. 102(1).-P. 36-40.

309. Schonfeld, A.M. Verbal and nonverbal fluency in children with heavy prenatal alcohol exposure / A.M. Schonfeld, S.N. Mattson, A.R. Lang, D.C. Delis, E.P. Riley. // J. Stud. Alcohol.- 2001.- Vol. 62(2).- P. 239-246.

310. Sherrington, C. S. The Integrative Action of the Nervous System / C. S. Sherrington //New Haven, Yale University Press — 1906.

311. Sidman, R. Neuronal migration with special refrence to developing human brain: a revew / R. Sidman, P. Rakic // Brain Res 1973. - Vol. 62.-№ l.-P. 1-35.

312. Smith, C.U. Sherrington's legacy: evolution of the synapse concept, 1890s-1990s. / C.U. Smith // J. Hist. Neurosci.- 1996.- Vol. 5(1).- P. 4355.

313. Smith, R.E. Phosphohydrolases in cells organelles electron microscopy / R.E. Smith // Ann. N.Y. Acag. Sci.- 1969 Vol.166 - № 2.-P. 525-563.

314. Sowell, E.R. Mapping callosal morphology and cognitive correlates: effects of heavy prenatal alcohol exposure / E.R. Sowell, S.N. Mattson, P.M. Thompson, T.L. Jernigan, E.P. Riley, A.W. Toga. // Neurology.-2001.-Vol. 57(2).-P. 235-244.

315. Spong, C.Y. Prevention of fetal demise and growth restriction in a mouse model of fetal alcohol syndrome / C.Y. Spong, D.T. Abebe, I. Gozes, D.E. Brenneman, J.M. Hill // J. Pharmacol. Exp. Ther 2001 — Vol. 297(2).-P. 774-779.

316. Stamps, W.T. Computerized ultrastructural analysis of the shape of the active synaptic zones in rat spinal cord / W.T. Stamps, R.E. Coggeshall, C.E. Hulsebosch // Exp. Neurol. 1990.- Vol.l08(2).- P. 151-155.

317. Stark, H. Structure, function and potential therapeutic possibilites of NMD A receptors. 1. Architecture and modulation of receptors / H. Stark, S. Grassmann, U. Reichert // Pharm. Unserer Zeit. 2000.- Vol. 29(3).-P. 159-166.

318. Steffensen, S.C. Ethanol inhibition of N-methyl-D-aspartate responses involves presynaptic gamma-aminobutyric acid(B) receptors / S.C. Steffensen, Z. Nie, J.R. Criado, G.R. Siggins // J. Pharmacol. Exp. Ther.- 2000.- Vol. 294(2).- P. 637-647.

319. Streisguth, A.P. Natural history of the fetal alcohol syndrome: a 10-year follov-up of eleven patients / A.P. Streisguth // Lancet- 1985-Vol. 13(8446).— P.85-91.

320. Sun, G.Y. Ethanol and membrane lipids / G.Y. Sun, A.Y. Sun. // Alcohol Clin. Exp. Res.- 1985.-Vol. 9(2).-P. 164-180.

321. Sutherland, R.J. Prenatal exposure to moderate levels of ethanol can have long-lasting effects on hippocampal synaptic plasticity in adult offspring / R.J. Sutherland, R.J. McDonald, D.D. Savage // Hippocampus.- 1997.-Vol. 7(2).- P. 232-238.

322. Tabarean, I.V. Interleukin-lbeta induces hyperpolarization and modulates synaptic inhibition in preoptic and anterior hypothalamic neurons / I.V. Tabarean, H. Korn, T. Bartfai // Neuroscience — 2006 — Vol. 15 (4).-P. 1685-1695.

323. Tanaka, H. Fetal alcohol effects: decreased synaptic formations in the field CA3 of fetal hippocampus / H. Tanaka, F. Nasu, K. Inomata // Int. J. Dev. Neurosci.- 1991.- Vol. 9(5).-P. 509-517.

324. Taylor, A.N. Behavioral probleme noted among fetal alcohol effects / A.N. Taylor // Psychiatr. topic.- 1983.- Vol. 4(1).- P. 8-14.

325. Taylor, A.N. Neonatal and long-term neuroendocrine effects of fetal alcohol exposure / A.N. Taylor, В J. Branch, N. Kokka, R.E. Poland // Monogr. Neural. Sci.- 1983.- Vol. 9.-P.140-152.

326. Topilko, A. Electron microscopic observation on the formation and development of blood vessels in the human and rabbit brain / A. Topilko // Ann. of the Medical Section of the Polich Acad, of Sci 1970 - Vol. 15(1).-P. 245-259.

327. Tran, T.D. Critical periods for the effects of alcohol exposure on brain weight, body weight, activity and investigation / T.D. Tran, K. Cronise, M.D. Marino, W.J. Jenkins, S.J. Kelly // Behav. Brain Res.-2000.-Vol. 15(1).-P. 99-110.

328. Trujillo, K.A. Are NMDA receptors involved in opiate-induced neural and behavioral plasticity? A review of preclinical studies / K.A. Trujillo // Psychopharmacology (Berl).- 2000.- Vol. 151(2-3).- P. 12141.

329. Tsai, G. The glutamatergic basis of human alcoholism / G. Tsai, D.R. Gastfriend, J.T. Coyle // Am. J. Psychiatry.- 1995.- Vol. 152(3).- P. 332-340.

330. Tsai, G. The role of glutamatergic neurotransmission in the pathophysiology of alcoholism / G. Tsai, J.T. Coyle // Annu. Rev. Med — 1998.-Vol. 49.-P. 173-184.

331. Tsai, G.E. Increased glutamatergic neurotransmission and oxidative stress after alcohol withdrawal / G.E. Tsai, P. Ragan, R. Chang, S. Chen, V.M. Linnoila, J.T. Coyle // Am. J. Psychiatry.- 1998.- Vol. 155(6).- P. 726-32.

332. Turcotte, L.A. Influence of prenatal ethanol exposure on vascular contractile response in rat thoracic aorta / L.A. Turcotte, N.S. Aberle, F.L. Norby, G.J. Wang, J. Ren // Alcohol.- 2002.- Vol. 26(2).- P. 75-81.

333. Umeda, T. Visualizing synapse formation and remodeling: recent advances in real-time imaging of CNS synapses / T. Umeda, S. Okabe // Neurosci Res.- 2001.- Vol. 40(4).- P. 291-300.

334. Viljoen, D. Fetal alcohol syndrome / D. Viljoen // Afr. Med. J.— 1999.-Vol. 89(9).-P. 958-960.

335. Wang, C. Mechanisms of N-methyl-D-aspartate-induced apoptosis in phencyclidine-treated cultured forebrain neurons / C. Wang, J.A. Kaufmann, M.G. Sanchez-Ross, K.M. Johnson // J. Pharmacol. Exp. Ther.- 2000.- Vol. 294(1).- P. 287-295.

336. Wang, M.Y. Ethanol directly depresses AMPA and NMDA glutamate currents in spinal cord motor neurons independent of actions on GABAA or glycine receptors / M.Y. Wang, I.J. Rampil, J J. Kendig // J. Pharmacol. Exp. Ther.- 1999.-Vol. 290(1).-P. 362-367.

337. Warren, K.R. Fetal alcohol syndrome: an international perspective / K.R. Warren, F.J. Calhoun, P.A. May, D.L. Viljoen, Т.К. Li, H. Tanaka, G.S. Marinicheva, L.K. Robinson, G. Mundle // Alcohol Clin. Exp. Res-2001.-Vol. 25(5 Suppl ISBRA).-P. 202-206.

338. Webb, S J. Mechanisms of postnatal neurobiological development: implications for human development / S.J. Webb, C.S. Monk, C.A. Nelson // Dev. Neuropsychol 2001.- Vol. 19(2).- P. 147-171.

339. Weinberg, J. Effects of ethanol and maternal nutritional status on fetal development / J. Weinberg // Alcoholism (NY).- 1985.- Vol. 9(1).-P. 49-55.

340. Wisniewski, K. A clinical neuropatological study of the fetal alcohol syndrome / K. Wisniewski // Neuropediatrics- 1983- Vol. 14(4).-P. 197-201.

341. Wood, C.E. Maternal binge drinking and fetal neuronal damage / C.E. Wood // Exp. Physiol.- 2007.- Vol. 92(5).- P. 821.

342. Wuethrich, B. Neurobiology. Does alcohol damage female brains more? / Wuethrich B. // Science.- 2001.- Vol. 16(5511).- P. 2077-2079.

343. Xu, C. Amphetamine normalizes the electrical activity of dopamine neurons in the ventral tegmental area following prenatal ethanol exposure / C. Xu, R.Y. Shen // J. Pharmacol. Exp. Ther.- 2001.- Vol. 297(2).- P. 746-752.

344. Yang, Q. A case-control study of maternal alcohol consumption and intrauterine growth retardation / Q. Yang, B.B. Witkiewicz, R.S. Olney, Y. Liu, M. Davis, M.J. Khoury, A. Correa, J.D. Erickson // Ann. Epidemiol.-2001.-Vol. 11(7).-P. 497-503.

345. Yanni, P. A. Ethanol inhibits development of dendrites and synapses in rat hippocampal pyramidal neuron cultures / P.A. Yanni, ТА. Lindsley // Brain Res. Dev. Brain Res.- 2000.- Vol. 14(2).- P. 233-243.

346. Ye, J.H. Ethanol inhibition of glycine-activated responses in neurons of ventral tegmental area of neonatal rats / J.H. Ye // J. Neurophysiol.— 2001.-Vol. 86(5).-P. 2426-2434.

347. Yelin, R. Early molecular effects of ethanol during vertebrate embryogenesis / R. Yelin, H. Kot, D. Yelin, A. Fainsod // Differentiation.-2007.-Vol. 75(5).-P. 393^103.

348. Yu, S. Effects of acute barbiturate administration, tolerance and dependence on brain GABA system: comparison to alcohol and benzodiazepines / S. Yu, I.K. Ho // Alcohol.- 1990.- Vol. 7(3).- P. 261272.

349. Zambidis, E.T. Blood-forming endothelium in human ontogeny: lessons from in utero development and embryonic stem cell culture / E.T. Zambidis, E. Oberlin, M. Tavian, B. Peault // Trends Cardiovasc. Med — 2006.-Vol. 16(3).-P. 95-101.

350. Zapuskalov, I.V. Vascular system of the eye in health and disease / I.V. Zapuskalov, O.I. Krivosheeva, Y.I. Khoroshikh // Tomsk, 2007.- 118 P

Информация о работе

Солонский, Анатолий Владимирович
доктора медицинских наук
Томск, 2008
ВАК 03.00.25

Диссертация

Морфологические закономерности ранних стадий развития головного мозга в условиях пренатальной алкоголизации - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы