Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Морфологическая и иммуногистохимическая характеристика селезенки при хроническом стрессе в раннем постнатальном онтогенезе
ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология
Автореферат диссертации по теме "Морфологическая и иммуногистохимическая характеристика селезенки при хроническом стрессе в раннем постнатальном онтогенезе"
На правах рукописи
Нестерова Алла Анатольевна /
МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ И ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СЕЛЕЗЕНКИ ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ СТРЕССЕ В РАННЕМ ПОСТНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ
03.00 25 гистология, цитология, клеточная биология
АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук
>П111П11111|1П
0030701Э0
Волгоград - 2007
Работа выполнена в Волгоградском государственном медицинском университете
Научные руководители доктор медицинских наук, профессор Капитонова Марина Юрьевна член-корр РАМН, доктор медицинских наук, профессор Кузнецов Сергей Львович
Официальные оппоненты
- доктор медицинских наук, профессор Павлов Алексей Владимирович
- доктор медицинских наук, профессор Хлопонин Петр Андреевич
Ведущая организация - Российский государственный медицинский университет
Защита состоится «_30_»_мая_200$? в_10 00_час на заседании
Диссертационного совета Д 208 008 01 при Волгоградском государственном медицинском университете по адресу 400066 Волгоград, пл Павших борцов, 1
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Волгоградского государственного медицинского университета (400066 Волгоград, пл Павших борцов, 1)
Автореферат разослан «
2008т
Ученый секретарь Диссертационного совета,
доктор медицинских наук,
профессор
Зайченко Светлана Ильинична
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность исследования Стресс запускает в организме цепь интегрированных реакций нервной, эндокринной и иммунной систем, обусловленных активацией гипоталамо-гипофизарно-адренокортикальной и симпато-адреналовой осей, приводящих к сложным иммуномодуляционным изменениям, которые особенно легко провоцируются в раннем постнатальном онтогенезе из-за морфо-функциональной незрелости лимфоидных органов, отсутствия устойчивых связей между ними, их компартментами и субкомпартментами, иммуноцитами и их микроокружением При этом стресс-ассоциированная иммуномодуляция является многофакторным явлением, и различные стрессоры и характеристики стресса могут оказывать различное действие на иммунный ответ, что необходимо учитывать при прогнозировании диапазона, амплитуды и направленности стресс-ассоциированных иммуномодуляционных сдвигов в растущем организме (М Р Сапин и Д.Б Никитюк, 2000, ИЛ Акмасв, 2003; НЛ акеисЫ а1, 2001; К.В КоЬ а!., 2006).
Селезенка является крупнейшим лимфоидным органом в организме человека
и млекопитающих, вносящим весомый вклад в развитие и поддержание клеточного
и гуморального иммунного ответа, врожденного и приобретенною иммунитета,
количественный и качественный состав иммуноцитов крови, лимфы и других
лимфоидных органов (Л.А Прасолова и др, 2004, М.С.Каг^воп е1 а!, 2004;
К.Е.МеЬш8 е( а!., 2004; P.BaIogh е! а1., 2004) Ее развитие в раннем постнатальном
онтогенезе сопровождается взаимодействием и установлением связей между
гемопоэтическими и стромальными клеточными популяциями многочисленных
микроанаюмических зон на территории органа Лимфодеструктивное,
лимфодегенеративное и лимфопролиферативное действие стресса способно
изменить эти взаимоотношения и привести к продолжительному нарушению
иммунного ответа (У.Х Ри е! а1., 1999; Ь. Вотш^иег-Сегре е! а!., 2001; ЛЛ.ЕНуап!
а1, 2005, Е.ваЮЬ с1 а1, 2006). Однако до сих пор не достигнуто полного
понимания природы стромальных клеток селезенки, их происхождения,
закономерностей распределения по субкомпартментам органа и механизмов
влияния на лимфоидные клетки при стрессе не определена природа фолликулярных
з
дендритных клеток, существуют разногласия в понимании происхождения и дифференцировки дендритных интердигитирующих клеток, их взаимодействия с Т-клеточными популяциями и тд, что связано с недостатком исследований лимфоидной и стромапьной архитектоники органов иммуногенеза, особенно в детском возрасте, и затрудняет понимание закономерностей становления эффективного иммунного ответа и иммуномодуляционных процессов в раннем постнатальном онтогенезе (M.de la Mata et al., 2001; G. Martínez del Hoyo et al., 2002; M.Svensson et al., 2004; L.Alos et al., 2005; J.Diao et al., 2006, T.Kaneko et al, 2006, H.Karsunky et al., 2006).
Основным проявлением стресс-ассоциированных иммуносуппрессивных сдвигов в иммунных органах, в частности в селезенке как наиболее компартментализованном среди них, является гипоцеллюлярность лимфоидной ткани, среди причин которой указывают нарушение трафика иммуноцитов (как притока, так и оттока), избыточную гибель, заторможенную пролиферацию и нарушение сигнальных взаимодействий При этом было неоднократно продемонстрировано, что по мере старения организма механизмы постстрессовой иммуномодуляции претерпевают определенную динамику, однако в раннем постнатальном онтогенезе она остается мало изученной (К А.Гарунова и др., 2004; М.Ю.Капитонова и др., 2006; Н Aviles et al., 2004; V.P.Makarenkova et al., 2006, D.Yin et al., 2006; K.C. Zheng et al., 2007)
Ввиду выше изложенного, мы провели изучение действия различных видов хронического стресса на иммунный статус организма экспериментальных животных на уровне периферического звена иммунной системы и его крупнейшего органа -селезенки - на ранних этапах постнатального онтогенеза с использованием методов количественной иммуногистохимии
Цель исследования. Целью настоящего исследования является выявление закономерностей адаптации селезенки при хроническом действии стресса в раннем постнатальном онтогенезе
Для достижения данной цели были поставлены следующие задачи
1 Охарактеризовать возрастные иммуномодуляционные сдвши в селезенке в раннем постнатальном онтогенезе
2 Изучить динамику лимфоидных и стромальных клеточных популяций различных компартментов селезенки при хроническом действии физических и психологических стрессоров
3 Определить механизмы постстрессовых иммуномодуляционных сдвигов на уровне периферического звена иммунной системы растущего организма
Научная новизна исследования Впервые с применением количественного иммуноцитохимического анализа выявлены иммуномодуляционные изменения в селезенке неполовозрелых крыс различных возрастных групп при хроническом стрессе, вызванном различными по природе стрессорами (физическими и психологическими) и определены их диапазон и амплитуда
Теоретическое значение работы заключается в выяснении механизмов иммуносуппрессивных сдвигов на уровне периферического звена иммуногенеза с учетом их возрастной специфичности в раннем постнатальном онтогенезе
Практическая значимость работы заключается в выделении критериев оценки глубины стресс-ассоциированной иммуносупрессии на уровне крупнейшего периферического органа иммунной системы - селезенки - для использования их при разработке новых терапевтических стратегий профилактики и лечения иммунодефицитных состояний
Внедрение в практику полученные научные данные используются в учебном процессе на кафедре анатомии человека и кафедре иммунологии и аллергологии ВолГМУ
Публикации и апробация материалов диссертации. Материалы диссертации докладывались на VII конгрессе международной ассоциации морфологов, Казань, 16 сентября 2004 года, на юбилейной конференции с международным участием «Современные проблемы науки и образования», посвященной 10-летию Российской академии естесствознания, г Москва, 5-6 декабря 2005 г, на конференции «Фундаментальные и прикладные проблемы
медицины и биологии», Дубай, ОАЭ, 13-20 октября 2006 г, на конференции, посвященной 70-летию Тверской государственной медицинской академии и 100-летию со дня рождения основателя кафедры анатомии человека, проф И С Кудрина, Тверь, сентябрь, 2006, на III конференции «Фундаментальные и прикладные исследования в медицине», 1-8 октября 2006 г, Лутраки (Греция), на заседании Волгоградского отделения Всероссийского научного общества анатомов, гистологов и эмбриологов, март, 2007
Основные положения, выносимые на защиту.
1 Постстрессовая динамика клеточных популяций иммуноцитов в различных компартментах селезенки растущего организма имеет возрастную зависимость и определяется видом действующего стрессора
2 Стресс-ассоциированные иммуномодуляционные сдвиги в селезенке экспериментальных животных в раннем постнатальном онтогенезе имеют как гемопоэтическое, так и стромальное происхождение, в соотношениях, опосредованных онтогенетически
Объем и структура диссертации. Текст диссертации изложен на 150 страницах машинописного текста и состоит из введения, части I - обзора литературы, излагающего современные представления о гистофизиологии селезенки как периферического органа иммуногенеза и об иммуномодулирующем действии стресса, и части II, содержащей 3 главы с описанием материалов и методов исследования, его результатов, обсуждения полученных данных и выводов Диссертация иллюстрирована 5 таблицами и 55 рисунками, среди них 45 -микрофотографии гистологических препаратов Библиографический указатель содержит 240 источников, в том числе 23 отечественных и 217 зарубежных
Содержание работы
Материалы и методы исследования.
Экспериментальное исследование проведено на 90 неполовозрелых белых крысах породы Sprague Dawley в грудном, подсосном и преювенильном возрастном периоде (исходный возраст 14, 21 и 30 дней соответственно, И П.Западнюк и др.,
1974) В исследовании применялись модели хронического стресса ежедневно в
6
течение 7 дней по одной 5-часовой сессии в день (S Bhatnagar et al, 1998) с использованием психологического стрессора («ожидание стресса» в модели S.Jain et al., 1996, - 1-я экспериментальная группа) и преимущественно физического по природе стрессора (водная иммерсия в модели E.Freidin et al., 2004, - 2-я экспериментальная группа) В каждой возрастной группе было по 30 животных, из которых 10 составили группу возрастного контроля и по 10 крыс было в каждой из двух экспериментальных групп По окончании эксперимента животные забивались под анестезией, селезенка извлекалась, взвешивалась и фиксировалась формалином Парафиновые срезы селезенки окрашивались гематоксилин-эозином, по Ван Гизону и иммуногистохимически стрептавидин-биотин-пероксидазным методом Помимо селезенки, извлекались и взвешивались тимус и правый надпочечник, а также оценивалось состояние слизистой оболочки желудка (для характеристики общей стресс-реакции)
Для иммуногистохимического исследования использовались моноклональные антитела фирмы "Serotec" (UK) против CD3 (клон 1F4), CD4 (клон W3/25), CD8a (клон MRC ОХ8), CD20 (клон RLN-9D3), CD90 (клон HIS51, "BD Pharmingen",USAJ, CD45RC (клон MRC 0X22,), выявляющие различные фракции лимфоидных клеток, CD68 (клон ED1), 0X62 (клон MRC 0X62) и белка S100 (DAKO, Denmark) для выявления стромальных клеток, а также PCNA (клон PC 10), и каспазы-3 ("Sigma", USA) для характеристики уровня пролиферации и апоптоза спленоцитов соответственно
Иммуногистохимически окрашенные срезы оценивались количественно с помощью цифрового анализа в программе ImageProPlus с использованием программы Excel для статистической обработки данных с вычислением средней арифметической, среднеквадратического отклонения, средней ошибки средней арифметической, коэффициента корреляции, необходимого числа исследований, различия средних по критерию Стьюдента
Полученные результаты и их обсуждение.
Хронический стресс вызывал инволюцию тимуса, гипертрофию надпочечников и появление точечных кровоизлияний на слизистой оболочке желудка экспериментальных животных обеих групп всех возрастных подгрупп
Таблица 1. Масса тела животных (г) при хроническом стрессе,
М+/-Ш.
стрессор/ возраст 20 дней 27 дней 36 дней
контроль 28,12 ± 1,56 40,56 ± 2,93 79,64 ±3,16
психологический (1-я гр) 26,83 ± 2,05 36,98 ±3,11 72,43 ± 3,95
физический (2-я гр) 23,19 ± 1,74* 31,52 ±3,06* 70,06 ± 3,29*
- р<0,05 по сравнению с контролем
Как следует из таблицы 1, хронический стресс вызывал отставание возрастной прибавки массы тела у животных обеих экспериментальных групп во всех возрастных подгруппах, которое было значимым только у животных 2-ой экспериментальной группы
Таблица 2. Масса селезенки животных (г) при хроническом стрессе, М+/-
ш
стрессор/возраст 20 дней 27 дней 36 дней
контроль 0,163+/-0,010 0,200+/-0,014 0,346+/-0,028
психологич (1-ягр) 0,149+/-0,013 0,156+/-0,012* 0,284+/-0,023
физический (2-я гр) 0,103 +/-0 009*** 0,123+7-0,011 *** 0,236+7-0,017 ***
р<0,05 по сравнению с контролем
*** - р<0,001 по сравнению с контролем
Несколько иной была динамика массы селезенки высоко достоверное ее уменьшение имело место во всех возрастных подгруппах 2-ой экспериментальной группы, в то время как в 1-ой группе это снижение достигало уровня значимости только в период перехода на самостоятельное питание При этом во всех 3-х возрастных подгруппах различия в весе селезенки между двумя экспериментальными группами было также достоверным (р<0,05)
Таблица 3 Динамика веса надпочечника животных (мг) при хроническом стрессе, М+/-Ш
стрессор/ возраст 20 дней 27 дней 36 дней
контроль 6,18-+/-0,31 7,11+/-0,5 8 9,35+/-0,65
психологич стрессор (1-я гр ) 7,19+/-0,43 9,14+/-0,61* 10,86+/-0,72
физический стрессор (2-я гр ) 7,59 +/-0,57 * 9, 58+7-0,63** 11,46+7-0,76*
- р<0, 05 по сравнению с контролем
** - р<0,01 по сравнению с контролем
Таблица 3 демонстрирует увеличение веса надпочечника при хроническом стрессе, которое достигало наибольшего уровня значимости в подсосном периоде в обеих экспериментальных группах Между двумя экспериментальными группами различий по данному показателю не было ни в одной возрастной подгруппе
Таким образом, степень стресс-ассоциированной гипотрофии селезенки и гипертрофии надпочечников, так же как относительное уменьшение массы тела при хроническом стрессе, были связаны с видом стрессора и исходным возрастом животного и достигали максимальных значений во 2-ой экспериментальной группе в исходном возрасте 21 день, что соответствует переходу на самостоятельное питание Гипоцеллюлярность лимфоидных органов, прежде всего за счет Т-клеточных популяций, является характерным признаком стресс-индуцированной иммуносуппрессии Косвенно о ней можно судить по весу органов иммуногенеза, так как между снижением числа 1-клеток в селезенке при иммуномодуляционных воздействиях и весом органа имеется определенный параллелизм (НЛ.Но$еа е! а1., 2003,) Однако имеющиеся в арсенале нашего исследования количественные иммуногистохимические методы позволили нам провести более тонкий анализ показателей стресс-ассоциированной иммуносуппрессии в растущем организме и соотнести их с органометрическими параметрами
На следующем этапе исследования - оценке микроструктуры селезенки на гистологических препаратах, окрашенных рутинными методами, отмечены
возрастные и стресс-ассоциированные изменения, свидетельствующие о выраженных иммуномодуляционных сдвигах в организме на уровне периферического звена органов иммунной защиты, связанных с видом стрессорного воздействия и зависящих от исходного возраста экспериментальных животных
В младшей возрастной группе, исходный возраст животных в которой соответствовал периоду грудного вскармливания, селезенка контрольных особей оставалась морфологически незрелой с очагами миелопоэза в красной пульпе, с небольшим объемом белой пульпы, представленной главным образом периартериальными лимфоидными влагалищами (ПАЛВ), преимущественно мелкими и средними, и формирующимися лимфоидными узелками, окруженными ободками маргинальной зоны с недостаточно четкими границами Иммуногистохимическое окрашивание на белок Б100, выявляющий фолликулярные дендритные клетки (ФДК) (Ь А1оз е! а1., 2005), показал наличие большого количества формирующихся лимфоидных фолликулов, содержащих рыхлую мелкопетлистую иммунореактивную сеть При окрашивании серийных срезов селезенки на С020, выявляющем зрелые В-лимфоциты, видно гомогенное заполнение этой сети иммунореактивными клетками, а при окрашивании на ОХ-62, маркер дендритных клеток, выявлялась строма ПАЛВ, заполняемая Т-лимфоцитами с фенотипом С[)31 (маркер зрелых Т-клеток), С04+ (маркер Г-хелперов и некоторой части макрофагов и дендритных клеток), С08+ (маркер Т-супрессоров/цитотоксических лимфоцитов, ЫК-клеток и части дендритных клеток), С090+ (маркер недавних тимусных иммигрантов, НТИ) В средней возрастной группе, исходный возраст которой соответствовал периоду перехода на самостоятельное питание, объем белой пульпы значительно возрастал увеличивался диаметр ПАЛВ за счет появления крупных лимфоидных влагалищ, в разрастающихся лимфоидных фолликулах появлялись центры размножения В старшей возрастной группе белая пульпа достигала наибольшего объема, она четко отграничивалась от маргинальной зоны, а маргинальная зона - от окружающей красной пульпы, в которой происходило угасание миелопоэза В ПАЛВ дифференцировались внутренная и наружная зона, а среди лимфоидных узелков появлялось все больше вторичных Возрастал объем маргинальной зоны, которая, как показало окрашивание на С020 и С045ЯС, становилась крупнейшим В-клеточным компартментом
зо
25
20
Контроль
- 20 дней *
- 27 дней I i - 36 пней
Ф изич4скиАстресс
Психологический стресс
- р<0,05 но сравнению с контролем
- р<0,01 ею сравнению с контролем но сравнению с контролем
При хроническом стрессе и селезенке отмечались структурные и йммуногистохимические изменения, указывающие на замедление развитая и достижения функциональной Зрелости органа при действии психологической* стрессора, а также дегенерация и деструкция лимфоидной ткани селезенки, диапазон и выраженность которой были предопределены исходным возрастом Животного. К изменениям, свидетельствующим об иммуносупрёссиином характере хронического стресса, относились уменьшение объема белой пульны и ширины маргинальной зоны, разрушение лимфоидных узелков и исчезновение в них герминативных центров, дезорганизация ПАЛВ, появление н лимфоидных узелках и ПАЛ В множества макрофагов с неокрашенной цитоплазмой, содержащей многочисленные алоптозные тельца. что свидетельствовала об усилении гибели спленоцитов алоптозом.
Количественное иммуногистохимичсское исследование йозаолило выявить новые закономерности стресс-индуцированных нммуномодуляционных сдвигов н селезенке, зависящих от вида стресса и связанных с возрастом животных. Рис.1. Динамика распределения CD8 t-клсток в селезенке прс пубертатных крыс при
хроническом стрессе (удельная площадь, %. М+/-т)
Результаты, представленные на рис, 1, демонстрируют возрастную и стресс-
ассоциированную динамику CDS+клеток, к которым относятся зрелые Т-суппрессоры, часть NK и дендритных клеток. Как следует из рисунка, имеет место
11
увеличение удельной площади иммунореактивных клеток у контрольных животных с возрастом, что отражает общую в данном возрастном периоде тенденцию увеличения объема белой пульны, где эти клетки главным образом сосредоточены, К Зй-дневном у возрасту это увеличение но сравнению с 20-дневной группой достигает уровня значимости (р<0,05). Имидж-анализ выявил также высоко достоверное уменьшение числа и м му нореакти в н ы х клеток при действии физического стрессора во всех возрастных группах, в то время как при действии психологического стрессора это уменьшение было значимым лишь в старших возрастных группах. Между двумя экспериментальными группами различие по данному показателю было достоверным лишь в период перехода на самостоятельное питание (р<0,05). В целом отмечена большая степень деплеции СЭЙ+шленоцитов в старших возрастных группах но сравнений с младшей группой.
Рис .2 Динамика распределения СОУО+адеток в селезенке пршубертатных крыс при хроническом стрессе (удельная площадь, %, ГУН /-т)
I I - 20 дней * - р<0,05 по сравнению с контролем
-27¿ней ** -р<0,01 по сравнению с контролем
| •■;■:■•■] . 36 дней *** - р<0,001 по сравнению с контролем
Как следует из рис.2, доля СЕ)90-иммунореактивных клеток, выявляющих
популяцию НТИ, также возрастала с увеличением возраста контрольных животных
(р<0,05 при сравнении средней с младшей и старшей со средней возрастных
подгрупп; р<0.001 при сравнении младшей и старшей подгрупп), что
12
свидетельствует о достаточно равномерном и очень динамичном нарастании интенсивности трафика Т-клеток из тимуса в периферическое звено иммунной системы в раннем постнатальном онтогенезе Динамика распределения С090-иммунореактивных клеток в эксперименте была несколько иной, чем у С08+клеток интенсивность трафика тимоцитов «на периферию» достоверно снижалась при обоих видах стресса во всех возрастных подгруппах Наибольшее снижение доли иммунореактивных клеток относительно контроля отмечалось в младшей возрастной подгруппе в обеих экспериментальных группах и наименьшее - в старшей подгруппе, что демонстрирует отчетливые возрастные преференции стресс-ассоциированной динамики различных популяций Т-лимфоцитов И С090+, и С08+клетки заполняют преимущественно Т-зоны селезенки, в связи с чем постстрессовая реакция стромальных элементов Т-клеточных субкомпартментов представляла особый интерес
Как следует из рис 3, при окраске на ОХ-62, выявляющей большую часть дендритных клеток ПАЛВ, а также небольшую часть гамма-дельта Т-лимфоцитов, отмечается значимое возрастное увеличение доли иммунореактивных клеток у контрольных животных по сравнению с младшей возрастной группой она была достоверно выше у средней возрастной группы (р<0,05), и высоко достоверно - у старшей (р<0,001), между средней и старшей группой различия также были значимыми (р<0,05) Эти результаты свидетельствуют о продолжающихся в данном возрастном периоде процессах нарастающего поступления и дифференцировки дендритных клеток, в частности ОХ-62, преимущественно в Т-зоны селезенки, а также в ее маргинальную зону Сгресс вызывал некоторое уменьшение доли ОХ-62 иммунореактивных клеток в ПАЛВ во всех возрастных подгруппах при обоих видах стресса, однако лишь в старшей возрастной подгруппе при действии физического стрессора это снижение было достоверным Оценивая полученные результаты по ОХ-62-иммунореактивности селезенки, мы учитывали то обстоятельство, что не все дендритные клетки Т-зон являются ОХ62-позитивными и не все ОХ-62-позитивные клетки являются дендритными (Т.Капеко с1 а!., 2006) В частности, ОХ-62-иммунореактивными являются гамма-дельта Т-клетки, однако у крыс они чрезвычайно малочисленны (М Вгепап а!, 1992) Большая часть дендритных
п
клеток у крыс OX-62-иммунореактивна, т е относится ко II типу дендритных клеток (M de la Mata et al, 2001 ) В целом, по данным ряда авторов, ОХ-62 иммунореактивность позволяет судить о доле и динамике дендритных клеток в лимфоидных тканях (M Brcnan et al., 1992) Полученные нами результаты соответствуют представлениям некоторых авторов о том, что стресс, сопровождающийся повышенным выбросом кортикостероидов в кровь, влияет на дендритные клетки селезенки, однако не провоцирует их апоптоза, в отличие от других клеточных популяций, а вызывает изменение их дифференцировки, «запуская» ее в большей степени по миелоидному фенотипу, что можно рассматривать как адаптационное изменение, поскольку именно дендритные клетки миелоидного фенотипа обладают более высоким антиген-презентирующим потенциалом, что чрезвычайно важно в условиях формирующейся стресс-ассоциированной иммуносуппрессии (G.Martinez del Hoyo et al., 2002; A.D.McLennan et al., 2002; P Martin et al., 20004; S.H.Naik et al., 2006) Корреляционный анализ также показал отсутствие параллелизма в дегшеции лимфоидных клеток Т-зон (CD8+ и CD90+) и стромальных (дендритных ОХ-62+) клеток Это наблюдение свидетельствует о том, что причиной лимфоидной гипоцеллюлярности Т-зон селезенки при хроническом стрессе в раннем постнатальном онтогенезе является в меньшей степени нарушение стромалыю-паренхиматозных взаимоотношений и в большей степени другие механизмы, рассмотренные нами ниже (такие, как снижение притока, угнетение пролиферации и усиленный апоптоз Т-лимфоцитов, который даже сохраненные стромальные клетки ПАЛВ, в отличие от стромальных клеточных элементов В-зон, не в состоянии эффективно предотвратить) (J.Choe et al, 2000) Интересно, что у контрольных животных между содержанием дендритных клеток и С090-иммунореактивных НТИ отмечалась достоверная средняя по силе или сильная корреляционная связь (г=0,59, 0,61 и 0,70 в младшей, средней и старшей возрастных подгруппах соответственно) При стрессе эта связь становилась слабой и недостоверной во всех возрастных подгруппах Это обстоятельство позволяет судить о том, что в раннем постнатальном онтогенезе в процессе становления иммунологической зрелости селезенки в ходе нарастания объема Т-зон параллельно идет разрастание их стромы
и
и усиление притока из тимуса Т-клеток, заполняющих петли этой стромы При стрессе стромальные клеточные элементы Т-зон остаются достаточно стабильной клеточной популяцией, во всяком случае это справедливо в отношении ОХ-62-позитивных клеток, которые оказывают стимулирующее влияние на Т-клетки и запускают иммунный ответ (М De la Mata et al., 2001) Полученные нами результаты противоречат данным других исследователей (М В Krummen et al., 2006) о том, что при повышении концентрации кортикостероидов происходит почти полная деплеция дендритных клеток в периферических органах иммуногенеза, что может быть связано с различными методическими подходами в этих экспериментальных исследованиях В противоположность дендритным клеткам, Т-лимфоциты, включая НГИ, оказываются высоко чувствительными к действию стресса, и резкое снижение их содержания в Т-зонах селезенки говорит о негативных последствиях стресса для гетерогенности наивных Т-клеток в периферическом Т-клеточном пуле (Н Engler et al., 2003) Полученные нами результаты не согласуются с данными других авторов о том, что спленоциты как достаточно зрелые лимфоидные клетки отличаются стресс-устойчивостью (X.Zhang et al, 2005) Причиной данного несоответствия вероятно является ранний возраст экспериментальных животных в наших исследованиях, в котором селезенка и все ее компартменты и субкомпартменты остаются морфологически и функционально незрелыми, что предопределяет повышенную чувствительность спленоцитов к иммунокомпрометирующему действию стресса
Контроль
I I - 20 дней *
- 27 имей *
1: : :: -1 - 36 дней
Психологический стресс Физический стресс
- р<0,05 но сравнению с контролем * * - р<0,01 но сравнению с контролем *** - р<0,001 по сравнению с кон тролем
Рис.3. Динамика распределения ОХбЗ+клеток в селезенке препубертатных крыс при хроническом стрессе (удельная площадь, %, М+/-т)
Как следует из рис,4, демонстрирующею динамику В-клеточного компартмента селезенки растущих крыс, он также претерпевает значительные возрастные изменения, связанные с увеличением удельной площади иммунореактивных клеток при переходе от младшей к старшей нозрастной подгруппе (р0,01) и от средней к старшей (р<0,05), что
I 1
Контроль
| | - 20 дней ШЯ - 21 пней Р':: I - 36 дней
*
■к* А -к -к
Псмщльтнчбитн счреъс ФМЗМЧЙЕХИЙ ¡лресс
- р<0.05 но сравнению с контролем
- р<0,01 по сравнений с контролем
- р<(),001 но сравнению с контролем
Рис.4. Динамика распределения С020+клеток в селезенке п ре пубертатных при ироническом стрессе (удельная площадь, %, М->/-т)
крыс
соответствует общей тенденции роста В-клеточного компармента в раннем постнатальном онтогенезе. Стресс-ассоииировапные изменения
иммуносупрсссивного характера при действии физического стрессора проявлялись высоко достоверным уменьшение^ доли иммунореактивных клеток (зрелых В-лимфоцитов) во всех возрастных подгруппах. При действии психологического стрессора, это снижение также имело место, дост игая при этом уровня значимости в младших возрастных подгруппах. Эти наблюдения подтверждают, что хронический стресс оказывает им м у носу пресс и (.нос действие, к'лс.нощесся не только клеточного, но и гуморального иммунного ответа, причем к нему особенно чувствителен В-к л сточный субкомпартмент крыс самых ранних стадий тшетнагапъного онтогенеза. Для выяснения роли в данном явлении стромальных элементов В-зон белой пульпы селезенки мы предприняли количественную оценку распределения белок 8100-иммунореактквныХ клеток, выявляющих ФДК ко вторичных иммунных органах (Ь.А1оя et.il., 2005).
Рис.5. Динамика распределения белок Б100+клеток и селезенке препубер-татнмх крыс при хроническом стрессе (удельная площадь, %, М+/-т)
I I -20лней * - р<0,05 по срапнению С контролем
\j2ZA -27 дней ** - р<0,01 по сравнению с контролем
|: : : : - 36 дней *** - р<0,001 по Сравнений! с контролем
Исследование показало, что и мму норе активные клетки локализовались исключительно в лнмфоидиых фолликулах. Серийные срезы продемонстрировали, что все они были СШО-пегативными. Как следует ю рис.5, эта клеточная популяция отличалась самым динамичным ростом при переходе из одной возрастной подгруппы в другую (р<0,()01 при сравнении младшей и средней возрастных подгрупп; р<0,05 при сравнении средней и старшей возрастных подгрупп). Во всех возрастных подгруппах имело место достоверное уменьшение доли иммунорелктивных клеток во 2-ой экспериментальной группе. В 1-ой экспериментальной группе различия не достигали уровня значимости только н старшей возрастной подгруппе. Гак же, как и при окраске на СЕ)20. во второй экспериментальной группе имело место большее снижение доли мммунореактивных клеток, чем в первой, а в младших возрастных подгруппах большее по сравнению со старшей подгруппой. При этом корреляционный анализ показал наличие сильной
!
I .. л_ _____
достоверной корреляционной связи между удельной площадью белок 5100+ клеток и В-лимфоцитов (г=0,72, 0,69, 0,76 при р<0,05 в исходном грудном, подсосном и преювенильном возрасте соответственно)
Известно, что ФДК и интердигитирующие дендритные клетки (ИДК) являются двумя разновидностями дендритных клеток, являющихся антиген-презентирующими, активирующими В- и Т-лимфоциты и располагающимися в В- и Т-компартментах соответственно (К \V.Tinsley е( а1., 2003) Как показало наше исследование, в противоположность Т-клеточным субкомпартментам белой пульпы, где параллелизм между лимфоидной и стромальной гипоцеллюлярностью отсутствовал, в В-клеточном субкомпартменте прослеживалась отчетливая связь между деплецией лимфоидных клеток и разрушением стромы лимфоидных фолликулов Эти результаты согласуются с данными других авторов о том, что белок 8-100+ иммунореактивные ФДК оказывают мощное стабилизирующее действие на иммуноархнтсктонику лимфоидных фолликулов (Л.СЬое е1 а!., 2000, Ь Ь| с1 а!., 2002, Ь.АЬэ е1 а1., 2005). Из литературных данных известно, что и ФДК, и ИДК гибнут апоптозом, который является преимущественно каспаза-3-медиированным Столь различное поведение этих двух клеточных популяций дендритных клеток селезенки при хроническом стрессе, обнаруженное в наших экспериментах, представляется вполне объяснимым Эти клетки имеют различное происхождение (большинство авторов считают, что ФДК, в противоположность ИДК, не являются клетками костномозгового происхождения), имеют различную продолжительность жизненного цикла (ФДК могут более года удерживать на поверхности антиген, в то время как ИДК гибнут апоптозом вскоре после презентации антигена Т-клеткам и имеют, в зависимости от фенотипа, период полужизни от 1,5 до 3 дней) Вопрос же о том, является ли утрата Т- или В-клеток причиной гибели ИДК и ФДК соответственно или, наоборот, происходит утрата ИДК и ФДК в связи с деплецией Т- и В-клеток соответственно, является до сих пор открытым (КЛУ.ТиЫсу е1 а!., 2003)
Как следует из рис 6, хронический стресс вызывал достоверное усиление апоптоза, распространенность которого оценивалась по иммунореактивности по каспазе-3 - ключевого фермента апоптоза, во всех возрастных подгруппах при
19
действии физического стрессора, в то время при действии психологического стрессора в подгруппе [рудного возраста это снижение не было значимым. В целом, отмечена относительно более высокая доля гибнущих апоптозом спленоцитов в старших возрастных подгруппах по сравнению с младшей.
Рис.6. Динамика распределения касназа-З ^клеток в селезенке лрепу-бертатпых крыс при хроническом стрессе (удельная площадь, %, Мь'-т)
15
Контроль Психологический стресс Физический стресс
I I -20 дней * - р<0,05 но сравнению с контролем
У///Л - 21 лнсй ** - р<0,01 по сравнению с контролем
. 36 дней *** - р<0,001 по сравнению с контролем
Полученные нами результаты противоречат данным других авторов,
показавших, что спленоциты являются относительно устойчивыми к стрессу
клетками, в сравнении, например, с тимонитами, так как у первых меньше
рецепторов к глюкокортикоидам, высок уровень экспрессии Ьс!-2 и в целом они в
меньшей степени доступны действию эндогенных корти косте рондо в, чем
лимфоциты других иммунных органов (В.S.McEwen et al., 1997). Объяснением
этого противоречия может быть то обстоятельство, что и раннем гтостната льном
онтогенезе селезенка еще продолжает формировать свои компартменты и
субкомлартменты, которые отличаются относительной незрелостью своих клеток, в
то время как устойчивыми к ГТНО-индуцированному анолтозу являются лишь
20
зрелые спленоцигы (Т81шш2и а1., 2000) Кроме того, ГГНО-зависимый путь является не единственным иммуномодулирующим средством при стрессе Спленоциты содержат также рецепторы к опиоидам, стимулирование которых при стрессе также способно запускать избыточный апоптоз лимфоидных клеток, в том числе с использованием системы Раз(АРО-1) - РаБ(АРО-1 )-лиганд (й Уш а1., 2000; 2006). Для подтверждения этих наблюдений и выявления дополнительных механизмов иммуносуппрессивных сдвигов в селезенке при стрессе мы провели сравнительное количественное исследование частоты обнаружения пролиферирующих клеток и клеток, гибнущих апоптозом
Как следует из рис 7, демонстрирующего динамику клеток, имеющих пролиферативный потенциал, возрастные колебания уровня экспрессии РСЫА незначительны При стрессе происходит уменьшение удельной площади РСЫА-иммунореактивных клеток, достоверное во всех возрастных подгруппах 2-ой экспериментальной группы и в старших возрастных подгруппах 1-ой экспериментальной группы Таким образом, как показало это исследование, хронический стресс в раннем постнатальном онтогенезе не вызывал усиления пролиферации спленоцитов ни в одной возрастной подгруппе при действии как психологического, так и преимущественно физического стрессора Как и при окрашивании на каспазу-3, отмечено более выраженное иммуносуппрессивное действие стресса на иммуноархитектонику селезенки в более старших возрастных группах
Рис.7. Динамика распределения РСХЛ ■ клеток и селезенке препусертатных крыс при хроническом стрсссс (уделъная площадь, %, М+/-т)
I I -20 дней * - р<0,05 по сравнению с контролем -27 дней ** -р<0,01 но сравнению с контролем
| . зй дней *** - р<0,00! чо сравнению с контролем
Полученные нами данные относительно стресс-иидуцированной динамики пролиферирующих клеток мри стрессе противоречат данным других авторов, отмечающих усиление пролиферации лимфоцитов периферических иммунных органов при стрессе (А.Р;тгаш1е11 ег а|., 2004), что также может быть связано с разницей в возрасте экспериментальных животных и примененных моделях стресса.
Таким образом, проведенное исследование Продемонстрировала, что хронический стресс, с использованием как чисто психологического стрессора («ожидание» стресса), гак и преимущественно физического стрессора (водной иммерсии) вызывает изменения иммуноархитектоники селезенки растущего организма, соответствующие иммумодепрессияным состояниям. При этом, как показало количественное иммуногистохимическое исследование, эти изменения являются отражением вида примененного стрессорного воздействия и исходного возраста Животных. Так пс.ихолошчсский стресс в большей степени влияя на микроархитектонику "Г-зон селезенки, в то время как физический стресс подавлял развитие как Т- , так и В-зон белой пульпы селезенки, вызывая дегенерацию,
Имела место утрата клеточных популяций Т-зон, таких как СОЗ+ и СЭ8+ иммунореактивные клетки - в большей степени на более поздних стадиях раннего постнатального онтогенеза, а В-зон (СЭ20+клетки) - в более ранние возрастные периоды Механизмы деплеции лимфоидных клеток при хроническом стрессе также имели возрастную зависимость в младших подгруппах это был в большей степени нарушенный трафик НТИ из 1имуса, а в более старших подгруппах - угнетение пролиферации спленоцитов и их избыточный апоптоз, что может быть связано с различной степенью функциональной зрелости ГГНО, симпато-адреналовой оси, опиоидного рецепторного аппарата на разных этапах раннего постнатального онтогенеза, регулирующих и рекрутирование НТИ в Т-зоны селезенки, и каспаза-3-медиированную гибель спленоцитов апоптозом, и функциональную зрелость как паренхиматозных, так и стромальных элементов Т- и В-зон селезенки, взаимодействие которых предотвращает избыточную гибель спленоцитов и регулирует процессы их селекции Полученные данные позволяют оценивать иммунный статус организма, подвергшегося действию хронического стресса, и разрабатывать новые методы постстрессовой иммунокоррекции у иммунокомпрометированных детей
ВЫВОДЫ.
1 Иммуномодуляционное действие хронического стресса на уровне периферического звена иммунной системы — селезенки - в раннем постнатадьном онтогенезе у крыс проявляется изменениями иммуносупрессивного характера в Т- и В-клеточном компар! ментах белой пульпы, соотношение и выраженность которых связана с исходным возрастом животных и характером стрессорного воздействия
2 При хроническом действии психологического стрессора снижение объема белой пульпы связано преимущественно с редукцией Т-клеточных компартментов вследствие уменьшения размеров ПАЛВ, снижения их клеточности, уменьшения удельной площади С090+ и С08+ лимфоцитов Уменьшение объема белой пульпы при хроническом действии физического стрессора обусловлено дегенерацией как Т-клеточных, так и В-клеточных субкомпартментов уменьшением размеров и числа
лимфоидных узелков, редукцией ПАЛВ, сужением маргинальной зоны вокруг лимфоидных узелков и ПАЛВ, что наряду с уменьшением удельной площади CD90+H CD8+ клеток сопровождается сокращением популяций CD20+ и CD45RC+mieTOK и является проявлением зависимости топографии стресс-ассоциированных сдвигов в иммуноархитектонике селезенки в раннем постнатальном онтогенезе от вида примененного стрессора
3 В раннем постнатальном онтогенезе хронический стресс оказывает влияние как на лимфоидные, так и стромальные элементы Т- и В-клеточных субкомпартментов белой пульпы селезенки в соотношениях и диапазоне, имеющих возрастную зависимость и соответствующих виду стресса При этом, по данным иммуногистохимического имидж-анализа, ОХ-62+ дендритные клетки ПАЛВ оказываются в целом менее чувствительными к действию стресса, чем белок S100+ фолликулярные дендритные клетки лимфоидных узелков, а Т-лимфоциты ПАЛВ -менее зависимыми от стабилизирующего действия стромальных клеток, чем В-лимфоциты лимфоидных узелков
4 Возрастное увеличение доли недавних тимусных иммигрантов коррелирует с нарастанием плотности дендритных клеток в Т-зонах, в то время как уменьшение числа дендритных клеток ПАЛВ при хроническом стрессе не обнаруживает значимой корреляции со снижением числа недавних тимусных иммигрантов (Thy 1 1+клеток), а также С08+иммунореактивных клеток
5 При хроническом психо-эмоциональном стрессе в исходном грудном возрасте преобладающим механизмом гипоплазии белой пулшы является уменьшение интенсивности трафика лимфоцитов из тимуса в Т-клггочные субкомпартменты, о чем свидетельствует достоверное снижение числа CDSO+клеток в ПАЛВ, в то время как в более старших возрастных группах - усиленш апоптоза (наибольшее — в В-зонах) и торможение пролиферации (наибольшее - вТ-зонах) лимфоцитов
6 Наибольшая степень иммуносуппрессивных «вигов в микроструктуре В-зон селезенки отмечается в более ранние периоды, в то время как Т-зон - на более поздних этапах развития, что свидетельствует овозрастной зависимости изменений
иммуноархшектоники селезенки при хроническом стрессе в раннем постнатальном онтогенезе
Практические рекомендации
1 Для оценки степени иммуносупрессии при стрессе высокой информативностью отличаются показатели содержания в селезенке популяций лимфоидных и стромальных клеточных элементов, иммунореактивных по С08+, СБ90+, белок 8100+, С020+, в связи с чем их можно использовать при разработке новых терапевтических стратегий борьбы с иммуносуппрессивными состояниями
2 Для характеристики гипоцеллюлярности Т-клеточных субкомпартментов целесообразно использовать иммуногистохимическое окрашивание на РСЫА, в то время как для оценки состояния В-клеточных - окрашивание на каспазу-3
СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ СОИСКАТЕЛЯ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1 Особенности реакции гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы на действие хронического стресса в период грудного вскармливания // В сб Морфология процессов индивидуального развития, адаптации и компенсации Труды ВолГМУ, Волгоград 2005 - Т 62 - Вып I - С 32-35 (соавтры Капитонова М.Ю., Клаучек С В., Верстакова O.E.,. Морозова З.Ч, Мураева H.A., Смирнова Т.С., Федорова О.В., Тхабит Худа С.А.)
2 Возрастные особенности соотношения изменений иммунных параметров в центральных и периферических органах иммуногенеза при хроническом стрессе // Фундаментальные исследования- 2006 - N11- С 61-62 (соавторы М.Ю.Капитонова, Н.А.Мураева, Д А Чернов В В Хлебников)
3 Влияние хронического психо-эмоционального стресса на параметры врожденного иммунного ответа в раннем постнатальном онтогенезе // Фундаментальные исследования- 2006- N11- С 51-52 (соавторы Н.А.Мураева, В.В.Хлебников, Д.А.Чернов, М.Ю.Капитонова).
4 Распределение SlOO-позитивных клеток в белой пульпе селезенки крыс в возрастном аспекте // Успехи современного естествознания - 2006 - N1 - С 83-84 (соавторы Капитонова М.Ю., Морозова 3 Ч., Сидоркина А.В , Нестерова А А., Мураева Н.А , Фомина Н.Г., Демидович И.Л.).
5 Возрастная динамика распределения гранзим Б-содержащих клеток в периферических иммунных органах крыс при хроническом стрессе в раннем постнатальном онтогенезе // Вестник Волгоградского государственного медицинского университета - 2006 - N3 - С 28-32 (соавторы Капитонова М.Ю., Краюшкин А.И., Мураева H.A., Федорова О.В.) *
6 Соотношение иммуномодуляционных сдвигов в центральных и периферических органах иммунной защиты при хроническом стрессе // Морфология -2006- N5 -С 49-50 (соавторы Капитонова М.Ю., Мураева H.A., Краюшкин А.И., Хлебников В.В, Чернов Д.А., Смирнова Т.С.) *
* - издания, рекомендованные ВАК РФ для опубликования материалов докторских диссертаций (2006 г)
Нестерова Алла Анатольевна
МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ И ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СЕЛЕЗЕНКИ ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ СТРЕССЕ В РАННЕМ ПОСТНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ
03.00.25 гистология, цитология, клеточная биология
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
кандидата медицинских наук
Формат 60x84 1/16 Печать офсетная Бумага офсетная № 65 Тираж 100 экз Заказ № 2126
Отпечатано ООО «Бланк» Лиц №3550 г Волгоград ул Скосырева, 2а
Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Нестерова, Алла Анатольевна
Список сокращений.
Введение.
Глава 1. Обзор литературы.
1.1. Селезенка как периферический орган иммуногенеза в норме и при иммуномодуляционных воздействиях.
1.1.1. Иммуноархитектоника маргинальной зоны селезенки.
1.1.2 Иммуноархитектоника белой пульпы селезенки.
1.1.2.1 Иммуноморфология В-клеточного субкомпартмента белой пульпы (лимфоидных узелков).
1.1.2.2 Стромально-паренхиматозные взаимоотношения в В-клеточном субкомпартменте селезенки.
1.1.2.3 Иммуноморфология Т-зон селезенки.
1.1.2.4 Недавние тимусные иммигранты и их роль в поддержании иммунного статуса организма.
1.1.2.5 Стромально-паренхиматозные взаимоотношения в Т-клеточном субкомпартменте селезенки и происхождение стромальных клеток.
1.1.3 Иммуноморфология красной пульпы селезенки.
1.1.3.1 Стромально-лимфоидные взаимоотношения в красной пульпе и маргинальной зоне.
1.2 Микроархитектоника селезенки при иммуномодулирущих воздействиях.
1.3 Стресс и его иммуномодулирующее действие.
1.3.1 Влияние острого стресса на микроструктуру селезенки.
1.3.2 Влияние хронического стресса на иммуноархитектонику селезенки.
Глава 2. Материал и методы исследования.
Глава 3. Результаты исследования.
3.1. Влияние разных видов хронического стресса на массу тела и органометрические параметры экспериментальных животных
3.2. Морфологическая и иммуноцитохимическая характеристика селезенки крыс в норме на разных этапах раннего постаатального онтогенеза.
3.3. Морфологическая и иммуноцитохимическая характеристика селезенки при хроническом действии психологического стрессора.
3.4 Морфологическая и иммуноцитохимическая характеристика селезенки крыс при хроническом действии физического стрессора.
3.5 Количественный иммуногистохимический анализ селезенки неполовозрелых крыс разных возрастных групп при хроническом стрессе.
Введение Диссертация по биологии, на тему "Морфологическая и иммуногистохимическая характеристика селезенки при хроническом стрессе в раннем постнатальном онтогенезе"
Актуальность исследования.
Стресс запускает в организме цепь интегрированных реакций нервной, эндокринной и иммунной систем, обусловленных активацией гипотапамо-гипофизарно-адренокортикалыюй (ГГНО) и симпато-адреналовой осей, приводящих к сложным иммуномодуляционным изменениям, которые особенно легко провоцируются в раннем постнатальном онтогенезе из-за морфо-функционапьной незрелости лимфоидных органов, отсутствия устойчивых связей между ними, их компартментами и субкомпартментами, иммуноцитами и их микроокружением. При этом стресс-ассоциированная иммуномодуляция является многофакторным явлением, и различные стрессоры и характеристики стресса могут оказывать противоположное действие на иммунный ответ, что необходимо учитывать при прогнозировании диапазона, амплитуды и направленности стресс-ассоциированных иммуномодуляционных сдвигов в растущем организме [28, 3,225,134J.
Селезенка является крупнейшим лимфоидным органом в организме человека и млекопитающих, вносящим весомый вклад в развитие и поддержание клеточного и гуморального иммунного ответа, врожденного и приобретенного иммунитета, количественный и качественный состав иммуноцитов крови, лимфы и других лимфоидных органов [23, 48]. Ее развитие в раннем постнатальном онтогенезе сопровождается взаимодействием и установлением связей между гемопоэтическими и стромальными клеточными популяциями многочисленных микроанатомических зон на территории органа. Лимфодеструктивное, лимфодегенеративное и лимфопролиферативное действие стресса способно изменить эти взаимоотношения и привести к продолжительному нарушению иммунного ответа [88, 75, 78]. Однако до сих пор не достигнуто полного понимания природы стромальных клеток селезенки, их происхождения, закономерностей распределения по субкомпартментам органа и механизмов влияния на лимфоидные клетки при стрессе; не определена природа фолликулярных дендритных клеток; не выяснены закономерности созревания и дифференцировки дендритных интердигитирующих клеток; существуют разногласия в понимании природы ретикулярных звездчатых клеток и т.д., что связало с недостатком исследований лимфоидной и стромальной архитектоники органов иммуногенеза, особенно в детском возрасте, и затрудняет понимание закономерностей становления эффективного иммунного ответа в раннем постнатальном онтогенезе [71,222,38,74,212].
Основным проявлением стресс-ассоциированных иммуносупрессивных сдвигов в иммунных органах, в частности в селезенке как наиболее компартментализованном среди них, является гипоцеллюлярность лимфоидной ткани, среди причин которой указывают нарушение трафика иммуноцитов (как притока, так и оттока), избыточная гибель, заторможенная пролиферация и нарушение сигнальных взаимодействий. При этом было неоднократно продемонстрировано, что по мере старения организма механизмы постстрессовой иммуномодуляции претерпевают определенную динамику, однако в раннем постнатальном онтогенезе она остается мало изученной [14,44, 151, 250,256].
Ввиду выше изложенного, мы провели изучение действия различных видов хронического стресса на иммунный статус организма экспериментальных животных на уровне периферического звена иммунной системы и его крупнейшего органа - селезенки - на ранних этапах постнатального онтогенеза с использованием методов количественной иммуногистохимии.
Целью настоящего исследования является выявление закономерностей адаптации селезенки при хроническом действии стресса в раннем постнатальном онтогенезе.
Для достижения данной цели были поставлены следующие задачи: 1 .Охарактеризовать возрастные иммуно-модуляционные сдвиги в селезенке в раннем постнатальном онтогенезе.
2.Изучить динамику клеточных популяций иммуноцитов различных компартментов селезенки при хроническом действии физических и психологических стрессоров.
3. Определить механизмы постстрессовых иммуномодуляционных сдвигов на уровне периферического звена иммунной системы растущего организма.
Материалы и методы.
Экспериментальное исследование проведено на неполовозрелых белых крысах породы Sprague Dawley в возрасте 14, 21 и 30 дней, что соответствует грудному, подсосному и преювенильному периоду. Воспроизведены модели хронического стресса с использованием преимущественно физического или психологического стрессоров, позволяющие провести сравнительное изучение характера иммуномодуляционых изменений в периферическом звене иммунной системы - селезенке - в их возрастном аспекте.
Изменения компартментализации селезенки, соотношения красной и белой пульпы, Т- и В-зон, стромально-паренхиматозных взаимоотношений изучены на продольных серийных срезах селезенки, окрашенныхгематоксилин-эозином, по Ван Гизону, по Браше и моноклональными антителами против CD3, CD4, CD8a, CD20, CD90, CD45RC, выявляющими различные фракции лимфоидных клеток; CD68, 0X62 и S100 для выявления нелимфоидных клеток, а также PCNA и каспазы-3 для характеристики уровня пролиферации и апоптоза спленоцитов.
Иммуногистохимически окрашенные срезы оценивались количественно с помощью цифрового анализа в программе ImageProPIus и с использованием программы Excel для статистической обработки данных с вычислением средней арифметической, среднеквадратического отклонения, средней ошибки средней арифметической, коэффициента корреляции, необходимого числа исследования; выявлением различий по критерию Стыодента.
Результаты исследования.
Проведенное исследование позволило получить данные об иммуномодуляционных сдвигах в крупнейшем периферическом органе иммуногенеза - селезенке - при хроническом действии разных стрессоров (физического и психоэмоционального) в различные возрастные периоды раннего постнатального онтогенеза. Применение количественного иммуногистохимического анализа позволило выявить опосредованные возрастом стресс-ассоциированные изменения иммуносупрессивного характера в различных компартментах селезенки и нарушение стромалыю-паренхиматозных соотношений в ней.
Научная новизна исследования.
Впервые с применением количественного иммуноцитохимического анализа выявлены иммуномодуляционные изменения в селезенке неполовозрелых крыс различных возрастных групп при хроническом стрессе, вызванном различными по природе стрессорами (физическими и психологическими) и определены их диапазон и амплитуда.
Теоретическое значение работы заключается в выяснении механизмов иммуносупрессивных сдвигов на уровне периферического звена иммуногенеза с учетом их возрастной специфичности в раннем постнатальном онтогенезе.
Практическая значимость работы заключается в выделении критериев оценки глубины стресс-ассоциированной иммуносупрессии на уровне крупнейшего периферического органа иммунной системы - селезенки - для использования их при разработке новых терапевтических стратегий профилактики и лечения иммунодефицитных состояний.
Внедрение в практику: полученные научные данные используются в учебном процессе на кафедре анатомии человека и кафедре иммунологии и аллергологии ВолГМУ.
Публикации и апробация материалов диссертации. Материалы диссертации докладывались на VII конгрессе международной ассоциации морфологов, Казань, 16 сентября 2004 года; на юбилейной конференции с международным участием «Современные проблемы науки и образования», посвященная 10-летию Российской академии естествознания, г. Москва, 5-6 декабря 2005 г.; на конференции «Фундаментальные и прикладные проблемы медицины и биологии», Дубай, ОАЭ, 13-20 октября 2006 г.; на конференции, посвященной 70-летию Тверской государственной медицинской академии и 100-летию со дня рождения основателя кафедры анатомии человека, проф. И.С.Кудрина, Тверь, сентябрь, 2006; на III конференции «Фундаментальные и прикладные исследования в медицине», 1-8 октября 2006 г., Лутраки (Греция), на заседании Волгоградского отделения Всероссийского научного общества анатомов, гистологов и эмбриологов, март, 2007.
Результаты исследования отражены в 6 научных публикациях, среди которых 2 - в журналах, рекомендованных ВАК РФ для опубликования материалов диссертаций. Положения, выносимые на защиту:
1. Постстрессовая динамика клеточных популяций иммуноцитов в различных компартментах селезенки растущего организма имеет возрастную зависимость и определяется видом действующего стрессора.
2. Стресс-ассоциированные иммуномодуляционные сдвиги в селезенке экспериментальных животных в раннем постнаталыюм онтогенезе имеют как гемопоэтическое, так и стромальное происхождение, в соотношениях, опосредованных онтогенетически.
Заключение Диссертация по теме "Гистология, цитология, клеточная биология", Нестерова, Алла Анатольевна
выводы.
1.Иммуномодуляционное действие хронического стресса на уровне периферического звена иммунной системы - селезенки - в раннем постнатальном онтогенезе у крыс проявляется изменениями иммуносупрессивного характера в Т- и В-клеточном компартментах белой пульпы, соотношение и выраженность которых связана с исходным возрастом животных и характером стрессорного воздействия.
2. При хроническом действии психологического стрессора снижение объема белой пульпы связано преимущественно с редукцией Т-клеточных компартментов вследствие уменьшения размеров ПАЛВ, снижения их клеточности, уменьшения удельной площади CD90+ и CD8+ лимфоцитов. Уменьшение объема белой пульпы при хроническом действии физического стрессора обусловлено дегенерацией как Т-клеточных, так и В-клеточных субкомпартментов: уменьшением размеров и числа лимфоидных узелков, редукцией ПАЛВ, сужением маргинальной зоны вокруг лимфоидных узелков и ПАЛВ, что наряду с уменьшением удельной площади CD90+H CD8+ клеток сопровождается сокращением популяций CD20+ и С045ЯС+клеток и является проявлением зависимости топографии стресс-ассоциированных сдвигов в иммуноархитектонике селезенки в раннем постнатальном онтогенезе от вида примененного стрессора
3.В раннем постнатальном онтогенезе хронический стресс оказывает влияние как на лимфоидные, так и стромальные элементы Т- и В-клеточных субкомпартментов белой пульпы селезенки в соотношениях и диапазоне, имеющих возрастную зависимость и соответствующих виду стресса. При этом, по данным иммуногистохимического имидж-анализа, ОХ-62+ дендритные клетки ПАЛВ оказываются, в целом, менее чувствительными к действию стресса, чем белок S100+ фолликулярные дендритные клетки лимфоидных узелков, а Т-лимфоциты ПАЛВ - менее зависимыми от стабилизирующего действия стромальных клеток, чем В-лимфоциты лимфоидных узелков.
4.Возрастное увеличение доли недавних тимусных иммигрантов коррелирует с нарастанием плотности дендритных клеток в Т-зонах, в то время как уменьшение числа дендритных клеток ПАЛВ при хроническом стрессе не обнаруживает значимой корреляции со снижением числа недавних тимусных иммигрантов (Thy 1.1+клеток), а также CDS+иммунореактивных клеток.
5.При хроническом психо-эмоциональном стрессе в исходном грудном возрасте преобладающим механизмом гипоплазии белой пульпы является уменьшение интенсивности трафика лимфоцитов из тимуса в Т-клеточные субкомпартменты, о чем свидетельствует достоверное снижение числа С090+клеток в ПАЛВ, в то время как в более старших возрастных группах -усиление апоптоза (наибольшее - в В-зонах) и торможение пролиферации (наибольшее - в Т-зонах) лимфоцитов.
6.Наибольшая степень иммуносупрессивных сдвигов в микроструктуре В-зон селезенки отмечается в более ранние периоды, в то время как Т-зон - на более поздних этапах развития, что свидетельствует о возрастной зависимости изменений иммуноархитектоники селезенки при хроническом стрессе в раннем постнатальном онтогенезе.
Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Нестерова, Алла Анатольевна, Волгоград
1. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия. Руководство.- М.: Медицина, 1990.-384с.
2. Акмаев И.Г. Нейроиммуноэндокринные взаимодействия: их роль в дисрегуляторной патологии // Патол. физиол. эксп. тер.- 2001.-N4.-C.3-10.
3. Акмаев И.Г. Нейроиммуноэндокринология: истоки и перспективы развития // Усп. физиол. наук.- 2003.- Т.34.- N4.- С.4-15.
4. Акмаев И.Г., Волкова О.В., Гриневич В.В., Рссненко А.Б. Эволюционные аспекты стрессорной реакции // Вестник Российской Академии медицинских наук. 2002. - N 6 . - С. 24-27.
5. Акмаев И. Г., Гриневич В. В. От нейроэндокринологии к нейроиммуно-эндокринологии // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. -2001.-Том 131.-N 1.-С.22-32.
6. Аминова Г.Г., Григоренко Д.Е., Волкова Л.В. Клеточный состав лимфоидной ткани структурных компонентов селезенки мышей при физических нагрузках // Бюлл. эксп. биол. мед.- 1994.- Т. 118.- №8.- С. 166168.
7. Бахмет А.А. Строение лимфоидных структур селезенки крыс при воздействии острого эмоционального стресса // Морфология.- 2004.-T.126.-N1.- С.55-58.
8. Бахшинян М.З., Азнауряп А. В. Изменения структуры и функции макрофагов селезенки в условиях злокачественного роста // Морфология.-2004. Т. 126.- N 5.- С.45-48.
9. Бородин Ю.И., Седова JI.A., Сслятицкая В.Г., Шорин Ю.П.
10. Сочетанная реакция лимфоидных органов и надпочечников на стресс у взрослых животных, испытавших воздействие холодом в раннем периоде постнатального онтогенеза.- Арх. анат., гистол. эмбриол.- 1989.- Т.96.-№1.- С.73-78.
11. П.Вихрук Т.И., Ткачук М.Г. Строение тимуса, селезенки и паховых лимфатических узлов белых крыс при иммунокоррекции в процессе адаптации к физическим нагрузкам // Арх. анат.- 1991.- Т. 100.- №6.- С.56-60.
12. Волкова Л.В. Морфофункциональные изменения в тимусе и селезенке при стрессовых воздействиях. Дис. д.м.н М., 1996 - 186с.
13. Воротникова Е.В. Особенности реакции лимфоидных органов крыс на острое стрессорное воздействие при гипокинезии // Косм. биол. и авиакосм, медицина.- 1984.- Т.18.-№5.- С. 50-54.
14. Гарунова К.А., А.мипова Г.Г. Изменения клеточного состава селезенки белых крыс под влиянием пресных ванн // Морфология.- 2004.- Т.125.-N2.- С.55-58.
15. Груздева О.Н., Чихман В.Н. Структура белой пульпы селезенки и показатели периферической крови у крыс в условиях повышенной мышечной деятельности // Морфология,- 1999.- Т.116.- N6.- С.65-68.
16. Журавлева Т.Б. Ягмуров О.Д., Огурцов Р.П. Функциональная морфология селезенки и лимфоидного аппарата при стрессе // Арх.пат.-1995.- T.57.-N1.-C.56-61.
17. Западнюк И.П., Западшок В.И., Захарпя Е.Ф. Лабораторные животные. 2-е издание.- Киев: «Вища школа», 1974.- 303 с.
18. Капитонова М.Ю., Кузнецов С.Л., Клаучек С.В., Мохд Исмаил З.И., Улла М., Федорова О.В. Особенности акцидентальной инволюциитимуса в растущем организме при воздействии различных видов стрессоров //Морфология.- 2006.- Т. 130.- N6.- С.56-61.
19. Кириллов Н.А., Смородченко А.Т. Гистохимическая характеристика структур лимфоидных органов крыс под действием стресса // Бюлл. эксп. биол. мед.- 1999.- Т. 127.- N2.- С.171-183.
20. Лаковников Е.А., Парфенов А.Ф. Цитологический состав паренхимы селезенки поросят 2- и 4-месячного возраста // Морфология,- 2005.-T.127.-N1.- С.41-42.
21. Лебединская О. В., Горская Ю. Ф., Шуклппа Е. Ю. и др. Анализ изменений количества стромальных клеток-предшественников в тимусе и селезенке животных различных возрастных групп // Морфология. -2005. — Т. 127.- N3.- С.41-44.
22. Орловская А.В., Богомолова II.II., Пнголкппа Е.Ю., Чернов Н.В. Судебно-медицинское значение морфометрии селезенки при наркомании и хронической алкогольной интоксикации // Суд. мед. эксперт.- 2004.-Т.47.- N3.- С.27-29.
23. Прасолова Л.А., Оськина И.Н., Шпхсвпч С.Г. Морфофункциональные характеристики селезенки у крыс разного поведения после воздействия рестрикционного стресса // Морфология.- 2004.- Т. 125.- N1.- С.59-63.
24. Родионова-Прочан О.А., Падсров Ю. М. Особенности процессов формообразования селезенки мелких грызунов в условиях техногенного воздействия // Морфология.- 2004.- Т. 126.- N4.- С. 105.
25. Родионова-Прочан О.А., Падсров Ю.М. Возрастные изменения гистологических показателей селезенки красной полевки в условиях техногенного воздействия // Морфология.- 2004.- Т.126.- N4.- С. 106.
26. Сапии М.Р. Состояние органов иммунной системы после воздействия интенсивных физических нагрузок и в период восстановления // Вестн. Росс.Акад.Мед.Наук.- 2001.- N12.- С.20-22.
27. Сапин М.Р., Ерофеева Л.М., Грнгоренко Д.Е., Федоренко Б.С.
28. Особенности реакции различных функциональных зон тимуса и лимфоидной ткани селезенки мышей на гамма-облучение // Бюлл. эксп. биол. мед.- 1998.- Т.125.- Т4.- С.469-473.
29. Сапин М.Р., Никитюк Д.Б. Иммунная система, стресс и иммунодефицит. М.: Джангар, 2000.- 184С.
30. Сапин М.Р., Этинген JI.E. Иммунная система человека. М., Медицина, 1996,225 с.
31. Смирнова Т.С., Ягмуров О.Д. Строение и функции селезенки // Морфология.- 1993.- Т. 104.- №5-6.- С.142-159.
32. Ткачук М.Г. Восстановительные процессы в тимусе и селезенке после прекращения воздействия физических нагрузок // Морфологические ведомости.-2004.- N1-2.-C.39-40.
33. Шаляпина В.Г., Бедров Я.А., Орднп Н.Э., Венцов А.В., Пивина С.Г. Характеристика основных параметров гормональной функции коры надпочечников и ее модификация в онтогенезе у крыс // Журн. эволюц. биохимии и физиологии.- 2001.- Т.37.- N2.- С.134-138.
34. Шаршембиев Ж.А. Лимфоидные структуры селезенки после введения полиоксидония //Морфология.- 2004.- Т.125.- N1.- С.64-66.
35. Ягмуров О.Д. Морфофункциональная характеристика иммунной системы человека при операционном стрессе // Архив патологии. 1999. - Т.61.-N6.- С. 10-16.
36. Ader R., Cohen N. Psychoneuroimmunology: conditioning and stress // Annu. Rev. Psychol.- 1993.- Vol.44.- P.53-85.
37. Aguas A.P., Esaguy N., Grande N., Castro A.P., Castelo Branco N.A. Effect low frequency noise exposure on BALB/c mice splenic lymphocytes // Aviat. Space Environ. Med.- 1999.- Vol.70.- N3.- Pt.2.- A128-131.
38. Anderson G., Hare K.J., Jcnkinson E.J. Positive selection of thymocytes: the long and winding road // Immunol Today.- 1999.- Vol.20.- N10.- P.463-468.
39. Anjucrc F., Martin P., Fcrrero I., Fraga M.L., del Hoyo G.M., Wright N., Ardavin C. Definition of dendritic cell subpopulations present in the spleen, Peyer's patches, lymph nodes, and skin of the mouse // Blood.- 1999.- Vol.93.-N2.- P.590-598.
40. Amsen D., Blander J.M., Lee G.R., Tanigaki K., Honjo Т., Flavell R.A.1.struction of distinct CD4 T helper cell fates by different notch ligands on antigen-presenting cells // Cell.- 2004.- Vol.117.- N4.- P.515-526.
41. Archana R., Namasivayam A. A comparative study of different crude extracts of Ocimum sanctum on noise stress // Phytother. Res.- 2002.- Vol.16.- N6.-P.579-580.
42. Atoji Y., Shirogane D., ct al. S-100-immunoreactive giant macrophages in lymphoid tissues of the guinea pig // Acta Anat (Basel).- 1991.- Vol.140.- N1.-P. 17-25.
43. Aviles H., Johnson M.T., Monroy F.P. Effects of cold stress on spleen cell proliferation and cytokine production during chronic Toxoplasma gondii infection //Neuroimmunomodulation.- 2004.- Vol.11.- N2.- P.93-102
44. Avitsur R., Kavelaars A., Hcijncn C., Sheridan J.F. Social stress and the regulation of tumor necrosis factor-alpha secretion // Brain Behav. Immun.-2005.- Vol. 19.- N4.P.311-317.
45. Balogh P., Aydar Y., Tew J.G., Szakal A.K. Appearance and phenotype of murine follicular dendritic cells expressing VCAM-1 // Anat. Rec.- 2002.- Vol. 268.- P.160-168.
46. Balogh P., Horvath G., Szakal A.K. Immunoarchitecture of distinct reticular fibroblastic domains in the white pulp of mouse spleen // J. Histochem. Cytochem.- 2004.- Vol.52.-N10.- P. 1287-1298.
47. Bartolomucci A., Palanza P, Gaspani L., Limiroli E., Panerai A.E., Cercsini G., Poli M.D., Parmigiani S. Social status in mice: behavioral, endocrine and immune changes are context dependent // Physiol. Behav.-2001.- Vol.73.- N3.- P.401-410.
48. Bartolomucci A., Sacerdote P., Panerai A.E., Pederzani Т., Palanza P., Parmigiani S. Chronic psychosocial stress-induced down-regulation of immunity depends upon individual factors // J. Neuroimmunol.- 2003,-Vol.141.- N1-2.- P.58-64
49. Bertrand J.Y., Desanti G.E., Lo-Man R., Lcclcrc C., Cumano A., Golub R.
50. Fetal spleen stroma drives macrophage commitment // Development.- 2006.-Vol.133.-N18.- P.3619-3628.
51. Berzins S.P. Boyd R.L., Miller J.F.A.P. The role of the thymus and recent thymic migrants in the maintenance of the adult peripheral lymphocyte pool // J. Exp. Med.-1998.- Vol.187.- N1 l.-P.l839-1848.
52. Berzins S.P., Godfrey D.I., Miller J.F., Boyd R.L. A central role for thymic emigrants in peripheral T cell homeostasis // Proc. Natl. Acad. Sci. U S A.-1999.- Vol.96.- N17.- P.9787-9791.
53. Bhatnagar S., Dallman M. Neuroanatomical basis for facilitation of hypothalamic-pituitary-adrenal responses to a novel stressor after chronic stress //Neuroscience.- 1998.- Vol.84.- N4.- P. 1025-1039.
54. Billian G., Mondierc P., Bcrard M., Bella C., Dcfrance T. Antigen receptor-induced apoptosis of human germinal center В cells is targeted to a centrocytic subset // Eur. J. Immunol.- 1997.- Vol.27.- N2.- P.405-414.
55. Brenan M., Puklavec M. The MRC OX-62 antigen: a useful marker in the purification of rat veiled cells with the biochemical properties of an integrin // J. Exp. Med.- 1992.- Vol.175.- N6.- P.1457-1465.
56. Bunco C., Bell E. CD45RC Isoforms Define Two Types of CD4 Memory T Cells, One of which Depends on Persisting Antigen // J. Exp. Med.- 1997.- Vol. 185.-N4.- P.767-776.
57. Burton G.F., Conrad D.H., Szakal A.K., Tew J.G. Follicular dendritic cells and В cell costimulation // J.Immunol.- 1993.- Vol.150.- P.31-38.
58. Burton G.F., Kcclc B.F., Estcs J.D., Thackcr T.C., Gartner S. Follicular dendritic cell contributions to HIV pathogenesis // Semin. Immunol.- 2002.-Vol.14.- N4.- P.275-284.
59. Butch A. W., Chung G.-H., Hoffman J. W., Nahm M. H. Cytokine expression by germinal center cells //J. Immunol.- 1993.- Vol. 150.- P.39.
60. Carbone A., Poletti A., ct al. S-100 protein detection in "follicular macrophages" of mouse lymphoid organs by ABC immunoperoxidase method // Int. J. Biol. Markers.- 1988.- Vol.3.- N1.- P.36-40.
61. Choe J., Li L., Zhang X., Gregory C.I)., Choi Y.S. Distinct role of follicular dendritic cells and T cells in the proliferation, differentiation, and apoptosis of a centroblast cell line, L3055 // J. Immunol.- 2000.- Vol.164.- N1.- P.56-63.
62. Cocchia D., Tiberio G., ct al. S-100 protein in "follicular dendritic" cells or rat lymphoid organs. An immunochemical and immunocytochemical study // Cell Tissue Res.- 1983.- Vol.230.- N1.- P.95-103.
63. Cohen M.J., Shankar R., Stevenson J., Fernandez R, Gamclli R.L., Jones S.B. Bone marrow norepinephrine mediates development of functionally different macrophages after thermal injury and sepsis // Ann. Surg.- 2004.-Vol.240.-Nl.- P. 132-141.
64. Dhabhar F.S., McEwen B.S. Acute stress enhances while chronic stress suppresses cell-mediated immunity in vivo: a potential role for leukocyte trafficking//BrainBehav. Immun. 1997.- Vol.11.- N4.- P.286-306.
65. Dhabhar F.S., McEwen B.S. Enhancing versus suppressive effects of stress hormones on skin immune function // Proc. Natl. Acad.Sci. U S A.- 1999.-Vol.96.- N3.- 1059-1064.
66. Dominguez-Gerpe L., Rcy-Mcmlez M. Alterations induced by chronic stress in lymphocyte subsets of blood and primary and secondary immune organs of mice // BMC Immunol.- 2001.- Vol.2.- N1.- C.7-17.
67. Dustin M.L., Colnian D.R. Neural and immunological synaptic relations // Science.- 2002.- Vol.298.- P.785-789.
68. El Fouhil A.F., Turknll R.M. Electron microscopic study on the effect of alternate-day hydrocortisone therapy on lymphocyte populations in rat spleen and lymph nodes // Toxicol. Pathol.- 1995.- Vol.23.- N1.- P.72-82
69. Ellyard J.I., Avery D.T., Mackay C.R., Tangyc S.G. Contribution of stromal cells to the migration, function and retention of plasma cells in human spleen: potential roles of CXCL12, IL-6 and CD54 // Eur. J. Immunol.- 2005.-Vol.35.- N3.- P.699-708.
70. Engler H., Stcfanski V. Social stress and T cell maturation in male rats: transient and persistent alterations in thymic function // Psychoneuroendocrinology.- 2003.- Vol.28.- N8.- P.951-969.
71. Finkclman D., Morris S.C., Orckhova Т., Mori M., Donaldson D., Reiner S.L., Reilly N.L., Scliopf L., Urban Jr. J.F. Stat6 regulation of in vivo IL-4 responses// J. Immunol.-2000.- Vol.164.-N5.-P. 2303-2310.
72. Fleshner M., Nguyen K.T., Cotter C.S., Watkins L.R., Maier S.F. Acute stressor exposure both suppresses acquired immunity and potentiates innate immunity//Am. J. Physiol.- 1998.- Vol.275.-N3.- Pt.-2.- R.870-878.
73. Fogg D.K., Sibon C., Milcd C., Jung S., Aucouturier P., Littman D.R., Cumano A., Geissmann F. A clonogenic bone marrow progenitor specific for macrophages and dendritic cells // Science.- 2006.- Vol.311.- N5757/- P.83-87.
74. Franceschi C., Valcnsin S. Fagnoni F., Barbi C., Bonafe M. Biomarkers of immunosenescence within an evolutionary perspective: the challenge of heterogeneity and the role of antigenic load // Exp. Gerontol.- 1999. Vol.34.-N8.- P.911-921.
75. Franchimont D. Overview of the actions of glucocorticoids on the immune response: a good model to characterize new pathways of immunosuppression for new treatment strategies // Ann. N. Y. Acad. Sci.- 2004,- Vol.1024.- P. 124137.
76. Freidin E, Mustaca AE. Frustration and sexual behavior in male rats // Learn. Behav.- 2004.- Vol.32.- N3.- P.311-320
77. Friedman E.M., Irwin M.R. A role for CRH and the sympathetic nervous system in stress-induced immunosuppression // Ann.N.Y.Acad.Sci.- 1995.-Vol.771.- P.396-418.
78. Fu Y.X., Chaplin D.D. Development and maturation of secondary lymphoid tissues// Annu. Rev. Immunol.- 1999.- Vol.17.- P.399-433.
79. Fu Y.-X., Huang G., Wang Y., Chaplin D.D. В lymphocytes induce the formation of follicular dendritic cell clusters in a lymphotoxin n-dependent fashion// J. Exp. Med.- 1998.- Vol.187.-P.1009.
80. Gabor M.J., Godfrey D.I., Scollay R. Recent thymic emigrants are distinct from most medullary thymocytes // Eur. J. Immunol.- 1997.- Vol.27.- N8.-P.2010-2015.
81. Gabor M.J., Scollay R., Godfrey D.I. Thymic T cell export is not influenced by the peripheral T cell pool // Eur. J. Immunol.- 1997.- Vol.27.- N 11.-P.2986-2993.
82. Gagliardi M.C., Sallusto F., Marinaro M., Langenkamp A., Lanzavecchia A., De Magistris M.T. Cholera toxin induces maturation of human dendritic cells and licences them for Th2 priming // Eur. J. Immunol.- 2000.- Vol. 30.-N8.- P. 2394-2403.
83. Garcia A., Marti O., Valles A., Dal-Zotto S., Armario A. Recovery of the hypothalamic-pituitary-adrenal response to stress. Effect of stress intensity, stress duration and previous stress exposure // Neuroendocrinology.- 2000.-Vol.72.- N2.- P.l 14-125.
84. Gartner L.P., Hiatt J.L. Color Textbook of Histology. 2nd Edition. Philadelphia: WB Saunders Company, 2001.-577 P.
85. Georas S.N. Inhaled glucocorticoids, lymphocytes, and dendritic cells in asthma and obstructive lung diseases // Proc. Am. Thorac. Soc.- 2004.- Vol.l.-N3.- P.215-221.
86. George A.J.T., Ritter M.A. Thymic involution with ageing: obsolescence or good housekeeping? // Immunology today.- 1996.- Vol.6.- N17.- P.267-272.
87. Gibbs F.E., Barraclough R., et al. Immunocytochemical distribution of the calcium-binding protein p9Ka in normal rat tissues: variation in the cellular location in different tissues // J. Histochem. Cytochem.- 1995.-Vol.43.- N2.-P.169-180.
88. Gonzalez M., Mackay F., Browning J. L., Kosco-Vilbois M. H., Noelle R.
89. J. The sequential role of lymphotoxin and В cells in the development of splenic follicles//J. Exp. Med.- 1998.- Vol.187.- P.997.
90. Gretz J.E., Kaldjian E.P., Anderson A.O., Shaw S. Sophisticated strategies for information encounter in the lymph node: the reticular network as a conduit of soluble information and a highway for cell traffic // J. Immunol.-1996.- Vol.157.-P.495-499.
91. Groer M.W., Hill J., Wilkinson J.E., Stuart A. Effects of separation and separation with supplemental stroking in BALb/c infant mice. Biol. Res. Nurs.// 2002.- Vol.3.- N3.- P. 119-131.
92. Haimoto H., Hosoda S., Kato K. Differential distribution of immunoreactive SlOO-alpha and SlOO-beta proteins in normal nonnervous human tissues//Lab. Invest.- 1987.- Vol.57.- N5.- P.489-498.
93. Hargreaves M., Bell E.B. Identical expression of CD45R isoforms by CD45RC+ 'revertant' memory and CD45RC+ naive CD4 T cells // Immunology.- 1997.- Vol.91.- N3.- P.323-330
94. Haynes B.F., Markert M.L., Sempowski G.D., Patel D.D., Hale L.P. The role of the thymus in immune reconstitution in aging, bone marrow transplantation and HIV-1 infection // Ann. Rev. Immunol.- 2000.- Vol. 18.-P.529-560.
95. Hazlewood M., Kumararatne D.S. The spleen? Who needs it anyway // Clin. Exp. Immunol. 1992.- Vol.89.- N3.- P.327-329.
96. Heinemann D.E., Peters J.H. Follicular dendritic-like cells derived from human monocytes // BMC Immunol.- 2005.- N6.- P.23.
97. Hosea H.J., Rector E.S., Taylor C.G. Zinc-deficient rats have fewer recent thymic emigrant (CD90+) T lymphocytes in spleen and blood // J. Nutr.- 2003.-Vol.133.- N12.- P.4239-424.
98. Hosseinzadeh H., Goldschneider I. Recent thymic emigrants in the rat express a unique antigenic phenotype and undergo post-thymic maturation in peripheral lymphoid tissues//J. Immunol.- 1993.- Vol.150.-N5.p. 1670-1679.
99. Hur D.Y., Kim D.J., Kim S., Kim Y.I., Clio D., Lee D.S., Hwang Y., Bae K., Chang K.Y., Lcc W.J. Role of follicular dendritic cells in the apoptosis of germinal center В cells // Immunol. Lett.- 2000.- Vol.72.- N2.-107-111.
100. Hylkema M.N., van der Deen M., Pater J.M., Kanipinga J., Nieuwenhuis P., Groen H. Single expression of CD45RC and RT6 in correlation with T-helper 1 and T-helper 2 cytokine patterns in the rat // Cell Immunol. 2000.-Vol.199.-N2.- P.89-96.
101. Igarashi, Medina K.L., Yokota Т., Rossi M.I., Sakaguchi N., Comp P.C., Kincade P.W. Early lymphoid progenitors in mouse and man are highly sensitive to glucocorticoids // Int. Immunol.- 2005.- Vol.17.- N5.- P.501-511.
102. Iwakabe K., Shimada M., Olita A., Yahata Т., Ohmi Y., Habu S., Nishimura T. The restraint stress drives a shift in Thl/Th2 balance toward Th2-dominant immunity in mice // Immunol. Lett.- 1998.- Vol.62.- N1.- 39-43.
103. Iwanaga Т., Fujita Т., ct al. S-100 protein-immunoreactive cells in the lymph node and spleen of the rat // Arch. Histol. Jpn.- 1982.-Vol.45.- N4.-P.393-397.
104. Jain S., Bruot B.C., Stevenson J.R. Cold swim stress leads to enhanced splenocyte responsiveness to concanavalin A, decreased serum testosterone, and increased serum corticosterone, glucose, and protein // Life Sci.-1996.-Vol.59.- N3.- P.209-218
105. Johnson S.A., Rozzo S.J., Cambier J.C. Aging-dependent exclusion of antigen-inexperienced cells from the peripheral В cell repertoire // J. Immunol.-2002.- Vol.168.- N10.- P.5014-5023
106. Justice N.J., Jan Y.N. Variations on the Notch pathway in neural development // Curr. Opin. Neurobiol.- 2002.- Vol. 12.- N1.- P. 64-70.
107. Kampinga J., Groen H., Klattcr F.A., Pater J.M., van Petersen A.S., Roser В., Nieuwenhuis P., Aspinall R. Post-thymic T-cell development in the rat //Thymus.- 1997.- Vol.24.- N3.- P. 173-200.
108. Kaneko Т., Okiji Т., Zhao L., Esgeurra R., Suda H. Heterogeneity of dendritic cells in rat apical periodontitis // Cell Tissue Res.- 2006
109. Kapasi Z.F., Burton G.F., Sliultz L.D., Tew J.G., Szakal A.K. Induction of functional follicular dendritic cell development in severe combined immunodeficiency mice. Influence of В and T cells // J. Immunol.- 1993.- Vol. 150.- N7.- P.2648-2658.
110. Kapasi Z.F., Qin D., Kerr W.G., Kosco-Vilbois M.H., Shultz L.D., Tew J.G., Szakal A.K. Follicular dendritic cell (FDC) precursors in primary lymphoid tissues // J. Immunol.- 1998.- Vol. 160.- N3.- P. 1078-1084.
111. Kapsenberg M.L. Dendritic-cell control of pathogen-driven T-cell polarization // Nat. Rev. Immunol.-2003.- Vol.3.- N12.- P. 984-993.
112. Karlsson M.C., Guinamard R., Holland S., Sankala M., Steinman R.M., Ravetch J.V. Macrophages control the retention and trafficking of В lymphocytes in the splenic marginal zone // J. Exp. Med.- 2003.- Vol. 198.-N2.- P.333-340.
113. Karsunky H., Merad M., Mcnde I., Manz M.G., Engleman E.G., Weissman I.L.Developmental origin of interferon-alpha-producing dendritic cells from hematopoietic precursors// Exp. Hematol.- 2005.- Vol.33.- N2.-P.173-181.
114. Kelly K. A., ScoIIay R. Seeding of neonatal lymph nodes by T cells and identification of a novel population of CD3"CD4+ cells // Eur. J. Immunol.-1992.- Vol. 22.- N2.- P.329-334.
115. Kelley L.C., Mahaffey E.A., Bounous D.I., Antczak D.F., Brooks R.L. Jr. Detection of equine and bovine T- and B-lymphocytes in formalin-fixed paraffin-embedded tissues // Vet. Immunol. Immunopathol.- 1997.- Vol.57.-N3-4.- P. 187-200.
116. Kelsoe G. The germinal center reaction // Immunol. Today.- 1995.- Vol. 16.-N7.- P.324-326.
117. Kitamura H., Konno A., Moriniatsu M., Jung B.D., Kiniura K., Saito M.1.mobilization stress increases hepatic IL-6 expression in mice // Biochem. Biophys. Res. Commun.- 1997.- Vol.238.- N3.- P.707-711.
118. Koh K.B., Choe E., Song J.E., Lee E.H. Effect of coping on endocrinoimmune functions in different stress situations // Psychiatry Res.-2006.- Vol.143.- N2-3.- P.223-234.
119. Kosco M. H., Pflugfelder Е., Gray В. Follicular dendritic cell-dependent adhesion and proliferation of В cells in vitro // J. Immunol.- 1992.- Vol.148.-P.2331.
120. Kraal G., Mebius R. New insights into the cell biology of the marginal zone of the spleen // Int. Rev. Cytol.- 2006.- Vol.250.- P. 175-215.
121. Kraal G., Schornagel K., Strcctcr P.R., Holzniann В., Butcher E.C. Expression of the mucosal vascular addressin, MAdCAM-1, on sinus-lining cells in the spleen//Am. J. Pathol.- 1995.- Vol.147.- P.763-771.
122. Kronin V., Winkel K., Suss G., Kelso A., Heath W., Kirberg J, von Boehmer H., Shortnian K. A subclass of dendritic cells regulates the response of naive CD8 T cells by limiting their IL-2 production // J. Immunol.- 1996.-Vol.157.- N9.- P.3819-3827.
123. Krummen M.B., Varga G., Stcincrt M., Stuctz A., Lugcr T.A., Grabbe S. Effect of pimecrolimus vs. corticosteroids on murine bone marrow-derived dendritic cell differentiation, maturation and function // Exp. Dermatol.- 2006.-Vol.15.-Nl.- P.43-50.
124. Li L., Choi Y.S. Follicular dendritic cell-signaling molecules required for proliferation and differentiation of GC-B cells // Semin. Immunol.- 2002.-Vol.14.-N4.- P.259-266.
125. Li L., Zhang X., Kovacic S., Long A.J., Bourque K., Wood C.R., Choi Y.S. Identification of a human follicular dendritic cell molecule that stimulates germinal center В cell growth // J. Exp. Med.- 2000,- Vol.191.- N6.- P. 10771084.
126. Liu Y.-J., Arpin C., de Boutcillcr O., Gurct C., Banchcrcau J., Martinez-Valdez H Lebecque S. Sequential triggering of apoptosis, somatic mutation and isotype switch during germinal ccntcr development // Semin. Immunol.1996.-Vol.8.- P.169.
127. Luettig В., Sponholz A., Hccrwagcn C., Bode U., Wcstermann J. Recent thymic emigrants (CD4+) continuously migrate through lymphoid organs: within the tissue they alter surface molecule expression // Scand. J. Immunol.2001.- Vol.53.- N6.- P.563-571.
128. Mackay F., Majeau G.R., Lawton P., Ilochinan P.S., Browning J.L. Lymphotoxin but not tumor necrosis factor functions to maintain splenic architecture and humoral responsiveness in adult mice // Eur. J. Immunol.1997.- Vol.27.- P.2033-2042.
129. MacLennan I. C. Germinal centers // Annu. Rev. Immunol.- 1994.- Vol. 12.- P.l 17-139.
130. MacLennan I.C., Toellner K.M., Cunningham A.F., Serre K., Sze D.M., Zuniga E., Cook M.C., et al. Extrafollicular antibody responses // Immunol. Rev.- Vol.2003.- Vol.194.- P.8-18.
131. Maillard I., Adler S.H., Pear W.S. Notch and the immune system // Immunity.- 2003.- Vol.19.- N6.- P.781-791.
132. Martin F., Kearney J.F. Marginal-zone В cells // Nature Rev. Immunol.2002.- Vol.2.- N5.- P.323-335.
133. Makarcnkova V.P., Bansal V., Matta B.M., Perez L.A., Ochoa J.B.
134. CDllb+/Gr-l+ myeloid suppressor cells cause T cell dysfunction after traumatic stress //J. Immunol.- 2006.- Vol.176.- N4.- P.2085-2094.
135. Makinodan T. Studies on the influence of age on immune response to understand the biology of immunosenescence // Exp. Gerontol.- 1998.- Vol.33.-N1-2.- P.27-38.
136. Martinez del Hoyo G., Martin P., Arias C.F., Marin A.R., Ardavin C.
137. CD8alpha+ dendritic cells originate from the CD8alpha- dendritic cell subset by a maturation process involving CD8alpha, DEC-205, and CD24 up-regulation //Blood.- 2002.- Vol.99.- N3.- P.999-1004.
138. Matasic R., Dietz A.B., Vuk-Pavlovic S. Dexamethasone inhibits dendritic cell maturation by redirecting differentiation of a subset of cells // J. Leukoc. Biol.- 1999.- Vol.66.- N6.- P.909-914.
139. Mazur A., Booth A. Testosterone and dominance in men // Behav. Brain Sci.- 1998.- Vol.21.- N3.- P.355-397.
140. McEwen B.S. The neurobiology of stress: from serendipity to clinical relevance // Brain Res.- 2000.- Vol.886.- N1-2.- P. 172-189.
141. McFarland R.D., Douck D.C., Koup R.A., Picker L.J. Identification of a human recent thymic emigrant phenotype // P.N.A.S.- 2000.- Vol.97.- N8.-P.4215-4220.
142. McLellan A.D., Kampgcn E. Functions of myeloid and lymphoid dendritic cells // Immunol. Lett. 2000.- Vol.72.- N2.- P.101-105.
143. McNagny K.M., Bucy R.P., Cooper M.D. Reticular cells in peripheral lymphoid tissues express the phosphatidylinositol-linked BP-3 antigen // Eur. J. Immunol.- 1991.- Vol.21.- P.509-515.
144. Mebius R.E. Organogenesis of lymphoid tissues // Nature Rev. Immunol.-2003.-Vol.4.- P.292-303.
145. Mebius R.E., Nolte M.A., Kraal G. Development and function of the splenic marginal zone // Crit. Rev. Immunol.- 2004,- Vol.24.- N6.-449-464.
146. Morishima N., Ovvaki Т., Asakawa M., Kamiya S., Mizuguchi J., Yoshinioto T. Augmentation of effector CD8+ T cell generation with enhanced granzyme В expression by IL-27 // J. Immunol.- 2005.- Vol.175.- N3.- P. 16861693.
147. Moser M., Murphy K.M. Dendritic cell regulation of TH1-TH2 development//Nat. Immunol.- 2000.- Vol.1.- N3.- P.199-205.
148. Muraille E., Giannino R., Guirnalda P., Lcincr I., Jung S., Panier E.G., Lauvau G. Distinct in vivo dendritic cell activation by live versus killed Listeria monocytogenes // Eur.J.Immunol.- 2005,- Vol.35.- N5.- P.1463-1471.
149. Murctto P. Immunohistochemical study of tonsils from newborn infants with emphasis on follicular dendritic reticulum cells // Eur. J. Histochem.-1998.-Vol.42.- N3.- P.l 89-195.
150. Murphy K.M. T lymphocyte differentiation in the periphery // Curr. Opin. Immunol.- 1998.- Vol. 10.- N2.- P. 226-232.
151. Murphy K.M., Reiner, S.L. The lineage decisions of helper T cells // Nat. Rev. Immunol.- 2002.- Vol.2.- N12.- P. 933-944.
152. Naik S.H., Metcalf D., van Nicmvcnhuijzc A., Wicks I., Wu L., O'KeefTe M., Shortman K. Intrasplenic steady-state dcndritic cell precursors that are distinct from monocytes//Nat Immunol.- 2006.- Vol.7.- N6.- P.663-671.
153. Ncsic D., Vuknianovic S. 1998. MI 1С class I is required for peripheral accumulation of CD8+ thymic emigrants // J. Immunol.- 1998.- Vol.160.- N8.-P.3705-3712.
154. Nolte M.A., Arens R., Kraus M., van Ocrs M.H., Kraal G., van Lier R.A., Mebius R.E. В cells are crucial for both development and maintenance of the splenic marginal zone // J. Immunol.- 2004.- Vol.172.- N6.- P.3620-3627.
155. Nolte M.A., Hoen E.N., van Stijn A., Kraal G., Mebius R.E. Isolation of the intact white pulp. Quantitative and qualitative analysis of the cellular composition of the splenic compartments // Eur. J. Immunol.- 2000.- Vol.30.-N2.- P.626-634.
156. Nunez M.J., Balboa J., Rodrigo E., Brenlla J., Gonzalez-Peteiro M., Freirc-Garabal M. Effects of fluoxetine on cellular immune response in stressed mice //Neurosci. Lett.- 2006.- Vol.396.- N3.- P.247-251.
157. Oarada M., Gonoi Т., Tsuzuki Т., Iguraslu M., Hirasaka K., Nikawa Т., Onishi Y., et al. Effect of dietary oils on lymphocyte immunological activity in psychologically stressed mice // Biosci. Biotechnol. Biochem. -2007.- Vol.71,-N1.- P. 174-182.
158. Obminska-Mrukowicz В., Szczypka M. Influences of DTC and zinc supplementation on the cellular response restoration in restrained mice // J. Vet. Sci.- 2005.- Vol.6.- N1.- P.25-32.
159. Okazaki S.I., Yaniakawa M., Maeda K., Ohta N., Aoyagi M. Expression of glucocorticoid receptors in non-neoplastic lymphoid follicles and В cell type malignant lymphomas // J. Clin. Pathol.- 2006.- Vol.59.- N4.- P.410-416.
160. Old J.M., Deane E.M. The detection of mature T- and B-cells during development of the lymphoid tissues of the tammar wallaby (Macropus eugenii) //J. Anat.- 2003.- Vol.203.- N1.- P.l 23-131.
161. Ortega E., Garcia J.J., Saez M.C., De la Fuentc M. Changes with aging in the modulation of macrophages by norepinephrine // Mech. Ageing Dev.-2000.- Vol. 118.- N3.- P. 103-114.
162. Palermo-Neto J., de Oliveira Mnssoco C., Robespierre de Souza W. Effects of physical and psychological stressors on behavior, macrophage activity, and Ehrlich tumor growth // Brain Behav. Immun.- 2003.- Vol. 17.-N1.- P.43-54.
163. Pijlman F.T., van Ree J.M. Physical but not emotional stress induces a delay in behavioural coping responses in rats // Behav. Brain Res.- 2002,-Vol.136.- N2.- P.365-373
164. Pijlman F.T., Wolterink G., van Ree J.M. Cueing unavoidable physical but not emotional stress increases long-term behavioural effects in rats // Behav. Brain Res.- 2002.- Vol.134.- N1-2.- P.393-401.
165. Polak J.M. Introduction to immunohistochemistry. 3rd edition. London, Bios Scientific Publishers, 2003.
166. Poulin J.F., Viswanathan M.N., Harris J.M. Konianduri K.V., Wieder E., Ringuette N., Jenkins M., McCune J.M., Sckaly R.P. Direct Evidence for Thymic Function in Adult Humans // J. Exp. Med.- 1999.- Vol.190.- N4.-P.479-486.
167. Prelog M. Aging of the immune system: a risk factor for autoimmunity? // Autoimmun. Rev.- 2006.- Vol.5.- N2.- P. 136-139.
168. Quadrilatero J., Boudrcau J., Hoffman-Goetz L. Lymphocyte distribution in mouse submandibular lymph nodes in response to acute treadmill exercise // Can. J. Physiol. Pharmacol.- 2003.- Vol.81.- N10.- P.972-978.
169. Radahmadi M., Shadan F., Karimian S.M., Sadr S.S., Nasimi A. Effects of stress on exacerbation of diabetes mellitus, serum glucose and Cortisol levels and body weight in rats // Pathophysiology.- 2006 Vol.13.- N1.- P.51-55.
170. Radulovic M., Wcbcr C., Spiess J. The effect of acute immobilization stress on the abundance of corticotropin-releasing factor receptor in lymphoid organs // J. Neuroimmunol.- 2000.- Vol.103.- N2.- P.153-164.
171. Robinson S.P., Patterson S., English N., Davics D., Knight S.C., Reid
172. C.D. Human peripheral blood contains two distinct lineages of dendritic cells // Eur. J Immunol.- 1999.- Vol.29.- P.2769-2778.
173. Rowden G., Boudrcau S., Higlcy II. Langerhans cells and extra-epidermal dendritic cells. An investigation in laboratory animals and man with immunomorphological methods // Scand. J. Immunol.- 1985.- Vol.21.- N5.-P.471-478.
174. Rozkova D., Horvath R., Bartunkova J., Spisck R. Glucocorticoids and their effect on dendritic cell function // Cas. Lek. Cesk.- 2005.- Vol.144.- N12.-P.825-831.
175. Rozkova D., Horvath R., Bartunkova J., Spisck R. Glucocorticoids severely impair differentiation and antigen presenting function of dendritic cellsdespite upregulation of Toll-like receptors // Clin. Immunol.- 2006.-Vol.120.-N3.- P.260-271.
176. Ruedl C., Koebcl P., Bachninnii M., IIcss M., Karjalainen K. Anatomical origin of dendritic cells determines their life span in peripheral lymph nodes // J. Immunol.- 2000.- Vol.165.- N9.- P.4910-4916.
177. Sacedon R., Vicente A., Varas A., Jimenez E., Zapata A.G. Early differentiation of thymic dendritic cells in the absence of glucocorticoids // J. Neuroimmunol.- 1999.- Vol.94.- N1-2.- P.103-108.
178. Salomon В., Cohen J.L., Masurier C., Klatzmann D. Three populations of mouse lymph node dendritic cells with different origins and dynamics // J. Immunol.- 1998.- Vol.160.-N2.- P.708-717.
179. Satoh E., Edamatsu IL, Omata Y. Acute restraint stress enhances calcium mobilization and proliferative response in splenic lymphocytes from mice // Stress.- 2006.- Vol.9.- N4.- P.223-230.
180. Satoh Т., Takeda R., Oikawa H., Satodate R. Immunohistochemical and structural characteristics of the reticular framework of the white pulp and marginal zone in the human spleen // Anat. Rec.- 1997.- Vol.249.- N4.- P.486-494.
181. Selye H. Forty years of stress research: principal remaining problems and misconceptions// Can. Med. Assoc. J.- 1976.-Vol.115.-N1.-P.53-56.
182. Sheridan J.F., Dobbs C., Jung J., Cliu X., Konstantinos A., Padgett D., Glaser R. Stress-induced neuroendocrine modulation of viral pathogenesis and immunity//Ann. N. Y. Acad. Sci.- 1998.- Vol. 840.- P.803-808.
183. Shiniizu Т., Kawamura Т., Miyaji С., Oya II., Bannai M., Yamamoto S., Weerasinghe A., Haider R.C., Watanabe II., Hatakcyama, K., Abo T.
184. Resistance of extrathymic T cells to stress and the role of endogenous glucocorticoids in stress associated immunosuppression // Scand. J. Immunol.-2000.- Vol.51.- N3.- P.285-292.
185. Sim B.C., Aftalii N., Rcilly C., Bogen В., Schwartz R.H., Gascoigne N.R., Lo D. Thymic skewing of the CD4/CD8 ratio maps with the T-cell receptor alpha-chain locus // Curr. Biol.- 1998.- Vol.8.- N12.- P.701-704
186. Sims G.P., Ettingcr R.f Sliirota Y., Yarboro С.11., Illci G.G., Lipsky P.E. Identification and characterization of circulating human transitional В cells // Blood.- 2005.- Vol.105.- N11.- P.4390-4398.
187. Skibinski G., Skibinska A., Stewart G.D., James K. Enhancement of terminal В lymphocyte differentiation in vitro by fibroblast-like stromal cells from human spleen // Eur. J. Immunol.- 1998.- Vol.28.- P.3940-3948.
188. Stanislawska J., Intercwicz В., Maksymowicz M., Moscicka M., Olszewski W.L. The response of spleen dendritic cell-enriched population to bacterial and allogeneic antigens // Ann. Transplant.- 2005.- Vol.10.- W.P.I 7-23.
189. Steiniger В., Bartli P., Hcllinger A. The perifollicular and marginal zones of the human splenic white pulp: do fibroblasts guide lymphocyte immigration? //Am. J. Pathol.- 2001.-Vol.159.-P.501-512.
190. Stefanski V. Social stress in laboratory rats: hormonal responses and immune cell distribution .// Psychoneuroendocrinology.- 2000.- Vol.25.- N4.-P.389-406
191. Stefanski V., Pescltcl A., Rcbcr S. Social stress affects migration of blood T cells into lymphoid organs //J. Neuroimmunol.- 2003.- Vol.138.- N1-2.- P.17
192. Sternberg S.S. Histology for Pathologists. Raven Press: N.Y., 1997.- 2nd Edition.- 726 P.
193. Sugimura M., Ishimaru II., et al. S-100 protein alpha subunit immunoreactivity of follicular dendritic cells in germinal centers of canine and caprine lymph nodes // Nippon Juigaku Zasshi.- 1987.- Vol.49.- N6.- P. 11831185.
194. Sun Y., Blink S.E., Chen J.I I., Fu Y.X. Regulation of follicular dendritic cell networks by activated T cells: the role of CD137 signaling // J. Immunol.-2005.-Vol.175.- N2.- P.884-890.
195. Svcnsson M., Maroof A., Ato M., Kayc P.M. Stromal cells direct local differentiation of regulatory dendritic cells // Immunity.- 2004.- Vol.21.- N6.-P.805-816.
196. Takai K., Takahara S., Isoyania N., Tsuchida M., Matsumura M., Kishi Y., Uchiyama K., Naito K. Effects of FTY720 on rat lymphoid organs // Transplant. Proc.- 2004.- Vol.36.- N8.- P.2453-2456.
197. Takcda S., Rodcwald II.-R., Arakawa II., Blucthmann H., Shimizu T.
198. MHC class II molecules are not required for survival of newly generated CD4+ T cells, but affect their long-term life span // Immunity.- 1996.- Vol.5.- N3.- P. 217-228.
199. Takcuchi H., Suzuki N., Tada M., He P. Accelerative effect of olive oil on liver glycogen synthesis in rats subjected to water-immersion restraint stress // Biosci. Biotechnol. Biochem.- 2001.- Vol.65.- N7.- P. 1489-1494.
200. Tew J.G., Wu J., Qin D., Helm S., Burton G. F., Szakal A. K. Follicular dendritic cells and presentation of antigen and costimulatory signals to В cells // Immunol. Rev.- 1997.- Vol. 156.- P. 39-52.
201. Thoman M.L. The pattern of T lymphocyte differentiation is altered during thymic involution//Mech. Ageing Dev.- 1995.- Vol.82.-N2-3.- P. 155-170.
202. Tinsley K.W., Grayson M.II., Swanson P.E., Drcwry A.M., Chang K.C., Karl I.E., Hotchkiss R.S. Sepsis induces apoptosis and profound depletion of splenic interdigitating and follicular dendritic cells // J. Immunol.- 2003.-Vol.171.- N2.- P.909-914.
203. Trubiani O., Di Giulio C., Tripodi D., Bianchi G., Paganelli R., Di Primio R. Thymic sensitivity to hypoxic condition in young and old rats. Age-dependent expression of NF-kappaB // Exp. Gerontol.- 2002.- Vol.37.- N8-9.-P.1077-1088.
204. Tumanov A.V., Grivcnnikov S.I., Shakhov A.N., Rybtsov S.A., Koroleva E.P., Takeda J., Nedospasov S.A. et al. Dissecting the role of lymphotoxin in lymphoid organs by conditional targeting // Immunol. Rev.- 2003. Vol. 195.-P.106-116.
205. Vandenabeele S., Hochrein II., Mavaddat N., Winkel K., Shortman K.
206. Human thymus contains 2 distinct dendritic cell populations // Blood.- 2001.-Vol.97.-N6.- P.l 733-1741.
207. Van den Berg C.L., Lamberts R.R., Wolterink G., Wiegant V.M., Van Ree J.M. Emotional and footshock stimuli induce differential long-lasting behavioural effects in rats; involvement of opioids // Brain Res.- 1998.-Vol.799.-Nl.- P.6-15.
208. Van Meervvijk J.P.M., Binnchi Т., Marguerat S., MacDonald H.R. Thymic lineage commitment rather than selection causes genetic variations in size of CD4 and CD8 compartments // J.Immunol.-1998.-Vol.l60.-N8.-P.3649-3654.
209. Van Vliet E., Melis M., Foidart J.M., Van Ewijk W. Reticular fibroblasts in peripheral lymphoid organs identified by a monoclonal antibody // J. Histochem. Cytochem.- 1986.- Vol. 34.- P.883-890.
210. Veenema A.H., Meijer O.C., de Kloct E.R., Koolhaas J.M. Genetic selection for coping style predicts stressor susceptibility //J. Neuroendocrinol.-2003.-Vol.15.-N3.-P.256-267.
211. Vremec D., Pooley J., Ilochrcin H., Wu L., Shortman K. CD4 and CD8 expression by dendritic cell subtypes in mouse thymus and spleen.// J. Immunol.- 2000.- Vol.164.- N6.- P.2978-2986.
212. Wang Y., Wang J., Sun Y., Wu Q., Fu Y.X. Complementary effects of TNF and lymphotoxin on the formation of germinal center and follicular dendritic cells//J. Immunol.- 2001.- Vol.166.- P.330-337.
213. Wood G.S., Turner R.R., ct al. Human dendritic cells and macrophages. In situ immunophenotypic definition of subsets that exhibit specific morphologic and microenvironmental characteristics // Am. J. Pathol.- 1985.- Vol.119.- N1.-P.73-82.
214. Xia X., Pan Y., Zhang W.Y., Cheng G., Kong L.D. Ethanolic extracts from Curcuma longa attenuates behavioral, immune, and neuroendocrine alterations in a rat chronic mild stress model // Biol. Pharm. Bull.- 2006.-Vol.29.- N5,- P.938-944.
215. Yamamotova A., Starcc M., Holecek V., Racck J., Trefil L., Raskova H., Rokyta R. Anticipation of acute stress in isoprenaline-sensitive and resistant rats: strain and gender differences // Pharmacol. Toxicol.- 2000.- Vol.87.- N4.-P.161-168.
216. Yang C.P., Bell E.B. Functional maturation of recent thymic emigrants in the periphery: development of alloreactivity correlates with the cyclic expression of CD45RC isoforms // Eur. J. Immunol.- 1992.- Vol.22.- N9.-P.2261-2269.
217. Yin D., Tuthill D., Mufson R.A., Shi Y. Chronic restraint stress promotes lymphocyte apoptosis by modulating CD95 expression // J. Exp. Med.- 2000.-Vol.191.-N8.- P.1423-1428.
218. Yin D., Zhang Y., Stuart C., Miao J., Zhang Y., Li C., Zeng X., Hanley G., Moorman J., Yao Z., Woodruff M. Chronic restraint stress modulates expression of genes in murine spleen. // J. Neuroimmunol.- 2006.- Vol. 177.-N1-2.- P.l 1-17.
219. Yoshida K., Kaji M., Takahashi Т., van den Berg Т.К., Dijkstra C.D.
220. Host origin of follicular dendritic cells induced in the spleen of SCID mice after transfer of allogeneic lymphocytes // Immunology.- 1995.- Vol.84.- N1.-P.l 17-126.
221. Yoshida K., Tamahashi N., Matsuura N., Takahashi Т., Tacliibana T. Antigenic heterogeneity of the reticular meshwork in the white pulp of mouse spleen // Cell Tissue Res.- 1991.- Vol.266.- P.223-229.
222. Zhang X., Okutsu M., Kancmi O., Gametchu В., Nagatomi R. Repeated stress suppresses interferon-gamma production by murine intestinal intraepithelial lymphocytes // Tohoku J. Exp. Med.- 2005.- Vol.206.- N3.-P.203-212.
223. Zheng K.C., Ariizumi M. Modulations of immune functions and oxidative status induced by noise stress // J.Occup.Health.- 2007.- Vol.49.- N1.- P.32-38.
224. Zhou H.J., Qu J.M., Qiu S.J., Ye S.L., He L.X. Anti-aspergillus Th immunity induced by dendritic cells and the effect of hydrocortisone on it // Zhonghua Jie He He Hu Xi Za Zhi.- 2004.- Vol.27.- N7.- P.449-454.
-
Нестерова, Алла Анатольевна
-
кандидата биологических наук
-
Волгоград, 2007
-
ВАК 03.00.25
- Возрастные аспекты приспособления иммунной системы к действию хронического стресса
- Постстрессовая иммунноморфология периферических лимфоидных органов в возрастном аспекте
- Влияние хронического стресса при беременности на становление гормональной и иммунологической реактивности потомства в постнатальном онтогенезе
- Морфологическая и иммуногистохимическая характеристика тимуса при различных видах хронического стресса на ранних этапах постнатального онтогенеза
- Морфологическая характеристика реактивных изменений миокарда в условиях воздействия витамина A и хронического стресса
