Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Морфофункциональные состояния и физиологическая регенерация выстилающего эпителия пищеварительного тракта у японской кукумарии

ВАК РФ 03.00.11, Эмбриология, гистология и цитология

Автореферат диссертации по теме "Морфофункциональные состояния и физиологическая регенерация выстилающего эпителия пищеварительного тракта у японской кукумарии"

»■|"Б гмлОД - Г Ш "¡303

»нУ11 ЕИ1)/!0!НИ й[)ря

ДАЛЬНЕВОСТОЧНОЕ ОТДЕЛЕНИЕ РАН

Но правах рукописи

ЕМШКНА Марина Геннадиевна

И0РФ0Ф9НКЦИ0НАЛЫШЕ СОСТОЯНИЯ И ФИЗИОЛОГИЧЕСКАЯ РЕГЕНЕРГЦЛ.Ч ВЫСТИЛАЮЩЕГО ЗПИТЕЛИЯ [ЩЕВАРИТЕЛЬНОГС ТРАКТА

а японской кжнарии

Специальность 03.00.11 - эибриологня.

гистология и цитология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученей степени кандидата биологических наук

Вгадивост«..; - ¡397)

Работа выполнена в Институте биологии ыоря ДВО РАН

Чаучнкй руноридитель -

кандидат медицинских нау, ведурй н.с. Н.Л. Нейбсон

Официальные сплоненты -доктор медицинских наук, профессор П.й. йотавкин . доктор биологических наук В.В. Исаева

Ведущея учреждение: Дальневосточный государственный университет

2&цита диссертации состоится "¿¿" ¿¿¿Й&£<1993 г. Па заседании Специализированного совета К 003.65.01 при Институте биологии иор" ДВО РАН по адресу: С90041 г. Владйвосток-41, Паль-чевского 17, Институт биологии нпря.

С диссертацией иозно ознакомиться » Центральной библиотеке ДВО РАЙ.

Рвтореферат разослан ¿¿¿¿¿ААШ г.

Яченый секретарь Спецйализирор=т,пг,л .кандидат биологических наук

С;В. Гнездилоеа

- 3 -

ОБОДЯ ХАРАКТЕРИСТИКИ РАБОТЫ

Актуальность исследования. Изучение процессов физиологической регенерации тканей - одна из центральна проблей современной гистологии. Классической моделью для изучения процессов клеточной репродукции и цитодифференцировки является кивечный эпителий как одна из наиболее динамичных тканевых систен. Большинство имеющихся работ касается кизечннх зпителиев позвоночных, менее изучены в этом плане беспозвоночные. Тем не менее, в последнее время значительно возрос интерес к изучении процессов физиологической регенерации в тканях корских беспозвоночных , которые дашт богатый материал для исследований, в той числе в сравнительно-гистологическом и эволвционном аспектах. Выли изучены представители разных типов еивотиых 7 иоллвски, брахиоподы, полихетн, иглокойке, оболочники (сн.: Заварзин, 1976, 1981, 1385; йейбсон, 13326, 1985, 1989; Пунин, 1S91), .

Игдокояие - српеобразная группа морских организив, сочетав-цая в своей строении многие примитивные черты (Оеклвиивев, 1952; Федотоз, i960), что делает их перспективный!! объектами для сравнительных исследований, в тон числе процессов физиологической регенерации. Данная работа выполнена на одном из представители.! иг-локових - японской куяуаарии, дрёвовиднощупальцевой голотурии, аироко распространенной в дальневосточник моряк. Несмотря на то, что этот вид является массовым и промыслсво в^зныи, его биология, сезонные циклы и строение внутренних органов практически не изучены.

Проведение цитологических исследований у вивотных в ходе годичных циклов позволяет выявить ?чсь природный диапазон структурных вариаций и пролифератиеных возмовностсй тканей и клеток, £ в раде случаев и их гистогенетичсские потенции. Голотурии в зтпа плане особенно перспективна в свсте дан;шх литература о существенных особенностях сезонных перестроек пищеварительного тракта у разных видов (Савилов, 1939; Лейбсон, 13816, 1982а; Левин, 1382; Byrne. 1-335; Fankboner, Са.ггоп, 1385; SiiLh. Kengan. 1385; Piß Che, 1991). Поэтому описание спзпнных сосюачн? внутренних '¡ргз-

нов у представителей этого класса, в той числе способных к явисцерацин и не обладагщ»х такой способности, представляет существенный интерес для понимания механизмов и способов обновления тканей.

Данная работа - часть комплексных исследований по изменив Физиологической и репаративной регенерации тканей у голотурий, проводимых в Лаборатории сравнительной цитологии (руководитель Н.Л. Лейбсон) Института биологии иорч.

Цель и задачи исследования. Целью работы было дать характеристику морфофункционального состояния и пролиферации тканей, и основном . выстилки, пищеварительного тракта японской кукума-рии и изучить их сезонную динамку. Задачи исследования: 1) описать корфологиг всех отдьлов пищеьарительного тракта и специфические черты выстилащеге их эпителия; 2) изучить морфологии и топографии пролиферирувщих клеток в выстилке разных отделов; 3) дать характеристику сезонннх аорфофункциональннх состояний кинеч-ного эпителия, б той числе на ультраструктурноы уровне; 4) изучить и проанализировать динамику митотической и ДНК-синтезирувцей активностей клеток кишечного эпителия в ходе годичного цикла.

Научная новизна. Дано первое у японской кукумарии и одно из первых у голотурий подробное описание морфологии пищеварительного тракта по отделам с учетом особенностей . строения, клеточного состава к ультраструктура клеток их выстилки, а такзе прояифера-тивних процессов в ней. Выявлен особый бульбовидный отдел - пограничный меиду «елудком к кивечникои (принципиально разными по морфологии и, возможно, гистогенезу своей выстилки) - с переходным типом эпителия" и с признаками, косвенно указывавши на ней-рорегуляторнув роль в процессах пищеварения. При изучении физиологической регенерации кизечного эпителия у японской кукуцарии выявлены черты как общие для морских беспозвоночных (отсутствие зычлененного камбия, способность к репродукции основных эпителио-цитов), так и специфические, почти неизвестные (например, распо-л01гние фигур митозов в толче пласта).

В хиде годичного цикла впервые для.тканей иглокомих четко выделены три основные состояния кивечного эпителия (условная нор-

на. дистрофия, восстановление), изученные не только на тканевом, но л на рьтраструктурнон уровне: в частности, показано сохранение на протяжении всего года базалыюй мембраны эпителия, что вазно для пониаания эпитслио-мезенхииних взаиноотиочений. Внявле-на в летне-осенний период глубокая морфофункциональнаа перестройка кизечного эпителия, включающая стадии деструкции и репарации, первая из которых соответствует состоянии зстивации у голотур"л; дано одно из первых описаний этих процессов на тканевой и клеточном уровнях. Получена одна из первих для беспозвоночных количественная характеристика сезонной динамики иитетической и ДНК-синте-зирцвщей активностей, установлен диапазон их колебаний с периодами подъёмов и спадов, коррелирующими с динамикой норфофункцно-иальннх состояний кизечного эпителия. В част"ости, выявлен один из первих у морских беспозвоночных случаев частичной синхронизации зпителиоцитов в природнах условиях.

Теоретическое и практическое значение. Приведенное в данной работе одно из первых для голотурий а иглокожих в целой и наиоо-лее подробное оьлсание морфофункциональннх состояний и пролифера-т'.-'знах свойств и их сезонных изменечий в выстилке органов пищеварительной системы С ведущей среди соматических) вносит весомый вклзд в сравнительную и эволвциоинуп гистологию. Полученные данные по физиологической регенерации расширяют каши представ пенна об организации зпителиев с »диффузной пполиферацией. вагные для понимания эволации обновлявшихся систем. Наряду с этим применённое круглогодичное изучение позволяет лучзе понять принципы организации тканей и неханизны поддерзания их структурного гоиеостаза. Впервые полученная у японской кукуиарии подробная информация о ей ведущей соматической системе, пищеварительной, существенно расЕиряет нааи знания по биологии этой проынслсво ваз: ,й голощ-рии и является частьа теоретического фундамента, необходимого для её правильного и эффективного использования и разведения. Выявленное в сезоне состояние кивечного эпителия с вероятней задеря-кой нпеток в 62-фазе ни тического цикла мояет бнть предлокно как удобная модель «"стичк й клеточной синхронизации. Полученнае даьные вошо использовать для лекций по сравнительной гистологии

и цитологии в университетах.

Апробация работа, Натериалц диссертации били доловеки на Uli Всесовзнсй конференции по регенерации и клеточнэй пролиферации (Иосква, 1985), III Всесовзной конференции по морской биологии (Севастополь, 1988), Егегодной научноЛ конференции IM РАН (1S92), на научных'семинарах Отдела цитологии ИБМ.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 7 работ и 2 находятся в печати.

Обьёи работы. Работа состоит из введения, 4 глав, выводов; список литературы вкявчает 205 работ, в том числе 140 иностранных; изло«вна ка 130 страницах, из них 110 страниц цааинописного текста, 4 графика, 25 рисунков (схеьш, никрофотографии).

НАГЕРййЛ И шиДй йССЛЕДпБАНиЯ

Материал, Исследование выполнено на японской кукуварии Cucuaaria japónica (Deadrochirota: Holothuroídea). йатериал собирали в 1983-1984 гг. в бухте Витязь зализа Посьзта Японского моря (с глубины П-30 в) и в 1988-1392 гг. в заливе Восток (с 10-12 м). В работу брали, взрослых половозрелых особей с обьемом тела от 00 до 300 ил. Фиксации проводили в условиях, максимально приближениях к естественный. Сбора велись круглогодично с интзрвалом в 1-2 месяца, по 3-5 особей на каждую сезоннуи точку. Сразу после пидъёиа со дна еивотинх ьскрйвали и фиксировали пи^еварит¿льный тракт либо целиком, либо его фрагвенты из всех отделов.

Для изучения пролиф ратнвной активности (с учет суточных колебаний) аивотных брали, по возможности, в одно и то ге время суток. Старались использовать особей сходных размеров, т.е. близкого возраста. В случае применения метода тимидиновой радиоавтографам {ивотных для опытов брали в заливе Восток (1388-1992 гг.) и однд .точку, от 20 декабря 1984 г., в бухте Витязь. Введшие меченого предеествениика проводили сразу аосле подъема кукуыарий из воды, после чего их содервали в ваннах с протокой до момента Фиксации материала.

Сортовая иикросиония. Все процедуры гровиили по стандаиг.--.ы

кетодикаи (си.: Ромейс, 1953; Роскин, Левинсон, 195?; Пирс, 1962; Луппа, 1990). Материал фиксировали р идкостях Навамина, Бузнэ и 102 -но* формалине на фосфатном буфере СрК 7,4). Парафиновые срезы (толщиной 3-5 мкм) окрависали гематоксилином Караччи (ГК), клез-ннк гематоксилином по Гейденгайну (1Г). азокармином по Гейденгай-на С ЙГ). паральдегид-Ф'жеином по Гомори (ПАФ), азур-эозинон (АЗ). Из гистохимических реакций применяли прочный зеленей (ИЗ) рН 2,2 на суммарные белки, альциановый синий (АС) на гликозаминогликанн, реакции с Вифф-йодной кислотой (ПИК) на нейтральные полисехаридн с контролем амилазой на гликоген.

Полутонкие срезы (0,5-1 мка) материала, заключенного в эпоксидные смолы, окравивали 1Х-ннм раствором нетиленового синего на буре (НС) или толлуидиновки синим с пиронннок (ТС). Также применяли реакций с нитратом серебра по методу МапЬеипга е1 а1. ( 1989) ка лшщсодерищие вещества.

Препараты анализировали и фотографировали с помощь») кик-роскопа Ро1ууаг.

При морфометрическом анализе шщадей ядрыяек в ядрах эпнте-лиоцитов кивечной выстилки проецировали их яззбра«енче с фотопленки (ув. х1С00) на миллиметровуо бумагу.

Метод радиоавтсграфии. В работе использовали метод световой гккидиновой радиоавтографии с импульсчив введением раствора меченного предшественника синтеза ДНК -Зй-тимидина (3Н-Т). Раствор 3Н~Т вводили в полость тела из расчета 0,1 МБг. на 1 мл'его обьёма. Материал фиксировали через 4 ч посла инъекции за исключение»; декабрьского опыта в бухте Витязь, когде время до фиксации составляло 1 ч.

Парафиновые срезы толщиной 5 мка покрывали эмульсией типа "Р" (Госхимфотопрозкт) и "ПР", время экспозиции составляло 1- 1,5 месяца. После проявления срезы окращивали ГК.

Прплиферативная активность. Япведекие делящихся и ЛНК-сиате-зируицих клеток рассматривали в эпителиальной выстилке ?сед отделов пимеварительног-о тракта. Количественный анализ проводили на примере 'выстилающего злителк. П-го нисшяягго колена кямечника, наиболее удобного для этих целей. Пролиферапчицв ак:авпо:ть сце-

нивали величинами двух индексов пролиферации - нитотическоге индекса (ИИ) и индекса меченых ядер (ИМЯ).

Значения МИ определяли как отновение числа митозов к оСцеид числу клеток на срез. Для зтого подсчитывали число митозов на 5-10 произвольно выбранных срезах и находили среднее значение. Из-за невозмовности провести на срезе прямой подсчет обцзго числа ядер клеток (в связи с их очень мелкими размерами) подсчет проводили следувры образа. Использовал!' рамку размером в 1 си2, приникая её за условнуп единицу плоцади (9ЕП), и в 5-10 таких НЕП подсчитывали ядра и определяли среднее значение (й). Поскольку в поло зрения микроскопа вмецалось 7 НЕП, то общее количество ядер на срез составляло АхБх7, где В - число полей зрения на срез. Отновение среднего «чела митозов на сроз к среднему числу ядер всех клеток на срез, внрааенкое в процентах, соответствовало величине МИ.

При анализе радиоавтографов меченными считали ядра, над которыми выявлялось не менее трех зерен восстановленного серебра. Значение ИМЯ определяли как отновение числа меченых ядер к общему числу ядер клеток на срез. Индекс устанавливали по трем произвольно внбрашшм срезам. Для этого по 5 полям зрения на каздый срез подсчитывали число меченых ядер и находили среднее значение. Затек находили среднее значение общего числа ядер клеток на поле зрения, для чего использовали ту ие раыку, что и в случае Кй. Дли крЕдэго из трех срезоз определяли величины ИМЯ (в X) и находили среднее значение индекса.

Оценивали такяе интелсивность кечения^-Т по количеству з£-реи серебра над ядром. При этом все ядра были распределзны по тре* классам - слабо, средне и интенсивно меченные. Их соотнове-нке выражали в до^х к обцзму числу меченых ядер и величинами Ш (в '.С для камдого из трёх клас.ов.

Злектроннаа микроскопиг. Для электронной микроскопии обработку проводили пс общепринятой методике (Уиклн, 1975). Иебольвие кусочки тканей из разных отделов пищеварительного тракта фиксировали 2*-ннм раствором глутаральдегида на 0,02 И какодилатном буфере рН 7,4 П ч пои 4*С) с постфиксацией 1Х-ннм раствором ОэПл

- ? -

(40 ми;и) на той ае бцфоое. Натериал обезвоживали в ацетоне и заклвчали в сиесь Йралдита и Зппна 812 по обычной схеме. Ультратонкие срезы контрастировали растворами уранил-ацетата .. цитрата свинца.

РЕЗУЛЬТАТЫ И 0БСУ8ДШЕ t. йириологиа пищеварительного тракта и внстилае^его эпителия

9 японской кукунарин п длинном трубчатом (как и у других голотурий) пичеварительнои тракте выделены, на основании иакро- и микроскопического изучения, девять отделов: глотка, пищевод, ыускулистий 8еяудск, переходной булъбовидин? отдел ("буяьба", оклпчаицая верхнвз и низнив части), три колена кивечника - первое нисходящее (I ПК), восходящее (ВК) и второе нисходящее fII НК), ректуи и клоака

Стенка пидеварктельнпй трубки вклиает четыре слоя: выстилавший, или кивеччый (пшзсвлрительныи) эпителий (КЗ), соединительнотканный, и иывечний слои и целомич^ский (перитоиеальный) эпита-лнй.

Выстиланий эпителий - высокий (до 300-400 мки), цилиндрический, ловноиногпоядннй (до 40-50 "рядов" ядер); при этом пчсота пласта и число "рядов'' гдер. клеток уаеньчаатся в орально-каудаль-HOd направлении. Оорка клеток, очень высоких и узких, не позволяет проследить их от базального до апикального края; поэтому нави дак::нз не могут ни подтвердить,. ни опровергнуть оригинального мнения Rosati (1S68) о шюгсслойности КЗ голотурий, в противопо-лоннос:ь обцепрннятоау анениа об однородности кквечных эпители-ев. 9 японской кукуаарни в составе КЗ выделены два ос: вине типа клеток - Т-клетки и энтероциты, а такве специализированные аеле-зистые клетки - мукоциты. D пределах основных типов клеток, сходных в целом с описанными у других изученных видов голотурий (fera!, Hassin, ¡982), нами внязлек и описан рад разновидностей. ^

Строение и кяет^чньй остав КЗ ра^личаатся в разину, отделах пицеварительногс тракта. В передних (глотка, пщевод, 1елудпк и

верхняя часть "бульбы") и задних (ректун и клоака) отделах выстилавший эпителий образован Т-кльтками. в нивней части "булъбв" и в собственно кивечникв - энтероцитами.

Иль вастилацего эпителия, образованного Т-клетками, характерны следувре признаки: присутствие на апикальной поверхности кутикулоподобной пластинки, достигавшей наибольшего развития з шелудке; наличие нетипичной, очень тонкой базальной мембраны к тесное взаимопроникновение соединительнотканного и эпителиального слоев (эпителий погрреннсго типа); основное вещество подлегаяей соединительной ткани - плотное фибриллярное и содержит многочисленные целоыоциты с преобладанием морулоподобных; во всех отделах (за исклвчением шелудка) в составе эпителия имеются мукоци-тн, вырабатывавшие слизь, которая наряду с "кутикулой" закидает поверхность эпителия от повреадекий. .

Для эпителия, образованного энтероцитами, характерно следув-щее: отсутствие кутикулоподобной пластинки: наличие толстой (типичной) базальной мембраны, отделявшей эпителий от соединительнотканного слоя; основу последнего составляет гемальные лакуны, содершашие фчбрилларно-яидкостной комплекс и многочисленные цело-моцита (морулоподобные, пигмент-содерааре, "мелкие" целомоцитн); в составе эпителия отсутствуат мукоцнты, а сскрецив слизи обеспечивает сами основные энтероциты.

Особого упомин заолриьает брьбавндный отдел, располо-шенный не!ду келудком и собственно килечникоы. Ранее ш был описан ли1ь у двух видов древовидношупальцевых голотурий -Сисшапа е1опва1а (Г:^, 1967а) и ЕирепЪасЬа ГгашЫНх (Лейбспн„ 15816), а его подробное гистологическое изучение сделано впервые у японской кукумарии. й составе э»иго отдела нами выделены две части - верхняя и нижняя. В верхней части "бульон" происходит резкое истончение миечного слоя и, как следствие этого. сблишенив целомичьскиго и пищеварительного зпителиев. Висти-дащий эпителий этой части образован Т-образными клетками, сходными с таковыми селудка, среди которых, однако, присут гвувт и мукоциты. Для эпителия характерны многочисленные целомоциты, преимущественно норулоподошше. Яркой особенность: выстилавшего З1.л-

телка этого отдела является наличие в базальной зоне пласта отростков нервных клеюк (сддя по релкцин с нитратом серебра и уль-1 раструктуре гранул), тесно соприкасавшихся с '[-клетками и, внро-атно, осуществлявших контроль над ними. Эти отростки проникаит нз иодлезащих слоев и принадлезат, как удалось проследить, клеткам целонического субзпнте.пиальнаго нервного сплетения. Наличие нервного контроля за зпителиоцитаии именно "бдльбн" могно объяснить её особна пограничник располозениен мезду азлудкои и киаечникоа и вероятный участием в регуляции, процессов пищеварения, на чтс указывает, з частности, разносбразке клеточного состава внсгилкп и фора её секреторной акпшости.

В нимней части "бульбы" происходит резкая сиена обцего пиана строения стенки пищеварительного тракта, которая становится сходной со стенкой собственно кииечнкка. Эпителий нианей части "бдльбн" образувт' эпителиоцитгн переходного типа, сочетавшие г, своей строений черта Т-клаток и зптероциш с преобладанием поелчдиик. В составе эпителия чродоляаит встречаться мдкоцитн, исутству!щне в знстилкз собственно кизечника.

Подробное изучение морфологии других (подлевачих) саозз стенки пичеварительпого тракта не входило в задачу кавегз исследования, однако их наиболее существенные особенности зо Озаи-изевязи с КЗ отмечены при рассцотрешш соотзетгтпупрх отделсв.

Характеристика основных типчз клеток вклнласцсги згмтелка. Основу эпителиальной окстиики сосгаплзвт. как уге отмечалось, Т-клеткн либо энтероциты, б заяисииопи от 01дела пнзмарительно-го тракта.

Т-клетки (Рис. 1Й) отличарт необычная Т-обпазчас форма с распиреиннми апикалпной и ядросодсрвацей чзстями и узкой вейкой аезду ними. Покрывавшая эти клетки снаруяи кутикулоподобная пластинка имеет слоеное стрсение и сосюит из двух слоёе, из готовых внутренний представлен нэйтральннми гликопрг-теннаак, а тонкий нарунный - кислыми гликозаминогдикакавк. йаикаяьнаа поверхность Т-клеток несет высокие разБ твлекннг мрнревэрсиики, в оснований которых формируется пиноцитознне пузьрькч. Телэ клетик следрина

б апикальной части протяженными межклеточными контактами ¡целевид-ного типа, чуть низе - контактами типа ¡шлуд^скосом, осуцествляп-даи связь клеток с тонкой нетипичной базальной кэабрачой; последняя оирдгает каждую клетк" и достигает зоны плотных контактов. Ядра клеток однотипна; сходных размеров, овальнае, с четко различимыми 1-2 здрышкэмк. Б цитоплазме херово развита система вероховатой эндсплазнатнческой сети ШС), характерны вторичные лйзг:цмы (гетэрофагогомы), в надьялеркой области имевтея скопления секреторных гранул с осмиофилышм содержимым, включавшим нейтральные гликопротеины, а такге липиды и, вероятно, участвующий в построении вецества кутикулы.

Знтероциты (Рис. 1Б) - высокие щеточнокаемчатне клетки, имеет ряд характерных признаков: каличле на апикальной поверхности янсоних ыикроворсинок, в оснозанич которых формируатся пиноцитоз-ные пузырьки; однотипные ядра удлиненной формы с 1-2 крупными ядрышками; компартментализация цитоплазмы, содерзащей в своей апикальной части многочисленные секреторные вакуоли с кислыми глико-заийчогликанакк, з основной части - хороио развитую систему 13С и в иазальной - скопления запасающих вакуолей с липогликопротеи-ной. Клетки подстилает хоросо развитая базальнзя мембрана.

Нукоциты - специализированные велезисгые клетки, вырабатывание кислые гликозамикогликаны, рагполоаены среди основных Т-об-рззних зпителиоцитсв. Б передних отделам сни янёе: колбовкдкуг форму, а задних - бокалеввдкув. Тйло клеток заполнено секреторными вакуолями; оставшаяся свободная цитоплазма - электронноплитная и содераит небольаое количество ыикрипузырьков и коротких цистерн ВЭС. вариабельность формы ядер и состояния хроматина (от округлых с четко различимом крупным ядрышком до непр^чльной формы гиперх-рокних пикнотнчесних),'вероятно, отра«ает стадии жизненного цикла гтих клеток.

В разных отделах пищеварительного тракта в пределах двух основных типов клэток эпителия нами выделен ояд разновидностей. Наичен^пим разнообразием отличается вксуилке желудка, образованная гранулярными Т-клетками, среди которых встречаются ресничные и беггресшг'.пча, й такге опорные клетки с пучками токофиламентов в

цитоплазме. 3 эпителии верхней части "бульбы", поиимо гранулярных Т-клеток, имэвтся плетки со сневапкыа сикретои, содераацие вакуоли сходного разйерп, но разной электронной плотности. ?> нигней част/ бульбовидного отдела выстилку обраэукт клетки переходного -неаду Т-клетками и знтороцитааи - типа. Так, оориа клеток напоминает Т-образнуэ, ко их базальнаа поверхность соприкасается с типичной хороша развитой базалышй .мембраной (как у знтероцитов); отмечается обширная зона плотных контактов щелевидного типа в апикальной части пласта, характерная для Т-клеток; в больвинстзс клеток апикальная часть цитоплазму содерзит секреторные вакуоли с элеятронносветлым содергимнм (гликозакиногликанави), однако име-зтея члетни с секреторными вакуолями разной электронной плот-

Рьи. 1. Схема стросниа Т-клетки (£) и знтероцита (Б).

Условные обозначения: би - базальная ыеибрана, в • закуоли с оейиофильным содергчьшм, вс - вакуоли с содерзииим средней электронной плотности, гф - готерсфагоссмы. к - кутикулоподобная пластинка, м - митохондрии, мс - слизисто-секреторныо масси. г: - полигоны, чв - пу'стыз вакуоли, - пинсцитозные пузирьии, р - свобод ные рибосомы, ИЗС - • чрэхс-.лтая зндопл'азматическая сеть, я - ядро, яд - адрывкс, яо - ядерная оболочка.

ности. Выстилку собственно кизечника образузт несколько разновидностей энтяроцнтов. Б 1 НК кизепны? эпителий предстазлен везикулярными гнтероцитааи с усиленной секрецией кислых гликозаыиьсгли-канов. Р ВК и II НК выстилку кивочника составляат клетки трёх разновидностей - наиболее многочисленные с гранулами разной электронной плотности, соотвиствуьщие "типичным" энтероцчтам у других Г0л01уркй (Рзга1, На$$1п, 1332), везикулярные и редкие гранулярные зпитьлиоцитн с зликтроиноплотныни гранулами.

Необходимо отцетигь, что в некоторые сезонные периоды в составе эпителиального пласта среди обоих основных типов клеток выявляется две клеточние сабпопрации, различавшиеся линь по электронной плотности цитоплазмы - "светлая" г "темные" клетки. Исходя из сущйствуЕйегс мнения (Саркисов к др.. 1976; Бонарцев, 1050), с8бтлис плСТпг' Ф'^п'Гр/пиНи^ико иКТИини» и для 7СмПиХ хзрак-терно обратимое снишше функциональной активности. Наличие таких клеток связывают с различным коллоидным состоянием цитоплазмы: светлое - золя, темное •- геля.

Т&ким с^разои, полученные данные показывают, что у японской кукумарии (как и у других видов голотурий) пищеварительный тракт выстилает эпителии децх типов, различные пс своей норфол'огин, функции и, возможно, гистогенетически. Показано, что согтавляюзне их основу зпителиоц ты (Т-лле*ки и зитероцитк) и их разновидности «вляатся пелифункциональннми.гчто указывает на низкий уроке:-;ь ци-тодифференцировки, характернкй для тканей иглокових в целом. При зтои ь разных отделах пищ. ¿зрительного тракта преобладаь; различные функции, в передних отделах (глотка, пищевод, велудок) - нн-раИтка вещества "кутикулы" (вероятно выполняющей роль перитрофи-чесний .мембраны), поглощение и внутриклеточное переваривание растворенной е воде органики; в "бульбе" - разнообразная секреторная деятельность и предполагаемая нейрорегуляторная; в 1 НК -полостное пищеварение ч усиленная мерикриновая секреция слизи, по-видимому, обогащенной пищеварительными ферментами; ь ВК к II НК - процессы мембранного и внутриклеточного пищеварения, а такве запс^амч и транспорт, питательных веществ, "етерогепность к/л-

точного состава и наличие разновидностей в пределах основных типов ¡меток могут отражать специализации отделов и аскнхроиность их функцкок'яровайнл. a гаме стадии жизненного цикла нлвтон. Наконец, вняплешше по ходу пищеварительного тракта различия норфо-логии выстилки йозно трактовать как указание на различное происхождение в онтогенезе разных отделов, а именно зктодермальное -в случае отделов, выстланных Т-клеткани С сходными с Т-клеткачи эпидермиса голотурий, по данным Holland, 1904), и энтодериальное - з случае отделов, внетланнах энтероцитааи. Правомерность таких представлений (Janyoux, 1382; Feral, Hassir., 1982), противоречащих нченип ДА Федотова (1965) о почти полностьо энтодернальнон пицеварительном тракте голотурий, требует специального з«бриоло-гического изучений,

2. Хаоактеристнка пролнфгративных процессов в кияочнои эпителин

Кивечный эпителий (КЗ) японской к^кунарин по своим пролкфе-ратизииа свойская нояет быть отнесен к медленно обновляяцинсл к/зточныа популяциям. Характер распределения и численность прели-фернруощкх клеток иеняэтея по длине пищеварительного тракта. Hes-ду отделами отмечены существенные различия з интенсивности клеточного разкноненич: крайне редко делятся зпителиоцити начальных отделов и клоаки, промежуточное полоаенип занимает восходящее колено киаечника, наиболее интенсивно делятся клетки в бульбовидноа отделе и II нисходящем колене кигечника (II НК). Зпителиоцити отделов с шшзенной пролиферативной активностьо КЗ. возмокно, при-ниааит участке в росте и обновлении зыстилки не только собственного, hj н соседних отделов.

Расположение Фигур нитоза по высоте эпителиально, о пласта оказалось различным в разных отделах. 3 зелудке к верхней части "бульба" - отделах, выстланных Т-клеткааи, где удалось наблюдать фигуры митоза - они располагались в толще пласта, что d целом не у^ракторно для однослойных зпитзлиеь и было описано ливь у одного^ вида (Лейбсон, 1381е\ В н .¿ней части ' Вульбы" и киэечкике, выстланных эптерсцитаки» напротив, почти Rce фигуры митоза были гче-

■lesera апикальчи, как это пписани у подавляющего большинства беспозвоночных (сы,: Лейбсон, 19S26, 1989; Пунин, 1991). 3 японской кукуыарии такие различии ноано объяснить особенностям строение Т-образных клеток, в частности, наличие« у них узкой вейки вежду ядросодермаяей и апикальной частями ты клетки, а такхе еьстко детерминировании.'. их форной, присущей погруаешша эпитета. Мечешше3Н--Т ядра располагались в средней зоне пласта, кнггда скевдясь апикалино. При этой меченный» оказывались ядра, не отличавшиеся по морфологии от ядер основных гпителиоцитов; это касается как Т-образных клеток, так и энтероцктзв.

По периметру пициварительной трубки фигуры митозоз и мечен. iíiieaü—Т ядра располагались диффузно н сравнительно равномерно. По высоте складок не удалось выявить преимущественной локализации делящихся клеток, тог/ii ка" в случае ивченнх здвр инелась тенденция к преобладанию их у основания складок в отделах с поваленной интенсивностью пролиферации (и никаей части "бульбц" и II ПК) у некоими особей, Чстречаацазея участки усиленной пролиферации нельзя рассматривать как аааЗиальние в связи с нестабильностью их ' наличия и ра-полошшя у разных особей; моеко говорить ливь о вольообразности и козаичности пролиферативного процесса в килечной выстилке. Тем самай, у японской кукумарии в кивечноа эпителии топографически обособленный камбий отсутствует.

Пои детальном зучен:м кораулогии, з том числе ультрастриктуры, клеток КЗ не удалось выявить низко диффоренцированньг,: (кан-биальных) элементов. Этот факт, а такве сходство меченах ядер с ядрам; осиовныч эпителиоц;ros позволяет заключить, что „ процесс деления вступают умеренно дифференцированные полифункциональнае эпнтелиоцита, составлявшие основу застилки. На И1.клвчнна, однако, возможность существования пока не идентифицированных диффузно рассеянных низко дифференцированных элементов.

Специализированные Ьолезистые клетки, мукоциты, не показа™ признаков синтеза ДНК и деления. Сучес»венные изменения числа му-коикгив, вплоть до их отсутствия в некоторые сезонные .¿еисды, наличие переходных форм меядо мукоцитаки и основными эпителиоци-техч, а гакяг сходстьо пиирпры секрета тех и других, позволит

считать источники* их обновления огновнье зиителиоцяти выпилки. Л пользу этого говорит такге корр^лягая меаду бпльним количествам лелгзистнх клеток з выстилке "бульбы" и ее усиленной пролкфчра-тирной активностыл.

Таким оиразом, у японской кукумарии организация обчовляз-цйг.ся системы кишечного зпитэлия характеризуется отсутствием топографически вычлененного каьбия и диффузностм клеточного размножения, как это имеет место у других изученных видов иглокоаих (Новчак и др., 1971; Иарувкини, Грачева, 197б;Лейбсон, 1981а, 19026, 1989; Анисииов, 1962) и ряда других групп оеслэзнонечных (см.: Яейбсон. 1986; Пунин, 1991).

3.Сезонные ыорфофункциональные изменения кишечного эпителия

Несмотря на значительную индивидуальна вариаб: .ышсть ыор-оофункциональннх состояний, характерная дчя беспозвоночных в целом, и имевшиеся у японской кукуиэрии различия стднлпр пищеварительного тракте,, связанные с их специализацией, з годичном цикле у изученного вида наблюдается ряд закономерных изменений ьыг.ила-йр.сго эпителия. Представляется бозмошнй выдзлитс три основных состояния: условная норма , дис-трофир, восстачоплепиз.

Ь состоянии норм»:, наиболее прэтяекнои по времени (и.пч'к все 1-е полугодие), кизеччый эпителий хопоио ,шпит.' Для нег-о характерны: максимальная высота и ч'/хли "рчдов" ядпр г. редкими иик-нотическими, однородность ш.яст?. бен четного дьлрния его па две субпопуляции клетск (светлые и темные), »Елначителитти дестрг?;-тивкых проявлений, толстая кутикулоподоСчш пластинка (в отделах, ¡¡устланных Т-клеткйми). Основные ел^тилиациты (Т-образчаз и зые-роциты) функционально акткснь; хгриго резвкти апикальный аппарат, шшзцитозннй комплекс и 03С. велико число секреторных и запасавших вакуолей, йуксашн (в : х отделах. где инл и«евт:з? в этм сезонный период наиболее штгочислбнаи н загмгяеиа кг.члн^мн с «'л-

реторннмн еакуоллки.

В состоянии дистрофий (ивль-начало октября) эпителий истончен, резко снимется число "радов" ядер клеток в пласте на фоне их гибели и элиминации при отсуствии ыитотических делений эпите-лиоцитов. В целом характерны признаки деградации: наличие больво-го числа клеток с пикнотичешнш ядраип в апикальной зоне пласта; увеличение кевклеточнкх проиегутков и инфильтрация эпителия ьно-гочксленнаки целоноц"тааи, в той числе фагоцитирусщккк, а таие пмгнент-содерадиии гранулоцитаыи, образующими обнирнне лакунопо-дпбныь скоплзния ("коричневые тела"). Происходит резкое снкш-че функциональной, в той числе секреторной, активности эпителиоци-тов, следствием чего является, в частности, истончение кутикуло-подобной пластинки в верхних отделах пищеварительного тракта. В пппЗХ ^лэтп^ возрастает степень конденсаиии хроматина, ^уеньва-втея размеры ядрииек. В цитоплазие происходит-дезагрегация ЕЭС, падает количество секреторных гранул и исчезают запасавщие вакуоли, нарастает число вторичных лизосои, появляется ниелиноподобнае тела. Эпителиальной пласт четко дели/ся на две субпопуляцни клеток - светлые и темные; первые «асто вьглядят деградирдоиви -они округлой формы и смещены в апикальнуи зону пласта, где подвергаются элиминации; томные клетки ииевт чрезвычайно плотные ядра и цитоплазму с плохо различимыми органоидами. Исходя из существующих представлений (см. с.14), наличие у японской кукуиарии в этот сезонный период в пищеварительном эпителии клеток с элеит-ронноплотной цитоплазмой, составлявших больвуи часть пласта, мое-но рассматривать как отраЕение обратимого снижений функциональной активности эпителия на фоне гибели и элиминации светлых клеток, вероятно, закончиваих свой визненннй цикл, ч целом преобладает процессы деструкции и катаболизма. Что касается мукоцитов, то их размеры и количество снижавтск, вплоть да исчезновения у части

0с0б2й. ■

Глубина дистрофически изменений вастилаьае' о эпителия различна в разных п-делах пищеварительного тракта. Наиболее еыраггны они в самим протяженном 1 НК, в эпителиальной выстилке которого ьа!)ЛЕдаеУся рез.чиз сниаьш'е высоты и числа "рядов" ядер (до 1-2).

сглавнвание килечных складок, необратимые изменения больяей части ядер эпнтелиоцитов, которые приобретает сродство к АС и сбрасывания б просвет вкесте с лизированной частью цитоплазмы и сли-зистыаи массами. С?оль резкие изменения КЗ иаенно этого отдела ногут быть следствием усиленной секреторной активности его зпнте-лиоцитов, что долено вести к повызенной скорости их нзнаииванна. Ненее вырааена изменения в начальных отделах тцеварительного тракта, эпителий которых образован Т-клеткаии, несуцими кутикуло-подобнуа пластинку с защитной Функцией,

Нльтраструктурннй анализ показывает, что по ходу всего пищеварительного тракта в этот сезонный период сохраняется базальная ограниченность вастштвщего эпителия от подлезацей соединительной ткани.

В состоянии восстановления (ноябрь-декабрь) в кизечноа эпителии постепенно повнгаатся высота и число "радов" ядер г пласте на фоне всплеска иитотической активности образущих его клеток; деструктивные проявления вновь незначительна, Наблвдаатся призна-155! подгё»а функциональной активности эпителиоцнтов: упорядочение а.:лкального аппарата и ЭЭС, резкое увеличение размеров ядркек, нарастание выработки секрета и падение числа вторичных лизосоа. Деление эпителия на две клеточные субпопуляции исчезает. Постепенно все показатели достигавт состояния нормы. Иукоциты в этот сезонный период достаточно многочисленна и заполнена базофилыша секретон.

Проведенный ыорфоаетрический анализ значений шщади ядрыаек в ядрах на примере зпителиоцитов II НК. подтверадает обвуа сезон-нув динамику морфофункциональных изменений пищеварительного эпителия. Наибольвие значения размеров гдрнвеи приходятся на период конца зимы - начала весны (февраль-апрель); к мал размена ядрыаек уиеньвавтея при сохранении этой тенденции до сентября, когда она шшимальг.ы (в 2 раза меньае, чем в феврале-апреле); с ноября размеры ядрыаек вновь начшшт увеличиваться, что продолжается в до-рбре м январе вплоть до фиральских максимальных значений. Каи зидин, нарастание -еличк.. плпчади яДр'ыаек в ядрах зпителиоцитов соответствует состояния их восстановления и нормализации после

дистрофии, что объясняется, судя ио другим навив данный, активно идущими в этот период ауте- и гетеросинтетическими процессами, йинивалыше значения площади здрывек совпадает с периоде* дистрофии пищеварительного эпителия, когда происходит глубокое угнетение синтетических процессов в клетках.

Таким образом, проведенное на японской кукумарии исследование показало, что у этого вида кивечнай эпителий претерпевает в годичной цикле существешшз изменения на тканевой, клеточном и субклеточном уровнях.

4. Сезонные изменения пролиферации клеток кивечного эпителия •

Описанпув у японской кукрарки картину сезонных структурных перестроек пищеваригельного тракта дополняет данные по сезонной динамике пролифератквных свойств его выстилки, полученные на основе круглогодичного сбора материала. Как ува отмечалось, в зависимости от сезонных изменений состояния кивечного эпителия (КЗ) в нем существенно извинялось число митозов - от минимального в состоянии дистрофии до максимального в состоянии восстанозлениа. Количественный анализ пролифзративлпй активности проводили ка приаере II нисходящего колена кйики (II Ш, выстилка которого отличается наимеиыш числом ядер клеток и их усиленной чролифера-тивной активность.. В качестве показателей иитотической и ДНК-синтезирупщей активностей-использовали величины индексы пролиферации - и ИКЯ. а такве интенсивность кечения (количество зерен серебра на ядво).

Величины МИ в кивечнон эпителии II НК в ходе годичного цикла показали следувщуи динамику (Рис. 2а). При среднегодовой величине МИ - 0.09*0,022 выявлены два периода подъёма и два - спада средних величин индекса. Псдъёмч зарегистрированы в апреле (0,167.) и в период с ноября (0,Щ) пс январь (0,122) при наивысвих значениях б декабре: 0,20 и 0,292 у особей и зел. Восток и 0,46, 0,36 к 0,352 у особей из бух. Витязь. Резкий спад китотическо" активности соответствует феврали (0,0152)и длительному летнему периоду, когща с меня по август средние величины МИ сосавили от 0,06 до

-г\ -

9.0Ш, а в конце августа и сентября у 4-х особей (из 5) значения приблизились к нулевый.

В ходе динамики средних величин ИИЗ (Рис. 26) м^яно выделить диапазон, 1,8-2,2%. в пределах которого колебались средние величины индекса больвииства сезонных точек, а именно - января, февраля, апреля, ивля ч августа. Отчетливые отклонения за пределы этого диапазона отмечены в сторону подъёка п ноябри (2,75л) и в декабре (3,022) при резком спаде в конце сентября (0,352); имеется такае тенденция к снигениа в начале ивня.

При анализе сезонной кривой ИЙЯ особого рассмотрения требувт два периода. Первый касается декабрьской точки, поскольку она получена в иных условиях эксперимента, чек все'остальные: в другой бухте и при укороченной ерике экспозиции (1 ч влес~о 4-х ч) после введения3}]-!; следует огидать, что в стандартных условиях опыта декабрьская величина ИМЯ превосходила бы его среднегодовой уровень еще более резко, чей это прздетавлено на графике. Второй требувзий пояснени." период касается ивня-августа, когда пригодные для обсчета радиоавтографа удалось получить лишь у 3-х особей (по одной на точку), данные по который и представлены т графике сшшвной линиен. У остальных зе 5 особей меченые клетки полностью отсутствовали во всех тканях кивечной стенки (в отличли ст особей в другие сезонные периоды), что могло бить одник из проявлений общего угнетения кетаоолизка акзаткых в летне ралкессэнний период. Поэтому с учетом всех 9 изученных осией средние значения ИКЯ в ивне-августе снизятся втрое, что соответствует пунктирной линии на Рис. 26.

• Наряду с подсчетом ИНЯ оценивали интенсивность лечения Зй-Т. Зсе меченые ядра распределяли н* 3 клггпг по числц зерен серебра на ядро; интенсивно меченные - от 15 зёрея и вы«, гредне меченные от 6 до 14, слабо неченныз 3-5 зерен/ядро. Интенсивно меченные ядра эпителиоцитов обнаружены з четырёх сезсинй* точках (из девяти изученных) - в ивле, у отдельных особей в январе я феврале, а так«е в небольвом количестве в апреле; с конца августа по ноябрь интенсивно леченные ь„ра не наблидгсись. В «вне, август* н ноябре интенсивность лечения ядер зпитеяиоцитос бвда средкРй к

Рис. 2. Сезонные изменения НИ (а) и Ш (б) клеток кивечного эпителия мпонскор кукумарии. fio оси абсцисс - месяц!» года. По оси ¿рдинат - слева НИ Ш, справа HHS (X); енизу - теипература морской воды. Ниловние обозначения: средние знзчени НИ и

ИМЯ (A-á), !1нциниду«и1ькыг значения ЛИ (о) и ЖЧ (Д); А-.-¿.-дополнительные величины (см. тэкст): <jí)иданные по б!Г<те Витязь.

слабой, примерно, поровну, а в сентабре только слабой. Что касается декабря, то дазе при укороченном сроке экспозиция после введения 3Н-Т (1ч внесто 4ч) средняя интенсивность мечиния ядер явно преобладала над слабой. Зги резкие сезонные различия в интенсивности нечения клеток КЗ могут обьясняться рядом факторов, в частности, положением клетки-иизени в нитотическои цикле в момент введения меченного предзественннка ДНК.

При сопоставлении сезонной динамики величин обоих индексов пролиферации в КЗ обращают на себя внимание периоды как совпадения этих величии, так и их резкого расхождения. Например, на границе сентябрь-октябрь найдено минимальное число митозов и иечених ядер (представленных исключительно слабо нечеинкни). С другой стороны, в нале-августе и в феврале крайне нгзкие, близкие к нулевым, значения НИ сочетавтся с довольно высокими значениями ИНЯ (у особей, где удалось получить вклвчение3Н-Т). Такое соотношение индексов позволяет предположить накопление клеток в 62-фаэе кито-тического цикла при блокировании перехода их в шиоз, что долзно вести в определённые периода года к частичной синхронизации популяции эпителиоцитов кивечного эпителия, как это обнаружено у некоторых других морских беспозвоночных - в кияечнике мидии Грея (Фролова, 1983: Фролова, Лейбсон, 1391) н дальневосточного трепанга (Лейбсон, 19816, 1982а, 1989) и в пищеварительной Еэлезе приморского гребенка (Увева, 1988).

Таким образом, проведенное круглогодичное изучение пищеварительного тракта японской кукумарни выявило закономерную динамику не только морфофуькциональкых состояний пищеварительного тракта, но и п;,илиферативннх свойств его эпителиальной выстилки. Очевидно, эта сезонная динамика обусловлена комплексом экзо- i эндогенных факторов (прежде всего, температур воды и стадий полового цикла зивотиых), которые могут оказывать на рассмотренные процессы двоякого рода воздействие: прямое - на клеточно* уровне и опосредованное - через об*и состояние организма, уровень его метаболизма и функцкпналы; .¡й активности всех его соматических систем, включая пищеваригельчув.

ВЫВОДЫ

1. Пищеварительный тракт японской адкунарии включает девять иорфофункционалыю различных отделов: глотку, пицевпд, желудок, переходный бульбовидшзй отдел ("бульба"), три колена кивечника (первое нисходящее, восходящее, второе нисходящее), ректуи к клоаку.

2. Основу эпителиальной выстилки пищеварительного тракта образуют клетки двух типов: Т-образные клетки передних (глотка, пищевод,, аелудок, верхняя часть "бульбн") и задних (ректуа, клоака) отделов и ¿нтероциты собственно киаечника; в отделах, выстланных Т-клеткаии (за исключением велудка), имевтся мукоциты. В пределах обоих основных типов клеток выделено-по нескольку разновидностей. Выявлена характерные признаки обоих типов эпителнев и полифункциональность составлявших их Т-клеток и эктероцитов, соответствующая специфике отделав; впервые показан переходный характер эпителия "бульбн".

3. Организация кивечяого эпителия как обновлявшейся скстеыи характеризуется отсутствием топографически обособленного камбия и диффузный распределив* делящихся и ДКК-синтезирунщих клеток. Способностью к иитотическоиу делении обладавт сани полифункцио-нальние уверенно дифференцированные эшпелиоцитн. Зльтраструктур-иий анализ не выявил низко дифференцированных эленентов, что не исключает возмолшсти их присутствия в эпителии.

4. В; ходе годичного пикла ничеварительны.. тракт и зыстилаь-ций его эпителий претерпевают ряд ворфофункциональных изменений на тканевом, клеточной и субклеточна ур знях. Выделено три основных сезонных состояния ки> чного эпителия: в норме (почти все первое полугодие) эпителий хорово развит и функционально, в =-том числе секреторно, активен; при дистрофии (шаль-начало октября) эпителий резко истончается на фон гибели и .лиминации части клеток и снижения функциональной активности остальных, ппи нарастании в них признаков кагаболизиа и чёткой делении на субпопу ляции "светлых" и "тёмных" клеток; при восстановлении (нсябрь-/с

- 25 -

кабрь) все показатели возвра^азтся к норке.

5. Структурные изменения киаечного эпителия сопровоадаятся изменениями пролиферативной (митотической и ДНК-с.штезирую^ей) активности его клеток. Динамика величин НИ (при среднегодовой Q,09±Q,Q2%) показала два периода подъёиа - в апреле и с ноября по январь при максимуме в декабре и два периода спада - в феврале и в ивне-сентябре. Величины ИКЯ, сходные на протявении Оольвей части года (1,8-2,22), резко снижаются в сентябре-октябре н достигают наибольвих в ноябре и особенно декабре.

6. Выявлены сезонные периода (ивль-август и феьраль), когда крайне низкие, близкие' к нулевыа, значения НИ сочетаются с довольно высокими значениями ИНЯ, что позволяет предполовигь накопление клеток в Ег-Фазе ии/отнческого цикла при блокировании перехода их в митоз. Тем самым, данное состояние кивечного эпителия моает рассматриваться как модель частичной клеточной синхронизации, очень мало известной для тканей морских беспозвоночных.

7. По совокупности данных, в годичном цикле япогской кукуна-рик HoiHo выделить особый (летне-раннеосенний) период, во время которого кивечннй эпителий подвергается отчетливой дистрофии (при торноаенни вступления клеток в нитоз и, у части оссбей, синтеза ДНК) с последующей его репарацией. Эти изменения выстил;;н пищеварительного тракта - совпадавеие по времени с максимальными температурами воды и с завераениьм процессов гаметогенеза к готов-ностьв к нересту мвотных данного зида - соответствуют, надо полагать, сезонному состоянии эстивации (или летней "спячки"), показанному у ряда видов голотурий на органном уровне.

СПИСОК РЙБОТ. ОПНШКОВШНХ ПО ТЕНЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Лейбсон Н.Л., Увева Л.Н., Фролова Л.Т., Елисейкина Я.Г., Долматов И.В. Особенности регенерации эпителиев пишева-рительного тракта у двустворчатых моллвсков и голотурий// Сравнительные аспекты изучения регенерации и клеточной пролиферации: Тез. Uli Всесовз. конф. по регенерации и клеточному

- 26 -

разнновении. 1985. К.: Наука. 4.1. С. 171-173.

Р.. Елисейкина К.Г. Морфологическая характеристика пищеварительной трубки японской кукумарии// Вкол. коря. 1988. Н5. С. 36-45.

3. Елисейкина Й.Г. Сезонная динамика состояния пищеварительного эпителия у японской кукумарии// III Всесовз. конф. по аорской биологии: Тез. докл. 1988. Киев. 4.1. С. 5-6.

4. Елисейкина К.Г. Ворфофункщпнальная характеристика пищеварительного тракта н внстилаащего эпителия у японской кукумарии// Цитология, биохимия и физиология морских организмов. Владивосток: ДВО fill СССР, 1990, С. 31-37.

5. Елисейкина И.Г. Норфофункциональная характеристика пищеварительного тркта и внстилзвзего эпителия н их сезонные изменения у японской кукимарии// Изучение строения, клеточного разкаовения' и регенерации тканей, главным образок, пищеварительного тракта у моллвсков и иглокоеих: Сб. науч. тр./ Ред. Лейбсон Н.Л. Владивосток. 1991. Деп. ВИНИТИ 26.08.91, Н 3539-В91. С. 34-48.

6. Елисейкина И.Г. Ультраструктурная организация выстилавшего эпителия пищеварительного тракта у японской кукуиарии// Тай Ее, С. 43-6С.

7. Елисейкина Н.Г. Сезонные изменения в пищеварительном эпителии японской кукумарии// Биол. коря. 1992. Н.1-2. С. 69-76.

М.Г. Еитсейкина

»¿ОИОФУНШОНАЛЬНЫ^ СОСТОИМ И ФИЛОЛОГИЧЕСКАЯ РЕГЕНЕРАЦИЯ ШСТИДАЩЕГО ЭПИТЕЛИЯ ШЩЗВАРКТЕЛЬНОГО "ТАКТА 7 ЯПОНСКОЙ НУКУМАРИИ

Автореферат

Подписано к печати 12.03.93 г. Формат 60x84/16. Печать офзетная. Усл.п..г. 1,4. Уч.-кзд.л. 1,29. Тираж ГОО экз. Ззказ 69.

Отпечатано ь участке оперативной полиграфия издательства "Дальнаука" 690600 Владивосток, Свэтлакская, 50