Морфофункциональное состояние клеток вагинальной жидкости у женщин при оппортунистических инфекциях влагалища

Теровская, Татьяна Юрьевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Морфофункциональное состояние клеток вагинальной жидкости у женщин при оппортунистических инфекциях влагалища
ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации по теме "Морфофункциональное состояние клеток вагинальной жидкости у женщин при оппортунистических инфекциях влагалища"

На правах рукописи

Теровская Татьяна Юрьевна

МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ КЛЕТОК ВАГИНАЛЬНОЙ ЖИДКОСТИ У ЖЕНЩИН ПРИ ОППОРТУНИСТИЧЕСКИХ ИНФЕКЦИЯХ ВЛАГАЛИЩА

03.00.25 - гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

2 6 НОЯ 2009

Томск - 2009

003485099

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Сибирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Научный руководитель:

доктор медицинских наук,

профессор Красножёнов Евгений Павлович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Потапов Алексей Валерьевич кандидат медицинских наук Бухарина Ирина Юрьевна

Ведущая организация:

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кемеровская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию», г. Кемерово.

Защита состоится /г 2009 г. в часов на заседании

диссертационного совета Д 208.096.03 при ГОУ ВПО «Сибирский государственный медицинский университет Росздрава» (634050, г. Томск, Московский тракт, 2).

С диссертацией можно ознакомиться в научно-медицинской библиотеке ГОУ ВПО «Сибирский государственный медицинский университет Росздрава».

Автореферат разослан « ^ » "//_2009 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

Герасимов А.В.

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы. В дерматовенерологии и гинекологии урогенитальные инфекции приобрели статус актуальной научной и клинической проблемы, так как публикации последних лет свидетельствуют об устойчивой тенденции к росту числа больных с инфекциями влагалища [Байрамова Г.Р., 2001; Анкирская A.C., 2006; Кира Е.Ф., 2008]. Реальную значимость приобретает возрастающая роль возбудителей оппортунистических вагинальных инфекций -условно-патогенных микроорганизмов. Наиболее распространенными оппортунистическими вагинальными инфекциями в настоящее время остаются вагинальный кандидоз, неспецифический вагинит и бактериальный вагиноз [Анкирская A.C., 2000; Сергеев А.Ю., 2000; Дмитриев Г.А., 2008].

Исследователи отмечают, что к 25 годам примерно половина всех женщин имеет хотя бы один эпизод кандидозного вульвовагинита, установленный врачом [Sobel J.D., 1993; Карпунина Т.И., 2003; Коломойцева Т.Н., 2004]. Неспецифичекские вагиниты составляют, по мнению ряда авторов, до 40% случаев обращения к гинекологам [Кисина В.И., 2005; Кира Е.Ф., 2008]. Бактериальный вагиноз обнаруживается в 30-50% среди вульвовагинитов, являясь предметом пристального изучения клиницистов и микробиологов во многих странах мира [Акопян Т.Э., 1996; Анкирская A.C., 2003]. Нет единого мнения исследователей по поводу состояния иммунитета при оппортунистических вагинальных инфекциях: изменения его при этих заболевании могут носить как общий, так и местный характер [Сергеев А.Ю., 2000; Коломойцева Т.Н., 2003; Кира Е.Ф., 2008].

В последнее время огромная роль при оппортунистических вагинальных инфекциях отводится факторам воздействия на макроорганизм метаболитов, образуемых условно-патогенными микроорганизмами. Экзо- и эндоферменты грибов рода Candida, стрептолизины, стрептокиназы, гиалуронидазы, липопротеиназы кокко-бациллярной флоры приводят к деградации эпителиоцитов, гибели или дисфункции лейкоцитов [Сергеев А.Ю., 2000; Анкирская A.C., 2006]. Рядом исследователей отмечена связь бактериального вагиноза с неопластическими процессами шейки матки: нитрозамины (продукты метаболизма строгих анаэробов) являются коферментами канцерогенеза и могут быть причастны к развитию карциномы

[Анкирская A.C., 2003; Дмитриев Г.А.. 2008]. Метаболиты условно-патогенных микроорганизмов играют роль в развитии воспалительных заболеваний органов малого таза, способствуют преждевременным родам, либо инфицированию плода [Анкирская A.C., 2006].

Основу местной противоинфекционной защиты составляет колонизационная резистентность, подразумевающая совокупность механизмов, придающих индивидуальную стабильность нормальной микрофлоре и обеспечивающая предотвращение заселения организма хозяина патогенными или условно-патогенными микроорганизмами. Динамическое равновесие в системе «макроорганизм-микрофлора-окружающая среда» на слизистой оболочке влагалища поддерживается благодаря многочисленным функциям индигенной микрофлоры, состоянию вагинального эпителия и факторам местной иммунной защиты: нейтрофильным гранулоцитам, лимфоцитам, макрофагам, лизоциму, секреторным иммуноглобулинам и др. [Санин A.B., 1993; Зиновьев A.C., 1997; Афанасьев С.С, 2004].

В настоящее время активно изучаются факторы местной противоинфекционной защиты слизистой оболочки влагалища при различных оппортунистических вагинальных инфекциях, однако характеризующие их показатели (лейкоцитарная реакция, уровень иммуноглобулинов, лизоцима и каталазы вагинальной жидкости), часто имеют противоречивый характер [Афанасьев С.С., 2000; Лебедева Т.Н., 2001; Рыбников Н.В., 2004]. В исследованиях сообщается о повреждающем действии метаболитов условно-патогенных микроорганизмов, но нет данных о степени повреждения эпителиоцитов и их количестве в вагинальной жидкости при различных оппортунистических инфекциях. Вопросы о воздействии условно-патогенных микроорганизмов на факторы, обуславливающие местную колонизационную резистентность, до сих пор остаются дискутабельными [Леденёва Л.И., 1996; Коршунов В.М., 1999; Никоненко А.Г., 2005].

Таким образом, приведенные данные свидетельствуют о необходимости более полного изучения морфофункционального состояния слизистой оболочки влагалища при оппортунистических вагинальных инфекциях, чтобы объективно оценить риск их возможного влияния на развитие гинекологических осложнений. Немаловажной остается проблема определения наиболее

показательных методов дифференцирования неспецифического вагинита, вагинального кандидоза и бактериального вагиноза, имеющих сходные клинико-симптоматические признаки.

Все вышеуказанное определяет актуальность представленной темы в теоретическом и практическом аспектах.

Цель исследования: оценить роль изменений морфофункционального состояния эукариотических и прокариотических клеток вагинальной жидкости в поддержании колонизационной резистентности слизистой оболочки влагалища при вагинальном кандидозе, неспецифическом вагините и бактериальном вагинозе.

Задачи исследования:

1. Изучить морфофункциональное состояние эпителиальных клеток отделяемого слизистой оболочки влагалища у пациентов при вагинальном кандидозе, неспецифическом вагините, бактериальном вагинозе.

2. Изучить морфофункциональное состояние нейтрофильных гранулоцитов, лимфоцитов и макрофагов в вагинальной жидкости у пациентов, страдающих вагинальным кандидозом, неспецифическим вагинитом, бактериальным вагинозом.

3. Определить количественное содержание эукариотических клеток микробного происхождения Candida albicans в вагинальной жидкости у больных вагинальным кандидозом, неспецифическим вагинитом, бактериальным вагинозом для выявления дисбаланса в микробиоценозе влагалища.

4. Исследовать количественные и качественные характеристики прокариотических клеток микробного происхождения (кокко-бациллярной флоры) в отделяемом слизистой оболочки влагалища у пациентов с вагинальным кандидозом, неспецифическим вагинитом, бактериальным вагинозом.

5. Определить индикаторные показатели оценки состояния колонизационной резистентности слизистой оболочки влагалища при вагинальном кандидозе, неспецифическом вагините и бактериальном вагинозе.

6. Определить роль особенности взаимодействия эукариотических и прокариотических клеток отделяемого влагалища в обеспечении противоинфекционной защиты при вагинальном кандидозе, неспецифическом вагините и бактериальном вагинозе.

Научная новизна. Впервые дана сравнительная оценка морфофункционального состояния показателей эукариотических и прокариотических клеток отделяемого слизистой оболочки влагалища женщин, страдающих неспецифическим вагинитом, вагинальным кандидозом и бактериальным вагинозом. Показано, что у пациентов с неспецифическим вагинитом и вагинальным кандидозом отмечаются высокие показатели каталазы и секреторного иммуноглобулина А, количества лейкоцитов, степени жизнеспособности и кислородзависимого метаболизма нейтрофилов. У пациентов, страдающих бактериальным вагинозом, отмечен наиболее низкий уровень количества, жизнеспособности и кислородзависимого метаболизма лейкоцитов, а так же каталазы, секреторного иммуноглобулина А в вагинальной жидкости. У всех пациентов с оппортунистическими вагинальными инфекциями отмечены значительные количества эпителиоцитов высокой степени деструкции и низкие показатели лизоцима и миелопероксидазы нейтрофильных гранулоцитов в отделяемом влагалища.

Теоретическая и практическая значимость. Настоящая работа содержит теоретические данные, существенно расширяющие представления о природе и роли «местного иммунитета», а с ним и о физиологических аспектах морфофункционального состояния отделяемого слизистой оболочки влагалища.

Представленная работа вносит вклад в более полное и всестороннее изучение патологических процессов на слизистой оболочке влагалища при заболеваниях, вызванных условно-патогенными микроорганизмами.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. При вагинальном кандидозе, неспецифическом вагините и бактериальном вагинозе изменения морфофункционального состояния клеток вагинальной жидкости носят разнонаправленный характер. При неспецифическом вагините и вагинальном кандидозе метаболиты условно-патогенных микроорганизмов стимулируют привлечение лейкоцитов из кровяного русла, подавляют функциональную активность нейтрофилов и макрофагов, не влияя на способность лимфоцитов к выработке иммуноглобулина А. При бактериальном вагинозе метаболиты, вырабатываемые микроорганизмами, ингибируют привлечение лейкоцитов, подавляют функциональную активность нейтрофилов, макрофагов и

лимфоцитов, обладают наиболее выраженными цитотоксическими свойствами.

2. Индикаторами колонизационной резистентности слизистой оболочки влагалища являются: степень деструкции эпителиоцитов, количество лейкоцитов, микробный статус, активность каталазы, рН, концентрация секреторного иммуноглобулина А в вагинальной жидкости. Нарушения морфофункционального состояния клеток отделяемого слизистой оболочки влагалища при вагинальном кандидозе, неспецифическом вагините и бактериальном вагинозе (высокая деструкция вагинального эпителия, снижение функциональной активности лейкоцитов, дисбаланс нормальной микрофлоры) указывают на подавление колонизационной резистентности репродуктивного тракта.

Апробация работы. Основные положения диссертации докладывались и обсуждались на VII международном конгрессе молодых ученых и специалистов «Науки о человеке» (Томск, 2006); на VIII международном конгрессе молодых ученых и специалистов «Науки о человеке» (Томск, 2007); на Российской научно-практической конференции «Современные аспекты этиопатогенеза, диагностики и лечения рака эндометрия» (Томск, 2007); на научно-практической конференции «Актуальные вопросы лучевой, функциональной и лабораторной диагностики» (Северск, 2007); на IX международном конгрессе молодых ученых и специалистов «Науки о человеке» (Томск, 2008); на ежегодной научной конференции «Дни иммунологии в Сибири» (Томск, 2008); на заседании областного научно-практического общества бактериологов (Томск, 2009).

Публикация результатов исследования. По теме диссертации опубликовано 8 работ, из них - 4 в журналах, рекомендованных перечнем ВАК.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 131 странице машинописного текста и состоит из введения, четырёх глав, выводов и списка использованной литературы, включающего 208 источников, из которых 139 отечественных и 69 иностранных. Работа иллюстрирована 14 рисунками и 15 таблицами.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Объект исследования. В работе представлены результаты комплексного обследования 57 женщин в возрасте от 18 до 40 лет с оппортунистическими вагинальными инфекциями (ОВИ), которые, в зависимости от этиологического фактора, были разделены на три группы: 18 женщин с вагинальным кандидозом (ВК), 25 - с неспецифическим вагинитом (НВ), 14 - с бактериальным вагинозом (БВ). Верификация диагноза проводилась путем комплексного лабораторно-диагностического обследования пациентов, включающего бактериоскопические и культуральные исследования. Женщины с ОВИ предъявляли жалобы на патологические вагинальные выделения, зуд и дискомфорт в области половых органов.

В контрольную группу были включены 20 клинически здоровых женщин с аналогичными возрастными характеристиками, не предъявлявших на момент осмотра жалоб, в ходе обследования которых не были выявлены ОВИ.

Критерии исключения: инфекции, передающиеся половым путем, изменения характерные для наступления ранней менопаузы, тяжелые соматические патологии, гормональные нарушения, беременность.

Пациенты наблюдались на базе женской консультации Клинической больницы №81 ФМБА России (г.Северск). Исследования проводились на кафедре микробиологии и вирусологии СибГМУ, в лаборатории клинической микробиологии Клинической больницы №81 (г.Северск), в лаборатории клеточных и молекулярно-биологических исследований НИИ ПЗ СО РАМН (г.Томск).

Материалом исследования служила вагинальная жидкость (ВЖ). Осмотр пациентов и забор материала осуществляла врач-гинеколог женской консультации. Исследование проводилось в соответствии с общепринятыми этическими требованиями.

Методы исследования:

1. Клинические методы: анализ анамнестических данных и гинекологический осмотр.

2. Цитологические методы:

а) Микроскопическое исследование ВЖ. Количественная и качественная оценка вагинальной микрофлоры оценивалась по

критерию R.P. Nugent в модификации Анкирской A.C. [ Nugent R.P. et al., 1991, Анкирская A.C., 2006];

б) Оценка степени деструкции вагинальных эпителиоцитов [Матвеева Л. А., 1973];

в) Подсчет лейкоцитов и эпителиоцитов в ВЖ осуществляли стандартными гематологическими методами [Козловская Л.В., 1975].

3. Цитохимические методы:

а) Определение степени жизнеспособности лейкоцитов в отделяемом влагалища [Дзержинская И.И., 1988; Соколов Е.И., 1998];

б) Кислородзависимый метаболизм нейтрофилов в ВЖ оценивали с помощью спонтанного НСТ-теста [Маянский А.Н., 1989];

в) Определение миелопероксидазы лейкоцитов проводили методом Грэхема-Кнолля [Яковенко Г.И., 1981].

4. Нефелометрические методы:

а) Определение активности лизоцима [Бухарин О.В., 1971];

б) Определение активности каталазы [Королюк М.А., 1988].

5. Иммунологический метод: содержание секреторного иммуноглобулина A (slgA) определяли методом радиальной иммунодиффузии в геле по Mancini et al. [Петров Р.В., 1997].

6. Определяли водородный показатель ВЖ.

7. Бактериологическое исследование осуществляли традиционным методом, производя посев материала на стандартный набор питательных сред. Культивировали микроорганизмы в аэробных и микроаэрофильных условиях. Видовую идентификацию проводили с использованием тест-систем и общепринятыми методами, согласно приказам МЗ СССР (Приказ № 535, 1985), используя номенклатуру Берджи, и сведения, обобщенные в руководствах по клинической микробиологии.

Оценку полученных результатов проводили методами статистического описания и проверки статистических гипотез. Для каждой выборки вычислялось среднее, стандартное отклонение. Проверка нормальности распределения проводилась с помощью критерия Колмогорова-Смирнова. При нормальном распределении переменных проверка гипотезы о равенстве выборочных средних выполнялась с помощью t-критерия Стьюдента для независимых выборок. В случае отсутствия согласия данных с нормальным распределением применялся непараметрический критерий Манна-Уитни. Различия считались достоверными при уровне значимости

р<0,05. С целью обнаружения связи между исследуемыми показателями проводили корреляционный анализ путём вычисления коэффициента ранговой корреляции Спирмена (г).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

В результате анализа анамнестических данных пациентов

было выявлено, что воспалительные заболевания органов малого таза (эндометрит, сальпингит, тубоовариальный абсцесс) у женщин, страдающих ВК, встречались в 5 раз чаще, у пациентов с НВ - в 3,2 раза чаще, у больных БВ - в 7,1 раза чаще, чем у клинически здоровых женщин.

Наибольший процент инфекций, передаваемых половым путем (гонорея, трихомонадная инфекция, хламидиоз), был отмечен в анамнезе пациентов, страдающих ВК (44,4%) и НВ (40,1%), где эти заболевания ранее встречались примерно в 4 раза чаще, чем в группе здоровых лиц.

Микоплазмозы в большем % случаев обнаруживались у больных БВ (57,1%). Функциональные кисты яичников чаще встречались у больных ВК (22,2%) и у лиц с БВ (28,5%).

Таким образом, у женщин, страдающих ВК, НВ и БВ, частота патологий женской половой сферы встречалась в большем числе случаев, чем у женщин группы сравнения. Наиболее высокий процент перенесенных ранее инфекций, передаваемых половым путем, отмечался у больных ВК и НВ. У пациентов с БВ в анамнезе воспалительные заболевания органов малого таза, микоплазмозы встречались в большем проценте случаев.

Морфофункциональная характеристика эпителиальных клеток слизистой оболочки влагалища. Цитологические исследования клеточного осадка отделяемого слизистой оболочки влагалища показали, что наиболее выраженные деструктивные изменения вагинального эпителия обнаруживались у больных БВ (табл. 1).

Полученные результаты можно объяснить длительным воздействием повреждающих факторов условно-патогенных микроорганизмов (УПМ) - экзотоксинов, липопротеиназ, гиалуронидазы и др. - на структуру эпителиоцитов, приводящим к изменению слизистой оболочки: нарушению фаз клеточного обновления и замещению нормальных эпителиоцитов функционально

неполноценными. Подтверждением этому является и проведенный корреляционный анализ, при котором была обнаружена прямая корреляция степени деструкции вагинальных эпителиоцитов от количества C.albicans (r=0,68, р<0,05), Streptococcus spp. (r=0,50, р<0,05) и G.vaginalis (r=0,79, р<0,05). Это указывает на то, что субстанции этих микроорганизмов определяют степень цитотоксичности среды, что приводит к более значительной деструкции эпителия, причем роль G.vaginalis в этом процессе более выражена.

Таблица 1

Степень деструкции эпителиальных клеток вагинальной жидкости (Х=1з )

Группы пациентов Количество эпителиальных клеток, % \

Деструкция 0 класса Деструкция 1 класса Деструкция 2 класса Деструкция 3 класса Деструкция J 4 класса

Здоровые женщины (п = 20) 89,55±3,01 7,84±0,45 1,05±0,09 1,06±0,07 0,50±0,07

Больные вагинальным кандидозом (п= 18) 61,40±3,98 Pi<0,05 15,45±0,96 pi<0,05 17,01±1,22 pi<0,05 5,03±1,24 pi <0,05 1,11±0,14 Pi<0,05

Больные неспецифическим вагинитом (п=25) 60,05±3,32 pi<0,05 34,07±0,69 Pi<0,05 р?<0,05 3,31 ±0,09 Pi<0,05 Рг<0,05 2,05±0,08 р,<0,05 р2<0,05 0,51 ±0,06 р2<0,05

Больные бактериальным вагинозом (п= 14) 34,29±2,11 р> <0,05 Р2<0,05 рз<0,05 23,46±0,78 Pi<0,05 Рг<0,05 Рз<0,05 19,67±1,20 р,<0,05 р3<0,05 20,12±2,02 pi <0,05 р2<0,05 рз<0,05 2,46±0,28 р,<0,05 р2<0,05 Рз<0,05

Примечание: р| - достоверность различий показателей по сравнению со здоровыми женщинами; рг - достоверность различий показателей по сравнению с больными вагинальным кандидозом: рч - достоверность различий показателей по сравнению с больными неспецифическим вагинитом.

Морфофункциональная характеристика клеток

лейкоцитарного ряда в вагинальной жидкости. Проведенные цитологические и цитохимические исследования показали, что у женщин с ВК в ВЖ общее количество лейкоцитов было в 4 раза больше (8,82±0,39-109/л, р<0,05), чем в группе контроля. У больных ВК степень жизнеспособности лейкоцитов (СЖЛ) достигала

48,33±3,42%, что в 6,4 раза больше, чем у здоровых лиц (табл. 2). Активность миелопероксидазы лейкоцитов (AMJ1) у больных ВК имела достоверно более низкие значения (1,41 ±0,05 усл.ед., р<0,05), чем у здоровых женщин. Процент активных нейтрофилов у больных ВК был в 1,4 раз больше (24,23±1,06%, р<0,05), а цитохимический индекс НСТ-теста - в 2 раза выше (2,24±0,10%, р<0,05), чем у клинически здоровых лиц.

У женщин, страдающих НВ, общее число лейкоцитов было в 2 раза больше (5,56±0,31 • 10%, р<0,05), чем у здоровых женщин. СЖЛ у больных НВ в 6,6 раз (50,05±2,79%, р<0,05) превышала процент жизнеспособных лейкоцитов у здоровых лиц. АМЛ у пациентов с НВ была в 1,4 раза меньше (1,56±0,07 усл.ед.), чем у женщин контрольной группы. Процент активных нейтрофилов (НСТ-тест) у пациентов с НВ имел более высокие значения (23,11±1,14%, р<0,05) в сравнении с контрольной группой. Цитохимический индекс НСТ-теста у женщин с НВ (2,11±0,15 усл.ед., р<0,05) в 1,9 раз превышал аналогичный показатель (1,1 ±0,17 усл.ед) клинически здоровых лиц.

У женщин, страдающих БВ, общее число лейкоцитов было в 4,9 раза меньше (0,54±0,02-109/л, р<0,05), чем у клинически здоровых пациентов. СЖЛ у женщин с БВ имела более низкие значения (1,4±0,25%, р<0,05), чем у пациентов других групп: на 6,10% меньше, чем в группе контроля, на 46,93% меньше, чем у больных ВК и на 48,65% ниже, чем у лиц с НВ. АМЛ у больных БВ была в 2 раза меньше (1,07±0,05 усл.ед., р<0,05), чем в контроле. Процент активных нейтрофилов (НСТ-тест) у больных БВ был в 3,4 раза меньше (5,12±0,48%, р<0,05), чем у клинически здоровых женщин. Цитохимический индекс НСТ-теста у больных БВ (0,76±0,07 усл.ед., р<0,05) был в 1,4 раза ниже аналогичного показателя здоровых лиц.

Выраженная лейкоцитарная реакция при ВК и НВ возможно обусловлена способностью грибов к глубокому проникновению в слои эпителия и высоким токсическим действием кокко-бациллярной УПМ, способствующих возникновению данных заболеваний [Лебедева Т.Н., 2004, Анкирская А.С., 2006].

Подтверждением этому является прямая корреляционная зависимость абсолютного числа лейкоцитов в ВЖ от количества C.albicans (r=0,79, р<0,05), Streptococcus spp. (r=0,67, р<0,05) и E.coli (r=0,77, р<0,05). Зарегистрированная отрицательная корреляционная связь абсолютного числа лейкоцитов от количеством Lactobacillus

spp. (r=~0,55, p<0,05). Это указывает на то, что выраженная местная лейкоцитарная реакция при ВК и HB индуцируется С.albicans, Streptococcus spp. и E.coli, а не Lactobacillus spp.

Таблица 2

Морфофункииональные показатели лейкоцитов в вагинальной жидкости ____(X±s)__

Показатели Группы пациентов

Здоровые женщины (п = 20) Больные вагинальным кандидозом (п = 18) Больные неспеиифи- ческим вагинитом (п = 25) Больные бактериальным вагинозом (п= 14)

Обшее количество лейкоцитов, 109/л 2,67±0,23 8,82±0.39 Pi<0,05 5,5б±0,31 Pi<0,05 Р2<0,05 0,54±0,02 pi<0,05 р2<0,05 рз<0,05

Количество сегментоядерных нейтрофилов, 109/л 2,32±0,21 6,75±0,46 р,с0,05 4,08±0,27 Pi<0,05 Р2<0,05 0,54±0,02 pi<0,05 р:<0,05 рз<0,05

Степень жизнеспособности лейкоцитов, % 7,50±!,25 48,33±3,42 р,О,05 50,05±2,79 р,<0,05 1,4±0,25 pi<0,05 р2<0,05 рз<0,05

Активность миелопероксидазы лейкоцитов, усл.ед. 2,25±0,06 1,41 ±0,05 р,<0,05 1,56±0,07 р,<0,05 1,07±0,05 pi <0,05 Р2<0,05 рз<0,05

Количество активных нейтрофилов, % !7,67±],12 24,23±1,06 р,<0,05 23,11 ±1,14 Pi<0,05 5,12±0,48 р,<0,05 Р2<0,05 рз<0,05

Средний цитохимический индекс (НСТ-тест), усл.ед. 1,1±0,17 2,24*0,10 Pi<0,05 2.11±0,15 pi<0,05 0,76±0,07 pi>0,05 Р2<0,05 рз<0,05

Примечание: pi - достоверность различий показателен по сравнению со здоровыми женщинами; рг - достоверность различий показателей по сравнению с больными вагинальным кандидозом; рз - достоверность различий показателей по сравнению с больными неспецифическим вагинитом.

Высокие показатели СЖЛ при ВК и HB вероятно обусловлены не уменьшением их гибели, а притоком из кровеносного русла «свежих» клеток вследствие воспаления. Обнаруженная обратная корреляционная зависимость процентного содержания живых лейкоцитов от количества C.albicans, Streptococcus spp. (r=-0,82,

р<0,05) и E.coli (г=-0,72, р<0,05) указывает на то, что субстанции этих микроорганизмов определяют степень цитотоксичности среды.

При проведении корреляционного анализа зарегистрирована отрицательная корреляционная связь абсолютного количества лейкоцитов от количества Lactobacillus spp. (r=-0,55, р<0,05) и G.vaginalis (r=-0,34, р<0,05). Это свидетельствует о том, что G.vaginalis способны затормаживать местные клеточные противоинфекционные реакции.

Результаты цитологического исследования отделяемого слизистой оболочки влагалища показали, что макрофаги были обнаружены только у пациентов с ВК (1,06±1,9М09/л) и с HB (0,83±0,03-109/л) (рис.1).

При нефелометрической оценке активности лизоцима в отделяемом слизистой оболочки влагалища было обнаружено, что у женщин, страдающих ВК, активность лизоцима была в 1,7 раз ниже (6,3±0,49 мкг/мл, р<0,05), у пациентов с HB - в 1,9 раз меньше (5,4±0,41 мкг/мл, р<0,05), у больных БВ (2,1 ±0,91 мкг/мл, р<0,05) - в 5 раз меньше, чем у здоровых лиц.

Количество лимфоцитов в отделяемом слизистой оболочки влагалища у больных ВК в 3,2 раза больше (1,05±0,09-109/л, р<0,05), чем у женщин контрольной группы и в 1,6 раз больше, чем у пациентов с HB (0,63±0,03-109/л, р<0,05). У больных БВ лимфоциты в вагинальном секрете выявлены не были.

Определение содержания slgA в ВЖ методом радиальной иммунодиффузии в геле обнаружило, что у пациентов с ВК количество slgA в ВЖ (1,25±0,06 г/л, р<0,05) в 1,4 раза больше, а у лиц с HB это значение (1,09±0,04г/л, р<0,05) в 1,3 раза выше аналогичного показателя клинически здоровых лиц. Для больных БВ было характерно низкое содержание slgA (0,41 ±0,03 г/л, р<0,05): в 2 раза меньше, чем у здоровых женщин.

Выявленные изменения могут быть обусловлены тем, что при ВК и HB происходит активная миграция лимфоцитов из слизистой оболочки влагалища. Антигенпрезентирующие макрофаги стимулируют пролиферацию и дифференциацию B-лимфоцитов в антителообразующие плазмоциты, которые осуществляют синтез slgA. Дефицит slgA в ВЖ у пациентов с БВ может быть следствием нарушения регенерации эпителиоцитов, ведущей к угнетению синтеза секреторного компонента и сборки slgA. Длительное антигенное раздражение метаболитами G.vaginalis, а так же

способность гарднерелл оставаться нераспознанными собственной иммунной системой может приводить к угнетению локальной противомикробной защиты [Кубанова A.A., 1996, Klocker U., 2000].

□ Количество секреторного иммуноглобулина Л

□ Активность лизоцима вагинальной жидкости

В Количество макрофагов

■ Количество лимфоцитов

Рис. 1. Показатели морфофункционального состояния лимфоцитов и макрофагов отделяемого слизистой оболочки влагалища (о - достоверность различий показателей по сравнению с контролем при р<0,05; • - достоверность различий показателей по сравнению с больными вагинальным кандидозом при р<0,05; ♦ - достоверность различий показателей по сравнению с больными неспецифическим вагинитом при р<0,05).

Подтверждением этому является установленная прямая корреляционная зависимость между содержанием slgA от количества Lactobacillus spp. (r=0,47, р<0,05), Streptococcus spp. (r= 0,49, p<0,05) и E.coli (r=0,48, p<0,05). Это свидетельствует о способности данных микроорганизмов стимулировать реакции, приводящие к выработке slgA. Содержание slgA в отделяемом влагалища имело обратную корреляционную зависимость от количества G.vaginalis (г=-0,66, р<0,05), что может свидетельствовать о подавлении G.vaginalis секреции slgA.

Таким образом, было обнаружено, что для женщин, страдающих ВК и НВ, характерны высокие показатели общего количества лейкоцитов, процента активированных лейкоцитов и их жизнеспособности, а так же концентрации slgA. В то же время у женщин с ВК и НВ отмечалась низкая активность миелопероксидазы и лизоцима. При БВ изучаемые показатели, характеризующие клеточный и гуморальный факторы местной противоинфекционной защиты, имели наиболее низкие значения.

Морфофункциональное состояние эукариотических и прокариотических клеток микробного происхождения отделяемого слизистой оболочки влагалища. В ходе проведенного бактериологического исследования отделяемого слизистой оболочки влагалища у 10% клинически здоровых женщин были обнаружены эукариотические клетки микробного происхождения C.albicans в ВЖ в количестве 1,2±0,2 1 lg КОЕ/мл. У пациентов с ВК C.albicans выявлялись в 4,6 раз больше (5,5±1,3 lg КОЕ/мл, р<0,05), чем у здоровых женщин. У 16% женщин с НВ C.albicans были обнаружены в титре 1,5±0,2 lg КОЕ/мл. У 21% женщин с БВ C.albicans были обнаружены в количестве 1,8±0,3 lg КОЕ/мл (рис.2).

Результаты бактериологического и бактериоскопического исследования ВЖ показали наличие у пациентов в отделяемом слизистой оболочки влагалища прокариотических бациллярных клеток: Lactobacillus spp., E.coli и G.vaginalis. Выделенные из ВЖ палочковидные УПМ оценивали на наличие у них вирулентных свойств - гемолитической активности (рис. 3).

У женщин, страдающих ВК, Lactobacillus spp. были обнаружены в количестве на 30,8% меньшем (4,5±0,9 lg КОЕ/мл, р<0,05), чем у здоровых лиц. У больных НВ Lactobacillus spp. были выявлены в 20% случаев, их титр был в 3 раза был ниже (2,1±0,4 lg КОЕ/мл, р<0,05), чем аналогичный показатель в группе контроля. У пациентов, страдающих БВ, Lactobacillus spp. не были обнаружены.

E.coli у 16,5% больных ВК выявлялись в количестве 1,3±0,7 lg КОЕ/мл (зона гемолиза составляла 2,45±0,15 мм). У пациентов, страдающих НВ, E.coli выявлялась в 20% случаев в количестве 3,1±0,7 lg КОЕ/мл (зона гемолиза - 2,51±0,17 мм). В культуральных посевах женщин с БВ E.coli отсутствовала.

G. vaginalis выявлялась только у женщин с БВ в титре 5,7±1,0 lg КОЕ/мл (зона гемолиза - 2,42±0,15 мм).

В результате проведенных исследований в ВЖ были обнаружены кокковые бактериальные клетки: Staphylococcus spp., Enterococcus spp., Streptococcus spp. (рис. 2). Выделенные микроорганизмы подвергали оценке их биологических свойств с целью определения степени вирулентности: наличие лецитиназной, плазмокоагулазной и гемолитической активности (рис. 3).

G. vaginalis

Streptococcus spp. 1 !.,, - -■' ~i c e

a-haem '''■"'■' •'•'■•'■'■'•

Streptococcus spp, I I | ,

ß-haem -л-л.у^^^ул^ул^л!

Eriterocococcus ——1» Iii ...... .........,

spp.

*Staphylococ. spp.

St.aureus

E.coli

C.albicans

Lactobacillus spp.

0 1 2 3 4 5 6 7

Количество микроорганизмов, КОЕ/мл

Ш Больные бактериальным вагинозом 0 Больные неспецифическим вагинитом И Больные вагинальным кандндозом □ Здоровые женщины

Рис. 2. Содержание эукариотических и прокариотических бактериальных клеток в отделяемом слизистой оболочки влагалища (*51арЬу1ососсиз зрр. -коагулазонегативные стафилококки; о - достоверность различий по сравнению со здоровыми женщинами при р<0,05; • - достоверность различий по сравнению с больными вагинальным кандидозом).

3~г

3-5"

?! 1

¿■TtT f+ffi—:ш-ш , лхгр—' -^ЯЪ

Здоровые Больные ВК Больные ИВ Больные БВ

Е Относительное количество гемолитических штаммов G.vaginalis

□ Относительное количество гемолитических штаммов St.aureus

И Относительное количество а-гемолитических Streptococcus spp.

□ Относительное количество в-гемолитичсских Streptococcus spp.

В Относительное количество гемолитических штаммов Е.соМ

Рис. 3. Биологические свойства прокариотических клеток отделяемого слизистой оболочки влагалища у женщин с оппортунистическими вагинальными инфекциями (ВК - вагинальный кандидоз; HB неспецифический вагинит; БВ - бактериальный вагиноз).

У 25% клинически здоровых женщин выявлялись коагулазонегативные стафилококки (1,2±0,3 lg КОЕ/мл), не обладавшие гемолитической, плазмокоагулазной и лецитиназной активностью. У 10% здоровых лиц - а-гемолитические Streptococcus spp. в титре 1,3±0,3 lg КОЕ/мл (зона гемолиза 1,22±0,10 мм).

У 11% больных ВК были обнаружены коагулазонегативные стафилококки в титре на 50% большем (2,5±0,4 lg КОЕ/мл, р<0,05), чем у здоровых женщин (зона гемолиза - 1,7б±0,12 мм). У 22% пациентов с ВК обнаруживались Enterococcus spp. в количестве 1,2±0,3 lg КОЕ/мл (зона гемолиза - 2,08±0,13 мм.), у 11% -а-гемолитические Streptococcus spp. в титре 1,5±0,3 lg КОЕ/мл (зона гемолиза - 1,32±0,12 мм) и ß-гемолитические Streptococcus spp. в количестве 2,8±0,4 lg КОЕ/мл (зона гемолиза - 1,89±0,14 мм).

У женщин с HB выявлялись коагулазонегативные стафилококки в количестве 3,1 ±0,4 lg КОЕ/мл (зона гемолиза - 1,81±0,14 мм), что было в 2,6 раза больше, чем у женщин контрольной группы. У 20% пациентов с HB были выявлены Enterococcus spp. в титре 5,6±0,5 lg КОЕ/мл с зоной гемолиза - 2,10±0,13 мм. У этой группы обследуемых обнаруживались а-гемолитические Streptococcus spp. в

титре 5,8±0,6 lg КОЕ/мл (зона гемолиза - 1,49±0,11 мм) и В-гемолитические Streptococcus spp. в титре 4,9±0,5 lg КОЕ/мл (зона гемолиза - 2,31 ±0,11 мм). У 20% лиц с НВ выявлялся St.aureus (5,1±0,4 lg КОЕ/мл), все штаммы которого проявляли гемолитические свойства (зона гемолиза - 3,10±0,15 мм), лецитиназную (3,56±0,12 мм) и плазмокоагулазную активность (2,38±0,09 ч).

У женщин, страдающих БВ, аэробные кокковые бактериальные клетки в отделяемом слизистой оболочки влагалища отсутствовали.

Полученные данные могут быть обусловлены тем, что при снижении колонизационной резистентности происходит гиперпродукция УПМ, которые, конкурируя за сайты прикрепления эпителиоцитов, проявляют вирулентные свойства, частично или полностью вытесняя лактобактерии. Подтверждением этому является обнаруженная обратная корреляционная зависимость между количеством Lactobacillus spp., с одной стороны, процентом выявления C.albicans (r=-0,59, р<0,05), Streptococcus spp. (r=-0,81, р<0,05) и E.coli (r=-0,61, р<0,05), с другой стороны. Это указывает на антагонизм этих представителей вагинальной микрофлоры.

Таким образом, дисбиотические изменения микробиоценоза влагалища у больных ВК и НВ характеризовались подавлением Lactobacillus spp., колонизацией слизистой влагалища C.albicans и кокко-бациллярной УМП, обладавшей признаками вирулентности (гемолитической, лецитиназной, плазмокоагулазной активностью). У женщин с БВ Lactobacillus spp. и кокко-бациллярная аэробная УПМ отсутствовали, у части лиц обнаруживались C.albicans, G.vaginalis обладала гемолитической активностью.

Активность каталазы и водородный показатель вагинальной жидкости. Исследования активности каталазы (АК) и рН отделяемого слизистой оболочки влагалища позволили установить, что у больных вагинальным кандидозом АК была в 2 раза больше (98,6±4,41мкат/л, р<0,05), чем у клинически здоровых лиц. Водородный показатель ВЖ у женщин с ВК был на 21% меньше (рН=3,25±0,06, р<0,05), чем аналогичный показатель у здоровых лиц (рис. 4).

Больные неспенифическим вагинитом

Больные бактериальным вагинотом

ваги нальнмм

кандидозом

Больные

Здоровые женщины

100

150

200

250 %

К Активность каталаи.1

□ Количество 1,асЮЬасШи5 .«рр.

Э Водородный показатель

Рис. 4. Показатели местной противоинфекционной зашиты в вагинальной жидкости (о- достоверность различий показателей по сравнению со здоровыми женщинами при р<0,05; • - достоверность различий показателей по сравнению с больными вагинальным кандидозом при р<0,05; ♦ - достоверность различий показателей по сравнению с больными неспецифическим вагинитом при р<0,05).

АК у больных НВ (68,37±2,64 мкат/л, р<0,05) в 1,4 раза превышала аналогичное значение у здоровых женщин. Водородный показатель отделяемого слизистой влагалища у больных НВ (рН=4,97±0,08, р<0,05) был на 16,4% больше аналогичного значения в контрольной группе. У пациентов, страдающих БВ, отмечались наиболее низкие значения АК (24,83±1,31 мкат/л, р<0,05) по сравнению с аналогичными параметрами в группе здоровых женщин, у больных ВК и НВ. РН отделяемого влагалища у женщин с БВ (рН=6,20±0,15, р<0,05) в 1,5 раз больше, чем у здоровых лиц.

Такие результаты могут быть обусловлены тем, что при ВК и НВ лактобактерии, грибы и аэробные УПМ обеспечивают выработку каталазы, которая предотвращает действие перекиси водорода, вырабатываемой перекись-продуцирующими лактобактериями.

Низкая активность каталазы при БВ вероятно обусловлена отсутствием лактобактерий и аэробной УПМ и, как следствие, сниженной антиоксидантной защитой ПЭС влагалища [Сергеев А.Ю., 2003; Степанькова Е.А., 2007].

Увеличение рН в отделяемом слизистой оболочки влагалища при НВ и БВ может быть следствием снижения (отсутствия) Lactobacillus spp, вырабатывающих молочную и другие жирные кислоты. Метаболиты анаэробов и G.vaginalis, образующиеся в процессе маслянокислого и пропионопислого анаэробного брожения, способствуют защелачиванию среды [Анкирская А.С., 2000]. Снижение рН у пациентов с ВК связано со способностью С.albicans усваивать аммиачный и органический азот в среде обитания [Домарадский И.В,, 2007].

Изменения морфофункционального состояния слизистой влагалища при данных патологиях обуславливают снижение колонизационной резистентности и нарушение местного иммунитета слизистой влагалища. Это может способствовать увеличению риска присоединения других инфекций урогенитального тракта.

ВЫВОДЫ

1. Для пациентов с неспецифическим вагинитом, вагинальным кандидозом и бактериальным вагинозом характерны изменения морфофункционального состояния клеток вагинальной жидкости, характеризующиеся высокими показателями деструкции эпителиоцитов. Наиболее выражена деструкция эпителия у пациентов с бактериальным вагинозом.

2. У женщин с неспецифическим вагинитом и вагинальным кандидозом обнаружена выраженная лейкоцитарная реакция с высокой жизнеспособностью клеток и дисбалансом их функциональной активности (высокие показатели кислородзависимого метаболизма нейтрофилов и биосинтеза секреторного иммуноглобулина А, низкие значения лизоцима). У женщин с бактериальным вагинозом отмечается подавление функциональной активности лейкоцитов и лимфоцитов: низкие показатели фагоцитарной способности нейтрофилов, угнетение продукции лизоцима и подавление секреции иммуноглобулина А.

3. Низкий уровень миелопероксидазы лейкоцитов у всех больных с оппортунистическими вагинальными инфекциями и активности

каталазы вагинальной жидкости у пациентов с бактериальным вагинозом указывают на угнетение факторов антиоксидантной защиты при данных патологиях.

4. Дисбаланс прокариотических и эукариотических клеток в вагинальной жидкости больных оппортунистическими вагинальными инфекциями проявляется замещением индигенной флоры условно-патогенными микроорганизмами, проявляющими гемолитические, лецитиназные и плазмокоагулазные свойства.

5. Наиболее индикаторными показателями оценки состояния колонизационной резистентности слизистой оболочки влагалища при вагинальном кандидозе, неспецифическом вагините и бактериальном вагинозе являются степень деструкции эпителиоцитов, количество лейкоцитов, микробный статус, активность каталазы, pH, уровень секреторного иммуноглобулина А в вагинальной жидкости.

6. При взаимодействии эукариотических и прокариотических клеток отделяемого влагалища у пациентов с оппортунистическими вагинальными инфекциями метаболиты условно-патогенных микроорганизмов способствуют повреждению вагинального эпителия, снижению функциональной способности лейкоцитов и лимфоцитов, что приводит к подавлению местного иммунитета.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Теровская, Т.Ю. Морфофункционапьное состояние отделяемого клеток влагалища при бактериальном вагинозе и вагинитах у женщин, проживающих в городе Северске [Текст] / Теровская Т.Ю., Красноженов E.H., Алпатова Н.И. // Науки о человеке: материалы VII конгресса молодых ученых и специалистов / Сибирский гос.мед.ун-т. - Томск, 2006. - С.92-93.

2. Теровская, Т.Ю. Колонизационная резистентность слизистой влагалища у женщин с доброкачественными опухолями в анамнезе [Текст] / Теровская Т.Ю., Красноженов E.H., Алпатова Н.И. // Сибирский онкологический журнал. - 2007. - Прилож, 1. -С.172-173.

3. Теровская, Т.Ю. Оппортунистические вагинальные инфекции у жительниц города Северска [Текст] / Теровская Т.Ю., Красноженов E.H., Алпатова Н.И. // Науки о человеке: материалы VIII конгресса молодых ученых и специалистов / Сибирский гос.мед.ун-т. - Томск, 2007. - С. 161-163.

4. Теровская, Т.Ю. Клинико-лабораторные исследования при дисбиозе влагалища [Текст] / Теровская Т.Ю., Красноженов E.H., Алпатова Н.И. // Материалы научно-практической конференции «Актуальные вопросы лучевой, функциональной и лабораторной диагностики». - Северск, 2007. - С. 76-78.

5. Теровская, Т.Ю. Состояние противоинфекционной защиты слизистой оболочки влагалища при вагинальном кандидозе [Текст] / Теровская Т.Ю., Красноженов E.H., Алпатова Н.И. // Науки о человеке: материалы IX конгресса молодых ученых и специалистов / Сибирский гос.мед.ун-т. - Томск, 2008. -С.77-78.

6. Теровская, Т.Ю. Факторы кислородзависимой бактерицидности вагинальной жидкости при неспецифическом вагините и бактериальном вагинозе [Текст] / Теровская Т.Ю., Красноженов Е.П. // Сибирский медицинский журнал. - 2008. - Т. 23., № 3. - вып.1. - С. 120-121.

7. Теровская, Т.Ю. Колонизационная резистентность репродуктивного тракта. женщин при оппортунистических вагинальных инфекциях [Текст] / Теровская Т.Ю. // Сибирский медицинский журнал. - 2008. - Т. 23., № 3. -вып.1.-С.120.

8. Теровская, Т.Ю. Состояние факторов местной противоинфекционной защиты при оппортунистических вагинальных инфекциях [Текст] / Теровская Т.Ю., Ахременко Я.А., Красноженов Е.П. // Дальневосточный медицинский журнал. - 2008. - № 4. - С. 24-26.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ активность каталазы активность лизоцима

активность миелопероксидазы лейкоцитов бактериальный вагиноз вагинальная жидкость вагинальный кандидоз неспецифический вагинит оппортунистические вагинальные инфекции степень жизнеспособности лейкоцитов секреторный иммуноглобулин А условно-патогенная микрофлора

АК

АЛ

АМЛ

БВ

ВЖ

ВК

ови сжл

slgA УПМ

Тираж 100. Заказ № 1054. Томский государственный университет систем управления и радиоэлектроники 634050, г. Томск, пр. Ленина, 40. Тел.:53-30-18.

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Теровская, Татьяна Юрьевна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Клеточный состав и морфофункциональные особенности отделяемого слизистой оболочки влагалища.

1.2. Морфофункциональное состояние отделяемого слизистой оболочки влагалища при различных патологических состояниях.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Характеристика обследуемых групп.

2.2. Методы исследования.

2.2.1. Цитологические методы исследования вагинальной жидкости.

2.2.1.1. Методика забора вагинального содержимого.

2.2.1.2. Микроскопия мазка вагинальной жидкости.

2.2.1.3. Определение степени деструкции эпителиальных клеток.

2.2.1.4. Определение количества эпителиальных клеток.

2.2.1.5. Определение общего количества лейкоцитов и подсчет лейкоцитарной формулы.

2.2.2. Методы определения функциональной активности лейкоцитов в вагинальной жидкости.

2.2.2.1. Определение жизнеспособности лейкоцитов.

2.2.2.2. НСТ - тест (спонтанный вариант).

2.2.2.3. Определение миелопероксидазы лейкоцитов методом Грэхема - Кнолля.

2.2.3. Методы исследования гуморальных факторов местного иммунитета и гомеостаза в вагинальной жидкости.

2.2.3.1. Определение активности лизоцима.

2.2.3.2. Определение концентрации иммуноглобулина А.

2.2.3.3. Определение каталазы в вагинальной жидкости.

2.2.3.4. Определение водородного показателя вагинальной жидкости.

2.2.4. Методы исследования качественного и количественного состава микрофлоры в отделяемом слизистой оболочки влагалища.

2.2.5. Статистическая обработка результатов.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Анализ анамнестических данных у пациентов.

3.2. Морфофункциональное состояние эукариотических клеток вагинальной жидкости.

3.2.1 Морфофункциональная характеристика эпителиальных клеток вагинальной жидкости.

3.2.2. Морфофункциональная характеристика клеток лейкоцитарного ряда в вагинальной .жидкости.

3.2.3. Количественное содержание эукариотических клеток микробного происхождения в отделяемом слизистой оболочки влагалища

3.3. Морфофункциональное состояние прокариотических микробных клеток в отделяемом слизистой оболочки влагалища.

3.3.1. Бациллярная микрофлора в отделяемом слизистой оболочки влагалища.

3.3.2. Кокковая микрофлора отделяемого слизистой оболочки влагалища.

3.3.3. Активность каталазы и водородный показатель вагинальной жидкости.

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Морфофункциональное состояние клеток вагинальной жидкости у женщин при оппортунистических инфекциях влагалища"

Актуальность проблемы. В дерматовенерологии и гинекологии урогенитальные инфекции приобрели статус актуальной научной и клинической проблемы, так как публикации последних лет свидетельствуют об устойчивой тенденции к росту числа больных с инфекциями влагалища [8, 15, 57]. Реальную значимость приобретает возрастающая роль возбудителей оппортунистических вагинальных инфекций - условно-патогенных микроорганизмов. Наиболее распространенными оппортунистическими вагинальными инфекциями в настоящее время остаются вагинальный кандидоз, неспецифический вагинит и бактериальный вагиноз [7, 23, 35].

Исследователи отмечают, что к 25 годам примерно половина всех женщин имеет хотя бы один эпизод кандидозного вульвовагинита, установленный врачом [53, 61, 201]. Неспецифичекские вагиниты составляют, по мнению ряда авторов, до 40% случаев обращения к гинекологам [57, 58]. Бактериальный вагиноз обнаруживается в 30-50% среди вульвовагинитов, являясь предметом пристального изучения клиницистов и микробиологов во многих странах мира [3, 10]. Нет единого мнения исследователей по поводу состояния иммунитета при оппортунистических вагинальных инфекциях: изменения его при этих заболевании могут носить как общий, так и местный характер [57, 65, 118].

В последнее время огромная роль при оппортунистических вагинальных инфекциях отводится факторам, воздействия на макроорганизм метаболитов, образуемых условно-патогенными микроорганизмами. Экзо- и. эндоферменты грибов рода Candida, стрептолизины, стрептокиназы, гиалуронидазы, липопротеиназы кокко-бациллярной флоры приводят к деградации эпителиоцитов, гибели или дисфункции лейкоцитов [8, 119]. Рядом исследователей отмечена связь бактериального вагиноза с неопластическими процессами шейки матки: нитрозамины (продукты метаболизма строгих анаэробов) являются коферментами канцерогенеза и могут быть причастны к развитию карциномы [10, 35]. Метаболиты условно-патогенных микроорганизмов играют роль в развитии воспалительных заболеваний органов малого таза, способствуют преждевременным родам, либо инфицированию плода [8].

В настоящее время активно изучаются факторы местной противоинфекционной защиты слизистой оболочки влагалища при различных оппортунистических вагинальных инфекциях, однако, характеризующие их показатели (лейкоцитарная реакция, уровень иммуноглобулинов, лизоцима и каталазы вагинальной жидкости) часто имеют противоречивый характер [11, 27, 33]. В исследованиях сообщается о повреждающем действии метаболитов условно-патогенных микроорганизмов, но нет данных о степени повреждения эпителиоцитов и их количестве в вагинальной жидкости при различных оппортунистических инфекциях. Вопросы о воздействии условно-патогенных микроорганизмов на факторы, обуславливающие местную колонизационную резистентность, до сих пор остаются дискутабельными [66, 77, 93].

Таким образом, приведенные данные свидетельствуют о необходимости более полного изучения морфофункционалъного состояния слизистой оболочки влагалища при оппортунистических вагинальных инфекциях, чтобы объективно оценить риск их возможного влияния на развитие гинекологических осложнений. Немаловажной остается проблема определения наиболее показательных методов дифференцирования неспецифического вагинита, вагинального кандидоза и бактериального вагиноза, имеющих сходные клинико-симптоматические признаки.

Все вышеуказанное определяет актуальность представленной темы в теоретическом и практическом аспектах.

Цель исследования: оценить роль изменений морфофункционалъного состояния эукариотических и прокариотических клеток вагинальной жидкости в поддержании колонизационной резистентности слизистой оболочки влагалища при вагинальном кандидозе, неспецифическом вагините и бактериальном вагинозе.

Задачи исследования:

Научная новизна. Впервые дана сравнительная оценка морфофункционального состояния показателей эукариотических и прокариотических клеток отделяемого слизистой влагалища женщин, страдающих неспецифическим вагинитом, вагинальным кандидозом и бактериальным вагинозом. Показано, что у пациентов с неспецифическим вагинитом и вагинальным кандидозом отмечаются высокие показатели каталазы и секреторного иммуноглобулина А, количества лейкоцитов, степени жизнеспособности и кислородзависимого метаболизма нейтрофилов. У пациентов, страдающих бактериальным вагинозом, отмечен наиболее низкий уровень количества, жизнеспособности и кислородзависимого метаболизма лейкоцитов, а так же каталазы, секреторного иммуноглобулина А в вагинальной жидкости. У всех пациентов с оппортунистическими вагинальными инфекциями отмечены значительные количества эпителиоцитов высокой степени деструкции и низкие показатели лизоцима и миелопероксидазы нейтрофильных гранулоцитов в отделяемом влагалища.

Основные положения, выносимые на защиту:

2. Индикаторами колонизационной резистентности слизистой оболочки влагалища являются: степень деструкции эпителиоцитов, количество лейкоцитов, микробный статус, активность каталазы, рН, концентрация секреторного иммуноглобулина А в вагинальной жидкости. Нарушения морфофункционалъного состояния клеток отделяемого слизистой оболочки влагалища при вагинальном кандидозе, неспецифическом вагините и бактериальном вагинозе (высокая деструкция вагинального эпителия, снижение функциональной активности лейкоцитов, дисбаланс нормальной микрофлоры) указывают на подавление колонизационной резистентности репродуктивного тракта.

Апробация работы. Основные положения диссертации докладывались и обсуждались на VII международном конгрессе молодых ученых и специалистов «Науки о человеке» (Томск, 2006); на VIII международном конгрессе молодых ученых и специалистов «Науки о человеке» (Томск, 2007); на Российской научно-практической конференции «Современные аспекты этиопатогенеза, диагностики и лечения рака эндометрия» (Томск, 2007); на научно-практической конференции «Актуальные вопросы лучевой, функциональной и лабораторной диагностики» (Северск, 2007); на IX международном конгрессе молодых ученых и, специалистов «Науки о человеке» (Томск, 2008); на ежегодной научной конференции «Дни иммунологии в Сибири» (Томск, 2008); на заседании областного научно-практического общества бактериологов (Томск, 2009).

Объем н структура работы. Диссертация изложена на 131 странице машинописного текста и состоит из введения, четырёх глав, выводов и списка использованной литературы, включающего 208 источников, из которых 139 отечественных и 69 иностранных. Работа иллюстрирована 14 рисунками и 15 таблицами.

Заключение Диссертация по теме "Гистология, цитология, клеточная биология", Теровская, Татьяна Юрьевна

109 ВЫВОДЫ

3. Низкий уровень миелопероксидазы лейкоцитов у всех больных с оппортунистическими вагинальными инфекциями и активности каталазы вагинальной жидкости у пациентов с бактериальным вагинозом указывают на угнетение факторов антиоксидантной защиты при данных патологиях.

4. Дисбаланс прокариотических и эукариотических клеток в вагинальной жидкости больных с оппортунистическими вагинальными инфекциями проявляется замещением индигенной флоры условно-патогенными микроорганизмами, проявляющими гемолитические, лецитиназные и плазмокоагулазные свойства.

5. Наиболее индикаторными показателями оценки состояния колонизационной резистентности слизистой оболочки влагалища при вагинальном кандидозе, неспецифическом вагините и бактериальном вагинозе являются степень деструкции эпителиоцитов, количество лейкоцитов, микробный статус, активность каталазы, рН, уровень секреторного иммуноглобулина А в вагинальной жидкости.

Ill

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Теровская, Татьяна Юрьевна, Томск

1. Абрамов, М.Г. Гематологический атлас / М.Г. Абрамов. М.: Медицина, 1985.-344 с.

2. Адгезивные взаимодействия грибов рода Candida с эпителиальными клетками слизистых оболочек человека / В.Л. Быков, Н.Р. Корнев, Е.В. Величко // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1985. -№ 10.-С. 88-94.

3. Акопян, Т.Э. Бактериальный вагиноз и беременность / Т.Э. Акопян // Акушерство и гинекология. 1996. - № 6. - С. 3-5.

4. Актуальные проблемы лечения урогенитального кандидоза / Н.В. Кунгуров, Н.М. Герасимова, И.Ф. Вишневская // Акушерство и гинекология. 2005.- №4.-С. 50-52.

5. Алешукина, A.B. Медицинская микробиология: Учебное пособие / A.B. Алешукина. Ростов на Д.: Феникс, 2003. - 480 с.

6. Анаэробная инфекция в акушерско-гинекологической практике / Ю.В. Цвелев, В.И. Кочеровец, Е.Ф. Кира, Н.В. Баскаков Санкт-Петербург: Питер Пресс, 1995.-320 с.

7. Анкирская, A.C. Неспецифические вагиниты / A.C. Анкирская // Клиническая микробиология и антимикробная терапия. 2000. - № 2. - С. 23-28.

8. Анкирская, A.C. Опыт микробиологической диагностики оппортунистических инфекций влагалища / A.C. Анкирская, В.В. Муравьева; Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии РАМН. М, 2006. - 9 с.

9. Анкирская, A.C. Бактериальный вагиноз. Клиническая лекция / A.C. Анкирская //Акушерство и гинекология 1995. — № 6. — С. 13-16.

10. Анкирская, A.C. Микроэкология влагалища и профилактика акушерской патологии / A.C. Анкирская // Гинекология. 2003. - № 11. - С. 15-16.

11. Аутоиммунная реакция организма при хроническом кандидозе кожи и слизистых оболочек / Т.Н. Лебедева, М.А. Шевяков, А.Г. Бобков, P.M. Чернопятова // Проблемы медицинской микологии. — 2001. №2. - С. 19-22.

12. Афанасьева, Т.И. Работы З.В. Ермолаевой и ее школы в области выделения и изучения лизоцима / Т.И. Афанасьева // Антибиотики и химиотерапия. 1998. - Т.43. - №5. - С. 18-22.

13. Аэробный вагинит — реальная угроза сохранению репродуктивного здоровья / Ю.В.Ширева, Т.И.Карпунина, М.М. Падруль, А.А.Олина // Здоровье и образование ребенка: материалы I Всерос. науч.-практ.конф. -Пермь, 2002. С. 428-430.

14. Байрамова, Г.Р. Клинические особенности и эффективность различных методов терапии бактериального вагиноза: Автореф. дис. канд. мед. наук. / Г.Р. Байрамова. М., 1996. - с. 25.

15. Байрамова, Г.Р. Бактериальный вагиноз / Г.Р. Байрамова // Гинекология. 2001'. - Т.З. - № 2. - С. 5-7.

16. Бактериальный вагиноз: особенности клинического течения, диагностика и лечение / A.C. Анкирская, В.Н. Прилепская, Г.Р. Байрамова, В.В. Муравьева // Русский медицинский журнал . 1998. - № 6. - С. 276-282.

17. Бактериальный вагиноз принципиальные вопросы этиологии, диагностики и лечения; Методические рекомендации. МЗ / А.Р. Мавзютов, З.Г. Габидуллин, Э.Д. Ахунов, М.М. Туйгунов - Респ. Башк., 2004. - 15 с.

18. Башмакова, М.А. Лабораторная диагностика генитальных инфекций / М.А. Башмакова, А.М. Савичева // Проблемы репродукции 2000. - № 1. -С. 20-24.

19. Беликова, З.Ф. Комплексная терапия урогенитального кандидоза у1женщин репродуктивного возраста с учетом состояния вагинального и кишечного микробиоценоза: Автореф. дис. канд. мед. наук. / З.Ф. Беликова. — М, 2000.-24 с.

20. Белобородова, H.B. О микрофлоре хозяина и ее участии в ответе на инфекцию / Н.В. Белобородова // Антибиотики и химиотерапия. 1998. -№43(9). -С 44.

21. Биохимия окислительного стресса. Оксиданты и антиоксиданты / Е.Б. Меньшикова, Н.К. Зенков, С.М. Ширгин Новосибирск, 1994. - 22 с.

22. Биохимические и молекулярные аспекты симбиоза человека и его микрофлоры / В.Н. Бабин, И.В. Домарадский, A.B. Дубинин, O.A. Кондракова // Российский химический журнал. 1994. - Т.38. - № 6. -С. 66-78.

23. Вагинальный кандидоз: этиология, эпидемиология, патогенез / А.Ю. Сергеев, O.JL Иванов, A.B. Караулов и др. // Иммунопатология. 2000. -№2.-С. 99-106.

24. Владимиров, Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах / Ю.А. Владимиров, А.И. Арчаков М., 1972 - 248 е.

25. Воробьев, A.A. Бактерии нормальной микрофлоры: биологические свойства и защитные функции / A.A. Воробьев, Е.А. Лыкова // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1999. - № 6. С. — 102—105.

26. Видовая идентификация и чувствительность к антимикотикам возбудителей вульвовагинального кандидоза / М.И. Кур дина, В.Е. Маликов, Н.Е. Жарикова, A.A. Бурова // Акушерство и гинекология. 2005. - №- 6. -С. 56-57.

27. Влияние лизоцима на функционально-метаболическую активность полиморфоядерных лейкоцитов в условиях острой кровопотери / Н.В. Рыбников, И.Л. Бровкин, Б.С. Утешев // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2004. - № 2. С. 41-48.

28. Вульвовагинальный кандидоз в клинической больнице / М.И. Кур дина, В.Е. Маликов, Н.Е. Жарикова, A.A. Бурова // Акушерство и гинекология. -2005." № 1.-С. 38-39.

29. Гемонов, B.B. Защитные свойства поверхностных слоев эпителия слизистой оболочки полости рта / В.В. Гемонов, M.JI. Могильный // Стоматология. 1987. - № 4. - С. 79-82.

30. Герасимов, A.M. Принципы защиты клеток от кислорода / A.M. Герасимов // Тез. докл. VII междунар. конгр. по гипербалической медицине. -М., 1981.-С. 177-178.

31. Гистохимия ферментов. Лабораторные методы / 3. Лойда, Р. Госсрау, М. Шиблер: Пер. с англ. М.: Мир, 1998. - 270 с.

32. Голубев, A.B. Ассоциации Enterobacteriaceae и Candida слизистых родовых путей женщин с нормальным течением беременности и с угрозой невынашивания: Автореф. дисс. канд. мед. наук / A.B. Голубев Иваново, 1993.-25 с.

33. Гуморальные компонента местного иммунитета влагалища девочек / С.С. Афанасьев, В.А. Алешкин, И.И. Садолина и др. // I nternational Journal on immunorehabilitation. 2000. - Vol. 2. - № 2. - P.71-73.

34. Дмитриев, Г.А. Лабораторная диагностика бактериальных урогенитальных инфекций / Г.А. Дмитриев М: Медицинская книга, 2003. -336 с.

35. Дмитриев, Г.А. Бактериальный вагиноз / Г.А. Дмитриев, И.И. Глазко -М.: БИНОМ, 2008. 192 с.

36. Добрынина, В.И. Биологическая химия / В.И. Добрынина М: Медицина, 1976.-504 с.

37. Домарадский, И.В. Очерки микологии для экологов / И.В. Домарадский, Н.Б. Градова М.: Истоки, 2007 - 86с.

38. Дорожкова, И.Ю. Определитель патогенных и условно-патогенных грибов / И.Ю. Дорожкова М: «Мир», 2001. - 467 с.

39. Дисбактериозы актуальная проблема медицины / A.A. Воробьев, H.A. Абрамов, В.М. Бондаренко, Б.А. Шендеров // Вестник РАМН. - 1997. - № 3. - С. 3-9.

40. Евсеев, A.A. Вагинальный дисбиоз и методы его коррекции / A.A. Евсеев // Издание врача-практика «Медицинские аспекты здоровья женщины». -2008.-№3/1.-С. 7-10.

41. Европейские стандарты диагностики и лечения заболеваний, передающихся половым путем. М.: Медицинская литература, 2004. - 272 с.

42. Елинов, Н.П. Химическая микробиология / Н.П. Блинов -М: Высшая школа, 1989.-432 с.

43. Елинов, Н.П. Токсигенные грибы в патологии человека / Н.П. Елинов // Проблемы медицинской микологии. 2002. - Т.4. - № 4. — С.3-7.

44. Еропкина Е.М., Афиногенов Г.Е. Антиадгезивная активность белковых комплексов биологических жидкостей и секретов // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1994. - № 2. - С. 110-113.

45. Защита макроорганизма при кандидозе и возможности иммунокоррекции / А.Ю. Сергеев, O.JI. Иванов, Ю.А. Сергеев, A.B. Караулов // Успехи клинической иммунологии и аллергологии / Под ред. Караулова A.B. — Т. 1. -М., 2000.-С.308-328.

46. Зиновьев, A.C. Хроническое воспаление слизистых оболочек, интеграция иммунитета и регенерация / A.C. Зиновьев, A.B. Кононов // Архив патологии. 1997. - № 3. - С.18-24.

47. Зиновьев, A.C. Эпителиальный барьер слизистых оболочек в динамике хронического воспаления / A.C. Зиновьев, A.B. Кононов // Архив патологии. 1994. - № 6. - С.32-37.

48. Инфекции в акушерстве и гинекологии / Под ред. О.В. Макарова, В.А. Алешкина, Н.Т. Савченко М: Медпресс-информ, 2007 - 507с.

49. Иммуногенез, гемостаз и неспецифическая резистентность организма / Б.И. Кузькин, Н.В. Васильев, H.H. Цыбиков М.: Медицина, 1989. - 122 с.

50. Индигенные микроорганизмы как иммуномодуляторы / Б.В. Пинегин,

51. B.М. Коршунов, М.М. Шкарупета, H.H. Мальцева М: Медицина, 1987.1. C. 149-156.

52. Иммунодиагностика иммунодефицитов / Петров Р.В. , Хаитов Р.В., Пинегина Б.В. //Иммунология, 1997.- № 7 С. 4-7.

53. Карпищенко, А.И. Медицинские лабораторные технологии / А.И. Карпищенко. Санкт-Петербург: Интермедика, 2002. - Т. 1. - 187 с.

54. Кира, Е. Ф. Бактериальный вагиноз (клиника, диагностика, лечение): Автореф. дис. д-ра мед. наук / Е.Ф. Кира Санкт-Петербург, 1995. - 40с.

55. Кира, Е. Ф. Бактериальный вагиноз / Е.Ф. Кира // Акушерство и гинекология 1990. - № 8. - С. 10-13.

56. Кира, Е. Ф. Клиника и диагностика бактериального вагиноза / Е.Ф. Кира // Акушерство и гинекология 1994. - № 2. - С. 32-35.

57. Кира, Е.Ф. Бактериальный вагиноз / Е.Ф: Кира СПб.: ООО «Нева-Люкс, 2001.-97 с.

58. Кира, Е. Ф. Современный взгляд на нетрансмиссионные инфекции влагалища и вульвы у женщин репродуктивного возраста / Е.Ф. Кира, З.С. Муслимова // Акушерство и гинекология. 2008. - №1. - С. 3-6.

59. Кисина, В.И. Урогенитальные инфекции у женщин: клиника, диагностика, лечение / В.И. Кисина, К.И. Забиров М.: «Медицинское информационное агентство», 2005. — 280 с.

60. Клинико-бактериологическое обоснование комплексного лечения бактериального вагиноза у женщин репродуктивного возраста / Побединский Н. М., Аксенова О. А., Аксенова М; Г., Молочков В. А. // Акушерство и гинекология. -2006. № 6. - С. 24-26.

61. Клинико-эпидемиологические особенности кандидозной инфекции влагалища у женщин детородного возраста г. Перми / Т.Н. Коломойцева,

62. Е.А. Сандакова, Т.Н. Карпунина, Е.В. Трухина // Материалы Научной сессии Пермской государственной медицинской академии и Ижевской государственной медицинской академии. Пермь, 2004. - С. 254-255.

63. К механизму антагонистической активности лактобацилл / М.В. Тюрин, Б.А. Шендеров, Н.Г. Рахимов // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2000. — №5. - С. 65-68.

64. Козловская, JI.B. Учебное пособие по клиническим лабораторным методам исследования / JI.B. Козловская, М.А. Мартынова М: Медицина, 1975.-С. 59-71.

65. Коломойцева, Т.Н. Клинико-микробиологические варианты кандидозной инфекции влагалища у женщин репродуктивного возраста / Т.Н. Коломойцева // Науки о человеке: Материалы IV конгресса молодых ученых и специалистов. Томск, 2003. — С. 124-126.

66. Коршунов, В.М. Микроэкология влагалища. Коррекция при вагинальных дисбактериозах / В.М. Коршунов, H.H. Володин М.: ВУНМЦ МЗ РФ, 1999. -80 с.

67. Коррекция дисбиоза влагалища и цервикального канала у беременных группы риска / И.О. Крыжановская, Е.Ю. Лебеденко, A.C. Мартышенко и др. //Акушерство и гинекология. 2005.- №4.- С. 16-18.

68. Кругликов, В.Д. Возможности коррекции дисбиотических состояний биоценоза влагалища и- цервикального. канала у беременных / В.Д. Кругликов, И.О. Крыжановская // Русский- медицинский журнал. 2006. -№3. -27 С.

69. Кубанова, A.A. Руководство по практической микологии / A.A. Кубанова, Н.С. Потекаев М.: Медицина, 2003. - с. 143.

70. Кубанова, A.A. Состояние проблемы бактериального вагиноза / A.A. Кубанова // Вестник дерматологии и венерологии. 1996. - № 2. - С. 22-26.

71. Кудрявцева, JT.B. Бактериальный вагиноз: Пособие для врачей / JI.B. Кудрявцева, E.H. Ильина М: Медицина, 2001. - с. 112.

72. Лабораторная диагностика заболеваний, передающихся половым путем / М.Н. Овчинников, В.Н. Беднова, В.В. Делекторский. М.: Медицина, 1987. -296 с.

73. Лакин, Г.Ф. Биометрия: Учебное пособие для билологич. спец. вузов. / Г.Ф. Лакин. М.: Высш.школа, 1980. - 293 с.

74. Лактофлора и колонизационная резистентность / A.A. Ленцер, Х.П. Ленцер, М.Э. Микельсар // Антибиотики и медицинская биотехнология. — 1987.- №3.-С. 173-179.

75. Ларсен, Б. Микрофлора родовых путей в норме. Репродуктивное здоровье / Б. Ларсен: Пер. с англ. М.: Медицина, 1988. - С. 17-45.

76. Лебедева Т.И. Иммунитет при кандидозе // Проблемы медицинской микологии. 2004. - Т.6. - № 4. - С. 8-16.

77. Леденева, Л.И. Диагностические критерии проведения общей бактериальной терапии у беременных с наличием очага инфекции: Автореф. дисс. канд. мед. наук / Л.И. Леденева Барнаул, 1996. - 27 с.

78. Луговская, С.А. Гематологический атлас / С.А. Луговская, М.Е. Почтарь. М.: «Триада», 2008. - 296 с.

79. Мальцева, А.Н. Неспецифические факторы защиты / А.Н. Мальцева // Фельдшер и акушерка. 1983. - № 4. - С. 23-27.

80. Матвеева, Л.А. Местная защита респираторного тракта у детей / Л.А. Матвеева. Томск. - 1973. - 276 с.

81. Маянский, А.Н. Очерки о нейтрофилах и макрофагах / А.Н. Маянский, Д.Н. Маянский Новосибирск, 1989. - 250 с.

82. Маянский, Д.Н. Хроническое воспаление / Д.Н. Маянский М.: Медицина, 1991.- 272 с.

83. Меньшиков, В.В. Клиническая лабораторная диагностика / В.В. Меньшиков // Частная аналитическая технология в клинической лаборатории. М: Агат-Мед, 2003. Т.4. - 816 с.

84. Местная и комбинированная терапия онихомикозов: Пособие для врачей; Национальная академия микологии / А.Ю. Сергеев, Ю.В. Сергеев, В.И. Лысенко М, 2003. - 32 с.

85. Методы определения активности катал азы / М.А. Королюк, Л.И. Иванова, И.Г. Майорова, В.Е. Токарев // Лабораторное дело. 1988. - № 1. -С. 16-18.

86. Молекулярная биология клетки / Б. Альберте, Д. Брей, Дж. Льюис и др. -М.: «Мир», 1987 -Т.5.-231 с.

87. Мирзабалаева, А. К. Инфекционные вульвовагиниты: клиническая проблема и пути ее решения / А.К. Мирзабалаева // Акушерство и гинекология. 2005. —№6. — С. 51-55.

88. Микробиоценоз половых путей женщин репродуктивного возраста / И.С. Сидорова, A.A. Воробьев, Е.И. Боровкова // Акушерство и гинекология. -2005. -№ 2. С. 2- 10.

89. Микробиология / В.Д. Тимаков, B.C. Левашев, Л.Б. Борисов М.: Медицина, 1983.- 512 с.

90. Муравьева, В. В. Микробиологическая диагностика бактериального вагиноза у женщин репродуктивного возраста: Афтореф. дис. . канд. биол. наук /В.В. Муравьева Москва, 1997. - 23 с.

91. Насонов, Т.А. Современные представления о значении нормальной микрофлоры тела в норме и патологии / Т.А. Насонов, В.Н. Мальцев // Успехи современной биологии. 1983. - Т. 96. - Вып. 1. - С. 139-149.

92. Некоторые особенности иммунодиагностики и иммунотерапии торпидных хронических смешанных инфекций гениталий / В.А. Алешкин,

93. C.B. Султанова, С.С. Афанасьев и др. // International Journal on immunorehabilitation. 2000. - Vol. 2. - N 2. - P.76.

94. Никоненко, А.Г. Слизистые оболочки — важный участок защитного барьера организма / А.Г. Никоненко // Здоровье Украины. 2005. - №114 - С.14-19.

95. Никонов, А.П. Инфекции в акушерстве и гинекологии: диагностика и антимикробная химиотерапия: Пособие для врачей / А.П. Никонов, O.P. Асцатурова М. Медицина, 2006. - 42 с.

96. Олина, A.A. Особенности этиологии и терапии Бульварного кандидоза / A.A. Олина, Т.И. Карпунина // Вестник Российского университета дружбы народов. Серия «Медицина». 2008. - №6. - С. 498-502.

97. Определение активности лизоцима / П.Г. Сторожук, И.В. Сафарова, В.В. Еричев //Клиническая лабораторная диагностика. — 2000.-№6.- С. 14-16.

98. Основы биохимии / А. Уайт, Ф. Хендлер, Э. Смит и др.: Пер. с англ. -М.: Мир, 1981.-Т. 1-3.

99. Определение активности лизоцима / Э.Г. Щербакова, В.М. Бухарин, Е.Б. Исакова // Клиническая лабораторная диагностика. 2000. - № 6. - С. 14-16.

100. Павлович, С.А. Основы иммунологии.: Учебное пособие / С.А. Павлович -Мн.: Высшая школа, 1997. 115 с.

101. Первушина, JI.A. Антилизоцимный признак микроорганизмов в бактериологической диагностике и лечении воспалительных заболеваний внутренних женских половых органов: Автореф. дисс. канд. мед. наук / JI.A. Первушина Челябинск, 1990. -23 с.

102. Подход к иммунокоррегирующей терапии при различных формах кандидоза / А.Ю. Сергеев, O.JI. Иванов, A.B. Караулов, П.Д. Новиков // Тез.докл. III съезд клинических иммунологов и аллергологов стран СНГ. М., 2000.-С. 306.

103. Порядок проведения микроскопического исследования мазков из урогенитального тракта. Методические рекомендации для специалистов по лабораторной диагностике / A.M. Савичева, Е.В. Соловский, М. Домейка -Санкт-петербург: H-JI, 2007. 64 с.

104. Практическое руководство по антиинфекционной химиотерапии / JI.C. Страчунский, Ю.Б. Белоусова, С.Н. Козлова Смоленск: МАКМАХ, 2007 -464 с.

105. Противоречивая микроэкология / И.В. Домарадский, Т.Х. Хохоев, O.A. Кондракова и др. // Российский химический журнал. 2002. - № 46(3). - С. 80-89.

106. Прилепская, В.Н. Современные представления о бактериальном вагинозе / В.Н. Прилепская, Г.Р. Байрамова // Вестник Российской ассоциации акушеров-гинекологов. 1996. - № 3. — С. 40^42.

107. Реакция восстановления нитросинего тетразолия лейкоцитами больных раком легкого / Г.В. Катаева, Н.Ш. Лобжанидзе, A.A. Редько, H.A. Дваладзе и др. // Вестник хирургии. 1988. - № 4. - С.14-17.

108. Роль макроглобулинов в репродуктивной функции / H.A. Зорин, В.Г. Левченко, P.M. Зорина, В.Н. Зорина // Акушерство и гинекология. 2005. -№4.-С. 7-8.

109. Савичева, A.M. Порядок проведения микроскопического исследования мазков из урогенитального тракта: Методические рекомендации дляспециалистов лабораторной диагностики / A.M. Савичева. Санкт-Петербург: Н.Л, 2007. - 60 с.

110. Савичева, А. М. Микробиоценоз влагалища и их регуляция / А. М. Савичева, М. А. Башмакова // Тез. докл. научн. конф. "Дисбактериозы и эубиотики". М. - 1996. - С.ЗЗ.

111. Санин, A.B. Неспецифический иммунитет / A.B. Санин, В.М. Манько // Гематология и трансфузиология. — 1993. -№4. С. 11-15.

112. Сапин, М.Р. Иммунная система человека / М.Р. Сапин, JI.E. Энтинген -М.: Медицина, 1996. 304 с.

113. Сенсибилизация к антигену Candida albicans у здоровых больных с разными формами кандидоза / А.Ю. Сергеев, П.Д. Новиков, A.B. Караулов // Тезисы докл. II междунар. ассамблеи «Новые медицинские технологии». — М., 2000.-С. 86.

114. Сергеев, А.Ю. Кандидоз / А.Ю. Сергеев, Ю.В. Сергеев М.: «Триада-X», 2000. - 472 с.

115. Сергеев, А.Ю. Вагинальный кандидоз: этиология, эпидемиология, патогенез / А.Ю. Сергеев, O.A. Иванов; Московская Медицинская академия, Институт аллергологии и клинической иммунологии. — М, 2006. — 405с.

116. Сергеев, А.Ю. Иммунитет при кандидозе и подходы к иммунокоррекции / А.Ю. Сергеев, С.А. Бурова // Антибиотики и химиотерапия. 2009. - Т. 45. - № 12. - С. 30-31.

117. Сергеев, А.Ю. Подходы к иммунокорригирующей терапии различных форм кандидоза / А.Ю. Сергеев // Тез. докл. II международной ассамблеи «Новые медицинские технологии». — М. 2000. - С. 108.

118. Слукина, Т. В. Пролиферативная активность и апоптоз в гиперплазированном эндометрии / Т.В. Слукина // Акушерство и гинекология. 2009. - № 5. - С. 25-29.

119. Спектр микрофлоры, изолируемой из различных отделов репродуктивного тракта женщин / Д.Г. Дерябин, A.A. Минаков, С.Д. Борисов // ЖМИ.-2001. -№ 4.-С. 84-86.

120. Современные подходы к лечению бактериального вагиноза / Т.В. Захарова, В.Г. Волков, Т.В. Лисицина // Акушерство и гинекология. 2005. - № 1.- С. 40-41.

121. Современная этиология кандидоза разных локализаций и устойчивость к противогрибковым средствам / В.Е. Маликов, Н.Е. Жарикова, Т.А. Романовская и др. // Тезисы IV Российской конференции «Современные проблемы антимикробной терапии». М., 2002. - С. 60.

122. Соколов, Е.И. Клиническая иммунология / Е.И. Соколов. М: Медицина, 1998. - 270 с.

123. Страну некий, JI.C. Современные методы клинической микробиологии: Выпуск 1 / JI.C. Страчунский, P.C. Козлова Смоленск: МАКМАХ, 2003 -104 с.

124. Темирбаев, М.А. Методика теста восстановления нитросинего тетразоля в нейтрофилах слюны / М.А. Темирбаев, Б.Д. Хасенова // Лабораторное дело. 1989. - № 7. - С. 41-42.

125. Тейлор-Робинсон, Д. Бактериальный вагиноз. Осложнения вне беременности / Д. Тейлор-Робинсон // ЗППП, 1998. №3. - С. 6-7.

126. Тихомиров, А.Л. Бактериальный вагиноз. Оптимизация лечения бактериального вагиноза / А.Л. Тихомиров, Н.Г. Олейник // Гинекология.-2004.-Т.6. — №2. С.54-57.

127. Факторы персистенции микрофлоры при воспалительных заболеваниях внутренних женских половых органов / О.В. Бухарин, О.Д. Константинова, С.В. Черкасов и др. // Вестник Российской Ассоциации Акушеров-Гинекологов. 1998. - № 3. - С. 7-12.

128. Фримель, X. Основы иммунологии: Пер. с нем. / X. Фримель, И. Брок -М: Мир, 1986.-254с.

129. Функционально-метаболическая активность лейкоцитов и ее коррекция лизоцимом при остром холодовом стрессе / Л.Г. Прокопенко, А.И. Лазарев, А.Р. Авакян // Антибиотики и химиотерапия. 2002. - № 12. - С. 11-14.

130. Хмельницкий, O.K. О кандидозе слизистых оболочек / O.K. Хмельницкий // Архив патологии. 2000. - Т. 62. - № 6. - С. 3-10.

131. Хэм, А. Гистология / А. Хэм, Д. Кормак М.: Мир, 1998. - Т. 4. - 344 с.

132. Цитохимическое изучение активности пероксидазы в лейкоцитах периферической крови у детей школьного возраста / Г.И. Яковенко, Е.Е. Клебанова, Т.Л. Сакун // Лаб.дело. 1981. - № 8. - С. 55-57.

133. Шабашова, Н.В. Новый взгляд на иммуногенез хронического кандидоза / Н.В. Шабашова//Проблемы медицинской микологии. 1999.- Т. 1.-№1. -С. 18-23.

134. Шендеров, Б.А. Нормальная микрофлора и ее роль в поддержании здоровья человека / Б.А. Шендеров // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1998. -№1. - С. 61-65.

135. Шварцман, Я.С. Местный иммунитет / Я.С. Шварцман, Л.Б. Хазенсон -Л:: «Медицина», 1978. —224 с.

136. Этиологический подход к лечению хронических форм кандидоза / А.Ю. Сергеев, Н.Е. Жарикова, В.Е. Маликов // Тез. докл. VII Российский национальный конгресс «Человек и лекарство». М. - 2000? - С. 307.

137. Этиологический подход к лечению хронических форм кандидоза / А.Ю. Сергеев, Н.Е. Жарикова, В.Е. Маликов // Тез. докл. VII Российский национальный конгресс «Человек и лекарство». М. - 2000. - С.307.

138. Abreu, M.T. Immunologic regulation of toll-like receptors in gut epithelium / M.T. Abreu // Curr. Opin. Gastroenterol. 2003. - Vol. 19. - P. 559-564.

139. A follow-up study of methods of contraception, sexual activity, and rates of trichomoniasis, candidiasis and bacterial vaginosis / F.J. Barbone, H. Austin., W.C. Louv et al. // Amer. J. Obstet. Gynec. 1990. - Vol. 163. - N 2. - P. 510514.

140. An estigation into the pathogenesis of vulvo-vaginal candidosis / S. S. El-Din. M. T. Reynolds, H. R. Ashbee et al. // Sex. Transm. Infect. 2001. - Vol. 77. - P.179-183.

141. Anaerobic bacteria in non-specific vaginitis / C. A. Spiegel, R. Amsel, D. Eshenbach // N. Engl. J. Med. 1980. - Vol. 16. - P. 303.

142. Analysis of Vaginal Cell Populations during Experimental Vaginal Candidiasis / P. L. Fidel, W.Luo, C. Steele et al. // Infect. Immun. 1999. -Vol. 67.-P. 3135-3140.

143. Anticandidal Immunity and Vaginitis: Novel Opportunities for Immune Intervention / A. Cassone, F. De Bernardis, G. Santoni // Infect. Immun. 2007. -Vol. 75.-P. 4675-4686.

144. Antifungal Susceptibilities of Candida Species Causing Vulvovaginitis and Epidemiology of Recurrent Cases / S. S. Richter, R. P. Galask, S. A. Messer et al. // J. Clin. Microbiol. 2005. -Vol. 43. - P. 2155-2162.

145. Bacterial vaginosis: microbiological and clinical findings / E. Hoist, B. Wathne, B. Hovelins, P.A. Mardh // Eur. J. Clin. Microbiol. 1987. - Vol. 6. - P. 536-541.

146. Bacterial vaginosis. Diagnostic and pathogenetic findings during topical clindamycin therapy / C.H. Livengood, J.L. Thomason, G.B. Hill // Amer. J. Obstet. Gynecol. 1990. - Vol. 163.- N2.-P. 515-520.

147. Bacterial vaginosis: Current review with indications for asymptomatic therapy / J.L. Thomason, S.M. Gelbard, N.J. Scaglione // Amer. J. Obstet. Gynecol. -1991.-Vol. 165. -P. 1210-1217.

148. Bingham, J.S. What to do with the patient with recurrent vulvovaginal candidiasis / J.S. Bingham // Sex. Transm. Infect. 1999. -Vol. 75. - P. 225-227.

149. Blaut, M. Relationship of prebiotics and food to intestinal microflora. / M. Blaut //Eur. J.Nutr. -2002,-Vol. 41-P. 16.

150. Braun, B. R. TUP1, CPH1 and EFG1 Make Independent Contributions to Filamentation in Candida albicans / B. R. Braun, A. D. Johnson // J. Genetics-Vol. 155.-P. 57-67.

151. Candida-Specific Antibodies during Experimental Vaginal Candidiasis in Mice / K. L. Wozniak, F. L. Wormley, P. L. Fidel // Infect. Immun. 2002. - Vol. 70.-P. 5790-5799.

152. Cell Adhesion Molecule and Lymphocyte Activation Marker Expression during Experimental Vaginal Candidiasis / F.L. Wormley, J. Chaiban, P. L. Fidel // Infect. Immun. 2001 - Vol. 69. - P. 5072-5079.

153. Cervical bacterial flora in infertile and pregnant women / P. Moberg, P.i

154. Eneroth, J.Harlin et al. // Med. Microbiol. Immunol. 1978. - Vol. 165. - P: 139-142.

155. Characterization of the cellular immune function of patients with chronic mucocutaneous candidiasis / D. Moraes-Vasconcelos, N.M. Orii, C.C. Romano, et al.// Clin. Exp. Immunol. -2001. Vol.123 - N2. - P. 247-253.

156. Clamp, J.R. The relationship between the immune system and mucus in the protection of mucous membranes / J.R. Clamp // Biochem. Soc. Trans. 1984. -Vol. 12.- N5.- P. 754-756.

157. Cummings, J.H. Role of intestinal bacteria in nutrient metabolism / J.H. Cummings, G.T. Macfarlane // J.Parenter. Enteral. Nutr. 1997. - Vol. 21. - P. 357-365.

158. Curved anaerobic bacteria in bacterial (nonspecific) vaginosis and their response to antimicrobial therapy / C. A. Spiegel, D. Eshelbach, R. Amsel // J. Infect. Dis.- 1983.-Vol. 148.-P. 817-822.

159. Development of a species-specific polymerase chain reaction assay for Gardnerella vaginalis / A. van Belkum, A. Koeken, P. Vandamme // Mol. Cell. Probes. 1995.-Vol. 9.-N3.-P. 167-174.

160. Dura, W.T. Secretory component, 1-antitrypsin and lysozime in Ig A deficient children. An immunohistochemical evaluation of intestinal mucosa / W.T. Dura, E. Bernatowska // Histopatology. 1984. - Vol.8. - N 5. - P. 747 - 754.

161. Emerging role of lactobacilli in the control and maintenance of the vaginal bacterial microflora / V. Redondo-Lopez, R.L. Cook, J.D. Sobel // Rev. Infect. Dis.- 1990. Vol. 12. - P. 856-872.

162. Endotoxin stimulates liver macrophages to release mediators that inhibit an early step in hepadnavirus replication / U. Klocker, U. Schultz, H. Schaller // J. Virol. 2000. - Vol. 74. - P. 5525- 5533.

163. Evaluation of the Oricult-N Dipslide for Laboratory Diagnosis of Vaginal Candidiasis / P. Carlson, M. Richardson, J. Paavonen // J. Clin. Microbiol. 2000.- Vol. 38.-P. 1063-1065.

164. Genetic relatedness of Candida strains isolated fi*om women with vaginal candidiasis in Malaysia / P. P. Chong, Y. L. Lee, B. C. Tan // J. Med. Microbiol. -2003. Vol. 52. -P. 657-666.

165. Galask, R.P. Vaginal flora and it,s role in disease entities / R.P. Galask // Clin.Obset.Gynecol. 1981. -Vol.5.-P. 355-358.

166. Henzl, M.R. Vulvovaginal candidiasis: historical prespectives and current trends / M.R. Henzl // J. Reprod. Med. 1986. - Vol. 31. - P. 641-644.

167. High levels of Gardnerella vaginalis detected with an oligonucleotide probe combined with elevated pH as a diagnostic indicator of bacterial vaginosis / D. Sheiness, K.Dix, S. Watanabe // J. Clin. Microbiol 1992. - Vol. 30. - P. 642650.

168. Hill, G.B. Microbiology of bacterial vaginosis / G.B. Hill // Am. J. Obstet. Gynecol. 1993. - Vol. 169. - P. 450^54.

169. Homing of intestinal immune cells / H.H. Uhlig, C. Mottet, F. Powrie // Novartis. Found. Symp. 2004. - Vol. 263. - P. 179-188.

170. Horowitz, B.J. Mycotic vulvovaginitis: A broad overview / B.J. Horowitz // Am. J. Obstet. Gynecol.-1991.- Vol. 165.-P. 1188-1192.

171. Hydrogen peroxide-producing lactobacilli and acqusition of vaginal infections / S. E. Hawes, S. L. Hillier, J. Benedetti et al. // J. Infect. Dis. 1996. - Vol. 174. - P.1058-1063.

172. Immunopathogenesis of .Recurrent Vulvovaginal Candidiasis / L. Paul, J.R. Fidel, J.D. Sobel // Clin. Microbiol. Rev. 1996. -Vol. 9. - P.335-348.

173. Improving M cell mediated transport across mucosal barriers: do certain bacteria hold the keys? / A.L. Man, M.E. Prieto-Garcia, C. Nicoletti // Immunology. 2004. - Vol. 113.- P. 152- 156.

174. Intravaginal and Intranasal Immunizations Are Equally Effective in Inducing Vaginal Antibodies and Conferring Protection against Vaginal Candidiasis / F. De Bernardis, M. Boccariera, D. Adriani et al. // Infect. Immun. 2002. - Vol. 70. -P. 2725-2729.

175. Kennedy, M.J. Role of motility, chemotaxis, and adhesion in microbial ecology / M.J. Kennedy // Ann. N. Y.Acad.Sci. 1987. - Vol. 506. - P. 260 -273.

176. Larsen, B. Vaginal microbial flora composition and influences of host physiology / B. Larsen // Ann. Intern. Med. 1982. -Vol. 71. - P. 926-930.

177. Larson, B. Vaginal flora in health and disease / B. Larsen // Clin. Obstet. Gynec.- 1993. -Vol.36. P. 107-121.

178. Local Anticandidal Immune Responses in a Rat Model of Vaginal Infection by and Protection against Candida albicans / F. De Bernardis, G. Santoni, M: Boccanera et al.//Infect. Immun. 2000. - Vol. 68. - P. 3297-3304.

179. Lu, L., Pathologic and physiologic interactions of bacteria with the gastrointestinal epithelium / L. Lu, W.A. Walker // Am. J.Clin. Nutr. 2001. -Vol.73. - P. 1124-1130.

180. Mead, P. B. Epidemiology of bacterial vaginosis / P. B. Mead // Am. J. Obsted. Gynecology. 1993. - Vol. 169. - N 2. - P. 446-449.

181. Metges, C.C. Contribution of microbial amino acids to amino acid homeostasis of the host / C.C. Metges // J. Nutr. 2000. -Vol. 130. - P. 18571864.

182. Microbial flora of the vagina / A. Mehta, J. Talwalkar, C. V. Shetty et al. // Microecology and Therapy. 1995. - Vol. 23. - P. 1-7.

183. Nonspecific vaginitis: diagnostic criteria and microbial and epidemiologic associations / R. Amsel, P.A. Totten, C.A. Spiegel, et al. // Amer. J. Med. 1983. -Vol. 74.-N 1.- P. 14-22.

184. Palma-Carlos, A.G. Chronic mucocutaneous candidiasis revisited / A.G. Palma-Carlos, M.L. Palma-Carlos // Mayo Clin. Proc. 2000 - Vol. 75. - N 8. -P. 853-855.

185. Peculiarities of humoral immunity in patients with candidosis / T.N. Lebedeva, S.M. Ignatieva, S.B. Minina et al. // 8-th Congress of the European Confederation of Medical Mycology. -Budapest, 2002. P. 34.

186. Piatti, G. Bacterial adhesion to respiratory mucosa and its modulation by antibiotics at sub-inhibitory concentrations / G. Piatti // Pharmacol.Res. 1994. -Vol. 30. - P. 289-299.

187. Prevalence of hydrogen peroxide-producing Lactobacillus species in normal women and women with bacterial vaginosis / D.A. Eshenbach, P.R. Davick, B.L. Williams B.L. et al. // J. Clin. Microbiol. 1989. - Vol. 27. - P. 251-257.

188. Probiotics: effects on immunity / E. Isolauri, Y. Sutas, P. Kankaanpaa et al. // Am. J. Clin. Nutr. 2001. - Vol. 73. - P. 444- 450.

189. Proline aminopeptidase activity as a rapid diagnostic test to confirm bacterial vaginosis / J.L. Thomason, S.M. Gelbard, L.M. Wilcoski // Obstet. Gynecol. -1988. -Vol.71. -N 4.-P. 607-611.

190. Quantitave bacteriology of the vaginal flora in genital disease / M. Wilkins, R. N. Thin, S. Tabaqchall // J. Med. Microbiol. 1984. - Vol. 18. - N 2. - P. 217231.

191. Reliability of diagnosing bacterial vaginosis is improved by standardized method of Gram stain interpretation / R.P. Nugent, M.A. Krohn, A.L. Hillier // J. Clin. Microbiol. 1991. - Vol. 29. - P. 297-301.

192. Role for Dendritic Cells in Immunoregulation during Experimental Vaginal Candidiasis / D. M. Le Blanc, M.M. Barousse, P.L. Fidel // Infect. Immun. -2006. Vol.74. - P. 3213-3221.

193. Romani, L. Immunity to Candida albicans: Thl, Th2 cells and beyond / L. Romani // Curr. Opin. Microbiol. 1999. - Vol.2. - N 4. - P. 363-367.

194. Serologic Response to Cell Wall Mannoproteins and Proteins of Candida albicans / J. P. Martinez, M. L. Gil, J. L. Lopez-Ribot, W. L. Chaffin W. L. // Clin. Microbiol. Rev.-1998.-Vol. 11. P. 121-141.

195. Sobel, J.D. Vulvovaginitis when Candida becomes a problem / J.D. Sobel // Dermatol. Clin. - 1998. - Vol. 16. - P. 763-768.

196. Sobel, J.D. Candidal vulvovaginitis / J.D. Sobel // Clin. Obstet. Gynecol. -1993. -Vol. 36.-P. 153-165.

197. Spt3 Plays Opposite Roles in Filamentous Growth in Saccharomyces cerevisiae and Candida albicans and Is Required for C. albicans Virulence / L. Laprade, V. L. Boyartchuk, W. F. Dietrich, F. Winston // Genetics. 2002. - Vol. 161.-P. 509-519.

198. Stebbins, C.E. Structural mimicry in bacterial virulence / C.E. Stebbins, J.E. Galan // Nature. 2009. - Vol. 412. - P. 701-705.

199. Sweet, R.L. New approaches for the treatment of bacterial vaginosis / R.L. Sweet // Am. J. Obstet. Gynecol. 1993. - Vol. 69. - P. 479-482.

200. The normal vaginal flora, H202-producing Lactobacilli and bacterial vaginosis in pregnant women / S. L. Hillier, M.A. Krohn, L.K. Rabe et al. // Cln. Infect.Dis. 1993. - Vol.16. -P.273 - 281.

201. Vaccination strategies for mucosal immune responses / P.L. Ogra, H. Faden, R.C. Welliver // Clin. Microbiol. Rev. 2009. - Vol. 14. - P. 430-445.

202. Vaginal Epithelial Cell Anti-Candida albicans Activity Is Associated with Protection against Symptomatic Vaginal Candidiasis / M. M. Barousse, T. Espinosa, K. Dunlap et al. // Infect. Immun. 2005. - Vol. 73. - P. 7765-7767.

203. Van Berlo, C.L. Gamma-Aminobutyric acid production in small and large intestine of normal and germ-free Wistar rats. Influence of food intake and intestinal flora / C.L. van Berlo, H.R. de Jonge // Gastroenterology. 1987. -Vol. 93.-P. 472-479.

Информация о работе

Теровская, Татьяна Юрьевна
кандидата медицинских наук
Томск, 2009
ВАК 03.00.25

Диссертация

Морфофункциональное состояние клеток вагинальной жидкости у женщин при оппортунистических инфекциях влагалища - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы