Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Морфофункциональная характеристика механизмов никотиновой холинергической регуляции нейрон-глиальных взаимодействий и метаболической активности в симпатическом ганглии
ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации по теме "Морфофункциональная характеристика механизмов никотиновой холинергической регуляции нейрон-глиальных взаимодействий и метаболической активности в симпатическом ганглии"

На правах рукописи

□□3454255 Гореликов Петр Леонидович

МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕХАНИЗМОВ НИКОТИНОВОЙ ХОЛИНЕРГИЧЕСКОЙ РЕГУЛЯЦИИ НЕЙРОН-ГЛИАЛЬНЫХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЙ И МЕТАБОЛИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ В СИМПАТИЧЕСКОМ ГАНГЛИИ

03.00.25 - гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

0 5 ДЕК 200В

Москва - 2008

003454255

Работа выполнена в ГУ Научно-исследовательском институте морфологии человека РАМН

Научный консультант:

доктор биологических наук, профессор Савельев Сергей Вячеславович Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Яцковский Александр Никодимович доктор медицинских наук Худоерков Рудольф Михайлович

доктор медицинских наук, профессор Ягубов Аркадий Сергеевич

Ведущее учреждение:

ГОУВПО «Российский государственный медицинский университет»

Защита диссертации состоится « »_2008 года в_часов

на заседании диссертационного совета (Д 001.004.01) ГУ НИИ морфологии человека РАМН по адресу: 117418Москва, ул.Цюрупы, д.З.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГУ НИИ морфологии человека РАМН

Автореферат разослан « »_2008 года

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук

Л.ПМихайлова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблемы

Фундаментальной проблемой нейробиологии является выяснение механизмов, обеспечивающих функционирование тканевых элементов нервной системы. Во многом ее решение зависит от знания синаптических процессов - важнейшего звена, обеспечивающего интегративную деятельность нервной системы. В ряду нейротрансмиттерных систем особую роль играют никотиновые холинергические синапсы паравертебральных симпатических ганглиев, образованные преганглионарными волокнами. Никотиновые холинорецепторы в указанных синапсах представляют ключевое функциональное звено, через которое осуществляется передача информации в ганглиях и происходит активизация автономной нервной системы (Ноздрачев А.Д., Фатеев М.М., 2002; De Biassi M. et al., 2000; De Biassi M., 2002).

Важным интегративно-координационным центром автономной регуляции является краниальный шейный ганглий, через никотиновые холинорецепторы которого осуществляется контроль общего сосудистого тонуса и гемодинамических показателей, обеспечивается деятельность эпифиза и регуляция многих других жизненно важных висцеральных функций (Ноздрачев А.Д., Пушкарев Ю.П., 1980; Skok V., 2002; Wang N. et al., 2004; Asamoto К., 2005).

Правомерно в связи с этим предполагать, что столь значимая функциональная роль никотиновых холинорецепторов в информационном обеспечении краниального шейного, равно как и других экстрамуральных симпатических ганглиев, должна определенным образом проявиться и в участии этих рецепторов в молекулярно-клеточных механизмах непосредственно организующих деятельность самих симпатических ганглиев. Такая постановка вопроса представляет вполне понятный теоретический и практический интерес, как с точки зрения выяснения общих принципов организации работы периферических ганглиев, так и в плане изучения последствий модуляции активности периферических никотиновых холино-

рецепторов, как объекта воздействия наркотических субстанций и лекарственных препаратов.

Объективной основой для проведения исследования в обозначенном направлении служит значительное число экспериментальных данных последних лет, полученных в отношении других отделов нервной системы, которые показывают, что роль синаптических процессов не ограничивается обеспечением только лишь информационной связи между нейронами. Напротив, эти данные позволяют рассматривать соответствующие синапсы в качестве биохимически самоорганизующихся систем, которые располагают собственными механизмами контроля за всеми этапами белкового синтеза в постсинаптических нейронах (Tiedge Н., 2005; Hirokawa N., 2006; Pfeiffer В., Huber К., 2006) и непосредственно участвуют в таком специфическом клеточном механизме, как нейрон-глиальное взаимодействие (Fellin Т., Carmignoto G., 2004; Hertz L., 2004; Magistretti P., 2006). Вместе с тем нейротрофическая роль синаптического сигнала через никотиновые холинорецепторы в регуляторных механизмах симпатических ганглиев не изучена.

Цель исследования - установить морфофункциональные закономерности метаболического ответа краниального шейного симпатического ганглия и входящих в его состав нейронов и сателлитных глиоцитов на экспериментально вызванные изменения в численности свободно функционирующих никотиновых холинергических рецепторов.

Задачи:

1. Установить закономерности в изменениях содержания рРНК в симпатических нейронах и окружающих нейроны сателлитных глиоцитах при применении разных доз ганглиоблокатора, вызывающих блокирование относительно небольшого, значительного числа никотиновых холино-рецепторов и полное блокирование никотиновых холинорецепторов, а также в ходе последующего восстановления численности функциони-

рующих никотиновых холинорецепторов после применения разных моделей блокады.

2. Провести сравнительный анализ модуляций в содержании рРНК в симпатических нейронах и окружающих сателлитных глиоцитах при разной численности блокированных никотиновых холинорецепторов.

3. Определить изоферментный состав и спектр ферментативной системы лактатдегидрогеназы (ЛДГ) на уровне интактного симпатического ганглия и на клеточном уровне - в симпатических нейронах и сателлитных глиоцитах.

4. Выявить закономерности в изменениях активности ферментативной системы ЛДГ при частичном и полном блокировании никотиновых холинорецепторов в симпатическом ганглии, а также в симпатических нейронах и сателлитных глиоцитах.

5. Определить основные закономерности в изменениях содержания аденилат-ных макроэргов (АТФ, АДФ, АМФ) в симпатическом ганглии, связанные с частичным и полным блокированием никотиновых холинорецепторов, а также динамику этих показателей в процессе последующего восстановления после прекращения действия блокады.

6. Провести комплексный анализ полученных динамических изменений метаболических показателей при экспериментально вызванных флук-туациях численности свободно функционирующих никотиновых холинер-гических рецепторов. Определить роль никотиновых холинергических рецепторов в регуляции метаболического статуса симпатического ганглия и межклеточном взаимодействии между симпатическими нейронами и са-теллитными глиоцитами и вероятный механизм, лежащий в основе этой регуляции.

Научная новизна

Установлены раннее неизвестные принципы морфофункциональной организации симпатического ганглия, которые базируются на том, что

синаптические сигналы, поступающие через никотиновые холинорецепторы симпатических нейронов, управляют метаболическими процессами и мобилизуют специфические клеточные механизмы в симпатическом ганглии, выступая в качестве системообразующего фактора, обеспечивающего его активную деятельность.

Впервые показано, что в симпатическом ганглии нейроны и окружающие нейроны сателлитные глиоциты при определенных условиях образуют единую функционально - метаболическую систему. Выявлены ранее неизвестные условия и характер взаимодействия между этими типами клеток, которые заключаются в том, что нейроны и сателлитные глиоциты в симпатическом ганглии вступают в метаболическое взаимодействие только при наличии синаптического сигнала, поступающего через никотиновые холинорецепторы симпатических нейронов. При этом метаболическая активность и энергетические механизмы сателлитных глиоцитов регулируются функциональным состоянием нейронов, которые через ионотропные никотиновые холинорецепторы осуществляют интеграцию своего собственного метаболизма с метаболизмом окружающих сателлитных глиоцитов.

В эксперименте впервые показано, что в симпатическом ганглии создаются условия для энергетического взаимодействия между симпатическими нейронами и сателлитными глиоцитами и существует высокая вероятность реализации в краниальном шейном ганглии механизма энергетического гомеостаза на основе клеточной интеграции, описываемого гипотезой ANLSH (astrocyte-neuron lactate shuttle hypothesis) для головного мозга, которая предполагает существование между глиоцитами (астроцитами) и нейронами лак-татного челночного механизма.

Впервые определен изоферментный спектр ЛДГ для краниального шейного ганглия и изоферментный профиль ЛДГ для симпатических нейронов и сателлитных глиоцитов.

Научно-практическая значимость

Разработанная в работе функционально-информационная модель регуляции краниального шейного симпатического ганглия представляет теоретический и практический интерес с позиций понимания специфических механизмов и общих принципов, лежащих в основе морфофункциональной организации периферических ганглиев и в целом симпатического отдела нервной системы.

Показанное в работе нейротрофическое значение холинергического сигнала через никотиновые холинорецепторы указывает на необходимость учета и оценки последствий модуляций активности периферических никотиновых холинорецепторов в краниальном шейном симпатическом ганглии, как объекта воздействия наркотических субстанций и лекарственных препаратов. Вместе с этим ключевая роль синаптических процессов с участием никотиновых холинорецепторов в организации контроля метаболизма и клеточного взаимодействия в краниальном шейном симпатическом ганглии указывает на возможность адресного, направленного на периферические никотиновые холинорецепторы, фармакологического контроля и коррекции симпатических функций.

Описанные в работе динамика энергетических и метаболических показателей и происходящие изменения в нейрон-глиальном взаимодействии расширяют фактологическую базу для расшифровки молекулярно-клеточных механизмов патогенеза заболеваний, связанных с нарушением синаптической функции холинергической передачи через никотиновые рецепторы.

Выявленный эффект применяемого в работе ганглиолитика, относящегося к группе бис-катионных аммониевых соединений, на динамику метаболических сдвигов в симпатическом ганглии и входящих в его состав нейронов и сателлитных глиоцитов восполняет существующий пробел в представлениях о молекулярно-клеточных механизмах действия этой группы неконкурентных холинолитиков в самом объекте блокады - краниальном шейном симпатическом ганглии.

Основные положения, выносимые на защиту

На основании анализа динамики метаболических процессов при модуляциях синаптического холинергического сигнала разработана функционально-информационная модель регуляции краниального шейного симпатического ганглия. Синаптический сигнал, поступающий через никотиновые холинорецепторы в синапсах симпатических нейронов, является для симпатического ганглия системообразующим фактором, который трансформирует и направляет метаболизм и создает специфическую клеточную интеграцию в ганглии для выполнения этим органом адекватной функции.

В рамках представленной модели установлено следующее.

■ Синаптический сигнал, через никотиновые холинорецепторы симпатических нейронов:

- управляет метаболическим статусом симпатического ганглия, осуществляя регуляцию базового уровня энергетического гомеостаза и изменяя активность белок-синтезирующей системы нейронов и саттелитных глиоцитов.

- потенцирует формирование специфической межклеточной интег-ративной единицы, связывая симпатические нейроны и соседние сателлитные глиоциты в единую функционально - метаболическую систему.

■ В отсутствие холинергического синаптического сигнала в симпатическом ганглии оказываются задействованными механизмы, поддерживающие только его системы жизнеобеспечения, а симпатические нейроны и сателлитные глиоциты представляют собой метаболически обособленные друг от друга клеточные системы.

■ На клеточном уровне показано, что синаптический сигнал через никотиновые холинергические рецепторы:

- индуктивно воздействует на метаболическую активность симпатических нейронов, вызывая в них повышение уровня активности белок-синтезирующей системы;

- модулирует в нейронах активность белок-синтезирующей системы;

- обеспечивает энергетический гомеостаз в нейронах, по крайней мере, на уровне регуляции активности ферментативной системы ЛДГ;

- обеспечивает синхронизацию процессов синтеза белка в нейронах и соседних сателлитных глиоцитах на уровне трансляции, и детерминирует анаэробную направленность изоферментного профиля ЛДГ в сателлитных глиоцитах.

Внедрение

Результаты исследования нейротрофического значения синаптической передачи через никотиновые холинорецепторы и ее роли в нейрон-глиальном взаимодействии в симпатическом ганглии используются при чтении лекций и проведении практических занятий на кафедрах гистологии и эмбриологии Российского государственного медицинского университета и анатомии и гистологии животных Московской академии ветеринарной медицины и биотехнологии.

Апробация работы

Основные материалы диссертации были представлены на IX и X Всесоюзных съездах анатомов, гистологов и эмбриологов (г.Минск, 1981 и г. Полтава, 1986); VII и VIII конгрессах международной ассоциации морфологов (г. Казань, 2004 и г. Орел, 2006); VII Всероссийской конференции по патологии клетки (г. Москва, 2005); 5-й Всероссийской конференции «Бабу-хинские чтения в Орле» (г. Орел, 2006); Конференциях ГУ НИИ морфологии человека РАМН «Актуальные вопросы морфогенеза в норме и патологии» (г. Москва, 2005, 2006, 2008), межлабораторной конференции в ГУ НИИ морфологии человека РАМН (декабрь, 2007г.).

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 24 печатные работы, из них 8 в журналах, рекомендуемых ВАК РФ.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 276 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, общей характеристики материала и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов, заключения, выводов и списка литературы. Работа иллюстрирована 42 рисунками и микрофотографиями, содержит 36 таблиц и одну схему. Список литературы включает 418 источников, из которых 110 отечественных и 308 зарубежных.

Материал и методы исследования

Работа выполнена на материале краниальных шейных симпатических ганглиев (КШСГ) половозрелых кроликов породы шиншилла (питомник "Столбовая"). В эксперименте использовано 103 животных, 124 ганглия, проанализировано 3568 симпатических нейронов и 5647 сателлитных глиоцитов.

При работе с экспериментальными животными руководствовались приказами Минздрава СССР № 755 от 12.08.1977 г. и Минздрава РФ № 267 от 19.06.2003г. На проведение экспериментов получено разрешение Комиссии по биоэтике ГУ НИИ морфологии человека РАМН (Протокол № 3 от.21.04.2005г.)

Экспериментальная модель. Для оценки роли никотиновых холино-рецепторов (нХР) применялось экспериментально индуцированное и управляемое изменение эффективности синаптического влияния через нХР. С этой целью использовали холинолитик димеколин. Холинолитический эффект препарата заключается в блокировании нХР в синапсах сим-

патических нейронов, число которых последовательно возрастает с увеличением дозы ганглиоблокатора (Скок В.И. и соавт.,1987; Бровцына Н.Б. и соавт., 1996). Димеколин характеризуется высокой холинолитической активностью, максимальный блокирующего эффект препарата наступает через 1час, с продолжительностью действия около 3-х часов, и слабой выраженностью побочного действия (Шарапов И.М., 1962; Вышинская Т.Е., 1965; Першин Б.Н., 1966).

Эксперимент планировали в соответствии с установленной для кроликов фармакодинамикой препарата (Шарапов И.М.1961, 1962; Першин Б.Н., 1966). Применяли однократное подкожное введение ганглиоблокатора в дозах 10, 30 и 50 мг/кг живого веса, первая из которых превышает пороговую дозу и вызывает частичное блокирование, а последняя приводит к практически полному блокированию нХР. После введения препарата в каждой из указанных доз в разные сериях опыта материал брали через 1, 3, 5, 7, 9 и 11 часов.

Исследовали:

> рРНК - ключевой параметр белкового синтеза (Grannemann S., Baserga S., 2004; Dresios J. et al., 2006).

> Ферментативную систему ЛДГ, которая осуществляет регуляцию субстратного обеспечения энергетических процессов (Зимин Ю.В. и др., 2001; Gladden L., 2004) и принимает участие в ряде других механизмах внутриклеточной регуляции (Popanda О. et al., 1998; Beeckman S., KanasekE., 1996).

> Аденилатные макроэрги (АТФ, АДФ, АМФ), уровень содержания, которых характеризует энергетический статус и общую интеграцию биохимических процессов (Хочачка П., Сомеро Дж., 1977, 1988; Dzeja Р., Terzic А., 2003).

Содержание нуклеиновых кислот определяли в цитоплазме нейронов и в сателлитных глиоцитах методом сканирующей фотографической цито-

фотометрии (Агроскин JI.C., Папаян Г.В.,1977) на микрофотометре ИФО-451 (фирма ЛОМО).

Для этого материал заключали в парафин в режиме, не приводящем к потерям нуклеиновых кислот (Гореликов П.Л, 1977, 1979), изготовляли срезы толщиной 5-7 мкм. Толщину парафиновых срезов измеряли предложенным нами методом (Гореликов П.Л, 1975) с помощью микроскопа ОРИМ - 1 (фирма ЛОМО). Срезы окрашивали по методу Эйнарсона и фотографировали в максимуме поглощения красителя (575 ммк) на специально для этой цели подобранную фотопленку КН-3 (Гореликов П.Л., Лебедев Э.А., 1977). Результаты, пересчитывали на 1 мкм толщины срезов.

Полученные в нейронах и сателлитных глиоцитах цитохимические сдвиги относили за счет изменений рРНК, так как в цитоплазме нейронов нуклеиновые кислоты в основном представлены рРНК (Гайцхоки B.C., 1980), а в глиоцитах, в которых по существу определяется суммарное количество РНК+ДНК, изменениями глиальной ДНК можно пренебречь, поскольку в зрелой нервной ткани она характеризуется стабильностью (Peters A., Sethares С., 2004). Объем выборки в контроле и во всех сериях опыта составлял в среднем 100 - 200 клеток каждого типа взятых от отдельного животного.

Активность ЛДГ, H и M ее изоформ в нейронах и окружающих их сателлитных глиоцитах определяли методом интегральной цитофотометрии (Агроскин Л.С., Папаян Г.В., 1977) на цитофотометре МИФ-1 (фирма ЛОМО) на криостатных срезах после гистохимического окрашивания тетранитро-синим тетразолием по методу Брумберга В.А. и Певзнера Л.З. (1975), позволяющему проводить количественную оценку активности фермента. Объем выборки составлял в контроле и в опыте по 150 нейронов и 210 - 300 сателлитных глиоцитов от каждого животного.

Содержание АТФ, АДФ, АМФ в ганглии определяли методом распределительной тонкослойной хроматографии на силуфоловых пластинках, с последующим количественным спектрофотометрическим определением раз-

деленных нуклеотидов на спектрофотометре СФ-16 (фирма JIOMO) в УФ диапазоне (260 ммк).

Активность изоферментов ЛДГ определяли в относительных единицах методом фотографической фотометрии (Агроскин J1.C., Папаян Г.В., 1977). Разделение изоферментов осуществляли с помощью диск-элекрофореза в полиакриламидном геле (ПАГ) в микромодификации Панавене Д.П. (1974) после окрашивания нитросиним тетразолием. После фотографирования в максимуме поглощения формазана (569 ммк) на специально подобранную для этой цели Аэрофотопленку, электрофореграммы денситометрировали на микрофотометре ИФО-451 (фирма JIOMO).

При исследовании всех показателей в контроле и в каждой из серий опыта использовано по 3-5 животных.

Статистическую обработку результатов проводили с использованием общепринятых методов параметрической (t-критерий, корреляционный анализ) и непараметрической (U-критерий) статистик с помощью компьютерных программ "Microsoft Excel 97", с, "STATISTICAL При оценке статистической значимости коэффициентов корреляции (г) применяли преобразование Фишера.

Результаты исследований и их обсуждение

1. Влияние блокирования никотиновых холинорецепторов на метаболическую активность симпатических нейронов и сателлитных

глиоцитов

Влияние функционирующих никотиновых холинорецепторов на проявления метаболической активности в нейронах и глиоцитах

Примененная в работе экспериментальная модель дозированной синап-тической блокады дает возможность создавать динамически изменяющийся численный баланс между нХР, которые вследствие блокирования находятся, в инактивированном состоянии, и нХР, которые, напротив, остаются неза-

нятыми ганглиоблокатором и, следовательно, сохраняют способность активно функционировать, и сопоставить эти изменения с цитохимическими сдвигами, происходящими в это время в исследуемых клетках.

Такой анализ позволил установить, что при синаптической блокаде нХР динамика формирования метаболических сдвигов в нейронах и соседних с ними сателлитных глиоцитах существенно различается.

В нейронах блокада, независимо от уровня блокирования холинорецеп-торов, вызывает стереотипный цитохимический ответ - выраженные колебания содержания рРНК, которые вместе с ослаблением и окончанием блокирующего воздействия постепенно затухают (рис. 1а,б,в). Важной особенностью наблюдаемых колебаний является то, что они происходят на уровне заметно превышающем контрольный.

Отмеченные в цитоплазме нейронов изменения рРНК представляют собой в достаточной мере адекватную характеристику функционального потенциала белок-синтезирующей системы, по крайней мере на уровне трансляционных процессов синтеза белка (Grannemann S., Baserga S., 2004; Dresios J. et al., 2006) и свидетельствуют о том, что в ответ на блокаду синаптической передачи через нХР эти процессы в симпатических нейронах заметно активизируются.

Именно изменения режима функционирования синаптической передачи являются основной причиной активизации белок-синтезирующего аппарата в нейронах (Gueorguiev Y. et al., 2000; Dunckley T., Lukas R., 2003) и продиктованы они необходимостью обеспечить материальными ресурсами функциональные и структурные перестройки синаптических образований (Wang H., TiedgeH., 2004).

Таким образом, полученные сдвиги рРНК сами по себе являются проявлением метаболического ответа нейронов на изменения внешних условий, связанных с нарушением нормального хода синаптических процессов в результате блокады синаптической передачи.

НЕЙРОНЫ

глиоциты

Корреляция

N 1/ 200 150 -

100

50 -L

Рис.1 Динамика содержания рРНК в симпатических нейронах и сателлитных глиоцитах при разных уровнях блокады никотиновых холинорецепторов

Обозначения: нХР - никотиновые холинорецепторы;

а - незначительное (10 мг/кг) и б - значительное количество (30 мг/кг) первоначально блокированных нХР; в - практически полная блокада (50 мг/кг) нХР. В скобках указаны дозы ганглиоблокатора.

По вертикали - отклонение в % к контролю. По горизонтали - время после введения ганглиоблокатора (в час.).

Примечание: * анализировали нейроны ядра, которых в плоскости данного среза имели, как минимум, одно ядрышко и глиоциты, удаленные от перикариона нейронов не более чем на больший диаметр ядра глиальной клетки;

** статистическую достоверность различий в полученных результатах и стандартную ошибку средних значений оценивали по t - критерию с р < 005.

Вместе с тем модуляции содержания рРНК в нейронах КШСГ оказываются закономерно связанными с активностью нХР.

Так вызванные эффектом блокады изменения содержания рРНК в нейронах происходят, только в том случае, когда в ганглии есть нормально функционирующие нХР. В самом деле, когда практически все нХР в синапсах нейронов заблокированы (через 1 и 3 часа после введения ганглиоблокатора), уровень содержание рРНК в цитоплазме статистически значимо не изменяется (р > 0,05), то есть остается на уровне этого показателя в интактных нейронах (рисЛв). Это означает, что при полной блокаде нейроны оказываются полностью депривированы и, несмотря на изменения внешней ситуации, связанной со сдвигами в режиме функционирования синаптической передачи, тем не менее, не могут изменить свой метаболизм.

В то же время при наличии в ганглии некоторого количества незабло-кированных, и, следовательно, сохраняющих функциональную активность, нХР (через 1 часа после введения ганглиоблокатора в дозах создающих частичную блокаду рецепторов), наблюдается резкий подъем содержания рРНК (рис.1а,б). С позиций предполагаемой роли нХР важно отметить, что величина наблюдаемого при этом сдвига в содержании рРНК оказывается тем больше, чем выше количественный уровень способных к активному функционированию нХР (рис.1).

Характер последующих цитохимических изменений в ходе разблокирования нХР (через 5, 7, 9 и 11 часов после введения ганглиоблокатора) подтверждает, что установленная в период блокады связь между активностью холинорецепторов и метаболической активностью нейрона закономерна и случайным совпадением не является. Так в случае применения полной блокады холинорецепторов содержание рРНК в нейронах начинает повышаться только при постепенном разблокировании нХР (через 5 часов) и продолжает возрастать (через 7 часов) параллельно увеличению количества способных к функционированию нХР, которые последовательно освобождаются в процессе разблокирования (рис.1 в).

Кроме того, из сопоставления модуляций при разных условиях блокирования следует, что уровень первоначально заблокированных нХР детерминирует также и относительную быстроту цитохимического ответа, и размах происходящих при этом колебаний. В самом деле, наблюдаемое максимальное увеличение содержания рРНК наступает тем раньше и по величине амплитуды оно тем больше, чем большим является количество сохраняющихся при данной модели блокады активных нХР (рис.1). Так при минимальном блокировании нХР максимальное отклонение наблюдается через 1 час и его величина относительно контроля составляет 72% (рис. 1а). При увеличении численности блокированных нХР максимальное отклонение наблюдается позже, только через 5 часов, и уже со значительно меньшей амплитудой - на 49% выше контрольного уровня, (рис. 16), при полном блокировании максимально возможное отклонение наступают еще позже -через 7 часов и является при этом наименьшим - увеличение только на 35% (рис.1в).

Таким образом, полученные экспериментальные данные дают основания заключить, что нХР в симпатическом ганглии весьма специфично проявляют себя в формировании метаболизма рРНК в нейронах. Не оказывая заметного влияния на базовый уровень этого показателя, характеризующий интактные нейроны, данные рецепторы принимают участие в индуктивных механизмах, которые в ответ на изменения внешних условий запускают динамические изменения рРНК в нейрональной цитоплазме и при этом, по всей вероятности, одновременно модулируют необходимый уровень и интенсивность цитохимического ответа.

Эффект блокирования нХР проявляется и на морфологическом уровне, что находит свое выражение в структурных перестройках хроматофильной субстанции в цитоплазме нейронов.

При полной блокаде холинорецепторов (через 1 час после введения ганглиоблокатора) в нейронах наблюдается тотальный хроматолиз. В это время основную массу нейронов представляют клетки, в которых имеет место

выраженное "измельчение" хроматофильной зернистости и значительное просветление участков цитоплазмы, в которых нисслевская субстанция не просматривается. В известной мере такая структурная реорганизация хроматофильной субстанции свидетельствует о существенной дезинтеграции эргастоплазмы (Pullen А., 1990; Heus R., Diegenbach Р., 1992).

В то же время при частичном блокировании нХР изменения хроматофильной субстанции носят в эти же сроки разнонаправленный характер. При блокировании незначительного числа рецепторов наблюдается гипер-хроматоз. В этом случае большая часть нейронов представлена клетками с крупнозернистой формой хроматофильной субстанции в цитоплазме, которая местами переходит в крупноглыбчатую форму. При этом глыбки укрупняются настолько, что теряют свою обособленность и формируют в цитоплазме однородную плотную массу, которая в норме не встречается. При возрастании численности заблокированных нХР морфологическая картина представлена, напротив, умеренным хроматолизом. В подавляющем большинстве нейронов хроматофильная субстанция в значительной степени диспергирована, в отдельных участках цитоплазмы наблюдается разрежение базофильного материала с заметным уменьшением размера зернистости.

Все отмеченные изменения обратимы и, независимо от числа первоначально заблокированных холинорецепторов, ослабление и окончание блокады в последующие сроки (3-11 часов) сопровождаются постепенной нормализацией хроматофильной субстанции.

Наблюдаемая морфологическая картина позволяет говорить о том, что степень трансформационных изменений хроматофильной субстанции характеризует, прежде всего, масштабность количественных модуляций рРНК: значительное увеличение содержания рРНК проявляются в гиперхроматозе, менее выраженные по величине изменения этого показателя, напротив, сопровождает умеренный хроматолиз.

Представленные данные, с учетом результатов количественного анализа цитохимических изменений рРНК и то, что на светооптическом уровне

хроматофильная субстанция по существу представляет эргастоплазму нейрона и ее базофильные гранулы располагаются в местах интенсивного белкового синтеза (Pannese Е., 1994; Крстич Р.В., 2001), подтверждают конкретный вклад никотиновых холинорецепторов в регуляцию белково-синтезиру-ющего аппарата симпатических нейронов, по крайней мере, на уровне трансляции.

В сателлитных глиоцитах блокада также, как и в нейронах вызывает стереотипный для этих клеток цитохимический ответ - существенные колебания содержания рРНК (рис. 1а,б,в). Вместе с тем динамика этого показателя имеет свои особенности. В отличие от нейронов, в глиоцитах изменения при всех уровнях блокирования нХР характеризуются четко выраженным фазным характером, и в них можно выделить три различных фазы (рис.1 а,б,в).

Фаза подъема, во время которой в глиоцитах происходит увеличение содержания рРНК. Указанный сдвиг отмечается в первые часы после введения ганглиоблокатора при всех уровнях блокирования нХР и его величина прямо не связана с количеством блокированных нХР. Так амплитуда изменений рРНК в глиоцитах при блокаде большого количества нХР (рис.1б) и при полной блокаде нХР (рис.1в) оказывается практически одинаковой (р > 0,05).

Фаза нормализаиии. во время которой содержание рРНК в глиоцитах временно нормализуется.

Фаза снижения, во время которой содержание рРНК в глиоцитах снижается.

Фазный характер количественных сдвигов рРНК в сателлитных глиоцитах скорее всего является частным проявлением общих закономерностей в динамике синтетической активности глиоцитов разных отделов нервной системы, которые при различных воздействиях отвечают, как правило, разнонаправленными относительно контрольного уровня модуляциями содержания рРНК (Гейнисман Ю.Я., 1974; Мац В.Н., 1994).

Таким образом, симпатические нейроны и окружающие их глиоциты характеризуются различной метаболической реакцией в ответ на нарушение синаптических процессов, вызванных блокадой.

Нейрон-глиальная метаболическая корреляция при разных уровнях блокирования никотиновых холинорецепторов

В модуляциях содержания рРНК в нейронах и окружающих нейроны сателлитных глиоцитах в условиях частичной блокады, сохраняющей в синапсах некоторое количество незаблокированных и, следовательно, функционально активных нХР, обнаруживается высокая, статистически достоверная положительная корреляционная зависимость (рис. 1а,б).

Напротив, при полном блокировании нХР такая корреляционная зависимость между указанными клеточными системами отсутствует (рис.1 в).

Высокая согласованность в динамике количественных изменений рРНК между симпатическими нейронами и соседними с ними сателлитными глио-цитами при наличии активных нХР и отсутствие таковой при полном блокировании нХР позволяет полагать, что в симпатическом ганглии существует механизм, координирующий метаболические изменения рРНК в нейронах и глиоцитах. Необходимым компонентом этого механизма координации является медиаторное взаимодействие с нХР, расположенных в синапсах симпатических нейронов.

Таким образом, из анализа полученных данных, следует, что в механизмах управления работой симпатического ганглия существует важное функциональное звено, представленное никотиновыми холинергическими синапсами (нХР).

На основании полученных экспериментальных данных можно заключить, что, во-первых, синаптический сигнал через нХР оказывает индуктивное и модулирующее воздействие на активность белок-синтезирующей системы в симпатических нейронах КШСГ вызывая, в ответ на вызванные

блокадой изменения синаптической активности, повышение функционального потенциала этой системы.

Во-вторых, через медиаторное взаимодействие с нХР симпатические нейроны сопрягают свою метаболическую активность с метаболической активностью соседних с ними сателлитных глиоцитов, по крайней мере, на уровне количественных изменений рРНК в этих клетках.

2. Влияние блокирования никотиновых холинорецепторов на энергетические процессы в симпатическом ганглии

Особенности изоферментного спектра ЛДГ интактного ганглия и входящих в его состав симпатических нейронов и сателлитных глиоцитов

В связи с тем, что спектр изоферментов ЛДГ характеризует высокая органная и тканевая специфичность (Райдер К., Тейлор К., 1983) для решения поставленных в работе задач необходимо было определить в КШСГ кроликов не исследованный до настоящего времени изоферментный состав ЛДГ. На основании полученных электрофореграмм установлено, что в интактном ганглии ферментативная система ЛДГ представлена всеми пятью основными изоферментами (рис.2). Наиболее активны из них анодные фракции ЛДГ-1 и ЛДГ-2, суммарный вклад которых в общую активность ЛДГ составляет более 50% от активности остальных изоформ (ЛДГ-3, ЛДГ-4 и ЛДГ-5).

В связи с этим КШСГ кролика можно отнести к категории органов, в которых превалирует активность, так называемых, изоформ ЛДГ сердечного типа (Райдер К., Тейлор К., 1983; Зимин Ю.В. с соавт., 2001).

Цитохимический анализ изоферментного состава ЛДГ подтверждает основные результаты, полученные при изучении ферментативной системы ЛДГ на уровне симпатического ганглия. Также как и в ганглии, в

Рис.2 Изоферментный состав ЛДГ и относительный вклад (в%) каждого изофермента в общую ферментативную активность ЛДГ в интактном симпатическом ганглии.

Обозначения: 1, 2, 3, 4 и 5 соответственно изоферменты ЛДГ-1, ЛДГ-2, ЛДГ-3, ЛДГ-4 и ЛДГ-5. Стрелки H и M указывают на изоферменты с преобладанием H и M субъединиц.

симпатических нейронах и сателлитных глиоцитах выявляется высокая активность Н и М-изоформ ЛДГ (рис.4). Вместе с тем в указанных клетках обнаруживаются важные принципиальные различия в соотношении активности между Н и М изоформами ЛДГ (рис.4).

В нейронах, как и в симпатическом ганглии, в спектре ЛДГ преобладает активность Н-изоформ (Н/М > 1). Такая особенность изоферментного профиля ЛДГ нейронов и ганглия в целом выглядит закономерной, так как высокий уровень активности Н-изоформ необходим для реализации высокоэффективной аэробной фазы энергопродукции (Хочачка П., Сомеро Дж., 1977; Gladden L., 2004).

Вместе с тем изоферментный профиль ЛДГ расположенных вокруг нейронов сателлитных глиоиитов характеризуется противоположной направленностью (рис.4). В этих клетках наиболее активны М-изоформы (H/M < 1), что свидетельствует, с учетом субстратной специфичности М-изоформ (Pellerin L., 2003; Bouzier-Sore A., et al., 2003), о том, что сателлитные глио-циты продуцируют лактат в значительно большем количестве, чем нейроны.

Выявленные на клеточном уровне различия ферментативных систем ЛДГ указывают, таким образом, на существование в симпатическом ганглии градиента в распределении лактата между симпатическими нейронами и окружающими их сателлитными глиоцитами. Наличие такого градиента между клетками, в соответствии с современными представлениями биоэнергетики (Gladden L., 2004; Philp A. et al., 2005; Schurr A., 2006), создает принципиальные возможности для осуществления межклеточного транспорта лактата, который может использоваться в качестве дополнительного энергетического ресурса для интенсивно работающих клеток. Именно существование такого механизма на основе трансферта лактата через глио-синап-тические контакты в активно работающие нейроны из астроцитов, которые имеют точно такую же, как и сателлитные глиоциты, анаэробную направленность энергетического обмена, предусматривается в головном мозге в соответствии с концепцией лактатного челночного механизма ANLSH (astrocyte-neuron lactate shuttle hypothesis) (Pellerin L., 2003; Pellerin L., Magistretty P., 2004; Pierre K., Pellerin L., 2005).

Можно полагать в связи с вышеизложенным, что установленные различия в ферментативных системах ЛДГ симпатических нейронов и сателлит-ных глиоцитов характеризуют те же клеточные механизмы энергетического взаимодействия, которые предусматриваются концепцией ANLSH, и сателлитные глиоциты симпатического ганглия наделены подобно астроцитам функциями энергообеспечения нейронов.

Влияние блокирования никотиновых холинорецепторов на ферментативную активность и изоферментный профиль ЛДГ в симпатическом ганглии

Синаптическая блокада нХР, как частичная, так и полная, ингибирует в значительной мере активность всей ферментативной системы ЛДГ (рис.3).

□ 5

Рис. 3. Редукция изоферментного состава и активности ЛДГ в ганглии при уменьшении числа свободных никотиновых холинорецепторов. Обозначения: К - контроль, Ч и П - частичная и полная блокада рецепторов, при введении ганглиоблокатора в дозах соответственно 10 и 50 мг/кг. Черным - показана относительная доля (цифры в рамке) Н-субъединиц фермента, стрелками - уменьшение активности общей ЛДГ и ее остаточная активность (подчеркнутые цифры). 1, 2, 3, 4 и 5 - обозначения изо-ферментов ЛДГ те же, что и на рис.2. Все различия достоверны (и критерий, р < 0,05).

Наибольшие по величине сдвиги наблюдаются уже при частичном блокировании нХР. В этих условиях синаптической блокады происходит полное исчезновение катодных фракций (ЛДГ-4 и ЛДГ-5). Активность остающихся в спектре анодных фракций (ЛДГ-1 и ЛДГ-2) и гибридной формы ЛДГ-3, при этом, резко снижается, составляя значительно меньше половины (29%, 30% и 13% соответственно) от активности этих изоформ в контроле (рис.3). Следствием этих изменений является значительное снижение (более чем в 5 раз) активности общей ЛДГ.

В редуцированном таким образом спектре ЛДГ, состоящем только из трех изоферментов, заметно выражена поляризация между активностью анодных фракций ЛДГ-1 и ЛДГ-2, на долю которых приходится 86% всей активности ферментативной системы ЛДГ, и активностью гибридной изо-формы ЛДГ-3 (рис.3). На долю последней приходится только 14% всей активности ЛДГ, в связи, с чем она не вносит заметный вклад в общую активность ЛДГ.

В результате таких изменений, в спектре ЛДГ при частичной блокаде нХР вклад (83%) Н-субъединиц в общую активность ЛДГ, по сравнению с

нормой заметно возрастает (рис.3). Это означает, с учетом функциональной значимости Н и М изоформ (Pellerin L., 2003; Gladden L., 2004), что метаболическая направленность ферментативной системы ЛДГ и характер ее воздействия на энергопродуцирующие механизмы в ганглии при блокировании рецепторов меняются: основной процесс наработки пирувата из лактата сохраняется, тогда как катализация обратного процесса - превращения пирувата в лактат в значительной степени снижается.

Следует при этом подчеркнуть, что в силу резкого, почти пятикратного падения активности ЛДГ, в результате которого активность фермента составляет только 19% от уровня контроля (рис.3), сама по себе степень участия ферментативной системы ЛДГ в реализации аэробной фазы энергопродукции при частичном блокировании нХР в целом оказывается существенно сниженной.

При полном блокировании нХР процесс сжатия спектра ЛДГ продолжается (рис.3). Из спектра окончательно исчезает гибридная форма изофер-мента ЛДГ-3 и в составе ферментативной системы ЛДГ остаются только две изоформы: ЛДГ-1 и ЛДГ-2. Активность этих изоформ, по сравнению с условиями частичного блокирования рецепторов, при этом еще более снижается.

Следует подчеркнуть, что, и при частичном блокировании и при полном блокировании нХР, сохраняется полная синхронность в изменениях ЛДГ-1 и ЛДГ-2. В результате этого уровень остаточной активности одинаков для ЛДГ-1 и ЛДГ-2. Этот показатель (16%), равно как остаточная активность ЛДГ в целом (9%), существенно ниже (р < 0,01), чем величина этих показателей при частичном блокировании никотиновых рецепторов.

В редуцированном таким образом спектре, полностью представленным только двумя изоферментами, суммарный вклад в ферментативную активность Н-субъединиц составляет 89%, а М-субъединиц - всего 11%. Это говорит о том, что метаболическая направленность ферментативной системы ЛДГ и ее воздействие на энергопродуцирующие механизмы в ганглии при полной

блокаде нХР приобретают практически односторонний характер, ориентированный на превращение лактата в пируват, на фоне практически полного прекращения обратной реакции с участием ЛДГ - превращения пирувата в лактат.

Редукция изоферментного состава и крайне низкий уровень активности ЛДГ при полном блокировании никотиновых холинорецепторов значительно ограничивает потенциальные возможности ферментативной системы ЛДГ для участия в энергопродуцирующих механизмах ганглия.

Таким образом, частичная блокада нХР в симпатическом ганглии вызывает редукцию спектра ЛДГ и значительное снижение активности всей ферментативной системы ЛДГ. Полная блокада нХР практически исключает участие этого фермента, как в энергообеспечении, так и в других процессах метаболизма. Вместе с этим блокирование холинорецепторов трансформирует функциональную направленность ферментативной системы ЛДГ, существенно сдвигая катализируемую этой системой реакцию взаимопревращения пирувата и лактата в сторону преимущественного образования пирувата.

Полученные результаты позволяют заключить, что органноспеци-фичный для КШСГ изоферментный состав и активность ЛДГ поддерживаются только при нормально функционирующих нейрональных никотиновых холинорецепторах и указывают на важную роль этих рецепторов в механизмах гомеостаза ферментативной системы ЛДГ.

Влияние блокирования никотиновых холинорецепторов на ферментативную систему ЛДГ в симпатических нейронах и сателлитных глиоцитах

В нейронах блокирование нХР вызывает значительное снижение активности изоферментов ЛДГ (рис.4).

НЕЙРОНЫ

глиоциты

Рис.4. Ферментативная система ЛДГ в клетках симпатического ганглия в разных условиях блокады никотиновых холинорецепторов. Обозначения: По горизонтали: К - контроль; Ч и П - частичная и полная блокада рецепторов (через 1 час после введения ганглиоблокатора в дозах 10 и 50 мг/кг соответственно). По вертикали: активность ферментов в отн. ед.

Примечание: нХР - никотиновые холинорецепторы; Н/М отношение между активностью Н и М-формами ЛДГ. Стрелка на диаграмме указывает направление инверсии изофермент-ного профиля ЛДГ глиоцитов при нарастающей блокаде нХР.

Также как и в целом ганглии, в нейронах, по мере сокращения числа свободно функционирующих нХР, наблюдается синхронное, весьма значительное и последовательное падение активности ЛДГ и входящих в ее состав изоформ (рис.4). При блокировании части рецепторов активность общей ЛДГ в нейронах уменьшается на 41,5%, при полном блокировании-уменьшение активности фермента составляет уже 71% относительно уровня его ферментативной активности в контроле. Такая же последовательность в ин-гибировании ферментативной активности при усилении блокирующего воздействия регистрируется и в отношении отдельных изоферментов ЛДГ. Для Н-изоформ полученное снижение активности составляет соответственно 25% при частичной, и 58% при полной блокаде. Для М-изоформ уровень снижения активности относительно контрольных показателей составляет соответственно 36% и 62%.

В динамике изменения активности всех трех составляющих ферментативной системы ЛДГ (общей ЛДГ, Н- и М-изоформ), которые определяются в рамках одного и того же гистохимического метода, но с помощью независящих друг от друга цитохимических реакций, прослеживается совпадающая тенденция, которая выражается в том, что вместе с уменьшением свободно функционирующих никотиновых холинорецепторов, линейно, с довольно высоким коэффициентом детерминированности (R2 = 0,99) синхронно уменьшается и их активность (рис.4).

Важным следствием блокады является то, что в нейронах вместе с ингибированием активности ферментативной системы ЛДГ, происходит сдвиг в сторону большей активности Н-субъединиц, осуществляющих превращение лактата в пируват. Связано это с тем, что активность М-изоформы при блокаде нХР снижается в большей степени, чем активность Н-изоформы, в результате чего величина отношения Н/М в нейронах при блокаде, хотя и незначительно, но повышается (рис.4) и при частичной блокаде отношение Н/М устанавливается на уровне более высоком, чем контрольный (р < 0,05).

Вышеизложенные результаты показывают, что уменьшение уровня свободных нХР вызывает сдвиги в функциональной направленности ферментативной системы ЛДГ в нейронах в сторону интенсификации участия фермента в процессах аэробной фазы энергопродукции.

Полученная при блокаде однотипность в изменениях ЛДГ, Н и М ее изоформ, совокупный вклад которых по существу определяет общий уровень активности ЛДГ, каждая из которых выявлялась с помощью разных цитохимических методик, объективно указывает на закономерное участие нХР в регуляции активности всей ферментативной системы ЛДГ нейронов. При этом характер цитохимических изменений ЛДГ в нейронах достаточно хорошо согласуется с аналогичными изменениями ЛДГ, полученными в тех же условиях с помощью биохимического анализа этого фермента на уровне целого симпатического ганглия.

Таким образом, нейрональным никотиновым холинорецепторам принадлежит ключевая роль в регулировании ферментативной системы ЛДГ как на уровне симпатического ганглия, так и входящих в его состав нейронов.

Совокупность представленных результатов позволяет заключить, что синаптический сигнал через нХР представляется важной составной частью механизмов, которые, во-первых. формируют изоферментный спектр ЛДГ, во-вторых, обеспечивают необходимый уровень активности входящих в состав ЛДГ ферментов и, в-третьих, поддерживают ее функциональную специфичность, направленную на обеспечение необходимой для нормальной деятельности ганглия сбалансированности лактат-пируватной реакции.

В сателлитных глиоцитах расположенных вокруг нейронов наблюдается при блокаде нХР другие изменения активности ЛДГ (рис.4).

В этих клетках наибольшие изменения происходят только с М изофор-мами ЛДГ, активность которых по мере усиления блокирующего воздействия значительно снижается - на 43% относительно контрольных показателей при частичной блокаде нХР и на 55,5% - при полной блокаде. Активность Н-форм ЛДГ в глиоцитах, в отличие от нейронов, при этом не меняется (р > 0,05).

Достоверное снижение активности общей ЛДГ (р < 0,05) регистрируется только при полной блокаде нХР (рис.4) и очевидно связано с отмеченными выше изменениями в активности M изоформ.

Важным следствием особенной реакции ЛДГ сателлитных глиоцитов на блокаду нХР является резкое изменение в этих клетках отношения между уровнями активности изоформ ЛДГ (Н/М), которое претерпевает, по сравнению с интактными клетками полную инверсию (рис.4). Так, при частичной блокаде отношение Н/М в указанных клетках уже выше единицы (1,15). При полной блокаде изоферментный профиль ЛДГ глиоцитов статистически значимо (р>0,05) не отличается от величины отношения Н/М, характеризующего нейроны интактного ганглия, (рис.4).

Таким образом, при блокаде нХР в сателлитных глиоцитах происходит трансформация энергетических механизмов, по крайней мере, в отношении ферментативной системы ЛДГ, которая начинает функционировать также как в интактных симпатических нейронах.

Полученные экспериментальные результаты позволяет закономерно полагать, что в сателлитных глиоцитах механизмы энергетического обмена, по крайней мере, в части функционирования ферментативной системы ЛДГ, контролируются через никотиновые рецепторы холинергической синапти-ческой активностью симпатических нейронов, которые тем самым могут прямо влиять на процессы выработки лактата в окружающих симпатические нейроны сателлитных глиоцитах.

Установленная в работе интеграция энергетических процессов между нейронами и окружающих их сателлитными глиоцитами, которая детерминируется нейронами через синаптическое взаимодействие с нХР, может рассматриваться как один из ключевых механизмов энергетической организации КШСГ, подобно аналогичному клеточному механизму энергетической организации головного мозга в соответствии концепцией лактатного челночного механизма ANLSH (Pellerin L., 2003; Pellerin L., Magistretty P., 2004; Pierre K., Pellerin L., 2005).

Влияние блокирования никотиновых холинорецепторов на содержание макроэргов в симпатическом ганглии

Блокирование нейрональных нХР приводит к весьма значительному, больше чем на половину, синхронному снижению содержания всех аденилат-

Уменьшение количества свободных нХР

Рис.5. Дефицит в содержании аденилатных макроэргов в симпатическом ганглии при блокировании никотиновых холинорецепторов (нХР) Обозначения. По горизонтали: К - контроль; Ч - частичное и П - полное блокирование рецепторов, при применении доз ганглиоблокатора соответственно 10 и 50 мг/кг (через 1 час после введения). По вертикали: содержание макроэргов в мг%. Все различия достоверны (и критерий, р < 0,05).

Поскольку количественные изменения макроэргов отражают не только интенсивность энергопродуцирующих процессов, но и уровень клеточного метаболизма в целом (Хватова Е.М., с соавт., 1987; Бге]а Р.,Тете А., 1998), такая динамика свидетельствует о значительном энергетическом дефиците и о снижении общего метаболического потенциала при блокаде нХР.

При этом степень отмеченных изменений выражена тем сильнее, чем меньше в ганглии остается функционирующих нХР, численность которых, как известно (Першин Б.Н., 1966; Скок В.И. и соавт.,1987; Бровцына Н.Б. и соавт., 1996), уменьшается с увеличением дозы ганглиоблокатора

Создаваемый блокадой дефицит макроэргов вместе с тем носит обратимый характер и в последующем, независимо от степени первоначально примененного блокирующего воздействия, содержание макроэргов начинает столь же последовательно увеличиваться (рис.6).

Рис.6. Последовательное увеличение содержания аденилатных макроэргов в симпатическом ганглии при разблокировании никотиновых холинорецеп-торов (нХР)

Обозначения. По горизонтали: Время после введения ганглиоблокатора (в час.). По вертикали: содержание макроэргов в мг%.

(К) - контроль; (У) - частичное и (Л) - полное блокирование рецепторов, при применении доз ганглиоблокатора соответственно 10 и 50 мг/кг. При оценке достоверности различий средних применяли и критерий при р < 0,05. На графиках показаны линии тренда линейной апроксимации.

При этом содержание аденилатов закономерно повышается вместе с постепенным восстановлением нормальной численности свободно функционирующих нХР, что является естественным следствием ослабления и окончания синаптической блокады (Першин Б.Н., 1966; Скок В.И. и соавт., 1987; Бровцына Н.Б. и соавт., 1996).

Таким образом, характер динамики полученных сдвигов аденилатного пула макроэргов позволяют заключить, что синаптические нХР принимают закономерное участие в механизмах формирующих такой уровень содержания макроэргов, который обеспечивает необходимый энергетический баланс, отвечающий запросам нормально функционирующего симпатического ганглия.

Заключение

На основании полученных результатов впервые установлены закономерности, управляющие функциональной деятельностью краниального шейного симпатического ганглия. Суть этих закономерностей заключается в том, что, поступающий в ганглий через нейрональные никотиновые холинорецеп-торы афферентный информационный поток осуществляет включение и последующую модуляцию в ганглии определенных молекулярных и специфических клеточных механизмов (схема 1).

Синаптический сигнал через никотиновые холинорецепторы принимает участие в механизмах энергетического гомеостаза симпатического ганглия, обеспечивая управление базовым уровнем ключевых энергетических параметров - аденилатного пула макроэргов и ферментативной системы ЛДГ, активизирует и модулирует процессы синтеза белка в нейронах и окружающих нейроны сателлитных глиоцитах.

Вместе с этим синаптический сигнал через никотиновые холинорецепторы потенцирует в симпатическом ганглии специфическое клеточное взаимодействие - метаболическую интеграцию между симпатическим ней-

СИМПАТИЧЕСКИМ ГАНГЛИИ

Синаптиче-ский сигнал

Схема 1. Включение через нейрональные никотиновые холинорецепторы (нХР) специфических, связанных с поступающим синаптическим сигналом молекулярных и клеточных механизмов в симпатическом ганглии. / — поток катионов, индуцируемый синоптическим сигналом, II - обеспечение базовых уровней содержания макроэргов в ганглии и III - активности ферментативной системы ЛДГ в ганглии, нейронах (Н) и сателлитных глиоцитах (С), IV- индукция и модуляция синтетической активности в нейронах (Н) и сателлитных глиоцитах (С); Н-Г - нейрон-глиалъная метаболическая интеграция: сопряжение синтетических (1) и энергетических(2) процессов в симпатических нейронах (II) и сателлитных глиоцитах (С).

роном и сателлитными глиоцитами, тем самым, связывая эти клетки в единую функционально - метаболическую единицу.

В этой системе метаболизм сателлитных глиоцитов контролируется нейронами. Симпатические нейроны через никотиновые холинорецепторы сопрягают активность своей белок-синтезирующей системы, по крайне мере на уровне трансляции, с активностью белок-синтезирующего системы соседних с ними сателлитных глиоцитов и детерминируют анаэробную направленность энергетических процессов в сателлитных глиоцитах, ориентируя эти клетки на избыточное продуцирование лактата.

Использованная в работе экспериментальная модель, приводящая к блокированию ионных каналов в никотиновых холинорецепторах, делает возможным понимание природы сигнальных механизмов, трансформирующих регуляторное воздействие через никотиновые холинорецепторы. К таковым относятся ионотропные эффекты селективного потока катионов К+ и Са 2+, лежащие в основе быстрой холинергической синаптической передачи.

ВЫВОДЫ

1. Основополагающий принцип морфофункциональной организации симпатического ганглия заключается в сопряжении синаптических сигналов поступающих через никотиновые холинорецепторы симпатических нейронов с метаболическими процессами в симпатическом ганглии.

2. Синаптический сигнал через никотиновые холинергические рецепторы формирует в симпатическом ганглии временную межклеточную интегра-тивную систему, состоящую из метаболически взаимодействующих между собой симпатических нейронов и окружающих нейроны сателлитных глиоцитов. В отсутствие такого сигнала симпатические нейроны и сателлитные глиоциты представляют собой метаболически самостоятельные, независящие друг от друга клеточные системы.

3. Индуцируемое холинергическим синаптическим сигналом нейрон - глиаль-ное взаимодействие проявляется в синхронизации процессов синтеза белка в симпатических нейронах и сателлитных глиоцитах в ответ на изменения синаптической активности.

4. В обусловленном синаптическим сигналом межклеточном взаимодействии ведущая роль принадлежит симпатическим нейронам, которые через никотиновые холинергические рецепторы осуществляют контроль за процессами синтеза белка на уровне трансляции в соседних с ними сателлитных глиоцитах и детерминируют в сателлитных глиоцитах специфический изофер-ментный профиль ЛДГ, определяющий в этих клетках анаэробную направленность энергетических процессов.

5. Энергетические процессы в симпатических нейронах и сателлитных глиоцитах существенно различаются. В симпатических нейронах ферментативная система ЛДГ ориентирована на обеспечение доминирования аэробной фазы энергопродукции. В сателлитных глиоцитах изоферментный профиль ЛДГ, напротив, функционально обеспечивает доминирование анаэробной фазы и связанной с ней интенсивной продукцией лактата.

6. Синаптические никотиновые холинорецепторы являются необходимым функциональным звеном, через которое в ответ на изменения синаптической активности холинергических синапсов осуществляется активизация процессов трансляции белка в симпатических нейронах. При этом синаптический сигнал, поступающий через никотиновые холинорецепторы, оказывает модулирующее влияние на процессы трансляции белка в нейронах, детерминируя относительную быстроту и интенсивность наступающего цитохимического ответа.

7. Сателлитные глиоциты краниального шейного симпатического ганглия в ответ на изменение синаптической активности проявляют высокую метаболическую лабильность, которая выражается в модуляциях содержания рРНК и изменениях изоферментного профиля ферментативной системы ЛДГ

в этих клетках. В то же время метаболическая реакция сателлитных глио-цитов существенно отличается от реакции симпатических нейронов.

8. Ферментативная система ЛДГ в краниальном шейном симпатическом ганглии кроликов представлена в норме пятью основными изоформами: ЛДГ-1, -2, -3, -4 и -5. Наиболее активны анодные фракции ЛДГ-1 и ЛДГ-2. Относительная активность изоферментов в спектре ЛДГ последовательно убывает от ЛДГ-1 кЛДГ-5.

9. Через синаптическое взаимодействие с никотиновыми холинорецепторами обеспечивается необходимый для нормальной функциональной деятельности симпатического ганглия изоферментный состав и уровень активности каждого из изоферментов ЛДГ, устанавливаются базовые параметры аденилат-ного пула макроэргов.

10. Полученные результаты по изучению динамических изменений энергетических и метаболических параметров дают основания заключить, что синаптический сигнал через никотиновые холинорецепторы управляет энергетическим и метаболическим статусом симпатического ганглия в условиях его нормальной функциональной деятельности.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Гореликов П.Л. Динамика содержания цитоплазматической РНК симпатических нейронов при синоптической блокаде. //Бюлл. экспер. биол. и мед.-1980.- от. 89.- №2.- С. 232-234.

2. Гореликов П.Л. Светооптическая характеристика базофильного вещества симпатических нейронов в условиях синаптической блокады. //«Проблемы молекулярной биологии и патологии сельскохозяйственных животных». Сб. научн. тр. М.: Моск.вет.акад.-1980.- Т. 113.- С. 91 - 94.

3. Гореликов П.Л. Функциональные изменения хроматофильного вещества и содержание РНК в цитоплазме симпатических нейронов при нарушении синаптической передачи. //Арх. анат. гист. эмбр,- 1981.- т. 81.- № 7-С. 58 - 64.

4. Александровская О.В., Козлов Н.А., Гореликов П.Л. Морфологические изменения ганглиев периферической нервной системы при постнатальном развитии и компенсаторном ответе. //«Проблемы вирусологии, молекулярной биологии и гистологии сельскохозяйственных животных». Сб.научн.тр. М.: Моск.вет.акад.-1983.- С. 56 - 58.

5. Гореликов П.Л. Содержание РНК в нейронах и перинейрональной нейро-глии краниального шейного симпатического ганглия при синаптической блокаде. //В кн.: «Морфологические исследования в практике здравоохранения и животноводства». М.: Наука. - 1984.- С. 34-37.

6. Гореликов П.Л., Козлов Н.А., Плахотина Л.М. Морфо-функциональные проявления компенсаторного ответа симпатической системы сельскохозяйственных животных в условиях гипер- и гиподинамии. //«Возрастная и экологическая морфология животных в условиях интенсивного живодноводства». Сб. научн. тр. Ульяновск.: Ульяновский с.-х. ин-т.- 1987.- С. 85 - 87.

7. Гореликов П.Л. Метаболизм РНК в условиях дозированной гипофункции нейронов. //«Актуальные проблемы ветеринарной и зоотехнической науки в интенсификации живодноводства». Мат.конф.посв.70-летию MB А. М.: Моск. вет. акад.-1990.- С. 157- 158.

8. Гореликов П.Л. Некоторые особенности метаболизма РНК в нейронах периферической нервной системы в условиях дозирования гипофункции. //В кн.: «Морфофункциональные основы формирования в онтогенезе адаптивных возможностей организма человека и животных». М.: ИЭМЭЖ АН СССР.-1991-С. 11-12.

9. Гореликов П.Л. Морфофункциональный статус периферической нервной системы кроликов при дозированной гипофункции. //«Морфофункциональный статус млекопитающих и птиц». Сб. научн тр. Симферополь: Крымский с.-х. ин.-т. и Крымский мед. ин.-т.- 1995.- С. 54 - 55.

10. Гореликов П.Л. Особенности энергообеспечения клеток нервной ткани в краниальном шейном ганглии в норме и при синаптической блокаде.

//«Материалы методической и научной конференции» Сб. научн тр. М.: МГАВМБ. - 2001.- С. 170-171.

11. Гореликов П.Л., Савельев C.B. Влияние блокады Н-холинергических синапсов в верхнем шейном ганглии на ферментативную систему ЛДГ. Тез. докл. VII конгресса Межд. Ассоциации морфологов. //Морфология.- 2004.т. 126.-№4.- С. 38.

12. Гореликов П.Л., Савельев C.B. Эффект частичного и полного нарушения транссинаптической передачи в холинергических синапсах на содержание р-РНК в симпатических нейронах. //«VII Всероссийская конференция по патологии клетки». Сб. научн. тр. М.: ГУ НИИ МЧ РАМН. - 2005.- С. 37-38.

13. Гореликов П.Л., Савельев C.B. Количественные изменения РНК в цитоплазме симпатических нейронов в условиях ганглионарной блокады. //«Актуальные вопросы морфогенеза в норме и патологии. Клиническая морфология новообразований эндокринных желез». Мат. научн. конф. М.: ГУ НИИ МЧ РАМН.- 2005.- С. 92 - 95.

14. Гореликов П.Л., Савельев C.B. Изоферментный спектр лактатдегидро-геназы в краниальном шейном симпатическом ганглии в норме и при синоптической блокаде. //Бюлл. экспер. биол. и мед.- 2005.- т. 140,- Ns 12.-С. 642 - 644.

15. Гореликов П.Л., Савельев C.B. Глиальные нуклеиновые кислоты в симпатическом ганглии при синаптической блокаде.//«Актуальные вопросы морфогенеза в норме и патологии». Сб. научн. тр. М.: ГУ НИИ МЧ РАМН.- 2006.-С. 70-73.

16. Гореликов П.Л., Савельев C.B. Метаболический ответ глиальных клеток на блокирование синаптической передачи в симпатическом ганглии. Мат. докл. VIII конгресса Межд. Ассоциации морфологов. //Морфология.- 2006.т. 129,-№4.- С. 39.

17. Гореликов П.Л., Савельев C.B. Вероятный механизм энергообеспечения симпатических нейронов с помощью глиальных клеток. //«Бабухинские

чтения в Орле». Мат. 5-й Всеросийской конф. ЗАО «Ретиноиды». М.:-2006.-С. 43-44.

18. Гореликов П.Л., Савельев С.В. Возможное участие лактата в нейрон-глиальном взаимодействии через Н-холинергические синапсы в краниальном шейном симпатическом ганглии. //Бюлл.экспер. биол. и мед.- 2006.- т.142.-№ П.- С. 573-575. (Gorelikov P.L., SavelievS.V. Possible involvement of lactate in neuroglial interaction through nicotinic cholinergic synapses in the cranial cervical sympathetic ganglion. //Bull. Exp. Biol. Med.- 2006.- V.142.-N.5.-p. 625-627.

19. Гореликов П.Л., Савельев С.В. Участие Н-холинергических синапсов в регуляции метаболизма РНК симпатических нейронов и сателлитных глиоци-тов. //Морфология.- 2007.- rn.131.-N2 1.-С. 40-43.

20. Гореликов П.Л., Савельев С.В. Влияние Н-холинергической синаптической блокады на содержание аденилатных макроэргов и на ферментативную систему ЛДГ в симпатическом ганглии. //Биомед. хим.- 2007.-т.53.-Вып.З,-С. 290 - 296.

21. Гореликов П.Л., Савельев С.В. Изоферменты лактатдегидрогеназы в симпатических нейронах и сателлитных глиоцитах в норме и в условиях блокады никотиновых холинорецепторов. //Морфология.- 2007.- rn.132.-N9 4,-С. 36-39.

22. Гореликов П.Л., Савельев С.В. Участие Н-холинергических периферических синапсов в энергетическом обмене симпатического ганглия. //Нейрохимия. - 2007. - rn.24.-Ns 2.- С. 132 - 137. (Gorelibv P.L., Saveliev S.V. Involvement of N-cholinergic peripheral synapses in energy exchange within a sympathetic ganglion. //Neurochem. J.-2007.-V.l.-N.3.-p. 208 - 213).

23 .Гореликов П.JI. Характеристика ферментативной системы ЛДГ в краниальном шейном ганглии. //Научн. конф.«Актуальные вопросы морфогенеза в норме и патологии».Сб. научн. тр. М.: ГУ НИИ МЧ РАМН.- 2008,-С. 35-38.

24.Гореликов П.Л. Влияние никотиновых холинергических рецепторов на энергетический обмен краниального шейного симпатического ганглия. //Научн. конф.«Актуальные вопросы морфогенеза в норме и патологии».Сб. научн. тр. М.: ГУ НИИ МЧ РАМН..- 2008.- С. 32 - 34.

* Курсивом выделены работы, опубликованные в журналах, входящих в список ВАК РФ

Соискатель: *~> П.Л. Гореликов

Напечатано с готового оригинал-макета

Издательство ООО "МАКС Пресс" Лицензия ИД N 00510 от 01.12.99 г Подписано к печати 24.09 2008 г. Формат 60x90 1/16. Уел печ.л. 2. Тираж 100 экз. Заказ 518. Тел. 939-3890. Тел/Факс 939-3891. 119992, ГСП-2, Москва, Ленинские горы, МГУ им М.В. Ломоносова, 2-й учебный корпус, 627 к.

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Гореликов, Петр Леонидович

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Никотиновый холинергический синапс.

1.1.1. Функциональное значение.

1.1.2. Структурно-молекулярная организация и механизмы ингибирования.

1.2. Современные представления о модулирующей роли синапсов в метаболизме нейрона.

1.2.1. Связь синаптической активности с экспрессией белков.

1.2.2. Компартментализация синтеза белка в нейронах. Связь синаптической активности с локальным синтезом белка

1.3. Представления о внутриклеточных регуляторных каскадах, индуцированных транссинаптической передачей

1.3.1. Транссинаптическая регуляция белкового синтеза

1.3.2. Са2+сигнал.

1.4. Участие синапсов в кооперативном взаимодействии нейронов и глиальных клеток.

1.4.1. Современные представления о нейрон-глиальном взаимодействии.

1.4.2. Современные представления о морфо-функциональной организации синапса. Концепция трехстороннего синапса

1.4.3. Гипотеза АМ^БН. Участие синапсов в энергетическом взаимодействии нейронов и глиоцитов.

1.5. Функциональное значение исследуемых параметров

1.5.1. Связь рРНК с пластическим обменом нейронов и глиоцитов.

1.5.2. Ферментативная система ЛДГ.

1.5.3. Аденилатные макроэрги.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Морфофункциональная характеристика механизмов никотиновой холинергической регуляции нейрон-глиальных взаимодействий и метаболической активности в симпатическом ганглии"

Фундаментальной проблемой нейробиологии является выяснение механизмов, обеспечивающих функционирование тканевых элементов нервной системы. Во многом ее решение зависит от знания синаптических процессов - важнейшего звена, обеспечивающего интегративную деятельность нервной системы. В ряду нейротрансмиттерных систем особую роль играют никотиновые холинергические синапсы паравертебральных симпатических ганглиев, образованные преганглионарными волокнами. Никотиновые холино-рецепторы в указанных синапсах представляют ключевое функциональное звено, через которое осуществляется передача информации в ганглиях и происходит активизация автономной нервной системы (Ноздрачев А.Д., Фатеев М.М., 2002; De Biassi M. et al., 2000; De Biassi M., 2002).

Важным интегративно-координационным центром автономной регуляции является краниальный шейный ганглий, через никотиновые холино-рецепторы которого осуществляется контроль общего сосудистого тонуса и гемодинамических показателей, обеспечивается деятельность эпифиза и регуляция многих других жизненно важных висцеральных функций (Ноздрачев А.Д., Пушкарев Ю.П., 1980; Skok V., 2002; Wang N. et al., 2004; Asamoto К., 2005).

Правомерно в связи с этим предполагать, что столь значимая функциональная роль никотиновых холинорецепторов в информационном обеспечении краниального шейного, равно как и других экстрамуральных симпатических ганглиев, должна определенным образом проявиться и в участии этих рецепторов в молекулярно-клеточных механизмах непосредственно организующих деятельность самих симпатических ганглиев. Такая постановка вопроса представляет вполне понятный теоретический и практический интерес, как с точки зрения выяснения общих принципов организации работы периферических ганглиев, так и в плане изучения последствий модуляции активности периферических никотиновых холинорецепторов, как объекта воздействия наркотических субстанций и лекарственных препаратов.

Объективной основой для проведения исследования в обозначенном направлении служит значительное число экспериментальных данных последних лет, полученных в отношении других отделов нервной системы, которые показывают, что роль синаптических процессов не ограничивается обеспечением только лишь информационной связи между нейронами. Напротив, эти данные позволяют рассматривать соответствующие синапсы в качестве биохимически самоорганизующихся систем, которые располагают собственными механизмами контроля за всеми этапами белкового синтеза в постсинаптических нейронах (Tiedge Н., 2005; Hirokawa N., 2006; Pfeiffer В., Huber К., 2006) и непосредственно участвуют в таком специфическом клеточном механизме, как нейрон-глиальное взаимодействие (Fellin Т., Carmig-noto G., 2004; Hertz L., 2004; Magistretti P., 2006). Вместе с тем нейротро-фическая роль синаптического сигнала через никотиновые холинорецепторы в регуляторных механизмах симпатических ганглиев не изучена.

Цель исследования

Установить морфофункциональные закономерности метаболического ответа краниального шейного симпатического ганглия и входящих в его состав нейронов и сателлитных глиоцитов на экспериментально вызванные изменения в численности свободно функционирующих никотиновых холинер-гических рецепторов.

Задачи исследования

1. Установить закономерности в изменениях содержания рРНК в симпатических нейронах и окружающих нейроны сателлитных глиоцитах при применении разных доз ганглиоблокатора, вызывающих блокирование относительно небольшого, значительного числа никотиновых холинорецепторов и полное блокирование никотиновых холинорецепторов, а также в ходе последующего восстановления численности функционирующих никотиновых холинорецепторов после применения разных моделей блокады.

2. Провести сравнительный анализ модуляций в содержании рРНК в симпатических нейронах и окружающих сателлитных глиоцитах при разной численности блокированных никотиновых холинорецепторов.

3. Определить изоферментный состав и спектр ферментативной системы лактатдегидрогеназы (ЛДГ) на уровне интактного симпатического ганглия и на клеточном уровне - в симпатических нейронах и сателлитных глиоцитах.

4. Выявить закономерности в изменениях активности ферментативной системы ЛДГ при частичном и полном блокировании никотиновых холинорецепторов в симпатическом ганглии, а также в симпатических нейронах и сателлитных глиоцитах.

5. Определить основные закономерности в изменениях содержания аде-нилатных макроэргов (АТФ, АДФ, АМФ) в симпатическом ганглии, связанные с частичным и полным блокированием никотиновых холинорецепторов, а также динамику этих показателей в процессе последующего восстановления после прекращения действия блокады.

6. Провести комплексный анализ полученных динамических изменений метаболических показателей при экспериментально вызванных флук-туациях численности свободно функционирующих никотиновых холинер-гических рецепторов. Определить роль никотиновых холинергических рецепторов в регуляции метаболического статуса симпатического ганглия и межклеточном взаимодействии между симпатическими нейронами и сателлитными глиоцитами и вероятный механизм, лежащий в основе этой регуляции.

Основные положения, выносимые на защиту

На основании анализа динамики метаболических процессов при модуляциях синаптического холинергического сигнала разработана функционально-информационная модель регуляции краниального шейного симпатического ганглия. Синаптический сигнал, поступающий через никотиновые холинорецепторы в синапсах симпатических нейронов, является для симпатического ганглия системообразующим фактором, который трансформирует и направляет метаболизм и создает специфическую клеточную интеграцию в ганглии для выполнения этим органом адекватной функции.

В рамках представленной модели установлено следующее.

Синаптический сигнал, через никотиновые холинорецепторы симпатических нейронов: управляет метаболическим статусом симпатического ганглия, осуществляя регуляцию базового уровня энергетического гомеостаза и изменяя активность белок-синтезирующей системы нейронов и саттелитных глио-цитов; потенцирует формирование специфической межклеточной интегратив-ной единицы, связывая симпатические нейроны и соседние сателлитные глиоциты в единую функционально - метаболическую систему.

В отсутствие холинергического синаптического сигнала в симпатическом ганглии оказываются задействованными механизмы, поддерживающие только его системы жизнеобеспечения, а симпатические нейроны и сателлитные глиоциты представляют собой метаболически обособленные друг от друга клеточные системы.

На клеточном уровне показано, что синаптический сигнал через никотиновые холинергические рецепторы: индуктивно воздействует на метаболическую активность симпатических нейронов, вызывая в них повышение уровня активности белок - синтезирующей системы; модулирует в нейронах активность белок - синтезирующей системы; обеспечивает энергетический гомеостаз в нейронах, по крайней мере, на уровне регуляции активности ферментативной системы ЛДГ; обеспечивает синхронизацию процессов синтеза белка в нейронах и соседних сателлитных глиоцитах на уровне трансляции, и детерминирует анаэробную направленность изоферментного профиля ЛДГ в сателлитных глиоцитах.

Научная новизна

Установлены раннее неизвестные принципы морфофункциональной организации симпатического ганглия, которые базируются на том, что синап-тические сигналы, поступающие через никотиновые холинорецепторы симпатических нейронов, управляют метаболическими процессами и мобилизуют специфические клеточные механизмы в симпатическом ганглии, выступая в качестве системообразующего фактора, обеспечивающего его активную деятельность.

Впервые показано, что в симпатическом ганглии нейроны и окружающие нейроны сателлитные глиоциты при определенных условиях образуют единую функционально - метаболическую систему. Выявлены ранее неизвестные условия и характер взаимодействия между этими типами клеток, которые заключаются в том, что нейроны и сателлитные глиоциты в симпатическом ганглии вступают в метаболическое взаимодействие только при наличии синаптического сигнала, поступающего через никотиновые холинорецепторы симпатических нейронов. При этом метаболическая активность и энергетические механизмы сателлитных глиоцитов регулируются функциональным состоянием нейронов, которые через ионотропные никотиновые холинорецепторы осуществляют интеграцию своего собственного метаболизма с метаболизмом окружающих сателлитных глиоцитов.

В эксперименте впервые показано, что в симпатическом ганглии создаются условия для энергетического взаимодействия между симпатическими нейронами и сателлитными глиоцитами и существует высокая вероятность реализации в краниальном шейном ганглии механизма энергетического гомеостаза на основе клеточной интеграции, описываемого гипотезой ANLSH (astrocyte-neuron lactate shuttle hypothesis) для головного мозга, которая предполагает существование между глиоцитами (астроцитами) и нейронами лактатного челночного механизма.

Впервые определен изоферментный спектр ЛДГ для краниального шейного ганглия и изоферментный профиль ЛДГ для симпатических нейронов и сателлитных глиоцитов.

Научно-практическая значимость

Разработанная в работе функционально-информационная модель регуляции краниального шейного симпатического ганглия представляет теоретический и практический интерес с позиций понимания специфических механизмов и общих принципов, лежащих в основе морфофункциональной организации периферических ганглиев и в целом симпатического отдела нервной системы.

Показанное в работе нейротрофическое значение холинергического сигнала через никотиновые холинорецепторы указывает на необходимость учета и оценки последствий модуляций активности периферических никотиновых холинорецепторов в краниальном шейном симпатическом ганглии, как объекта воздействия наркотических субстанций и лекарственных препаратов. Вместе с этим ключевая роль синаптических процессов с участием никотиновых холинорецепторов в организации контроля метаболизма и клеточного взаимодействия в краниальном шейном симпатическом ганглии указывает на возможность адресного, направленного на периферические никотиновые холинорецепторы, фармакологического контроля и коррекции симпатических функций.

13

Описанные в работе динамика энергетических и метаболических показателей и происходящие изменения в нейрон-глиальном взаимодействии расширяют фактологическую базу для расшифровки молекулярно-клеточных механизмов патогенеза заболеваний, связанных с нарушением синаптической функции холинергической передачи через никотиновые рецепторы.

Выявленный эффект применяемого в работе ганглиолитика, относящегося к группе бис-катионных аммониевых соединений, на динамику метаболических сдвигов в симпатическом ганглии и входящих в его состав нейронов и сателлитных глиоцитов восполняет существующий пробел в представлениях о молекулярно-клеточных механизмах действия этой группы неконкурентных холинолитиков в самом объекте блокады - краниальном шейном симпатическом ганглии.

Заключение Диссертация по теме "Гистология, цитология, клеточная биология", Гореликов, Петр Леонидович

238 ВЫВОДЫ

1. Основополагающий принцип морфофункциональной организации симпатического ганглия заключается в сопряжении синаптических сигналов поступающих через никотиновые холинорецепторы симпатических нейронов с метаболическими процессами в симпатическом ганглии.

2. Синаптический сигнал через никотиновые холинергические рецепторы формирует в симпатическом ганглии временную межклеточную интегра-тивную систему, состоящую из метаболически взаимодействующих между собой симпатических нейронов и окружающих нейроны сателлитных глиоцитов. В отсутствие такого сигнала симпатические нейроны и сателлитные глиоциты представляют собой метаболически самостоятельные, независящие друг от друга клеточные системы.

3. Индуцируемое холинергическим синаптическим сигналом нейрон - гли-альное взаимодействие проявляется в синхронизации процессов синтеза белка в симпатических нейронах и сателлитных глиоцитах в ответ на изменения синаптической активности.

4. В обусловленном синаптическим сигналом межклеточном взаимодействии ведущая роль принадлежит симпатическим нейронам, которые через никотиновые холинергические рецепторы осуществляют контроль за процессами синтеза белка на уровне трансляции в соседних с ними сателлитных глиоцитах и детерминируют в сателлитных глиоцитах специфический изофермент-ный профиль ЛДГ, определяющий в этих клетках анаэробную направленность энергетических процессов.

5. Энергетические процессы в симпатических нейронах и сателлитных глиоцитах существенно различаются. В симпатических нейронах ферментативная система ЛДГ ориентирована на обеспечение доминирования аэробной фазы энергопродукции. В сателлитных глиоцитах изоферментный профиль ЛДГ, напротив, функционально обеспечивает доминирование анаэробной фазы и связанной с ней интенсивной продукцией лактата.

6. Синаптические никотиновые холинорецепторы являются необходимым функциональным звеном, через которое в ответ на изменения синаптической активности холинергических синапсов осуществляется активизация процессов трансляции белка в симпатических нейронах. При этом синаптический сигнал, поступающий через никотиновые холинорецепторы, оказывает модулирующее влияние на процессы трансляции белка в нейронах, детерминируя относительную быстроту и интенсивность наступающего цитохимического ответа.

7. Сателлитные глиоциты краниального шейного симпатического ганглия в ответ на изменение синаптической активности проявляют высокую метаболическую лабильность, которая выражается в модуляциях содержания рРНК и изменениях изоферментного профиля ферментативной системы ЛДГ в этих клетках. В то же время метаболическая реакция сателлитных глиоцитов существенно отличается от реакции симпатических нейронов.

8. Ферментативная система ЛДГ в краниальном шейном симпатическом ганглии кроликов представлена в норме пятью основными изоформами: ЛДГ-1, -2, -3, -4 и -5. Наиболее активны анодные фракции ЛДГ-1 и ЛДГ-2. Относительная активность изоферментов в спектре ЛДГ последовательно убывает от ЛДГ-1 к ЛДГ-5.

9. Через синаптическое взаимодействие с никотиновыми холинорецепторами обеспечивается необходимый для нормальной функциональной деятельности симпатического ганглия изоферментный состав и уровень активности каждого из изоферментов ЛДГ, устанавливаются базовые параметры аденилатного пула макроэргов.

10. Полученные результаты по изучению динамических изменений энергетических и метаболических параметров дают основания заключить, что синаптический сигнал через никотиновые холинорецепторы управляет энергетическим и метаболическим статусом симпатического ганглия в условиях его нормальной функциональной деятельности.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Установленные в работе морфофункциональные принципы синаптиче-ского управления молекулярно-клеточными механизмами в симпатическом ганглии могут быть экстраполированы на имеющие холинергическую регуляцию отделы головного мозга и ганглии автономной нервной системы, поскольку краниальный шейный симпатический ганглий во многом аналогичен другим периферическим ганглиям и, вместе с этим, по многим параметрам своей структурно - функциональной организации может рассматриваться в качестве естественной модели вышележащих отделов ЦНС.

Установленный в работе в нейрон-глиальном метаболическом взаимодействии закономерный контроль со стороны нейронов за функцией глиоцитов, необходимый для реализации нормальной функциональной деятельности, следует учитывать при исследовании патогенеза нервных расстройств и при анализе причин патологий, в основе которых лежит аномальное поведение глиоцитов в соответствующих отделах нервной системы.

Описанные в работе морфофункциональные изменения в молекулярных и клеточных механизмах при экспериментально вызванных модуляциях активных никотиновых холинорецепторов могут служить объективной основой при разработке средств фармакологического контроля функций симпатического отдела и препаратов синаптического действия.

Выявленное в работе нейротрофическое значение информационной нагрузки связанной с синаптической передачей в никотинчувствительных хо-линергических синапсах симпатического ганглия необходимо учитывать при разработке средств профилактики и коррекции нарушений автономных функций.

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Гореликов, Петр Леонидович, Москва

1.Агроскин Л.С., Папаян Г.В. Цитофотометрия. Л.: Наука.- 1977.- 295 с.

2. Алексидзе Н.Г. О передаче метаболических сигналов в системе нейрон-нейроглия. В кн.: Функции нейроглии. П/р А.И.Ройтбака. Тбилиси: Мецниереба.- 1987.- С. 6 14.

3. Алексидзе Н.Г. Молекулярные и клеточные механизмы интегративной деятельности головного мозга. Тбилиси.: Тбилисский ун-т.- 1988.- 180 с.

4. Баранов М.Н. Изменения фосфорного обмена верхнего шейного симпатического и узловатого ганглиев при некоторых их функциональных состояниях. //Биохимия.- I960.- Т.25, № 5.- С. 781 786.

5. Беллер Н.Н., Болондинский В.К., Бусыгин И.И., Матросова О.Г., Ониско

6. B.А., Пастухов В.А., Пушкарев Ю.П. Холинэргические механизмы регуляции висцеральных функций. Л.: Наука.-1986.- 134 с.

7. Бродский В.Я. Трофика клетки. М.: Наука.- 1966.- 356 с.

8. Брумберг В.А., Певзнер Л.З. Нейрохимия изоферментов.Л.: Наука.-1975.-124 с.

9. Бужурина И.М., Панов М.А., Черная Н.Г. Скорость синтеза рРНК как отражение уровня метаболизма в клетках. //Мол. биол.- 1995.- Т.29, № 6.-С. 1336- 1340.

10. Булыгин И.А. Новые принципы структурно-функциональной организации симпатических ганглиев. Минск.: Наука и техника.-1979.-232 с.

11. Высоцкая Н.Б. Влияние ганглиолитиков на содержание фосфорных фракций в верхнем шейном ганглии. //Фармакол. токсикол.-1957.- Т.20, № 2,-С. 12-15.

12. Высоцкая H.Б. Влияние ганглиоблокирующих веществ на гликолити-ческие процессы в верхнем шейном ганглии. //Фармакол. токсикол.- 1960.-Т.23, № 2.- С. 155- 158.

13. Высоцкая Н.Б. Влияние ганглиоблокирующих веществ на напряжение кислорода в ткани верхнего шейного ганглия. //Фармакол. токсикол.-1961.-Т.24, № 6.- С. 687 689.

14. Высоцкая Н.Б. Влияние ганглиоблокирующих веществ на дыхание ткани верхнего шейного ганглия. //Фармакол. токсикол.- 1962,- Т.25, № 2.-С. 160-163.

15. Гайцхоки B.C. Информационные РНК клеток животных. М.: Медицина.-1980.- 200 с.

16. Герштейн JI.M., Сергутина A.B., Худоерков P.M. Морфо-химическая характеристика мозга крыс, генетически предрасположенных (Август) и устойчивых (Вистар) к эмоциональному стрессу. //Нейрохимия.- 2000.- Т.17, №2.- С. 135- 139.

17. Гейнисман Ю.Я. Структурные и метаболические проявления функции нейрона. М.: Наука.- 1974.- 207 с.

18. Гилъмиярова Ф.Н., Радомская В.М., Баишева Г.М., Кретова И.Г., Клейман М.С., Первова Ю.В. Роль гиперлактатдегидрогеназемии в индукции метаболических нарушений в организме. //Вопр.мед.хим.- 2001.-Т.47, № 5.-С. 469-476.

19. Глазко В.И. Генетика изоферментов сельскохозяйственных жи-вотных. //Сб. "Итоги науки и техники". М.: ВИНИТИ. Сер. "Общая генетика". Т.Ю.-С. 1-212.

20. Глебов Р.Н., Крыжановский Г.Н. Функциональная биохимия синапсов. М.: Медицина.-1978.- 328 с.

21. Гмиро В.Е., Бровцына Н.Б., Горбунова О.Б., Сердюк С.Е., Лукомская Н.Я. Топография участка связывания бис-катионных ганглиоблокаторов в ионном канале нейронального никотинового холинорецептора. //Докл. Росс. Акад. наук.- 1995.- Т. 341, № 5.-С. 699 705.

22. Голиков С.Н., Долго-Сабуров В.Б., Елаев Н.Р., Кулешов В.И. Холинэргическая регуляция биохимических систем клетки. М.: Медицина.-1985.- 224 с.

23. Горбунова A.B. Содержание РНК в мотонейронах спинного мозга при гипокинезии. //Цитология.-1971.- Т. 13, № 1.- С. 83 87.

24. Горбунова A.B. Вегетативная нервная система и устойчивость сердечнососудистых функций при эмоциональном стрессе. //Нейрохимия.- 2000.-Т.17, № 3.- С. 163-184.

25. Горбунова О.Б. Исследование строения участка ионного канала нейронального никотинового холинорецептора. Автореф. дисс.на соиск. канд. биол. наук. Спб.: Ин-т эвол. физиол. биохим. РАН.-1996.- 20 с.

26. Горбунова О.Б. Роль никотиновых холинорецепторов в формировании совместной зависимости от никотина и этанола. I. Никотиновый холинорецептор и эффекты никотина. //Усп. совр. биол.-2004.- Т. 124, № 6.-С. 570-580.

27. Гордон Р.Я. Исследование генерализованного метаболического ответа нервных клеток на смену функционального состояния и на действие повреждающих факторов. Автореф. дисс.на соиск. докт. биол.наук. Пущино.: ин-т медико-биол. проблем.- 2000.- 45 с.

28. Гореликов П.Л. Применение микроскопа ОРИМ-1 для определения толщины парафиновых срезов. //Цитология.- 1975.- Т. 17, № 11.- С. 1341 1344.

29. Гореликов ПЛ. Влияние фиксации в жидкости Карнуа на содержание нуклеиновых кислот и белка в верхнем шейном симпатическом ганглии кролика. //Цитология.- 1977.- Т. 19, № 1.- С. 90 94.

30. Гореликов П.Л. Влияние гистологической обработки на содержание нуклеиновых кислот, свободных нуклеотидов и белка в краниальном шейном симпатическом ганглии. //Цитология.- 1979.- Т.21, № 2.- С. 222 224.

31. Гореликов П.Л. Методы количественной цитохимии. М.: Моск. вет.акад,-1980.-24 с.

32. Гореликов П.Л. Теоретические и практические возможности метода цито-фотометрии. М.: Моск.вет.акад.-1982.-32 с.

33. Гореликов П.Л., Лебедев Э.А. Применение пленки КН-3 в сложных случаях фотографической фотометрии. //Сб. "Проблемы молекулярной биологии и патологии". М.: Моск.вет.акад.- 1977.- Т. 93.- С. 52 57.

34. Грешен А.Г. Структура и гистохимическая характеристика некоторых симпатических ганглиев. Автореф. дисс.на соиск докт. биол.наук. Саратов.: Саратовский гос.мед.ин-т.-1965.- 25 с.

35. Гринкевич Л.Н., Васильев Г.В. Возможные молекулярно генетические механизмы регуляции экспрессии генов при обучении. //Российск. физиол.ж.-1999.-Т.85, № 1.- С. 48-66.

36. Гублер Е.В., Генкин A.A. Применение непараметрических критериев статистики в медико-биологических исследованиях. JL: Медицина.-1973 .-142 с.

37. Дамбинова С.А., Арутюнян A.B. Успехи функциональной нейрохимии. СПб.-2003.-516 с.

38. Есакова Т.В., Иванов М.В. Взаимодействие лактатдегидрогеназы и мембран саркоплазматического ретикулума. //Биохимия.- 1992.-Т.57, № 2.-С. 253-267.

39. Жаботинский Ю.М. Нормальная и патологическая морфология вегетативных ганглиев. М.: АМН СССР.- 1953.- 292 с.

40. Жаботинский Ю.М. Нормальная и патологическая морфология нейрона. Л.: Медицина.- 1965.- 324 с.

41. Зандриттер В., Кифер Г., Рик В. Галлоцианин-хромовые квасцы. В кн.: Введение в количественную цитохимию. П/р. В.Я.Бродского и Н.И. Полякова. М.: Мир.-1969.- С. 240 264.

42. Зенгбуш П. Молекулярная и клеточная биология. М.:Мир.-1982.-Т1.-368 с.

43. Зимин Ю.В., Сяткин С.П., Березов Т.Т. Надмолекулярная регуляция активности некоторых оксидоредуктаз клетки в норме и патологии. //Вопр.мед.хим.- 2001.- Т. 47, № 3.- С. 279 287.

44. ИостХ. Физиология клетки. М.: Мир.-1975.- 864 с.

45. Карпов Ф.Ф. Фотографический метод для фотометрического определения содержания веществ в негомогенных структурах клеток и тканей. Автореф. дисс.на соиск. канд. биол.наук. М.: 2-ой МОЛГМИ.-1973. 28 с.

46. Ковальский Г.Б. Количественная гистохимия дегидрогеназ. В кн.: Введение в количественную гистохимию ферментов. П/р. Т.Б. Журавлевой и Р.А.Прочуханова. М.: Медицина. -1978.- С. 58 114.

47. Костюк П.Г. Ионы кальция и пластичность нервной системы. //Российск. физиол. ж.- 2001.- Т.87, № 8.- С. 1017 1025.

48. Крстич Р.В. Иллюстрированная энциклопедия по гистологии человека. СПб.: Сотис.- 2001.- 531 с.

49. Кудряшов КЕ. Глутаматергические ионотропные рецепторы и потенциал-зависимые дендритные каналы в гиппокампе: их взаимодействие в пластических процессах. //Нейрохимия.- 2003.- Т. 20, № 2.- С. 85 92.

50. Кудряшова КВ. Синаптическая пластичность на разных стадиях обучения: зависимость от величины и локализации кальциевого сигнала. //Нейрохимия.- 2002.- Т.19, № 2.- С.85 89.

51. Кудряшова КВ. Участие ферментов энергетического метаболизма в пластических процессах в гиппокампе при обучении. //Нейрохимия,- 2003.- Т.20, № 1.- С. 5-11.

52. Куффлер С., Николе Дж. От нейрона к мозгу. М.: Мир.-1979.- 439 с.

53. ЛакинГ.Ф. Биометрия. М.: Высш. школа.-1980.-293 с.

54. Левкова Н.А., Туманский В.А., Скуба Н.Д. Современные представления о структуре и функциональном значении "темных" клеток. //Архив патол.-1973.- Т. 35, №8.- С. 82-87.

55. Ленинджер А. Биохимия. М.: Мир.- 1976.- 958 с.

56. Ли В.В. Участие АТФ рецепторов в восприятии клетками неспецифических физических и химических воздействий. Автореф. дисс.на соиск. канд. биол.наук. Пущино.: ин-т медико-биол. проблем. 2005.- 20 с.

57. Лукомская Н.Я., Гмиро В.Е. Ганглиоблокирующее действие несимметричных бис-катионных соединений. //Докл. АН СССР.- 1982.- Т.265, № 3.-С. 743 747.

58. Лукьянова Л.Д., Дудченко A.M. Параметры аденилатного пула как предикторы нарушений энергетического обмена в гепатоцитах при гипоксии. //Бюлл. экспер. биол. мед.- 2003.- Т. 136, № 7.- С. 41 44.

59. Лукьянова Л.Д., Дудченко A.M., Цыбина Т.А., Германова Э.Л. Регуляторная роль митохондриальной дисфункции при гипоксии и ее взаимодействие с транскрипционной активностью. //Вестн. РАМН.-2007.- № 2.-С. 3-13.

60. ЛуппаХ. Основы гистохимии. М.: Мир.- 1980.- 343 с.

61. Лущак В.И. Характеристика связанной с микросомами лактатдегидро-геназы из белых мышц скота. //Биохимия.-1991.-Т.56, № 12.- С. 2173 2180.

62. Маркелов И.М. Определение изоферментов ЛДГ. //Лаб.дело.-1966.- № 12.-С. 707-710.

63. Мац В.Н. Нейро-глиальные соотношения в неокортексе при обучении. М.: Наука.- 1994.- 93 с.

64. Меерсон Ф.З. Общий механизм адаптации и профилактики. М.: Медицина." 1973.-360 с.

65. Меерсон Ф.З. Адаптация, стресс и профилактика. М.: Наука.-1981.-278 с.

66. Меерсон Ф.З., Пшенникова М.Г. Адаптация к стрессовым ситуациям и физическим нагрузкам. М.: Медицина.-1988.-253 с.

67. Мендельсон М. Абсорбционная цитофотометрия: сравнение различных методов исследования структурированных объектов и двухволновой метод. П/р. В.Я.Бродского и Н.И. Полякова. М.: Мир.-1969.- С. 167 177.

68. Меркулова О.С., Даринский Ю.А. Реакция нейронов на длительную стимуляцию. Л.: Наука.- 1982.- 171 с.

69. Мосевицкий М.И. Значительный прогресс биохимических исследований мозга еще не привел к пониманию сути мыслительного процесса. //Нейро-химия.- 2003.-Т.20, № 4.- Р. 299 315.

70. Немечек С., Лодин 3., Волъфф И., Выскочил Ф., Байгар И. Введение в нейробиологию. Прага.: Avicenum.- 1978.- 413 с.

71. Ноздрачев А.Д., Пушкарее Ю.П. Характеристика медиаторных превращений. Л.: Наука.- 1980.- 230 с.

72. Ноздрачев А.Д., Фатеев М.М. Звездчатый ганглий. Спб.: Наука.- 2002.238 с.

73. Панавене Д.П. К методике разделения изоферментов лактатдегидро-геназы на полиакриламидном геле. //Лаб. дело.- 1974, № 9.- С. 542 544.

74. Панин JI.E. Биохимические механизмы стресса. Новоссибирск.: Наука.-1983.-234 с.

75. Певзнер Л.З. Функциональная биохимия нейроглии. Л.: Наука.- 1972.198 с.

76. Першин Г.И. Димеколин. В кн.: Новые лекарственные средства. П/р. Г.И. Першина. М.: Медицина.- 1966.-Вып. 10.- С. 72 100.

77. Попова Э.Н., Лапин С.К., Кривицкая Г.Н. Морфология приспособительных изменений нервных структур. М.: Медицина.- 1976.- 264 с.

78. Проссер Л. Центральная нервная система. В кн.: Сравнительная физиология животных. М.- 1978.- Т.З.- С. 5 163.

79. Прочуханов P.A. Принципы количественной гистохимии ферментов. В кн.: Введение в количественную гистохимию ферментов. П/р.Т.Б. Журавлевой и P.A. Прочуханова. М.: Медицина. 1978.- С. 7- 13.

80. Райдер К, Тейлор К. Изоферменты. М.: Мир.- 1983.- 106 с.

81. Ройтбак А.И. Глия и ее роль в нервной деятельности. СПб.: Наука.-1993.-352 с.

82. Самохин В.Т., Обривкова Е.И., Бащев АД. Определение адениловых нуклеотидов в цельной крови. //Ветеринария.-1981, №7.-С. 65-66.

83. Саркисов Д.С., Гельфанд В.Б., Туманов В.П. Нервная система. В кн.: Структурные основы адаптации и компенсации нарушенных функций. П/р. Д.С. Саркисова. М.: Медицина.- 1987.- С. 343 364.

84. Свифт X. Количественная цитохимия рибонуклеиновых кислот. В кн.: Введение в количественную цитохимию. П/р. В.Я.Бродского и Н.И. Полякова. М.: Мир.-1969.- С. 288 313.

85. Селиванова АЛ., Голиков С.Н. Холинэргические механизмы высшей нервной деятельности. JL: Медицина.-1975.-183 с.

86. Скок В.И., Селянко A.A., Деркач В.А. Нейрональные холинорецепторы. М.: Наука.-1987.- 344 с.

87. Тасбулатова Р.Д. К возрастной морфологии краниального шейного симпатического узла и нижнего узла блуждающего нерва. Автореф. дисс.на соиск.канд. биол.наук. Караганда.: Караган-динский гос.мед.ин-т.-1968.- 11 с.

88. Тихонов Д.Б. Исследование строения и механизмов блокады ионных каналов никотиновых холинорецепторов и глутаматных рецепторов. Автореф. дисс.на соиск. докт. биол.наук. Спб.: Ин-т эвол. физиол. биохим. РАН.-2004.-42 с.

89. Унжаков А.Р. Изоферментные спектры ЛДГ в тканях норок (Musterla vison Sehr.) и песцов (Alopex lagopus L.) как индикаторы их физиологического состояния. Автореф. дисс. на соиск. канд. биол. наук.СПб.: Гос. Акад. вет. мед.-1997.- 17 с.

90. УрбахВ.Ю. Биометрические методы. М.: Наука.- 1964.- 416 с.

91. Уткин Ю.Н., Цетлин В.И., Хухо Ф. Структурная организация никотиновых холинергических рецепторов. //Биол.мембраны,- 1999.- Т.16, № 2.-С. 118-135.

92. ШадеДж., Форд Д. Основы неврологии. М.: Мир.- 1976.- 350 с.

93. Федин Л.А., Барский И.Я. Микрофотография. Л.: Наука.-1971.- 220 с.

94. Флеров М.А., Толстухина Т.Н., Герасимова Л.А. Процессы свободно-радикального окисления липидов в нейронах и нейроглии коры больших полушарий при судорогах. //Бюлл.экспер.биол.и мед.- 2004,- Т. 13 8, № 10.-С. 385-387.

95. Фокин В.Ф., Пономарева Н.В. Энергетическая физиология мозга. М.: Антидер.-2003 .-288 с.

96. Харди Р. Гомеостаз. М.: Мир.-1986.- 81 с.

97. Хочачка П., Сомеро Дж. Стратегия биохимической адаптации. М.: Мир.-1977.-398 с.

98. Хочачка П., Сомеро Дж. Биохимическая адаптация.М.: Мир.- 1988.-568 с.

99. Хруст Ю.Р., Литинская Л.Л., Чепцов С.А., Зайделъ КН., Мацигура С.А. Новый метод цитофотометрии метод логарифмического экрана. //Цитология.- 1975.- Т. 17, № 8.- С. 997 - 1000.

100. Хруст Ю.Р., Литинская Л.Л., Козлов ДА. Использование методов нелинейного преобразования изображений в цитофотометрической аппаратуре. //Цитология.- 1976.- Т. 18, № 5.- С. 644 646.

101. Худоерков P.M. Цитохимия белков в раскрытии закономерностей структурной и функциональной организации мозга. //Вестник РАМН.- 2001.- № 4.-С. 43-48.

102. Хухо Ф. Нейрохимия. Основы и принципы. М.: Мир.- 1990.- 384 с.

103. Чехонин В.П., Давыдовская М.В., Лебедев С.В., Демина Т.Л., Дмитриева Т.Е., Гусев Е.И. Нейробиологические основы ремиелинизации в ЦНС. //Вестник РАМН.-2003.- № 8.-С. 43-51.

104. Шарапов K.M. К фармакологии производных пипередин-карбоновых кислот. //Фармакол. и токсикол.- 1961.- Т.24.- № 6.- С. 700 706.

105. Шарапов K.M. К фармакологии димеколина нового ганглиоблокиру-ющего средства. //Фармакол. и токсикол.- 1962.- Т.25 - № 5.- С. 533 - 538.

106. Шеперд Г. Нейробиология. М.: Мир.- 1987.- Т.1.- 454 с.

107. ЭкклсДж. Физиология синапсов. М.: Мир.-1966.-396 с.

108. Ярыгин В.Н. О двухъядерных нервных клетках в верхнем шейном симпатическом узле кролика. //Арх. анат. гист. и эмбриол.- 1964.- Т. 47, № 12.-С. 77 82.

109. Ярыгин В.Н., Доронин П.П., Родионов K.M., Гибер Л.М. Цитохимический и элетронномикроскопический анализ симпатических нервных клеток с явлениями локального хроматолиза. //Арх.анат.гист.и эмбриол.-1974.-Т. 66, №3.- С. 76-80.

110. Ярыгин Н.Е., Ярыгин В.Н. Патологические и приспособительные изменения нейрона. М.: Медицина.- 1973.- 190 с.

111. Aguado F., Espinosa-Parrilla J., Carmona M, Soriano E. Neuronal activity regulates correlated network properties of spontaneous calcium transients in astrocytes in situ. //J. Neurosci.-2002.-V.22.- P. 9430 9444.

112. Alkadhi K., Alzoubi K., Aleisa A. Plasticity of synaptic transmission in autonomic ganglia. //Prog. Neurobiol.- 2005.- V.75, N 2.- P. 83 108.

113. Ames A. 3rd. CNS energy metabolism as related to function. // Brain Res.Rev.-2000.- V.34, N 1-2.-P. 42 -68.

114. Araque A., Carmignoto G., Haydon P. Dynamic signaling between astrocytes and neurons. //Ann. Rev. Physiol.-2001.-V.63.- P. 795 813.

115. Araque A., Li N., Doile R. Т., Haydon P. SNARE protein-dependent glutamate release from astrocytes. //J. Neurosci.-2000.-V.20.-P. 666 673.

116. Araque A., Martin E., Perea G., Arellano J., Buno W. Synaptically released acetylcholine evokes Ca elevations in astrocytes in hippocampal slices.

117. J. Neurosci.-2002.-V.22, N 7.- P. 2443 2450.

118. Araque A., Parpura V., Sanzgiri R., Haydon P. Tripartite synapses: glia, the unacknowledged partner. //Trends Neurosci.-1999.-V.22, N 5.- P. 208 215.

119. Asamoto K. Network of the sympathetic nervous system: focus on the input and output of cervical sympathetic ganglion. //Anat. Sci. Int.- 2005.-V.80, N 3.-P. 132-140.

120. Ashroft S., Ashroft F. Properties and functions of ATP-sensitive K-channels. //Cell Signal.-1990.-V.2.- P. 197 214.

121. Ataullakhanov FI., Vitvitsky VM. What determines the intracellular ATP concentration. //Biosci. Rep.-2002.-V22, N 5-6.-P.501 511.

122. Atkinson D. The energy charge of the adenylate pool as regulatory parameter. Interaction with feedback modifiers. //Biochem.- 1968.-V.7, N11.-P. 4030 4034.

123. Atwell D., Laughlin S. An energy budget for signaling in the grey matter of brain. //J. Cereb. Flow Metab.- 2001.- V.21, N 10.- P. 1133 1145.

124. Aubert A., Costalat R. Interaction between astrocytes and neurons studied using a mathematical model of compartmentalized energy metabolism. //J. Cereb. Flow Metab.- 2005.-V.25, N 11 .-P. 1476-1490.

125. Aubert A., Costalat R., Magistretti P., Pellerin L. Brain lactate kinetics: modeling evidence for neuronal lactate uptake upon activation.

126. Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 2005.-V.102, N 45.-P. 16448 16453.

127. Auld D., Colomar A., Belair EL., Castonguay A., Pinard A., Rousse I., Thomas S., Robitaille R. Modulation of neurotransmission by reciprocal synapse-glial interactions at the neuromuscular junction. //J. Neurocytol.- 2003.-V.32, N5-8.-P. 1003- 1015.

128. Auld D., Robitaille R. Perisynaptic Schwann cells at the neuromuscular junction: nerve-and activity-dependent contributions to synaptic efficacy, plasticity, and reinnervation. //Neuroscientist.- 2003.-V.9, N 2.-P. 144 157.

129. Auld D., Robitaille R. Glial cells and neurotransmission: an inclusive view of synaptic function. //Neuron.-2003a.-V.40, N 2.- P. 389 400.

130. Boding H. Transcription-dependent neuronal plasticity. The nuclear calcium hypothesis. //Eur. J. Biochem.- 2000.- V.267, N 17.- P. 5280 5283.

131. Banco JL., Hou L., Klann E. NMDA receptor activation results in PKA-and ERK-dependent Mnkl activation and increased elF4E phosphorilation in hippocampal area CA1. //J. Neurochem.- 2004.- V.91, N 2.- P. 462 470.

132. Barnes BR., Zierath JR. Role of AMP activated protein kinase in control of glucose homeostasis. //Curr. Mol. Med.-2005.-V.5, N 3.-P. 341 -348.

133. Barsotti C., Ipata P. Metabolic regulation of ATP breakdown of adenosine production in rat brain extracts. //Int. Biochem. Cell. Biol.- 2004.- V.36, N 11.-P. 2214-2225.

134. Bassell G., Twiss J. RNA exodus to Israel: RNA controlling function in the far reaches of the neuron. //EMBO reports.- 2006.- V.7, N 1.- P. 31 35.

135. Beeckman S., Kanasek E. Organ Cell Metabolism: Proc. NATO Alv. Res.Work-Shop, Hensthelis.- New York-London.- 1996.- P. 199 208.

136. Berridge M. Neuronal calcium signaling. //Neuron.- 1998,- V.21, N 1,-P. 13-26.

137. Berridge M., Bootman M., Roderick L. Calcium signaling: dynamics, homeostasis and remodeling. //Nat. Rev. Mol. Cell Biol.-2003.-V.4, N 7.- P. 517 529.

138. Biguet N., Rittenhouse A., Mallet J., Zigmond R. Preganglionic nerve stimulation increases mRNA levels for tyrosine hydroxylase in the rat superior cervical ganglion. //Neurosci. Lett.- 1989.-V.104, N 1-2.-P. 189 194.

139. Bittar PCharnay ¥., Pellerin L., Bouras C., Magistretti P. Selective distribution of lactate degydrogenase isoenzymes in neurons and astrocytes of human brain. //J.Cereb.Blood Flow Metab.- 1996.- V.16, N 6.- P. 1079 1089.

140. Boehm S. Signaling via nucleotide receptors in sympathetic nervous system. //Drug News Perspect.- 2003.- V.16, N 3.- P. 141 148.

141. Bouzier-Sore A., Serres S., Canioni P., Merle M. Lactate involvement in1 ^neuron-glia metabolic interaction: C-NMR spectroscopy contribution. //Biochimie.-2003.-V.85, N 9.-P. 841 848.

142. Braitenberg V., Schuz A. Cortex: Statistics and Geometry of Neuronal Connectivity. New York: Springer.-1998.- 610 p.

143. Briggs C.A., McAfee.D.A., McCaman R.E. Long-term regulation of synaptic acetylcholine release and nicotinic transmission: the role of cAMP. //Br.J.Pharmacol.- 1998.-V.93.- P. 399 -411.

144. Brooks G. Lactate shuttles in nature. //Biochem. Soc. Trans.- 2002.- V.30, N2.- P. 258-264.

145. Broun N., Zhu Y., Kriglstein J., Culmsee C., Zimmermann H. Upregulation of the enzyme chain hydrolyzing extracellular ATP after transient forebrain ischemia in the rat. //J. Neurosci.- 1998.- V.18.- P. 4891 4900.

146. Brown DA., Filippov AK., Barnard EA. Inhibition of potassium and calcium currents in neurons by molecularly-defined P2Y receptors. //J. Auton. Nerv. Syst.-2000.-V.81, N 1-3.-P. 31 -36.

147. Brown E., Schreiber S. A signaling pathway to translation control. //Cell.-1996.- V.86.- P. 517-520.

148. Brown N., Dale P. Spike-independent release of ATP from Xenopus spinal neurons evoked by activation of glutamate receptors. //J. Physiol. (London).-2002.-V.540.- P. 851 -860.

149. Burdakov D., Ashcroft F. Shedding new light on brain metabolism and glial function. //J. Phisiol.- 2003.- V.546, N 2.- P. 334.

150. Burnstock G. Noradrenaline and ATP: cotransmitters and neuromodulators. //J. Physiol. Pharmacol.-1995.-V.46, N 4.-P. 365 384.

151. Burnstock G. The past, present and future of purine nucleotides as signaling molecules. //Neuropharmacology.- 1997.-V.36.- P. 1127 1139.

152. Buzhurina IM., Chernay NG., Panov MA. Glucose strongly stimulates rate of the RNA synthesis in Ehrlich ascites carcinoma cells. //Cell. Biol. Int.- 1994.-V.18, N 6,- P. 673-675.

153. Carling D. The AMP activated protein kinase cascade - a unifying system for energy control. //Trends Biochem. Sci.- 2004.- V.29, N l.-P. 18-24.

154. Carling D. AMP activated protein kinase: balancing in scales. //Biochimie.- 2005.- V.87, N 1.- P. 87 - 91.

155. Chalazonitis A., Zigmond R. Effects of synaptic and antidromic stimulation on tyrosine hydroxylase activity in the rat superior cervical ganglion. //J. Physiol.-1980.- V.300.-P. 525-538.

156. Chang K., Berg D. Voltage-gated channels block nicotinic regulation of CREB phosphorylation and gene expression in neurons. //Neuron.- 2001.- V.32, N5.- P. 855-865.

157. Charles A. Glial intercellular waves. //Sci. STKE.- 2005.-V.290.- Tr.19.

158. Cheng H., Wei S., Wei L., Verkhratsky A. Calcium signaling in physiology and phatophysiology. //Acta pharmacologica sinica.- 2006.- V. 27, N 7.-P. 767 772.

159. Clementi F., Fornasari D., Gotti C. Neuronal nicotinic receptors, important new players in brain function. //Eur. J. Pharmacol.-2000.-V.393, N 1-3.- P. 3 10.

160. Colomar A., Robitaille R. Glial modulation of synaptic transmission at the neuromuscular junction. //Glia.- 2004.-V.47, N 3.-P. 284 289.

161. Cooper M. Intercellular signaling in neuronal-glial networks. //Biosystems.-1995.-V.34, N 1-3.- P. 65-85.

162. Corfas G., Velardez M., Ko C.-P., Ratner N., Peles E. Mechanisms and roles of axon Schwann cell interactions. //J. Neurosci.- 2004,- V.24, N 42.-P. 9250-9260.

163. Cragg B. What is the signal for chromatolysis? IIBrain Res.- 1970.- V.23, Nl.-P. 1-21.

164. Cuevas J., Roth A., Berg D. Two distinct classes of functional a7-containing nicotinic receptor on rat superior cervical ganglion neurons. //J. Physiol.-2000.-V.525, Pt. 3.- P. 735-746.

165. Cunha R., Ribeiro J. ATP as presynaptic modulator. //Life Sci.-2000.-V.68.-P. 119-137.

166. DaiX., Lercher L., Clinton P., Du Y., Livingston D., Vieira C., Yang Lu., Shen M., Dreyfus C. The trophic role of oligodendrocytes in the basal forebrain. //J. Neurosci.- 2003.- V.23, N 13.- P. 5846 5853.

167. Dajas-Bailador F., Wonnacott S. Nicotinic acetylcholine receptors and regulation of neuronal signaling. //Trends Pharmacol. Sci.- 2004.- V.25, N 6.-P. 317-324.

168. Dani J. Overview of nicotinic receptors and their roles in the central nervous system. //Biol. Psychiatry.- 2001.- V.49, N 3.- P. 166 174.

169. De Biasi M. Nicotinic mechanisms in the autonomic control of organ systems. //J. Neurobiol.- 2002.- V.53, N 4.- P. 568 579.

170. De Biasi M., Nigro F., Xu W. Nicotinic acetylcholine receptors in the autonomic control of bladder. //Eur. J. Pharmacol.- 2000.- V.393, N 1-3.- P. 137 140.

171. Deitmer JW. Glial strategy for metabolic shuttling and neuronal function. //Bioessays.-2000.-V.22, N 8.- P. 747 752.

172. Deitmer JW. Strategies for metabolic exchange between glial cells and neurons. //Respir. Phisiol.- 2001.-V.129, N 1-2.- P. 71 81.

173. Dienel GA., Cruz NF. Astrocyte activation in working brain: energy supplied by minor substrates. //Neurochem. Int.-2006.-V.48, N 6-7.-P. 586 595.

174. Dietz A., Lubrano T., Rubinstein H. Disc electrophoresis of lactate degydro-genase isoenzymes. //Clin. Chim. Acta.- 1970.- V.27, N 2.- P. 225 232.

175. Dolivo M. Metabolism of mammalian sympathetic ganglia. //Fed. Proc.-1974.-V.33, N 4.-P. 1043 1048.

176. Dresios J., Chappel SA., Zhou W., Mauro VP. An mRNA- rRNA base-pairing mechanism for translation initiation in eukaryotes. //Nat. Struct. Mol.Biol.- 2006.-V.13, N 1.- P. 30-34.

177. Dreyfus C. The trophic role of oligodendrocytes in the basal forebrain. //J. Neurosci.- 2003.-V.23, N 13.- P. 5846 5853.

178. Dunckley 71, Lukas R. Nicotine modulates the expression of a diverse set of genes in the neuronal SH-SY5Y cell line. //J. Biol. Chem.- 2003. V.278, N 18.-P. 15633- 15640.

179. Dunn PM., Gever J., Ruan HZ., Burnstock G. Developmental changes in heteromeric P2X(2/3) receptor expression in rat sympathetic ganglion neurons. //Dev. Din.-2005.-V.234, N 3.- P. 505 511.

180. Dunwiddie T., Diao L., Proctor W. Adenine nucleotides undergo rapid, quantitative conversion to adenosine in the extracellular space in rat hippocampus. //J. Neurosci.- 1997.-V.17.- P. 7673 7682.

181. Dunwiddie T., Masino S. The role and regulation of adenosine in central nervous system. //Ann. Rev.Neurosci.-2001.-V.24.-P. 31-55.

182. During M, Spencer D. Adenosine: a potential mediator of seizure arrest and postictal refractoriness. //Annl. Neurol.- 1993.- V.32.- P. 618 624.

183. Dwoskin L., Crooks. Competitive neuronal nicotinic receptor antagonist: a new direction for drug discovery. //J. Pharmacol. Exp.Ther.- 2001.- V.298, N 2.-P. 395-402.

184. Dzeja P., Terzic A. Phosphotransfer reactions in the regulation of ATP-sensitive K+ channels. //FASEB J.- 1998.-V.12.- P. 523 529.

185. Dzeja P., Terzic A. Phosphotransfer networks and cellular energetics. //J.Exp.Biol.- 2003.- V.206.- P. 2039 2047.

186. Dzeja P., Zeleznikar R., Goldberg N. Adenylate kinase: kinetic behavior in intact cells indicates it is integral to multiple cellular processes. //Mol. Cell. Biochem.- 1998.- V.184, N 1-2.- P. 169 182.

187. Einarson L., Krogh E. Variation in the basophilia of nerve cells associated with increased cell activity and functional stress. //J. Neurol. Neurosurg. Psychiat.-1955.-V.18.-P. 1-12.

188. Erecinska M., Silver I. Ions and energy in mammalian brain. //Prog. Neurobiol.- 1994.-V.43, N 1.- P. 37 71.

189. Etherington L., Frenguelli B. Endogenous adenosine modulates epileptiform activity in rat hippocampus in receptor subtypedependent manner. //Eur. J. Neurosci.-2004.-V.19.- P. 2539 2550.

190. Fellin T., Carmignoto G. Neurone-to-astrocyte signaling in the brain represents a distinct multifunctional unit. //J. Phisiol.- 2004.- V. 559, N 1.- P. 3 -15.

191. Feng Z., Koirala S., Ko C-P. Synapse-glia interactions at the vertebrate neuromuscular junction. //Neuroscientist.- 2005.-V.l 1, N 5.- P. 503 513.

192. Finkbeiner S. Glial calcium. //Glia.- 1993.- V.9, N2.- P. 83 104.

193. Foufelle F., Ferre P. Role of adenosine monophosphate- activated protein kinase in the control of energy homeostasis. //Curr.Opin.Clin.Nutr.Metab.Care.-2005.-V.8, N 4.-P. 355 360.

194. Fowler J. Purine release and inhibition of synaptic transmission during hypoxia and hypoglycemia in rat hippocampal slices. //Neurosci. Lett.-1993,-V.157.- P. 83 -86.

195. Fucile S. Ca(2+) permeability of nicotinic acetylcholine receptors. //Cell Calcium.-2004.- V.35, N 1.- P. 1 8.

196. Fucile S., Renzi M., Lax P., Eusebi F. Fractional Ca(2+) current through human neuronal alpha7 nicotinic acetylcholine receptors. //Cell Calcium.-2003.-V.34, N 2.- P. 295-209.

197. Fujii S. ATP- and adenosine-mediated signaling in the central nervous system: the role of extracellular ATP in hippocampal long-term potentiation. //Pharmacol. Sci.- 2004.-V.94, N 2.- P. 103 106.

198. Galzi J., Changeux J. Neuronal nicotinic receptors: molecular organization and regulations. //NeuropharmacoL- 1995.- V.34, N 6.- P. 563 582.

199. Ge S., Dani J. Nicotinic acetylcholine receptors at glutamate synapses facilitate long-term depression or potentiation. //J. Neurosci.- 2005.- V.25, N 26.-P. 6084-6091.

200. Georgiou J., Robitaille R., Trimble WS., Charlton MP. Synaptic regulation of glial protein expression in vivo. //Neuron.- 1994.- V.l2, N 2.- P. 443 455.

201. Georgiou J., Robitaille R.t Charlton MP. Muscarinic control of cytoskeleton in perisynaptic glia. //J. Neurosci.- 1999.- V.19, N 10,- P. 3836 3846.

202. Gerebtzoff M.A. Detection histochimique d' isoenzymes de la lactate deshy-drogenase dans le nerf et le ganglion spinal. //Compt. rend. Soc. Biol.- 1966.-V.160, N 6.- P. 1323- 1325.

203. Gerebtzoff M.A. Contribution histochimique a l'etude de la lactate deshydro-genase et de ses isoenzymes. //Path. Biol.- 1968.- V.16, N 11 12/13 - 14.-P. 601 -608.

204. Ginty D., Bading H., Greenberg M. Trans synaptic regulation of gene expression. //Curr.Opin. NeurobioL- 1992.-V.2, N 3.- P. 312 - 316.

205. Gisiger V. Triggering of RNA synthesis by acetylcholine stimulation of the postsynaptic membrane in mammalian sympathetic ganglion. //Brain Res.- 1971.-V.33, N 1.- P. 139-146.

206. Gisiger V. Role of hyperpolarisation generated by Na+ K+ pump in the trans-synaptic induction of RNA synthesis in sympathetic neurons. //J. Physiol (Paris).- 1988-89.- V. 83, N 3.- P. 148 - 163.

207. Gisiger V. Regulation of gene expression by trans-synaptic activity: a role for the transcription factor NF-kappa B. //J. Physiol (Paris).- 1998.- V.92, N 3-4.-P. 163-166.

208. Gisiger V., Dunant Y., Huguenin AC., Dolivo M. Incorporation of tritiated uridine into ribonucleic acid by the rat sympathetic ganglion incubated in vitro. //Helv. Physiol. Pharmacol. Acta.- 1967.- V. 25, N 4.- CR415.

209. Goddard P., Grigor P. Lactate dehydrogenase quantification and isoenzyme distribution in physiological response to stress in red deer (Cervus elaphus). //Res. Vet. Sci.- 1997.- V.63, N 2.- P. 119 122.

210. Goelet P., Castellucci V., Schacher S., Kandel E. The long and the short-term memor a molecular framework. // Nature.- 1986.- V.322, N 6078.- P. 419 - 422.

211. Gorbunova AV. Autonomic ganglionic neurons in rabbits with differing resistant to emotional stress. //Stress.- 2000.- V.3, N 4.- P. 309 318.

212. Gotti G, Clementi F. Neuronal nicotinic receptors: from structure to pathology. //Prog. Neurobiol.- 2004.- V.74, N 6.- P. 363 396.

213. Granneman S., Baserga SJ. Ribosome biogenesis: of knobs and RNA processing. IIExp. Cell. Res.- 2004.- V.296, N 1.- P. 43 50.

214. Greenberg M., ZiffE., Greene L. Stimulation of neuronal acetylcholine receptors induced rapid gene transcription. //Science.-1986.- V.234, N 4772.- P. 80-83.

215. Gueorguiev V., Zeman R., Meyer E., Sabban E. Involvement of alpha7 nicotinic acetylcholine receptors in activation tyrosine hydroxylase and dopamine beta-hydroxylase gene expression in PC12 cells. //J. Neurochem.- 2000.- V.75, N 5.-P. 1997-2005.

216. GuerriniL., BlasiF., Denis-Donini S. Synaptic activation of NF-kB by glutamate in cerebellar granule neurons in vitro. //Proc. Natl. Acad. Sci.- 1995,- V.92.-P. 9077-9081.

217. Guntinas-Lichius O., Neiss W., Schulte E., Stennert E. Quantitative image analysis of the chromatolysis in rat facial and hypoglossal motoneurons following axotomy with and without reinnervation. //Cell. Tissue. Res.- 1996,- V.286, N 3.-P. 537-541.

218. Guntinas-Lichius O., Schulte E., Stennert E., Neiss W. The use of texture analysis to study the time course of chromatolysis. //J. Neurosci. Methods.- 1997.-V.78,N 1-2.- P. 1 -6.

219. Hansen A. Effect of anoxia on ion distribution in the brain. //Physiol. Rev.-1985.-V.65.-P. 101-148.

220. Hans son E., Ronnback L. Glial neuronal signaling in the central nervous system. //FASEB J.- 2003.- V.17, N 3.- P. 341 348.

221. Hardie G. The AMP-activated protein kinase cascade: the key sensor of cellular energy status. //Endocrinology.- 2003.- V.144, N 12.-P. 5179 5183.

222. Hardie G. The AMP-activated protein kinase pathway new plaers upstream and downstream. //J. Cell Science.- 2004.- V. 117.- P. 5479-5487.

223. Harhonen M., Passonen J., Lowry O. Relationships between energy reserves and function in rat superior cervical ganglion. //J.Neurochem.-1969.-V.16, N 10.-P. 1439-1450.

224. Hatton G. Dynamic neuronal- glial interactions: an overview 20 years later. // Peptides.-2004.-V.25, N 3.- P.403 -411.

225. Haydon P. Glia: listening and talking to the synapse. //Nat. Rev. Neurosci.-2001.- V.2, N 3.- P. 185- 193.

226. Hazama H, Uchimura H. Lactate degydrogenase isoenzyme pattern contained in neurons resolved by microdisc electrophoresis. //Brain Res.-1970a.-V.23, N 2.- P. 288 292.

227. Hazama H, Uchimura H. Separation of lactate degydrogenase isoenzymes of nerve cells in the central nervous system by micro-disc electrophoresis on polya-crylamide gels. //Biochim. Biophys. Acta.- 1970.- V.200, N 2.- P. 414 417.

228. Heinova D., Rosival I., Avidar Y, Bogin E. Lactate dehydrogenase isoenzyme distribution and patterns in chicken organs. //Res. Vet. Sci.- 1999,- V.67, N 3.-P. 309-312.

229. Hertz L. Intercellular metabolic compartmentation in the brain: past, present and future. //Neurochemistry International.- 2004.- V.45, N 2-3.- P. 285 296.

230. Hertz L., Code W., Sykova E. Ions, water, and energy in brain cells: a synopsis of interrelations. //Can. J. Phisiol. Pharmacol.-V.70, Suppl.-S. 100 106.

231. Heus R., Diegenbach P. The use of texture analysis for the discrimination of Nissl substance in neurons. //J. Neurosci. Methods.- 1992.- V.44, N 2-3.-P.209 -215.

232. Hirokawa N. mRNA transport in dendrites: RNA granules, motors, and tracks. //J. Neurosci.-2006.-V.26, N 27.- P. 7139 7142.

233. Hochachka P. The metabolic implications of intracellular circulation. //Proc. Natl. Acad. Sci.- 1999. V.96, N 22. P. 12233 12239.

234. Hochachka P. Oxygen, homeostasis, and metabolic regulation. //Adv. Exp. Med. Biol.- 2000.- V.475.- P. 311 335.

235. Hochachka P. Intracellular convection, homeostasis and metabolic regulation. //J. Exp. Biol.- 2003.-V.206.- P. 2001 2009.

236. Hochachka P., McClelland G. Cellular metabolic homeostasis during large-scale change in ATP turnover rates in muscles. //J. Exp. Biol.- 1997.- V.200.-P. 381 -386.

237. Hogan Y.N., Florent G., Hussain T., Alkadhi K. Cyclic AMP antagonizes adenosine-induced inhibition of ganglionic transmission. //Brain Res.- 1998a.-V.787.- P. 242-247.

238. Hogan Y.N., Hawkins R., Alkadhi K. Adenosine A1 receptor activations inhibits LTP in sympathetic ganglia. //Brain Res.- 1998b.- V.807.- P. 19 28.

239. Horton A., Ehlers M. Neuronal polarity and trafficking. //Neuron.- 2003.-V.40, N 10.- P. 277-295.

240. Huber K., Kayser M., Bear MF. Role for rapid dendritic protein synthesis in hippocampal mGluR dependent LTD. //Science.-2000.-V.288, N 5469.1. P. 1254- 1257.

241. Hyden H. RNA in brain cells. In.: The Nerosciences. Quarton G.,Melnechuk T., Schmitt F. (Eds). New York.: The Rockfeller University Press.- 1967.-P. 248-266.

242. Hyden H., Lange P. A genetic stimulation with production of adenic-uracil rich RNA in neurons and glia in learning. The question of transfer of RNA from glia to neurons. //Naturwissenschaften.- 1966.- V. 53, N 3.- P. 64 70.

243. Hyder F., Rothman D., Shulman R. Total neuroenergetics support localized brain activity: implications for the interpretation of fMRI. //Proc. Natl. Acad. Sci.-2002.-V.99.- P. 10771 10776.

244. Inoue I, Tsutsui I., Abbott NJ., Brown ER. Ionic currents in isolated and in situ squid Scwann cells. //J. Phisiol.- 2002.- V.541, Pt 3.- P. 769 778.

245. Iunquiera L., Carneiro J. Basic Histology. 8th Englewood Clifts.: Prentice Hall.-1995.

246. Jahromi B., Robitaille R., Charlton M. Transmitter release increases intracellular calcium in perisynaptic Schwann cells in situ. //Neuron.-1992.-V. 8, N 6.-P. 1069-1077.

247. Jeneson J., Wiseman R., Westerhoff H, Kushmerick M. The signal transduction function for oxidative phosphoiylaton is at least second order in ADP.

248. J. Biol. Chem.- 1996.-V.271, N 45.- P. 27995 27998.

249. Jensen A., Frolund B., Liljefors T., Krogsgaard P. Neuronal nicotinic acetylcholine receptors: structural revelation, target identifications, and therapeutic inspiration. //J. Med. Chem.- 2005.-V.48, N 15.- P. 4705 4745.

250. Jessen K. Glial cells. //Int. J. Biochem. Cell Biol.- 2004.- V.36.-P. 1861 -1867.

251. Johnson I., Pullen A., Sears T. Target dependence of Nissl body ultrastructure in cat thoracic motoneurons. //Neurosci. Lett.- 1985.- V.61, N 1-2.- P. 201 205.

252. Johnson I., Sears T. Organelle changes in cat thoracic alpha- and gamma-motoneurons following axotomy. //Brain Res. 1989.- V.489, N 2.- P. 400 - 405.

253. Juranyi Z., Sperlagh B., Vizi E. Involvement of P2 purinoceptors and the nitric oxide pathway in 3H1purin outflow evoked by short-term hypoxia and hypoglycemia in rat hippocampal slices. //Brain Res.- 1999.- V.823.-P. 183 -190.

254. Kadekaro M., Crane A., Sokoloff L. Differential effects of electrical stimulation of sciatic nerve on metabolic activity in spinal cord and dorsal root ganglion in the rat. //Proc. Natl. Acad. Sci.- 1985.-V.82, N 17.- P. 6010 6013.

255. Kahlert S., Reiser G. Glial perspectives of metabolic states during cerebral hipoxia calcium regulation and metabolic energy. //Cell Calcium.-2004.- V.36, N3-4.-P. 295-302.

256. Kaltschmidt C., Kaltschmidt B., Baeuerle P. Stimulation of ionotropic glutamate receptors activates transcription factor NF-kB in primary neurons. //Proc. Natl. Acad. Sci.- 1995.-V.92.- P. 9618 9622.

257. Kammermeier H. High energy phosphate of the myocardium: concentration versus of free energy change. //Basic Res.Cardiol.- 1987.-V.82, S 2.- P. 31 36.

258. Kammermeier H. Meaning of energetic parameters. //Basic. Res.Cardiol.-1993.-V.88, N 5.- P. 380-384.

259. Kang H., Schuman E. A requirement for local protein synthesis in neuro-trophin-induced hippocampal synaptic plasticity. //Science.- 1996.- V.273, N5280.- P. 1402- 1406.

260. Karachot L., Shirai Y., Vigot R., Yamamory T., Ito M. Induction of long-term depression in cerebellar Purkinje cells requires a rapidly turned over protein. //J. Neurophysiol.- 2001.- V.86, N 1,- P. 280 289.

261. Kasischke K., Vishwasrao H, Fisher P., Zipfel W., Webb W. Neural activity triggers neuronal oxidative metabolism followed by astrocytic glycolysis. //Science.- 2004.-V.305, N 5680.- P. 99 103.

262. Kelleher R.III, Govindarajan A., Tonegava S. Translational regulatory mechanisms in persistent forms of synaptic plasticity. //Neuron.- 2004a.- V.44, N 1.-P. 59-73.

263. Kelleher R.III, Govindarajan A., Jung HY., Kang H., Tonegava S. Translation control by MAPK signaling in long-term synaptic plasticity and memory. //Cell-20046.-V. 116, N 3.-P. 467 479.

264. Kernell D., Peterson R. The effect of spike activity versus synaptic activation on the metabolism of ribonucleic acid in molluscan giant neuron. //J. Neurochem.-1970.-V.17.-P. 1087-1094.

265. Kertser S., Bobryshev A., Voitenko S., Gmiro V., Brovtsyna N., Skok V. Dimensions of neuronal nicotinic acetylcholine receptors channel as estimated from the analysis of the channel-blocking effects. //J. Membr. Biol.-1998.-V. 163, N2.-P. 111-118.

266. Kettenmann H. Membrane conductance of oligodendrocytes is dominated by K+ channels. В кн.: Функции нейроглии. П/р А.И.Ройтбака. Тбилиси.: Мецни-ереба.- 1987.- С. 72-80.

267. Kimelberg НК. The role of hypotheses in current research, illustrated by hypotheses on possible role of astrocytes in energy metabolism and cerebral blood flow: from Newton to now. //J. Cereb. Flow Metab.- 2004.- V.24, N 11.-P. 1235- 1239.

268. Kindler S., Wang H., Richter D., Hedge H. RNA transport and local control of translation. //Annu. Rev. Cell Dev. Biol.- 2005.- V.21.- P. 223 -245.

269. Klann E., Dever T. Biochemical mechanisms for translational regulation in synaptic plasticity. //Nat. Rev. Neurosci.- 2004.- V.5, N 12.- P. 931 942.

270. Klimaschewski L., Kummer W., Heyrn C. Localisation, regulation and functions of neurotransmitters and neuromodulators in cervical sympathetic ganglia. //Microscopy Res. Technique.- 1996.- V.35, N 1.- P. 44 68.

271. Koirala S., Ко C.-P. Synapse-glia interactions at the vertebrate neuromuscular junction. //Neuroscientist.- 2005.-V.il, N 5.-P. 503 513.

272. Kruk P., Кот H., Faber D. The effects of geometrical parameters on synaptic transmission: a Monte Carlo simulation study. //Biophys. J.- 1997.-V.73, N 6.-P. 2874-2890.

273. Kubrusly R., da Cunha M., Reis R., Soares H., Ventura A., Kurtenbach E., de Mello M, de Mello F. Expression of functional receptors and transmitter enzymes in cultured Muller cells. //Brain Res.- 2005.- V.1038, N 2.- P. 141 149.

274. Kumer S., Vrana K. Intricate regulation of tyrosine hydroxylase activity and gene expression. //J. Neurochem.- 1996.- V.67.- P. 443 462.

275. Lanahan A., Worley P. Immediate-early genes and synaptic function. //Neurobiol. Learn. Mem.- 1998.-V.70, N 1-2.- P. 37 43.

276. Larkum M, Warren D., Benett M. Calcium concentration changes in the calyciform nerve terminal of the avian ciliary ganglion after tetanic stimulation. //J. Auton. Nerv. Syst.- 1994.- V.46.- P. 175 188.

277. Laughton J., Charnay Y., Belloir B., Pellerin L., Magistretti P., Bouras C. Differential messenger RNA distribution of lactate dehydrogenase LDH-1 and LDH-5 isoforms in the rat brain. //Neuroscience.- 2000.- V.96, N 3.- P. 619 625.

278. Lazdunski M. ATP-sensitive potassium channels: an overview. //J. Cardiovasc. Pharmacol.- 1994.- V.24.- SI S5.

279. Lieberman A. The axon reaction: a review of the principal features of peri-karial responses to axon injury. //Int. Rev. Neurobiol.- 1971.- V.l4.- P. 49 124.

280. Lilienbaum A., Israel A. From calcium to NF-kappa В signaling pathways in neurons. //Мої. Cell. Biol.- 2003.- V.23, N 8.- P. 2680 2698.

281. Lin YQ., Brain K., Bennett M. Calcium in sympathetic boutons of rat superior cervical ganglion during facilitation, augmentation and potentiation. //J. Auton. Nerv. Sist.- 1998.- V.73, N 1.- P. 26 37.

282. Lopez-Cardozo M., Larsson OM., Schousboe A. Acetoacetate and glucose as lipid precursors and energy substrates in primary cultures of astrocytes and neurons from mouse cerebral cortex. //J. Neurochem.- 1986.- V.46, N 3.-P. 773 778.

283. Madshus Y. Regulation of intracellular pH in eukaryotic cells. //Biochem.-1988.-V.250.-P. 1-8.

284. Magistretti P. Neuron-glia metabolic coupling and plasticity. //J Exp Biol.-2006.- V.209, N 12.- P. 2304 2311.

285. Magistretti P., Pellerin L. Cellular mechanisms of brain energy metabolism and their relevance to functional brain imaging. //Philos. Trans. R. Soc. Lond. В Biol. Sci.- 1999,- V.354.- P. 1155 1163.

286. Malenka R., Nicoll R. Long-term potentiation a decade of progress? //Science.- 1999.- V.285, N 5435.- P. 1870 - 1874.

287. Mangia S., Giove F., Bianciardi M, Di Salle F., Gareffa G., Maraviglia B. Issues concerning the construction of a metabolic model for neuronal activation. // J. Neurosci. Res.- 2003.- V.71, N 4.- P. 463 467.

288. Mansvelder H., van Aerde K., Couey J., Brussard A. Nicotinic modulation of neuronal networks: from receptors to cognition. //Psychopharmacology.- 2006.-V.184.- P. 292-305.

289. Martin D. Synthesis and release of neuroactive substances by glial cells. //Glia.- 1992.- V.5, N 2.- P. 81 94.

290. Martin ED., Buno W. Stabilizing effects of extracellular ATP on synaptic efficacy and plasticity in hippocampal pyramidal neurons. //Eur. J. Neurosci.-2005.-V.21, N 4.- P. 936 944.

291. Martin S., Moris R. New life in an old idea: the synaptic plasticity and memory hypothesis revisited. //Hippocampyus.- 2002.- N 12.- P. 609 636.

292. Masino S., Dulla C. Adenosine, glutamate and pH: interactions and implications. //Neurological. Res.- 2005.-V.27, N 2.- P. 149 152.

293. McBride W., Klingman J. Effects of excitation of the metabolism of simple neuronal system: the mammalian sympathetic ganglion. //Prog. Neurobiol.-1975.-V.3.-P. 253-287.

294. McCaman M., McAfee D. Effects of synaptic activity on the metabolism and release of purines in the rat superior cervical ganglion. //Cell Мої. Neurobiol.-1986.-V.6. N 4. P. 349 -362.

295. McGaugh J. Memory: a century of consolidation. //Science.- 2000.- V. 287.-P. 248-251.

296. McKenna M., Tildon J., Stevenson J., Boatright R., Huang S. Regulation energy metabolism in synaptic terminals and cultured rat brain astrocytes: differences revealed using aminooxyacetate. //Dev. Neurosci.- 1993.- V.15, N 3-5.-P. 320-329.

297. Meberg P., Kinney W., Valcourt E., Routtenberg A. Gene expression of the transcription factor NF-kappa В in hippocampus: regulation by synaptic activity. //Brain Res. Мої. Brain Res.- 1996.-V.38, N 2.- P. 179 190.

298. Meffert M., Chang J., Wiltgen B., Fanselow M., Baltimore D. NF-kappa В function in synaptic signaling and behavior. //Nat. Neurosci.- 2003.- V.6, N 10.-P. 1072-1078.2661. OA

299. Meldolesi J. Rapidly exchanging Ca stores: ubiquitous partners of surface channels in neurons. //News Physiol. Sci.- 2002.- V.17.- P. 144 149.

300. Mitterauer B. Imbalance of glial-neuronal interaction in synapses: a possible mechanism of the pathophysiology of bipolar disorder. //Neuroscientist.- 2004.-V.10, N 3.- P. 199-206.

301. Moss T. At the crossroad of growth control; making ribosomal RNA. //Curr. Opin. Genet. Dev.- 2004.- V.14, N 2.- P. 210 217.

302. Nakamura S., Todo Т., Motoi Y., Haga S., Aizawa Т., Ueki A., Ikeda K. Glial expression of fibroblast factor-9 in rat central nervous system. //Glia.- 1999.-V.28, N1,- P. 53-65.

303. Neumann D., Schlattner U., Wallimann T. A molecular approach to the concerted action of kinases involved in energy homeostasis. //Biochem. Soc. Trans.-2003.-V.31.- P. 169- 174.

304. Newman E., Volterra A. Glial control of synaptic function. //Glia.-2004.-V.47, N 3.- P. 207-208.

305. Newman E., Zahs R. Modulation of neuronal activity by glial cells in the retina. //J. Neurosci. Res.- 1998.- V. 18, N 11.- P. 4022 4028.

306. Nguen P., Abel Т., Kandel E. Requirement of critical period of transcription for induction of a late phase of LTP. //Science.- 1994.- V.265, N 5175.-P. 1104-1107.

307. Norenberg M.D., Martinez-Hernandez A. Fine structural localization of glutamine synthetase in astrocytes of rat brain. //Brain Res.- 1977.- V.161.-P. 303-310.

308. Novere N., Corringer P., Changeia J. The diversity of subunit composition in nAChRs: Evolutionary origins, physiologic and pharmacologic consequences. //J. Neurobiol.- 2002.- V.53, N 4.- P. 447 456.

309. Oikawa H., Nakamichi N., Kambe Y, Ogura M., Yoneda Y An increase in intracellular free calcium ions by nicotinic acetylcholine receptors in a single cultured rat cortical astrocyte. //J. Neurosci. Res.- 2005.-V.79, N 4.- P. 535 544.

310. OKane E., Stone T. Characterization of ATP-induced facilitation of transmission in rat hippocampus. //Eur. J. Pharmacol.- 2000.- V.409.- P. 159 166.

311. Okuno H., Takemoto-Kimura S., Ohmae S., Okamura M., Ishihara N., Bito H. Synaptic activity-dependent regulation of neuronal gene expression. // Tan-pakushitsu Kakusan Koso.- 2004.- V.49, Suppl 3.- P. 411 418.

312. Palevic V., Burnstock G. Receptors for purines and pyrimidines. //Pharmacol. Rev.- 1998.-V.50, N 3.- P. 413 492.

313. Pannese E. Neurocytology. Stuttgart.: Thyeme.- 1994.- 450 p.

314. Parkinson F., Sinchlar C., Othman T., Hayghey N., Geyger J. Differences between rat primary cortical neurons and astrocytes in purine release evoked by ischemic conditions. //Neuropharmacology.- 2002.-V.43.- P. 836 846.

315. Pelto-Huikko M., Dagerlind A., Kononen J., Lundberg J., Villar M., Koisti-naho J,, Bravo R., Hokfelt T. Neuronal regulation of c-fos, c-jun, and jun B immediate-early genes in rat adrenal medulla. //J. Neurosci.- 1995.- V.15, 3 Ptl.-P. 1854- 1868.

316. Peppiatt C., Attwell D. Neurobiology: feeding the brain. //Nature.- 2004.-V.431, N 7005.- P. 137-142.

317. Perrone-Capano C., Crispino M., Menchini E., Kaplan BB., Giuditta A. Ribosomal RNAs synthesized by isolated squid nerves and ganglia differ from native ribosomal RNAs. //J. Neurochem.- 1999.- V.72, N 3.- P. 910-918.

318. Peters A., Schweiger U., Pellerin L., Hubold C., Oltmanns KM., Conrad M., Schultes B., Born J., Fehrn HL. The selfish brain: competition for energy resources. //Neirosci. Biobehav. Rev.-2004.-V.28, N 2.-P. 143- 180.

319. Peters A., Sethares C. Oligodendrocytes, their progenitors and other neuroglial cells in the aging primate cerebral cortex. //Cerebral Cortex.- 2004.- V. 14.-P. 995-1007.

320. Petersen O., Michalak M, Verkhratsky A. Calcium signaling: past, present and future. //Cell Calcium.- 2005.- V.38, N 3-4.- P. 161 169.

321. Pfeiffer B., Huber K. Current advances in local protein synthesis and synaptic plasticity. //J. Neurosci.- 2006.-V.26, N 27.- P. 7147 7150.

322. Pfrieger E., Barres B. New views on synapse-glia interactions. //Curr. Opin. Neurobiol.- 1996.- V.6, N 5.- P. 615 -621.

323. Phillis J., O'Regan M., Estevez A., Song D., VanderHiede S. Cerebral energy metabolism during severe ischemia of varying duration and following reperfusion. //J. Neurochem.- 1996.-V.67.- P. 1525 1561.

324. Philp A., Macdonald A., Watt P. Lactate a signal coordinating cell and systemic function. //J. Exp. Biol.- 2005.- V.208.- P. 4561 - 4571.

325. Pierre K., Pellerin L. Monocarboxylate transporters in the central nervous system: distribution, regulation and function. //J. Neurochem.- 2005.- V.94, N 1.-P. 1 -14.

326. Poitry-Yamate C, Poitry C., Tsacopoulos M. Lactate released by Muller cells is metabolized by photoreceptors from mammalian retina. //J. Neurosci.-1995.-V.15.-P. 5179-5191.

327. Popanda O., Fox G., Thielmann H.W. Modulation of DNA polymerases a, 5 and s by lactate dehydrogenase and 3-phosphoglycerate kinase. //Bio-cim.Biophys. Acta.- 1998.- V.1397, N 1.- P. 102 117.

328. Porter J., McCarthy. K. Astrocytic neurotransmitter receptors in situ and in vivo. //Prog. Neurobiol.- 1997.- V.51.- P. 439 455.

329. Prasad R., Singh L. LDH and succcinate dehydrogenase activités in relation to species and muscle types. //Indian J. Anim.Sci.- 1992.- V.62, N 7.- P. 622- 624.

330. Pullen A. Morphometric evidence from C-synapses for phase Nissl body response in alpha-motoneurones retrogradely intoxicated with diphtheria toxin. //Brain Res.- 1990.- V.509, N1.- P. 8 16.

331. Raichle M. Functional brain imaging and human brain function. //J. Neurosci.- 2003.- V.23.- P. 3959 3962.

332. Raichle M, Gusnard D. Appraising the brain's energy budget. //Proc. Natl. Acad. Sci.- 2002.- V.99.- P. 10237 10239.

333. Rathouz M., Berg D. Synaptic-type acetylcholine receptors raise intracellular calcium levels in neurons by two mechanisms. //J. Neurosci.-1994.- V.14, 11 Pt.2.-P. 6935 6945.

334. Rathouz M., Vijayaraghavan S., Berg D. Elevation of intracellular calcium levels in neurons by nicotinic acetylcholine receptors. //Mol. Neurobiol.- 1996.-V.12, N 2.- P. 117-131.

335. Rizzuto R. Intracellular Ca(2+) pools in neuronal signaling. //Curr. Opin. Neurobiol.-2001.- V.l 1, N 3.- P. 306- 311.

336. RichterJ. Think globally, translate locally: What mitotic spindles and neuronal synapses have in common. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 2001.- V.98, N 13.-P. 7069-7071.

337. Rochon D., Rousse I., Robitaille R. Synapse-glia interactions at the mammalian neuromuscular junction. //J. Neurosci.- 2001.-V.21, N 11.- P. 3819 3829.

338. Rosenberg M., Blitzblau R., Olsen D., Jacob M. Regulatory mechanisms that govern nicotinic synapse formation in neurons. //J. Neurobiol.- 2002.- V.53, N 4.-P. 542-555.

339. Sargent P. The diversity of neuronal nicotinic acetylcholine receptors. //Annu. Rev. Neurosci.- 1993.- V.16.- P. 403 443.

340. SatchelI D. Purinergic nerves and purinoceptors: early perspectives. //J. Auton. Nerv. Syst- 2000.- V.81, N 1-3.- P. 212 217.

341. Scheetz A., Nairn A., Constantine-Paton M. NMDA receptor-mediated control of protein synthesis at developing synapses. //Nat. Neurosci.- 2000,- V.3, N 3.-P. 211 -216.

342. Schipke CG., Kettenmann H. Astrocyte responses to neuronal activity. //Glia.- 2004.-V.47, N 3.- P. 226 232.

343. Schuman E., Dynes J., Steward O. »Synaptic regulation of translation of dendritic mRNAs. //J. Neurosci.- 2006.- V.26, N 27.- P. 7143 7146.

344. SchurrA. Lactate: the ultimate cerebral oxidative energy substrate. //J. Cereb. Blood Flow Metab.- 2006.- V.26, N 1.- P. 142 152.

345. Serres S., Bouyer J-J., Bezancon E., Canioni P., Merle M. Involvement of brain lactate in neuronal metabolism. //NMR Biomed.- 2003.- V.l6.- P. 430 439.

346. Serres S., Bezancon E., Franconi J.M., Merle M. Ex vivo NMR study of lactate metabolism in rat brain under various depressed states. //J. Neurosci. res.-2005.- V.79, N 1-2,- P. 19-25.

347. Shank R.P., Bennet G., Freytag S., Campbell G. Pyruvate carboxylase: an astrocyte-specific enzyme implicated in the replenishment of amino acid neurotransmitter pools. //Brain Res.- 1985.- V.329.- P. 364 367.

348. Sharma G., Vijayaraghavan S. Nicotinic cholinergic signaling in hippocampal astrocytes involves calcium-induced calcium release from intracellular stores. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 2001.- V.98, N 7.- P. 4148 4153.

349. Sharma G., Vijayaraghavan S. Nicotinic receptor signaling in nonexcitable cells. //J. Neurobiol.- 2002.- V.53, N 4.-P. 524 534.

350. Shashoua VE. RNA metabolism in the brain. //Int. Rev. Neurobiol.- 1974.-V.16.-P. 183-231.

351. Sibson N., Dhankhar A., Mason G., Rothman D., Behar K., Shulman R. Stoichiometric coupling of brain glucose metabolism and glutamatergic neuronal activity. //Proc. Natl. Acad. Sci.- 1998.- V.95.-P. 316 321.

352. Silver I., Deas J., Erecinska M. Ion homeostasis in brain cells: differences in intracellular ion responses to energy limitation between cultured neurons glial cells. //Neuroscience.- 1997.- V.78, N 2.- P. 589 601.

353. Skok VI. Molecular mechanisms of open-channel blockade in nicotinic acetylcholine receptors of autonomic ganglia neurons. //Can. J. Physiol. Pharmacol.- 1992.-V.70.- S78-85.

354. Skok VI. Nicotinic acetylcholine receptors in autonomic ganglia. //Auton. Neurosci.- 2002.- V.97, N 1.- P. 1 11.

355. Skok VI., Voitenko SV, Brovtsyna NB, Kurenniy D., Gmiro VE., Kertser SL. The ionic channel of neuronal nicotinic acetylcholine receptors is funnelshaped. //Neuroscience.- 1995.- V.67, N 4.-P. 933 939.

356. Smith R. Moving molecules: mRNA trafficking in mammalian oligodendrocytes and neurons. //Neuroscientist.- 2004.- V.10, N 6.- P. 495 500.

357. SokoloffL. Energetics of functional activation in neural tissues. //Neurochem. Res.- 1999.-V.24, N 2.- P. 321 329.

358. Sokoloff L. Functional-related changes in energy metabolism in the nervous system: localization and mechanisms. //Keio J. Med.- 1993.- V.42, N3.1. P. 95- 103.

359. Sokoloff L., Takahashi S., Gotoh J., Driscoll B., Law M. Contribution of astroglia to functionally activated energy metabolism. //Dev. Neurosci.- 1996.-V.18, N 5-6.- P. 344-352.

360. Sontheimer H. Voltage-depend ion channels in glial cells. //Glia.-1994.-V.l 1, N2.-P. 156- 172.

361. Stefani G., Fraser C., Darnell J., Darnell R. Fragile X mental retardation protein is associated with translating polyribosomes in neuronal cells. //J. Neurosci.- 2004.- V.24, N 33.- P. 7272 7276.

362. Steward O., Levy WB. Preferential localization of polyribosomes under the base of dendritic spines in granule cells of the dentate gyrus. //J. Neurosci.- 1982.-V.2.-P. 284-291.

363. Steward O., Schuman E. Protein synthesis at synaptic sites on dendrites. //Annu. Rev. Neurosci.- 2001.- V.24.- P. 299 325.

364. Steward O., Schuman E. Compartmentalized synthesis and degradation of proteins in neurons. //Neuron.- 2003.- V.40, N 2.- P. 347 359.

365. Steward O., Worley PF. A cellular mechanism for targeting newly synthesis mRNA to synaptic sites on dendrites. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 2001.- V.98, N13.-P. 7062-7068.

366. Stone T., O'Kane E., Nikbakht M., Ross F. Presynaptic P2 receptors? //J. Auton. Nerv. Syst.- 2000.- V.81, N 1-3.- P. 244 248.

367. Takei N., Kawamura M, Hara K, Yonezawa K, Nawa H. Brain-derived neurotrophic factor enhances neuronal translation by activating multiple initiation processes: comparison with the effect of insulin. //J. Biol. Chem.- 2001.- V.276, N46. P. 42818-42825.

368. Tang S., Reis G., Kang H., Gingras A.C., Sonenberg N„ Schuman E. A rapamicin-sensetiv signaling pathway contributes to long-term synaptic plasticity in hippocampyus. //Proc. Natl. Acad. Sci.- 2002.- V.99, N 1.- P. 467 472.

369. Temburni M., Jacob M. New functions for glia in the brain. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 2001.- V.98, N 7.- P. 3631 3635.

370. Thomas S., Fell DA. A control analysis exploration of the role of ATP utilization in glycolytic-flux control and glycolytic-metabolite-concentration regulation. //Eur. J. Biochem.- 1998.- V.258, N 3.- P. 956 967.

371. Thompson K., Otis K., Chen D., Zhao Y., ODell T., Martin K. Synapse to nucleus signaling during long-term synaptic plasticity: a role for the classical active nuclear import pathway. //Neuron.- 2004.- V.44, N 6.- P. 997 1009.

372. TiedgeH. RNA reigns in neurons. //Neuron.- 2005.- V.48.- P. 13-16.

373. Todd KJ., Robitaille R. Neuron-glia interactions at the neuromuscular synapse. //Novartis Found. Symp.- 2006.- V.276.- P. 222 229.

374. Tolbert L., Oland L., Tucker E., Gibson N., Higgins M., Lipscomb B. Bidirectional influences between neurons and glial cells in the developing olfactory system. //Prog. Neurobiol.- 2004.- V.73, N 2.- P. 73 105.

375. Triller A., Choquet D. Surface trafficking of receptors between synaptic and extra synaptic membranes: and yet they do move! //Trends Neurosci.- 2005.-V.28, N3.-P. 133- 139.

376. Trouslard J., Marsh S., Brown D. Calcium entry through nicotinic receptor channels and calcium channels in cultured rat superior cervical ganglion cells. //J. Physiol.- 1993.- V.468, N 1.- P. 53 71.

377. Ullian E., Sapperstein S., Christopherson K., Barres B. Control of synapse number by glia. //Science.- 2001.- V.291, N 5504.- P. 657 661.

378. Valero E., Varon R., Garcia-Carmona F. Kinetics of a self-amplifying substrate cycle: ADP-ATP cycling assay. //Biochem J.- 2000.-V.350, Pt 1.- P. 237-243.

379. Vega C., Martiel J-L., Drouhault D., Burckhart M-F., Coles J. Uptake of locally applied deoxyglucose, glucose and lactate by axons and Schwann cells of rat vagus nerve. //J. Phisiol.- 2003.- V.546, N 2.- P. 551 564.

380. Verkhratsky A. Physiology and pathophysiology of the calcium store in the endoplasmic reticulum of neurons. //Physiol Rev.- 2005.-V.85, N 1.- P. 201 279.

381. Verkhratsky A. Glial calcium signaling in physiology and pathophysiology. //Acta Pharmacol. Sin.- 2006.- V.27, N 7.- P. 773 780.

382. Verkhratsky A., Orkand R., Kettenmann H. Glial calcium: homeostasis and signaling function. //Physiol. Rev.- 1998.- V.78, N 1.- P. 99 141.

383. Volterra A., Magistretti P., Haydon P. The Tripartite Synapse: Glia in Synaptic Transmission. Oxford.: Oxford University Press.- 2002.

384. Vraa-Jensen J. On the correlation between the function and structure of nerve cells. //Acta psychiat. Scand.- 1956.- V.109.- P. 9 88.

385. Wakade A., Wakade A., Maholtra R. Restoration of catecholamine content of previously depleted adrenal medulla in vitro: importance of synthesis in maintaining the catecholamine stores. //J. Neurochem.- 1988,- V.51.- P. 820 829.

386. Walz W. Role of astrocytes in the clearance of excess extracellular potassium. //Neurochem. Int.- 2000.- V.36.- P. 291 300.

387. Wang N., Orr-Urtreger A., Chapman J., Rabinowitz R., Korczyn A. Deficiency of nicotinic acetylcholine receptor (34 subunit causes autonomic cardiac and intestinal dysfunction. //Mol. Pharmacol.- 2003.-V.63, N 3.- P. 574 580.

388. Wang N., Orr-Urtreger A., Korczyn A. The role of nicotinic acetylcholine receptor subunits in autonomic ganglia: lessons from knockout mice. //Prog. Neurobiol.- 2002.- V.68, N 5.- P. 341 360.

389. Wang H., Tiedge H. Translation control at the synapse. //Neuroscientist.-2004.- V. 10, N 5.- P. 456 466.

390. Wells D. RNA-binding proteins: a lesson in repression. //J. Neurosci.- 2006.-V.26,N 27.-P. 7135-7138.

391. West A., Griffith E., Greenberg M. Regulation of transcription factors by neuronal activity. //Nature Rev. Neurosci.- 2002.- V.3, N 12.- P. 921 931.

392. Westwall D., Todorov L., Mihalova- Todorova S. ATP as co-transmitter in sympathetic nerves and its inactivation by releasable enzymes. //J. Pharmacol. Exp. Ther.- 2002.-V.303, N 2.- P. 439 444.

393. Wilkins A., Chandran S., Compston A. A role for oligodendrocyte-derived IGF-1 in trophic support of cortical neurons. //Glia.- 2001.- V.36, N 1.- P.48 57.

394. Winkler BS., Arnold MJ., Brassell., Puro DG. Energy metabolism in human retinal Muller cells. //Invest. Ophthalmol. Vis. Sci.- 2000.-V.41, N 10.-P.3183-3190.

395. Wolf G. Application of microdisc electrophoresis. //Acta Histochem. Suppl.-1975.-V.15.- P. 79-82.

396. Wonnacott S., Sidhpura N., Balfour D. Nicotin: from molecular mechanisms to behavior. //Curr. Opin. Pharmacol.- 2005.- V.5, N 1.- P. 53 59.

397. YaoL., Wang G., Yang K., Wei C., WangX., WangS., Yao W., Huang K, Luo J., Wu C., Liu J., Zhog Z., Cheng H. Ca2+ sparks and Ca2+ glows in superior cervical ganglion neurons. //Acta Pharmacol. Sinica.- 2006.-V.27, N 7.- P. 848 852.

398. Yarowsky P., Crane A., Sokoloff L. Metabolic activation of specific postsynaptic elements in superior cervical ganglion by antidromic stimulation of external carotid nerve. //Brain Res.- 1985.-V.334, N 2.- P. 330 -334.

399. Yarowsky P., Ingvar D. Symposium summary. Neuronal activity and energy metabolism. //Fed. Proc.- 1981.-V.40, N 9.- P. 2353 2362.

400. Yarowsky P., Kadekaro M., Sokoloff L. Frequency-dependent activation of glucose utilization in the rat superior cervical ganglion by electrical stimulation of cervical sympathetic trunk. //Proc. Natl. Acad. Sci.- 1983.-V.80, N 13.-P. 4179-4183.

401. Yawo H., Chuhma N. Preferential inhibition of omega-conotoxin-sensetiv presynaptic Ca2+ channels by adenosine autoreceptors. //Nature.- 1993.- V.365.-P. 256-258.276

402. Yoshino M., Yamamoto C., Murakami K., Katsumata Y., Mori S. Stabilization of the adenilate energy charge in erythrocytes of rats and humans at high altitude hypoxia. //Comp. Biochem. Physiol. A.- 1992.-V.101, N 1.- P. 65 68.

403. Yu A.C.H., Drejer J., Herz L., Schousboe A. Pyruvate carboxylase activity in primary cultures of astrocytes and neurons. //J. Neurochem.- 1983.- V.41.-P. 1484-1487.

404. Zalfa F., Giorgi M., Primerano B., Moro A., Penta Di., Reis S., Oostra B., Bagni C. The fragile X syndrom protein FMRP associates with BC1 RNA and regulates the translation of specific mRNAs at synapses. //Cell.- 2003.- V.l 12.-P. 317-327.

405. Zalfa F., Lindholm D., Castren E., Hartikka J., Thoenen H. Regulation of brain -derived neurotrophic factor and nerve growth factor mRNA in primary cultures of hippocampal neurons and astrocytes. //J. Neurosci.- 1992.- V.12.-P. 4793-4799.

406. ZhongJ., Zhang T., Bloch L. Dendritic mRNAs encode diversified functionalities in hippocampal pyramidal neurons. //BMC Neuroscience.- 2006.- V. 7, N17.-P. 1-12.

407. Zhou Y, Deneris E., Zigmond R. Differential regulation of levels of nicotinic receptor subunit transcripts in adult sympathetic neurons after axotomy. //J. Neurobiol.- 1998.- V.34, N 2,- P. 164 178.