Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

МОРФОФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ КРАБА-СТРИГУНА ОПИЛИО (CHIONOECETES OPILIO. BRACHYURA: MAJIDAC) В ВОДАХ САХАЛИНА В СВЯЗИ С ПАТОГЕНЕТИЧЕСКИМ ВОЗДЕЙСТВИЕМ НА НЕГО НЕКОТОРЫХ ОРГАНИЗМОВ ЭПИБИОЗА

ВАК РФ 03.00.18, Гидробиология

Автореферат диссертации по теме "МОРФОФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ КРАБА-СТРИГУНА ОПИЛИО (CHIONOECETES OPILIO. BRACHYURA: MAJIDAC) В ВОДАХ САХАЛИНА В СВЯЗИ С ПАТОГЕНЕТИЧЕСКИМ ВОЗДЕЙСТВИЕМ НА НЕГО НЕКОТОРЫХ ОРГАНИЗМОВ ЭПИБИОЗА"

Л-ЗЗИЪ

На правах рукописи

СТЕКСОВА Валентина Васильевна

Морфофизиологическое состояние краба-стригуна олилио {С1й0поесе(еь орШо; ВгасЬунга: Ма^ёае) в водах Сахалина в связи с патогенетическим воздействием на него некоторых организмов эпибиоза

Специальность ОЗ.ООЛ 8- гидробиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Работа выполнена в лаборатории болезней рыб ФГУП «Сахалинский научно-исследовательский институт рыбного хозяйства и океанографии» (СахНИРО) Госкомрыболовства Росси и.

Научный руководитель: доктор биологических наук Головина Н. А.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук

Безносое В. Н,;

кандидат биологических наук Иванов Б. Г.

Ведущая организация: Камчатский научно-исследовательский институт рыбного хозяйства и океанографии (КамчатНИРО)

Защита состоится 19 декабря 2003 г. в 1 ? часов на заседании диссертационного совета К 212, 122.03 приМо^коси -- ■ "сударственной технологической академии по адресу: 117' г. М : V, г>;;<лниковская, д. 15.

С диссертацией лг < ■ ■■* Московской госу-

дарственной Тех НОЛ О Ч г' -

Авторес

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат биологических наук

Николаева И. Ф.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Морские биоресурсы составляют одно из основных богатств Сахалинского региона. Придонные биоценозы побережий острова включают в себя большое число ценных объектов промысла, одним из которых являются крабы-стригуны (p. Chionoecetes), Стригуны широко распространены в зоне шельфа и свала северной части Тихого океана и представлены в Сахалино-Ку рильском регионе пятью видами, из которых наибольшая промысловая нагрузка приходится на опил но.

Исследования, направленные на изучение распределения в регионе и биологин краба-стригуна опилио дальневосточных морей, были начаты в конце 1970-х годов (Родин, 1975; Родин, Слизкин, 1977;Слизкин, 1978,1982; Слизкин, Мясоедов, 1979; Федосеев, 1988; Федосеев, Слизкин, 1988;Первее-ва, 1996; Иванов, 1994,1997; и др.). В результате чего к настоящему времени выявлены основные особенности структуры популяций, определена их численность и изучены черты биологии дальневосточных стригунов. Однако характеристика популяции не может быть полной без анализа уровня мор-фофизиологических отклонений особей в онтогенезе, причин возникновения их патологических изменений и влияния на ее состояние в целом в настоящий период и прогнозирования ситуации в будущем. Морфологические изменения у стригунов часто проявляются в виде многочисленных травм, до 90% из которых связаны с отсутствием конечностей вследствие аутото-мин или хэндлинга при поимке н возвращении крабов в морскую среду (Селин, 1998). Было показано, что высокая травмированность оказывает влияние не только на эффективность промысла, но и на физиологическое состояние животного, а следовательно, и на эпизоотическую обстановку всей популяции (Juanes, Smith, 1995).

Особо следует отметить необходимость исследования взаимоотношений крабов с другими гидробионтами ареала, в том числе симбионтами. Обычные на внешних покровах обрастатели способны изменять морфологию краба, но до настоящего времени нет достаточного анализа эпибиоза крабов-стригунов Сахалинского региона. Морфофизиологнческие изменения часто вызываются условно-патогенными микроорганизмами, чья численность в морской воде и на внешних покровах крабов довольно значительна. Указанные изменения создают проблемы для добывающих предприятий. В связи с этим возникает необходимость изучения эпизоотической ситуации в популяциях стригу но в Сахалинского региона.

Цели и задачи исследования. Целью данной работы являлось выявление морфологических изменений и исследование физиологических нарушений в результате взаимоотношений с некоторыми организмами эпибиоза у краба-стригуна опилн^в-Сахалинском pcj ноне:

ЦНБ МСХА фонляаучнйй литеоатуры

до

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

К Определить морфологические и биологические характеристики краба-стригуна опилио в Сахалинском регионе.

2. Выявить основные морфофизиологические изменения у краба опилио под влиянием ряда биотических факторов.

3. Определить уровень травмированности и рассмотреть особенности регенерации конечности у краба опилио.

4. Изучить формирование эпибиотических сообществ на крабах опилио и выявить доминантные и субдомннантные компоненты эпибиоза.

5. Охарактеризовать взаимоотношения бактерий рода Ряеис1отопа5 и краба-стригуна опилио. Определить степень пораженности некрозом панциря крабов Японского и Охотского морей.

6. Оценить воздействие на популяцию крабов микроскопических грибов Тпскотат ¿таЛенз.

Научная новизна. На большом многолетнем фактическом материале оценены взаимоотношения различных групп гидробионтов с крабом опилио. Впервые определены уровень седвазии эпибионтами краба-стригуна опилио Сахалинского региона, процесс формирования эпибиоза и выявлены взаимоотношения краба с пиявками и их коконами. Впервые определено воздействие на физиологическое состояние краба-стригуна опилио Сахалина патогенных микроорганизмов, выявлен видовой состав бактерий и определен этиологический агент бактериальной хнтинолити-ческой болезни панциря. Впервые в российских водах у краба опилио зарегистрировано заболевание микозной природы - хитинолитическая грибковая болезнь. Рассмотрена по стадиям картина регенерации конечностей у стригуна опилио.

Практическое значение. На основе полученных данных проведена оценка уровня поврежденности конечностей и пораженности заболеваниями бактериальной и микозной природы крабов в популяциях Японского и Охотского морей, омывающих западное и восточное побережья Сахалина. Оценена эпизоотическая ситуация в этих районах. Крабодобывающим предприятиям рекомендованы некоторые профилактические меры оздоровления популяций крабов при их промысле и рекомендации по использованию больных крабов.

Апробация. Результаты исследований были доложены на: отчетной сессии ученого совета СахНИРО, Южно-Сахалинск, 2001 г.; отчетной сессии ученого совета ТИНРО-центра, Хабаровск, 2002 г.; 10-й Международной конференции ЕАРР, Дублин (Ирландия), 2001 г.; 26-й российско-японской конференции по исследованию прибрежных вод Дальнего Востока, Южно-Са-

халинск, 2003 г.; Памятных научных чтениях к 85-легию профессора В. А. Мус-селиус-Богоявленской, ВНИИПРХ, 2003 г.; расширенном коллоквиуме кафедры биоэкологии и ихтиологии МГТА, 2003 п

Публикации. Основные результаты исследований по теме диссертации отражены в семи публикациях.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 137 страницах машинописного текста, включая 39 таблиц, 53 рисунка, и содержит следующие разделы: введение, обзор литературы, результаты исследований (пять главсподглавами),выводыисписоклитераггуры,включающий 161 источник, из которых отечественных - 77 и иностранных - 84.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Глава 1. Некоторые аспекты биологии и состав эпибиоза крабов-стригунов (обзор литературы)

Стригуны относятся к семейству Majidae подотряда Brachyura. В дальневосточных морях краб-стригун опилио встречается повсеместно в зоне, где придонная температура воды колеблется от-1,8 до +7,0 градусов на глубинах от 18 до 600м (Слизкин, 1982). Он имеетбольшое промысловое значение, и суммарный вылов в морях Дальнего Востока России в 2000 г, достигал 15,4 тыс. т (Иванов, 2001).

Наиболее яркое морфологическое изменение крабов - травмирован-ность, которая большей частью проявляется в виде отсутствия одной или нескольких конечностей. Повреждение конечностей влияет на продолжительность линочных периодов, снижает эффективность нагула, успешность спаривания и увеличивает уязвимость животного при нападении хищников (Juanes, Smith, 1995). Отмечается, что у промысловых крабов постоянно утрачиваются конечности вследствие принятой техники их добычи, н на отдельных участках более половины особей травмированы (Иванов, 1994,1997, 2001; Селин, 1998;Вялова, 1999;Кочнев,2000;идр.).

Внешний вид крабов изменяют различные эпибионты, которые появляются у крабов вскоре после линьки (Виноградов, 1941; Клнтин, Лабай, 2002). Кроме многощетинковых червей p. Spirorbis, усоногих раков р. Baiamts, мшанок кл, Bryozoa, гидроидов и водорослей на карапаксе и конечностях крабов в большом количестве находятся пиявки сем, Piscicolinae - Notostomum cychstomum (Johansson, 1898) и Crangonobdellafabricii (Malm, 1863) и их коконы. Пиявки являются паразитами рыб, а крабов используют только для откладки коконов {Эпштейн, 1962,1968;Энштейн,Утевский, 1996;Sloanetal., 1984;Khan, Paul, 1995).

Взаимоотношение с некоторыми морскими микроорганизмами, обладающими хити политическим и свойствами,— Vibrio spp., Pseudomonas spp., Aeromonas spp., Photobacterium sp. и другими, часто приводит к физиологическим изменениям у крабов. Эти бактерии вызывают тяжелое заболевание у ракообразных - бактериальный некроз панциря (Malloy, 1978; Wardlaw, Unkles, 1978; Noga et al., 1996; Noga et al., 2000; и др.).

Заражение крабов хитинолитическим грибом кл. Ascomycetes Trichomarís invadens вызывает заболевание Black mat syndrome (BMS) {черно-матовый синдром). После заражения гифы гриба проникают через эк-зоскелегг, инфицируют многие внутренние органы, что приводитк летальному исходу (Robichaud, 1988; Bower et al., 1994).

Впериодс 1996 по 2001 год проводился сбор материала в Охотском и Японском морях в шельфовой зоне Сахалина {рис. I).

Pite. }. Район исследований краба-стригуна оттю в ¡996-2001 гг.

Глава 2. Материал и методика

1» 140 141 142 143 144 145 14« 147 14«

• —места отбора проб

Были использованы клинические, патологоан ато м и чес ки е, бактериологические и микологические методы исследований краба. Всего было исследовано 18730 экз. крабов (табл. 1.).

Таблица 1. Объем исследованных крабов-стригунов опилио в 1996-2001 гг. (в экз.)

Район исследований Метод исследований

биологический, из них/клинический патологоанатомический бактериологический посев, экз. крабов/ число проб

самцы самки всего самцы самки самцы сам к»

Охотское море 13256/ 11455 II47/ 1147 14403/ 12602 50 15 50/144 15/43

Японское море 3307/ 3307 1020/ 1020 4327/ 4327 21 - 11/30 -

ВСЕГО 16563/ 14762 2167/ 2167 18730/ 16929 61 15 61/174 15/43

Крабы вылавливались с помощью специальных ловушек японского типа, с использованием приманок, С одного порядка (собранные на одну хребтину 100 ловушек, интервал между которыми около 20 м) исследовалось не менее 50 экз. крабов. При этом проводили биологический анализ, включающий измерения наибольшей ширины карапакса, определение пола и стадии линочного цикла.

Мы выделяли пять стадий линочного цикла: первую, вторую, третью раннюю, третью позднюю и четвертую по состоянию панциря: его плотности, цвету, наличию на карапаксе обрастателей и другим признакам.

Клинический осмотр проводили параллельно с биоанализом. У каждой особи фиксировали все патологические изменения на внешних покровах и отмечали число недостающих конечностей.

Первичные бактериологические и микологические посевы проводились на питательные среды общего назначения, дальнейшие выделение и идентификация возбудителей осуществлялись на дифференцнально-днаг-ностическне средах, приготовленных как стандартным способом, так и на морской воде.

Глава 3. Биологическая характеристика краба-стригуна опилио Сахалинского региона

Средняя ширина карапакса самцов опилио Японского моря составляла 11,8±0,03 см при амплитуде 7,2-17 см (табл. 2). В Охотском море размеры карапаксов самцов были достоверно ниже: минимальный и максимальный размеры -5,6-15,4 при среднем размере 10,8±0,01 см. Средний размер карапакса самок также был достоверно выше в Японском море, чем в Охотском, — 8,4±0,02 см (6,4-10,5 см)и7,2±0,03 см (5,5-9,6 см) соответствен но.

Таблица 2. Морфологические характеристики крабов-стригунов Сахалинского региона (ширина карапакса, см)

Самцы Самки

средняя тіп-тах средняя тігмтх

Охотское море 10,8±0,01 5,6-15,4 7,2±0,03 5,5-9,6

Японское море 11,8±0,03 7,2-17 8,4±0,02 6,4-10,5

1я по Стьюденту 31,25* - 33,33* -

* Различия достоверны по 0,1%-наму уровню значимости (р<0,001).

В период исследования в Охотском море на второй стадии линочного цикла было 30% самцов, на третьей ранней - 64,3% и на третьей поздней -6,9%. Исследования в Японском море показали, что на третьей ранней стадии линочного цикла также находилась большая часть всех самцов—88,5%, 6,5% было натретьей поздней и только 4,8% на второй (табл. 3).

Таблица 3, Биологические характеристики сащов краба-стригуна опилио Сахалинского региона в сентябре-декабре 1997-2001 гг.

РаПок исследований Стадии линочного цикла

Параметры вторая третья ранняя третья ПОЗДНЯЯ четвертая

Охотское Число крабов, экз. 2706 6055 651 5

море Доля, % 28,7 64,3 6,9 0,04

Японское Число крабов, экз. 159 2927 216 5

море Доля, % 4,8 88,5 6,5 0,15

Почти все исследованные самки были половозрелыми и несли под абдоменом икру оранжевого цвета.

Глава 4. Травм ированность краба-стригуна опилио в Японском и Охотском морях

Крабам свойственна аутотомия, когда при экстремальных ситуациях, в сражениях ссоперниками или при механических повреждениях, у животных надламывается конечность в строго определенном сочленении. По нашим наблюдениям, одним из самых распространенных видов травм являются повреждения и утрата ходильных или клешненосных конечностей. Вуловах при ловушечном лове встречались особи без четырех-шести конечностей. Доля травмированных крабов опилио на разных участках варьировала от 16 до 56%. В Охотском море в среднем у 35,2% от всех исследованных самцов опилио наблюдалось отсутствие одной, двух и более конечностей, а в Японском таких самцов было почти в два раза меньше (табл. 4). Коэффициенты экстенсивности и интенсивности поврежденности (по Иванову), характеризующие степень травмированности популяции в целом, были самыми высокими у самцов Охотского моря - 0,36 и 0,047 соответственно.

Таблица 4. Уровень тра&иированности краба-стригуна опито в 1996-200! гг.

Показатель Охотское море Японское море

самцы самки самцы самки

Доля крабов, лишенных конечностей, % Из них без клешненосных конечностей, % 35,2±0,4| 29,9± 1,33 18,1 ±0,67 17,8±1,2

15,1 ±0,56 12,5±1,78 14,1 ±1,47 14,3±2,59

Коэффициент экстенсивности 0,36 0,3 0,18 0,18

Коэффициент интенсивности 0,047 0,039 0,022 0,021

Известно, что крабы имеют способность регенерировать утраченные конечности. Однако, наблюдая за частотой встречаемости вновь отросших конечностей, было выявлено, что для опилио Сахалинского региона характерен низкий процент регенерации. Отросшие конечности разной стадии были обнаружены у 0,1% самцов и 0,6% самок. Такая слабая регенерация объясняется терминальной линькой у стригунов, после которой крабы не линяют и, следовательно, не растут.

Было замечено, что при аутотомии у краба остается три первых сегмента перейоподов - соха (ляжка) и слитые вместе basis (основной членик) и ischium (седалищный членик).

По нашим наблюдениям, визуальные признаки процесса регенерации можно разделить на пять стадий. Первое время после аутотомии место

слома имеет нежную покровную пленку белой окраски. Через некоторое время на этой пленке начинает проявляться темный пигмент, и скоро вся площадь слома покрывается черной пленкой, которая несет защитную функцию. Эта черная пленка предохраняет от проникновения патогенных микроорганизмов в нежные ткани краба. Пленка представляет собой образование довольно твердой консистенции и плотно сидит на месте слома. Под пигментной пленкой в результате регенеративных процессов на месте слома образуется «почка» бело-желтой окраски. По мере формирования «почки» пигментная корочка исчезает, и скоро становится виден только бело-желтоватый наплыв, из которого в дальнейшем в отдельных случаях формируется новая конечность.

Глава 5. Характеристика эпибноза краба-стригуна опилио Сахалинского региона

Обрастания на карапаксе крабов снижают их товарные качества, в связи с чем требуются дополнительные затраты для удаления эпибионтов. Внешние покровы крабов опилио часто служат субстратом для многощетинко-вых червей р, ЗрггогЫз, усоногих раков р. Ва1апю, колоний мшанок кл. Вгуоюа, гидроидов и водорослей. Эти организмы, после оседания на крабов, всю свою жизнь проводят на нем и составляют стабильную часть его эпибиоза. Крометого, на опилио встречаются эгшбионты, которые только некоторое время своей жизни проводятна экзоскелетах крабов. Кгруппе временных эпибионтов относятся пиявки и их коконы,

У самцов и самок доминантным компонентом стабильного эпибиоза были многощетинковые черви р. ЗрггогЫя. Эти организмы составляли 73% от общего числа сочленов стабильного эпибиоза самцов и 81,4%-самок. Роль субдоминантного компонента играли колонии мшанок, доля которых у самцов составляла 22%, а у самок — 18,3%. Усоногие рачки р. Ва1апж составляли около 5% численности сочленов стабильного эпибиоза самцов и 0,3% самок. Гидроиды и водоросли встречались в незначительном количестве.

Экстенсивные и интенсивные показатели седвазии стабильными эпи-бионтами возрастали по мере старения панциря (рис. 3). Если на второй стадии линочного цикла экстенсивность седвазии самцов была 30%, то к третьей поздней доля крабов со стабильными эпибионтами возросла до 88,4% (рис. 2).

88,4

Вторая Третья ранняя Третья поздняя

Стадии межлнночного цикла

ШШ Экстенсивность ♦ Интенсивность

Рис. 2. Седвазия стабильными зпибионтами самцов крабов-стригунов опилио па разных стадиях линочного цикла

Временные сочлены -пиявки сем. РІ5СІС0Ііпае— СгагщопоЬ(ІеЯа}аЬгісіі и іїоішотит сусіоііотит и их коконы первыми появлялись на чистых после линьки покровах краба опилио из всех обрастателей. Взрослые пиявки, обычно поселяющиеся на нижней части конечностей, были обнаружены у 72,3±1,0% самцов и 1,5±0,56% самок опилио (табл. 5). Коконы этих пиявок отмечались у 82,1 ±0,86% самцов и 0,42±0,30% самок. Число коконов достигало на одном крабе450 экз.

Таблица 5. Седвазия крабов-стригунов опилио Охотского моря пиявками и коконами Сгап§опоЬ&Иа /аЬп'сИ в сентябре-ноябре 2000-2001 гг.

Параметры седвазн и Самцы (1992 эю.) Самки (471 экз.)

2 я Экстенсивность, % 72,Э±1,0 1,5±0,56

3 А О * Интенсивность, экз ./особь 6,0±0,4 1

со Амплитуда интенсивности, экз. 1-45 1

3 Экстенсивность, % 82,1±0,86 0,42*0,30

X 1 Интенсивность, экз./особь 85±9,4 I

Амплитуда интенсивности, экз. 1-450 1

Разница в степени седвазии пиявками и коконами у самцов и самок объясняется более ранней терминальной линькой самок. В ловушечных уловах из-за выборочной способности ячеи ловушек попадаются обычно половозрелые самки с довольно старым панцирем, который пиявки не используют для откладки коконов.

Более крупные пиявки ¡Чоюьютит сус1оз(отит недолгое время находятся на крабах, откладывая темные коконы размером до 7 мм на карапаксе и реже на абдомене. Пиявки обнаруживались у 4,5 и 5,2% самцов крабов Японского и Охотского морей соответственно (табл. 6).

Таблица 6, Седвазия краба-стригуна опилио пиявками и коконалш ^ю$1отит сус1оз1отит

Параметры Японское море, 1999 г., октябрь-декабрь Охотское море, 2000 г., сентябрь-ноябрь

самцы (3307 экз.) самки (1020 экз.) самцы (1792 зкз.) самки (471 экз.)

Экстенсивность, % 4,5±0,36 0 5,2±0,52 0

•А ~ г- £ о а а Е £ с Интенсивность, экзУособь 1,3±0,08 0 1,2±0,0б 0

Амплитуда интенсивности,эю. 1-3 0 1-5 0

Экстенсивность, % 65,1±0,83 11,5±!,0 37,'7± 1,14 0,6±0,36

з і Интенсивность, экз./особь 17,8±0,8 7,6±0,9 14,1 ±0,4 5,2±0,3

§ Амплитуда интенсивности, экз. 1-150 1-40 1-70 3-22

Обычно на самцах можно встретить одну пиявку, реже-три-пять. На самках опилио взрослые пиявки не встречались. Коконы этих пиявок значительно чаще встречались на крабах Японского моря.

Глава 6. Взаимоотношения крабов-стригунов с условно патогенными бактериями (бактериальный некроз)

Микроорганизмы, и в частности бактерии, играют важную роль в функционировании морских биоценозов. В значительном количестве бактерии находятся в донных отложениях, в воде, окружающей других гидробионтов, и на их теле, выступая уже в роли эпибионтов. Из всей микрофлоры особый

интерес представляют условно-патогенные бактерии, которые в определенных условиях способны вызывать физиологические нарушения у хозяина. Среди морских условно-патогенных бактерий для крабов представляют реальную опасность те из них, которые обладают хитин олигическими свойствами.

Как правило, повреждения целостности хитиновых покровов являются одной из причин возникновения болезней у краба, и в частности некроза панциря. Микрофлора воды Сахалинского региона представлена условно-патогенными бактериями родов Pseudomonas, Aeromonas, Micrococcus и другими. Открывающиеся при травмах панциря «ворота» инфекции способствуют проникновению возбудителей некроза хитиновых покровов.

Бактериологический анализ больных (с явными некротическими изъязвлениями на панцире) и здоровых (без видимых повреждений хитина панциря) крабов выявил микрофлору, которая, с учетом культурально-морфоло-гических и биохимических свойств бактерий, была отнесена нами к десяти родам, приведенным в таблице 7.

Таблица 7. Частота встречаемости бактерий у крабов-стригунов опилио Охотского моря в ¡996-1997 гг. (в процентах от общего числа выделенных культур)

Ми кроорган измы Всего выделено От больных От здоровых

р. Pseudomonas 46,9 36,6 10,2

р. Moraxella 9,4 6,2 3,1

p. Acinetobacter 5,6 3,6 2,1

p. Flavobacterium 6,2 4,1 2,1

p. Aeromonas 14,4 9,3 5,2

p. Bacillus 6,7 4,1 2,6

p. Proteus 6,2 6,2 0

p. Micrococcus 1 1 0

р. Enterobacter 1,5 1 0,5

p. Ples'tomonas 2,1 2,1 0

В целом качественный состав микрофлоры больных крабов был более разнообразным, чем здоровых. Так, здоровые особи опилио не были инфицированы бактериями родов Proteus, Micrococcus и Ptesiomonas, и число штаммов бактерий, обнаруженных у здоровых особей, было заметно ниже, чем у больных. При этом у больных особей доминировали условно-патогенные грамнегативные неферментирующие бактерии р. Pseudomonas, Эти бактерии вызывали септический процесс. Они практически в монокультуре выделялись из пораженных тканей и внутренностей, в частности из мышеч-

ной ткани и гепатопанкреаса. Наибольшее видовое разнообразие наблюдалось в посевах кишечника и карапакса (табл. 8).

Таблица 8. Частота выделения бактерий от тканей крабов, пораженных некрозам (экз.)

Ми кроор гак изм ы ё § 5 Я в Л х 0> 3 X г І Итого

а й А 2 41 С э й і £ экз. %

р. Pseudomonas 50 29 31 24 - 50 100

р. Moraxella 17 - - 12 і 20 40

р. Acinetobacter 12 - - 14 - 18 36

р. Flavokacierhim 9 - 7 4 - 13 26

р. Aeromortas 11 3 8 5 - 18 36

р. Bacillus 6 - - - - 6 12

р. Proteus - 14 - 9 - 15 30

р, Micrococcus 13 - - 17 - 19 38

р. Enterobacter - - - 8 - 8 16

р. Plesiomonas 17 3 - 4 - 21 42

Из материала мышечной ткани было высеяно четыре вида бактерий и три - из материала печени. При посевах гонад роста бактерий обычно не отмечалось, и только от одного краба были получены штаммы микроорганизмов р. МогахеИа. Карапаксы всех больных особей были инфицированы псе вдом о налами. При повреждении панцирных покровов инфицированной оказалась и мышечная ткань в панцирных трубках, в то время как у особей с неповрежденными покровами она оставалась стерильной. От здоровых крабов микроорганизмы высевались только из карапакса и кишечника, и, как правило, в поликультуре.

Признаки некроза панциря хорошо заметны при внешнем осмотре. Болезнь проявлялась в виде пятен черного, иногда ржаво-черного цвета на теле животного. Размер поражений варьировал от точечного до нескольких квадратных сантиметров. Хитин в пораженных участках истончался, становился хрупким, и в тяжелых случаях заболевания наблюдались некротические изъязвления, ведущие к прободению покровов и обнажению тканей мышц. Пятна локализовались на карапаксе, абдомене, конечностях и даже глазах. Некроз зрительных органов приводил к полному разрушению одного, а иногда и обоих глаз. Чаще всего некротические изъязвления отмечались на ходильных конечностях и клешнях (рис. 3).

Рис. 3. Встречаемость некротических участков на теле краба-стригуна опилио (в процентах от всех выявленных случаев)

Патологоанатом и ческие исследования крабов опилио, имеющих значительный некроз панциря, показали изменения тканей и органов. В ряде случаев, когда разлагался хитин экзоскелета, мышечная ткань обнажалась и была окрашена в серый, иногда черный цвет. У 89,5% пораженных стригунов наблюдалось изменение цвета гепашпанкреаса от оливкового (в норме) до коричневого, бурого и даже черного. Черный цвет наблюдался у 46,7% пораженных самок и у 19,7% самцов. На жабрах было замечено почернение эпителия лепестков, что является одним из симптомов общего поражения организма крабов бактериальным некрозом (Young et al„ 1975; Vogan, 2001), Было выявлено, что болезнь развивалась у крабов по мере старения панциря, что проиллюстрировано на гистограмме (рис. 4).

Стадии межлиночного цикла

Рис. 4. Пораженноеть некрозом панциря самцов крабов-стригунов опилио разных стадий ли ночного цикла е 1996-2001 гг.

В Охотском море крабы опилио, больные некрозом панциря, встречались значительно чаще, чем в Японском. При этом самки были поражены этим заболеванием сильнее, чем самцы (табл. 9).

Таблица 9. Поражеппоапь крабов-стригунов опилио некрозом панциря в 1996-200! гг.

Район исследований Доля больных, % ta по Стьюденту

самцы самки

Охотское море 29,1 ±0,42 59,0*1,45 19,81*

Японское море 10,8±0,54 45,4±1,56 20,96*

* Различия достоверны по 0, ¡%-но.иу уровню значимости (р<0,001)

Следует отметить, что некоторыми авторами средний уровень зараженности крабов некрозом панциря используется как индикатор популяций (Young, Pearse, 1975; Sawyer et al., 19S3).

Глава 7. Взаимоотношения крабов Сахалинского региона с микроскопическими грибами (хитннолитический микоз)

Паразитирование на крабах микроскопических грибов Trichomaris invadens (кл. Ascomycetes) вызывает хитиполитическую грибковую болезнь, которая была отмечена у опилио в Охотском море. Внешние признаки болезни начинались с проявления небольших дискретных черных точек на покровах животного, которые, расширяясь и соединяясь, в виде черной массы покрывали всю поверхность карапакса или конечностей. По нашим наблюдениям локализация поражений была различной: встречались животные с нарастаниями на карапаксе при совершенно чистых конечностях и абдомене, либо поражены были только одна или несколько конечностей. Нередко отмечались поражения глаз. Пораженные панцирные покровы с внутренней стороны становились тоньше, нарушалась их структура. Экстенсивность заражения микозом самцов опилио варьировала по районам от 0,3 до 1,0%, а доля пораженных самок на юге Охотского моря в 2000 году достигала 8,5%. Средняя экстенсивность заражения самцов составила 0,6%, а самок-3,7%.

Поскольку больные крабы выпускаются назад в море, а это ведет к накоплению инфекционного начала и изменению эпизоотического фона, то добывающим предприятиям рекомендовано утилизировать больных крабов на судне.

выводы

Таким образом, по результатам наших исследований можно сделать следующие выводы,

1, В Сахалинском регионе размеры взрослых особей краба связаны с местом обитания. Средняя ширина карапакса самцов опилио Японского моря составила 11,8±0,03 см при амплитуде 7,2-17 см. В Охотском море самцы были заметно меньше-10,8±0,01 см, (5,6-15,4 см).

2, У краба-стригуна опилио на различных стадиях его развития были выявлены некоторые морфологические изменения, затрагивающие строение и структуру экзоскелета. Наиболее значимыми для популяции Охотского моря были поражения, связанные с аутотомией и заболеваемостью бактериальной и микозной природы. В Японском море эпизоотическое состояние популяции опилио было более благополучное: микоз-ное поражение панциря не обнаружено, доля самцов с бактериальными поражениями на панцире и уровень травмирован но сти были значительно ниже, чем в Охотском.

3, Наблюдались различия в доле потери конечностей между самцами и самками в биоценозе Японского и Охотского морей. Регенерация конечностей у опилио встречается редко, и при этом у самок в пять-шесть раз чаще, чем у самцов.

4, Эпибиоз крабов-стригунов опилио состоит из стабильных и временных сочленов. Доминантным компонентом стабильного эпибиоза являются многощетинковые черви р. Spirorbis. Субдоминантным компонентом в эпи-биозе опилио являлись колонии мшанок. Экстенсивность седвазии стабильными эпибионтами возрастает по мере старения панциря.

К временным компонентам относятся пиявки-Notostomum cyclastomum и Crangonobdeila fabricH и их коконы. Максимальный уровень седвазии пиявками и коконами в основном приходится на третью раннюю стадию линочного цикла самцов краба. На самках эти организмы встречаются значительно реже, чем на самцах,

5, Широкий спектр микроорганизмов способен вызывать у краба некроз панциря. В Сахалинском регионе основным этиологическим агентом заболевания являются грамнегативные неферментирующие бактерии р. Pseudomonas. При некрозе панциря были обнаружены патологические изменения органов н тканей: некроз жаберных лепестков, изменение структуры и цвета гепатопанкреаса и мышечной ткани.

Клиническое проявление болезни усугубляется по мере старения панциря: доля больных крабов, находящихся на третьей поздней стадии линочного цикла, была максимальной.

Пораженных некрозом панциря крабов опилио в Японском море зарегистрировано почти в три раза меньше, чем в Охотском. При этом заболевание чаще встречалась у самок.

6. У крабов-стригунов из Охотского моря сахалинского побережья описан хитинолитический микоз, вызванный микроскопическим грибом Trichomaris invadens. Средняя экстенсивность поражения этим заболеванием самцов опилио составила 0,6%, а самок - 3,7%.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Стексова, В. В, Травматизм и процессы регенерации конечностей краба-стригуна опилио Chionoecetes opilio i В. В. Стексова // Проблемы охраны и рац. использ, биоресурсов Камчатки : Тез. докл. Второй науч,-пракг, конф. - П-Камчатский, 2000. - С. 95-96.

2. Стексова, В, В. Ми ко зное поражение краба-стригуна опилио Chionoecetes opilio / В. В. Стексова It Проблемы охраны и рац. использ. биоресурсов Камчатки : Тез. докл. Второй науч.-практ. конф. - П-Камчатский, 2000.-С. 97-98.

3. Stexova, V. V. Pathologies of snow crab, Chionoecetes opilio (Fabricius, 1788) in the Northern Pacific Ocean along the coast of Sakhalin Island (Russia) / V. V. Stexova, G. P. Vyalova andZ. K. Shkhurina// Diseases of Fish and Shellfish: Abstract Book. 10th Internationa! Conference of the EAFP. Trinity College Dublin (9th-14th September). - Ireland, 2001. - P-003.

4. Стексова, В, В. Эпизоотические предпосылки марикультуры крабов Сахалша/В. В. Стексова//Прибреж. рыболовство-XXI век: Тез. докл. меж-дунар. науч.-практ. конф. (19-21 сент. 2001 г.).-Ю-Сах„ 2001.-С. 110-111.

5. Стексова, В. В, Структура и формирование эпибиоза краба-стригуна опилио восточного побережья Сахалина / В. В. Стексова// Рыбохоз. исслед, в Сах.-Курил, регионе и сопред. акваториях: Сб. науч. тр. СахНИРО,- Ю-Сах.: СахНИРО, 2003. - Т, 5,-(В печати).

6. Стексова, В, В, Микрофлора крабов-стригунов Chionoecetes орШо (Decapoda, Majidae) Сахалина при некрозе панциря / В. В. Стексова // Памятные науч. чтения к 85-летию проф. В, А. Мусс ел и ус-Богоявленской: Материалы докл. (1-2 окт. 2003 г). -М.: ВНИИПРХ, 2003. -(В печати).

7. Stexova, V. V. Diseases and pathologies of Sakhalin commercial crabs / V. V. Stexova //Sci. Rep. Hokkaido Fish. Exp. Stn. - 2003. - (In print).

Подписано в печать 17.11.2003. Объем 1,25 псч. п. Тираж !(Ю эк*. Закэ*) № 34

СахНИРО, 693023, г, Южно-Сахалинск, ул. Комсомольская, 196