Множественность управляемых трансмиттерами процессов в период делений дробления

Шмуклер, Юрий Борисович

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Множественность управляемых трансмиттерами процессов в период делений дробления
ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Множественность управляемых трансмиттерами процессов в период делений дробления"

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК Институт биологии развития им.Н.К.КОЛЫЦОВА

На правах рукописи

РГБ ОД

ШМУКЛЕР . _

1 7 ДПР 7ППП

ЮРИИ БОРИСОВИЧ '

УДК 591.3

Множественность управляемых трансмиттерами процессов в период делений дробления

03.00.13 - физиология животных и человека

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

Москва, 2000

Работа выполнена в Институте биологии развития им.Н.К.Кольцова РАН (директор Института - академик РАН Н.Г.Хрущов).

Официальные оппоненты:

Доктор биологических наук, профессор Б.Н.Манухин Доктор биологических наук, профессор Л.В.Белоусов Доктор биологических наук С.А.Титов

Ведущее учреждение: Институт биофизики клетки РАН

Защита состоится < %

2(900 г.

в /[час, на заседании Диссертационного совета Д 002.85.01 при Институте биологии развития им. Н.К.Кольцова РАН (117808, Москва, ул. Вавилова, д. 26).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института биологии развития им.Н.К.Кольцова РАН.

Автореферат разослан «2»

Ученый секретарь специализированного совета,

кандидат биологических наук Е.В.Волина

Е99-/ €

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Участие медиаторов нервной системы -ацетилхолина (АХ), норадреналина и серотонина (5-НТ), далее именуемых трансмиттерами, в раннем зародышевом развитии впервые продемонстрировано более 30 лет назад (Бузников, 1967). За последующий период накоплен значительный материал о функциональной активности этих веществ на различных этапах онтогенеза - от процессов гаметогенеза до пролиферации клеток взрослого организма у самых различных видов (Бузников, 1987; Бузников с соавт., 1996; Gustafson, Toneby, 1970; Lauder, 1993; Weiss et al., 1998). Уже сама по себе такая универсальность трансмиттеров представляет фундаментальный интерес. Впервые участие трансмиттеров в процессах эмбриогенеза было показано на делениях дробления, которые представляются наиболее близкими к первичным механизмам клеточного деления. Управление такими принципиально важными процессами, в более или менее видоизмененной форме присутствующими на всех этапах фило- и онтогенеза, активно исследуется всей современной физиологией. В дефинитивных клетках трансмиттеры являются первичными мессенджерами, запускающими внутриклеточные сигнальные каскады. На таких объектах взаимодействие трансмиттеров с вторичными мессенджерами (циклические нуклеотиды, фосфоинозитиды, ионы кальция) исследовано подробнейшим образом. Доказательство такого взаимодействия в эмбриональных клетках представляется принципиальным для понимания управления ранним зародышевым развитием.

Не менее фундаментальным является процесс ранних межклеточных взаимодействий, определяющих развитие целостного организма. На поздних этапах онтогенеза трансмиттеры выполняют специализированную роль межклеточного посредника. Логично предположить, что в той или иной форме этот механизм складывается на более ранних этапах развития и можно проследить его процесс его формирования.

Цель и задача исследования.

Целью данной работы является изучение участия трансмиттеров в регуляции процессов периода делений дробления и исследование механизмов их функционирования у зародышей различных видов. В частности, проверялась возможность участия трансмиттеров в запуске делений дробления, формировании борозды дробления и межбластомерных взаимодействиях. Изучали взаимосвязь трансмиттеров с системами вторичных мессенджеров, таких как циклические нуклеотиды, ионы кальция и фосфоинозитиды. В задачу работы входило формирование на основе экспериментальных данных общей концепции формирования и функционирования трансмиттерных механизмов в фило- и онтогенезе. Научная новизна и практическая значимость работы.

Впервые прямыми экспериментами продемонстрирована внутриклеточная локализация трансмиттерных рецепторов, участвующих в запуске делений, а также присутствие в ранних зародышах трансмиттерных рецепторов, локализованных в поверхностной мембране. Впервые продемонстрирована связь между трансмиттерами и вторичными мессенджерами в управлении различными процессами раннего эмбриогенеза. Принципиальным результатом является также демонстрация участия трансмиттеров в межбластомерной сигнализации в период делений дробления. В работе впервые продемонстрировано последовательное или одновременное участие трансмиттеров в целом ряде процессов периода делений дробления, включая запуск делений, развитие борозды дробления, адгезия бластомеров после деления и обмен межбластомерной информацией, т.е. непрерывный трансмиттерный контроль раннего развития. Полученные результаты могут быть полезны не только для понимания фундаментальных процессов развития, но и должны учитываться при разработке проблем терапии раннего развития в плане возможного тератогенного и эмбриотоксического эффектов используемых препаратов.

пробация работы

11 Всесоюзная конференция, поев. 75-лет. акад. Арм ССР, чл.-корр. АН ССР Х.С.Коштоянца "Физиология и биохимия медиаторных процессов ", 976, Москва

Конференция молодых ученых, поев. 60-летию Великого Октября и 10-зтию ИБР РАН СССР, 1977

VII конференция по эволюционной физиологии, 1978, Ленинград

Всесоюзный симпозиум "Регуляторные системы обмена веществ в шнем эмбриогенезе ", 1979, Львов

II конференция молодых ученых Института экспериментальной гологии АН Арм. ССР, 1980, Ереван

III Всесоюзная конференция "Физиология и биохимия медиаторных эоцессов", 1980, Москва

VI Всесоюзный съезд эмбриологов, 1981, Москва

Конференция молодых ученых ИБР РАН СССР, 1982

Конференция молодых ученых ИБР РАН СССР, 1984

IV Всесоюзная конференция "Физиология и биохимия медиаторных эоцессов", 1985, Москва

Советско-финский симпозиум по биологии развития. 1988. Ташкент

V Всесоюзная конференция "Физиология и биохимия медиаторных эоцессов", 1990, Москва

Congress of the European Developmental Biology Organisation, 1995, julouse, France

XIV International Symposium on Medical Chemistry, 1996, Maastricht, etherlands

Международная Конференция «Рецепция и внутриклеточная [гнализация». 1998. Пущино.

XVII Съезд физиологов России, 1998.Ростов-на-Дону

Структура и объем работы.

Диссертация изложена на 431 странице машинописного текста t состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной частр (материалы и методы исследования, результаты экспериментов), обсуждения выводов и списка цитированной литературы. Библиография включает 88* источников. Работа включает 110 рисунков и 32 таблицы.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ Материал и методы исследования.

Объекты исследования

В работе использовались ранние зародыши морских ежей Scaphechinut mirabilis, Echinarachnins parma, Echinocardium cordatum, Echinus esculentus Strongylocentrotus drôbachiensis, S.intermedius, S.nudus, Paracentrotus lividus Lytechinus pictus и шпорцевой лягушки Xenopus laevis. Фармакологические опыты

Фармакологические опыты на зародышах морских ежей проводилис! по стандартной схеме (Бузников, 1967) либо вещества вносились в момен' формирования борозды дробления. В клетки зародышей X. laevis веществ; вводились на стадиях 2-8 бластомеров с помощью микроинъектора. Е контрольных опытах в клетки инъецировали раствор, соответствующий ш ионному составу внутриклеточной среде зародышей X.laevis (Gillespie, 1982), Метод электропробоя мембраны (Черномордик, 1985) модифицирова! применительно к яйцеклеткам морских ежей S. intermedius. Пикова) напряженность электрического поля составляла 1 кВ/см. Количеств« импульсов для эффективного пробоя мембраны подбирали в опытах < введением в среду флуоресцеина. Связывание меченных лигандов

На зародышах X.laevis связывание меченных лигандов трансмиттерны; рецепторов проводили на тотальном гомогенате, микросомальной i митохондриальной фракциях. На зародышах морских ежей исследовал! возможность связывания мембранными рецепторами интактных зародышей

поэтому максимально ограничивали возможность проникновения лигандов внутрь клетки за счет краткого времени экспозиции лиганда и температуры среды инкубации 0°С.

Определение активности аденилатциклазы у ранних зародышей Xenopus laevis Активности аденилатциклазы (АЦ) определяли в микросомальной фракции на стадиях 2-8 бластомеров с помощью [а-32Р] АТФ по методу Уайта (White, 1974). Электрофизиологические методы

Измерение мембранного потенциала клеток ранних зародышей морских ежей проводили с использованием стандартной техники с добавлением в микроэлектрод 1 мМ ЭГТА для предупреждения образования преципитатов. Для фиксации потенциала на мембране делящихся клеток ранних зародышей шпорцевой лягушки использовалась стандартная трехэлектродная схема. Putch-clump на зародышах морского ежа P. lividus проводили с использованием прибора L/M-EPC7. Измерения внутриклеточного уровня ионов кальция

В экспериментах по определению уровня внутриклеточного Са2+ использовались зонды Fura-2 и Fura-2 dextran. Процедура измерения была стандартной (Swann, Whitaker, 1986). Изменения уровня Са2+(|) оценивали по площади пика (мкМ Са2+ х мин), амплитуде (мкМ Ca24) и латентному периоду. Calcium Green-1 dextran использовали в опытах по конфокальной микроскопии. Изменения [Ca2+]j контролировались и анализировались с помощью аналитической программы Leica CLSM.

Методы изоляции бластомеров морских ежей

Основным методом была изоляция с помощью стеклянной иглы. Датировку изоляции проводили по стадии адгезии бластомеров после деления. На зародышах S. nudus, Р. lividus и S. intermedius для изоляции требовалась также трехкратная отмывка суспензии зародышей Ca2+FASW. Контролировали момент формирования микромеров и форма бластул.

Результаты экспериментов

Внутриклеточные трансмиттерные рецепторы у ранних зародышей

Микроиыъекция |3-адренолитика пропранолола в клетки зародышей X.laevis вызвала торможение развития в 58,7 ± 6,5% по сравнению с контролем (рис. I). Иногда эффект микроинъекции проявлялся лишь в следующем клеточном цикле, т.е. трансмиттеры, вероятно, участвуют в каком-то раннем этапе процесса клеточного деления. Внесение пропранолола в концентрациях до 1 мМ в среду инкубации на деления дробления не влияло.

Рис. 1. Блокада деления в 2-х клеточном зародыше

}:;'''

X. 1аетз, инъецированном пропранололом (бб мкМ).

_ 5 Деление блокировано в инъецированном бластомере; С " I интактный бластомер прошел 2-е деление дробления. \ Стрелкой показано место инъекции.

гмк.. :.»,ts Адреналин per se(l мМ) в 22,2 ± 5,2% случаев

приводил к опережающему деление в инъецированном бластомере по сравнению с интактными, а совместно с пропранололом практически

полностью нормализовал развитие (рис. 2).

----------------

ЕЗ контроль Опропранолол 50 мкМ

О пропранолол 50

мкМ+триптамин 2,8 мМ CD пропранолол 50

мкМ+адреналин 1 мМ □ пропранолол 50 мкМ + серотонин 1.5 мМ

Рис. 2. Специфичность эффекта микроинъекции пропранолола на деления дробления X. 1аеи1в

По оси ординат - % клеток, затормозивших развитие; штриховые обозначения - на рисунке.

В то же время введение совместно с пропранололом триптамина или 5-НТ показало отсутствие защитного действия этих веществ (рис. 2), что дает основание полагать достаточно высокую специфичность внутриклеточных рецептивных структур.

Микроинъекция м-холинолитика атропина (50 мкМ) приводила к торможению делений дробления в 56,2 ± 12,0% случаев. Ацетилхолин существенно уменьшал этот эффект при одновременной инъекции с атропином. Таким образом, прямыми экспериментами показана активность одновременно двух трансмиттеров и их антагонистов, и соответственно, внутриклеточная локализация рецептивных структур у ранних зародышей амфибий.

На тотальном гомогенате ранних зародышей X. 1ае\''^ обнаружено специфическое связывание 3Н-дигидроальпренолола (3Н-ДГА) с константой диссоциации Ко = 3-10"9 М. В микросомальной фракции также присутствует высокоаффинный пул связывания (Ко для 3Н-ДГА -3 -10"9 М, а для 1251-цианопиндолола- 1,5-10"9 М) (рис. 3).

Рис. 3. Кривая Скэтчарда

для связывания 3Н~ДГА

микросомальной фракцией

зародышей Х.1аеу1з. По оси абсцисс - связывание меченного лиганда (расп./мин); по оси ординат -отношение концентрации связанного лиганда к общей концентрации лиганда в среде

Добавление цитохалазина В (10 мкг/мл) увеличивает общее и специфическое связывание в среднем в 2,2 раза. Возможно, что связывание Р-адренолигандов зависит от состояния актинового цитоскелета. На микросомальной фракции показано также специфическое связывание лиганда ш-холинорецепторов Н3-хинуклидинила (К0 7-10"9 М). Эти данные подтверждают возможную внутриклеточную локализацию трансмиттерных рецепторов.

0 2 4 6

АЦ (рис. 6). Другие использованные вещества обладали менее выраженными эффектами.

Рис.

активности

1.е-06 1.е-05 1.е04 1.е-03

Зависимость

аденилатциклазы

микросомальной фракции ранних

зародышей Х./яем'з от концентрации

адреналина в среде инкубации По оси абсцисс - концентрация адреналина (М); по оси ординат - активность АЦ (пмоль/мг белка ■ мин). Уровень базальной активности - 1 пмоль/мг белка • мин.

И Адреналин 0,5 мкМ

□ Изопротереноп 0,5 мМ

ЕЗТриптамин 0,5 мМ П Дофамин 50 мкМ ОСеротонин 50 мкМ

! О Холерный токсин 1 J мг/мл

ИАдреналин 0,05 мкМ + форсколин 0,05 мкМ

Базальный уровень активности -1 пмоль/мг-мин.

Рис. б. Влияние

трансмиттеров и

форсколина на уровень активности АЦ зародышей

X. 1аеУ15.

Адреналин - 0,5 мкМ; изопротереноп - 0,5 мМ; триптамин 0,5 мМ; дофамин 50 мкМ; 5-НТ - 50 мкМ; холерный токсин 1 мг/мл; адреналин 0,05 мкМ + форсколин 0,05 мкМ. Штриховые обозначения - на диаграмме. По оси абсцисс -активность АЦ (пмоль/мг-мин).

Рис. 7. Эффект микроинъекции цАМФ (1

мМ) и бластомеры зародышей X. 1аеи1з

Микрофотография 2-х клеточного зародыша через 15 мин после инъекции.

1 - место микроинъекции, 2 - место концентрации пигмента в точки, 3- место наибольшего «вскипания» поверхности

Инкубация клеток ХЛаехчз, инъецированных пропранололом, с дибутирил-цАМФ (2 мМ), приводит к уменьшению числа клеток, развитие которых было заблокировано на 31,5 ± 3,2%, а цАМФ (10 мМ) был не эффективен. Микроинъекция цАМФ (1 мМ) приводит в 69,2 + 3,9% случаев к

выраженным изменениям поверхности клеток (ИПК): формируются многочисленные пузырьки (диаметром от нескольких десятков до приблизительно 100 мкм, рис. 7). Микроинъекция холерного токсина и фторида натрия вызывали сходные эффекты. При совместном введении цАМФ и хелатора Са2+ ЭГТА (100 мкМ) частота ИПК снижалась на 17,8 ± 3,2%. Микроинъекция СаС12 (10 мкМ) в бластомеры X. вызывала изменения поверхности, сходные с наблюдавшимися при введении цАМФ, а также мелкие неправильной формы бороздки (суммарно в 53,8 ± 9,8% случаев). Кроме того, высокий уровень ионов кальция в среде является условием защитного действия кальциевого ионофора А23187 против цитостатического эффекта пропранолола.

Изложенные факты свидетельствуют о том, что вторичные мессенджеры наряду с участием в трансмиттерной регуляции делений дробления способны так или иначе взаимодействовать непосредственно с цитоскелетом и сократительным аппаратом зародышевых клеток.

На ранних зародышах Б. т1егтесИи,1 изучали защитное действие циклических нуклеотидов против цитостатических эффектов антагонистов 5-НТ (табл. 1).

Таблица 1.

5-НТ-антагонист Концентрация, Циклический Концентрация, Защитное действие

мкМ нуклеотид мМ циклического нуклеотида, %

Инмекарб 25 цАМФ 0,3 0*

Дибутирил-цАМФ 0,2 +25,0+6,1**

Дибутирил-цГМФ 0,18

Мелипрамин 120 Дибутирил-цАМФ 0,2 +

60 цАМФ 0,3 +30,0+11,2

Дибутирил-цАМФ 0,2 +38,0+8,3

Дибутирил-цГМФ 0,18 +35,0+13,5

5-Вг-триптамин 120 цАМФ 0,3 +60,0±9,1

Дибутирил-цАМФ 0,2 0

Дибутирил-цГМФ 0,18 0

* - отсутствие достоверного эффекта вещества-протектора;

** увеличение числа зародышей, прошедших 1-е деление дробления при добавлении вещества-протектора, по сравнению с контролем, в который протектор не добавлялся; *** - наличие защитного эффекта установлено методом альтернативного анализа качественно

Видно, что дибутирильные аналоги цАМФ и цГМФ во многих случаях оказывают достоверное защитное действие против цитостатического

действия инмекарба и мелипрамина. Напротив, цАМФ оказывает защитное действие против 5-Вг-триптамина. Такие различия могут быть обусловлены особенностями механизмов рецепции и транспорта 5-НТ-ергических веществ. Активатор АЦ К'аР также уменьшает цитостатическое действие инмекарба, тогда как папаверин был неэффективен.

Добавление в среду электропробоя мембраны цАМФ или активатора АЦ форсколина уменьшает задержку развития и повышает число делящихся клеток. Напротив, добавление фосфодиэстеразы циклических нуклеотидов (ФДЭ) приводит к замедлению вступления клеток в очередное деление и уменьшает число делящихся клеток (рис. 8).

Рис. 8. Влияние химических веществ на восстановление делений дробления у зародышей Э. Мегтейшэ,

подвергнутых электропробою.

По оси абсцисс - время с момента оплодотворения ((.:и.н; ; по оси ординат - % зародышей, восстановивших деления дробления. Обозначения использованных веществ - на рисунке. цАМФ - 300 мкМ, форсколин -240 мкМ, ФДЭ - 0,5 мг/'мл.

- -о - Серотонин —ж—Форсколин

В период до первого деления дробления Ь.рШи.1 антагонисты 5-НТ инмекарб и его йодметилат способны вызывать изменения уровня Са2+ь измеренного с помощью зондов Рига-2 и Рига-2-Оех1гап {табл. 2). Микроинъекция Са2+-зондов или преднагрузка ВАРТА/АМ зародышей ослабляет цитостатические эффекты 5-НТ-антагонистов.

Таблица 2.

Эффекты антагонистов серотонина на уровень Са2+ до 1-го деления дробления.

Вещество Концентрация (мкМ) Площадь пика (мкМ Са2+ х мин) Повышение уровня Са2+ (мкМ)

Инмекарб 40 0.624±0.293 0.685±0.408

Йодметилат инмекарба 40 0.167±0.050 0.073±0.019

Йодметилат трописетрона 100 0.120±0.094 0.031 ±0.027

—^• Контроль

Таким образом, показана функциональная активность и взаимодействие целого ряда вторичных мессенджеров с трансмиттерами. То есть, ранние зародыши представляют собой автокринную систему с полным набором первичных и вторичных звеньев сигнальных каскадов, обнаруженных в клетках взрослых организмов. На основании изложенных данных можно предположить, что у ранних зародышей механизмы внутриклеточной передачи сигнала подобны таковым, участвующим в реализации митогенетического эффекта трансмиттеров на поздних стадиях развития и в клетках взрослых организмы (см. Weiss et al., 1998). При участии G-белков активация АЦ приводит к повышению уровня цАМФ и запуску комплекса биохимических процессов, находящихся под контролем цАМФ-зависимых протеинкиназ. Повышение уровня цАМФ может также влиять на уровень [Ca2+]j. Наряду с циклазной трансмиттерами активируется и фосфатидилинозитольная система, протеинкиназа С и другой механизм выброса Са2+.

Существует ли связь между временной организацией функции трансмиттеров и циклиновой системой? Наиболее вероятно, что трансмиттеры способны влиять на митоген-активируемую киназу р42МАРК, под контролем которой находится дефосфорилирование рр34 - компонента фактора, запускающего митоз (MPF) (Bitangcol et al., 1998; Fisher et al., 1998). В частности 5-HT, а также ПКС, Са2+- зависимые ферменты и р42/44 МАРК являются звеньями сигнального пути от 5-НТ2А рецепторов (Goppelt-Struebe et al., 1999). Именно с рецепторами 5-НТ2-типа (Бузников, личное сообщение) сходны внутриклеточные 5-НТ-рецепторы, участвующие в запуске делений дробления. Кроме того, в клетках взрослых организмов показано прямое влияние стимуляции ß-адренорецепторов на белок клеточного цикла cdc2 и уровень циклин-зависимых киназных комплексов (Waters et al., 1998). Альтернативной возможностью является влияние трансмиттеров на обмен циклинов через Ca21 /кальмодулиновую систему, которая в свою очередь входит в механизм Са2+-осциллятора, управляющего фосфорилированием-дефосфорилированием MPF.

Следующим этапом участия трансмиттеров в раннем развитии является показанная в данной работе регуляция процесса адгезии бластомеров после деления у морских ежей. Этот эффект трансмиттеров осуществляется на уровне внутриклеточных рецепторов (скорее всего, благодаря влиянию на микрофиламенты филоподий) и может рассматриваться как продолжение участия трансмиттеров в цитокинезе. Только антагонисты 5-НТ способны нарушать этот процесс, тогда как антагонисты других трансмиттеров были неэффективны. Таким образом, вероятно, что регуляция адгезии бластомеров, в отличие от собственно делений дробления, является функцией исключительно серотонергического механизма.

Мембранные эффекты трансмиттеров у ранних зародышей морских ежей

На зародышах 5. ШегтесИш в условиях, предотвращающих проникновение лигандов внутрь клетки (инкубация в течение 1 мин при 0°С), показано специфическое связывание [Н3]8-ОН-ВРЛТ с К0 = 3 х 10"'° М. На зародышах Р./тсЛм при аналогичных условиях инкубации (длительность инкубации 45 с) также обнаружено наличие специфического связывания [113]8-ОН-ОРАТ при использовании в качестве холодных вытеснителей лигандов 5-НТ|А-рецепторов Ршс1оЫп(1-5НТ1а, 5-НТ2-рецепторов -ципрогептадина и 5-НТз-рецепторов - 5-НТО, а также препарата КЮР-14.

Константы диссоциации, определенные в этих опытах, приведены в табл. 3., см. также рис. 9.

120 0 1 ооо 300 60 0 400 200 0

Рис. 9.

Скэтчарда

связывания

Кривая для НЗ-8-ОН-

ОРАТ зародышами Р. Ни1с1из.

«Холодный» вытеснитель -КЮР-14,100 мкМ

Таблица 3.

Константы диссоциации H3-8-OH-DPAT на зародышах P.lividus при

использовании различных немеченных лигандов МО-9 м)

Pindobind-5HTiA Ципрогептадин 5HTQ ЮОР-14

1,13 1,71 2,56 1, 01

Концентрация немеченных лигандов - 10"4 М.

Эти эксперименты показывают возможность присутствия на мембране бластомеров морских ежей 5-НТ-рецепторов, которые, по-видимому, отличаются по своим фармакологическим свойствам от известных 5-НТ-рецепторов 1-го - 3-го типов.

На зародышах морского ежа P.lividus методом whole cell putch показано, что плохо проникающий в клетки агонист 5-ШУрецепторов 5-HTQ в период от оплодотворения до стадии 8 бластомеров между делениями вызывает в основном выходящий ток, а в периоды цитокинезов 1-го и 2-го

делений дробления - входящий ток (рис. 10, 11).

Рис. 10. Действие 5HTQ (100 мкМ) па мембрану зародыша морского ежа P.lividus в период формирования борозды 1-го деления дробления (около 30% диаметра).

По оси абсцисс - время (с), по оси ординат - ток (нА). Вещество внесено непосредственно перед началом регистрации.

Рис. 11. Суммарная диаграмма токов,

вызываемых 5-HTQ (100 мкМ) у зародышей P.lividus.

По оси ординат мембранные токи (нА); по оси абсцисс - периоды развития (1-cell - от оплодотворения до 1-го деления; 1s' c.d. -формирование 1-й борозды дробления; 2-cell - от 1-го до 2-го деления дробления; 2 c.d. - формирование борозды

йодметилата инмекарба на зародыш Ь.рюЫБ в период 1-го деления дробления.

Отметки времени - в углах кадров (от 10 с до 10 мин от момента

Рис.

внесения вещества)

микроскопия

12.

Конфокальная эффекта

Своеобразный эффект наблюдался на зародышах Ь.рШт при внесении йодметилатов инмекарба, трописетрона и КЮР-14 в период формирования борозды дробления. Через 2 мин после внесения препарата проявлялись признаки регресса борозды, который завершался в течение 10 мин (рис. 12). 5-Н'Г и 5-НТО достоверно снижали частоту регрессии борозды, вызванную йодметилатами 5-НТ-антагонистов. При отмывке последних зародыши были способны к восстановлению борозды дробления. Сборку-разборку борозды удавалось повторить в ходе одного эксперимента до 5 раз. Таким образом, серотонергические вещества (в т.ч. лиганды 5-НТ3-рецепторов) не влияющие на процессы запуска делений дробления, участвуют в завершении формирования борозды дробления. Эффективность йодметилатов 5-НТ-антагонистов в этих экспериментах позволяет предположить мембранную локализацию соответствующих рецепторов, возникающих в процессе формирования борозды дробления.

Иодметилаты трописетрона, инмекарба и препарата КЮР-14, внесенные в период первого деления дробления, вызывают также повышение уровня Са2*, по принципу «доза - эффект», определенное с помощью кальциевого зонда Рига-2-с1ех1.гап (табл. 4).

Таблица 4. Эффекты 5-НТ-антаговистов на внутриклеточный уровень свободных ионов Са2+ в клетках зародышей L.pictus

Вещество Концентрация (мкМ) Площадь пика (мкМ Са2+ х мин) Амплитуда пика Са * (мкМ)

Инмекарб 40 0,624±0,293 0,685±0,408

Йодметилат инмекарба 40 0,167±0,050 0,073±0,019

Трописетрон 100 0,323±0,169 0,094±0,051

Йодметилат трописетрона 200 1,Ю8±0,163 0,248±0,023

100 0,601±0,142 0,145±0,028

67 0,303±0,079 0,06б±0,015

40 0,151±0,043 0.044±0,015

Pindobind-5HTiA 200 0.25 5±0.102 0.150±0.070

Рис. 13. Изменения эффекта йодметилата трописетрона на

внутриклеточный уровень свободного Са2+ при заблаговременном внесении 5-НТ<2 и нифедипина в период первого деления

дробления псевдостационарного

во юо 120 140 160 180 200 зародыша Ь.ргсШэ.

По оси абсцисс - время ' 2 13 II (мин), по оси ординат - Са2*

(мкМ). Первый пик Са2* -

оплодотворение; 1 - йодметилат трописетрона (100 мкМ), 2 - йодметилат трописетрона (100 мкМ) + 5НТО (100 мкМ), 3 - йодметилат трописетрона (100 мкМ) + нифедипин (20 мкМ)

5-НТ(2 и 5-НТ, внесенные за 10 - 40 с до йодметилата трописетрона снижали его эффект в опытах по измерению Са2* по соотношению сигнала Гига-2-с1ех1гап (Табл. 5, Рис. 13).

Таблица. 5.

Эффекты 5-HTQ и 5-НТ на уровень свободного внутриклеточного Са2+ по сравнению с эффектом йодметилата трописетрона per se.___

Йодметилат трописетрона 100 мкМ Площадь пика (мкМ Са2+х мин) Йодметилат трописетрона 100 мкМ perse (мкМ Са2' х мин) Различие в площадях пиков (мкМ Са2< х мин) **

+5-HTQ 100 мкМ ( 14)* 0.473 ± 0.083 1.088 ±0.178 -0.615 ±0.196 (-56.5%)

+5-НТ 200 мкМ (4) 0.452 ± 0.062 0.741 ±0.106 -0.289 ±0.123 (-37.8%)

* - В скобках - число экспериментов

** - В скобках - %% по отношению к эффекту йодметилата трописетрона perse

Замена нормальной морской воды на бескальциевую вызывала значительное уменьшение эффекта йодметилата трописетрона (100 мкМ) (табл. 6). Внесение нифедипина в нормальную морскую воду за 10 - 40 с до йодметилата трописетрона также уменьшало эффект последнего (табл. 6, Рис. 13); препарат 0-600 имел сходный, но более слабый эффект. При этом собственного эффекта блокаторы Са2+-каналов не проявляли.

Таблица 6.

Эффекты 5-HTQ, нифедипина и бескальциевой морской воды на уровень свободного внутриклеточного Са2+ по сравнению с эффектом йодметилата трописетрона per se.

Иодметилат трописетрона 100 мкМ Площадь пика (мкМ Са2> х мин) Иодметилат трописетрона 100 мкМ per se (контроль) (мкМ Са!+ х мин) Различие в площадях пиков (мкМ Ca2f х мин) *

+ Нифедипин 20 мкМ 0.346 ±0.104 1.010 ± 0.115 0.664 ±0.155 (-65.7)

+ D-600 40 мкМ 1.023 ±0.045 1.409 ±0.102 0,386 ±0.111 (-27.4)

Ca2,FASW 0.074 ± 0.024 0.463 ±0.135 0.388 ±0.137 (-83.8)

" - в скобках - %% по отношению к эффекту йодметилата трописетрона perse

Следует отметить, что разборка борозды дробления у L.pictus обусловлена не только действием йодметилатов 5-НТ-антагонистов, но и забуфериванием цитоплазматического Са2+ зондом Calcium Green- 1/dextran или Са2+-буфером В APT A/AM (1 мкМ). Таким образом, эффекты 5-НТ-ергических веществ на мембранные рецепторы по всей вероятности сопряжены с изменениями уровня Ca2+i.

На модели «форболового синдрома» АХ потенцирует эффекты ФМА, а все ингибиторы протеинкиназы С (ПКС) полностью предупреждают это действие АХ. 1-никотин (10-15 мкМ), потенцирует эффекты ФМА, а в более высоких концентрациях вызывает гибель ранних зародышей, d-никотин в 2-5 раз менее активен. Четвертичные или бис-четвертичные антагонисты н-АХ-рецепторов (напр. d-тубокурарин), полностью устраняют цитотоксическое действие никотина на обработанные ФМА зародыши. Обнаружено, что такая

активность н-АХР-антагонистов снижается с возрастанием липофильности (табл. 7).

Таблица 7.

Влияние н-холинергических веществ на чувствительность зародышей Ь.рюЫв к летальным дозам смеси ФМА + никотин (0,05 мкМ + 40 мкМ).

I II III IV V VI tubo Sube Hexa

ФМА+никотин 100* 100 40 100- 20-35 0-5 100* 100* 100*

Дано относительное количество (в %%) живых зародышей через 3 часа после гибели всех зародышей, обработанных смесью «ФМА + никотин» per se. Все никотинергические вещества использовались в концентрации 20 мкМ.

*) Присутствуют зародыши с частично или полностью нормализованным развитием. I - имехин, II - темехин, III - пемпидин, IV - LK-58 (темпетол), V -темпидон, VI - нанофин, tubo - d-тубокурарин; sube - субехолин; hexa гексаметоний

5-НТ и агонист 5-НТз-рецепторов - 2-метил-5-НТ уменьшают эффекты не только ФМА, но и других активаторов ПКС. Четвертичные лиганды 5-ШУрецепторов - 5-HTQ (2,5 -100 мкМ) и йодметилат трописетрона не меняют чувствительности зигот и зародышей к активаторам ПКС, но являются сильными антидотами против цитотоксических тандемов. Лиганды 5-НТ2;1С- и 5-НТ1А-рецепторов не оказывали на зиготы и зародышей защитного действия против «ФМА+никотин».

Зиготы или ранние зародыши, инкубировавшиеся в Ca2+FASW сохраняют нормальную чувствительность к ФМА per se, но практически нечувствительны к цитотоксическому действию «ФМА+никотин». Перенос таких зародышей в нормальную морскую воду полностью восстанавливает их чувствительность к тандему «ФМА+никотин».

Рис. 14. Влияние смеси

«ФМА+никотин» на уровень Ca2+¡ у

зародышей L.pictus По оси абсцисс - время (мин), по оси ординат - Са2* (мкМ). Черная отметка -момент внесения смеси форбол -никотин (2 мкм + 200 мкм, соответственно). Зонд - Fura-2/Dextran

0 5 10 15 20 25 30 35 40

Неоплодотворенные

яйцеклетки преднагруженные ВАРТА/АМ (1 мкМ) или Са2+-зондами после

оплодотворения снижали чувствительность к цитотоксическому действию тандема «ФМА + никотин», тогда как чувствительность к ФМА per se не изменялась. Рианодин и нифедипин (25-50 мкМ) не устраняют действия ФМА, но снимают эффект цитотоксического тандема «ФМА + никотин».

В экспериментах с Са24-зондами Fura-2 и Fura-2/dextran было обнаружено, что внесение зародышам L.pictus в инкубационную среду смеси «ФМА + никотин» (1-2 мкМ + 200 мкМ) в период после оплодотворения может вызывать существенные изменения уровня [Са2+], (рис. 14). Изменения уровня Ca2+i могут быть подавлены или предупреждены н-холинолитиками d-тубокурарином и субехолином, но не м-холинолитиком атропином.

Ряд защитного действия никотинолитиков против цитотоксического эффекта тандема ФМА+никотин совпадает с таковым в опытах с иономицином.

В целом для влияния трансмиттеров, их агонистов и антагонистов на цитотоксические эффекты тандема ФМА+никотин и иономицина характерно, что холинергические и серотонергические вещества тем более эффективны, чем труднее они проникают в клетку, т.е. действуют, вероятнее всего, на клеточной мембране. На описанных выше моделях более вероятным является присутствие в клетках АХ-рецепторов близких к никотиновым и 5-НТ-рецепторов близких к 5-НТз-рецепторам. В то же время защитное действие 5-НТ-ергических соединений проявляется при проникновении их в клетку. Как и в случае модели сборки-разборки борозды дробления, эффекты АХ- и 5-НТ-эргических веществ связаны с регуляцией Са2+,.

Роль трансмиттеров в межклеточных взаимодействиях у интактных ранних зародышей морских ежей

Изучалось действие датированного введения трансмиттеров и их антагонистов в ходе одного из делений дробления морских ежей на состояние межклеточных взаимодействий. На зародышах плоского морского ежа S. mirabilis внесение антагонистов трансмиттеров на стадии бластулы вызывало различные нарушения межклеточных взаимодействий:

образование россыпи бластомеров, агрегатов бластомеров, "двойниковых" зародышей - формирующиеся из функционально изолированных бластомеров, сохраняющих между собой механическую связь; "карликовых" зародышей, образующихся из "двойниковых", утративших между собой механическую связь (рис.15); "открытых полубластул" - полусферических образований с полостью, открытой во внешнюю среду; зародышей 8-образной формы. Значительно менее эффективными были антагонисты 5-НТ при внесении их непосредственно после оплодотворения. Сходные результаты были получены на зародышах E.cordatum; на зародышах S.drôebachiensis и E.esculentus наблюдались более слабо выраженные эффекты антагонистов трансмиттеров, а на зародышах S.intermedius они

Рис. 15. Нарушения

межклеточных

взаимодействий у

интактных зародышей S.

mirabilis при датированной

обработке в период 1-го

деления дробления

инмекарбом (78 мкМ). А - нормальные зародыши, Б -двойниковый зародыш, В карликовые зародыши Уг - ЛА нормального, Г - 8-образный зародыш

Наиболее эффективно

вызывали нарушения межклеточных взаимодействий антисеротониновые препараты инмекарб и мелипрамин. 5НТ и его аналог буфотенин ни в одном случае нарушений межклеточных взаимодействий не вызывали, при этом 5-НТ оказывал выраженное защитное действие против эффектов инмекарба, мелипрамина, индолилгептиламина, азафена, динезина и др., проявляющееся в уменьшении суммарного числа зародышей с нарушениями межклеточных взаимодействий. Некоторые препараты обладают пролонгированным

были неэффективны.

действием — способностью нарушать взаимодействия бластомеров не только по борозде 1-го деления дробления, когда проводилась обработка, но и последующим. Наиболее резко выраженным проявлением такого действия является образование россыпей бластомеров.

Наблюдения за развитием зародышей показали существование видимого различия в действии некоторых препаратов. Так, эффект инмекарба выражался в блокаде «адгезии после деления». Между бластомерами спхпянялясь шель. хяпяктепняя лля момента наибольшего оасхождения в_

ходе деления дробления, а впоследствии формировались двойниковые зародыши. В то же время мелипрамин не вызывал блокады адгезии, но в дальнейшем развитии наблюдались различные хорошо выраженные нарушения межклеточных взаимодействий.

Вещества, легко проникающие в клетку (первичные, вторичные, третичные индолилалкиламины и родственные им соединения), вызывали в этих опытах нарушения межклеточных взаимодействий в меньших концентрациях, чем их четвертичные аналоги. Таким образом, различаются равноэффективные концентрации типиндола и инмекарба и соответствующих четвертичных аналогов.

Наряду с описанными выше нарушениями, в некоторых случаях при действии мелипрамина обнаруживалась задержка формирования микромеров. Возникло предположение о наличии причинно-следственной связи между этими явлениями. Прямые опыты по изучению влияния изоляция бластомеров различными механическими методами позволяют в принципе решить вопрос о зависимости типа дробления от состояния межклеточных взаимодействий.

Установлено, что типы дробления изолированных бластомеров исследованных видов зародышей могут быть различными. Это выражалось в формировании (рис. 16А) или не формировании (рис. 16Б) микромеров на 4-м делении дробления (см. также табл. 8). Равномерное 4-е деление дробления преобладало у половинных зародышей S.nudus и S. mirabilis, у зародышей S.

ê Ф

формировались. На нормальных партиях зародышах S. mirabilis опыты по изоляции бластомеров проводились в период 1-го, 2-го или 3-го делений дробления (табл. 8). В результате изоляции бластомеров до адгезии как в 1-м, так и во 2-м делениях дробления (Дь Дз), образуются половинные зародыши, среди которых достоверно преобладают не формирующие микромеры на 4-м делении дробления. Напротив, при изоляции после адгезии в 1-м или 2-м делениях (Пь П2) существенно больше случаев, когда половинные зародыши формируют микромеры на этой стадии. Преобладание одного из типов дробления на каждой стадии изоляции статистически достоверно. Вероятно, судя по полученным данным, такая же ситуация и на 3-м делении дробления. В 142 случаях удалось пронаблюдать развитие пар половинных зародышей S.mirabilis, изолированных из одного и того же материнского на стадии деления дробления - в 97 случаях (68,3%) тип дробления таких «близнецовых» зародышей совпадал. То есть, хотя реализация межклеточного сигнала в большинстве случаев происходит в обоих бластомерах одновременно, в этом процессе присутствует и некоторая несинхронность.

Рис. 16. Типы дробления половинных зародышей S.mirabilis.

А - половинные зародыши, сформировавшие микромеры (указаны стрелками) на 4-м делении дробления.

Б - половинные зародыши, не сформировавшие микромеров на 4-м делении дробления.

Таблица 8

Влияние момента изоляции бластомеров на тип дробления образующихся

половинных зародышей

Вид Момент ИЗОЛЯЦИИ Число зародышей Доля зародышей, формирующих микромеры на 4-м делении дробления (в %%) Разность долей зародышей, формирующих и не формирующих микромеры на 4-м делении дробления

S. mirabilis fli 818 34,7±1,7 30,6±2,3

ni 865 68,2±1,6 36,4±2,2

Дг 60 30,0±6,0 4 0,0±8,4

П2 127 81,1±3,5 62,2±4,9

Дз 67 85,1±4,4 70,2±6,2

S.mtdus Ri 56 23,2±5,6 53,6±8,0

ni 26 92,3±5,2 8 4,6±7,4

S.intermedius Д1 62 79,4±5,1 58,8±7,2

ni 48 83,3±5,4 66,6±7,6

E.parma fli 94 77,7±4,3 55,4А6,1

П1 87 64,4±5,1 28,8±7,2

E.cordatum Дх 22 27,3±9,5 45,4±13,4

P.lividus Дг 309 45,0+1,4 10,0±2,0

Д12 27 11,1+6,0 77,8+8,5

На «микромерной» модели межбластомерных взаимодействий изучали эффекты трансмиттеров, их антагонистов и веществ, способных участвовать во внутриклеточной передаче сигнала.

Таблица 9.

Влияние химических препаратов на тип дробления половинных зародышей

морских ежей

Вид Момент изоляции Вещество Концентра ция [мкМ] Разность типов дробления* Вероятность

S. mirabilis Д| Серотонин 56 14,4+3,8 >0,999

Д|2 56 11,8±5,7 >0,95

Дш 56 14,5±4,5 >0,99

Д| Триптамин 250 13,3±6,4 >0,95

Д] Карбахолин 274 -8,5±7,9 <0,95

Д| АТФ 360 2,В±8,9 <0,95

Д| Дофамин 260 5,8±9,8 <0,95

Д. Папаверин 50 33,8+6,2 >0,999

Д| цАМФ 270 6,8±5,1 <0,95

Д| иГМФ 270 -7,9±6,5 <0,95

Д. Дибутирил-цАМФ 210 41,1±6,2 >0,999

П, Мелипрамин** 5 -32,0±4,7 >0,999

П, Мелипрамин*** 5 -30,4±7,2 >0,999

П, Ципрогептадин 61 -20,6±6,1 >0,95

П, Инмекарб 25 -33,6+7,9 >0,999

П| Инмекарб йодметилат 25 -25,7±8,0 >0,999

п, ИК-306 125 -21.5+10,0 >0,95

п, Аминазин 15 -2,6±7,5 <0,95

п, Пропранолол 135 1,8±7,2 <0,95

п, Ганглерон 32 -9,6+7,0 <0,95

п, Кватерон 400 -2,1+8,6 <0,95

Д| Валиномицин 5,4x10"3 22,1 +9,0 >0,95

П| Уабаин 1000 -25,3 + 8,7 >0,99

П, Трифтазин 49 -28,2 ± 13,0 >0,95

Хищ/ш л Серотонин 112 24,4+11,5 >0,95

РМуШШ Д| Инмекарб 50 -1,4±11,9 <0,95

Д| Йодметилат инмекарба 40 -30,2+10,0 >0,95

Д, КЮР-14 100 0 >0,95

Д| ЮОР-14 йодметилат 100 -16,5±7,4 >0,95

Д. Мелипрамин 60 -19,8+7,5 >0,99

А.Ихи/а д. КЮР-14 йодметилат 100 -41,0±10,8 >0,99

Примечания. * опыт к контролю в %

** препарат вводился сразу после изоляции бластомеров. *** Препарат вводился после 3-го деления дробления.

5-НТ достоверно увеличивает число Д|-зародышей, формирующих на 4-м делении дробления микромеры (табл. 9). Тот же эффект наблюдался на зародышах, подвергшихся последовательной изоляции в 1-м и 2-м делениях и в 1-м - 3-м делениях (Дп-, и Д|2з-зародыши). Папаверин резко увеличивал число половинных зародышей, формирующих микромеры на 4-м делении дробления. цАМФ и цГМФ не имели значительных и статистически достоверных эффектов, тогда как эффект дибутирил-цАМФ (дБцАМФ) был вполне сравним с действием папаверина. Это, по-видимому, объясняется существенно лучшим проникновением в клетки дБцАМФ по сравнению с цАМФ.

Антагонисты 5-НТ статистически достоверно уменьшают число зародышей, изолированных после адгезии, формирующих микромеры на 4-м делении дробления (табл. 9). Антагонисты других трансмиттеров существенных и статистически достоверных эффектов не вызывали. В этих опытах впервые наблюдался эффект кватернизированного аналога

антагониста серотонина. Инмекарб и его йодметилат в одинаковых концентрациях сходным образом снижали частоту неравномерных 4-м делений дробления у половинных зародышей S. mirabilis по сравнению с контролем. На зародышах P.lividus инмекарб и КЮР-14 не влияли на паттерн дробления, тогда как их йодметилаты вызывали снижение частоты неравномерных дроблений у половинных зародышей (см. табл. 9).

На интактных зародышах S. mirabilis проведены опыты по изучению влияния мелипрамина на формирование микромеров. По крайней мере часть интактных зародышей S. mirabilis при обработке мелипрамином микромеров на 4-м делении дробления не формирует. У контрольных интактных зародышей в этих опытах всегда обнаруживалось 4 микромера. При действии ОАГ или ФМА деления дробления у зародышей L.pictus и P.lividus наблюдались типичные признаки нарушений межбластомерных взаимодействий: ослабление межбластомерной адгезии, неправильная ориентация бластомеров и подавление формирования микромеров.

Таким образом, эффекты фармакологических препаратов на тип дробления половинных зародышей, по крайней мере частично, имеют место и на интактных. Полученные данные подтверждают общность вызываемых химическими препаратами нарушений межклеточных взаимодействий у интактных зародышей (выражающихся в нарушении формы бластул) и изменений, вызываемых ими в типе дробления половинных зародышей.

Мелипрамин и 5-НТ на зародышах S.mirabilis взаимно устраняют их эффекты при одновременном внесении. На половинных зародышах P. lividits 5-НТ уменьшал эффект йодметилата инмекарба, т.е. эффекты 5-НТ-ергических препаратов специфичны. Мелипрамин также полностью устранял действие папаверина, при этом число Дгзародышей, формирующих микромеры на 4-м делении дробления, снижалось на 22,3 %. Вместе с данными об эффекте дБцАМФ и активности АЦ в контактной области бластомеров (Ростомян с соавт., 1985) это свидетельствует о взаимосвязи трансмиттерного звена с системой циклических нуклеотидов.

mirabilis, S.midus, P.Iividus паттерн дробления может закономерно изменяться в результате изоляции бластомеров в зависимости от момента изоляции бластомеров. Зависимость типа дробления половинных зародышей от момента изоляции предполагает наличие критического периода в клеточном цикле, в течение которого осуществляется процесс, определяющий дальнейшую судьбу бластомера. Можно полагать, что такие критические периоды имеются и в ходе последующих делений дробления. Рассматриваемый повторяющийся процесс, очевидно, является межклеточным и реципрокным. Всю сумму полученных данных можно объяснить обменом равноправными сигналами между бластомерами. Можно предположить, что осуществление каждого из них определяет такую перестройку бластомера и в первую очередь ориентацию веретена следующего деления взаимодействия, которые последовательно приводят к реемг-мши рагаггтрвц^й—иитодшзу^, и_гпптиетгтвеннп гЬопмиповянит

микромеров. Предполагается, что основой межбластомерных взаимодействий является химическим сигнал, мишенью которого является мембранный рецептор соседнего бластомера (аналог химического синапса). В межбластомерной щели сконцентрирована активность аденилатциклазы, мембранные ганглиозиды, возможно связанные с рецепцией 5-НТ и повышенная концентрация 5-НТ, обусловленная затрудненной диффузией из этого компартмента. Нашими опытами показано наличие локализованных на плазматической мембране функционально активных 5-НТ- и АХ-рецепторов у зародышей морских ежей. Важность плазматической мембраны подтверждается и тем, что наряду с серотонергическими веществами эффективно соответствующие нарушения вызывались только детергентом ОП-7. Все изложенное позволяет предположить, начиная с завершения борозды 1-го деления дробления, существование «протосинапса» между бластомерами - билатерально симметричной структуры, в которой обе клетки одновременно служат как источниками трансмиттера, так и его мишенями. Оба контактирующих бластомера являются равноправными и представляют собой как бы пре- и постсинапгические клетки одновременно; кроме того,

присутствие обоих бластомеров является необходимым условием поддержания повышенной концентрации трансмиттера в межбластомерной щели на сравнительно высоком уровне (рис. 17). Сходство с классическим синапсом становится еще большим, если учесть возможную связь трансмиттерной системы с циклическими нуклеотидами.

Наиболее вероятно, что этот процесс происходит с участием рецепторов внешней мембраны. Существенно отметить, что локализация и время функционирования этих рецепторов практически совпадают с таковыми мембранных рецепторов, участвующих в завершении формирования борозды. На этом основании можно предположить, что оба эти эффекта реализуются с участием одних и тех же рецепторов с небольшим интервалом по времени. В обоих случаях действие трансмиттера может сводиться к воздействию через внутриклеточную систему передачи сигнала на элементы цитоскелета, по всей вероятности отличные от тех, которые участвуют в формировании и начальном этапе активности сократительного кольца.

Активация трансмиттерных рецепторов и системы вторичных мессенджеров в контактной области бластомеров может приводить к формированию функциональной асимметрии цитокортекса, которая определяет ориентацию следующей борозды дробления и, следовательно, момент формирования. На свободной поверхности мембраны концентрация трансмиттера вследствие свободной диффузии существенно ниже, что уменьшает вероятность трансмиттер-рецепторного взаимодействия.

Рис. 17. Протосинапс.

Описание в тексте. Т - трансмиттер, К -мембранный трансмиттерный рецептор

Такая модель хорошо объясняет и различия в паттернах развития при изоляции бластомеров в классических опытах Ру и Дриша. Даже убитый бластомер может служить препятствием

для утечки трансмиттера, в результате чего интактный бластомер может получить адекватный сигнал о наличии сестринской клетки, тогда как полное устранение последней уравнивает концентрацию трансмиттера в области контактной мембраны с таковой на свободной поверхности и устраняет асимметрию сигнала.

Адгезия бластомеров является необходимым условием для последующих протосинаптических взаимодействий бластомеров, которые протекают при специфическом участии 5-НТ или 5-НТ-подобного вещества. АХ может участвовать в этих взаимодействиях как антагонист 5-НТ (Бузников, неопубликованные данные).

По-видимому, активность трансмиттерных рецепторов в области межбластомерного контакта сопряжена не только с относительным повышением уровня трансмиттера в этой области. Как данные наших фармакологических опытов на интактных зародышах, так и активность 5-НТ и его плохо проникающих в клетку антагонистов и агонистов, вызывающих мембранные токи, влияющих на внутриклеточный уровень Са2+ и функцию сократительного кольца указывают на определенную временную организацию трансмиттерных процессов. Действительно, все эти феномены сопряжены с периодом формирования борозды дробления, в то же время кватернизированные серотонергические препараты на более ранних этапах клеточного цикла устойчивых эффектов не имели. Пока отсутствуют доказательства того, что именно те мембранные 5-НТ-рецепторы, которые очевидным образом участвуют в завершении борозды дробления, вовлекаются и в прямые межбластомерные взаимодействия, однако на основании единства времени и места локализации этих рецепторов такое предположение кажется достаточно обоснованным.

Предполагаемый механизм ранней межклеточной сигнализации может представлять собой онтогенетический предшественник нейрональных синапсов. Нетрудно заметить, что простая специализация структуры, при которой хотя бы один из бластомеров перестает быть источником трансмиттера, например, в результате развития ферментативной деградации

трансмиттера внутри клетки, а другой - теряет на своей поверхности трансмиттерные рецепторы делает ее идентичной классическому синапсу.

5-НТ и, вероятно АХ, удовлетворяют всем критериям трансмиттера межбластомерных взаимодействий, представляющих собой модифицированные критерии Дэйла (Dale, 1935):

1. Присутствие трансмиттера в клетке в момент реализации его функции. 5-НТ, его аналог триптамин и АХ присутствуют в бластомерах морских ежей (см. Бузников, 1967, 1990). Концентрация трансмиттеров меняется синхронно с делениями дробления (Бузников с соавт., 1972), причем концентрация 5-НТ повышается в межбластомерной щели в период делений дробления морских ежей (Markova et al., 1985);

2. Нспичие соответствующих рецепторов в месте реализации трансмиттерного процесса. Нами показано присутствие в поверхностных мембранах бластомеров морских ежей рецепторов к 5-НТ и АХ. Более того, их активность наиболее ясно проявляется в период формирования борозды дробления;

3. Подавление рассматриваемого процесса развития антагонистами трансмиттера. Действительно, антагонисты 5-НТ вызывают функциональную изоляцию бластомеров зародышей, а 5-НТ устраняет ее;

4. Наличие собственного эффекта трансмиттера. 5-НТ имитирует межбластомерный сигнал;

5. Наличие внутриклеточного механизма передачи трансмиттерного сигнала. Результаты наших опытов указывают на связь трансмиттеров с циклических нуклеотидов, ионов кальция, и, вероятно, компонентов фосфатидил-инозитольной системы в межклеточных взаимодействиях у зародышей морских ежей.

6. Множественность процессов, управляемых трансмиттерами, в период делений дробления

Период делений дробления - многокомпонентный процесс, на каждом этапе которого участвуют трансмиттеры. Вслед за вероятным участием в оплодотворении (Numanoi, 1953; Бузников, 1967; Falugi, 1993; Kim et al.,

1997) эти вещества играют важную роль в запуске делений дробления (рис. 18). Блокада запуска делений дробления обусловлена, по-видимому, ингибированием внутриклеточных 5-НТ-рецепторов. Далее, связывание 5-НТ-эргических лигандов с микрофиламентами ранних зародышей приводит к изменению жесткости цитокортекса (Бузников, Григорьев, 1990).

Критерии эмбрионального трансмиттера с поправками на локализацию рецепторов выполняются и для этих процессов раннего эмбриогенеза. Впервые соответствие 1-му - 3-му критериям было продемонстрировано для 5-НТ, триптамина и АХ в отношении запуска делений дробления зародышей морских ежей (Бузников, 1967, 1990). В ходе данного исследования впервые продемонстрированы эффекты собственно трансмиттеров в процессах раннего развития, т.е. соответствие четвертому критерию идентичности трансмиттерного процесса. В данной работе впервые получены предварительные данные о возможном присутствии катехоламинов и 5-НТ (1-й критерий) и продемонстрировано выполнение 2-го - 5-го критериев для процесса делений дробления у ранних зародышей амфибий.

Результаты, полученные на шпорцевой лягушке, имеют принципиальное значение еще и потому, что это - первая демонстрация роли трансмиттеров на зародышах позвоночных, достаточно далеко отстоящих в эволюционном отношении от иглокожих, на которых были получены первые результаты и основная масса последующих. Это является существенным аргументом в пользу универсальности регуляторной роли трансмиттеров в раннем развитии.

Этапом, сопутствующим закладке борозды дробления, является определение места формирования сократительного кольца. В пользу предположения об участии трансмиттеров в определении места формирования борозды дробления свидетельствует различие эффектов микроинъекции адреналина, циклических нуклеотидов и Са2+ в бластомеры шпорцевой лягушки. Адреналин вызывает лишь ускорение по сравнению с интактным бластомером формирования нормально ориентированной борозды дробления. Хаотичность изменений поверхности бластомеров X.

/яега, наблюдаемых при микроинъекции цАМФ и СаС12 в клетку возникает, вероятно, вследствие нарушения их естественного пространственного распределения. Отметим, что участие трансмиттеров и вторичных мессенджеров внутри одной и той же клетки в регуляции одного и того же процесса может объясняться различием их дистантности. Трансмиттеры диффундируют к мишени на расстояния в сотни микрон, вторичные мессенджеры эффективны на сравнительно коротких дистанциях (в случае ИТФ - не более чем 20 мкм, ионы кальция действуют в пределах еще более ограниченных доменов) (АПЬпЦоп с! а1., 1992). Т.е., трансмиттер является более "адресным" мессенджером, и именно локализация мест взаимодействия его рецепторов с аденилатциклазой и/или механизмами, генерирующими Са2+-сигнал, может быть основой механизма, определяющего конкретную геометрию клеточного деления. Способность антагонистов трансмиттеров влиять на положение борозды дробления показана и на зародышах морских ежей. Т.е., в данном случае можно говорить о соответствии 3-му и 5-му критериям.

В данной работе представлены доказательства соответствия 2-му - 5-му критериям для процесса «фиксации борозды» у зародышей морских ежей. Антагонисты 5 -НТ- рецепторов способны вызывать разборку формирующейся борозды, а их агонисты - предупреждать этот эффект. Эти эффекты строго коррелируют с влиянием серотонергических веществ на мембранные токи и уровень свободного внутриклеточного причем

показан и собственный эффект агонистов 5-НТ. Регрессия борозды при действии кватернизированных антагонистов 5-НТ позволяет предположить прямую причинно-следственную связь между активацией мембранных 5-НТ-рецепторов, повышением уровня Са2+ и перестройкой цитоскелета. Феномен регресса борозды дробления наблюдался при действии антагонистов кальмоДулина (Бузников, 1967), а в наших опытах всегда следовал за значительным повышением уровня Са21". Можно предположить, мишенями Са2+/кальмодулинового сигнала в данном случае являются компоненты цитоскелета, не вовлеченные в запуск формирования борозды дробления

(Schatten, 1994; Wong, 1996). Следует отметить, что найденные в данной работе условия эксперимента, позволяющие многократно имитировать сборку-разборку борозды дробления, представляют уникальную псевдостационарную модель развивающегося объекта.

Таким образом, в совокупности с данными о механизме межбластомерных взаимодействий, подробно рассмотренными выше, можно констатировать, что весь период делений дробления, начиная с момента оплодотворения, находится под контролем трансмиттеров, некоторые функции которых могут реализовывагься одновременно или последовательно, с участием одних и тех же рецепторных и сигнальных путей. То есть, автокринная система зародыша включает и трансмиттерное звено, предположительно в качестве первичного мессенджера. Клетки делящегося зародыша (бластомеры) сохраняют черты автокринной системы, но и начинают взаимодействия с другими клетками. Совокупность зародышевых сигнальных механизмов может, рассматриваться как предшественник дефинитивной регуляторной системы.

делений дробления зародышей морских ежей.

1 - оплодотворение, 2 - изменение жесткости цитоскелета, 3 -локализация борозды дробления, 4 - фиксация борозды дробления, 5 - адгезия бластомеров, 6 -протосинаптическое взаимодействие. Черными стрелками показаны потоки трансмиттеров, призмами - трансмиттерные рецепторы, широкими стрелками - ход развития. Сокращения: цс - цитоскелет, пбд - презумптивная борозда дробления, ск -сократительное кольцо, мв - микроворсинки, АЦ - аденилатциклаза, мбщ -межбластомерная щель

В пределах олиоц у;тшты i ш*. во й_к-цепср пцигетсттплт иолмпи«.

трансмиттеров и функционально связанных с ними вторичных мессенджеров. На основе постулата о филогенетической первичности онтогенетически первичных функций трансмиттеров одна из основных гипотез предполагает, что трансмиттеры и их рецепторы возникли как компоненты первичного механизма первичного хемотаксиса (Boyd, 1979; Trams, 1981). Его функциональное значение состоит в обеспечении достаточных количеств субстратов для синтезов в клетке, а разнообразие презумптивных нейротрансмиттеров может быть связано с множественностью необходимых клетке субстратов. В соответствии с гипотезой хемотаксиса трансмиттерные рецепторы, локализованные на внешней мембране, являются эволюционными предшественниками внутриклеточных (Csaba, 1981, 1984). Альтернативная гипотеза (Коштоянц, 1951, 1963) основывается на чувствительности белковых молекул к некоторым эндогенным химическим факторам. Позднее нами (совместно с Г.А.Бузниковым и Н.Г.Григорьевым) эта гипотеза была детализирована с учетом того, что некоторые из классических трансмиттеров являются производными веществ, лимитирующих существенные синтезы незаменимых аминокислот. Если и порог концентраций, запускающий ферментативную систему преобразования предшественников трансмиттеров, и чувствительность к ним реактивных белков (проспективных рецепторов) достаточно высоки, возникает возможность контроля внутриклеточного уровня компонентов белкового синтеза - малых количеств трансмиттера, а не абсолютного уровня его предшественника. Исходя из изложенного, необходимость множественности трансмиттеров в развитии связана с тем, что каждый из них является равноправным фактором, лимитирующим специфический момент синтетических процессов. Сходная логика применима и к сигнальным веществам, которые могут отражать уровень доступной энергии в клетке. Исходя из этого, первичный смысл рецепторно-циклазного взаимодействия - это интеграция информации о пластическом и энепгетическом мятртшяпяу п с-гт^т^о п лт....... ----------к --------

являющемся предпосылкой для последующей реализации межбластомерной сигнализации.

8. Методами рЩсЬ-сЬшр, флуоресцентных Са2+-зондов, связывания меченных радиолигандов и фармакологическим методом показано присутствие в плазматических мембранах ранних зародышей морских ежей 5-НТ- и холинорецепторов. Активность этих рецепторов связана с регуляцией уровня Са2+„ причем в отношении эффектов цитотоксических тандемов типа «ФМА+никотин» 5-НТ и АХ проявляют функциональный антагонизм.

9. Мембранные 5-НТ-рецепторы участвуют в процессе завершения формирования борозды дробления у ранних зародышей морских ежей. Процесс завершения борозды дробления сопряжен также с изменениями уровня Са2*.

10. Феномен сборки-разборки борозды дробления предоставляет возможность псевдостационарной модели развивающегося зародыша, перспективной для исследования эффектов веществ, влияющих на уровень Са2+,

11. На «микромерной модели» и на интактных зародышах морских ежей показано существование значимых межклеточных взаимодействий в период делений дробления.

12. Мембранные 5-НТ- и, вероятно, АХ- рецепторы участвуют в процессе межбластомерных взаимодействий у ранних зародышей морских ежей.

13. Влияние трансмиттеров на межбластомерные взаимодействия реализуется чепез шг.тему ■«^•^»цу-ург"" „—

циклическими нуклеотидами, ионами кальция и, вероятно, фосфоинозитидами.

14. Сформулирована гипотеза «протосинапса» - двухсторонней структуры, в которой обе клетки являются как источниками, так и акцепторами сигнальных молекул, идентичных трансмиттерам, на основе которой формируется асимметрия раннего зародыша и который может быть генетическим предшественником дефинитивного синапса, с одной стороны, и основой формирования многоклеточное™.

15. Рассмотрены существующие и предложена модифицированная гипотеза эволюции трансмиттерных веществ и их рецепторов.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

Статьи

1. Бузников Г.А., Шмуклер Ю.Б. 1978. Влияние препаратов-антимедиаторов на межклеточные связи у ранних зародышей морских ежей. Онтогенез, 9, 2, 173-178

2. Шмуклер Ю.Б., Чайлахян JI.M., Карпович А.Л., Харитон В.Ю., Квавилашвили И.Ш.. 1981. Межклеточные взаимодействия у ранних зародышей морских ежей. I. Существование различных типов делений дробления зародышей половинного размера морских ежей. Онтогенез, 12, 2, 197-201

3. Шмуклер Ю.Б., Чайлахян Л.М., Смолянинов В.В., Блиох Ж.Л., Карпович А.Л., Гусарева Э.В., Найденко Т.Х., Хашаев З.Х.-М., Медведева Т.Д. 1981. Межклеточные взаимодействия у ранних зародышей морских ежей. II. Датированное механическое разделение бластомеров. Онтогенез, 12, 4, 398 - 403

4. Шмуклер Ю.Б. 1981. Межклеточные взаимодействия у ранних зародышей морских ежей. III. Влияние нейрофармакологических препаратов на тип дробления половинных зародышей Scaphechinus mirabilis. Онтогенез, 12, 4,404-409

5. Buznikov G.A., Shmukler Yu.B. 1981. The possible rôle of "prenervous" neurotransmitters in cellular interactions of early embryogenesis: a hypothesis. Neurochem.Res., 6, 1,55-69

6. Божкова В.П., Николаев П.П., Петряевская В.Б., Шмуклер Ю.Б. 1982. Межклеточные взаимодействия у ранних зародышей морских ежей. IV. Пространственная ориентация плоскостей деления бластомеров. Онтогенез, 13, 6, 596-604

7. Григорьев Н.Г., Шмуклер Ю.Б. 1984. О роли ионных градиентов клеточной мембраны в раннем развитии зародышей морских ежей. Докл. АН СССР, 21 А, 2, 464-466

8. Шмуклер Ю.Б., Бузников Г.А., Григорьев Н.Г., Мальченко Л.А.. 1984. Влияние циклических нуклеотидов на чувствительность ранних зародышей морских ежей к цитотоксическим нейрофармакологическим препаратам. Бюлл. эксп. биол. мед., 97, 3, 354-355

9. Шмуклер Ю.Б., Григорьев Н.Г. 1984. Межклеточные взаимодействия у ранних зародышей морских ежей. V. Новые данные о механизме регуляции формирования микромеров. Онтогенез, 15, 3, 308-310

10. Шмуклер Ю.Б., Григорьев Н.Г., Бузников Г.А., Турпаев Т.М. 1984. Специфическое торможение делений дробления у Xenopus laevis при микроинъекции пропранолола. Докл. АН СССР, 274, 4, 994-997

П. Shmukler Yu.B., Grigoriev N.G., Buznikov G.A., Turpaev T.M.. 1986. Régulation of cleavage divisions: participation of "prenervous" neurotransmitters coupled with second messengers. Сотр. Biochem. Physiol., 83C, 2, 423-427

12. Григорьев Н.Г., Шмуклер Ю.Б. 1986. Изучение регуляции цитокинеза ранних зародышей морского ежа с помощью электрического пробоя мембраны. Докл. АН СССР, 287, 2, 463-466

13. Шмуклер Ю.Б., Григорьев Н.Г., Мартынова Л.Е. 1987. Изменения клеточной поверхности бластомеров Xenopus laevis при микроинъекции цАМФ и ионов кальция. Докл. АН СССР, 294, 2, 507-510

14. Шмуклер Ю.Б., Григорьев Н.Г., Московкин Г.Н. 1988. Адренорецептивные структуры в ранних зародышах шпорцевой лягушки (Xenopus laevis). Ж.эвол.биохим.физиол., 24, 5, 621-624

15. Шмуклер Ю.Б. 1992. Специфическое связывание [H3]8-OH-DPAT ранними зародышами морского ежа Strongylocentrotus intermedins. Биол. Мембр., 9, 10-11,1167-1169

16. Shmukler Yu.B. 1993. On the possibility of membrane reception of neurotransmitter in sea urchin early embryos. Сотр. Biochem. Physiol., 106C, 1,269-273

17. Buznikov G.A., Shmukler Yu.B., Lauder J.M. 1996. From oocyte to neuron: do neurotransmitters function in the same way throughout development? Cell. Molec. Neurobiol., 16, 5, 532-559

18. Buznikov G.A., Koikov L.N., Shmukler Yu.B., Whitaker M.J. 1997. Nicotine antagonists (piperidines and quinuclidines) reduce the susceptibility of early sea urchin embryos to agents evoking calcium shock. Gen.Pharmacol., 29,1,49 - 53

19. Бузников Г.А., Шмуклер Ю.Б., Лаудер Дж.М. 1997. Изменение физиологической роли нейротрансмиттеров в течение индивидуального развития. Росс.Физиол.ж., 83, 10,1-16

20. Shmukler Yu.B., Buznikov G.A. 1998. Functional coupling of neurotransmitters with second messengers during cleavage divisions: facts and hypotheses. Perspect. Dev. Neurobiol., 5, 469-480

21. Buznikov G.A., Marshak T.L., Malchenko L.A., Nikitina L.A., Shmukler Yu.B., Buznikov A.G., Rakic Lj., Whitaker M.J. 1998. Serotonin and acetylcholine modulate the sensitivity of early sea urchin embryos to protein kinase С activators. Сотр. Biochem. Physiol., 120A, 2, 457-462

22. Shmukler Yu.B., Buznikov G.A., Whitaker M.J. 1999. Action of serotonin antagonists on cytoplasmic calcium level in early embryos of sea urchin Lytechinus pictus. Int.J.Dev.Biol., 42, 3, 179-182

23. Buznikov G.A., Shmukler Yu.B., Lauder J.M. 1999. Changes of the physiological roles of neurotransmitters during individual development. Neurosci.Behav.Physioi, 29,1,11 - 21

Тезисы

24.Шмуклер Ю.Б.. Действие химических аналогов серотонина на формирование и работу ресничного аппарата у зародышей морских ежей. Тез. Докл. II Всес. конф., поев. 75-лет. акад. Арм ССР, чл.-корр. АН СССР Х.С.Коштоянца "Физиология и биохимия медиаторных процессов ", 1976, Москва, с. 149

25.Шмуклер Ю.Б., Бузников Г.Л.. 1978. О возможной роли биогенных моноаминов в формировании межклеточных связей у ранних зародышей морских ежей. Тез. Докл. VII научного Совещ. эвол. физпол., поев. пам. акад. Л.А.Орбели, Ленинград, с. 257

26.Шмуклер Ю.Б. 1979. Влияние некоторых нейрофармакологических препаратов на характер делений дробления у морского ежа Scaphechinus mirabilis. Тез. Докл. Всес. симп. "Регуляторные системы обмена веществ в раннем эмбриогенезе ", Киев. Наукова Думка, с. 56-57

27.Шмуклер Ю.Б. 1980. Межбластомерные взаимодействия у зародышей морских ежей. Тез. докл. II конф. молодых ученых Ин-та экспериментальной биологии АН Арм. ССР, Ереван, с. 16-18

28.Бузников Г.А., Шмуклер Ю.Б. 1980. О механизме межклеточных взаимодействий у ранних зародышей морских ежей. Тез. докл. III Всес. конф., поев. 80-летию акад. Арм. ССР, чл.-корр. АН СССР Х.С.Коштоянца "Физиология и биохимия медиаторных процессов ", Москва, с. 35

29.Чайлахян JI.M., Шмуклер Ю.Б. 1980. Применение техники изоляции бластомеров для изучения роли серотонинергической системы в ранних межклеточных взаимодействиях. Тез. докл. III Всес. конф., поев. 80-летию акад. Арм. ССР, чл.-корр. АН СССР Х.С.Коштоянца "Физиология и биохимия медиаторных процессов ", Москва, с. 211

30.Шмуклер Ю.Б., Садокова И.Е. 1981. Роль циклических нуклеотидов (ЦН) в регуляции типа дробления половинных зародышей морского ежа Scaphechinus mirabilis. Тез. докл. VI Всес. совещ. Эмбриол., М., с. 204-205

31.Шмуклер Ю.Б. 1982. Влияние уабаина и валиномицина на тип дробления половинных зародышей морских ежей. Тез. сообщ. VIII совещ. по эвол. физиологии "Вопросы эволюционной физиологии", Ленинград, с.339

32.Шмуклер Ю.Б., Григорьев Н.Г. 1985. Ускорение развития и "вскипание" поверхности бластомеров Xenopus laevis при микроинъекции регуляторных веществ. Тез. докл. IV Всес. конф., поев. 85-летию со дня рождения чл.-корр. АН СССР Х.С.Коштоянца "Физиология и биохимия медиаторных процессов", Москва, ч. 2, с. 356

33. Григорьев Н.Г, Шмуклер Ю.Б. 1985. Изучение регуляции делений дробления Strongylocentrotus intermedius с помощью электрического пробоя мембраны. Тез. докл. IV Всес. конф., поев. 85-летию со дня рожд. чл.-корр. АН СССР Х.С.Коштоянца "Физиология и биохимия медиаторных процессов", Москва, ч. 1, с.91

34. Бузников Г.А., Григорьев Н.Г., Шмуклер Ю.Б. 1985. "Донервные трансмиттеры" как регуляторы делений дробления: роль цАМФ и ионов кальция. Онтогенез, 16, 5, с.529

35. Бузников Г.А., Григорьев Н.Г., Шмуклер Ю.Б. 1988. Возможная роль трансмиттеров в клеточной дифференцировке и других морфогенетических процессах. Онтогенез, 19, № 4, с. 436

36. Шмуклер Ю.Б. 1990. Возможность протосинаптической организации трансмиттерного процесса у ранних зародышей морских ежей. Тез. докл.

V Всес. конф., поев. 90-летию со дня рожд. акад. АН Арм.ССР, чл.-корр. АН СССР Х.С.Коштоянца "Физиология и биохимия медиаторных процессов", Москва, р. 332

37. Shmukler Yu.B., Buznikov G.A., Whitaker M.J. 1995. The effect of serotonergic substances on free calcium ion concentrations in the early Lytechinus pictus embryos. In: Congress of the European Developmental Biology Organisation, Toulouse, France, p. 64

38. Buznikov G.A., Koikov L.N., Shmukler Yu.B., Whitaker M.J. 1996. Quinuclidine and piperidine nicotinic antagonists in the study of pre-nervous nAChR of early sea urchin embryos. XIV Int. Symp. Med. Chem., Maastricht, Netherlands, p.2.22

39. Бузников Г.А. и Шмуклер Ю.Б. 1998. Мембранные нейротрансмиттерные рецепторы ранних зародышей морских ежей. Тез. XVII Съезда физиологов России, Ростов-на-Дону , с. 128

40. Шмуклер Ю.Б. 1998. Серотониновые рецепторы и уровень свободных ионов кальция у ранних зародышей морских ежей. Тез. Междунар. Конф. «Рецепция и внутриклеточная сигнализация». Пущино. с. 65 - 68

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Шмуклер, Юрий Борисович

1. Трансмиттеры в индивидуальном развитии

1.1. Ооциты б

1.2. Оплодотворение

1.2.1. Са2+-сигнализация при оплодотворении

1.2.2. рН-сигнал при оплодотворении

1.2.3. Трансмиттеры как потенциальные составляющие "растворимого фактора" спермы

1.3. Клеточный цикл в период делений дробления

1.3.1. Модель управления циклом клеточного деления на основе фактора, запускающего' М-фазу

1.3.2. Эффекторное звено MPF-системы

1.3.3. Сигнальные системы в клеточном цикле

1.3.4. Трансмиттеры в период делений дробления

1.3.4.1. Эффекты трансмиттеров, их агонистов и антагонистов в период делений дробления

1.3.4.2. Трансмиттерные рецепторы в период делений дробления

1.3.4.3. Мишени трансмиттерной сигнализации в период делений дробления

1.4. Цито- кариокинетические взаимодействия в делениях дробления 4 б

1.4.1. Сигнальные механизмы

1.4.2. Собственно формирование борозды дробления

1.4.3. Сигнальные системы в формировании борозды дробления

1.5. Межклеточные взаимодействия у ранних зародышей

1.5.1. Механизмы ранних межклеточных взаимодействий

1.5.2. Межклеточные взаимодействия и осевые характеристики раннего развития

1.5.3. Микромеры зародышей морских ежей

1.6. Стадии бластулы и гаструлы

1.7. Трансмиттеры как "морфогены" у зародышей позвоночных

1.7.1. Моноамины в нейруляции

1.7.2. Трансмиттеры как регуляторы нейрогенеза.

1.8. Механизмы действия трансмиттеров в развивающихся и дефинитивных клетках

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Шмуклер, Юрий Борисович

Выводы

1. Раннее развитие в период делений дробления находится под постоянным контролем трансмиттеров, последовательно или одновременно управляющих рядом ключевых процессов: запуском деления, определением места формирования борозды, завершением ее формирования, адгезией бластомеров и межбластомерными взаимодействиями.

2. Методом микроинъекции на зародышах X.laevis продемонстрирована прямо, а фармакологическими экспериментами, связыванием меченных лигандов и методом электропробоя мембраны на зародышах морских ежей подтверждена внутриклеточная локализация трансмиттерных рецепторов, участвующих в запуске делений дробления.

3. В клетках ранних зародышей одновременно присутствуют и являются функционально активными рецепторы по крайней мере к двум трансмиттерам. Внутриклеточные адрено- и холинорецепторы ранних зародышей Х.1аеу1з проявляют выраженную специфичность.

4. Трансмиттеры через активацию соответствующих внутриклеточных рецепторов способны влиять на внутриклеточный уровень цАМФ. и Са2+ у ранних зародышей.

5. Функция внутриклеточных трансмиттерных рецепторов реализуется при участии вторичных мессенджеров: циклических нуклеотидов, ионов кальция и фосфоинозитидов, однако именно трансмиттер определяет положение и момент формирования борозды, т.е. является более «адресным» мессенджером.

6. Циклический АМФ непосредственно или через изменение концентрации Са2+1 способен влиять на состояние цитоскелета и сократительных белков ранних зародышей.

7. Внутриклеточные 5-НТ-рецепторы ранних зародышей морских ежей участвуют в процессе адгезии бластомеров морских ежей после деления, являющемся предпосылкой для последующей реализации межбластомерной сигнализации.

8. Методами ри1:сЬ-с1итр, флуоресцентных Са2+-зондов, связывания меченных радиолигандов и фармакологическим методом показано присутствие в плазматических мембранах ранних зародышей морских ежей 5-НТ- и холинорецепторов. Активность этих рецепторов связана с регуляцией уровня Са2+1, причем в отношении эффектов цитотоксических тандемов типа «ФМА+никотин» 5-НТ и АХ проявляют функциональный антагонизм.

13. Влияние трансмиттеров на межбластомерные взаимодействия реализуется через систему вторичных мессенджеров, в том числе циклическими нуклеотидами, ионами кальция и, вероятно, фосфоинозитидами.

15. Рассмотрены существующие и предложена модифицированная гипотеза эволюции трансмиттерных веществ и соответствующих рецепторов. гипотетическая схема происхождения трансмиттеров

1 - поток аминокислот -предшественников трансмиттеров; 2 -порог срабатывания трансмиттерсинтезирующего фермента; 3 трансмиттерсинтезирующий фермент; 4 - белковый синтез; 5 -новосинтезированный трансмиттер; 6 - трансмиттерная рецептивная структура; 7 - цветочек

Автор благодарит своего учителя заведующего Лабораторией эмбриофизиологии ИБР РАН профессора Геннадия Алексеевича Бузникова за науку, доброжелательное сотрудничество в совместных опытых, представленную свободу научного исследования, терпение и взыскательность в дискуссиях. Большая благодарность также сотрудникам Лаборатории за дружеское отношение, советы и поддержку. Большую ценность для автора представляет сотрудничество с коллегами по экспериментам - соавторами опубликованных материалов - в первую очередь акад. Чайлахяну и к.б.н. Григорьеву. Доктору химических наук В.В.Безуглову и коллективу возглавляемой им лаборатории ИБХ РАН автор благодарен за предоставление специально разработанных искусственно функционализированных жирных кислот и сотрудничество в проведении экспериментов. Данная работа не могла бы быть выполнена, если бы не многочисленные коллеги, принимавшие автора на морских станциях России и зарубежья; особая благодарность сотрудникам ДВО РАН докторам наук Сове, Васьковскому, Хотимченко и Жадану, кандидатам биологических наук Латышеву, Деридовичу, Креймеру и Ващенко. Автор благодарен д-ру Майклу Уитекеру (Университет Ньюкасла, Великобритания) и Королевскому Обществу за представленную возможность исследований уровня внутриклеточного кальция в клетках зародышей морских ежей, д-р д-р Элизабетте Тости , Мартину Уайлдингу и Брайену Дэйлу (Зоологическая станция «Антон Дорн» (Неаполь, Италия) за большую методическую помощь в организации опытов по ри1с1>с1итр; профессору Давиде Файсу и Нино Олива из Университета Палермо (Италия) и академику САНУ Ракичу и сотрудникам Института биологии моря (Котор, СФРЮ) за. помощь в организации исследований. Автор признателен заведующему аквариальной ИБР Льву Гудкову за большую помощь в организации работы на зародышах шпорцевой лягушки. Искренняя признательность академику Т.М.Турпаеву за большую поддержку в организации исследований в кабинете электрофизиологии ИБР РАН и ценное обсущение. Нельзя не поблагодарить чл.-корр. РАН Л.А.Пирузяна, благодаря которому научная карьера автора не прервалась в самом начале. Автор всегда встречал самое доброжелательное отношение руководства Института биологии развития РАН в том числе академика Хрущова и доктора биологических наук Нечаевой, за что искренне благодарен. Последние по очереди, но не последние по глубине благодарности автор приносит своей семье, которая всегда относилась к его работе с пониманием и уважением. А.Б.Шмуклер оказал очень большую помощь в распечатке этой работы.

Заключение

От принципиального утверждения о роли трансмиттеров в эмбриогенезе и пионерских опытов, ее доказывающих, исследования, в том числе представленные в данной работе, прошли этап расширения и углубления знаний по этой проблеме и достигли этапа формирования целостных концепций. Универсальность распространения трансмиттерных систем в животном царстве, функциональная активность в ходе всего онтогенеза и консервативность каскадов передачи сигнала позволяют отнести их к фундаментальным регуляторным механизмам. Те черты, которые, согласно первоначальным представлениям, считались специфическими для эмбриональных трансмиттерных систем, в ходе исследований обнаружились в аналогичных механизмах клеток взрослого организма, а стандартные трансмиттерные механизмы дефинитивных клеток обнаруживаются на эмбриональных стадиях. Это подчеркивает генетическое единство трансмиттерной системы в ходе всего онтогенеза.

Функции множества эмбриональных трансмиттеров реализуются на уровне одной клетки с участием сложной системы вторичных мессенджеров. Предполагается, что это отражает эволюционное происхождение трансмиттерных систем как датчиков метаболических процессов. В дефинитивных клетках происходит специализация как трансмиттеров и вторичных мессенджеров, так и их функций. При всем разнообразии функций так или иначе они сводятся к пространственно-временной организации адресного сигнала. Как и в клетках взрослых организмов, трансмиттеры в донервных этапах развития являются «вершиной пирамиды» передачи клеточных сигналов, реализующихся через каскад вторичных мессенджеров.

Изученные в данной работе трансмиттерные механизмы, включающие как внутриклеточные, так и мембранные рецепторы, контролируют последовательно или одновременно практически все существенные события делений дробления, в том числе собственно цитокинез и межбластомерные взаимодействия. Наряду с открытой Г.А.Бузниковым способностью трансмиттеров внутриклеточно регулировать запуск делений дробления, уже на стадии двухклеточного зародыша, вероятно, возникает протосинаптический механизм трансмиттерной межклеточной передачи информации, обладающий значительным сходством с классической синаптической передачей, эволюционным предшественником которой он и является. К этим двум функциям в той или иной степени можно свести и все последующие проявления участия трансмиттеров в индивидуальном развитии, включая дефинитивные функции - синаптическую и управления пролиферацией. Можно предположить, что эти функции сами по себе и лежат в основе возникновения трансмиттерного управления клеточными процессами.

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Шмуклер, Юрий Борисович, Москва

1. Авдонин П.В., Ткачук В.А. 1994. Рецепторы и внутриклеточный кальций. М., Наука, 288 с.

2. Ашмарин И.П. с соавт. 1996. Нейрохимия (п/ред. И.П.Ашмарина и П.В.Стукалова). Изд-во Ин-та биомедицинской химии РАМН, М., 47 0 с.

3. Безуглов В.В, Маневич Е.М., Арчаков A.B., Бобров М.Ю., Куклев Д.В., Петрухина Г.Н., Макаров В.А., Бузников Г. А. 1997. Искусственно функционализированные жирные кислоты -новые липидные биорегуляторы. Биоорган.хим., 23, 211-220

4. Белоусов Л.В., Мещеряков В.Н. 1978. Пространственная организация дробления. Итоги науки и техники, сер. Морфология человека и животных. Антропология, 8, 5 100, ВИНИТИ, М.

5. Божкова В.П. 1993. Роль кортикальной ротации в формировании полярности зародышей. Онтогенез, 24, 3, 31-4 0

6. Божкова В.П., Исаева В. В. 1984. Нарушение межклеточных взаимодействий у зародышей морского ежа додецилсульфатом натрия. Онтогенез, 15, 5, 465-471

7. Божкова В.П., Квавилашвили И.Ш., Ротт H.H., Чайлахян Л.А. 1974. Соотношения между периодами циклических изменений электрических характеристик мембран и фазами цито- и кариокинеза в дробящихся яйцах вьюна и аксолотля. Цитология, 16, 5, 709-716

8. Божкова В.П., Николаев П.П., Петряевская В.В., Шмуклер Ю.Б. 1982. Межклеточные взаимодействия у ранних зародышей морских ежей. IV. Пространственная ориентация плоскостей дробления бластомеров. Онтогенез, 13, 6, 596 604

9. Божкова В.П., Харитон В.Ю., Чайлахян Л.М. 1984. Связь формообразовательного процесса с межклеточными взаимодействиями у ранних зародышей морских ежей. Онтогенез, 15, 2, 177 182

10. Божкова В.П., Петряевская В.В., Чайлахян Л.М., Хруст Ю.Р. 1990. Форболовый эфир нарушает характер дробления зародышей морского ежа. Онтогенез, 21, 2, 160-166

11. Бузников Г.А. 1963. Применение дериватов триптамина для изучения роли '5-окситриптамина (серотонина) в эмбриональном развитии беспозвоночных. Докл. АН СССР, 152, 5, 1270 1272

12. Бузников Г. А. 1967. Низкомолекулярные регуляторы зародышевого развития. Москва, Наука. 2 65 с.

13. Бузников Г.А. 1971. Роль медиаторов нервной системы в индивидуальном развитии. Онтогенез, 2, 1, 5-13

14. Бузников Г. А. 1977. Моноамины и ацетилхолин как регуляторы процесса эмбриогенеза основные итоги иперспективы исследований. В кн: Проблемы экспериментальной биологии, с. 304 310, М., Наука

15. Бузников Г.А. 1979. Биогенные моноамины в донервном периоде филогенеза и онтогенеза. В кн.: Катехоламинергические нейроны (п/ред. Т.М.Турпаева и А.Ю.Буданцева). с. 5 16, М., Наука

16. Бузников Г.А. 1987. Нейротрансмиттеры в эмбриогенезе. М. Наука

17. Бузников Г.А. 1989. Трансмиттеры в раннем эмбриогенезе: новые данные. Онтогенез, 20, 427-435

18. Бузников Г.А. и Манухин Б.Н. 1960. Влияние серотонина на эмбриональную моторику голожаберных моллюсков. Ж. общ. биол., 21, 5, 347 352

19. Бузников Г. А. и Манухин Б.Н. 1961. Серотониноподобное вещество в эмбриогенезе некоторых брюхоногих моллюсков. Ж. общ. Биол. 22, 3, 223 229

20. Бузников Г.А. и Чудакова И.В. 1963. Серотонин у развивающихся эмбрионов морского ежа Strongylocentrotus dröbachiensis. Докл. АН СССР, 152, 4, 1014 1016

21. Бузников Г.А. и Григорьев Н.Г. 1990. Эффект биогенных моноаминов и их антагонистов на кортикальный цитоплазматический слой у ранних зародышей морских ежей. Ж. эвол.биохим.физиол., 26: 614 622

22. Бузников Г. А. и Ракич J1. 1998. Холинорецепторы ранних (донервных) зародышей морских ежей. Росс, физиол. журн. им. И. М. Сеченова 84, 10, 7 9-95

23. Бузников Г.А., Манухин Б.Н., Сахарова A.B., Маркова JI.H. 1972. Изменения концентрации серотонина в дробящихся яйцеклетках морских ежей (флуориметрическое и гистохимическое определение). Онтогенез, 3, 3, 319-323

24. Бузников Г.А., Кабанкин A.C., Колбанов В.М., Ландау М.А., Ароян A.A., Овсепян Т.Р., Теплиц H.A. 1976а. О корреляции между эмбриотоксической активностью и липофильностью алкоксибензилалкиламинов. Хим.-фарм. ж., 10, 2, 23 27

25. Бузников Г.А., Манухин Б.Н., Ракич JT., Кудряшова Н.И., Хромов-Борисов Н.В. 1977. Влияние моноаминов, теплового шока и других факторов на связывание нейрофармакологических препаратов эмбрионами морских ежей. Ж. эвол. биохим. физиол., 13, 2, 173 178

26. Бузников Г. А., Ракич JI., Кудряшова Н.И., Овсепян Т. Р. и Хромов-Борисов Н.В. 1980. Стратифицированные зародыши морского ежа Arbacia lixula как модель для выявления межклеточных взаимодействий. Онтогенез, 11, 4, 411 416

27. Бузников Г.А., Мартынова Л.Е., Маршак Т.Л., Галанов А.Ю., Дунгенова P.E., Никитина Л.А., Милеуснич Р., Ракич Л. 1993. Действие активаторов и ингибиторов протеин киназы С на ранние зародыши иглокожих. Онтогенезг 24, 172-181

28. Бузников Г.А., Шмуклер Ю.Б., Лаудер Дж. 1997. Изменение физиологической роли нейротрансмиттеров в течение индивидуального развития. Росс. Физиол. Ж. им. И.М.Сеченова, 83, 10, 1-15

29. Вильсон Э. 1940. Клетка и ее роль в наследственности и развитии, том 2, М. Л., изд-во АН СССР, 497 с.

30. Гаузе Г. Г. 1974. Методы выделения субклеточных структур. В кн.: Методы биологии развития. М. Наука, с. 333 340

31. Гойда Е.А., Ротт H.H., Санагурский Д.И. 1981. Изменения трансмембранного потенциала зародышей вьюна при действии колхицина. Онтогенез, 13, 6, 643-647

32. Григорьев Н.Г. 1988. Кортикальный слой цитоплазмы -возможное место действия донервных трансмиттеров. Ж. эвол. биохим. 'физиол., 24, 5, 625 629

33. Детлаф Т.А., Руднева Т.Б. 1975. Шпорцевая лягушка Xenopus laevis daudin. В кн. : Объекты биологии развития, М., Наука, с. 392-442

34. Дьюкар Э. 1978. Клеточные взаимодействия в развитии животных. М., Мир, 330 с.

35. Заварзин A.A. 1945. Очерки эволюционной гистологии крови и соединительной ткани. М. Медгиз. Вып. 1. 292 с.

36. Захваткин A.A. 1949. Сравнительная эмбриология низших беспозвоночных. М., Советская Наука. 39 6 с.

37. Иванов A.B. 1968. Происхождение многоклеточных животных: Филогенетические очерки. Л., 288 с.

38. Иванов A.B. 1973. Trihoplax adhaerens Schulze и вопрос о происхождении Metazoa. Докл. АН СССР, 211, 1469-1471

39. Исаева В. В., Преснов Е. В. 1990. Топологическое строение морфологических полей. М., Наука, 256 с.

40. Кантор Ч. и Шиммел П. 1985. Биофизическая химия. Т. 3. Москва, Мир, 534 с.

41. Коробцов Г.Н., Сорокин Л.В. 1974. Изменение мембранного потенциала оплодотворенных яйцеклеток морского ежа при действии некоторых нейрофармакологических препаратов. Онтогенез, 5, 3, 309-313

42. Коштоянц Х.С. 1951. Белковые тела, обмен веществ и нервная регуляция. М., изд-во АН СССР

43. Коштоянц Х.С. 1963. Проблемы энзимохимии возбуждения и торможения и эволюции функций нервной системы. Изд. АН СССР, Москва

44. Крепе Е.М. 1981. Липиды клеточных мембран. Изд. "Наука", Ленинград, 339 с.

45. Лазарева A.B., Ротт H.H., Гойда Е.А., Шиян Р.В., Михайлова Г.В. 1984. Изменение содержания циклического АМФ в зародышах вьюна на протяжении клеточного цикла в период дробления. Онтогенез, 15, 2, 171 177

46. Лакин Г.Ф. 1973. Биометрия. М. Высшая школа, 343 с.

47. Ландау М.А., Бузников Г.А., Кабанкин A.C., Колбанов В.М., Суворов H.H., Теплиц H.A. 1977. Эмбриотоксическая активность производных индолов. Хим.-фарм. ж11, 1, 57 -60

48. Ленинджер А. 1974. Биохимия. Изд. Мир, Москва, 957 с.

49. Малахов В. В. 1990. Загадочные группы морских беспозвоночных. Изд-во Московского университета. 14 4 с.

50. Манухин Б.Н., Бузников Г.А. 1963. Серотонин в эмбриогенезе морских беспозвоночных. Ж. общ.биол., 24, 1, 23 29

51. Манухин Б.Н., Волина Е.В., Маркова Л.Н., Ракич Л., Бузников Г.А. 1980. Новые данные о биогенных моноаминах развивающихся эмбрионов морских ежей. Ж. эвол. биохим. физиол., 16, 2, 105 111

52. Манухин Б.Н., Шайымов Б.К., Мезидов Х.А., Московкин Г.Н., Султанов Ф.Ф. 1990. Влияние гипертермии на связывание ß-адреноблокатора синаптосомами мозга крысы. Докл. АН СССР, 311, 5, 1268-1271

53. Маркова Л.Н., Бузников Г.А. 1980. Действие триптамина и серотонина (5-окситриптамина) на развивающихся зародышей морских ежей. Тез. докл. III Всесоюзн. конф., поев. 80-летию Х.С.Коштоянца "Физиология и биохимия медиаторных процессов", с. 132, М., Наука

54. Маркова Л.Н., Садыкова К.А. и Сахарова Н.Ю. 1990. Эффект антагонистов биогенных моноаминов на развитие доимплантационных зародышей мышей in vitro. Ж. эвол. биохим. физиол. 26, 72 6 732

55. Мартынова Л.Е. 1981. Гаструляция у морского ежа Strongylocentrotus droebachiensis в норме и при обработке различными веществами. Онтогенез, 12, 310 -315

56. Мартынова Л.Е., Белоусов Л.В. 1978. Влияние нейрофармакологических препаратов и колхицина на морфогенетические процессы вэмбриональных клетках амфибий. Онтогенез, 9, 4, 382 389

57. Мещеряков В.H. 1978. Ориентация веретен дробления у легочных моллюсков. I. Роль формы бластомеров в ориентации веретен второго деления. Онтогенез, 9, 6, 558 566

58. Никитина Л.А., Мальченко Л.А., Теплиц H.A., Бузников Г.А. 1988. Эффект серотонина и его аналогов на созревание ооцитов in vitro. Онтогенез, 19, 336-343.

59. Никитина Л.А., Трубникова О.В., Бузников Г.А. 1993. Эффекты нейротрансмиттеров и их антагонистов на созревание ооцитов. Эффект антагонистов серотонина на созревание in vitro ооцитов амфибий. Онтогенез, 24, 229-236

60. Проссер Л. 1977. Питание. В кн.: Сравнительная физиология, п/ ред. Проссера Л., "Мир", Москва, с. 241-279

61. Ростомян М.А., Абрамян К.С., Бузников Г.А., Гусарева Э.В. 1985. Электронно-цитохимическое выявление аденилатциклазы у ранних эмбрионов морского ежа. Цитология, 27, 877-881

62. Садокова И.Е. 1980. Влияние нейрофармакологических препаратов на содержание циклического аденозинмонофосфата в ранних эмбрионах морских ежей. Тез. докл. III Все с. конф., поев. 80-летию Х.С.Коштоянца, с. 173, М., Наука

63. Садокова И.Е. 1982. Динамика содержания циклических нуклеотидов в развивающихся зародышах морских ежей Scaphechinus mirabilis. Онтогенез, 13, 4, 435 440

64. Садыкова К.А., Сахарова Н.Ю. и Маркова Л.Н. 1992. Действие циклических нуклеотидов на чувствительность ранних зародышей мыши к антагонистам биогенных моноаминов. Онтогенез 23, 379-384

65. Сахаров Д.А. 1979. Медиаторы. В кн.: Общая физиология нервной системы. Руководство по физиологии, гл. б, с. 218- 277, Л., Наука

66. Сахаров Д. А. 1990. Множественность нейротрансмиттеров: функциональное значение. Ж. эвол. биохим. физиол. 26, 734- 741

67. Сорокин Л. В. 1974. Электрические характеристики зародышей морских ежей в норме и при действии некоторых нейрофармакологических препаратов. Автореф. дисс. на соиск. степ. канд. биол. наук. М. KMC Минмонтажспецстрой СССР

68. Ткачук В.А. 1998. Фософоинозитидный обмен и осцилляция ионов Са2+. Биохимия, 63, 3, 4 9-58

69. Ткачук В.А. 1999. Мембранные рецепторы и внутриклеточный кальций. Биол.Мембр., 16, 2, 212-229

70. Турпаев Т.М., Юрченко О.П., Григорьев Н.Г. 1985. Изменение ответа на экстраклеточную аппликацию ацетилхолина при внутриклеточной перфузии изолированных нейронов биогенными моноаминами. Докл. АН СССР, 280, 6, 1495 1498

71. Турпаев Т.М., Юрченко О.П., Григорьев Н.Г. 1986. Изменение ацетилхолиновых ответов префузируемых нейронов прудовика при действии серотонина снаружи и изнутри клетки. Нейрофизиология, 18, 3, 326 332

72. Черномордик JI.В. 1985. Виомедицинские приложения электрического пробоя клеточных мембран. Усп. совр. биол., 99, 1, 67 80

73. Шмуклер Ю.Б. 1976. Действие химических аналогов серотонина на формирование и функционирование ресничного аппарата зародышей морских ежей. Тез. II Всесоюзн. конф. "Физиология и биохимия медиаторных процессов", М., с.149

74. Шмуклер Ю.Б., Садокова И.Е. 1981. Роль циклических нуклеотидов в регуляции типа дробления половинных зародышей морского ежа Scaphechinus mirabilis. Тез. Докл. VI Всес. совещ. эмбриологов, с. 204 205, М., Наука

75. Юрченко О.П. 1988. Механизмы взаимодействия нейротрансмиттерных систем. Ж. эвол. биохим. физиол., 24, 5, 630 635

76. Юрченко О.П., Турпаев Т.М., Коневич Д., Григорьев Н.Г., Ракич Л. 1985. Влияние инъекции дофамина на эндогенную активность и ацетилхолиновые ответы идентифицированных пачечных нейронов аплизии. Докл. АН СССР, 284, 1, 248252

77. Abdelmajid Н., Rivaillier P., Krantic S., and Guerrier P. 1994. Differences in tyrosine phosphorilation of oocyte key proteins during 5-HT-induced meiosis reinitiation in two bivalve species. Exptl Cell Res. 212, 422-425

78. Ahn S., Maudsley S., Luttrell L.M., Lefkowitz R.J., Daaka Y. 1999. Src-mediated tyrosine phosphorylation of dynamin is required for p2adrenergic receptor internalization and mitogen-activated protein kinase signaling. J. Biol. Chem., 274, 3, 1185-1188

79. Aimar C., Grant N. 1992. The role of calcium, polyamines and centrosomes in the formation and organization of cleavage furrows in amphibian eggs. Biol. Cell, 76, 1, 2331

80. Alberts В., Bray D., Lewis J., and Watson J.D. 1989. The Molecular Biology of the Cell. Garland. New York.

81. Alder J., Lu В., Valtorta F., Greengard P., and Poo M.M. 1992. Calcium-dependent transmitter secretion reconstituted in Xenopus oocytes: requirement for synaptophysin. Science, 257, 657-661

82. Allbritton N.L., Meyer Т., Stryer L. 1992. Range of messenger action of calcium ion and inositol 1,4,5 triphosphate. Science, 258, 1812 1815

83. Allbritton N.L., Oancea E., Kuhn M.A., Meyer T. 1994. Proc. Natl Acad. Sci. USA, 91, 12458 12462

84. Allemand D., De Renzis G., Girard J.P., and Payan P. 1987. Activation of amino acid uptake at fertilization in the sea urchin egg. Exptl Cell Res., 169, 169 177

85. Amy C.M., Rebhun L.I. 1977. Properties of adenylate cyclase activity during early sea urchin development. Exptl Cell Res., 104, 2, 399 410

86. Ananth U.S., Leli U., Hauser G. 1987. Stimulation of phosphoinositide hydrolysis by serotonin in C6 glioma cells. J. Neurochem., 48, 253 261

87. Anderson E. 1970. A cytological study of the centrifuged whole, half, and quarter eggs of sea urchin Arbacia punctulata. J. Cell Biol., 47, 711-733

88. Arion D., L. Meijer, B. Brizuela, and D. Beach. 1988. Cdc2 is a component of the M-phase specific HI kinase: evidence for identity with MPF. Cell, 55, 371 378

89. Arnold J.M. 1975. An effect of calcium in cytokinesis as demonstrated with ionophore A23187. Cytobiologie, 11, 1, 1 9

90. Arnoult C. & Villaz M. 1994. Differential developmental fates of the two calcium currents in early embryos of the ascidian Clona intestinalis. J. Membr. Biol., 137, 127-135

91. Ashkenazi A., Ramachandran J., Capon D.J. 1989. Acetylcholine analogue stimulates DNA synthesis in brain-derived cells via specific muscarinic receptor subtypes. Nature, 340, 6229, 146 150

92. Asnes C.F., Schroeder T.E. 1979. Cell cleavage: ultrastructural evidence against equatorial stimulation by aster microtubules. Exptl Cell Res., 122, 327 338

93. Atlas D., Steer M. L., Levitzki A. 1974. Stereospecific binding of propranolol and catecholamines to the J3-adrenergic receptor. Proc. Natl Acad. Sci. USA, 71, 10, 4246 4248

94. Aunis D., Perrin D. 1984. Chromaffin granule membrane-F-actin interactions and spectrin-like protein of subcellular organelles: a possible relationship. J. Neurochem., 42, 1558 1569

95. Avery J., Hodel A., and Whitaker M. 1997. In vitro exocytosis in sea urchin eggs requires a synaptobrevin-related protein. J. Cell Sci., 110(Pt 14), 1555 1561

96. Ayabe T., Kopf G., and Schultz R. 1995. Regulation of mouse egg activation presence of ryanodine receptors and effects of microinjected ryanodine and cyclic ADP ribose on unseminated and inseminated eggs. Development, 121, 2233 - 2244

97. Bachs 0., Agell N., Carafoli E. 1994. Calmodulin and calmodulin binding proteins in the nucleus. Cell Calcium, 16, 4, 289 296

98. Baitinger C., Alderton J., Poenie M., Schulman H., Steinhardt R. A. 1990. Multifunctional Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase is necessary for nuclear envelope breakdown. J. Cell Biol., Ill, 1762-1773

99. Baker M.W., Vohra M.M., and Croll R.P. 1993. Serotonin depletors, 5,7-dihydroxytryptamine and p-chlorophenylalanine, cause sprouting in the CNS of the adult snail. Brain Res. 623, 311-315

100. Baker P.C., Quay W.B. 1969. 5-hydroxytryptamine metabolism in early embryogenesis, and the development of brain and retinal tissues. A review. Brain Res., 12, 2, 272 295

101. Baker P.P., Warner A.E. 1972. Intracellular calcium and cell cleavage in early embryos of Xenopus laevis. J. Cell Biol., 53, 3, 579-581

102. Balasubramanian M.K., Helfman D.M., and Hemmingsen S.M. 1992. A new tropomyosin essential for cytokinesis in the fission yeast S. pombe. Nature (L.), 360, 84 87

103. Balasubramanian M.K., Hirani B.R., Burke J.D., and Gould K.L. 1994. The Schizosaccharomyces pombe cdc3+ gene encodes a profilin essential for cytokineis. J. Cell Biol., 125, 1289 1301

104. Bardoul M., Drain M.-J., and König N. 1998. Modulation of intracellular calcium in early neural cells by non-NMDA ionotropic glutamate receptors. Persp. Dev. Neurobiol., 5, 4, 353 371

105. Bell G. 1998. Volvox Molecular-genetic origins of multicellularity and cellular differentiation, by D.L. Kirk - Development. Science, 282, 5387, 248

106. Bennett M.V.L. 1978. Junctional permeability. In: Intercellular juncitons and development (Feldman, Gilula, Pitts, eds). pp. 25 36. London, Chapman and Hall.

107. Bennett M.V.L., Spira M.E., Spray D.C. 1978. Permeability of gap junctions between embryonic cells of Fundulus. Developm. Biol., 65, 1, 114 123

108. Berridge M.J. 1975a. Hypothesis. Control of cell division: a unifying hypothesis. J. Cycl. Nucl. Res., 1, 6, 305 320

109. Berridge M.J. 1975b. The interaction of cyclic nucleotides and calcium in the control of cellular activity. Adv. Cycl. Nucl. Res., 6, 1-98.

110. Berridge M.J. 1984. Cellular control through interactions between cyclic nucleotides and calcium. Adv. Cycl. Nucl.Protein Phosphoryl. Res., 17, 329 336.

111. Berridge M.J. 1987. Inositoltriphosphate and diacylglycerol: two interacting second messengers. Ann. Rev. Biochem. 56, 159-193

112. Berridge M.J. 1993a. Inositol triphosphate and cell signalling. Nature, 361, 315 325

113. Berridge M.J. 1993b. Intracellular channels and calcium spiking. Biomed. Res., 14(Suppl. 2), 21-27

114. Berridge M.J. 1995. Calcium signalling and cell proliferation. Bioessays, 17, 491-500

115. Berridge M.J. 1996. Regulation of calcium spiking in mammalian oocytes thhrough a combinaiton of inositoltriphosphate-dependent entry and calcium release. Mol. Hum. Reprod., 2, 386 388

116. Berridge M.J., Irvine R.F. 1989. Inositol phosphates and cell signalling. Nature (L.), 341, 197 205

117. Berridge M.J., Dupont G. 1994. Spatial and temporal signalling by calcium. Curr. Opin. Cell Biol., 6, 267-274

118. Berrie C., Cuthbertson K., Parrington J., Lai F.A., Swann K. 1996. A cytosolic sperm factor triggers calcium oscillations in rat hepatocytes. Biochem. J., 313, 369 -372

119. Blum J.J. 1970. Biogenic amines and metabilic control in Tetrahymena. In: Biogenic amines as physiological regulators. Blum J.J. pp. 95 118. New Jersey, Prentice-Hall, Inc.

120. Bodis J., Torok A., Tinneberg H.R., Hanf V., Hamori M., and Cledon P. 1992. Influence of serotonin on progesterone and estradiol secretion of cultured human granulosa cells. Fertil. Steril. 57, 1008-1011.

121. Bodis J., Tinneberg H.R., Torok A., Cledon P., Hanf V., and Pappenfuss F. 1993b. Effect of noradrenaline and dopamine on progesterone and estradiol secretion of human granulosa cells. Acta Endocrinol. Copenh. 129, 165-168

122. Bolsover S.R., Silver R.A., and Whitaker M.J. 1993. Ratio imaging measurement of intracellular calcium and pH. In: Electronic light microscopy (Ed. D. Shotton), Wiley-Liss, New York, p. 181 210

123. Bosser R., Aligue R., Guerini D., Agell N., Carafoli E., Bachs 0. 1993. Calmodulin can modulate protein phosphorylation in rat liver veils nuclei. J. Biol. Chem., 268, 21, 15477 15483

124. Bourne H.R. 1995. Team blue sees red. Nature, 376, 727 -729

125. Boveri T. 1901. Die Polaritat von Ovocyte, Ei und Larve des Strongylocentrotus lividus. Zool. Jahrb., Abt. F. Anat. U. Ont., 14, 4, 630 653

126. Bowerman B., Eaton B.A. and Priess J.R. 1992. Skn-1, a maternally expressed gene required to specify the fate of ventral blastomeres in early C.elegans embryo. Cell, 68, 1061-1075

127. Bowerman B., Draper B.W., Mello C.C. and Priess J.R. 1993. The maternal gene skn-1 encodes a protein that is distributed unequally in early C.elegans embryos. Cell, 74, 443- 452

128. Boyd C.A.R. 1979. Chemical neurotransmission: a hypothesis concerning the evolution of neurotransmitters substances. J. Theoret. Biol., 76, 4, 413 417

129. Boynton A.L., Whitfield J.F. 1983. The role of cyclic AMP in cell proliferation: a critical assessment of the evidence. Adv. Cycl. Nucl. Res., 15, 193-294

130. Brachet J., Donini-Denis S. 1978. Studies on maturation and differentiation without cleavage in Chaetopterus variopedatus. Effects of ions, ionophores, sulphhydril reagents, colchicine and cytochalasine B. Differentiation, 11, 1, 19 37

131. Bradbury E.M., R.J. Inglis, and H.R. Matthews. 1974. Control of cell division by very lysine rich histone (Fl) phosphorylation. Nature (L.), 247, 257 261

132. Brandelli A., Miranda P.V., and Tezon J.G. 1996. Voltage-dependent calcium channels and G(i) regulatory protein mediate the human sperm acrosomal exocytosis induced by N-acetylglucosaminyl/mannosyl neoglycoproteins. J. Andrology, 17, 5, 522-529

133. Brandes L.J., LaBella F.S., Glavin G.B., Paraskevas F., Saxena S.P., Nicol A., and Gerrard J.M. 1990. Histamine as an intracellular messenger. Biochem. Pharmacol. 40, 16771681

134. Brehteric L., Lee G.E., Lunt E., Wragg W.R. and Edge N.D. 1959. Congeners of pempidine with high ganglion-blocking activity, Nature (L.), 184, 1707-1709

135. Brooker G., Seki T., Croll D. and Wahlstedt C. 1990. Calcium wave evoked activation of endogenous orexogenously expressed receptors in Xenopus oocytes. Proc. Natl. Acad.Sci. USA 87, 2813-2817

136. Brown E., Kendall D.A., and Nahorski S.R. 1984. Inositol phospholipid hydrolysis in rat cerebral cortical slices: I. Receptor characterization. J. Neurochem.,42, 1379 -1387

137. Brown K.M. and Shaver J.R. 1987. Subcellular distribution of 3H.serotonin binding sites in blastula, gastrula, prism and pluteus sea urchin embryos. Comp. Biochem. Physiol. 87C, 139 148

138. Brown K.M. and Shaver J.R. 1989. 3H.Serotonin binding to blastula, gastrula, prism and pluteus sea urchin embryo cells. Comp. Biochem. Physiol. 93C, 281 285

139. Brown K.M. and Anitole K.G. 1993. Serotonin in early embryogenesis. Trends Comp. Biochem. Physiol., 1, 281 -288

140. Brownlee C., Dale B. 1990. Temporal and spatial correlation of fertilization current, calcium waves and cytoplasmic contraction in eggs of Ciona intestinalis. Proc. R. Soc. Lond. B. Biol. Sci., 23, 239, 321 328

141. Buchner K., 1995. Protein kinase in the transduction of signals toward and within the cell nucleus. Eur. J. Biochem., 228, 2, 211 221

142. Budnik V., Wu C.F., and White K. 1989. Altered branching of serotonin-containing neurons in Drosophila mutants unable to synthesize serotonin and dopamine. J. Neurosci. 9, 2866-2877

143. Burden H.W., Lawrence I.E. 1973. Presence of biogenic amines in early rat development. Am. J. Anat., 136, 2, 251- 257

144. Burgering M.T. & Bos J.L. 1995. Regualtion of Rasmediated signaling: more than one way to skin a cat. Trends Biochem. Sci., 20, 18 22

145. Burgess D.R., Schroeder T.E. 1977. Polarized bundles of actin filaments within microvilli of sea urchin eggs. J. Cell. Biol., 74, 1032 1037

146. Biirk R.R. 1968. Reduced adenyl cyclase activity in a polyoma virus transformed cell line. Nature (L.), 219, 5160, 1272 1275

147. Bustamante J.O., Liepins A., Hanover J.A. 1994. Nuclear pore complex ion channels. Molec. Membr. Biol., 11, 141150

148. Buznikov G.A. 1973. 5-hydroxytryptamine, catecholamines, and some related substances in early embryogenesis. In: Comparative Pharmacology (M:. J.Michelson, ed.), v. II, 593- 623

149. Buznikov G.A. 1980. Biogenic monoamines and acetylcholine in Protozoa and metazoan embryos. In: Neurotransmitters. Comparative aspects (J. Salanki, T.M.Turpaev, eds). pp.7 29. Budapest, Akadem.Kiado

150. Buznikov G.A. 1981. Neurotransmitters in early embryogenesis. In: Problems of developmental biology. M., Mir Publishers, pp. 76-104

151. Buznikov G.A. 1984. The action of neurotransmitters and related substances on early embryogenesis. Pharmac. Ther., 25, 23-59

152. Buznikov G.A. 1990a. Neurotransmitters in embryogenesis. Chur, Academic Press. 526 p.

153. Buznikov G.A., Shmukler Yu.B. 1981. The possible role of "prenervous" neurotransmitters in cellular interactions of early embryogenesis: a hypothesis. Neurochem. Res., 6, 55 -69.

154. Buznikov G.A., Chudakova I.V., Zvezdina N.D. 1964. The role of neurohumors in early embryogenesis. I. Serotonin content of developing embryos of sea urchin and loach. J. Embryol. Exp. Morph., 12, 3, 563 573

155. Buznikov G.A., Sakharova A.V., Manukhin B.N., Markova L.N. 1972. The role of neurohumors in early embryogenesis. IV. Fluorometric and histochemical study of serotonin in cleaving eggs and larvae of sea urchins. J. Embryol. Exp. Morph., 27, 2, 339 351

156. Buznikov G.A., Rakic L., Turpaev T.M., Markova L.N. 1974. Sensitivity of sea urchin embryos to antagonists of acetylcholine and monoamines. Exptl Cell Res., 86, 2, 317 324

157. Buznikov G.A., Manukhin B.N., Rakic: L. 1979. The sensitivity of whole, half, and quarter sea urchin embryos to cytotoxic neuropharmacological drugs. Comp. Biochem. Physiol. 64C, 1, 129 135

158. Buznikov G.A., Mileusnic R., Yurovskaya M.A., Rakic L. 1984a. Effect of calcium ionophore A23187 on the sensitivity of early sea urchin embryos to cytotoxic neuropharmacological drugs. Comp. Biochem. Physiol., 790, 2, 425-4271.

159. Buznikov G.A., Nikitina L.A., Galanov A.Yu., Malchenko L.A., and Trubnikova O.B. 1993. The control of oocytematuration in the starfish and amphibians by serotonin and its antagonists. Int. J. Dev. Biol. 37, 363-364.

160. Buznikov G.A., Shmukler Yu.B., and Lauder J.M. 1996. From oocyte to neuron: do neurotransmitters function in the same way throughout development? Molec. Cell. Neurobiol. 16, 532-559.

161. Cameron R.A., Smith L.C., Britten R.J., Davidson E.H. 1994. Ligand dependent stimulation of introduced mammalian brain receptors alters spicule symmetry and other morphogenetic events in sea urchin embryos. Mechanisms of Development, 45, 1, 31-47

162. Cameron R.A., Leahy P.S., and Davidson E.H. 1996. Twins raised from separated blastomeres develop into sexually mature Strongylocentrotus purpuratus. Dev. Biol., 178, 514-519

163. Campbell A.K. 1985. Intracellular calcium. John Wiley and Sons limited. Chichester e.t.s., 56 p.

164. Capasso A., Parisi E., De Prisco P., De Petrocellis B. 1987. Catecholamine secretion and adenylate cyclase activation in sea urchin eggs. Cell Biol.Int. Rep., 11, 457-463.

165. Capasso A., Creti P., De Petrocellis B., De Prisco P., Parisi E. 1988. Role of dopamine and indolamine derivatives in the regulation of sea urchin adenylate cyclase. Biochem. Biophys. Res. Comm., 154, 758 -764

166. Carginale V., Capasso A., Madonna L., Borelli L., Parisi E. 1992. Adenylate cyclase from sea urchin eggs is positively and negatively regulated by D-l and D-2 dopamine receptors. Exptl Cell Res., 203, 491-494

167. Carginale V., Borrelli L., Capasso A., Parisi E. 1995. Changes in dopamine uptake and developmental effects of dopamine receptor inactivation in the sea urchin. Molec. Reprod. Develop40, 379-385

168. Castañeda M., Tyler A. 1968. Adenyl cyclase in plasma membrane preparations of sea urchin eggs and its increase in activity after fertilization. Biochem. biophys. Res. comm., 33, 5, 782 787

169. Cavalli, A., Dunant, Y., Leroy, C., Meunier, F.-M., Morel, N., and Israel, M. 1993. Antisense probes against mediatophore block transmitter release in oocytes primed with neuronal mRNAs. Eur. J. Neurosci. 5, 1539-1544

170. Chandler D.E. 1991. Multiple intracellular signals coordinate structural dynamics in the sea urchin egg cortex at fertilization. J. Electron Microsc. Tech., 17, 266-293

171. Chandler D.E., Heuser J. 1979. Membrane fusion during secretion: cortical granule exocytosis in sea urchin eggs as studied by quick-freezing and freeze fracture. J. Cell Biol., 83, 91-108

172. Chang F. & Nurse P. 1996. How fission yeast fission in the middle. Cell, 84, 191 194

173. Chang F., Woollard A., and Nurse P. 1996. Identification and characterization of fission yeast mutants defective in actin ring assembly and placement. J. Cell Sci., 109, 131 142

174. Chang F., Drubin D., Nurse P. 1997. Cdcl2p, a protein required for cytokinesis in fission yeast, is a component of the cell division ring and interacts with profilin. J. Cell Biol., 137, 1, 169-182

175. Chant J. & Stowers L. 1995. GTPase cascades choreographing cellular behaviour: movement, morphogenesis, and more. Cell, 81, 1-4

176. Charbonneau M. & Grandin N. 1992. A Hypothesis on p34(cdc2) Sequestration Based on the Existence of Ca2+-Coordinated Changes in H+ and MPF Activities During Xenopus Egg Activation. Biol. Cell, 75, 3, 165-172

177. Charp P.A., Whitson J.L. 1980, Calcium and cyclic nucleotides interactions in the cell cycle (ed. Whitson J.A.), N.Y., Academic press, pp. 309-334

178. Cheng Y., Prusoff W.H. 1973. Relationship between the inhibition constant (Ki) and the concentration of inhibitor which causes 50 per cent inhibition (I50) of an enzymatic reaction. Biochem.Pharmacol., 22, 3099-3108

179. Chiba K., Alderton J.M., Hoshi M., Steinhardt R.A. 1999. Activation of the proteasomes of sand dollar eggs at fertilization depends on the intracellular pH rise. Develop. Biol., 209, 1, 52 59

180. Chrzanowska-Wodnicka M. & Burridge K. 1996. Rho-stimulated contractility drives the formation of stress fibers and focal adhesions. J.Cell Biol., 133, 1403 1415

181. Ciapa B. and Whitaker M. 1986. Two phases of inositol polyphosphate and diacylglycerol production at fertilization. FEBS Lett. 195, 347-351

182. Ciapa B. & Denadai C. 1996. Role of integrins and polyphosphoinositide metabolism during fertilization in sea urchin egg and hamster oocyte. Invert. Reprod. & Developm., 30, 1-3, 99-108

183. Ciapa B. & Epel D. 1996. An early increase in cGMP follows fertilisation of sea urchin eggs. Biochem. Biophys. Res. Comm., 25, 633 636

184. Ciapa B., Borg B., and Whitaker M. 1992. Polyphosphoinositide metabolism during the fertilization wave in sea urchin eggs. Development, 115, 1, 187-195

185. Ciapa B., Pesando D., Wilding M., Whitaker M. 1994. Cell-cycle calcium transients driven by cyclic changes in inositol trisphosphate levels. Nature, 368, 875 878

186. Clayton, L. & Johnson, M.H. 1998. Tropomyosin in preimplantation mouse development: Identification, expression, and organization during cell division and polarization. Exptl Cell Res., 238, 2, 450-464

187. Coffino P., Gray J.W., Tomkins G.M. 1975. Cyclic AMP, a nonessential regulator of the cell cycle. Proc. Natl Acad. Sci. USA, 72, 3, 878 882

188. Colas P., Serras F., and Vanloon A.E. 1993. Microinjection of Sucl transcripts delays the cell cycle clock in Patella vulgata embryos. Int. J. Developm. Biol., 31, 4, 589-594.

189. Cone C.D. 1976. Variation of the transmembrane potential level as a basic mechanism of the mitotic control. Oncology, 24, 438 470.

190. Conn P.J. & Sanders-Bush E. 1984. Selective 5HT2 antagonists inhibit serotonin stimulated phosphatidylinositol metabolism in cerebral cortex. Neuropharmacology, 23, 993 996

191. Conn P.J. & Sanders-Bush E. 1985. Serotonin-stimulated phosphoinositide turnover: mediation by the S2 binding site in rat cerebral cortex but not in subcortical regions. J. Pharmacol. Exp. Ther., 234, 195 203

192. Connor J.H., Olds J.L., Lester D.S., McPhie D.L., Senft S.L., Johnson J.A., Alkon D.L. 1992. Heterogenous distribution of fluorescent phorbol ester signal in living sea urchin embryos. Biol. Bull., 183, 365-366

193. Conrad G. W., Davis S.E. 1977. Microiontophoretic injection of calcium ions or cyclic AMP causes rapid shape changes in fertilized eggs of Ilyanassa obsoleta. Dev. Biol., 61, 2, 184 201.

194. Cooke J. 1975. The emergence and regulation of spatial organization in early animal development. Ann. Rev. Biophys. Bioeng., 4, 185 217

195. Coon S.L., Bonar D.B. 1987. Pharmacological evidence that alphal-adrenoceptors mediate methamorphosis of the pacific oyster, Crassostrea gigas. Neuroscience, 23, 11691174

196. Costello D.P. 1945. Experimental studies of germinal localization in Nereis. I. The development of isolated blastomeres. J. Exp. Zool., 100, 1, 19-66

197. Cox D.A., Cohen M.L. 1995. 5-HT2B receptor signaling in the rat stomach fundus: Dependence on calcium influx, calcium release and protein kinase C. Behav. Brain Res., 73, 1-2, 289-292

198. Creton R., Speksnijder J.E., Jaffe L.F. 1998. Patterns of free calcium in zebrafish embryos. J. Cell Sci., lll(Pt 12), 1613-1622

199. Crick F.H.C. 1970. Diffusion in embryogenesis. Nature, 225, 420 422

200. Crossley I., Whalley T., and Whitaker M. 1991. Guanosine 5'-thiotriphosphate may stimulate phosphoinositide messenger production in sea urchin eggs by a different route than the fertilising sperm. Cell Reg., 2, 121 133

201. Csaba G. 1981. Ontogeny and phylogeny of hormone receptors. Basel, Karger, 172 p.

202. Csaba G. 1984. The present state in the phylogeny and ontogeny of hormone receptors. Hormone Metabol. Res16, 329-335

203. Csaba G., Nagy S.U. 1976. Effect of vertebrate hormones on the cyclic AMP level in Tetrahymena. Acta biol. med. germ., 35, 12, 1399 1401

204. Currie K., Swann K., Galione A., and Scott R. 1992. Activation of calcium-dependent currents in cultured dorsal root ganglion neurons by a sperm factor and cyclic ADP ribose. Mol. Biol. Cell., 3, 1415 1425

205. Cuthbertson K. & Cobbold P. 1985. Phorbol ester and sperm activate mouse oocytes by inducing sustained oscillation in cell calcium. Nature, 316, 541 542

206. Czihak G. 1973. The role of astral rays in early cleavage of sea urchin eggs. Exptl Cell Res., 83, 2, 424 -426

207. Czihak G., Horstadius S. 1970. Transplantation of RNA-labeled micromeres into animal halves of sea urchin embryos. A contribution to the problem of embryonic induction. Developm. Biol., 22, 1, 15 30

208. Dale H.H. 1935. Pharmacology abd nerve endings. Proc. Roy. Soc. Med., 28, 4 319 322

209. Dale B. 1988. Primary and secondary messengers in the activation of ascidian eggs. Exptl Cell Res., 207, 205 -211

210. Dale B. & Santella L., 1985. Sperm-oocyte interaction in the sea urchin. J. Cell Sci., 74, 153 167

211. Dale B., DeFelice L., Ehrenstein G. 1985. Injection of soluble sperm extract into sea urchin eggs triggers the cortical reaction. Experientia, 41, 1068 1070

212. Dale B., Talevi R., De Felice L.J. 1991. L-type Ca2+currents in ascidian eggs. Exptl Cell Res., 192, 302 -306

213. Dale B., DeFelice L.J., Kyozuka K., Santella L., Tosti E. 1994. Voltage clamp of the nuclear envelope. Proc. Roy. Soc. London Ser.B, 255, 119-124

214. Dale B., Tosti E., Iaccarino M. 1995. Is the plasma membrane of human oocyte reorganised following fertilisation and early cleavage? Zigote, 3, 31 36

215. Dale B., Fortunato A., Monfrecola V., and Tosti E. 1996. A soluble sperm factor gates calcium-activated potassium channels in human oocytes. J. Assist. Reprod. Genet., 13, 573 577

216. Dale B., Yazaki I., Tosti E. 1997. Polarized distribution of L-type calcium channels in early seaurchin embryos. Amer. J. Physiol. — Cell Physiol. 42(3) : C822-C825.

217. Dan K. 1972. Modified cleavage pattern after suppresion of one mitotic division. Exptl Cell Res., 12, 1, 69 73

218. Dan K., Ikeda M. 1971. On the system controlling the time of micromere formaiton in sea urchin embryos. Develop., Growth & Differ., 13, 4, 285 301

219. Dan Y., and Poo M.M. 1992. Quantal transmitter secretion from myocytes loaded with acetylcholine. Nature 359: 733736

220. Danilchik M.V., Funk W.C., Brown E.E., Larkin K. 1998. Requirement for microtubules in new membrane formation during cytokinesis of Xenopus embryos. Developm. Biol., 194, 1, 47 60

221. Dascal N., Landau E.M. 1980. Types of muscarinic response in Xenopus oocytes. Life Sci., 27, 17, 1423 -1428

222. Dascal N., Landau E., Lass Y. 1984. Xenopus oocyte resting potential, muscarinic responses and the role of calcium and guanosine 3',5'-cyclic monophosphate. J.Physiol. (L.), 352, 551-574

223. Dautov S.Sh. and Nezlin L.P. 1992. Nervous system of the Tornaria larva (Hemichordata: Enteropneusta). A histochemical and ultrastructural study. Biol.Bull. 183: 463 475

224. Davenport R.W., and Kater S.B. 1992. Local increases in intracellular calcium elicit local filopodial responses in helisoma neuronal growth cones. Neuron, 9, 405 416

225. Davidson E.H. 1968. Gene Activity in Early Development. First Edition. N.Y., Academic Press

226. Davidson E.H. 1986. Gene Activity in Early Development. Third Edition. Orlando, Florida, Academic Press

227. Davidson E.H. 1989. Lineage-specific gene expression and the regulative capacities of sea urchin embryo: A proposed mechanism. Development, 105, 421-445

228. Davidson E.H., Cameron R.A., and Ransick A. 1998. Specification of cell fate in the sea urchin embryo: summary and some proposed mechanisms Essay in Development. Development, 125, 17, 3269-3290

229. De Laat S.W., Buwalda R.J.A., Habets A.M.M.C. 1974. Intracellular ionic distribution, cell membrane permeability and membrane potential of the Xenopus egg during first cleavage. Exptl Cell Res., 89, 1, 1-14

230. De Vitry F., Hamon M., Catelon J., Dubois M. , and Thibault J. 1986. Serotonin initiates and autoamplifies its own synthsis during mouse central nervous system development. Proc. Nat. Acad. Sci. USA 83, 8629-8633

231. Debarry J., Kawahara S., Takamura K., Janoshazi A., Kirino Y., Olds J.L., Lester D.S., Alkon D.L., and Yoshioka, T. 1997. Time-resolved imaging of protein kinase

232. C activation during sea urchin egg fertilization. Exptl Cell Res., 234(1): 115-124

233. Dedman J.E., Brinkley B.R., Means A. E. 1979. Regulation of microfilaments and microtubules by calcium and cyclic AMP. Adv. Cycl.Nucl. Res., 11, 131-175.

234. Deeb S.S. 1972. Inhibition of cleavage and hatching of sea urchin embryos by serotonin. J. exp. Zool., 181, 1, 79 86

235. Dellafazia M.A., Servillo G., and Sassone-Corsi P. 1997. Cyclic AMP signalling and cellular proliferation: Regulation of CREB and CREM. FEBS Letters, 410, 1, 22-24

236. Denadai C., Huitorel P., Chiri S., Ciapa B. 1998. Effect of wortmannin, an inhibitor of phosphatidylinositol 3-kinase, on the first mitotic divisions of the fertilized sea urchin egg. J. Cell Sci., Ill (Pt 17), 2507 2518

237. Deridovich I.I. and Reunova O.V. 1993. Prostaglandins Reproduction control in bivalve molluscs. Comp. Biochem. Physiol. 104A, 23-27

238. Deshaies R. 1995. The self-destructive personality of a cell cycle in transition. Curr. Opinion Cell Biol., 7, 6, 781-789

239. Divecha N., Banfic H., Irvine R.F. Inositides and the nucleus and inositides in the nucleus. 1993. Cell, 74, 405- 407

240. Dobashi Y., Shoj i M., Jiang S.X., Kobayashi M., KawakuboY., Kameya T. 1998. Active cyclin A CDK2 complex, a possible critical factor for cell proliferation in human primary lung carcinomas. Am. J. Pathol., 153, 3, 963 972

241. Dorée M., Cavadore J.-C., Picard A. 1990. Facts and hypotheses of calcium regulation of MPF activity during meiotic regulation of starfish oocytes. J.Reprod.Fert., Suppl. 42, 135-140

242. Dorée M. & Galas S. 1994. The cyclin-dependent protein kinases and the control of cell division 1. FASEB J., 8, 14, 1114-1121

243. Draetta G., Beach D. 1988. Activation of cdc2 protein kinase during mitosis in human cells: cell cycle-dependent phosphorylation and subunit rearrangement. Cell, 54, 17 -26

244. Draetta G., Luca F., Westendorf J., Brizuela L., Ruderman J., Beach D. 1989. Cdc2 is complexed with both cyclin A and B: evidence for inactivation of MPR by proteolysis. Cell, 56, 829 838

245. Driesch H. 1891. Entwicklungmechanische Studien. I. Der Werth der beiden ersten Furchungszellen in der Echinodermentwicklung. Experimentelle Erzeugung von Theil-und Doppelbildungen. Z. wiss. Zool. 53, 1, 160 184

246. Driesch H. 1892. Entwicklungmechanische Studien. III. Die Vermiderung des Furchungsmaterials und ihre Folgen (Weiteres über Theilbildungen) . Z. wiss. Zool. 55, 1, 1 -10

247. Driesch H. 1901. Die organishen Regulationen. Leipzig.

248. Driesch H. 1910. Neue Versuche Über die Entwicklung verschmolzener Echinidenkeime. Arch. Entw.mech. Org., 30, 1, 8 23

249. Dunant Y. 1994. Hormones and neurotransmitters release: four mechanisms of secretion. Cell Biol. Internat18, 327-336

250. Dunphy W.G., Brizuela L., Beach D., Newport J. 1988. The Xenopus cdc2 protein is a component of MPF, a cytoplasmic regulator of mitosis. Cell, 54, 423-431

251. Dupont G. 1998. Link between fertilization-induced Ca2+ oscillations and relief from metaphase II arrest in mammalian eggs: a model based on calmodulin-dependent kinase II activation. Biophysical Chemistry, 72, 1-2, 153 167

252. Durham A.C.H., Walton J.M. 1982. Calcium ions and control of proliferation. Biosci. Rep., 2, 15 33

253. Ebner F. 1982. Putatively intracellular adrenoreceptors contribute to positive inotropic effect of noradrenaline. Trend Pharmac. Sei., 3, 195-196

254. Eddy E.M., Shapiro B.M. 1976. Changes in the topography of the sea urchin egg after fertilization. J. Cell. Biol., 71, 35-48

255. Edgar B. 1995. Diversification of cell cycle controls in developing embryos. Curr. Opin. Cell Biol., 7, 6, 815824

256. Edgar B.A., Sprenger F., Duronio R.J., Leopold P., and O'Farrell P.H. 1994. Distinct molecular mechanisms regulate cell cycle timing at successive stages of drosophila embryogenesis. Genes & Development, 8, 4, 440 -452

257. Emanuelsson H. 1974. Localization of serotonin in cleavage embryos of Ophryotrocha labronica La Greca and Bacci. Wilh. Roux' Arch., 175, 4, 253 271

258. Emanuelsson H. 1992. Autoradiographic localization in polychaete embryos of tritiated mesulergine, a selective antagonist of serotonin receptors that inhibits early polychaete development. Int. J. Dev. Biol. 36: 293 302.

259. Emanuelsson H., Carlberg M., and Lowkvist B. 1988. Presence of serotonin in early chick embryos. Cell Diff. 24, 191-200

260. Epel D. 1982. The physiology and chemistry of calcium during the fertilisation. In: Calcium and cell function (ed. Cheung W.Y.), vol. II, N.Y.-Lond. Paris, Academic press, pp. 355-383

261. Epel D., Steinhardt R.A., Humphreys T., Mazia D. 1974. An analysis of the partial metabolic derepression of the sea urchin egg by ammonia: the existence of independent pathways. Dev. Biol., 40, 245 255

262. Epstein C.J. 1991. Aneuploidy and morphogenesis. In: The Morphogenesis of Down Syndrome (C.J. Epstein ed.), Wiley-Liss, Inc., New York, pp. 1-18

263. Eusebi F., Pasetto N., and Siracusa G. 1984. Acetylcholine receptors in human oocytes. J. Physiol. (L.) 346, 321-330

264. Evangelista M., K. Blundell, M.S. Longtine, C.J. Chow, N. Adame, J.R. Pringle, M. Peter, and C. Boone. 1997. Bnilp, a yeast form in linking Cdc42p and the actin cytoskeleton during polarized morphogenesis. Science, 216, 5309, 118-122

265. Evans T., Rosenthal E.T., Youngbloom J., Distel D., Hunt T. 1983. Cyclin A: A protein specified by maternal mRNA in sea urchin eggs that is destroyed at each cleavage division. Cell, 33, 389 396

266. Ezzell R.M., Cande W.Z., Brothers A.J. 1985. Ca2+-ionophore-induced microvilli and cortical contractions in Xenopus eggs: evidence for involvement of actomyosin. Wilh. Roux's Arch. Dev. Biol. 194, 3, 140 147

267. Falugi C. 1993. Localization and possible role of molecules associated with the cholinergic system during "non-nervous" developmental events. Eur. J. Histochem. 31, 287 294

268. Falugi C. and Lamoretti M. 1982. Histochemical localization of acetylcholinesterase in connection with ciliary activity. Boll. Zool. 49 (suppl.), 70

269. Falugi C. and Raineri M. 1985. Acetylcholinesterase (AChE) and pseudocholinesterase (BuChE) activity distribution pattern in early developing chick limbs. J. Embryol. Exper. Morphol. 86, 89-108

270. Falugi C. and Prestipino G. 1989. Localization of putative nicotinic cholinoreceptors in the early development of Paracentrotus lividus. Cell. Molec. Biol. 35, 147 -161

271. Falugi C., Moretti E., Laminerding Koppel M., and Drews U. 1993. In: Cellular Communication in Reproduction (Facchinetti, Henderson, Pierantoni, Polzonetti-Magni, eds). Journal of Endocrinology Ltd, Bristol, pp. 101-104

272. Frankhauser C.A., Reymond A., Cerutti L., Utzig S., Hofmann K., and Simanis V. 1995. The S. pombe cdcl5 gene is a key element in the reorganization of F-actin at mitosis. Cell, 82, 435 444

273. Fargin A., Raymond J.R., Lohse M.J., Kobilka B.K., Caron M.G., Lefkowitz R.J. 1988. The genomic clone G-21 which resembles a p-adrenergic receptor sequence encodes the 5-HTiA receptor. Nature, 335, 6188, 358 360

274. Ferkowicz M.J., Stander M.C., Raff R.A. 1998. Phylogenetic relationships and developmental expression of three sea urchin Wnt genes. Molec. Biol. Evolution, 15, 7, 809-819

275. Filtz T.M., Paterson A., Harden T.K. 1996. Purification and G-protein subunit regulation of a phospholipase C~P from Xenopus laevis oocytes. J. Biol. Chem., 271, 49, 31121-31126

276. Finkbeiner S. & Greenberg M.E. 1996. Ca2+-dependent routes to Ras: Mecganisms for neuronal survival, differentiation, and plasticity? Neuron, 16, 233 236

277. Fishkind D.J. & Wang Y.L. 1995. New horizons for cytokinesis. Curr. Opinion Cell Biol. 7, 23 31

278. Fishkind D.J., Bonder E.M., and Begg D.A. 1990. Subcellular localiza.tion of sea urchin egg spectrin: evidence for assembly of the membrane-skeleton on unique classes of vesicles in eggs and embryos. Dev. Biol., 142, 439 452

279. Fishkind D.J., Silverman J.D., and Wang Y.L. 1996. Function of spindle microtubules in directing cortical movement and actin filament organization in dividing cultured cells. J. Cell Sci., 109 (Pt 8), 2041-2051

280. Fleming T.P. & Johnson M.H. 1988. From egg to epithelium. Annual Rev. Cell Biol., 4, 449 485

281. Fluck R.A. 1978. Acetylcholine and acetylcholinesterase activity in the early embryos of the medaka Oryzias latipes, a teleost. Developm., Growth & Differ., 20, 1, 17- 25

282. Fluck, R.A. 1982. Localization of acetylcholinesterase activity in young embryos of the medaka Oryzias latipes, a teleost. Comp. Biochem. Physiol. 72C: 59 64

283. Foltz K. & Lennarz W. 1992. Identification of sea urchin egg receptor for sperm using an antiserum raised against its extracellular domain. J. Cell Biol., 116, 647 658

284. Foltz K. & Schilling F. 1993. Receptor-mediated signal transduction and egg activation. Zygote, 1, 273 279

285. Fowler V.M., Pollard H.B. 1982. Chromaffin granule membrane-F-actin interaction are calcium sensitive. Nature (L.), 295, 336 339

286. Frazier W., Glaser L. 1979. Surface components and cell recognition. Ann. Rev. Biochem., 48, 491-523

287. Frielle T., Collins S., Daniel K.W., Caron M.G., Lefkowitz R.J., Kobilka B.K. 1987. Clonning of the cDNA for the human Pi-adrenergic receptor. Proc. Natl Acad. Sci. USA, 84, 22, 7920-24

288. Fryxell K.J. 1995. The evolutionary divergence of neurotransmitter receptors and second-messenger pathways. J. Molec. Evolution, 41, 85-97

289. Fujiwara K. & Pollard T.D. 1976. Fluorescent antibody localization of myosin in the cytoplasm, cleavage furrow and mitotic spindle of human cells. J.Cell Biol., 71, 848- 875

290. Fujiwara K. & Pollard T.D. 1978. Simultaneous localization of myosin and tubulin in human tissue culture cells by double antibody staining. J. Cell Biol., 77, 182- 195

291. Fujiwara K., Porter M.E., and Pollard T.D. 1979. Alpha-actinin localization in the cleavage furrow during cytokinesis. J. Cell Biol., 79, 268 275

292. Furmanski P., Silverman D.J. and Lubin M. 1971. Expression of differentiated functions in mouse neuroblastoma mediated by dibutyryl cyclic adenosine monophosphate. Nature (L.), 233, 413 415

293. Galione A. and White A. 1994. Calcium release induced by cyclic ADP ribose. Trends Cell Biol., 4, 431 436

294. Galione A., McDougall A., Busa W.,Willmott N., Gillot I., Whitaker M. 1993. Redundant mechanisms of calcium-induced calcium release underlying calcium waves during fertilisation of sea urchin eggs. Science, 261, 5119, 348- 352

295. Gallo, C.J., Hand, A.R., Jones, T.L.Z., Jaffe, L.A. 1995. Stimulation of Xenopus oocyte maturation by inhibition of the G-protein a(s) subunit, a component of the plasma membrane and yolk platelet membranes. J. Cell Biol., 130, 275-284

296. Gautier J., Norbury C., Lokha M., Nurse P., Mailer J. 1988. Purified maturation-promoting factor contains the product of a Xenopus homolog of the fission yeast cell cycle control gene cdc2+. Cell, 54, 433 439

297. Gautier J., Matsukawa T., Nurse P., Mailer J. 1989. Dephosphorylation and activation of Xenopis p34cdc2 protein kinase during the cell cycle. Nature (L.), 339, 626 629

298. Gautier J., J. Minshull, M.J. Lohka, M. Glotzer, T. Hunt, and J.L. Mailer. 1990. Cyclin is a component of maturation-promoting factor from Xenopus. Cell, 60, 487 -494

299. Geilenkirchen W.L., Jensen J., Coosen R., van Wijk R. 1977. Changes in content of cyclic AMP and cyclic GMP in eggs of Mactra solidisslma during 2nd cleavage cycle. Cell Biol. Internal. Reprod., 1, 5, 419 426

300. Genazzani A.A. & Galione A. 1996. Nicotinic acid-adenine dinucleotide phosphate mobilizes Ca2+ from a thapsigargin-insensitive pool. Blochem. J., 315(Pt 3), 721 725

301. Geneviere-Garrigues A.M., Barakat A., Doree M., Moreau J.L. and Picard A. 1995. Active cyclin B-cdc2 kinase does not inhibit DNA replication and cannot drive prematurely fertilized sea urchin eggs into mitosis. J. Cell Sci., 108 (Pt 7), 2693 2703

302. Gerasimenko O.V., Gerasimenko J.V., Tepikin A.V., Petersen O.H. 1995. ATP-dependent accumulation and inositol triphosphate or cyclic ADP-ribose mediated release of Ca2+ from nuclear envelope. Cell, 80, 439 444

303. Ghosh A. and Greenberg M.E. 1995. Calcium signaling in neurons: Molecular mechanisms and cellular consequences. Science, 268, 239-247

304. Gilbert S.F. 1994. Developmental biology. Sinauer Assoc. Inc Publ., Sunderland, USA. 894 p.

305. Gillespie J.D. 1982. The distribution of small ions during early development of Xenopus laevis embryos. J. Physiol328, 71 72

306. Gillot I. & Whitaker M. 1993. Imaging Calcium Waves in Eggs and Embryos. J. Exp. Biol., 184, 213 219

307. Gillot I. & Whitaker M. 1994. Calcium signals in and around the nucleus in sea urchin eggs. Cell Calcium, 16, 269-278

308. Gingell D. 1970. Contractile response at the surface of an amphibian egg. J. Embryol. Exp. Morphol., 23, 3, 583 -603

309. Giuduce G. 1962. Restitution of whole larvae from disaggregated cells of sea urchin embryos. Dev. Biol., 5, 3, 402 411

310. Godin, I., and Gipouloux, J.D. 1986. Notochordal catecholamines in exogastrulated Xenopus embryos. Dev. Growth Diff. 28, 137-142

311. Goebl M. & Byers B. 1988. Cyclin in fission yeast. Cell,54, 739 740

312. Goldberg J.I. 1998. Serotonin regulation of neurite outgrowth in identified neurons from mature and embryonic Helisoma trivolvis. Persp. Develop. Neurobiol., 5, 4, 373- 387

313. Goldstein, B. 1995. Cell contacts orient some cell division axes in the Caenorhabditis elegans embryo. J. Cell Biol., 129, 4, 1071-1080

314. Goldstein B. & Freeman G. 1997; Axis specification in animal development. Bioessays, 19, 2, 105-116

315. Goppelt-Struebe M., Hahn A., Stroebel M., Reiser C.O.A. 1999. Independent regulation of cyclo-oxygenase 2 expression by p42/44 mitogen-activated protein kinases and Ca2+/calmodulin-dependent kinase. Biochem. J., 339, Pt 2, 329-334

316. Gould K., Nurse P. 1989. Tyrosine phosphorylation of the fission yeast cdc2+ protein kinase regulates entry into mitosis. Nature (L.), 342, 39 45

317. Gould K. & Stephano J. 1987. Electrical responses of eggs to acrosomal protein similar to those induced by sperm. Science, 235, 1654 1656

318. Gould K. & Stephano J. 1991. Peptides from sperm acrosomal protein that initiate development. Dev. Biol., 146, 509 518

319. Grainger J.L., Winkler M.M., Shen S.S., Steinhardt R.A. 1979. Intracellular pH controls protein synthesis rate in sea urchin eggs and early embryos. Dev. Biol., 68, 396 -406

320. Grandin N. & Charbonneau M. 1990. Cycling of intracellular pH during cell division of Xenopus embryos is a cytoplasmic activity depending on protein synthesis and phosphorylation. J. Cell Biol., Ill, 523-532

321. Grandin N. & Charbonneau M. 1991. Intracellular free calcium oscillates during cell division of Xenopus embryos. J. Cell Biol., 112,4,711-718

322. Grandin N. & Reed S.I. 1993. Differential function and expression of Saccharomyces cerevisiae B-type cyclins in mitosis and meiosis. Molec. Cellul. Biol., 13, 4, 2113 -2125

323. Greber U.F. & Gerace L. 1995. Depletion of calcium from the lumen of endoplasmic reticulum reversibly inhibits passive diffusion and signal-mediated transport into the nucleus. J. Cell Biol., 128, 1-2, 5-14

324. Groigno L. & Whitaker M. 1998. An anaphase calcium signal controls chromosome disjunction in early sea urchin embryos. Cell, 92, 2, 193-204

325. Gross S.D., Simerly C., Schatten, G., and Anderson A. 1997. A casein kinase I isoform is required for proper cell cycle progression in the fertilized mouse oocyte. J. Cell Sci., 110, 24, 3083 3090

326. Guerrier P. 1970. Les caractères de la ségmentation et de la determination de la polarité dorsoventrale dans de développment de queques Spiralia. I. Les formes premier clivage égal. J. Embryol. exp. Morph., 23, 3, 611 637

327. Guerrier P., Leclerc-David C., and Moreau M. 1993. Evidence for the involvement of internal calcium stores during serotonin-induced meiosis reinitiation in oocytes of the bivalve mollusc Ruditapes philippinarum. Dev. Biol. 159, 474-484

328. Guerrier P., Durocher, Y., Gobet, I., Leclerc, C., Moreau, M. 1996. Reception and transduction of the serotonin signal responsible for oocyte meiosis reinitiation in bivalves. Invert. Reprod. & Develop., 30, 1-3, 39 45

329. Guerriero V., Rowley D.R., Means A.R. 1981. Production and characterization of an antibody to myosin light chain kinase and intracellular localization of the enzyme. Cell, 27, 2, 449 458

330. Gumbiner B.M. 1998. Propagation and localization of Wnt signaling. Curr. Opinion Genet. & Develop., 8, 4, 430-435

331. Guo X.Q. & Becker P.L. 1997. Cyclic ADP-ribose-gated Ca2+ release in sea urchin eggs requires an elevated Ca2+. . J. Biol. Chem., 272, 27, 16984 16989

332. Gurdon J.B., Mitchell A., Ryan K. 1996. An experimental system for analyzing response to a morphogen gradient. Proc. Natl Acad. Sci. USA, 93, 18, 9334 9338

333. Gustafson T. 1969. Cell recognition and cell contacts during sea urchin development. In: Cellular recognition. pp. 47 60. N.Y., Meredith Corp.

334. Gustafson T. 1989a. Pharmacological control of muscular activity of the sea urchin larva. I. Effects of nicotinic and muscarinic agents. Comp. Biochem. Physiol. 94C: 1 -14 .

335. Gustafson T. 1989b. Pharmacological control of muscular activity of the sea urchin larva. II. Role of calcium in nicotinic stimulation and paralysis, and the modulatory role of muscarinic agents. Comp. Biochem. Physiol. 94C: 15 21

336. Gustafson T., Toneby M. 1970. On the role of serotonin and acetylcholine in sea urchin morphogenesis. Exptl Cell Res., 62, 1, 102 117

337. Gustafson T., Lundgren B., Trenfeldt R. 1972. Serotonin and contractile activity in the echinopluteus. A stud of the cellular basis of larval behaviour. Exptl Cell. Res., 72, 1, 115 139

338. Gutkind J.S., Novotny E.A., Brann M.R. and Robbins K.C. 1991. Muscarinic acetylcholine receptor subtypes asagonist-dependent oncogenes. Proc. Natl Acad. Sci. USA, 88, 4703 4707

339. Hagiwara S., Miyasaki S. 1977. Changes in excitability of the cell membrane during "differentiation without cleavage" in the egg of the annelid, Chaetopterus pergamentaceus. J. Physiol., 272, 1, 197 216

340. Hagstrom B.E., Lonning S. 1964. The rate of development in isolated halves of sea urchin embryos. Sarsia, 15, 17 -22

341. Hagstrom B.E., Lonning S. 1969. Time-lapse and electron microscopic studies of sea urchin micromeres. Protoplasma, 68, 3, 271 288

342. Hamaguchi Y. 1975. Microinjection of colchicine into sea urchin eggs. Dev.Growth Differ., 17, 111-1173 65. Hamaguchi Y. & Mabuchi I. 1986. a-Actinin accumulation in the cortex of echinoderm eggs during fertilization. Cell Motil. Cytoskel., 6, 549 559

343. Hamaguchi Y. 1998. Displacement of cleavage plane in the sea urchin egg by locally applied taxol. Cell Motil. Cytoskeleton, 40, 3, 211-219

344. Hansch C., Leo A. 1979. Substitute constante for correlation analysis in chemistry and biology. N.Y., Wiley Interscience Publ.

345. Haraguchi S., Naito K., Sato E. 1998. MAP kinase cascade, but not ERKs, activated during early cleavage of mouse embryos. Molec. Reprod. Developm., 51, 2, 148 155

346. Hardwick J.C. & Parsons R.L. 1995. Requirement of a colchicine- sensitive component of the cytoskeleton for acetylcholine receptor recovery. Brit. J. Pharmacol114, 442-446

347. Harris P., Mazia D. 1962. The finer structure of the mitotic apparatus. In: Symposium of Internat. Soc. Cell Biol., v. 1 (The interpretation of ultrastructure, R.J.C.Harris ed.), Academic Press Inc., N.Y., pp. 279-305

348. Harris P. 1975. The role of membranes in the organisation of the mitotic apparatus. Exptl Cell Res., 94, 409 425

349. Harris P. 1982. Effect of caffeine on mitosis in eggs of the sea urchin Strongylocentrotus purpuratus: the possible role of calcium. Cell Diff., 11, 4, 357 358

350. Harrison F.L., Chesterton C.J. 1980. Factors mediating cell-cell recognition and adhesion. FEBS Lett., 122, 157 -165

351. Harvey E.B. 1940. A new method of producting twins, triplets and quadruplets in Arbacia punctulata and their development. Biol. Bull., 78, 2, 202 216

352. Harvey E.B. 1956. The american Arbacia and other sea urchins. Princeton, New Jersey, Princeton Univ. Press

353. Harvey E.G. 1936. Parthenogenetic merogony or cleavage without nuclei in Arbacia punctulata. Biol. Bull., 71, 101 121

354. Hauser K.F. & Mangoura D. 1998. Diversity of the endogenous opioid system in development. Persp. Dev. Neurobiol., 5, 4, 437 449

355. Head J.P., Mader S., Kaminer B. 1974. Calcium-binding modulator protein from the unfertilysed egg of sea urchin Arbacia punctulata. J. Cell Biol., 80, 1, 211-218

356. Hellendall R.P., Shambra U., Liu J., and Lauder J.M. 1993. Prenatal expression of 5-HTlc and 5-HT2 receptors in the developing nervous system. Exp. Neurol. 120, 18 6-201

357. Henry J.J., Klueg K.M., and Raff R.A. 1992. Evolutionary dissociation between cleavage, cell lineage and embryonic axes in sea urchin embryos. Development, 114, 931-938

358. Hepler P.K. 1980. Membranes in the mitotic apparatus of barley cells. J. Cell Biol., 86, 2, 490 499

359. Hepler P.K. 1989. Calcium transients during mitosis: observations in flux. J. Cell Biol., 109, 2567 2573

360. Hille B. 1994. Modulation of ion-channel function by G-protein-coupled receptors. Trends Neurosci., 17, 531 536

361. Hinshaw J.E., Carracher B.O., Milligan R.A. 1992. Architecture and design of the nuclear pore complex. Cell, 69, 7, 1133 1141

362. Hiramoto Y. 1965. Further studies on cell division without the mitotic apparatus in sea urchin eggs. J. Cell Biol., 25, 161 166

363. Hiramoto Y. 1974. Mechanical properties of the surface of sea urchin egg at fertilisation and during cleavage. Exptl Cell Res., 89, 320 326

364. Hiramoto Y. 1981. Mechanical properties of dividing cells. In: Cellular Dynamics: Mitosis/Cytolinesis (A.M. Zimmerman and A. Forer, eds) , pp. 398 418. Academic Press, New York

365. Hohmann C.F., Berger-Sweeney J. 1998. Cholinergic regulation of cortical development and plasticity. New twists of an old story. Persp. Developm. Neurobiol., 5, 4, 401-426

366. Holtfretter J. 1943. Properties and functions of the surface coat in amphibian embryos. J. exp. Zool., 93, 2, 251-323

367. Homa S. & Swann K. 1994. A cytosolic sperm factor triggers calcium oscillations and membrane hyperpolarisation in human oocytes. Hum. Reprod., 9, 2356 2361

368. Horvitz H.R.& Herskowitz I. 1992. Mechanisms of assymmetric cell division: two Bs or not two Bs, that is the question. Cell, 68, 237 255

369. Horstadius S. 1937. Investigation, as to the localization of the micromere-, the skeleton-, and the entoderm-forming material in the unfertilized egg of Arbacia punctulata. Biol. Bull., 73, 2, 295 316

370. Horstadius S. 1939. The mechanics of sea urchin development studied by operative methods. Biol. Rev. 14, 2, 132 179

371. Horstadius S. 1973. Experimental embryology of echinoderms. Oxford, Claredon Press, 192 pp.

372. Horstadius S., Joseffsson L., Runnstrom J. 1967. Morphogenetic agents from unfertilized eggs of the sea urchin Paracentrotus lividus. Dev. Biol., 16, 2, 189 -202

373. Hoyer D. & Martin G.R. 1996. Classification and nomenclature of 5-HT receptors: a comment on current issues. Behav. Brain Res., 73, 263 268

374. Hunt T. 1989. Maturation promoting factor, cyclin and the control of M-phase. Curr. Opinion Cell Biol., 1, 2 68 -278

375. Hutter H. & Schnabel R. 1995. Specification of anterior-posterior differences within the AB lineage in the C.elegans embryo: A polarising induction. Development, 121, 5, 1559-1568

376. Hyman A.A. and White J.G. 1987. Determination of cell division axes in the early embryogenesis of Caenorhabditis elegans. J. Cell Biol. 105, 5, 2123-2135

377. Ikeda M. 1965. Behaviour of sulfhydryl groups of sea urchin egg under the blockage of cell division by UV and heat. Exptl Cell Res., 40, 2, 282 291

378. Ikeda M., Nemoto S., Yoneda M. 1976. Periodoc changes in the content of protein-bound sulfhydryl groups and tension at the surface of starfish oocytes in correlation with the meiotic division cycle. Developm., Growth & Differ., 18, 3, 221 225

379. Ikeda S.R. 1996. Voltage-dependent modulation of N-type calcium channels by G-protein (3y subunits. Nature, 380, 255 258

380. Ishida K., Yasumasu I. 1982. The periodic changes in adenosine 3',5'-cyclic monophosphate in sea urchin eggs. Biochem. Biophys. Acta, 720, 266 273

381. Ishimoda-Takagi T. 1979. Localization of tropomyosine in sea urchin eggs. Exptl Cell Res., 119, 423 428

382. Ivgy-May N., Tamir H., and Gershon M.D. 1994. Synaptic properties of serotonergic growth cones in developing rat brain. J. Neurosci. 14: 1011-1029

383. Iwamatsu T., Toya Y., Sakai N., Terada Y., Nagata R., and Nagahama Y. 1993. Effect of 5-hydroxytryptamine on steroidogenesis and oocyte maturation in pre-ovulatory follicles of the medaka Oryzias latipes. Develop. Growth & Differ. 36: 625-630

384. Iwasa K., Ehrenstein G., DeFelice L., and Russell J. 1990. High concentrations of inositol 1,4,5,-triphosphate in sea urchin sperm. Biochem. Biophys. Res. Comm., 172, 932 938

385. Jacobson M., Cervantes-Laurean D., Strohm M. et al., 1995. NAD glycohydrolases and the metabolism of cyclic ADP ribose. Biochemie, 77, 341 344

386. Jaffe L. 1990. First messengers at fertilization. J. Reprod. Fert. Suppl. 42, 107 116

387. Jaffe L.A. 1995. Calcium waves and development. In: Calcium Waves, Gradients and Oscillations (G.R Bock, K. Ackrill, eds), John Wiley & Sons Ltd, London, pp.4-12

388. Janakidevi K., Dewey V.C., Kidder G.W. 1966a. Serotonin in Protozoa. Arch. Biochem. Biophys., 113, 3, 758 759

389. Janakidevi K., Dewey V.C., Kidder G.W. 1966b. The biosynthesis in two genera of Protozoa. J. Biol. Chem., 241, 11, 2576 2578

390. Janmey P.A. 1998. The cytoskeleton and cell signalling: component localization and mechanical coupling. Physiol. Rev., 78, 3, 763-781

391. Jaspersen S.L., Charles J.F., Tinker-Kulberg R.L., Morgan D.O. 1998. A late mitotic regulatory network controlling cyclin destruction in Saccharomyces cerevisiae. Molec. Biol. Cell, 9, 10, 2803 2817

392. Ji H., Sandberg K., Bonner T.I., and Catt K.J. 1993. Differential activation of inositol 1,4,5-triphosphate-sensitive calcium pools by.muscarinic receptors in Xenopus laevis oocytes. Cell Calcium 14: 649-662

393. Joseffsson L., Horstadius S. 1969. Morphogenetic substances from sea urchin eggs. Isolation of animalizing and vegetalizing substances from unfertilized eggs of Paracentrotus lividus. Develop. Biol., 20, 6, 481 500

394. Julius D., MacDermott A.B., Axel R., and Jessell T.M. 1989. Molecular characterization of a functional cDNA encoding the serotonin lc receptor. Science, 241, 558 -564

395. Julius D., Huang K.N., Livelli T.J., Axel R., and Jessell T.M. 1990. The 5-HT2 receptor defines a family of structurally distinct but functionally conserved serotonin receptors. Proc. Natl Acad. Sci. USA, 87, 928 932

396. Junej a R., Ito E., and Koide S.S. 1994. Effect of serotonin and tricyclic antidepressants on intracellularcalcium concentrations in Spisula oocytes. Cell Calcium 15, 1 6

397. Kahan C., Julius D., Pouyssegur J., and Seuwen K. 1992. Effects of 5-HTlc-receptor expression on cell proliferation control in hamster fibroblasts: Serotonin fails to induse a transformed phenotype. Exptl Cell Res., 200, 523 527

398. Kaltner H., Andrae S., Wittmann J. 1993. Activity of cholinesterases in the japanese quail embryo effects of dichlorphos on the embryonic development. Biochem. Pharmacol45, 87-92

399. Kane R.E. 1970. Direct isolation of the hyaline layer protein released from cortical granules of the sea urchin egg at fertilization. J. Cell Biol., 45, 3, 615 622

400. Kane R.E. 1973. Hyaline release during normal sea urchin development and its replacement after removal at fertilization. Exptl Cell Res., 81, 2, 301 311

401. Kaneko S., Takahashi H., and Satoh M. 1992. Metabotropic responses to acetylcholine and serotonin in Xenopus oocytes injected with rat brain messenger RNA are transduced by different G-protein subtypes. FEBS Lettr. 299, 179-182

402. Karnovsky A., Klymkowsky M.W. 1995. Anterior axis duplication in Xenopus induced by the over-expression of the cadherin-binding protein plakoglobin. Proc. Natl Acad. Sci. USA, 92, 10, 4522-4526

403. Kassis S., Hagmann J., Fishman P.H., Chang P.P., Moss J. 1982. Mechanism of action of cholera toxin on intact cells. Generation of Ai peptide and activation of adenylate cyclase. J. Biol. Chem., 257, 20, 12148-12152

404. Katsu K. & Kubota H.Y. 1998. A cytoplasmic factor required for contraction of the cleavage furrow in af mutant eggs of Xenopus laevis. Zool. Sci., 15, 2, 223- 230

405. Katsu Y., Minshall N., Nagahama Y., Standart N. 1999. Ca2+ is required for phosphorylation of clam p82/CPEB in vitro: Implications for dual and independent roles of MAP and Cdc2 kinases. Develop. Biol., 209, 1, 186-199

406. Kimble J.E. 1981. Strategies for control of pattern formation in Caenophabditis elegans. Phil. Trans. Roy. Soc. , 295, 539 551

407. Kinnally K.W., Zorov D.B., Antonenko Y.N., Snyder S.H., McEnery M.W., Tedeschi H. 1993. Mitochondrial benzodiazepine receptor linked to inner membrane ion channels by nanomolar actions of ligands. Proc. Natl Acad. Sci. USA, 90, 1374-1378

408. Kirby M.L. and Gilmore, S.A. 1972. A fluorescence study on the ability of the notochord to synthesize and store catecholamines in early chick embryos. Anat. Rec. 173: 469-478

409. Kishimoto T., Kuriyama R., Kondo H., Kanatani H. 1982. Generality of the action of various maturation-promotion factors. Exptl Cell Res. 137, 121 126

410. Kleppisch T., Wobus A.M., and Hescheler J. 1993. Cation channels in oocytes and early stages of development: a novel type of nonselective cation channel activated by adrenaline in a clonal mesoderm-like cell line (MES-1). EXS. 66: 297-303

411. Kline D., Kline J. 1992,. Repititive calcium transients and the role of calcium in exocytosis and cell cycle activation in the mouse egg. Dev. Biol. 145, 80 89

412. Kline J.T., Kline D. 1994. Regulation of intracellular calcium in the mouse egg evidence for inositol trisphosphate-induced calcium release, but not calcium-induced calcium release. Biol. Reprod., 50, 1, 193-203

413. Kline, D., Simoncini L., Mandel, G., Maue, R.A., Kado, R.T, and Jaffe, L.A. 1988. Fertilization events induced by neurotransmitters after injection of mRNA in Xenopus eggs. Science, 241, 464-467

414. Kline D., Kopf G., Muncy L., and Jaffe L. 1991. Evidence for the involvement of pertussis toxin-insensitive G-protein in egg activation of frog Xenopus laevis. Dev. Biol., 143, 218 229

415. Krantic S., Dube F., Querion R. and Guerrier P. 1991. Pharmacology of the serotonin induced meiosis reinitiation of Spisula oocytes. Develop.Biol. 146, 491-497

416. Krantic S., Guerrier P., and Dube F. 1993. Meiosis reinitiation in surf clam oocytes is mediated via a 5-hydroxytryptamine5 serotonin membrane receptor and a vitelline envelope-associated high affinity binding site. J. Biol. Chem. 268, 7983-7989

417. Kreimer D.I., Fedoseev V.Y., Grishchenko V.M., Orlova T.G., Freidin A.A., and Orlov, N.Y. 1992. Water-soluble Ca2+-calmodulin-binding proteins in embryo of the sea urchin Strongylocentrotus intermedius. Comp. Biochem. Physiol., 103B, 4, 951-954

418. Kretsinger R.H. 1977. Evolution of the informational role of calcium in eukaryotes. In: Calcium binding proteins and calcium function, ed. Wassermann R.H. et al., pp. 63-72, Elsevier, N.Y.,

419. Kubota H.Y., Yoshimoto Y., Hiramoto Y. 1993. Oscillation of intracellular free calcium in cleaving and cleavage-arrested embryos of Xenopus laevis. Dev. Biol., 160, 512 -518

420. Kubota T. 1979. Mechanism of cleavage of newt eggs. J. Cell Sci., 37, 1, 39 45

421. Kuraishi R., Osanai K. 1989. Structural and functional polarity of starfish blastomeres. Dev. Biol., 136, 2, 304- 310

422. Kusano K., Miledi R., Stinnakre J. 1977. Acetylcholine receptors in the oocyte membrane. Nature, 270, 5639, 739- 741

423. Kusano K., Miledi R., Stinnakre J. 1978. Neurotransmitter receptors in Xenopus oocyte membrane. Biol. Cellulair, 32, 2, 7 -8

424. Kusano K., Miledi R., Stinnakre J. 1982. Cholinergic and catecholaminergic receptors in the Xenopus oocyte membrane. J. Physiol., 328, 143 170

425. Laasberg T. 1990. Ca2+-mobilizing receptors of gastrulating chick embryo. Comp. Biochem. Physiol. 97C: 9 -12

426. Labbm J.C., M.G. Lee, P. Nurse, A. Picard, and M. Doreé. 1988. Activation at M-phase of a protein kinase encoded by a starfish homolog of the cell cycle control gene cdc2+. Nature (L.), 335, 251 254

427. Lambert J.J., Peters J.A., and Hope A.G. 1995. 5-HT3 receptors. In: Ligand- and Voltage-gated Ion Channels (R.A. North ed.) CRC Press, Boca Raton, pp. 177 211

428. Landau M.A., Buznikov G.A., Kabankin A.S., Teplitz M.A., Chernilovskaya P.E. 1981. The sensitivity of sea urchin embryos to cytotoxic neuropharmacological drugs; the correlation between activity and lypophility. Comp. Biochem. Physiol., 69C, 359-366

429. Lange K. and Brandt U. 1996. Calcium storage and release properties of F-actin: evidence for the involvement of F-actin in cellular calcium signalling. FEBS Let., 395, 137 142

430. Lanini L., Bachs 0., Carafoli E. 1992. The calcium pump of the liver nuclear membrane is identical to that of endoplasmic reticulum. J. Biol. Chem., 267, 11548 11552

431. Larabell C., Nuccitelli R. 1992. Inositol lipid hydrolysis contributes to the calcium wave in the activating egg of Xenopus laevis. Dev. Biol., 153, 247 -255

432. Lau A., Rayson T. and Humphreys T. 1986. Tumor promoters and diacylglycerol activate the Na+/H+ antiporter in sea urchin eggs. Exptl Cell Res., 166, 23 30

433. Lauder J.M. 1988. Neurotransmitters as morphogens. Prog. Brain Res. 73: 365-387

434. Lauder J.M. 1990. Ontogeny of the serotonergic system in the rat: Serotonin as a developmental signal. Ann. N.Y. Acad. Sei. 600: 297-314

435. Lauder J.M. 1993. Neurotransmitters as growth regulatory signals: role of receptors and second messengers. Trends Neurosci., 16, 233 240

436. Lauder J.M.& McCarthy K.D. 1986. Neuronal-glial interactions. In: Astrocytes (S.Fedoroff & A. Vernadakis, eds). Academic Press, Orlando, pp. 295 314

437. Lauder J.M. & Liu J. 1994. Glial heterogeneity and developing neurotransmitter systems. Persp. Dev. Neurobiol. 2, 3, 239-250

438. Lauder J.M., Tamir H., and Sadler T.W. 1988. Serotonin and morphogenesis I. Sites of serotonin uptake and -binding protein immunoreactivity in the midgestation mouse embryo. Development 102: 709-720

439. Lauder J.M., Liu J., Devaud L., and Morrow A.L. 1998. GABA as a trophic factor for developing monoamine neurons. Persp. Dev. Neurobiol., 5, 2, 247-259

440. Lauder J.M., Moiseiwitsch, J., Liu, J., and Wilkie,- M.B.1994. Serotonin in development and pathophysiology. In: Brain Lesions in the Newborn (Lou H.C., Griesen G., Larsen J., Falck, eds.), Munksgaard, Copenhagen, pp. 60-72

441. Launey J.-M., Birraux G., Bondoux D., Callebert J., Choi D.-S., Loric S., and Maroteaux L. 1996. Ras involvement in signal transduction by serotonin 5-HT2b receptor. J. Biol. Chem., 271, 3141 3147

442. Lee M.G., Norbury C.J., Spurr N.K., Nurse P. 1988. Regulated expression and phosphorylation of a possible mammalian cell cycle control protein. Nature (L.), 333, 676 679

443. Lee S.L., Wang W.W., Moore B.J., and Fanburg B.L. 1991. Dual effect of serotonin on growth of bovine pulmonary artery smooth muscle cells in culture. Circulation Res., 68, 1362 1368

444. Lee H., Aarhus R., Walseth T. 1993. Calcium mobilisation by dual receptors during fertilisation of sea urchin eggs. Science, 261, 352 355

445. Lee H., Graeff R., Walseth T. 1995. Cyclic ADP ribose and its metabolitic enzymes. Biochemie, 77, 345 355

446. Lembo P.M.C., Ghahremani M.H., Morris S.J., and Albert P.R. 1997. A conserved threonine residue in the second intracellular loop of the 5-hydroxytryptamine 1A receptor directs signaling specificity. Molec. Pharm., 52, 1, 164 -171

447. Leslie F.M. 1993. Neurotransmitters as neurotrophic factors. In: Neurotrophic factors (S.E.Loughlin and J.H.Fallon, eds). Academic Press, Orlando, pp. 565 598

448. Lev S., Moreno H., Martinez R., Canoll P., Peles E., Musacchio J.M., Plowman G.D., Rudy B., and Schlessinger J.1995. Protein tyrosine kinase PYK2 involved in Ca2+-inducedregulation of ion channel and MAP kinase functions. Nature, 376, 737 745

449. Lin P.J., Luby-Phelps K., and Stull J.T. 1997. Binding of myosin light chain kinase to cellular actin-myosin filaments. J. Biol. Chem., 272, 11, 7412 7420

450. Lindsay A.R.G., Tinker A., Williams A.J. 1994. How do ryanodine modify ion handling in the sheep cardiac sarcoplasmic reticulum Ca2+-release channel? J. Gen. Physiol104, 425-447

451. Liu, J., and Lauder, J.M. 1992. S-100b and insulin-like growth factorll differentially regulate growth of developing serotonin and dopamine neurons in vitro. J. Neurosci. Res. 33, 248-256

452. Lo C.W. & Gilula N.B. 1979. Gap junction communication in the preimplantation mouse embryo. Cell, 18, 2, 399 -409

453. Loewenstein W.R. 1966. Permeability of membrane junctions. Ann. N.Y. Acad. Sei., 137, 2, 441 472

454. Loewi 0. 1921. Über humorale übertragbarkeit der Herznervenwirkund. I: Mitteilung. Pflügers Arch., 189, 3, 239-242

455. Logan C.Y., Mcclay D.R. 1997. The allocation of early blastomeres to the ectoderm and endoderm is variable in the sea urchin embryo. Development, 124, 11, 2213-2223

456. Lorca T., Cruzalegui F.H, Fesquet D., Cavadore J., Mery J., Means A. and Doree M. 1993. Calmodulin-dependent protein kinase II mediates inactivation of MPF and CSF upon fertilization of Xenopus eggs. Nature, 366, 270-273

457. LoTurco J.J., Owens D.F., Heath M.J.S., Davis M.B.E. and Kriegstein A. R. 1995. GABA and glutamate depolarize cortical progenitor cells and inhibit DNA synthesis. Neuron, 15, 1287 1298

458. Lovely J.R. & Threlfall R.J. 1976. Fluctuations in cyclic adenosine 3',5'-monophosphate and cyclic guanosine 3',5'-monophosphate during the mitotic cycle of the acellular slime mold Physarum polycephalum. Biochem. Biophys. Res. Comm., 76, 3, 789 795

459. Lovtrup-Rein H., Lovtrup S. 1975. Changes in the content of cyclic GMP during the development of Xenopus laevis. Exptl. Cell Res., 94, 11, 216 220

460. Lu B.W., Jan L.Y., Jan Y.N. 1998. Asymmetric cell division: Lessons from flies and worms. Curr. Opinion Genetics & Developm., 8, 4, 392-399

461. Luca F.C. & Ruderman J.V. 1989. Control of programmed cyclin destruction in a cell-free system. J. Cell Biol., 109, 5, 1895 1909

462. Luttrell L.M., Ferguson S.S.G., Daaka Y., Miller W.E., Maudsley S., Dellarocca G.J., Lin F.T., Kawakatsu H., Owada K., Luttrell D.K., Caron M.G., Lefkowitz R.J. 1999.-arrestin-dependent formation of ß2 adrenergic receptor

463. Src protein kinase complexes. Science, 283, 5402, 655 -661

464. Mabuchi I. 1973. A myosin-like protein in the cortical layer of the sea urchin egg. J. Cell. Biol., 59, 542 547

465. Mabuchi I. 1979. Role of myosin and actinin cell division of echinoderm eggs. In: Cell Motility: Molecules and Organization (Hatano S., Ishikawa H., and Sato H., eds), pp. 147 163, Baltimore, University Park

466. Machesky L.M. & Pollard T.D. 1993. Profilin as a potential mediator of membrane-cytoskeleton communication. Trends Cell Biol., 3, 381 385

467. Machesky L.M., S.J. Atkinson, C. Ampe, J. Vandekerkhove, and T.D. Pollard. 1994. Purification of a cortical complex containing two unconventional actins from Acanthamoeba by affinity chromatography on profilin-agarose. J. Cell Biol., 127, 107 115

468. Mackay D.J., Nobes C.D., and Hall A. 1995. The Rho's progress: a potential role during neuritogenesis for the Rho family of GTPases. Trends Neurosci., 18, 496 501

469. MacManus J.P., Whitfield J.F. 1969. Stimulation of deoxyribonucleic acid synthesis and mitotic activity of thymic lymphocytes by cyclic adenosine 3',5'-monophosphate. Exptl Cell Res., 58, 1, 188 191

470. MacNeill S.A., Nurse P. 1989. Genetic interactions in the control of mitosis in fission yeast. Curr. Genet., 16, 1-6

471. Maekawa S., Endo S., and Sakai H. 1987. A high molecular weight actin binding protein: its localization in the cortex of sea urchin egg. Exptl Cell Res., 172, 340 353

472. Malacinski G.M. 1984. Axis specification in amphibian eggs. In: Pattern formation. A primer in developmental biology (G.M. Malacinski ed.). Macmillan Publishing Co. N.Y. ch. 18, pp. 435 456

473. Malinger G., Zakut H., Soreq H. 1989. Cholinoceptive properties of human primordial, preantral, and antral oocytes: in situ hybridization and biochemical evidencefor expression of cholinesterase genes. J. Mol. Neurosci. 1, 77-84

474. Mango S.E., Thorpe C.J., Martin P.R., Chamberlain S.H., Bowerman B. 1994. Two maternal genes, apx-1 and pie-1, are required to distinguish the fates of equivalent blastomeres in the aarly Caenorhabditis elegans embryo. Development, 120, 8, 2305-2315

475. Manseau L., J. Calley, and H. Phan. 1996. Profilin is required for posterior patterning of the Drosophila oocyte. Development (Camb.), 122, 2109 2116

476. Marcus N.H. 1979. Developmental aberrations associated with twinning in laboratory-reared sea urchins. Dev. Biol., 70, 1, 274 277

477. Margolis R.L. 1983. Calcium and microtubules. In: Calcium and cell function, ed. W.Y.Cheung, e.a., Academic Press, vol. 4, pp. 313-335

478. Markova L.N., Buznikov G.A., Kovacevic N., Rakic L., Salimova N.B., Volina E.V. 1985. Histochemical study of biogenic monoamines in early (prenervous) and late embryos of sea urchins. Int. J. Dev. Neurosci3, 493 500

479. Marks J. & Hyams J.S. 1985. Localization of F-actin through the cell division cycle of Schizosaccharomyces pombe. Eur. J. Cell. Biol. 39, 27 32

480. Martindale M.Q. & Henry J.Q. 1998. The development of radial and biradial symmetry: The evolution of bilaterality. Amer. Zool., 38, 4, 672-684

481. Mashkovsky M.D., Yachontov L.N., Kaminka M.E. and Mikhlina E.E. 1983. Further development in research on the chemistry and pharmacology of synthetic quinuclidine derivatives. Progr. Drug Res., 27, 9-61

482. Masmoudi A., Labourdette G., Mersel M., Malviya A.N. 1989. Protein kinase C located in rat liver nuclei. J. Biol. Chem., 264, 2, 1172 1179

483. Masui Y. & Markert C.L. 1971. Cytoplasmic control of nuclear behaviour during meiotic maturation of frog oocytes. J. Exp. Zool., Ill, 129 146

484. Masui Y., Clarke H.J. 1979. Oocyte maturation. Int. Rev. Cytol., 86, 129 196

485. Matsuoka T., Nishizaki T., Sumino K. 1997. A specific inhibitory action of lithium on the 5-HT2c receptor expressed in Xenopus laevis oocytes. Molecular Pharmacology, 51, 3, 471-474

486. Matsutani T. & Nomura T. 1986. Serotonin-like immunoreactivity in the central nervous system and gonad of the scallop, Patinopecten yessoensis. Cell Tiss. Res. 244, 3, 515-517

487. Mattingly R.R. & Macara I.G. 1996. Phosphorylation-dependent activation of the Ras-CRF/CDC25Mm exchange factor by muscarinic receptors and G-protein (3y subunits. Nature, 383, 268 272

488. Mattson M.P. & Furukawa K. 1998. Signalling events regulating the neurodevelopmental triad. Persp. Dev. Neurobiol., 5, 4, 337 352

489. Matus-Leibovitch N., Gershengorn M.C., and Oron Y. 1993. Differential effects of cytiskeletal agents on hemispheric functional expresiion of cell membrane receptors in Xenopus oocytes. Cell. Molec. Neurobiol. 13, 625 637

490. Mayerhofer A., Smith G.D., Danilchik M., Levine J.E., Wolf D.P., Dissen G.A., and Ojeda S.R. 1998. Oocytes are a source of catecholamines in primate ovary: Evidence for a cell-cell regulatory loop. Proc. Natl Acad. Sci., 95, 10990 10995

491. Mazia D. 1958. The production of twin embryos in Dendraster by means of mercaptoethanol (monothioethylene glycol). Biol. Bull., 114, 2, 247

492. McCaig C.D., Robinson K.R. 1982. The distribution of lectin receptors on the plasma membrane of the fertilised sea urchin egg during first and second cleavage. Dev. Biol., 92, 197 202

493. McClendon J.F. 1910. The development of isolated blastomeres of frog's egg. Am. J. Anat. 10, 425 430

494. McCollum D.M., Balasubramanian M.K., and K. Gould. 1995. Schizosaccharomyces pombe cdc4+ gene encodes a novel EF-hand protein essential for cytokinesis. J. Cell Biol., 130, 651 660

495. McCulloch D. & Chambers E. 1987. When does the sperm fuse with the egg? J. Gen. Physiol., 88, 384

496. McEnery M.W., Snowman A.M., Snyder S.H. 1994. The association of endogenous G omicron alpha with the purified co-conotoxin GVia receptor. J. Biol. Chem., 269, 5-8

497. McMahon D. 1974. Chemical messengers in development: a hypothesis. Science, 185, 4154, 1012 1021

498. Means A.R. 1994. Calcium, calmodulin and cell cycle regulation. FEBS Lett., 347, 1, 1 4

499. Meier H., Hertz L., Schousboe A. 1991. Neurotransmitters as developmental signals. Neurochem. Int., 19, 1-15

500. Meijer L., Arion D., Golsteyn R., Pines J., Brizuela L., Hunt T., Beach D. 1989. Cyclin is a component of the sea urchin egg M-phase specific histone HI kinase. EMBO J., 8, 2275 2282

501. Mello C.C., Draper B.W., Priess J.R. 1994. The maternal genes apx-1 and glp-1 and establishment of dorso-ventral polarity in the early C. elegans embryo. Cell, 77, 95-106

502. Michelson M.J. 1973. Pharmacology of cholinergic systems in some other phyla. In: Comparative Pharmacology (Michelson M.J. ed) , v.l, Oxford N.Y., Pergamon Press, pp. 191-229

503. Mikhailov A.T., Zvezdina N.D., Prokazova N.V., Kocharov S.L., Malchenko L.A.,- Buznikov G.A., Bergelson L.D. 1981. Immunological investigation of the gangliosides on the cell surface of sea urchin embryos. Differentiation, 18,1, 43 50

504. Miller J.R., Mcclay D.R. 1997. Changes in the pattern of adherens junction-associated |B-catenin accompany morphogenesis in the sea urchin embryo. Dev. Biol., 192,2, 310-322

505. Miller T., Fritschy J.M., Grosche J., Pratt G.D., Mohler and Kettenman H. 1994. Developmental regulation of voltage-gated K+ channel and GABAa receptor expression in Bergman glial cells. J. Neurosci. 14, 2503 2514.

506. Mishima M., Mabuchi I. 1996. Cell cycle-dependent phosphorylation of smooth muscle myosin light chain in sea urchin egg extracts. J. Biochemistry, 119, 5, 906 913

507. Mitchison J.J. & Swann M.M. 1954. The mechanical properties of the cell surface: the sea urchin egg from fertilization to cleavage. J. Exp. Biol., 32, 4, 734 750

508. Miyazaki S. 1988. Inositol 1,4,5-triphosphate-induced calcium release and guanine nucleotide binding proteinmediated periodic calcium rises in golden hamster eggs. J. Cell Biol., 106, 345 353

509. Miyazaki S., Katayama Y., Swann K. 1990. Synergistic activation by serotonin and GTP analogue and inhibition by phorbol ester of cyclic Ca2+ rises in hamster eggs. J.Physiol. (L.), 426, 209 227

510. Miyazaki S., Yuzaki M., Nakada K. 1992. Block of calcium wave and calcium oscillation by antibody to the inositol 1,4,5-triphosphate receptor in fertilised hamster eggs. Science, 257, 251 255

511. Miyazaki S., Shirakawa H., Nakada K. and Honda Y. 1993. Essential role of the inositol 1,4,5-triphosphate receptor calcium release channel in calcium waves and calcium oscillations at fertilisation in mammalian eggs. Dev. Biol., 158, 62 78

512. Mohri H. 1979. Dynein in cell division. In: Cell Motility: Molecules and Organization (Hatano S., Ishikawa H., and Sato H., eds), pp. 669 673, Baltimore, University Park

513. Moiseiwitsch J.R.D., and Lauder J.M. 1993. In vitro effects of serotonergic drugs on expression of S-100(J and tenascin. Teratology 47, 393.

514. Moiseiwitsch J.R.D., and Lauder J.M. 1995. Serotonin regulates mouse cranial neural crest migration. Proc. Natl Acad. Sci.USA, 92, ,16, 7182 7186

515. Monroy A. & Moscona A.A. 1979. Introductory Concepts in Developmental Biology. Chicago, Chicago University Press

516. Moon R.T. & Kimelman D. 1998. From cortical rotation to organi zer gene expression: toward a molecular explanationof axis specification in Xenopus. Bioessays, 20, 7, 536 -545

517. Moore G., Kopf G.S. and Shultz R., 1993. Complete mouse egg activation in the absence of sperm by stimulation of an exogenous G-protein coupled receptor. Dev. Biol., 159, 669 678

518. Moreno S., Hayles J., Nurse P., 1988. Regulation of p34cdc2 protein kinase during mitosis. Cell 58, 361 372

519. Morgan L.V. 1894. Experimental studies on echinoderm eggs. Anat. Anz., 9, 7, 141 152

520. Morla A.Q., Draetta G., Beach D., Wang J.Y.J. 1989. Reversible tyrosine phosphorylation of cdc2: dephosphorylation accompanies activation during entry into mitosis. Cell, 58, 193 203

521. Morrill J.B., Blair C.A., Larsen W.J. 1973. Regulative development in the pulmonate gastropod Lymnaea palustris, as determined by deletion experiments. J. exp. Zool., 183, 1, 47 56

522. Morris T.A., Delorenzo R.J., and Tombes R.M. 1998. CaMK-II inhibition reduces cyclin Di levels and enhances the association of p27(kipl) with Cdk2 to cause G1 arrest in NIH 3T3 cells. Exptl Cell Res., 240(2): 218-227

523. Moskowitz I.P.G., Genreau S.B., and Rothman J.H. 1994. Combinatorial specification of blastomere identity by glp-1-dependent cellular interactions in the nematode Caenorhabditis elegans. Development, 120, 3325-3338

524. Murray A. 1989. The cell cycle as a cdc2 cycle. Nature (L.), 342, 14 15

525. Murray A.W. & Kirschner M.W. 1989. Cyclin synthesis drives the early embryonic cell cycle. Nature (L.), 339, 275 280

526. Murray A.W., Solomon M.J., Kirschner M.W. 1989. The role of cyclin synthesis and degradation in the control of maturation promoting factor activity. Nature (L.), 339, 280 286

527. Muto A., Mikoshiba K. 1998. Activation of inositol 1, 4, 5-triphosphate receptors induces transient changes in cell * shape of fertilized Xenopus eggs. Cell Motil. Cytoskel., 39, 3, 201 208

528. Nakano T., Kontani K., Kurosu H., Katada T., Hoshi M., Chiba K. 1999. G-protein Py-subunit-dependent phosphorylation of 62-kDa protein in the early signaling pathway of starfish oocyte maturation induced by 1-methyladenine. Dev. Biol., 209, 1, 200-209

529. Nath I., Rebhun L.I. 1973a. Studies on cyclic AMP level and phosphodiesterase activity in developing sea urchineggs. Effects of puromycin, 6-dimethylaminopurine and aminophylline. Exptl Cell Res., 11, 1-2, 319

530. Nath I., Rebhun L.I. 1973b. Studies on the uptake and metabolism of adenosine 3',5'- cyclic monophosphate in sea urchin eggs. Exptl Cell Res., 82, 1, 73 78

531. Neer E.J. 1994. G-proteins: Critical control points for transmembrane signals. Protein Sci., 3, 3-14

532. Neer E.J. 1995. Heterotrimeric G proteins: organizers of transmembrane signals. Cell, 80, 249 257

533. Nelse-Stuen, G.L., Bazzi, M.D. 1991. Activation and regulation of protein kinase C enzymes. J. Bioenerg. Biomembr., 23, 43-62

534. Nemecek G.M., Coughlin S.R., Handley D.A., and Moskowitz M.A. 1986. Stimulation of aortic smooth muscle cell mitogenesis by serotonin. Proc. Natl Acad. Sci USA, 83, 674 678

535. Nguyen T.T., Tseng Y.T., Mcgonnigal B., Stabila J.P., Worrell L.A., Saha S., and Padbury, J.F. 1999. Placental biogenic amine transporters: In vivo function, regulation and pathobiological significance. Placenta, 20, 1, 3-11

536. Ni Y.G., Panicker M.M., Miledi R. 1997. Efficient coupling of 5-HTia receptors to the phospholipase C pathway in Xenopus oocytes. Molec. Brain Res., 51, 1-2,115-122

537. Nicotera P., McConkey, Jones D.P., Orrenius S. 1989. ATP stimulates Ca2+ uptake and increase the free Ca2+ concentration in isolated rat liver nuclei. Proc Natl Acad. Sci. USA, 86, 453 457

538. Nicotera P., Orrenius S., Nilsson T., Berggren P.O. 1990. An inositol 1,4,5-triphosphate sensitive Ca2+ pool in liver nuclei. Proc Natl Acad. Sci. USA, 87, 17, 6858 -6862

539. Nicotra A., Schatten G. 1990. Propranolol, a J3-adrenergic receptor blocker, affects microfilament organization, but not microtubules, during the first division in sea urchin eggs. Cell Motil. Cytoskel., 16, 182 189

540. Nikitina L.A., Buznikov G.A., and Lauder J.M. 1995. Putative role of serotonin in the maturation of amphibian oocytes. 25th Annual Meeting Soc. Neurosci., San Diego, 11-16 Nov., 1995. Abstracts, Pt 2, p.862

541. Nishida E., Kumagai H. 1980. Calcium sensitivity of sea urchin tubulin in vitro assembly and effects of calcium dependent regulator (CDR) protein isolated from sea urchin eggs and porcine brains. J. Biochemistry (Tokyo), 87, 1, 143 151

542. Nobes C.D., Hall A. 1995. Rho, Rac, and Cdc42 GTPases regulate the assembly of multimolecular focal complexes associated with actin stress fibers, lamellipodia, and filopodia. Cell, 81, 53 62

543. Noh S.J. & Han J.K. 1998. Inhibition of the adenylyl cyclase and activation of the phosphatidylinositol pathway in oocytes through expression of serotonin receptors does not induce oocyte maturation. J. Exp. Zool., 280, 1, 45 -56

544. Novak B. & Tyson J. 1993a. Modeling the cell division cycle M-phase trigger, oscillation, and size control. J. Theor. Biol., 165, 101 134

545. Novak B. & Tyson J. 1993b. Numerical Analysis of a Comprehensive Model of M-Phase Control in Xenopus Oocyte Extracts and Intact Embryos. J. Cell Sci., 106 (Pt 4): 11531168

546. Numanoi H. 1953. Studies on the fertilization substances. IV. Presence of acetylcholine-like substance and cholinesterase in echinoderm-germ cells during fertilization. Scient. Papers Coll. Gen. Educ. Univ. Tokyo, 3, 2, 193 200

547. Numanoi H. 1955. Studies on the fertilization substances. VI. Formation of acetylcholine-like substance in echinoderm eggs during fertilization. Scient. Papers Coll. Gen. Educ. Univ. Tokyo, 5, 2, 43 54

548. Numanoi H. 1959a. Studies on the fertilization substances. IX. Effect of intermediates split from lecithin in sea urchin eggs during fertilization. Scient. Papers Coll. Gen. Educ. Univ. Tokyo, 9, 2, 297 301

549. Numanoi H. 1959b. Studies on the fertilization substances. VII. Effect of acetylcholine esterases on development of sea urchin eggs. Scient. Papers Coll. Gen. Educ. Univ. Tokyo, 9, 2, 279 283

550. Numanoi H. 1959c. Studies on the fertilization substances. VIII. Enzymic degradation of lecithin during development of sea urchin eggs. Scient. Papers Coll. Gen. Educ. Univ. Tokyo, 9, 2, 285 296

551. Numanoi H. 1961. Studies on the fertilization substances. XII. Morphological changes induced by microinjection of acetylcholine precursors in sea urchin eggs. Scient. Papers Coll. Gen. Educ. Univ. Tokyo, 11, 2, 265 274

552. Nurse P., 1990. Universal control mechanism regulating onset of M-phase. Nature (L.), 344, 503 508

553. Nurse P., Thuriaux P. 1980. Regulatory genes controlling mitosis in the fusion yeast Schizosaccharomyces pombe. Genetics, Princeton, 96, 627 637

554. Nurse P., Bissett Y. 1981. Gene requires in G1 for commitment to cell cycle and in G2 for control of mitosis in fussion yeast. Nature (L.), 292, 558 560

555. Nurse P., Thuriaux P., and Nasmyth K. 1976. Genetic control of the cell division cycle in the fission yeast Schizosaccharomyces pombe. Mol. Gen. Genet. 146, 167 178

556. O'Conner T.P., Duerr J.S. and Bentley D. 1990. Pioneer drowth cone steering decisions mediated by single filopodial contacts in situ. J. Neurosci., 10, 3935 3946

557. Ohkura H., Hagan I.M., and Glover D.M. 1995. The conserved Schizosaccharomyces pombe kinase plol, required to form a bipolar spindle, the actin ring, and septum, can drive septum formation in G1 and G2 cells. Genes & Dev., 9, 1059 1073

558. Okazaki K. 1975. Spicule formation by isolated micromeres of the sea urchin embryo. Amer. Zool., 15, 3, 567 581

559. Olson M.F., Ashworth A., and Hall A. 1995. An essential role for Rho, Rac, and Cdc42, GTPases in cell cycle progression through Gi. Science, 269, 1270 1272

560. Oron Y., Gillo B., Straub R.E., and Gershengorn M.C. 1988. Differences in receptor-evoked membrane electrical responses in native and mRNA-injected Xenopus oocytes. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85, 3820 3824

561. Osawa M. 1994. Soluble sperm extract triggers inositol 1,4,5-triphosphate-induced calcium release in oocytes of the sea urchin Anthocidaris crassispina. Cell Struct. Funct., 19, 73 80

562. Otto J.J., & Schroeder T.E., 1984. Assembly-disassembly of actin bundles in starfish oocytes: an analysis ofactin-associated proteins in the isolated cortex. Dev. Biol., 101, 262 273

563. Otto J.J., Kane R.E., Bryan J., 1982. Redistribution of actin and fascin in sea urchin eggs after fertilization. Cell Motil., 1, 31-40

564. Painter T.S. 1915. An experimental study in cleavage. J.exp. Zool., 18, 2, 299 323

565. Pakala R., Willerson J.T., and Benedict C.R. 1994. Mitogenic effect of serotonin on vascular endothelial cells. Circulation, 90, 1919 1926

566. Palen K., Thorneby L., and Emanuelsson, H. 1979. Effects of serotonin and serotonin antagonists on chick embryogenesis. W. Roux's Arch. 187, 89 103

567. Pantaloni D. & earlier M.F. 1993. How profilin promotes actin filament assembly in the presence of thymosin beta4. Cell, 75, 1007 1004

568. Parisi E., Filosa S., De Petrocellis B., Monroy A. 1978. The pattern of cell division in the early development of the sea urchin, Paracentrotus lividus. Dev. Biol., 65, 1, 38 49

569. Parrington J., Swann K., Shevchenko V., Sesay A.K., Lai F.A. 1996. Calcium oscillations in mammalian eggs triggerd by a soluble sperm protein. Nature, 379, 364 368

570. Pastan I., Johnson G.S., Anderson W.B. 1975. Role of cyclic nucleotides in growth control. Ann. Rev. Biochem., 44, 491 522

571. Patel R., Twigg J., Sheppard B., Whitaker M.J. 1989a. Calcium, cyclin and cell cycle in sea urchin embryos. In: Developmental Biology (UCLA Symp. No 125), 21 35. (eds E. Davidson, J. Ruderman, J. Posakony). A.R.Liss, N.Y.

572. Patel R., Twigg J., Crossley I., Golsteyn R., Whitaker M.J. 1989b. Calcium-induced chromatin condensation and cyclin phosphorylation during chromatin condensation cycles in ammonia-activated sea urchin eggs. J. Cell Sci., Suppl. 12, 129 144

573. Pays-de-Schutter A., Kram R., Hubert E., Brachet J. 1975. Cyclic nucleotides and amphibian development. Exptl Cell Res., 96, 1, 7 14

574. Perez-Mongiovi D., Chang P., Houliston E. 1998. A propagated wave of MPF activation accompanies surface contraction waves at first mitosis in Xenopus. J. Cell Sci., Ill (Pt 3), 385 393

575. Perlmann P. 1954. Study on the effect of antisera on unfertilised sea urchin eggs. Exptl Cell Res., 6, 485 -490

576. Perovic S., Krasko A., Prokic I., Muller I.M., Muller W.E.G. 1999. Origin of neuronal-like receptors in Metazoa: cloning of a metabotropic glutamate GABA-like receptor from the marine sponge Geodia cydonium. Cell Tiss. Res. , 296, 2, 395 -404

577. Perrin D., Langley O.K., Aunis D. 1987. Anti-a-fodrin inhibits secretion from permeabilized chromaffin cells. Nature (L.), 326, 498 501

578. Perry M.M., John H.A., and Thomas N.S.T. 1971. Actin-like filaments in the cleavage furrow of newt egg. Exptl Cell Res., 65, 249 263

579. Pflugfelder 0. 1962. Lehrbuch der entwicklungsgeschichte und entwicklungsphysiologie der tiere. Jena, VEB Gustav Fischer Verlag. 347 p.

580. Philipova R., Whitaker M. 1998. MAP kinase activity increases during mitosis in early sea urchin embryos. J. Cell Sci., Ill (Pt 17), 2497 2505;

581. Picard A., Cavadore J.-C., Lor P., Parnango J.C., Oeda C., Doree M. 1990. Microinjecting a peptide sequence conserved in p34cdc2 homologues induces a transient increase of free calcium in starfish and Xenopus oocytes. Science (NY), 247, 327 329

582. Plough H. 1927. Defective pluteus larvae from isolated blastomeres of Arbacia and Echinarachnius. Biol. Bull., 52, 5, 373 393

583. Poenie M., Alderton J., Tsien R.J., Steinhardt R.A. 1985. Changes of free calcium level with stages of the cell division cycle. Nature, 313, 6013, 147 149

584. Poenie M. & Epel D. 1987. Ultrastructural localization of intracellular calcium stores by a new cytochemical method. J. Histochem. Cytochem., 35, 939 956

585. Pollard T.D. 1995. Actin cytoskeleton. Missing link for intracellular bacterial motility? Curr. Biol., 5, 837 -840

586. Pondaven P., Meijer L., Beach D. 1990. Activation of M-phase specific histone HI kinase by modification of the phosphorylation of its p34cdc2 and cyclin components. Genes Devel., 4, 9-17

587. Powers R.D., Tupper J.T. 1977. Intercellular communication in the early embryo. In: Intercellular communication (Di Mello W.C., ed.), pp. 231 251, N.Y. & London, Plenum Press

588. Pruschy Y.J., Spitz L., Carafoli E., Goldfarb D.S. 1994. Facilitated nuclear transport of calmodulin in tissue culture cells. J. Cell Biol., 127, 6(Pt 1), 1527 1536

589. Purves R.D. 1981. Microelectrode methods for intracellular recording and ionophoresis. London, etc. Academic Press, 143 p.

590. Rapp P.P., Berridge M.J. 1981. The control of transepithelial potential oscillations in the salivary glands of Calliphora erythrocephala. J. Exp. Biol., 93, 119-132

591. Rappaport R. 1965. Geometrical relations of the cleavage stimulus in invertebrate eggs. J. Theoret.Biol., 9, 51 -66

592. Rappaport R. 1973. On the rate of movement of cleavage stimulus in sand dollar eggs. J. Exp. Zool. , 183, 115 -119

593. Rappaport R. 1974. Furrowing in altered cell surface. J. exp Zool., 195, 2, 271 277

594. Rappaport R. 1975. Establishment and organization of the cleavage mechanism. In: Molecules and Cell Movement (Inoue S.and Stephens R.E., eds), pp. 287 304, New York, Raven Press

595. Rappaport R. 1978. Effects of continual mechanical agitation prior to cleavage in echinoderm eggs. J. exp. Zool., 206, 1, 1-12

596. Rappaport R. 1986. Establishment of the mechanism of cytokinesis in animal cells. Int. Rev. Cytol. 101, 245 -281

597. Rasmussen E. & Barrett P. 1984. Calcium messenger system: an integrated view. Physiol. Rev., 61, 938-984

598. Rasmussen C. & Rasmussen G. 1994. Inhibition of G(2)/M progression in Schizosaccharomyces pombe by a mutant calmodulin kinase II with constitutive activity. Molec. Biol. Cell, 5, 7, 785-795

599. Rasmussen C.D., Lu K.P., Means R.L., and Means A.R. 1992. Calmodulin and Cell Cycle Control. J. Physiol. (Paris), 86, 1-3, 83 88

600. Raz T., Eliyahu E., Yesodi V., Shalgi R. 1998. Profile of protein kinase C isozymes and their possible role in mammalian egg activation. FEBS Letters, 431, 3, 415-418

601. Rebhun L.I. 1977. Cyclic nucleotides, calcium, and cell division. Int. Rev. Cytol., 49, 1-54

602. Renaud F., Parisi E., Capasso A., Monroy A. 1979. On the role of serotonin in the regulation of cell division in sea urchin eggs. J. Cell Biol., 83, 2 (Pt 2), 4a

603. Renaud F., Parisi E., Capasso A., and De Prisco E.P. 1983. On the role of serotonin and 5-methoxytryptamine inthe regulation of cell division in sea urchin eggs. Dev. Biol. 98, 37 47

604. Reverberi G. Ascidians. 1972. In: Experimental embryology of marine and fresh- water invertebrates (Reverberi G., ed.), ch. 13, pp. 507 509. Amsterdam -London, North-Holland Publ. Co.

605. Rhyu M.S.& Knoblich J.A. 1995. Spindle orientation and assymmetric cell fate. Cell, 82, 523 526

606. Rickfords L. & White K. 1993. Electroporation of insitol 1,4,5-triphosphate induces repititive calcium oscillations in murine oocytes. J. Exp. Biol., 265, 178 184

607. Ridgeway E.B., Gilkey J.C., Jaffe L.F. 1977. Free calcium increases explosively in activating Medaka eggs. Proc. Natl Acad. Sci. USA, 74, 3, 623 627

608. Rime H., Huchon D., Desmedt V., Thibier C., Galaktionov K., Jessus C., and Ozon R. 1994. Microinjection of cdc25 protein phosphatase into Xenopus prophase oocyte activates MPF and arrests meiosis at metaphase I. Biol. Cell, 82, 1, 11 22

609. Roche E. & Prentki M. 1994. Calcium regulation of immediate-early response genes. Cell Calcium, 16, 4, 331 -338

610. Rocheleau C.E., Downs W.D., Lin R., Wittmann C., Bei Y., Cha Y.H., Ali M., Priess J.R., and Cello C.C. 1997. Wnt signaling and an APC-related gene specify endoderm in early C.elegans embryos. Cell, 90, 707-716

611. Rodbell M. 1983. The complex structure and regulation of adenylate cyclase. In: Cell surface receptors (ed. Strange P.G.), John Willey and Sons, N.Y., pp. 228-240

612. Rosania G.R. and Swanson J.A. 1996. Microtubule can modulate pseudopod activity from a distance inside macrophages. Cell. Motil. Cytoskeleton, 34, 230 245

613. Rose L.S. & Kemphues, K. 1998. The let-99 gene is required for proper spindle orientation during cleavage of the C.elegans embryo. Development, 125, 7, 1337-1346

614. Rosel P., Arranz B., Oros M., Vallejo J., San L., Marcusson J., Navarro M.A. 1999. Different regional distribution of the 5-HT reuptake complex, the 5-HT2A receptors and their second messenger IP3 in human brain. Neurosci. Res. Comm., 24, 2, 107-115

615. Rosenthal E.T., Hunt T., Ruderman J.V. 1980. Selective translation of mRNA controls the pattern of protein synthesis during early development of the surf clam, Spisula solidissima. Cell, 20, 487 492

616. Rothschield L., Barnes H. 1953. The inorganic constituents of sea urchin eggs. J. exp. Biol., 30, 534 -544

617. Rounds D.E., Flickinger R.E. 1958. Distribution of ribonucleoprotein during neural induction in the frog embryo. J. Exp. Zool. , 137, 3, 479 499

618. Rowe S.J., Messenger N.J., and Warner A.E. 1993. The role of noradrenaline in the differentiation of amphibian embryonic neurons. Development, 19, 1343 1357

619. Ruiz i Altaba A. 1994. Pattern formation in the vertebrate neural plate. Trends Neurosci. 17: 233-243

620. Runnström J. 1928. Zur experimentellen Analyse der Wirkung des Lithiums auf den Seeigelkeim. Acta Zool. (Stockholm), 9, 365 424

621. Runnström J. 1966. Acta Zool. Ital., 50, 239 272. Cited by: Hörstadius S. 1973

622. Rustad R.C. 1960. Dissociation of the mitotic time-shedule from the micromere "clock" with X-rays. Acta Embr. Morph. Exper., 3, 2, 155 158

623. Ryan W.L., McClurg J.E. 1973. Tissue levels of cyclic AMP and tumor inhibition. In: Cyclic AMP in immune response and tumor growth (L.Lichtenstein, C. Parker, eds), 329 338, Berlin - N.Y., Springer Verlag

624. Ryan W.L., Heidrick M.L. 1974. Role of cyclic nucleotides in cancer. Adv. Cycl. Nucl. Res., 4, 81 116

625. Sakai H. 1960. Studies on sulfhydryl groups during cell division of sea urchin egg. III. SH-groups of KCl-soluble proteins and their change during cleavage. J. Biophys. Biochem. Cytol., 8, 3, 609 615

626. Sakai H. 1965. Studies on sulfhydryl groups during cell division of sea urchin egg. VII. Electron transfer between two proteins. Biochem. Biophys. Acta, 102, 1, 235 248

627. Sakai H. & Dan K. 1959. Studies on sulfhydryl groups during cell division of sea urchin egg. I. Glutathion. Exptl Cell Res., 16, 1, 24 41

628. Sakuta H. 1994. Inhibition by histamine Hi receptor antagonists of endogenous glibenclamide-sensitive K+ channels in follicle-enclosed Xenopus oocytes. Eur. J. Pharmacol. 266: 99-102

629. Sakuta H., Sekiguchi M., Okamoto K., Sakai Y. 1991. Oscillatory muscarinic acetylcholine responses of Xenopus oocytes are desensitized by protein kinase-C and sensitized by protein phosphatase-2b. Eur. J. Pharmacol.-Molec. Pharm., 208, 4, 297-305.

630. Salmon E.D., Segall R.R. 1980. Calcium-labile mitotic spindles isolated from sea urchin eggs (Lytechinus variegatus) . J. Cell Biol., 86, 355-365

631. Sanders E.J. & Di Caprio R.A. 1976. Intercellular junctions in the Xenopus embryo prior to gastrulation. J. exp. Zool., 197, 3, 415 421

632. Santella L. 1996. The cell nucleus: an Eldorado to future calcium research? J. Membrane Biol., 153, 83 92

633. Sardet C. & Chang P. 1987. The egg cortex: from maturation throught fertilization. Cell Differ., 21, 1 -19

634. Sardet C., Gillot I., Ruscher A., Payan P., Girard J.P., and Derenzis G. 1992. Ryanodine activates sea urchin eggs. Dev. Growth Differ34(1): 37-42

635. Sardet C., McDougall A., Houliston E. 1994. Cytoplasmic domains in eggs. Trends Cell Biol., 4, 166-72

636. Satterwhite L.L. & Pollard T.D. 1992. Cytokinesis. Curr. Opin. Cell Biol., 4, 43-52

637. Sawai T. 1979. Cyclic changes in the cortical layer of non-nucleated fragments of newt's egg. J. Embryol. Exp. Morphol., 51, 183 193

638. Sawai T. 1997. Effect of protein phosphatase inhibitors on cleavage furrow formation in newt eggs: Inhibition of normal furrow formation and concomitant induction of furrow-like dents. Developm. Growth & Differ., 39, 2, 235242

639. Sawai T. 1998. Evidences for direct involvement of microtubules in cleavage furrow formation in newt eggs. Zool. Sci., 15, 1, 51-56

640. Schantz A.K. 1985. Cytosolic free calcium ion concentration in cleaving embryonic cells of Oryzias latipes measured with calcium-selective microelectrodes. J. Cell Biol., 100, 3, 947-954

641. Schatten H. 1994. Dithiothreitol prevents membrane fusion but not centrosome or microtubule organization during the first cell cycles in sea urchins. Cell Motil. Cytoskeleton, 27, 59-68

642. Schatten H., Cheney R., Balczon R., Willard M., Cline C., Simmerly C., and Schatten G. 1986. Localization of fodrin during fertilization and early development of sea urchins and mice. Dev. Biol., 118, 457 466

643. Schindler M., Jiang L.W. 1990. In: Biochemical and structural analysis of the cell nucleus. (E. Wang, J.I. Wang, S. Chien, W.Y. Cheing, C. Wu eds). Pp. 249 263. Academic Press, San Diego

644. Schlaepfer D.D., Hanks S.K., Hunter T., and van der Geer P. 1994. Integrin-nediated signal transduction linked to ras pathway by GRB2 binding to focal adhesion. Nature, 372, 786 791

645. Schneider E.G. 1985. Activation of Na+ dependent transport at fertilization in the sea urchin: requirements of both an early event associated with exocytosis and alater event involving increased energy metabolism. Dev. Biol., 118, 457 466

646. Schollmeyer J.E. 1988. Calpain II involvement in mitosis. Science, 240, 4854, 911 913

647. Schroeder T.E. 1973. Actin in dividing cells: contractile ring binds heavy meromyosin. Proc. Natl Acad. Sci. USA, 70, 1688 1692

648. Schroeder T.E. 1975. Dynamics of the contractile ring. In; Molecules and Cell Movement (Inoue S. & Stephes R.E., eds.), Liss, N.Y., pp. 305 334

649. Schroeder T.E. 1988. Contact independent polarization of the cell surface and cortex of free sea urchin blastomeres. Dev. Biol., 125, 255-264

650. Schroeder T.E., Strickland D.L. 1974. Ionophore A23187, calcium and contractility in frog eggs. Exptl Cell Res., 83, 1, 139-142

651. Schuel H. 1985. Functions of egg cotical granules. In: Biology of fertilization, v. 3 (C.B.Metz, A.Monroy, eds) , Academic Press, Orlando, pp. 1-44

652. Schwartz J.P., Ji Z., Epe.lbaum J. 1998. Somatostatin as a neurotrophic factor. Persp. Develop. Neurobiol., 5, 4, 427 435

653. Scott L.B. & Lennarz W.J., 1989. Structure of major yolk glycoprotein and its processing pathway by limited proteolysis are conserved in echinoids. Dev. Biol., 132, 91 102

654. Scott L.B., Leahy P.S., Decker G.L., and Lennarz W.J., 1990. Loss of yolk platelets and yolk glycoproteins during larval development of sea urchin embryo. Dev. Biol., 137, 368 377

655. Seigel S. 1956. Non-parametric statistics for the behavioral sciences, N.Y., Mc Graw-Hill

656. Serratosa J., Pujol M.J., Bachs 0., Carafoli E. Rearrangement of nuclear calmodulin during proliferative liver cell activation. 1988. Biochem. Biophys. Res. Commun., 150, 3, 1162 1169

657. Seuwen K. & Pouyssegur J. 1990. Serotonin as a growth factor. Biochem. Pharmacol., 39, 985 990

658. Seuwen K., Magnaldo I.M., and Pousségur J. 1988. Serotonin stimulates DNA synthesis in fibroblasts acting through 5-HTib receptors coupled to Gi protein. Nature, 335, 254 256

659. Shen S.S. 1989. Na+-H+ antiport during fertilization of the sea urchin egg is bllockes by W-7 but is insensitive to K2252a and H-7. Biochem. Biophys. Res. Comm., 161, 3, 1100 1108

660. Shen S.S., Ricke, L.A. 1989. Protein kinase C from sea urchin eggs. Comp. Biochem. Physiol92B, 251-254

661. Shilling F., Mandel G., and Jaffe L. 1991. Activation by serotonin of starfish eggs expressing the rat serotonin lc receptor. Cell Reg. 1, 465 469

662. Shilling F., Carroll D., Muslin A., J., Escobedo, J.A., Williams, L.T., Jaffe, L.A. 1993. Evidence for both protein tyrosine kinase and G-protein linked pathway leading to starfish egg activation. Dev. Biol., 162, 590 -599

663. Shmukler Yu. B. & Buznikov G.A. 1998. Functional coupling of neurotransmitters with second messengers during cleavage divisions: facts and hypotheses. Persp. Developm. Neurobiol., 5, 4 69 480

664. Shmukler Yu.B., Grigoriev N.G., Buznikov G.A., Turpaev T.M. 1986. Regulation of cleavage divisions: participation of "prenervous" neurotransmitters coupled with second messengers. Comp. Biochem. Physiol., 83C, 2, 423 427

665. Shuey D.L., Sadler T.W., and Lauder J.M. 1992. Serotonin as a regulator of craniofacial morphogenesis: Site specific malformations following exposure to serotonin uptake inhibitors. Teratology, 46, 367 378

666. Shuey D.L., Sadler T.W., Tamir H., and Lauder J.M. 1993. Serotonin and morphogenesis. II. Transient expression of serotonin uptake and binding protein during craniofacial morphogenesis in the mouse. Anat. and Embryol., 187, 75 -85

667. Shulman H. 1984. Calcium-dependent proteinkinases and neuronal function. In: Receptor again (Lamble J.W., Abbot A.C., eds), Amsterdam-NY-Oxford, Elsevier science publ., pp. 298- 305

668. Silver R.B. 1986. Mitosis in sand dollar embryos is inhibited by antibodies directed against the calcium transport enzyme of muscle. Proc. Natl Acad. Sci. USA, 83, 4302 4306

669. Silver R.B., Cole R.D., Cande W.Z. 1980. Isolation of mitotic apparatus containing vesicles with calcium sequestration activity. Cell, 19, 2, 505 516

670. Sisken J.E. 1980. The significance and. Regulation of calcium during mitotic events. In: Nuclear-cytoplasmic interactions in cell cycle, ed. Witson J.R., N.Y., Academic Press

671. Skop A.R. & White J.G. 1998. The dynactin complex is required for cleavage plane specification in early Caenorhabditis elegans embryos. Current Biology, 8, 20, 1110-1116

672. Slusarski D.C., Yang-Snyder J., Busa W.B., Moon R.T. 1997. Modulation of embryonic intracellular Ca2+ signaling by Wnt-5A. Dev. Biol., 182, 1, 114-120

673. Small D.H., Wurtman R.J. 1985a. Association of serotonin, dopamine, or noradrenaline with an actin-like component in pheochromocytoma (PC12) cells. J. Neurochem. 45, 825 831

674. Small D.H., Wurtman R.J. 1985b. Binding of 3H-serotonin to skeletal muscle actin. J. Neurochem. 45, 819 824

675. Smith L.C., Wilmut I. 1994. Control of Cleavage and Further Development in Vitro in Reconstituted Two-Cell Mouse Embryos. J. Reprod. Fert., 100(1): 323-329

676. Snow P., Nuccitelli R. 1993. Calcium buffer injections delay cleavage in Xenopus laevis blastomeres. J. Cell Biol., 122, 387 394

677. Solomon M., Booher R., Kirschner M., Beach D. 1988. Cyclin in fission yeast. Cell, 54, 738 739

678. Sousa M., Barros A., Tesarik J. 1996. The role of ryanodine-sensitive calcium stores in the calcium oscillation machine of human oocytes. Mol. Hum. Reprod., 2, 265 272

679. Speksnijder J.E., Miller A.L., Weisenseel M.H., Chen T.H., Jaffe L. 1989. Calcium buffer injections blockfucoid egg development by facilitating calciumdiffusion. Proc. Natl Acad Sci. USA, 86, 6607-6611

680. Speksnijder J.E., Terasaki M., Hage W.J., Jaffe L.F., Sardet, C. 1993. Polarity and reorganization of the endoplasmic reticulum during fertilization and ooplasmic segregation in the ascidian egg. J. Cell Biol., 120, 6, 1337-1346

681. Spemann H., Mangold H. 1924. Uber Induktion von Embryonalanlagen durch Implantation artfremder Organisatoren. Wilh. Roux's Arch. EntwMech. Org., 100, 599

682. Spiegel M., Spiegel E. 1975. The reaggregation of dissociated embrionic sea urchin cells. Amer.Zool, 15, 583-606.

683. Spiegel M., Spiegel E. 1978. The morphology and specificity of cell adhesion of echinoderm embrionic cells. Exptl Cell Res., Ill, 261-268

684. Spinelli G., Dibernardo M., Palla F., Anello L., Oliveri P., Melfi R., Bonura C., Russo R., and Di Gaetano L. 1997. Gene expression during early embryogenesis of sea urchin: The histone and homeobox genes. Inv. Reprod. & Developm., 31, 1-3, 11-19

685. Sprengel R. & Seeburg P.H. 1995. Ionotropic glutamate receptors. In: Ligand- and Voltage-gated Ion Channels (R.A.North, ed.). CRC Press, Boca Raton, pp. 213 263

686. Spudich A. & Spudich J.A. 1979. Actin in Triton-treated cortical preparations of unfertilized and fertilized sea urchin eggs. J. Cell Biol., 82, 212 226

687. Srinivasan M., Edman C.F., Schulman H. 1994. Alternative splicing introduces a nuclear localization signal that targets multifunctional CaM kinase to the nucleus. J. Cell Biol., 126, 4, 839 852

688. Stachecki J.J. & Armant D.R. 1996. Transient release of calcium from inositol 1,4,'5-trisphosphate-specific stores regulates mouse preimplantation development. Development, 122 , 8, 2485-2496

689. Staehelin L. 1974. Structure and function of intercellular junctions. Int. Rev. Cytol., 39, 191—283.

690. Stanley-Samuelson D.W. 1994. The biological significance of prostaglandins and related eicosanoids in invertebrates. Amer. Zoologist, 34, 589-598

691. Stehno-Bittel L., Perez-Terzic C., Clapman D.E. 1995. Diffusion across the nuclear envelope inhibited by depletion of hte nuclear Ca2+ store. Science, 270, 5243, 1835 1838

692. Steinhardt R.A. 1990. Intracellular free calcium and the first cell cycle of the sea urchin embryo (Lytechinus pictus). J. Reprod. Fert., Suppl. 42, 191 197

693. Steinhardt R.A., Alderton J. 1988. Intracellular free calciums rise triggers nuclear envelope breakdown in the sea urchin embryo. Na.ture (L.) , 332, 364 366

694. Steinhardt R.A., Bi G.Q., and Alderton J.M. 1994. Cell membrane resealing by vesicular mechanism similar to neurotransmitter release. Science 263, 390-393

695. Stephens R.E., and Prior G. 1992. Dynein from serotonin-activated cilia and flagellar extraction characteristics and distinct sites for cAMP-dependent protein phosphorylaiton. J. Cell Sci. 103, 999 1012

696. Stice S., Robl J. 1990. Activation of mammalian oocytes by a factor obtained from rabbit sperm. Mol. Reprod. Dev., 25, 272 280

697. Stith B.J., Goalstone M., Silva S., and Jaynes, C. 1993. Inositol 1,4,5-trisphosphate mass changes from fertilization through 1st cleavage in Xenopus laevis. Molec. Biol. Cell, 4, 4, 435-443

698. Strieker, S.A. 1996. Changes in the spatiotemporal patterns of intracellular calcium transients during starfish early development. Inver. Reprod. & Developm., 30, 1-3, 135 152

699. Strudel G., Recasens M., and Mandel P. 1977. Identification de catecholamines et de serotonine dans les chordes d'embryons de poulet. C.R. Acad. Sci. Paris, 284: 967-969

700. Sullivan W.D., Sullivan C.F. 1964. The acetylcholine content and the effect of hexamethonium bromide in this compound at the various phases of division in Tetrahymena pyriformis Gl. Broteria. Cienc. natur., 33, 1, 17 33

701. Swann K. 1990. A cytosolic sperm factor stimulates repetitive calcium increases and mimics fertilisation in hamster eggs. Development, 110, 1295 1302

702. Swann K., 1992. Different triggers for calcium oscillations in mouse eggs involve a ryanodine-sensitive calcium store. Biochem. J., 287, 79 84

703. Swann K., Whitaker M.J., 1985. Phorbol ester stimulates the sodium-hydrogen exchange of sea urchin eggs. Nature (L.), 314, 274 277

704. Swann, K. and Whitaker, M.J. 1986. The part played by inositol triphosphate and calcium in the propagation of the fertilisation wave in sea urchin eggs. J. Cell Biol., 103, 2333 2342

705. Swann K., Whitaker M.J. 1990. Second messengers at fertilization in sea-urchin eggs. J. Reprod. Fert., Suppl. 42, 141 153

706. Swanson C.A., Arkin A.P., and Ross J. 1997. An endogenous calcium oscillator may control early embryonic division. Proc. Natl Acad. Sci. USA, 94, 4, 1194 1199

707. Swenson K.I., Farell K.M., Ruderman J.V. 1986. The clam embryo protein cyclin A induces entry into M phase and the resumption of meiosis in Xenopus oocytes. Cell, 47, 861 -870

708. Taieb F., Chartrain I., Chevalier S., Haccard 0., and Jessus C. 1997. Cyclin D2 arrests Xenopus early embryonic cell cycles. Exptl Cell Res., 237, 2, 338-346

709. Takuwa N., Ganz M., Takuwa Y., Sterzel R.B., and Rasmussen H. 1989. Study of mitogenic effect of serotonin in rat renal mesangial cells. Am. J. Physiol., 257, F431 -F439

710. Talesa V., Contenti S., Mangiabene C., Pascolini R., Rosi G., and Principato G.B. 1990. Propyonylcholinesterase from Murex brandarls: comparison with other invertebrate cholinesterases. Comp. Biochem. Physiol. 96C, 39-43

711. Tamir H. and Gershon M.D. 1990. Serotonin-storing secretory vesicles. Ann. N.Y.Acad. Sci. USA, 600, 53 67

712. Tanaka Y. 1976. Effects of the surfactants on the cleavage and further development ofthe sea urchin embryos. 1. The inhibition of micromere formation at the fourth cleavage. Developm., Growth & Differ., 18, 2, 113 122

713. Tang, L., Pelech, S.L., and Berger, J.D. 1994. A cdc2-like kinase associated with commitment to division in Paramecium tetraurelia. J. Eukaryotic Microbiol., 41, 4, 381 387

714. Tauc L., Boux G. 1982. Are there intracellular acetylcholine receptors in the cholinergic synaptic nerve terminals? J. Physiol.{Paris), 78, 366-372

715. Taylor C., Lawrence Y., Kingland C. 1993. Oscillations in intracellular free calcium induced by spermatozoa in human oocytes after fertilisation. Hum. Reprod., 8, 2174 -2179

716. Terasaki M., and Sardet C. 1991. Demonstration of calcium uptake and release in sea urchin eggs by cortical endoplasmic reticulum. J. Cell Biol., 115, 1031 1037

717. Tesarik J., Sousa M., Testart J. 1994. Human oocyte activation after intracytoplasmic sperm injection. Hum. Reprod., 9, 511 518

718. Theriot J.A. & T.J. Mitchison, 1993. The three faces of profi1in. Cell, 75, 835 838

719. Theriot J.A., Rosenblatt J., Portnoy D.A., Goldschmidt-Clermont P.J., and Mitchison T.J. 1994. Involvement of profilin in the actin-based motility of L. Monocytogenes in cells and in cell-free extracts. Cell, 76, 505 517

720. Thomas E.W., Murad F., Looney W.B., Morris H.P. 1973. Adenosine 3',5'-monophosphate concentrations in Morris hepatomas of different growth rates. Biochim. Biophys. Acta, Ser. G., 297, 2, 564 567

721. Thorpe C.J., Schlesinger A., Carter J.C., and Bowerman B. 1997. Wnt signaling polarizes an early C.elegans blastomere to distinguish endoderm from mesoderm. Cell, 90, 695 705

722. Thron C.D. 1994. Theoretical Dynamics of the Cyclin B-MPF System A Possible Role for pl3(sucl). Biosystems, 32, 2, 97-109

723. Togo T., Deguchi R., and Osanai K. 1993. Meiotic maturation and early development in the marine bivalve Hiatella flaccida. Bull.Marine Biol. Stat. Asamushi 19, 41-47

724. Toneby M. 1977a. Functional aspects of 5-hydroxytryptamine in early embryogenesis of Echinoidea and Asteroidea. Dept Developm. Physiol., The Wenner-Gren Inst., Univ. Stockh., Stockholm

725. Toneby M. 1977b. Functional aspects of 5-hydroxytryptamine in early embryogenesis of sea urchin Paracentrotus lividus. Wilh. Roux/ Arch. Dev. Biol., 181, 3, 247 260

726. Torok K., Wilding M., Groigno L., Patel R., Whitaker M. 1998. Imaging the spatial dynamics of calmodulin activation during mitosis. Curr. Biol., 8, 12, 692 699

727. Toth M., Benjamin D., and Shenk T. 1994. Targeted disruption of the 5-HT2 receptor results in developmental abnormalities in mice. Abst. IUPHAR Third Satellite Meeting on Serotonin, p.37

728. Toyoshima F., Moriguchi T., Wada A., Fukuda M., Nishida E. 1998. Nuclear export of cyclin Bi and its possible role in the DNA damage-induced G(2) checkpoint. EMBO Journal, 17, 10, 2728-2735

729. Trams E. 1981. On the evolution of neurochemical transmission. Differentiation, 1, 3, 125 133

730. Tuganowski W., Kopec P., Kaszuba M., Glanc A. 1981. Do the intracellular (3-adrenoreceptor exist in the rabbit auricle? Pol. J. Pharmac. Pharm., 33, 1, 49-52

731. Tupper J.T. & Sanders J.W. 1972. Intercellular permeability in the early Asterias embryo. Develop. Biol., 27, 4, 546 554

732. Turing A.M. 1952. The chemical basis of morphogenesis. Phil. Trans. Roy. Soc. B., 641, 37-72

733. Turlejski K. 1996. Evolutionary anncient roles of serotonin: long-lasting regulation of activity and development. Acta Neurobiol. Exp., 56, 619 636

734. Turner P. & Jaffe L. 1989. G-proteins and the regulation of oocyte maturation and fertilisation. In: Schatten H. And Schatten G. (eds), The Cell Biology of Fertilisation. Academic Press, New York, pp. 297 318

735. Turpaev T.M., Yurchenko O.P., Grigoriev N.G. 1988. Alteration of acetylcholine response by intra- and extracellular serotonin application in intracellularly perfused neurons of Limnaea stagnalis. Cell. Molec. Neurobiol., 1, 4, 381-390

736. Twigg J., Patel R., Whitaker M.J. 1988. Translational control of InsP3~induced ch-romatin condensation during thr early cell cycles of sea urchin embryos. Nature (L.), 332, 366 369

737. Ueda S., Gu X.F., Whitaker-Azmitia P.M., Naruse I., and Azmitia, E.C. 1994. Neuro-glial neurotrophic interaction in the S-100|3 retarded mutant mouse (Polydactyly Nagoya) . I. Immunocytochemical and neurochemical studies. Brain Res. 633: 275-283

738. Usui N., Yoneda M. 1982. Ultrastructural basis of the tension increase in sea urchin eggs prior to cytokinesis. Dev. Growth Differ., 24, 453 465

739. Uzunov P., Weiss B. 1971. Effects of phenothiazine tranquilizers on the cyclic 3',5'-adenosine monophosphate system of rat brain. Neuropharmacology, 10, 4, 697 708

740. Vacquier V.D. 1968. The connection of blastomers of sea urchin embryos by filipodia. Exptl Cell Res., 52, 571—581

741. Vacquier V.D. 1981. Dynamic changes of egg cortex. Dev. Biol., 84, 1 26

742. Vacquier V.D., Mazia D. 1968a. Twinning of sand dollar embryos by means of dithiothreitol. The structural basis of blastomere interactions. Exptl Cell Res., 52, 2, 209 -219

743. Vacquier V.D., Mazia D. 1968b. Twinning of sand dollar embryos by means of dithiothreitol. Roles of cell surfaceinteractions and of the hyaline layer. Exptl Cell Res., 52, 2, 459 468

744. Vaillancourt C., Petit A., and Belisle S. 1994a. D2-dopamine agonists inhibit adenosine 3':5'-cyclic monophosphate (cAMP) production in human term trophoblastic cells. Life Sci. 55, 1545-1552.

745. Van den Biggelaar J.A.M. 1971. Development of division asynchrony and bilateral symmetry in the first quartet of micromere in eggs of Lymnaea. J. Embryol. exp Morph., 26, 3, 351 359

746. Velez C., Aranega A.E., Fernandez J.E., Melguizo C., Alvarez L., Aranega A. 1994. Modulation of contractile protein troponin-T in chick myocardial cells by catecholamines during development. Cell. Molec. Biol., 40, 1189-1199

747. Verdonk N.H., Cother J.N. 1973. The development of isolated blastomeres in Bithynia tentaculata (Prosobranchia, Gastropoda). J.exp.Zool. r 186, 1, 47 62

748. Verrault A., Boekaert J., and Waeber C. 1992. Activation of 5-HTiA receptors expressed in NIH3T3 cells induces focus formation and potentiates EGF effect on DNA synthesis. Mol. Biol. Cell, 3, 961 969

749. Vincenzi F.F. 1981. Calmodulin pharmacology. Cell Calcium, 2, 2, 387-409

750. Vorbrodt A., Konwinski M., Solter D. and Koprowski H. 1977. Ultrastructural cytochemistry of membrane-bound phosphatases in preimplantation mouse embryos. Dev.Biol., 55, 117-134

751. Wallace B.G. 1995. Regulation of the interaction of nicotinic acetylcholine receptors with the cytoskeleton by agrin-activated protein tyrosine kinase. J. Cell Biol., 128, 1121-1129

752. Wallace J.A. 1982. Monoamines in the early chick embryo: demonstration of serotonin synthesis and the regionaldistribution of serotonin-concentrating cells during morphogenesis. Am. J. Anat. 165: 261-276

753. Wang J.K., Gao G., and Goldfarb M. 1994. Fibroblast growth factor receptors have different signaling and mitogenic potentials. Mol. Cell. Biol., 14, 181 188

754. Wang W.H., Sun Q.Y., Hosoe M., and Shioya Y. 1997. Calcium- and meiotic-spindle-independent activation of pig oocytes by the inhibition of staurosporine-sensitive protein kinases. Zygote, 5, 1, 7582

755. Wasserman W.J., Smith L.D., 1978. The cyclic behaviour of a cytoplasmic factor controlling nuclear membrane breakdown. J. Cell Biol., 78, R15 R22

756. Watanabe K., Hamaguchi M.S., and Hamaguchi Y. 1997. Effects of intracellular pH on the mitotic apparatus and mitotic stage in the sand dollar egg. Cell Motil. Cytoskeleton, 37, 3, 263-270

757. Waters C.A., Morand J.N , Schatzman R.C., and Carlson D.M. 1998. Induction of p34(cdc2) in mouse parotid glands upon activation of Pi-adrenergic receptors. Cell. Molec. Biol., 44, 2, 333-342

758. Webb S., Anderson, R.A., and Brown, N.A. 1994. Mouse trisomy 16 model of heart defects in Down syndrome: atrioventricular cushion cells and volumes. Teratology 49: 373

759. Webb S.E., Lee K.W., Karplus E., Miller A.L. 1997. Localized calcium transient accompany furrow positioning, propagation, and deepening during the early cleavage period of zebrafish embryos. Developm. Biol., 192, 1,78 -92

760. Weiss E.R., Maness P., and Lauder J.M. 1998. Why do neurotransmitters act like growth factors? Persp. Dev. Neurobiol., 5, 4, 323 335

761. Welsh M.J., Dedman J.R.,, Brinkley B.R., and Means A.R. 1979. Tubulin and calmodulin. Effects of microtubule and microfilament inhibitors on localization in hte mitotic apparatus. J. Cell Biol., 81, 624 634

762. Whalley T., McDougall A., Crossley I., Swann K., and Whitaker M.J. 1992. Internal calcium release and activation of sea urchin eggs by cGMP are independent of the phosphoinositide signaling pathway. Mol. Biol. Cell, 3, 373-383

763. Whalley T., Terasaki M., Cho M.S., Vogel S.S. 1995. Direct membrane retrieval into large vesicles after exocytosis in sea urchin eggs. J. Cell Biol., 131, 5, 1183-1192

764. Wheatley S.P. and Wang Y.L. 1996. Midzone microtubule bundles are continuously required for cytokinesis in cultured epithelial cells. J. Cell Biol., 135, 4, 981-989

765. Whitaker M.J. 1989. Phosphoinositide messengers in eggs and oocytes. In: Inositol Ldpids and Cellular Signalling,pp. 459 483. Eds R.H. Michell, C.P. Downes & A. Drummond. Academic Press, New York

766. Whitaker M.J. 1990. Cell cycle control proteins are second messenger targets at fertilization in sea-urchin eggs. J. Reprod. Fert., Suppl. 42, 199 2 04

767. Whitaker M.J., Steinhafdt R.A. 1981. The relation between the increase in reduced nicotinamide nucleotides and the initiation and maintenance of DNA synthesis in the egg of sea urchin Lytechinus pictus. Cell, 25, 95 103

768. Whitaker M.J., Steinhardt R.A. 1982. Ionic regulation of egg activation. Q. Rev. Biophys. 15, 593 666

769. Whitaker M.J. & Swann K., 1993. Lighting the fuse at fertilisation. Development, 117, 1-12

770. Whitaker-Azmitia, P.M. 1991. IV. Role of serotonin and other neurotransmitter receptors in brain development: Basis for developmental pharmacology. Pharmacol. Rev. 43, 553-561

771. Whitaker-Azmitia P.M. and Azmitia E.C. 1994. Astroglial 5-HTia receptors and S-100k in development and plasticity. Persp. Dev. Neurobiol. 2, 3, 233-238

772. Whitaker-Azmitia P., Lauder J., Shemmer A., and Azmitia E. 1987. Postnatal changes in serotonin receptors following prenatal alteration in serotonin levels: Further evidence for functional fetal serotonin receptors. Dev. Brain Res. 33, 285-289

773. Whitaker-Azmitia P.M., Quartermain D., and Shemer A.V. 1990a. Prenatal treatment with a selective D1 receptor agonist (SKF 38393) alters adult 3H.paroxetine binding and dopamine and serotonin behavioral sensitivity. Dev. Brain Res., 57, 181 185

774. Whitaker-Azmitia P.M., Shemer A.V., Caruso J., Molino L., and Azmitia E.C-. 1990b. Role of high affinity serotonin receptors in neuronal growth. Ann. N.Y. Acad. Sci. 600, 315-330

775. White A.A. 1974. Separation and purification of cyclic nucleotides by alumina column chromatography. In: Methods in Enzymology (eds J.G. Hardmann, R.W.O'Malley), Academic Press, N.Y., v. 38C, pp. 41-46

776. Whitfield J.F. 1980. Adrenergic agents, calcium ions and cyclic nucleotides in the control of cell proliferation. In: Adrenergic activators and inhibitors. Handb. of Exp. Pharm. (ed. Sjekers L.), 1980, Springer Verlag, Berlin, v. 54, pp. 261-317.

777. Whitfield J.F., Rixon R.H., MacManus J.P., Balk S.D. 1973. Calcium, cyclic adenosine 3',5'-monophosphate, and the control of cell proliferation: a review. In Vitro, 8, 4, 257 272

778. Whittaker J.R. 1979. Cytoplasmic determinants of tissue differentiation in the ascidian egg. In: Determinants of spatial organization. (Subtelny S., Königsberg I.R., eds). pp. 29 52. N.Y., Academic Press

779. Wick S.M. & Hepler P.K. 1980. Localization of Ca++-containing antimonate precipitates during mitosis. J. Cell Biol., 86, 2, 500 513

780. Wikramanayake A.H., Huang L., Klein W.H. 1998. ß-Catenin is essential for patterning the maternally specified animal- vegetal axis in the sea urchin embryo. Proc. Natl Acad. Sei. USA, 95, 16, 9343-9348

781. Wilding M. 1996. Calcium and cell cycle control in early embryos. Zygote, 4, 1 6

782. Wilding M. and Dale B. 1997. Sperm factor: what is it and what does it do? Molec. Human Reprod., 3, 3, 269-273

783. Wilding M., Török K., and Whitaker M. 1995. Activation-dependent and activation-independent localisation of calmodulin to the mitotic apparatus during the first cell cycle of the Lytechinus pictus embryo. Zygote, 3, 3, 219224

784. Wilding M., Kyozuka K., Russo G.L., Tosti E., Dale B. 1997. A soluble extract from human spermatozoa activates ascidian oocytes. Developm., Growth & Differ., 39, 3, 329336

785. Wilson E.B. 1903. Experiments on cleavage and localization in the nemertine egg. Arch. f. Entw.-mech., 16, 3, 411 460

786. Wilson H.L., Galione A. 1998. Differential regulation of nicotinic acid adenine dinucleotide phosphate and cADP-ribose production by cAMP and cGMP. Biochem. J., 331, 3, 837-843

787. Wilt F.H. 1987. Determination and morhogenesis in the sea urchin embryo. Development, 100, 559-575

788. Wilt F.H., Livingston B. and Khaner 0. 1995. Cell interactions during early sea urchin development. Amer. Zool., 35, 353-357

789. Winston N.J. 1997. Stability of cyclin B protein during meiotic maturation and the first mitotic cell division in mouse oocytes. Biol. Cell, 89, 3, 211-219

790. Wolpert L. 1971. Positional information and pattern formation. Curr. Top. Devel. Biol., 6, 183 224

791. Wolpert L.E. and Mercer E.H. 1963. An electron microscope study of the development of the blastula of the sea urchin embryo and its radial polarity. Exptl Cell Res., 30, 2, 280 300

792. Wolpert L. & Stein W.D. 1984. Positional information and pattern formation. In: Pattern formation. A primer indevelopmental biology (G. M. Malacinski ed. ) . Macmillan Publishing Co. N.Y. ch. 1, p. 3 21

793. Wong, G.K., Hoyle, D.H.R., and Begg, D.A. 1996. Alteration of cell cycle timing and induction of surface instability in starfish blastomeres microinjected with antibodies to spectrin. Dev. Biol., 180, 1, 199-212

794. Wong G.K., Allen P.G., Begg D.A. 1997. Dynamics of filamentous actin organization in the sea urchin egg cortex during early cleavage divisions: Implications for the mechanism of cytokinesis. Cell Motil. Cytoskeleton, 36, 1, 30-42

795. Woodward D. 1968. Electrical signs of new membrane production during cleavage of Rana pipiens eggs. J. Gen. Physiol., 52, 509-531

796. Yasumasu J., Fujivara A., Ishida K. 1973. Periodic changes in the content of adenosine 3', 5'-cyclic monophosphate with close relation to the cycle of cleavage in the sea urchin eggs. Biochem. Biophys. Res. Comm., 54,2, 628 632

797. Yasumasu I., Hino A., Asami K. 1977. Effect of dibutyryl adenosine 3',5'-cyclic monophosphate on several metabolic systems in sea urchin eggs. Cell Struct. Funct., 2, 11-20

798. Yavarone M.S. 1991. Prospective Roles for Serotonin in Heart Development. Ph.D Thesis, Univ. North Carolina at Chapel Hill

799. Yavarone, M.S., Shuey, D.L., Tamir, H., Sadler, T.W., and Lauder, J.M. 1993a. Serotonin and cardiac morphogenesis in the mouse embryo. Teratology, 47, 573-584

800. Yavarone M.S., Shuey D.L., Sadler T.W., and Lauder J.M. 1993b. Serotonin uptake in the ectoplacental cone and placenta of the mouse. Placenta 14, 149-161

801. Yazaki I. 1984. The egg originated and local distribution of the surface of sea urchin embryo cells detected by immunofluorescence. Acta Embryol.Morphol. Exper., 5, 3-22

802. Yazaki I. 1991. Polarization of the surface membrane and cortical layer of sea urchin blastomeres and its inhibition by cytochalasin B. Develop. Growth Differ., 33,3, 267-276

803. Yazaki I., Uemura I. 1989. Immunocyytochemical evidence for the presence of two domains in the plasma membrane of sea urchin blastomere. Roux's Arch. Dev. Biol., 198, 179184

804. Yazaki I., Tosti E., Dale B. 1995. Cytoskeletal elements link calcium channel activity and the cell cycle in early sea urchin embryos. Development, 121, 1827 1831

805. Yokota Y. & Kato K.H., 1988. Degradation of yolk proteins in sea urchin eggs and embryos. Cell Differ., 23, 191 200

806. Yoneda, M., and Schroeder, T.E. 1984. Cell cycle timing in colchicine-treated sea urchin eggs. Develop. Growth Differ. 26, 372

807. Yoneda M., Ikeda M. , and Washitani S. 1978 . Periodic changes in the tension at the surface of activated non-nucleated fragments of sea urchin eggs. Develop. Growth & Differ., 20, 3, 329 336

808. Yoshigaki T., Maekawa S., Endo S., and Sakai H. 1989. Localization of high-molecular-weight actin binding protein in the sea urchin egg from fertilization through cleavage. Cell Struct. Funct., 14, 363-374

809. Yue C. , White K., Reed W., and Bunch T., 1995. The existence of inositol 1,4,5-triphosphate and ryanodine receptors in mature bovine oocytes. Development, 121, 2645 2654

810. Zagon I.S., Higbee R., Riederer B.M., and Goodman S.R. 1986. Spectrin subtypes in mammalian brain: an immunoelectron microscopic study. J. Neurosci., 6, 2977 -2986

811. Zimprich F., Torok K., Bolsover S.R. 1995. Nuclear calmodulin responds rapidly to calcium influx at the plasmalemma. Cell Calcium, 17, 3, 233 238

812. Zucker R.S., Steinhardt R.A., and Winkler M.M. 1978. Intracellular calcium and the mechanism of parthenogenetic activation of sea urchin eggs. Dev. Biol., 65, 285 295

Информация о работе

Шмуклер, Юрий Борисович
доктора биологических наук
Москва, 2000
ВАК 03.00.13

Диссертация

Множественность управляемых трансмиттерами процессов в период делений дробления - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы