Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Микроэкологические и биохимические нарушения при токсических гепатитах и их коррекция фитобактериопрепаратами

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Микроэкологические и биохимические нарушения при токсических гепатитах и их коррекция фитобактериопрепаратами"

Г I и « ■■

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ И МЕДИЦИНСКОЙ ПРОШЛЕИНОСТИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ МОСКОВСКАЯ НЕДИЦИПСКАЯ АКАДЕМИЯ ЙНЕНИ И.Н.СЕЧЕНОВА

На правах рукописи ЛЕХАТИНОВА Татьяна Чингисовна

9ДК 616.36-002-099-06:61&--008.93+615.322.015.2:615.33

НЙКР03К0Л0ГЯЧЕСКИЕ И БИОХИМИЧЕСКИЕ НАРН1ЕШ ПРИ ТОКСИЧЕСКИХ ГЕПАТИТАХ И ИХ КОРРЕКЦИЯ ФЙТОБАКТЕРИОПРЕПЙРДТЙИИ

С Экспериментальное исследование 3

03.00.07 - микробиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание дченой степени кандидата медицинских наук

Москва - 1995

Работа выполнена в Московском научно-исследовательском институте эпидемиологии и микробиологии им. Г. Н. Габричевского.

Научные руководители Доктор медицинских наук, профессор Шендеров К А. Доктор медицинских наук, профессор Николаев С. М.

Официальные оппоненты Доктор медицинских наук, профессор Вэдьмина Е. А. Доктор медицинских наук, профессор Дратвин С. А.

Ведущая организация - Московский областной научно-иссле-доЕательский клинический институт им. Ы. Ф. Владимирского

Защита состоится "_" _1995 г. в _часов на

заседании Диссертационного Совета Д 074.05.10 при Московской медицинской академии им. И. М. Сеченова.

Автореферат разослан "_" _ 1995 г.

Ученый секретарь Диссертационного Совета, кандидат медицинских наук,

доцент А. Ю. Миронов

- з -

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕШ. В настоящее время на заболевания печении и желчевыводящих путей приходится около 4.0Z всей патологии органов пищеварительной системы. Устойчиво сохраняется на высоком уровне заболеваемость вирусным гепатитом, многообразными стали токсические и аллергические повреждения гепатобили-арной системы, как результат попадания с пищей и водой различных ксенобиотиков, Еключая фармакологические препараты (Шды-мсва С. Д. ,1993; Hakanura Н., 1991; Рарро I., 1991). Данные последних лет продемонстрировали, что в процессах летоксикации

L>ööaui*iHaA CUcfürmcnmi. iiühduiciiüüijriX В Qüi'ciHJdoU jrioüHfci iLün UÜUci^jriü

цихся в пищеваригельном тракте, наряду с печенью, больше участие принимает микрофлора желудочно-кишечного тракта, кото-рал в виде биопленки выстилает всю слизистую ( Куваева И. Б. , 1991; Шэндеров Б. А., 1990; Hill M.J., 1986; Miyamori I., 1988; Tannock а V., 1988). Практически печень и микрофлора желудочно-кишечного тракта - это два основных детоксикационных органа макроорганизма, осуществляющих его защиту от токсических соединенна за счет окислительных ре акций- (печень) или гидролитических и восстановительных анаэробных процессов (микроорганизмы кишечнгасг). Печень и микрофлора кишечника активно участвуют также в процессах печеночно-кишечной рециркуляции различных органотески:: и неорганических соединений. Учитывая многообразие совместных функций, выполняемых печенью и нормальной микрофлорой, не пригодится сомневаться, что микроэкологические наБушеш.л и повреждения печеночных клеток, вызываемые различила! факторгш, кзгут приводить к серьезным последствиям как функционального, гак и структурного характера не только в этих = системах, нг и з макроорганизме в целом. К сожалению, целенаправленных исследований по экспериментальному изучению взаимодействия функций печени и нормальной микрофлоры кишечника до настоящего времени выполнялись в недостаточном объеме, что не адекватно кс?сш?»б2м патологий,'связанных о повреждениями печени и дисбалелсг:; микрофлоры кишечника. Так, не ясно, какие группы микроорганизмов в кишечнике .претерпевают изменения при токсических повреждениях печени, не выявлены фазы и формы реагирования микрс£.-.эры на кратковременное и длительное воздействие на печень^гоксических соединений, в частности четы-реххлористого углерода. Не установлена информативность того

или иного показателя функциональной активности печени для оценки степени дисбаланса кишечной микрофлоры1 или определенных ее компонентов. Практически отсутствуют данные о возможности коррекции функций печени бактериопрепаратами, влиянии различных противопеченочных средств (з т.ч. фитопрепаратов), на состояние микрофлоры кишечника. Отсутствуют наблюдения пй профилактическому и терапевтическому эффекту 'применения при токсических гепатитах комплекса препаратов, в механизме положительного эффекта которых лежит восстановление функций печени (например, полифитохол) и корректоров нормальной кишечной микрофлоры (например, лактобациллы). Между тем, исследования в этих направлениях позволят детализировать механизмы повреждения печени под воздействием различных токсичеких препаратов, выяснить участие и значимость в развитии повреждений печени микрофлоры кишечника или ее метаболитов и, в случае подтверждения взаимодействия печени и кишечной микрофлоры в поддержании здорового их состояния, разработать и предложить принципиально новые приемы - фитобактериопрофилактику и фитобагсгерио-терапию токсических гепатитов, сопровождающихся развитием дисбдазов.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ. Цель настоящей работа- выявление микроэкологияеских нарушений толстой кишки при экспериментальных гепатитах, вызванных тетрахлорметаном, а также выяснение эффективности лечения и профилактики гепатитов применением комбинации фито- и багсгериопрепаратоЕ.

Для достижения поставленной цеди были определены следующие задачи: - *

1. Установить микроэкологические критерии повреждения печени при остром и хроническом гепатитах, вызванных четыреххлористым углеродом.

2. Выяснить влияние фитопрепарата (полифитохола) на микрофлору кишечника и биохимические показатели функции печени.

3. Выяснить влияние бифидобактерий и лактобацилл на состав микрофлоры при остром и хроническом токсическом гепатитах и функциональное состояние печени.

4. Обосновать перспективность фитобактериотерагаот гепатитов с учетом вовлечения в их патогенез и клинические проявления нарушений как со стороны печени, так и дисбаланса в кишечной микрофлоре.

(

НАУЧНАЯ НОВИЗНА. Впервые на модели экспериментального гепатита. вызванного CCl^, установлена корреляция изменений некоторых физиолога-биохимических показателей функционирования печэни и состава микрофлоры толстой кишки крыс с острым и хроническим гепатитами. Выявлены формы и фазы реагирования аэробной и анаэробной микрофлоры фекалий у крыс с гепатитами.

Впервые продемонстрировано отсутствие икгибирующего зф-jsKia лолифитсхола на рост и размножение молочнокислых и бифи-добактерий in vitro и наличие определенных позитивных измене-

~ 2~~ ' **гжтлтrrrtiyo ТТТ41* ог>г> Цяяннинмип. uurwaoGi

но, что коммерческий бифидумбакгерин, пригстозлэнныЛ на ионоьв Bifidobacterium bifidum 1, и ацидофильные лактобациллы не только вызывают коррекцию измененной при гепатитах микрофлоры, но и улучшают некоторые_ физиолого-биохимические показатели, ч характеризующие функцию печени. Впервые показано, что сочетан-ное оральное применение полифитохола (250 мг/кг) и живых бак-терка L."acidophilus (10бклеток в день) приводило к менее выраженным количественным изменениям в составе микрофлоры и биохи-ьатческих показателей функции печени и сокращало сроки восстановительного пеоиода при экспериментальном гепатите.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ. Отобраны пггаммы молочнокислых и бифидобактэрий, которые в комбинации с полифитохолом оказывали наиболее благоприятный эффект на состав микрофлоры и показатели функции печени.

Результаты исследования свидетельствуют, что в патогенезе naio^jrKii печени при воздействии четыреххлористого углерода кроме поражения клеток паренхимы печени могут, играть роль и ~ нарушения микроэкологии пищеварительного тракта

Экспериментально, обоснована фитобактериотерапия острых и хронических токсических гепатитов.

Ребота является частью комплексных исследований, выполняемых Московским научно-исследовательским институтом эпидемиологии и микробиологии им. Г. К Габричевского по программам Государственного Комитета Санзпиднадзора РФ "Разработка экспресс-методов диагностики нарушения микробной экологии и иммунитета, создание эубиотиков второго и третьего поколения, способствующих4 оздоровлению населения и снижающих заболевания в условиях усиливающегося воздействия экстремальных факторов внешней среды" N 3-131-66 и "Разработка новых типов эубиотиков

- б -

и модуляторов биологических эффектов из бифидобакгерий и лак-тобацилл на основе структурных компонентов микробных клеток" N 3-131-183. .

ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫБЭСИШЕ НА ЗАЩИТУ.

1. Токсические гепатиты, вызванные подкожнш введением тетрахлорметаяа, сопровождаются вырахенны>,м-.изменениями в микробной, экологии толстого кишечника.

2. Лактобациллы, бифидобактерии, 'фитопрепарат "Полифито-хол", назначенные отдельно при экспериментальных гепатитах, восстанавливали как ыикроэкологические изменения, так и биохимические показатели функции печени.

3. Экспериментально обосновывается перспективность комбинированной фитобактериальной профилактики и терапии токсических гепатитов. ■

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Материалы исследования и основные положения работы обсуждались на научно-практических конференцях "Фитотерапия и рефлексотерапия заболеваний" (Улан-Удэ, 1992), "Дисбиотические состояния человека, пути профилактики и лечения" (Пермь, 1993).

ПУБЛИКАЦИИ. Ш теме диссертации опубликовано 5 работ.

СТРУКТУРА И ОБЪЕМ РАШГЫ. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, "четырех глав собственных исследований, заключения, выводов, списка основной использованной литературы, включающего 205 работ, из них 105 зарубежных авторов, и приложения. Диссертация изложена на 147 страницах машинописного текста, включающих 29 рисунков, 19 таблиц.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. Исследования проведены на 329 белых крысах линии Вистар. Острый гепатит вызывали путем подкожного введения 502 масляного раствора тетрахлорметана в объеме 0,4 мл на 100 г массы тела животного ежедневно в течении 4 дней, хронический гепатит - 0,25 мл на 100 г массы животного дважды в неделю в течение 80 дней (Кудрин А.Е, Левшин Б. И., 1982; ВгаЪес М. j., Ovfens J.B., < 1982). Животные исследовались на 7, 14 сутки от начала затравки в случае острого гепатита и на 30, 60, 74, 90 сутки - в случае хронического эксперимента.

Дня оценки состояния животных и функции печени измеряли прибавку в весе, процент гибели животных, относительную вели-

'irr:;' "очен:?, определяли активности сывороточных алаяинамино-

тг^нсферзаы (АЛ) и асггартатамияотранефэра^ы (ЛсТ) (по Райтме-ну и Сранке-ши), активность щелочной фосфатами (¡:о гидролизу р-китрофенидфосфата), содержание в сыворотке крови общего белка (по биуретовой реакции) -липопротеидов (по Вурштейн и Сама»), :;слйстергна (по методу Илька), б5струбина и его фракций (по ';>ндргж*ку).у^глутакнлтрансферазы (с ь-у'-глутамк-п-ЮЕгро-анилидом), показатели тимоловой пробы (по методу Хуэрго и Пот-""Г") ü р . r n кэ.чя: шньеиков ее ■

•4ПООЧ

Гистологичеише н злекгронномикроскопические исследования печени проводились в соответствии с (Волкова 0. Е, Елецкий XIК, 1982; Меркулов Г.А., 1984). Готовые срезы для световой микроскопии окрашивали гематоксилин-эозином, Суданом черным, шифф-йодной кислотой.

Материалом для изучения микрофлоры толстого кишечника 'служили свежевзятне фекалии экспериментальных животных. Выделение и идентификацию микроорганизмов осуществляли в соответствия с действующими методическими рекомендациями (Приказ К 535 от 22. 04. ВС.; Н Й051 от 18. 0ö.89; Lennet E.H., Balovs А. , 1980).

Для профилакияси и лечения экспериментального гепатита применяли фитопрепарат (полифитоход) и бактериопрепараты (би-фндумбактерин, лактобактерин и ацилакт). Полкфитохол - новый отечественный препарат, обладающий желчегонным, противовоспалительным, спазмолу.хическим действием. Представлял собой сумму акстрчктиршлг вешеств из печеночного сбора, разработан с учетом опыта тибетской медицины (НПО "5ито", Улан-Удэ). В качестве ба^сриедреларатов использовали коммерческие средства (Предприятие по производству бактерийных препаратов МНИЮМ т. Г. Н. Габричевского), в состав которых входили ливые лактоба-шшлы и бифиодобактерии. Препараты вводились интрагастральяо в водной форме в дозах 250 мг/кг массы тела (полифитохол), 10^ аибых бактерий, или 1 доза на животное (зубиотики) ежедневно. Лечение острою гепатита проводилось с 3 по 14 сутки, в целях профилактики их вводили в течение 7 суток до затравки. При хроническом гепатите эти сроки составляли с 61 по 90 день от начала и с 1 по 60 день во время интоксикации соответственно.

Исследования по оценке совместимости микроорганизмов к

фитопрепарату были проведены in vitro. Были использованы музейные штаммы бифидобактерий С В. adolescent is ГО 13, В. adolecentis М>42, В. longum В379М, В. bif idum 791, В. bifi-duBi 1) и лактобацилл (L. acidophilus 100АШ, L.acidophilus HK1, L. acidophilus K3III24, L. plantarum 8P A3, L. fermentum 90T-C4, L. delbruegkii subsp. bulgarius 8-79). У,узейные штаммы были получены из Государственной коллекции микрооргализмов-представи-телей нормальной микрофлоры человека (МНИИЗМл им. Г. Е Габри- ' чевского).

Полученные данные обрабатывали путем вычисления ;:озфици-ентов Фишера, Стьюдента с использованием пакета прикладных программ на персональном компьютере IBM PC AT.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Подкожное введение СС1^ как в остром, так и в хроническом экспериментах подтвердило данные литературы ( Кудрин А. Е , Лев-шин К И., 1982; Brabec М. j., Owens J. В., 1982) о том, что этот препарат действительно обладает гепатотропным действием, что проявлялось в гибели животных, ' увеличении относительной массы печени (табл.1), возникновении в паренхиме печени дегенеративных изменений, выражающиеся в дистрофии, стеатозе, фиброзе, инфильтрации, круглоклеточными^алементами, а-в -случае хронического гепазита - проявления цирроза Одновременно все исследованные нами биохимические показатели функции печени продемонстрировали, что подкожное введение тетрахлорметана, затрагивало межуточный обмен (белковый, липидный, пигментный), активность ферментов сыворотки крови.

В связи с отсутствием данных о составе кишечной микрофлоры крыс с токсическими гепатитами мы-исследовали, каким образом подкожное введение тетрахлорметана отражается на микробной экологии толстого кишечника. Ва основании проведенных исследований наш впервые были получены количественные показатели общего содержания аэробных и анаэробных бактерий, кишечных палочек и других грамотрицательных аэробных бактерий, стафилококков, энтерококков, клостридий, дзкхобацилл и бифидобактерий у крыс с гепатитом в разные сроки наблюдения. При этом, оказалось, что у животных, народу с клиническими проявлениями, па-томорфологическими, биохимическими изменениями со стороны печени, имелся глубокий дисбаланс микрофлоры в толстом гашечнй-

TaC~- j.. Некоторое показатели влияния интоксикации тетрахлорме-

гаюы на крыс линии Вистар

... \ Поката- Кпллчество погиб-Г^ГТПСЛ ТС'ГЪ хивотнмс в .^¿хлых ч ¡ггуиле (Z) я Относительная величина печени кРысы(тда/т^<и) Прибавка в весе (г)

Интактпък 1 0 (58) 100,0% 3,8±0,7

Получившле j 11,4 (35) 179.0tll.cz ■kick 3.1+0.9

В х-...*.-* зг.зпери&зтэ, срок исследования - 7 суток с начала Еведе-шя ССЦ .

г. г го\ 11*1 П7 --—-------- 95, G±12,4

Получившие тетрахлорметан 17,7 (62) 157,5+14,3%*** 47,9ill,2*

23,3 ( 30) 136,8+10,1%*** 73,1±15,2**

В хроническом эксперименте, cdok исследования - 60 суток (в числителе), 90 суток (в знаменателе) с начала введения CCL,. Ж В скобках указано количество животных в группе. * р<0,1; ** р<0,05; *** р<0,001

ке, свидетельствующий,"* что токсический гепатит сопровождается заметным снижением колонизационной резистентности кишечного траста. Это т;.. являлось в увеличении в фэкадшях пула условно-патогенны::;' грамотрицательных аэробных бактерий, грибов, клос±рэдий, уменьшении • числа лактобацилл и бифидобактерий, транслокацией микроорганизмов из кишечника в печеночную паренхиму. ВыяЕле;:;.' фазы реагирования кишечной микрофлоры на различных стадиях развития гепатита. Наиболее выраженные изменения в составе микрофлоры получены при остром гепатите, в особенности в первую неделю после начала эксперимента При хроническом гепатите изменения микрофлоры кишечника были менее выражены, однако при этом сохранялся тот же тип изменений, что и при остром гепатите (табл.2). Интересно отметить, что дисбиоз при гепатитах, вызванных подкожным ведением тетрахлорметана, по своей форме и фазам рагвития напоминает те нарушения микрофлоры, которые по данным литературы возникают у животных при назначении антибиотиков, стрессовых ситуацях, голодании, кро-вопотере (Горская E.V., 1989; Лапчинская A.B., 1990).

Отработав модель острого и хронического гепатитов, выз-

Табл.2. Нзкоторые показатели микрофлоры толстого кишечника (1е КОЕ/г) и сыворотки крови крыс линии Вистар при подкожном введении тетрахлорметана

Интактные Опытные крысы

Показатели крысы

7 сутки # 60 сутки Ж

Лактобациллы Клостридии

7,96±0,10 <2,00 7,74±0,21

Вифидобактерии Аэробные граше-

гативные бак- 3,43±0,26 терии йй? Кандида - <2,00

7,10±0,22 3,40+0,18 3,56+0,25 5,25+0,32 3,97±0,25

6,20+0,23 3,12+0,29 6,76+0,18 4,61+0,74 3,13±0,33

АлТ (мкМ) ч

Щелочная фосфата-таза(нмоль/с л) Тимоловая проба (ед)

/-лшюпротеиды ' (усл.ед)

Билирубин общий (мг/100мл)

О,77±0,10

152,0111,0

1,41+0,19

96,0+4,2

0,63+0,02

2,90+0,23 234,0+8,0 4,03±1,09 259,0+2,0 13,31+0,19

5,2010,16

224,0+9,1 3,14±0,17 137,0+1,2 5,53+0,05

it - острый гепатит , ## - хронический гепатит ### - микроорганизмы, выросшие на среде Плоскирева р<0,01

ванных тетрахдорметаном, и убедившись, что доза, схема введения этого токсиканта сопровождается нарушениями как со стороны печени, так и приводит к дисбалансу микрофлоры толстого кишечника, мы поставили задачу апробирсзать с лечебно-профилактической целью вышеперечисленные фито- и 6актериопрепараты, которые нормализуют соответствующие органы и системы. В основе действия полифитохола лежит стабилизация мембран печеночных клеток. Шхаяизы положительного эффекта лактобацилл и бифидо-багегерий на микрофлору толстого кишечника и ее колонизационную резистентность обусловлен антагонистической активностью входящих в них бактерий относительно условно-патогенных микроорганизмов, блокированием рецепторов в кишечном тракте, а также образованием разнообразных метаболитов, положительно воздействующих на слизистую кишечника, • представителей нормальной

}.-.якро флоры, иммунный статус.

Первым этапом ' основного эксперимента по оценке эффекта

ф;:тосгугтер;'.зтерапии гепатитов, вызванных CCl^, было нашэ к.-- .тед.-.взяиэ чо изучен:;» ззаимодейстьия полифитохола, лакгоба-'"(лл, б/фидобактерий ин витро. Для этого полифитохол добаЕ-nbVii в соответствующие среды для' выращивания лактобацилл и бифидобактерий, после чего производился учет числа жизнеспособных микроорганизмов в этих средах. При этом оказалось, что полифлюлол з этих, условиях эксперимента практически не злиял на скорость размножения и количество живых лактобацилл.

полифитохола показало, что сам по себе полифитохол очень слабо поддерживает рост бифидобактерий, а по рост-стимулирующей активности в отношении лактобацилл значительно уступал среде МРС. Из 11 штаммов, взятых в данную серию экспериментов мы отобрали те культуры, рост которых был оптимален в питательной среде, содержащей полифитохол. Эти бактерии входят в состав коммерческих бифидумбактерина, лактобактерина и ацилакта (В. blfidum 1, L. plantarUTn 8Р-АЗ, L. acidophilus 100 АТС; 1Ж1; КЗ 11124).

fiV.i'nnnriOTTQna'r! u OTriSunfTlUirU UQiiTi fSuiTTM H^rtnirt.lnnauu ir^w D TTO-

-..ж w.*^*. II UJUIIUII.I-1 4 1 ..II II JIU.IWWIUUWUI^.^. 11^1

чении, ■ так и с профилактической целью, .как в монопрепарате, так и в комбинации с полифитохолом. Проведенные нами исследования убедительно показали, что одновременное воздействие на печень и микрофлору кишечника оказывает благоприятный эффект на состояние интоксицированных тетрахлорметаном животных. Как при остром, так и при хроническом эксперименте фитобактериоте-рапия приводила к снижению или полному предотвращению гибели животных. Способствовало более ускоренному нарастанию их массы, по сравнению с крысами, которые не получали подобную терапию, заметно улучшало биохимические показатели функции печени и микробную экологию кишечника опытных крыс. Анализ полученных нами результатов по изучению терапевтической активности монофито- и бактерийных препаратов или комбинации препаратов при остром и хроническом гепатитах, дал нам основание утверждать, что практически все взятые в эксперименты лекарственные . средства улучшали клиническую картину и объективные показатели функции печени и микробной экологии (табл. 3, 4). Вне зависимости от того, при какой форме гепатита применялись, по зффек-

Табл.3. Влияние полифитохола (П), бифидумбактерина (Б), лакто-бактерина (Л) и ацилакта (А) на-некоторые показатели микрофлоры толстого кишечника крыс линии Вистар при подкожном введении тетрахлорметана (КОЕ/г)

ЧГруппа жи-Мик-\ вотных роорган. \ Крысы с острым гепатитом (¿3, леченные

П Б Ш-Б Л . Ш-Л

Лактобациллы Клостридии Бифидобакте-рии Аэробные грамнегатив. бактерии ### Кандида 7,73+0,20 3,51+0,19 * 5,15±0,18 * 4,93±0.24 4,21+0,30 * 7,81+0,16 3,06+0,14 * 6,62+0,10 ** 3,64+0,50 3,00+0,68 * 7,35+0,15 ** 2,78+0,31 ■к 6,67+0,14 ** 3,25+0,36 ** 3,15±0,44 . * 8.2910,12 * 2,60+0,21 * 5,95+0,30 * <2,00 * 2,92+0,50 А 3,83+0,28 Ус 2,13+0,17 * 5,91+0,15 •к 2,40+0,31 * 2,81+0,20 *

Интактные крысы Нелечен-ные крысы (##) Крысы с хр. гепатитом, леченные

П А П + А

Лактобациллы Клостридии Бифидобакте-рии Аэробные грамнегатив. бактерии ### Кандида 7,79+0,10 <2,00 8,50+0,11 2,8410,52 <2,00 6,75±0,17 2,85±0,57 * 7,48±0,16 * 5,34+0,40 ■к 3,41+0,29 * 8,02+0,19 ■к . <2,00 6,54+0,13 * 3,66+0,37. 3,42±0,47 ** 9,33+0,11 * 2,35+0,38 6,70+0,13 * 4,03+0,25 * 2,84+0,33 А 9,76±0,10 * 2,48+0.50 8,53+0,36 4,05+0 „41 ■к 2,39+0,70 **

* р<0,001; ** р<0,05

г/- острый гепатит (7 сутки), на- хронический гепатит (74 сутки) микроорганизмы, выросшие на среде Плоскирева

тивности воздействия использованные препараты можно было бы расположить в следующей последовательности: комбинация полифитохола и ацилакта, комбинация полифитохола с л акт обакт е рином, затем с бифидуыбактерином, полифитохол, ацилакт, лактобактерин и, наконец, бифидумбактерин. Давая характеристику отдельным препаратам по их влиянию на исследуемые показатели при остром и хроническом гепатитах, можно прийти к выводу, что назначение полифитохола наиболее благоприятно сказывалось на тех показателях, которые характеризуют функцию печени. Эубиотики, напротив, в большей степени приводили к нормализации показателей микрофлоры, чем полифитохол.

Влиянн: полифктохсла СП), бифпдумбактерина (Б), лактобактерина 'Л) и ацнлакта (А) на некоторое показатели сыворотки крови крыс линии йистар при подкожном введении тетрахлорметана < в 7. по отношению к ин-тактным животным)

\Группа ли Пока-\Еот-ззтельЧньк Крысы с острым гепатитом < я), леченные

П+Б П+Л П Б Л

АЛТ Щелочная фосфатзза ¿50,6+ 6,5 116,4+ 5,2 250.6±35,0 110,5+ 7,8 232,4+10.4 113,2+ 5,0 227 з+оо 1 * 180,9+ 7,5 * 263,6+13,0 * 141,4+ 5,2 *

|>1мили^»Л I £.ии.ЦТ1Ч.£1 . 01"--..'. <1 I ¿UO.OTJi-.4l I пч-.-ч^: Г»!

/ ^ лмл м

ппппя ^■дипопро-) теиды Билирубин общий 171,3+ 1,3 * 1550,8+20,6 * 164,0+. 4,2 * 1431,0+14,2 * 109,7±. 2,9 1634,9+17,5 * 253.5+ 4,6 * 2079,3+23,'5 А £50,0±10,0 * 1984,1+26,9 *

Нэ леченные крысы (я?) Крысы с хроническим гепатитом, леченные

П + А П А

АлТ Щелочная ^осфатаза Тимоловая проба й' теиды 502,7+27,0 * 154,315.9 * 525,4+35,2 Г» 1 п о 429,7132,4 102.0+5.2 419,7+11,2 '34,9+3,1 ч 664,7+24,3 * 97.3+13.1 440,3+21,1 85,7+5,7 533,8+25,6 А 173,8+3,2 * 494,3±16,9 * 122,4+9,£ *

* р'. 0,05 - острый гепатит (7 сутки),

хронический гепатит (74 сутки)

Особенностью наших экспериментов является то, что нами впервые показано, что назначение полифитохола приводило з -гой или иной степени к коррекции микрофлоры кишечника, а назначение эубиотжоз способствует нормализации функции печени. Тот факт, что комбинированная Фитобактериот^рапил давала наилучжте результаты как при остром, так и при хроническом гепатитах, вызванных тетрахлорметаном, позволяют нам предполагать, что в клинике и патогенезе токсических гепатитов принимают участие как печеночная паренхима, подвергнутая изменениям под влиянием токсиканта, так, вероятно, какие-то метаболиты (мы полагаем эндотоксины и ферменты агрессии бактериальной природы), потенцирующие токсический эффект езятого нами в опытах четыреххло-ристого углерода

Среди зубиотиков по нашему мнению наиболее эффективным патогенетическим средством является ацилакт, новый комбиниро-

ванный препарат-эубиотик, изготовленный из трех разных штаммов ацидофильных лактобацилл, специально подобранных по высокому антагонистическому эффекту превде всего в отношении грамотри-цательных аэробных бактерий и кандида В этой связи считаем небезынтересным отметить, что при токсическом гепатите (СдЛ^), именно эти . две группы микроорганизмов были наиболее показательными биологическими индикаторами дисбаланса микробной экологии толстого кишечника

Шлученные экспериментальные данные дают нам основания рекомендовать фитобактериотерапию (в частности комбинация по-лифитохол с ацилактом) как новый перспективный прием прс-филак-" тики и лечения острых и хронических гепатитов.

ВЫВОДЫ

1. Подкожное введение крысам линии Вистар четыреххлористого углерода (в дозе 0,4 и 0,25 мл/100 г веса) на протяжении 4 (ежедневно) дней и 60 ((два раза в неделю) дней, кроме кли-нико-патоморфэлогических нарушений и изменений биохимических показателей сыворотки крови, характеризующих соответственно острое и хроническое воспаление печени, сопровождается снижением колонизационной резистентности толстого

* "Ч

• кишечника, что ' проявляется ' в -увеличении пула грамотрица-тельных аэробных бактерий, грибов рода Кандида, клостридий, уменьшении количества лактобацилл. и бифидооактерий.

2. Профилактическое и лечебное назначение красам с острым и хроническим гепатитом полифитохола оказывает выраженный фармакотерапевтический эффект, проявляющийся в уменьшении явлений холестаза, подавлении воспалительной реакции, предохранении печени от токсического действия тетрахлорметёна Шлифитохол имел некоторое положительное влияние на восстановление микрофлоры толстого кишечника \

3. Профилактическое и лечебное назначение крысам с острым к хроническим гепатитом бакгериопрепаратов (лакгобактерина, бифидумбактерина и ацилакта) (108 живых бактерий, или 1 доза, на- животное в день) оказывало определенный положительный эффект на процесс реконвалесценции, в большей степени улучшало количественный и качественный состав микрофлоры фекалий крыс по сравнению с фитопрепаратом.

4. Комбинированное применение фитопрепарата полифитохола и ацилакта оказывало наиболее выраженный терапевтический эффект, что проявлялось как в предотвращении гибели животных, менее выраженных деструктивных изменениях в печени, в ускорении сроков нормализации биохимических показателей функции печени, так и повышении колонизационной резистентности ки-озчныса.

5. Экспериментально обоснована фитобактериотерапия острых и

того, что в патогенезе этой патологии играет роль как пора, жение паренхимы печени, так и нарушения микроэкодогии пищеварительного тракта.

- 16 -

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ГО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ:

1. Лехатинова Т. Ч. Микроэкологическая характеристика острого гепатита, вызванного тетрахлорметаном //Сборник материалов на-учно-прагсгической конференции "Фитотерапия и рефлексотерапия заболеваний", - Улан-Удэ, 1992. - С. 35-38.

£ Лехатинова Т. Ч., Николаев С. Ы., Шэндеров К А. Влияние некоторых фито- и бактерийных препаратов на течение острого гепатита, вызванного тетрахлорметаном /иэдицинскиа аспекты микробной экологии.- 1992.-вып. 6.-С. 90-92.

3. Лехатинова Т. Ч. Состояние микроэкологии толстого кишечника и печени у крыс с острым гепатитом, вызванным тетрахлорметано:; //Тезисы докладов научно-практической конференции "Дисбиоти-ческие состояния человека, пути профилактики и леченля". -Пермь, 1993. -С.22-23.

4. Лехатинова Т. Ч., Шендеров В. А. Влияние полифитохола и лак-тобактерий на течение хронического токсического гепатита, вызванного длительным введением тетрахлорметана /Ьйдицинские аспекты микробной экологии. -1993/1994. -вып. 7/8. -С. 117-120.

5. Лехатинова Т. Ч., Шэндеров Б. А., Николаев С. Ы. Влияние бактерийных и фитопрепаратов на течение хронического токсического гепатита, вызванного введением тетрахлорметана //Тибетская медицина (Сб.-тр.Бур. инст-та биологии СО РАН).-1994.'С. 135-139.