Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Микробная деградация ароматических ПАВ

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Дубровская, Екатерина Викторовна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ГЛАВА 1. МИКРОБНАЯ ДЕГРАДАЦИЯ АРОМАТИЧЕСКИХ ПОВЕРХНОСТНО-АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ.

1.1. ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКАЯ И ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКИ ПАВ.

1.2. БИОРАЗЛАГАЕМОСТЬ ПАВ И ДРУГИХ КСЕНОБИОТИКОВ И СПОСОБЫ ЕЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ.!.

1.3. УЧАСТИЕ ЧИСТЫХ КУЛЬТУР И МИКРОБНЫХ СООБЩЕСТВ В

БИОДЕГРАДАЦИИ ПАВ.

1.4. ПУТИ МИКРОБНОГО РАЗРУШЕНИЯ АРОМАТИЧЕСКИХ АНИОННЫХ И НЕИОНОГЕННЫХ ПАВ.

1.4.1. ПУТИ МИКРОБНОГО РАЗРУШЕНИЯ АРОМАТИЧЕСКИХ АПАВ.

1.4.2. ПУТИ МИКРОБНОГО РАЗРУШЕНИЯ АРОМАТИЧЕСКИХ НПАВ.

1.4.3. ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ДЕТЕРМИНАЦИЯ ПРИЗНАКА БИО ДЕГРАДАЦИИ КСЕНОБИОТИКОВ.

1.5.МИКРОБНАЯ ОЧИСТКА СТОЧНЫХ ВОД ОТ ПАВ.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

ГЛАВА 3. РАСПРОСТРАНЕНИЕ МИКРООРГАНИЗМОВ-ДЕСТРУКТОРОВ ПАВ В ПРИРОДНЫХ БИОЦЕНОЗАХ.

3.1. ДЕГРАДАТИВНЫЙ ПОТЕНЦИАЛ.

3.2. ПУЛ МИКРООРГАНИЗМОВ-ДЕСТРУКТОРОВ.

3.3. ДЕСТРУКТИВНАЯ АКТИВНОСТЬ МИКРООРГАНИЗМОВ ПРИРОДНЫХ БИОЦЕНОЗОВ.

ГЛАВА 4. ИЗУЧЕНИЕ ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКИХ И ДЕСТРУКТИВНЫХ СВОЙСТВ ШТАММОВ-ДЕСТРУКТОРОВ,

ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ ПРИРОДНЫХ. МИКРОБИОЦЕНОЗОВ.

4.1. СУБСТРАТНЫЙ СПЕКТР ШТАММОВ-ДЕСТРУКТОРОВ.

4.2. ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА И ИДЕНТИФИКАЦИЯ ШТАММОВ-ДЕСТРУКТОРОВ АРОМАТИЧЕСКИХ ПАВ

4.3. ВЛИЯНИЕ УСЛОВИЙ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ НА. ДЕСТРУКТИВНУЮ АКТИВНОСТЬ ВЫДЕЛЕННЫХ ШТАММОВ.

4.3.1. ВЛИЯНИЕ СТЕПЕНИ АЭРАЦИИ НА ДЕСТРУКТИВНУЮ АКТИВНОСТЬ ПОЧВЕННЫХ КУЛЬТУР.

4.3.2. ВЛИЯНИЕ ТЕМПЕРАТУРЫ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ НА ДЕСТРУКТИВНУЮ АКТИВНОСТЬ ПОЧВЕННЫХ КУЛЬТУР.

4.3.3. ВЛИЯНИЕ ЗНАЧЕНИЯ рН СРЕДЫ.

4.3.4. ВЛИЯНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ СУБСТРАТА И ПОСЕВНОЙ ДОЗЫ.

ГЛАВА 5. СПОСОБЫ ВЫДЕЛЕНИЯ И СЕЛЕКЦИИ ДЕСТРУКТОРОВ СУЛЬФОНОЛА.

5.1. ВЫДЕЛЕНИЕ КУЛЬТУР-ДЕСТРУКТОРОВ СУЛЬФОНОЛА ПРЯМЫМ ВЫСЕВОМ.

5.2. СЕЛЕКЦИЯ ДЕСТРУКТОРОВ СУЛЬФОНОЛА МЕТОДОМ НАКОПИТЕЛЬНОГО КУЛЬТИВИРОВАНИЯ.

5.3. СЕЛЕКЦИЯ СУЛЬФОНОЛРАЗРУШАЮЩИХ КОНСОРЦИУМОВ В УСЛОВИЯХ НЕПРЕРЫВНОГО ПРОТОЧНОГО КУЛЬТИВИРОВАНИЯ.

5.3.1. СЕЛЕКЦИЯ СУЛЬФОНОЛОКИСЛЯЮЩЕГО КОНСОРЦИУМА В ОДНОСЕКЦИОННОЙ УСТАНОВКЕ.

5.3.2. СЕЛЕКЦИЯ СУЛЬФОНОЛОКИСЛЯЮЩИХ КОНСОРЦИУМОВ В ШЕСТИСЕКЦИОННОЙ УСТАНОВКЕ.

ГЛАВА 6. ДЕСТРУКТИВНАЯ АКТИВНОСТЬ И МИКРОБНЫЙ СОСТАВ КОНСОРЦИУМОВ ОЧИСТНЫХ УСТАНОВОК.

6.1. ДЕСТРУКЦИЯ СУЛЬФОНОЛА В ОДНОСЕКЦИОННОЙ УСТАНОВКЕ.

6.2. ИЗУЧЕНИЕ ВИДОВОГО СОСТАВА И ДЕСТРУКТИВНОЙ АКТИВНОСТИ ШТАММОВ КОНСОРЦИУМА ОДНОСЕКЦИОННОЙ УСТАНОВКИ.

6.2.1. ДИНАМИКА МИКРОБНОГО СОСТАВА ОДНОСЕКЦИОННОЙ УСТАНОВКИ.

6.2.2. генетическая детерминация признака сульфонолредукции штаммов-деструкторов односекционной установки.

6.3. деструкция сульфонола в составе модельных и реальных стоков в шестисекционной установке.

6.4. микробный состав шестисекционной сульфонолокисляющей установки.

ГЛАВА 7. СЕЛЕКЦИЯ, ДЕСТРУКТИВНАЯ АКТИВНОСТЬ И ВИДОВОЙ СОСТАВ МИКРОБНОГО СООБЩЕСТВА, РАЗРУШАЮЩЕГО АЛКИЛФЕНОЛ.

7.1. селекция консорциума, разрушающего алкилфенол.

7.2. деструктивная активность селекционированного консорциума.:.

7.3. микробный состав консорциума.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Микробная деградация ароматических ПАВ"

Важнейшая экологическая проблема современного мира - утилизация миллионов тонн токсичных химических веществ, попадающих в окружающую среду в виде промышленных и бытовых отходов.

Постоянно растет число синтетических органических соединений, большинство из которых абсолютно чужды живой природе, т.е. являются ксенобиотиками. Их число достигло более 6 млн. [115]. Чрезвычайно распространенной и опасной группой ксенобиотиков являются синтетические поверхностно-активные вещества (СПАВ). Они широко применяются более чем в 100 отраслях промышленности. Среди этой группы веществ особенно опасными являются те, которые имеют в своей структуре ароматическое кольцо, такие как окси-этилированные алкилфенолы (ОЭАФ) и алкилбензолсульфонаты (АБС). Являясь активной основой бытовых и промышленных моющих средств эти вещества в большом количестве попадают в воду и почву.

В природе основным способом восстановления загрязненных объектов является биологический путь. В основе процесса самоочищения лежит действие присутствующих в загрязненных зонах природных микроорганизмов - деструкторов ксенобиотиков. При благоприятных условиях эти микроорганизмы размножаются и потребляют загрязняющие вещества, в том числе и ПАВ, как источник углерода и энергии, и, в идеальном случае, полностью их минерализуют. Однако большим недостатком природного самоочищения является его длительность, а с учетом того, что темпы поступления таких загрязнителей как СПАВ очень велики, биодеструктивного резерва природных микроценозов недостаточно. Кроме того, существует опасность вторичного загрязнения окружающей среды - грунтовых вод, источников водоснабжения и водоемов рыбо-хозяйственного назначения, сельскохозяйственных угодий. Так, в Левобережной части Саратовской области во многих районах для водоснабжения используется вода из открытых водоемов без надлежащей очистки, которая имеет вы7 сокое микробное загрязнение, мутность, повышенную концентрацию ПАВ и нефтепродуктов [36]. Поэтому изучение самоочищающей способности природных объектов является весьма важной проблемой.

Для очистки бытовых и промышленных сточных вод от ПАВ широко используются физико-химические и биологические методы. Последние, основанные на использовании активного ила, эффективны для очистки стоков с низкой концентрацией ПАВ (10-20 мг/л) [95,113], более высокие концентрации являются токсичными для биоценозов очистных сооружений.

Метод локальной микробной очистки, удельный вес использования которого в настоящее время в отношении ПАВ-содержащих сточных вод достигает 13 % как самостоятельно, так и в комплексе с физико-химическими методами [50], наиболее перспективен для обезвреживания высококонцентрированных стоков. Этот метод отличается экологической безопасностью, высокой экономичностью и эффективностью по сравнению с другими методами [26].

Совершенствование биотехнологии микробной очистки от ПАВ, в частности ароматических, основано на селекции новых высокоактивных консорциумов или штаммов-деструкторов, исследовании и отработке условий и приемов их наиболее эффективного использования. Поэтому получение и изучение чистых культур и сообществ микроорганизмов, имеющих высокие биодеструктивные характеристики в отношении этих соединений, представляет собой актуальную задачу.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

Целью настоящего исследования явилось изучение биодеградации ароматических ПАВ микроорганизмами естественных и искусственных сообществ.

Для ее достижения были решены следующие конкретные задачи:

1) изучение распространения деструкторов ПАВ в микроценозах чистых и загрязненных объектов окружающей среды; 8

2) исследование культурально-морфологических и физиолого-биохимических характеристик наиболее активных из выделенных штаммов-деструкторов;

3) селекция микробных консорциумов, эффективно разрушающих "биологически жесткие" ПАВ и их структурные компоненты;

4) изучение видового состава консорциумов;

5) исследование продуктов деструкции ароматических ПАВ;

6) моделирование и отработка процессов микробной очистки сточных вод от ароматических ПАВ.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА РАБОТЫ

Исследована частота встречаемости штаммов-деструкторов ПАВ в различных объектах окружающей среды. Впервые оценка биоразлагаемости ПАВ проводилась по совокупности наличия в образцах бактерий, способных разрушать ПАВ (деградативного потенциала), доли их в общей микрофлоре (пула микроорганизмов-деструкторов) и деструктивной активности выделенных штаммов. Из природных микробиоценозов выделены и охарактеризованы новые культуры-деструкторы ПАВ: Bacillus mucilaginosus CS36, Micrococcus varians CS 12, Azomonas macrocytogenes PS9, Pseudomonas putida PS6, P. cepacia PS3, Aeromonas hydrophila PS 15, Staphylococcus saprophytics CS43 и S. saprophytics PS43. Селекционированы новые консорциумы, разлагающие ал-килбензолсульфонаты и изононилфенолы, определены основные пути и продукты деструкции ароматических ПАВ изученными штаммами и консорциумами. Выделены новые плазмидсодержащие штаммы-деструкторы сульфонола.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ РАБОТЫ

Предложен новый подход к оценке биоразлагаемости ПАВ. На основе селекционированных высокоактивных микробных сообществ созданы биокатализаторы, утилизирующие сульфонол в концентрации 0,2-0,75 г/л и изононилфе9 нол в концентрации 0,2 г/л. Биокатализаторы стали основой модельных очистных установок, непрерывно работающих в течение 6 лет. Отработанные процессы могут быть масштабированы с целью создания промышленной технологии очистки производственных и бытовых сточных вод. Одна из установок апробирована на реальных сточных водах завода по производству синтетических моющих средств.

Результаты диссертационной работы нашли использование в учебном процессе на кафедрах органической и биоорганической химии химического факультета и микробиологии биологического факультета Саратовского государственного университета, микробиологии Саратовского государственного медицинского университета; в научно-исследовательской деятельности лаборатории гигиены труда на сельскохозяйственной технике Саратовского НИИ сельской гигиены.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ

1. Оценка биоразлагаемости ПАВ, относящихся к разным классам, на основании изучения распространения штаммов-деструкторов в окружающей среде.

2. Физиолого-биохимические и деструктивные характеристики выделенных штаммов-деструкторов ароматических ПАВ.

3. Селекция активных консорциумов, разрушающих ароматические ПАВ и их структурные компоненты.

4. Видовой состав селекционированных консорциумов.

5. Пути деструкции ароматических ПАВ и их структурных компонентов.

6. Основные технологические параметры процесса очистки сточных вод, содержащих ароматические ПАВ.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ Материалы диссертации обсуждались на конференциях: "Новые направления биотехнологии" (Пущино, 1992), International Symposium: Workshop on

10

Environmental Biotechnology (Waterloo, 1994), Малоотходные и энергосберегающие технологии в системе водного хозяйства (Пенза, 1995), Чувашская республиканская конференция по охране природы (Чебоксары,1995), "Процессы и оборудование экологических производств" (Волгоград, 1995), International Seminar: Biosorption and bioremediation (Prague, 1995), World Environmental Congress (World"95) (London, Ont., Canada, 1995), I nternational Conference Environmental Pollut.(ICEP"95)(St. Peterburg, 1995), "Микробное разнообразие: состояние, стратегия, экология, проблемы" (Пермь, 1996), "Вода, экология и технология" (Москва, 1996), "Проблемы изучения биосферы" (Саратов, 1996), ISEB"97 Meeting Bioremediation (Leipzig, 1997), Biosorption and bioremediation (Prague, 1998), 9th European Congress on Biotechnology (Brussels, 1999).

ПУБЛИКАЦИИ. По теме исследования опубликовано 16 работ.

СТРУКТУРА И ОБЪЕМ РАБОТЫ.

Диссертация состоит из введения, 7 глав, заключения, выводов, списка использованной литературы, включающего 213 работ отечественных и зарубежных авторов, и содержит 160 страницы машинописного текста, включающего 28 рисунков и 9 таблиц.

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Дубровская, Екатерина Викторовна

ВЫВОДЫ

1. Исследовано распространение в объектах окружающей среды микроорганизмов-деструкторов ряда анионных и неионогенных ПАВ с различным химическим строением. Деструкторы алифатических ПАВ присутствовали в образцах чаще, их доля в общей сапрофитной микрофлоре составляла от 7 до 23%. Для ароматических ПАВ этот показатель был равен от 4,5 до 7,5%.

2. Предложены критерии для определения биоразлагаемости ПАВ: деграда-тивный потенциал и пул микроорганизмов-деструкторов. В соответствии с этими критериями изученные ПАВ располагаются в порядке убыли биоразлагаемости: стеарокс 6, синтамид 5, синтанол ДС-10, неонол АФ9-10, доде-цилсульфат Na, ОП-Ю, тритон Х-100, неонолы АФ9-12 и сульфонол.

3. Отдельные штаммы природных микробиоценозов обладали высокой деструктивной активностью по отношению к широкому спектру ПАВ, включая "биологически жесткие". Однако их число очень мало - 8 из 884 выделенных штаммов-деструкторов.

4. Штаммы идентифицированы как Bacillus mucilaginosus, Micrococcus varians, Azomonas macrocytogenes, Pseudomonas putida, P. cepacia, Aeromonas hydrophila и Stapylococcus saprophyticus, их деструктивные характеристики по отношению к различным ароматическим ПАВ лежали в диапазоне от 52 до 78%) при исходной концентрации 0,2 г/л за 3 суток. Существенное влияние на деградацию ПАВ оказывали условия культивирования: аэрация, температура, рН, концентрация субстрата и посевная доза.

5. Деструкция сульфонола и изононилфенола наиболее активно осуществлялась сообществом микроорганизмов, а не отдельными штаммами-деструкторами; селекция консорциумов, активно разрушающих ароматические ПАВ и их структурные компоненты, гораздо успешнее происходила в условиях непрерывного проточного культивирования.

140

6. Видовой состав консорциума односекционной сульфонолокисляющей установки был представлен в основном культурами рода Pseudomonas: Р. aeruginosa, Р. cepacia, Р. alcaligenes и Р. stutzeri; сообщество шестисекцион-ной установки состояло из семи штаммов рода Bacillus. Консорциум установки, деградирующей изононилфенол, был представлен двумя культурами рода Bacillus, и одной культурой рода Pseudomonas.

7. С помощью методов фотоколориметрии, ИК- и УФ-спектроскопии были выявлены основные промежуточные и конечные продукты деструкции сульфо-нола и изононилфенола. Деградация сульфонола начиналась с десульфони-рования, затем происходило окисление алифатического радикала, после чего разрушалось ароматическое кольцо. При деструкции изононилфенола окислению подвергались линейные алифатические радикалы или с изопропиль-ным разветвлением, изомеры с трет-бутильным разветвлением были недоступны для биоразложения; кроме того, раскрывалось фенольное кольцо.

8. Моделирование очистки сточных вод, содержащих ароматичекие ПАВ, основой для которого служила шестисекционная сульфонолокисляющая установка, позволило отработать основные параметры процесса: многоступенчатость системы; отсутствие аэрации в первых секциях для избежания обильного пенообразования и активная аэрация в последующих секциях; концентрация ПАВ 0,2 г/л; скорость протока 0,04 ч~ ; температурный диапазон от 20 до 30°С. В этих условиях эффективность разрушения сульфонола составила 99-100%.

141

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ПАВ широко применяются в самых различных областях промышленности и в быту, до 80% производимых ПАВ используется в технических и бытовых моющих средствах и при производстве тканей и волокон [50]. Практически все сферы их применения связаны с водоемкими процессами, что приводит к попаданию значительной части производимых ПАВ в окружающую среду в составе сточных вод. Более половины ПАВ, выпускаемых в странах бывшего СССР являются "жесткими" веществами с низкой биоразлагаемостью, вследствие чего происходит их накопление в природных водоемах, вызывающее устойчивое нарушение экологического равновесия.

Существуют разные критерии оценки биоразлагаемости ПАВ: по определению биохимического потребления кислорода [60], по скорости разрушения исследуемого вещества в пробе воды из природного водоема или в солевой среде [193], обогащенной лабораторной культурой [129], по количеству углекислого газа, выделяющегося при окислении ПАВ [131,142] и т.д. Методы определения биоразлагаемости ПАВ, принятые в разных странах, существенно различаются, и единого стандарта, который бы действовал повсеместно, пока не существует. Поэтому разработка новых методов, объективно оценивающих способность ПАВ подвергаться биоокислению, остается весьма актуальной.

Существуют следующие основные способы очистки ПАВ-содержащих сточных вод: физико-химические и биологические. Основным недостатком различных физико-химических методов является перевод загрязнителя из одной формы в другую, вследствие чего происходит накопление шламов - концентратов загрязнителей, которые требуют дальнейшей утилизации или захоронения. Основной недостаток традиционной биологической очистки при ее прочих достоинствах (экологическая безопасность и экономичность в эксплуатации) - низкая эффективность при высоких концентрациях или попадании "жестких" ПАВ.

130

Весьма перспективным вариантом биологического окисления является локальная микробиологическая очистка высококонцентрированных стоков. Она является экономичной, не предполагает образования шламов и остается высокоэффективной независимо от концентрации и "жесткости" ПАВ. Последнее обусловлено использованием специфичных микроорганизмов или их консорциумов, способных утилизировать указанные вещества в высоких концентрациях в качестве единственного источника углерода и энергии.

Для создания такого рода очистных систем, осуществляющих эффективное обезвреживание стоков, необходимы специально селекционированные микробные сообщества, способные активно осуществлять разложение загрязнителя, разработка и совершенствование технологии их использования.

Микробные сообщества широко применяются в практической деятельности человека.

Взаимодействия в сообществах открытых систем, какими являются и природные сообщества, и искусственные проточные системы, очень сложны. Одна и та же ассоциация может проявлять одновременно разные типы взаимоотношений. Это создает определенные трудности в их изучении, выявлении закономерностей, которые помогут контролировать эту сложную систему. Изучение микробных сообществ имеет и фундаментальный (понимание процессов, происходящих в ходе развития и функционирования природных экосистем) и прикладной (разработка более совершенных и экономичных биотехнологических процессов) аспекты.

В сообществах, в отличие от роста в чистой культуре, между разными группами бактерий возникают конкурентные взаимоотношения, которые во многом определяются "стратегией" их развития. Под стратегией жизни понимают совокупность приспособлений, обеспечивающих возможность виду обитать совместно с другими организмами и занимать определенное положение в соответствующих биоценозах [33,74,80]. Тип стратегии определяется способностью популяции противостоять конкуренции и захватывать определенные ни

131 ши, переживать стрессы под воздействием биотических или абиотических факторов, восстанавливаться после нарушений.

Для К-стратегов предпочтительнее достаточно стабильные условия, они расходуют много ресурсов на поддержание жизнеспособности, медленнее размножаются, но имеют преимущества в неблагоприятных условиях, г-стратеги характерны для нестабильных условий, они быстро размножаются при условии избытка пищевого субстрата и заселяют новые ниши, где нет конкуренции; однако стрессовые ситуации приводят к их быстрому отмиранию. Для г-стратегов наиболее благоприятные условия создаются в гомогенной периодической культуре и при высоких скоростях разбавления в хемостате. В непрерывной культуре после смены скорости разбавления наступает короткий переходный период, а затем быстро устанавливается новое стационарное состояние. У К-стратегов в подобной ситуации сначала наблюдается вымывание клеток, и лишь через несколько генераций устанавливается новое стационарное состояние, таким образом, К-стратеги отличаются большей инертностью.

Учитывая вышеизложенное, мы поставили перед собой задачу установить степень распространенности микроорганизмов-деструкторов ПАВ, в том числе содержащих ароматическое кольцо, в различных природных микробиоценозах, и оценить с учетом полученных данных степень биоразлагаемости веществ с разным химическим строением; селекционировать и изучить микробные консорциумы, способные утилизировать особо "жесткие" ПАВ и их производные; создать модели очистных установок, активной основой которых являлись селекционированные сообщества.

Более 70 почвенных или водных проб, отобранных из относительно чистых и из загрязненных мест, исследовались на способность подвергать биодеградации десять ПАВ с разной химической структурой: синтанол ДС-10 (окси-этилированный спирт), стеарокс 6 (оксиэтилированная жирная кислота), синта-мид 5 (оксиэтилированный амид), тритон Х-100, неонол АФ9-10, два неонола АФ9-12 разных предприятий-изотовителей - НПО "СинтезПАВ" г. Шебекино и

132

ПО "Нижнекамскнефтехим" г. Нижне-Камск, ОП-Ю (оксиэтилированные ал-килфенолы), додецилсульфат натрия и сульфонол (алкилбензолсульфонат). Определяли деградативный потенциал (наличие в образцах деструкторов того или иного вещества), пул деструкторов (их долю в общей микрофлоре) и деструктивную активность выделенных культур. От 75 до 80% исследованных образцов содержали микроорганизмы, способные разрушать ПАВ, не имеющие а своей химической структуре арильного кольца, для ароматических ПАВ эти показатели ниже - 55-61%. Подобная тенденция обнаруживалась и при определении пула микроорганизмов-деструкторов, т.е. их доли в общей микрофлоре пробы. Самым высоким это значение было для стеарокса (23%), несколько ниже для синтамида и синтанола, а для додецилсульфата Ыа пул составлял около 7%. Пул микроорганизмов-деструкторов ароматических ПАВ составил от 4,5 (сульфонол) до 7,5% (неонол АФ9-10). Менее доступными для биоразложения оказались ароматические соединения и ионогенные вещества. При исследовании деструктивной активности выделенных штаммов-деструкторов мы также обнаружили зависимость этого показателя от наличия ар ильной структуры: ароматические ПАВ разрушались в среднем на 17-22%, а алифатические - на 24-32%. По всем исследованным критериям показатели для ароматических ПАВ были заметно ниже. Биоценозы загрязненных объектов обнаруживали некоторую адаптивную способность к обезвреживанию этих ксенобиотков: они обладали несколько большими значениями деградативного потенциала, пула микрооргнизмов-деструкторов, деструктивной активности выделенных культур, к тому же менее выраженными были различия между ароматическими и неароматическими соединениями. Наиболее "биологически жесткими" оказались сульфонол - алкилбензолсульфонат, относящийся к анионным ПАВ, а среди неионогенных - соединения, относящиеся к классу оксиэтилированных ал-килфенолов.

Лишь 8 штаммов из более 800 выделенных обладали достаточно высокой деструктивной активностью к широкому спектру ПАВ, включая ароматические.

133

При подборе оптимальных условий культивирования разрушение ОЭАФ тритона Х-100 самой активной культурой достигало 80%. Культуры были представлены грамотрицательными палочками - Azomonas macrocytogenes, Aeromonas hydrophila, Pseudomonas putida и P. cepacia, грамположительными спорообразующими палочками - Bacillus mucilaginosus, грамположительными кокками - Micrococcus varians и Staphylococcus saprophyticus.

На основании вышесказанного становится очевидным, что основные природные объекты детоксикации - микробиоценозы - не способны в короткие сроки справиться с подобными загрязнителями.

Для обезвреживания наиболее жестких веществ проводилось селекционирование консорциумов, способных их деградировать. Одним из этих ПАВ стал сульфонол - линейный алкилбензолсульфонат. Было установлено, что наиболее успешно селекция активного консорциума проходила в условиях непрерывного проточного культивирования. Для решения таких задач как селекция сульфонолдеградирующих консорциумов и моделирования процесса очистки сточных вод от этого опасного ксенобиотика, использовались две лабораторных модельных установки: одно- и шестисекционная. Засевным материалом для обеих установок было микробное сообщество периодической накопительной культуры. Параметры функционирования установок несколько различались. Модельный раствор для односекционной установки готовили на солевой среде М9, а после длительного периода работы при концентрации субстрата 0,2 г/л проводилось ее ступенчатое повышение до конечной концентрации 0,75 г/л. Мы установили интересную зависимость: при повышении концентрации загрязнителя увеличивались показатели его разрушения, и происходил более быстрый выход установки на режим. При увеличении содержания сульфонола с 0,2 до 0,25 г/л деструкция его увеличилась с 70-75%» до 77-80% и была достигнута примерно через месяц, при достижении концентрации вещества 0,5 г/л максимальный уровень разрушения (90-92%) был достигнут уже через неделю, а при содержании алкилбензолсульфоната в подаваемом модельном растворе

134

0,6-7 г/л выход на режим происходил на вторые-третьи сутки, при концентрации 0,7 г/л деструкция достигла 100% и сохранялась при дальнейшем повышении содержания сульфонола.

Степень разрушения была недостаточно глубокой: происходило полное десульфонирование ПАВ, в значительной степени утилизировался алифатический радикал, скорее всего по ß-пути, однако разложения ароматических структур мы не наблюдали.

Для шестисекционной установки модельные стоки готовились на водопроводной воде, за все время эксплуатации биореактора уровень загрязнителя не менялся и составлял 0,2 г/л. После выхода установки на режим деструкция сульфонола проходила на 98-100%. Анализ проб из каждой секции установки и очищенной сточной воды показал, что осуществляется последовательное расщепление молекулы алкилбензолсульфоната: десульфонирование, со-окисление углеводородной цепочки с образованием дикарбоновых кислот и расщепление кольца. В очищенной жидкости присутствует лишь некоторое количество насыщенных и ненасыщенных карбоксилированных структур. Эффективность микробной очистки, осуществляемой в этой установке, была продемонстрирована при очистке реальных стоков предприятия, производящего CMC. Степень утилизации сульфонола при концентрации 0,2 г/л составляла 85-99%, кроме того полностью разлагался и присутствующий в этих стоках в концентрации 0,012-0,050 г/л синтанол АЦС Э. Это свидетельствует о перспективности использования данной установки при масштабировании для промышленной очистки сточных вод.

Очень интересными оказались результаты анализа микробного состава этих двух установок. За время работы в них была осуществлена селекция совершенно непохожих сообществ. Бактериальное сообщество односекционной установки было представлено культурами рода Pseudomonas, их число и соотношение менялось, однако ядром консорциума являлись две культуры: Р. aeruginosa и Р. cepacia. Они присутствовали в сообществе постоянно, а при дли

135 тельной подаче стоков с постоянной концентрацией сульфонола становились доминирующими. Лишь эти культуры обладали способностью к десульфониро-ванию вещества, оно осуществлялось на 27 и 23% соответственно. Вероятнее всего, что эти штаммы начинают ферментную атаку, а затем к ней подключаются другие члены сообщества. При пассировании или длительном хранении культур их деструктивная активность снижалась, вплоть до полной ее потери.

Микробное население шестисекционной установки было представлено исключительно грамположительными культурами рода Bacillus. Две из них, идентифицированные как В. cereus, присутствовали во всех секциях установки в значительном количестве. Штамм В. cereus 1 осуществлял реакцию первичного разрушения сульфонола - десульфонирование, доля его уменьшалась от первой секции (71%) к последней (11%), второй доминантный штамм - В. cereus 2 -не обладал способностью использовать нативный сульфонол в качестве источника углерода и энергии, причем его содержание к последним секциям заметно увеличивалось (с 24 до 70%). Остальные пять культур составляли от 1 до 12% сообщества в отдельных секциях. Штамм В. cereus 1 также утрачивал активность при пассажах или хранении на плотных средах.

Подобная нестабильность деструктивной активности выделенных культур могла быть следствием плазмидной локализации генов, ответственных за этот признак. Данное предположение согласуется и с литературными данными. В качестве модельного объекта для изучения генетической природы признака сульфонолредукции были выбраны культуры односекционной установки. Только в двух штаммах Р. aeruginosa и Р. cepacia, обладающих деструктивной активностью по отношению к нативному сульфонолу, были обнаружены плаз-миды, контролирующие этот признак. Размер их составлял 54 и 4,3 kb соответственно.

На наш взгляд, разные режимы функционирования изучаемых сульфоно-локисляющих установок привели к формированию в них микробных сообществ с разным типом экологической стратегии. Хотя строгие количественные оценки

136 кинетических характеристик этих консорциумов не проводилось, к таким выводам можно прийти на основе качественных показателей.

Условия, поддерживаемые в односекционной установке характеризуются неоднородностью химического состава соединений, являющихся субстратами для микроорганизмов, составляющих данное сообщество. Скачкообразное повышение концентрации также способствовало преимущественному развитию г-стратегов, характерной была и реакция консорциума на повышение содержания субстрата: после короткого периода адаптации быстро устанавливался новый, более высокий уровень деструктивной активности. Показателен и видовой состав данного сообщества: все культуры относятся к p.Pseudomonas, для них характерны высокие скорости роста, способность утилизировать субстрат в высоких концентрациях, быстрое отмирание в условиях голодания. Характеристики изучаемого консорциума вполне соответствует таковым типичных г-стратегов, исключение составляет отсутствие высокой скорости роста, что в большой мере определяется свойствами субстрата - присутствие высоких концентраций суль-фонола приводит к частичному лизису клеток.

Режим, в котором эксплуатируется шестисекционная установка более предпочтителен для K-стратегов. За счет многоступенчатости системы, хотя и увеличивается скорость протока для каждой отдельной колонки, достигается более стабильный и менее разнородный состав среды. Все сообщества секций представлены только микроорганизмами р.Bacillus, которые многими авторами [33,80] описываются как K-стратеги. Их способность образовывать покоящиеся формы способствует их большей жизнеспособности: спорообразующие микроорганизмы лучше приспособлены к таким неблагоприятным условиям, как длительное голодание, резкое снижение или повышение температуры, изменение режима аэрации.

Еще одной предпосылкой, позволяющей говорить, что микробные ассоциации этих двух установок представляют разные типы экологических стратегий, является разная глубина утилизации используемого субстрата. Выше отме

137 чалось, что конечными продуктами деструкции сульфонола, поступающего в односекционную установку в весьма высокой концентрации являлись ароматические структуры, имеющие, возможно, короткоцепочечный окисленный углеводородный радикал.

В шестисекционной установке разрушение вещества при относительно невысокой концентрации протекает гораздо глубже: происходит разрыв кольца и его частичное окисление.

Полученные результата позволяют предположить, что селекционированные сообщества имеют разную экологическую стратегию.

Актуальность получения сообщества, деградирующего алкилфенолы, очевидна. Известно, что ОЭАФ достаточно легко подвергаются первичной деструкции, а промежуточные продукты, такие как алкилфенолы или ОЭАФ с одной-тремя оксиэтильными группами, накапливаются. При обработке и обеззараживании воды, содержащей такие соединения, образуются еще более стабильные и опасные их хлорпроизводные [44].

Методом непрерывного проточного культивирования нам удалось селекционировать микробный консорциум, достаточно активно разрушающий изо-нонилфенол. Консорциум является активной основой модельной очистной установки. Степень очистки, осуществляемой в установке, достигает 96% при концентрации загрязнителя 0,2 г/л. Установлено, что активной деструкции подвергается как ароматическая часть молекулы, так и алифатическая, причем доступными для биодеструкции оказались изомеры с линейным или имеющим изопропильное развтвление радикалом, соединения же, содержащие трет-бутильные структуры разложению не подвергались. В очищенной воде обнаруживаются частично окисленные линейные фрагменты, образующиеся при разрушении кольца и радикала. Столь же эффективно разлагались акилфенолы и ОЭАФ с 1-3 оксиэтильными группами, полученные в результате микробной деструкции неонола АФ9-12. Утилизации подвергались и углеводородный радикал, и ароматические кольцо и остаточное количество оксиэтильных групп.

138

Сформировавшийся консорциум был представлен тремя культурами: Bacillus sp., В. subtilis и Р. stutzeri. Все культуры способны при периодическом культивировании в большей или меньшей степени разлагать изононил-фенол, самая активная из них Bacillus sp. утилизирует на 81% ароматическое кольцо и на 42% углеводородный радикал.

Модельные очистные установки, осуществляющие деградацию ароматических ПАБ и их структурных компонентов, работают в непрерывном проточном режиме, воздух подается из расчета V/V мин, количество очищенной жидкости равно объему установки.

Объектом для отработки технологических параметров очистки стоков, содержащих ароматические ПАВ, стала шестисекционная сульфонолокисляю-щая установка. Показано, что глубина разрушения обеспечивается многоступенчатостью системы. При поддержании в первых секциях очистной установки микроаэрофильных условий снимается проблема интенсивного пенообразова-ния, а подача в последующие секции достаточного количества воздуха способствует наиболее полной деградации субстрата. Температурный оптимум лежит в диапазоне от 20 до ЗОоС, отклонение в ту или иную сторону приводит к значительному снижению эффективности очистки. При восстановлении оптимального температурного режима деструктивные показатели установки восстанавливались.

Таким образом, нам удалось селекционировать микробные сообщества, способные эффективно разрушать "биологически жесткие" ароматические соединения - алкилбензолсульфонаты и алкилфенолы. На основе этих консорциумов, иммобилизованных на волокнистых носителях, созданы модельные очистные установки, работающие более шести лет в непрерывном режиме, показана их перспективность для промышленной очистки сточных вод от этих загрязнителей.

139

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Дубровская, Екатерина Викторовна, Саратов

1. Абрамзон A.A., Зайченко Л.П., Файнгольд С.И. Поверхностно-активные ыещества. Синтез, анализ, свойства, применение: Учебное пособие для ВУЗов. -Л.: Химия. - 200с.

2. Алиева P.M. Биотехнология локальной очистки от токсических соединений и металлов//Микробиология охраны биосферы в регионах Урала и Северного Прикаспия: Тез. докл. Всесоюзн. симп. Оренбург, 1991. С. 5.

3. Алиева P.M., Илялетдинов А.Н. Реализация экологического принципа в микробиологической очистке промышленных сточных вод// Изв. АН СССР. Сер. Биол. 1986. - N4. - С. 517-527.

4. A.c. N612958 СССР, МКИЗ С 12К 1/02, С 02В 9/02. Штамм Pseudomonas aeruginisa 123, несущий ОСТ+, cam+, NAH+ плазмиды, используемый при биологической очистке воды от нефти и нефтепродуктов/ A.M.Воронин, А.Л.Пориц, Г.К.Скрябин (СССР). 5 с.

5. A.c. 333135 СССР, МКИ1 С 02 С 5/10. Установка для очистки сточных вод/ П.И.Гвоздяк, В.М.Удод, М.Н.Ротмистров (СССР). 2 е.: ил.

6. A.c. 1640155 СССР МКИ5 С 12 N 1/20, С 12 S 13/00. Штамм бактерий Pseudomonas mendocina, используемый для очистки сточных вод от сульфоно-ла, синтамида, синтанола/Л.С.Самойленко, С.С.Ставская, В.В.Лизунов (СССР). -4 с.

7. A.c. 1285776 СССР МКИЗ С 12 N 1/20, С 02 F 3/34. Штамм бактерий Pseudomonas putidá В-2950, используемый для очистки сточных вод от алкил-фенолэтоксилатов типа ОП/ О.В.Турковская, Б.А.Шендеров, Г.М.Шуб (СССР). -4 с.

8. Балашов С.В., Воронин А.М. Бактерии деструкторы сульфоаромати-ческих соединений из активного ила// Микробиология. - 1996. - 65, N5. - С. 6237-631.

9. Балашов СВ., Дубейковский А.Н. Генетическая система биодеградации сульфоароматических соединений штаммом Pseudomonas putida BS1304// Новые направления биотехнологии: Тез. докл. VI конф. Росс. Фед. 24-26 мая 1994г. -Пущино, 1994. С. 15.

10. Барковский A.J1., Шуб Г.М. Штамм Acinetobacter calcoaceticus с широким спектром утилизации ароматических соединений, несущий плазмиду деградации резорцина// Микробиология. 1986. - Т.55, N2. - С. 237-240.

11. Бест Д., Джонс Д., Стаффорд Д. Биодеградация ксенобиотиков в окружающей среде// Биотехнология: принципы и применение/ Под ред. И. Хиггин-са, Д. Беста, Д. Джонса. М.: Мир, 1988. - С. 284-295.

12. Биоиндикация загрязненных наземных экосистем: Пер. с нем./ Под ред. Р.Шуберта. М.: Мир, 1989. - 350 с.

13. Воронин А.М., Скрябин Г.К. Генетические аспекты деградации бактериями ксенобиотиков// Успехи микробиологии. М.: Наука, 1985. - Вып.20. - С. 39-60.

14. Боронини А.М., Кочетов В.В., Скрябин Г.К. Группы несовмостимости плазмид биодеградации нафталина у бактерий рода Pseudomonas// Генетика. -1980. -Т.16, N5. С. 792-803.

15. Брагинский Л.П., Перевозченко И.И., Калиниченко К.П. и др. Биологические факторы деградации СПАВ в водной среде// Самоочищение и биоиндикация загрязненных вод. М.: Наука, 1980.1. С. 193-196.

16. Булатников В.В., Левченко А.Н., Худяков А.Д. О биологической разла-гаемости неионогенных эмульгаторов, полученных на основе многоатомных спиртов//Нефтепереработка и нефтехимия. 1973. - N5. - С. 48-50.

17. Василевская И.Л., Сергейчук М.Г., Ермакова Л.З. и др. Антимикробные свойства нового синтетического моющего средства "Фитон"// Микробиол. журн. 1983. - Т.45, N3. - С. 62-66.143

18. Вербина Н.М. Деградация микроорганизмами неприродных органических соединений в окружающей среде// Микробиология/ ВИНИТИ. 1978. -Т.7. - С. 65-107.

19. Волков В.А. Поверхностно-активные вещества в моющих средствах и усилителях химической чистки. М.: Легпромбытиздат, 1985. - 200 с.

20. Волощенко О.И., Медяник И.А. Гигиена и токсикология бытовых химических веществ. Киев: Здоровья, 1983. - 143 с.

21. Волощенко О.И., Мудрый И.В. Гигиеническое значение поверхностно-активных веществ. Киев: Здоровья, 1991. - 162 с.

22. Волощенко О.И., Леонская Г.И. Эмбриотическая активность ПАВ// Тез. докл. VI Всесоюзной конф. по ПАВ и сырью для их пр-ва. Волгодонск: ВНИИПАВ, 1984. - С. 522-523.

23. Гвоздяк П.И. Основные тенденции в микробиологии очистки воды// Достижения микробиологии практике: Тез. докл. VII съезда ВМО, Алма-Ата, июнь 1985 г. - Алма-Ата: Наука, 1985. - Т. 6. С. 38.

24. Гвоздяк П.И., Дмитриенко Г.Н., Куликов Н.И. Очистка промышленных сточных вод прикрепленными микроорганизмами// Химия и технология сточных вод. 1985. - Т.7, N1.-0. 64-68.

25. Гвоздяк П.И., Хазипов Р.Х., Удод М.В., Кравчук В.Н., Подорван Н.И. Влияние микрофлоры пластовых вод Арланского нефтяного месторождения на неионогенное ПАВ ОП-Ю// Химия и технология воды. 1983. -Т.5, N4. - С. 357358.

26. Гвоздяк П.И., Чеховская Т.П., Никоненко ВЧ. Микробное разрушение анилина// Химия и технология воды. 1985. - Т.7, N2. - С. 84-85.

27. Генцлер Г.Л. О влиянии пенообразующих веществ на биологическую очистку сточных вод// Изв. ВУЗов.Строительство. 1991. - N12. С. 75-77.

28. Гоголев И.Н., Михальченко Ю.В. Сорбция некоторых анионных синтетических поверхностно-активных веществ в Южном Черноземье// Почвовед. -1993.-N2.-С. 45-51.144

29. Горелик Э.В. Микробиологическая деструкция анионных поверхностно-активных веществ. Дис. канд. биол. наук. Саратов , 1990. - 160 с.

30. Громов Б.В., Павленко Г.Д. Экология бактерий. Д.: Изд. Ленингр. унта, 1989.-248 с.

31. Добрынина Л.Ф., Ненашева М.Н., Цинберг М.Б. Опыт применения биотехнологии "Трофактор" на предприятиях нефтегазовой промышленно-сти//Биология и биотехнология очистки воды: Тез. докл. конф. 17-19 ноября 1992, г. Полтава. Киев, 1992. С. 14-15.

32. Добрынина Л.Ф., Цинберг Б.М., Гвоздяк П.И. и др. Изучение пространственной сукцесии микроорганизмов в установке микробной очистки химически загрязненных сточных вод// Химия и технология воды. 1993. - Т. 15, N1. -С. 71-77.

33. Доклад о состоянии окружающей природной среды Саратовской области в 1997 году. Саратов, 1998. - 157 с.

34. Дубейковский А.Н., Гафаров А.Б., Наумов A.B. Плазмидный конроль деградации сульфоароматических соединений штаммами Pseudomonas sp. BS 1304// Генетика. 1992. - Т.28, N11- С.34-40.

35. Дубейковский А.Н., Таранова Л.А., Наумов A.B. Плазмидный контроль деградации р-толуолсульфоната штаммом Pseudomonas putida BS 1304// Новые направления биотехнологии: Тез. докл. V конф. Росс. Фед. 18-22 мая 1992 г. -Пущино,1992. С. 149.

36. Заварзин Г.А. Микробные сообщества объект фундаментальных исследований/ Биоценоз в природе и промышленных условиях. - Пущино, 1987. С. 3-11.

37. Закупра В.А. Методы анализа и контроля в производстве поверхностно-активных веществ. М.: Химия, 1977. - 368 с.145

38. Звягинцев Д.Г. Функционирование природных ценозов в почве и пути его регулирования/ Биоценоз в природе и промышленных условиях. Пущино, 1987. С. 32-41.

39. ИК-, ЯМР- и KP- спектры поверхностно-активных веществ, сырья и препаратов на их основе: Каталог/ Перов П.А., Глухова Л.Ю., Маркова Е.И. и др. ЦНИИТЭ нефтехим. Москва, 1989. - 233 с.

40. Ильин Е.И. Изучение токсичности продуктов трансформации ПАВ, образующихся в процессе обеззараживавния питьевой воды// Гигиена и санитария. 1982. - N9. - С. 33-36.

41. Кабиров P.P., Хазипова Р.Х. Альгологический метод оценки токсичности поверхностно-активных веществ// Биоиндикация и биомоноторинг: Сб. матер. междунар. шк.-семин., Курск, 1988. М., 1991. - С. 282-285.

42. Калениченко К.П. Поверхностно-активные вещества в воде Дуная// Водн. рес. 1993. - Т.20, N4. - С. 486-487.

43. Керимов Т.М., Исмаилов Н.М. Разложение неионогенных ПАВ типа АФ8-12 пластовой микрофлорой// Изв. АН Аз.ССР. Сер. биол. науки. 1989. -N24. С. 89-93.

44. Клименко H.A., Панченко Н.П. Определение НПАВ в сточных водах// Текстильная промышленность. 1971. - N2. - С. 85-86.

45. Клименко H.A., Тимошенко М.Н. Физико-химические методы очистки промышленных сточных вод от синтетических поверхностно-активных веществ// Химия и технология воды. 1993. - Т. 15, N7-8. - С. 534-566.

46. Корженевич В.И. Деградация фенола грамотрицательными аэробными бактериями: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. Ростов-на-Дону, 1985. - 17 с.

47. Кофанов В.И., Венгжен Г.С., Удод В.М. и др. Исследование промежуточных продуктов микробного разрушения оксиэтилированных спиртов и алкилфенолов// Химия и технология воды. 1986. - Т.8, N1. - С. 71-74.146

48. Кривец И.А. Изменеие свойств микроорганизмов под влиянием поверхностно-активных веществ// Химия и технология воды. 1984. - Т.6,N5. - С. 455-464.

49. Кривец И.А., Таранова Л.А., Ставская С.С. Использование бактерий для разрушения анионных детергентов// Самоочищение и биоиндикация загрязненных вод. 1980. С. 204-207.

50. Кудымова Т.В. Влияние неонолов АФ9-12 и АФ9-6 на репродуктивную функцию белых крыс// Опыт использования неонолов АФ9-п оксиэтилиро-ванных алкилфенолов в народном хозяйстве: Сб. науч. тр. Всесоюзн. совещ., Шебекино. - Белгород, 1990. С. 26-27.

51. Леснюк И.И., Коцюмба И.Я., Комаринец О.Т. и др. Влияние неионо-генных ПАВ на эмбрионов и предличинок вьюна// Гидробиол. журн. 1983. -Т. 19, N4. - С. 35-40.

52. Лурье Ю.Ю. Аналитическая химия промышленных сточных вод. М.: Химия, 1984. -448 с.

53. Методика оценки степени биохимического распада синтетических поверхностно-активных веществ (анионного и неионогенного типа). М., 1970. -32 с.

54. Методические указания по санитарной охране водоемов от загрязнения синтетическими поверхностно-активными веществами/ Разраб. Можаевым Е.А. М.: Минздрав СССР, 1976. - 16 с.

55. Методы почвенной микробиологии и биохимии/ Под ред. Д.Г.Звягинцева. М.: Изд-во МГУ, 1991.-304 с.

56. Могилевич Н.Ф. Иммобилизованные микроорганизмы в очистке воды. Преимущества и перспективы// Микробиология охраны биосферы в регионах147

57. Урала и Северного Прикаспия: Тез. докл. Всесоюзн. симп. Оренбург, 1991. С. 78.

58. Можаев Е.А. Загрязнение водоемов поверхностно-активными веществами. М.: Медицина, 1976. - 96 с.

59. Моргунова Т.С., Бабичева JI.A., Гребенюк JI.H. и др. Средства для стирки// Поверхностно-активные вещества и сырье для их производства: Тез. докл. VIII конф. Белгород. 1992. С. 298.

60. Моргунова Т.С., Гребенюк JI.H., Шумских Т.П. и др. Новые ПАВ в составе порошкообразных ТМС// Поверхностно-активные вещества и сырье для их производства: Тез. докл. VIII конф. Белгород. 1992. С. 185-186.

61. Мусил Я., Новакова О., Кунц К. Современная биохимия в схемах . М.: Мир, 1984.-215 е.

62. Овчаров Л.Ф., Таранова Л.А. Плазмиды биодеградации некоторых ио-ногенных поверхностно-активных веществ// Микробиологические методы защиты окружающей среды: Тез. докл. Всес. конф. 5-7 апреля 1988 г. Пущино, 1988. -С.48.

63. Орлянская H.A. Микроорганизмы показатели загрязнения почвы CMC и биодеградация их в почве// Тез. докл. Всесоюз конф. "Микробиологические методы защиты окружающей среды". Пущино, 1988. С. 153-154.

64. Осауленко О.В., Вейде Л.А., Марамович A.C. Влияние некоторых поверхностно-активных веществ на выживаемость холерного вибриона в воде// Проблемы экологии Прибайкалья: Тез. докл. респ. совещ. Иркутск, 1979. -Секц.2. Секц.З. - С. 48-50.

65. Остроумов С.А. Биологическая активность вод, содержащих ПАВ// Химия и технология воды. 1991. - Т.13, N3. - С. 270-282.

66. Остроумов С.А., Самойленко Л.С. Оценка эффективности биотехнологического разрушения анионных ПАВ с помощью биотестов// Вестн. МГУ Сер. 16. . 1990. -N3. - С. 74-78.148

67. Паников Н.С. Меристический анализ природных микробных сообществ и его приложения в биотехнологии/ Биоценоз в природе и промышленных условиях. Пущино, 1987. С. 11-22.

68. Панченко JI.B. Исследование процессов микробной деструкции неио-ногенных поверхностно-активных веществ для разработки технологии очистки сточных вод. Дис. . канд. биол. наук. Саратов, 1994. - 215 с.

69. Паршикова Т.В., Негрутский С.Е.Влияние поверхностно-активных веществ на водоросли// Гидробиол. журнал. 1988. - Т.24, N6. - С. 46-58.

70. Перов П.А., Глухова Л.Ю., Стогнушко Д.П. Методы определения поверхностно-активных веществ в сточных водах: Темат. обзор. М.: ЦНИИТЭ нефтехим, 1986. - 67 с.

71. Першинов В.И., Выскубенко И.Ф., Журков B.C. Гигиеническая оценка двух новых ПАВ как фактора загрязнения водоисточников// Гигиена и санитария. 1982. - N2. - С. 85-86.

72. Печуркин Н.С. Смешанные проточные культуры микроорганизмов. -Новосибирск: Наука, 1981. 200 с.

73. ПианкаЭ. Эволюционная экология. М.: Мир,1981.-399 с.

74. Поверхностно-активные вещества: Справочник/ Абрамзон A.A., Бочаров В.В., Гаевой Г.М. и др.; Под ред. А.А.Абрамзона и Г.М.Гаевого. Л.: Химия, 1979. - 376 с.

75. Плешакова Е.В. Биодеградация ПАВ и минеральных масел и ее генетическая природа. Дисс. .канд. биол. наук. Саратов, 1999. - с. 166.

76. Поруцкий Г.В. Биохимическая очистка сточных вод химических производств. М.: Химия, 1975. - 224 с.

77. Правдин В.Г., Полковниченко И.Т., Чистяков Б.Е и др. Поверхностно-активные вещества в народном хозяйстве. М.: Химия, 1989. - 48 с.

78. Рабинович Н.Л., Белов А.П., Градова Н.Б. Экспериментальные подходы к созданию системы биоиндикации воздействия детергентов на почву// Прикл. биохим. и микробиол. 1994. Т.30, N3. - С.487-492.

79. Резяпова И.Б., Хазипов Р.Х. Биоразлагаемость и влияние на жизнедеятельность сульфатвосстанавливающих бактерий оксиэтилированного алкилфе-нола в смеси с н-бутаном//Микробиология. 1991. - Т.60, N8. - С. 872-878.149

80. Рокицкий П.Ф. Биологическая статистика Минск: Вышэйш. школа, 1973.-320 с.

81. Ротмистров М.Н., Таранова Л.А., Радченко О.С., Ставская С.С. Бактериальная деструкция алкилбензолсульфонатов// Докл. АН СССР . 1986. - 288, N1. - С. 246-248.

82. Сарсенова С.Ж. Влияние синтетических поверхностно-активных веществ на выживаемость и морфологию Str. roseoflavus var. roseofungini 1128// Изв. АН КазССР. Сер. биол. 1981. - N5. - С. 55-58.

83. Саутин А.И., Руднева Т.К., Соловьева Т.Г. и др. Влияние ПАВ на живой организм// VII Международный конгресс по ПАВ, июль 1976 г.: Тез. докл. -М„ 1976.-С. 31-32.

84. Селивановская С.Ю., Петров A.M., Егорова К.В. и др. Формирование иммобилизованного биоценоза, очищающего сточные воды от комплекса ароматических загрязнений// Химия и технология воды. 1996. - Т. 18, N3. - С.328-336.

85. Ставская С.С. Биологическое разрушение анионных ПАВ. Киев: Наук, думка, 1981. - 114 с.

86. Ставская С.С., Таранова Л.А., Кривец И.А. и др. Микробиологический метод очистки производственных сточных вод от анионных ПАВ// Химия и технология воды. 1982. - Т.4, N4. - С. 368-370.

87. Ставская С.С., Таранова Л.А., Радченко О.С., Ротмистров М.Н. Селекция микроорганизмов-деструкторов алкилбензолсульфонатов// Химия и технология воды. 1986. - Т.8, N6. - С. 59-62.

88. Ставская С.С., Удод В.М., Таранова Л.А. Микробиологическая очистка воды от поверхностно-активных веществ. Киев: Наукова думка, 1988. - 184 с.

89. Ставская С.С., Шамолина И.И., Никовская Г.Н. и др. Иммобилизация бактерий-деструкторов на искусственных волокнах для очистки воды от анионных ПАВ// Химия и технология воды. 1991. - Т.13, N6. - С.548-554.

90. Сытник K.M., Брайон А.Б., Городецкий А.Б. Биосфера. Экология. Охрана природы. Киев: Наукова думка, 1987. -378 с.

91. Таранова Л.А. Бактериальная деструкция ионогенных ПАВ// Хим. и технол. воды. 1995. - Т. 17, N5. - С.538-544.150

92. Таранова JI.А., Радченко О.С., Овчаров Л.Ф., Ставская С.С. Бактериальная деструкция сульфонола (алкилбензолсульфоната) в биореактое// Химия и технология воды. 1987. - 9, N4. - С. 361-363.

93. Тарасова В.Ф., Фурманчук Р.Ф., Негай Л.А. Мировые тенденции развития моющих средств// Поверхностно-активные вещества и сырье для их производства: Тез. докл. VIII конф. Белгород, 1992. С. 174-175.

94. Теппер Е.З., Шильникова В.К., Переверзева Г.И. Практикум по микробиологии. М.: Колос, 1993. - 175 с.

95. Турковская О.В. Микробиологическая деструкция неионогенных поверхностно-активных веществ. Дисс. . канд. биол. наук. Саратов, 1989. - 173 с.

96. Удод В.М., Подорван Н.И. Микробная деструкция неиногенных поверхностно-активных веществ при очистке воды//Самоочищение и биоиндикация загрязненных вод. -1980. С. 208-211.

97. Удод В.М., Подорван Н.И., Венгжен Г.С. и др. Очистка сточных вод, содержащих НПАВ, иммобилизованными микроорганизмами в анаэробно-аэробных условиях// Химия и технология воды. 1982. - Т.4, N4. - С. 375-376.

98. Удод В.М., Подорван Н.И., Венгжен Г.С. и др. Микроорганизмы-деструкторы ряда неионогенных поверхностно-активных веществ// Микробиология. 1983. - Т.52, N3. - С. 370-374.

99. Удод В.М., Шапар С.К., Подорван Н.И. и др. Микробиологический метод очистки сточных вод, содержащих смесь НПАВ//Химия и технология воды. 1985. -T.7,N1. - С. 80-81.

100. Файзутдинова Р.Н. Структурно-функциональная организация оболочки дрожжей-деструкторов поверхностно-активных веществ. Дисс. . канд. биол. наук. Пущино, 1999. - 151 с.

101. Химия окружающей среды/ Б.Т.Бейкер, Дж.О.М.Бокрис, Дж.Брикард и др.: Под ред. Дж.О.М. Бокриса: Пер. с англ. М.: Химия, 1982. - 672 с.

102. Черняев A.M., Жаманаев Ш.Ш., Беличенко Ю.П. Изучение изменения АСПАВ в природных водах// Водн. рес. 1988. - N2. - С. 173-176.

103. Чеховская Т.П. Консорциум микроорганизмов для очистки стиочных вод от анилина и формальдегида//Микробиология охраны биосферы в регионах Урала и Северного Прикаспия: Тез. докл. Всесоюзн. симп. Оренбург, 1991. С. 129-1301.

104. Шевченко М.А., Таран П.Н., Марченко П.В. Современные методы очистки воды от пестицидов// Химия и технология воды. 1982. - Т.4, N4. -С.329- 344.

105. Шенфельд Н.Н. Поверхностно-активные вещества на основе оксида этилена. М.: Химия, 1982. - 749 с.

106. Щукин Е.Д., Гершенович А.И. Поверхностно-активные вещества состояние и перспективы развития// Журн. Всесоюз. хим. об-ва им. Д.И.Менделеева. - 1980. - 25, N5. - С. 573-581.

107. Экологическая биотехнология/ под ред. К.Ф.Фостера и Д.А.Дж.Вейза: Пер. с англ. Л.: Химия, 1990. - 384 с.

108. American Puble Health Association. Standart Methods for the Examination of water and wastwater, 15 th ed. (APHA). Washington, DC.,1980. P.530-532.

109. Anderson D.J., Russel N.J., White G.F. Dieaway kinetic analysis of the capacity of epilethic and planktonic bacteria from cleam and polluted river water to biodegrade sodium dodecyl sulfate// Appl. and Environ. Microbiol. 1990. - 56, N3. -P. 758-763.

110. Baggi G., Beretta Z., Galli E. et al. Biodégradation of alcylphenol polye-toxylates// Oil Ind. and Microb. Ecosyst. Proc. Meet. London: Marwick, 1978. - P. 129-136.

111. Bergey's manual systematic bacteriology. Baltimore; London: Williams, Wiskins, 1984-1986. - 1599 p.

112. Brandel S., Dletzch K. Toxikologische Wirkung und onkologische Auswirkungen von Alkansulfonate// Alkansulfonate. Leipzig. - 1985. - S. 219-241.

113. Birnboim H.C., Doly J. A rapid alcaline extraction procedure for screening recombinant plasmid DNA//Nucl. Acids Res. 1979. - Vol.7. - P. 11513-11523.152

114. Brown D. The assement of biodegrability a consideration of possible criteria for surface-active subetances// Тр. VII Междунар. конгр. по ПАВ (Москва, 12-18 сент. 1976 г.). - М., 1987. - Т. 4, - С. 44-57. .

115. Bunsh R.L., Chambers C.W. A diodegrability test for organic compounds// J. Water Pollut. Contr. Fed. 1967. - 39, N2. - P. 181-189.

116. Cain R.B. Microbial degradation of surfactants and "builder" components// Microbial degradation of xenobiotics and recalcitrant compounds: FEMS symp. N12. London: Acad, press, 1981. - P. 325-370.

117. Cain R.B., Willets A.J., Bird J.A. Surfactant biodégradation: metabolism and enzymology// Biodégradation of materials: Appl. Sci. Publ. Ltd. Enfland, London, 1979. - Vol.2. - P. 136-144.

118. Camiller C. Techniques die'quaration. Unqart desie'clde proges technologiques ont permisala biologie des'imposer// Arts et manuf. 1991. - N425. - P. 19-22.

119. Chakrabarty A.M. Genetic basis of the biodégradation of salicylate in Pseudomonas// J. Bacteriol. 1972. - Vol. 112, N2. - P. 815-823.

120. Cook K.A. A rapid methodfor the detection of nonionic surfactant degrading microorgansms// J. Appl. Bacteriol. - 1978. - Vol.44, N2. - P.299-303.

121. Courtes R., Bahlaoui A., Rambaut A., Daschamps F., Sunde E., Dutrieuse E. Ready biodegrability test in seawster: A new mehtodological approach// Ecotoxi-col. and Environ. Safety. 1995. - 31, N2. - P. 1142-148.

122. Davey J.E., Gibson D.T. Bacterial metabolism of paraand meta-xilene: oxidation of a nethyl substituent// J. Bacteriol. 1974. - Vol.119, N3. - P. 923-929.

123. Department of the Environment, Seventeenth Progress Report of the Standing Technical Commitee on Syntrtic Detergents, HMSO, London, 1977.

124. Deschenes L., Lafrance P., Villeneuve J.P., Samson R. The effect of anionic surfactant on the mobilisation and biodégradation of PAHs in creosote-contaminated soil// Hidrol. Sci. J. 1980. - Vol.19, N 3. - P. 234-239.

125. Dhawan N., Mishra M.M. Biodégradation of tetrapropilene alkylbenzene sulphonate// Zbl. Bacteriol. Parasitenk., Infectionskrankh. und Hyg. Abt. 2. 1976. -Bd 131, N3. - S. 208-211.153

126. Dodson K.S. Observation on enzyme systems invilved in the biodégradation of anionic surfactants// Sei and Sei.: Essays Biohem. Biol, and Chem. Tokyo, 1981. - P. 183-190.

127. Drewa G., Dabrowska T., Zbitniewsky Z. et al. Effect of crude oil and detergent "Solo" on the activity of some hydrolases in hemolymph of crab Rnictropano-peus harrisi// Pol. arch, hydrobiol. 1979. -Vol.26, N1-2. - P. 205-211.

128. Dunn N.W., Gunsalus I.C. Transmissible plasmid coding early ensymes of naphtalene oxidation in Pseudomonas putida// J. Bacteriol. 1973. - Vol.114, N3. - P. 974-979.

129. Dunnik J.K., Marinetti G.V., Greenland P. Effect of detergents and sodium fluoride on the enzyme activities of rat liver plasma membrane// Biochem. et Bio-phys. Acta. 1972. - Vol.266, N3. - P. 684-694.

130. Frazee C.D., Osburn Q.W., Crisles R.O. Application of Infrared Spectroscopy to Surfactant Degradation Studies// J. Amer. Oil Chem. Soc. 1964. - Vol.41, December.-P. 808-812.

131. Friello D.A., Mylroie J.R., Gibson D.T. et al. XYL, a nonconjugative xilene-degrading plasmid in Pseudomonas Pxy// J. Bacteriol. 1976. - Vol.127, N3. -P. 1217-1224.

132. Friello D.A., Mylroie J.R., Chakrabarty A.M. Use of genetically engineered multiplasmid microorganisms for rapid degradation of fuel hydrocarbons// Proc. 3rd Int. Biodegrad. Symp. London, 1976. - P. 205-214.

133. Giger W., Brunner P.H., Schaffner C. 4-nonylphenol in sewage sludge: accumulation of toxic metabolites from nonionic surfactants// Science. 1984. -Vol.225, August. - P. 623-625.

134. Gledhill W.E., Screening test for assessment of ultimate biodegrability: linear alkilbenzene sulphonates// Appl. Microbiol. 1975. - 30, N6. - P. 922, 929.

135. Grady C.P. Biodegradation: ist measurimrnt and microbiological basis// Biotechnol. and Bioeng. 1985. - 27, N5. - P 660-674.

136. Harnes J.R., Alexander M. Microbial degradation of polyethylene glycols// Appl. Microbiol. 1975. - Vol. 29, N5. - P. 621-625.

137. Hideaki M., Naoto M., Masanori F. et. al. Degradation of alkylphenol ethoxilates by Pseudomonas sp. strain TR01// Appl. and Environ. Microbiol. 1994. -Vol.60, N7. - P. 2265-2271.154

138. Hommel R., Borneleit P., Kleber H. Effects of detergents and phospholipids on the pyridine nucleotide-independent aldehide dehydrogenase from membranes of Acetobacter rancens//Biomed. Biochim. Acta. 1985 - Vol. 44, N9. - P. 1315-1320.

139. Hrsak D., Begonya A. Growth characteristics adn metabolic activities of the methanotrophic-hetrotrophic groundwater community// J. Appl. Microbiol. 1998. -N85. - P. 448-456.

140. Hrsak D., Grbic-Grbic D. Biodégradation of linear alkylbenzenesulpho-nates (Cl 1 LAS) by mixed methanotrophic/heterotrophic and mixed heterotrophic bacterial cultures// Prehramb. teknol./ Biotechnol. rev. - 1993. - Vol. 31, N1. - P. 714.

141. Hrsak D., Johanides V., Starcevic M. Dinamics of mixed bacterial population during linear alkylbenzenesulphonate biodégradation// Тр. VII Междунар. конгр. по ПАВ (Москва, июль 1976 г.). М., 1978. - Т.4. - С. 149-159.

142. Janke D., Fritsche W. Nature and significance of microbial cometabolism of xenobiotics// J. Basic. Microbiol. 1985. - Vol.25, N9. - P. 603-619.

143. Jimenez L., Breen A., Thomas N. et al. Mineralisation of linear alkylbezene sulfonate by a four-member aerobic bacterial consortium// Appl. Environ. Microbiol. 1991. -N57. - P. 1566-1569.

144. Jones W.L., Schroeder E.D. Use of cell-free extract for the enhancement of biological wastewater treatment// J. Water Pallut. Contr. Fed. 1989. - Vol.61, N1. -P. 60-65.

145. Kado C.J., Liu S.T. Rapid procedure for the detection and isolation of large and small plasmid//J.Bacteriol. 1981. - Vol. 145. - P. 1365-1373.

146. Konopka A., Zakharova T., Oliver L. et al. Biodégradation of Oganic Wastes Containing Surfactants in a Biomass Recicle Reactor// Appl. and Environ. Microbiol. 1996. - Vol.62, N9. - P. 3292-3297.

147. Kostal J., Demnerova K. A new-alkane degradation plasmid from Pseudomonas C12B// Proc. of the two Intern. Symp. Biosorption and Bioremediation, the Prague, 12-17 July 1998. Prague, 1998. -P.13.

148. Kravetz L. Biodégradation of nonionic ethoxylates// J. Amer. Oil Chem. Soc. 1981. - Vol.58, N1. - P. 58A-65A.

149. Lonning S., Falk-Petersen I. The effect of oil dispersants on marine eggs and larvae// Astsrte. 1978. - Vol.11, N2. - P. 135-138.155

150. Marques M.L., Silva I., Roseiro I.C. Co-metabolism and microbial growth in the biodégradation of alkylbenzensulphonates// Lettrs in Applied Microbiology. -1997. -N24. P. 435-437.

151. Martikeinen P., Miettenen I., Livaneinen E., Katila M.-L. Mikrobiologia, biokemia ja jmparustotutkimukset//Tutkimusrap./ Goel. tutkimuskeskuskeskus. -1992. -N115. -C.45-53.

152. Nayyar S.P., Sabatini D.A., Harvell J.H. Surfaktant adsolubilisation and modified admicellar sorption of nonpolar, polar and iozocable organic contaminais// Environ. Sci. and Technol. 1994. - 28, N11. - P. 1874-1881.

153. Niberg H., Koskimies-Soininen K. The glycolipid fatty acids of Porphy-ridium purpureum cultered in the presence of detergents// Phytochemistry. 1984. -Vol.23, N4. P. 751-757.

154. Niberg H., Koskimies-Soininen K. The phospholipid fatty acids of Porphy-ridium purpureum caltered in the presence of Triton X-100 and sodium desoxycho-late// Phytochemistry. 1984. - Vol.23, N11. - P. 2489- 2495.

155. Nicodemuss I., Fodor F., Balatoni m., Sujbert L. Uber die Wirkung von Detergenten auf Microben// Zbl. Bacterid., Parasitenk. Infeltionskrankkh. und Hyg.,1 Abt. Orig.A. 1976. - N236. - S.131-135.

156. Nicodemuss I., Fodor F., Sujbert L., Balatoni M. Wechselurung von anionaktiven Detergentien und Microorhanismen// Fonem-Stadte-Hyg. 1977. -Bd.28, N6. - S.176-178.

157. Nishihara T., Hasebe S., Nishiwaka J. et al. Biodégradation of aniline, anthracene, chlornitrophen, fenitrothion and linear alkylbenzene sulfonate in pond water//!. Appl. Bacteriol. 1996. - N82. - P.441-447.

158. Ohtonen R., Markkola A.M., Ladesmaki P. Characteristics of the mikrobial community in forest hummus along an industrial pollution gradient// 6 th Int. Symp. Microb. Ecol. (ISME-6) Barcelona, 6-11 Sept., 1992: Abstr. . Barcelona: 1992. -P.187.156

159. Ohwada K. Agar plate method for detection and enumeration of alkyl-bencenesulphonete-degrading microorganisms// Appl. Microbiol.- 1975,- 29, N1,-P.40-43.

160. Pat. 4317885 USA, MKU3 CI2 N 1/20 Microbiological having multiple compartible degradative energe-generating plasmids and preparation there oil A.M.Chakrabarty (USA).

161. Pat. 4483923 USA, MKI C12 N1/20. Microbiological process for removing nonionic surface active agents, detergents and the like from wastewater and microorganism capable of same/ James E.Blair, Lois T. Davi. (USA). 7 p.

162. Patterson S.J., Scott C.C., Tucker K.B.E. Nonionic detergent degradation. III. Initial mechanism of the degradation// J.Amer. Oil Chem. Soc. 1970. - Vol.47, N2. - P.37-41.

163. Pawlaczyk-Szpilowa M., Plucinski J., Karpinska-Smulikowska J. et al. Studies on pluronic type, under stationary conditions// Wiss. Z. Techn. Univ. Dresden. 1977. -Bd.26,N6. S. 1178-1180.

164. Peine W.J., Feisal V.E. Bacterial utilizaton of dodecylsulfate and dodecyl-benzene sulfonate// Appl. Microbiol. 1963. - Vol. 11, N2. - P. 339-344.

165. Pitter P., Fuka T. Biodégradation of non-sulphated and sulphated nonyl-phenol ethoxylate surfactants// Environ. Prot. Eng. 1970. - Vol.5, N1. - P. 47-56.

166. Plucinski J., Pawlaczyk-Szpilowa M., Dziendziel E. et al. Biodégradation of the tetronic-type nonionic surfactants under stationary conditions// Environ. Prot. Eng. (PRL). 1983. - N3. - P. 19-24.

167. Prelini C., Costero G. Tensioaktivi ad alta velosita di biodegradazione// Tinctoria. 1988. - Vol.84, N12. - P. 81-85.

168. Raghavan P.S., Subramani K., Suryanarayanes T.S. et al. Metal-ion assisted detergent action on bacterial growth: detergent specificity and mechanism of ingibi-tion// Acta microbiol. hung. 1986. - Vol.33, N1. - P.3-8.

169. Rheinwald J.G., Chakrabarty A.M., Gnsalus I.C. A transmissible plasmid controlling camphor oxidation in Pseudomonas putida// Proc. Nat. Acad. Sci. USA. -1973. Vol.70, N3.-P. 885-889.

170. Roderer G. Toxic effect of tetraethyl lead its derivatives on the chrysophyte Poteriochroomonas malhamensis VIII. Comparative studies with surfactants// Arch. Environ. Contam. Toxicol. 1987. - Vol.16, N3. - P. 291-301.157

171. Rolando G. Microbieller Abbau eines nichtionogenen Tensids in Gegenwart von Activ Kohle: Diss. Doct. Naturwiss. Eidgenoess. Techn. Hochsch. Zuerich. 1980. - 136 s.

172. Rudling L., Solyom P. The investigation of biodegradability of branched nonyl phenol ethoxilates// Water Res. 1974. - Vol.8, N2. - P. 115-119.

173. Rzechowska E. Studies on the polyestre fibre industry. II. Effect of activated sludge load on microorganisms// Acta microbiol. pol. 1976. - Vol.25, N3. - P. 219-225

174. Schaffner C., Brunner P.H., Giger W. 4-Nonylphenol highly concentrated degradation product of nonionic surfactants in sewage sludge// Proc. 3 Int. Symp. Sept. 27-30, 1983,-Brighton, 1984. P. 168-171.

175. Schobert P. Polyethylenglykoketten-metabolismus durch Pseudomonas fluorescens stamm P 250 an Scispiel des Triethylenglykols// Tenside Detergents. -1983. N2. -S. 57-65.

176. Sigoillot J.-C., Nguyen M.H. Complete oxidation of linear alkyelbenzene sulfonate by bacterial communities selected from coastal seawater// Appl. and Environ. Microbiol. 1992. - 58, N4. - C.1308-1312.

177. Singh M., Satish S. Primary biodégradation of linear alkyltoluene and al-kylbenzene sulphonates//Environ. Pollut. 1989. - Vol.59, N2-3. - P. 109-113.

178. Slater J.H., Lovatt D. Biodegradation and the significance of microbial cjmmunitees/ Microbial degradation of organic compounds. Ed/D.T.Gibson/ N.Y. and Basel; Marsel-Dekker inc. -1984. -536 p.

179. Specchia V., Ruggeri B., Gianetto A. et al. Effects of antifoaming agents on the biological removal of non-ionic surfactants// Enyiron. Prot. Eng. 1988-1990. -14, N3-4. - P. 41-48.

180. Stiff M.J. Biodegradation of surfactant// Oil Ind. and Microbial. Ecosyst. Proc. meet., Warwick, Sept., 1977. London, 1978. P. 118-128.

181. Stocker G. Zu einigen theoretischen und methodischen Aspekten der Biodegradation. In: Schubert R., Schuh J. (Hrsg). Bioindikation. Teil 1, Wiss. Beitr. Martin-Luther-Univ., Halle Wietenberg 1980/24 (P8), 10-21, 1980.

182. Swisher R.D. Surfactant biodégradation. New-York: Dekker, 1970. -496p.158

183. Swisher R.D. Linear alkylbenzene sulphonate (LAS) benzene rings: Biodegradation and acclimation studies// Yukagaku. 1972. - Vol.21, N3. - P. 130-142.

184. Swisher R.D. Surfactant biodégradation// Tenside Detergents. 1982. - 19, N5. - P. 298-299.

185. Thurnheer T., Cook A.M., Leisinger T. Co-culture of defined bacteria to degrade seven sulphonated aromatoc compounds: efficiency, rates and phenotypic variation// Appl. Microbiol, and Biotechnol. 1988. - Vol.29, N6. - P. 605-609.

186. Tobin R.S., Onuska F.I., Anthony D.H.J, et al. Nonionic Surfactants: Conventional Biodégradation Test Methods Do Not Detect Persistent Polyglycol Products//AMBIO. 1976. - Vol.5, N1. - P. 30-31.

187. Tobin R.S., Onuska F.I., Brownlee B.G. et al. The application of an ether cleavage technique to a study of the biodégradation of a linear alcohol ethoxylate nonionic surfactant// Water Res. 1976. - Vol.10. - P. 529-535.

188. Tokai A., Morioka T. Application of basin wide ecological models (BAWEMS) to the fate of LAS in Tokyo Bay// Water Sci. and Technol. 1988. - 20, N6-7. - P. 287-294.

189. Torslov Jens, Lindgaard-Jordensen Palle. Effect of mixture of chlorphenols, surfactents and aniline on growth of Pseudomonas fluorescens// Ecotoxicol. and Environ. Safety 1994. - 29, N1. - P. 86-92.

190. Van Ginkel C.G. Coplete degradation of xenobiotic surfactants by consortia of aerobic microorganisms// Biodégradation. 1996. - N7. - P. 151-164.

191. Wagener S., Schink B. Fermentative degradation of nonionic surfactants and polyethylene glycol by enrichment cultures and by pure culture of homoaceto-genic and propionateforming bacteria// Appl. and Environ. Microbiol. 1988. - N2. -P. 561-565.

192. Watanabe R., Ogasawara N., Tanaka H. et al. Effects of Fungae litic enzymes and non-ionic detergents on the actions of same fungicides against Pyricularia oryrae// Agric. Biol. Chem. 1988. - Vol.52, N4. - P. 895-901.

193. Wayman C.H. Biodégradation of synthetic detergents// Progr. Ind. Microbiol. 1971. - Vol.10, N1. - P. 219-271.

194. White G.F., Russel N.J. Diodegradation of anionic surfactants a bacterial perspective//J. Chem. Technol. and Biotechnol. - 1992. - Vol. 55, N4. - P. 409-411.159

195. Wickbold R. The determination of smoll concentration of nonionic surfactants in river and wastewater// Tenside Detergent. 1972. - Vol.9. - P. 173-177

196. Willets A.J. Microbial aspects of the biodégradation of synthetic detergents: A review//Unt. Biodeterior. Bull. 1973. - Vol.9, N1-2. - P. 3-10.

197. Willets A.J. Microbial metabolism of alkylbenzene sulfonates: Effect of amethyl branching of the alkyl side chain of oxidation by a Bacillus species// Antonie van Leeuwenhoek. J. Microbiol, and Serol. 1974. - Vol. 40, N4. - P. 561-575.

198. Willets A.J. Microbial metabolism of of alkylbenzene sulphonates: Variance in enzyme complement of a Bacillus in response to growht substrate// Antonie van Leeuwenhoek. J. Microbiol, and Serol. 1976. - Vol.46, N3. - P. 287-292.

199. Willets P.A., Jeenes D.J., Wheatcroft R. Structural changes of the TOL plasmid pWWO// Adv. Boitechnol. Prog. 6 the Int. Ferment. Symp. 20-25 July 1980. -Toronto, 1981.-P. 171-176.

200. Wilson J., Fraser F. Handbook of Teratology. General principles. New-York: Plenum Press. - 1977. - 476 p.

201. Wong C.L., Dunn N.W. Transmissible plasmid coding for the degradation of benzoate and m-toluate in Pseudomonas arvilla mt-2// Genet. Res. 1974. -Vol.23, N2. - P. 227-232.

202. Wong C.L., Dunn N.W. Combined chromosomal and plasmid encoded control for the degradation of phenol in Pseudomonas putida// Genet. Res. 1976. -Vol.27, N3. - P. 405-412.

203. Yoshimura K., Ara K., Hayashi K. et al. Biodégradation of linear allylben-zene sulphonates and sear in river water// Jap. J. Limnol. 1984. - Vol.45, N3. - 204212.

204. Yositinari A. Surface tension of a polluted river water// Verh. Int. Ver. theor.und. angew. Limnd. 1978. - Vol.20, N3. - P. 1934-1940.160