Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Изучение штаммов клубеньковых бактерий, образующих эффективный симбиоз с арахисом (Arachia hypogaea L.)

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Изучение штаммов клубеньковых бактерий, образующих эффективный симбиоз с арахисом (Arachia hypogaea L.)"

Л&\ДЕШ1Я НАУК РЕСПУБЛИКИ УЗБЕКИСТАН ИНСТИТУТ Л1ИКР0БИ0Л0ГИИ

<Ъ #

» с

' >; На правах рукописи

УДК 576.85.584.557.633.1.

П У Л А Т О В А Дилрабо Зульфикахаровна

ИЗУЧЕНИЕ ШТАММОВ КЛУБЕНЬКОВЫХ БАКТЕРИЙ, ОБРАЗУЮЩИХ ЭФФЕКТИВНЫЙ СИМБИОЗ С АРАХИСОМ (А1?АСН1$ НУРОСАЕА Ь.)

03.00.07 --• микробиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Ташкент — 1997

Работа выполнена в лаборатории биохимии и биотехнологии физиологически активных веществ Института микробиологии АН РУз и в лаборатории биотехнологии и биологического азота Всероссийского научно - исследовательского института сельскохозяйственной" микробиологии (г. Санкт-Петербург) .

Научный руководитель:

кандидат биологических наук,

старший научный сотрудник ПРОБОРОВ Н. А.

Официальные оппоненты:

Заслуженный деятель науки РУз, академик АН РУз,

доктор биологических наук М. И. МАВЛАНИ

кандидат биологических наук, доцент Р. К- САТТАРОВА

Ведущая организация — Ташкентский Государственный

Университет

Защита состоится « » с^/с^^т¿г__ 199_^г.

в ч. на заседании Специализированного Совета

Д.015.02.01 по защите диссертации на соискание ученой степени доктора наук при Институте микробиологии АН РУз по адресу: 700128, Ташкент - 128 ул. А. Кодирий 7-Б.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института микробиологии АН РУз.

Автореферат разослан «_»_1997 г.

С

I Ученый секретарь Специализированного Совета, доктор биологических наук* С. М. ХОДЖИБАЕВА

Антуалнссть работа. Арахис подземный-цепная бобовая ¡сультура, возделываемая в Узбекистане. Высокое содержание жира к белка в семенах арахиса определяет его ¡сак маслично-белковую кулмуру. которая по этим показателям занимает одно из первых кест з ук-рэ. Семена арахиса, содержащие 44-66% ;o¡pa и 23-38% белка (Жукоь..-кик, 1950; Коренев о соавт., 1990), широко используются щ г.;~'.з,э-сой продукт и liar, источник ценного невшда.:гаего масла, а ботва и хмых являются хорошим кормом для сельскохозяйственных хивотных.

Одним из важных способсз повышения продуктивности арахиса является предпосевная инокуляция его семян клубеньковыми бактериями (ризобиями), которые за счет еимбиотическои фиксации молекулярного азота атмосферы могут существенно повышать урокайяость этой культуры (Allen, Alien, 1031).В литературе имеется ряд работ об особенностях развития симбиоткческого аппарата и свойствах клубеньковых бактерий арахиса. Однако свадонкч о си/бнотэтеской эффективности - способности повышать урожайность при инокуляции клубеньковыми бактериями - для арахиса ограничены. 3 Узбекистане такие исследования paute но проводились. По атому целью нашей работы было изучить возможность повышения продуктивности арахиса, возделываемого в Узбекистане, за счет точуяяцаи кяубаньковьаш бактериями.

Б задачи исслолоизкдЛ зха;?у!0:

1. Выделить местные штаиш клубеньковых бактерий арахиса, проанализировать их культурадьно-биохи./ическпе яриснакк и сшбкоти-ческуи активность в условиях стерильных лабораторных и полевых опытов.

2. Изучить действие иискуляции производственным итакмо« С1АЮ104 Sradyrizoblin spp. (Ar&chls) на урожайность надземной части и семян у сортов арахиса (Ташкентская - 32, Ташкентская -112, Перзуван - 46/2) возделываемых з Узбекистане.

3. Проанализировать влияние генотипов симбиотических партнеров на различные элемента структуры урожая инокулироваиных растений арахиса (высота растений, чисяо ветвей, бобов, клубеньков, масса 1000 семян, юсо бобоз и др.) и их биохимические показатели к изучить коррелятиъные связи кехду этими признаками,-

4. Изучить симбиотическ/ю эффективность арахиса ка фоне внесения азотных удобрений.

Научная новизна.

1." Впервые создана коллекция из 15 штаммов клубеньковых бактерий арахиса, выделенных из корневых клубеньков растений, которые охарактеризованы по различных« культурально-биохишчеоким признакам (размер, цвет и'профиль колоний, прозрачность, сли-зость, скорость роста на разных средах, кетолактазн&я активность и др.), а также по сжбиоткческой активности в условиях лабораторных-и полевых опытов.

2. Путем дпухфакторного дисперсионного анализа показано, что у растений арахиса, инокулированных ризобиями в условиях полевых мелкоделянсчкых опытов, масса растений, число клубеньков й показатели семенной продуктивности (уро,тайность семян, число бобов) гависят преимущественно от генотипа втамиа бактерий, а масса 1000 семян - от генотипа сорта растений.

3. Показано, что при инокуляции клубеньковыми бактериями, различные агробиологические признаки арахиса меняются е разной степени: среднее по 3 сортам сухая масса растений, урожайность семян, число бобов возрастает в больсей степени (на 68,5; 53,5; 144,5 %), чем высота растений, масса 1000 семян л удельное содержание в них белка (на 58,9; 21,1; 20,0 X), тогда как удельное содержание в семенах жира снижается на 4,0 %.

Практическая значимость:

. 1. Показана целесообразность инокуляции сортов арахиса, возделываемых в Узбекистане, производственным штаммом ризсбкй С1АМ0104, которая достоверно повышает сухую массу растений сортов Ташкентская-32, Ташкентская-112 и Перзуван-46/2 на 19,1%, 104,6% и 81,9%, урожайность семян на 62,5, 58,6 и 39,ЗХ, удельное содержание и общее накопление в семенах белка на 19,5, 25,7, 15,8% и 94,1, 102,3, 61,5 мг/м2, соответственно.

2. Из клубеньков арахиса, выращиваемого в Узбекистане, выделены штаммы ризобий А78 и А72, которые но способности увеличивать массу растений арах-иса (сорта Ташкентская - 32 и Ташкентская -112) достоверно превосходят производственный штамм С1АШ104 на

» 64,1 - 51,9%.

3. Установлена перспективность совместного применения азотных удобрений (60 кг/га азота) и инокуляции арахиса производственным пташек С1АШ104, который достоверно повышает массу растений на 13,8%, урожай семян на 4,9% по сравнению с инокуляцией без внесет:» азота.

Апробация работы. Результаты работы докладывались на конференции "Интродукции микроорганизмов в • окружающую среду" (Москва, 1994), на Международном симпозиуме "Химия природных соединений (Таскент, 1995), на'10 Международном Конгрессе по азотфиксации (Санкт-Петербург, 1995), на расширенных заседаниях лаборатории биологического азота и биотехнологии ВНИИСХМ и отдела зернобобовых .культур ВКР им. Н.И.Вавилова' (Санкт-Петербург, 1995) и на Ученом Совете института микробиологии Ali РУз (1996).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 работ.

Планирование и проведение часть экспериментов осуществлялось при участии и руководстве кандидата биологических наук Ю.Б.Саим-кагарова, с которой автор разделяет часть полученных результатов и выражает сво:о благодарность.

Структура л ' объем работы. Диссертация состоит из введения, обзор литературы, описания материалов и методов исследования, результатов и их обсуждения, заключения и выводов. Работа изложена за 123 страницах машинописного текста, содержит 9 рисунка, 16 таблиц. Библиографий включает ссылок 176 наименований работ на русском и английском языках.

МАТЕРИАЛЫ И KET041!. УСЛОВИЯ ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ

Материалы исследований. Объектами исследований служили 20 силовых штаммов Rhizobiura.Bradyrhizobium и Agrobacterlum получений из коллекции лаборатории биологического азота ВНИИСХМ (г.. Занкт-Петербург) и 15 штаммов.клубеньковых бгктерий арахиоа раз-тного географического происхождения, которые были выделены .нами га природных корневым клубеньков арахиса. Использовали три сорта уэахиса -Arachis hypogaea L.:' Ташкентская-32; Ташкентскгя-112, [ерзувак-46/2 возделываемых-в Узбекистане. Семена арахиса получена из коллекции УэНИЙР.

Мэтоди исследований. Выделение бактерий из клубень коп раоте-:ий аъг.хиса проводили по общепр/гаятому методу (Мет. ' рекомендации 979). Для поддержания и культивирования клубеньковых бактерий спольоовали жидкую или агаризованъую среду N79 (Allen, 1959; lncent, Нушрпгеу, 1970). На этой же среде проверял» скорость ■оста-штаммов, их способность расти при температуре 37°С и при внцеяярациях Nací 1,5; 2,5; 3,02.

Способность микроорганизмов утилизировать различны^ истеч-ики углерода проводил:! ■ на модифицированной полужидкой среде

(Мет. указ. 1985).

Рость изучаемых 'штаммов на ШБ и на картофельном косяке, их способность разгтаать желатину и реакция штаммов на лакмусовом молоке изучали по Возняковской и др. (Мет. указ. 1985).

Для выявления патогенных штаммов, штаммы инкубировали на среде ТТХ при 28°С в течение 4-7 дней. Отмечали: окрашивающий•колонию в красный цвет (Кельвин, 1968).

Образование З-кеталактоаы. Культуру выращивали на скошенной среде, затем ее снимали петлей с косяка и помещали в виде небольшой капли на поверхность лактогного агара в чашке Петри. После инкубации 1 2 суток поверхность агара Баливали точким слоем реактива Бенедикта. Положительная реакция: образование желтого кольца оксида меди вокруг зоны роста, достигающего максимальной величины через 2 часа (Нооукааэ еЬ а1., 1979).

Изучение чувствительности изучаемых штаммов клубеньковых бактерий арахиса к фагам ризобий различных видов проводили по Линдстрому и др. (Ыпс^гот еЬ а1., 1983).

■ Симбиотическую активность клубеньковых бактерий арахиса изучали в стерильных условиях кикровегетационного опыта при выравд-ваниирастений в баночках на вермикулите (Мет. рекомен. 1984). Растения взращивали при 20-25°С в теплице с искусственным освещением в течение 30-45 суток. Источником допольнительного . света служили лампы ДРЛФ-400 и ДИАД-400, обеспечивающие освещенность рабочей поверхности в 20000 лк. По истечение срока вегетации растений оценивали наличие у них клубеньков. Эффективность инокуляции определяли по величине сухой массы корней и надземной части растений, инокулированных штаммами клубеньковых бактерий, которую сравнивали с массой неинокулированных растений.

Оценку симбиотическую эффективности штаммов ризобий проводили в полевых мелкоделяночных опытах в УзНИИР в 1993-1995 гг. (почва серозем). Запасы азота в полуметровом слое почвы составляют 3,5-5,6 т/га,, отношение С:Н равно 8-10, валовое содержание фосфора и калия 0,17-0,182 и 1,04%, соответственно. Для инокуляции се-"мена арахиса клубеньковыми бактериями использовали ризоторфин, приготовленный на основе испытуемых штаммов, перемешивая семена с препаратом из расчета 200 г препарата (1га/порция) на 90-110 кг семян (норма высева на 1 га). Площадь делянок 3,5 м2. Повторность опытов 4-кратная. В проведении полевого опыта использовали типовой штамм клубенковых бактерий арахиса С1АМ 0104 Вга£1угМгоЫит

spf, полученный из ЙШСХМ и местные штаммы А72, А76, А78. Полевке опыты велись по методике ПИР и Доспехову (Метод.указ., 1976; Доспехов 1972).

Из минеральных удобрений фосфора и калия- вносили в- виде двух подкормок после массовый всходоз и з начале цветения (Р2О5-.U-O-tK) ¡сг/га, Калия- 100-110 кг/га). Азотные удобрения давали в форме аммиачной селитры . -NII4 'NO3. Доза азота составляла Neo " .N120 • Эффективность штаммов- ризобий оценивали по урожаю семян арахиса, а тага® по удельному содержанию (2) и общему накопления (мг/м2) в ней белка и жира. По количеству' общего азота вычисляли содержание "сырого"'белка, используя, общепринятые коэффициенты (Nx6,25). ' Содержание обцего азота определяли методом 1'л.елдаля па анализаторе "KJelt.ec auto" (Ермаков и др., 1987). Масла в семенах определяли при поаедн рефрактометра (Ермаков, 1У8?).

Для статистической обработки полуденных результатов использовали двухфакторный дисперсионный и корреляционные анализы, t-критерий Стьюдента, а также вычисляли коэффициенты вариации (Доспехов, 1972; Лакин, 1980).

Больная часть экспериментальных исследований была выполнена в рамках реализации "Договора о научном сотрудничестве мекду Институтом микробиологии А.Ч РУз и Всероссийским научно-исследовательским Институтом сельскохозяйственной микробиологии (Санкт Петербург)", за что-автор выносить сердечную признательность веек, кто оказал непосредственную, помощь и содействие для выполнения работы: зав. лаборатории биологичдекого азота ВНШЮХМ, к.б.н. А.П.Кожемякову, к.б.н. Н.И.Новиковой, Е.В.Лиме.ценко, зав: кафедры хлопководства ТааГАУ, к.б. н. Б.О.Омонтурдиеву, академику АН РУа [А.Г.Холмурадову|.

РЕЗУЛЬТАТЫ Н^ЕДОЗАПЙ 1. Веделеккэ и изучение коллекция м^стшя втешов клубеньковых бадтерий арахиса

Для выделения штаммов рш-обий мы. иепбльаояали- клубеньки в корнях растений араз.иса, выросиих в естественных полевых услови-; ях. Выделение бактерий осуществляли го' общепринятому методу- (Мет. 'рекомендация, 1984).

Первичное микроскопическое исследование выделенных штаммов клубеньковых- бактерии арахиса .показало, Чтоих морфология, а кменно/форма .и подвижность клеток типична для ризобий. Все нее fie-

доваяные штаммы грамотрицательные подвижные палочки.

Для описания морфологии колоний и штриха клубеньковых бактерий арахиса мы использовали аналогичные критерии. Большинство штаммов образовывали !«оны с морфологией, типичной для ризобий,.в том числе и для медленнорастущие штаммы гаубеньковых бактерии' арахиса. • Их клоны были круглые, сферические в профиль', с розными краями,белые или бесцветные.мапослизистые,штрих гомогенный, белый' или бесцветный, глянцевый, малослизистый, с ровными краями. Боль-

Таблица. 1

Културалько-мср$олагичесю;э свойства штаммов клубеньковых бактерий арахиса

Штаммы размер колонии (мм) ЦЕет Прозрачность Слизистость Профиль колоний Скорость появления колоний, сутки

1.Вг.Брр. С1АЮ101 1-1,2. Бел. + Вып 6-7

г.Вг.Брр. С1А\:0102 1-1,2 Бел. + + Точ 6-7

З.Вг.Брр. С1АШ103 1-1,2 Бел. + +/- Вып 6-7

4.Вг.Брр. С1АШ104 1-1,5 Бел. + +/- Точ 6-7

5. Вг.Бор. С1АШ105 1-1,2 Бел. + +/- Вып >8 ■

б.Вг.Брр. С1АМ0106 0,5-1 Крем. + +/- Вып 6-7

7. С1АШЮ7 3,5-4 Бел. + Вып 2-3

8. стююз 3-3.5 Бел. + + Вып 2-3

9.Местный шт. А 70 2,5-3 Крем. + - Вып 2-3

10.Местный шт. А 71 3,5-4 Бц. . - - Кон 2-3

11.Местный шт. А 72 2,5-3 Бц. +■ +/- Вып 4-5

12.Местный шт. А 73 3,5-4 Бц. + + Сф 4-5

13.Местный шт. А 74 3,5-4 Бц. + + Кон 4-5

14.Местный шт. А 75 1-1,5 Бц. + - Сф 4-5

15.Местный шт. А 76 3-3,5 Бел. + +/- Вып 2-3

16.Местный шт. А 77 2,5-3 Крем. - - Кон 2-3

1?.Местный шт. А 78 3-3,5 Бел. + + Сф 4-5

18.Местный шт. А 79 . 2,5-3 Крем. + - Сф 4-5

19.Местный шт. А 80 2,5-3 Бел. - +/- Сф 4-5

20.Местный шт. А 81 3,0-4 Крем. - - Сф 2-3

21.Местный шт. А 82 2,5-3 Бел. + +/- Кон 4-5

22.Местный шт. А 83 2,5-3 Бц. + + Сф 4-5

23.Местный шт. А 84 3,5-4 Бел. + +/- Кон 4-5

Примечания. Цвет: Бц - бесцветный, Бел - белый, Кр - кремовый. 'Слизистость: "-" -низкая, "+/-" -умеренная, +" -высокая. Профиль колоний: Вып-выпуклый, Точ-точечный, Сф-сферический, Кон-конусосбразный шинство штаммов- клубеньковых бактерий арахиса образуют на ВДА

круглые колонии .с выпуклым или конусообразным, слабовыпуклым не

сферическим профилем, с ровным или неровными краями, прозрачные,

бесцветные, • белые, или кремового цвета, слизистые

(табл.1). Размер колонии изученных штаммов 2,5; 3,0; 4,0 мм, в отличие от многих типовых штаммов были более крупными, что, и было похске на типовые быстрорастущие шта;д/ы СШ'0Ю7 и С1АМ01С8 из Вьетнама.(табл.1). След/ет отметить, что по скорости роста 5оль-еинство стаммов -также были сходны со зтачмами из Вьетнама, так как отдельные колонии появились ухе 2-3 су::ет (табл.1), у других в 4-5 сутки.

Известно, что микроорганизмы, развиваясь на поверхности картофельного ломтика, образуют налеты, характерные для-каждого.вида. При росте изученных штатов на картофельном, косяке нами наблюдалось образование слкзк г,ли ркзоидного роста, характерные для ризобий. Кроме того, все штаммы на среде/ содержаний разные концентрации ТТХ росли в Еще красных «ли темно-бурых колоний с белым налетом слизи.1 Как известно, на среде с ТТХ только нелатоген-кые бактерии растут в таком виде, а патогенные в виде белых колоний о розовым центром (Артур Кельвин 1963).

Изученные местные птаммы клубеньковых бактерии арахиса, как и быстрорастущие типовые штаммы С1М,Ш07 и СШЮ108 из Вьетнама, от других типовых атаммов отличались по интенсивности роста нз МПБ, которые наблюдались наличие пленки или кольца и образование осадка (табл.2). По этому признаку они отличались от штаммов С1А},Ю1СЗ,СШ0104, которые на }ША не растут.

Для большинства ¡лубеньковых бактерий оптимальной температурой является 27-28° С. Способность расти при 37° С специфические свойство отдельных микроорганизмов и используется как тес? прд их идентификации. Из таблицы 2. видно, что все %таммы арахиса были способны расти при температуре 37° 0 и при более высоких концентрациях МаС1 по сравнению с С1А\!?104 (табл.2). Рост колоний штаммов ризобий на концентрациях НаС1 1,5-2,0%, отмечался б работах и других автороз (Во1зГогс1, 1983; Павлова, 1993; Сапронова, 1994).

Вое изученные штаммы, как и медленнорастущие штаммы П1АШ103 и С1А.\;0104 подщелачивали лакмусовое молоко и не гидролизовали казеин. Интересно, что у некоторых штаммов зрахиса наблюдали слабое свертывание молока, как и у быстрорастущих типовых штаммов С1АМ01С7 и С1Ш108 (табл.2). -

Все штаммы, включая типовые дали отрицательный отейт при выявлении кеталактознол активности, за исключением штамма А.■ гаЗ. 52, давшего положительный ответ при определении энзиматической екглхссги, что свойственно АггоЬзсгеПшп (НэоуЧааэ еЪ а1,1979) и

Таблица. 2

Рост и реакц;ш изученных штаммов при разицх ксвдэктрациях МаС1 , ШВ и Лакмусовое молоко

Штаммы РОСТ при МПБ . Л&хмусовое молоко

37° С МаС1 По Пл ОС Свеити- вание молока коагуляция- пеп-тонизация

1,5 2,5 3,0

1.Вг.зрр. . С1АМ0104 - - _ - _ _ - . +

2. С1АМ0107 + + - - - + + + - +

3. С1АМ0108 + + - - + + + - 4

4.Местный ит. А 70 + + + - - - + + - +

5.Местный кт. А 71 + + - - + - + -

6.Местный шт. А 72 + + + - - - + - - +

7.Местный шт. А 73 - - - - - - + - ■ - +

8.Местный шт. А 74 + + + - - - + 1 + +

9.Местный шт. А 75 + - - - - - - - - . +

10.Местный пт. А 76 + + - - + - - +

11.Местный шт. А 77 + + + + - - + - - . +

12.Местный шт. А 78 - - - - - - . - - - +

13.Местный шт. А 79 + + + - - - - - - +

14.Местный шт. А 80 + + + + - - + - - + ■

15.Местный шт. А 81 + + + + - - + - - +

16.Местный шт. А 82 + +- + - - - + ■ - - +

17.Местный шт. А 83 + + + - - - + - - +

18.Местный шт. А 64 + + + + - - + + - +

Примечание: По - помутненио; Пл - пленка; ОС - осадок; "+" -рост есть; "-" - нет роста, не один иг изученных штаммов не способен разжижать желатину.

Микроорганизмы характеризуется неодинаковой способностью использовать различные углеводы. Для практических целей при идентификации ризобий можно ограничиться двумя- тремя углеводами, в первую очередь ато гдокоза и сахароза. Большинство авторов отмечает, что ризобии подкисляют или подщелачивают среды при росте на ксилозе, глюкозе'и др. (Павлова, 1993; Сефронова, 1994.'; Методические указания,1985).. Б своей работе нами был использован более широкий набор углеводов. Способность штаммов утилизировать углеводы, как это показано в таблице 3, неодинакова. По изменения цвета бромтимолового синего в соответствующем виде мы отмечали подкисление или подщелзчивание среды. Реакция почти у всех местных штаммов были сходны с типовыми штаммами, кроме штаммов А76, А77 И А82.

. Ранее было показано, что фаги ризобий проявляют видоспеци-фичность в литическом действии (Ь1пйзЬгот еЬ а1.,1983; Новикова и др.,1987.) .Поэтому фаготипирование может быть использовано как один из методов идентификации клубеньковых бактерий : при определений их родстЕа с известными видами ризобий. С этой целью были

Таблица 3

Способность изучаеиых киироорганкгмсз утилизировать различные источники углерода

Г~ ...... mxAîvftibi Реакция- штаммов при росте на:

глюкоза ксилоза сорбит галактоза рафиноза! дульцит

. 1 с. 3 4 5 6 7

l.Agr. rhizogenes х5834 +++К +++К ++К •■ +++К +++К . +к

2.Agr. radiobt ?.cter' .52 ++К +++К +++К +++К +++К +++К

3.Rh.loti NZP 2213 +к +++К •++К +++К' I++K -

4.Rh.sp. ' CIAM3502 +Т+К ++К г++К +к ' - •

5.Rh.melilotl CIAMI723 ++К ++'+К f+K ■н'+К м: (К

"S.Rh.trtfolll CI AMI361 . ++К "»К +к +++К +к +к

7.Rh.troplcl 899 ' ++К +++К +к +++К • ++Щ

.ô.Rh.huaTculi CCBAU2609 +.++К +++К ++К +++К +++К +к

Q.Rh.galegae НАШ1540 -ь+К +++К +++К +++К ++Щ

iO.Br.spp. CIAM0104 +++К +++Щ ++ 1-Щ.

11. С1АШ107 +.+К ++К +++К ++К -

12. С1АШ108 +тК ++-+К ++К ++К ++К -

13.Местный шт. A 70 ++К ■+к +++К - -

14.Местной шт. ■A 71' +++К +++К ' +щ ++К ++Щ

15.Местны;> .шт. A 72 +++К + Т+К +++К - . ++К ++Щ

16.Местный шт. A 73 +к +++К - +к +++К +++К

17.Местный шт. A 74 +++К +++К +щ ' +++К ' +++К +++Щ

18.Местный шт. A 75 +й +++К +к +++-К +++К -

19.Местный шт. A 76 - - - - +к -

20.Местный шт. A 77 - +к - +к -

21.Местный шт. A 78 - - ++Щ ++Щ ++Щ ++Ц

22.Местный шт. A 79 +++К +++К ++Щ +++К +++К ++Щ

23.Местный шт. A 80 -¡-к - - +к Г++К

24.Местный шт. A 81 +++Й - ++К . . ■ +щ +++К ++И

25.Местный шт. ■ A. 82 - - +к +к

26.Местный шт. A 83 -н+К - ++Щ +++К ++Ш

27.Местный шт. A 84 +++К. +++К ++Щ +++К +++К ++Ц

Примечание: "-"-цвет среды не изменялся; изменялся:"+"-слабо; "++"-умерэнно; "+н"~сильно; "К"-подкисление (окраска желтая); "Щ"-подщелачивание (синяя окраска)

использованы три фага R.lo.ti (182,183,18.6), один фаг R. ieguminosarum (132), один фаг R.mellloti (136) из коллекции liJjiOfGXM и один фаг R.galegae (1/0W) из коллекции доктора l.inctetrom (Финляндия). Ш один из изученных штаммов не был чувствителен к фагам R.galegae, R.melijotl, R.leguminosarum, из чего можно загаючить, что наши штаммы не относятся ни к одному из этих видов. '• • '

Таким ооразом, по полученным данным в результате изучения морфодого-культуральных свойств исследуемых бактериальных-иволя-тов, видно, ' что выделенные нами местные штампы клубеньковых бактерий арахиса по многим признакам несомненно сходны с типовыми штаммами CIAMQ104, CIAM0107 и' CJAM0108.; Однако, по некоторым признакам (.например, скорость роста) местные штаммы не соответствуют Bradyrhl2oblum. Поэтому, по нашему мнению, целесообразно далнейдего изучения выделенных нами штаммов с применением методов молекулярной гибридизации в реакции ДНК-ДНК.

■ Для предварительной - оценки •симбиотической эффективности местных штаммов клубеньковьс; бактерий арахиса были проведены стерильные лабораторные опыты. Растения сорта Ташкентская-112 иноку-лированные в безазотйой среде Красильникова Кореняко, выращивали в сосудах (200 мл) по 1-2. растения, в течениз 30-45 дней. Затем растения отмывали, визуально оценивали количество, цвет, размер и расположение на корнях клубеньков, после чего определяли сухую массу надземной части и корней. .Результаты опыта показали, что прибавка надземной части растений от инокуляции выделенными штаммами существенно варьировала от +14,4% до +82,7%, (в среднем +50,3%), а прибавка массы корней варьировала от +0,62 до 65,7% (в среднем +35,22). Следует отметить, что растения инокулированные, штаммами ризобий от неинокулированных отличались мощным развитием корней и образованием многих клубеньков. Это особенно четко наблюдается на корнях растений, инокулйрованных с местными штаммами'. В результате проведенного опыта нам удалось выявить б штаммов ри-зобиум, инокуляция . которыми . достоверно повышает' массу надземной

части растений арахиса на 68,2-82,7% по сравнению с контролем.

'. '

. 2. Сиыбиотичесиая эффективность местных штаммов / < ризобий арахиса в палевых опытах

/Для определения симбиотической эффективности местных штаммов было . проведено 2 полевых мелкоделяночнкх ^опытов (1994 и 1995

•г.г), которыё на сортах Ташкентская-32, Ташкентская-112 и Перзу-ван-4б/2 изучали. 3 ■ штамма ризобий (А78,А72,А76) выделенные из клубеньков этих же сортов.

В опытах, (табл.4) наиболее эффективным оказался штамм А72, который превзошел производственный штамм CIAM0104 по всем изучен-• нкм -параметра» (в обоих'опытах). Штаммы A.7S й А78 оказались менее эффективными, однако и они в ряде вариантов опытов превзошли CIAM0104 по способности увеличивать хозяйственно-денные признаки арахиса. Таким- образом, результаты этого .опыта показали, что местные популяции клубеньковых бактерий, обитающие в почвах Узбекистана, могут быть использованы для инокуляции сортов арахиса, 'возделываемых в Узбекистане. ■ Для того, чтобы изучить связь между - изученными- агробиологическими признаками растений арахиса, были вычислены'коэффициенты корреляции.между величинами признаков, определенными ка каждой делянке в контрольном и опытном вариантах для какдого сорта. Результаты корреляционного анализа показали, что (табл.5.) между большинством изученных признаков' выявляется четкая положительная связь. Например, общее число клубеньков достоверно коррелирует с массой семян, числом бобов, а также удельным содержанием, и сбзцтм накоплением белка. Содержание масла отрицательно коррелировало со всеми признаками, видимо это-связано с уменьшением содержания, масла в семенах в результате инокуляции ризсбиями. Ранее в других работах (Singh et al., 1976) была показана отрицательная корреляция медлу содержанием масла в семенах арахиса и массой'клубеньков. -

Для того, чтобы выяснить относительные вклады генотипов сим-биотяческих партнеров (расгений и бактерий) в определение величин изученных агробиологических признаков,, мы подвергли данные полевых опытов двухфакторному дисперсионному аяанизу. .Оказалось что роль геьотипов партнеров в контроле разных признаков может существе лно различаться (рис 1). Так, сухая масса растений, урожай семян, число бобов.и клубеньков, п также общее накопление белка и . масла ьависяг в ochoehom от генотипа микросимбионта, а масса 1000 семян or' растения-хозяина. Неаддиткзное сорто-штаммовое взаимо-действке играет существенную роль лмиь в определении массы растений, тогда как его вклад в определение показателей семенной-продуктивности невелик.' Эти данные говорят о возможности выявления штаммов ризобий, повышающих урожайность семян у достаточно широкого спектра сортов арахиса, тогда как для повкшеьия надземной

Таблица 4

ДейстЕиз инокуляции местными пгггшмаш ризобий на агробиологические признаки сфгшгса (среднее по 3 сортам, полевые опыты, УзНИИР,1934-1995 гг.)

Варианты Сухая масса растений (г) Урожайность' семян (г/разт.) Масса 1000 семян (г) Общее число клубеш-ков на 1 растение

опыта 1994 1995 ■1994 1995 1994 1995 1994 199Ь

С1ЛЮ104 1.8 1.9 120,1 120,9 608,9 608,9' 170,0 173,2

А78 1,8 1,9 121,9 122,9(+) 615,4(+) 613,5(0 156,1(-) 157,2(-)

А72 2,0(+) 2,1(+) 125,2(+) 124,7(+) 625,9(+) 625,01+) 183,7(+) 186,9(+)

А?б 1,6 1.3 123,3(+) 122.. 5 613,1 612,0 174.0(+) 178,3(+)

Контроль 1,1 1,1 79,5 70,8 497,6 500,0. 18,2 18,5

НСР(О.ОБ) 0,14 0,11 . 2,70 1,67 4,99 4,20 3,80 2,87

Примечание: (+) и (-)- достоверные отличия от штамма С1АШ104

Таблица 5

Ксрреляцпощшй акалш агробиологических признаков арахиса (среднее по 3 сортам) при гюнулздня штаммом С1АШ104 ВгайугЫгоЫига зр. (АгасЫз) н местными штаммами 76, 72, 78

9 8 7 6 5 4 3 2

1.Масса растений (г) 0,83+0,04 0,88+0,05 0,92+0,05 0,73+0,03 0,30+0,03 0,83+0,04 0,80+0,04 0,81+0,С5

2.Масса семян {г/и2) 0,95+0,02 0,94+0,04 0,96+0,02 0,58+0,01 0,78+0.01 0,94+0,02 0,92+0,02

3.Число зрелых бобов (шт/раст) 0,94+0,01 0,89+0,04 0,93+0,02 0,63+0,02 0,85+0,02 0,9310,02

4,Масса 1000 семян (г) 0,96+0,01 0,90+0,04 0,94 КЗ,02 0,67+0,01 0,88+0,03 ч.

5.Содержание белка (Z) 0,88+0,03 0,73+0,02 .0,86+0,01 0,67+0,02 i

6.Содержание масла (%) 0,65+0,02 0,60+0,01 0,72+0,03

7.Общ. накоп.белка (мг/ьг) 0,94+0,02 0,95+0,02

8.0бц. накоп.ыасла (ыг/и2) 0,89+0,04

9.Общее число клубеньков

- 16 - '

массы необходимо в большей■степени учитывать сортовые особенности растений.

100% т

80% - •

60%

40% - ■

20% - ■

0%

I ьма |

О Неконтролируемые

факторы О Взаимодействия □ Штамм В Сорт

Рис.*. Вклады генотипов партнеров в определение хозяйственно — ценных признаков арахиса.

примечание; 1—сухая масса 1 растения; 2 —Урожай семян (г/и1); 3—число бобов; 4 —масса 1000 семян; 5 —общее число клубеньков на 1 растение.

л

• - 17 -

3.Эффективность инокуляции арахиса производственным штаммом С1А1Ю1СИ ВгааугМгоЫия за. (Агзг.Мз).

Мы изучали-эффективность инокуляции трех сортов арахиса, широко возделываемых в Узбекистане (Ташкентская - 132, Нерзуван -46/2, Ташкентская -32), производственным штаммом С1АЮ104 медленнорастущие клубеньковых бактерий, ВгаЗугЬ1гоЫ.ит гр. (АгасМБ). Б течение 1993 - 1995 г.г. было изучено действие инокуляции на урожайность, сухой массы растений.и семян, а также на рааяичнне зла-менты структуры урожая, биохимические признаки и показатели клу-бет.кообраяования (всего изучено 16 признаков). .

Результаты опытов показали (табл.6), что инокуляция приводила к дпптопйрному возрастанию полт.шинстпа показателей продуктивности надземной массы и семян,- однако величины прибавок были разными. Так, сухая масса растений возрастала (68,52) как правило, в большей степени, чем их. высота (58,ЯХ).

Важно отметить, что инокуляция клубеньковыми бактериями вли-■ яла не только на урожайность, но и на биохимический состав семян арахиса. Так, процентное содержание в семенах белка возрастало на 20,07. в результате чего прибавка по общему'накоплению белка достигала 86,0%. По видимому,, накопление дополнительных количеств белка в зерне является непосредственным результатом азотфиксации в клубеньках, образованных штаммом С1АМ0104. В то хе время процентное содержание в семенах масла уменшалось, в результате чего общее накопление масла увеличивалось в результате инокуляции в меньшей степени, чем урожайность семян. Этот эффект мохет быть связан с тем, что значительные количества фотосинтатов были использованы растениями на образование дополнительного числа клубеньков . и поддержания в них высокой азотфиксирующей активности, что снизило накопление углеводов в семенах. Об этом говорят, в частности, отрицательные (иногда достоверные)"корреляции, выявленные при сопоставлении числа клубеньков с удельным содержанием в семенах масла (табл.5).

Важно отметить, что. изученные сорта арахиса существенно различаются по отзывчивости на инокуляцию ризобиями. Наибольшие прибавки по массе растений были получены у. сорта Ташкентская-112 (104,6%), сорта Ташентская-32 и Перзуве.н-46/2 этот показатель составил 19,1 и 81,9 соответственно, (различие, оцененное с помощью критерия Стыодента, существенно: 1-6,8; Ро<0,05). В то же время»'' сорт Перзуван-46/2 превзошел сорта Ташкентская - 32 и

Таблица 6

Действие инокуляции производственным штаммом С1АН0104, ВгайутЫгоЫит ер. (АгасМз) на ссновнкэ ачюбиолог/яеские признаки арахиса (полеькэ опиты, УзНИИР, 1903-1995гг.)

СОРТА АРАХИСА

ПРИЗНАКИ ТАШКЕНТСКАЯ-32 ТАШКЕНТСКАЯ-112 ПЕГОУВАН 46/2 СРЕДНЕЕ

контроль прибавка (Г.) контроль прибавка (X) контроль прибавка (7.) прибавка IX)

Масса растений (г) 1,1+0,05 19,1+0,9 1,1+0 104,6+4,36 1,1-Ю 81,9+9,12 68,5+16,4

Высота растений (см) 15,1+0,1 53,4+1,3 18,6+0;1 66,4+0,6 ■ 16,5+0,3 57,0+2,7 58,9+2,1

Число ветвей 1 порядка 4,2+0,03 15,0+4,5 4,2+0,03 Р.1,0+10,5 3,9+0,03 31,9+6,4 22,6+4,5

Масса семян (г/м2) 65,1+5,6 62,5+1,1 73,5+7,3 58,6+3,9 84,5+3,0 39,3+0,9 53,5+3,8

Число зрелых бобов (шт/раст) 10,9+1,0 164+24,0 7,8+0,8 .157,0+33,9 9,0+0,3 112,2+8,0 144,5+3,8

Масса 1СЮ0. семян (г) 410+7,3 18,3+0,4 504+10,7 29,4+1,7 . 557+6,7 15,4+0,9 21,1+2,2

Содержанпэ Сэлка X 21,2+2,7 19,5+1,0 23,2+3,1 25,7+1,7 23,0+2,1 15,8+1,0 20,0+1,9

Содержание масла X 55,2+2,7 -4,6+1,7 51.7+1,2 -5,1+1,2 51,4+0,3 -2,3+0,9 -4,0+0,8

Общее0накопление белка (мг/м2) 13,3+3,3 94,1+1,1 16,7+4,8 102 ,.3+12, а 19,2+2,8 61,5+0,1 86,0+12,4

Об ш.ее„нако пленин масла (мг/м ) 34,3+6,0 1 55,9+1.4 36,2+6,4 51,2+7,0 42,7+2,2 39,5+0,2 48,9+4,8

Ташкентская-112 по массе семян, а по числу бобоз на 1 растение сорт Ташкентская-32 превзошел обоих сортов.

■ Раз.ияным было действие инокуляции и на образование разных типов клубеньков. Так, число крупных клубеньков увеличивался в большей степени, чем число мелких клуСенькоз (рис 2.). Эти данные

шт/раст. 210 -

2С0 -

440 130 120 110 100 М СО 70 ■

30 ■ 29 ■ 10 ■

\\\\\\ \\\\\\

\\\\\\ \W\N\ \\\\\\ \\\\\\ \\\\\\ \\\\\\ \\\\\\ \\\\\\ \\\\\\ \\\\\\ \\\\\\ \\\\\\ \\\\\\ \\\\\\ Ч\\\\\ \\V\W \\W\V

\Ч\\\\ \\\\\\ \\\\\\ \\\\\\ \X\W\ \\\\\\ \\\\\\

\\\\\\ \\\\\\ ч\\\ч.\ \\\ч\\ \\\\\\ \\\\\\ \\\\\\ \\\\\\ \\\\чч \\\\\\ \\\\\ч \\\\\\ \\\\\\ \\\\\\

\\\\\\ \\\\\\ \\ч\\\ \\\\\\ \\\\\\ \\ч\\\ \\\\\\

\\\\\\

\\\\\\ ч\\\\\ \\\\\\ \\\\\\ \\\\\\ \\\ч\\ \\\\\\

Рис.2. КЛУЕЕНЬКООБРАЗОВАНИЕ НА КО?НЯХ АРАХИСА ПРИ КНОКУДШЦЗ! ИТАЧМО;,! СШЮ104 ЙШЗУКПгОВШ! 2Р. (СРЩЩЕЗ ПО 3 СОРТА!!, 3 ГОДА)

1 - ОБЩЕЕ ЧИСЛО КЛУЕЕНЫЮВ; 2 3 - ЧЧСЛО ЬЕЯЬКЫХ КЛУБЕНЬКОВ

ЧИСЛО КРУПНЫХ ШЕ2ШГОЗ;

- КОНТРОЛЬ;

\\\\Ч\ - 1ИАМИ СХАЗ,Ю104

позволяют предположить, что именно крупные клубеньки образуется за счет инокуляции штаммом CIAM0104 и что азотфиксирующая активность этих клубеньков является причиной увеличения урожайности растений. Об этим свидетельствуют и высокие коэффициенты корреляции (табл.5) между числсм клубеньков и изученными агробиологическими признаками арахиса. Ранее при проведении вегетационных опытов было показано (Sing-h et al., 1976) что.масса клубеньков, образуемых на корнях арахиса при инокуляции ризобиями, коррелирует только с надземной массой растений (г—¡0,81; Ро4С,01).

4. Эффективность инокуляции арахиса штубеныюзими бактеркяда на фона использования азотных удобрен'.»") Важным'этапом оценки ■ эффективности симбиотической ааотфиксации является сопоставление действия на бобовые растения инокуляции ризобиями'и внесения азотных удобрений. Внесение значительных доз азотных удобрений обычно подавляет интенсивность симбиотической азотфиксавди. Цель»'заключительного этапа кашей работы было изучение действия инокулдада производственным птаммом СШ.1О104 на продуктивность арахиса на фоне внесения азотных удобрений (в форме аммиачной селитры).

В пслевом опыте 1995 г. были заложены следующие варианты: инокуляция штаммом СШШ04, внесение азотных удобрений в дозах 60. кг/га ("средняя" доза) и 120 кг/га ("высокая" дога), а также сочетания инокуляда и внесения 60 ravra азота.

Подученные результаты показали, что инокуляция 'арахиса штаммом CIAM01G4 эквивалентен на внесение по хоньпек мере, 120 кг/ra "связанного" азота (таСл.7). Например, суузя масса растений возрастала при инокуляции на 100%, а при внесении 120 кг/га азота -только на +45,5%. По уротайнопти семлн прибавки составили; при инокуляции 47,12, при внесении 120 кг/ra азота 26..27.. Ваото отметить, что внесение азотных удобрений практически т влияло на количество клубеньков, образуемых на корнях арахиса местными штаммами ризобий, однако в случае внесение 120 кг/га азота наблюдалась тенденция к уменьшению-их числа.

При совместной обработке. арахиса штампом CIAM0104 и внесении 60 .. кг/^а "связанного" азота для большинства изученных агробиологических признаков наблюдали достоверное повышение по сравяенко -с варилигами, в которых инокуляцию ризобиями и внесение агота. производили раздельно. Одновременные внесение ри-

Таблица 7

Действие инокуляции штаммом СШЙ104 на фоне использования азотных удобрений на основные агробиологические признаки арахиса (среднее по 2 сортам)

Варианты Сухая масса растений (г) Урожайность семян (г/м ) Масса 1000 семян (г) Общее число клубеньков на 1 растение

опыта АВ П АВ Ц АВ 11 АВ П

С1АМ0104 2,2 +100,0 123,4 +47,1 654,4 +22,9 ' 182,4 +816,6

N£0 1.5 С—) +36,4 95,7(-) +14,1 634,0(-) +17,3. 21,3(-) +7,0 •

N120 1.6(-) +45,5 105.9С-) +26,2 650,5(-) +20,4 18.7С-) -6.1

С1АШ104+М60 2,5(+) +127,3 129,4(+) +54,2 6№,5(+) +26,9 140,£!(-) + №4,5

К 1.1 0 0'<5,9 0 Ь40,4 . 0 19, У и

НСР (0,05) 0,17 - 2,09 - 4,30 - .4,14 -

Примечание: К- контроль без инокуляцш и азота. АВ- абсолютные величины;

П- прибавка в 1; (-) Я (+)- достоверные отличия от штамма С1АШ104

аобий I!. азота повышает массу растений.на 66,7%, по сравнению с " внесением только азота и лишь на 13,6% по сравнению, с внесением только ризобий. Таким.образом, эффекты от внесения ризсбий и азота не являются аддитивными.(не складываются), . т.к. прибавка от совместного действия этих факторов меньше, ' чем сумма прибавок от каждого фактора в отдельности.

Эти данные. позволяют предположить, что з присутствии 60 кг/га "связанного"' азота наблюдается существенное ингибирование симбиотической активности штамма С1АЮ104. Об этом .говорить, в частности, результаты изучения показателей клубенькооораэования: при совместном внесении штамма с;дю104 и 60 кг/га азота число клубенысоп, достоверно .меньше, чем при внесении только штамма С1АШЮ4.

Тагам образом, полученные данные' показывают', что необходимо продолжить работу по выявлению оптимальных сочетаний инокуляции ризобипми и внесения "связанного" ззота при возделывании арахиса. В частности, следует изучить эффекты от сочетания .инокуляции с внесением матах ("стартовых") доз азота (20-40 кг/га) с целью подбора доз, которые не ингибируруют.симбиотическую активность, ризсбий и влияние- которых ''на урожайность арахиса является "аддитивным", по отношению к эффекту инокуляции.

ВЫВОДЫ'

1. Из клубеньков арахиса, собранных в,разных районах Узбекистана (Дибрай и Бекабад) выделено 15 штаммов клубеньковых бактерий, которые.. охарактеризованы по культуральио-биохимическим признакам. Эти ' штаммы., сочетают признаки . быстрорастущих (¡ЗМгоМит)' и медленнорастущих (ВгааугМгоЫш). клубеньковых бактерий. В условиях стерильных лабораторных опытов все штаммы Формировали на. корнях, арахиса клубеньки, а инокуляция 6 штаммами достоверно (на 63,1-82,7%) повышала сухую надземнута.массу .растений,

2; В условиях полевых опытов наибольшую эффективность в симбиозе с сортами арахиса, возделываемых в Уйбелистане, проявил местный штамм А72, который достоверно превысил производственный штамм С1АШ104 по способности увеличивать сухую ма:су растений (на 10,5-11,1%), урожай семян (на 3,1-4,2%), массу 1000 семян (на 2,6-2,8%)... '

3: В'условиях полевых мелкоделяночных опытов инокуляция про-

изводственным штаммом ШШ104 Bradyrhizoblum sp. (Arachls) 3 портов арахиса, возделываемых в Узбекистане, повышала сухуп массу растений на 18,2-109,12,. урожай семян на 37,9-66,2%, общее накопление оелча в семенах на 61,4-114,5%, масла на 39,3-60,1%. При этом наблюдали достоверное повышение величин ряда элементов урожая надземной массы (высота растений, число и длина ветгей) и семян (число бобов, масса 1000 бобов и 1000 семян).

4. Общее число клубеньков, образуемых на корнях арахиса 5 полевых условиях, возрастало при инокуляции в 3,7 раза, причем число крупных клубеньков возрастало в 15.8 раза, а мелких - а 4,7 раза. Выявлены высокодосговерныэ (Ро<0,01) корреляции числа клубеньков с изученными агробиологическими признаками арахиса, в т.ч. с массой растений +0,83; а урожаем семян +0,У5; с числом зрелых бобов -i0,94; с общим накоплением масла +0,89.

5. С использованием метода двухфактсрного дислерсиг.;п;огп анализа показано, что сухая масса, урожай семян и число ярелнх бобов инокулированных растений арахиса более жестко контролируются генотипами штаммов бактерий, чем сортов растений, а масса юпо семян в наибольшей степени зависит от сорта растений. А.-аддитив-нсе сорто-штаммовое взаимодействие играет наибольшую роль л пире-делении сухой массы растений (24,72 варьирования), тогда как в определении показателей семенной продуктивности этот фактор играет незначительнув роль.

6. Эффект от инокуляции арахиса штаммом С1АМ0104 достоверно превышал эффект от внесения азотных удобрений в дозе 120 кг/га N: по массе ратенкй на 37,6%, по урожайности семян на iß.fiX, по массе 1000 семян на 2,12. Сочетание инокуляции с внесением ВО кг/га N привело к достоверному повышению массы ратенкй (на 13,6%), урожайности семян (на 4,7%), число бобов (на 20.0%) и массы 1000 семян (на 3,1%) по сравнению с обработкой только штаммом 01АШ104.

24 - -

Список работ, опубликованных по материалам диссертации

1. Саимназаров-Ю.Б., Хакимов С.О., Юедажеза Ф. Т., Расулов A.C.. Пулатова Д.З., Бахромов й.У. Эффективность местных втаммоз Rhizobium mellloti выделенных из Среднеазиатского тенцентра. //Узбекский биологический .журнал. 1994. КЗ С. 21-25.

2. Саимназаров Ю.Б.,' Прохоров H.A., Бахромов И.У., Пулатова Д.З. Влияние бактериального препарата на- клубенькообразо-ванию и урожайность.маша и арахиса. Конф. "Интродукции микроорганизмов в окружащую среду". //Москва. 1994. С.83.

3. Provorov N. А., Ncvikova N. I., .Limeschenko E.V., Xozhemiakov- A.'P., . Saimnazarov V.B., Bahrotnov I.U., Pulatova D.Z., Rasulov A.S., Murodov М.Ы., Kurbonov G.K., Omonturdiev B.O. Symbiotic efficiency in tho t legymes cultivated in Middle Asia-chickpea (Clcer arietihum l.),mungboan (Phaseolus aureus Roxb.) and peanut (Arachls hypogaaa Ii,). Nitrogen' Fixation: Fundamentals and Applications..Proceedings- of the 10 th International Congress on Nitrogen Fixation,St Peterburg,Russia,May.28 June3,1995.Kluwer Academic Publishers Dordrecht /Boston/ London.P.?2o,

4. Саимназаров Ю.Б.,.' Пулатова Д.З., 'Бахромов И.У., Проворов H.A. Сравнительное изучение содержания пигментов в растениях маша и арахиса, инокулироваинш клубеньковыми бакте-рипми. //Химия Природных Соединений. 1995. N.2. С.323-324.

5. Пулатова Л.3... Саимназаров Ю.Б., Проворов H.A., Бахромов И.У., Омонгурдиев Б.О. Эффективность симбиоза арахиса подземного (Arachis hyp'ogaea L.) с клубеньковыми бактериями в условиях Узбекистана. ' //Узбекс-лй биологический журнал. 1996. N.5. С 21-26. . •

6. Пулатова Д.З., Оконтурдйев.В.О., БойматоваТ., ПроЕоров H.A., Саимназаров Ю.Б. Влияние инокуляции на арахиса. // Сельское хозяйство-Узбекистана. 1997. N1. С. 50.

7. ЦулатоЕа Д.З., Саимназаров Ю.Б., Смонтур;.;иев Б.О., Бойма-това Т.., Ерёнгок илдизидаги фенологик узгаришлар. // Узбе-кистон. ндалок хужалиги. 1997. N2. С.37.

8. Бахрамов И.У., Саимназаров Ю.Б., Проворов Н.А., Пулатова Д.З. Нош хосилдорлигини оЕирив. /' Узбекистан кишок хужа-лиги. 1997. N2. С.32.

Пулагова Дилрабо Зульфикахаровна

ЕРЁНРО^ (АИАСН^ НУРООАЕА I.) БИЛАН САМАР.Ш СИМБИОЗ

ХОЯАХДА БУЛУВЧИ ТУГАНАК БАКТЕРИЯ ШТАММЛАРШИ УРГАККШ

Биринчи марта 15 та ерёнгок туганак бактериялари ма^аллий штаммларининг коллекцияси яратилган. Штаммлар табиий дала аарои-тида усган усимлик шщизи туганакларидан ажратиб олиниб, уларнинг мсрфо - физиологии ва культурал - биохимиязий хусусиятлари урга-нилган. Уларнинг симбиотик хусусиятлари махсус лаборатория ва ыайда каторли дала тажрибаларида урганилган.

С1АМ0104 штамми билан шлов бериб экиа натижасида Уабекистон-да экиладиган ерётеок навларики хосилдорлиги ошиши. ва уругникг сифати яхшиланили курсатилган. Лаборатория тажрибаларида усимлик ер устки кисмини 63,2 - 82,7 фоизга окирувчи 6 та стамм анинла-ниб, шулардан 2 таси симбиотик хусусиятлари жздатидан С1АЫ0104 штаммвдан ус тун турили исботланган.

Икки факторли дисперсия усули ёрдамида майда каторли дала тажрибаларида ерёнрокни туганакли бактерия билан ишлов беркб экилганда усимликнинг огирлиги' ва туганаклар сони бактерия штам-мининг генотипига, уруг косилдорлиги, дукаклар сони ва 1000 та уруг огирлиги эса усимлик нави генотипига богликлиги курсатилган.

Узбегастон шароитида етиатириладИган ерёнрок навлари з^осил-дорлигини куп микдбрда азотли уритлар солига билан змас, балки са-марадорлиги в:^ори булган туганак бактериялари Тгазммларики ишлатиш йули билан оширш макрадга муофккжиги курсатилган.

Pulatova Dilrabo Zulfikaxarovna

Analysis of the nodule bacteria strains forming the effective symbiosis with peanut (Araohis hypogaea L..).

In the field trials inoculation of 3 peanut cultivars with' tho commercial Bradyrhizobium sp. strain C1AM0104 increased shoot mass by 18,2 - 109,1%, ssed yield by 37.9 - 60,2%, total protein yield in seeds by 61,4 - 114,5%, total oil yield by 39,3 - 60,1%. Total'number of nodules was increased by 8,7 tines. _15 rhlzcbla strains wore isolated from peanut nodules collected within different areas of Uzbekistan. Analysis of the cultural and biochemical properties (colcny morphology, growth rate, utilization of various carbohydrates, sensitivity to phases, salt end high temperature) in chess local strains demonstrated that they combine properties of fast-growing and slow-growing rhizobia. The local strain 72 was identified which overcomes tho CIAW0104 strain in its symbiotic efficiency under the field conditions (for the adility to increase the shoot mass by 10,5-11,1%, the seed mass by 3,1-4,2%). Two-factor analysis of variance demonstrated that shcot mass of tho inoculated plants controlled mainly by the rhlzobla genotypes, while the seed yield - by the host genotypes. The rhlzobla Inoculation was equivalent to application of 120 kg/ha of mineral N (aumcnium nitrate).' The rhizobia inoculation combined with application of 60 kg/ha of N was more effective than inoculation without M feriiltor.

P. •— Подписано к печатк-j^ Ob. a--u.— Ш- ^Сб-•/' Тираж iOO . 19У jrr. OS.f ■■Отпечатано в АП ТПК

Ташкент, Навои, 30.