Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Использование многоуровневой системы индикации биологической активности почв для оценки эффективности методов биорекультивации нефтезагрязненных территорий
ВАК РФ 03.00.16, Экология

Автореферат диссертации по теме "Использование многоуровневой системы индикации биологической активности почв для оценки эффективности методов биорекультивации нефтезагрязненных территорий"

На правах рукописи

КАБИРОВ ТАГИР РУСТЭМОВИЧ

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МНОГОУРОВНЕВОЙ СИСТЕМЫ ИНДИКАЦИИ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ПОЧВ ДЛЯ ОЦЕНКИ ЭФФЕКТИВНОСТИ МЕТОДОВ БИОРЕКУЛЬТИВАЦИИ НЕФТЕЗАГРЯЗНЕННЫХ ТЕРРИТОРИЙ

03.00.16-Экология 03.00.23 - Биотехнология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Уфа 2009

7 ЗЯНЗ?^

003460217

Работа выполнена на кафедре биохимии и биотехнологии факультета биологии ГОУ ВПО «Башкирский Государственный Университет».

Научные руководители: доктор биологических наук, профессор

Киреева Наиля Ахняфовна

доктор биологических наук, профессор Дубовик Ирина Евгеньевна

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Хазиев Фангат Хаматович

доктор биологических наук, профессор Домрачева Людмила Ивановна

Ведущая организация: Институт биологии Коми НЦ УрОРАН

Защита диссертации состоится 20 февраля 2009 г. в 1400 часов на заседании диссертационного совета ДМ 002.136.01 при Институте биологии Уфимского научного центра РАН по адресу: 450054, г. Уфа, Проспект Октября, 69. тел.: 235-53-62, E-mail: ib@anrb.ru

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Уфимского научного центра Российской Академии Наук и на официальном сайте http://www.anrb.ru/inbio/dissovet/index.htm

Автореферат разослан «» января 2009 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук

Р.В. Уразгильдин

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В современном обществе, зависящем от углеводородных энергоресурсов, одним из наиболее масштабных техногенных загрязнителей является нефть. Попадая в почву, нефть оказывает как прямое, так и опосредованное влияние на биологическую активность почв.

Биотесты, используемые для оценки токсичности техногенно нарушенных почв обычно состоят из одного (Udo, Payemi, 1975; Вассер и др., 1989; Винник, 2005) или группы таксономически близких видов (Артемьева, Шти-на, 1985; Bierkens et al., 1998; Juvonen et al., 2000; Домрачева, 2005; Ашихми-на и др., 2006; Капелькина и др., 2004, 2007; Терехова, 2007). Результаты таких тестов могут показывать значительную степень корреляции с величиной оцениваемого фактора (обычно концентрацией загрязнителя), однако не могут в полной мере отражать интегральную токсичность среды.

В связи с этим, актуальным является использование таких диагностических систем, которые позволяли бы оценить общую биологическую активность почвы по результатам совокупной реакции каждого уровня организации живой материи на стрессовый фактор.

Использование микробных препаратов является одним из наиболее экономически и экологически целесообразных методов рекультивации неф-тезагрязненных почв (Алехин и др., 1998; Габбасова, 2001; Лизунов, 2002; SaSek et al., 2003; van der Gast et al., 2003). Однако при искусственном внедрении микробных комплексов в почвы с таким многокомпонентным загрязнителем как нефть, в ходе рекультивации всегда существует вероятность образования персистентных и токсичных соединений (Плешакова и др., 2007). Для испытания экологической безопасности микробных препаратов и для оценки эффективности биоаугментации необходим обобщающий критерий, который позволил бы определять функциональное состояние почвы и ее ток-

сичность. В качестве такого критерия может быть использован уровень биологической активности почвы.

Цель и задачи исследования. Целью исследований являлась разработка многоуровневой тест-системы для измерения биологической активности нефтезагрязненных и рекультивируемых почв, а также поиск обобщенного критерия для оценки эффективности биоаугментации с использованием микробных препаратов Азолен, Белвитамил, Ленойл.

В соответствии с поставленной целью решались следующие задачи:

1. Изучить индивидуальные реакции каждой группы тест-объектов на внесение в почву различных концентраций нефти и рекультивацию.

2. Создать многоуровневую тест-систему, используя наиболее диагностически значимые реакции изученных тест-объектов.

3. Разработать обобщенный коэффициент биологической активности, позволяющий сравнивать почвы с разной степенью антропогенной нагрузки.

4. Оценить эффективность рекультивационных мероприятий в нефтезагрязненных почвах с помощью разработанного коэффициента.

Научная новизна. Впервые в многоуровневую систему биотестирования нефтезагрязненных почв включены показатели развития цианобактери-ально-водорослевых ценозов (ЦВЦ). Проведены тесты по наличию у микробных препаратов алъготоксических свойств.

Предложен коэффициент биологической активности почв (БАП), включающий в себя уровень активности ферментов, показатели численности гетеротрофных и углеводородокисляющих микроорганизмов (УОМ), микроскопических грибов, водорослей и цианобактерий, степень развития высших растений и педобионтов в исследуемой почве. Получены данные об использовании коэффициента БАП для оценки эффективности рекультивационных мероприятий.

Практическая значимость работы. Разработанная многокомпонентная тест-система позволяет получить надежные результаты при оценке ха-

рактера и степени нефтяного загрязнения почвы. Ее можно включить как составную часть в систему экологического мониторинга. Результаты исследований могут быть использованы в курсах лекций «Охрана природы», «Промышленная экология», «Экология и рациональное природопользование». Предложенный коэффициент БАП позволяет сравнивать функциональное состояние почв на разных стадиях биодеградации нефти и можегг служить дополнительным аргументом при выборе того или иного метода рекультивации.

Апробация. Основные положения и результаты диссертации были представлены: на Международных конференциях и конгрессах «Ломоно-сов-2004» (Москва, 2004), «Мжробш бютехнологи» (Одесса, 2006), «Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана» (Казань, 2006), «Здоровье и безопасность жизнедеятельности молодежи: проблемы и пути решения» (Уфа, 2006), «Changing Soils in a Changing World: the Soils of Tomorrow» (Palermo, 2007), «Биологическая рекультивация и мониторинг нарушенных земель» (Екатеринбург, 2007), «Экология и биология почв» (Ростов-на-Дону, 2007), «Мировые инновационные технологии восстановления нарушенных и загрязненных земель техногенных регионов» (Кемерово, 2008), на Всероссийских конференциях и съездах «VI, VII Докучаевские молодежные чтения» (Санкт-Петербург, 2003, 2004), «Проблемы геоэкологии Южного Урала» (Оренбург, 2005), «Биотехнология-2005» (Пущино,

2005), «Биология-наука XXI века» (Пущино, 2006), «Техносферная безопасность, надежность, качество, энерго- и ресурсосбережение» (Ростов-на-Дону,

2006), «Альгологические исследования: современное состояние и перспективы на будущее» (Уфа, 2006), «Актуальные проблемы регионального экологического мониторинга» (Киров, 2006, 2007), «Фундаментальные достижения в почвоведении, экологии, сельском хозяйстве на пути к инновациям» (Москва, 2008), «Проблемы экологии в современном мире» (Тамбов, 2007,2008).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 27 печатных работ, в

том числе 3 статьи в журналах списка ВАК.

Объем и структура работы. Диссертация состоит из введения, 5 глав, заключения, выводов, списка литературы (336 наименований, в том числе 124 на иностранных языках) и приложения. Текст диссертации изложен на 168 страницах, рисунков 20, таблиц 13.

Благодарности. Автор выражает глубокую признательность и благодарность научным руководителям: доктору биологических наук, профессору H.A. Киреевой и доктору биологических наук, профессору И.Е. Дубовик, за неоценимую помощь, оказанную при выполнении данной работы, профессору О.Н. Логинову, за предоставленные биопрепараты, а также всем коллегам и соавторам публикаций.

ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Исследования нефтезагрязненных и рекультивируемых почв проводились с 2002 по 2008 год на базе агробиостанции БГПУ им. Акмуллы и в лаборатории микробиологии кафедры биохимии и биотехнологии БашГУ.

В лабораторных и полевых условиях изучалось изменение биологической активности почв (серая лесная, выщелоченный чернозем), загрязненных нефтью, и почв на разных стадиях рекультивации микробными препаратами. При биоремедиации были использованы: 1) биопрепарат нефтедеструктор «Ленойл», основанный на природном консорциуме микроорганизмов Bacillus brevis и Arthrobacier species, полученный в институте биологии УНЦ РАН (г.Уфа), Пат. РФ № 2232806; 2) биоудобрение комплексного действия «Азо-лен» на основе Azotobacter -vinelandii ИБ 4, полученный в институте биологии УНЦ РАН (г.Уфа), Пат. РФ № 2224791. Оба препарата любезно представлены проф. О.Н. Логиновым; 3) биопрепарат Белвитамил, Пат. РФ № 2198748 -активный ил целлюлозо-бумажного производства, представляющий собой готовую смесь промышленной ассоциации аэробно-анаэробных микроорга-

низмоз, содержащий углеводородокисляющие микроорганизмы родов Arthrobacter, Bacillus, Candida, Desulfovibrio, Pseudomonas (всего 10 видов).

Оценка биологической активности почв осуществлялась по показателям ферментативной активности, численности гетеротрофных и углеводородо-кисляющих микроорганизмов, качественному составу и количественным характеристикам микроскопических грибов, водорослей и цианобакгерий, реакциям высших растений и почвенных беспозвоночных.

Активность каталазы определялась газометрическим методом, хитиназы - колориметрическим методом с n-диметиламинобензальдегидом, липазы -титрометрическим методом, целлюлазы - аппликационным методом (Хази-ев, 2005). Определение численности гетеротрофных, углеводородокисляю-щих микроорганизмов и микромицетов проводили общепринятыми методами посева почвенной суспензии (Методы...,1991), а видового состава микромицетов по соответствующим определителям. При выявлении видового состава цианобактерий и водорослей использовали чашечные культуры со стеклами обрастания (Штина, Зенова, 1990; Кузяхметов, Дубовик, 2001). Оценку обилия видов водорослей проводили по 15-ти балльной системе (Ка-биров, Шилова, 1990). Количественный учет почвенных водорослей проводили методом культурального подсчета (Вассер и др., 1989). Биомассу водорослей вычисляли объемно-расчетным методом (Кузяхметов, Дубовик, 2001). Фитотоксичность почв определяли с помощью редиса {Raphanus sativus, сорт Красный с белым кончиком). Степень зоотоксичности оценивали на коллем-болах видов Folsomia Candida и Onychiurus stachianus (Ханисламова, 1995). Содержание остаточных нефтепродуктов в почве определяли горячей экстракцией метиленхлоридом (McGill, Rowell, 1980). По результатам тестирования рассчитывали индекс токсичности (ИТФ), который вычисляли по формуле (Кабиров, 1995) ИТФ = ТФо / ТФк, где ИТФ - индекс токсичности оцениваемого фактора, ТФо - значение регистрируемой тест-функции в опыте; ТФк - значение регистрируемой тест-функции в контроле.

Статистическая обработка данных осуществлялась с применением пакетов прикладных программ Statistica 6.0 и Microsoft Excel 2007. При статистической обработке данных использовали t-тесг, расчет доверительных интервалов средних арифметических значений и коэффициент корреляции.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Изменение параметров биологической активности почв под влиянием нефтяного загрязнения

Биологическая активность нефтезагрязненных почв находилась в подавленном состоянии за счет угнетающего действия нефти на составляющие ее компоненты. Нефтяное загрязнение оказывало значительное влияние на ферментативную активность почв. Активность каталазы резко снижалась при загрязнении почвы нефтью, причем степень угнетения активности фермента напрямую зависела от концентрации поллютанта. В отличие от каталазы, загрязнение нефтью в малых и средних концентрациях, после периода первоначального спада, оказывало стимулирующее действие на активность почвенной липазы. Активность хитиназы и целлюлазы первоначально снижалась под действием нефти и постепенно восстанавливалась с увеличением сроков инкубации.

Под влиянием нефтяного загрязнения изменялись микробиологические параметры почв. Внесение нефти способствовало бурному росту численности УОМ (табл.1). Гетеротрофная часть микробного комплекса нефте-загрязненной почвы, которая первоначально находилась в угнетенном состоянии, постепенно восстанавливалась со временем (табл.1).

В почве, загрязненной нефтью в концентрации до 8% наблюдалось увеличение видового разнообразия микроскопических грибов, расширялся список выделенных из загрязненных почв видов, по-видимому, участвующих в утилизации нефти или просто устойчивых к данному типу загрязнения. В

8

отличие от контрольных вариантов, где представители родов Aspergillus и Pénicillium являлись типичными редкими наравне с представителями других родов (Trichoderma, Mucor, Scopulariopsis), в сильно загрязненной почве возрастала доля видов, принадлежащих этим двум родам, и они переходили в разряд типичных частых и доминирующих.

Загрязнение нефтью в концентрации 1% уже достаточно сильно сказывалась на количественных показателях всхожести, скорости прорастания и энергии прорастания семян. В почвах с загрязнением 8% гибель семян достигала практически 100%.

Многочисленные опыты, проведенные с использованием двух видов коллембол (Folsomia Candida, Onychiurus stachianus) по всевозможным сценариям развития стрессовой ситуации, показали, что эти педобионты чутко реагировали как на прямое, так и на опосредованное действие нефтяного загрязнения и быстрее всего погибали при «свежем» загрязнении.

Фоновая (ненарушенная) почва характеризовалась полночленностью циа-нобактериально-водорослевого ценоза (ЦВЦ) с наличием всех таксономических групп: цианобакгерии (Cyanophyta, Cyanobacteria) и зеленые (Œorophyta), жел-тозеленые (Xanthophyta), диатомовые ([Bacillariophyta) водоросли. Был идентифицирован 31 вид и внутривидовой таксон цианобактерий и водорослей, относящийся к 6 классам (Chroococcophyceae, Hormogoniophyceae, Pennatophyceae, Xanthococcophyceae, Xanthotrichophyceae, Chlorophyceae).

При загрязнении почвы нефтью в концентрациях 1 и 4%% на 3 сут произошла унификация видового состава ЦВЦ. Так, в почвах с 1% нефти были выявлены виды цианобактерий, относящиеся к роду Nostoc: Nostoc commune, Nostoc sp., N. linckia, N. punctiforme, a при 4%-ном загрязнении - N. ИпсЫа. Через 90 сут произошло восстановление видового разнообразия цианобактерий и только виды Leptolyngbya foveolarum, Gloeocapsa turgida при 4%-ном загрязнении не обнаруживались. Это, вероятно, связано с тем, что цианобакгерии способны усваивать углеводороды нефти и занимать откры-

тые пространства с повышенным рН среды (Кабиров, Минибаев, 1982; Зимо-нина, 1998). Кроме того, виды рода Л'ойос обладают высокой устойчивостью к поллютантам, их уникальные экологические свойства обусловлены способностью становиться эдификаторами ЦВЦ (Киреева и др., 2007; Кондакова, Домрачева, 2007). Среди зеленых водорослей наиболее устойчивым был вид СЫогососсит т/изюпит. В вариантах с концентрацией нефти (8%) наблюдалась массовая гибель водорослей. Были обнаружены лишь представители вида №игое НпсЫа.

Оценка эффективности рекультивации нефтезагрязненных почв с использованием микробных препаратов

Были исследованы три способа биоаугментации с использованием микробных препаратов Ленойл, Азолен и Белвитамил. Эффективность восстановления почв, обработанных этими препаратами, оценивалась отдельно по каждому из изучаемых параметров и сравнивалась с аналогичными значениями фоновой почвы и почвы, загрязненной нефтью без обработки препаратом.

Рис. 1. Снижение содержания остаточных нефтепродуктов в почвах при использовании различных биопрепаратов (через 90 сут).

Исследуя изменения биологической активности почв в ходе рекультивации нефтяного загрязнения, мы сравнивали их с количественными данны-

ми содержания остаточных нефтепродуктов. Внесение препаратов способствовало значительному увеличению темпов деградации углеводородов (рис. 1). В почвах с биопрепаратами количество остаточных нефтепродуктов за 90 сут снижалось до 45-60% от исходного, в зависимости от первоначальной концентрации нефти.

Таблица 1

Численность гетеротрофных и углеводородокисляющих микроорганизмов в нефтезагрязненных и рекультивируемых почвах

Вариант Гетеротрофные микроорганизмы, п* Ш6КОЕ/1гпочны УОМ, п* 101 КОЕ / 1г почвы

3 сут 30 сут 90 суг 3 сут 30 сут 90 сут

К 7,94±0,40 8,95±0,45 12,59±0,63 1,26±0,06 1,78±0,09 2,19±0,11

К+1% 1,00±0,05 17,42±0,88 21,38±1,07 2,51±0,13 26,55±1,33 45,71±2,29

К+4% 0,50±0,03 13,84±0,69 16,59±0,83 1,99±0,10 43,65±2,18 109,65±5,48

К+8% 0,16±0,01 1,52±0,08 3,54±0„18 3,16±0,16 56,11±2,80 114,82±5,74

1%+Л 2,51±0,13 26,54±1,33 39,81±1,99 3,16±0,16 38,89±1,94 72,44±3,62

4%+Л 1,26±0,06 35,62±1,78 63,09±3,15 4,47±0,22 62,28±3,11 169,82±8,49

8%+Л 0,15±0,01 2,88±0,14 7,08±0,35 15,85±0,79 101,52±5,07 229,08±11,45

1%+А 15,49±0,77 18,71 ±0,94 23,44±1,17 2,19±0,11 38,05±1,90 69,65±3,48

4%+А 4,79±0,74 16,23±0,82 25,12±1,26 4,90±0,25 44,29±2,21 98,11±4,91

8%+А 0,37±0,02 7,01±0,35 9,55±0,44 22,39±1,12 42,40±2,12 114,54±5,72

1%+Б 1,55±0,08 2,23±0,11 4,88±0,24 7,24±0,36 62,84±3,14 76,46±3,82

4%+Б 0,95±0,02 4,38±0,22 8,13±0,41 20,89±1,04 123,10±6,16 144,67±7,23

8%+Б 0,21±0,01 6,66±0,33 10,79±0,54 26,30±1,32 146,25±7,31 164,56±8,22

Примечание: здесь и в послед, таблицах принята относительная погрешность измерений: 8= ±5%; здесь и далее: К— фоновая почва; А - азолен; Б-белвитамил; Л - ленойл

Все исследованные биопрепараты оказали положительное влияние на каталазную активность почв, рост численности гетеротрофных и углеводородокисляющих микроорганизмов (табл. 1). Стимулирующее действие препа-

ратов на развитие гетеротрофных микроорганизмов связано, вероятнее всего, со снижением общей токсичности почвы с одновременным появлением дополнительных трофических ресурсов. УОМ, априори получающие стимул к развитию за счет появления углеводородов, в опытах с внесением биопрепаратов проявляют еще более бурный рост, хотя в некоторых случаях наблюдался антагонизм аборигенной и инокулированной углеводородокисляющей микробиоты (табл. 1).

Использование Ленойла для биоремедиации способствовало некоторому уменьшению численности микромицетов за счет интродукции консорциума углеводородокисляющих бактерий, составляющих основу биопрепарата, что способствовало восстановлению соотношения бактерии - грибы. Применение биопрепарата Ленойл для очистки нефтезагрязненного чернозема также оказывало воздействие на видовой состав комплекса микромицетов. В варианте с низкой концентрацией нефти были выявлены микромицеты, не встречавшиеся в других образцах (РетсНИит ¡р., Р. ЫтШ, ТпсЪоскгта \iride). В образцах нефтезагрязненных почв с Белвитамилом, по сравнению с таковыми без биопрепарата, произошло значительное стимулирование некоторых видов микромицетов. Преимущество получили А. fumigatгls, А. гехМсШя, А. /еггеич. Вид Т. \4ride перешел из группы типичных редких в группу типичных частых.

Наиболее эффективным препаратом для снижения фитотоксичности в проведенном эксперименте стал Азолен, положительно отразившийся на регистрируемых показателях (всхожесть, скорость и энергия прорастания) в течение всего эксперимента во всех концентрациях. Такие результаты кажутся вполне закономерными, если принять во внимание что Азолен был исходно разработан как биоудобрение. Известно (Логинов и др., 2004), что микроорганизмы, входящие в его состав обладают способностью к фиксации атмосферного азота, синтезу стимуляторов роста растений (цитокининов и ауксинов), а также проявляют антагонизм к фитопатогенным грибам.

Таблица 2

Влияние различных концентраций нефти и биоремедиации на зоотоксичность почв

Вариант Выживаемость коллембол (%) в почвах с различными концентрациями нефти п биопрепаратами

Folsomia candida Onychiurus stachianus

3 сут 30 сут 90 сут 3 сут 30 сут 90 сут

К 100+ 100+ 100+ 100+ 100+ 100+

К+1% 50 70 90 40 70 100+

К+4% _0 30 65 30 60 85

К+8% 0 0 0 0 0 5

1%+Л 70 85 95+ 90 95 100+

4%+Л 10 40 75 60 80 95

8%+Л 0 0 15 0 ' 5 25

1%+А 45 55 65 40 70 90

4%+А 5 15 30 25 50 85

8%+А 0 0 10 0 0 15

1%+Б 65 85 90 65 85 90+

4%+Б 0 40 80 50 75 90

8%+Б 0 5 20 0 10 25

Примечание: знаком «+» обозначено появление потомства

Внесение биопрепаратов также значительно снижало зоотоксичность почв. Таблица 2 иллюстрирует влияние исследуемых биопрепаратов в динамике на зоотоксичность почв. Отметим, что коллемболы чутко реагировали уже на 1% внесенной нефти. На 3 сут выживаю не более половины особей, терялась их способность к размножению. Наиболее эффективным препаратом в рамках данного эксперимента стал Ленойл (табл.2).

Использование различных биопрепаратов для рекультивации нефтезаг-рязненных почв оказывало неоднозначное влияние на видовое разнообразие ЦВЦ как в фоновой, так и в загрязненной почве. Находясь в поверхностных слоях почвы, цианобактерии и водоросли быстро реагировали на внесение

испытуемых веществ, показывая при этом неодинаковую реакцию различных групп на разные препараты.

__ ■ ■ УУУУ.У^уу : ._ь • ; У.,.., ... . . Л

йООО Г'.....■......................."""""'...... .............. ..................."""""........ ........:.'■■..............

Рис. 2. Численность клеток почвенных водорослей и цианобактерий в нефтезагрязненной и рекультивируемой почве.

Через 3 сут при внесении в фоновую почву биопрепарата Азолен наблюдалось снижение видового разнообразия зеленых и диатомовых водорослей и цианобактерий. Белвитамил, внесенный в фоновую почву, через 3 сут оказался наиболее токсичным из всех биопрепаратов. Избирательный характер действия биопрепаратов проявился и в варианте с внесением Ленойла. В фоновой почве через 3 сут происходило незначительное обеднение видового состава ЦВЦ. Через 90 сут после начала эксперимента все чувствительные по отношению к препаратам виды водорослей и цианобактерий адаптировались, и по численности и биомассе превосходили эти показатели в фоновой почве (рис. 2).

Наибольшее разнообразие видов цианобактерий и водорослей было отмечено в загрязненной почве, обработанной Ленойлом (табл. 3). Под его действием наблюдалось снижение токсичности внесенной нефти. Применение Ленойла способствовало восстановлению видового разнообразия водорослей и цианобактерий при 1%-ном загрязнении. При концентрации нефте-

продуктов 4% виды Во1г)(Иор$'и; епетгя и ВитШепорш 1егпсо1а, относящиеся к желтозеленым, выпали из нефтезагрязненного ЦВЦ, и не проявляли себя в течение оставшегося периода.

Таблица 3

Изменение качественного состава (число видов) и количественных характеристик (баллы обилия) ЦВЦ в зависимости от сроков наблюдения и варианта

эксперимента

Сроки отбора проб, сут | К К+Л 1% 1%+Л 4% 4%+Л

Число видов

30 13 9 8 7 0 0

90 15 15 10 15 0 0

180 19 19 16 19 3 9

Во все сроки наблюдения 26 24 22 23 3 9

Степень развития ЦВЦ (баллы)

30 69 58 13 24 0 0

90 88 87 35 66 0 0

180 97 77 56 62 3 16

Рекультивация почвы, загрязненной нефтью в концентрации 8%, не привела к восстановлению видового разнообразия водорослей. В данных образцах почвы были обнаружены только представители цианобактерий, относящиеся к роду Л^ос. Очевидно, для восстановления видового состава водорослей необходима повторная обработка биопрепаратами или более длительное время дня детоксикации поллютанта.

Коэффициент биологической активности почв В качестве обобщающего показателя было предложено использовать коэффициент биологической активности почвы (БАП) = (ИТФ1 + ИТФ2 + ИТФ3 +ИТФ4 + ИТФ5 + ИТФб + ИТФ7)/7, где ИТ®! - индекс токсичности, рассчитанный по активности каталазы; ИТФ2 - индекс токсичности для гете-

ротрофных микроорганизмов; ИТФ3 - для углеводородокисляющих микроорганизмов; ИТФ4 - для микроскопических грибов; ИТФ5 - для почвенных водорослей; ИТФ6 - для высших растений; ИТФ7 - для почвенных беспозвоночных (коллембол). Регистрируемые тест-функции соответственно выражали: для ИТФ1 - в мл 02 за 120 сек, для ИТФ2-ИТФ5 -в ^ численности, для ИТФб в относительном удлинении проростков тест-растения, для ИТФ7 регистрируемая тест-функция выражена в среднем % выживаемости двух видов. При величине БАП равной или больше 1 биологическая активность почвы сохраняется или возрастает. При БАП < 1 она снижается.

Таблица 4

Значения БАП в различных вариантах экспериментов (3 сут)

Варианты эксперимента Тест - объекты БАП

Каталаза Гетеротрофные микроорганизмы УОМ Микроскопические грибы Почвенные водоросли Высшие растения Почвенный бес- позвоночные

к 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00

К+1% 0,62 0,87 1,06 0,96 0,82 0,88 0,45 0,83

К+4% 0,24 0,83 1,04 0,95 0,74 0,53 0,30 0,67

К+8% 0,16 0,75 1,08 1,21 п 0,05 п 0,57

1% + Л 0,32 0,93 1,08 1,34 1,14 0,94 0,80 0,94

4% +Л 0,22 0,88 1,11 1,25 1,05 0,54 0,35 0,77

8% +Л 0,05 0,75 1,22 1,21 п 0,10 П 0,48

1% + А 0,76 1,04 1,05 1,58 1,00 1,15 0,43 1,00

4% +А 0,49 0,97 1,12 1,55 0,97 0,68 0,15 0,85

8% +А 0,18 0,81 1,25 1,53 п 0,13 п 0,56

1% + Б 0,68 0,90 1,15 1,33 1,15 0,78 0,65 0,95

4% +Б 0,46 0,87 1,24 1,37 0,96 0,54 0,25 0,81

8% +Б 0,11 0,77 1,26 1,41 1,00 0,12 п 0,67

Примечание: п -тест-организм погиб

Использование такого интегрального показателя как БАП позволяет получить представление об обобщенной реакции почвенной экосистемы на

нефтяное загрязнение и более достоверные результаты об эффективности используемых при биоремедиации препаратов.

В таблицах 4 и 5 представлены величины коэффициента БАП, рассчитанные для всех вариантов опыта с периодами инкубации 3 и 90 сут. Как видно из полученных результатов (табл. 4, 5), при загрязнении нефтью общая биологическая активность почвы заметно снижалась. При этом степень подавления биологической активности зависела от концентрации нефти и времени прошедшего с момента попадания ее в почву.

Таблица 5

Значения БАП в различных вариантах экспериментов (90 сут)

Варианты эксперимента Тест-объекты БАП

Каталаза Гетеротрофные микроорганизмы УОМ Микроскопические грибы Почвенные водоросли Высшие растения Почвенный беспозвоночные

к 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00

К+1% 0,76 1,03 1,25 1,08 0,83 1,05 0,95 0,99

К+4% 0,39 1,02 1,32 0,90 0,79 0,84 0,75 0,86

К+8% 0,22 0,92 1,32 0,95 п 0,33 0,03 0,54

1% + Л 1,13 1,07 1,28 1,36 1,19 1,31 1,00 1,19

4% +Л 0,63 1,10 1,35 1,11 1,03 0,9 0,85 1,00

8% +Л 0,33 0,96 1,38 1,00 п 0,23 0,2 0,59

1% + А 1,04 1,04 1,33 1,02 1,20 1,40 0,77 1,11

4% + А 0,57 1,04 1,35 1,05 1,04 0,85 0,57 0,92

8% +А 0,26 0,98 1,34 0,96 п 0,39 0,12 0,58

1% + Б 1,22 0,94 1,09 1,01 1,18 1,19 0,9 1,08

4% +Б 0,70 0,97 1,25 1,07 1,06 0,72 0,85 0,95

8% +Б 0,43 0,94 1,28 1,10 0,83 0,37 0,22 0,74

В отличие от почв, подвергшихся слабому загрязнению (1%), биологическая активность которых за 90 сут практически полностью восстанавливалась (БАП для 1% загрязнения через 90 сут = 0,99), почвы со средней степенью загрязнения (4%) уже не могут вернуться в исходное состояние за счет внутренних ресурсов за такой отрезок времени (БАП для 4% загрязнения = 0,67, 0,79 и 0,86 после 3, 30 и 90 сут инкубации почвы, соответственно). При более высоких концентрациях нефти (8%) величина БАП за период наблюдения (3, 30, 90 сут) практически не изменялась и колебалась в пределах 0,540,57 единиц.

«1% В 4% О 8%

Бе/шитамил

Азоден шттжМ -Л»:«!

Лемойл ЗШНИИМИа*

Контроль © : • -

Рис. 3. Значения БАП через 90 сут инкубации

На этом фоне хорошо отслеживается положительная динамика от внесения биопрепаратов. Уже на 3 сут значение БАП в почвах с препаратами были значительно выше, чем в необработанных. Так, в почве с

внесением Ленойла она равнялось 0,77; Азолена - 0,85; Белвитамила -0,81. Тенденция восстановления биологической активности в почвах с 4% нефти и препаратами сохранялась на протяжении всего эксперимента, и через 90 сут показатели БАП составили: для 4% нефти без обработки - 0,86; с Ленойлом - 1,00; с Азоленом - 0,92; с Белвитамилом -0,95 (рис. 3). Исходя из этих результатов, можно констатировать неоспоримую эффективность использования исследованных препаратов в качестве инструментов восстановления биологической активности в почвах, подвергшихся нефтяному загрязнению средней степени (равному, в нашем случае, 4%).

Использование биопрепаратов в условиях высокой концентрации нефти (8%) не смогло существенно изменить скорость восстановления биологической активности. Возможно, в долгосрочной перспективе внесение биопрепарата в почву с сильным загрязнением сыграет свою положительную роль, однако в рамках нашего эксперимента значительного увеличения величины БАП не наблюдалось. Единственным препаратом, который показал хорошие результаты восстановления БАП при 8% загрязнении, стал Белвитамил (БАП для 8% загрязнения через 90 сут = 0,54; с Белвитамилом - 0,74). Вероятнее всего, это связано с его многокомпонентным составом, в который входят протеины, витамины и микроэлементы, служащие энергетическим материалом для почвенной мик-робиоты, а также целлюлозное волокно и низкомолекулярный лигнин, обладающие некоторой нефтеемкостью.

выводы

1. Разработана многоуровневая тест-система, включающая показатели ферментативной активности (каталаза), численности гетеротрофных и угле-водородокисляющих микроорганизмов, количественного и качественного состава микроскопических грибов, водорослей и цианобакгерий, а также уровни фито- и зоотоксичности. Данную систему можно использовать для оценки состояния почвенного покрова и эффективности способов рекультивации загрязненных и нарушенных почв.

2. Для определения биологической активности разработан интегральный показатель биологической активности почвы (БАП). Он позволяет более надежно оценить состояние почвы, чем использование каких-либо ее отдельных характеристик.

3. Исследованные биопрепараты Азолен, Ленойл и Белвитамил в целом оказались эффективными при восстановлении биологической активности нефтезагрязненных почв. Приемы биорекультивации с использованием этих препаратов имели наибольшую эффективность при исходно слабом (1%) или среднем (4%) загрязнении; при умеренно сильном загрязнении (8%) наиболее активен препарат Белвитамил.

4. Биопрепараты Азолен, Ленойл и Белвитамил не обладали собственными альготоксическими свойствами. При внесении биопрепаратов для ре-медиации нефтезагрязненных почв токсическое действие нефти на почвенные водоросли и цианобакгерии снижалось. Наиболее эффективным дм восстановления цианобактериально-водорослевых ценозов оказался препарат Ленойл. При его внесении в загрязненную почву (1 и 4%% концентрация нефти) наблюдалось полное восстановление видового состава, численности клеток и биомассы водорослей и цианобакгерий. В условиях 8% загрязнения все три препарата оказались неэффективными.

5. Азолен, Белвитамил и Ленойл оказали схожее стимулирующее действие на активность почвенной каталазы. Динамика роста каталазной активности сохранялась в течение всего эксперимента; в пробах с исходным загрязнением в 1% через 90 сут эти значения становились выше контрольных. Применение препаратов способствовало восстановлению численности гетеротрофных микроорганизмов. Через 90 сут в слабо- (1%) и среднезагрязнен-

20

ных (4%) почвах с внесением Азолена и Ленойла их количество было больше чем в контроле. Белвитамил положительно влиял на рост численности гете-ротрофов в почвах с исходно сильным (8%) загрязнением. Углеводородокис-ляющие микроорганйзмы, получающие стимул к развитию за счет нефтяных углеводородов, показали еще более быстрый рост при использовании биопрепаратов, особенно Белвитамила и Ленойла. В почвах, обработанных этими препаратами, уже через 30 сут численность углеводородокисляющих микроорганизмов достигала порядка 107. Внесение в нефтезагрязненную почву препаратов также способствовало перестроениям в комплексе почвенных микромицетов. Азолен, Белвитамил и Ленойл неодинаково влияли на видовой состав микромицетов, проявляя стимулирующее и ингибирующее действие по отношению к разным видам.

6. Применение биопрепаратов снижало фито- и зоотоксическое воздействие нефти. Ленойл оказал стимулирующее действие на рост проростков редиса при 1% загрязнении в течение всего эксперимента. Внесение препарата в почвы с более высокими концентрациями нефти (4 и 8%%) отразилось только на увеличении процента всхожести, увеличения длины проростков не наблюдалось. Наиболее эффективным препаратом для снижения фитоток-сичности в проведенном эксперименте оказался Азолен, положительно отразившийся на регистрируемых показателях (длина проростков, всхожесть, энергия и скорость прорастания семян) в течение всего эксперимента во всех концентрациях. Выживаемость коллембол зависела от времени, прошедшего с момента попадания нефти в почву и концентрации нефтяного загрязнения, а также от особенности их видовой резистентности к нефти. В почве с 8% концентрацией нефти особи коллембол Folsomia candida погибали, а благодаря обработке препаратами Азолен, Ленойл и Белвитамил их выживаемость в таких почвах составила 10, 15 и 20%, соответственно. Для Onychiurus sta-chianus аналогичные показатели составили 5% (в почве с 8% нефти), 15% при обработке Азоленом, и по 25% при обработке Ленойлом и Белвитамилом.

Список основных работ, опубликованных по теме диссертации

1. Киреева H.A., Кабиров Т.Р., Онегова Т.С., Жданова Н.В. Биологическая очистка нефтезагрязненных природных объектов с использованием целлюлосодержащих субстратов // Нефтяное хозяйство. - 2007. - № 6. - С. 98-101 (принято к печати до 31.12.2006).

2. Киреева H.A., Водопьянов В.В., Рафикова Г.Ф., Кабиров Т.Р., Григориади A.C. Мониторинг токсичности нефтезагрязненных почв по микробиологическим показателям II Вестник Оренбургского государственного университета. 2007. - № 75. - С. 158-161.

3. Киреева H.A., Рафикова Г.Ф., Галимзянова Н.Ф., Логинов О.Н., Кабиров Т.Р. Комплекс микромицетов нефтезагрязнениого чернозема выщелоченного при рекультивации биопрепаратом ленойл // Микология и фитопатология. - 2008. - Т.42. - Вып. 1. - С. 57-63.

4. Бакаева М.Д., Тарасенко Е.М., Кабиров Т.Р. Экологическая оценка рекультивируемых почв // Город. Почва. Экология. Тез. докл. Всеросс. конф.. VI Докучаевские молодежные чтения. С.-Пб., 2003. - С.36-37.

5. Кабиров Т.Р., Шамаева АЛ. Активность почвенной липазы как индикатор процесса биодеградации нефти в почве // Человек и почва в XXI в. Тез. докл. Всеросс. конф. VI Докучаевские молодежные чтения. - С.-Пб., 2004. - С.80.

6. Федотов A.B., Киреева H.A., Тарасенко Е.М., Шамаева A.A., Кабиров Т.Р. Создание биопрепарата для биоремедиации нефтезагрязенных почв // Итоги биологических исследований. Сб. научн. трудов. - 2004. -Выпуск 8. - Уфа: РИО БашГУ, 2004. - С.42-46.

7. Киреева H.A., Онегова Т.С., Кабиров Т.Р. Биотехнология рекультивации нефтезагрязненных почв II Биотехнология-2005. Семинар-презентация инновационных научно-техничеких проектов. Тез. докл. -Пущино, 2005. - С99-100.

8. Кабиров Т.Р., Гиззатова JI.C. Оценка токсического воздействия нефти на ногохвосток // Биология-наука XXI в. Сб. тез. 10-ой Пущинской школы-конференции. - Пущино, 2006. - С.227-228.

9. Кабиров Т.Р. Реакция водорослей на загрязнение почвы нефтью//Альгологические исследования: современное состояние и перспективы на будущее. Матер. 1 Всеросс. научн-пр. конф. - Уфа:Изд-во БГПУ, 2006. - С.54-55.

Ю.Киреева H.A., Кабиров Т.Р., Онегова Т.С.,Жданова Н.В.. Активизация аборигенной углеводородокисляющей микробиоты почв внесением отходов производства целлюлозы // М1кробш бютехнологп. Тез. МЬкд. наук. конф. - Одесса, 2006. - С. 189.

П.Кабиров Т.Р., Киреева H.A., Рафикова Г.Ф., Бакаева М.Д. Экологический риск нефтяного загрязнение почв // Техносферная безопасность, надежность, качество, энерго- и ресурсосбережение. Сб. научн. тр. и матер. Всеросс. н.-практ. конф. Выпуск VIII. - Ростов-на- Дону-Шепси, 2006. —С.330-335.

12.Киреева H.A., Кабиров Т.Р., Онегова Т.С.. Биоремедиация нефтезагрязненных почв с использованием целлголозосодержащих субстратов// Биологическая рекультивация и мониторинг нарушенных земель. Матер, междун. научн. конф. - Екатеринбург: Изд-во Ур. ун-та, 2007. - С. 346-358.

13.Мрясова А.Б., Кабиров Т.Р. Альгологическая характеристика нефтезагрязненных почв в качестве биоиндикаторных показателей // Студент и наука. Матер, научн. конф. - Уфа: РИЦ БашГУ, 2007. - С. 41-44.

14.Кабиров Т.Р. Использование биопрепарата «ленойл» для биотехнологической очистки нефтезагрязненных почв // Проблемы экологии в современном мире. Матер. IV всеросс. lntemet-конф. -Тамбов, 2007. - С. 172-175.

15.Kabirov T.R., Kireeva N.A. Usage of wastes from cellulose-paper production for bioremediation of oil polluted soils // Changing Soils in a Changing World: the Soils of Tomorrow. 5th International Congress of European Society for Soil Conservation. - Palermo, 2007. - P. 311.

16.Киреева H.A., Кабиров T.P., Дубовик И.Е. Комплексное биотестирование нефтезагрязненных почв // Теоретическая и прикладная экология. -2007. -№1. - С. 65-69.

17.Киреева H.A., Кабиров Т.Р., Григориади A.C., Онегова Т.С. Детоксикация нефтешлама с использованием целлюлозосодержащих субстратов// Вестник Башкирского университета. 2008. - №1. - С. 47-51.

18.Киреева H.A., Кабиров Т.Р., Онегова Т.С., Григориади A.C., Рафикова Г.Ф. Использование отходов целлюлозно-бумажного производства для очистки и детоксикации загрязненных почв // Фундаментальные достижения в почвоведении, экологии, сельском хозяйстве на пути к инновациям. Тез. докл. всеросс. научно-практ. конф. - М.: МаксПресс, 2008. - С. 25-26.

19.Киреева H.A., Онегова Т.С., Григориади A.C., Кабиров Т.Р. Изучение возможности утилизации отходов целлюлозо-бумажной промышленности для рекультивации нефтезагрязненных почв// Мировые инновационные технологии восстановления нарушенных и загрязненных земель техногенных регионов. Сб. матер, междунар. научно-пр. конф. -Кемерово, 2008. - С. 47-49.

20.Кабиров Т.Р. Экологические риски, сопутствующие трубопроводному транспорту нефти // Проблемы экологии в современном мире. Матер. V всеросс. Internet-конф. -Тамбов, 2008. - С. 67-70.

Лиц. на издат. деят. Б848421 от 03.11.2000 г. Подписано в печать 14.01.2009. Формат 60X84/16. Компьютерный набор. Гарнитура Times New Roman. Отпечатано на ризографе. Усл. псч. л. - 1,7. Уч.-изд. л. - 1,5. Тираж 100 экз. Заказ № 262

ИПК БГПУ 450000, г.Уфа, ул. Октябрьской революции, За

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Кабиров, Тагир Рустэмович

Введение

ГЛАВА 1. Влияние нефтяного загрязнения на биологическую 9 активность почвы (обзор литературы)

1.1. Нефтяное загрязнение почв

1.2. Мониторинг природных объектов загрязненных нефтяными 11 углеводородами

1.3. Абиотическая деградация нефти в почве

1.4. Биотическая деградация нефти в почве

1.5. Биотестирование и биоиндикация. Тест-объекты, 22 используемые для оценки нефтяного загрязнения почв

1.6. Диагностика и биорекультивация нефтезагрязненных почв

1.6.1. Углеводородокисляющие микроорганизмы

1.6.2. Цианобактериально-водорослевые ценозы (альготестирование, 32 альгоиндикация и фикоремедиация)

1.6.3. Растения (фитотестирование, фитоиндикация и 35 фитомелиорация)

1.6.4. Зоотоксичность нефтезагрязненных почв

1.6.5. Ферментативная активность нефтезагрязненных почв

1.7. Биоремедиация нефтезагрязненных почв с использованием 43 микробных препаратов

ГЛАВА 2. Материалы и методы исследований

2.1. Материалы исследований

2.1.1. Экспериментальные участки (микрополевые опыты)

2.1.2. Модельные опыты (лабораторные эксперименты)

2.1.3. Характеристика использованной нефти

2.1.4. Характеристика биопрепарата Белвитамил (Пат. РФ №2198748)

2.1.5. Характеристика биопрепарата Ленойл (Пат. РФ № 2232806)

2.1.6. Характеристика биопрепарата Азолен (Пат. РФ № 2224791)

2.2. Методы исследований

2.2.1. Определение содержания остаточных нефтепродуктов в почве 55 (McGill, Rowell, 1980)

2.2.2. Определение уровня фитотоксичности (ГОСТ 12039-82; ГОСТ

12039-82; ГОСТ 12039-82; Фомин, Фомин, 2001)

2.2.3. Определение уровня зоотоксичности (Ханисламова, 1995)

2.2.4. Методы изучения почвенных водорослей (Штина, Голлербах,

1976; Кузяхметов, Дубовик, 2001)

2.2.5. Определение ферментативной активности почвы 60 (Хазиев, 1976, 2005)

2.2.6. Методы посева, выращивания, учета и определения 61 микроорганизмов (Методы., 1991; Егоров, 1976).

2.2.7. Описание структуры комплекса почвенных микроскопических 62 грибов (Зенова, Кураков, 1988)

2.2.8. Определение длины гиф мицелия (Методы .,1991)

2.2.9. Статистическая обработка данных

ГЛАВА 3. Изменение параметров биологической активности почв 64 под влиянием нефтяного загрязнения

3.1. Реакция почвенных ферментов на нефтяное загрязнение почв

3.1.1. Каталаза

3.1.2. Липаза

3.1.3. Хитиназа

3.1.4. Целлюлаза

3.2. Динамика изменения численности микроорганизмов под 72 действием нефтяного загрязнения почвы

3.2.1 Влияние нефтяного загрязнения почв на численность гетеротрофных микроорганизмов 3.2.2. Влияние нефтяного загрязнения почв на углеводородокисляющие микроорганизмы

3.3. Влияние нефтяного загрязнения почвы на комплекс микроскопических грибов

3.3.1. Влияние нефтяного загрязнения на длину гиф и биомассу 79 мицелия

3.4. Влияние нефтяного загрязнения на высшие растения

3.5. Использование микроартропод (Collembola) для определения 83 зоотоксичности нефтезагрязненных почв

3.6. Влияние нефтяного загрязнения на цианобактериально- 86 водорослевые ценозы

ГЛАВА 4. Оценка эффективности рекультивации 92 нефтезагрязненных почв с использованием микробных препаратов

4.1. Содержание остаточных нефтепродуктов

4.2. Изменение активности почвенной каталазы при рекультивации

4.3. Влияние рекультивации на численность гетеротрофных и 95 углеводородокисляющих микроорганизмов

4.4. Влияние рекультивации на численность и видовой состав 98 микроскопических грибов

4.5. Влияние рекультивации на фитотоксичность

4.6. Влияние рекультивации на зоотоксичность

4.7. Влияние рекультивации на цианобактериально-водорослевые 105 ценозы

ГЛАВА 5. Коэффициент биологической активности почв

Введение Диссертация по биологии, на тему "Использование многоуровневой системы индикации биологической активности почв для оценки эффективности методов биорекультивации нефтезагрязненных территорий"

Актуальность темы. В современном обществе, зависящем от углеводородных энергоресурсов, одним из наиболее масштабных техногенных загрязнителей является нефть. Попадая в почву, нефть оказывает как прямое, так и опосредованное влияние на биологическую активность почв.

Биотесты, используемые для оценки токсичности техногенно нарушенных почв обычно состоят из одного (Udo, Payemi, 1975; Вассер и др., 1989; Винник, 2005) или группы таксономически близких видов (Артемьева, Штина, 1985; Bierkens et al., 1998; Juvonen et al., 2000; Домрачева, 2005; Ашихмина и др., 2006; Капелькина и др., 2004, 2007; Терехова, 2007). Результаты таких тестов могут показывать значительную степень корреляции с величиной оцениваемого фактора (обычно концентрацией загрязнителя), однако не могут в полной мере отражать интегральную токсичность среды.

В связи с этим, актуальным является использование таких диагностических систем, которые позволяли бы оценить общую биологическую активность почвы по результатам совокупной реакции каждого уровня организации живой материи на стрессовый фактор.

Использование микробных препаратов является одним из наиболее экономически pi экологически целесообразных методов рекультивации нефтезагрязненных почв (Алехин и др., 1998; Габбасова, 2001; Лизунов, 2002; Sasek et al., 2003; van der Gast et al., 2003). Однако при искусственном внедрении микробных комплексов в почвы с таким многокомпонентным загрязнителем как нефть, в ходе рекультивации всегда существует вероятность образования персистентных и токсичных соединений (Плешакова и др., 2007). Для испытания экологической безопасности микробных препаратов и для оценки эффективности биоаугментации необходим обобщающий критерий, который позволил бы определять функциональное состояние почвы и ее токсичность. В качестве такого критерия может быть использован уровень биологической активности почвы.

Цель и задачи исследования. Целью исследований являлась разработка многоуровневой тест-системы для измерения биологической активности нефтезагрязненных и рекультивируемых почв, а также поиск обобщенного критерия для оценки эффективности биоаугментации с использованием микробных препаратов Азолен, Белвитамил, Ленойл.

В соответствии с поставленной целью решались следующие задачи:

1. Изучить индивидуальные реакции каждой группы тест-объектов на внесение в почву различных концентраций нефти и рекультивацию.

2. Создать многоуровневую тест-систему, используя наиболее диагностически значимые реакции изученных тест-объектов.

3. Разработать обобщенный коэффициент биологической активности, позволяющий сравнивать почвы с разной степенью антропогенной нагрузки.

4. Оценить эффективность рекультивационных мероприятий в нефтезагрязненных почвах с помощью разработанного коэффициента.

Научная новизна. Впервые в многоуровневую систему биотестирования нефтезагрязненных почв включены показатели развития цианобактериально-водорослевых ценозов (ЦВЦ). Проведены тесты по наличию у микробных препаратов альготоксических свойств.

Предложен коэффициент биологической активности почв (БАП), включающий в себя уровень активности ферментов, показатели численности гетеротрофных и углеводородокисляющих микроорганизмов (УОМ), микроскопических грибов, водорослей и цианобактерий, степень развития высших растений и педобионтов в исследуемой почве. Получены данные об использовании коэффициента БАП для оценки эффективности рекультивационных мероприятий.

Практическая значимость работы. Разработанная многокомпонентная тест-система позволяет получить надежные результаты при оценке характера и степени нефтяного загрязнения почвы. Ее можно включить как составную часть в систему экологического мониторинга. Результаты исследований могут быть использованы в курсах лекций «Охрана природы», «Промышленная экология», «Экология и рациональное природопользование». Предложенный коэффициент БАП позволяет сравнивать функциональное состояние почв на разных стадиях биодеградации нефти и может служить дополнительным аргументом при выборе того или иного метода рекультивации.

Апробация. Основные положения и результаты диссертации были представлены: на Международных конференциях и конгрессах «Ломоносов-2004» (Москва, 2004), «Мисробш бютехнологи» (Одесса, 2006), «Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана» (Казань, 2006), «Здоровье и безопасность жизнедеятельности молодежи: проблемы и пути решения» (Уфа, 2006), «Changing Soils in a Changing World: the Soils of Tomorrow» (Palermo, 2007), «Биологическая рекультивация и мониторинг нарушенных земель» (Екатеринбург, 2007), «Экология и биология почв» (Ростов-на-Дону, 2007), «Мировые инновационные технологии восстановления нарушенных и загрязненных земель техногенных регионов» (Кемерово, 2008), на Всероссийских конференциях и съездах «VI, VII Докучаевские молодежные чтения» (Санкт-Петербург, 2003, 2004), «Проблемы геоэкологии Южного Урала» (Оренбург, 2005), «Биотехнология-2005» (Пущино, 2005), «Биология-наука XXI века» (Пущино, 2006), «Техносферная безопасность, надежность, качество, энерго- и ресурсосбережение» (Ростов-на-Дону, 2006), «Альгологические исследования: современное состояние и перспективы на будущее» (Уфа, 2006), «Актуальные проблемы регионального экологического мониторинга» (Киров, 2006, 2007), «Фундаментальные достижения в почвоведении, экологии, сельском хозяйстве на пути к инновациям» (Москва, 2008), «Проблемы экологии в современном мире» (Тамбов, 2007, 2008).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 27 печатных работ, в том числе 3 статьи в журналах списка ВАК.

Объем и структура работы. Диссертация состоит из введения, 5 глав, заключения, выводов, списка литературы (336 наименования, в том числе 124 на иностранных языках) и приложения. Текст диссертации изложен на 169 страницах, рисунков 20, таблиц 13.

Заключение Диссертация по теме "Экология", Кабиров, Тагир Рустэмович

выводы

1. Разработана многоуровневая тест-система, включающая показатели ферментативной активности (каталаза), численности гетеротрофных и углеводородокисляющих микроорганизмов, количественного и качественного состава микроскопических грибов, водорослей и цианобактерий, а также уровни фито- и зоотоксичности. Данную систему можно использовать для оценки состояния почвенного покрова и эффективности способов рекультивации загрязненных и нарушенных почв.

2. Для определения биологической активности разработан интегральный показатель биологической активности почвы (БАП). Он позволяет более надежно оценить состояние почвы, чем использование каких-либо ее отдельных характеристик.

3. Исследованные биопрепараты Азолен, Ленойл и Белвитамил в целом оказались эффективными при восстановлении биологической активности нефтезагрязненных почв. Приемы биорекультивации с использованием этих препаратов имели наибольшую эффективность при исходно слабом (1%) или среднем (4%) загрязнении; при умеренно сильном загрязнении (8%) наиболее активен препарат Белвитамил.

4. Биопрепараты Азолен, Ленойл и Белвитамил не обладали собственными альготоксическими свойствами. При внесении биопрепаратов для ремедиации нефтезагрязненных почв токсическое действие нефти на почвенные водоросли и цианобактерии снижалось. Наиболее эффективным для восстановления цианобактериально-водорослевых ценозов оказался препарат Ленойл. При его внесении в загрязненную почву (1 и 4%% концентрация нефти) наблюдалось полное восстановление видового состава, численности клеток и биомассы водорослей и цианобактерий. В условиях 8% загрязнения все три препарата оказались неэффективными.

5. Азолен, Белвитамил и Ленойл оказали схожее стимулирующее действие на активность почвенной каталазы. Динамика роста каталазной активности сохранялась в течение всего эксперимента; в пробах с исходным загрязнением в 1% через 90 сут эти значения становились выше контрольных. Применение препаратов способствовало восстановлению численности гетеротрофных микроорганизмов. Через 90 сут в слабо- (1%) и среднезагрязненных (4%) почвах с внесением Азолена и Ленойла их количество было больше чем в контроле. Белвитамил положительно влиял на рост численности гетеротрофов в почвах с исходно сильным (8%) загрязнением. Углеводородокисляющие микроорганизмы, получающие стимул к развитию за счет нефтяных углеводородов, показали еще более быстрый рост при использовании биопрепаратов, особенно Белвитамила и Ленойла. В почвах, обработанных этими препаратами, уже через 30 сут численность углеводородокисляющих микроорганизмов достигала порядка п

10 . Внесение в нефтезагрязненную почву препаратов также способствовало перестроениям в комплексе почвенных микромицетов. Азолен, Белвитамил и Ленойл неодинаково влияли на видовой состав микромицетов, проявляя стимулирующее и ингибирующее действие по отношению к разным видам.

6. Применение биопрепаратов снижало фито- и зоотоксическое воздействие нефти. Ленойл оказал стимулирующее действие на рост проростков редиса при 1% загрязнении в течение всего эксперимента. Внесение препарата в почвы с более высокими концентрациями нефти (4 и 8%%) отразилось только на увеличении процента всхожести, увеличения длины проростков не наблюдалось. Наиболее эффективным препаратом для снижения фитотоксичности в проведенном эксперименте оказался Азолен, положительно отразившийся на регистрируемых показателях (длина проростков, всхожесть, энергия и скорость прорастания семян) в течение всего эксперимента во всех концентрациях. Выживаемость коллембол зависела от времени, прошедшего с момента попадания нефти в почву и концентрации нефтяного загрязнения, а также от особенности их видовой резистентности к нефти. В почве с 8% концентрацией нефти особи коллембол Folsomia Candida погибали, а благодаря обработке препаратами Азолен, Ленойл и Белвитамил их выживаемость в таких почвах составила 10, 15 и 20%, соответственно. Для Onychiurus stachianus аналогичные показатели составили 5% (в почве с 8% нефти), 15% при обработке Азоленом, и по 25% при обработке Ленойлом и Белвитамилом.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Биологическая активность почвы является определяющим критерием оценки ее функционального и токсикологического состояния, а также продукционного потенциала. Для того чтобы адекватно оценивать текущее состояние исследуемой почвы в каждом конкретном случае и отслеживать ее динамические изменения под влиянием различных искусственно внесенных веществ и соединений, а также живых организмов, необходима универсальная методика, способная регистрировать весь спектр внутриэкосистемных превращений. В нашем случае объектами исследования послужили почвы, в большей или меньшей степени загрязненные нефтью и испытывающие на себе различные рекультивационные мероприятия. Эффективность этих мероприятий, как и процессов самоочищения почв, оценивалась по ряду параметров, объединенных под термином «биологическая активность почв».

Объединив теоретические знания в области многоуровневого биотестирования природных объектов в целом и нефтезагрязненных почв в частности и скорректировав их для наших условий с учетом доступных нам методических приемов и тест объектов мы получили комплексную тест-систему которая послужила основным инструментом наших исследований. При построении комплексной тест-системы для оценки биологической активности почвенного покрова мы руководствовались следующими принципами: тест система должна содержать прокариотические и эукариотические организмы; содержать представителей двух трофических уровней - автотрофов и гетеротрофов; включать представителей из основных функциональных блоков наземных экосистем - продуцентов, консументов, редуцентов; иметь в своем составе представителей из основных царств живого - бактерий, грибов, растений, животных; включать тест-организмы, хорошо растущие в лабораторных условиях и обладающие высокой чувствительностью к исследуемым загрязнителям природной среды; включать такие тест-реакции тест-объектов, регистрация которых не требует использования сложной и дорогостоящей аппаратуры, но, в то же время, несущие достаточный объем информации.

Объективным методом оценки нефтезагрязненных почв является определение количественного содержания нефтепродуктов в почве. Однако, как мы могли убедиться, эти цифры не всегда можно отождествлять с биологической активностью. Возможно, в обработанных препаратами почвах не так выражено меняется количественный состав углеводородов, но они трансформируются привнесенными микроорганизмами в менее токсичные соединения. В любом случае, каждый из исследованных нами тест-объектов обладает своим уникальным диапазоном реакции на происходящие в окружающей среде изменения. Все они находятся в постоянном контакте друг с другом и с абиотическими факторами среды, в своем взаимодействии образуя уникальный ответ на внесенный стресс-фактор. Попытка определить реакцию почвы на загрязнение, вырывая из контекста тот или иной биологический объект, будет не всегда адекватной. Мы постарались, насколько это возможно, объединить наиболее важные параметры в один коэффициент, которым можно было бы в общих чертах охарактеризовать биологическую активность почвы.

Для оценки состояния и изменения биологической активности при экспериментальном загрязнении почвы нефтью (в концентрациях 1%, 4% и 8%) и внесении в нее биопрепаратов Ленойла, Белвитамила, Азолена были использованы следующие показатели: ферментативная активность (каталаза, липаза, хитиназа, целлюлаза), численность гетеротрофных микроорганизмов, численность углеводородокисляющих микроорганизмов, качественный состав и количественные характеристики микроскопических грибов, водорослей и цианобактерий, реакции высших растений и почвенных беспозвоночных.

Первоначальной реакцией исследованных ферментов на нефтяное загрязнение являлось некоторое подавление их активности с последующим восстановлением до уровня контроля и в отдельных случаях с некоторым превышением этого уровня. При нефтяном загрязнении резко возрастала численность гетеротрофных и углеводородокисляющих микроорганизмов, что, по-видимому, связано с увеличением содержания органического вещества и, в частности, углеводородного субстрата. Высокую толерантность к нефтяному загрязнению в исследованном диапазоне концентраций показали микромицеты. Это проявлялась как на уровне качественного состава, так и на количественном уровне. Более чувствительными оказались фототрофные организмы и мелкие почвенные беспозвоночные.

В наших исследованиях изучение изменений, происходящих в цианобактериально-водорослевых ценозах под воздействием нефтяного загрязнения, заняло центральное место. Акцент на этом параметре биологической активности почвы в нашей работе был сделан по ряду причин. Во-первых, в отличие от вышеописанных тест-объектов, которые индивидуально или в различных сочетаниях уже использовались для оценки экологических последствий нефтяных загрязнений и рекультивации, влияние микробных препаратов на альгоценозы не изучено, и это направление является наиболее интересным в связи с его научной новизной.

Во-вторых, цианобактериально-водорослевые ценозы оказались самыми чувствительными объектами по отношению к токсическому действию нефти, стремительно деградируя уже при однопроцентном загрязнении. Такая высокая чувствительность метода сделала его незаменимым дополнением к уже описанным более «грубым» биотестам, обычно начинающим выражено реагировать на нефть при ее концентрации 1% и выше.

Воздействие нефти на почвенные водоросли и цианобактерии заключалось не только в выведении одних видов из сообщества и подавлении других, но и в задержке развития всего сообщества. Так, при просмотре культур, первые клетки водорослей на стеклах обрастания в опытных вариантах появились значительно позднее, чем в контрольных. Видимо, требуется определенный период, в течение которого происходит адаптация

ЦВЦ к нефтяному загрязнению.

В зависимости от дозы, нефтяное загрязнение по-разному влияет на видовое разнообразие, численность клеток и биомассу ЦВЦ. Для большинства видов почвенных водорослей и цианобактерий сырая нефть явилась токсичной. Под ее действием произошла унификация видового состава сообщества на уровне немногих видов одноклеточных зеленых водорослей и цианобактерий. Наиболее чувствительными к нефтяному загрязнению оказались желтозеленые и диатомовые водоросли. Их отсутствие указывает на токсичность почвы, поэтому их можно использовать в качестве биоиндикаторов техногенного загрязнения.

Чуть меньшей, чем водоросли, чувствительностью к нефтяному загрязнению обладали высшие растения. Концентрация нефти в 1% не значительно влияла на морфометрические характеристики проросших побегов, однако заметно сказывалась на снижении количественных показателей всхожести, скорости роста и энергии прорастания семян.

Для почвенных беспозвоночных (коллембол) наиболее губительными являлись легкие фракции нефти, которые со временем улетучиваются. Выживаемость коллембол зависела от давности и концентрации нефтяного загрязнения, а также особенности видовой резистентности к нефтяному загрязнению.

Внесение биопрепаратов в нефтезагрязненную почву в целом оказало положительное воздействие на все исследованные показатели. На активность ферментов все три препарата оказали схожее, практически равнозначное положительное влияние. Использованные биопрепараты оказали стимулирующее влияние и на рост численности гетеротрофных и углеводородокисляющих микроорганизмов. Однако Азолен для гетеротрофных микроорганизмов в этом плане был более эффективен, чем Белвитамил и Ленойл. В тоже время рост численности углеводородокисляющих микроорганизмов лучше стимулировали Белвитамил и Ленойл.

При использовании биопрепаратов для рекультивации нефтезагрязненных почв, происходило увеличение видового разнообразия микромицетов по сравнению с таковым нефтезагрязненных почв без биопрепарата.

Положительное влияние рассматриваемые биопрепараты оказали и на цианобактериально-водорослевые ценозы. Однако это влияние было неоднозначным по показателям восстановления флористического состава, численности клеток и биомассы водорослей и цианобактерий как в фоновой, так и в загрязненной почве. Использованные препараты при внесении в незагрязненную почву оказывали небольшое негативное влияние на качественный состав почвенных водорослей и цианобактерий, снижая их видовое разнообразие. Менее заметным было воздействие рекультивации на количественные показатели альгогруппировок. В первые сутки биопрепараты или не вызывали изменений численности и биомассы, или приводили к незначительному их увеличению. Положительный эффект становился более выраженным через 3 месяца. Можно констатировать, что сами по себе биопрепараты не обладают альготоксическими свойствами.

При незначительном нефтяном загрязнении (1%) процесс восстановления ЦВЦ проходил довольно быстрыми темпами. Уже через 6 месяцев после внесения нефти в почве опытного участка было выявлено 16 видов, что всего на 3 вида меньше, чем обнаружено в контроле. В условиях более интенсивного нефтяного загрязнения (4%) процесс восстановления ЦВЦ был замедлен. Наиболее эффективным для восстановления альгогруппировок оказался препарат Ленойл. При его внесении в загрязненную почву наблюдалось полное восстановление флористического состава, численности клеток и биомассы водорослей и цианобактерий. При 8%-ном загрязнении однократное внесение всех трех препаратов оказалось неэффективным. Очевидно, для восстановления видового состава и количественных характеристик ЦВЦ необходимо более длительное время или дополнительные способы рекультивации.

По отношению к высшим растениям наиболее эффективным препаратом оказался Азолен, положительное влияние которого сказывалось на регистрируемых показателях в течение всего эксперимента во всех концентрациях. Внесение в нефтезагрязненную почву Белвитамила положительно отразилось на тест-функциях взятых семян только при сильном загрязнении (8%). Ленойл оказал стимулирующее действие на рост растений при 1% загрязнении в течение всего эксперимента. Внесение препарата в почвы с более высокими концентрациями нефти (4 и 8%) отразилось только на увеличении процента всхожести. Увеличения же других параметров не отмечалось.

Изучаемые биопрепараты в подавляющем большинстве случаев приводили к увеличению выживаемости коллембол. Наиболее эффективным препаратом в рамках данного эксперимента оказался Ленойл.

Предложенный нами интегральный показатель биологической активности (БАП) позволяет более надежно оценить состояние почвы, чем использование каких-либо ее отдельных характеристик. Он обобщает наиболее важные биологические свойства почвы. Ферментный блок, который контролирует биохимические процессы, представлен каталазой. О реакции гетеротрофной части почвенного населения можно судить по поведению микроорганизмов и почвообитающих беспозвоночных (коллембол). Водоросли и цианобактерии являются важной частью фототрофной составляющей биоценоза почвы. Как продуценты, они вносят дополнительное количество органического вещества в почву. Кроме того, некоторые виды цианобактерий способны к азотфиксации. Реакцию семян в почве (банк семян) можно отследить по семенам редиса Raphanus sativa. Набор указанных организмов вместе с ферментом каталазой следует рассматривать как упрощенную модель биологической составляющей почвы. Результаты, полученные с использованием этой модели можно с достаточно высокой надежностью экстраполировать на природные системы.

Приведенные в диссертационной работе данные и сделанные на их

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Кабиров, Тагир Рустэмович, Уфа

1. Абдулаев М. Р., Аскеров А. О. Рекультивация нефтезагрязненных земель в Азербайджане // Вестник с.-х. науки, 1979. - № 1. - С. 57-61.

2. Акопова Г.С., Булатов А.И., Лушников С.В. и др. Очистка воды и почвы от нефти и нефтепродуктов с помощью культуры микробов-деструкторов // Экология и промышленность России. — 1999. Декабрь. -С. 17-20.

3. Алексахина Т.И., Штина Э.А. Почвенные водоросли лесных биогеоценозов. М.: Наука, 1984. 150 с.

4. Алексеев П. Д., Гридин В. И., Бараз В. И., Николаев Б. А. Охрана окружающей среды в нефтяной промышленности. Учебно-методическое пособие. М.: Нефтяник, 1994. - 474 с.

5. Алиев С.А., Гаджиев Д.А. Влияние загрязнения нефтяным органическим веществом на активность биологических процессов почв //Изв. АН АзССР. Сер. биол. наук. 1977. №2. - С. 46-49.

6. Алиев С. А., Гвозденко Д. В., Бабаев М. П., Гаджиев Д. А. Рекомендации по рекультивации нефтезагрязненных земель. Баку: Элм, 1981.-26 с.

7. Андреева В.М. Почвенные и аэрофильные зеленые водоросли (Chlorophyta: Tetrasporales, Chlorococcales, Chlorosarcinales). СПб.: Наука, 1998.-361 с.

8. Андресон Р.К., Мукатанов А.Х., Бойко Т.Ф. Экологическае последствия загрязнения нефтью // Экология. 1980. - №6. — С.21-25.

9. Андресон Р.К., Хазиев Ф.Х. Борьба с загрязнением почвогрунтов нефтью // Сер. Коррозия и защита в нефтегазовой промышленности. — М.: ВНИИОЭНГ, 1981. 45 с.

10. Артемьева Т.И. Комплексы почвенных животных и вопросы рекультивации техногенных территорий. М.: Наука, 1989. — 111 с.

11. Артемьева Т.И., Жеребцов А.К., Борисович Т.Н. Влияние загрязнения почвы нефтью и нефтепромысловыми сточными водами на комплексы почвенных животных // Восстановление нефтезагрязненных почвенных экосистем. М., Наука, 1988. - С. 82-99.

12. Ашихмина Т.Я., Домрачева Л.И., Кондакова Л.В. и др. Эколого-аналитический мониторинг антропогенно-нарушенных почв // Вестник ВяТГУ. 2006. - №14. - С.153-169.

13. Байрамов З.Р. Оруджалиев Ф.С. Лесохозяйственная рекультивация нарушенных и нефтезагрязненных земель Апшеронского полуострова. // Проблемы рекультивации нарушенных земель: Тез. докл. Уральского совещания 14-18 ноября 1988. Свердловск, 1988.-С. 135-139.

14. Берадзе И.А., Ошакмашвили Н.Л. Биологическая активность нефтезагрязненных почв //Сообщ. АНГССР 1987- №1. - С. 129-132.

15. Берестецкий О.А. Фитотоксины почвенных микроорганизмов и их экологическая роль // Фитотоксические свойства почвенных микроорганизмов. Л., 1978. 247 с.

16. Биккинина, А.Г. Разработка технологии рекультивации нефтезагрязненных объектов с использованием комплекса микробиологических препаратов. Автореф. дис. . канд. биол. наук. Уфа: ИБ УНЦ РАН, 2007. - 23 с.

17. Билай В.И., Коваль Э.З. Аспергиллы. Киев: Наукова думка, 1988. 204 с.

18. Биологический энциклопедический словарь / Гл. ред. М.С. Гиляров. М.: Сов. энциклопедия, 1986. 831 с.

19. Бирштехер Э. Нефтяная микробиология / Под ред. М.Ф. Двали, Т.Д. Силиковой. JL: Гостоптехиздат, 1957. — 314 с.

20. Воронин A.M., Старовойтов И.И. Биотехнология защиты окружающей среды // Тез. Докл. (Пущино, 18-19 октября 1994 г.). Пущино, 1994.-С.

21. Брагинский Л.П., Величко И.М. Методы оценки влияния токсикантов на планктонные организмы и их сообщества // Пресноводный планктон в токсической среде. Киев: Наукова думка, 1987. С.22-34.

22. Буров А.И. Цеолитсодержащие породы Татарстана и их применение. Казань: Фэн, 2001. 176 с.

23. Бэр доке Р. Стратегия защиты окружающей среды. М.: Мир, 1983. 326с.

24. Вайнерт Э., Вальтер Р., Ветцель Т. и др. Биоиндикация загрязнений наземных экосистем / Под. ред. Р. Шуберта. М.: Мир, 1988. 350 с.

25. Василевич В.И. Статистические методы в геоботанике. Л.: Наука, 1969.-231 с.

26. Васильева И.И. Эвгленовые и желтозеленые водоросли Якутии. Л.: Наука, 1987.-366 с.

27. Вассер С.П., Кондратьева Н.В., Масюк Н.П. и др. Водоросли. Справочник. Киев: Наукова думка, 1989. 608с.

28. Вельков В.В. Биоремедиация: принципы, проблемы, подходы // Биотехнология. 1995. - № 3-4. - С.20-27.

29. Веттич К., Гельберт Г., Шабад Л. М. и др. Определение бенз/а/пирена в семенах до и после прорастания // Вопросы онкологии. — 1976. Т. 22. - Вып. 12. - С. 52-54.

30. Волкова И. Н., Старкова О. В. Использование микробиологических показателей для диагностики состояния почв и их мониторинга. // Тез. докл. Межд. научн. конф. Микроорганизмы и биосфера. Москва, 2007. С. 19-21.

31. Вшивцев В. С, Пиковский Ю. И., Веселовский В. А. Биотестирование загрязнения среды нефтепродуктами по реакциифотосинтетического аппарата автотрофов // Мониторинг нефти и нефтепродуктов в окружающей среде. Уфа, 1985. - С. 50-51.

32. Габбасова И.М. Деградация и рекультивация почв Южного Приуралья. Автореф. дисс.д.б.н. Москва, 2001. 45 с.

33. Габбасова И.М., Сулейманов P.P., Бойко Т.Ф., Галимзянова Н.Ф. Использование биогенных добавок совместно с биопрепаратом «Деворойл» для рекультивации нефтезагрязненных почв // Биотехнология. 2002. - №2. -С. 57-65.

34. Габбасова И.М., Хазиев Ф.Х., Сулейманов P.P. и др. Стимулирование микрофлоры нефтезагрязненной серой лесной почвы с помощью органических добавок // Башкирский экологический вестник. — 1999.- №2. С. 14-18.

35. Гайнутдинов М. 3., Гайсин И. А., Храмов И. Т., Гилязов М. Ю. О токсичности нефти // Проблема разработки автоматизированных систем наблюдения, контроля и оценки состояния окружающей среды: Матер. Всесоюз. науч.-техн. конф. Казань, 1979. С. 128-129.

36. Галяутдинов А.А., Зубаилов Г.И., Хайрутдинов Ф.Ш., Шмаков В.А. К вопросу о демонтаже трубопроводов // Нефтегазовое дело, 2007. -№ .-С.

37. Гатауллина Э.М. Биотехнологический способ очистки отходов бурения от нефти и полимерных реагентов. Автореф. дис. . канд. биол. наук. СПб: СПбГТУ, 1996. - 211 с.

38. Гафарова Е.В., Зарипова С.К. Влияние цеолитсодержащей породы и эспарцета на биологические параметры выщелоченного чернозема, загрязненного смесью углеводородов // Вестник СамГУ. Естественнонаучная серия. 2005. — №6 (40). — С.

39. Гилязов М.Ю. Агроэкологическая характеристика нарушенных при нефтедобыче черноземов и приемы их рекультивации в условиях Закамья Татарстана. Автореф. дис. докт. с/х наук. Саратов: СГСХА, 1999. -43 с.

40. Гиляров М.С. Почвенные беспозвоночные как индикаторы почвенного режима и его изменений под влиянием антропогенных факторов// Биоиндикация состояния окружающей среды Москвы и Подмосковья. -М.: Наука, 1982- С. 8-12.

41. Глазовская М.А. Почвенно-геохимическое картографирование для оценки экологической устойчивости среды.// Почвоведение. — 1992, N6. — С.5-14.

42. Голлербах М.М., Коссинская Е.К., Полянский В.Е. Определитель пресноводных водорослей СССР. М.: Сов. наука, 1953. Вып. 2. - 652 с.

43. Головлева JI. А., Соляникова И. П., Бриганти Ф., Феррарони М., Коломыцева М. П., Травкин В. М. Физиолого-биохимические основы бактериальной деградации ксенобиотиков // Микроорганизмы и биосфера Тез. докл. межд. научн. конф. Москва, 2007. С.31-32.

44. Голодяев Г.П. Консорциум штаммов микроорганизмов-деструкторов, используемых для очистки почв, почвогрунтов от нефтепродуктов / Тез. докл. III съезда Докучаевского общества почвоведов, Суздаль, 2000. Кн. 2. - С. 11-12.

45. Голодяев Г.П. Микробиологическая деструкция нефтепродуктов в почве // Достижения микробиологии — практике. Экология, геохимическая деятельность микроорганизмов и охрана окружающей среды. —. Алма-Ата: Изд-во Наука Казахской ССР, 1985. Т.6. - С.42.

46. Гордиенко А.С., Курдиш И.К., Краснобрижий Н.Я. Влияние глинистого минерала палыгорскита на выживаемость бактерий при их обезвоживании // Микробиологический журнал. 1990. — Т.52. - №5. - С.75-77.

47. Горлатов С.Н., Беляев С.С. Аэробная микрофлора нефтяного месторождения и способность ее к деструкции нефти// Микробиология.— 1984. Т.53. -№5. -С. 843-850.

48. ГОСТ 12039-82 Семена сельскохозяйственных культур. Методы определения жизнеспособности

49. ГОСТ 12039-82 Семена сельскохозяйственных культур. Метод определения силы роста

50. ГОСТ 12039-82 Семена сельскохозяйственных культур. Методы определения всхожести

51. Государственный доклад «О состоянии окружающей природной среды Российской Федерации в 1998 году», Министерство природных ресурсов РФ, 1998.

52. Государственный доклад «О состоянии окружающей природной среды Российской Федерации в 2005 году», Министерство природных ресурсов РФ, 2005.

53. Груздкова Р. А., Сурин В. А. Распространения нефтяного пятна в почве // Загрязнение почв и сопредельных сред. Тр. Ин-та эксперим. метеоролог. Вып. 17. М.: Гидрометеоиздат, 1990. С. 69-71.

54. Гузев B.C., Левин СВ., Селецкий Г.И. и др. Роль почвенной микробиоты в рекультивации нефтезагрязненных почв // Микроорганизмы и охрана почв. М.: Изд-во МГУ, 1989. С. 129-150.

55. Гумеров А.Г., Гумеров Р.С., Гумеров К.М. Безопасность длительно эксплуатируемых магистральных нефтепроводов. М.: Недра, 2001. -305 с.

56. Гусев М.В., Коронелли Т.В. Микробиологическое разрушение нефтяного загрязнения // Изв. АН СССР. Сер. биол. -1981. № 6. - С.

57. Добрянский Л. Н. Загрязнение нефтью и нефтепродуктами экосистем Севера — важнейшая экологическая проблема // Экология нефтяного комплекса. М., 1988. С. 51-53.

58. Домрачева Л.И. Цветение почвы и закономерности его развития. Сыктывкар: Коми НЦ УрО РАН, 2005. 336 с.

59. Домрачева Л.И., Кондакова Л.В., Пегушина О.А., .Фокина А.И. Биопленки Nostoc commune особая микробная сфера // Теоретическая и прикладная экология. — 2007. - № 1. - С. 15-19.

60. Другов Ю.С., Родин А.А. Экологические анализы при разливах нефти и нефтепродуктов. Практическое руководство. М.: Бином, 2007, — 270с.

61. Дубовик И.Е. Влияние нефтепродуктов на почвенные водоросли // Актуальные проблемы современной альгологии. Тез. докл. Черкассы, 1987. -С.163

62. Дубовик И.Е. Водоросли эродированных почв и альгологическая оценка почвозащитных мероприятий. Уфа: Изд.-во БашГУ, 1995. 156 с.

63. Дума В.М. Как не вылететь в трубу // Трубопроводный транспорт нефти. 2006. № 9., - 112с.

64. Елыпина Т. А. Почвенные водоросли как индикаторы некоторых видов техногенного загрязнения почвы (на примере загрязнений, связанных с нефтедобычей). Автореф. дисс.канд. биол. н. Л.: 1986. 24 с.

65. Емцев В.Т., Селицкая О.В., Алехин В.Г. Новый микробный препарат «Псевдомин» для рекультивации почв, загрязненных нефтепродуктами // Микробиология почв и земледелие. Тез. докл. Всерос. конф. СПб. - 1998. - С. 103.

66. Еремеева С.В. Нефтеокисляющие микроорганизмы природных итехно-генных экосистем аридной зоны. Автореф. дисс.канд. биол. наук.

67. Астрахань: Астрахан. ГТУ, 2000. 24 с.

68. Заварзин Г.А. Становление биосферы // Микробиология. 1997. -Т.66. —№6. - С.725-734.71.3акирова З.Р. Синезеленые водоросли (цианобактерии) антропогенно-нарушенных почв и их консортивные связи. Автореф. дисс. .канд. бисл.н. Уфа, 2006. 16 с.

69. Звягинцев Д.Г. Почва и микроорганизмы. М.: Изд-во МГУ, 1987.256с.

70. Зерщикова Т.А. Изучение качества воды в реке Везелка методом биотестирования с использованием дафний // Успехи современного естествознания. 2004. -№11.- С. 109.

71. Зименко Т. Г., Картыжова JI. Е. Влияние нефтяного загрязнения на биологическую активность дерново-подзолистой легкосуглинистой почвы // Вестн. АН БССР. Сер. биол. наук. 1986. - № 6. - С. 52-55.

72. Зимонина Н.М. Почвенные водоросли нефтезагрязненных земель. Киров, 1998.- 170с.

73. Иларионов С.А. Экологические аспекты восстановления нефтезагрязненных почв. Екатеринбург: УрО РАН, 2004. 194 с.

74. Ильина Е.Г. Разработка технологии биоочистки нефтяных и буровых отходов. Дисс. канд. тех. наук. Уфа.: УГНТУ, 2002. - 181 с.

75. Инструкция по применению сухого бактериального препарата «Путидойл». М., 1991. - 9 с.

76. Исмаилов И. М. Микробиология и ферментативная активность нефтезагрязненных почв // Восстановление нефтезагрязненных почвенных экосистем. М.: Наука, 1988. С. 42-56.

77. Кабиров P.P. Альготестирование и альгоиндикация (методические аспекты, практическое использование). — Уфа: БГПИ, 1995. -125с.

78. Кабиров Р. Р., Минибаев Р. Г. Влияние нефти на почвенные водоросли // Почвоведение. 1982. - № 1. - С. 86-91.

79. Кабиров P.P., Сагитова А.Р., Суханова Н.В. Разработка и использование многокомпонентной тест- системы для оценки токсичности почвенного покрова городской территории// Экология. 1997.— №6. - С. 408-411.

80. Кабиров P.P., Хазипова Р.Х., Хусаинов З.М. Изучение границ устойчивости почвенных водорослей к поверхностно-активным веществам//Альгология. 2000. - Т.10. - №2. - С. 168-173.

81. Кабиров P.P., Шилова И.И. Почвенные водоросли свалок и полигонов твердых бытовых и промышленных отходов в условиях крупного промышленного города // Экология. — 1990. N5. - С.10-18.

82. Кабиров Р. Р., Шилова И. И. Сообщества почвенных водорослей на территории промышленных отвалов// Экология. 1994. - № 2. - С. 82-85.

83. Кавеленова JI.M. О некоторых проблемах использования высших растений в качестве фитоиндикаторов техногенного загрязнения городской среды// Вопросы экологии и охраны природы в лесостепной зонах. Самара: Изд-во Самарск. ун-т. 1999. С. 137-144

84. Кавеленова JI.M. О Перспективах и проблемах использования высших растений в фитоиндикации уровня техногенного загрязнения//

85. Современные проблемы биоиндикации и биомониторинга: Тез. докл. XI межд. симп. по биоиндикаторам. Сыктывкар, 2001. С. 390.

86. Кайгородова С.Ю. Биологическая активность нефтезагрязненных болотных почв Тюменской области // Тез. IV Научн. конф. Ин-та биологии. Сыктывкар, 1996.-С.56.

87. Капелькина Л.П., Бакина Л.Г., Бардина Т.В., Чугунова М.В., Маячкина Н.В. Исследование загрязненных почв методами биотестирования // Современные проблемы загрязнения почв. Сб. тез. междун. научн. конф. М.: МГУ, 2004. С. 353-355.

88. Капотина Л.Н., Морщакова Г.Н. Биологическая деструкция нефти и нефтепродуктов, загрязняющих почву и воду // Биотехнология. — 1998. — №1. — С. 85-92.

89. Квасников Е. И., Клюшникова Т. М. Микроорганизмы — деструкторы нефти в водных бассейнах. Киев: Наукова думка, 1981. 132 с.

90. Квасников Е.И., Клюшникова Т.М., Куберская С.Л., Касаткина Т.П., Смирнова Г.Ф., Сумневич В.Г. Опыт использования ассоциаций микроорганизмов для очистки подслажвых вод от нефтепродуктов. // Микробиол. ж. 1982. - № 2. - С. 75-77.

91. Киреева Н. А. Микробиологические процессы в нефтезагрязненных почвах. Уфа: Башк. гос. ун-т, 1994. 172 с.

92. Киреева Н. А., Новоселова Е. И., Хазиев Ф. X. Ферменты азотного обмена в нефтезагрязненных почвах // Изв. АН. Сер. биол. 1997. - № 6. -С. 735-759.

93. Киреева Н. А., Рафикова Г. Ф. Разнообразие спорообразующих микроорганизмов в условиях нефтяного загрязнения почвы //

94. Микроорганизмы и биосфера. Тез. докл. Междунар. научн. конф. Москва, 2007.-С. 58-59.

95. Киреева Н.А. Использование биогумуса для ускорения деструкции нефти в почве // Биотехнология. 1995. №5-6. - С.32-35.

96. Киреева Н.А. Консортивные связи микроорганизме в высших растений в нефтезагрязненных почве // Экол. и охрана окруж. среды: Тез. докл. 2 Междунар. науч.-практ. конф., Ч.З. Пермь, 1996. - С.16-17.

97. Киреева Н.А., Бакаева М.Д., Тарасенко Е.М., Галимзянова Н.Ф., Новоселова Е.И. Снижение фитотоксичности серой лесной почвы при биорекультивировации // Агрохимия. 2003. - №2. — С. 50-55.

98. Киреева Н.А., Водопьянов В.А., Мифтахова A.M. Биологическая активность нефтезагрязненных почв. Уфа. Тилем, 2001. 376 с.

99. Киреева Н.А., Кабиров Т.Р., Онегова Т.С., Жданова Н.В. Биологическая очистка нефтезагрязненных природных объектов с использованием целлюлозосодержащих субстратов // Нефтяное хозяйство. -2007.-№6.-С. 98-101.

100. Киреева Н.А., Кузяхметов Г.Г. Способы ускорения биологического разрушения нефтяных углеводородов в почве // Науч. Конф. По прогр. «Университеты России». Тез. докл. — Уфа, 1995. С. 61-62.

101. Киреева Н.А., Тарасенко Е.М., Шамаева А.А., Новоселова Е.И. Влияние загрязнения почв нефтью и нефтепродуктами на активность липазы // Почвоведение. 2006. - №8. - С.1005-1011.

102. Киреева Н.А., Тишкина Е.И. Ускорение биодеструкции нефтяных загрязнений при рекультивации почв // Актуальные вопросы биотехнологии. Межвуз. сб. Уфа: Изд-во БГУ, 1990. С. 36-44.

103. Ковриго В.П., Кауричев И.С., Бурлакова JI.M. Почвоведение с основами геологии. — М.: Колос, 2000. 416 с.

104. Кондакова Л.В., Домрачева Л.И. Флора Вятского края. Часть 2. Водоросли. Киров: ОАО «Кировская областная типография», 2007. 192с.

105. Короленко П.И. Основные понятия и термины биологического мониторинга в порядке обсуждения // Гидрохимические материалы. 1984. — Т. 89.-С. 94-105.

106. Коронелли Т.В. Микробиологическая деградация углеводородов и ее экологические последствия // Науч. докл. высш. шк. Биол. науки. 1982. - -№ 3. - С.5-13.

107. Коронелли Т.В. Физиология, биохимия и экология углеводородокисляющих микроорганизмов // Мониторинг нефти и нефтепродуктов в окружающей среде: Тез. докл. Всес. совещ. Уфа, 1985. — С. 58-61.

108. Кузяхметов Г.Г. Продуктивность альгоценозов в освоенных зональных почвах степи и лесостепи // Почвоведение. 1998. — №4. — С.442-452.

109. Кузяхметов Г.Г. Водоросли зональных почв степи и лесостепи: Монография / под ред. Б.М. Миркина. Уфа: РИО БашГУ, 2006. - 286 с.

110. Кузяхметов Г.Г., Дубовик И.Е. Методы изучения почвенных водорослей: Учебное пособие. Уфа, 2001. 60с.

111. Купревич В. Ф., Щербакова Т. А. Почвенная энзимология. Минск: Наука и техника, 1966. — 275 с.

112. Кураков А.В. Методы выделения и характеристики комплексов микроскопических грибов наземных экосистем. М.: МАКС Пресс, 2001. 92 с.

113. Кураков А.В., Ильинский В.В., Котелевцев С.В., Садчиков А.П. Биоиндикация и реабилитация экосистем при нефтяных загрязнениях. М.: Графикон, 2006. - 335 с.

114. Латыпова В.З., Селивановская С.Ю. Некоторые аспекты нормирования качества и утилизации осадков сточных вод // Эколог, химия. 1999.-№2.-С. 121-132.

115. Лизунов А.Б. Деструкция тяжелых нефтепродуктов в почве иммобилизированными углеводородокисляющими микроорганизмами: Автореф. . .канд. тех. наук. СПб, 2002. - 20с.

116. Логинов О.Н., Силищев Н.Н., Бойко Т.Ф., Галимзянова Н.Ф. Биотехнологические методы очистки окружающей среды от техногенных загрязнений. Уфа: Гос. изд-во научно-технической литературы «Реактив», 2000. 100 с.

117. Логинов О.Н., Нуртдинова Л.А., Бойко Т.Ф., Четвериков С.П., Силищев Н.Н. Оценка эффективности нового биопрепарата «Ленойл» для ремедиации нефтезагрязненных почв // Биотехнология. — 2004. № 1. — С. 77-82.

118. Маковский В. М. Влияние нефтезагрязнений на состояние болотных экосистем в Сургутском Приобъе // Экология нефтегазоносного комплекса. М., 1988. С. 203-206.

119. Матвиенко О. М., Догадина Т. В. Жовтозелеш водорост1 -Xanthophyta // Визначник прюноводних водоростей УРСР. Киев. 1978. -Вип. 10.-512с.

120. Медведева Е.И. Биологическая активность нефтезагрязненных почв в условиях Среднего Поволжья. Автореф. дис. . канд. биол. н., Тольятти, 2002.- 18с.

121. Методы почвенной микробиологии и биохимии / Под. ред. Д. Г. Звягинцева. М.: МГУ, 1991. - 304с.

122. Минибаев Р.Г., Шкундина Ф.Б., Дубовик И.Е., Шарипова М.Ю. Краткий определитель водорослей Башкортостана. ч. 1. Уфа: РИО БашГУ, 2003.- 148 с.

123. Мифтахова A.M. Комплекс микроскопических грибов в условиях нефтяного загрязнения // Тез. 14-ой Комиреспублик. молодежи, научн. конф. Т.2. Сыктывкар, 2000. С.144-145.

124. Мищенко В. С, Ильницкий А. П. О синтезе канцерогенного углеводорода бенз/а/пирена некоторыми злаковыми растениями // Синтез, метаболизм и роль углеводородов в живых системах. Пущино, 1977. С. 1921.

125. Муратова А.Ю., Турковская О.В. // Прикладная биохимия и микробиология. -2001.-№2.-С. 175-180.

126. Мурыгина В.П., Аринбасаров М.У., Калюжный С.В. // Экология и промышленность России. 19996. -№8. - С.16-19.

127. Невзоров В. М. О вредном воздействии нефти на почву // Изв. вузов. Лесн. журн. 1976. - № 2. - С. 164-165.

128. Никифорова Е. М., Солнцева Н. П., Кабанова Н. В. Геохимическая трансформация пахотных дерново-подзолистых почв под воздействием нефти // Влияние промышленных предприятий на окружающую среду. М.: Наука, 1987.-С. 241-253.

129. Новиков Ю.В., Ехина Р.С., Тулакин А.В. и др. Гигиеническая оценка препарата «Путидойл» и его влияние на санитарное состояние водных объектов // Гигиена и санитария. 1991. - №7. — С. 16-18.

130. Оборин А. А., Каданникова И. Г., Масливец Т. А. и др. Биологическая рекультивация нефтезагрязненных земель в условиях таежной зоны // Восстановление нефтезагрязненных почвенных экосистем: Сб. науч. тр. М.: Наука, 19886. С. 140-159.

131. Панов Г.Е., Петряшин Л.Ф., Лысяный Г.Н. Охрана окружающей среды на предприятиях нефтяной и газовой промышленности. М.: Недра, 1986.-244 с.

132. Патент РФ №2198748. Онегова Т.С., Киреева Н.А., Жданова Н.В. и др. Способ очистки почвы и водоемов от нефтяных загрязнений. МПК 71309С1/10, 2003. Бюлл. №5.

133. Патент РФ №2053205. Белоконин М.Д., Рогозина Е.А., Свечинина P.M. и др. Биопрепарат для очистки почвы и воды от нефти и нефтепродуктов // Бюлл. — 1996. №3.

134. Патент РФ № 2232806. Консорциум штаммов Bacillus brevis и Arthrobacter sp., используемый для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов / О.Н. Логинов, Н.Н. Силищев, Р.Н. Чураев, Т.Ф. Бойко и др. Б.И. // Бюлл. 2004. - № 20.

135. Пат. РФ №1805097. Ягафарова Г.Г., Скворцова И.Н. и др. Штамм Rhodococcus erythropolis AC 1339Д, используемый для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов // Бюлл. - 1993. — №12. - С. 52.

136. Патент РФ №2245918. Штамм бактерий Azotobacter vinelandii для борьбы с болезнями пшеницы, вызываемых грибными фитопатогенами, и повышения урожая / О.Н. Логинов, Е.Г. Пугачева, Н.Н. Силищев, Т.Ф. Бойко, Н.Ф. Галимзянова // Бюлл. 2004, - №6.

137. Патент РФ 2006. № 2279472С2. Онегова Т.С., Киреева Н.А., Жданова Н.В. и др. Способ очистки почвы от нефтяных загрязнений // Бюлл. 2006. - № 19.

138. Патин С.А. Биотестирование как метод изучения и предотвращения загрязнения водоемов // Биотестирование природных и сточных вод. М.: Наука, 1981; С. 7-16.

139. Патова Е.Н. Cyanophyta в водоемах и почвах восточноевропейских тундр//Ботанический журнал. — 2004. Т. 89. — №9 — С. 1403-1419.

140. Патова Е.Н., Гецен М.В., Сивков М.Д. Nostoc commune (Cyanophyta) в тундрах Российского сектора Арктики // Ботанический журнал. 2000. - Т. 85.-№1.-С. 71-79.

141. Пиковский Ю. И. Геохимические особенности техногенных потоков в районах нефтедобычи // Техногенные потоки вещества в ландшафтах и состояние экосистем. М.: Наука, 1981. — С. 134-148.

142. Пиковский Ю. И. Трансформация техногенных потоков нефти в почвенных экосистемах // Восстановление нефтезагрязненных почвенных экосистем. М.: Наука, 1988. С. 7-22.

143. Пиковский Ю.И. Природные и техногенные потоки углеводородов в окружающей среде. М.: Изд-во МГУ, 1993. 207с.

144. Плешакова Е. В., Дубровская Е. В., Турковская О. В. Интродукция нефтеокисляющих микроорганизмов в загрязненную почву: проблемы и перспективы // Микроорганизмы и биосфера. Тез. докл. Междун. научн. конф. М., 2007. С. 97-98.

145. Полянская JI.M. Звягинцев Д.Г. Содержание и структура микробной биомассы как показатель экологического состояния почв // Почвоведение. 2005. - №6. - С.706-714

146. Посттехногенные экосистемы Севера. Спб.: Наука, 2002. 159 с.

147. Почвы Башкортостана. Т.2: Воспроизводство плодородия: зонально-экологические аспекты / Ф.Х. Хазиев, Г.А. Кольцова, Р.Я. Рамазанов и др. Под ред. Ф.Х. Хазиева. Уфа: Гилем, 1997. 328 с.

148. Рейвн П., Эверт Р., Айкхорн С. Современная ботаника. В 2-х т. Пер. с англ. М.: Мир, 1990 Т.2. - 344 с.

149. Реймерс Н.Ф. Природопользование. Словарь-спавочник. М.:Мысль, 1990.-637с.

150. Рыбак В.К., Овчарова Е.П., Коваль Э.З. Микофлора почвы, загрязненной нефтью // Микробиол. ж. 1984 - Т. 46. - № 4. - С. 29-33.

151. Савельев И.Б., Селях И.О. Экспериментальное изучение действия ионов тяжелых металлов на цианобактерии//Физиология растений и экология на рубеже веков: Матер. Всеросс. научно-практич. конф. Ярославль, 2003. С. 126-127.

152. Самосова С.М., Фильченкова В.И., Мусина Г.Х., Кипрова P.P., Губайдуллина Т.С. Изыскание путей стимуляции биодеградации нефти в почве // Микробиологические методы борьбы с загрязнением окружающей среды: Тез. докл. Пущино, 1979. С. 8-10.

153. Самосова С.М.,.Фильченкова В.И., Кипрова P.P., Мусин; Г.Х., Губайдуллина Т.С, Махмутова Ф.Б. Микрофлора черноземных почв и ееактивность при загрязнении нефтью. Казань, 1983 ВИНИТИ-№ 6073 83. -Деп.- 19 с.

154. Сидоров Д.Г., Борзенко И.А., Ибатуллин P.P. и др. Полевой эксперимент по очистке почвы от нефтяного загрязнения с использованием углеводородокисяющих микроорганизмов // Прикладная биохимия и микробиология. 1997. - Т.ЗЗ. - №5. - С. 497-502.

155. Славнина Т. П., Кахаткина М. И., Середина В. Я., ИзверскаяЛ. А. Загрязнение нефтью и нефтепродуктами // Основы использования и охраны почв Западной Сибири. Новосибирск: Наука, 1989. С. 186-211.

156. Слободина Н.П. Изучение специфики альгофлоры нефтезагрязненных территорий // Актуальные экологические проблемы Республики Татарстан. Матер. 4-ой республ. научн. конф. Казань: Новое Знание, 2000. С.79

157. Смирнова Е.В. Транспорт и распределение жидких углеводородов в выщелоченном черноземе: Автореф. дисс. . канд. биол. наук. Казань, 2003. 24 с.

158. Солнцева Н. П. Добыча нефти и геохимия природных ландшафтов М.: Изд-во МГУ, 1998.-376 с.

159. Солнцева Н. П. Общие закономерности трансформации почв в районах добычи нефти (формы проявления, основные процессы, модели) // Восстановление нефтезагрязненных почвенных экосистем. М., 1988. — С. 2342.

160. Солнцева Н. П., Пиковский Ю. И. Особенности загрязнения почв в районах нефтедобычи // Миграция загрязняющих веществ в почвах и сопредельных средах. Л.: Гидрометеоиздат, 1980. С. 76-82.

161. Солнцева Н.П., Пиковский Ю.И., Никифорова Е.М. и др. Проблемы загрязнения почв нефтью и нефтепродуктами: геохимия, экология, рекультивация // Докл. Симпоз. VII делегат. Съезда ВОП. Ташкент, 9-13 сент. 1985 г. С.

162. Сопрунова О.Б. Цианобактериальные ассоциации перспективные агенты реабилитации техногенных экосистем. Автореф. дисс. докт. биол. н. М.: МГУ, 2005. 44 с.

163. Стабникова Е.В. Скрининг носителя для бактерий, очищающих почву от нефтяных загрязнений // Мшробюлопческш журн. 1998. - №2. — С. 85-90.

164. Стабникова Е.В., Селезнева М.В., Дульгеров А.Н., Иванов В.Н. Применение препарата «Лестан» для очистки почвы от углеводородов нефти // Прикладная биохимия и микробиология. 1996. - Т. 32. - №2. - С. 219223.

165. Сулейманов P.P. Использование различных биогенных добавок для рекультивации нефтезагрязненных почв // Освоение Севера и проблемы природовосстановления. Тез. V Междунар. конф. 5-8 июня 2001, Сыктывкар,2001. С.235-237.

166. Таранова Л.В., Морозова Т.Н. Микробиологическое окисление нефти в присутствии бакпрепарата «Путидойл» // Нефть и газ Западной Сибири. Тез. докл. Междунар. научн. техн. конф. Тюмень, 1996. - С. 125.

167. Тарасенко Е.М., Женин Р.И. Микробиологическая трансформация нефти в почве // Тез. 14-ой Комиреспубл. молодежи, научн. конф. Т. II, Сыктывкар, 2000. С.221.

168. Терехова В.А. Микромицеты в экологической оценке водных наземных экосистем. М.: Наука, 2007. 215 с.

169. Тутова Э.Г., Куц П.С. Мушка продуктов микробиологического синтеза. М.: Агропромиздат, 1987. — 303 с.

170. Фердман В.М. Комплексная технология утилизации промысловых нефтешламов. Автореф. дисс.канд.тех.н. Уфа, 2002. 23с.

171. Фильченкова В.И. Биологическая активность карбонатного чернозема при нефтяном загрязнении // Защита растений и охрана окружающей среды в Татарской АССР. Казань, 1982. -С. 168-170.

172. Фокина А.И. Влияние свинца на структуру фототрофных микробных комплексов. Автореф. дисс. . канд. биол. наук. Сыктывкар: ИБ КНЦ УрО РАН, 2008. 23 с.

173. Фомин Г.Р., Фомин А.Г. Почва. Контроль качества и экологической безопасности по международным стандартам. Справочник. М.: Изд-во «Протектор», 2001. 304с.

174. Хазиев Ф. X. Ферментативная активность почв. Методическое пособие. М.: Наука, 1976. 179 с.

175. Хазиев Ф. X. Системно-экологический анализ ферментативной активности почв. М.: Наука, 1982. 203 с.

176. Хазиев Ф. X. Методы почвенной энзимологии М.: Наука, 2005.252 с.

177. Хазиев Ф. X., Фахтиев Ф. Ф. Изменение биохимических процессов в почвах при нефтяном загрязнении и активация разложения нефти//Агрохимия. 1981.-Т.1.-№10.-С. 102-111.

178. Ханисламова Г.М. Побочное воздействие пиретроидов ш почвообитающих микроартропод // Химия, применение и механизм действш инсектицидов и акарицидов. Тез. докл. Всес. совещ. М., 1990. С. 79.

179. Ханисламова Г.М. Использование коллембол для лабораторной оценка токсичности загрязняющих почву соединений // Проблемы окружающей Средь на Урале. Межвузовск. сб. Уфа: Изд-во БГПИ, 1995. С. 152-157.

180. Ханисламова Г.М., Кабиров P.P., Хазипова Р.Х. Поверхностно-активные вещества в наземных экосистемах. Уфа: Изд-во БНЦ УрО АН СССР, 1988. 143с.

181. Химическая энциклопедия, М.: Большая Российская энциклопедия, 1992. -Т. 3. 639 с.

182. Ходаков И.В., Дятлов С.Е., Петросян А.Г. Использование ранних стадий эмбрионального развития черноморской мидии Mytilus galloprovincialis Lam для биотестирования природных и сточных вод // Гидробиол. журн. 1996. - Т. 32, - № 5. - С. 67-77.

183. Чугунов В.А., Ермоленко З.М., Жиглецова С.К. и др. Создание и применение жидкого препарата на основе ассоциации нефтеокисляющих бактерии // Прикладная биохимия и микробиология. 2000. - Т. 36. - №6. -С. 666-671.

184. Чугунов В.А., Холоденко В.П., Кобелев B.C. и др. Разработка и испытания жидких препаратов «Экойл» на основе нефтеокисляющих бактерий // Новые направления биотехнологии Тез. докл. 6-ой конф. ГосНИИ прикладной микробиологии. М., 1994. — С.56.

185. Шабад JI. М. О циркуляции канцерогенов в окружающей среде. М.: Медицина, 1973.-357 с.

186. Шилова И. И. Биологическая рекультивация нефтезагрязненных земель в условиях таежной зоны // Восстановление нефтезагрязненных почвенных экосистем М.: Наука, 1988. С. 159-167.

187. Шилова И. И. Первичные сукцессии растительности на техногенных песчаных обнажениях в нефтегазодобывающих районах Среднего Приобья // Экология. 1977. - № 6. - С. 5-15.

188. Шипилин Н.Н. Техногенно загрязненные почвы пашни и их биоиндикация. Автореф. дисс.канд. с-х. н. Барнаул, 1996. 20 с.

189. Шмаль Г. Запах нефти пока не очень манит // Мировая энергетика. 2007. - №12. - С. 10-12.

190. Штина Э.А., Голлербах М.М. Экология почвенных водорослей. М.: Наука, 1976.-144 с.

191. Штина Э.А., Зенова Г.М. Почвенные водоросли: Учебное пособие для студентов биологического и факультета почвоведения университета. М.: Изд-во МГУ, 1990. 78 с.

192. Штина Э.А., Зенова Г.М., Манучарова Н.А. Альгологический мониторинг почв // Почвоведение. 1998. - № 12. - С. 1449-1461.

193. Ягафарова Г. Г. Микроорганизмы-деструкторы нефти и нефтепродуктов // Охрана от коррозии и защита окружающей среды. 1996. - №9. - С. 11-12.

194. Ягафарова Г.Г., Хлесткин Р.Н., Барахнина В.Б. Испытания биопрепарата «Родотрин» для ликвидации нефтяных загрязнений на территории Татарстана // Нефтехимия и нефтепереработка. 1998. - №7 - С. 21-23.

195. Янкевич М.И., Квитко К.В. Биоремедиация нефтезагрязненных водоемов // Экология и промышленность России. 1998. - Октябрь. - С. 2126.

196. Янкевич М.И., Хадеева В.В., Лизунов А.В. Биоремедиация природных и промышленных территорий с применением нефтеокисляющих препаратов // Микробиология почв и земледелие Тез. докл. Всерос. конф. — СПб., 1998.- 133 с.

197. Яшвили Н.Н., Берадзе И.А., Думбадзе Т.К., Мардалейшвили Р.К., Кобахидзе Н.В. Влияние загрязнения нефтью и нефтепродуктами на биологическую активность почв Колхидской низменности // Изв. АН ГССР. Сер. биол.- 1982.-Т.8.-№6.-С.413-418.

198. Alexander, S.K., Webb, J.W. Oil in Salt Marsh: What Have WeLearned? // Proceedings of the Fourth Coastal, Marsh and Estuary Management Symposium, Louisiana State University, 1985. P. 49.

199. Allard A.S., Neilson A.H. Bioremediation of organic waste sites: a critical review of microbiological aspects // Int. Biodeterioration and Biodegradation. 1997. V.39. - P. 253-285

200. April W., Sims R. C. Evaluation of the use of prairie grasses for stimulating polycyclic aromatic hydrocarbon treatment in soil // Chemosfere. -1990.-V. 20.-P. 253-265.

201. Atlas R.M. Microbial degradation of petroleum hydrocarbons: an environmental perspective // Microbiological Reviews. 1981. - V. 45. - P. 180209.

202. Ayed L., Assas N.,. Sayadi S, Hamdi M. Involvement of lignin peroxidase in the decolorization of black olive mill wastewaters by Geotrichum candidum II Lett. Appl. Microbiol. 2004. - V.40. - P. 7-11.

203. Baldrian P. Interactions of heavy metals with white-rot fungi// Enzyme Microb. Technol. 2003. - V.32 - P. 78-91.

204. Bar-Ness R., Rosenberg M. Putative role of 70kda surface protein in mediating cell surface hydrophobicity of Serratia marcescens II J. Gen. Microbiol. 1989.-V. 135.-P. 277.

205. Beastall S., Hughes D.E. Microbial aspects of the breakdown of crude oil in the environment // J. Appl. Chem. and Biotechnol. 1972. - V. 22. - N7. -P. 877-878.

206. Benoit T. G. Wiggers R. J. Hydrocarbon degrading bacteria at Oil Springs, Texas Dept. of biol., SFASU. 2004.

207. Bierkens J., Klein G., Corbisier P. et al. Comparative sensitivity of 20 bioassays for soil quality 11 Chemosphere. 1998. - V. 37. - P. 2935-2947.

208. Bo Yu, Ping Xu, Quan Shi, Cuiqing Ma Deep Desulfurization of Diesel Oil and Crude Oils by a Newly Isolated Rhodococcus erythropolis Strain //Appl. Environ Microbiol. 2006. - V. 72(1). - P.54-58.

209. Bokn T.L., Moy F.E., Murray S.N. Long-term effects of the water-accommodated fraction (WAF) of diesel oil on rocky shore populations maintained in experimental mesocosms // Botanica Marina, 1993. - V. 36. - P. 313-319.

210. Booth G.H. Microbial corrosion. London: Mills and Broon Ltd., 1971,250p.

211. Bouchez Т., Patureau D., Dabert P., Juretschko S., Dore J., Delegenes P., Moletta R., Wagner M. Ecological study of bioaugmentation failure //Environ. Microbiol. 2000. - V. 2. - P. 179-190.

212. Burns K.A., Teal J.M., The West Falmouth Oil Spill:Hydrocarbons in the salt marsh ecosystem // Estuarine and Coastal Marine Science . 1979. - V. 8. -P. 349.

213. Cheesbrough Т. M., Kolattukudy P. E. Microsomal preparation from an animal tissue catalyzes release of carbon monoxide from a fatty aldehyde to generate an alkane // J. Biol. 1988. - V. 263. - P. 2738-2743.

214. Chen J., Henderson G., Grimm С. С et al. Termites fumigate their nests with naphthalene // Nature. 1998. - V. 392. - P. 558-559.

215. Col well R.R., J.D. Walker. Ecological aspects of microbial degradation of petroleum in marine environment // Crit. Rev. Microbiol. 1977. -V. 5.-P. 423-445.

216. Daniel D., David K., Kenneth B. Biotransformation of Hg(II) by Cyanobacteria //Appl. Environ Microbiol. 2007. - V.73(l). - P. 243-249

217. D'Annibale, A. Rosetto F., Leonardi V., Federici F., and Petruccioli M. Role of Autochthonous Filamentous Fungi in Bioremediation of a Soil Historically Contaminated with Aromatic Hydrocarbons // Appl. Environ Microbiol. 2 006. - V. 72(1). - P. 28-36.

218. De Rosa S., Milone A., Kujumgiev A., Stefanov K., Nechev I., Popov S. Metabolites from a marine bacterium Pseudomonas/Alteromonas, associated with the sponge Dysidea fragilis // Сотр. Biochem. Physiol. B. 2000. - V. 126. -P. 391-396.

219. DeLaune R.D., Gambrel R.P., Pardue J.H., Patrick Jr, W.H. Fate of petroleum hydrocarbons and toxic organics in Louisiana coastal environments // Estuaries. 1990. - V. 13. - P. 72.

220. Donnelly J.A., Mikucki W. Used Motor oil Digestion by soil Microorganisms // Abstr. Annu. Meet. Amer. Soc. Microbiol. Washington, D.C. -1987.-P. 288.

221. Dresback K., Ghoshal D., Goyal A. Phycoremediation of Trichloroethylene (TCE). Laboratory of Plant Physiology, Biochemistry and Biotechnology, Department of Biology University of Minnesota Duluth, Duluth, MN 55812, USA.

222. DuranN., Esposito E. Potential applications of oxidative enzymes and phenoloxidase-like compounds in wastewater and soil treatment //Appl. Catal. B. 2000. - V. 28.-P. 83-89.

223. Ellis R., Adams R.S. Contamination of soils by petroleum hydrocarbons // Adv. Argon. 1961. - V. 13. - P. 197.

224. Essa A. M. M., Macaskie L. E., Brown N. L. Mechanisms of mercury bioremediation // Biochem. Soc. Trans. 2002. - V. 30. - P. 672-674.

225. Ettl H., Gartner G. Syllabus der Boden-, Luft- und Flechtenalgen. -Stutgart: Jena, Jena New-York: G. Fischer, 1995. - 680s.

226. Farrington, J.W. Oil pollution: A decade of research and monitoring // Oceanus. 1985. - V. 28. - P. 2.

227. Fava, F., Bertin L. Use of exogenous specialised bacteria in the biological detoxification of a dump site-polychlorobiphenyl-contaminated soil in slurry phase conditions// Biotechnol. Bioeng. 1999. V. 64. - P. 240-249.

228. Faw G.M., Holloway S.L., Sizemore R.C. The bacterial of an active oil field in the Northwestern Gulf of Mexico // Abstr. 79 th Annu. Meet. Amer. Soc. Microbiol. Loa Angeles Cal. 1979. Wash. (D.C.). 1979. - P. 192.

229. Fedorak P. M., Westlake D. W. S. 1983. Microbial degradation of organic sulfur compounds in Prudhoe Bay crude oil. Can. J. Microbiol. 29:291296.

230. Fedorak P. M., Westlake D. W. S. Degradation of sulfur heterocycles in Prudhoe Bay crude oil by soil enrichments // Water Air Soil Pollut. -1984. -V. 21.-P. 225-230.

231. Field J. A., E. de Jong, Costa G. F., J. A. M. de Bont. Screening of ligninolytic fungi applicable to biodegradation of xenobiotics // Trends Biotechnol. 1993. - V. 11. - P. 44-49.

232. Floodgate G. The fate of petroleum in marine ecosystems. In R.M. Atlas (ed.) Petroleum Microbiology, MacMillan Publishing Co, New York. -1984.-P. 355-397.

233. Forde S.E. Modelling the effects of an oil spill on open populations of intertidal invertabrates // J. Appl. Ecol. 2002. - V. 39. - P. 595-604.

234. Fritsche W., Hofrichter M. Aerobic Degradation by Microorganisms. Jena, Germany. 2000. - 134 p.

235. Fukuda H., Ogawa Т., Tanase S. Ethylene prodaction by microorganisms // Adv. Microb. Physiol. 1993. - V. 35. - P. 275—306.

236. Gajbhiye S-N., Mustafa S., Mehta-Pratik, Nair-Vijayalakshmi R. Assessment of biological characteristics on coastal environment of Murud

237. Maharashtra) during the oil spill I I Indian Journal of Marine Sciences. 1993. -V. 24 (4).-P. 196-202.

238. Gibson D.T. Microbial degradation of organic compounds. New York: Marcel Dekker. 1984. - P. 125-126.

239. Gray K. A., Mrachko G. Т., Squires С. H. Biodesulfurization of fossil fuels // Cuit. Opin. Microbiol. 2003. - V. 6. - P. 229-235.

240. Gupta N., Roychoudhury P. K., Deb J. K. Biotechnology of desulfurization of diesel: prospects and challenges //Appl. Microbiol. Biotechnol.- 2005. — V. 66.-P. 356-366.

241. Hada H.S., Sizemore R. K. Incidence of plasmids in marine Vibrio spp. Isolated from an oil field in the northwestern Gulf of Mexico //Appl. Environ. Microbiol. 1981.-V. 30.-P. 982-987.

242. Hangaran K., Vivekanamban L. Effect of oil pollution on soil respiration and growth of Vigna mungo (L.) hepper 11 Sci. Total Environ. 1992. -V. 116.-P. 187—194.

243. Harayama S, Kishira H, Kasai Y, Shutsubo K. Petroleum biodegradation in marine environments // J Mol .Microbiol. Biotechnol. 1999, -V. l.-P. 63-70.

244. Hood M.A., Bishop W.S., Myers S.P., Whelan Т. Ill Microbial indicators of oil-rich salt marsh sediment // Appl. Microbiol. 1975. - V. 30. - P. 982-987.

245. Hutchinson Т. C, Freedman W. Effect of crude oil spillls on subarctic boreal forest vegetation near Normans Wells N. W. T// Canad. J. Bot. 1978. - V. 56.-P. 28-34.

246. Hylemon P.B., Harder J. Biotransformation of monoterpenes, bileacids, and other isoprenoids in anaerobic ecosystems // FEMS Microbiol Rev.- 1999, -V. 22. P. 475-488.

247. Jackson J.B.C., Cubit J.D., Keller B.D., Batista V., Burns K., Caffey H.M., Caldwell R.L., Garrity S.D., Getter C.D., Gonzalez C., Guzman H.M., Kauffman K.W., Knap A.H., Levings S.C., Marshall M.J., Steger R., Thompson

248. R.C., Weil E. Ecological effects of a major oil spill on Panamanian coastal marine communities // Science. 1989. - V. 243. - P. 37-44.

249. Jayaraman A., Eartman J.C., Wood Т.К. Problems of oil pollution in South Texas // Appl. Microbiol. Biotechnol. 1997. - V. 47. - P. 62-68.

250. Jen-You Wang, Yun-Peng Chao Immobilization of Cells with Surface-Displayed Chitin-Binding Domain // Appl. Environ. Microbiol. 2006. -V. 72(1).-P. 927-931.

251. John D. O., Hien V. D., Jignesh K., Ngeh L. N., Bigger S. W., Healy M., Jessop R., Dann P. An investigation into the removal of oil from rock utilising magnetic particle technology//Marine Pollution Bulletin. 2007. -V. 54. -Iss. 12.-P. 1958-1961.

252. John W. Farrington, Judith E. McDowell. Tracking the sources and impacts of oil pollution in the marine environment. // Oceanus. 2004. - V. 23. -P. 6.

253. Jordan RE, Payne JR . Fate and weathering of petroleum spills in the marine environment. // Ann. Arbor. Science. 1980. -P.62-64.

254. Jou C. J. G., Lee C. L., Wang H. P., Lee H. Y. Application of granular activated carbon in a microwave energy to treat heavy oil contaminated sand. 5th international conference on marine pollution and exotoxicology. Hong Kong. -2007.-P. 186-192.

255. Juhasz A. L., Naidu R. Bioremediation of high molecular weight polycyclic aromatic hydrocarbons: a review of the microbial degradation of benzoa.pyrene // Int. Biodeterior. Biodegrad. 2000. - V. 45. - P. 57-88.

256. Juhasz A. L., Waller N.3 Lease C., Bentham R., Stewart R. Pilot scale bioremediation of creosote contaminated soil-efficacy of enhanced natural attenuation and bioaugmentation strategies.// Bioremed. J. 2005. - V. 9. - P. 141-157.

257. Juvonen R., Martikalnen E., Schultz E., et al. A battery of toxicity tests as indicators of decontamination in composting oilywaste // Ecotoxicol. Environ. Saf. 2000. - V. 47. - № 2. - P. 156-166.

258. Kapanen A., Itavaara M. Ecotoxicity test for compost application // Ecotoxicol. Environ. Saf. 2001. - V. 49. - P. 1-16.

259. Kayama R. New methods of quantitative representation of the structure of plants communities. IV. On the dominance ratio weighted by the plant weight // Jap. Jorn. Ecol. 1961. - V. 11 -№4. - P.86-89

260. Kordel W., Rombke J. Requirements on physical, chemical and biological testing methods for estimating the quality of soils and soil substrates // J. Soil Sediments. 2001. - V. 1. - P. 98-104.

261. Leahy J.G, Corwell R.R. Microbial Degradation of Hydrocarbons in the Environment // Microbiological Reviews, Sept. 1990. - P. 305-315.

262. Lee E., Banks M. K. Bioremediation of petrolium contaminated soil using vergetation: a microbial study //J. Environ. Sci and Health. 1993. - V. 28. -P. 2187-2198.

263. Li F. L., Xu P., Ma C. Q., Luo L. L., Wang X. S. Deep desulfurization of hydrodesulfurization-treated diesel oil by a facultative thermophilic bacterium Mycobacterium sp. X7B// FEMS Microbiol. Lett. 2003. -V. 223. - P. 301-307

264. Li W., Zhang Y., Wang M. D., Shi Y. Biodesulfurization of dibenzothiophene and other organic sulfur compounds by a newly isolated Microbacterium strain ZD-M2 // FEMS Microbiol. Lett. 2005. - V. 247. - P. 4550.

265. Llanos C. Kjoller A. Changes in the flora of soil fungi following oil waste application // Oikos. 1976. - V. 27. - P. 377-382.

266. Lougheed L. W., Edgar G. J. Snell H. L. Biological Impacts of the Jessica Oil Spill on the Galapagos Environment: Preliminary Report. Charles Darwin Foundation, Puerto Ayora, Galapagos, Ecuador. 2001. - 32 p.

267. Lounachan T. S. Low Temperature Mineralization of Crude oil in soil // J. Environ. Qual. - 1978. - V. 7. - № 4. - P. 494-500.

268. Marc A. Mills a,c,l, James S. Bonner, Cheryl A. Page b,2, Robin L. Autenrieth Evaluation of bioremediation strategies of a controlled oil release in a wetland// Marine Pollution Bulletin . 2004. -V. 49. - P. 425-435.

269. Margesin R., Zimmerbauer A., Schinner F. Monitoring of bioremediation by soil biological activities // Chemosphere. 1999. - No. 13. - P. 340-345.

270. Markwiese J., Ryiu R., Hooten M., Michael D., Hlohowskyj I. Toxicity bioassayas for ecological risk assessment in arid and semiarid ecosystems // Rev. Environ. Contam. Toxicol. 2001. - V. 168. - P. 43-98.

271. Matsui Т., Опака Т., Maruhashi К., Kurane R. Benzob.thiophene desulfurization by Gordonia mbropertinctus strain T08/I Appl. Microbiol. Biotechnol. 2001. - V. 57. - P. 212-215.

272. McGill W.B., Rowell M.J. Determination of oil content of oil contaminated soil // Sci. Total. Environ. 1980. - V.l 4. - No. 3. - P. 245-253.

273. McGuinness K.A. Effects of oil spills on macroinvertebrates of saltmarshes and mangrove forests in Botany Bay, New South Wales, Australia //Journal of Experimental Marine Biology and Ecology. 1990. -V. 142. - P. 121-135.

274. Mendelssohn I.A., Hester M.W., Sasser C. The effect of a Louisiana crude oil discharge from a pipeline break on thevegetation of a southeast Louisiana brackish marsh//Oil and Chemical Pollution. 1990. - V. 7, - P. 1.

275. Methods in biotechnology/ Ed. Bickerstaff G. F. Immobilization of enzymes and cells, Humana Press Inc., Totowa, N.J. 1997. - V. 1. - P. 1-11.

276. Monticello D. J. Biodesulfurization and the upgrading of petroleum distillates// Curr. Opin. Biotechnol. 2000. - V.l 1. - P. 540-546.

277. Monticello D. J. Microbial desulfurization of fossil fuels// Annu. Rev. Microbiol. 1984. - V.39. - P. 371-389.

278. Negash, Lacy, Birch LD, Bachofen R. Microbial production of hydrocarbons //Journal of Experimental Marine Biology and Ecology. 1982. -V. 65. - P.121-138.

279. Niewolak S. Mikrobiologiczne aspecty rekultywacji gleb mvnych skazonych гора naftowa // Wiad ecol. 1978. - V. 24. - No.2. - P. 9-118.

280. Odu G.TJ. The effect of nutrient application and aeration on oil degradation in soil // Environ. Pollut. 1978. - V. 15. - No.3. - P. 235-340.

281. Office of Technology Assessment. Bioremediation for Marine Oil Spills, Congress of the United States, Office of Technology Assessment, Congressional Board of the 102nd Congress. 1990. - 125p.

282. Ogunseitan, O. A., Tedforf E.T., Pacia D., Sirotkin К. M., Sayler G. S. Distribution of plasmids in groundwater/Я. Ind. Microbiol. 1987. - V. 1. - P. 311-317.

283. Olsen, K.D., Sizemore R. K. Effects of an established offshore oil platform on the autochthonous bacterial community. Dev. //J. Ind. Microbiol. -198.-V. 22.-P. 685-694.

284. Palittapongarnpim M, Pokethitiyook P., Suchart Upatham E., Tangbanluekal L. Biodegradation of crude oil by soil microorganisms in the tropic// Biodegradation. 1988. -V. 9. - P. 83-90.

285. Pandeya S.C. On some new concept in phytosociological studies of grassland. II. Community coefficient. (FXC) ICC //Jorn. Indian Bot. Soc. 1961. - V. 40. - No.2.

286. Pierce Jr, R.H., Cundell, A.M., Traxler, R.W. Persistence and biodegradation of spilled residual fuel oil on an estuarine beach//Appl. Microbiology. 1975. -V. 29. - P. 646.

287. Pinholt Y.S., S. Struwe, & A. Kjoller. Microbial changes during oil decomposition in soil. //Holarct. Ecol. 1979. - P. 195-200

288. Pointing, S. В. Feasibility of bioremediation by white-rot fungi // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2001. - V. 57. - P. 20-33.

289. Raymond R., Hydson J.O., Jamison V.W. Oil degradation in soil // Appl. environ. Microbiol. 1976. - V. 31. - No 4. - P. 522-535.

290. Rehm HJ, Reed G. Weinheim: VCH Verlagsgesellschaft. 1988. P.71.99.

291. Reviere J., Gatellier С Evolution de la macroflore dun sol im-pregne d h ydrocarbures // Ann. Agron. 1976. - V. 27. - No 1. - P. 85-99.

292. Rodriguez, J., Ferraz A., Nogueira R. F., Ferrer I., Esposito E., Duran N. Lignin biodegradation by the ascomycete Chrysonilia sitophila. //Appl. Biochem. Biotechnol. 1997. - V. 62. - P. 233-242.

293. Ronnpagel K., Janben E., Ahlf W. Asking for the indicator function of bioassays evaluating soil contamination: are bioassay results reasonable surrogates of effects on soil microflora? // Chemosphere. 1998. - V. 36. - No 6. - P. 12911304.

294. Rosenberg , M. Basic and applied aspects of microbial adhesion at the hydrocarbon: water interface // Crit. Rev. Microbiol. 1991. - V. 18. - P. 159173.

295. Rosenberg , M. Isolation of pigmented and non-pigmented mutants of Serratia marcescens with reduced cell surface hydrophobicity//J. Bacteriol. -1984.-V. 160.-P. 480.

296. Russia Pipeline Oil Spill Study Joint UNDP/World Bank Energy Sector Management Assistance Programme (ESMAP) 203. - 84 p.

297. Saparrat, M. C. N., Martinez M. J., Tournier H. A., Cabello M. N., Arambarri A. M. Production of ligninolytic enzymes by Fusarium solani strains isolated from different substrata // World J. Microbiol. Biotechnol. 2000. - V. 16.-P. 799-803.

298. Sasek, V., Glaser J., Baveye A. The utilization of bioremediation to reduce soil contamination: problems and solution. Kluwer Academic Publishers, Amsterdam, The Netherlands. 2003.

299. Semple K.T., Cain R.B., Schmidt S. Biodegradation of aromatic compounds by microalgae//FEMS Microbiology Lett. 1999. - P. 170.

300. Setti, L., Rossi M., Lanzarini G., Pifferi P. G. The effect of n-alkanes in the degradation of dibenzothiophene and of organic sulfur compounds in heavy oil by a Pseudomonas sp. II Biotechnol. Lett. 1992. - V. 14. - P. 515-520.

301. Speight, J. G. The chemistry and technology of petroleum. Marcel Dekker Inc., New York, N.Y. 1980.

302. Stinner B. R., House G. J. Arthropods and Other Invertebrates in Conservation-Tillage Agriculture // Ann. Rev. Ent. 1990. - V. 35. P. 299-318.

303. Stirling L.F., Watkinson R.J., Higgins I J. Microbial metabolism of alicyclic hydrocarbons: Isolation and properties of cyclo-hexanedegrading bacterium// J. Gen. Microbiol. 1977. -V. 99. - P. 119-125.

304. Study of Recovery from an Oil Spill on the Rocky Intertidal Coast of Washington. Pacific OCS Region, Minerals Management Service, US Department of Interior, Washington // DC. Kinetics Laboratories Inc. (KLI) 1992.

305. Suryanarayanan T.S., Muruganandam V., Srinivasen E. An ecological study of fungi occurring insludge and soil saturated soils of a petroleum refinery // Pollut. Res. 1989. - V. 8. - No 3. - P. 117-121.

306. Tavenas F., Jean P., Leblond P., Lerouel S. The Permeability of Natural Soft Glas. Part II: Permeability Characteristies // Canad. Geotech. J. -1984.-V. 20.-P. 645- 660.

307. Udo E. J., Payemi A. A. The effect of oil pollution of soil on germination, growth and nutrient uptake of com//J. Environ. Quality. 1975. - V. 4. - P. 537-540.

308. Van der Gast, C., A. S. Whiteley, M. Starkey, C. J. Knowles, and I. P. Tompson. Bioaugmentation strategies for remediating mixed chemical effluents// Biotechnol. Prog. 2003. - V.19. - P. 1156-1161.

309. Vanloocke R, Veriinde A-M., Verstraete W. Microbial release of oil fiomsoilcolumns//Eriviron. Sci. andTechnol. 1979. - V. 13. - No 5. - P. 346348.

310. Vinas, M., J. Sabate, M. J. Espuny, and A. M. Solanas. Bacterial community dynamics and polycyclic aromatic hydrocarbon degradation during bioremediation of heavily creosote-contaminated soil //Appl. Environ. Microbiol. 2005. - V. 71. - P. 7008-7018.

311. Vogel, Т. M. Bioaugmentation as a soil bioremediation approach// Curr. Opin. Biotechnol. 1996. - V. 7. - P. 311-316.

312. Widdel and Ralf Rabust Anaerobic biodegradation of saturated and aromatic hydrocarbons Friedrich Widdel and Ralf Rabust // Current Opinion in Biotechnology. 2001. - V. 12. - P. 259-276.

313. Wlodyka-Bergier A. Biodegradacja substancji ropopochodnych zanieczyszczajacych glebe // Wiert., nafta, gas. 1997. - No 14. - P. 145-152.

314. Wood S. E., Gaskin J. F., Langenheim J. H. Loss of monoterpenes from Umbellularia californica leaf litter// Biochem. Syst. Ecol. 1995. - V. 23. -P. 581-591.

315. Yehuda Cohen, Zeev Aizenshtat Oil degradation by cyanobacterial mats//10th Int. Symp. Phototroph. Prokaryotes: Program and Abstr. — Barcelona. -2000.-P. 85.

316. Zhou, Z. Y., and K. Zhang. Development situation and prospect of oil fields in China // Petroleum Expl. Dev. 2004. - V. 31. - P. 84-87.

317. Zimmermann P. R., Chatfield R. В., Fishmann J. et al. Estimates of the production of CO and H2 from oxidation of hydrocarbon emissions from vegetation // Geophys. Res. Lett. 1978. - V. 5. - P. 679-682.

318. ZoBell, C.E. Action of microorganisms on hydrocarbons // Bacterid. Rev. 1946,- V. 10.-P. 1-49.