Генетические основы ассоциации между тимомегалией и семейными заболеваниями опухолевого, аутоиммунного и аллергического характера

Азова, Мадина Мухамедовна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Генетические основы ассоциации между тимомегалией и семейными заболеваниями опухолевого, аутоиммунного и аллергического характера
ВАК РФ 03.00.15, Генетика

Автореферат диссертации по теме "Генетические основы ассоциации между тимомегалией и семейными заболеваниями опухолевого, аутоиммунного и аллергического характера"

На правах рукописи

АЗОВА МАДИНА МУХАМЕДОВНА

ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ АССОЦИАЦИИ МЕЖДУ ТИМОМЕГАЛИЕЙ И СЕМЕЙНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ОПУХОЛЕВОГО, АУТОИММУННОГО И АЛЛЕРГИЧЕСКОГО

ХАРАКТЕРА

03.00.15-генетика

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва 2005

Работа выполнена на кафедре биологии и общей генетики медицинского факультета Российского университета дружбы народов

Научные руководители:

доктор биологических наук, профессор Иткес Александр Веньяминович доктор медицинских наук, профессор Кузьменко Лариса Григорьевна

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор доктор биологических наук

Асанов Алий Юрьевич Голимбет Вера Евгеньевна

Ведущая организация:

Факультет фундаментальной медицины Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова

на заседании диссертационного совета Д 212.203.05 при Российском университете дружбы народов по адресу: 117198, Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 8.

С диссертацией можно ознакомиться в Научной библиотеке Российского университета дружбы народов по адресу. 117198, Москва, ул. Миклухо-Маклая,

Д. 6.

Автореферат разослан " " _ 2005г.

/Г-

часов

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат биологических наук, доцент

О.Б. Гигани

/, С^у % С ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы

Тимомегалия - это явление, сущность которого не выяснена до сих пор. В настоящее время термин «тимомегалия» употребляется для обозначения врожденного или приобретенного варианта увеличения вилочковой железы при сохранении ее нормальной гистоархитектоники. Сведения о частоте встречаемости тимомегалии достаточно противоречивы: по данным различных авторов ее выявляют у 10-50% детей, а наибольшая частота регистрируется у детей первого года жизни [Дадомбаев Е.Т., 1985; Ткаченко, Ю.П., 1986]. Согласно данным, полученным Кузьменко Л.Г. с соавт. [1993], тимомегалия выявляется у 35% детей первых трех месяцев жизни. Однако, до сих пор нет единого мнения среди педиатров, считать ли увеличение тимуса у детей нормой, патологией или пограничным состоянием.

воздействиям. Существует мнение, что внезапная смерть детей с тимомегалией

связана с имеющейся у них тимусно-надпочечниковой недостаточностью [Матковская Т.В., 1986]. Общая недостаточность тимусзависимого иммунитета обусловливает высокую частоту и тяжесть заболеваний, а также резистентность к терапии. [Зайратянц О.В., 1987; Кузьменко Л.Г., 1988; Кузьменко Л.Г., Зайратянц О.В.,1991; Мартынова М.И., Кузьменко Л.Г., Тюрин П.А., 1993].

Согласно литературным данным [Кузьменко Л.Г., 1988; Мартынова М.И., Кузьменко Л.Г., Тюрин П.А., 1993], у детей с увеличенной вилочковой железой,

РОС. НАЦИОНАЛЬНАЯ БИБЛИОТЕКА С-Петербург Г ^Р*

а также у их родственников чаще наблюдаются пороки сердца, ревматизм, онкологические заболевания, туберкулез, хронические заболевания почек. По отягощенности злокачественными новообразованиями семьи детей с тимомегалией конкурируют только с семьями детей с острым лимфоидным лейкозом, а по частоте встречаемости эндокринных заболеваний - с семьями детей с сахарным диабетом. Кроме того, в семьях детей с тимомегалией отмечается ряд аутоиммунных заболеваний таких, как системная красная волчанка, гломерулонефрит, рассеянный склероз, аутоиммунный тиреоидит.

Несмотря на интерес, проявляемый к проблеме, и полученные в последние годы новые сведения по данному вопросу, сущность патологии тимуса остается до конца неясной.

Вместе с тем, известно, что вирусы обладают особым влиянием на организм человека. Продукты вирусных генов могут индуцировать или блокировать различные процессы в зараженной клетке, осуществляя, таким образом, регуляцию пролиферации и апоптоза. Немалую роль играют вирусы, непосредственно поражающие иммунную систему. Следовательно, одним из факторов, вовлеченных в патогенез тимомегалии и ассоциированных с ней нарушений, может выступать вирусная инфекция.

Учитывая все вышеизложенное, целью настоящего исследования явилось изучение молекулярных механизмов, вовлеченных в развитие тимомегалии и ассоциированных с ней заболеваний иммунологического характера.

Для этого нами были поставлены следующие задачи:

1. Выявить наличие наследственной предрасположенности к возникновению тимомегалии, а также возможную ассоциированность тимомегалии с другими заболеваниями, для которых также характерна та или иная степень наследственной предрасположенности.

2. Исследовать корреляцию между тимомегалией и инфицированностью вирусом Эпштейна-Барр и цитомегаловирусом детей раннего возраста.

Научная новизна

♦ Впервые исследована корреляционная структура заболеваний, ассоциированных с тимомегалией.

♦ Впервые выявлена достоверная корреляция между тимомегалией и инфицированностью вирусом Эпштейна-Барр и цитомегаловирусом.

Практическая значимость

Полученные результаты могут быть использованы в практике для прогнозирования развития ассоциированных с тимомегалией заболеваний у детей с увеличенным тимусом и ранней ВЭБ-инфекцией, а также у их родственников.

Апробация работы

Работа выполнена на кафедре биологии и общей генетики (зав. каф. проф. Иткес A.B.) и частично - на кафедре детских болезней (зав. каф. проф. Кузьменко Л.Г.) медицинского факультета Российского университета дружбы народов.

Основные положения работы доложены на XI международном симпозиуме «Эколого-физиологические проблемы адаптации» (Москва, 2003г), III конгрессе педиатров-инфекционистов России (8-10 декабря 2004г), заседании кафедры биологии и общей генетики медицинского факультета РУДН (2004 г.).

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 116 страницах машинописного текста, иллюстрирована 10 рисунками, 8 таблицами, 4 элекгрофореграммами.

Диссертационная работа состоит из введения, трех глав, выводов, приложений, списка литературы. Список цитированной литературы включает 175 источников, из них 69 - на русском и 106 - на других языках.

Публикации

По теме диссертации опубликовано 4 работы.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Оценка величины вилочковой железы у детей

1. Рентгенологический метод

Величина тимуса определялась с помощью кардиотимикоторакального индекса (КТТИ). КТТИ представляет собой частное от деления ширины кардиотимическоЙ тени над уровнем бифуркации трахеи на ширину грудной

клетки над уровнем купола диафрагмы. Величина КТТИ 0,38 и более расценивалась как признак тимомегалии.

2. Ультразвуковое исследование

Методика определения массы тимуса с помощью сопоставления линейных параметров тимуса (ширины, длины и передне-заднего размера), определяемых при ультразвуковом исследовании, с данными аутопсии была разработана Л.Г. Кузьменко с соавт. [2002]. УЗИ тимуса проводилось на аппарате «Aloka - 2000» и использованием конвексного датчика 5 Мг. Масса тимуса определялась по формуле:

М = Ш*ДхП* 0,7, где Ш - ширина тимуса, см; Д - длина тимуса, см; П -передне-задний размер тимуса, см; 0,7 - коэффициент для определения массы тимуса.

Масса тимуса, составлявшая более 21,3 г у детей в возрасте 1-3 мес. и более 34 г у детей в возрасте 4 -24 мес., считалась признаком тимомегалии

Забор материала для молекулярно-генетического исследования

Для выявления наличия вирусной инфекции у детей использовали цельную кровь, взятую в количестве 200 мкл. После забора кровь наносили на хроматографическую бумагу «Ватман 3 ММ» и высушивали.

Получение ДНК-матрицы из периферической крови

Образцы на хроматографической бумаге помещали на 10 минут в 50мМ раствор NaOH, затем переносили на 40 минут в ЮмМ раствор НС1 и на 10 мин в дистиллированную воду. Образцы высушивали. В таком виде материал хранится при комнатной температуре.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

ПЦР проводили с использованием амплификатора ДНК (Progene, Techne). На первом этапе работы при выявлении генома ВЭБ для усиления специфичности нами был применен специальный режим с внутренними праймерами - NESTED ПЦР. Две пары использованных олигонуклеотидных праймеров имели следующую структуру:

EBV-1L (5') AACCGGTTCCAGTCAAGCCT EBV-1R (5') CCCAGTATCCGAAGGACTCA EBV-lnL (5') AGAAGGGGAGCGTGTGTTGT

EBV-lnR (5') GGCTCGTTTTTGACGTCGGC

Реакцию проводили в объеме 50 мкл. Реакционная смесь на 4 пробы содержала: праймеры по 10 мкл, 22 мкл смеси dNTP, 30 мкл буфера 1 Ох, 122 мкл дистиллированной воды и 6 мкл Taq-полимеразы.

В каждую пробирку, содержащую ДНК-матрицу (размер образца 3x4 мм), добавляли по 50 мкл реакционной смеси.

При проведении NESTED ПЦР в качестве внешних праймеров использовались EBV-1L и EBV-1R. Этой паре праймеров соответствовал фрагмент 228 пн. Для второго этапа NESTED ПЦР продукт, полученный после первого этапа, в объеме 5 мкл использовался в качестве матрицы для следующей реакции амплификации, где праймерами служили EBV-lnL и EBV-lnR. При этом длина фрагмента сокращалась до 154 пн.

Программа амплификации состояла из 35 циклов, каждый из которых имел следующие параме1ры:94°С - 40 с, 58°С - 30 с, 72°С - 1 мин 30 с. На втором этапе NESTED ПЦР температура отжига составляла 60°С.

На втором этапе работы геном ВЭБ выявляли с помощью ПЦР с использованием альтернативной пары праймеров (длина получаемого фрагмента составляла 225 пн) и в ином режиме амплификации: 45 циклов, 94°С - 40с, 56°С - 30 с, 71°С - 1мин 30 с.

С целью выявления ЦМВ-инфекции проводилась полимеразная цепная реакция с использованием пары олигонуклеотидных праймеров, имеющих следующую структуру:

CMV L (5') TGTACCTGAGGATAAGCGGG CMV R (5-) CACTGAGGCAAGTTCTGCAA

Программа амплификации состояла из 45 циклов, 94°С - 40с, 5б°С - 30 с, 71°С - 1мин 30 с. Длина получаемого фрагмента составляла 248 пн.

После амплификации пробы осаждали 3 объемами этанола в течение ночи и собирали центрифугированием в течение 10 минут при 10 -rac.g.

Электрофорез в полиакриламидном геле

Разделение фрагментов осуществляли в 10% полиакриламидном геле (ПААГ). ПААГ готовился на трис-боратном буфере. Электрофорез проводили при 20 мА и 250V в течение 1 часа. Образцы перед нанесением на гель

окрашивали бромфеноловым синим, разведенном в 50% глицерине. В качестве маркера использовались фрагменты плазмиды pUC 18, полученные при обработке рестрикционной эндонуклеазой MspI (размер фрагментов от 501 до 34 пн). Гель окрашивали бромистым этидием или серебром.

Клвнико-генеалогический метод

Методом опроса собирали данные о состоянии здоровья родственников обследуемого ребенка по линии отца и матери и строили родословную. Затем проводили статистический анализ полученных данных.

Статистический анализ данных

Материал для исследования составили описания состояния здоровья членов 410 семей, разделенных на три группы: I группа - 255 семей детей с тимомегалией, II группа - 95 семей детей с аллергическими заболеваниями, в том числе с бронхиальной астмой и Ш группа - контрольная - 60 семей практически здоровых детей.

Исходными данными для статистической обработки материала являлись наличие или отсутствие следующих заболеваний в семьях: злокачественных и доброкачественных новообразований, аллергических заболеваний (без бронхиальной астмы), бронхиальной астмы, аутоиммунных заболеваний, ревматизма, туберкулеза, инфекционно-воспалительных заболеваний, эндокринных заболеваний, язвенной болезни желудка и / или двенадцатиперстной кишки, эпилепсии, псориаза, сердечно-сосудистых заболеваний, алкоголизма.

Из числа стандартных биометрических методов для оценки достоверности различий между частотами встречаемости заболеваний в выборках был применен t - критерий Стьюдента. Корреляционная структура заболеваний в группах исследована с помощью кластерного анализа, где в качестве меры расстояний между заболеваниями использована величина К, которая вычислялась по формуле К = Рху/(РххРу), где Рху - доля семей, в которых встречаются заболевание X и заболевание Y; Рх - частота встречаемости заболевания X в группе; Ру - частота встречаемости заболевания Y в группе. Вычисления выполнены на компьютере с использованием пакета статистического анализа «AGROS версия 2.08»

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

1. Заболевания, ассоциированные с тимомегалией,

На первом этапе работы были определены частоты встречаемости заболеваний (злокачественные и доброкачественные новообразования, аллергические заболевания (без бронхиальной астмы), бронхиальная астма, аутоиммунные заболевания, ревматизм, туберкулез, инфекционно-воспалительные заболевания, эндокринные заболевания, язвенная болезнь желудка и / или двенадцатиперстной кишки, эпилепсия, псориаз, сердечнососудистые заболевания, алкоголизм) в 410 семьях: 255 семьях детей с тимомегалией (I группа), 95 семьях детей с аллергическими заболеваниями, в том числе с бронхиальной астмой (II группа) и 60 семьях практически здоровых детей (III группа, контрольная).

За частоту встречаемости заболевания принималась доля семей, в которых было выявлено данное заболевание хотя бы у одного члена семьи.

Как видно из таблицы 1, частоты встречаемости ряда заболеваний значительно различались в исследованных группах. С использованием критерия Стьюдента было выявлено, что у родственников детей с тимомегалией достоверно чаще, чем во II и III группах встречаются злокачественные и доброкачественные новообразования, аутоиммунные заболевания, ревматизм и эпилепсия. При этом существенных отличий в частотах встречаемости данных заболеваний в II и III группах нами не обнаружено. Достоверно наименьшие частоты встречаемости инфекционно-воспалительных и эндокринных заболеваний были зафиксированы в контрольной группе (по сравнению с I и П группами). В семьях детей с тимомегалией частоты встречаемости указанных заболеваний превышают приблизительно в два раза соответствующие показатели III группы, тогда как во II группе являются промежуточными. Как показали наши расчеты, частота встречаемости аллергических заболеваний значительно выше в семьях детей II группы по сравнению с I и III группами. Однако частоты встречаемости бронхиальной астмы в I и II группах были приблизительно равны, но достоверно выше, чем в III группе.

Таблица 1.

Частота встречаемости заболеваний в группах семей, %.

Семьи детей с Семьи детей с Семьи

Заболевания тимомегаггией аллергией и (или) здоровых детей

(255 семей) бронхиальной астмой (95 семей) (60 семей)

Опухоли 43,53* 23,16 18,33

Аллергические 9,41 22,10* 8,33

заболевания

Бронхиальная астма 13,33 12,63 1,67*

Аутоиммунные 8,24* 1,05 1,67

заболевания

Ревматизм 15,29* 6,31 6,67

Туберкулез 9,02 5,26 5,00

Инфекционно- 33,73 25,26 16,67*

воспалительные

заболевания

Эндокринные 32,55 25,26 16,67*

заболевания

Язвенная болезнь 11,76 12,63 11,67

желудка и (или)

двенадцатиперстной

кишки

Эпилепсия 14,90* 2,10 0,00

Псориаз 2,35 2,10 1,67

Сердечно-сосудистые 30,98 26,32 18,33

заболевания

Алкоголизм 16,08 8,42 6,67

* отличие частоты встречаемости данного заболевания в данной группе от соответствующего показателя в других группах достоверно, р<0,05

При изучении частоты встречаемости злокачественных и доброкачественных новообразований в семьях детей с тимомегалией было установлено, что по линии матери данные заболевания встречались в 23,6%, по линии отца - в 13,4%, а по линии отца и матери одновременно - в 6,5% семей.

Несомненный интерес представляет факт обнаружения в I группе нескольких родословных с более чем одним случаем тимомегапии в семье. В их числе были семьи, в которых увеличение тимуса имело место как у родных, так и у двоюродных сибсов. Также наблюдался случай рождения ребенка с тимомегалией от матери, имевшей в раннем детском возрасте увеличенную вилочковую железу.

Полученные данные могут свидетельствовать о наличии наследственной предрасположенности к развитию тимомегапии.

В ходе исследования была сделана попытка выяснить возможность ассоциированной предрасположенности к определенным заболеваниям. Для этого нами было предложено применить величину К (см. «Материалы и методы исследования»). Если К>1, присутствует сопряженность между заболеваниями, при К близком к 1, совместная встречаемость заболеваний носит случайный характер. Затем был проведен кластерный анализ с использованием величины К в качестве меры расстояния между заболеваниями. Результат анализа представлен в виде дендрограммы (рис.1).

Как видно из рисунка, изученные группы семей несколько различаются структурой кластеров, что свидетельствует о том, что для каждой группы характерна своя система корреляций между заболеваниями. Так, в группе семей детей с тимомегалией четко выделяется плеяда коррелированных с опухолями заболеваний: аутоиммунные болезни, ревматизм, аллергические заболевания, бронхиальная астма и алкоголизм. Во II группе с опухолями сопряжены бронхиальная астма, эндокринные и сердечно-сосудистые заболевания, а ревматизм и аутоиммунные заболевания совместно с эпилепсией образуют отдельный кластер. В III группе опухолевые заболевания тесно коррелированы с бронхиальной астмой, а эндокринные - с аллергическими заболеваниями, ревматизмом и язвенной болезнью желудка и /или двенадцатиперстной кишки.

9 11 7 10 1 4 5 2 3 13 8 12 6

5 10 1 3

12 5 11 13 ? 2 9

¿1

¿Я

11 13 7 2 « 9 5 1 3 4 12 6 10

Рис.1. Результаты кластерного анализа заболеваний в семьях I (Л), II (Б), III (В) групп 1 - опухолевые заболевания, 2 - аллергические заболевания, 3 -бронхиальная астма, 4 - аутоиммунные заболевания, 5 - ревматизм, 6 - туберкулез, 7 -иифекционно-воспалительные заболевания, 8 - эндокринные заболевания, 9 -язвенная болезнь желудка и / или двенадцатиперстной кишки, 10 - эпилепсия, 11 -псориаз, 12 - сердечно-сосудистые заболевания, 13 - алкоголизм.

Для подтверждения наличия корреляции между заболеваниями, частоты встречаемости которых достоверно различались в исследованных группах, все семьи были объединены, а затем разделены на две подгруппы (А и В): А - семьи, в которых встречались злокачественные и доброкачественные новообразования, В - семьи без опухолевых заболеваний. Затем в каждой подгруппе определялась частота встречаемости остальных заболеваний.

Аналогичный анализ был проведен в двух подгруппах семей с эндокринными заболеваниями и без них. С использованием критерия Стьюдента было выявлено, что в семьях с опухолевыми заболеваниями достоверно чаще встречаются ревматизм и аутоиммунные болезни, а в семьях с эндокринными заболеваниями - аутоиммунные болезни, бронхиальная астма и сердечно-сосудистые заболевания (р<0,05).

Среди полученных результатов несомненный интерес представляет наличие сопряженности между злокачественными и доброкачественными новообразованиями, аутоиммунными заболеваниями и бронхиальной астмой. Это позволило нам говорить о возможности совместного наследования предрасположенности к этим заболеваниям и искать соответствующие генетические детерминанты.

При попытке установить возможный характер наследования тимомегалии, была проанализирована I группа родословных на предмет частоты встречаемости данной патологии у детей разного пола. В результате было обнаружено, что увеличение тимуса достоверно чаще наблюдается у детей мужского пола (62%). Учитывая полученный результат и локализацию в X хромосоме гена врожденной гипоплазии надпочечников, которая, согласно имеющимся в литературе данным, имеет место при увеличении тимуса, можно было предположить Х-сцепленный характер наследования тимомегалии. Однако, достаточно частая встречаемость увеличенного тимуса у девочек (38%) не дала нам право полностью исключить возможность аутосомного наследования.

2. Вирусная инфекция, ассоциированная с тимомегалией

Таким образом, анализ родословных показал, что хотя заболевания, ассоциированные с тимомегалией носят выраженный семейный характер, они не укладываются в рамки менделевского наследования (это было подтверждено во всех проанализированных нами случаях). Полученные результаты позволили нам выдвинуть гипотезу о возможном наличии в этих семьях латентной вирусной инфекции с заражением детей перинатально или в раннем детском возрасте. В соответствии с вышесказанным, а также учитывая имеющиеся в литературе данные об онкогенности и лимфотропности вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ) и его ассоциации с аутоиммунными заболеваниями, в данной работе было проведено изучение инфицированности детей с тимомегалией ВЭБ и цитомегаловирусом (ЦМВ). Определение у детей ЦМВ-инфекции проводилось исходя из того, что оба вируса в популяции встречаются с приблизительно равной частотой, и ЦМВ, так же как и ВЭБ, способен поражать клетки иммунной системы и ассоциирован с иммунодефицитными состояниями.

На наличие ВЭБ-инфекции были обследованы 28 детей с тимомегалией (I группа) и 20 детей контрольной группы, отобранных случайно, величина тимуса которых была неизвестной (II группа) (рис.2). Параллельно 27 детей с увеличенным тимусом и 20 детей из контрольной группы были также обследованы на наличие цитомегаловирусной инфекции.

Возраст детей с тимомегалией колебался от 2-х месяцев до 3-х лет, средний возраст в группе составлял 13,8 ±2,5 мес. Возраст детей контрольной группы не превышал 1 года.

С использованием критерия Стьюдента было выявлено, что частота встречаемости ВЭБ и ЦМВ у детей с тимомегалией достоверно выше, чем в контрольной группе (р<0,05). Также обнаружено, что дети с увеличенным тимусом значимо чаще инфицированы ВЭБ, нежели ЦМВ (р<0,05) (рис.3).

123456789 Рис.2. Электрофоретическое разделение продуктов амплификационного анализа ДНК вируса Эпштейна-Барр. 2 - 9 - пробы от детей с тимомегалией, 1 - маркер длины ДНК (риС18/Мзр1). Специфический фрагмент ДНК (154 пары нуклеотидов) указан стрелкой.

I группа II группа

ЕВЭБ 96,43 10

■ ЦМВ 55,56 15

РисЗ. Частота встречаемости вирусной инфекции в изученных группах детей, %.

Исходя из данных литературы [Катягина М.Г., 1999;. Скули Р.Т., 1994; Anderson J., Emberg I., 1988], нами была построена кривая зависимости частоты встречаемости ВЭБ-инфекции в популяции от возраста обследуемых. Видно, что в популяции только у лиц старше 30 лет достигается уровень ВЭБ-инфицированности, характерный для детей с тимомегалией в возрасте 1 года (рис.4).

—♦-Популяция —Дета с тимомегаяией

1 год 5 лет 20 лет 40 лет V

Возраст !

Рис.4. Возрастная динамика инфицирования вирусом Эпштейна-

Барр.

Как было указано выше, статистический анализ родословных показал наличие сопряженности между опухолевыми, аутоиммунными заболеваниями и бронхиальной астмой. Эта же группа заболеваний достоверно чаще встречалась в семьях детей с тимомегалией. Получив такие результаты, мы обратились к работам исследователей, прослеживавших катамнез детей с тимомегалией [Кузьменко Л.Г., 1986; Мартынова М.И., Кузьменко Л.Г., Тюрин П.А., 1993]. Оказалось, что частота различных иммунопатологических состояний, таких как бронхиальная астма и ряд заболеваний аутоиммунной природы (тромбоцитопеническая пурпура, аутоиммунная гемолитическая анемия и др.), так же как и онкологических заболеваний, в том числе и лимфопролиферативных, в группе детей с тимомегалией в анамнезе была в *

десятки раз выше, чем в популяции. Обнаруженная нами столь высокая частота

и1

инфицированности вирусом Эпштейна - Барр детей с тимомегалией позволяет ^

предположить, что ВЭБ является этиологическим фактором в развитии

ассоциированных с тимомегалией заболеваний.

Вышесказанное подтверждается также имеющимися в литературе данными о состоянии иммунной системы детей с тимомегалией. У детей с увеличенным тимусом наблюдался более высокий уровень В-лимфоцитов и 1{>Е по сравнению с таковыми показателями у здоровых детей. Содержание Т-супрессоров было значимо ниже нормы [Мартынова М.И., Кузьменко Л.Г., Тюрин П.А., 1993]. Дефицит по популяции клеток-супрессоров может быть

следствием функциональной недостаточности вилочковой железы или может возникнуть по неизвестным причинам, в том числе под действием вирусных факторов. Существуют исследования, показывающие способность ВЭБ инфицировать малодифференцированные эпителиальные клетки тимуса и его ассоциацию с тимомой и гиперплазией тимуса [Мсйшге е1.а1., 1988]. Но возможно, что дефект тимуса является врожденным и независимым от наличия ВЭБ-инфекции, и в условиях иммунодефицита организм становится пермиссивной системой для развития вируса. Однако, частота встречаемости ЦМВ - инфекции, обычно сопутствующей иммунодефицитным состояниям, в группе детей с тимомегалией достоверно ниже, чем частота встречаемости ВЭБ-инфекции, хотя и выше, чем в среднем в популяции. Полученные данные позволяют полагать, что тимомегапия совместно с ранней ВЭБ-инфекцией играют триггерную роль в возникновении заболеваний опухолевого, аутоиммунного и аллергического характера.

ВЫВОДЫ

1. Тимомегалия характеризуется семейным характером наследования, однако ее передача не соответствует классическим «менделевским» закономерностям.

2. Тимомегалия достоверно коррелирует с рядом заболеваний, относящихся к различным группам, но имеющих семейный характер: опухолевыми, аутоиммунными и эндокринными заболеваниями, ревматизмом, бронхиальной астмой и эпилепсией.

3. Тимомегалия достоверно коррелирует с ранней инфицированностью вирусом Эпштейна-Барр и цитомегаловирусом. Возможно, что эти вирусы вовлечены в патогенез тимомегалии, или, напротив, развитие тимомегалии облегчает процесс инфицирования этими вирусами плода, новорожденного, или ребенка в раннем возрасте.

4. Полученные данные позволяют полагать, что тимомегалия совместно с ранним инфицированием вирусом Эпштейна-Барр играют триггерную роль в возникновении заболеваний опухолевого, аутоиммунного и аллергического характера, ассоциированных с тимомегалией.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Азова М.М., Гигани О.Б., Гигани О.О., Иткес A.B., Кузьменко Л.Г., Смиряев A.B. Генетические основы ассоциации между тимомегалией и семейными заболеваниями опухолевого, аутоиммунного и аллергического характера // Вестник РУДН. Серия «Медицина». 2003.- №5,- С.34-40.

2. Азова М.М., Гигани О.Б., Гигани О.О., Иткес A.B., Кузьменко Л.Г. Наследственная предрасположенность к возникновению SCT-синдрома и снижению адаптивных возможностей организма // Материалы XI Международного симпозиума «Эколого-физиологические проблемы адаптации». 27-28 января 2003г. - М.: Изд-во РУДН. 2003 г.- С. 20-21.

3. Азова М.М., Гигани О.Б., Гигани О.О., Иткес A.B., Кузьменко Л.Г. Корреляция между развитием у детей тимомегалии и ранним инфицированием вирусом Эпштейна-Барр и цитомегаловирусом // Материалы III конгресса педиатров-инфекционистов России «Актуальные вопросы инфекционной патологии у детей. Инфекции и иммунитет». 8-10 декабря 2004г. - М.: 2004 г.- С.23.

4. Азова М.М., Гигани О.Б., Гигани О.О., Иткес A.B., Кузьменко Л.Г. Тимомегалия и раннее инфицирование вирусами Эпштейна-Барр и цитомегалии // Детские инфекции. 2004.-№4.- С.23-24.

Азова Мадина Мухамедовна (Россия)

Генетические основы ассоциации между тимомегалией и семейными заболеваниями опухолевого, аутоиммунного и аллергического характера

Проведенный анализ родословных детей с тимомегалией выявил существование заболеваний, ассоциированных с увеличением тимуса (опухолевые, аутоиммунные и эндокринные заболевания, ревматизм, бронхиальная астма и эпилепсия). Но, хотя они носят выраженный семейный характер, их наследование не укладывается в рамки менделевского. Это позволило предположить возможное наличие в этих семьях латентной вирусной инфекции с заражением детей перинатально или в раннем детском возрасте. Было выявлено, что частота встречаемости ВЭБ и ЦМВ у детей с тимомегалией достоверно выше, чем в контрольной группе. Также обнаружено, что дета с увеличенным тимусом значимо чаще инфицированы ВЭБ, нежели ЦМВ-инфекцией. Полученные данные позволяют полагать, что тимомегалия достоверно коррелирует с ранней ВЭБ-инфекцией и участвует в возникновении заболеваний опухолевого, аутоиммунного и аллергического характера.

Madina М. Azova (Russia)

Genetic bases of association between thymomegaly and familial tumor, autoimmune and atopic diseases

The data accumulated in our studies of children with thymomegaly showed diseases associated with hyperplasia of thymus (tumors, autoimmune and endocrine / diseases, rheumatism, a bronchial asthma and epilepsy). Although they had family

features, they didn't agree with mendelian heredity. On the base of our results we assumed presence of a latent viral infection in the families. It has been found that the frequencies of EBV- and CMV-infection of children with thymomegaly were significantly higher than those of children from control group. And children with hyperplasia of thymus were infected by EBV more frequently than by CMV. Our results show that thymomegaly and early EBV-infection are associated with tumors, autoimmune diseases and allergy.

РНБ Русский фонд

2005-4 45435

Подписано в Формат 60x84/16.

Тираж/00 экз. Усл. печ. л. V . Заказ 3 £ •

Типография Издательства РУДН 117923, ГСП-1, г. Москва, ул. ОрджониквдЗе, Д/З | ;

2 2 МАРгоиМ ' ' у 1630

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Азова, Мадина Мухамедовна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Строение и функции тимуса.Л.

1.2. Современные представления о тимомегалии и о некоторых особенностях детей с увеличенной вилочковой железой.

1.3. Герпесвирусы.

1.3.1. Цитомегаловирус.

1.3.2. Вирус Эпштейна - Барр.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Оценка величины вилочковой железы у детей.

2.2. Забор материала для молекулярно-генетических исследований.

2.3. Получение ДНК-матрицы из периферической крови.

2.4. Полимеразная цепная реакция (ПЦР).

2.5. Концентрирование ДНК.

2.6.Электрофорез в полиакриламидном геле.

2.7. Окраска полиакриламидного геля серебром.

2.8. Клинико - генеалогический метод.

2.9. Статистический анализ данных.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Заболевания, ассоциированные с тимомегалией.

3.2. Вирусная инфекция, ассоциированная с тимомегалией.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Генетические основы ассоциации между тимомегалией и семейными заболеваниями опухолевого, аутоиммунного и аллергического характера"

Актуальность темы

Тимомегалия - это явление, сущность которого не выяснена до сих пор. В настоящее время термин «тимомегалия» употребляется для обозначения врожденного или приобретенного варианта увеличения вилочковой железы при сохранении ее нормальной гистоархитектоники. Сведения о частоте встречаемости тимомегалии достаточно противоречивы: по данным различных авторов ее выявляют у 10-50% детей, а наибольшая частота регистрируется у детей первого года жизни [16, 60]. Согласно данным, полученным Кузьменко Л.Г. с соавт. [56], тимомегалия выявляется у 35% детей первых трех месяцев жизни. Однако, до сих пор нет единого мнения среди педиатров, считать ли увеличение тимуса у детей нормой, патологией или пограничным состоянием.

Как известно, выраженность иммунных реакций организма и возникновение аутоиммунных заболеваний зависят от состояния и функционирования тимуса. При тимомегалии вследствие сопровождающих ее эндокринных нарушений и дефицита Т-системы иммунитета, особенностью которого является сочетание повышенной пролиферативной активности Т-лимфоцитов с их недостаточным созреванием в условиях дефицита тимических гормонов, наблюдается дисфункциональное состояние как иммунной так и эндокринной системы. Так, у детей, имеющих увеличенную вилочковую железу неоднократно фиксировалась повышенная чувствительность (вплоть до наступления внезапной смерти) к различным неблагоприятным внешним воздействиям. Существует мнение, что внезапная смерть детей с тимомегалией связана с имеющейся у них тимусно-надпочечниковой недостаточностью [45]. Общая недостаточность тимусзависимого иммунитета обусловливает высокую частоту и тяжесть заболеваний, а также резистентность к терапии. [19, 35, 36, 56].

Согласно литературным данным [35, 56], у детей с увеличенной вилочковой железой, а также у их родственников чаще наблюдаются пороки сердца, ревматизм, онкологические заболевания, туберкулез, хронические заболевания почек. По отягощенности злокачественными новообразованиями семьи детей с тимомегалией конкурируют только с семьями детей с острым лимфоидным лейкозом, а по частоте встречаемости эндокринных заболеваний - с семьями детей с сахарным диабетом. Кроме того, в семьях детей с тимомегалией отмечается ряд аутоиммунных заболеваний таких, как системная красная волчанка, гломерулонефрит, рассеянный склероз, аутоиммунный тиреоидит. Несмотря на интерес, проявляемый к проблеме, и полученные в последние годы новые сведения по данному вопросу, сущность патологии тимуса остается до конца неясной.

Для этого нами были поставлены следующие задачи:

Научная новизна

Впервые исследована корреляционная структура заболеваний, ассоциированных с тимомегалией.

Впервые выявлена достоверная корреляция между тимомегалией и инфицированностью вирусом Эпштейна-Барр и цитомегаловирусом.

Практическая значимость

Апробация работы

Работа выполнена на кафедре биологии и общей генетики (зав. каф. проф. Иткес A.B.) и на кафедре детских болезней (зав. каф. проф. Кузьменко Л.Г.) Российского университета дружбы народов.

Основные положения работы доложены на XI международном симпозиуме «Эколого-физиологические проблемы адаптации» (Москва, 2003г), III Конгрессе педиатров-инфекционистов России (8-10 декабря 2004г), заседании кафедры биологии и общей генетики РУДН (2004 г.).

По результатам исследования опубликованы 4 печатные работы.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 116 страницах машинописного текста, иллюстрирована 10 рисунками, 8 таблицами, 4 электрофореграммами.

Диссертационная работа состоит из введения, трех глав, выводов, приложений и списка литературы. Список цитированной литературы включает 175 источников, из них 69 - на русском и 106 - на других языках.

Заключение Диссертация по теме "Генетика", Азова, Мадина Мухамедовна

выводы

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Азова, Мадина Мухамедовна, Москва

1. Агеев А.К. Гистопатология вилочковой железы человека. Л.: Медицина, 1973г.-127с.

2. Алекберова З.С., Прокаева Т.Б. Вилочковая железа при системной красной волчанке //Ревматология. 1986, №3. С.36-41.

3. Алексеева Г.В., Юнкер В.М., Грунтенко Е.В. Сравнительная морфология тимико-лимфатического аппарата у некоторых инбредных и беспородных мышей // Известия Сиб.отд. АНСССР, 1976, №7. С. 139-134.

4. Бендюг Г.Д. Нарушения эндокринной функции тимуса и возможности ее реабилитации при канцерогенезе молочных желез. (Эксперим.и клинико-иммунол.иссслед.) Автореф.дис. .канд.биол.наук: 14.00.11.-Киев, 1988. -19с.

5. Бобова Л.П. Морфология вилочковой железы в норме и при росте карциномы РС-1. Автореф.дис. .канд.биол.наук: 03.00.11. М., 1976.

6. Вельтищев Ю.Е. Наследственное предрасположение к болезням, диатезам и пограничные состояния у детей //Педиатрия, 1984, №12. С.3-9.

7. Волков В,Т. Тимусзависимые «факторы риска» миастенического синдрома у больных бронхиальной астмой // Факторы риска при неврол.и погранич.заболеваниях. Том.мед.ин-т.-1987. Вып.2. С.21-23.

8. Галактионов В.Г. Иммунология: Учебник. М., 1998. - 480с.

9. Галустян Ш.Г. Строение зобной железы в свете экспериментального анализа. М., 1949.

10. Ю.Глухенысая А.Б. Секреторная функция вилочковой железы у больных диффузным нейродермитом //Врачебное дело. 1986, №2. С.89-90.

11. П.Гнездицкая Э.В. Иммуноморфология и гетероорганные антигены тимуса человека в норме и при некоторых патологических процессах (ревматизм, тяжелая миастения, миопатия). Автореф.дис. .докт.биол.наук: 14.00.36. М., 1993.47с.

12. Голдобина Э.Г. Особенности иммунного контроля к Chlamydia trachomatis и герпесвирусам у пациентов с аллергическими заболеваниями. Дис.канд.мед.наук. 2003г. 114с.

13. М.Гурцевич В.Э.б Афанасьева Т.А. Гены латентной инфекции вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ) и их роль в возникновении неоплазий // Рус.журн. ВИЧ / СПИД и родств. пробл. 1998г. Т.2. №1. С.68-75.

14. Гюллинг Э.В. и др. Эндокринная функция вилочковой железы у детей с аллергическими и воспалительными заболеваниями органов дыхания // Иммунология и иммунопатолог.состояния у детей. Тез.докл. М., 1983. С.146-147.

15. Дадомбаев Е.Т. Способ определения тимомегалии у детей // Педиатрия, 1985, №8. С.24-25.

16. Ивановская Т.Е. Гиперплазия вилочковой железы «status thymicolymphaticus» у детей грудного возраста // Педиатрия. 1970г. №1. С.22-29.

17. Ивановская Т.Е. Значение иммунодефицитных синдромов в педиатрии // Педиатрия. 1985г. №1. С.11-15.

18. Ивановская Т.Е., Зайратянц О.В., Леонова JI.B., Волощук. Болезни тимуса у детей. М.: Медицина, 1996.

19. Иммунология: В 3-х т. Т.1. Пер. с англ./ Под ред. У. Пола. М.; Мир, 1998. 476с.

20. Иткес A.B. Генетические механизмы вирусного онкогенеза // Вестник РУДН, серия «Медицина». 2003г. №5. С.7-23.

21. Катягина М.Г. Клинико-лабораторная характеристика инфекционного мононуклеоза у детей. Дис.канд.мед.наук. СПб. 1999г. 180с.

22. Клиническая иммунология. Руководство для врачей. / Под ред. Е.И. Соколова. М., 1998. - 272с.

23. Копнин Б.П. Мишени действия онкогенов и опухолевых супрессоров: ключ к пониманию базовых механизмов канцерогенеза // Биохимия, 2000, т.65, вып. 1. С.5-33

24. Коротяев А.И, Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. Учебник. СПб.; 1998. - 592с.

25. Краснов М.В. Клинико-иммунологическая характеристика детей раннего возраста с тимомегалией на фоне аллергических заболеваний // Актуальные проблемы аллергии в педиатрии: Тез.докл., ч.2. М., 1987. С.404.

26. Кузнецова Т.И. Применение маркеров вируса Эпштейна-Барр при формировании групп риска по раку легкого. Автореф.канд.биол.наук. Томск, 1993.

27. Кузьменко Л.Г. Катамнез детей с тимомегалией // Педиатрия, 1986, №12. С.31-34.

28. Кузьменко Л.Г. Тимомегалия у детей первых трех лет жизни: Дис. .докт.мед.наук. М., 1988.

29. Кузьменко Л.Г., Зайратянц О.В. Гетерогенность и полиморфизм синдрома увеличенной вилочковой железы у детей первых трех лет жизни // Педиатрия. 1991. №10. С. 16-21.

30. Кузьменко Л.Г. и др. Оценка величины вилочковой железы у детей первых лет жизни по данным ультразвукового сканирования // Педиатрия. 2002г. №6. С.22-26.

31. Кузьменко Л.Г., Семенихина К.Н., Фарез Фазе Эль Фарез. Состояние здоровья детей, подростков и лиц молодого возраста с тимомегалией в анамнезе // Вестник РУДЫ. Серия «Медицина». 2003г. №2. С.93-97.

32. Курбанов Т.Г. Гиперплазия вилочковой железы у детей раннего возраста // Вопр. охраны мат.и дет., 1983, Т.28, №11. С.74.

33. Курбанов Т.Г., Алиев М.Г., Гусейнов Ж.Г. Гиперплазия вилочковой железы у детей физиология или патология? // Пробл.эндокринологии, 1985, т.31, №1. С.33-37.

34. Леенман Е.Е. О роли вируса Эпштейна-Барр в патогенезе лимфогранулематоза. Иммуногистохимическое и молекулярно-биологическое исследование. Автореф.канд.мед.наук. СПб. 1999г. 20с.

35. Маслов М.С. Лимфатическая аномалия конституции // Многотомное руководство по педиатрии. М.: Медгиз, 1960г. -Т.1. С.505-513.

36. Матковская Т.В. К выявлению причин, способствующих увеличению тимуса // Тимус и его влияние на организм. Томск, 1982. С.97-99.

37. Матковская Т.В. Клинико-диагностические и прогностические критерии синдрома тимической недостаточности при тимомегалии у детей. Дис. . д-ра мед. наук: 14.00.09. Томск, 1986. 298с.

38. Матковская Т.В. Синдром увеличения тимуса у детей. Учеб.метод.пособие. Томск, 1985. - 44с.

39. Медведев Н.Ю., Назаров В.Ю. Некоторые вопросы танатогенеза при синдроме внезапной смерти у детей. // Педиатрия. 1979. №11. С.34-39.

40. Ребров А.П. Показатели функциональной активности тимуса у больных ревматизмом. Дис. .канд.мед.наук: 14.00.39. Саратов, 1985.231с.

41. Россомаха E.JI. Функциональная морфология тимуса при дисгормональном опухолевом росте. Дис. .канд.мед.наук: 14.00.15. Л., 1982.-250с.

42. Сапин М.Р., Этинген Л.Е. Иммунная система человека. М.: Медицина, 1996.-304с.

43. Севостьянова Н.В. Морфологические изменения лимфоидных и эпителиальных клеток в условиях in vitro и in vivo при воздействии онкогенного вируса Эпштейна Барр. Дис.канд.мед.наук. Томск. 1999г. 117с.

44. Севостьянова Н.В., Исаева Т.М., Уразова Л.Н. Особенности иммунологических и вирусологических показателей у онкологических больных//Вопр.онкологии. 2001г. Т.47. №4. С.446-448.

45. Синдром увеличенной вилочковой железы у детей: Монография / Под ред. М.И. Мартыновой, Л.Г. Кузьменко, П.А. Тюрина. М., 1993. - 201с.

46. Скрипкин Ю.К. Кожные и венерические болезни. Учебник для врачей и студентов мед.вузов. М., 1999. 688с.

47. Скули Р.Т. Инфекции, вызванные вирусом Эпштейна-Барр, включая инфекционный мононуклеоз // Внутренние болезни / Под ред. Харрисон Т.Р. и др. М., «Медицина», 1994г. Т.4.

48. Смиряев A.B., Мартынов С.П., Кильчевский A.B. Биометрия в генетике и селекции растений. М., 1992. 269с.

49. Тимомегалия (этиология, патогенез, диагностика, клинические проявления, влияние на течение болезней, лечение) / Под общ.ред. Ю.П. Ткаченко. Запорожье. 1996. 101с.

50. Тяжкая A.B. Клинико-иммунологическая характеристика детей раннего возраста с увеличенной вилочковой железой // Тимус и его влияние на организм. Томск, 1982. С. 178-181.

51. Тяжкая A.B. Тимомегалия у детей (Клинико-морфологическая характеристика и лечебно-профилактические мероприятия). Автореф.дис. . .д-ра мед.наук. 14.00.09. Киев, 1986. -43с.

52. Учайкин В.Ф., Гаспарян М.О. Эпштейна-Барр вирусная инфекция (инфекционный мононуклеоз) // Руководство по инфекционным болезням у детей / Под ред. Учайкина В.Ф. М., «Медицина». 1998г. С.262-274.

53. Хасан Хамад А., Глухов А.И., Гордеев С.А. и соавт. Анализ содержания геномной ДНК некоторых вирусов герпетической группы в мононуклеарных клетках крови пациентов с кожной Т-клеточной лимфомой // Вопр.биол.мед. и фармац. химии. 1998г. №3. С.25-28.

54. Шувалова Е.П. Инфекционные болезни: Учебник. 4-е изд. М.: Медицина, 1995. 656 с.

55. Якимчук К.С. Выявление маркеров инфицирования вирусами гепатитов В, С, Е, G, Эпштейна-Барр и герпеса 6 типа у пациентов с болезнью и синдромом Шегрена. Дис.канд.мед.наук. 2001г. 91с.

56. Ярилин А.А., Пинчук В.Г., Гриневич Ю.А. Структура тимуса и дифференцировка Т-лимфоцитов. Киев, 1991.244с.

57. Allday M.J., Crawford D.U. Role of epithelium in EBV persistence and pathogenesis of B-cell tumors // Lancet. 1988. V.l. P.855-857.

58. Anderson J., Ernberg I. Management of Epstein-Barr virus infections // Am. J. Med. 1988. V.85. P.107-115.

59. Auvin S., Dalle J.H., Ganga-Zandzou P.S., Ythier H. Is agranulocytosis following infectious mononucleosis caused by autoimmunity? // Pediatr. Hematol. Oncol. 2003 Dec; 20(8): 611-5.

60. Balner H., Dersjant H. Neonatal thymectomy and tumor induction with methylcholantrene in mice // J. Nat. Cancer Inst. 1996. V.36. P.513-551.

61. Bergonzi F. Functional investigation of suckling suffered from hyperplasia of thymus // Aggiorn.prdiat., 1962. V.l2, №6. S.281-284.

62. Bogdanos D.P., Mieli-Vergani G., Vergani D. Virus, liver and autoimmunity // Dig. Liver Dis. 2000 Jun-Jul. V.32, №5. P.440-446.

63. Bramis M.D.et al. Effects of thymectomy in human oncogenesis // J.of Surgical Research. 1977. V.22. P.305-312.

64. Burdin N., Peronne C., Banchereau J., Rousset F. Epstein-Barr virus transformation induces B-lymphocytes to produce human interleukin 10 // J. Exp. Med. 1993; 177: 195.

65. Chen W., Cooper N.R. The Epstein-Barr virus nuclear antigen 2 and latent membrane protein independently transactivate p53 through induction of NF-kappaB activity // J. Virol. 1996. Jul; 70 (7): 4849-53.

66. Claudy A.L., Tourainne J.L., Schmitt D.et al. // Thymus. 1983. V.5. P.209-222

67. Cohen J.I., Lekstrom K. Epstein-Barr virus BARF 1 protein is dispensable for B-cell transformation and inhibits alpha-interferon secretion from mononuclear cells // J. Virol. 1999 Sep; 73 (9): 7627-32.

68. Dawson C.W., George J.H., Blake S.M et al. The Epstein-Barr virus-encoded latent membrane protein 2A augments signaling from latent membrane protein 1 // Virology. 2001 Oct 25; 289 (2): 192-207.

69. Dawson C.W., Rickinson A., Young L.S. //Nature. 1990. V.344. P.777-780.

70. Dror Y., Blachar Y., Cohen P.et al. Sistemic lupus erythematosus associated with accute Epstein-Barr virus infection // Am. J. Kidney Dis. 1998 Nov; 32(5): 825-8.

71. Eliopoulos A.G., Waites E.R., Blake S.M et al. TRAF-1 is a critical regulator of JNK signaling by the TRAF-binding domain of the Epstein-Barr virus -encoded latent infection membrane protein -1 but not CD 40 // J. Virol. 2003. Jan; 77 (2): 1316-28.

72. Epstein M.A., Barr Y.M. Cultivation in vitro of human lymphoblasts from Burkitt's malignant lymphoma // Lancet. 1964. Vol 1. P.252-253.

73. Fujino T., Shiraogawa K., Takezako S.et al. A study on maternal humoral immune responsrs to vilous trophoblast using Epstein-Barr virus // Acta. Obst. Gynaes. J. 1989. V.41. P.660-664.

74. GahnT.A., SugdenB. //J. Virol. 1995. V.69. P.2633-2636.

75. Gamalero P.C., Canestri G. Approach for the thymomegaly treatment // Minerva pediat., 1968. V.20, №11. S.605-607.

76. Gires O., Kohlhuber F., Kilger E et al. Latent membrane protein -1 of Epstein-Barr virus interacts with JAK3 and activates STAT proteins // EMBO J. 1999 Jun 1; 18(11): 3064-73.

77. Glickman J.N., Griffin B.E. // J. Virol. 1988. V.62. P.902-911.

78. Haluska F.G., Tsujimoto Y., Croce C.M. Mechanisms of chromosome translocation in B- and T-cell neoplasia // Trends Genet. 1987. 3: 11-15.

79. Henderson A., Ripley S., Heller M., Kieff E. Chromosome site for Epstein-Barr virus DNA in a Burkitt tumor cell line and in lymphocytes growth-transformed in vitro // Proc. Nat. Acad. Sci. 80: 1987-1991, 1983.

80. Henderson S., Rowe M., Gregory C et al. Induction of bcl-2 expression by Epstein-Barr virus latent membrane protein -1 protects infected B-cells from programmed cell death // Cell. 1991. Jun 28; 65 (7): 1107-15.

81. Hiemstra H.S., Schloot N.C., van Veelen P.A et al. Cytomegalovirus in autoimmunity: T-cell crossreactivity to viral antigen and autoantigen glutamic acid decarboxylase //Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 2001 Mar 27; 98 (7): 3988-91.

82. Higuchi M., Kieff E., Izumi K.M. The Epstein-Barr virus latent membrane protein -1 putative Janus Kinase 3 (JAK 3) does not mediate JAK 3 association or activation in B-lymphoma or lymphoblastoid cell lines // J. Virol. 2002 Jan; 76 (1): 455-9.

83. Izraele V., Shirely P., Sixbey J.W. Excretion of the Epstein-Barr virus from the genital tract of men // J. Infect. Dis. 1991. V. 163. P. 1341-1343.

84. Jones C., Dun H.C., Thomas E.E.et al. Acute encephalopathy and status epilepticus, associated with human herpes virus infection // Dev. Med. Child. Neurol. 1994. V.36. P.646-650.

85. Jones R.J., Smith L.J., Dawson C.W et al. Epstein-Barr virus nuclear antigen 1 (EBNA1) induced cytotoxity in epithelial cells is accociated with EBNA1 degradation and processing//Virology. 2003 Sep 1; 313 (2): 663-76.

86. Kaiser C., Laux G., Eick D et al. The protooncogen c-myc is a direct target gene of Epstein-Barr virus nuclear antigen 2 // J. Virol. 1999 May; 73 (5): 4481-4.

87. Kang I., Quan T., Nolasco H.et al. Defective control of latent Epstein-Barr virus infection in systemic lupus erythematosus // J. Immunol. 2004 Jan 15; 172(2): 1287-1294.

88. Kawanishi M. Anti-apoptotic function of the Epstein-Barr virus LMP1 and BHRF 1 proteins//NipponRinsho. 1996 Jul; 54 (7): 1848-54.

89. Kekis P.B., Murtin C., Kunzli B.M.et al. Epstein-Barr virus-associated lympho-epitelial carcinoma in the pancreas // Pancreas. 2004 Jan; 28(1): 98102.

90. Kieff E. Epstein-Barr virus and its replication. In: Fields virology, Third edition, edited by fields B.N., Knipe D.M.and Howley P.M. Philadelphia. 1996. P.2343-2380.

91. Kitay M.K., Rowe D.T. // Virology. 1996. V.220(l). P. 91-99.

92. Labrecque L.G., Barnes D.M., Fentiman I.S., Griffin B.E. Epstein-Barr virus in epithelial cell tumors: a breast cancer study // Cancer Res. 1995 Jan.l; 55(1): 39-45.

93. Larochelle B., Flamand L., Gourde P.et al. Epstein-Barr virus infects and induces apoptosis in human neutrophils // Blood. 1988; 92: 291-299.

94. Lawrence J.B., Villnave C.A., Singer R.H. Sensitive high-resolution chromatin and chromosome mapping in situ: presence and orientation of two closely integrated copies of EBV in a lymphoma line. // Cell.52: 51-61, 1988.

95. Lee H., Minarovits J. Host-cell-dependent expression of latent Epstein-Barr virus genomes: regulation by DNA methylation // Adv Cancer Res. 2003; 89: 133-56.

96. Lee J.M., Lee K.H., Weidner M et al. Epstein-Barr virus EBNA2 blocks Nur 77-mediated apoptosis // Proc Natl Acad Sci USA. 2002 Sep 3; 99 (18): 1187883.

97. Lee H.P., Chang Y.S. Epstein-Barr virus latent membrane protein -1: structure and functions // J. Biomed Sci. 2003. Sep-Oct; 10 (5): 490-504.

98. Liebowitz D., Kieff E. Epstein-Barr virus // The human gerpesviruses / Ed. Bernard Roizman Sc.D.et al. New-York. 1993. P. 107-172.

99. Lin C.S., Kuo H.H., Chen J.Y. Epstein-Barr virus nuclear antigen 2 retards cell growth, induces p21 (WAF1) expression, and modulates p53 activity posttranslationally // Mol.Biol. 2000 Oct 13; 303 (1): 7-23.

100. Liftman A.J., Rossing M.A., Madeleine M.M.et al. Association between late age at infectious mononucleosis, Epstein-Barr virus antibodies and ovarian cancer risk // Scand. J. Infect. Dis. 2003; 35(10): 728-35.

101. Lo A.K., Liu Y., Wang X.H et al. Alterations of biologic properties and gene expression in nasopharingeal epithelial cells by the Epstein-Barr virus-encoded latent membrane protein -1 // Lab.Invest. 2003. May; 83 (5): 697-709.

102. Magrath I. Infectious mononucleosis and malignant neoplasia // Infectious mononucleosis / Eds. Schlossberg D.et al. New-York. 1989. P.143-171.

103. Mannic J.B., Cohen J.I., Birkenback M.et al. // J. Virol. 1991. V.65. P. 68266837.

104. McCann E.M., Kelly G.L., Rickinson A.b., Bell A.I. Genetic analysis of the Epstein-Barr virus coded leader protein EBNA-LP as a co-activator of EBNA 2 function // J. Gen.Virol. 2001 Dec; 82 (12): 3067079.

105. McGuire L.J., Huang D.P., Teo H.R.et al. Epstein-Barr virus genome in thymoma and thymic lymphoid hyperplasia // Amer. J. Pathol. 1988. V.131. №3. P.385-390.

106. McLaughlin K., Cruickshank M., Hollomly D et al. Idiopathic thrombocytopenia after cytomegalovirus infection in a renal transplant recipient // Am J. Kidney Dis. 1999 Jun; 33 (6): e6.

107. Mitarnum W., Saechan V., Pradutkanchana J.et al. Epstein-Barr virus-associated peripheral T-cell lymphoma with gastrointestinal tract involvement // J. Med. Assoc. Thai. 2003 Sep; 86(9); 816-28.

108. Mladenova I., Pellicano R. Infectious agent and gastric tumors. An increasing role for Epstein-Barr virus // Panminerva Med. 2003 Sep; 45(3): 183-8.

109. Munch M., Hvas J., Christensen T.et al. The implications of Epstein-Barr virus in multiple sclerosis a review. // Acta. Neurol. Scand. Suppl. 1997; 169: 59-64.

110. Murray J.C., Bernini J.C., Bijou H.L et al. Infantile cytomegalovirus-associated autoimmune hemolytic anemia // J. Pediatr.Hematol.Oncol. 2001 Jun-Jul; 23 (5): 318-20.

111. Nakagomi H., Dolcetti R., Bejarano M.T. The Epstein-Barr virus latent membrane protein -1 (LMP-1) induces interleukin-10 production in Burkitt lymphoma lines // Int J Cancer. 1994. Apr 15; 57 (2): 240-4.

112. Niedobitek G., Meru N., Delecluse H.J. Epstein-Barr virus infection and human malignancies // Int. J. Exp. Pathol. 2001 Jun; 82(3): 149-170.

113. Odejans J.J., Van den Brule A.J., Jiwa N.M et al. BHRF 1, the Epstein-Barr virus (EBV) homoloque of the bcl-2 protooncogene is transcribed in EBV-associated B-cell lymphomas and in reactive lymphocytes // Blood. 1995 Sep 1; 86 (5): 1893-902.

114. Olson G.B., Kanaan M.N., Gersuk G.M.et al. Correlation between allergy and persistent Epstein-Barr virus infections in chronic active Epstein-Barr virus-infected patients // J. Allergy Clin. Immunol. 1986 Aug; 78(2): 308-14.

115. Palanduz A., Yieldirmark Y., Telhan L.et al. Fulminant hepatic failure and autoimmune hemolytic anemia associated with Epstein-Barr virus infection // J. Infect. 2002 Aug; 45(2): 96-8.

116. Pender M.P. Infection of autoreactive B-lymphocytes with EBV, causing chronic autoimmune diseases // Trends. Immunol. 2003 Nov; 24(11): 584-8.

117. Pollock B.U., Jenson U.B., Leach C.T.et al. Risk factors for pediatric human immunodeficiency virus-related malignancy // JAMA. 2003 May 14; 289(18): 2393-9.

118. Rand M.L., Wright J.F. Virus-associated idiopathic thrombocytopenic purpura//Transfus. Sci. 1998 Sep; 19(3): 253-9.

119. Ren Q., Sato H., Murono S. Epstein-Barr virus latent membrane protein -1 induces interleukln- 8 through the nuclear factor-kappa B signaling pathway in EBV-infected nasopharyngeal carcinoma cell line // Laryngoscope. 2004 May; 114 (5): 855-9.

120. Richardson C., fielding C., Rowe M., Brennan P. Epstein-Barr virus regulates STAT-1 through latent membrane protein -1 // J. Virol. 2003. Apr; 77 (7): 4439-43.

121. Roberts M.L., Cooper N.R. Activation of a ras-MAPK-dependent pathway by Epstein-Barr virus latent membrane protein -1 is essential for cellular transformation // Virology. 1998. Jan 5; 240 (1): 939.

122. Robertson E.S., Lin J., Kieff E. The amino-terminal domains of Epstein-Barr virus nuclear proteins 3A, 3B and 3C interact with RBPJ (kappa) // J/ Virol. 1996 May; 70 (5): 3068-74.

123. Rosendorff A., Illanes D., David G et al. EBNA 3C coactivation with EBNA 2 requires a SUMO homology domain // J. Virol. 2004 Jan; 78 (1): 367-77.

124. Rosenow E.C., Hurley B.T. // Arch.intern. med. 1984. V.144. P/764-770.

125. Rothenberger S., Burns K., Rousseaux M et al. Ubiquitination of the Epstein-Barr virus encoded latent membrane protein -1 depends on the integrity of the TRAF binding site // Oncogene. 2003. Aug 28; 22 (36): 5614-8

126. Sadler R.H., Raab-Traub N. // J. Virol. 1995. V.69(2). P.l 132-1141.

127. Sail A., Caserta S., Jolicoeur P et al. Mitogenic activity of Epstein-Barr virus-encoded BARF-1 protein // Oncogene. 2004 Jun 17; 23 (28): 4938-44.

128. Schaefer B.C., Strominger S.H. Host-cell-determined methylation of specific Epstein-Barr virus promoters regulates the choice between distinct viral latency programs // Mol Cell Biol. 1997 Jan; 17 (1): 364-77.

129. Sekigawa I., Nawata M., Seta N et al. Cytomegalovirus infection in patients with systemic lupus erythematosus // Clin.Rheumatol. 2002 Jul-Aug; 20 (4): 559-64.

130. Sheng W., Decaussin G., Ligout A et al. Malignant transformation of Epstein-Barr virus negative Acata cells by introduction of the BARF 1 gene carried by Epstein-Barr virus // J. Virol. 2003 Mar; 77 (6): 3859-65.

131. Shimakage M., Kawahara K., Sasagana T.et al. Expression of Epstein-Barr virus in Thyroid carcinoma correlates with tumor progression // Hum. Pathol. 2003 Nov; 34(11): 1170-7.

132. Sissons J.G., Bain M., Wills M.R. Latency and reactivation of human cytomegalovirus // J. Infect. 2002 Feb; 44 (2): 73-7.

133. Steinmann G.// The Human Thymus. Ed.by H. Muller-Hermelink .- Berlin ect. 1986. P.43-89.

134. Stevenson M., Volsky B., Hedenskog M.et al. Immortalization of human T-lymphocytes after transfection of Epstein-Barr virus DNA // Science. 1996. №4767. P.980-984.

135. Strannegard O., Strannegard I.L., Rystedt I. Viral Infections in atopic dermatitis // Acta. Derm. Venereol. Suppl. 1985; 114: 124-4.

136. Strockbine L.D., Cohen J.I., Farrah T et al. The Epstein-Barr virus BARF 1 gene encodes a novel, soluble colony-stimulating factor-1 receptor // J.Virol. 1998 May; 72 (5): 4015-21.

137. Taga K., Chretien B., Cherney I.et al. Interleukin 10 inhibits apoptotic cell death in infectious mononucleosis T-cells // J. Clin. Invest. 1994; 94: 251-260.

138. Tao Q., Roberson K.D. Stealth technology: how Epstein-Barr virus utilizes DNA methylation to cloak itself from immune detection // Clin immunol. 2003 Oct; 109(1): 53-63.

139. Teo C.G., Griffin B.E. Epstein-Barr virus genomes in lymphoid cells: activation in mitosis and chromosomal location // Proc. Nat. Acad. Sci. 84: 8473-8477, 1987.

140. Triantos D., Porter S.R., Scully C., Teo C.G. Oral Hairy leukoplakia: clinicopathologic features, pathogenesis, diagnosis, and clinical significance // Clin. Infect.Dis. 1997 Dec; 25 (6): 1392-6.

141. Viruses and cellular immune response. / Ed by Thomas D.B., Marcel Dekker. Inc. 1993.

142. Vockerodt M., Tesh H., Kube D. Epstein-Barr virus latent membrane protein -1 activates CD25 expression in lymphoma cells involving the NF-kappa B pathway // Genes Immun. 2001 Dec; 2 (8): 433-41.

143. Vogel A., Manns M.P., Strassburg C.P. Autoimmunity and viruses // Clin. Liver Dis. 2002 Aug. V.6 №3. P.451-465.

144. Wan J., Sun L., Nendoza J. W et al. Elucidation of the C-JunN-terminal kinase pathway mediated by The Epstein-Barr virus encoded latent membrane protein -1 // Mol. Cell Biol. 2004. Jan; 24 (1). 192-9.

145. Wang D., Liebowitz T., Wang F.et al. // J. Virol. 1988. V.62. P.4173-4174.

146. Webster-Cyriague J., Raab N. Transcription of Epstein-Barr virus latent cycle genes in oral hairy leukoplakia // Virology. 1998 Aug 15; 248 (1): 53-65

147. Wu H., Kapoor P., Frappier L. Separation of the DNA replication, segregation, and transcriptional activation functions of Epstein-Barr virus nuclear antigen 1 //J. Virol. 2002 Mar; 76 (5): 2480-90.

148. Yang j., Deng X.Y., Gu H.H et al. Epstein-Barr virus latent membrane protein -1 induces the telomerase activity in human nasopharingeal epithelial cells // Sh yan Sheng Wu Xue Bao. 2001. Sep; 34 (3): 207-11.

149. Yokogama A., Tanaka M., Matsuda G et al. Identification of major phosphorylation sites of Epstein-Barr virus nuclear antigen leader protein

150. EBNA-LP): ability of EBNA-LP to induce LMP-1 cooperatively with EBNA-2 is regulated by phosphorylation // J.Virol. 2001 Jun; 75 (11): 5119-28.

151. Zhang L., Hong K., Zhang J., Pagano J.S. Multiple signal transducers and activators of transcription are induced by EBV LMP-1 // Virology. 2004. May 20; 323 (1): 141-52.

152. Zimber U., Adldinger H., Lenoir G.M.et al. // J. Virol. 1986. V.5. P.56-66.

153. Zur Hausen A., Brink A.A., Craanen M.E et al. Unique transcription pattern of Epstein-Barr virus (EBV) in EBV-carrying gastric adenocarcinomas: expression of the transforming BARF-1 gene // Cancer Res. 2000 May; 60 (10): 2745-8.

Информация о работе

Азова, Мадина Мухамедовна
кандидата биологических наук
Москва, 2005
ВАК 03.00.15

Диссертация

Генетические основы ассоциации между тимомегалией и семейными заболеваниями опухолевого, аутоиммунного и аллергического характера - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы