Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом на Юге Дальнего Востока России

ВАК РФ 03.00.06, Вирусология

Автореферат диссертации по теме "Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом на Юге Дальнего Востока России"

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ 1ВДЩШЖХ НАУК ИНСТИТУТ ПОЛИОМИЕЛИТА И ВКУСНЫХ ЭЯЦЕШИТОВ

С10Н03А РАИСА АЛЕКСАВДРОВЕА

ГЕМОРРАГИЧЕСКАЯ ЛИХОРАДКА С ПОЧШШМ СИЩРОМОМ НА КГЕ ДАЛЬНЕГО ЗОСТОКА РОССИИ (ВИРУСОЛОГИЧЕСКИЕ И ЭКОЛОГО-БГСда®ОЛОЗЖЕСКИ2 АСПЕКТЫ)

03.00.06 - вирусология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наун

На правах рукописи

Москва - 1323

Работа выполнена в Научно-исследовательском институте эпидемиологии и микробиологии Сибирского отделения РАМН.

Научный консультант:

Академик Российской АМН, профессор^ Г.П.СОМОВ

Официальные оппоненты: член-коюр.РАШ,

доктор биологических наук, профессор

Тарасевич И.В.

доктор кедицикских наук, профессор

Бочаров А.Ф.

доктор иедицкнских наук, профессор

Погодин« В.В.

Ведущая организация - Государственный НИИ стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов имЛ.А.Тлрасевича.

Защита состоится " ¿¿¿¿'//Л_ 1Э93 г

в часов на заседании Специализированного совета Д 001.27.01 при Институте полиомиелита и вирусных энцефалитов РАМЫ (142782, Московская область, Ленинский район,п/о Института полиомиелита).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института полиомиелита и вирусных энцефалитов РАМН

•Автореферат разослан _1993 г

Ученый секретарь

Специализированного совета

кандидат биологических наук О.А.Медведюша

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность птюблеш. Проблема геморрагической лихорадки о почечным синдромом (ГШС) в наией стране уделяется значительное внимание. Связано это с тем, что ГЛПС является одной из самых распространенных болезней среди зсоюзных природноочаговых инфекций. Достаточно сказать-, о тем, что из числа природноочаговых болезней, которые регистрируются по России ежегодно, более 60$ приходится на долю ГЛПС (Л.М.Иванова и дрД973).

В дальневосточном регионе эндемичными до ГЛПС является Приморский край и часть территории Хабаровского края и Амурской области (К.И.Акулов н др. 1976).

Изучение ГШС было начато в 30-е годы текущего столетия, когда на территории' юга Дальнего Востока нашей страны отечественными исследователями были получены сведения о клинике заболевания и его вирусной природе, внеказано предположение о связи заболевания с дикими мышевидными грызунами и была установлена нозологическая самостоятельность болезни (В.А.Тарганская 1935,Л.И.Казбин-цев 1941, А.В.Чурилов 1941, А.А.Смородинцев и др. 1963).

За 40 лет изучения ГЛПС были накоплены фактические данные, дозволившие сделать обобщения по многим аспектам проблемы. Однако длительное время в проблеме ГЛПС нерешенными оставались кардинальные вопросы и превде всего выделение и изучение вируса, разработка методов специфической диагностики и профилактики инфекции.

Во второй половине 70-х гэйов ( н.чг.Хеаи др.1978) показали, что обнаружить специфический антиген вируса ГЛПС можно при использовании непрямого метода флюоресцирующих антител (ШФА) в крио-статных срезах органов грызунов-носителей вируса после обработки юс сывороткой переболевшего ГЛПС. От полевой мыши (Арсаечшв а£гаг1из ) авторами был изолирован этиологический агент корей- I -

ской геморрагической лихорадкитат 76-118, названный вирусом Хаятаан.

Сообкеняэ шнокорейских исследователей послукало реиакщж фактором дая разработки катодов специфической диагностики инфекции, способствовало успеху выделения в ряде стран от больных и грызунов возбудителя к послужило основой для широкого изучения многих аспектов проблема ГЛПС. В последние года была получена достоверная шйормацйя об источниках иь^даи, биологической, биохимической п антигенной характеристике возбудителя, клинических и ¡шмунологических особенностях проявлений ГЛПС, а также разработаны новые методы специфической лабораторной диагностики инфекции.

Необходимость проведения исследований по ГЛПС в одном из очагов юга Дальнего Востока - Приморском крае - определялась ежегодной регистрацией случаев ГЛПС и относительно высокой летальностью (1,2-22,0?)• По мере возрастания антропогенного воздействия на природу в последнле годы расширился и ноэоарэал ГЛПС, о чём свидетельствуют данные роста заболеваемости во вновь осваиваемых северных районах региона (Р.А.Слонова и др.1983).

К началу планирования настоящей работы не имелось сведений о конкретных источниках инфекции, их эпидемиологической значимости, характере связи эпизоотического и эпидемического процессов, не был выделен возбудитель на территории нашей страны, поэтому отсутствовали методы специфической лабораторной диагностики инфекции и данные о его характеристике.

Выяснение этих вопросов осуществлялось в рамках тэыы НИР "Изучение этиологии гсморрагической лихорадки с почечным синдромом (ГЛПС)" гё гос.регистрации 79062653 (197&-ГЭ83); " Изучение возбудителя и вопросов природной очаговости геморрагической ли- 2 -

¿орпдки с почечным синдромом (ГЛ1С)'' £ гос.регистрации 01.84. (№05740(1984-1988);"Биологические и антигенные свойства зозбуди-теля Х'е1:.срраг;гтос:со:' лчхоргдшх с почечный счцдромем (ГЛЕЮ) ь закономерности циркуляции его о очагах Дальнего Востока" $ гос.регистрации 01.89.0015194(1982-1991). Все вышеперечисленные теш НИ? входили составной частью в Государственную программу "Здоровье человека в Сьбири".

Дель Г1 задачи исследования. При планировании исследований была поставлена цель - выделить вирус от больных ГЖ! и животных -природных носителей вируса, дать экологическую и антигенную характеристику возбудителю и разработать методы специфической диагностики инфекции. В связи с этим необходимо было решить сле-дувдие задачи:-

1. Определить круг яиэотнкх-яосителей вируса ГЛПС среди мелких млекопитаюцчх, оценить значение разных видов в поддержании икр-, кулгяцгл вируса в очагах к ка;с источников инфекции для чело«екг.

2. Для выяснения механизма циркуляции возбудителя ГЛПС - изучать характер естественной инфекции у жнвотных-носителей вируса.

2. Выделись штаммы вируса ГЛПС от больных ладей„отвотных-носите-лей вируса и представить их ангигеннув характеристику.

4. Определить значение циркулиружих на территории региона серо-тшов вируса в этиологии заболевания.

5. Раскрыть эпидемиологические особенности инфекции в регионе в связи с характером эпизоотического процесса и антигенной неоднородностью возбудителя.

5. Разработать на основе штаммов,циркулирующих в очагах юга Дальнего Востока,тест-скстсму для диагностик инфекции.изучить характер иммунного ответа при ГЛПС у больных и грызунов-пшродных носителей вируса,выявить наличие атипичных и инаспарантшх форм инфекции. - 3 -

Научная новизна. Бяеръие определен г.рут животных-носителей хантавируса на территорл края. Спонтанная зараженность выявлена у 17 белов ыггзкопияавдих и 10 видов птщ. Доказано, что циркуляцию вируса в очагах, в основной, обеспечивают пять видов грызунов семейств шшшшх с хомячьих.

- Получены принципиально новые данные о течении персистирукщей >;нфекцЕи у грызунов - осксених носителей хадтавируса. В инфекци-

, онном процесса спонтанно зараженных зивотных условно выделено четыре стадии. В связи с чем, предложено использовать соотнояе--нае даунов-носителей, находящихся в разных стадиях инфекционного процесса, для объяснения изменений активности и цикличности эпизоотического процесса.

- Представлены новые данные о связи эпидемического проявления инфекции в очагах разных ландшафтных зон с характером эпизоотического процесса-.в популяциях грызунов рода ApoieEus.

. - Установлено существовачие е регионе двух эпидемических очагов ТЛПС: природнет, с основными источниками инфекции полевой ( Ар.' agrarius ) и зосточноасиатокой ( Ap'ïpeninsulae ) мышью, и синан-трспшх, ь которых источником инфекции является серая крыса ( Battus norvegicus ).

- Впёрше от больных ГЛПС, пяти видов грызунов и одного вида птиг выделени виашы хантавируса, получены данные об их биологических и антигенных свойствах, характере циркуляции серотипов вируса в популяциях грызунов, ^остановлена связь серотипов хантавирусов с определенным видом кивотного - экологическим xoi.îhhom.

- Представлены серологические и вирусологические доказательства преимущественного значения в очагах Г1ПС юга Дальнего Востока первого серотига хаяташруса в этиологии заболевания.

- Впервые получены данные о характере гуморального ответа к раз-

- 4 -

ши серо типам ."шнтавируса у болъных и переболевших ГЛПС, грызунов - природных носителей вируса - и состоянии естественного им-мунитйта у здорового населения в очаговом регионе.

З&дтэетичвская' и практическая значимость габоты. Получены неизвестные до настоящих исследований факты об экологии и антигенной характеристике возбудителя ГЛПС! в дальневосточном регионе, которые позволили по новому оценить некоторые принципиальные положения проблемы. Б частности представить данные о широкой экологической пластичности хантавируса, обосновать загдзяение, что основание резервуарами вируса в очагах, обеспечивавшими циркуляцию на территории региона яе менее пяти.серотипов вируса, являются грызуны рода.Аройеишз,, С1е-№г±ош>пуа и Еа^Лиз. . Показать значенк- мышей двух видов (А.&згггЭлю и. А.решлви1ае ) - носителей'первого серотлпа хантавируса, как источников инфекции, и установить связь зпвдсмяческого проявления инфекции в очагах с характером эпизоотического процесса в популяциях грызунов.

Б практическом плане сведения об антигенной структуре циркулирующих в крае серотипов хантавируса и значении их в патологии человека способствовали целенадравленному ¿онструированшз диагностических препаратов и отбору штатов - кандидатов для будущих вакцин. На основании данных о характере эпидемического проявления инфекции в очагах разных ландшафтных зон, а такке материалов о видовом составе грызунов-носителей хантавируса, осуществлено эколого-эпицемиологкческое районирование территории региона, что может служить основой при планировании профилактических мероприятий.

- Впервые на основе антигенов штаммов серотипов хантавируса, циркулирующих в Приморском крае, создана тест-система (культураль-ный диагностику^?) для серологической диагностики инфекции.

- 5 -

Это позеолняо пря проведении серологических исследований в очага; ГЖ/' установить истинные размеры заболеваемости в регионе, расширить представление о диапазоне клинических проявлений ¿щдекцкл, выявить легкие и бессиигасынце формы, о которых ранее сведений не имелось.

Шесть штамксвхантавнруса ох грызунов-нссигелей и больных людей ГЛПС депонированы в Государственную коллекцию вирусов при Институте вирусологии им „Д.И. Ивановского (номера депонента -708,703,710,711,7Ь2,676). На птамм 1-го серотипа вируса ШС, • используемого для специфической лабораторной диагностики получено авторское свидетельство ^ 1319555, Шташ включен в поливалентный культуралышй диагностикум ГЛПС, технология изготовления котрого защищена авторским свидетельством № 1365918. Выпуск препарата осуществляемся на база Института полиомиелита и вирусных энцефалитов РАМ.

Материалы исследований по ГЛПО включены е программу лекций студентам во Владивостокской Государственной медицинском институте (акт внедрения ст I5.D3.86 г).

Основные положения, выносимые на затату.

1. Резервуарами хантавируса в счагах юга Дальнего Востока России являются" 17 видов млекопитающих и 10 видов птиц.

2. Основное значение в эпидежологли ГЖС на юге Дальнего Востока России принадлежит грызунам рода Аройенив ( полевой и восточ- . ноазизтекой мышам). Эпидемическая активность природных очагов зависит от характера эпизоотического процесс- в популяции этих видов животных.

3. О выделении четырех стадий инфекционного процесса б течении хактавирусной инфекции у грызунов-носителей вируса, позволяющей

- 6 -

давать оценку состояния эпизоотического процесса в популяциях зараженных грызунов.

4. О циркуляции в очагах юга Дальнего Востока России пята серэтя-пов хантавируса и основном значении первого свротипа вируса в патологии человека.

5. О сроках формирования гуморального иммунитета к серотипагл хантавируса' у больных ГЖГС, наличие в регионе легких и стертых форм заболевания и уровне естественного иммунитета к хантавиру-' • су у здорового населения кга Дальнего Востока России.

■Апробация "работы. Основные материалы диссертация были доложены и обсудцекы на 19 и 20 итоговых научных сессиях Института полиомиелита и вирусных энцефалитов АМН СССР (Москва 1981,1985). На пленуме Всесоюзной проблемной комиссии "Арбовирусы" (Таллинн', 1984) и пленуме проблемной комиссии Сибири и Дальнего Востока по природноочаговш болезням (Хабаровск 1985, Владивосток 1986). На двух Всесоюзных конференциях по природноЗ очаговости болезней (Тюмень 1Э84, Краснообск Новосибирской области 1989). На республиканской конференции вирусологов Казахстана (Алма-Ата 1982), республиканской научно-практической конференции (Якутск 198?" , Омск 1938, Владивосток 1989). На Международном симпозиуме по ге- . моррагической лихорадке с почечным синдромом-(Ленинград 1991).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 60 работ.

Объем и структура -работы. Диссертация изложена на 253 стра- • ницах машинописного текста, состоит из введения, 6-ти глав собственных исследований, обсуждения получэнных результатов, выбо-дов и списка цитируемой литературы, включающего 289 источников,. в том числе 185 иностранных. Работа иллюстрирована 20- рисунками 4 и 60 таблицами.

- ? -

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ЙССЛВДОВАНШ.

Заключения и выводы в работе были сделаны на основании данных, полученных за период I980-I99I гг при обследовании 23364 млекопитающих 28 видов, 9 семейств, 5 отрядов к 283 птиц 34 видов, 9 отрядов, отловленных на участках очаговой территории в различных ландшафтных зонах края. От животных и птиц на исследование получено 44400 проб органов и 4521 проба крови. ОЬ 675 больных ГЛПС, 195 больных с подозрением на данное заболевание и 215 боль-.яых с другая: диагнозами заболеваний, сходными по некоторым клиническим сшштоахм с ГЛПС, исследовано 2834 сыворотке крови. Для изоляции вируса ГЛПС использовали органы от 252 грызунов пяти видов к 13 птиц и 46 проб органов лвдей, умерших от ГЛПС.

Выделение вируса проводили на клетках Vero Б б (клон клеток ' африканской зеленой мартышки С 1106 - свь -1586 - African Туре Collection ). Экспериментальные исследования выполнены на 298 новорожденных и 130 взрослых белых мышах ice , крысах Вис-тар и' сирийских хомячках, полученных из питомника АМН СССР "Столбовая".

Поликлональные иммунные сыворотки к серотипам хантавируса были приготовлены на крысах Блсгар и сирийских хомячках. Фрагмент работы с коноклснальными антителами (МХА) был выполнен совместно с Е.А.Ткачанко -в Институте полиомиелита и вирусных энцефалитов РАМН.

Для изоляции штаммов хантавируса использовали методы общепринятые в вирусологии. Антитела к хангавирусу в сыворотках крови определяли с помощью непрямого метода флюоресцирующих-; антител (ЬША), метода радиоиымунологического анализа (РИА), реакции нейтрализации (РН), которую ставили по методу ( A.Takeaafca, 1985 ) и реакции торможения гемагглютинацш (ИГА). Согласно рекоменда-

- 8 -

цейм , изложенным в Методах лабораторной диагностики геморрагической лихорадки с почечным синдромом М.,1982, определяли антиген хантазируса в суспензиях органов с помощью иммуноферментно-го анализа (ИИ). Критерием зараженности служили данные о присутствии антигена вируса ГЛПС в легких - наиболее часто поражаемом органе. РИА -блот прямого варианта применяли при серодифферен-циацпи антигенов - 10$ суспензией инфицированных легких грызунов.

В работе были использованы штаьялн хактавируса, выделенные в других лабораториях. Шташ 76-110 вируса Хантаан (Ю.Корея),штамм Нй-И (Япония), штамм нИипаз (Швеция) и штамм 1820, выделенный з насей стране от рыжей полевки (В.й.Башкирцев и др.1984).

При обработке данных по заболеваемости ГЛПС использованы методы эпидемиологического анализа (Е.Б.Павловский 1364, Л.В.Грома-шевский 1565), при сборе и обработке природно-очагового материала зоологические метода (В.В.Кучерук 1972, Н.В.Тупккова 1565). Работа по компьютерной обработке данных о заболеваемости выполнена на базе ТЙГ ДВО АН СССР совместно с к.мат.наук Е.С.Борисовец и м.нс. Е.Л.Кушнаревыы.

РЕЗУЛЬТАТЫ КССЛЕДОВАНИЙ И ОБСУЖДЕНИЕ Экологическая характеристика возбудителя геморрагической лихорадки с почечным синдромом в очагах ига Дальнего Востока России.

В результате проведенных исследований получены факты, по-ноео-му освещаются некоторые стороны экологии вируса ГЛПС. Впервые представлены данные о круге кивотшх - природных носителей хактавируса в очагах ГЛПС нз территории региона. Подтверждено ранее высказанное (Б.К.Гаврилш, А.А.Смородинцзв 1968, П.З.Изотов, Г.М. Солдатоз 1962, А.А.Смородинцев и др.1963) положение о роли мышевидных грызунов, как резервуаров вируса, а такае установлено участие б его циркуляции других теплокровных животных и птиц, отно-

- 9 -

сящихся к различным таксономическим группам, что свидетельствует о широкой экологической пластичности вируса ГЛПС.

С помощью лабораторных, методов исследования (ИФМ.К/М) по обнаружению сдещфгчесхого антигена в органам и антител в крови зараженность была выявлена у млекопитающих -представителей 5 отрядов, 9 семейств, 17 видов. Из отряда грызунов в семействе мышиных носительство хантавируса обнаружено у полевей, восточноа-зиатской и домовой шшзй, мыши-малшки, серой и черной крыс. Б .семействе хомячьих - у дальневосточной, красной и красно-серой полевок,"крысовидкого и даурского хошчков. В семействе беличьих-у обыкновенной белки и азиатского бурундука. Из отряда насекомоядных специфический антиген вируса обнаружен в семействе земле-ройковых - у средней бурозубки. Из отряда парнолапых - у домят-' ней свиньи; отряда хищников - у енотовидной собаки; отряда аай-деобразшх - у ьусгарнпкоаого зайца.

Йа основании обнаружения инфицированных серых крыс (4,2%) к доковых мышей (2,3).в городах установлено наличие в крае синан-тропных очагов инфекции. Антиген хантавируса выявлен у обследованных птиц десяти видов, что позволяет цредпологшть о возможности вовлечения их в эпизоотический процесс. Инфицированные птицы были обнаружены ж в других очагах Дальневосточного региона (1 .И.Иванов и др.1991).

•Несмотря на широкий круг животных - носителей хантавируса , роль в поддержании циркуляции вируса ГШС в природных очагах края принадлежит' пяти видал: представителям мышиных - полевой, востсч-ноазиатской мыаам и хоикчьих - дальневосточной, красно-серой и красной полевйагл. При сравнении данных о зараженности грызунов наиболее высокие показатели инфицированности выявлены у дальневосточной полевки ..к. ЕАСТочно£Зиатскр]1лдст;:- 10;_22;_ссо1-

- 10 -

ветственно. У нолевой мьпги этот показатель был в 2,6 раза ниже, чей у дальневосточной полевки (Р-0,001) и в 1,8 раза ниже, чем у вооточноазиатско* мши (Р=0,001). Однако в общей сумме .чнфи-цированных грызунов значительную долю составляли мыши: полевая-39,в восточкоааиатская - 22,7%, которым принадлежала основная роль в формировании природных очагов инфекции. Деля дальне-' восточной полевки составила 20,СЙ, красно-сзрой - 8,5% и красной полевки -2,'/$ (табл. I).

В результате многократных эпизоотологических обследований, прозеденшх на 122 участках очаговой территория установлена приуроченность зараженных грызунов к разным ландшафтным зонам, в кевдой из которых доминирующее положение занимал определенный вид или виды. Полевая мышь доминировала (48,1% среди инфицированных грызунов) на безлееннх пространствах ПриханкаЕекой низменности. Максимальные показатели встречаемости инфицированных ■ полевых мышей (8,62 на 100 ловушко-сутск) отмечены ка участках равнинной очаговой территории. На лесолог.рытой территории среди инфицированных грызунов преобладала восточноазиатская мышь-81,<$, максимальный показатель встречаемости инфицированных восточно-азиатских мышей в очагах лесной зоны составил на 100 ловулко-сутск - 6,98.

Циркуляция хантавируса среда грызунов определенного звда заметно отличается по годам. У полевой мыши процент зараженных зверьков в годы снижения их численности и депрессии (1985-1990) не превышал 2,1-3,1$ и возрастал в 4,2-6,3 раза (РгО.ОО!) в годы подъема их численности (1981, 1988); у восточноазиатской мыши резких колебаний зараженности не отмечено. Высокий процент инфицированных зверьков отмечался, как з год пика их численности; так и снижения (1981 и 1982).

ТАБЛИЦА I

ОШАШшЖЕ АНТИГЕНА. ХАНТАВИРУСА У ОТДЕЛЬНЫХ ВИДОВ ГРЫЗУНОВ

Ввды грызуноЕ

Обследовано Антиген грыз^ов

хантавируса

оонеруяен

у^гшзунов

/' т

Процент грызунов по видам

среди среди

обследованных гнфицировашша

Гыгдь полевая 10246 7,1-0,2 47,0*0,3 • 39,1*1,1

госточноазиат-ская Крыса серая ' " черная 4059 . 1141 576 10,2-0,4 6,3^0,7 ■ 0,3±0,2 18,6-0,2 5,2±0Д 2,6-0,1 22,7*0,9 3,6-0,4 1,0*0,2

Мышь домовая 985 3,6-0,5 4,5±0,1 1,7*0,2 .

Полевка Дальневосточная " красно-сарая' " -красная 2100 1675 672 18,5^0,8 7,0±0,6 5,6-С;,8 9,б±о,: 7,6-0,1 3,0*0,1 20,1*0,9 8,6*0,6 2,2*0,3

}.!ышь-калюгка 99 1,0*1,0 0,45±0,04 0,25*0,1

Белка обыкновенная 44 2,2-2,2 0,2^0,03 0,05*0,05

Бурундук азиатский 22 4,7±4,5 ед±о,о2 0,05*0,05

Хомячок крысоввдный 156 4,5-1,6 0,7*0,05 0,37±0,1

Хомячок даурский 129 6,2-2,1 0,59±0,05 0,45±0,2

В многолетней динамике наблюдались совпадения подъема инфя-цпрованностЕ у солевой шли и красной полевки CI98I и 1988), восгочиоазиатской мпгп и краскс-сэрой полегки (1982 и IS87). В то se время среди носителей хантавируса ежегодно доминирующее пслоаенпо занимали полевая или восгэчноазьатская мыши.

Установленное факт асинхронного развития хантавирусных эпизо-отий у основных носителей вируса - полевой и восточноазнатской мышей , обитающих в разных ландшафтных зонах, приводит, вероятно, к постоянному наличию на определенных очагоЕЫх территориях активного эпизоотического процесса, что отражается в ежегодной регистрации заболеваний ГШС.

Выявлена зависимость частоты обнаружения зараженных зверьков от возраста, половой и генерационной структуры популяции грызунов-• носителей вируса. Процент звзрькоз, содержащих специфический антиген в легких у полевой мыли в возрасте одного месяца, составил 1,6, старше четырех месяцев - 9,7 и одного года - 20,0. Заражен-, ность половозрелых самцов полевой мгпи в 11,8 раза (BsO.OGI) превышала зараженность неполовозрелых самцов. У самок этого вида гры-зуксв разница составила 1,9 раза (PsO.OOI).

Сроди обследованных полевых мышей особи с антигеном хантавируса в легких значительно чаща встречались у грызунов, родившихся с апреля по июнь (I s II генерации), по сравнению с грызунами, родившимися с августа по октябрь (III и 1У генерации). У восточно-азиатских нишей, наоборот, более высокие показатели зараженности были выявлены у зверьков III и 1У генерации (24,0$) пс сравнению с особями I и II генераций (8,9^).

Получены данные о характере инфекционного процесса в популяци- . ях носителей хантавируса,годовых и сезонзих изменениях интенсивности и факторах, обуславливающих эти изменения.

- 13 -

При многолетних Е&блдденпях в очагах ГЛПС установлено, что инфицированные грызуны встречались зо все сезоны года,но число зараженных грызунов увеличивалось к осени, когда в популяциях преобладали зверьки 4-5 месяцев,родившихся весной и в начале лета. Пр обследовании грызунов специфический антиген обнаруживали в разных органах и экскретах. С наибольшей частотой антиген хантавзруса выявлял® в легких,гатей в печени,слюнных железах, почках, селезенке. В ходе исследований было установлено,что в развитии инфекционного процесса спонтанно зараженных животных условно' можно видвлить четыре стадии: первая стадия-обнарртеняе специфического.антигена только б легких; втсрая-наличие антигена в легких и других органах; третья-в легких, органах и экскретах. В этой стадии инфекционного процесса наблвдалась активна? диссе-минация вируса в окружающую среду. Во второй и третьей стадиях наряду с обнаружением специфического антигена в органах, определяли антитела к хантавирусу в сыворотках крови. Четвертая стадия характеризовалась присутствием у грызунов только антител в крови При многолетнем наблюдении га популяцией мышей на стационарном участке, с учетом условно выделенных стадий хантавирусной инфекции у грызунов, выявлена фаэносгь течения эпизоотического процесса: нарастание процесса, пик активности и затухание. За пятилетний период в популяциях полевой мыши двадды наблвдался низкий уровень эпизоотического процесса (1986,1990 гг.).нарастание его напряженности (1987), период высокой напряженности (1988 и угасаниэ эпизоотического процесса (1989)(р^с.1). Общая инфици-рованнось полевых мышей в год напряженного эпизоотического процесса составляла 16,в годы его низкой активности- 1,2-1,9$. рурдняд картина характера эпизоотического процесса отмечена в популяции восточноазиагской мыши. Выявлен спад активности эпи-

- 14 -

I

м сл

40 35

30 25

20

15 10

III 1У Т986 406 843

III 1У 1987 320 295

Рис .11

Динамика обнаружения антигена хантавируса в легких и экскретах мышей

По оси ординат-процент,по оси абсцисс-сроки обследованил(квар?ал,год) I-процент восточнсазиатских мышей с антигеном хантавируса в легких, 2 - половых мышей, бветлые столбики-антиген хантаияруса в экскретах полевой мыши, заштрихованше-восточно-азиатской мши. 3 - количество обследованных нолевых мышей, 4 - восточноазиатских мышей

зоотичэского процесса в 1987 г,низкая активность в 1988г. к подъем активности в 1989 г.

Не всегда наличие антигена в легких з органах сопровождалось диссеминацией рируоа в екр}жалцую среду, о чем свидетельствовали данные обследования экскретов у полевых мышей весной 1987 г. Отмечено, что на фена активного эпизоотического процесса возрастал процент грызунов, содсраащих специфический антиген одновременно е легких,органах и экскретах, а в фазе затухания среда носителей хантавируса чаще встречались особи с антигеном только в летки

Следовательно, если в годовых циклах сезонной динамики инфици-рованности различия могут быть не значительными, то в частоте выявления грызунов в разных стадиях инфекционного процесса различия потуг быть существенны.

Активность эпизоотического процесса на конкретной очаговой тер ритории обусловлена, по-видимому, соотношением в популяции грызунов-носителей особай, находящихся в разных стадиях инфекционного процесса. Присутствие в популяции значительной части зверьков, у которых в экскрстирующих органах и экскретах обнаружен антиген хантавируса, может служить косвенным признаком активности эпизоотического процесса с диссемидацией вируса в окружающую среду. Наиболее интенсивное размножение и выделение хантавируса в -окружающую средуогмечается в первый месяц после заражения (Н.С.Апеки-на-1989, HiWvXee et aJl98I). В последнее время. основываясь на да* ных об инфицированности носителей хантавируса, предпринимаются попытки охарактеризовать эпизоотический процесс и найги его связз с заболеваемость© ГДПС. В основном с этой целью используются данные обнаружения специфического антигена в легких грызунов и его концентрация (Н.С.Апекина и др.1982, М.А.Захарова 1985). Вместе с тем,на наш взгляд, более полную информацию об активности эдязо-

- 16 -

(этического процесса дают данные по обнаружении антигена хантави-руса в органах выделения и экскретах, наиболее достоверно отражающие периоды выделения возбудителя в окружающую среду. Одним, из факторов, сдерживающим развитие эпизоотического процесса,судя по нашим данным, может быть преобладание в популяции носителей особей, содержащих антитела к хангевирусу. По данным К.Н.Гаври-" ловской 1988Д.Ю.СЫ11а et а1.1987, Х.'К.гкши.е еЬ а!;' 1988 грызун« в Еозрастс одного—дьух месяцев с пассивно приобретенным иммунитетом представляют пополнение, защищенное от хантавирусной инфекции.

Сетотипы хантавицуса в очагах ста Дальнего Востока России и пх значение в этиологии геморрагической лихорадки с почечным синдромом.

От'больных ГЛПС, пяти видов грызунов-носителей хантавируса и птицы (желтогорлой овсянки) на клеточной культуре Уего 36 , выделен 21 штамм вируса.

На основании данных серодифференциации штаммов в Е«М и РЯ, с использованием референс-сывороток от больных ГЛПС, иммунных сывороток от животных и ыоноклональнкх антител (ЖА) впервые показано, что в очагах Приморского края циркулируют разные серотиш вируса ГЛПС. В результате тишрования штаммов в ДША, с использованием референс-сывороток огбольных ГЛПС из дальневосточного региона с антителами к первому серотипу вируса и европейского региона - ко второму серотипу, среди исследуемых штаммов выявлено две группы. Одна группа,включающая 12 штаммов (три штамма, выделенные от полевой мыши, три-от восточноазиатской, четыре- от больных ГЛПС и по одному штамму от красной и красно-серой полевок), по взаимодействию с сыворотками больных ГЛПС из дальневосточного региона не отличалась от первого серотипа; вторая группа, включающая 6

- 17 -

штаммов (два, выделенные от дальневосточной полевки, два - от полевой мши и по одному - от восточноазиагской мыши и красной полевки), имела более тесную связь со вторым серотипом, поскольку титр антител, яри использовании антигенных препаратов этих штаммов, был выше в сыворотках крови больных из европейского рее гиона. Для проведения более детального анализа антигенных различий и уточнения взаимосвязи мэвду шгашами использовали 17-ША, приготовленные к первому серотипу хантавнруса - штамм 76-118, . второму - штамм ЕаПлаа ' и третьему - штамм

С помощью девяти МКА, приготовленных к штамму 76-118 и ВЕ-11 , удалось показать сложность антигенной композиции шт&чаюв хантаЕИ-руса, циркулирующих в очагах региона, выявить в груше исследуемых штаммов четыре серотша, показать сходство между штаммами, • выделенными от больных и грызунов, а также возможность носитель-ства грызунами'одного вида антигенно разных серотипов.(табл.2). Сходство к шести МКА первого серотипа отмечено у семи из 15 иссл<

• дозяаыых , штаммов, в г ом числе выделенных ох больных ГЛПС.

Два штамма, изолированные от красно-серой полевки (4450) и. боль-

• ного ГШС (22403) на основании различия по реакции с МКА ( 5-8-' и Д -9-5-8) выделены в отдельную группу. Четыре штамма, выделенные от больных (5524,26250), Еосточноалиатской мыши (4588), красной полевки (10290) имели антигенное сходство по реакции с МКА (Д-3-4-6, А-7-4-4, Д-9-5-8) со штаммом второго серотипа (1820), выделенного от рыжей полевки. К четвертому серотипу отнесены два штамма (5181,5203), выделенные от дальневосточной полевки, у которых выявлены общие антигенные детерминанты с лрототипным штаммом этого серотипа. Штамм 4588, выделенный от восточноазиатской шши по реакции с МКА ко второму серотипу хантавируса проявлял более тесную связь со штаммом второго серотипа ¿пчяй ' , чем

- 18 -

ТАБЛИЦА • г.

даШ?ВД1АЦИЯ ШТАММОВ ХАНТАВЙРУСА В ША С МОНОКЛОНАЛЫЫМИ АНТИТЕЛАМИ К ШТАММАМ ПЕРВ011) (76-118) И ТРЕТЬЕГО ( БН-11 ) СЕРОТИПОВ . .

Антигены Источник Моноклональные антитела к штаммам

штаммов выделения—

76 - 118 БЙ-Ц

Д-3- 0-5- Д-4- - В-22- Д-4- С-8- В-1- А-7- Д-9-

4-6 8-4 3-5 10 8-8 11-8 4-4 4-4 5-8

76-118 М.полевая +х) + + + + + - - +

5Н-11 Лабор.крыса+ -ь + - - - + + • +

2332В М.полевая + + + + + - - -г

10508 + + + + + + - - +

4400 М.восточно-

азиатская + + + ' + + 4 - - +

4590 • + + + + + + - - +

4 95 9 П.красная + + + + + + -

4605 Б-ной Щ. + + + + + + - - • +

4642 Б-ной 3. + -г + -г + - - +

4450 П.красно-

серая + - + + + + — — —

22402 Б-ной Некл. + - + + + + - - -

1620 П.рыжая + - - - - - - + ■ +

4588 М.восточно-

' азиатская - - - - - - - + +

10290 П.красная + - - - - - + +

26250 Б-ной К. + - - - - - - + +

5524 Б-ной В. + - - - - - + +

Ргозр'Ш.пенсиль-

Н111 ванская + + - - - — — — +

5181 П. дальневос-

точная + + - - - — — — +

5203 + - — — — — — +

Примечание: х) - титр антител (-) 1:16, (+) антитела з титре

1:32 и . М.-мышь, Д.-полевка, В-ной-. больной.

со шташом 1820 этого же серотша.

Изолированные от дальневосточной полевки штаммы четвертого • серэиша по реакции с ЩА ко второе серо типу также отличались от штата этого жз серстипа, вделенного от пенсильванской полевки в США. Возможно, различия этих: штаммов' отражают циркуляцию в регионе антигешшх вариантов известных серогипов.

В Ш с иммунными сыворотками, приготовленными к пяти серотипам ' выявлены отличия штаммов, выделенных от красной (4959), красно-серой (4450) полевок и больного (22402), от штаммов, сходных по . данным ВША с первым серотшом.

На основании серологических различий, выявленных в РН и с помощью НША при использовании МКА, штаммы, выделенные от красно-серой полевки и больного ГЛПС, обозначены наш как пятый серотаи. Штамм, выделенный от красной полевки, рассматривается как подтип . • первого серотипа хантавируса, посколы^ установлена тесная антигенная связь по реакции с ША.

По результатам серотшгарования и изучения антигенных взаимосвязей установлена связь серотша с определенным видом грызуна, однако в то же время показано, что в полигосталъкых очагах встречаемся носительство грызунами несвойственного для определенного вида серотип.

. В результате серотшшрования с помощью блока РИА 301 пробы легочного антигена хантавируса установлено носительство несвойственного для данного вида грызунов серотипа, как среди мышей, так и среди полевок. Антиген хантавируса, сходный со вторым серо-типом, был выявлен у 15$ серопсчитивных полевок и у 8£ бостсчко-азиатских мышей - основных носителей первого серотипа хантавируса У дальневосточных полевок -носителей четвертого серотипа антиген хантавируса первого серотипа был обнаружен в легких у 3,3%.

- 20 -

В сыворотках крови грызунов антитела к несвойственному серотипу были обнаружены у 15.8$ полевых мышей, 20,2$ восточноазиатских мышей, 9£ дальневосточных и 11,2$ красно-серых полевок.

Анализ 77 эпизоотических ситуаций с разной комбинацией грызунов на участках очаговой территории доказал, что носительство несвойственного серотипа хантавируса чаще встречается на участках, занятых особями обоих семейств (мышиных и хомячьих). Число грызунов-носителей несвойственного им соротипа хантавируса воз-ростало в годы синхронного подъема численности животных - хозяев разных серотшов вируса. Обмену .серотипами хантавируса в таких условиях способствовал, до всей вероятности, широкий межвидовой контакт носителей вируса. Полученные данные подтверждает сложившееся представление ( еЪ ей-;' 1985,С;'Нз1пв et а1. 1988, кт; Ьее оЪ аП985,Н.'Я';Ъоо и др.1930), что определенный серотип хантавируса связан с грызуном - экологически хозяином и показывает, что связь эта не абсолютна.

Для выяснения роли циркулирующих в очагах Приморского края серотшов хантавируса в патологии человека с помощью НМФА проведено сравнительное титрование сывороток крови больных ГЛПС на антигенных препаратах, приготовленных к штаммам первого, четвертого и пятого серотипов и к прототилному штамму 76-118 вируса Хаятаан.

На первой неделе заболевания в 80,7-85,% обследованных сывороток были выявлены специфические антитела к первому и пятому серотшам, что отражало наличие у этих штаммов обоих группоспе-цифичвских детерминант. Средняя геометрического титра (СГТ Хо^) антител составила соответственно 8,0-9,0 К штамму четвер-

того серотипа антитела в первых пробах сывороток крови были обнаружены только в единичных сыворотках (8,7?) и в низких титрах

- 21 -

(СГГ 1,0ю%).

Поскслхку по результатам ШЁА. - метода, который в настоящее время общепринят длл диагностики ГЛТЮ, из-за наличия перькрестных реакций медсу сэрстиса.ш (первым ч третьим, вторым и четвертым) не всегда удается ттолучкгь свадеши о серотипе вируса, вызвавшем заболевакие: сыворотки больных Ш1С были использовали в РН. При исследовании 42 сывороток крови, взятых от больных ГЛПС на Еторой неделе заболевания, с использованием штаммов первого, второго, четвертого и пятого серотипсв нейтрализующие антитела выявлена, в основном, к первому сарстипу. У двух больных обнаружены антитела к пятому серотипу хантавируса и у одного больного ко второму серотипу. '

. Подтверздение основного значения первого серотипа хантавируса в этиологии ГЛПС в крае получено и при серологическом исследовании в ШФА 2075 сывороток крови с использованием для титрования антигенов первого и четвертого серотипов. циркуляция которых наблюдается в счагах регеона. В 93,2$ обследованных в ранние сроки сывороток отмечались высокие (в 16 и более раз) титры антител к первому серотипу со сравнении с четвертым серотипом.

■ Таким образом, по результатам исследования сывороток больных ГЛПС! в двух серологических тзетах (НША и РП), получены доказательства о Быраженнои сероконверсии к первому серотипу хантавируса, что свидетельствует о ведущей роли этого серотипа в структуре заболеваемости ГЛПС в крае. Вероятно, это находит отражение и в особенностях клинического проявления инфекции в регионе (преобладание тяжелых форм заболевания), и выделении наг® штаммов перзого серотипа из крови больных с тяжелым клиническим течением ГЛПС з из органов умерших от этой инфекции.

За годы на&пкеаий по данным сероготического обследования,

- 22 -

больных и изоляции от нгх штаммов вируса удалось выявить два случая наболяЕалия, обусловленных вторые серстшсм хснтавируса. Результаты серологического зсследовэяия сывороток крови больных ГЛЛС датэт основание предоолозглгь, что в очагах юга Дальнего Востока циркулируют слабо вирулентные штаммы второго и пятого оеро-тнпог, чосиг':е;;я;ш которж является пеленки реда С1с^1опоштз г атгатогенные для человека штаммы четвертого ссротипа, основным природным хозяином которого являются полевки Щсго^из.

Из числа забелевших ГЛЛС в течение 1984-1990 гг. у семи больных заражение произошло в городе е результате контакта с серой крысой. Подтверждением того, что серые крысы могли быть источником заражения,'служили данныэ об инфицированкости грызунов, отловленных в местах преднолагаешго заражения. Клинический диагноз ГЛЛС бта подтвержден серологически при титровании сывороток крови на антигеншх препаратах первого, второго и третьего ее-ротипов хантавируса. Более выеокно титры специфических антител в ЕША обнаружены к третьему серогилу, носителем которого является серая крыса. К этому же серотипу в РН выявлены нейтрализующие антитела, что свидетельствует о связи случаев заболевания ГЛЛС с третьим серотипом.

Несмотря на антигенное разнообразие штампов, циркулирующих в очагах ига Дальнего Востока, основное значение в эпидемиологии ¡шйзкции имеет вирус первого серопша, носителями котрого являто-тся полевая и восточноазиатская капли и, в меньшей степени, третий серэткп, экологическим хозяином которого является серая крыса. Эколого-эпидемиологические особенности хантавицусной инфекции в очагах юга Дальнего Востока .

Многолетние данные по заболеваемости ГЛЛС позволяют отнести Приморский крап к одному из активных природных очагов в дальне- - 23 -

восточном регионе. В течение I980-I99I гг. на территории края зарегистрировано 764 случаев ГЛПС, из них лабораторно наш обследовано 675 случаев. За ^последнее десятилетне триады - в 1981, 1986 и 1990 гг.- отмечались двухкратные подъемы заболеваемости, однако, среднегодовой её уровень не превышал показателя 4,17 на 100 тыс. населения. Летальность при ГЛПС в года наСдвдений колебалась в крае от 1,2% до 16,и в среднем составила 5,9£. Это ■превышает показатели летальности при ГЛПС в очагах европейского региона нашей страны и свидетельствует о значительной тяжести инфекции на иге'Дальнего Востока России.

При компьютерной обработке данных по заболеваемости ГЛПС и построения ЭВМ-картограым установлена "разбросанность" случаев ГЛПС по территории, цикличность их возникновения по отдельным районам, а таете наличие не благополучных районов, где заболевания .регистрируются ежегодно. В крае ежегодно отмечается групповая заболеваемость (от 3-х до 12 больных в очаге). Наш выявлено 28 очагов с. грушевой заболеваемости), где было зарегистрировано-105 случаев ГЛЕЮ, что составило 15,5$ от общего числа заболевших в течение 1980-1990 гг. Наряду с манифестным проявлением ГЛПС, среди обследованных лиц, которые находились с заболевшими в сходных производственных условиях, у 16,8$ были обнаружены антитела к хан-тавирусу при исследовании сывороток крови, взятых через месяц после регистрации первых случаев ГШС.

Динамика'заболеваемости ГЛПС в крае характеризуется выраженной сезонностью. Эпидемический сезон начинается, в основном, с конца апреля и продолжается до конца декабря, хотя единичные случаи заболевания в период наблюдения регистрировались и в январе-марте. Однако, при лабораторном обследовании 72 случаев ГЛПС, выявленных за десятилетие в I квартале года, диагноз ГЛПС серологически был

- 24 -

подтвержден только у 42% обследованиях больных. При анализе многолетних данных по заболеваемости выявлено наличие двух сезонных подъемов: небольшого весенне-летнего (май-ивдь) и максимального-осенне-зимнего (октябрь-декабрь).

К особенностям очагов ШПС ига Дальнего Востока следует отнести обитание в них двух видов мышей - полевой и восточноазиатской -носителей первого серотива, которые, как показано при серологи--ческом обследовании больных, определяют эпидемическую ситуацию в регионе. Поэтому, осе&весз внимание при изучении характера эпизоотического процесса в очагах региона было уделено этим видам грызунов, которые в разных местах обитания формируют относительно автономные очаговые системы. Полевая мышь обитает на значительной части территории края. Наиболее многочислен этот вид на Приханкайской низменности, в горных и хвойпо-пшроколиственных. лесах встречаются единичные особи полевой мши. Вос-точноазиатская мышь, напротив, доминирует на лесопокрытой части территории края. Интенсивность циркуляции хавтавируса з популяциях указанных двух видов, отличается по годам. Среди полевых мышей высокие среднегодовые показатели инфицированности (II,2-13,8£) отмечены в 1981, 1987,1988 гг, у восточноазиатсних мышей (14,3-20,8$) - в 1982, 1983,1987 и 1988 гг.

Доминирующее положение в течение эпидсезона 1986 г. и первой половины 1987 г, как источника инфекции, принадлежало восточно-азиатской мыши, поскольку, судя по числу инфицированных грызунов (50,7-29,СЙ), отловленных в пунктах очаговой территории, а также обнаружение специфического антигена в экскретах, активный эпизоотический процесс наблвдался в популяции грызунов этого вида. В эти годы преобладало число случаев заболеваний в весенне-летний период и чаще прослеживалось возникновение их после пребывания

- 25 -

заболевших в очагах лесной зоны региона. До результатам обследования полевых мшей (п=270), отловленных в этот период на территории участков сельскохозяйственного ландшафта, получены данные о вялотекущем эпизоотическом процессе (инфицировано 13,4$ в по-.пуляции грызунов этого вида).

Со второй половины 1987 г. и на протяжении 1988 г>активный эпизоотический процесс наблкщался среди полевых мышей (процент инфицированных составил 34,4-68,3). Заболеваемость, в основном, была связана с этим источником инфекции.

В сезон 1988-1989 гг случаи ГИПС регистрировались, преимущественно, на очаговой территории сельскохозяйственного ландшафта Приханкайской низменности, когда, по данным серологического обследования материала от грызунов, активный эпизоотический процесс наблвдадся в популяции полевой мыши - наиболее многочисленного вида в очагах луго-полевогс типа. При анализе связи случаев заболевания ГЛПС с предполагаемым местом заражения больного отмечено, что в 1988 г. значительное число случаев ГЛПС (60£ от. числа зарегистрированных) наблюдалось в осенне-зимний период в очагах -сельскохозяйственного ландшафта, где доминирующее положение среди грызунов-носителей вируса ГЛПС принадлежало полевой мыши. В этот период чаще отмечались случаи тяжелого течения ГЛПС с выраженным гемаррагическим "синдромом, летальность возрасла.более чем в пять раз (1986 в -1,2$, 1987 г. -I,S&, 1988 г. - 7,5$).

Различия в ходе эпизоотического процесса в популяциях полевой и восгочноазиатской мышей - основных носителей вируса - позволили установить, что подъемы заболеваемости, которые имели место Б крае в 1981Д986Д990 гг. совпадали с активным эпизоотическим процессом в популяциях восточноазиатской мыши. В эти года заболевания ГЛПС регистрировались в населенных пунктах 17-20 районов

- 26 -

Приморского края. Б некоторые годы подъел заболеваемости ГЛПС совпадал с синхронизацией эпизоотического процесса в популяции двух указацЕпх в?дов мышей. Подобная ситуация наблвдалась в IS8I г. когда на большей части территории региона отмечалась высокая численность в сельскохозяйственных ландшафтах полевой мыши (24 -46? на 100 ловушко-суток),в хвойно-широколгственных лесах - восточно-азиатской мыши (8,8-18$ на 100 ловушко-суток). В целом'по краю среднегодовая икфщированно сть полевой мыши составила 13,3$, зос-точцоазиатской шдш - 16,7$. В это период встречаемость особей с антигеном хантавируса в легких £ очагах луго-полевого типа среди полевой мыши достигала 5,48-8,62 на 100 ловушко-суток, в лесах среди восгочноазиатской мыши 6,96 на 100 ловушко-суток.

Самый низкий показатель летальности за последнее десятилетие наблздался в 1986 г. на фоне подъета заболеваемости ГЛПС (интенсивный показатель 3,9 на 100 тыс. населения) в период, когда.активный еписостичосгдй процесс наблкщался в популяциях восточно-азиатской маши и красно-серой полевки - носителей разных серотипов хантавируса.

Сравнивая характер эпизоотического процесса в популяциях носителей эпидемического серотипа хантавируса, обитающих на изолированных участках очаговой территории, удалось выявить различие в интенсивности процесса и асинхронность его течения на разных территориях. Вероятно, с этим связана неравномерность распределения случаев ГЛПС в эпидемический сезон.

Установлено, что сезонные проявления ГЛПС, наряду с социальными факторами, зависят от активности эпизоотического процесса в популяциях основных носителей хантавируса первого серотипа.

Пик инфицированное:^, у восточноазиатской мши отмечался,как

правило, весной и в начало лета, у полевой мши инфшщрованнссть

- 27 -

г нарастала от весны к осени.

Данные о предполагаемом места заражения, полученные путем опроса больных, показали, что из числа заболевших в весенне-летний период (а=205) у 62,5$ заражение произошло в период пребывания в очагах лесной зоны. Б то же время среди заболевших в осенне-зимний период (п=325) преобладали лица, заразившиеся в луго-поле-вых очагах сельскохозяйственного ландшафта.

В годы наблюдения не всегда осенне-зимние подъемы заболеваемос-. ти в крае преобладали над весенними, как это отмечалось ранее (Б.К.Гаврилнк 1957). Более выраженные весенние подъемы заболеваемости. отмэчены в 1985,1989 гг, что совпадало с подъемом численности и инфицированкости Еосточноазиагских мышей.

Характерно., что на фоне напряженного эпизоотического процесса в популяциях полевой мыши отмечался значительный осенне-зимний подъем заболеваемости в очагах луго-полевого типа. В этих очагах на следующий год случаи заболевания наблюдались в весенний период

Еа основании обнаружения -зараженных хантавирусом синантропных грызунов в городе и регистрации случаев заболевания ГЛЛС, обуслов ленных контактом с серой крысой, установлено наличие в крае, наряду с природшыи, сннантропных очагов инфекции.

Неоднократные находки в течение ряда лет спонтанно зараженных особей среди обследованных крыс в восьми пунктах из 49 свидетельствовали о стабильной циркуляции хаятавируса в популяции грызуног обитавших в черте города. Инфицированные крысы встречались при разных значениях их численности - от 1,8% до 17,7$ в отловах. Циркуляция хантазируса, ассоциированного с серой крысой, наблвда-лась в течение года, но чаще инфицированные зверьки встречались зимой и ранней весной. Серологически подтвержденные случаи заболеваний ГШС в городе наблюдались преимущественно в этот период.

- 28 -

Нами проведено эколого-эпидечиологическое районирование очаговой территории региона. В основу' выделения эпидемических районов были доло;;;еш дан;ше о заболеваемости, грызунах-носителях первого серогипа'хантавируса и ландшафтной характеристике территории. Данные о случаях заболевания, с учетом места предполагаемого заражения, являлись основным показателем.

При анализе распределения по крав эпидемически проявившихся очагов за период 1981-1987 гг.'выявлены территориальные совокупности с различной плотностью и регулярностью проявления. На основе этих данных проЕедено районирование энзоотичкой территории, выделено восемь эпидемических районов. В определении границ эпидемических районов учитывали ландшафтныэ особенности и характер распределения мышей-основных носителей первого серогияа хантави-•руса. Эпидемические районы сгруппированы по количеству функционирующих очагов, в пределах которых относительно синхронизированы эпизоотические процессы в популяциях основных видов грызунов-носителей хантавируса. Каздому из выделенных районов присвоено условное название, отражающее географию месторасположения. Выявлены особенности в характере многолетней и сезонной динамики■эпидемического проявления для эпидемических районов разных ландшафтных зон.

Значительная часть случаев ГЛПС (46,6^ из зарегистрированных за 10 лет в рэгиоке) наблццалась в 4-х районах (П,1У,У1,У1П) луго-полевего типа, где основным носителем хантавируса является полевая мышь. Эпидемический процесс в этих., районах характеризовался спорадической заболеваемостью с небольшими подъемами через 2-3 года. Групповые случаи заболевания в общей сумме зарегистрированных случаев ГЛПС составили от 3,0 до 21,0%, летальность в среднем составила 4,£$. По числу проявившихся очагов

- 29 -

выявлены районы высокой (I/ и Л), средней (II) и низкой (ЛИ) активности. Е даух эпидемических районах (I и III),расположенных в зоне очагов лесного типа с преимущественным носителем хантави-руса - восточкоазиатзкой мышью, число зарегистрированных случаев составило 20, Здесь реже наблвдались групповые случаи заболевания - 7,1-13,7$, ниже была летальность - 3,7%. Эпидемические районы характеризовались средней (III) и низкой (I) активностью. Из общей суммы зарегистрированных случаев ГЖС 32,5$ приходилось на' эпидемические районы (7 и 711), расположенные в зоне смешанного типа, где носителями возбудителя ТЖС в равной мере являются оба вышеуказанных вида грызунов. Нередко здесь наблвдались групповые случаи заболевания -15,9-16,5$, высокой была летала ность - 6,1$. Оба эпидемических района характеризовались средней активностью эпидемически проявившихся очагов.

Разобщенность распределения основных носителей хантавируса по территории края, специфичность динамики эпизоотического процесса в их. популяциях определяли особенности сезонной динамики заболеваемости ГШС в эпидемических районах.

Анализ сезонной динамики заболеваемости ГЛПС, проведенный в группе эпидемических районов, показал, что выраженная осенне-зимняя сезонность заболеваемости была характерна для 4-х районов луго-полевого типа, что связано с характером эпизоотической активности в популяциях основного источника инфекции в этих очагах-полевой мыши. В двух эпидемических районах очагов лесного комплекса преобладали весокне-лэтние подъемы заболеваемости, что коррелировало с активностью в этот период эпизоотического процесса в популяциях восточноазиатской мшш, В группе эпидемических районов, расположенных в зоне очагов смешанного типа, отмечено два сезонных подъема заболеваемости, поскольку источником инфекции

- 30 -

в данных очагах могут быть как полевая, так и восточноазиатская мши. Представленные данные по характеристике эпидемического процесса в эшдс;.отческих районах разных ландшафтных зон могут служить основой для дифференцированного подхода при проведений эпиднадзора и противоэпидешческих мероприятий по ГШС.

Иммунологическая характеристика хантазирусной инфекции у лшей.

До настоящих исследований диагноз ГШС у больных в регионе ставился на основании клинических проявлений с учетом данных эпидемиологического акемнеза, а в случаях с летальным исходом -на основании заключения патологоанатоыического исследования. Б прошлые годы в .регионе диагностировались, в основном, тяжелые и средней тяжести формы ГДЛС. Легкие формы заболевания выявляли крайне редко, сведения же об атипичных и бессимптомных формах инфекции отсутствовали. При анализа данных серологического исследования 2319 сывороток крОЕИ от больных с клиническим диагнозом ГЛПС, совпадение клинического и серологического диагноза установлено в 11,1% случаев.

За период наблюдения обследовано 195 больных с предполагаемым диагнозом ГШС и 215 с другими диагнозами, сходными в начальной стадии болезни по клинической сшптоматике с ЕШС. Суммарно серологический диагноз в этой груше больных подтвержден в 21,5^ случаев. Среди больных, у которых предполпгалась ГШС, он составил 29,1$, у больных с другими диагнозами - 23,2$.

Таким образом, благодаря серологическому обследовании больных, была провидена коррекция первоначального диагноза, а также показана, что определенная часть случаев ГШС в регионе остаются не распознанными и могут быть шявлэ1ш только с применением лабораторной диагностики. Антитела к хантавпрусу у 98,1$ обследованных

- 31 -

больных были выявлены в сыворотках крови, собранных на первой неделе заболевания.СГТ специфических антител была равна 7,5 Во вторых пробях крови, взятых через 2-3 недели после саболеваш определяли более высокие СГТ-9,4 1об2 • Четырсх-восьш кратное нарастание титра специфических антител выявлено у 45,8$ обследованных больных при исследовании парных проб крови, собранных до седьмого дня заболевания (первая проба) л через 2-3 недели (вторая проба). Разницы в показателях уровня иммунитета от тяжести заболевания у больных, обследованных в остром периоде заболевания, не установлено.

При неоднократном обследовании больных ГЖС в разные сроки о "начата заболевания и в период рекоквалесценцки прослежена динамика формирования гуморального имыунного'.ответа.

Нарастание титра специфических антител у больных отмечалось в течение первых двух недель острого периода болезни. Максимальный уровень титра антител - 8,9 - регистрировался к третьей неделе заболевания и сохранялся до 6 месяцев с момента заболевания. 3 более поздние сроки отмечалась тенденция к незначительному снижению титра гуморальных антител, которая прослеживалась до 2-х лет. Подобная динамика антителообразования к хантазирусу отмечалась у большинства больных и только у 1,2% обследованных бол: ных специфические антитела выявлены в сыворотках крови, взятых на. БгороЁ-пятчй день болезни. У такого же процента обследованных больных антитела были обнаружены только на 7-10 день с момента заболевания.

.Для выяснения вопроса о длительности сохранения антител к хан-тавирусу наш проведено обследование 109 лиц, перенесших заболевание год назад и более. У лиц, обследованных через год после перенесенного заболевания, выявлены высокие титры антител (СГГ-6,4

- 32 -

Б более отдаленныз сроки с момента заболевания (три-г...гь и более лет) редко удавалось обнаружить высокие титры антител к хантави-русу. Обнаружение оттецитических антчтял у лиц, перенесших заболевание 10-29 лет казсд, свидетельствует о длительном .-сохранении иммунитета к возбудителя, что подтверждается отсутствием повторных заболеваний ГШС.

В связи с тем, что в очагах ьюгэ. Дальнего Востока выявлена циркуляция нескольких антигенных вариантов хантавируса, проведено ■ сравнительное титрование в НМФА сывороток крози больных ГШС, по-лученнь-х в динамике заболевания, на препаратах антигенов первого (штамм 23328), четвертого (штамм 5X81) и пятого (штамм 4450) се-ротипов хантавируса. Выявлены существенные различия в показателях уровня специфических антител и числа серопозитивных сыгороток к четвёртому серотипу. В первые дни заболевания антитела к этому серотипу з низких тиграх (СГТ 1,6-1,2 logo) удавалось обнаружить в единичных сыворотках (8,7$), со второй недели заболевания отмечалось незначительное повышение уровня антител, однако титр их ■ оставался невысоким (2:2 log^)* В более поздние сроки заболевания процент сывороток, содержащих антитела, значительно возрастая. При параллельном титровании сывороток крози больных ГШС на пре- . паратах антигенов разных серстипоз выявлена сходная картина в ди~ намике формирования гуморального иммунитета к разным сбротипам я показана степонь антигенных взаимосвязей мезду ними.

Несмотря на всестороннее изучение ГШС в клинико-эпкдемиологз-ческом аспекте, до внедрения в лабораторную практику серологических методов исследования вопрос о легких, атипичных, стертых и бессимптомных формах инфекции оставался малс изученным. Регистрация таких случаез заболевания имеет принципиальное значение для уточнения размеров истинной заболеваемости и оценки тяжести тече-

- 33 -

ния ГЛПС в различных очаговых регионах, особенно в свете данных об антигенных различиях возбудителя ГЛПС.

Учитывая, что лепоте формы заболевания ГЛПС наиболее достоверно можно обнаружить при групповых случаях и вспышках заболевания нами было проведено обследование 255 человек, которые находились в очагах с групповой заболеваемостью ГЛПС, в сходных с заболевшими условиями проживания и производственной деятельности. При обследовании в ШШ сывороток крови 42-х больных ГЛПС диагноз заболевания был подтвержден у всех серологически. У лиц, имевших'общий с больными ГЛПС контакт с природными очагами, антг тела в титре 1:32 - 1-:.28 к первому серотипу хантавируса обнаружены у 16,8$. При повторном серологическом обследовании этих лиц через 30 дней диагностическое нарастание титра специфические антител выявлено у 13 человек.

На основании сведений из амбулаторных карт, с учетом положительных результатов серологического исследования сывороток крс-.' ви у трех человек (1,1$) из числа серопозитивных выявлена легкая форма ГЛПС, в 10 случаях (3,9$) появлению и нарастанию.титра специфических антител у обследованных лиц предшествовали легкие катаральные явления, что позволило нам сделать заключение о наличии у них стертой формы ГЛПС. Выявить каких-либо признаков заболевания, у 11,1$ серопозитивных лиц не удалось, что свидетельствовало о появлении антител к хантавируса при бессимптомном течении инфекции.

Проведенные исследования позволили впервые показать, что на территории региона, наряду с классическими формами ГЛПС, имеют место легкие,и бессимптомные, выявление которых в очагах инфекции стало возможным только благодаря применению специфических лабораторных методов исследования. За счет таких форм хантави-

- 34 -

эусной инфекции, по всей вероятности, формируется иммунная пребойка среди актолбй очагового региона,

3 результате исследований сывороток крови взрослого населения тс 20 районоь Приморского края,характеризующихся разной зпиде-лической активпсстьш, установлено, что в среднем иммунологическая прослойка к хантавирусу первого серотида среди населения в очагах края составила 3,2^. Несколько выше был процент лиц (6,2) з антителами к хзнтавирусу среди жителой северо-восточных районов края, где,как нами установлено, в очагах ГЛПС доминирует носитель хантавируса - восточноазиатская мыль. В центральных районах процент иммунных лиц был невысоким (2,7),также как и в целом среди населения нго-заладных районов края (1,7),1350, в основном циркуляцию хантавнруса первого серотипа обеспечивает нолевая мышь. При сопоставлении показателей состояния иммунной прослойки населения с заболеваемостью ГЛПС в 15 районах края " только в четырех из них отмечалась корреляционная сеязь между ними.

Среди здорового населения антитела к хантавкрусу чаще выявляли у лиц в возрасте от 30 до 49 лет - Ь% (п=1928), что в два раза (BsO.OOI) превышало число серопозитивных лиц в возрастной груше 20-29 лет (л=962) и в 4,5 раза (РгЮ, 001} у лиц .5Сда? и-старше (п=351). Процент серопозитивных лиц был выше среди лиц, которые по реду своей трудовой деятельности длительно находились на очаговой территории в лесной ландмафтной зоне. Специфические антитела были выявлены у 12,2% работников изыскательских партий, у 8,4$ работников горнодобывающей отрасли и у 5,5% работников подвижных механизированных колонн (БЫК). В группе работников сельского хозяйства антитела к хантавзрусу выявлены у 3,1$, служащих промышленных и бытсвых учреждений -2,5$, учащихся - 0,8$ и неработающих лиц - 0,7$. Таким образом, группу лиц повышенного риска

- 35 -

в очагах юга Дальнего Востока кашей страны составляют отдельные категории работников изыскательских партий, горнодобывающей отрасли, ПМК, сельского хозяйства, что необходимо учитывать при планирования профилактических мероприятий.

ВЫВОДЫ

I. Биерзне б результате вдрусолого-серологических исследова-• ннй материала ез очагов ШГС ига Дальнего Востока выделены штаммы хантавируса, показана их антигенная неоднородность, значение в патологии человека и широкое распространение среди теплокровных животных.

, 2. Установлена широкая экологическая пластичность хантавиру-са в очагах юга Дальнего Востока. Спонтанная зараженность обнаружена у 17 видов млекопитающих и 1С видов птиц. Доказана ведущая роль в поддержании циркуляции хантавируса б очагах луго-по-левого типа полевой шшз и дальневосточной полевки, очагах лесной зоны - восточноазиатской мшш, красной и красно-серой полевок, в городских очагах - серой крысы.

3. Получены данные о взаимоотношении хантавируса с естественным хозяином. На фоне инашарантного течения инфекции у грызунов выявлены фазы активного размножения вируса, выделения его в окружающую среду и формирования специфического и!»мунитета. Отмечена зависимость уровня иммунитета от возраста грызунов, присутствия специфического антигена хантавируса в органах зверьков. Показателем активного размножения хантавируса в организме животного, который должен учитываться при оценке эпизоотической ситуации в очагах, могут служить данные обнаружения у зараженных животных антигена хантавируса в органах и экскретах.

4. Получены данные о закономерности эпизоотического процесса

- 36 -

в популяциях пологой и восточяоазиатской мышей. Выявлена цикличность процесса: нарастание его активности, пик и онаяенив. Уста-нсвлеиы отличия в годсво? и сезонной динамике эпизоотического, процесса в популяциях шгаей и асинхронность его течения на отдельных очаговых территориях.

5. Обоснована роль трех видов грызунов (полевой, Еосточноази-атской мышей-и серой крысы) в эпидемиологии инфекпии. Установлено, что особенности эпидемического процесса (территориальное распространение, сезонные и годовые подъемы заболезаемости) в природных очагах разных ландшафтных зон региона обусловлены присутствием в них двух видов мышей : полевой и Еосточноазиатской - носителей эпидемического первого серотипа хантавируса. О активнос-гыо'у эпизоотического процесса в популяциях восточнсазиатской т-ии, в' основном, связаны весенне-летние подъемы заболеваемости в очагах лесного типа, в популяциях полевой шзга осенне-зимние'подъ-зма на территории очагов луго-подаэого типа. Заболевания обуслов-юлкые серотипом, циркулирующим б городских популяциях крыс, ка*5-подаются, в основном, в зимне-весенний период.

6. Установлено, что подъемы общей заболеваемости ГЛПС в регяо-ге совпадают с активностью эпизоотического процесса в популяциях юсточноазиатской мыши и при синхронизации активности процесса в [опуляциях полевой и восточноазиатской мышей. Асинхронность эпи-оотическсго процесса в популяциях грызунов-носителей вируса в ространстве и времени обуславливает неравномерность распространим заболеваемости на очаговой территории в периодичность яро-вления очагов.

7. На основании эколого-эпидедаологическгас подходов проведено айонирование очаговой территории решена, знделено восемь эпиде-кческих районов, отличающихся напряженностью эпидемически проя-

- 37 -

вившихся очагов, видовым составом гркунов-посителеи хантавируа и ландаафтной характеристикой территорий. Данные характеристики эпидемического процесса в выделенных районах могут составить основу для разработка и проведения целенаправленных профилактических мероприятий.

■ 8. На основании серодифференциации штаммов, ввделенных от больных ГЛПС, пяги видов грызунов и птицы, в ВШ и РН с использованием поликлонашшх V моноклональных антител, а такнЕ по результатам данных обследования больных ГЛПС, с использованием антигенных препаратов к разным серотипам, показана циркуляция в регионе пяти серотипов хантавируса. Установлена связь сероти-пов с определенным видом хозяина: первого серотипа с полевой и восточноазиатской мышью, второго - красной полевкой, третьего -серой крысой, четвертого - дальневосточной полевкой и пятого -красно-серой полевкой. Отмечена возможность заражения грызунов в очагах совместного обитания несвойственным им серотипом вируса

Э. Представлена доказательства об основной роли в этиологической структуре ГЛПС на иге Дальнего Востока первого и третьей серотипов хантавируса. Показана связь единичных случаев заболевг нля со вторым и пятым серотипом и отсутствие заболеваний, обусловленных четвертым серотипом хантавируса.

10. Представлены данные о закономерностях формирования гуморального иммунитета в очагах циркуляции алтигенно-разных серотипов хантавируса. Отмечено ракпее появление специфических антител к первому серотипу, нарастание титра антител к концу третье] недели и длительное ех сохранение у лиц перенесших ГЛПС.

11. Впарвые на юге Дальнего Востока, благодаря применению специфического метода исследования, установлено наличие легких, стертых и бесстштошшх форм инфекции, обусловленных первым се- 38 -

ротшом хантавпруса. Показано, »го в очагах ГЛПС за счет бессимптомны* оорл форшруэтся яыцунна«: прослойка среди здорового населения. Ь очагах, лесной зоны процент лиц с антителам к ханта-вируск составил "5,2,'з луго-полевых - 1,7.

12, На основании' региональных штаммов хаятавируса разных сорог шов создана тест-система для лабораторной диагностики ГЛПС. Применение специфических препаратов способствовало более полно-ку пнявдсдшо случаев заболевания и установлению истинных размеров заболеваемости ГЛПС в регионе.

СПИСОК ОСНОВНЫХ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРГАЦЖ

1. Материалы.по изучению геморрагической лихорадки с почечянн синдромом в Приморском крае/?.А.Слонова,Г.П.Соков,Т.И.Астахош .з др.-Вирусы и вирусные инфекции человека.М.,1981,с.240.

2. Серологическая диагностика геморрагической лихорадки с по-чечшгй синдромом в Приморском iqpao/У .А.Слонова Д.й .Астахова,

О.Б.Павленко и др.- Тоз.до1'л.конфер.вирусол.Казахстана,Ал:,1г-Ата, 1982,с.226-228.

3. Изучение геморрагической лихорадки с почечным синдромом яа основе новых методических подходов/Р.А.Слошва,Т.И.Астахова, М.Е.Косой и др.-Еешл.Сибирского отд.АМН CCCP,ISS2,Mtc.9-I3.

4. Serotypes of HFRS (Hemorrhagic fever with renal syndrome) virus in East European and Far Eastern TJESE f KV AV Tkachento, M.' A. Donets .Vi' b. AV ölonova et al. - Lancet j 1982e 10, p.' 863i'

5. Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом в Приморском крае/Р.А.Слонова,Т.И.Астахова,М.Е.Косой и др.-ШЗИ,IS83,K82-8G.

Potential weervoii and. vectors oí Haemorrhagi« fever with renal symiroiLo (HEES) in USSR/ B.AVSfcachenko, A^p-.lvanoy, a.'Sinonets ... HiXiSlonova et el? - Ara. Sol. Eelgs. Med. ¡Prop.-,1985,rol,'65, p.' 267-269.'

7. О резервуарах, вируса ГЛПС в очагах Приморского края и его антигенной неоднородности/Р.А.Слонова,Т.И.Астахова,М.Е.Косой и др.-Б сб.Арбовирусы.Тег.докл.пленума Зсес.лробл.комиссии.Таллинн 1984,с.36-37.

8. Особенности эпизоотического и эпидемического процессов при гэморрагаческой лихорадке с почечным синдромом в очагах юга Даль него Востока/Р. А.СлоноЕа,Г.II.Астахова,М.Е.Косой и др.-Тез.докл. XI Всесоюзной конф.по природнпочагов.болезням-М.,1984,с.154-156,

9. Серотипы вируса геморрагической лихорадки с почечным синд-, ромом в очагах Приморского кргя/Р.А.Слонова,Т.И.Астаховг,?.!.Е.Ко-сой и др.- В кн.Актуальные проблемы мгдиц.вирусол.Дез.докл.М., I9S5,с.122-123.

1С. .Серологические доказательства даркуляцшг различных серо типов вируса геморрагической лихорадки с почечным синдромом/Г .К. ДзагурэЕа.Г.Вам дер Гроен,Е.А.Ткаченко ...Р.А.Слоноьа л др.- В кн. Актуальные проблемы медиг;. вкрусол .Тез.докт.М.,1985,с.125-126.

'II. Резервуары возбудителя геморратичесхой лихорадки с почечным синдромом в очагах Приморского кт:ая/Р.А.Слснова,М.Е.Косой, Т.И.Астахова и др.-Вопр.взрусол.,1985,№2,с.169-192.

12. Выделение штаммоз вируса геморрагической лихорадки с почет; ным с^йдрокрм на культуре меток от бальных и хрызунсь/Р.А.Сло-нова,Т.И.Астахова,Е.А.Ткаченко и др.-Вопр.Бирусол.ДЭВб,^ c.ISC

13. Результаты гоуч ения гуморального иммунитета при геморраги-

ческой лихорадке с почечным синдромом в Приморском крае/Т .И Астахова,?. А .Слонова,О.Б.Пазлекко и др.-Волр.вирусол.,1986,.'£,с.183

14. Особенности эпизоотологии гоморрагической лихорадки с почечным синдромом в Приморском крае/Е.Л.1^-шнзрев,Г^Е.Косой,Р.А. Слонова и др.-Сб.Вопросы санитарной охраны территории и профилактики природноочагозых инфекций.Тэз.докл.науч.-практ.конфар.Хаба- ■ ровск,1986,с.95-97.

15. Ввдозая структура родентосообществ и серотлш вируса гемор-рагичзской лихорадки с почечным синдромом в очагах Приморского края/Е.Л.Кушнарев,Р.А.Слонова,Т.И.Астахова и др.-Вопросы региональной гигиены и сачигарии и эпидемиологии.Тез.докл.Якутск, 1987,с.182-183. ;

16. Значение синантропных грызунов в эпидемиологии геморрагической лихорадки с почечным синдромогл/Р.А.Слонова,Е.Л.Кушнарзв, Т.И.Астахова и др.-Вопросы региональной гигиены,санитарии и эпи-демтологип.Тоз.дскл. .Якутск,1287, с .181-182.

17. Елкнико-лабораторньй анализ причин летальных исходов у больных геморрагической лихорадкой с почэчным синдромом/А.Н.Бондарен-кс,Т ,И.Астахова,Р.А.Слонова и др.-Сб.Актуальные вопросы здравоохранения .Тез.докл.наун.-практ.конфер..Владивосток,1988,с,

18. Серологическая диагностика легких и бессимптомных форм геморрагической лихорадки с почечным синдромом/Т.И. Астахова.Р. А. Слонова,М.Е.Косой и др.- ШЗИ, 1988,№,с.54-59.

19. Нозотрон-новкй метод изучения зоонозов/1И.Е.Косой,Р.А.Слонова, 0.И.Косая и др.-Тез.докл.XII Всесокз.конфер.по природной очаговости бслезней.Новосибнрск,IS89,с.27-29.

20. ¿Материалы клинического и серологического изучения геморрагической лихорадки о почечные синдромом (ГЛПС) в Приморском крае /А.Н.Бондаренко,Т.ИЛстахова,Р.А.Слонрва,В.М.Шакин - Инфекционная

- 41 -

патология б Приморском крае,- Тез.науч.-практ.конфер.Владивосток,ISS9, с.81-83.

21. Эколого-эп:<ще?.:яслогтчзское районирование территории Приморского края до геморрагической лих:-р?д::е с почечным синдромом/ Е.Л.^шнарев,Тл1.Аота::ова,?.А.Слолоза,1,!.2.Косой - Тез.докл.ХП Всссоизкой конфер. по природной очаговости болезней.М.,1969,о.92

22. Эппзоотологическ:;е аспекты эпидемиологии геморрагической лихорадки с почечным синдромом/ЕЛ.Кушнарез,Т.ИДстахова,Р.А.Слс воза и др.-Инфекционная патология в Приморском крае. Тез.науч.-

■ практ.кскфер.Владивэсток,1989.

23.IFA eug ИГРА analyses of antigenic relations ЪеЪигееп hantavirus Strains / E.A.'-lkachenVo, b'.A.SlonQva, T.ZV Dzafsuro-s-a ет; alV - АЪз. 2nd Synip. of arboviruses in the Mediterranean Count« xtea, 1989» BubroTOit, p.' 74V

24. Некоторые особенности пространственной организации очаго-Bicc систем гешрратачеохой лихорадки с почечным синдромом в При-

• морском Ерае/Е.Л.Кушнарев,М.Е.Косой,Р.А .Слояова - Сб.Природнооча-говые болезни человека.Сыск,1989,с,124-127.

25. Характер персистенции возбудителя геморрагической лихорадки с почечным сиздромом в организме природного хозяина и связь ее с эпизоотическим и эшщяшчзским процессам/Р.А.С.етноБа.Е.Л,. Куикарев,М.Е.Косой и др. -Бопр.влрусол.,1990,113,с.250-253.

26. Участие грызунов Приморья в циркуляции вируса ГЛПС на эн-зобтичзой территории разных тшюв/М.2.Косой,Е.Л.Кушарев,Р.А.Сло-нова.~'Тез.7 съезда Бсэсоюз.териологического общества АН СССР. 1,1. ,1950,том 3.

27. Серотипы хакташруса, циркулирующие в очагах Дальневосточного региона СССР/Р. А.Слонова, Т .И.Астахова,Е.А. Ткачешсо ,Т.К .Дза-гуриьа - Вопр.вирусол.,1990.й5,с.391-393.

- 42 -

28. Изучение роли сзротипов хантавируса в этиологии геморрагической лихорадки с почечным сивдромом/Т.И.Астахова,Р.А.Слонова, Е.А.Ткаченко и др.-Вопр.влрусол.,1990,с.492-494.

29. Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом на юге Дальнего Востока СССР/Р.А.Слонова,Т.И.Астахова,М.Е.Косой и др. Тез.дс>кл.1;!ейдунар.сишоз.по геморрагической лихорадке с почечным синдромом ..1., 1991, с. II.

30. Сравнительный ультраструктурный анализ серотипов вируса ШПС, циркулирующих в очагах юга Дальнего Востока СССР/Л.А.Минская ,В.К.Степгпенко ,Р.А.Слонова - Тез .докл.¡Лекдунар. спмпоз .по геморрагической лихорадке с почечным синдромом.Л.,1991,с.13.

31.Сезонная динамика хантавпрусной эпизоотии в природной популяции полевой мыши Apodenus agrarius /Е.Л.Кушнарев.Т.В. 1^тпнарева,Р.А.Слонова,IvI.E.Kocoii - Тез.докл.Меадунар.ск^псз. по геморрагической лихорадке с почечным синдромом.!.,1391,с.3.

32. Итоги изучения геморрагической лихорадки с почечным синдромом в Приморском крае/Р.А.Слоноза,- Юбилейный сборник научно-исследовательского института эпидемиологии и микробиологи! СО РАмК, посвященный 50-летию со дня основания.Владивосток.I9SI,с,114-124.

33. Hantavirus isolation from birds / E.A.Slonova, E.A.Tkachen-ko, E.L. Kushnarev et alv - Acta Tirol'.', 1992K 36, p'. 493.

Подписано к печати 30.04.93 г. Заказ № 285. Тираж 80 экз.

Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов РАМН.