Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему
Фармакотерапия болезней кожи собак полиэтиологичной природы
ВАК РФ 06.02.03, Звероводство и охотоведение
Автореферат диссертации по теме "Фармакотерапия болезней кожи собак полиэтиологичной природы"
На правах рукописи
484Ь4оо
ЕРПЕЛОВА ТАТЬЯНА НИКОЛАЕВНА
ФАРМАКОТЕРАПИЯ БОЛЕЗНЕЙ КОЖИ СОБАК ПОЛИЭТИОЛОГИЧНОЙ ПРИРОДЫ
06.02.03. - ветеринарная фармакология с токсикологией
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук
4 1 2 МАЙ 2011
Краснодар-2011
4846488
Работа выполнена в Краснодарском научно-исследовательском ветеринарном институте Россельхозакадемии.
Научный руководитель: заслуженный деятель наук РФ,
член корреспондент РАСХН доктор ветеринарных наук, профессор Антипов Валерий Александрович
Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор
Сапунов Анатолий Яковлевич
кандидат ветеринарных наук Якубов Рубен Саркиеович
Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт»
Защита состоится « 2011 г. в « ч на заседании
диссертационного совета Д 220.038.07 при ФГОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет» по адресу: 350044, г.Краснодар, ул.Калинина, 13.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет».
Автореферат разослан « 1 г., и размещён на
официальном сайте ФГОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет» - http://www.kubsau.ru.
Ученый секретарь
диссертационного совета ^ И .А. Родин
1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. За последние годы возросло число заболеваний кожи у собак и кошек, и они занимают одно из ведущих мест среди болезней, встречающихся у этих видов животных. Причиной тому являются изменения в характере кормления, ухудшение экологических характеристик окружающей среды, малоподвижный образ жизни большинства мелких домашних животных, не всегда правильная племенная работа (Н.Г.Решетникова, 2006; А.Б. Селисский, 1963; C.B. Старченков, 1999). Эти факторы способствуют возникновению и закреплению различных патологических состояний, многие из которых сопровождаются кожными проявлениями. В настоящее время более 34,23% случаев обращений владельцев собак к ветеринарным специалистам связано с заболеванием кожного покрова.
В связи с широким распространением кожных болезней собак, низкой лечебной эффективностью применяемых лекарственных средств и их высокой стоимостью, изыскание новых эффективных препаратов при этих патологиях является актуальной проблемой современной ветеринарной науки и практики (О.Б. Терехова, 2002; Д.В. Шагаев, Е.С. Посашкова, 2003; D.N. Carlotti, 1999; F.Lifka, 1922; Т. Натолл, 2007).
Цель и задачи исследований. Целью настоящего исследования является разработка, изучение фармако-токсикологических свойств и внедрение в ветеринарную практику нового комплексного препарата комбицид для лечения кожных заболеваний мелких домашних животных плиэтиологичной природы. Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:
- Создать новый комплексный препарат, в виде крема, обладающий фунгицидным, акарицидным и антимикробным действием;
- Изучить физико-химические свойства препарата;
- Определить токсикологические параметры препарата;
- Изучить фармакологическое действие препарата;
- Определить лечебную эффективность препарата при заболеваниях кожи разной этиологии.
Научная новизна. В результате проведённых исследований разработан оригинальный комплексный препарат для лечения заболеваний кожи собак бактериальной, грибковой и паразитарной этиологии - крем комбицид. Изучены фармако-токсикологические параметры нового препарата. Разработаны показания к применению. Отработаны оптимальные схемы и дозы при лечении кожных заболеваний разной этиологии. Приоритетность исследований подтверждена положительным решением на выдачу патента на изобретение.
Практическая значимость. Для практической ветеринарии предложен новый комплексный препарат, обладающий высокой лечебной эффективностью при ассоциативных кожных заболеваниях мелких домашних животных.
Определены показания к применению данного препарата мелким домашним животным, установлены оптимальные дозы, кратность и интервалы между нанесениями. Препарат комбицид, разработан в виде мягкой лекарственной формы, смягчает и успокаивает поражённые участки кожи, обладая комплексным действием на болезнетворных агентов.
Практическая ценность препарата комбицид подтверждается положительными результатами производственных испытаний и временной инструкцией по применению крема комбицид в ветеринарии.
Апробация работы. Результаты экспериментальных и клинических исследований, являющихся основой диссертации, доложены, обсуждены и одобрены:
на заседаниях Учёного совета Краснодарского НИВИ (2007-2011 гг.); на VIII региональной научно-практической конференции молодых учёных «Научное обеспечение агропромышленного комплекса» Кубанского государственного аграрного университета (Краснодар, 2006); на международной научно-практической конференции, посвященной 135 -летию академии «Современные подходы развития АПК» (Казань, 2008); на II сибирском ветеринарном конгрессе «Актуальные вопросы ветеринарной медицины» (Новосибирск, 2010);на научно-практической конференции молодых учёных краснодарского края «У.М.Н.И.К.» (Краснодар, 2010). Основные положения диссертации, выносимые на защиту:
- распространение дерматитов смешанной этиологии у собак в г.Краснодаре;
- разработка и физико-химические свойства комбицида;
- токсикологические и фармакологические свойства препарата;
- результаты терапевтического действия препарата комбицид на собаках.
Публикации. По материалам диссертационной работы опубликовано 5 научных статей, в том числе одна работа опубликована в изданиях рекомендованных ВАК Минобрнауки Российской Федерации. Получено положительное решение о выдаче патента на изобретение от 17 ноября 2010г.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 155 страницах стандартного компьютерного текста и состоит из следующих разделов: введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, заключения, выводов, практических предложений и приложения. Список использованной литературы включает 179 источников, в том числе иностранных - 26. Работа иллюстрирована 33 таблицами и 3 рисунками.
2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Работа выполнялась в период с 2007 по 2010 годы на базе лаборатории фармакологии Краснодарского научно-исследовательского ветеринарного института, а также в условиях ветеринарных клиник г. Краснодара: в частности клиниках ветеринарной медицины «Биосфера», «Надежда», «Призвание», «Vita» и ГСПББЖ г. Краснодара.
В работе использованы материалы амбулаторных журналов ветеринарных клиник г. Краснодара по заболеваниям мелких домашних животных, в частности собак.
Экспериментальные и научно-производственные опыты проведены в соответствии с требованиями к врачебно-биологическому эксперименту по подбору аналогов, постановке контроля, соблюдению одинаковых условий кормления и содержания животных, в период проведения работы и учёта результатов.
С целью определения распространения и этиологии острых форм ассоциативных дерматитов проводили диспансеризацию собак, включающую в себя следующие методы исследования: токсикологические, фармакологические, клинические и лабораторные (гематологические, биохимические, микробиологические, микологические и
паразитологические) исследования животных.
На различных этапах исследований для определения фармако-токсикологических параметров нового препарата было использовано 113 белых мышей, 40 морских свинок, 90 белых крыс, 40 кроликов и 40 собак.
Общетоксические свойства препарата оценивали путём определения острой и хронической токсичности, возможных побочных свойств и отдалённых последствий в условиях лаборатории фармакологии Краснодарского НИВИ.
Определение острой токсичности проводили на белых крысах и щенках, по методу Deishmann и Le Blanc (1943). В опыте использовали животных отобранных по методу пар-аналогов. Животным вводили различные дозы препарата per os от 500 до 8550 мг/кг массы тела, и в течение 14 дней после затравки вели наблюдения (Саноцкий И.В., 1970; Трахтенберг И.М. и соавт, 1978; Хабриев Р.У., 2005).
Субхроническую токсичность определяли по методике Lim (1961). С этой целью было сформировано 4 группы аналогов белых беспородных крыс с массой тела 180-200 г по 10 голов в группе. Препарат задавали ежедневно в течение 28 дней в различных дозах от LD50. Затем рассчитывали коэффициент кумуляции по формуле:
K(K)=LD50(npH многократном введении)/ LD50(npH монократном введении).
При наблюдениях учитывали потребление корма, воды, состояние шерстного покрова и видимых слизистых оболочек, показатели дыхания, пульса, температуры тела. В конце эксперимента проводили морфо-биохимические исследования сыворотки крови, а местно-раздражающее
действие на желудочно-кишечный тракт оценивали в процессе патоморфологического изучения при макро- и микроскопическом исследовании.
Кожно-резорбтивное действие препарата комбицид изучали на белых крысах методом погружения хвоста. При этом 10 голов животных фиксировали в станке так, чтобы хвосты были помещены на 2/3 длины в пробирки с кремом, помещенную на встряхиватель. Хвосты контрольных животных были погружены в вазелин на такое же время. Учет реакции проводили через 4 часа по наличию местных изменений хвоста, смертельных исходов и степени выраженности интоксикации.
Изучение аллергизирующего действия препарата комбицид проводилось в двух сериях опыта, путем воспроизведения местных аллергических реакций (феномена Артюса-Сахарова, скарификационного теста) на «роликах породы шиншилла с живой массой тела 3 - 3,5кг. В первой серии опыта было сформировано две группы по пять животных в каждой. В первой группе животным на выстриженных участках вводили в подкожную клетчатку исследуемый препарат, в дозе 0,2 мл на животное, второй (контрольной) группе - сыворотку крови лошади в дозе 1 мл/кг. Препараты во всех случаях вводили шестикратно, с интервалом в шесть дней. Наблюдения за животными вели ежедневно с учетом воспалительной реакции в течение всего срока назначения препаратов и 6 дней после его окончания.
Во второй серии опытов аллергизирующее действие изучали с помощью «скарификационного метода», для чего было сформировано 2 группы кроликов по 3 головы в каждой. В первой группе животным с кормом назначали препарат в дозе 0,3 мл/кг массы животного, ежедневно в течение 10 дней. Вторая группа кроликов получала корм без препарата. На 10 день опыта кроликам провели скарификацию, предварительно выстриженных участков кожи наждачной бумагой и в эти участки втирали препарат комбицид, а животным контрольной группы втирали сыворотку крови лошадей. За последующей воспалительной реакцией наблюдения вели в течение 3 дней.
О фармакодинамике препарата судили по клиническим показателям, изменениям в белковом, липидном, углеводном, минеральном обменах и интенсивности роста.
При гематологических исследованиях определяли количество эритроцитов и лейкоцитов в камере Горяева, выводили лейкоформулу в окрашенных по Романовскому-Гимзе мазках крови по В.Г. Мухину, определяли содержание гемоглобина (гемоглобинцианиднымметодом) (Донник И.И., 2004; Камышников B.C., 1997; Никитина В.Н., 1949; Рихтер В. И. и соавт., 1987; Западнюк Л.П. и соавт., 1983; Сахаров П.П., 1937).
При изучении биохимического состава крови определяли содержание в сыворотке крови общего белка (биуретовым методом), белковых фракций (нефелометрическим методом), глюкозы (глюкозооксидазным методом), активность трансаминаз - АлАТ, АсАТ (методом Райтмана - Френкеля),
общего кальция (унифицированным колориметрическим методом), неорганического фосфора (молибдатным uv-методом), холестерина, триглицеридов (энзиматическим калориметрическим методом), мочевины (уреазным фенол/гипохлоритным методом) (Комаров Ф.И., Коровин Б.Ф., Меньшиков В.В., 1999; Чиркин и соавт., 1992).
Собаки, использованные в опытах по изучению терапевтической эффективности препарата комбицид и его клинической апробации, содержались в домашних условиях с двухразовым выгулом и в течение всего периода наблюдения получали промышленный сухой рацион класса премиум. До включения животных в опытные и контрольные группы проводили их обследование, включающее клинический осмотр, в том числе тщательный осмотр области поражения, пальпацию пораженных участков кожи и регионарных лимфоузлов, термометрию, гематологические и биохимические исследования крови, с пораженных участков кожи делали соскобы и подвергали микроскопическому, бактериологическому исследованиям.
При осмотре кожи обращали внимание на специфические изменения: гиперемию, отечность кожи, изменение местной температуры, поредение волосяного покрова, наличие на поверхности кожи чешуек, скутул, пустул, расчесов, эрозий, язв, оценивали запах и консистенцию кожи на измененных участках.
Взятие крови от собак проводили дважды - в первый раз до лечения животного, а второй - после клинического выздоровления животного, до утреннего кормления из лучевой или вены сафена животного.
С целью изучения видового состава и культуральных свойств микроорганизмов, изолированных от собак с дерматитами производили посевы крови и смывов с поражённых участков кожи (Дышко A.C., 1962; Егоров Н.С., 1957; Козинец Г.И., 2001; Лаб. тссты, ч.1,2, 1995). Для первичного посева использовали мясопептонный бульон, а в последующем твёрдые питательные среды: МПА, Эндо, желточно-солевой и кровяной агар, а также среду Сабуро и среду Кандида - для грибов. Данные среды позволяли выявлять бактерий из рода Pseudomonas, Streptococcus, Staphilococcus, семейства Enterobacteriaceae и несовершенные грибы -Trichophyton, Microsporum (Лещенко В.М., 1977). Посевы инкубировали при +37°С в течение 18-20 часов, при культивировании грибов - до пяти суток.
Культуральные свойства определяли по внешнему виду колоний микроорганизмов, характеру роста на питательных средах. Учитывали форму, размер, цвет, прозрачность, характер поверхности. При посевах на кровяной агар - наличие или отсутствие зоны гемолиза (Медведев В.В., Волчек Ю.З., 1997; Сидоров М.А., Скородумов Д.И., Федотов В.Б., 1995; Биргер М.О., 1982).
Идентификацию микроорганизмов проводили с учетом морфологических, культуральных и биохимических свойств микробов по общепринятым методикам (Определитель бактерий Берджи, 1997).
Патогенность. изучали при внутрибрюшинном заражении белых мышей массой 16 - 18г 1 млрд/мл взвесью микробных клеток смытой с агаровой культуры в дозе 0,2 - 0,5 мл (200 - 500 млн микробных клеток).
При подозрениях на наличие дерматомикоза пробы подвергали микроскопическому исследованию. Для дифференциальной диагностики микроспории проводили люминесцентное исследование патологического материала (волосы, корочки от поражённых участков кожи) в тёмном помещении под лампой Вуда. В дальнейшем для изучения видовых и культуральных свойств проводили посевы на питательные среды согласно вышеописанным методикам.
Видовую принадлежность бактерий устанавливали, руководствуясь, Определителем бактерий Берджи (1997), грибов - согласно методике H.A. Спесивцевой (1964).
Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам проводили методом диффузии в агаровом геле на среде АГВ с использованием стандартных дисков с антибиотиками. Бактерицидные и фунгицидные свойства нового препарата крема комбицид изучали луночным методом диффузии в агаровом геле или последовательных серийных разведений в МПБ, среде Сабуро, среде Кандида (Метод.реком., 2005).
В качестве тест-культур использовали суточные полевые очищенные изоляты микроорганизмов, выделенные от собак, с поражением кожного покрова.
При паразитологическом исследовании для обнаружения чесоточных клещей (Demodex canis) соскобы брали со свежих не сильно уплотнившихся очагов поражения, не менее чем с 2-3 мест на границе между здоровой и поражённой кожей до первых капель крови. Отбирали кровь, эпидермис, экссудат, чешуйки (Орлов И.В., Агринский Н.И., Никольский С.Н., 1962; Паттерсон С., 2006; Поляков В.А., Узаков У.Я., Весёлкин Г.А., 1990; Василевич Ф.И., 2009).
Акарицидное действие препаратов определяли на клещах Psoroptes cuniculi, выделенных из соскобов некротических струпьев с внутренней поверхности ушей, поражённых псороптозом кроликов. Сбор живых чесоточных клещей проводили по методике Д.Р. Приселковой (Орлов И.В. и соавт., 1962). Итак, в чашках Петри на кружочки фильтровальной бумаги диаметром около 3 см обильно смоченных препаратами, помещали по 10 клещей на каждую и через определённые промежутки времени (15; 30; 45; 60 мин; затем каждые пол часа до 6 часов и через каждый час с 6 до 10 часов и в последующем на 20; 24; 27; 30; 48; 72; 96; и 120ч) наблюдали за состоянием и гибелью клещей через бинокуляр Ms+ - 130. Чашки Петри помещали в термостат при t = 37°С и влажности 80%. Опыт с каждым разведением ставился в трёх повторностях. В качестве контроля использовали фильтровальную бумагу пропитанную дистиллированной водой, на которую помещали клещей.
Физико-химические свойства каловых масс изучали путем определения pH с помощью лакмусовой бумаги, а также - наличие крови -
бензидиновой пробой, желчные пигменты - с помощью универсальных полосок, билирубин - пробой Фуше, жир и крахмал - микроскопически с Суданом III и раствором Люголя.
Оценку местного раздражающего и кожно-резорбтивного действия крема комбицид осуществляли на морских свинках методом накожных аппликаций, а также на кроликах методом введения в конъюнктивальный мешок. Сенсибилизирующую способность препаратов устанавливали по методу О.Г. Алексеевой и А.И. Петкевича (1973).
При оценке лечебной эффективности нового препарата учитывали: наличие или отсутствие клеща; состав микрофлоры, населяющей исследуемый участок кожного покрова; наличие или отсутствие спор грибов; общее состояние кожно-волосяного покрова (аллопеции, пузыри, экземы, трещины); наличие или отсутствие аппетита.
Математическую и биометрическую обработку полученных цифровых данных исследований проводили в соответствии с рекомендациями И.А Ойвина (1960) и Н.А Плохинского (1970), а также при помощи программы Windows ХР, Microsoft Excel 2007, степень достоверности устанавливали по распределению Стьюдента.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1 Распространение заболеваний вызывающих поражения кожного покрова у собак в условиях г. Краснодара
Таблица 1 - Частота регистрируемых заболеваний кожи у собак __в г. Краснодаре__
Заболеваемость по годам %от
общего
Заболевание 2005 2006 2007 2008 2009 Абс. числа заболеваний кожи
Аллергия 9 13 19 20 21 82 2,32
Атопический дерматит 6 10 11 12 15 54 1,53
Демодекоз 89 96 97 98 112 492 13,94
Пиодемодекоз 77 118 122 130 138 585 16,58
Дирофиляриоз 51 62 68 79 79 339 9,61
Кандидоз 0 0 1 2 2 5 0,14
Микроспория 15 17 21 25 31 109 3,09
Папиломатоз 0 0 1 2 1 4 0,11
Пиодермия 23 25 27 33 35 143 4,05
Трихофития 283 349 347 357 378 1714 48,59
Смешанные инфекции (клещи, м/о, грибы) 410 487 492 513 556 2458 69,67
Всего: 553 690 714 758 812 3527
В результате исследований было установлено, что в г. Краснодаре только на долю кожных болезней приходится более 34% всех случаев обращений владельцев собак за оказанием врачебной помощи. В свою очередь заболевания кожи имеют различное клиническое проявление и этиологическую основу.
Проблема заболеваемости собак связанная с поражением кожного покрова и особенно ассоциированной этиологии является актуальной проблемой в условиях г. Краснодара
В таблице 1 представлены заболевания кожи различного генеза и частота их регистрации у собак в г. Краснодаре. Больше всего зарегистрировано собак с инфекционной патологией. Превалируют заболевания, вызванные несовершенным грибом рода Trichophyton, которые составляют 48,59% от общего количества кожных болезней. У 13,94 % животных отмечали патологию кожи, вызванную паразитарными агентами, лишь 4,05% приходится на заболевания вызванные микрофлорой. Смешанные инфекции кожи (чесоточные клещи, грибы, микрофлора) составляют 69,67% случаев от общего числа кожной патологии.
Наиболее часто заболевания кожи встречаются не как монозаболевания, а проявляются в комплексе, то есть паразитарный агент, открыв ворота инфекции, способствует наслоению вторичной микрофлоры и грибов. Именно поэтому основной задачей явилась разработка комплексного препарата направленного на уничтожение этих болезнетворных агентов. При этом с каждым годом численность заболевших растёт, а ситуация усугубляется. Численность заболеваний смешанными инфекциями ежегодно увеличивается в среднем, на 1,7%.
3.2. Разработка и физико-химические свойства препарата комбицид
В настоящее время большой практический и научный интерес представляет разработка средств комплексного действия с широким спектром антимикробного действия, обладающими как бактерицидной, так и фунгицидной активностью, а также акарицидной, которые были бы высокоэффективными при заболеваниях кожи смешанной этиологии.
Исходя из анализа литературных данных мы разработали состав комплексного препарата комбицид. Препарат комбицид - оригинальный отечественный комплексный препарат, стойкий при хранении в обычных условиях в защищенном от света месте, не горюч, не пожароопасен. Активнодействующими компонентами крема комбицид являются препараты, относящиеся к группам авермектинов и полигексаметиленгуанидинов, в качестве формообразующего вещества взята жировая основа.
Препарат получали путём смешения действующих веществ и основы. Полученный препарат представляет собой крем, от серо-белого до светло-желтого цвета со специфическим запахом и вкусом. Водородный показатель 6,3-6,8. (таблица 2).
При изучении стабильности препарата флаконы с комбицидом выдерживали 41 сутки в холодильном шкафу при температуре +5+10 °С.
Затем препарат подвергали «ускоренному старению» 15 суток в термостате при температуре +38°С. В результате, установлено, препарат -крем комбицид хранится в течение 18 месяцев, при температуре 23-25°С в тёмном месте.
Таблица 2 - Физико-химические свойства препарата комбицид
№ Наименование показателя Характеристика
1. Описание препарата Крем со специфическим запахом
2. Прозрачность и цветность от серо-белого до светло-желтого цвета
3. Кислотность Водородный показатель 6,3-6,8
4. Специфическая активность Проявляет антимикробное, антимикозное, акарицидное действие
5. Безвредность Ь05о=454 мг/кг. 4 класс опасности по ГОСТ 12.1.007-76.
На протяжении всего периода исследования комбицид сохранял цвет и внешний вид - от серо-белого до светло-желтого цвета; специфический сладко-горький запах; безвредность определяли в тест-дозе 454 мг/кг на одну мышь; концентрация ионов водорода рН была в пределах 6,3 - 6,8.
Прозрачность и цветность препарата определяли органолептически при естественном дневном освещении против белого листа бумаги.
Кислотность определяли с помощью универсальных бумажных полосок с индикаторной поверхностью для определения уровня ph.
Проведенными исследованиями установлено, что все показатели, на препарат комбицид во все месяцы исследований соответствовали первоначальным показателям.
3.3 Токсикологические свойства комбицида 3.3.1 Определение параметров острой токсичности
Изучение острой токсичности крема комбицид проводили в опыте на лабораторных животных (белые крысы) по методике Deischmann и Le Blanc (1943). С этой целью было взято 16 белых нелинейных крыс (самцы и самки) со средней массой тела 208 г.
Животных сформировали в две группы по принципу пар-аналогов и поместили в отдельные клетки за 48 часов до начала эксперимента для адаптации.
Длительность наблюдения за подопытными животными составила 14 дней, после затравки. При наблюдении, обращали внимание на характер токсического действия препарата, поведение, тактильную чувствительность и двигательную активность, поедаемость корма и отправление физиологических функций, кожный и корнеальный рефлексы.
Исследуемый препарат задавали per os в виде линимента, в свободном скармливании, в дозах от 500 мг/кг до 8550 мг/кг. Контрольным животным давали смалец в тех же количествах (таблица 3).
О нормализации физиологического состояния контрольных крыс судили по отсутствию нарушений координации движений,. появлению аппетита, подвижности.
Введение препарата крысам в диапазоне испытанных доз 500-2550 мг/кг не вызывало каких либо признаков интоксикации. Клиническое состояние животных было удовлетворительным. При патологоанатомическом вскрытии крыс, убитых в конце опыта, визуальных изменений со стороны внутренних органов не наблюдалось.
Таблица 3 - Острая токсичность комбицида для белых крыс per os .
Масса Доза, мг/кг Доза,
№ тела, г массы тела мг/животное Эффективность
1 201 500 100 Живые
2 205 750 150 Живые
3 207 1150 230 Живые
4 211 1700 340 Живые
5 206 2550 510 Живые
6 212 3800 760 Гибель через 18 часов
7 209 5700 1140 Гибель через 18 часов
8 211 8550 1710 Гибель через 18 часов
Препарат, в дозе начиная с 3800 мг/кг приводил к гибели 75% животных, а в дозах 5700 и 8550 мг/кг являлся летальным для 100% животных. Гибель крыс наступила вследствие остановки сердца. При этом крысы теряли координацию движений, они занимали боковое положение вплоть до парезов. Смерть их наступала в коматозном состоянии от остановки сердца.
Таким образом, ЛД 50 препарата комбицид составила 454 мг/кг. Что согласно ГОСТу 12.1.007-76 «Вредные вещества», относится к 4 классу опасности (малотоксичные вещества).
3.3.2 Определение кумулятивных свойств
Эксперименты по определению хронической токсичности проводили в двух сериях опытов: первая - на белых крысах, вторая серия - на собаках.
Первая серия опытов проведена в условиях вивария Краснодарского НИВИ, отдела фармакологии на 30 беспородных белых крысах, разделенных на три равные группы массой 190-210 грамм. В первой группе препарат наносили на кожный покров животным в дозе 227 мг/животное (однократная терапевтическая доза), а второй - 681 мг/животное (трехкратная терапевтическая доза), ежедневно в течение 28 дней (в семь раз, превышающий рекомендуемый срок введения препарата). Третья группа животных была контрольной, содержалась на основном рационе и препарат не получала.
За всеми животными вели клинические наблюдения в течение всего срока назначения и семи дней после прекращения дачи препарата, обращая внимание на общее состояние, поведенческие реакции, аппетит, динамику прироста массы животных, время возникновения и характер интоксикации, ее тяжесть, обратимость, сроки гибели животных.
Субхроническая токсичность изучалась в течение 28 дней на 30 белых крысах с массой тела 190 - 210 г, подобранных по методу пар-аналогов.
Препарат задавали ежедневно в различных дозах от ЬО50 (454 мг/кг массы тела) по схеме, представленной в таблице 4.
Таблица 4 - Субхроническая токсичность комбицида для белых крыс per os
Номер периода I II III IV V VI VII
Сутки от начала опыта 1-4 5-8 9-12 13-16 17-20 21-24 25-28
Доза от ЬО50 45,40 68,10 102,15 153,23 229,84 344,76 517,13
Гибель (%) 0 0 0 3,3 20 10 10
Суммарная доза за период (на 1 кг массы тела) 908 1362 2043 3064,6 4596,8 6895,2 10342,6
В результате в IV периоде погибло 3,3 % животных (одна крыса), на 16-е сутки. В V период погибло 20% животных - две крысы на 18-е сутки. Три крысы пали на 19-е сутки, одна - на 20-е сутки.
В VI периоде погибло 10 % животных от общего числа крыс до начала опыта. Одна крыса погибла на 22-е сутки, Две крысы на 24-е сутки. В VII период погибло 10% животных, две крысы - на 26-е и одна - на 27-е сутки.
Ь05о при многократном скармливании препарата равна суммарной дозе препарата за I- V периоды опыта и составила - 11974, 4 мг/кг массы тела животного (908+1362+2043+3064, 6+4596, 8).
Коэффициент кумуляции (Кк) при многократном применении препарата крем комбицид составил 5,27, что относит препарат к четвертой группе-слабо выраженная степень кумуляции (по Л. И. Медведю, 1964).
3.3.3 Определение раздражающего действия
Раздражающие и кожно-резорбтивные свойства крема комбицид изучали на кроликах методом конъюнктивальных проб и на морских свинках путем накожных аппликаций.
Трем кроликам под верхнее веко правого глаза вносили исследуемый препарат в дозе 227; 454 и 681 мг/животное. Для контроля в левый глаз этим же животным вносили такое же количество вазелина. Учет реакции проводили через 5 минут, 24 и 48 часов с момента введения крема комбицид и учитывали состояние слизистой оболочки глаза и век, наличие инъекции сосудов и секрецию слезы. .Через 5 минут у кроликов, которым вводили 454 мг и 681 мг препарата, регистрировали повышенное слезотечение, связанное с механическим воздействием взвеси на слизистую оболочку глаза, которое исчезало через 15 и 25 минут. Гиперемии конъюнктивы и сужения зрачка не наблюдалось.
Провокационные кожные пробы проводили на морских свинках методом эпикутанных аппликаций. Перед началом опыта проводили сенсибилизацию животных путем многократных нанесений на кожу крема. На выстриженный участок кожи с левой задней трети спины трем морским свинкам ежедневно наносили 18 раз по 0,1 мл крема. Затем с правой стороны выстригали такой же участок и наносили по 0,1 мл крема в 1, 3, 5, 7 дни и выдерживали 4 часа, после чего препарат удаляли. После выдержки инкубационного периода, продолжавшегося 14 дней, на выстриженный участок кожи наносили разрешающую дозу крема (0,3 мл).
В течение всего периода опыта за морскими свинками вели наблюдения, проводили измерение температуры тела, толщины кожной складки на месте введения, определяли местную кожную температуру. Каких-либо изменений в клиническом статусе животных и на месте аппликации кремом комбицид не было выявлено как в период изучения препарата, так и после его прекращения. Эластичность, подвижность и упругость кожи морских свинок оставалась неизменной. При пальпации места аппликации болевая реакция не отмечалась. Отека кожи и геморрагий не установлено.
На основании всего перечисленного ответную реакцию оценили как отрицательную.
Кожно-резорбтивное действие крема комбицид изучали на белых крысах методом погружения хвоста. В данном случае, результаты наблюдений не выявили гибели опытных животных и каких-либо внешних признаков интоксикации в сравнении с контролем.
На основании всего перечисленного, крем комбицид можно охарактеризовать как препарат, не обладающий раздражающим, кожно-резорбтивным действием.
3.3.4 Определение аллергезирующих свойств
В результате опыта по феномену Артюса-Сахарова у всех опытных животных после шестикратного введения комбицида, характерных для геморрагического воспаления признаков отеков и уплотнений на месте инъекций не отмечалось. Лишь сразу после инъекций в этих местах образовывались небольшие инфильтраты, размером с маленькую горошину, которые рассасывались в течение 3-24 часов.
У контрольных животных уже после 3-5 инъекций регистрировали картину воспалительных явлений, характерных для феномена в виде отечно-инфильтративной, инфильтративно-геморрагической и геморрагическо-некротической формы. У этих животных регистрировали язвы, исхудание.
Таким образом, препарат комбицид не обладает местным аплергизирующим действием.
При клинических наблюдениях во второй серии опытов в течение 3 суток у опытных животных в местах скарификации не выявлено признаков характерных для аллергического воспаления. Во всех случаях отмечали лишь кратковременную гиперемию в течение 3-4 часов. В контрольной группе животных воспалительных явлений не было.
Таким образом, проведенные аллергизирующие тесты показали, что препарат не обладает аллергизирующими свойствами.
3.4 Фармакологические свойства комбицида 3.4.1 Биологическая активность препарата
С целью изучения видового состава бактерий, изолированных от собак с дерматитами, провели комплексные бактериологические исследования. С этой целью от 20 больных собак производили посевы из крови и смывов с поражённых участков кожи.
По культуральным, морфологическим и тинкториапьным свойствам было установлено, что из патологического материала собак с дерматитами высевали различные бактерии, однако, по преимуществу это грамположительные кокки.
Анализируя полученные результаты исследований (таблица 5) по определению чувствительности условно-патогенной микрофлоры под воздействием крема комбицид зона задержки роста составила для Streptococcus pyogenes- 44,0 мм,; Staphylococcus aureus - 41,7мм; Staphylococcus epidermidis - 39,6; Staphylococcus intermedius - 31,3мм; Entherococcus faecalis - 39,6мм; Escherichia coli - 31,3мм; Citrobacter freundii - 39,6мм; Shigella dysenteriae - 43,7мм; Klebsiella pneumonia - 37,6мм; Pseudomonas aeragenosa - 33,4мм; Proteus vulgaris - 35,7мм.
Таблица 5 - Формирование резистентности бактерий к различным
препаратам
Препарат Тест-культуры Зоны задержки роста в мм (М±ш)
1-й пассаж 5-й пассаж 10-й пассаж 15-й пассаж 20-й пассаж
Роксацин Str. pyogenes 47,0±0,2 43,2±0,2 40,3±0,2 39,3±0,2 38,2±0,1
St.aureus 45,0±0,2 42,3±0,1 41,1±0,3 39,1 ±0,5 37,6±0,4
St.intermedius 27,8±0,4 27,2±0,3 26,9±0,5 26,1 ±0,9 25,1±1,1
St.epidermidis 43,0±0,2 42,9±0,5 41,1±0,7 39,9±0,2 38,5±0,1
E.coli 31,9±0,2 30,5±0,5 30,1±0,2 29,8±0,7 28,6±0,3
P.aeragenosa 36,1 ±0,1 35,9±0,3 33,8±0,8 32,9±0,7 31,7±0,7
P.vulgaris 36,9±0,5 36,6±0,2 35,7±0,1 35,5±0,5 34,9±0,1
Крем комбицид Str. pyogenes 43,0±0,1 41,9±0,1 41,3±0,3 39,7±0,2 39,6±0,3
St.aureus 41,0±0,1 39,8±0,1 39,2±0,4 38,6±0,2 38,3±0,5
St.intermedius 31,1±0,2 30,3±0,1 29,9±0,4 29,5±0,1 29,2±0,1
St.epidermidis 39,0±0,1 38,7±0,2 38,5±0,5 37,8±0,2 37,3±0,1
E.coli 30,8±0,2 30,4±0,1 30,1 ±0,5 29,6±0,3 29,4±0,1
P.aeragenosa 33,2±0,1 32,8±0,1 32,4±0,3 32,1±0,1 31,2±0,2
P.vulgaris 34,7±0,3 34,4±0,3 34,0±0,1 33,5±0,2 33,1±0,1
К грибам Candida albicans зона задержки роста крема комбицид составила - 37,3мм; к грибам Microsporum canis - 27,3мм; к грибам Trichophyton mentagrophytes - 29,3мм.
Таблица 6 - Определение чувствительности грибов к различным лекарственным препаратам
Препараты Зона задержки роста в мм
Candida albicans Microsporum canis Trichophyton mentagrophytes
Роксацин 32,4 22,6 30,4
Крем комбицид 37,3 27,3 29,3
Мазь «Ям» 12,6 25,1 27,1
Таким образом, отмечено, что роксацин и крем комбицид, обладали как антибактериальными, так и антимикозными свойствами.
Был поставлен опыт для определения акарицидной активности комбицида в сравнении со следующими препаратами: препарат из группы авермектинов и крем комбицид, в качестве контроля использовали дистиллированную воду.
Таблица 7 - Акарицидное действие препаратов на Р$огор1е$ сишсиН
Названия испытуемых препа) эатов
к « Ш и О Дистиллированная Препарат Комбицид
о, 2 00 5 * О вода (КОНТРОЛЬ) из группы авермектинов
ж п О г Ж П О Г Ж П О Г
15 мин 10 - - - 10 - - - 10 - - -
30 мин 10 - - - ■ 7 2 1 - 8 2 - -
45 мин 10 - - - 5 3 2 - 8 1 1 -
60 мин 10 - - - 1 5 3 1 5 4 1 -
1 ч 30 мин 10 - ■ - - - 3 2 5 3 5 2 -
2ч 10 - - - - - 5 5 1 6 3 -
2 ч ЗОмин 10 - - - - - - 10 - 5 4 1
Зч 10 - - - - - - - 3 4 3
3 ч 30 мин 10 - - - - - - - 1 4 5
4ч 10 - - - - - - - - 7 3
4 ч 30 мин 10 - - - - - - - - 3 7
5ч 10 - - - - - - к - - - 10
6ч 10 - - - - - - ю - - -
7ч 10 - - - - - - и о - - -
8ч 10 - - - - - - и - - - ч ю
9ч 10 - - - - - - СП - - - £
10ч 10 - - - - - - - - - с
24 ч 7 2 1 - - - - - - - о РЭ
48 ч 6 1 3 - - - - - - -
72 ч 5 1 3 1 - - - - -
Ж - живые,"движение; П - паралич, шевелит конечностями, но не движется; О - обездвиживание, не шевелит и не движется; Г - гибель.
Исходя из проведённых исследований, очевидно, что наиболее высокие результаты показали: препарат из группы авермектинов и крем комбицид соответственно. Максимальный эффект в опыте продемонстрировал препарат из группы авермектинов - через 2ч 30 мин, крем комбицид - через 5ч.
3.4.2 Изучение влияния препарата комбицид на кровь
Опыты проводили на заведомо здоровых собаках. Для этого из 15 собак в возрасте 3-5 лет, различной породной принадлежности было сформировано 3 группы по принципу пар-аналогов.
Таблица 8 - Влияние длительного наружного применения препарата комбнцид на показатели крови собак (М±т)
Показатели Группы животных
Фон 1 2 3
Однократная терапевтическая доза (п=5) Трёхкратная терапевтическая доза (п=5) Контроль (отрицательный) (п=5)
Эритроциты, 10,2/л 6,83±0,29 7,53±0,05* 8,42±0,11 6,92±0,18
Лейкоциты, 109/л 9,32±0,40 9,63±0,09 П,6±0,П 6,39±0,06
Гемоглобин,г / л 134,4±4,85 140,9±0,94 165,4±1,77 109,3±1,78
Эозинофилы 0,7б±0,12 0,6±0,04* 1,08±0,04* 0,89±0,05
Нейтрофилы 5,59±0,62 6,97±0,07 8,48±0,08 5,28±0,05
Лимфоциты 3,77±0,37 3,19±О,07 4,57±0,08 3,73±0,10
Моноциты 0,79±0,12 0,73±0,05* 1,09±0,04* 0,48±0,04
Общий белок,г/л 62,87±0,59 72,83±0,37 73,81±0,25 59,15±0,58
Глюкоза, ммоль/л 4,53±0,10 5,4±0,12 5,61±0,10 4,03±0,17
Альбумины, % 33,81±1,27 31,6±0,06 37,67±0,1 29,50±0,53
Глобулины, % 32,5±|,06 25,34±0,05* 29,38±0,05* 21,15±0,05
Белковый коэфф. 0,9 1,3 1,6 1,7
АсАТ, ЕД/л 11,75±0,61 33,99±0,90 43,04±0,78 21,23±0,07
АлАТ,ЕД/л 29,21 ±3,75 41,78±0,11 40,46±0,18 16,01 ±0,05
Билирубин общий, мкмоль/л 4,35±0,74 6,85±0,06 7,39±0,05 4,0±0,04
Мочевина, ммоль/л 5,0±0,29 8,39±0,05* 8,6±0,08 4,91 ±0,05
Креатинин, мкмоль/л 104,8±9,93 116,86±0,07 123,97±0,05* 100,49±0,18
Триглицериды, ммоль/л 0,49±0,13 0,43±0,01* 0,71 ±0,07 0,38±0,01
Кальций, ммоль/л 2,48±0,07 2,45±0,05* 2,42±0,04* 2,27±0,03
Фосфор, ммоль/л 1,55±0,16 1,25±0,02* 1,61±0,04* 1,21 ±0,02
Примечание: - степень достоверности Р< 0,05
В первой группе препарат наносили на подготовленные участки кожи в дозе 1135 мг/кг массы, во второй - 3405 мг/кг и третья служила отрицательным контролем. Препарат наносили ежедневно на подготовленные участки кожи в течение 28 дней.
Условия содержания и кормления всех групп были одинаковыми. Ежедневно за всеми животными проводили клинические наблюдения, учитывая влияние препарата на общее состояние, аппетит, дыхание и поведение.
В результате проведенных опытов установлено, что многократное применение препарата комбицид в оптимальной и трехкратной терапевтических дозах не оказывает токсического влияния на организм животных. На протяжении всего срока эксперимента они оставались подвижными с хорошо выраженным аппетитом, их поведенческие реакции оставались в норме, рефлексы сохраненными и не отличались от таковых у контрольных животных.
Общее состояние собак в опытных и контрольной группах в течение всего эксперимента оставалось удовлетворительным, животные были подвижными, аппетит сохранен, поведенческие реакции и рефлексы сохранены. Случаев токсического эффекта, расстройств пищеварения, колик, явлений метеоризма желудка и кишечника, а также нарушений функций почек и других систем не регистрировали.
Взятие крови у собак проводили по истечению опыта на 29 день. Согласно данным таблицы 8 показатели красной крови не являются отклонением от норм у собак данного возраста.
Анализируя полученные данные, у собак в 1 и 2 группах, в которых животным наносили препарат, наблюдается эритроцитоз по отношению к группе отрицательного контроля. Вместе с тем увеличивается и гемопоэз. Повышается активность билирубина и трансаминаз, но, тем не менее, показатели находятся в пределах нормы для данного вида животных. Препарат оказывал стимулирующее на показатели белкового обмена (общий белок, мочевина), жирового (триглицериды), углеводного (глюкоза). Повышение этих показателей косвенно свидетельствует о повышении общей неспецифической резистентности организма. Обращает на себя внимание незначительная величина ошибки средней арифметической в численных показателях составляющих сыворотки крови, что указывает на сходный характер обмена веществ у большинства особей. Следует отметить отсутствие достоверных различий между группами в значениях показателей крови - как морфологических, так и биохимических, указывающих не на патологическое воздействие, а на тенденцию эффекта
3.4.3 Влияние препарата комбицид на функции органов и систем организма
Исследования проводили на собаках параллельно с определением хронической токсичности препарата. О действии крема комбицид на функции пищеварения животных судили по физико-химическим свойствам фекалий, которые собирали в начале исследования и в конце эксперимента. При этом проводили органолептическую оценку, обращая внимание на форму, консистенцию, запах, цвет, а также присутствие посторонних примесей.
Проведенными исследованиями установлено, что акты дефекации у собак опытных и контрольной групп осуществлялись в естественной для данного вида животного позе, безболезненно, без напряжения. Каловые
массы были оформлены, имели цилиндрическую форму коричневого цвета, специфического запаха. В исследуемых пробах кала примеси крови, слизи, гноя, пузырьков газа не обнаружено, отсутствовали яйца гельминтов и простейшие.
При микроскопическом исследовании, характеризирующем переваривающую способность желудочно-кишечного тракта, обнаружены единичные крахмальные зерна и нейтральный жир.
Проведенными химическими исследованиями в каловых массах не выявили кровяных пигментов, желчные пигменты выделялись в пределах нормы. Реакция рН колебалась в пределах 6,7-7,2, подтверждая нормальную жизнедеятельность кишечной микрофлоры.
Таким образом, препарат комбицид в терапевтических дозах, и также в трехкратных терапевтических, при длительном назначении не влиял отрицательно на процессы пищеварения.
Функциональное состояние почек под влиянием препарата исследовали по физико-химическим показателям мочи. Анализ результатов проведенных исследований показал, что физико-химические свойства мочи оставались в пределах норм.
Акты мочеиспускания были регулярными, произвольными, безболезненными, происходили в естественной позе. Моча была светло-желтого цвета, прозрачная, водянистой консистенции, специфического запаха, без осадка, с концентрацией водородных ионов 6,5-7,0 и удельным весом 1,015-1,035.
При химическом исследовании содержание белка, глюкозы, кровяных и желчных пигментов в моче не обнаружено.
Все вышеперечисленное дает основание утверждать, что длительное назначение препарата комбицид в различных дозах не влияет отрицательно на функции органов мочеотделения.
3.5. Изучение лечебной эффективности препарата комбицид при ассоциированных заболеваниях кожи
В опыте по терапевтической эффективности крема комбицид и традиционной схемы лечения в клиниках города Краснодара при смешанных заболеваниях кожи (чесоточные клещи, бактерии и дерматомикозы), которые проявляются клиническими признаками характерными как для пиодермий, так и для микозов кожи и поражения подкожными клещами соответственно: наличие зуда, пузырьков на поверхности кожи, шелушение, сечения и выпадения волосяного покрова, отёк, эритема, огрубение, экземы и трещины кожи животных. В первой опытной группе лечение проводили при помощи крема комбицид, который наносили на поражённую кожу тонким слоем, во второй - применяли традиционную схему лечения клиник г. Краснодара, путём комплексного подхода.
Проведенные исследования показали, что комплексный препарат комбицид быстрее и качественнее оказывает терапевтический эффект
который составляет 80% на 10 день нанесения его на поражённые места и 85% на 15 день применения, нежели традиционная схема лечения в клиниках, которая, как видно из данных таблицы 9, составляет в среднем срок лечения около 3 недель и терапевтическая эффективность составляет на 20 день применения лишь70%.
При исследовании крови животных установлено, что крем способствует быстрому выздоровлению животного (таблица 10)."
Анализируя полученные данные, у собак в 1-й опытной группе животные получали лечение кремом комбицид, в крови отмечается эритроцитоз, а также повышение гемоглобина в группе собак на 1,1%, которым применяли комбицид относительно к группе, где использовали схему лечения клиники на 0,8%. Повышение общего белка в 1-й опытной группе составляет 1%, по сравнению со схемой, в которой общий белок составил 0,9%, а также положительные изменения в альбуминовых и глобулиновых фракциях белка указывают на благотворное влияние опытного препарата комбицид. Так альбуминовые фракции повысились на 1,0%, а глобулиновые на 0,9%. В то время как при использовании схемы лечения белковые фракции составили: 0,9% - альбумины и 1,1% - глобулины.
Итак, препарат комбицид является комплексным препаратом и обладает высокой активностью в отношении стафилококков, стрептококков, микроорганизмов кишечной группы, протея, грибов рода микроспорум, трихофитон, а также кандида, губительно действует на подкожных клещей, находящихся на любой стадии жизненного цикла. Крем комбицид при местном применении не вызывает раздражающего и аллергезирующего действий.
Исходя из полученных результатов, следует, что разработанный нами комплексный препарат - крем комбицид, является наиболее эффективным лечебным средством при смешанных заболеваниях кожного покрова, осложнённых микробной и микозно-клещевой этиологией, позволяющий сократить срок лечения.
Производство препарата освоено в ООО «КНИВИ-ФАРМ» (г. Краснодар). В условиях ветеринарных клиник г. Краснодара обеспечено его применение в качестве эффективного лечебного средства при острых ассоциативных заболеваниях кожи мелких домашних животных.
Таблица - 9 Терапевтическая эффективность препарата комбицид при смешанных болезнях кожи собак
Дни рпыта
1 5 10 15 20 25
Наименования препаратов Количестве собак больных здоровых % излечения больных здоровых % излечения больных здоровых % излечения больных здоровых % излечения больных здоровых % излечения больных здоровых % излечения
Крем комбицид 20 20 - - 8 12 60 2 16 80 3 17 85
Схема
применяемая 20 20 - - 20 - - 8 12 60 8 12 60 6 14 70 6 15 75
в клиниках*
* - Антимикробный препарат - линимент синтомицина 10% (наружно, 2 р/день, 5-7 дней);
- Фунгицидный препарат - Вакдерм (2 иньекции в/м с интервалом в 10 дней, при показаниях повторить);
- Акарицидный препарат - Ивермек (2 иньекции п/к с интервалом в 10 дней).
Таблица - 10 Влияние препарата комбицид на кровь собак при смешанных заболеваниях кожи собак
Показатели Фон (отрицательный) (п=20) Группы животных
1 2
Крем комбицид (п=20) Схема лечения в клиниках (п=20)
Эритроциты, 1012/л 9,16±0,03 10,58±0,09 7,56±0,05*
Лейкоциты, 10у/л 10,23±0,05 11,21 ±0,03* 13,16±0,07
Гемоглобин,г / л 153,37±0,12 167,25±1,13 128,69±0,13
Эозинофилы 1,11±0,04 1,06±0,04* 1,26±0,04*
Нейтрофилы 7,72±0,07 8,41±0,08 9,56±0,06
Лимфоциты 4,91 ±0,13 4,15±0,06 4,43±0,05*
Моноциты 0,82±0,08 1,08±0,04* 0,77±0,05*
Общий белок,г/л 71,71±0,01 74,41 ±0,09 69,91 ±0,21
Глюкоза, ммоль/л 5,82±0,05 5,84±0,19 5,73±0,07
Альбумины, % 53,15±0,04 54,17±0,14 50,12±0,08
а- глобулины, % 15,31±0,03 12,21±0,12 15,21±0,01*
Р" глобулины, % 20,31±0,07 21,14±0,11 19,96±0,03*
у- глобулины, % 11,23±0,02 12,48±0,03* 14,71±0,09
Триглицериды,ммоль/л 0,81 ±0,02 0,86±0,05* 0,78±1,05
АЛТ, Ед/л 46,17±0,03 52,16±0,12 59,6±0,03*
ACT, Ед/л 26,37±0,08 47,99±0,16 52,4±0,12
Примечание: * - степень достоверности Р< 0,05
4. ВЫВОДЫ
1. Результатами проведённых научных исследований и анализом регистрационных записей отдельных ветеринарных клиник г. Краснодара установлено, что кожные болезни широко распространены у мелких домашних животных. На долю кожных болезней приходится более 34% всех случаев. При этом идёт увеличение числа заболеваний ежегодно в среднем на 1,7%. Наибольшее распространение имеет трихофития, демодекоз, пиодермия и микроспория.
Установлена четкая сезонность динамики заболеваемости собак смешанными инфекциями кожи. Проведенный анализ данных позволил определить сезонность заболеваний, которая приходится на два периода года: с мая по сентябрь, с пиками заболеваемости в июне и сентябре, а в зимние месяцы происходит затухание болезни. Максимальное количество заболевших пиодермией отмечается в июне, когда заболевает - 23,7% животных от общего количества заболевших в течение всего года. Пик заболевания животных демодекозом приходится на июнь - июль месяцы, что составляет - 38,8% от общего количества заболевших животных. Дерматофитозы также как и пиодермии, достигают пика заболеваемости в июне - 23,5% и сентябре - 22,3%. Наиболее часто распространено смешанное течение кожных заболеваний, вызванное комплексом инфекционных агентов (чесоточные клещи, грибы, микрофлора), которые составляют - 69,67%.
2.Учитывая полиэтиологичность наиболее массовых заболеваний кожи разработан оригинальный отечественный комплексный препарат комбицид. Он представляет собой однородную, мазеобразную массу от серо-белого до светло-желтого цвета со специфическим запахом и вкусом. Активнодействующими компонентами крема комбицид являются препараты, относящиеся к группам авермектинов и полигексаметиленгуанидинов, в качестве формообразующего вещества взята жировая основа. Он стоек при хранении в обычных условиях в защищенном от света месте, не горюч, не огнеопасен.
Лабораторные исследования крови (морфологические и биохимические) доказывают, что использование крема комбицид в однократной и трёхкратной терапевтических дозах благотворно влияет на все основные биохимические процессы в организме животных, не причиняя вреда гомеостазу организма животных.
3.Комбицид относится к 4-му классу опасности (незначительно опасные вещества) по ГОСТ 12.1.007-76 «Вредные вещества» ЬО}0=454 мг/кг, не вызывает выраженного токсикоза в дозировках до 2550 мг/кг массы тела. Коэффициент кумуляции (Кк) при многократном применении препарата крем комбицид составил 5,27, что относит препарат к четвертой группе - слабо выраженная степень кумуляции. Длительное применение препарата в терапевтической и 3-х кратной терапевтической дозах, не оказывает негативного влияния на состояние животных й другие показатели их клинического статуса, не оказывает вредного местного действия, не влияет
отрицательно на морфо-биохимические показатели крови, не нарушает функции и структуру жизненно важных органов, систем и тканей. При нанесении на кожу и видимые слизистые оболочки препарат не оказывает раздражающего и аллергезирующего действия.
4.Комбицид способен оказывать акарицидное, антимикотическое и антимикробное воздействие на болезнетворных агентов при наружном (локальном) применении против дерматитов бактериального, микозного и клещевого происхождения.
При изучении антимикробных, антимикозных и акарицидных свойств препарата комбицид в отношении условно-патогенной микрофлоры, дерматофитов и саркоптоидных клещей установлено, что препарат обладает выраженным распространённым действием в отношении комплексных заболеваний кожи.
При определении чувствительности условно-патогенной микрофлоры под воздействием крема комбицид зона задержки роста составила для Str.pyogenes - 44,0 мм,; St.aureus - 41,7мм; St.epidermidis - 39,6; St.intermedius - 31,3мм; E.coli - 31,3мм; P.aeragenosa - 33,4мм; P.vulgaris -35,7мм.
Препарат комбицид по отношению к грибам проявлял себя следующим образом. Зона задержки роста при воздействии на Candida albicans кремом комбицид составила 37,3 мм; к Microsporum canis - 27,3 и к Trichophyton mentagrophytes - 29,3 мм.
При определении акарицидной активности комбицида в сравнении с другими акарицидными препаратами, крем комбицид быстро вызывал гибель (через 5ч) клещей Psoroptes cuniculi находившихся в опыте.
5.Препарат обладает высокой терапевтической эффективностью- 82,8 -94,7%, характеризуется быстрой впитываемостью в поверхостные слои кожи, комплексностью действия и удобством в использовании. У больных животных, получавших лечение кремом комбицид существенно улучшалось общее состояние, на 3-10 день (в зависимости от наличия болезнетворных агентов) уменьшались гиперемия, зуд, раневая поверхность становилась светлее и сокращалась в диаметре, происходило формирование струпа, затем струп постепенно отделялся и в местах поражения отмечали регенерацию кожного покрова и появление новой здоровой шерсти.
Проведенные исследования показали, что комплексный препарат комбицид при заболеваниях кожи смешанной этиологии (саркоптоидные клещи, микрофлора и дерматофитозы) гораздо быстрее и качественнее оказывает терапевтический эффект, который составляет 80% на 10 день нанесения его на поражённые участки и 93,8 % на 20 день применения, нежели традиционная схема лечения применяемая в клиниках, которая, составляет в среднем около месяца и терапевтическая эффективность на 20 день достигает лишь 75%.
5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
На основании полученных результатов разработаны показания к применению и схемы использования препарата комбицид в ветеринарной практике.
Для практической ветеринарии рекомендуется препарат комбицид, предназначенный для нормализации патологического процесса кожно-волосяного покрова, в качестве комплексного средства, для лечения мелких домашних животных, в частности собак с поражениями поверхности кожи. В качестве терапевтического средства при острых формах течения болезни, вызванной чесоточными клещами, гноеродной микрофлорой и спорами грибов.
Результаты исследований, изложенные в диссертации, рекомендуются для использования в учебном процессе на ветеринарных и биологических факультетах, при написании учебных пособий и монографий, а также при проведении научно-исследовательских работ по изучению биологически активных веществ и их влияния на организм животных. Результаты исследований могут быть включены в программу повышения квалификации ветеринарных специалистов.
СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ
1. Терехова О.Б., Кириченко Т.Н. Микробиоценоз кожи собак при различных условиях содержания. // Матер, научно-практической конф. посвященной 60-летию ГНУ Краснодарского НИВИ «Актуальные проблемы в ветеринарии в современных условиях». - Краснодар, 2006. -С. 237-239.
2. Кириченко Т.Н., Терехова О.Б. Особенности микробиоценоза кожи собак, содержащихся в условиях города и села. // Матер. VIII региональной научно-практической конференции молодых учёных «Научное обеспечение агропромышленного комплекса». - Краснодар, 2006.-С. 261-262.
3. Кириченко Т.Н. Исследование микробиоцеиоза кожи собак. УЧЁНЫЕ ЗАПИСКИ; Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана, Т. 194. // Матер, международной научно-практической конференции, посвященной 135 - летию академии «Современные подходы развития АПК».-Казань, 2008.-С. 81-84.
4. Кириченко Т.Н., Коба И.С., Ферсунин А.В. Рациональный подход при наружном лечении болезней кожи. // Ветеринарный доктор. -Екатеринбург, 2009 - № 2. - С. 17.
5. Ерпелова Т.Н., Антипов В.А. Исследования в области улучшения лечения кожных заболеваний у домашних животных. // Матер. II сибирского ветеринарного конгресса «Актуальные вопросы ветеринарной медицины». - Новосибирск, 2010. - С. 30-32.
Подписано в печать 08.04.2011г. Формат 60x84 1/16 Бумага офсетная Цифровая печать
Печ.л. 1,2 Заказ №640 _Тираж 120 экз._
Отпечатано в типографии «Световод» 350004, г. Краснодар, ул. Калинина 15/1
Содержание диссертации, кандидата ветеринарных наук, Ерпелова, Татьяна Николаевна
1. ВВЕДЕНИЕ.
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
2.1 Распространенность и клиническое проявление заболеваний кожи осложнённых паразитарными, грибковыми и бактериальными инфекциями.
2.2 Этиология и диагностика кожных заболеваний, осложнённых паразитарными, грибковыми и бактериальными инфекциями.^
2.3 Лечение собак при смешанных инфекциях кожи.
3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.
4. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.
4.1 Мониторинг эпизоотической ситуации заболеваний у собак в городе Краснодаре.
4.2 Возрастные, породные и сезонные критерии заболеваемости собак смешанными дерматитами.
4.3 Разработка, получение и физико-химические свойства препарата
4.4 Токсикологические свойства комбицида.
4.4.1 Определение параметров острой токсичности.
4.4.2 Определение кумулятивных свойств.
4.4.3 Определение раздражающего, кожно-резорбтивного и аллергизирующего действии.
4.5 Фармакологические свойства комбицида.
4.5.1 Фармакокинетика препарата.
4.5.2 Фармакодинамика препарата.
4.5.3 Биологическая активность препарата.
4.5.3.1 Антимикробная и фунгицидная активность.
4.5.3.2 Акарицидная активность.
4.5.4 Влияние препарата комбицид на пищеварение.
4.5.5 Влияние препарата комбицид на кровь.
4.5.6 Влияние комбицида на функции органов и систем организма
4.5.7 Влияние препарата комбицид на течение воспаления.
4.6 Терапевтическая эффективность препарата комбицид.
Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Фармакотерапия болезней кожи собак полиэтиологичной природы"
Актуальность темы. Одновременно возросла заболеваемость собак -бешенством, туберкулёзом, лептоспирозом, дерматофитозами, токсоплазмозом, различными гельминтозами, арахноэнтомозами и др. (Е.Б. Никитин, 2005). Наиболее часто у собак регистрируют болезни кожи. В настоящее время более 34% случаев обращений владельцев собак к ветеринарным специалистам связано с заболеванием кожного покрова.
Основными причинами заболеваний кожного покрова собак могут быть различные травмы, бактерии, грибы, вирусы, эктопаразиты, аутоиммунные факторы и др. Согласно мнению Н.Г. Решетниковой (2006), В.1чГ.Саг1оШ (1999) и многих других, и поэтому этиология кожных болезней собак чаще многофакторная и, как правило, сочетанная. Поэтому если постановка клинического диагноза в этом случае не составляет особого труда, то выявление этиологического фактора бывает значительно затруднено.
Смешанные инфекции, проявляющиеся в виде дерматитов у собак, приобрели массовый характер и имеют тенденцию к росту.
Причинами этого служат:
-высокая устойчивость микроорганизмов, паразитов к лекарственным средствам и способность быстрого привыкания к новым химиотерапевтическим препаратам, используемым при лечении больных;
-способность стафилококков, грибов и клещей продуцировать большое количество факторов патогенности, особенно токсинов, каждый из которых способен воздействовать самостоятельно, что затрудняет использование средств специфической защиты и профилактики;
-очень сложное, многогранное и далеко не изученное воздействие возбудителя на иммунную систему организма хозяина, приводящее к крайне низкой сопротивляемости (Д.Г. Дерябин, 2000).
В связи с широким распространением кожных болезней собак, низкой лечебной эффективностью применяемых лекарственных средств и их высокой стоимостью изучение этиологических аспектов кожных болезней собак и изыскание новых эффективных препаратов комплексного воздействия при этих патологиях является актуальной проблемой современной ветеринарной науки и практики.
Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования является разработка, изучение фармако-токсикологических свойств и внедрение в ветеринарную практику нового комплексного препарата комбицид для лечения кожных заболеваний мелких домашних животных полиэтиологичной природы. Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:
1. Изучить распространение дерматитов смешанной этиологии у собак в г. Краснодаре;
2. Создать новый комплексный препарат, в виде крема, обладающий фунгицидным, акарицидным и антимикробным действием;
3. Изучить физико-химические свойства препарата;
4. Определить токсикологические параметры препарата;
5. Изучить фармакологическое действие препарата;
6. Определить лечебную эффективность препарата при заболеваниях кожи разной этиологии.
Научная новизна. В результате проведённых исследований разработан оригинальный комплексный препарат для лечения заболеваний кожи собак бактериальной, грибковой и паразитарной этиологии - крем комбицид. Изучены фармако-токсикологические параметры нового препарата. Разработаны показания к применению. Отработаны оптимальные схемы и дозы при лечении кожных заболеваний разной этиологии. Приоритетность исследований подтверждена положительным решением на выдачу патента на изобретение.
Практическая значимость. Для практической ветеринарии предложен новый комплексный препарат, обладающий высокой лечебной эффективностью при ассоциативных кожных заболеваниях мелких домашних животных.
Определены показания к применению данного препарата мелким домашним животным, установлены оптимальные дозы, кратность и интервалы между нанесениями. Препарат комбицид, разработан в виде мягкой лекарственной формы, смягчает и успокаивает поражённые участки кожи, обладая комплексным действием на болезнетворных агентов.
Практическая ценность препарата комбицид подтверждается положительными результатами производственных испытаний и временной инструкцией по применению крема комбицид в ветеринарии.
Внедрение результатов исследований. Разработка лекарственной формы крема комбицид освоена в лаборатории фармакологии Краснодарского НИВИ.
Апробация работы. Результаты экспериментальных и клинических исследований, являющихся основой диссертации, доложены, обсуждены и одобрены: на заседаниях Учёного совета Краснодарского НИВИ (2007-2011 гг.); на VIII региональной научно-практической конференции молодых учёных «Научное обеспечение агропромышленного комплекса» Кубанского государственного аграрного университета (Краснодар, 2006); на международной научно-практической конференции, посвящённой 135 -летию академии «Современные подходы развития АПК» (Казань, 2008); на II сибирском ветеринарном конгрессе «Актуальные вопросы ветеринарной медицины» (Новосибирск, 2010); на научно-практической конференции молодых учёных краснодарского края «У.М.Н.И.К.» (Краснодар, 2010).
Публикации. По материалам диссертационной работы опубликовано 5 научных статей, в том числе одна работа опубликована в изданиях рекомендованных ВАК Минобрнауки Российской Федерации. Получено положительное решение о выдаче патента на изобретение от 17 ноября 2010г.
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 2.1 Распространение кожных заболеваний осложнённых паразитарными, грибковыми и бактериальными инфекциями
Дерматиты животных - распространенная зооантропонозная инфекция, которая является не только ветеринарной, но и социальной проблемой (Т.А. Белоусова,2003. - [Электронный ресурс] - Режим доступа: http://www.dermatolog4you.IWstat/rmj/derm atofitiiactprobl.html, - Загл. с экрана; Машкиллейсон Л.Л., Спесивцева Н.А. - [Электронный ресурс] -Режим доступа: http://dic.academic.rii/dic.nsf/bse/109099/, - Загл. с экрана).
За 2002-2003 годы в г. Москве более половины собак (55%), обращавшихся в клиники с дерматологическими проблемами, имели пиодермию как непосредственную причину кожного поражения и зуда. Немало пациентов оказались страдающими от демодекоза, однако, в большем числе случаев он осложнялся сильно выраженной пиодермией.
Наряду с выше описанными заболеваниями в ветеринарной практике встречается высокий процент заболеваемости собак пиодермией. По данным О.Б. Тереховой (2002) за 1998-2000 годы из 13516 случаев обращения жителей города Краснодара по поводу заболеваний своих собак, около трети (27,67%) составляли кожные болезни. Было установлено, что пиодермиями поражаются от 6 до 10% городских собак. Из общего числа кожных болезней пиодермии составляют 20,65%, занимая второе место по распространенности.
В Ростовской области за 1996-1998 годы на долю стафилококкоза собак приходилось 21,75% среди инфекционной патологии. В сравнении с другими болезнями животных данного вида стафилококкоз составил в 1996 году 19,76%, в 1997 году - 22,01%», 1998 году - 23,81% и имеет тенденцию роста на 2,25-4,05% в сравнении с 1996 годом.
К заболеванию пиодермией предрасположены животные короткошерстных пород со складчатой или огрубевшей кожей. Наиболее глубокая пиодермия бывает у немецкой овчарки, у которой болезнь лишь частично поддаётся воздействию антибиотиков и нередко рецидивирует.
Акне чаще встречается у собак таких пород, как боксёр, доберман-пинчер, английский бульдог, датский дог, мастифф, ротвейлер в молодом возрасте (Л. Тилли, 2001). Заболевают преимущественно взрослые животные. В годовалом возрасте у 5,6% из них регистрировали пиогенную инфекцию кожи; в 2-3-летнем возрасте количество поражённых данной болезнью увеличивается в три раза. Пик поражения собак пиодермиями отмечен, когда животные достигают возраста 4-5 лет. До 7-летнего возраста процент встречаемости дерматитов бактериального характера остаётся высоким, в более зрелом возрасте пиодермии у собак проявляются реже (О.Б. Терехова, 2002). Для пиодермии характерно сезонное течение заболевания: наибольшее количество обращений за ветеринарной помощью приходится с апреля по май (25,6-27,8%) и с октября по ноябрь (15,4-24,9%). Больше всего животных, пораженных пиодермией, регистрируется в весенний период.
Клиническое проявление пиодермии определяется возбудителем заболевания и характером течения патологического процесса. Как правило, острая форма пиодермии у собак характеризуется внезапностью возникновения, гиперемией кожи, иногда обильной папулёзной сыпью. Область поражения имеет склонность к быстрому распространению, почти всегда отмечается сильный зуд. В большинстве случаев довольно быстро развивается экссудация из поражённых участков кожи (В.А. Соколовский и др., 1968; П.Е. Игнатов, 1995; Е.С>иас1го8, 1974).
На клиническое проявление пиодермии оказывают влияние и ферментативные свойства патогенных кокков. Как известно, одним из защитных факторов, предотвращающих распространение инфекции, является блокада лимфатических сосудов фибриновыми пробками. Они образуются примерно через 2 часа после проникновения микрорганизмов в лимфатическое русло и препятствуют их дальнейшему распространению. У стафилококков практически отсутствуют фибринолитические ферменты, поэтому очаг восполения быстро отграничивается (образуются узелки и гнойнички). У стрептококков, наоборот, фибролитические свойства развиты хорошо, в результате чего происходит быстрое распространение микрорганизмов по лимфатической системе, наблюдаются отёк кожи, обильная везикулёзно-пустулёзная сыпь (А.Д. Троицкая, 1958).
При стафилококковой пиодермии у собак на коже появляются корочки, струпья и очаговые выпадения волос (Б.Ф. Шуляк, 2003), которым предшествует стойкий зуд, имеющий тенденцию к усилению. Локализуется процесс, как правило, вдоль позвоночного столба, в области крестца и шеи (O.A. Верховский, 1996). Кожа в местах поражения гиперемирована, появляются плотные бугристые припухлости и язвы. На месте увеличивающихся аллопеций появляются струпья, и развивается мокнущая экзема (П.Е. Игнатов,1995; А.Б. Селисский, 1963).
Поверхностная пиодермия проявляется влажной экземой, развитию которой способствует жаркая, сухая погода (К.С. Медведев, 1999). При этой форме болезни область поражения начинает значительно увеличиваться, охватывая зону паха, подгрудка, шеи и хвоста (П.Е. Игнатов, 1994). Затрудненная вентиляция кожных складок способствует развитию «intertrigo» - пиодермии кожных складок. Процесс сопровождается зловонным запахом, экссудативными выделениями, язвами и свищевыми ходами. Локализуется в области кожных складок губ, морды, тела, хвоста и в области межпальцевой щели.
При осложнении демодекоза пиодермией, кожа, как правило, опухшая, покрасневшая, толстая, морщинистая и влажная, часто с трещинами. Сопровождается сильным зудом и неприятным запахом.
Фолликулиты характеризуются покраснением, незначительной болезненностью, затем пораженный участок приобретает форму опухоли. Процесс прогрессирует, опухоль расширяется в диаметре, становится более болезненной, окружающие ткани отекают, и образуется фурункул с гнойно-некротическим стержнем. Однако нередко он не выделяется, что задерживает заживление. С удалением стержня симптомы воспаления затухают. При множественных фурункулах наблюдается повышение температуры тела (С.В. Старченков, 1999).
Остиофолликулиты и фолликулиты возникают главным образом там, где кожа травмируется намордником или поражена демодекозом, раздражена выделяющимся экссудатом (из глаз, носа и т.д.), разложившимся потом и т.п. (В.А. Соколовский, 1968).
При хроническом течении пиодермии отмечают различные по площади участки поражённой кожи, которая, как правило, утолщена, наблюдается папулёзно-пустулёзная сыпь и патологическая пигментация. Течение болезни длительное, вялое. Периоды ремиссии сменяются периодами обострения. Зуд выражен слабо или отсутствует (А.А. Соколовский и др., 1968; В.А. Лукьяновский, 1995; Е. Quadros, 1974).
В настоящее время практически нет ни одной страны, в которой не были бы зарегистрированы случаи микозов человека и животных. Распространению микозов способствуют широкая транспортировка животных из-за рубежа со скрытой формой заболевания, факторы внешней среды; кроме того, показатели распространенности существенно зависят от применения эффективных средств их профилактики и лечения.
V. Vrzal, A. Rybnikar, J. Chumela, J. Lysak (1985) установили, что в связи с высокой концентрацией поголовья собак в ЧССР участились случаи дерматомикоза, вызванного в 82,5% случаев грибом Trichophyton в 10% -Tr.mentagrophytes и в 7% - Microsporum canis. Болеет в основном молодняк до 1 года и чаще осенью и зимой.
По данным N.C. Nayak; Т. Chakraborty; М.К. Bhowmik (1989) в Индии в конце 1987г. зарегистрировано 4 вспышки (564 случая) дерматомикоза. У больных животных на голове, носу, ушах, теле и конечностях появлялись поражения кожи округлой формы диаметр 5-8 мм серовато-белого цвета.
В странах Европы основным возбудителем микроспории является Microsporum canis , который у кошек составляет 65-98,7 % и 45-88,3 % - у собак. Поэтому особый интерес при грибковых заболеваниях животных занимает микроспория, которой принадлежит 90% всех кожных болезней (P.M. Гаскел, М. Беннет, 1999; Cats-портал-Маи.ги. - [Электронный ресурс] -Режим доступа: http://www.cats-portal.ru/pub/health/?p=illcatl, - Загл. с экрана).
В Англии, Северной Ирландии у 83,3% собак, больных дерматомикозами, возбудителем является зоофильный гриб Microsporum canis (J. Walker, 1950; [Электронный ресурс] - Режим доступа: http://chelyaby1 priut.livejournal.com/8354.html, - Загл. с экрана. Во Франции у 80% собак причиной дерматомикозов является скрытая форма микроспории (D. N. Carlotti, 1999).
В Нидерландах у 27% домашних животных изолируют зоофильные грибы. К.С. Медведев (1999) и А. Бокарёв. - [Электронный ресурс] - Режим flOCTyna:http://www.ve^hoto.ni/modules/sections/index.php?op=viewarticle&arti d=9, - Загл. с экрана, считают, что гриб Microsporum canis хорошо адаптирован к кошкам и поэтому нередко болезнь протекает бессимптомно. От здоровых животных, ранее не болевших микроспорией, выделить возбудитель очень трудно, в то время как уровень носительства у переболевших животных достигает 100 %.
Особенно опасным источником инфекции для людей являются животные с субклинической (скрытой) формой микроспории. Также дерматофиты изолируют из здоровой кожи собак и кошек. Важное место в распространении дерматомикозов занимают бездомные собаки и кошки (М.В. Яцуха, 1992; Животные и закон. - [Электронный ресурс] - Режим дocтyпa:http://vetdoctor.ru/lib/textreader.php?specialization=&categoryid=43&t extid=124, - Загл. с экрана.; С.Е. Горбовицкий, 1958).
В национальном ветеринарном институте, Осло, исследовано 2066 соскобов с кожи домашних животных (собаки - 38%, лошади - 29%, крупный рогатый скот - 16%, кошки - 14%). В 439 образцах обнаружены дерматофиты следующих видов: Mirosporum canis (собаки, кошки, крупный рогатый скот, лошади, свиньи, козы, кролики, хомячки), Microsporum equinum (собаки, лошади), М. gypseum (лошади), Trichophyton equinum (лошади, крупный рогатый скот), Т. mentagrophytes (собаки, кошки, крупный рогатый скот, лошади, морские свинки, кролики), Т. verrucosum (крупный рогатый скот), Epidermophyton floccosum (собаки) (Н. Stenwig, 1985).
Одной из наиболее частых патологий связанных с поражением кожного покрова, с которым приходится встречаться ветеринарным специалистам -является демодекоз. A.A. Лисициной и Ф.И. Василевичем (1996) в Московской области было обследовано 638 собак с различными поражениями кожи, у 186 животных (29,2%) был диагностирован демодекоз. Чаще всего очаги поражений находились на голове, передних лапах и шее, т.е. в местах наибольшего контакта больных собак со здоровыми. Большинство больных собак были чистопородными (90,6%), короткошерстными (97 случаев). Максимальный процент заболеваемости отмечен у животных 6-12 мес. (42,1%). Самцы болеют чаще (61,9%) самок. Реже всего болеют щенята до 2 мес., т.к. в этом возрасте нет контакта с другими собаками и они защищены колостральным иммунитетом.
Т.С. Катаевой и М.А. Костылевой (2008) изучено распространение демодекоза собак в условиях г. Краснодара. Зараженность собак Demodex canis достигает 11%. Максимальная зараженность установлена у молодняка собак следующих пород: мопс, немецкая овчарка, ротвейлер и беспородных. Пик заболеваемости отмечают весной и осенью.
Ф.И. Василевич, А.К. Кириллов (1997) в период с 1983 по 1993 гг. в Москве и Московской области в результате микроскопического исследования соскобов кожи с губ, век, лба, щек, внутренней поверхности бедра, подмышечной впадины и вымени от 415 собак без видимых клинических признаков поражения кожи только у 36, или 8,6% обнаружили клещей D. canis. Кроме того, в 1994 г. была исследована кожа 25 собак после их смерти. При жизни признаков поражения кожи у них не было. В результате у 8% собак были обнаружены клещи D. canis, причем все собаки были старше 5-летнего возраста.
По данным L.D.B.B. Ferreira (1982) распространение демодекоза среди домашних животных в Португалии отмечал у 25% собак с проблемами кожного покрова.
С.В.Ларионов (1991) при обследовании 658 собак с поражением кожи у 226 (34%) обнаружил демодекоз. По данным М.В.Шустровой (1996) в г. Санкт-Петербурге из 1115 обследованных собак, диагностировали демодекоз У 725.
Несмотря на широкое распространение демодекоза, до настоящего времени мало изучены вопросы эпизоотологии и патогенеза, не разработаны эффективные меры борьбы с данной инвазией. Многие исследователи утверждают, что D. canis является нормальным обитателем кожи собак. В 1910 г. H.Gmeiner, основываясь на гистоморфологии кожи, установил, что клещи D. canis не встречаются у здоровых собак. В 1921 г. K.Trautwein гистологически исследовал 10 клинически здоровых собак в возрасте от 4 мес. до 8 лет, у 8 животных было обнаружено множество клещей. Автор делает вывод, что клещи могут паразитировать в волосяных сумках здоровых собак.
Ему возражает F. Lifka (1922). Он проверил 50 собак с "чистой кожей" и только у одного 2-х месячной бассета смог обнаружить клещей в пробе из верхней и нижней губы. Он предположил, что имеет дело с началом болезни. Автор делает вывод, что клещи не являются постоянными обитателями кожи здоровых собак. S.M. Gaafar (1958) проводил исследование 93 собак разных пород в возрасте от 2-х недель до И лет без клинических признаков поражения кожи. Материал брался из кожи верхнего века и из области виска. В 5 случаях был обнаружен клещ D. canis. F.R. Koutz (1955) исследовал кожу 204 здоровых собак в возрасте от 3 месяцев до 12 лет. Пробы брали из верхнего века, верхней и нижней губы, щек и др. У 108 собак был обнаружен клещ D. canis. F. Piotrowski (1979) в своих экспериментах брал пробы из тех же мест, что и F.R. Koutz. Из 100 подопытных собак у 39% обнаружили клещей D. canis. Возраст их был от 4 недель до 8 лет.
Ф.И. Василевич и А.К. Кириллов (1997) отмечают, что в период с 1983 по 1993 гт. в Москве и Московской области в результате микроскопического исследования соскобов кожи с губ, век, лба, щек, внутренней поверхности бедра, подмышечной впадины и вымени от 415 собак без видимых клинических признаков поражения кожи только у 36, или 8,6% обнаружили клещей D. canis. У 18 собак клещей находили на веках, у 9-на щеках, у 8-на губах, у 6 - на вымени, у 2 - на внутренней поверхности бедер. Собаки были, как правило, чистопородные: 16 собак были моложе 1 года, 9 - от 1 года до 3-х лет и 11-старше 3-х лет.
G.M. Gowing (1964) отмечает, что из 507 собак, пораженных демодекозом, представляли все возрастные группы в возрасте до 12 лет. Почти 2/3 его пациентов заболели в первый год жизни, доля собак старше 5 лет составила 35 случаев. С.Н. Olschewski (1988) считает, что старые собаки чаще болеют опухолями, их лечат кортикостероидами, которые ослабляют иммунную систему и они более подвержены заболеванию демодекозом. С.В.Ларионов (1991) отмечает, что из 226 собак, пораженных клещом D. canis, лишь 44 (19,5%) были старше 2-х лет. D.W.Scott (1995) четко выраженной возрастной динамики при данной инвазии не установил.
По данным Ф.И. Василевича (1997) из 61 обследованной собаки, зараженной демодекозом, максимальный процент заболеваемости отмечался у животных в возрасте от 6 мес. до 1 года - 42,3%, или 260 собак, в 191 случае (31%) демодекоз регистрировался в возрасте от 2 до 6 месяцев. В возрасте 13-х лет - 93 случая (35,1%), старше 3 лет - 61 случай (9,9%).
Высокая заболеваемость собак в возрасте до 1 года, вероятно, объясняется тем, что в это время животные подвергаются всевозможным стрессовым ситуациям (вакцинации, купирование ушей, смена зубов и др.)> что, безусловно, ослабляет защитные силы организма,
У 2,4% случаев наблюдался демодекоз у 1-2-х месячных щенков. В этом возрасте практически отсутствуют контакты с другими собаками, и не трудно предположить, что заражение произошло от больных демодекозом матерей.
Поражения кожи при демодекозе делят на сквамозную и пустулёзную.
При пустулезной форме демодекоза кожа, как правило, была опухшей, покрасневшей, на ней образовывались маленькие твердые узелки, которые возникали рядом с волосяными фолликулами и имели сине-красный оттенок. Узелки быстро превращались в гнойнички желтого, красно-коричневого, а иногда черноватого оттенка. Под легким нажатием из гнойничка выделялся сальный гной, иногда с кровью, в котором находились клещи на всех стадиях жизненного цикла. Вследствие вторичной инфекции возникает обширная пиодерма с образованием язвенных нарывов. Кожа становится толстой, морщинистой, влажной, часто трескается. Зуд часто бывает очень сильный, запах неприятный.
При пиодемодекозе почти во всех случаях наблюдается увеличение и болезненность подчелюстных лимфатических узлов, часто-гнойные флебиты конечностей, хромоту.
Папулы находились в области головы, спины, крестца, корня хвоста. Их размеры были от 2 до 7 мм в диаметре, очень плотные. При проколе стенки папулы в ее содержимом находили, как правило, мертвых клещей или их фрагменты (конечности, коксостернальный скелет, структуры гнатосомы и др.) На поверхности крупных папул, волос был несколько истончен, но сохранен.
Чаще всего встречалась смешанная форма демодекоза. Причем, при этой форме заболевание протекает наиболее тяжело. На облысевших участках кожа сильно сморщивается, что придает ей гофрированный вид. На месте вскрывшихся пустул часто образовываются язвы. Вследствие нарушения терморегуляции собака даже в теплом помещении испытывает озноб. Такие случаи, как правило, заканчиваются летальным исходом (Д.Н. Антипин, B.C.
Ершов, H.A. Золотарёв, В.А. Соляев, 1956; Ф.И. Василевич, A.A. Лисицина, В.А. Голубева, 1996).
Более половины всех случаев заболеваний кожи животных приходится на хронические зудящие дерматозы: экзему, нейродермит, атопический дерматит и другие. В большинстве случаев заболевания кожи бывают вызваны несколькими причинами, но большая часть этих заболеваний отражает нарушение деятельности внутренних органов. Наиболее частой причиной кожных заболеваний являются нарушения пищеварения. Основным субъективным симптомом является выраженный зуд. В результате частых расчесываний отмечается появление экскориаций, покрытых кровянистыми корочками. Ссадины вызывают новые приступы зуда и одновременно представляют собой благоприятные входные ворота для бактериальной инфекции и развития воспалительной реакции (A.B. Липин, и др., 2002).
Заключение Диссертация по теме "Звероводство и охотоведение", Ерпелова, Татьяна Николаевна
6. выводы
1 .Результатами проведённых научных исследований и анализом регистрационных записей отдельных ветеринарных клиник г. Краснодара установлено, что кожные болезни широко распространены у мелких домашних животных. На долю кожных болезней приходится более 34% всех случаев. При этом идёт увеличение числа заболеваний ежегодно в среднем на 1,7%. Наибольшее распространение имеет трихофития, демодекоз, пиодермия и микроспория.
Установлена четкая сезонность динамики заболеваемости собак смешанными инфекциями кожи. Проведенный анализ данных позволил определить сезонность заболеваний, которая приходится на два периода года: с мая по сентябрь, с пиками заболеваемости в июне и сентябре, а в зимние месяцы происходит затухание болезни. Максимальное количество заболевших пиодермией отмечается в июне, когда заболевает - 23,7% животных от общего количества заболевших в течение всего года. Пик заболевания животных демодекозом приходится на июнь - июль месяцы, что составляет - 38,8% от общего количества заболевших животных. Дерматофитозы также как и пиодермии, достигают пика заболеваемости в июне - 23,5% и сентябре - 22,3%. Наиболее часто распространено смешанное течение кожных заболеваний, вызванное комплексом инфекционных агентов (чесоточные клещи, грибы, микрофлора), которые составляют - 69,67%.
2.Учитывая полиэтиологичность наиболее массовых заболеваний кожи разработан оригинальный отечественный комплексный препарат комбицид. Он представляет собой однородную, мазеобразную массу от серо-белого до светло-желтого цвета со специфическим запахом и вкусом. Активнодействующими компонентами крема комбицид являются препараты, относящиеся к группам авермектинов и полигексаметиленгуанидинов, в качестве формообразующего вещества взята жировая основа. Он стоек при хранении в обычных условиях в защищенном от света месте, не горюч, не огнеопасен.
Лабораторные исследования крови (морфологические и биохимические) доказывают, что использование крема комбицид в однократной и трёхкратной терапевтических дозах благотворно влияет на все основные биохимические процессы в организме животных, не причиняя вреда гомеостазу организма животных.
3 .Комбицид относится к 4-му классу опасности (незначительно опасные вещества) по ГОСТ 12.1.007-76 «Вредные вещества» Ы)5о=2270 мг/кг, не вызывает выраженного токсикоза в дозировках до 2550 мг/кг массы тела. Коэффициент кумуляции (Кк) при многократном применении препарата крем комбицид составил 2,07, что относит препарат к четвертой группе - слабо выраженная степень кумуляции. Длительное применение препарата в терапевтической и 3-х кратной терапевтической дозах, не оказывает негативного влияния на состояние животных и другие показатели их клинического статуса, не оказывает вредного местного действия, не влияет отрицательно на морфо-биохимические показатели крови, не нарушает функции и структуру жизненно важных органов, систем и тканей. При нанесении на кожу и видимые слизистые оболочки препарат не оказывает раздражающего и аллергезирующего действия.
4.Комбицид способен оказывать акарицидное, антимикотическое и антимикробное воздействие на болезнетворных агентов при наружном (локальном) применении против дерматитов бактериального, микозного и клещевого происхождения.
При изучении антимикробных, антимикозных и акарицидных свойств препарата комбицид в отношении условно-патогенной микрофлоры, дерматофитов и саркоптоидных клещей установлено, что препарат обладает выраженным распространённым действием в отношении комплексных заболеваний кожи.
При определении чувствительности условно-патогенной микрофлоры под воздействием крема комбицид зона задержки роста составила для Str.pyogenes — 44,0 мм,; St.aureus - 41,7мм; St.epidermidis - 39,6; St.intermedius - 31,3мм; E.coli - 31,3мм; P.aeragenosa - 33,4мм; P.vulgaris - 35,7мм.
Препарат комбицид по отношению к грибам проявлял себя следующим образом. Зона задержки роста при воздействии на Candida albicans кремом комбицид составила 37,3 мм; к Microsporum canis - 27,3 и к Trichophyton mentagrophytes - 29,3 мм.
При определении акарицидной активности комбицида в сравнении с другими акарицидными препаратами, крем комбицид быстро вызывал гибель (через 5ч) клещей Psoroptes cuniculi находившихся в опыте.
5.Препарат обладает высокой терапевтической эффективностью- 82,8 -94,7%, характеризуется быстрой впитываемостью в поверхостные слои кожи, комплексностью действия и удобством в использовании. У больных животных, получавших лечение кремом комбицид существенно улучшалось общее состояние, на 3-10 день (в зависимости от наличия болезнетворных агентов) уменьшались гиперемия, зуд, раневая поверхность становилась светлее и сокращалась в диаметре, происходило формирование струпа, затем струп постепенно отделялся, и в местах поражения отмечали регенерацию кожного покрова, и появление новой здоровой шерсти.
Проведенные исследования показали, что комплексный препарат комбицид при заболеваниях кожи смешанной этиологии (саркоптоидные клещи, микрофлора и дерматофитозы) гораздо быстрее и качественнее оказывает терапевтический эффект, который составляет 80% на 10 день нанесения его на поражённые участки и 93,8 % на 20 день применения, нежели традиционная схема лечения, применяемая в клиниках, которая, составляет в среднем около месяца и терапевтическая эффективность на 20 день достигает лишь 75%.
7. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
На основании полученных результатов разработаны показания к применению и схемы использования препарата комбицид в ветеринарной практике.
Для практической ветеринарии рекомендуется препарат комбицид, предназначенный для нормализации патологического процесса кожно-волосяного покрова, в качестве комплексного средства, для лечения мелких домашних животных, в частности собак с поражениями поверхности кожи. В качестве терапевтического средства при острых формах течения болезни, вызванной чесоточными клещами, гноеродной микрофлорой и спорами грибов.
Результаты исследований, изложенные в диссертации, рекомендуются для использования в учебном процессе на ветеринарных и биологических факультетах, при написании учебных пособий и монографий, а также при проведении научно-исследовательских работ. Результаты исследований могут быть включены в программу повышения квалификации ветеринарных специалистов.
Производство препарата освоено в ООО «КНИВИ-ФАРМ» (г. Краснодар). В условиях ветеринарных клиник г. Краснодара обеспечено его применение в качестве эффективного лечебного средства при острых ассоциативных заболеваниях кожи мелких домашних животных.
5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Причина большинства кожных болезней - потеря способности организма справиться с недугом за счет внутренних компенсационных резервов, внутренний сбой. Нарушение физиологического равновесия происходит по многим причинам: заболевания внутренних органов, зашлакованность организма, дисгармония в психоэмоциональной и гормональной сферах, заражение грибковыми и вирусными инфекциями.
Заболевания внешних покровов собак можно разделить на две группы -заболевания собственно кожи и заболевания шерстного покрова. Более половины всех случаев заболеваний кожи у собак приходится на хронические зудящие бактериальные инфекции: пиодермия, дерматит, пиодермия кожных складок, импетиго, фолликулит, дерматофитоз, фурункулез, акне, пододерматит (межпальцевая зона) и другие. В других случаях эти заболевания являются последствиями нарушений деятельности внутренних органов, в частности пищеварения, к которым может присоединиться бактериальная инфекция (Ж-л: Зоосоветы любителям животных, 2008).
Болезни, общие для человека и животных, занимают первостепенное место среди всех известных ныне болезней. Кроме социальной опасности, инфекционные заболевания наносят значительный экологический ущерб (Т.В. Новикова, 2006).
Основным принципом лечения кожных заболеваний собак является комплексный подход к решению проблемы, воздействуя сразу на все виды патологических агентов. Это часто приводит к более быстрому выздоровлению, чем массированное воздействие высокоактивных субстанций.
На базе Краснодарского научно-исследовательского ветеринарного института разработан новый отечественный препарат - крем комбицид, представляющий собой комплексный препарат, состоящий из компонентов, способных оказывать акарицидное, антимикотическое и антимикробное воздействие на болезнетворных агентов. По внешнему виду крем комбицид представляет собой однородную, кремообразную массу от серо-белого до светло-желтого цвета с приятным специфическим запахом и вкусом.
Основными компонентами крема комбицид являются: препарат авермектинового ряда, полученный на основе продуктов жизнедеятельности почвенного гриба З^ерШтусез ауегтШНз обладает выраженным противопаразитарным действием на нематод и личинки подкожных, носоглоточных, желудочных оводов, а также на вшей, кровососок и возбудителей саркоптоидозов животных;
Биоцидный препарат, из группы полигексаметиленгуанидинов -относится к ограниченному кругу биоцидных препаратов, способных одновременно действовать как на аэробную, так и на анаэробную микрофлору, и грибы соответственно;
В качестве формообразующего вещества использована жировая основа, которая обладает выраженным противовоспалительным, противозудным, увлажняющим, ранозаживляющим эффектом при экземе, дерматите, псориазе, гнойничковых поражениях, опрелостях кожи. Устраняет кожный зуд. Увлажняет кожу и восстанавливает ее эластические свойства, предотвращает лихенизацию, восстанавливает проходимость протоков сальных желез.
Токсикологическая оценка крема комбицид проводилась на белых крысах и собаках. Проведенное, согласно общепринятым стандартам, изучение токсикологических свойств крема комбицид позволило нам установить его среднесмертельную дозу (1Т)5о=2270мг/кг).
В течение периода наблюдения крем комбицид не вызывал гибели и острой интоксикации животных, не влиял на их общее состояние и поведение. Рефлексы оставались сохраненными. Нарушения функциональной активности органов пищеварения и мочеотделения не наблюдали.
Токсикологические исследования на лабораторных и мелких домашних животных позволяют сделать вывод о том, что крем комбицид обладает некой токсичностью, вызывая явления токсического характера и гибели животных, в дозе начиная от 3,8 г/кг массы тела, и по ГОСТ 12.1.007-76 «Вредные вещества» относится к 4-му классу опасности (незначительно опасные вещества).
Изучение хронической токсичности на крысах показало, что животные хорошо переносили крем комбицид. Гибель крыс наблюдалась в группах во время опыта. Коэффициент кумуляции равен 2,07, что относит препарат к четвертой группе - слабо выраженная степень кумуляции. За всеми животными вели клинические наблюдения в течение всего срока назначения и семи дней после прекращения дачи препарата, обращая внимание на общее состояние, поведенческие реакции, аппетит, динамику прироста массы животных, время возникновения и характер интоксикации, ее тяжесть, обратимость, сроки гибели животных.
Исследование крови подтвердило вывод о малой токсичности препарата. При этом все проанализированные показатели крови опытных животных существенно не отличались от таковых в контроле.
Средние значения полученных результатов содержания эритроцитов, лейкоцитов и лейкоформула характерны для физиологической нормы растущих животных.
В крови крыс опытных групп наблюдалось недостоверное незначительное увеличение гемоглобина, что вероятно, можно отнести к активизации обменных процессов, протекающих в организме.
При анализе данных хронического эксперимента на собаках, в ходе которого изучали влияние крема комбицид на состояние обмена веществ, функцию почек и пищеварительного тракта, получены данные, свидетельствующие о том, что физико-химические показатели мочи и фекалий животных опытных групп оставались в пределах физиологических норм, а все исследованные показатели крови были схожи с таковыми в контроле.
Местно-раздражающее действие крема комбицид изучали методом накожных аппликаций на морских свинках. Каких-либо изменений в клиническом статусе животных и на месте аппликации выявлено не было, как в период изучения препарата, так и после его прекращений.
Характерным в действии крема комбицид является быстрая впитываемость препарата в поверхностные слои кожи, биоразлагаемость, комплексность действия, удобная в использовании лекарственная форма и высокий терапевтический эффект.
Проведенные исследования показали, что нанесение крема комбицид на кожу собак и лабораторных животных способствует снятию зуда, шелушения и не вызывает раздражения кожного покрова.
При изучении антимикробных, антигрибных и акарицидных свойств крема комбицид в отношении условно-патогенной микрофлоры и саркоптоидных клещей, установлено, что препарат обладает достаточно выраженным действием.
Клиническими испытаниями установлено, что крем комбицид обладает выраженной терапевтической эффективностью при ассоциированных заболеваниях кожи мелких домашних животных.
Разработка показаний к применению и изучение эффективности крема комбицид проведена в нескольких сериях опытов на собаках.
Терапевтическую эффективность крема комбицид изучали при поражениях кожи у собак.
Крем комбицид обладает выраженным бактерицидным и бактериостатическим действием в разведении 1:32 по отношению к культурам Streptococcus pyogenes, Staphylococcus epidermidis и Entherococcus faecalis, a также в разведении 1:16 по отношению к культуре Escherichia coli, Citrobacter freundii, Shigella dysenteriae и Pseudomonas aeragenosa. МБцК для Staphylococcus intermedius, Klebsiella pneumonia и Proteus vulgaris составила 1:16, а МБсК для Staphylococcus aureus - 1:16 и 1:64 для Staphylococcus intermedius, Klebsiella pneumonia и Proteus vulgaris соответственно.
Наряду с бактерицидными и бактериостатическими свойствами, крем комбицид обладает также фунгистатической и фунгицидной способностью.
Анализируя полученные результаты исследований по определению чувствительности условно-патогенной микрофлоры к лекарственным препаратам, устанавливали, что наиболее активно препятствуют росту микрофлоры такие антибиотики, как ципрофлоксацин, энрофлоксацин, тетрациклин; из четвертичных аммонийных соединений - бромацид; из биоцидных препаратов - роксацин (полигексаметиленгуанидин); из комплексных препаратов - анилокаин и крем комбицид. Антимикозным действием обладали роксацин, мазь «Ям» и крем комбицид.
В дальнейшем проведен опыт по определению сроков формирования устойчивости вариантов микроорганизмов к бромациду, роксацину, энрофлоксацину, ципрофлоксацину, крему комбицид. Проведено 20 пассажей семи тест-культур на питательных средах с вышеперечисленными препаратами.
Исследуемые виды культур микроорганизмов выявили устойчивость к препарату ципрофлоксацин уже в первом пассаже: максимально эффективная задержка роста составила 20,9±0,1 мм в культуре St.epidermidis.
Препараты бромацид и энрофлоксацин формировали устойчивость у Str. pyogenes в 10 пассажах, а роксацин и крем комбицид устойчивость у данного вида микрофлоры не вызывали.
Культура St.aureus-19,5±l,l теряла чувствительность к препарату энрофлоксацин к 15 пассажу, а к препаратам бромацид-23,4±2,1 и роксацин-39,1±0,5 чувствительность сохранялась.
St.intermedius формировал устойчивость к энрофлоксацину-17,6±0,2 и ципрофлоксацину-18,8±0,8 уже в первых пассажах, к препаратам бромацид-33,8±0,4 и роксацин-27,8±0,4 устойчивость не формировалась.
St.epidermidis-17,6±0,4 выявил устойчивость к энрофлоксацину в 20 пассаже и ципрофлоксацину-20,9±0,1 уже в первом, к препаратам бромацид, роксацин, крему комбицид данный штамм был в достаточной степени чувствителен.
E.coli была чувствительна к роксацину и крему комбицид, к препарату бромацид-15,6±0,3 устойчивость формировалась уже в 15 пассаже, к энрофлоксацину-18,6±0,3 и ципрофлоксацину-0 - уже в первом.
P.aeragenosa выявила чувствительность к роксацину и крему комбицид, однако же, к препаратам: бромацид, эрофлоксацин, ципрофлоксацин данный штамм показал значительную устойчивость.
P.vuigaris-20,9±0,5 демонстрировал чувствительность к препарату бромацид в 1 пассаже, к препарату энрофлоксацин-19,5±0,3 - в 5 пассажах, к препарату роксацин и крему комбицид — во всех проводимых пассажах.
При этом установлено, что формирование устойчивых вариантов Str. pyogenes-10,4±0,1, St. aureus-23,4±2,l, St.intermedius-24,1±2,2 к бромациду; Str. pyogenes-15,3±0,l, St. aureus-19,5±1,1, St.intermedius-7,8±0,2 к энрофлоксацину; Str. pyogenes-0, St. aureus-7,3±0,l, St.intermedius-13,9±0,1 к ципрофлоксацину происходило уже в 15-м пассаже, a Str. pyogenes-, E.coli, P.aeragenosa и P. vulgaris был устойчив к ципрофлоксацину с самого начала и энрофлоксацину уже в 10 пассаже. А именно - Str. pyogenes-18,4±0,3, E.coli-15,2±0,3, P.aeragenosa-15,2±0,6 и P. vulgaris-17,2±0,4. Все происследованные штаммы микроорганизмов были в достаточной степени чувствительны к крему комбицид, не формируя устойчивости в 20 пассажах.
Проведенные исследования позволяют сделать вывод, что препарат роксацин и крем комбицид не формировали устойчивости микрофлоры в 15 и даже , в 20 пассажах. Однако же крем комбицид вызывал более выраженную зону задержки роста практически у всех культур микроорганизмов во всех пассажах.
Препарат роксацин и крем комбицид не формировали устойчивости микрофлоры в 15 и даже в 20 пассажах. Характерно, что начальные уровни чувствительности патогенных и условно-патогенных бактерий также были заметно выше к препаратам роксацин и крем комбицид, чем к аналогам.
Таким образом, формирование резистентно-устойчивых штаммов микроорганизмов происходит гораздо быстрее к антибиотическим препаратам, нежели к препаратам, не содержащих их.
Акарицидное действие препаратов определяли на клещах Рзогор1ез сишсиИ, выделенных из соскобов некротических струпьев с внутренней поверхности ушей поражённых псороптозом кроликов. Выясняли следующим образом. Сначала выявляли неподвижных чесоточных клещей путём просветления корочек в соскобах кожи едкими щелочами. Соскоб эпидермиса помещали в чашку Петри или пробирку, заливали 5—10 частями 10 % раствора едкого натрия или калия и подогревали в течение 10—20 минут, доводя жидкость до лёгкого кипения. Затем маленькими частицами корочки переносили на предметное стекло, тщательно расщепляя препаровальными иглами, накрывали препарат покровным стеклом и исследовали под микроскопом.
Уже через 30 минут воздействия лекарственных веществ на подкожных клещей, препарат авермектинового ряда: аверсект-2 в 1% и комбицид показали первые результаты. Под воздействием Аверсект-2 1 % концентрации из 10 клещей, 7 живы, 2 парализованы, под воздействием крема комбицид - 8 ?кивых, 2 парализованых. Что касается препарата флювалинат 22%, то все 10 клещей из 10 по-прежнему живы; и бромпропиолат 50% - лишь 1 клещ из 10 парализован.
По истечении 45 минут воздействия акарицидов на зудней: аверсект-2 1% — 5 живых, 3 парализованных и уже 2 обездвиженных; комбицид - 1 парализован, 1 обездвижен; флювалинат 22% - по прежнему живы 10 из 10; и бромпропиолат 50% - 2 парализованы, 1 обездвижен и 1 погиб.
Спустя 1 час: аверсект-2 1% — 1 живой, 5 парализованы, 3 обездвижены и 1 погибший; комбицид - 5 живых, 4 парализованы и 1 обездвижен; флювалинат 22% - 8 живых, 2 парализовано, обездвиженных и погибших нет; и бромпропиолат 50% — живых не зарегестрировано, 1 парализован, 3 обездвижены и 6 погибших.
При воздействии 1час 30 минут: аверсект-2 1% — живые отсутствуют, 3 парализованы, 2 обездвижены и 5 погибло; комбицид - 3 живых, 5 парализовано, 2 обездвижены; флювалинат 22% — живых 7, 2 парализованы, 1 обездвижен и по прежнему ни одного погибшего; и бромпропиолат 50% — также как и под воздействием аверсект-2 4% — погибли все 10 из 10.
Через 2часа: аверсект-2 1 % — 5 обездвижено и 5 погибших; комбицид - 1 живой, 6 парализованы, 3 обездвижены; флювалинат 22% — 3 живых, 2 парализованы, 1 обездвижен и снова ни одного погибшего.
Спустя 2 часа 30 минут под воздействием препарата аверсект-2 1% все 10 клещей из 10 погибли. Комбицид — 5 парализованы, 4 обездвижены и 1 погибший. Гибель всех клещей при обработке кремом комбицид наступила через 5 ч экспозиции. А вот под воздействием препарата флювалинат 22% — 100% гибель наблюдалась лишь на исходе 4 часа эксперимента.
Клещи, которые находились в контрольной группе, помещённые на диск белой фильтровальной бумаги, пропитанной дистиллированной водой, сохраняли свою жизнедеятельность до 2 недель, и гибель первого из них зафиксирована только лишь через 72 часа, то есть на 4-е сутки.
Итак, исходя из проведённых опытов следует, что наиболее приемлемым акарицидным средством для комплексного препарата — крем комбицид является препарат аверсект-2 1%, потому что он достаточно быстро воздействует на паразитов на разных фазах жизненного цикла и имаго в том числе, не обладает резким специфическим запахом, легко растворим в воде, этиловом спирте, не накапливается в организме животных.
Анализируя полученные данные проведенных морфологических и биохимических исследований крови собак, показали, что при нанесении крема комбицид на кожный покров животных наблюдается спокойная картина крови не сильно отличающаяся от фоновых животных. В 2-й опытной группе животным наносили крем комбицид в трёхкратной терапевтической дозе, при этом в крови зарегестрирован эритроцитоз, по отношению к 1-й опытной группе, в которой животным наносили крем комбицид в однократной терапевтической дозе, который повысился в 1-й опытной группе в 1,1 раза, а во 2-й опытной группе в 1,2 раза по отношению к контролю. За счёт увеличения эритропоэза, повышается и уровень гемоглобина в 1-й группе на 1,2 раза, во 2-й опытной группе - в 1,5 раза. Повышение общего белка в 1-й опытной группе в 1,1 раза по сравнению со 2-й группой, в которой он составил 1,2 раза. Изменения в альбуминовых и глобулиновых фракциях белка не значительны, указывают на благотворное влияние опытного препарата - крем комбицид.
АлАТ и АсАТ во 2-й опытной группе быле выше по сравнению с группой отрицательного контроля, но всё равно находились в пределах физиологических норм собак. АсАТ в 1-й группе повышался в 1,8 раза, во 2-й опытной - в 2,0 раза, что касается АлАТ , то и в 1-й и во 2-й опытных группах увеличился одинаково в 2,5 раза.
Биллирубин, мочевина и креатинин также увеличивался практически равноценно в обеих опытных группах по отношению к контрольной. Итак билирубин вырос в 1,7 в 1-й опытной и в 1,9 раза во 2-й опытной группе соответственно. Мочевина увеличилась по отношению к контролю практически одинаково: в 1-й опытной в 1,7 раза, во 2-й опытной в 1,8 раза. Креатинин же равноценно, как в 1-й, так и во 2-й опытных группах увеличился в 1,2 раза по отношению к отрицательному контролю.
Что касается липидного обмена, в 1-й опытной группе произошло увеличение в 1,6 раза, вот во 2-й опытной группе - в 2,3 раза по отношению к группе отрицательного контроля.
В количественном отношении кальция и фосфора значительных изменений не наблюдалось.
Следовательно, проанализировав морфологические и биохимические данные мы можем сделать вывод, что использование крема комбицид в однократной и трёхкратной терапевтических дозах благотворно влияет на все основные биохимические процессы в организме животных, не причиняя вреда гомеостазу организма щенков.
Применение крема комбицид экономически выгодно, как по срокам, так и по затраченным средствам на лечение.
По материалам настоящих исследований фармакологических и токсикологических свойств крема комбицид, его эффективности при кожных заболеваниях и разработанному комплексному препарату - крем комбицид получено положительное решение на получение патента на изобретение.
Таким образом, препарат крем комбицид является малотоксичным и доступным по цене средством, обладающим разносторонним фармакологическим действием с выраженной лечебной эффективностью при ассоциированных заболеваниях кожи мелких домашних животных, вызванных микрофлорой, грибами и подкожными клещами.
Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата ветеринарных наук, Ерпелова, Татьяна Николаевна, Краснодар
1. Абуладзе, К.И. Паразитология и инвазионные болезни сельскохозяйственных животных / К.И. Абуладзе. М.: Колос, 1975. - 458с.
2. Айвазян, М.А. Изучение грибов рода Candida методом сканирующей электронной микроскопии. Вопр. Зоогигиены и вет. Санитарии при различных технологиях содержания животных / М.А. Айвазян.- М.: 1987,- С.42-45.
3. Акатов, А.К. Стафилококки / А.К. Акатов, B.C. Зуева.- М.: Медицина, 1983,- 255 с.
4. Алексеева, О.Г. К методике определения аллергенных свойств химических веществ / О.Г. Алексеева, А.И. Петкевич // Гигиена и санитария. 1973. - №3. - С. 64-67.
5. Безнадзорные собаки в крупных населённых пунктах./ Ветеринарная библиотека/ Животные и закон Электронный ресурс. Режим доступа: http://vetdoctor.ru/lib/text reader.php?specialization=&category id=43&text id=124, свободный. - Загл. с экрана.
6. Беклемишев, Н.Д. Аллергия к стафилококкам / Н.Д. Беклемишев. Алма-Ата: Наука, 1984.- 175с.
7. Белов, А.Д. Болезни собак / В.А. Чижов, Е.П. Данилов, И.И. Дукур; под ред. Д.А. Белова // Инфекционные болезни. Дерматомикозы. М.: Колос, 2002.-Гл. 6.-С. 240-243.
8. Белоусова, Т.А. Дерматофитии (микозы кожи) актуальная проблема современной дерматологии. Электронный ресурс. // Русский медицинский журнал. 2003. № 17. - Режим доступа: http://www.dennatolog4vou.rn/stat/rmi/dermatofitii act probl.html, - Загл. с экрана.
9. Белякова, И.М. Диагностика внутренних незаразных болезней сельскохозяйственных животных / И.М. Белякова. М.: Колос, - 1975. -288с.
10. Вайдерс, Л.Л. Создание лекарственных форм для широкого использования в ветеринарии /Л .Л.Вайдерс // Ветеринарная фармакопрофилактика, фармакотерапия и биофармация. Рига, 1974.
11. Василевич, Ф.И. // Ветеринария. 1993. - № 5. -С. 52-54.
12. Василевич, Ф.И. Гистоморфология колеи и внутренних органов при демодекозе собак / Ф.И. Василевич, A.A. Лисицина; В.А. Голубева / ML: 1996. - С.193-196.
13. Василевич, Ф.И. Демодекоз собак / Ф.И. Василевич, А.К. Кириллов / -М.: 1997. С. 47
14. Василевич, Ф.И. Демодекоз собак. / Ф.И. Василевич // Сб.материалов международн. семинара. -М.: 1994, с.41-48.
15. Василевич, Ф.И. Микроскопические исследования в диагностике заболеваний мелких домашних животных. / Ф.И. Василевич/ М. : Зоомедлит, 2009. - 96 с.
16. Верховский, O.A. Количественная характеристика иммуноглобулинов сыворотки крови собак в норме и при патологии / О.А.Верховский, А.А.Лисицина и др. // Журнал «Сельскохозяйственная биология», 1996. -№ 4. - С. 103-108.
17. Внимание! Лишай! Электронный ресурс. Режим доступа: http://chelyabv-priut.liveiournal.com/8354.htmL - Загл. с экрана.
18. Волков, Ф.А. Ивомек / Ф.А. Волков, К.Ф. Волков / Опыт применения в России. M.: Menai, 1999. - 38с.
19. Гавриш, В.Г. Справочник ветеринарного врача / В.Г Гавриш, И.И. Калюжный. Ростов н/Д.: «Феникс», 2003. - 576с.
20. Гаршис, М.Г. Болезни животных, опасные для человека / М.Г. Гаршис, Б.Л. Черкасский // Микроспория (Стригущий лишай). М.: Колос, 1997. -С. 111-113.
21. Гаскелл, P.M., Беннет М. Справочник по инфекционным болезням собак и кошек / P.M. Гаскелл, М. Беннет. М.: Аквариум, 1999, 224 с.
22. Глотова, Т.И. Дерматомикозы собак и кошек в условиях города / Т.И. Глотова // Ветеринария. 1998. - Вып. 12. - С. 59 - 61.
23. Горбовицкий, С.Е. Вопросы общей патологии, клиники и лечения дерматозов / С.Е Горбовицкий. Л.: Медгиз, 1958.-326 с.
24. Гржебин, З.Н., Цераидис Г.С. Основы гистопатологии кожи / З.Н. Гржебин, Г.С. Цераидис. М.: Медгиз, I960,- 360 с.
25. Гриценко, В.В. Воспитание и дрессировка собаки / В.В. Гриценко. М.: ООО «Аквариум-Принт», 2006. - 352 с.
26. Гурьянова, М.П. // Ветеринария, 1952, № 10, с.29-32.
27. Гусель, В.А., Маркова И.В. Справочник педиатра по клинической фармакологии / В.А. Гусель, И.В. Маркова.- Л.: Медицина,, 1989.- 318 с.
28. Дерябин, Д.Г. Стафилококки: экология и патогенность / Д.Г. Дерябин. -Екатеринбург: УроРАН, 2000,- С. 26-29.
29. Дойняк, Л.Б. Показатели антистафилококкового иммунитета у больных ринитом / Л.Б. Дойняк // ВОРЛ.- 1980.- № 2,- с.10-13.
30. Донник, И.И. Иммуноморфологические показатели крови у клинически здоровых собак / И.И. Донник, М.Ю.Лопатина и др. // Екатеринбург: Методическое пособие, 2004. С. 13.
31. Дубинин, В.Б. Чесоточные клещи, их биология, вред в сельском хозяйстве, меры профилактики и борьбы с ними / В.Б. Дубинин. М.: «Советская наука», 1954. - 149с.
32. Дышко, A.C. Зуд. Экспериментально-клинические исследования / A.C. Дышко. М.: Медгиз, 1962. - 86 с.
33. Егоров, Н.С. Выделение микробов-антагонистов и биологические методы учёта их антибиотической активности / Н.С. Егоров. М., 1957. - 74 с.
34. Егорова, Н.Б. Реактогенность и эффективность сухой бесклеточной стафилококковой вакцины при лечении хронических бронхитов / Н.Б. Егорова//ЖМЭИ.-1991,- №12,- с.42-45.
35. Жвакина, Е. Стригущий лишай. Электронный ресурс. Режим доступа: http://elenadolores.ucoz.ru/forum/23-341-l. - Загл. с экрана.
36. Забашта, Н. Н. Совершенствование мер борьбы с подкожнооводовой инвазией крупного рогатого скота: дис. . канд. вет. наук: 03.00.19 / Николай Николаевич Забашта; Ставроп. гос. аграр. ун-т. Ставроп, 2008. -178 л.
37. Западнюк, Л.П., Западнюк В.И., Захария Е.А., Западнюк Б.В. Лабораторные животные: разведение, содержание, использование в эксперименте / Л.П. Западнюк, В.И. Западнюк, и др. Киев, Вища школа. - 1983. - 383с.
38. Заржецкая, H.H. Стригущий лишай у собак / H.H. Заржецкая // Форум КЦ «Лидер НС» Электронный ресурс. - Режим доступа: http://liderastana.3bb,ru/viewtopic.php?id=124. - Загл. с экрана.
39. Зверькова, Ф.А. Болезни кожи детей / Ф.А Зверькова. СПб., Сотис, 1994. - 236 с.
40. Зубко, В.Н. Дрессировка служебных собак / В.Н. Зубко, М.М. Укроженко, и др. М.: ДОСААФ, 1977. - 95 с.
41. Иванов, H.A. Лечение кортикостероидами некоторых дерматозов. М.: Медгиз, 1963. - 171с.
42. Иванова, Л.Г. Микрофлора очагов поражения кожи у животных, подозреваемых в заболевании дерматомикозами / Л.Г. Иванова // Бюлл. ВИЭВ,- 1989.- Вып.72.- С.16-22.
43. Игнатов, П.Е. Стафилококковый дерматит у собак / П.Е.Игнатов / М.: Журнал «Ветеринария», 1995. -№5. С. 53-56.
44. Игнатов, П.Е. Стафилококкоз у собак / П.Е. Игнатов. М.: Ж-л Ветеринария, 1994. -№4. С.48-50.
45. Каблучеева, Т.И., Боровой В.Н. Учебное пособие «Определение экономической эффективности ветеринарных мероприятий» / Т.И. Каблучеева, В.Н. Боровой. КубГАУ, Красно дар,2002. - 60с.
46. Камышников, B.C. О чём говорят медицинские анализы: Справочное пособие / B.C. Камышников. Минск: Белорусская наука, - 1997. - 189 с.
47. Катаева, Т.С. Эпизоотология демодекоза собак в г. Краснодаре /Т.С. Катаева/ М.: Российский паразитологический журнал, Всероссийский
48. НИИ гельминтологии им. К.И. Скрябина РАСХ, 2008. Е.1. - С.64-67.
49. Кашкин, П.Н. Кандидозы / П.Н. Кашкин.- Л.: Медгиз, Ленингр. отд., 1958.-271 с.
50. Кашкин, П.Н. Руководство по медицинской микологии / П.Н. Кашкин, Н.Д. Шелканов.- М., 1978,- 346 с.
51. Кисилёв, O.A. Грибковые болезни кожи / O.A. Кисилёв. М., 1962. - 21 с.
52. Клюев, М.А. Лекарственные средства / М.А. Клюев, Н.М. Богданова и др. М.: Русская книга, 1993,- 576 с.
53. Ковалёв, В.Ф. Антибиотики, сульфаниламиды и нитрофураны в ветеринарии / В.Ф. Ковалёв, И.Б. Волков и др. М.: Агропромиздат, 1988.-223 с.
54. Кожные заболевания кошек и собак как их лечить/ Ж-л: Зоосоветы любителям животных.- 2008. - №10.
55. Козинец, Г.И. Кровь и инфекция / Г.И. Козинец, В.В. Высоцкий и др. -М.: Триада Фарм, 2001. - 456 с.
56. Колесникова, Н.М. Изменение микрофлоры очагов поражения под влиянием местного лечения антибиотиками / Н.М. Колесникова // Венерические и кожные заболевания: Алма-Ата, 1975.- С.194-197.
57. Комаров, Ф.И. Биохимические исследования в клинике / Ф.И. Комаров, Б.Ф. Коровин и др. Элиста: АЛЛ «Джангар», - 1999. - 250 с.
58. Кондакова, И.А. Этиология пиодермии собак / И.А Кондакова., И.Г.Конопельцев / Воронеж Теоретические и практические аспекты возникновения и развития болезней животных и защита их здоровья в современных условиях. Матер, междунар. конф., 2000. С. 48-50.
59. Корнеев, Л.А. Слово о собаке / Л.А. Корнеев. Москва: Мысль, 1989 -с.256.
60. Корнюшенкова Е.В. Дерматофития. Лечение лишая у собак и кошек / Е.В. Корнюшенкова, 2008. Электронный ресурс. Режим доступа: http://www.zoovet.ru/text.php7newsicH303, - Загл. с экрана.
61. Королёва, В.П. Возбудители дерматомикозов животных и их лаборатория диагностика / В.П. Королёва, Л.Г. Иванова // Тр.ВИЭВ.-1987.- Т.65,- С.32-41.
62. Кошки здоровье и болезни кошек, профилактика и лечение. Заразные болезни. // Cats-портал-Маи.ги. - Дерматомикозы. Электронный ресурс.
63. Режим доступа: http://www.cats-portal.m/pub/health/?p=illcatl, Загл. с экрана.
64. Кубась, В.Г. Дрожжеподобные грибы рода Кандида на неповреждённой коже / В.Г. Кубась // Науч.тр. Ленингр. Ин-та усовершенствования врачей, 1970,- Вып.90.- С.243-245.
65. Кузьмин, A.A. Глюкокортикоиды при болезнях кожи у собак / A.A. Кузьмин. Ж-л Ветеринария,- 1991,- №5,- С.59.
66. Лабораторные тесты. // Микробиологическая и вирусологическая диагностика. М.: Каппа, - 1995. - 4.1. - 111 с.
67. Лабораторные тесты. // Микробиологическая и вирусологическая диагностика. М.: Каппа, - 1995. - 4.2. - 111 с.
68. Ларионов, С.В. дис. . докт. вет. наук. -М.: 1991.
69. Лештаева, A.B. Дерматомикозы: лечение мелких домашних животных / A.B. Лештаева. Электронный ресурс. Режим доступа: hUp://ispets.ru/vetyarticles/derma/. - Загл. с экрана.
70. Лещенко, В.М. Лабораторная диагностика грибковых заболеваний / В.М. Лещенко. М.: Медицина, 1977. - 125 с.
71. Лещенко, В.М. Лечение больных зооантропонозной микроспорией гризеофульвином в сочетании с а-токоферолом / В.М. Лещенко, О.Г. Омельченко и др. // Вестник дерматологии.- Л., 1988.- №12.- С.24-26.
72. Липин, A.B. Ветеринарный справочник: Традиционные и нетрадиционные методы лечения собак // A.B. Липин, A.B. Санин, Е.В. Зинченко. -М.: -2002.
73. Липин, A.B. Ветеринарный справочник: традиционные и нетрадиционные методы лечения собак / A.B. Липин, A.B. Санин, Е.В. Зинченко // Дерматомикозы. М.: Колос, 2002. - Ч. 5, гл. 11. - С. 272278.
74. Лисицина, A.A. Клинико-эпизоотологическая характеристика демодекоза собак. Новое в диагностике, лечении и профилактике болезней животных / A.A. Лисицина, Ф.И. Василевич. М., 1996. - С. 196-199
75. Литвинов, A.M. Дерматофитозы кошек и собак (профилактика и лечение) / А.М. Литвинов. Ж-л Ветеринария. 2000. - Вып. 11. - С. 51 - 53.
76. Лукьяновский, В.А. Болезни кожи и подкожной клетчатки у собак / В.А. Лукьяновский. Ж-л Ветеринария,- 1995.- № 3,- С AI-55.
77. Маркова, И.В. Педиатрическая фармакология / И.В. Маркова, В.И. Калиничева.- Л.: Медицина, 1987,- 495 с.
78. Машкиллейсон, Л.Н. Частная дерматология / Л.Н. Машкиллейсон,- М.: Медицина, 1965.- 522 с.
79. Машкиллейсон. Микроспория / Л.Л. Машкиллейсон, H.A. Спесивцева // Большая советская энциклопедия. М.: Советская энциклопедия. 1969 -1978. Электронный ресурс. - Режим доступа: http://dic.academic.ru/dic.nsfbse/109099/. - Загл. с экрана.
80. Машковский, М.Д. Лекарственные средства / М.Д. Машковский,- М.: • Медицина, 1978.- Т. 1,2.
81. Медведев, В.В., Волчек Ю.З. Клиническая лабораторная диагностика: Справочник для врачей / В.В. Медведев, Ю.З. Волчек / под ред. В.А. Яковлева. СПб.: Гиппократ, - 1997. - 208 с.
82. Медведев, К.С. Болезни кожи собак и кошек / К.С. Медведев // Киев: Вима, 1999. С. 18-58,113-117.
83. Методические рекомендации. Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам. КубГАУ, кафедра эпизоотологии: Краснодар, 2005, с. 26.
84. Микроспория (стригущий лишай). Электронный ресурс. Режим доступа: http://www.povodok.rii/care/veterinarian/illnesses/artl683.html. -Загл. с экрана.
85. Милич, M.B. Пиломикозы (трихофития, микроспория, фавус) / М.В. Милич, М., 1963. - 65с.
86. Муканов, Д. Собачья проблема / Д. Муканов // Уральская неделя. 2007. -Вып. 6. - С. 10.
87. Натолл, Т. Кожные болезни собак / Т. Натолл, пер. с англ. М.: ООО «Аквариум-Принт», 2007. - 48 с.
88. Никитин, Е.Б. Анализ этиологических факторов заболеваемости мелких животных. // Павлодарский центр кинологии и фелинологии / Е.Б. Никитин. Электронный ресурс. Режим доступа: http://stalker-pvl.narod.ru/vet/index.htmL - Загл. с экрана.
89. Никитина, В.Н. Атлас клеток крови сельскохозяйственных и лабораторных животных / В.Н. Никитина. М.: Госуд. из-во сельскохоз. литературы, - 1949. - 179 с.
90. Новикова, Т.В. Лабораторная диагностика эндопаразитозов у собак и кошек / Т.В. Новикова: Учебно-методическое пособие. М.: ООО «Аквариум-Принт», 2006. - 144 с.
91. Определитель бактерий Берджи./ под ред. Дж.Хоума, Н. Крига, П. Снита и др. М.: Мир. - 1997. - Т.2. - С.541 - 559.
92. Орлов, И.В. Практикум по ветеринарной паразитологии / И.В. Орлов, Н.И. Агринский, С.Н. Никольский. М.: 1962, с. 185-191
93. Паразитология и инвазионные болезни сельскохозяйственных животных / Д.Н. Антипин и др.; под ред. Д.Н. Антипина. М.: Гос. с/х издат., 1956. -463с.
94. Паттерсон, С. Кожные болезни собак /Пер. с англ. Е.Осипова. М.: ООО «Аквариум-Принт», 2006 176 с.
95. Петрович, C.B. Дерматофитоз мелких домашних животных / C.B. Петрович, A.B. Горбатов. Ж-л Ветеринария.- 1984.- № 3.- С.48-49.
96. Плохинский, Н. А. Биометрия / Н. А. Плохинский. М.: МГУ, 1970. - 367 с.
97. Покровский, В.И. Медицинская микробиология / В.И. Покровский, O.K. Поздеев // М: ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 1999. С. 162-164.
98. Поляков, В.А. Ветеринарная энтомология и арахнология: Справочник/ В.А. Поляков, У.Я. Узаков, Г.А. Веселкин. М.: Агропромиздат, 1990. - 239 с.
99. Поляков, И.Д. Аллергия при дерматомикозах животных / И.Д. Поляков // Бюлл. ВНИИЭВ,- 1984,- Вып.54,- С.21-23.
100. Поляков, И.Д. Дерматомикозы собак и кошек, лечение вакциной Поливак-ТМ / И.Д. Поляков // Портал для ветеринарных врачей и владельцев животных. Электронный ресурс. Режим доступа:• • http://www.veterinarka.ru/content/view/257/60/, Загл. с экрана.
101. Постников, Е.И. Актуальные проблемы ветеринарной медицины на Северном Кавказе / Е.И.Постников, А.В.Хотько // Персиановский, Материалы 2 региональной конференции, 1999. С. 34-36.
102. Потекаев, Н.С., Шульгина Е.А. Низорал. Перспективы применения и побочное действие / Н.С. Потекаев, Е.А. Шульгина // Вестн.
103. Дерматологии,- 1987.- №8,- С.20-25.
104. Потёмкин, В.И. Сборник научных трудов МВА / В.И. Потёмкин. М.: 1973, т.65, с.184-185.
105. Потоцкий, И.И. Клинические разновидности висцерального кандидоза / И.И. Потоцкий, // Вестн. Дерматологии.- 1974.- № 2,- С.75-81.
106. Прокопенкова, И.А.Заболевания, вызванные патогенными грибами /. И.А Прокопенкова // Форум «Ветеринария и уход». Электронный ресурс. -Режим доступа: http://www.dogcitY.ru/vet/den'natit.html. Загл. с экрана.
107. ПО.Пьянкова, З.П. Лечение леворином и морфоциклином больных кандидозом кожи и слизистых, осложнёнными стафилококковой инфекцией / З.П. Пьянкова, Н.М. Колесникова // Венерические и кожные заболевания.- Алма-Ата, 1975.- С.190-193.
108. Равийский, Т.А. Кожа: грибковые заболевания у собак заразные для человека / Т.А. Равийский. // "2ооПетербург", 1998 9. Электронныйресурс. Режим доступа: littp://inaTis.net/forum/textversion.html?tl62 . -Загл. с экрана.
109. Реброва, Р.Н. Грибы рода Candida при заболеваниях негрибковой этиологии / Р.Н. Реброва,- М.: Медицина, 1989.- 125 с.
110. Решетникова, Н.Г. Наследственные аномалии внешних покровов / Р.Н. Реброва. Краснодар: Ж-л "Ветеринария Кубани"№ 3, 2006.
111. Рихтер, В. Основные физиологические показатели у животных и технология содержания / В. Рихтер, Э. Вернер, X. Бэр. Москва.: Колос, -1987. - С.86 - 88.
112. Розентул, М.А. Общая терапия кожных болезней / М.А. Розентул, -М., 1952,367с.
113. Самцов, В.И. Руководство по кожным и венерическим болезням / В.И. Самцов.- JL: Медицина, Ленингр. отд., 1990.- 388 с.
114. Саноцкий, И.В. Методы определения токсичности и опасности химических веществ / И.В. Саноцкий. М.: «МЕДИЦИНА», 1970. - 317 с.
115. Саркисов, А.Х. Иммунитет и специфическая профилактика дерматомикозов животных / А.Х. Саркисов. Бюлл. ВИЭВ,- 1984.-Вып.54.- С.3-7.
116. Сахаров, H.A. Техника дрессировки служебных собак / H.A. Сахаров. -М:-1961-139с.
117. Сахаров, П.П. Лабораторные животные, их болезни, некоторые биологические особенности и зоотехнические основы содержания,1 кормления и разведения / П.П. Сахаров. М.-Л.:гос. Изд-во биологической и мед. лит., 1937. - 268 с.
118. Селиванов, E.B. Красители в биологии и медиине /Е.В. Селиванов //. : Справочник.-Барнаул: Азбука, 2003. С.35-40.
119. Селисский, А.Б. Справочник по кожным болезням / А.Б. Селисский. -Минск: Госиздат БССР, 1963. 474С.
120. Сидоров, М.А. Определитель зоопатогенных микроорганизмов: Справочник / М.А. Сидоров, Д.И. Скородумов, В.Б. Федотов. М.:Колос, 1995.-319 с.
121. Скрипкин, Ю.К. Руководство по детской дерматовенерологии / Ю.К. Скрипкин, Ф.А. Зверькова, Г.Я. Шарапова.- Л.: Медицина, 1983,- 460 с.
122. Соколов, В.Д. Новые средства для лечения повреждений кожи различной этиологии / В.Д. Соколов, Н.Л. Андреева и др. // Ж-л Ветеринария, 1998. -№ 8, С. 37-40.
123. Соколовский, В.А. Кожные болезни животных / В.А. Соколовский, Н.Г. . . Толстова-Парийская и др. М.: Колос, 1968,- 382 с.
124. Сосновский, А.Т. Дерматологический справочник / А.Т. Сосновский,
125. B.Ф. Корсун,- Минск: Вышейша школа, 1986,- 229 с.
126. Спесивцева Н.А. Микозы и микотоксикозы. -М.: Колос, 1964. -551с.
127. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования. /Под.ред. Биргер М.О. М., Медицина, 1982.
128. Старченков, C.B. Болезни мелких животных: диагностика, лечение, профилактика / C.B. Старченков // СПб.: «Лань», 1999. - С. 344, 348.
129. Страчунский, Л.С., Козлов С.Н. Антибиотики: клиническая фармакология / Л.С. Страчунский, С.Н. Козлов,- Смоленск, А.О «Амипресс», 1994.- 208 с.
130. Сухецки, С. Пригодность препаратов из имидазоловой группы для лечения дерматомикозов и органов дыхательной системы у животных /
131. C. Сухецки // Новости вет.фарм.мед.- 1988.- №4.- С.7.
132. Терехова О.Б. Стафилодермия собак. Эпизоотология, клиническое проявление и терапия: (ведущие страны ОЭСР) автореф. дис. . канд. вет. наук: 16.00.03 / О.Б. Терехова; Краснодар, 2002. С. 3-14.
133. Тилли, Л. Ветеринария: болезни кошек и собак // Л. Тилли, Ф. М. Смит // ГЭОТАР -МЕД, 2001. С. 257, 605-606.
134. Тиханин, В.В. Бактериальные дерматиты у собак: особенности патогенеза и лечебная тактика / В.В. Тиханин, Н.Л. Карпецкая // Ж. Зооиндустрия, 2001. №8. - С. 17-19.
135. Трахтенберг, И.М. Показатели нормы у лабораторных животных в . токсикологическом эксперименте / И.М. Трахтенберг, P.E. Сова. - М.:1. Медицина, 1978. 155 с.
136. Троицкая, А.Д. Пиодермиты (стафилодермии и стрептодермии) / А.Д. Троицкая,.- Л.: Медгиз, Ленингр. отд., 1958.- 144 с.
137. Фольмерхаус, Б. Анатомия собаки и кошки / Б. Фольмерхаус, Й. Фревейн и др. М.: «Аквариум», 2003 .-508с.
138. Фролов, Е.П. Роль кожи в иммунологических реакциях / Е.П. Фролов, И.С. Персина // Кожа: строение, функции, общая патология и терапия.-М., 1982.- С.140-156.
139. Хабриев, Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Р.У. Хабриев,.-М.: ОАО «Медицина», 2005.- 832 с.
140. Ханис, А.Ю. Метод определения вирулентности дерматофитов / А.Ю. Ханис. Ж-л Ветеринария. 2003. - Вып. 8. - С. 20-22.
141. Цветкова, Г.М. Патоморфологическая диагностика заболеваний кожи / • " Г.М. Цветкова, В.Н. Мордовцев. М.: Медицина, 1986.- 352 с.
142. Цыркунов, Л.П. Профессиональные дерматозы от контакта с растениями и животными / Л.П. Цыркунов. М.: Медицина, 1986. - 240с.
143. Черкай, З.Н. Эффективность лекарственных форм анандина при микозах собак / З.Н. Черкай. Ж-л Ветеринария. 2006. - Вып. 12. - С. 50 - 52.
144. Черномор дик, А.Б. Кандидозы при антибиотикотерапии / А.Б. Черномордик.-Киев: Здоров'я, 1972,- 71 с.
145. Черноморцева, Н.И. Атлас сапрофитной и паразитной микрофлоры и микрофауны патологически изменённой кожи человека / Н.И. Черноморцева,- Минск, 1968.- 682 с.
146. Чиркин, А.А. Диагностический справочник терапевта: клинические симптомы, программы обследования больных, интерпретация данных / А.А. Чиркин, А.Н. Окороков, И.И. Гончарик. Минск: Беларусь, - 1992. -688с.
147. Шагаев, Д.В. Болезни кожи у собак / Д.В. Шагаев, Е.С. Посашкова '// Ветеринария. 2003. - Вып. 4. - С. 51 - 52.
148. Шендрик, Н.Д. Лечение собак при экземе / Н.Д. Шендрик, Л.Н. Шендрик. Ж-л Ветеринария.- 1990,- №7.- С.70.
149. Шуляк, Б.Ф. Руководство по бактериальным инфекциям собак / Б.Ф. : Шуляк//-М.: «ОЛИТА», 2003. Том 1. - С. 14-75.
150. Шустрова, М.В. дис. докт. веет, наук, 1996.
151. Яцуха, М.В. Трихофития, микроспория и фавус. Особенности эпидемиологии / М.В. Яцуха. Вестник дерматологии и венерологии. 1992.№ 3 - с.43-46.
152. Albanese G., Beneggi М., Crippa D/ Candidosi mucocutanea cronica: Brillante risultato del trattamento con ketokonazolo // Chron.Dermatol.-1986/- Vol.17.- №4,- P.539-544.
153. Carlotti D.N. Claw disease in dogs and cats. European Journal of Small Animal Practice, 1999, 9, 21-33.
154. Deichmann B. W., Le Blanc Т. I. J. Industr. Hyg. Toxicol., 1943, 25, 9, 415.
155. Ferreira L.D.B.B. A sarna demodecica nos animais. Rep. Trab. Inst. Nac. Veter. Lisboa, 1982; T. 14. p. 175-183
156. Gaafar S.M. The incidence of Demodex sp. in skins of apparently normal ■ . dogs//J. Am. Vet. Med. Assoc. -1958, № 133.-p.122-123.
157. Gmeiner H. Die Akarusrande der Tiere.// L. Tiermed. V.D., 1910. v 13. p.
158. Gowing G.M. (1964) Adwanced demodectic dermatitis in 4-day-old dachud puppiles.// Mod. Wet. Pract. № 45, p.70.
159. Koch H. Lietfaden der medicinischen mykologie. Jene, 1973. - 128 s.
160. Koutz F.R. Demodex folliculorum studies. Treatment methodes// North. Am. Vet. 1955, v.36, p.129-136.
161. Kurnatowska A. Przewodnik do cwiczen z mikologii lekarskiej.- Warzawa, 1973,- 88 s.
162. Lifka F. Demodex canis studies// Vet. Med. Diss. Berlin. 1922, № 3, p. 126132.
163. Lim R. K., Rink K. G., Glass H. G., Soaje-Echague E. Arch. Intern. Phar. Therapie, 1961, 130, 3-4, 336.
164. Mobacken H., Moberg S. Ketoconazole treatment of 13 patients with chronic mucocutaneous candidosis. A prospective 3 year trial // Dermatológica. -1986,- Vol/173/- №5,- P.229-236.
165. Nayak N.C.; Chakraborty T.; Bhowmik M.K. Prevalence and pathology of caprine dermatophytosis due to Trichophyton mentagrophytes. Indian J.anim. Sc, 1989; T. 59.N 11. -p.1380-1383
166. Olschewski C.H. Hat. jeder hautgesundeHund Demodexmilben// Berlin, 1988, p.140.
167. Petzelbauer P., Konrad K., Wolff K. Staphylococcal scalted skin syndrome bei zwei Erwachschen mit okutem Nierenversagen // Hautarzt.- 1989,- Bd.40.-№2,- S.90-93.
168. Piotrowski F. Ectoparasites of dogs and cats their importance and distribution in Europe// Wiadomosci parazyt, 1979, v.25, № 4, p.378-389.
169. Plant J. D., Rosenkrantz, W. S., Griffin, C. E. Factors associated with a prevalence of high Malassezia pachydermatis numbers on dog skin. Journal of the American Veterinary Medical Association 1992; 201: 87985.
170. Quadros E. Furunculosis in dogs. A etiology, pathogenesis and treatment. A clinical study. Akad.avhande. Stockholm, 1974. - 115 p.
171. Scott D.W., Miller W.H. and Griffin C.E. (1995) Muller & Kirk's Small Animal Dermatology. W.B. Saunders, Philadelphia, pp. 417-432.
172. Stenwig H. Isolation of dermatophytes from domestic animals in Norway. Nord. Veter.-Med, 1985; T. 37. N 3. p. 161-169
173. Thomsett L.R. Fungal diseases of the skin of small animals // Brit. Veter. J. -1986. Vol.142.- № 4.- P.317-352.
174. Trautwein K. Beiträge zur Kenntnis der Akariasis des Hundes// Monatsh, fur. Prakt. Tierheilkol, 1921, № 32, p.336-340.
175. Ukrainczuk Laborie F., Laborie R. Significance of Staphylococcus aureus in allergy immunology and its possible Role in cancer immunotherapy as substitute for BGG in context of microbial stimulation // Allergy a clin. Immunal., 1977.- P.269-276.
176. Vrzal V.; Rybnikar A.; Chumela J.; Lysak J. Trichophyton equinum hlavni puvodce dermatofytoz u koni. Veterinarstvi, 1985; T. 35. N 3. - s. 119-120.
177. Walker J., 1950 MedicalMycology A glabrous Microsporum canis in Greater , London 1981, Vol. 1981, Vol. 19, No. 1, Pages 71-77.
-
Ерпелова, Татьяна Николаевна
-
кандидата ветеринарных наук
-
Краснодар, 2011
-
ВАК 06.02.03
- Микробиоценозы кожи у собак и усовершенствование схем лечения инфекционных дерматитов
- Фармако-токсикологические свойства и терапевтическая эффективность амита форте при саркоптоидозах собак
- Фауна гельминтов собак Кабардино-Балкарской Республики и усовершенствование мер борьбы с опасными зоонозами
- РАСПРОСТРАНЕНИЕ ДИРОФИЛЯРИОЗА СОБАК В КРАСНОДАРСКОМ КРАЕ В РАЗРАБОТКА ЕГО ДИАГНОСТИКИ ИММУНОФЕРМЕНТНОЙ РЕАКЦИЕЙ
- Клещевой боррелиоз собак в природных очагах трансмиссивных инфекций на территории Омской области
