Бруцеллез крупного рогатого скота в Астраханской области: эпизоотологический мониторинг и совершенствование противобруцеллезных мероприятий

Устаев, Вахид Магомедович

Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему
Бруцеллез крупного рогатого скота в Астраханской области: эпизоотологический мониторинг и совершенствование противобруцеллезных мероприятий
ВАК РФ 06.02.02, Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов

Автореферат диссертации по теме "Бруцеллез крупного рогатого скота в Астраханской области: эпизоотологический мониторинг и совершенствование противобруцеллезных мероприятий"

На правах рукописи

Устаев Вахид Магомедович

004602924

Бруцеллез крупного рогатого скота в Астраханской области: эпизоотологический мониторинг и совершенствование противобруцеллезных мероприятий

06.02.02,- ветеринарная микробиология, вирусология,

эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

- 3 июн 2010

Москва-2010

004602924

Работа выполнена в ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко (ГНУ ВИЭВ)» г. Москва, в областной противоэпизоотической экспедиции службы ветеринарии Астраханской области и в областной ветеринарной лаборатории.

Научный руководитель:

Официальные оппоненты:

доктор ветеринарных наук Альбертян Мкртич Погосович (ВИЭВ)

доктор ветеринарных наук Скляров ОлегДинтриевич (ФГУ ВГНКИ)

доктор ветеринарных наук, профессор Скородумов Дмитрий Иванович (МГУПБ)

Ведущая организация: ФГОУ ВПО Московская Государственная Академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И.Скрябина (ФГОУ ВПО МГАВМиБ).

Защита диссертации состоится « Л>> ии^Л 2010г. в (V часов на заседании диссертационного совета Д 212.149.03 при ГОУ ВПО «Московский государственный университет прикладной биотехнологии (МГУПБ)» по адресу: 109316, Москва, ул. Талалихина, д. 33.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Московского государственного университета прикладной биотехнологии.

Автореферат разослан «ЗА>^ 2010г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук, доцент

И.М. Нитяга

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1. Актуальность темы. Бруцеллез - инфекционное заболевание, которым заражаются практически все виды сельскохозяйственных и многие виды диких животных, а также человек.

С момента открытия возбудителя Брюсом и Бангом до наших дней проведено огромное количество исследований в разных странах и изучено много вопросов, относящихся к бруцеллезу животных и человека. И в настоящее время интерес к изучению данной инфекции не ослабел, так как заболевания людей и животных бруцеллезом еще наблюдаются во многих странах мира.

Бруцеллез представляет собой мировую проблему, как для здравоохранения, так и для сельского хозяйства. Он является одной из наиболее сложных и в то же время опасных для людей антропозоонозных инфекционных болезней.

В настоящее время в Российской Федерации оздоровление хозяйств от бруцеллеза животных ведется при помощи противобруцеллезных вакцин. Используемые в нашей стране живые вакцины создают значительные неудобства. Самым главным из них является то, что у животных, привитых этими вакцинами в крови длительно сохраняются специфические антитела, что затрудняет определение эпизоотического состояния стад по бруцеллезу, то есть, отличить привитых животных от естественно больных бруцеллезом пока не представляется возможным.

Многие исследователи положительно оценивают роль подкожной и конъюнктивальной иммунизации и реиммунизации телок и взрослого крупного рогатого скота вакциной из агглютиногенного штамма 19 В. abortus в пониженных дозах (3-5 млрд.м.к.). В то же время нет единого мнения об эффективности указанных методов в борьбе с бруцеллезом животных.

1.2. Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы явилась изучение эффективности противобруцеллезных мероприятий в сравнительном аспекте и их научно-обоснованное совершенствование.

Для достижения данной цели были поставлены следующие задачи:

1) Изучить динамику заболеваемости бруцеллезом крупного рогатого скота в различных регионах Астраханской области;

2) Провести мониторинг эпизоотического процесса бруцеллеза крупного рогатого скота, определить территориальные и популяционные границы с различной степенью риска в Астраханской области;

3) Усовершенствование общих и специальных ветеринарно-санитарных мероприятий при бруцеллезе крупного рогатого скота в районах эпизоотического риска Астраханской области;

4) Провести сравнительное изучение эффективности схем подкожной иммунизации стандартной (80 млрд.м.к.), подкожной и конъюнктивальной реиммунизации пониженными дозами (3 и 5 млрд.м.к.) крупного рогатого скота вакциной из штамма 19 В. abortus в лабораторных экспериментах и в хозяйствах, не благополучных по бруцеллезу крупного рогатого скота;

5) Идентификация и дифференциация культур бруцелл, выделенных от абортированных плодов крупного рогатого скота в хозяйствах Астраханской области.

Научная новизна работы. Впервые проведен анализ и обобщены результаты диагностической и профилактической работы ветеринарной службы Астраханской области по борьбе с бруцеллезом крупного рогатого скота с 1960 по 2006 год. Изучена эпизоотологическая эффективность противобруцеллезных мероприятий с применением вакцин из штаммов 19 и 82 В. abortus в Астраханской области. Установлена эффективность применения вакцины из штамма 19 в полной и малых дозах при подкожном и конъюнктивальном методах введения.

Практическая ценность. Установлено, что эпизоотологический мониторинг является определяющим в прогнозировании эпизоотического процесса при бруцеллезе крупного рогатого скота, который позволяет своевременно планировать и проводить с высокой эффективностью комплекс ветеринарно-санитарных мероприятий, направленных на борьбу с бруцеллезом.

В результате исследований была создана основа по совершенствованию противобруцеллезных мероприятий с использованием специфических средств защиты и предложены рекомендации по применению вакцин из штаммов 19 и 82 В. abortus для профилактики и борьбы с бруцеллезом крупного рогатого скота. Рекомендуются подкожный и конъюнктивальный методы введения вакцины из штамма 19 в малых дозах.

Основные положения и результаты, выносимые на защиту:

1. Анализ статистических данных ветеринарной отчетности по заболеваемости крупного рогатого скота бруцеллезом в Астраханской области за период 1960 по 2006 год.

2. Результаты сравнительной эффективности противобруцеллезных мероприятий с применением вакцин из штаммов 19 и 82 В. abortus против бруцеллеза крупного рогатого скота в Астраханской области.

3. Выделение культур бруцелл от абортированных плодов крупного рогатого скота. Изучение основных биологических свойств этих культур, их идентификация и дифференциация;

4. Эффективность подкожного и конъюнктивального методов применения высокоагглютиногенной вакцины из штамма 19 В. abortus в малых дозах в борьбе с бруцеллезом крупного рогатого скота.

Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на заседаниях Ученого совета Всероссийского научно-исследовательского института экспериментальной ветеринарии имени Л.Р.Коваленко (ВИЭВ) в 2007-2009 г.г.

Публикация. По материалам диссертационной работы опубликовано 4 статьи в научных журналах.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа представлена в одном томе состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов и практических предложений. Диссертация изложена на 151 страницах компьютерного текста, иллюстрирована таблицами.

Список использованной литературы включает 148 наименований, в т.ч. 30 иностранных авторов.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы и методы исследований.

Работа выполнена в 2004-2008 годах в секторе хронических инфекций ВИЭВ, неблагополучных по бруцеллезу районах Астраханской области, районных ветеринарных лабораториях, в областной противоэпизоотической экспедиции службы ветеринарии Астраханской области. При анализе эпизоотологического и эпидемиологического состояния области использованы доступные для изучения статистические материалы Службы ветеринарии Астраханской области, областной санитарно-эпидемиологической станции, областной и районной ветеринарных лабораторий.

По указанным источникам выявлено численность, движение неблагополучных по бруцеллезу пунктов, количество проведенных исследований и эпизоотическое состояние каждого пункта за ряд лет по данной инфекции, на основе чего составлены таблицы и графики, иллюстрирующие динамику развития бруцеллеза крупного рогатого скота за годы иммунизации вакцинами из штаммов 19 и 82, а также заболевания людей.

Для более детального и сравнительного изучения взяты материалы за 46 лет, с 1960 по 2006 год.

В целях выделения бруцелл от больных животных исследовали бактериологически аборт-плоды крупного рогатого скота.

Посевы инкубировали как в условиях атмосферы, обогащенной углекислым газом (5-10%) в парафинированных пробирках, так и в обычных аэробных условиях.

Изучение основных биологических свойств культур бруцелл, выделенных от животных в Астраханской области проводили по современной классификации ФАО/ВОЗ. Изучили следующие дифференциальные признаки видов и биоваров рода Brucella:

-потребность в С02,

-продукция H2S,

-рост на средах, содержащих тионин, основной фуксин, агглютинация с моноспецифическими сыворотками А и М, с R-сывороткой, рост на питательных средах с различной концентрацией пенициллина.

Исследовано всего 18 культур, выделенных от абортированных плодов. Из них 13 оказались полевыми штаммами бруцелл, остальные - вакцинными.

Изучали морфологию бруцелл, тинкториальные свойства культур. С этой целью каждую культуру исследовали микроскопически путем окрашивания мазков по Граму и Козловскому. Для изучения морфологий колоний культур проводили посев их на печеночный агар в чашках Петри. Проверяли агглютинабильность культур со специфическими агглютинирующими сыворотками. При этом антигеном служила кипяченая суспензия испытуемой культуры.

Вирулентность штаммов бруцелл изучали на морских свинках. Для каждого изучаемого штамма брали по 3 животных. На 15-й день после заражения и перед убоем сыворотки крови морских свинок исследовали в РА и РСК.

На 30-й день после заражения морских свинок убивали для бактериологического и патологоанатомического исследований, которые проводили общепринятыми методами. Часть полученных культур исследовали теми же методами, что и исходные культуры, с целью проверки их после пассажа. Кроме того изучали чувствительность культур бруцелл к пенициллину.

Изучаемые культуры бруцелл проверяли в реакции термоагглютинации и пробой с трипафлавином, окрашивали по методу Уайт-Вилсона в отношении диссоциации.

Контроль полученных результатов дифференциации проведено с эталонным штаммом В. abortus, сектора хронических инфекций ВИЭВ.

Чувствительность культур бруцелл к тионину изучали на полужидкой среде. В 100 мл. среды добавили различные количества 0,1% основного раствора тионина из расчета, чтобы получились концентрации от 1:40 ООО до 1:300 000. Каждая культура исследовалась посевом на вышеуказанные среды. С этой целью 48-часовые культуры бруцелл смывали стерильным физиологическим раствором и из них готовилась суспензия с содержанием один миллиард микробных клеток в 3 мл. по стандарту мутности. Из такой суспензии высевалась одна петля в пробирку на среду с тионином. Рост учитывался в течение 6 дней при инкубации посевов при температуре 37-38°С.

С целью проверки чувствительности штаммов бруцелл к пенициллину, их выращивали в течение 48 часов на мясо-пептонном печеночном агаре при температуре 37-38°С, после чего культуру смывали стерильным физиологическим раствором. Из смыва каждой культуры готовили путем последовательных разведений суспензии с содержанием в 1 мл. 100 000 микробных клеток (м.к.) по стандарту мутности. Из указанной взвеси делали посевы по одной стандартной петле в пробирку на поверхность агара, содержащего 0,5, 5, 50, 100, 500 и 5000 ед. пенициллина в 1 мл. среды. Для этой цели использовался кристаллический пенициллин, калиевая соль. Посевы выдерживали в термостате при температуре 37-38°С в течение 10 суток. Учет роста проводили через каждые 48 часов.

Кроме выделенных от абортированных плодов культур бруцелл в работе использовали:

1) В. abortus 19

2) В. abortus 82

3) В. abortus 75/79-АВ

4) В. abortus 54

Культуры штаммов суспензировали в стерильном физиологическом растворе с концентрацией от 10 до 1x109 м.к. в 1 мл.

2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.2.1. Ретроспективное изучение эпизоотического состояния по бруцеллезу крупного рогатого скота в Астраханской области.

В Астраханской области бруцеллез сельскохозяйственных животных впервые был установлен в 1931-1932 г.г.. Однако вопросы эпизоотологии до настоящего времени недостаточно изучены.

В 1960 году в Астраханской области насчитывалось 180 неблагополучных пунктов по бруцеллезу крупного рогатого скота, заболеваемость людей бруцеллезом составляла до 13 человек в год (Таблица

I)-

Таблица 1

Эпизоотическая обстановка по бруцеллезу крупного рогатого скота в Астраханской области за период 1960-2006 г.г.

Годы Неблагополучные пункты

Наличие на 01.01. Выявлено новых Оздоровлено Осталось на конец года

1 2 3 4 5

1960 180 10 16 174

1961 174 7 25 156

1962 156 15 30 141

1963 141 8 20 129

1964 129 6 22 113

1965 113 3 36 80

1966 80 4 35 49

1967 49 - 25 24

1968 24 5 9 20

1969 20 3 11 13

1970 13 7 3 17

1971 17 11 5 23

1972 23 12 3 32

1973 32 7 3 36

1974 36 16 5 47

1975 47 9 9 47

1976 47 8 11 44

1977 44 1 19 26

1978 26 - 17 19

1979 19 2 7 14

1980 14 1 3 12

1981 12 1 3 10

1982 10 - 4 6

1983 6 - 2 4

1984 4 - 3 1

1985 1 42 - 43

1986 43 1 14 30

1987 30 1 20 11

1988 11 1 9 3

1989 3 2 - 5

1990 5 1 - 6

1991 6 2 3 5

1992 5 5 1 9

1993 9 5 3 11

1994 11 3 6 8

1995 8 4 3 9

1996 9 2 4 7

1997 7 3 5 5

1998 5 1 2 4

1999 4 3 2 5

2000 5 - 1 4

2001 4 4 2 6

2002 6 3 3 6

2003 6 17 7 16

2004 16 9 5 20

2005 20 5 12 18

2006 18 6 7 16

В 1960 году, в период начала изучения нами эпизоотической ситуации по бруцеллезу сельскохозяйственных животных в Астраханской области крупный рогатый скот исследовался по реакции агглютинации (РА), реакции связьшания комплемента или реакции длительного связывания комплемента (РСК/РДСК), кольцевой реакцией (КР) и роз бенгал пробой (РБП).

Эпизоотическая обстановка по бруцеллезу крупного рогатого скота и применение вакцин из штаммов 19 и 82 В. abortus показано на рисунках 5 и 6.

Положительно реагирующих животных концентрировали в бруцеллезных изоляторах. Колхозы и совхозы по экономическим соображениям не могли сокращать маточное поголовье. Организовалось летне-лагерное содержание скота, проводилась очистка и дезинфекция животноводческих помещений. Однако весь этот комплекс противобруцеллезных мероприятий не оказался эффективным в борьбе с бруцеллезом.

В Астраханской области до 1974 года для оздоровления хозяйств от бруцеллеза на крупном рогатом скоте применялась вакцина 19 В. abortus.

Система ведения животноводства из-за отсутствия условий игнорировала изолированное выращивание молодняка и формирование из них отдельных здоровых гуртов. Поэтому применение вакцины из штамма 19 с учетом местных условий Астраханской области сталкивалось со многими неясными вопросами. Прежде всего, как определить состояние по бруцеллезу гуртов, пополняемых привитым молодняком, вакцинировать ли взрослый крупный рогатый скот, какие сроки и кратность вакцинации и ревакцинации и в соответствии с этим оценка реагирующих в отдаленные сроки после вакцинации, длительность применения прививок, применение малых доз и т.д.. Требовалось также изучить, что дает вакцинация животных личного пользования, без чего в ряде районов нельзя было обойтись.

Вакцина из штамма 19 применялась в 180 пунктах, неблагополучных по бруцеллезу с общим поголовьем 151 тыс. крупного рогатого скота, а также в угрожаемых хозяйствах. Ревакцинацию проводили через 2 года, а иногда и через год и раньше при появлении абортов бруцеллезного происхождения. Кратность или продолжительность прививок определялась исходя из эпизоотической ситуации хозяйства и данного района по бруцеллезу. Серологические и аллергические исследования проводились по общепринятой методике. Хозяйство признавалось благополучным при получении двукратных отрицательных результатов исследований.

Рисунок 5. Бруцеллез крупного рогатого скота

с; с; <и

а >>

о.

ю о с

fcs о с о

аЗ

ч о btS

200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0

"ИЗ 43.9

1960 1961 1962 1963 1964 1965 1966 1967 1968 1969 1970 1971 1972 1973

■Количество неблагополучных пунктов -НЭ "Количество животных, привитых против бруцеллеза шт. 19 В. abortus

Рисунок 6 Бруцеллез крупного рогатого скота

Я К 03 CQ О О, К

s ^ а У sc -О сз

CQ w

О «

Ь О ID

¡Г S П О

180,0 160,0 140,0 120,0 100,0 80,0 60,0 40,0 20,0 0,0

^ ^ ^ ^ ^ ф ^ ^ график движения неблагополучных пунктов и вакцинация животных вакциной шт. 82 В. abortus

— вакцинировано вакциной шт. 82 В. abortus -неблагополучные пункты

50,0 45,0 40,0 35,0 30,0 25,0 20,0 15,0 10,0 5,0 0,0

о с

а з

в* >, Es о с о

сЗ Jj

н X

с ¡и

а.

а> ю Я

Численность крупного рогатого скота в Астраханской области в 2006 году составляла 157,580 голов (Таблица 2).

Таблица 2

Численность крупного рогатого скота в Астраханской области за 1981- 2006 годы (среднегодовое наличие скота)

№ п/п Годы Наличие КРС (голов) № п/п Годы Наличие КРС (голов)

1 1981 349,000 14 19 94 379,518

2 1982 360,000 15 1995 240,557

3 1983 376,000 16 1996 208,514

4 1984 379,000 17 1997 175,876

5 1985 358,162 18 1998 158,049

6 1986 344,118 19 1999 155,213

7 1987 347,580 20 2000 154,212

8 1988 347,455 21 2001 159,253

9 1989 379,018 22 2002 171,944

10 1990 376,096 23 2003 176,026

11 1991 363,752 24 2004 178,923

12 1992 338,888 25 2005 185,869

13 1993 314,387 26 2006 157,580

Из таблицы 2 видно, что за указанный период поголовье крупного рогатого скота в Астраханской области резко сократилось. Так, если в 1981 году в области имелось крупного рогатого скота 349 000 голов, то в 2000 году поголовье скота резко сократилось и составило 154,2 тыс.

За период с 1960 по 1974 год серологически и аллергически исследовано всего крупного рогатого скота 3314,7 тыс. голов, выявлено реагирующих 42340 голов или 1,27%. По мере развертывания диагностических исследований росло и число неблагополучных по бруцеллезу районов в области. Если в 1933 году бруцеллез крупного рогатого скота имел распространение только в шести районах: (Ахтубинский, Енотаевский, Черноярский, Приволжский, Харабалинский, Красноярский), то в 1960 году инфекция регистрирована почти во всех 11-й районах области.

В борьбе с бруцеллезом кроме общих мероприятий, применяли также специфическую профилактику.

Впервые вакцину из штамма 19 в 1955-1956 г.г. внедрили в районах, в которых бруцеллез сильно распространился. Применение вакцины в комплексе противобруцеллезных мероприятий способствовало созданию иммунной прослойки, купированию инфекции, особенно в районах с сильным распространением инфекции и способствовало ликвидации бруцеллеза, прежде всего в районах со слабым распространением болезни.

По состоянию на 01.01.1974г. в области остались 4 района с поражением бруцеллеза, насчитывающие всего 36 неблагополучных пунктов в районах, граничащих с Казахстаном.

2.2.2. Эффективность мероприятий в борьбе с бруцеллезом крупного рогатого скота, проводимых в хозяйствах Астраханской области.

Существенным моментом, определяющим направление борьбы с бруцеллезом, является разработка комплекса организационно-хозяйственных и ветеринарно-санитарных мероприятий по ликвидации бруцеллезных очагов и охране благополучных хозяйств.

Число неблагополучных районов в Астраханской области к 1960 году доходило до 11 (из общего числа 11), в которых установлено неблагополучных пунктов по бруцеллезу крупного рогатого скота -180.

В комплекс проводимых мероприятий входили следующие основные моменты:

а) диагностические исследования животных;

б) изоляция реагирующих на бруцеллез животных с последующим их убоем, за исключением племенных и высокопродуктивных животных, из которых создавались группы бруцеллезных животных;

в) проведение ветеринарно-санитарных мероприятий (очистка, дезинфекция помещений и прилегающей территории).

Диагностические исследования развертывались в больших, ежегодно возрастающих размерах. Кроме неблагополучных, обследовались подозреваемые в неблагополучии и пункты кольцевой зоны, расположенные вокруг сильно пораженных бруцеллезом хозяйств, независимо от эпизоотического состояния, куда возможен был занос инфекции.

Результаты диагностических исследований крупного рогатого скота на бруцеллез приводятся в Таблице 3.

Таблица 3

Исследование проб крови на бруцеллез от вакцинированного и не вакцинированного крупного рогатого скота

за 1974-2006гг.

Годы Исследовано серологически КРС не привитый вакциной шт. 82 Выявлено положительно реагирующих животных (голов) % реагирующих Исследовано серологически КРС, привитый вакциной из шт. 82 Выявлено положительно реагирующих животных (голов) % реагирующих

1974 418847 5329 1,27 35259 518 1,47

1975 374882 6008 1,60 105806 1316 1,24

1976 175380 1608 0,91 347830 4403 1,26

1977 164770 326 0,19 340071 4202 1,23

1980 118160 310 0,26 268578 2101 0,78

1982 124350 419 0,33 272943 1162 0,44

1984 81917 276 0,33 360655 2828 0,78

1985 123419 700 0,56 319315 2353 0,73

1988 141190 300 0,21 276968 1098 0,39

1989 98923 189 0,19 234460 1062 0,32

1990 110446 390 0,35 286554 1231 0,42

1996 118327 674 0,57 136674 538 0,39

1997 125406 574 0,46 110595 502 0,45

1998 131261 604 0,46 80341 226 0,28

1999 139758 554 0,39 70906 155 0,21

2000 174973 744 0,42 60877 49 0,08

2001 207269 778 0,37 51637 91 0,17

2002 213801 802 0,37 49944 113 0,22

2003 228703 965 0,42 48158 84 0,17

2004 234248 1094 0,46 41252 158 0,38

2005 226193 1057 0,46 41921 118 0,28

2006 221130 1140 0,51 42558 128 0,3

Итого 24841 24436

Из таблицы 3 видно, что количество исследованного скота, вакцинированного штаммом 82 в 2005 году по сравнению с 1975 годом сократилось в 2,5 раза, а количество положительно реагирующих - в 10 раз.

Сведения о выявлении бруцеллеза среди коров в хозяйствах Астраханской области за 1993-2006 г.г. приводятся в Таблице 4.

Из таблицы 4 видно, что заболеваемость коров в указанный период значительно сократилась. Если в 1993 году по Астраханской области было выявлено 832 гол. больных бруцеллезом коров, то в 2006 году - в 8,3 раза меньше, 100 голов. В 1993г. наибольшее количество больных животных было выявлено в Енотаевском районе (171гол.), Камызякском (134гол,), Ахтубинском (123 гол.) районах.

В 1960-2006г.г. бруцеллез крупного рогатого скота имел распространение на всей территории Астраханской области (Таблица 5 и Рисунок 7).

В период 1970-1984г.г. обстановка значительно улучшилась. Количество неблагополучных пунктов сократилось до 1 в 1984 году. В 1985 году в области число бруцеллезный очаг резко увеличивается до 43. С 1988 по 2002 годы количество неблагополучных пунктов в Астраханской области составляло от 3-х до 11. В 2003-2006г.г. обстановка несколько ухудшилась. Количество неблагополучных по бруцеллезу пунктов выросло до 16-20. В то же время эпизоотическая обстановка по бруцеллезу крупного рогатого скота продолжала оставаться значительно лучшей по сравнению с периодом 1960-1974г.г., когда применялась вакцина из штамма 19. Улучшению обстановки по бруцеллезу способствовало и то, что резко сократилось количество больных бруцеллезом животных на передержке.

В борьбе с бруцеллезом крупного рогатого скота в общем комплексе организационно-хозяйственных и ветеринарно-санитарных мер применялось и специфическая профилактика. В Астраханской области применялись две вакцины, до 1974 года - агглютиногенная вакцина из штамма 19 и с 1975 года - слабоагглютиногенная вакцина из штамма 82 В. abortus. Вакциной из штамма 19 ежегодно иммунизировалось от 23,4тыс. до 66,2тыс. голов скота, а штаммом 82 - значительно больше - от 20,7 до 164,1тыс. голов.

По официальным данным за период с 1960 по 2006г. с применением противобруцеллезных вакцин в общем комплексе организационно-хозяйственных и ветеринарно-санитарных мер в 11 районах в Астраханской области от бруцеллеза крупного рогатого скота оздоровлено всего 235 колхозов, совхозов, разной категории частных фермерских, крестьянских хозяйств, гуртов. Отдельные хозяйства оздоровливались по 2-3 раза.

С применением вакцины из штамма 19 В. abortus оздоровлено 82 хозяйства, с применением вакцины из штамма 82 - 153.

Таблица 4

Выявление бруцеллеза среди коров в хозяйствах Астраханской области за 1993-2006 годы

Районы 1993 1994 1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 Всего ПО району (голов)

Ахтубинский 123 125 23 31 8 10 6 2 2 16 2 0 9 0 357

Володарский 39 10 11 7 7 4 10 2 0 1 0 6 15 1 113

Енотаевский 171 67 103 61 13 10 0 2 0 0 52 51 59 79 668

Икрянинский 26 16 45 40 49 1 1 12 12 0 0 0 0 0 202

Камызякский 134 101 72 103 101 117 5 15 35 15 5 31 2 2 738

Красноярский 62 157 158 45 39 6 52 27 20 11 23 16 39 2 657

Лиманский 5 0 0 4 И 1 0 0 0 92 0 0 1 14 128

Наримановский 53 37 50 23 2 2 59 0 0 0 0 0 57 0 283

Приволжский 103 16 105 71 24 2 15 3 1 0 2 3 0 0 345

Харабалинский 39 51 30 20 10 3 5 1 1 0 0 0 0 2 162

Черноярский 77 59 42 29 11 16 72 2 15 7 0 0 0 0 330

г. Астрахань. 0 0 11 10 0 1 2 28 0 0 0 0 0 0 52

г. Знаменск 0 0 0 0 0 0 1 41 1 0 1 0 0 0 44

Всего по области 832 639 650 444 275 173 228 135 87 142 85 107 182 100 4079

Таблица 5

Эпизоотическое состояние животноводческих хозяйств Астраханской области по заболеванию крупного рогатого скота бруцеллезом за 1960-2006гг.

Годы Наличие неблагополучных пунктов (н/л) Заболело голов Иссл-но первично (тыс. гол.) % реагирующих животных Исслед. вторично (тыс. гол.) Вакци-нировно (тыс. гол.) План оздоровления н/п Остаток больного скота на конец года

на 01 января выявлено новых Оздоровлено осталось на конец года

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

Вакцина из шт. 19

1960 180 10 16 174 3620 151,9 2,4 46,0 0 640

1961 174 7 25 156 3633 158,6 2,3 43,9 0 1104

1962 156 15 30 141 3204 175,0 1,8 66,2 0 763

1963 141 8 20 129 2764 179,0 1,5 40,2 0 428

1964 129 6 22 113 3683 207,4 0,9 43,9 14 28

1965 113 3 36 80 2095 201,7 0,9 35,9 34 111

1966 80 4 35 49 1498 236,1 0,6 45,9 36 83

1967 49 0 25 24 1256 233,4 0,5 32,4 24 10

1968 24 5 9 20 1945 244,3 0,7 33,0 13 22

1969 20 3 11 13 1305 241,8 0,5 37,8 10 10

1970 13 7 3 17 1377 231,1 0,5 29,9 7 105

1971 17 И 5 23 2749 250,7 0,09 33,3 10 94

1972 23 12 3 32 3114 254,9 1Д 23,4 11 30

1973 32 7 3 36 4425 270,8 1,63 24,5 0 136

1974 36 16 5 47 5672 278,0 2,0 37,4 0 233

Вакцина из шт. 82

1975 47 9 9 47 6777 322,0 2,1 130,5 164,1 628

1976 47 8 11 44 6010 316,4 1,9 182,4 157,6 15 424

1977 44 1 19 26 4527 304,3 1,5 206,3 106,98 15 206

Продолжение таблицы 5

оо

1 2 3 4 5 б 7 8 9 10 и 12

1978 26 0 7 19 2964 321,0 0,9 133,7 156,2 21 129

1979 19 2 7 14 2621 322,9 0,8 102,5 114,4 11 109

1980 14 1 3 12 3439 304,5 0,8 92,6 104,2 6 297

1981 12 1 3 10 2590 307,2 0,8 111,3 100,9 8 290

1982 10 0 4 6 1623 294,3 0,5 107,6 122,0 7 37

1983 6 0 2 4 1951 307,9 0,6 129,3 96,1 5 7

1984 4 0 3 1 854 314,9 0,3 128,7 112,3 6 0

1985 1 42 0 43 939 320,4 0,3 120,7 133,3 0 91

1986 43 1 14 30 1967 319,9 0,96 146,3 116,8 2 26

1987 30 1 20 11 601 594,1 0,5 170,3 139,7 18 0

1988 11 1 9 3 375 276,0 0,14 111,2 143,4 11 0

1989 3 2 0 5 1251 305,0 0,38 119,0 124,3 3 0

1990 5 1 0 6 494 289,6 0,55 108,7 136,3 6 0

1991 6 2 3 5 386 271,6 0,7 145,3 119,1 6 3

1992 5 5 1 9 1957 255,9 0,77 103,8 117,1 5 6

1993 9 5 3 11 2280 234,2 0,97 130,2 102,7 4 17

1994 П 3 6 8 1538 225,4 0,68 99,7 90,6 7 11

1995 8 4 3 9 1353 182,2 0,74 103,7 69,8 7 36

1996 9 2 4 7 1197 166,4 0,72 85,7 61,3 7 111

1997 7 3 5 5 1062 140,1 0,60 89,8 57,2 6 7

1998 5 1 2 4 827 134,2 0,52 84,0 34,6 5 0

1999 4 3 2 5 679 123,5 0,43 85,8 26,2 5 0

2000 5 0 1 4 781 130,4 0,59 102,5 24,7 4 3

2001 4 4 2 6 863 146,4 0,58 111,7 22,1 4 14

2002 6 3 3 6 896 144,8 0,61 118,2 20,7 6 19

2003 6 17 7 16 1013 149,1 0,67 124,8 24,4 5 9

2004 16 9 5 20 1250 150,2 0,83 123,8 21,9 16 1

2005 20 5 12 18 1163 148,7 0,76 118,6 20,6 17 0

2006 18 6 7 16 1251 139,7 0,89 1133 19,8 10 0

Рисунок 7 Бруцеллез крупного рогатого скота

Количество заболевших бруцеллезом животных

■Количество вакцинированного скота (%)

2.2.3. Изучение эффективности малых доз вакцины из штамма 19 В. abortus при подкожном ее введении.

Работами многих исследователей доказано, что малые дозы вакцины из штамма 19 у коров и телок создают иммунитет такой же напряженности, как и стандартные дозы, не мешают нормальному течению стельности и вызывают кратковременную серопозитивность у иммунизированных животных.

Эффективность реиммунизации малой дозой вакцины из штамма 19 мы изучали в опыте на 10 телках 4-5-мес. возраста. Животных разделили на 2 аналогичные группы по пять голов в каждой. Животных первой группы иммунизировали подкожно стандартной дозой (80млрд.м.к.) вакцины из штамма 19 В. abortus. Телки второй группы (5голов) не вакцинировались, служили контролем.

Сыворотки крови исследовали на бруцеллез в РА, РСК и РБП в динамике.

Серологические исследования показали, что телки, привитые вакциной из штамма 19, агглютинины в диагностических титрах утрачивают через 5 месяцев после иммунизации. Одно животное из пяти исследованных положительно реагировало на 180-й и 303-й дни. Средний титр агглютинирующих антител по группе достиг своего максимума на 10-й день и составил 1075 МЕ/мл. Через 4 месяца все подопытные телки в РСК реагировали отрицательно и до конца наблюдения (12 месяцев) ни у одного животного комплементсвязывающие антитела в сыворотке крови не выявлялись. Сразу на 5-й день после вакцинации антитела в РБП выявлялись уже у 80% животных, а через 7, 10, 12 и 18 дней эта реакция у всех телок была положительной и отдельные животные сохраняли положительную реакцию до 12 месяцев после иммунизации.

Результаты данного опыта подтверждают ранее полученные данные о выраженной антигенности для крупного рогатого скота вакцины из штамма 19 при подкожном введении стандартной дозы.

Через 12 месяцев телок первой группы реиммунизировали подкожно той же вакциной (штамм 19) в дозе Змлрд.м.к., а через 6 месяцев подопытные и контрольные животные были случены. После ревакцинации серологические исследования в динамике проводили через 6, 10, 16, 34 дня, далее ежемесячно до 352-го дня.

Результаты этого опыта показали, что после реиммунизации у животных в сыворотке крови наступил подъем уровня антител.

При исследовании сывороток крови в РСК установлено, что на 16-й день после ревакцинации положительные реакции получены у 100% и сохранились до 352-го дня у 20% животных из пяти исследованных.

С целью проверки иммунитета через 12 месяцев после ревакцинации подопытных и контрольных нетелей, имеющих к этому времени 6-месячную стельность, экспериментально заразили вирулентной культурой В. abortus 54, доза которой была ранее оттитрована на 8 нетелях аналогичного возраста, породы, упитанности. Культуру животным вводили конъюнктивально в дозе 7 млн.м.к. (28 ИДюо).

В данном опыте через 12 месяцев после ревакцинации нетелей, привитых в 3-5-месячной возрасте полной дозой вакцины из штамма 19 В. abortus и реиммунизированных подкожно малой дозой (3 млрд.м.к.) этой же вакцины, все 5 животных были иммунными (100%). Все контрольные (не вакцинированные) нетели заразились, что свидетельствует о достаточной эффективности выбранной для проверки иммунитета дозы вирулентной культуры штамма В. abortus 54. При этом из материала от животных контрольной группы было выделено 28 культур (индекс инфицированности составил 22,5). (Таблица 6).

Таблица 6

Результаты проверки иммунитета у нетелей через 12 месяцев после реиммунизации вакциной из штамма 19 В. abortus

Иммунные

Вьдааю культур

Всего

100

Подкожно 80 млрд.м.к.

Не привиты (контроль)

Подкожно 3 млрд.м.к.

Не привиты

При бактериологическом исследовании плодов от подопытных нетелей ни в одном случае не была выделена культура вирулентного штамма 54 В. abortus.

От пяти плодов контрольных нетелей было выделено 6 культур вирулентного штамма, в том числе от 2-х плодов - по две, от двух по одной и от одного плода культура не была выделена.

Таким образом, на основании комплексных иммунологических исследований можно заключить, что первичная подкожная иммунизация телок в возрасте 3-5 месяцев вакциной из штамма 19 В. abortus в дозе 80млрд.м.к. с последующей подкожной реиммунизацией пониженной (Змлрд.м.к.) дозой той же вакцины создает у животных напряженный, достаточно продолжительный иммунитет и является перспективной.

2.2.4. Оздоровление хозяйств от бруцеллеза крупного рогатого скота с применением вакцины из штамма 19 В. abortus в пониженных дозах

Работу проводили в ООО «Дельта» Лиманского района Астраханской области. Общее поголовье крупного рогатого скота в хозяйстве 678 голов, в том числе 350 коров. По официальным данным ООО «Дельта» считалось неблагополучным по бруцеллезу крупного рогатого скота. Ежегодно при серологических исследованиях выявлялись больные бруцеллезом животные и наблюдались аборты бруцеллезной этиологии. Заболеваемость крупного рогатого скота бруцеллезом составляла 6%. Вакцину из штамма 19 В. abortus применяли по той же схеме, что и в лабораторном опыте.

В результате проведенной работы за три года аборты бруцеллезной этиологии и выделение серологически реагирующих на эту болезнь прекратились.

Начатая в 2004 году иммунизация, а в последующем и ревакцинация телок перед случкой и коров вакциной из штамма 19 в пониженной дозе с охватом всего поголовья скота хозяйства позволила ликвидировать бруцеллез в ООО «Дельта» Лиманского района Астраханской области.

Таким образом, применение вакцины из штамма 19 в пониженных дозах в комплексе общих мер позволяют добиться оздоровления данного хозяйства от бруцеллеза крупного рогатого скота.

2.2.5. Эффективность конъюнктивальной иммунизации и реиммунизации крупного рогатого скота вакциной из штамма 19 В. abortus

Профилактическая иммунизация крупного рогатого скота против бруцеллеза с использованием живых агглютиногенных вакцин при подкожном их введении в установленных наставлением дозах, как правило, сопровождается длительной серопозитивностью, которая не позволяет дифференцировать больных животных от привитых.

По сообщениям ряда исследователей исправить данный недостаток позволяет новый способ вакцинации. Это иммунизация животных путем аппликации вакцины на конъюнктиву глаз.

'В связи с эти мы поставили перед собой задачу провести сравнительное испытание разных схем иммунизации и реиммунизации крупного рогатого скота вакциной из агглютиногенного штамма бруцелл конъюнктивальным методом.

Опыт поставили на 15 телках 3-4-месячного возраста. Животных по принципу аналогов разделили на три группы и иммунизировали вакциной из штамма 19 В. abortus согласно схеме опыта, представленной в таблице 7.

Таблица 7

Схеме опыта по иммунизации телок конъюнктивальным методом

Количество животных Первичная вакцинация Ревакцинация через15 месяцев после первичнои вакцинации

№ п/п Метод введения вакцины Доза вакцины (млрд.м.к.) Метод введения вакцины Доза вакцины (млрд.м.к.)

1 2 3 4 5 6

1 5 Подкожно 80 Конъюнктавально 5

2 5 Конъюнктавально 5 Конъюнктавально 5

3 5 Контроль(не вакцинированы) 0 0

При изучении динамики показателей гуморального иммунного ответа отмечена определенная закономерность сроков появления, угасания и уровня специфических антител в зависимости от дозы вакцины и способа ее введения.

Незначительный подъем уровня антител и быстрое их угасание отмечены у телок, иммунизированных конъюнктивальным способом.

Через 15 месяцев после прививки всех подопытных телок 1-й и 2-й групп реиммунизировали конъюнктавально вакциной из штамма 19 в дозе 5млрд.м.к.

Через 2 месяца после ревакцинации телок контрольной и подопытных групп осеменили искусственно спермой здорового быка.

Через 12 месяцев после ревакцинации одна нетель из 1-й группы, 3 -из 2-й группы и одна из числа контрольных нормально отелились.

С целью проверки иммунитета через 340 дней после ревакцинации 10 подопытных (группы 1 и 2) и 5 контрольных (не вакцинированных) нетелей (группа № 3), имеющих к этому времени 8-8,5 месяцев стельность, были аражены вирулентной культурой В. abortus 54 в дозе Пмлн.м.к., что составляет 44 инфицирующих доз.

После заражения животных в течение 45 дней 2 нетели из контрольной .|уппы абортировали, а одна отелилась нормально. Все остальные нетели из .iynn 1 и 2 (10 голов) также нормально отелились. Все абортированные лоды и околоплодная жидкость были подвергнуты бактериологическому сследованию.

Убой, патологоанатомическое и бактериологическое исследования фоводили через 45 дней после заражения. Результаты бактериологического сследования показали, что через 340 дней после реиммунизации из 5 коров 1-й группы, привитых в возрасте 3-5 месяцев подкожно полной дозой 80млрд.м.к.) вакцины из агглютиногенного штамма 19 и еиммунизированных конъюнктавально этой же вакциной в дозе 5млрд.м.к., ммунными были 4 (80%), а в группе 2, где животные дважды (в 3-5 есячном возрасте и через год после первичной прививки) были ммунизированы конъюнктавально дозой 5млрд.м.к. вакциной из штамма 19,

искусственному заражению вирулентной культурой бруцелл противостояло 3 (60%).

Все коровы контрольной (не вакцинированной) группы заразились, что говорит о достаточности выбранной для проверки иммунитета дозы культуры В. abortus 54.

В этом опыте ни одна нетель из опытных групп не абортировала после заражения вирулентной культурой бруцелл, тогда как из пяти контрольных две абортировали и при бактериологическом исследовании от всех плодов были выделены культуры вирулентного штамма бруцелл.

Таким образом, сравнительное изучение иммуногенности вакцины из штамма 19 на крупном рогатом скоте при разных методах введения, проведенное в лабораторных условиях с проверкой иммунитета через 340 дней после реиммунизации путем конъюнктивального заражения животных в период стельности, показало, что наиболее эффективной является первичная подкожная иммунизация этой вакциной телок в возрасте 3-5 месяцев в дозе 80млрд.м.к. с реиммунизацией его конъюнктивальным методом в дозе 5млрд.м.к. через 15 месяцев (80% иммунных животных).

Двукратная с интервалом в 340 дней конъюнктивальная иммунизация телок в дозах по 5млрд.м.к. вакцины из штамма 19, несколько менее эффективна (60% иммунных).

2.2.6. Оздоровление ООО «Волга» от бруцеллеза крупного рогатого скота с применением вакцины из штамма 19 В. abortus в пониженных

дозах.

Положительные результаты лабораторного опыта по изучению эффективности конъюнктивального метода иммунизации позволили перейти к использованию данного метода в производственных условиях.

Работу проводили в ООО «Волга» Наримановского района Астраханской области, неблагополучного по бруцеллезу крупного рогатого скота.

На начало испытания в хозяйстве имелось 563 головы крупного рогатого скота, в том числе коров 240 голов.

Вакцину из штамма 19 В. abortus применяли по схеме:

- перед вакцинацией животных исследовали на бруцеллез серологически (РБП, РА, РСК). Положительно реагирующих сдавали на убой. Телок 3-5-месячного возраста иммунизировали вакциной из штамма 19 подкожно в дозе 80 млрд.м.к.. Через 15-20 дней сыворотку крови телок исследовали в РА с целью выявления иммунотолерантных и иммунодефицитных животных. Ареактивных телок изолировали и сдавали на мясо. Телок случного возраста и коров иммунизировали или реиммунизировали конъюнктивально пониженной дозой (5млрд.м.к.) вакцины. В дальнейшем животных ежегодно реиммунизировали конъюнктивальным методом после предварительного исследования на бруцеллез и изоляции положительно реагирующих.

За три года хозяйство полностью оздоровлено от бруцеллеза крупного рогатого скота с применением в общем комплексе противобруцеллезных мер

вакцины из штамма 19 В. abortus конъюнктивальным способом. В ООО «Волга» прекратились аборты бруцеллезной этиологии, выделение положительно реагирующих на бруцеллез животных.

3. Результаты исследований штаммов бруцелл, выделенных от абортированных плодов крупного рогатого скота в Астраханской области.

От абортированных плодов крупного рогатого скота Астраханской области нами выделено 18 штаммов бруцелл. Из них 13 оказались полевыми штаммами, 5 - вакцинными.

По результатам наших исследований штаммы бруцелл, выделенные от абортированных плодов могут быть охарактеризованы следующим образом:

по морфологическим признакам все изучаемые культуры не отличались друг от друга, а также от референтных штаммов бруцелл, взятых нами для контроля.

Все культуры хорошо красятся анилиновыми красками по Граму и Козловскому в красный цвет.

Рост бруцелл на мясо-пептонном печеночном агаре всегда появляется в виде круглых, бесцветных, блестящих колоний, выпуклых и правильно контурированных, величиной от булавочной головки до чечевичного зерна.

С возрастом колонии мутнеют и принимают несколько бурую окраску.

В мясо-пептонном печеночном бульоне бруцеллы росли в виде равномерного помутнения, в последующем с образованием пристеночного кольца в пробирке.

Из 18 культур, выделенных из материала от аборт - плодов крупного рогатого скота, 13 росли в первых генерациях только в парафинированных пробирках и не росли в обыкновенных атмосферных условиях.

Исследования показали, что все испытуемые нами штаммы бруцелл в количестве 13 выделяют сероводород.

Семь штаммов бруцелл росли на средах с фуксином и 6 штаммов - на средах с тионином.

При проверке культур в РА с монорецепторными сыворотками установлено, что все они агглютинировали с сывороткой вида antiabortus в титрах 1:10; 1:20; 1:40; 1:80. 1:160 агглютинировали 9 культур и 1:320 - семь культур.

Что касается сыворотки вида antimelitensis, то три культуры В. abortus (из 13) агглютинировали в титре 1:10, по одной культуры - в титрах 1:20 и 1:40. Остальные 8 культуры В. abortus не агглютинировали с сывороткой вида antimelitensis.

Изучение тинкториальных свойств штаммов показало, что все 13 штаммов В. abortus, выделенные от абортированных плодов крупного рогатого скота в Астраханской области окрасились реактивами № 1 и № 2 в голубой, синий, сине-зеленый цвета. Такие же результаты получены при окраске культур В. abortus 4004.

Вирулентные свойства культур бруцелл, выделенных от абортированных плодов крупного рогатого скота изучали на морских

свинках. Всего для этого исследования было использовано 42 морских свинок.

Исследования показали, что все изучаемые нами культуры вызывали у животных генерализованный процесс, тогда как культура вакцинного штамма 19 оказалась слабовирулентной.

При изучении роста изучаемых культур бруцелл на питательной среде с различной концентрацией пенициллина установлено, что все эти культуры В. abortus росли на средах с 500 ЕД пенициллина и 3 культуры - на среде с 5ООО ЕД. Культура В. melitensis росла на среде, содержащей 100 ЕД пенициллина.

Эти исследования показали, что различные виды бруцелл обладают неодинаковой чувствительностью к пенициллину. Менее чувствительны к пенициллину культуры В. abortus, чем культура В. melitensis.

Таким образом, по предложенной ФАО/ВОЗ схеме, выделенные нами от аборт-плодов крупного рогатого скота культуры могут быть отнесены к биоварам 1,2 и 3/6 рода Brucella.

ВЫВОДЫ

1.В 1960-1963г.г. бруцеллез крупного рогатого скота был распространен во всех 11 районах Астраханской области. В период с 19542006 г.г. с применением противобруцеллезных вакцин в общем комплексе организационно-хозяйственных и ветеринарно-санитарных мер от бруцеллеза крупного рогатого скота оздоровлено 235 хозяйств. С применением вакцины из штамма 19 В. abortus оздоровлено 82 хозяйства, а с применением вакцины из штамма 82 В. abortus - 153.

2.Выделенные на территории Астраханской области от абортированных плодов крупного рогатого скота 13 штаммов бруцелл по морфологическим, культуральным, биологическим, антигенным и другим свойствам не отличаются от международных референтных штаммов бруцелл.

По предложенной ФАО/ВОЗ схеме все они могут быть отнесены к биоварам 1, 2 и 3/6 рода Brucella.

3.Все выделенные 13 штаммов бруцелл оказались вирулентными и у морских свинок, зараженных ими в дозе 100 микробных клеток, вызывали генерализованную инфекцию и сильно выраженные патолого-анатомические изменения в лимфатических узлах и паренхиматозных органах.

4.Иммунизация и реиммунизация крупного рогатого скота пониженными дозами (3 и 5 млрд.м.к.) вакцины из штамма 19 В. abortus при подкожном и конъюнктивальном введении препарата создают у животных напряженный и длительный иммунитет против бруцеллеза. При этом имеет место короткий срок персистенции антител в сыворотке крови животных и их низкий уровень.

5.Первичная подкожная иммунизация телок в возрасте 3-5 месяцев вакциной из штамма 19 В. abortus в дозе 80 млрд.м.к. с последующей подкожной реиммунизацией малой дозой (3 млрд.м.к.) той же вакцины

создает у животных напряженный, достаточно продолжительный иммунитет и является перспективной.

б.Конъюнктивальный способ иммунизации крупного рогатого скота вакциной из агглютиногенного штамма 19 В. abortus в пониженной дозе (5млрд.м.к.) создает у вакцинированных животных напряженный и продолжительный иммунитет против бруцеллеза.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Полученные результаты исследований использованы в «Проекте целевой программы по мониторингу предупреждения и ликвидации бруцеллеза животных», представленный в департамент ветеринарии Минсельхоза РФ в 2008году.

Рекомендуется внедрить в ветеринарную практику для специфической профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота подкожный и конъюнктивальный методы введения малых доз (3 и 5 млрд. микробных клеток соответственно) агглютиногенной вакцины из штамма 19 В. abortus.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Устаев В.М. Ветеринарная служба в Астраханской области в начале XXI века / Устаев В.М., Быков В.П., Зюзин И.Е.,// Ж. «Ветеринарный врач». -2001. - N 3. - С. 21-25.

2. Устаев В.М. Адъювант-вакцина против инфекционного эпидидимита баранов. /В.М. Устаев, М.П. Альбертян, С.Н. Степнова, Ш.Ш. Разиков, В.П. Быков, Н.С. Павлов//Ж. «Ветеринария». № 12.-2003. - С. 20-22.

3. Устаев В.М. Эффективная схема вакцинации животных против бруцеллеза. /В.М. Устаев, М.П. Альбертян, М.И. Искандаров, А.И. Федоров// Ж. «Веткорм». № 6.'- 2008. ноябрь-декабрь. - С. 22-23.

4. Устаев В.М. Оценка в экспериментальных условиях эффективности конъюнктивальной иммунизации и реиммунизации крупного рогатого скота вакциной из штамма 19 В. abortus. /В.М. Устаев// Ж. «Веткорм». -№3.- 2009. май-июнь. -С. 34-35.

Отпечатано в ООО «Компания Спутник+» ПД № 1-00007 от 25.09.2000 г. Подписано в печать 26.04.2010 Тираж 110 экз. Усл. п.л. 1,7 Печать авторефератов (495)730-47-74,778-45-60

Содержание диссертации, кандидата ветеринарных наук, Устаев, Вахид Магомедович

Перечень сокращенных названий.

1.ВВЕДЕНИ Е.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. Краткие исторические данные.

2.2. Дифференциация видов бруцелл.

2.3. Пути заражения бруцеллезом.

2.4. Распространение бруцеллеза.

2.5. Клинические признаки бруцеллеза.

2.6. Патогенез бруцеллеза.

2.7. Патоморфология бруцеллеза.

2.8. Иммунитет и специфическая профилактика бруцеллеза животных.

2.8.1. Антигенные свойства.

2.8.2. Инактивированные вакцины из штаммов 53Н38 и 45/

2.9. Диагностика бруцеллеза крупного рогатого скота.

2.10. Дифференциальная диагностика бруцеллеза.

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Бруцеллез крупного рогатого скота в Астраханской области: эпизоотологический мониторинг и совершенствование противобруцеллезных мероприятий"

Бруцеллез относится к древнейшему заболеванию. По мнению ряда исследователей, болезнь, которую называют теперь бруцеллезом, была известна еще в V века до нашей эры.

Хеддлсон на основании литературных данных считает, что заболевание бруцеллезом среди коз и людей отмечались в Испании и соседних с ней странах в начале XV века.

С момента открытия возбудителя Брюсом и Бангом до наших дней проведено огромное количество исследований в разных странах и изучено очень много вопросов, относящихся к бруцеллезу животных и человека. И в настоящее время интерес к изучению данной инфекции не ослабел, так как заболевания людей и животных бруцеллезом еще наблюдаются во многих странах мира. Бруцеллез представляет собой мировую проблему, как для здравоохранения, так и для сельского хозяйства. Он является одной из наиболее сложных и в то же время опасных для людей антропозоонозных инфекционных болезней.

Многолетний опыт показал, что метод ликвидации бруцеллеза путем выявления больных животных, их изоляции или убоя и проведения комплекса организационно-хозяйственных, ветеринарно-санитарных общепрофилактических мер является трудоемким и малоэффективным. Недостаточная эффективность противобруцеллезных мероприятий объясняется в основном тем, что своевременное и полное изъятие больных животных затруднено из-за несовершенства существующих методов диагностики, сложностью и недоступностью выполнения многих мероприятий отдельными хозяйствами.

В настоящее время в Российской Федерации оздоровление хозяйств от бруцеллеза животных ведется при помощи противобруцеллезных вакцин.

Используемые в нашей стране живые вакцины создают значительные неудобства. Самым главным из них является то, что у животных привитых этими вакцинами в крови длительно сохраняются специфические антитела, что затрудняет определение эпизоотического состояния стад по бруцеллезу, то есть, отличить привитых животных от естественно больных бруцеллезом пока не представляется возможным.

Одной из причин, снижающих эффективность борьбы с бруцеллезом животных, является то, что практическая ветеринарная служба в основу этой работы ставит разработку и проведение мер специфической профилактики и недостаточно внимания уделяет ветеринарно-санитарным требованиям.

1.2. Цели и задачи. Целью настоящей работы явилась изучение эффективности противобруцеллезных мероприятий в сравнительном аспекте и их научно-обоснованное совершенствование.

Для достижения данной цели были поставлены следующие задачи:

4) Провести сравнительное изучение эффективности схем подкожной иммунизации стандартной (80 млрд.м.к.), подкожной и конъюнктивальной реиммунизации малыми дозами (3 и 5 млрд.м.к.) крупного рогатого скота вакциной из штамма 19 В. abortus в лабораторных экспериментах и в хозяйствах, не благополучных по бруцеллезу крупного рогатого скота;

Идентификация и дифференциация культур бруцелл, выделенных от абортированных плодов крупного рогатого скота в хозяйствах Астраханской области.

1.3. Научная новизна работы. Впервые проведен анализ и обобщены результаты диагностической и профилактической работы ветеринарной службы Астраханской области по борьбе с бруцеллезом крупного рогатого скота с 1960 по 2006 год. Изучена эпизоотологическая эффективность противобруцеллезных мероприятий с применением вакцин из штаммов 19 и 82 В. abortus в Астраханской области. Установлена эффективность применения вакцины из штамма 19 в полной и малых дозах при подкожном и конъюнктивальном методах введения.

1.4. Практическая ценность. Установлено, что эпизоотологический мониторинг является определяющим в прогнозировании эпизоотического процесса при бруцеллезе крупного рогатого скота, который позволяет своевременно планировать и проводить с высокой эффективностью комплекс ветеринарно-санитарных мероприятий, направленных на борьбу с бруцеллезом.

1.5. Основные положения и результаты, выносимые на защиту: 1)Анализ статистических данных ветеринарной отчетности по заболеваемости крупного рогатого скота бруцеллезом в Астраханской области за период 1960 по 2006 год.

2)Результаты сравнительной эффективности противобруцеллезных мероприятий с применением вакцин из штаммов 19 и 82 В. abortus против бруцеллеза крупного рогатого скота в Астраханской области.

3)Выделение культур бруцелл от абортированных плодов крупного рогатого скота. Изучение основных биологических свойств этих культур, их идентификация и дифференциация;

4)Эффективность подкожного и конъюнктивального методов применения высокоагглютиногенной вакцины из штамма 19 В. abortus в малых дозах в борьбе с бруцеллезом крупного рогатого скота.

1.6 Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на заседаниях Ученого совета Всероссийского научно-исследовательского института экспериментальной ветеринарии имени Я.Р.Коваленко (ВИЭВ) в 2007-2009 г.г.

1.7. Публикация. По материалам диссертационной работы опубликовано 4 статьи в научных журналах.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа представлена в одном томе состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов и практических предложений. Диссертация изложена на 133 страницах компьютерного текста, иллюстрирована таблицами.

Заключение Диссертация по теме "Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов", Устаев, Вахид Магомедович

ВЫВОДЫ

1. В 1960-1963г.г. бруцеллез крупного рогатого скота был распространен во всех 11 районах Астраханской области.

В период с 1954-2006г.г. с применением противобруцеллезных вакцин в общем комплексе организационно-хозяйственных и ветеринарно-санитарных мер от бруцеллеза крупного рогатого скота оздоровлено 235 хозяйств. С применением вакцины из штамма 19 В. abortus оздоровлено 82 хозяйства, а с применением вакцины из штамма 82 В. abortus - 153.

2. Выделенные на территории Астраханской области от аборт -плодов крупного рогатого скота 13 штаммов бруцелл по морфологическим, культуральным, биохимическим, антигенным и другим свойствам не отличаются от международных референтных штаммов бруцелл.

По предложенной ФАО/ВОЗ схеме все они могут быть отнесены к биоварам 1, 2 и 3/6 рода Brucella.

3. Все выделенные 13 штаммов бруцелл оказались вирулентными и у морских свинок, зараженных ими в дозе 100 микробных клеток, вызывали генерализованную инфекцию и сильно выраженные патологоанатомические изменения в лимфатических узлах и паренхиматозных органах.

4. Иммунизация и реиммунизация крупного рогатого скота пониженными дозами (3-5 млрд.м.к.) вакцины из штамма 19 В. abortus при подкожном и конъюнктивальном введении препарата создают у животных напряженный и длительный иммунитет против бруцеллеза. При этом имеет место короткий срок персистенции антител в сыворотке крови животных и их низкий уровень.

5. Первичная подкожная иммунизация телок в возрасте 3-5 месяцев вакциной из штамма 19 В. abortus в дозе 80 млрд.м.к. с последующей подкожной реиммунизацией пониженной (3 млрд.м.к.) дозой той же вакцины создает у животных напряженный, достаточно продолжительный иммунитет и является перспективной.

6. Конъюнктивальный способ иммунизации крупного рогатого скота вакциной из агглютиногенного штамма 19 В. abortus в пониженной дозе (5 млрд.м.к.) создает у вакцинированных животных напряженный и продолжительный иммунитет против бруцеллеза.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

2.11. Заключение

Таким образом, анализируя литературные данные по проблеме профилактики и борьбы с бруцеллезом крупного рогатого скота, совершенствовании противобруцеллезных мероприятий , следует отметить, что основными звеньями в оптимальных противоэпизоотических мероприятий при бруцеллезе животных, должны выступать методы диагностики, эффективные средства специфической профилактики, организационно-хозяйственные и ветеринарно-санитарные мероприятия.

Можно также отметить, что применение малых доз агглютиногенной вакцины из штамма 19 В. abortus является перспективным.

Вышеизложенное говорить о том, что цели и задачи наших исследований актуальные.

3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 3.1. Материалы в методы исследований

Для более детального и сравнительного изучения взяты материалы за 46 лет, с 1960 по 2006 год.

Исследование абортированных плодов слагалось, как правило, из бактериоскопии и высевов на искусственные питательные среды из содержимого грудной и брюшной полостей, желудка, из печени и селезенки. В большинстве случаев применяли заражение лабораторных животных (морских свинок). Посевы инкубировали как в условиях атмосферы, обогащенной углекислым газом (5-10%) в парафинированных пробирках, так и в обычных аэробных условиях.

Чувствительность культур бруцелл к тионину изучали на полужидкой среде. В 100 мл. среды добавили различные количества 0,1% основного раствора тионина из расчета, чтобы получились концентрации от 1:40 ООО до 1:300 000. Каждая культура исследовалась посевом на вышеуказанные среды. С этой целью 48-часовые культуры бруцелл смывали стерильным физиологическим раствором и из них готовилась суспензия с содержанием один миллиард микробных клеток в 1 мл. по стандарту мутности. Из такой суспензии высевалась одна петля в пробирку на среду с тионином. Рост учитывался в течение 6 дней при инкубации посевов при температуре 37

Кроме выделенных от аборт-плодов культур бруцелл в работе использовали:

38°С.

1) В. abortus 19

2) В. abortus 82

3) В. abortus 75/79-АВ

4) В. abortus 54

Культуры штаммов суспензировали в стерильном физиологическом растворе с концентрацией от 10 до 1x109 м.к. в 1 мл.

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата ветеринарных наук, Устаев, Вахид Магомедович, Москва

1. Абдылдаев М.А. Материалы сравнительного производственного испытания вакцин из штаммов 53Н38 и 45/20, 19 и Rev-1 / Абдылдаев М.А., Шумилов К.В., Ким В.И. и др. // Меры борьбы с бруцеллезом с.х. животных и птиц в Киргизии. 1988. - Вып. 2. - С. 52 - 60.

2. Абалихин К.А. К вопросу о вакцинации крупного рогатого скота вакциной из шт. 19 / Абалихин К.А., Краснов Б.А. // Ветеринария. 1958. -№ Ю.-С. 51.

3. Аввакумов М.Е. Опыт вакцинации овец против бруцеллеза ланолин вакцинами / Аввакумов М.Е. // Автореферат. - Труды Военно-ветеринарной академии. - Том V. - 1947. - С. 73 -90.

4. Авилов В.М. Бруцеллез животных и его специфическая профилактика / Авилов В.М., Селиверстов В.В., Пылинин В.Ф., Шумилов К.В. и др. // Ветеринария. 1997. - № 7. - С. 3 - 6.

5. Альбертян М.П. Сравнительное патоморфологическое изучение органов телок, привитых культурами В. abortus 104 М и 19 и зараженных вирулентной культурой В. abortus 54 / Альбертян М.П. // Бюллетень ВИЭВ. -1981.-Выпуск 42.-С. 17-21.

6. Альбертян М.П. Иммуноморфологические реакции у морских свинок, привитых штаммами В. abortus 104 М, 19 и зараженных вирулентной культурой В. abortus Э - 335 / Альбертян М.П. // Труды ВИЭВ. -Т. 47.-1978.-С. 12-16.

7. Альбертян М.П. Изучение вакцины из штамма 104 М в экспериментальных и производственных условиях / Альбертян М.П., Шумилов К.В. и др. // Сборник материалов Всесоюзной научной конференции. - Омск. - 1980. - С. 94 - 97.

8. Алилов A.M. К вопросу о результате субъединичной противобруцеллезной вакцины / Алилов A.M. и др. // V Всероссийская конференция. Тезисы докладов. Шелково. - 1996. - С. 102.

9. Аливердиев А.А. Предохранение от абортов реагирующих и не реагирующих на бруцеллез коров убитьши формол- квасцовыми вакцинами / Аливердиев А.А. // Ветеринария. 1946. - № 4. - С. 21.

10. Альбертян М.П. Иммунобиологические свойства бруцеллезного антиген полимерного конъюганта / Альбертян М.П., Искандеров М.И., Федоров А.И. // Ж. «Ветеринарная патология». - № 3 (18). - 2006. - С.122 -128.

11. Антонов Б.И. Реакция иммунодиффузии в агаровом геле (РИД) с О-ПС- антигеном ИЭВ и ДВ при диагностике бруцеллеза крупного рогатого скота. / Антонов Б.И., Шумилов К.В., Скляров О.Д. и др. // Ветеринария. -1994.-№ И.-С. 19-22.

12. Баландин Г.А. Сущность иммунитета при бруцеллезе / Баландин Г.А. // Известие Роств. НИИ микробиологии и эпидемиологии. 1941. - Вып. 19.-С. 40-95.

13. Борисов Е.М. К вопросу об эффективности противобруцеллезной вакцинации крупного рогатого скота / Борисов Е.М., Захаров И.А., Куранов Ю.Ф. // Бюллетень научно-технической информации Каз. НИВИ. 1957. - С. 3-4.

14. Бронников B.C. Использование химических вакцин для специфической профилактики бруцеллеза овец / Бронников B.C., Новицкий А.А. // Тезисы докл. III Всесоюзный конф. по эпизоотологии. Новосибирск. - 1991.-С. 165- 166.

15. Вершилова П.А. Значение диссоциации для дифференциации групп Brucella / Вершилова П.А. // Архив биологич. науки. 1939. - 53. -1. -С. 47-56.

16. Вершилова П.А. Бруцеллез / Вершилова П.А. // Медицина. -1972.-С. 190.

17. Вершилова П.А. Защитная функция местного воспалительного очага, вызванного живой вакциной / Вершилова П.А., Чернышова М.И. // ЖМЭИ.- 1959.-№ 1.-С. 60-64.

18. Вершилова П.А. Изучение напряженности перекрестного и типового иммунитета при бруцеллезе / Вершилова П.А., Курдина Д.С. // ЖМЭИ. 1963. - № 8. - С. 34 - 39.

19. Вершилова П.А. Изучение полисахаридно-липоидного антигена из группы Бруцелла / Вершилова П.А. // Архив биологических наук. 1941. -№63. (1-2).-С. 39-99.

20. Вершилова П.А. Бруцеллез / Вершилова П.А., Голубева А.А., Кайтмазова Е.И., Островская Н.Н., Ходжаев Ш.Х. // Москва.- 1961. С. 216 -228.

21. Вершилова П.А. Патогенез и иммунология бруцеллеза / Вершилова П.А., Чернышева М.И., Князева Э.Н. // Москва, «Медицина».-1974.-С. 30-36.

22. Вершилова П.А. Сессия Академии медицинских наук / Вершилова П.А. // Алма Ата. - 1949. - Тезисы докладов.

23. Воскресенский Б.В. Опыт по иммунизации овец против бруцеллеза убитыми и ослабленными культурами бруцелл / Воскресенский Б.В., Вершилова П.А., Штритер В.А. // В книге «Бруцеллез». Труды экспедиции ВИЭМ.- 1937. С. 13 - 24.

24. Горяков К.Т. Опыт вакцинации крупного рогатого скота против бруцеллеза / Горяков К.Т. // ЖМЭИ. № 6,- 1940. - С. 37 - 40.

25. Гольцов А.С. Аллергическая проба для эпизоотической оценки нетелей, иммунизированных вакциной из штамма 82 / Гольцов А.С. // Бруцеллез сельскохозяйственных животных. Сб. науч. трудов ВНИИБТЖ. РАСХИ. Сиб. отд. Омск.- 1989 - С. 30 - 32.

26. Гринин А.С. О скрытом бруцеллоносительстве скота, привитого вакциной из штамма 19 / Гринин А.С. // Ветеринария.- 1964. 10. - С. 25 -26.

27. Григорьева Г.И. Антигенная структура бруцелл / Григорьева Г.И., Игнатов П.Е., // Успехи современной биологии.- 1991. Т. 3. - Вып. 6.

28. Дорофеев К.М. Изучение сухой бруцеллезной вакцины из штамма 19 на крупном рогатом скоте / Дорофеев К.М., Путимов В.М. // Ветеринария.- 1943. № 4. - С. 30 - 31.

29. Драновская Е.А. Изучение синтетических полимеров в качестве стимуляторов и пролонгаторов иммунного действии бруцеллезного протективного антигена / Драновская Е.А., Игнатов П.Е. // Микробиология, эпидемиология и иммунология. 1982. - № 3. - С. 69 - 73.

30. Драновская Е.А. Иммунологическая активность и физико-химические свойства компонентов клеточной стенки бруцелл и Yersinia enterocolitika / Драновская Е.А., Желудков М.М., Толмачева Т.А. // Ветеринария. 1975. -№ 11.-С. 34 -37.

31. Дуранов B.C. Свойства бруцелл, выделенных из абортированных плодов коров, привитых вакциной из штамма 82 / Дуранов B.C. // Ветеринария. 1975. -№ 11. - С. 32-33.

32. Желудков М.М. Иммуноферментный метод в диагностике бруцеллеза у людей / Желудков М.М., Павлова И.П., Уленова Н.С. // ЖМЭИ.- 1986.-№8.-С. 59-63.

33. Жованик П.Н. Убитая вакцина против бруцеллеза. Опыты иммунизации лабораторных животных / Жованик Н.Н. // ЖМЭИ. -1950. № 6.-С. 9-13.

34. Жованик П.Н. Первые результаты применения профилактической вакцинации против бруцеллеза в колхозах Харьковской области / Жованик П.Н., Калугин JI.K., Подгордецкий Н.П., Ротт Е.В. // Ветеринария. 1959. - 8. -С. 48.

35. Здродовский П.Ф. Бруцеллез. Современное учение применительно к патологии человека / Здродовский П.Ф. // М. изд. АМН СССР,- 1948.-С. 104- 108.

36. Здродовский П.Ф. Бруцеллез / Здродовский П.Ф. // М.- 1953. С.264.

37. Иванов М.М. К вопросу вакцинации овец и крупного рогатого скота против бруцеллеза вакциной из штамма 19 / Иванов М.М., Романов A.M. // Труды ВГНКИ. 1957. - Т. 7. - С. 26 - 40.

38. Иванов М.М. Напряженность иммунитета у овец, вакцинированных против бруцеллеза / Иванов М.М. // Тезисы докладов науч. конфер. ГНКИ (15-17 ноября, 1962). М. - С. 46 - 48.

39. Иванов М.М. Сравнительная иммуногенная оценка применения бруцеллезных вакцин / Иванов М.М., Складчиков Р.В. // Ветеринария. 1970. -№4. - с. 53.

40. Иванов М.М. Изучение биологических свойств штамма 19 в сравнении с другими бруцеллезными штаммами / Иванов М.М., Романов A.M., Левина И.Г. // Труды ГНКИ. 1957. - Т. 7. - С. 12 - 19.

41. Иванов М.И. О применении сапониновой вакцины при бруцеллезе / Иванов М.И., Кожакин С.К. // Ветеринария. 1938. - № 7. - С. 38-40.

42. Иванов М.М. К вопросу сохранения серологических реакций у коров, вакцинированных против бруцеллеза / Иванов М.М., Павловский В.В., Кириллов JI.B., Поноценко А.С. // Ветеринария. 1961. - 7. - С. 33-37.

43. Иванов М.М. Некоторые вопросы диагностики бруцеллеза / Иванов М.М., Богданова Е.А.// Ветеринария. 1967. - 1. - С. 32-33.

44. Искандаров М.И. Иммунобиологическая реактивность крупного рогатого скота при использовании малой дозы вакцины из штамма 19 В. abortus / Искандаров М.И. // Автореферат дисс. канд. вет. наук Москва. -1986.

45. Калмыков В.В. Методы проверки иммуногенности противобруцеллезных вакцин / Калмыков В.В. // Тезисы докладов. Научно-практическая конференция. Новосибирск. - 1995. - С. 94 - 95.

46. Каструлина З.И. К вопросу о самовыздоровлении овец от бруцеллеза / Каструлина З.И. // Уч. зап. Витебского вет. института. 1953. -12.-С. 63.

47. Ким В.И. Некоторые данные антигенных свойств вакцин из штаммов 53Н38 и 45/20 производства фирмы «Рон-Мерье» / Ким В.И., Шумилов К.В., Абдылдаев М.А. и др. // Инфекционные болезни животных и вопросы природной очаговости. 1989. - Вып. 11. - С. 60-64.

48. Клочков А.А. Изучение свойств вакцинного штамма 104-М, пассированного через организм нетелей и морских свинок / Клочков А.А., Шумилов К.В. и др. // Бюллетень ВИЭВ, Выпуск 43.- 1981.

49. Котлярова Х.С. Изучение эффективности иммунизации против бруцеллеза убитыми вакцинами (в опытах на морских свинках) / Котлярова Х.С. и др. // ЖМЭИ. 1949,- 2. - С. 58.

50. Котлярова Х.С. Самовыздоровление, иммунитет и активная иммунизация при бруцеллезе / Котлярова Х.С. // Автореферат докт. диссер. М.-1953.-С. 160.

51. Косилов И.А. Бруцеллез сельскохозяйственных животных / Косилов И.А. // Новосибирск. 1992. - С. 260.

52. Коломакин Г.А. К вопросу о целесообразности прививок коров вакциной из штамма 19 / Коломакин Г.А., Сарсенов У.С. // Ветеринария. -1958.- 10.-С. 28-31.

53. Красиков А.П. Влияние стимуляторов на иммуногенность противобруцеллезной вакцины из штамма 19 В. abortus / Красиков А.П., Иванова О.Н. // Сборник науч. тр. ИЭВС и ДВ СО РАСХН. Новосибирск. Феникс.-1995.-С. 84-88.

54. Кудрина Д.С. Сравнительное изучение остаточной вирулентности вакцинных штаммов бруцелл разных видов / Кудрина Д.С. // ЖМЭИ. 1963. -№ 4. - С. 97 - 102.

55. Кульберг А.Я. Молекулярная иммунология / Кульберг А.Я. // М. Высшая школа. - 1985. - С. 287.

56. Ламихов К.Ф. Опыты вакцинации коров и нетелей против бруцеллеза живой вакциной / Ламихов К.Ф., Ануфриев К.П., Агафонов Н.А. // Ветеринария. 1954. - 12. - С. 29.

57. Малахова Т.И. Изучение свойств эталонной и производственных серий вакцины из штамма Бруцелла абортус 82 / Малахова Т.И., Шумилов К.В., Самаруков Ю.А., Климанов А.И. // Труды ВГНКИ. 1983. - С. 5 - 11.

58. Михайлов Н.А. Результаты проверки свойств отдельных серий сухой живой противобруцеллезной вакцины из штамма 82 / Михайлов Н.А., Салмаков К.М., Киренин Б.А. и др. // Труды НИВИ Казань. 1980. - Т. 135. С. 48-60.

59. Муллакаев О.Т. Иммуноморфологические изменения в органах и тканях телок, привитых вакциной из штамма бруцелл 82-ПЧ / Муллакаев О.Т., Салмаков К.М., Белозерова Г.А. // Ветеринария. 1993. - № 5. - С. 24 -26.

60. Наставление по диагностике бруцеллеза животных Москва. -2003.-С. 13-51.

61. Новицкий А.А. Иммунитет у крупного рогатого скота после однократной и повторной прививки противобруцеллезной вакциной из штамма 82 / Новицкий А.А., Яковлев И.Н., Тягунина Е.А., Троицкая Л.И. // Труды СибНИВИ. 1978. - Выпуск 32.

62. Никифоров И.П. Живые слабоагглютиногенные вакцины в системе противобруцеллезных мероприятий / Никифоров И.П. // Диссертация доктора вет. наук, (в форме научного доклада). Барнаул. 1996. - С. 47.

63. Николаев В.А. Бруцеллез сельскохозяйственных животных / Николаев В.А. // Сельхозгиз 1950. - С. 91 - 109.

64. Новицкий А.А. Оптимизация специальных мероприятий против бруцеллеза крупного рогатого скота / Новицкий А.А. // Автореферат дисс. док. вет. наук: 16.00.03. Казань. 1989. - С. 46.

65. Новицкий А.А. Иммунитет у морских свинок, иммунизированных вакцинами из штаммов В. abortus 19, 82 и 104-М. / Новицкий А.А., Тягунина Е.А. // Сборник науч. тр. института Сиб. отдела ВАСХНИЛ. 1984. - С. 26 - 30.

66. Объединенный комитет экспертов ФАО/ВОЗ по бруцеллезу. Четвертый доклад. Женева. 1965.

67. Объединенный комитет экспертов ФАО/ВОЗ по бруцеллезу. Пятый доклад. Женева. 1972. - С. 23 - 35.

68. Орлов Е.С. Вакцины при бруцеллезе / Орлов Е.С., Корнеева В.Е., Морякова О.И., Чернышева М.И. // Ветеринария. 1946. - № 7. - С. 23 - 25.

69. Орлов Е.С. Результаты испытания противобруцеллезной вакцины из штамма В. abortus 19 в производственных условиях / Орлов Е.С., Морякова О.И., Замурий И.Р., Корнеева В.Е., Чернышева М.И. // Труды ВИЭВ.- 1951.-Т. 18.-С. 154- 162.79.

70. Орлов Е.С. Изучение иммунитета у овец, вакцинированных различными штаммами бруцелл / Орлов Е.С., Уласевич П.С., Иванов М.М. // Труды ВИЭВ. 1962. - Т. 29. - С. 31 - 37.

71. Орлов Е.С. Изучение живой вакцины из штамма 19 / Орлов Е.С., Корнеева В.Е., Морякова О.И. // Ветеринария. 1946. - № 7. - С. 18-19.

72. Орлов Е.С. Выздоровление ягнят, зараженных бруцеллезом / Орлов Е.С. // Ветеринария. 1949. - № 6. - С. 21 - 22.

73. Орлов Е.С. Изучение напряженности иммунитета у овец, привитых вакциной из штамма В. abortus 19 и В. melitensis Rev-1 / Орлов Е.С., Уласевич П.С., Иванов М.М. // Труды ВИЭВ. 1965. - 31. - С. 3-7.

74. Петров Р.В. Искусственные антигены и вакцины / Петров Р.В., Хаитов P.M. // Москва. Медицина. -1988.-С.288.

75. Пинигин А.Ф. О новом типе бруцелл / Пинигин А.Ф., Петухова О.С., Выборов Т.П. // Известия Иркутского НИ Противочумного института Сибири и Дальнего Востока. 1960. - 23. - С. 346 - 349.

76. Притулин П.И. Эпизоотология и диагностика бруцеллеза / Притулин П.И. // автореферат дисс. канд. вет. наук. М. - 1951.

77. Ромахов В.А. Эпизоотологическая эффективность вакцин из штамма 19 в малой дозе против бруцеллеза крупного рогатого скота в хозяйствах Самаркандской области Узбекской ССР / Ромахов В.А.,

78. Альбертян М.П. // Тезисы докладов. Всесоюзная конференция. — Новосибирск. - 24 - 25 октября. - 1989. - С. 167.

79. Ротов И.В. Опыт применения вакцин из штамма 19 в хозяйствах с острым течением бруцеллеза / Ротов И.В. // Ветеринария. 1957. - 8. - С. 56.

80. Рягузов B.C. Новый вакцинный штамм № 21 / Рягузов B.C. // Сб. науч. тр. Донского СХИ. 1967. - 3. -С. 5 - 7.

81. Самойлов П.П. Методы диагностики и самовыздоровления овец от бруцеллеза / Самойлов П.Г1. // Ветеринария. 1951. - 10. - С. 26 - 28.

82. Салмаков К.М. К вопросу изыскания новых вакцинных штаммов бруцелл / Салмаков К.М. // Автореферат диссер. канд. вет. наук. 1964. — Казань.

83. Сборник санитарных и ветеринарных правил. Профилактика и борьба с болезнями, общими для человека и животных. М. - Инф. - изд. центр Госкомсаэпиднадзора России. - 1996. - 256с.

84. Салмаков К.М. Изыскание и испытание новых вакцинных штаммов бруцелл / Салмаков К.М. // Автореферат диссертации док. вет. наук. -Казань, 1977.-29с.

85. Селиванов А.В. О поствакцинальных реакциях при бруцеллезе овец / Селиванов А.В., Косилов И.А. // Ветеринария. 1959. - 12. - С. 29 -32.

86. Скляров О.Д. Разработка и совершенствование средств и методов диагностики бруцеллеза и кампилобактериоза животных / Скляров О.Д. // Диссертация доктора ветеринарных наук. Москва. - 2006.

87. Сочнев В.В. Эпизоотология бруцеллеза крупного рогатого скота в степной и лесостепной зонах РСФСР / Сочнев В.В. // Автореф. дисс. д-ра вет. наук. 1989. - Л. - С. 40.

88. Сочнев В.В. Управление эпизоотическим процессом на модели бруцеллеза крупного рогатого скота в Нижнем Поволжье / Сочнев В.В., Филиппов Н.В., Григорьева Г.И. // Н. Новгород: Альфа. 1999. - 376 с.

89. Сочнев В.В. Влияние гетерологических вакцин на иммунологические реакции организма при иммунизации бруцеллезной вакцины / Сочнев В.В. // Вопросы иммунологии и молекул, биологии. -Нальчик. БОТХН. -1981. - Т. 1. - С. 64-65.

90. Терентьев В.А. О нецелесообразности вакцинации против бруцеллеза взрослого крупного рогатого скота / Терентьев В.А., Сергеева Т.Я., Морозов И.С., Олоновский Е.А. // Ветеринария. 1957. - 12. - С. 60-64.

91. Триленко П.А. Особенности иммуногенеза в зависимости от изменчивости бруцелл / Триленко П.А. // Сборник науч. тр. ЛенНИВИ. -1963.- 10.-С. 5-19.

92. Уласевич П.С. Стабильность свойств штамма В. melitensis Rev-1 / Уласевич П.С. // Труды ВИЭВ. 1965. - XXXI. - С. 18-26.

93. Уласевич П.С. Перспективы вакцинации крупного рогатого скота против бруцеллеза малыми дозами штамма Brucella abortus 19 / Уласевич П.С., Ромахов В.А. // Сельское хозяйство за рубежом. 1983. - № 6.-С. 47-50.

94. Уласевич П.С. Изучение на овцах иммуногенных свойств бруцеллезных вакцин / Уласевич П.С. // Труды ВИЭВ. 1961. - 34. - С. 134138.

95. Федоров А.И. Значение гуморального и клеточного иммунитета при бруцеллезе / Федоров А.И., Искандаров Н.И., Игнатов П.Е., Альбертян М.П. и др. // Физиология и патология иммунной системы. — Том 10. № 8. -С. 6.

96. Хоч А.А. Бруцеллез северных оленей в Якутии / Хоч А.А., Слепцов Е.С. // Якутск. 2001. - С. 14-16.

97. Цион Р.А. Проблемы выздоровления при бруцеллезе сельскохозяйственных животных / Цион Р.А., Овчинников С.М. // Ветеринария. 1943. - 12. - С. 17 - 23.

98. Черкасов В.В. Опыт оздоровления хозяйств от бруцеллеза с применением живой вакцины из штамма 82 / Черкасов В.В., Ростов А.П. // Науч. труды Каз.НИВИ. Т. 135. - 1980. - С. 80-82.

99. Черкасов В.В. Опыт оздоровления хозяйств от бруцеллеза с применением живой вакцины из штамма 82 / Черкасов В.В., Ростов А.П. // Науч. труды Каз.НИВИ. Т. 135. - 1980. - С. 80-82.

100. Шаталов В.Ф. Об эффективности вакцины из штамма 19 / Шаталов В.Ф. // Ветеринария. 1954. - 12. - С. 28-29.

101. Шевченко Н.Х. Сравнительное испытание иммуногенных и антигенных свойств противобруцеллезных вакцин из различных штаммов / Шевченко Н.А., Малахова Т.И., Абиджанов М.С. // Сб. науч. тр. УзНИВИ. -1963.-Т. 15.-С. 142-147.

102. Шишков В.П. Иммунология и современные проблемы ветеринарии / Шишков В.П. // Проблемы ветеринарной иммунологии. М. Агропром. издат. - 1985. - С. 3-9.

103. Шкунов П.Я. Эффективность схем оздоровления крупного рогатого скота от бруцеллеза с применением вакцины из штамма 82 / Шкунов П.Я. // Сб. науч. тр. Кустанайской НИВС. 1983. - С. 70-73.

104. Юсковец М.К. Бруцеллез сельскохозяйственных животных / Юсковец М.К. // 1952,1960.

105. Юсковец М.К. Вакцинация при бруцеллезе / Юсковец М.К. // Ветеринария. 1946. -№ 7. - С. 16-18.

106. Andre-Fontaline G. Lees vaccines suitibrucellogues en France Rcc Veter / Andre Fontaline G. // 1989. - 156. - 6. - P.433-437.

107. Alton G.G. Control of Brucella melitensis infection in Sheep and goats a review Trap - Anim. Health. Product. / Alton G.G. // 1987. - V. 19. - P. 65-74.

108. Ackermann M.R. Bovine ileal dome lymphoepithelial cell: Endocytosis and transport of Brucella abortus strain 19 / Ackermann M.R., Cheville N.F., Deyoe B.Z. // Veter. pathol. 1988, V. 25. - № 1. - P. 28.

109. Bang B. Die Aetiologie des Seuchenhaften (infektiosen) Verwerfens. Leitschrift for Tiermedicine. 1897. - 1. - 4. - P.241-278.

110. Brinley Morgan W.Y. Adyuvant Vaccine prepared from killed Brucella abortus strain 45 / Brinley Morgan W.Y., Mc. Diarmid A. // Vet. Rec. -1968.-Vol. 83.-P. 184-199.

111. Bruce D. Note an discovery of microorganism in Malta fever. The practioner. / Bruce D. // 1887. 39. - P.l61-170.

112. Corner L.A., Alton G.G. Стойкость инфекции В. abortus штамма 19 у взрослого крупного рогатого скота, вакцинированного сниженными дозами. «Rec. Vet. Sci», 1981. 31. - 3. - P. 342-344.

113. Corbei M.J., Morgan W.Y. Classification of Brucella Hanhb. bakt. infect. Tieren. Bd. / Corbei M.J., Morgan W.Y. // Lena. 1982. - P. 17-52.

114. Crauford R.P. Relationship of fetal age at conjunctival exposure of pregnantheifers and Brucella abortus isolation / Crauford R.P., Adams L.G., Williams J.D. // Amet. J. Vet. Rec. 1987. - V. 48. - № 5. - P. 755.

115. Dhennin L. Resultat de Letucte comparae Sept vaccins antibrucelligues / Dhennin L. // Bull. Acad. Veter. France. 1975. - 46.(4). - P. 171-190.

116. Mc. Diarmid A. The immunising value of a killed vaccine prepared from a mucoid strain of Brucella abortus / Mc. Diarmid A. // Res. Vet. Sci. -1960.-№ l.-P. 269-272.

117. Elberg S.S. Cuprine immunisation against Brucellosis. A. Summari of experiment on the isclation Properties and Bchavicur of vaccine Strain / Elberg S.S., Meyer K.F. // Bull, of the vorid Htalth. Orig. 1958. - 19. - 4. - P. 711-724.

118. Elberg S.S. Studies on the immunisation of guinea pigs and mice to Brucella infection by meana of the «native antigen» / Elberg S.S., Hersberg M., Schneider P., Silverman S.I., Meyer B.R.T.//1, immunol. 1951. - 67. - P. 1-11.

119. Fiocre B. Neuf ans dutilisation exclusive de 45/20 en million rural. Bull. Ass. frans. vetimier ot spec, malae. Infect / Fiocre B. // 1969. 5. - P. 85-89.

120. Huber I. Crawford Brucella antibody in milk following vaccination of adult cattle with a reduced dose of Brucella abortus atrain 19 / Huber I. // P. roc. (Ann. Meet. United States Anim. Health Assn), Buffalo № I. - 1978. - 82. - P. 79-88.

121. Huddleson I.F. The differentiation of the Species of genus Brucella / Huddleson Y.F. // Am. I. Rubl. Health. 1929. - 1. - P. 18-24.

122. Herberg M. Immunisation against Brucella infection. I. isolation and characterisacion of Streptomycin dependent mutant / Hurberg M., Elberg S.S. // I. Bacterion. 1953. - 66. - 5. - P. 585-599.

123. Liebonne Бруцеллез и борьба с ним во Франции / Liebonne // Реферат в Советской литературе. № 4. - 1939.

124. Live I. Vet. Res. 1949. - 10. - P. 347.

125. Placket P. Failufe of a Singe dese a Brucella abortus atrain 19 vaccine to protect cattle whon given early in calfhod / Placket P., Alton G.G., Capter P.D., Carner L.A. // Austral. Vet. Journ. 1980. - 56. - 9. - P. 409-412.

126. Plommet M. Les dernieres etapes bovine on France / Plommet M. // Bull. Soc. Vet. Prat. Er. 1985. - 69. - 7. - P. 425-431

127. Plommet M. Progres recents en immunication contre L infection a Brucella abortus / Plommet M. // Immunication ches lee bovis. 1987.

128. Raho Parmer Контроль бруцеллеза в США Still того emphasis on brucellosis control. Stockman / Paho Parmer // 1981.-99.- 17.

129. Traum I. Infection abortion investigation in piga / Traum S. // Ann. Rep. of the chief Dep. of Agric. -1914.-30.

130. Valette L. La reaction ELISA dans le diagnostic de la brucellose animale / Valette L. // Rev. Elevade Med. Veter. 1987. - Vol. - 40. - № 4. - P. 341-345.

131. Wilson G.S. The serological differentiation of Sacth strains of the Brucella grup / Wilson G.S., Milce A.A. // Bitt. of Experim. Patholog. 1932. -13.-P. 1-13.

Информация о работе

Устаев, Вахид Магомедович
кандидата ветеринарных наук
Москва, 2010
ВАК 06.02.02

Диссертация

Бруцеллез крупного рогатого скота в Астраханской области: эпизоотологический мониторинг и совершенствование противобруцеллезных мероприятий - тема диссертации по сельскому хозяйству, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы