Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Биологическая активность нефтезагрязненных почв Крайнего Севера на разных стадиях их восстановления и при рекультивации
ВАК РФ 03.00.27, Почвоведение

Автореферат диссертации по теме "Биологическая активность нефтезагрязненных почв Крайнего Севера на разных стадиях их восстановления и при рекультивации"

На правах рукописи

ЩЕМЕЛИНИНА Татьяна Николаевна

БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ НЕФТЕЗАГРЯЗНЕННЫХ ПОЧВ КРАЙНЕГО СЕВЕРА НА РАЗНЫХ СТАДИЯХ ИХ ВОССТАНОВЛЕНИЯ

И ПРИ РЕКУЛЬТИВАЦИИ (на примере Усинского района Республики Коми)

Специальность 03.00.27 - Почвоведение 03.00.16 - Экология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

□ОЗ168935

Воронеж - 2008

003168935

Работа выполнена в Институте биологии Коми научного центра Уральского отделения Российской академии наук

Научные руководители: доктор биологических наук, профессор

Киреева Наиля Ахняфовна

кандидат биологических наук Маркарова Мария Юрьевна

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Хазиев Фангат Хаматович

Защита состоится 27 мая 2008 г. в 13 часов на заседании диссертационного совета Д 212.038.02 при Воронежском государственном университете по адресу: 394006, г. Воронеж, Университетская пл., 1

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Воронежского государственного университета

доктор биологических наук, профессор Девятова Татьяна Анатольевна

Ведущая организация Казанский государственный университет,

факультет географии и экологии

Автореферат разослан _ апреля 2008 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

Брехова Л.И.

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. Экологические проблемы в регионах нефтедобычи и переработки связаны, в первую очередь, с загрязнением объектов окружающей среды нефтью. Благодаря высоким сорбци-онным свойствам почвы, нефтяные углеводороды способны аккумулироваться и сохраняться в ней длительное время, существенно преобразуя и значительно ухудшая свойства почвы и ее биологическую активность. В последние годы все большее значение приобретает борьба с загрязнением почв и поиск оптимальных путей очистки природных объектов. Однако необходимо помнить, что, во-первых, нефть каждого месторождения имеет свой характерный состав и, во-вторых, в каждой климатической зоне она будет оказывать различное воздействие на природную среду. Соответственно и процессы самоочищения почв будут отличаться в зависимости от природно-климатических условий и состава загрязнителя. Торфяно-глее-вые почвы Крайнего Севера (Республика Коми), формирующиеся в условиях низких температур и переувлажнения, характеризуются невысокой скоростью протекания биологических процессов.

Точно предсказать эффекты от рекультивационных мероприятий и гарантировать успех восстановления почв в полной мере в настоящее время не представляется возможным, так как процессы, определяющие динамику токсичности нефтезагрязненных почв, изучены недостаточно. И в то же время показатели биологической активности почвы — функциональной активности почвенной мик-робиоты и связанной с ней ферментативной активности позволяют объективно оценить влияние поллютантов на почвы.

Цель работы - оценка ферментативной и микробиологической активности, загрязненных нефтью торфяно-глеевых почв при их самовосстановлении и рекультивации разными методами.

В соответствии с поставленной целью были определены следующие задачи:

1. Изучить агрохимические, микробиологические и ферментативные характеристики фоновых торфяно-глеевых почв зоны лесотундры Усинского района Республики Коми.

2. Исследовать влияние нефтяного загрязнения на активность почвенных ферментов (каталазы, дегидрогеназы, уреазы, протеазы, фосфатазы, липазы) на разных стадиях самовосстановления.

3. Исследовать динамику численности основных трофических групп микроорганизмов загрязненных нефтью торфяно-глеевых

на разных этапах их восстановления.

4. Изучить активность ферментов и динамику численности микроорганизмов при рекультивации.

5. Провести оценку эффективности способов рекультивации по показателям микробиологической и ферментативной активности.

Научная новизна. Впервые проведено исследование ферментативной активности фоновых и загрязненных нефтью торфяно-глее-вых почв Усинского района Республики Коми.

Выявлены закономерности изменения ферментативной активности в нефтезагрязненных почвах при концентрациях нефти в почве от 1 до 50% в процессе их восстановления и при различных способах рекультивации.

Установлено, что активность окислительно-восстановительных ферментов (каталазы, дегидрогеназы) и гидролитического фермента (уреазы) в исследованных почвах, загрязненных нефтью концентрацией до 10% повышается. Высокие концентрации нефтепродуктов (выше 10%) ингибирует ферментативную активность. Нефть в концентрации до 17% способствует повышению фосфатазной и ли-политической активности. Высокие концентрации нефтепродуктов (выше 17%) ингибирует эти активности. Нефтяное загрязнение снижает протеазную активность торфяно-глеевых почв.

На объектах с возрастом нефтяного загрязнения со сроком давности свыше 10 лет повышается активность каталазы, усиливаются процессы анаэробного дегидрирования и гидролиза мочевины.

Впервые получены данные влияния биопрепаратов нефтеокис-ляющего действия на ферментативную активность торфяно-глеевых почв Усинского района Республики Коми.

Установлено, что более эффективны для очистки почв от нефтепродуктов биопрепараты нефтеокисляющего действия, полученные на основе углеводородокисляющей аборигенной микробиоты.

Практическая значимость. Разработаны критерии оценки состояния рекультивируемых почв по показателям ферментативной активности. Критерии могут быть использованы для разработки разделов ОВОС в проектной документации на этапе определения оптимальных видов природоохранных работ в нефтяной отрасли. Результаты исследований вошли в основу разработанных для условий Республики Коми «Требований к технологиям рекультивации нефтезагрязненных земель в условиях Севера» (ТТРЗ), ставших руководящим документом для производства работ в промышленных условиях (Справка о внедрении результатов исследований прилагается).

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Загрязнение торфяно-глеевых почв Крайнего Севера (на примере Усинского района Республики Коми) нефтью приводит к существенному изменению агрохимических, микробиологических и ферментативных свойств.

2. При внесении в загрязненную торфяно-глеевую почву биопрепаратов нефтеокисляющего действия (МУС, Родер, Универсал, Деконтам, Петролан, Омуг), особенно одновременно с минеральными удобрениями повышается ее биологическая активность.

3. Активность каталазы, дегидрогеназы, уреазы, липазы, фос-фатазы можно использовать при комплексной оценке состояния неф-тезагрязненных и рекультивируемых почв.

Апробация работы. Основные положения и результаты диссертационной работы представлены на Международных конференциях «Новые технологии для очистки нефтезагрязненных вод, почв, переработки и утилизации нефтешламов» (Москва, 2001), «Экология и биология почв: проблемы диагностики и индикации» (Ростов-на-Дону, 2006), «Environmental Challenges of Arctic Oil and Gas Development - Risk Management and Technological Solution» (Tromso, 2008), на Всероссийских конференциях «Теоретические и практические вопросы мониторинга, предупреждения, ликвидации последствий нефтяного загрязнения» (Ханты-Мансийск, 2003) «Особь и популяция - стратегия жизни» (Уфа, 2006), «Проблемы экологии Южного Урала» (Оренбург, 2007), на Республиканских конференциях «Актуальные проблемы биологии и экологии» (Сыктывкар, 2004, 2005, 2006).

Публикации. По теме работы опубликованы 11 печатных работ, в том числе две статьи в реферируемых журналах.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, 5 глав, выводов, списка литературы, включающего 285 источников, в том числе 63 на иностранных языках. Текст изложен на 139 страницах, иллюстрирован 6 рисунками и 28 таблицами.

ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В главе дана краткая природно-географическая характеристика (рельефа, климата, почвы) района исследований, к которому приурочены основные месторождения нефти Усинского района Республики Коми.

Полевые исследования проведены на территории Усинского, Во-зейского, Пермокарбонского и Верхневозейского нефтяных месторождений, подвергавшихся в период с 1980 по 2002 г. аварийным разливам нефти. Основной тип почв на обследованных территориях относился к торфяно-глеевым.

Характерный тип растительного покрова - морошковые, пупга-цевые, осоковые сфагновые сообщества.

Анализ параметров биологической активности исследуемых субстратов выполняли из свежих, не более 3-х дней после отбора, образцов почвы. О биологической активности почвы и ее способности к самоочищению судили по ферментативной активности почв, численности основных физиологических групп микроорганизмов, интенсивности дыхания, и по динамике снижения нефтяного загрязнения.

Активность каталазы, дегидрогеназы, фосфатазы, липазы, уре-азы, протеазы, целлюлазы определяли по методам, описанным Ф.Х. Хазиевым (1990, 2005). Учет численности основных физиологических групп микроорганизмов проводили общепринятыми методами посева почвенной суспензии на агаризованные питательные среды (Колешко, 1981; Методы..., 1991; Практикум по ..., 2005). Агрохимические анализы почв проводили по общепринятым в почвоведении методам из средней почвенной пробы (Аринушкина, 1970; Агрохимические..., 1975). Определение дыхательной активности почвы проводили по интенсивности выделения С02 (Методы..., 1991). Содержание остаточных нефтепродуктов в почве определяли методом флуориметрии на анализаторе жидкости «Флюорат-02» в соответствии с ПНДФ 16.1.21-98 (Методика..., 1998). Результаты исследований обрабатывали с применением пакета прикладных программ Statlstlca 6.0.

АГРОХИМИЧЕСКИЕ, МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ И ФЕРМЕНТАТИВНЫЕ ПАРАМЕТРЫ ТОРФЯНО-ГЛЕЕВЫХ ПОЧВ

По результатам исследования торфяно-глеевые почвы характеризовались пониженной биологической активностью. Численность и активность микроорганизмов не превышала 104 КОЕ в 1 г абсолютно-сухой почвы и была значительной лишь кратковременно, в период разгара вегетации растений, и быстро затухала с понижени-

ем среднесуточной температуры окружающей среды. Поэтому общая продуктивность бактериальной биомассы была довольно низкая.

По степени обогащенности ферментами торфяно-глеевые почвы можно отнести к очень бедным (табл. 1). Повышение ферментативной активности наблюдалось в середине вегетационного сезона (конец июня - начало августа), когда среднемесячная температура в Усинском районе составляла +10 "С.

Таблица 1

Активность ферментов торфяно-глеевых почв (п = 4)

Ферменты Июнь 2005 г Сентябрь 2005 г Июнь 2006 г

Катал аз а 0 60=ь0 03 0 50±0 02 0 20±0 01

Дегидрогеназа 0 61±0 03 0 25±0 01 0 90±0 04

Уреаза 2 5±0 1 0 90±0 04 13 0±0 7

Протеаза 0 4Ш=0 02 Не определяли 0 33±0 01

Целлюлаза 0 68±0 03 Не определяли 1 6±0 08

Фосфатаза 0 52±0 02 0 36±0 01 Не определяли

Липаза 0 17±0 01 0 40±0 02 0 9Н) 04

Примечание здесь и в последующих таблицах принята относительная погрешность измерений (1 = ±5%

Вследствии замедленных биохимических превращений в поверхностном слое почвы в периоды избыточного увлажнения происходило обеззоливание источников гумусообразования и образовывались в основном слабоконденсированные гумусовые вещества. Содержание гумуса было более 2%, но он кислый и ненасыщенный.

Органические горизонты торфяно-глеевых почв фоновых участков характеризуются кислой реакцией среды (табл. 2).

Содержание органического углерода варьирует от 25.5 до 36.6%, что может быть обусловлено различиями в степени разложенности органического материала в фоновых органогенных горизонтах торфяно-глеевых почв.

Исследованные почвы характеризуются повышенным содержанием подвижных форм фосфора и средним содержанием подвижных форм калия, что характерно для торфяно-глеевых почв зоны лесотундры Усинского района Республики Коми (табл. 2).

Следует отметить, что содержание легкогидролизуемого азота варьирует в торфяно-глеевой почве фоновых участков в широких пределах.

Таблица 2

Агрохимические показатели торфяно-глеевых почв

Вариант С общий, % Азот гидролизуемый Подвижные формы pH водный

Р205 К20

мг/100 г ас п

1 25 5±1 2 6 33±0 31 17 56±0 82 19 77±0 91 35

2 Не определяли 4 28±0 22 28 14±14 8 07±0 41 36

3 36 6±1 6 39 21±1 53 10 9±0 51 1170±0 50 44

Примечание 1 - участок 4С, фон под пушицево-сфагновым сообществом, 2 -фоновый участок опыта 1995 г , скважина 203, площадка 3, прикопка из-под злаков, где монолит с лисохвостом, 3 - фоновый участок опыта 2001 г

Таким образом, торфяно-глеевые почвы характеризуются низкой биологической активностью. В целом для этих почв характерна слабая степень разложения торфа, низкая ферментативная активность, очень высокая кислотность.

БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ЗАГРЯЗНЕННЫХ НЕФТЬЮ ТОРФЯНО-ГЛЕЕВЫХ ПОЧВ

Было рассмотрено влияние разных концентраций нефтяного загрязнения почв на изменение численности микроорганизмов, ферментативной активности и интенсивности почвенного дыхания. При высокой концентрации поллютанта (50%) в отличие от фоновых в нефтезагрязненных почвах в течение первых 2-3 лет после загрязнения отсутствовали микромицеты, численность почвенных бактерий не превышала 103-104 КОЕ в 1 г абсолютно-сухой почвы. Среди рассмотренных трофических групп отсутствовали олигонитрофилы. Численность аммонификаторов, нитрификаторов и олиготрофов была снижена на 4-5 порядков по сравнению с незагрязненной почвой. Численность углеводородокисляющих микроорганизмов возрастала не сразу.

Ферментативная активность почвы зависела от срока загрязнения. В свежезагрязненной почве активность окислительно-восстановительного фермента каталазы и гидролитического фермента уре-азы была снижена по сравнению с аналогичными значениями в фоновом варианте опыта (табл. 3).

Таблица 3

Влияние срока давности нефтяного загрязнения на ферментативную активность почв (п = 4)

Вариант Активность каталазы, мл 0 1н КМп04/1 г ас п за 20 мин Активность уреазы, №N-N114/1 ra.cn за 3 часа Активность дегидрогеназы, мг фор мазана/10 г а.с п за 72 часа

Фон 1 0 48±0 02 0 39±0 01 0 25±0 01

2 0 56±0 02 0 45±0 02 0 23±0 01

3 0 51±0 02 0 35±0 01 0 ISttO 01

I 1 0 14±0 01 0 05±0 002 0 08±0 004

3 0 21±0 01 0 14±001 0 51±0 02

II 1 0 32±0 01 0 15±0 01 1 15±0 05

2 2 0&t0 10 0 98±0 04 2 96±0 14

Примечание I - свежезагрязненная почва, II - почва, загрязненная нефтью более 15 лет назад; 1 - скважина 203, 2 - участок 32, 3 - секция 3 участка 4С до начала рекультивации

Активность этих ферментов в почве, загрязненной нефтью более 10 лет назад, повышалась, достигала значения фоновых показателей и затем превосходила их. При попадании в почву нефтяных углеводородов снижалась дегидрогеназная активность. На более поздних этапах самоочищения процессы анаэробного дегидрирования в почве усиливались.

Активность окислительно-восстановительных ферментов первоначально повышалась с увеличением содержания нефти до среднего уровня, но при дальнейшем увеличении концентрации поллютанта происходило резкое снижение активности каталазы и дегидрогена-зы в сравнении с показателями фоновой почвы. Активность этих ферментов тесно связана с общей численностью микроорганизмов (через год после загрязнения г = 0.86 для каталазы и г = 0.78 при р > 0.95 для дегидрогеназы, и через 5 лет г = 0.74 и г = 0.70 при р >0.95 соответственно для каталазы и дегидрогеназы).

При средних концентрациях нефти в почве (10%) наблюдали стимулирование процессов гидролиза мочевины, осуществляемые уреазой. Высокая активность уреазы способствовала росту содержания аммиачной формы азота в загрязненной почве и коррелировала с повышением численности аммонифицирующих микроорга-

низмов (г = 0.92 при р > 0.95). Показатели активности этого фермента были высокими по сравнению с данными фонового варианта. С увеличением содержания нефти в почве уреазная активность постепенно снижалась до минимального уровня, что говорит об ослаблении биохимических процессов обмена азотсодержащих соединений.

Активность протеазы, фермента, участвующего в обмене азотсодержащих соединений в торфяно-глеевой почве снижалась пропорционально концентрации поллютанта, что свидетельствует об ингибировании процессов гидролитического расщепления белков.

При загрязнении почвы различными концентрациями нефти фос-фатазная активность повышалась, как в первый, так и во второй год после загрязнения, что, видимо, связано с большим содержанием в нефти н-парафиновых и циклопарафиновых углеводородов (10%), стимулирующих активность этого фермента. При увеличении концентрации нефти свыше 17% фосфатазная активность снижалась.

В торфяно-глеевой почве при низких и средних концентрациях нефти активность липазы повышалась и превосходила значения фонового варианта. Высокие концентрации поллютанта (17%) ин-гибировали активность фермента и тормозили процессы липолиза из-за токсичного действия нефти на границе раздела фазы «вода-липид».

Показано, что скорость эмиссии С02 увеличивалась по мере возрастания срока загрязнения. Данные по интенсивности дыхания почвы коррелировали с общей численностью микроорганизмов (г = 0.86) и каталазной активностью.

Таким образом, в торфяно-глеевых почвах нефть меняла биологическую активность, которая выражалась в снижении интенсивности микробиологических и биохимических процессов, что, в свою очередь, способствовало нарушению обмена основных органогенных элементов и пищевого режима.

ВЛИЯНИЕ РАЗЛИЧНЫХ ПРИЕМОВ РЕКУЛЬТИВАЦИИ НА БИОЛОГИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ ТОРФЯНО-ГЛЕЕВЫХ ПОЧВ

Оценка эффективности рекультивационных работ на Усинском месторождении со старым загрязнением

Было рассмотрено влияние различных приемов рекультивационных мероприятий на агрохимические, микробиологические и ферментативные параметры в загрязненной нефтью почве.

Опыт был заложен на участке 4С аварии 1994 г. в Усинском районе Республики Коми (Усинское нефтяное месторождение). Общая площадь участка около 6 га. В результате работ по предотвращению растекания нефти вглубь территории в 1995 г. участок был локализован песчаной отсыпкой по периметру и внутри разделен насыпным грунтом на 3 секции. В течение 1995 - начала 1996 гг. секции 1 и 2 заполнились на 1-1.5 м водой (естественным путем в результате сезонных осадков и таяния снега). Содержание нефтепродуктов, в почве под водой, к моменту начала работ, на секциях составляло от 450 до 550 мг/г. Глубина пропитки торфяного слоя колебалась на секциях от 20 до 50 см. В 1996 г. на секции 1, в 1997 г. - на секции 2 и в 2000 г. - на секции 3 провели рекультива-ционные мероприятия.

На секции 1 в первый год в почву участка вносили биопрепарат (МУС), представляющий комплекс психрофильных углеводородо-кисляющих микроорганизмов - продуцентов поверхностно-активных веществ и минеральные удобрения. В течение 2-х месяцев проводили аэрацию воды с помощью специально сконструированных устройств, и последовательно убирали всплывающую на поверхность нефть (локализовывали нефтяное пятно с помощью боновых заграждений и откачивали нефтесодержащую жидкость вакуумбочка-ми). На секции 2 в первый год проводилась уборка всплывшей на поверхность нефти и обработка затопленного участка удобрениями и тем же препаратом без усиленной аэрации, а только с помощью помповых устройств. На второй год работ, на секции 1 и 2 провели осушку, повторную обработку препаратом и удобрениями и посев трав (овес и тимофеевка). На секции 3 длительность рекультивационных мероприятий составила один сезон, при этом была выполнена осушка участка с помощью дренажных каналов. Остаточную нефть из почвы вымывали при помощи помповых устройств, затем

провели однократную обработку минеральными удобрениями и высеяли однолетние и многолетние травы. Средняя дневная температура за этот период составляла 10 °С. В процессе восстановления почв произошло зарастание пушицей и осокой, иван-чаем и частично высеянными злаками. Фоновым для этих трех вариантов опытов был участок, расположенный в 200 м от загрязненного и локализованного участка 4С, характеризующийся как пушециво-осоковое болото с торфяно-глеевой почвой.

После проведенных рекультивационных работ наиболее высокие показатели содержания соединений фосфора, калия и натрия были на секции 1, где наряду с биопрепаратом МУС с минеральными удобрениями применяли аэрирование (табл. 4).

На тех секциях (1 и 2), где в качестве рекультивирующего фактора использовали биопрепарат, состоящий из комплекса углеводо-родокисляющих микроорганизмов - продуцентов ПАВ и минеральных удобрений, численность отдельных эколого-трофических групп превышала значения фонового варианта опыта (рис. 1). В секции 2, где рекультивационные работы отличались от секции 1 отсутствием аэрации показатели численности аммонификаторов и нигрифика-

Таблица 4

Агрохимические свойства почвы и содержание остаточных нефтепродуктов в фоновой и рекультивируемой торфяно-глеевой почве

Вариант Азот гидролшуемый Подвижные формы Содержание нефти, мг/г

Р205 К20

мг/100 гас п

1 39 21±1 96 10 9±0 5 11 79±0 58 2 2±0 1

2 1140 ±0 57 3 0±0 1 8 37±04 37 (Ш 8

3 70 0±3 50 22 3±1 1 11 89±0 59 0 25±0 01

4 61 60±3 08 51 8±2 5 411±0 20 015±0 01

5 39 20±1 96 13 0±0 6 317±0 15 0 68±0 03

6 22 20±1 11 0 30±0 01 1 66±0 08 0 51±0 02

7 14 00±0 70 0 90±0 04 1 20±0 06 27 0±1 3

8 66 40±3 32 0 80±0 04 6 80±0 34 27 0±1 3

Здесь и на рис 1 и 2 приняты следующие условные обозначения 1 - фоновый участок, 2 - нефтезагрязненная почва (первоначальная концентрация нефти - 50%); рекультивационные мероприятия не проводились, 3 - секция 1 (участок зарос пушицей), 4 - секция 1 (участок зарос иван-чаем), 5 - секция 2 (участок зарос пушицей), 6 - секция 2 (участок зарос иван-чаем), 7 - секция 3 (без растительности), 8 - секция 3 (участок зарос иван-чаем)

Рис. 1. Численность отдельных эколого-грофических групп микроорганизмов в нефтезагрязненной торфяно-глеевой почве: а - аммонифицирующие; б - нитрифицирующие; в - олигонитрофилы; г - УОМ.

а)

вариакгы

б)

3 4 5 варианты

В)

|_ з

з: 2,5

* 1.5

^ 1

О" 0,5

4 5

варианты

Г)

и 3

2.5

X

01 2

■И 1.5

§ 1

§

4 0.5

1 0

4 5 вариакгы

Рис. 2. Ферментативная активность нефтезагрязненных торфяно-глее-вых почв: а - дегидрогеназная активность; б - каталазная активность; в -липолитическая активность; г - фосфатазная активность.

торов были самыми высокими среди всех рассматриваемых объектов, что может свидетельствовать о благоприятном воздействии проведенных рекультивационных мероприятий на активизацию очищения почвы (об этом свидетельствует и низкая концентрация нефти). Однако такое отличие в активности микробного пула может также говорить и о том, что в почве этого участка процессы трансформации остаточных углеводородов еще продолжались и отставали от аналогичных на секции 1. Это, по-видимому связано с недостатком кислорода для более быстрого окисления нефтепродуктов. В секции 3, где были применены только осушка и внесение удобрений, численность микроорганизмов была невысокой.

Исследование ферментативной активности в нефтезагрязненных торфяно-глеевых почвах при разных способах рекультивации показало, что активность катал азы, фосфат азы и липазы коррелировала с содержанием остаточных нефтепродуктов и была значительно дег-радирована в почве секции 3 без растительности с высоким содержанием поллютантов (рис. 2).

Оценка эффективности биоремедиационных работ при использовании различных биопрепаратов и агроприемов на Пермокарбонском месторождении

На Пермокарбонском месторождении оценивали эффективность биоремедиационных работ при использовании различных биопрепаратов и агроприемов.

В 2002 г. при участии российских и зарубежных исследователей был заложен полевой промышленный опыт по оценке эффективности различных биопрепаратов, сорбентов и агроприемов для очищения почв от нефти в условиях Севера. Наблюдения по основным биологическим параметрам почвы проводились в течение 5 лет. Как показали результаты оценки интегральных параметров биологической активности почвы (численности основных трофических групп почвенной микробиоты и изучаемых групп ферментов) степень активизации процессов деградации нефти объективно различалась в зависимости от использованных приемов биоремедиации.

Все проведенные биоремедиационные работы способствовали увеличению численности микроорганизмов азотного цикла и активизировали процессы превращения азотсодержащих соединений в неф-тезагрязненной торфяно-глеевой почве.

Наибольший интерес представляет изучение динамики изменений численности УОМ, так как именно этой эколого-трофической группе принадлежит основная роль в биодеградации компонентов нефти в почве. Значительное увеличение численности УОМ отмечено, в первую очередь, в почвах, обработанных биопрепаратами, основой состава которых являются УОМ. В почвах других вариантов опыта их численность увеличивалась, но не так значительно.

После первой обработки препаратами, высокая каталазная активность наблюдалась в почве наиболее загрязненной нефтепродуктами (в почве необработанной, в почве обработанной химическим окислителем, биопрепаратами «Омуг» и «Родер») (табл. 5). В почве этих вариантов опыта, кроме варианта с использованием биопрепарата «Родер» происходило снижение каталазной активности на протяжении всего срока наблюдений. В почве, в которую были внесены биопрепараты «Петролан», «Универсал», «Родер», «Деконтам» и в агростимулированной почве в последующие годы исследования про-

Таблица 5

Активность каталазы (мл 0.1н КМп04/1 г а с.п.) торфяно-глеевых почв, загрязненных нефтью и подвергнутых рекультивации (п = 4)

Варианты 1 2 3 4

1-1 1-2

НЗП 3 19±0 16 1 28±0 06 1 95±0 09 1 02±0 05 1 00±0 05

«Петролан» 2 55±0 13 2 68±0 13 3 85±0 19 5 88±0 29 2 5±0 1

«Иниполь» - - 3 18±0 15 0 91±0 04 0 40±0 02

«Универсал» 0 95±0 047 1 98±0 09 2 98±0 14 4 79±0 23 1 50±0 07

«Омуг» 6 15±0 31 2 65±0 14 4 01±0 20 4 24±0 21 3 3±0 1

«Универсал», Лигносорбент, БАГ 2 ШОП 2 95±0 14 3 96±0 19 5 04±0 25 3 9±0 1

Агростимулирование 014±001 1 05±0 05 1 23±0 06 2 45±0 12 4 5±0 2

«Деконтам» 2 61±0 13 3 01±0 15 3 65±0 18 3 97±0 19 6 4±0 3

«Родер» 3 10±0 15 3 10±0 15 4 02±0 20 6 11±0 30 4 8±0 2

Фон 2 3±0 1 2 3±0 1

Здесь и в табл 6 и 7 приняты следующие условные обозначения 1 - первый год опыта (1-1 - начало опыта, 1-2 - через 30 суток после обработки опытных площадок), 2 - через 12 месяцев, 3 - через 24 месяца, 4 - через 48 месяцев

исходило увеличение каталазной активности. Снижение активности каталазы и приближении ее значений к показателям фоновой почвы к 5 году опыта наблюдалась в почве тех вариантов, в которых массовая доля остаточных нефтепродуктов составляла менее 10%.

В нефтезагрязненной почве активность дегидрогеназы в начале опыта была одной из самых низких (табл. 6). К концу эксперимента процессы анаэробного дегидрирования активизировались. В почве площадки, обработанной препаратом «Иниполь» активность дегидрогеназы была репрессирована. В почвах остальных площадок опыта, как с применением биопрепаратов, так и на площадке с агро-стимулированием, наблюдалась сходная картина изменения активности дегидрогеназы. Через 2 и 3 года опыта активность этого фермента повышалась, а через 5 лет, наоборот, снижалась. В почве площадки с применением препарата «Петролан» активность фермента была самой низкой в конце исследования, и в 2.5 раза ниже фоновых показателей. Наиболее близкими к значениям фоновой почвы были показатели дегидрогеназной активности почвы площадки («Универсал»). В почвах площадок, в которых процессы разложения нефтепродуктов стимулировались внесением биопрепаратов

Таблица 6

Дегидрогеназная активность (мг формазана/ 10 г а.с.п.) торфяно-глеевых почв, загрязненных нефтью и подвергнутых рекультивации (п = 4)

Варианты 1 2 3 4

1-1 1-2

НЗП 0 26±0 01 0 25±0 01 0 34±0 01 0 45±0 02 0 60±0 03

«Петролан» 0 96±0 04 3 11±0 15 3 11±0 15 3 98±0 19 0 08±0 004

«Иниполь» - - 3 01±0 15 0 56±0 02 0 03±0 001

«Универсал» 0 52±0 02 2 45±0 12 3 16±0 15 3 45±0 17 0 24±0 01

«Ому г» 0 65±0 03 2 05±0 10 2 69±0 13 3 16±0 15 0 56±0 02

«Универсал», Лигносорбент, БАГ 0 65±0 03 2 34±0 11 4 7±0 2 3 54±0 17 0 ЗЙО 01

Агростимулирование 015±0 01 1 56±0 07 2 55±0 12 2 56±0 12 0 37±0 01

«Депонтам» 0 84±0 04 2 03±0 10 3 18±0 15 2 98±0 14 0 85±0 04

«Родер» 0 50±0 02 2 45±0 12 4 12±0 20 3 01±0 15 0 38±0 19

Фон 0 20±0 01 0 20±0 01

«Омуг» и «Деконтам» значения активности этого фермента в 2 и 4 раза, соответственно, превосходили значения фоновых показателей.

В начале опыта нефтезагрязненная почва характеризовалась высокой уреазной активностью (табл. 7). Через 4 года после постановки опыта активность уреазы снизилась в 1 5 раза в сравнении с исходным вариантом, но в 2 раза превосходила фоновые значения. Биопрепараты «Универсал», «Омуг», «Универсал» на лигносорбен-те с БАГами, «Деконтам», «Родер» стимулировали процессы гидролиза мочевины. Через 4 года после обработки биопрепаратами активность фермента снизилась. В почве площадки с агростимулиро-ванием наблюдалась аналогичная картина: сначала происходило повышение активности фермента, а затем его ингибирование. В почве площадок, с внесением биопрепаратов «Петролан» и «Иниполь» самые высокие значения уреазной активности были в начале опыта. К 5 году произошло ослабление процессов гидролиза мочевины.

Об активизации процессов биоразложения нефти свидетельствуют данные по содержанию остаточных нефтепродуктов в почве. Концентрация нефти в почве, на которой не применяли рекульти-вантов, составляла на начало опыта 240.1 мг/г. Через 4 года в почве этой площадки произошло незначительное снижение содержания нефти (на 4.2%).

Таблица 7

Активность уреазы (мг N-N1^/1 г а.с.п.) почв, загрязненных нефтью и подвергнутых рекультивации (п = 4)

Варианты 1 2 3 4

1-1 1-2

НЗП 41 3±2 0 3 15±0 15 21 50±1 07 25 6±1 2 28 0±1 4

«Петролан» 63 2±3 1 51 9±2 5 35 6±1 7 34 4±1 7 4 0±0 2

«Иниполь» - - 32 6±1 6 24 5±1 2 5 0±0 2

«Универсал» 6 5±0 3 12 5±0 6 18 5±0 9 31 6±15 11 0±0 5

«Омуг» 31 5±15 34 9±1 7 36 9±1 8 51 2±2 5 6Ш=0 3

«Универсал», Лигносорбент, БАГ 12 6±0 6 25 1±1 2 41 0±2 0 41 3±2 0 5 0±0 2

Агростимулирование 6 3±03 12 8±0 6 27 5±1 3 31 6±15 29 0±1 4

«Деконтам» 12 6±0 6 25 4±1 2 54 6±2 7 58 9±2 9 26 ОЫ 3

«Родер» 6 3±0 3 12 1±0 6 39 8±1 9 51 1±2 5 23 0±1 1

Фон 13 0±0 6 13 0±0 6

Наибольшее снижение содержания остаточных нефтепродуктов за 5 лет исследований наблюдалось на площадках, в почву которых были внесены биопрепараты «Петролан», «Универсал», «Родер» и «Омуг».Биопрепараты активизировали процессы разложения нефти и способствовали снижению содержания остаточных углеводородов за пять лет на 73.9, 78.8, 66.1 и 70% соответственно.

Применение только минеральных удобрений привело к снижению концентрации нефти на 40% за 5 лет.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Нефтяное загрязнение торфяно-глеевых почв Усинского района Республики Коми вызывает нарушение динамичного равновесия в почвенных экосистемах, связанное с изменением агробиологических показателей, что согласуется с данными, полученными исследователями, работавшими в других регионах (Хазиев, Фатхиев, 1981; Исмаилов, 1988; Антоненко, Занина, 1992; Сулейманов, 1999; Kiss, 1998, 2001; Киреева и др., 2001; 2002; Габбасова, 2004; Новоселова, 2004, 2007). При высоких концентрациях поллютанта ингибируют-ся процессы ферментативной активности почвы, о чем свидетельствует ухудшение окислительно-восстановительного потенциала почвы, снижение скорости разложения мочевины, уменьшение ли-политической и фосфатазной активности почвы. Подавляется микробиологическая активность.

При невысоком содержании нефти и нефтепродуктов в почве происходит стимулирование как микробиологической, так и биохимической активности.

Результаты наших экспериментов и анализ данных литературы позволяет утверждать, что естественное восстановление плодородия почв, загрязненных нефтяными углеводородами происходит длительное время (Colwell et al., 1978; Brown et al., 1983; Rosenberg, 1985; Debry et al., 1990; Bacraff, 1992; Hetti, 1993; Маркарова, 2002).

В данной работе было выполнено сравнение эффективности различных биопрепаратов, сорбентов и агроприемов для очищения торфяно-глеевых почв от нефти вУсинском районе Республики Коми. Все испытанные биопрепараты усиливают биологическую активность почвы, что выражается в существенном увеличении численности основных трофических групп почвенной микробиоты и возрастании ферментативной активности почв. В результате очистка почвы

от нефти более эффективна. Наибольший эффект разложения нефти и очищения почв наблюдается при двух-трехкратном применении биопрепаратов и одновременно с агротехническими приемами.

ВЫВОДЫ

1. Торфяно-глеевые почвы Усинского района Республики Коми характеризуются низкой биологической активностью, слабой степенью разложения торфа и высокой кислотностью.

2. С увеличением содержания нефти в торфяно-глеевой почве численность микроорганизмов, утилизирующих органические формы азота, возрастает, и их максимальное содержание наблюдается в почвенных образцах с 15 % -ным загрязнением нефтью. При дальнейшем повышении концентрации нефти численность микроорганизмов снижается.

3. Нефть в концентрации до 10% способствует повышению активности окислительно-восстановительных (каталазы, дегидрогена-зы) и гидролитического фермента (уреазы). Высокие концентрации нефтепродуктов (выше 10%) ингибирует ферментативную активность. Активность этих ферментов тесно связана с общей численностью микроорганизмов (через год после загрязнения г = 0.86 для каталазы и г = 0.78 при р > 0.95 для дегидрогеназы и г = 0.92 при р > 0.95 для уреазы).

4. Нефть в концентрации до 17% способствует повышению фос-фатазной и липолитической активности. Высокие концентрации нефтепродуктов (выше 17%) ингибирует эти активности. Нефтяное загрязнение снижает протеазную активность торфяно-глеевых почв.

5. На объектах с возрастом нефтяного загрязнения со сроком давности свыше 10 лет повышается активность каталазы, усиливаются процессы анаэробного дегидрирования и гидролиза мочевины.

6 Скорость эмиссии С02 увеличивается по мере возрастания срока загрязнения. Данные по интенсивности дыхания торфяно-глеевой почвы коррелирует с общей численностью микроорганизмов (г = 0.86).

7. Приемы рекультивации (аэрация, осушка с помощью дренажных каналов, агростимулирование) и биоремедиации (внесение биопрепаратов - Родер, Универсал, Омуг, Деконтам, МУС, Петро-лан) усиливают микробиологическую активность торфяно-глеевой почвы, загрязненной нефтью в концентрациях 14-49%, активизи-

руют окислительно-восстановительные и гидролитические процессы.

8. Среди испытанных препаратов наиболее эффективными оказались биопрепараты «Петролан», «Универсал, «Родер» и «Омуг», применение которых с агротехническими приемами активизировало процессы разложения нефти и способствовало снижению содержания остаточных углеводородов за пять лет на 73.9, 78.8, 66.1 и 70% соответственно.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

В целях улучшения экологической ситуации в районах, подвергающихся загрязнению нефтью на наш взгляд целесообразно проводить следующие мероприятия:

1. При исследовании состояния торфяно-глеевых почв зоны лесотундры проводить комплексную оценку по агробиологическим параметрам.

2. В качестве диагностических показателей биодеградации нефтяных углеводородов и эффективности рекультивации в нефтезаг-рязненных торфяно-глеевых почв необходимо использовать биохимические показатели (активность каталаз, фосфатаз и липаз).

3. Для наиболее эффективной очистки почв от нефтепродуктов использовать биопрепараты нефтеокисляющего действия, полученные на основе углеводородокисляющей аборигенной микробиоты.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Киреева H.A. Ферментативная и микробиологическая активность загрязненных нефтью глееподзолистых почв на разных стадиях их восстановления / Н.А.Киреева, М.Ю. Маркарова, Т.Н. Щемелинина, Г.Ф. Рафикова // Вестник Башкирского университета, 2006. - № 4. - С. 57-60.

2. Щемелинина Т.Н. Диагностирование степени загрязненности почв нефтью по показателям ферментативной активности / Т.Н. Щемелинина, Е.И. Новоселова, H.A. Киреева, М.Ю. Маркарова // Вестник Оренбургского государственного университета. - 2007. -№ 75/октябрь. - С. 432-434.

3. Маркарова М.Ю. Особенности деструкции нефтяных соединений некоторыми природными нефтеокисляющими бактериями (к вопросу о конструировании препаратов) / М.Ю. Маркарова, Л.Г. Емельянова, Т.Н. Щемелинина // Новые технологии для очистки нефтезагрязненных вод, почв, переработки и утилизации нефтешла-мов Междунар. науч. конф. Тез. докл. - М.: Издательский дом «Ноосфера», 2001. - С. 118-120.

4. Маркарова М.Ю. Некоторые вопросы оценки состояния нефтезагрязненных и рекультивированных земель / М.Ю. Маркарова, Л.Г. Емельянова, Т.Н. Щемелинина // Теоретические и практические вопросы мониторинга, предупреждения, ликвидации последствий нефтяного загрязнения. Тез. докл. научно- практической конф. -Тюмень, 2003. - С. 89-97.

5. Емельянова Л.Г. Сукцессионные изменения микробоценозов нефтезагрязненных почв Севера на разных стадиях их восстановления / Л.Г. Емельянова, Т.Н. Щемелинина, М.Ю. Маркарова // Актуальные проблемы биологии и экологии. Матер, докл. науч. конф. - Сыктывкар, 2004. - Т. II. - С. 87-88.

6. Щемелинина Т.Н. Агробиологические параметры нефтезагрязненных почв при разных способах рекультивации / Т.Н. Щемелинина, Л.Г. Емельянова // Актуальные проблемы биологии и экологии. Матер, докл. науч. конф. - Сыктывкар, 2005. - С. 181-183.

7. Киреева H.A. Мониторинг ремедиации нефтезагрязненных почв Республики Коми по ферментативной активности / H.A. Киреева, М.Ю. Маркарова, Т.Н. Щемелинина // Экология и биология почв: проблемы диагностики и индикации. Матер, докл. междунар. конфер. - Ростов-на-Дону, 2006. - С. 250-252.

8. Рафикова Г.Ф. Изменение в составе микробного сообщества глееподзолистых почв при загрязнении нефтью / Г.Ф. Рафикова, Т.Н. Щемелинина, М.Ю. Маркарова, H.A. Киреева // Особь и популяция - стратегия жизни. Матер, докл. IX Всерос. популяционного семинара. - Уфа, 2006. - С. 402-407.

9. Маркарова М.Ю. Особенности, перспективы и направления переработки нефтешламов в условиях Севера / М.Ю. Маркарова, Т.Н. Щемелинина, Е.М. Анчугова // Доклады VI международной научной конференции «Освоение Севера и проблемы природовос-становления», 10-14 октября 2006 г. - Сыктывкар, 2007. - С. 4351.

10. Щемелинина Т.Н. Активность некоторых ферментов как индикаторов процесса биодеградации нефти в почве / Т.Н. Щемелинина // Актуальные проблемы биологии и экологии. Матер, докл. науч. конф. 3-7 апреля 2006 г. - Сыктывкар, 2007. - С. 282-285.

11. Markarova M.Yu. The mam results of cleanup operations after accidental oil spills m the Republic of Komi. Description of 15-years experience / M.Yu. Markarova, V.K. Zagvozdkin, A.I. Taskaev & T.N. Schemelinina // International Conference «Environmental Challenges of Arctic Oil and Gas Development - Risk Management and Technological Solution», Arctic Frontiers: Tromso, 20-25 January 2008 - P. 81.

Статьи №№ 1, 2 опубликованы в изданиях, соответствующих списку ВАК РФ.

Лицензия № 19-32 от 26.11.96 г. КР 0033 от 03.03 97 г.

Тираж 100 Заказ 11(08)

Информационно-издательская группа Института биологии Коми научного центра Уральского отделения РАН 167982, г. Сыктывкар, ул Коммунистическая, д. 28

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Щемелинина, Татьяна Николаевна

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ

НЕФТЕЗАГРЯЗНЕННЫХ ПОЧВ И ИХ РЕКУЛЬТИВАЦИЯ

1.1. Экологические особенности почв Крайнего Севера

1.2. Изменение свойств почв под влиянием нефти

1.3. Влияние нефти на микробиоту почв

1.4. Влияние нефти и нефтепродуктов на ферментативную 21 активность почв

1.5., Современные методы восстановления нефтезагрязненных 30 почв

Глава 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Природно-географическая характеристика района 38 исследования

2.2. Характеристика почв Усинского района Республики Коми

2.3. Характеристика нефтей Усинского района Республики 43 Коми

2.4. Условия проведения опытов

2.5. Характеристика биопрепаратов нефтеокисляющего 48 действия, использованных в работе

2.6. Методы почвенно-биологических исследований

2.7. Методика проведения измерений массовой доли нефтепродуктов в пробах почв 2.8. Статистическая обработка результатов

Глава 3. АГРОХИМИЧЕСКИЕ, МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ И 54 ФЕРМЕНТАТИВНЫЕ ПАРАМЕТРЫ ТОРФЯНО

ГЛЕЕВЫХ ПОЧВ »

Глава 4. БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ЗАГРЯЗНЕННЫХ 58 НЕФТЬЮ ТОРФЯНО-ГЛЕЕВЫХ ПОЧВ

4.1. Микробиологическая активность фоновых и загрязненных 58 нефтью торфяно-глеевых почв разного возраста загрязнения

4.2. Ферментативная активность фоновых и загрязненных 63 нефтью торфяно-глеевых почв разного возраста загрязнения

Глава 5. ВЛИЯНИЕ РАЗЛИЧНЫХ ПРИЕМОВ РЕКУЛЬТИВАЦИИ 75 НА БИОЛОГИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ ТОРФЯНО-ГЛЕЕВЫХ ПОЧВ

5.1. Оценка эффективности рекультивационных работ на 75 Усинском месторождении со старым загрязнением

5.2. Оценка эффективности биоремедиационных работ при 84 использовании различных биопрепаратов и агроприемов на Пермокарбонском месторождении биопрепаратов и агротехнических приемов

Введение Диссертация по биологии, на тему "Биологическая активность нефтезагрязненных почв Крайнего Севера на разных стадиях их восстановления и при рекультивации"

Актуальность темы. Экологические проблемы в регионах нефтедобычи и переработки связаны, в первую очередь, с загрязнением объектов окружающей среды нефтью. Благодаря высоким сорбционным свойствам почвы, нефтяные углеводороды способны аккумулироваться и сохраняться в ней длительное время, существенно преобразуя и значительно ухудшая свойства почвы и ее биологическую активность. В последние годы все большее значение приобретает борьба с загрязнением почв и поиск путей очистки природных объектов. Однако необходимо помнить, что, во-первых, нефть каждого региона имеет характерный состав и, во- вторых, в каждой климатической зоне она будет оказывать различные эффекты. Исходя из этого очевидно, что и для рекультивации нефтезагрязненных объектов в каждом конкретном случае должен применяться индивидуальный подход.

Торфяно-глеевые почвы Крайнего Севера (Республика Коми) характеризуются* незначительной биологической активностью, связанной с постоянным прессингом низких температур.

Точно предсказать эффекты от рекультивационных мероприятий и гарантировать успех восстановления почв в полной мере в настоящее время не представляется возможным, так как, процессы, определяющие, динамику токсичности нефтезагрязненных почв изучены недостаточно. И в то же время показатели биологической активности почвы - функциональной активности почвенной микробиоты и связанной с ней ферментативной активности позволяют объективно оценить влияние поллютантов на почвы.

Цель работы - оценка ферментативной и микробиологической активности, загрязненных нефтью торфяно-глеевых почв при их самовосстановлении и рекультивации разными методами.

Задачи:

1. Изучить агрохимические, микробиологические и ферментативные характеристики фоновых торфяно-глеевых почв зоны лесотундры Усинского района Республики Коми.

2. Исследовать влияние нефтяного загрязнения на активность почвенных ферментов (каталазы, дегидрогеназы, уреазы, протеазы, фосфатазы, липазы) на разных стадиях самовосстановления.

3. Исследовать динамику численности основных трофических групп микроорганизмов загрязненных нефтью торфяно-глеевых почв на разных этапах их восстановления.

4. Изучить активность ферментов и динамику численности микроорганизмов при рекультивации.

5. Провести оценку эффективности способов рекультивации по показателям микробиологической и ферментативной активности.

Научная новизна. Впервые проведено исследование ферментативной активности фоновых и загрязненных* нефтью торфяно-глеевых почв Усинского района Республики Коми. ;•

Выявлены закономерности изменения ферментативной активности в нефтезагрязненных почвах при концентрациях нефти в почве от 1 % до 50 % в процессе их восстановления и при различных способах рекультивации.

Установлено, что активность окислительно-восстановительных ферментов (каталазы, дегидрогеназы) и гидролитического фермента (уреазы) в исследованных почвах, загрязненных нефтью концентрацией до 10% повышается. Высокие концентрации нефтепродуктов (выше 10%) ингибирует ферментативную активность. Нефть в концентрации до 17% способствует повышению фосфатазной и липолитической активности. Высокие концентрации нефтепродуктов (выше 17%) ингибирует эти активности. Нефтяное загрязнение снижает протеазную.активность торфяно-глеевых почв.

На объектах с возрастом нефтяного загрязнения со сроком давности свыше 10 лет повышается активность каталазы,. усиливаются процессы анаэробного дегидрирования и гидролиза мочевины.

Впервые получены данные влияния биопрепаратов нефтеокисляющего действия на ферментативную активность торфяно-глеевых почв Усинского района Республики Коми.

Установлено, что более эффективны для очистки почв от нефтепродуктов биопрепараты нефтеокисляющего действия, полученные на основе углеводородокисляющей аборигенной микробиоты.

Практическая значимость. Разработаны критерии оценки состояния рекультивируемых почв по показателям ферментативной активности. Критерии могут быть использованы для разработки разделов ОВОС в проектной документации на этапе определения оптимальных видов природоохранных работ в нефтяной отрасли. Результаты исследований вошли в основу разработанных для условий Республики Коми «Требований к технологиям рекультивации нефтезагрязненных земель в условиях Севера» (ТТРЗ), ставших руководящим документом для производства работ в промышленных условиях (Справка о внедрении результатов исследований прилагается, Прил.).

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Загрязнение торфяно-глеевых почв Крайнего Севера (на примере Усинского района Республики Коми) нефтью приводит к существенному изменению агрохимических, микробиологических и ферментативных свойств.

2. При внесении в загрязненную нефтью торфяно-глеевую почву биопрепаратов нефтеокисляющего действия (МУС, Родер, Универсал, Деконтам, Петролан, Омуг), особенно одновременно с минеральными удобрениями, повышается ее биологическая активность.

3. Активность каталазы, дегидрогеназы,, уреазы, липазы, фосфатазы можно использовать при комплексной оценке состояния нефтезагрязненных и рекультивируемых почв.

Личное участие автора. Автором проведены аналитический обзор литературы, экспериментальные работы, выполнена математическая обработка экспериментальных данных. Автор принимала активное участие в написании статей, тезисов и докладов.

Обоснование выводов и достоверность результатов работы обеспечены большим объемом полевых и промышленных экспериментов с применением современных методов исследований. Полученные результаты обработаны с применением математических методов.

Апробация работы. Основные положения и результаты диссертационной работы представлены на Международных конференциях «Новые технологии для очистки нефтезагрязненных вод, почв, переработки и утилизации: нефтешламов» (Москва, 2001), «Экология и биология почв: проблемы диагностики и индикации» (Ростов-на-Дону, 2006), «Environmental Challenges of Arctic Oil and Gas Development - Risk Management and Technological Solution» (Tromso, 2008), на Всероссийских конференциях «Теоретические . и . практические вопросы мониторинга^ предупреждения, ликвидации, последствий нефтяного загрязнения» (Ханты-Мансийск,, 2003), «Особь и популяция - стратегия жизни» (Уфа, 2006), «Проблемы экологии^ Южного Урала» (Оренбург, 2007), на Республиканских конференциях «Актуальные проблемы биологии и экологии» (Сыктывкар, 2004, 2005, 2006);

Публикации. По теме работы опубликованы 11 печатных работ, в том числе две статьи в реферируемых журналах.

Структура- и объем, диссертации. Диссертация состоит из введения; 4 глав, выводов, списка литературы^ включающего 285 источника, в том числе 63 на иностранных языках. Текст изложен на 139 страницах, иллюстрирован 6 рисунками и 28 таблицами.

Заключение Диссертация по теме "Почвоведение", Щемелинина, Татьяна Николаевна

Выводы

1. Торфяно-глеевые почвы Усинского района Республики Коми характеризуются низкой биологической активностью, слабой степенью разложения торфа и высокой кислотностью.

2. С увеличением содержания нефти в торфяно-глеевой почве численность микроорганизмов, утилизирующих органические формы азота, возрастает, и их максимальное содержание наблюдается в почвенных образцах с 15 % -ным загрязнением нефтью. При дальнейшем повышении концентрации нефти численность микроорганизмов снижается;.

3. Нефть в концентрации до 10% способствует повышению активности окислительно-восстановительных (каталазы, , дегидрогеназы) и гидролитического фермента (уреазы). Высокие концентрации нефтепродуктов (выше 10%) ингибйрует ферментативную активность. Активность этих ферментов тесно связана с общей численностью микроорганизмов (через год после загрязнения г=0,86 для каталазы и г=0,78 при р>0,95 для дегидрогеназы,. и г=0,92 при р>0,95 для уреазы).

4. Нефть в концентрации до 17% способствует повышению фосфатазной и липолитической активности. Высокие концентрации нефтепродуктов (выше 17%) ингибирует эти активности. Нефтяное загрязнение снижает протеазную активность торфяно-глеевых почв.

5. На объектах с возрастом нефтяного загрязнения со сроком давности свыше 10 лет повышается активность каталазы, усиливаются процессы анаэробного дегидрирования и гидролиза мочевины^

6. Скорость эмиссии СО2 увеличивается по мере возрастания срока загрязнения; Данные по интенсивности? дыхания, торфяно-глеевой почвы коррелирует с общей численностью микроорганизмов (г=0^86).

7. Приемы рекультивации (аэрация, осушка с помощью дренажных каналов, агростимулирование) и биоремедиации (внесение биопрепаратов - Родер, Универсал, Омуг, Деконтам, МУС, Петролан) усиливают микробиологическую активность торфяно-глеевой почвы, загрязненной нефтью в концентрациях 1449 %, активизируют окислительно-восстановительные и гидролитические процессы.

8. Среди испытанных препаратов наиболее эффективными оказались биопрепараты «Петролан», «Универсал, «Родер» и «Омуг», применение которых с агротехническими приемами активизировало процессы разложения нефти и способствовало снижению содержания остаточных углеводородов за пять лет на 73,9; 78,8; 66,1 и 70 %, соответственно.

Практические рекомендации

В целях улучшения экологической ситуации в районах, подвергающихся загрязнению нефтью на наш взгляд целесообразно проводить следующие мероприятия:

1. При исследовании состояния торфяно-глеевых почв зоны лесотундры проводить комплексную оценку по агробиологическим параметрам.

2. В качестве диагностических показателей биодеградации нефтяных углеводородов и эффективности рекультивации в нефтезагрязненных торфяно-глеевых почв необходимо использовать биохимические показатели (активность катал аз, фосфатаз и липаз).

3. Для наиболее эффективной очистки почв от нефтепродуктов использовать биопрепараты нефтеокисляющего действия, полученные на основе ушеводородокисляющей аборигенной микробиоты.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Щемелинина, Татьяна Николаевна, Сыктывкар

1. Абдуев М.Р. Рекультивация нефтезагрязненных: земель в Азербайджане / М.Р. Абдуев, А.О. Аскеров // Вестн. с.-х. науки. - Баку, 1979. - №1. - С.57-61.

2. Агрохимические методы исследования почв / Под ред. А.А. Фролова. -М.: Наука, 1975.-656 с.

3. Андресон Г.К. Изучение факторов, влияющих на биоразложение нефти в почве / Г.К. Андресон, Л.А. Пропадущая // Коррозия и защита в нефтегазовой промышленности. 19791 - № 3. - С. 30-32.

4. Андресон Р.К. Борьба с загрязнением почвогрунтов нефтью / Р.К. Андресон, Ф.Х. Хазиев // Коррозия и защита нефтегазовой промышленности; М., 1981. -45 с.

5. Андресон Р.К. Экологические последствия загрязнения нефтью / Р.К. Андресон , А.Х. Мукатанов, Т.Ф. Бойко // Экология. 1980. - № 6. - С. 21-25.

6. Антоненко A.M. Влияние нефти на ферментативную активность аллювиальных почв Западной Сибири / A.M. Антоненко, О.В. Занина // Почвоведение. 1992. - №1. - С.38-43.

7. Аринушкина Е.В. Руководство по химическому анализу почв / Е.В. Аринушкина. М.: Изд-во МГУ, 1970. - 487с.

8. Аристовская Т.В. Микробиология процессов почвообразования / Т.В. Аристовская. JL: Наука, 1980. - С. 87.

9. Арчегова И.Б. Криогенные проявления в почвах Коми АССР / И.Б. Арчешва, И.В. Забоева // Доклад на заседании президиума РАН. "Научные доклады". Вып. 10. -Сыктывкар, 1974. - С. 156.

10. Арчегова И.Б. Особенности тундровых экосистем и концепция природовосстановления / И.Б. Арчегова // Биологическая рекультивация и мониторинг нарушенных земель. Матер, докл. междунар. конф. Екатеринбург, 2007.-С. 16-22.

11. Атемова Г.Т. Экологическая оценка влияния нефтяного загрязнения на микробиоту почвы и ее роль в деструкции нефти в модельных экспериментах: микрокосмах: Автореф. дис. . канд. биол.наук / Г.Т. Атемова. Алматы, 2001. -27 с.

12. Атлас по климату гидрологии республики^Коми. М.: Дрофа, 1997. - 116 с.

13. Ахундова JI.X. Влияние нефтепродуктов на ферментативные процессы в почве /Л.Х. Ахундова, Г.Ю. Масловецкая // Научные основы гигиены окружающей среды и инфекционной патологии. Баку, 1980.- С. 29-33.

14. Барышникова Л.М. Биодеградация нефтепродуктов штаммами деструкторами и их ассоциациями в жидкой среде / Л.М. Барышникова, В.Г. Грищенков, М.У. Аринбасаров и др.// Прикл. биохимия и микробиология. -2001. Т.37. - №.5. - С. 542-548.

15. Безносиков В.А. Азотный режим сезоннопромерзающих почв /В.А

16. Безносиков //Криопедология-97: Тезисы докладов межд. конф. Сыктывкар, 1997. - <2.150:

17. Белоусова Н.И. Отбор микроорганизмов способных к деструкции нефти и нефтепродуктах при пониженных температурах / Н.И. Белоусова, Л.М. Барышникова* А.Н. Шкидченко// Прикл. биохимия и микробиология. 2002. -Т;38. - №.5. -G. 513-517. .' /','.

18. Бельков В. Ликвидация разливов нефтепродуктов биологическими? способами;/ В! Бельков; Н: Мйзгирев // Мир транспорта. 2007. - № 1.- С.50-53

19. Биологическая рекультивация нефтезагрязненных земель в; условиях таежной зоны / А.А. Оборин;; ИЖ1 Калачникова; T.Al Масливец? // Восстановление нефтезагрязненных почвенньш экосистем:,- Mi: Наукам 1988i . С: 140-159;

20. Биоремедиация черноземной! почвы, загрязненной нефтью / Э.В. Карасева;,ИШ. Ририч, А.А. Худокормов и др. // Биотехнология; 2005. - № 2. -С. 67-72. ■

21. Биотехнологические методы очистки окружающей* среды от техногенных загрязнений / О.Н. Логинов, Н.Н. Силищев, Т.Ф. Бойко; Н1Ф;1 Гилимзянова -Уфа. Изд-во научно-технической литературы «Реактив», 2000. -100 с.

22. Бочарникова Е.А. Влияние нефтяного загрязнения на свойстваорганического вещества серо-бурых почв / Е.А. Бочарникова, Я.М. Амосова // Проблемы антропогенного почвообразования. Тезисы докладов межд. конф. -М: МГУ, 1997. Т.З. - С.135-137.

23. Броникова В.Д., Шеховцев П.В., Шеховцев В.П. Патент РФ № 2066944. Способ ускоренной рекультивации почвы, загрязненной нефтепродуктами.1996.

24. Булатов А.И. Охрана окружающей среды в нефтегазовой промышленности / А.И. Булатов, П.П. Макаренко, В.Ю. Шеметов. М.: Недра,1997.-С 483.

25. Василевская В.Д. Стабильность северных почв и экосистем к техногенным воздействиям / В.Д. Василевская, В.Я. Григорьев, А.Ю. Сидорчук // Освоение Севера и проблема рекультивации: Докл.Ш межд. конф. -Сыктывкар, 1997. С.203-207.

26. Вельков В.В. Стандартизация формата описаний промышленных технологий биоремедиации / В.В. Вельков // Биотехнология. 2001. - № 2. - С. ^ 70-76

27. Влияние загрязнения нефтью и нефтепродуктами на биологическое состояние чернозема обыкновенного / С.И. Колесников, К.Ш. Казеев, M.JI. Татосян, В.Ф. Вальков // Почвоведение. 2006. - №5. - С.616-620.

28. Влияние загрязнения нефтью и нефтепродуктами на биологическую активность почв Колхидской низменности / Н.Н. Яшвили, И.А. Берадзе , Т.К. Думбадзе и др. // Изв. АН ГССР. Сер. биол. - Т. 8. - №6. - 1982. - С. 413-418.

29. Влияние загрязнения почв нефтью и нефтепродуктами на активность липазы / Н.А.Киреева, Е.М. Тарасенко, А.А. Шамаева, Е.И. Новоселова // Почвоведение. 2006. - № 8. - С.1005-1011.

30. Влияние нефтяного загрязнения на некоторые компоненты агросистемы / Ф.Х. Хазиев, Е.И. Тишкина, Н.А. Киреева, Г.Г. Кузяхметов // Агрохимия. 1988. - №2. - С. 56-61.

31. Волде М.И. Экологический механизм действия глюкозы на активностьуглеводородокисляющих микроорганизмов в почве: Автореф. дис. канд. биол. наук / М.И: Волде. М.: МГУ, 2002. - 25с.

32. Восстановление конструктивная часть проблемы защиты природы / И.Б. Арчегова, Т.В. Евдокимова, H.G. Котелина и др.// Освоение Севера-и проблема рекультивации: Докл. III междунар. конф. - Сыктывкар, 1997.- С. 4-10.

33. Габбасова.И.М. Деградация и рекультивация почв,Башкортостана / И.М. Габбасова: -Уфа.Гилем. 2004. - 283с.

34. Гафарова Е.В. Влияние цеолитсодержащей породы и растений на биологическую активность выщелоченного чернозема; загрязненного нефтяными углеводородами: Автореф. дис. . канд. биол.наук / Е.В. Гафарова. Казань, 2006:-23с.

35. Гафарова Е.В. Влияние цеолитсодержащей породы и эспарцета на биологические параметры выщелоченного чернозема, загрязненного смесью углеводородов / Е.В: Гафарова, С.К. Зарипова // Вестник СамГУ Естественнонаучная серия. 2005.- № 6. - С.146-157.

36. Гилязов М.Ю. Агроэкологическая, характеристика нарушенных при нефтедобыче черноземов и приемы их рекультивации в условиях Закамья Татарстана: Автореф. дис. . докт. с-х наук./ М.Ю. Гилязов. Саратов: СГСХА, 1999.-43с.

37. Гилязов М.Ю. Изменение некоторых агрофизических свойств выщелоченного чернозема при загрязнении товарной нефтью в условиях Татарстана / М.Ю. Гилязов // Почвоведение. 2002. - №12. - С.1515-1519.

38. Гилязов М.Ю. Изменение некоторых агрохимических свойстввыщелоченного чернозема при загрязнении его нефтью / М.Ю. Гилязов // Агрохимия. 1980. - № 12. - С. 72-75.

39. Григорян К.В. Влияние ионов тяжелых металлов на активность ферментов почв / К.В. Григорян //Биол.ж. Армении. 1982. - Т.35. - №8. - С.653-656.

40. Гулько А.Е. Фенолоксидазы почв: продуцирование, иммобилизация, активность / А.Е. Гулько, Ф.Х. Хазиев // Почвоведение. 1992. - № 11. - С. 5567.

41. Гусев М.В. Микробиологическое разрушение нефтяного загрязнения / М.В. Гусев, Т.В. Коронелли // Изв. АН СССР. Сер. биол. 1981. - №6. - С. 835844.

42. Гусева О.А. Миграционные структуры почвенного покрова как основа оценки поведения битуминозных веществ в ландшафтах /О.А. Гусева, С.В. Горячкин //Криопедология-97: Тезисы докладов междунар. конф. Сыктывкар, 1997.- 170 с.

43. Девятова Т.А. Биодиагностика уровня техногенного загрязнения почв по ферментативной активности /Т.А. Девятова, Н.В. Стороженко, И.Н. Костылев // Современные проблемы загрязнения почв. Матер, докл. II межд. н. конф. М: МГУ, 2007.-TII. - С.338-341.

44. Девятова Т.А. Техногенное изменение биологических свойств почв под влиянием автотранспорта / Т.А. Девятова, Т.Н. Крамарева // Экология и биология почв: проблемы диагностики и индикации. Матер, межд. научн. конф. Ростов-на-Дону, 2006. - С. 134-138.

45. Демидиенко А.Я. Изучение питательного режима почв, загрязненных нефтью / А.Я. Демидиенко, В.М. Демурджан, Л.Д. Шеянова //Агрохимия. -1983. № 9. - С.100-103.

46. Демидиенко А.Я. Пути восстановления плодородия нефтезагрязненных почв черноземной почвы Украины / А.Я. Демидиенко, В.М. Демурджан // Восстановление нефтезагрязненных почвенных экосистем. М.: Наука, 1988.1. С. 197-206.

47. Диагностирование степени загрязненности почв нефтью по показателям ферментативной активности / Т.Н. Щемелинина, Е.И. Новоселова, Н.А. Киреева, М.Ю. Маркарова // Вестник Оренбургского государственного университета. 2007. - № 75/октябрь. - С.432-434.

48. Долгова Л.Г. Биохимическая активность почвы при загрязнении / Л.Г. Долгова //Почвоведение. 1975. - № 4. - С. 113-118.

49. Драчук С.В. Микрофлора почв, загрязненных нефтепродуктами. / С.В. Драчук, Н.В. Кокшарова, Н.Н.Фирсов // Экология. 2002. - № 2. - С.148-150.

50. Дыхательный газообмен почвы, загрязненной нефтью: (Деп. ВИНИТИ 15.11.83; № 6074-83 Деп.) / Губайдуллина Т.С. Казань, 1983. - 16 с.

51. Ерцев Г.Н. Защита водных объектов от загрязнения аварийной нефтью в Усинском районе / Г.Н. Ерцев // Научно-техническая политика: Материалы науч.-аналит. конф. Сыктывкар, 1997. - С.200-201.

52. Ерцев Г.Н. Опыт ликвидации аварийных разливов нефти в Усинском районе Республики Коми /Т.Н. Ерцев, Г. М. Баренбойм, А.И. Таскаев. Сыктывкар, 2000. 183 с.

53. Ерцев Г.Н. Результаты исследований технологий рекультивации загрязненных нефтью земель на опытном участке № 20 Возейского месторождения в Усинском районе Республики Коми / Г.Н. Ерцев, О.В. Громова,

54. B.И. Лукашев // Экологические работы на месторождениях нефти Тимано-Печорской провинции. Состояние и перспективы. Материалы четвертой научн.-практ. конф. Сыктывкар, 2006. - С. 101-109.

55. Забоева И.В. Почва и земельные ресурсы Коми АССР / И.В. Забоева. -Сыктывкар, 1975. 344 с.

56. Звягинцева И.С., Суровцева И.Т., Поглазова М.Н., Ивойлов B.C., Беляев

57. C.С. // Прикл. биохимия и микробиология. 2001.- Т.70. - №.3. - С. 321-328.

58. Зименко Т. Г. Влияние нефтяного загрязнения на биологическую активность дерново-подзолистой легкосуглинистой почвы / Т. Г. Зименко, Л. Е. Картыжова // Вестн. АН БССР. Сер. биол. 1986. - № 6. - С. 52-55.

59. Игнатенко И.В. Опыт рекультивации нарушенных земель вг Субарктике / И.В. Игнатенко, И.С. Постнов, И.Ю. Гладкий // Освоение Севера и проблема рекультивации. Материалы докладов ПГ междунар. конф. Сыктывкар, 1997. -С. 318-321.

60. Изменение агрохимических и микробиологических свойств нефтезагрязненнош чернозема в рекультивационный период / А.И. Фатеев, Н.Н. Мирошниченко, Е.В. Панасенко, С.И. Христенко // Агрохимия. 2004. - № 10. -С.53-60.

61. Изменение микрофлоры и состава нефти в черноземной почве Татарии в первый период после загрязнения / С.М. Самосова, Г.Л. Курбский, Г.М. Усачева и др: // Добыча полезных ископаемых и биохимия природных экосистем. М.: Наука, 1982. - С.235-245.

62. Изменение свойств почв и состава грунтовых вод при загрязнении нефтью и нефтепромысловыми сточными водами в Башкирии / И.М. Габбасова,1.l

63. Р.Ф. Абдрахманов, И.К. Хабиров, Ф:Х. Хазиев // Почвоведение. 1997. - № 11. -С. 1362-1372

64. Иларионов. С.А. Самоочищение нефтезагрязненных почв и их рекультивация / С.А. Иларионов // Освоение Севера и проблема рекультивации. Докл. III междунар. конф. Сыктывкар, 1997. - С.51-55.

65. Иларионов С.А. Трансформация.углеводородов* нефти в почвах гумидной зоны: Автореф. дис. . докт. биол. наук / С.А. Иларионов. Сыктывкар, 2006. -30 с.

66. Ильджинова М.И. Методы химического и микробиологического очищения почв от нефтяных загрязнений / М.И Ильджинова // Экология и биология почв: проблемы диагностики и индикации. Материалы докладов межд. конф. Ростов-на-Дону, 2006. - С. 224-225.

67. Исмаилов Н.М. Биодеградация нефтяных углеводородов в* почве, инокулированной дрожжами / Н.М. Исмаилов // Микробиология. 1985. - Т. 54. - № 6. - С. 835-841.

68. Исмаилов Н.М. Влияние нефтяного загрязнения на круговорот азота в почве / Н.М Исмаилов. // Микробиология. 1983. - Т. 52. - №6. - С. 1003-1007.

69. Исмаилов Н.М. Коэффициент минерализации углеводородов как показатель самоочищающей, способности нефтезагрязненных почв и эффективности применяемых методов их рекультивации / Н.М. Исмаилов, В.И.

70. Гаджиева, М.Г. Гасанова // Изв. АН АзССР, Сер. биол. н. 1984. - №6. -С.76-85.

71. Исмаилов Н.М. Микробиология и ферментативная активность нефтезагрязненных почв / Н.М. Исмаилов // Восстановление' нефтезагрязненных почвенных экосистем. М.: Наука, 1988. - С.42-56.

72. Исмаилов Н.М. Нефтяное загрязнение и биологическая-активность почв / Н.М. Исмаилов //Добыча полезных ископаемых и геохимия ' природных экосистем. М: Наука, 1982. - С.227-235.

73. Исмаилов Н.М: Современное состояние методов рекультивации нефтезагрязненных земель / Н.М. Исмаилов, Ю.И. Пиковский // Восстановление нефтезагрязненных почвенных экосистем.- Ml: Наука, 1988. -С. 222-230. '

74. Исследование способности нефтеокисляющих бактерий утилизировать углеводороды нефти / Ф.М. Хабибуллина, А.А. Шубаков, И.Б. Арчегова, Г.Г. Романов // Биотехнология. 2002. - №6. - С. 57-62.

75. Кайгородова С.Ю. Биологическая активность нефтезагрязненных болотных почв Тюменской области / С.Ю: Кайгородова // Тезисы 4 Национальной конференции. Сыктывкар, 1996. - С 56.

76. Калачникова И.Г. Влияние нефтяного загрязнения на экологию почв и почвенные микроорганизмы / И.Г. Калачникова; Т.А. Масливец, Е.Н. Базенкова // Экология и популяционная генетика микроорганизмов: Свердловск, 1987. -23с.

77. Калачникова И.Г. Исследование трансформации нефтяных углеводородов в почвенной экосистеме, как основа оптимизации антропогенных воздействий на нее / И.Г. Калачникова, Е.И. Базенкова, Н.М. Колесникова.1. Свердловск, 1991. — 99с.

78. Калюжный С.В. Биотехнология защиты окружающей среды: единство биокаталитических и инженерных подходов / С.В. Калюжный //Изв. РАН. Сер. Химическая. 2001. - № 10. - С. 1735-1742.

79. Киреева Н.А. Активность каталазы и дегидрогеназы в почвах, загрязненных нефтью и нефтепродуктами/ Н.А. Киреева, Е.И. Новоселова, Т.С. Онегова // Агрохимия. 2002. - №8. - С.50-55.

80. Киреева Н.А. Биологическая активность нефтезагрязненных почв / Н.А. Киреева, В.В. Водопьянов, A.M. Мифтахова. Уфа.: Гилем, 2001. - 376с.

81. Киреева Н.А. Влияние нефтепродуктов на биологическую активность серой лесной почвы / Н.А. Киреева, Е.И. Новоселова // Тез. докл. 2 съезда общества почвоведов. С.-Пб., 1996. - Кн. 1. - С.261.

82. Киреева Н.А. Микробиологические грибы и актиномицеты в почвах. Загрязненных нефтью / Н.А. Киреева // Эколого-флористические исследования по споровым растениям Урала. Свердловск, 1990. - С. 51-56.

83. Киреева Н.А. Микроскопические грибы — биодеструкторы нефтяных углеводородов в почве / Н.А. Киреева // Ботанические исследования на Урале. Информ. матер. Свердловск, 1990 г. - С. 41.

84. Киреева Н.А. Ускорение биодеструкции нефтяных загрязнений при рекультивации почв / Н.А. Киреева, Е.И. Тишкина // Актуальные вопросы биотехнологии. Уфа: БашГУ, 1990. - С.36-44.

85. Киреева Н.А. Ферменты серного обмена в нефтезагрязненных почвах / Н.А. Киреева, Г.Ф. Ямалетдинов., Е.И. Новоселова, Ф.Х. Хазиев // Почвоведение. 2002. - № 4. - С. 474-480.

86. Коваль Э.З. Микрофлора почв, заливаемых нефтепродуктами / Э.З. Коваль, Т.И. Редчиц // Систематика, экология и физиология почвенных грибов. -Киев: Наукова думка. 1975. - С. 64-65.

87. Кодина J1.A. Геохимическая диагностика нефтяного загрязнения почвы / JI.A. Кодина // Восстановление нефтезагрязненных почвенных экосистем. М.: Наука, 1988.-С. 112-122.

88. Колесников С.И. Использование показателей биологической активности в целях мониторинга, диагностики и нормирования нефтезагрязненных почв / С.И. Колесников // Экология и биология почв. Материалы межд. конф. Ростов-на-Дону, 2005. - С.218-223.

89. Колешко О.И. Экология микроорганизмов почвы: Лаб практикум / О.И. Колешко. Минск: Высш. Школа, 1981. - 176с.

90. Концепция природовосстановления нарушенных экосистем Севера / И.Б. Арчегова, С.В. Дегтева, Т.В. Евдокимова, Е.Г. Кузнецова // Республика Коми: Экономическая стратегия вхождения в ХХЗ век. Матер, науч. конф. -Сыктывкар, 1996. С. 135-139.

91. Кореньков Д.А. Агрохимия азотных удобрений / Д.А. Кореньков. М: Наука, 1972.-208 с.

92. Коронелли Т.В. Микробиологическая деградация углеводородов в почвах, загрязненных нефтью и ее экологические последствия / Т.В. Коронелли // Биол. науки. 1982. - №3. - С.5-7.

93. Коронелли Т.В. Принципы и методы интенсификации биологического разрушения углеводородов в окружающей среде (обзор) / Т.В. Коронелли // Прикладная биохимия и микробиология. 1996. - Т.32. - №6. - С. 579-585.

94. Маркарова М.Ю. Использование угаеводородокисляющих бактерий для восстановления нефтезагрязненных земель в условиях Крайнего Севера: Дис. . канд. биол. наук/М.Ю. Маркарова. Пермь, 1999. - 156 с.

95. Маркарова М.Ю. Микробиологическая очистка загрязненных нефтью водоемов и резервуаров / М.Ю. Маркарова, И.Б. Арчегова, В.В. Полшведкин // Химия в интересах устойчивого развития. 1998. - Вып. 6. - С. 343-348.

96. Маркарова М.Ю. Некоторые вопросы теории и практики восстановления нефтезагрязненных земель на Севере/ М.Ю. Маркарова, А.И. Таскаев, И.А. Заикин // Экология и промышленность. Спецвыпуск: Приложение к журналу. -М., 2004. С.17-21.

97. Медведева Е.И. Биологическая активность нефтезагрязненных почв в условиях Среднего Поволжья: Автореф. Дис. . канд. биол. наук / Е.И. Медведева. Тольятти, 2002. - 18с.

98. Методика выполнения измерений массовой доли нефтепродуктов в-пробах почв на анализаторе жидкости «Флюорат 02». ИНД Фь 16.1.21 — 98. - М, 1998. - 15с.

99. Методические рекомендации по биорекультивации нефтезагрязненных земель / JI.B. Панченко, О.В. Турковская, Е.В. Дубровская, А.Ю. Муратова. -Саратов: Изд-во Сарат. Ун-та, 2003. 28с.

100. Методы общей бактериологии / Под ред. Ф. Герхардта и др. М.: Мир. -Т.1-3.- 1983.

101. Методы почвенной микробиологии и биохимии./ Под ред. Д.Г Звягинцева. М: МГУ, 1991. - 304с.

102. Микрофлора черноземных почв и ее активность при загрязнении нефтью / С.М. Самосова, В.И. Фильченкова, P.P. Кипрова и др. Казань. - 19 с.

103. Михновская А.Т. Микрофлора грунтов, забрудненных нефтепродуктами / А.Т. Михновская, Л.Г. Тете // Агрохимия и грунтознавство. 1980. - Т.40.- С. 79-85.

104. Мишустин Е.Н. Ассоциация почвенных микроорганизмов / Е.Н. Мишустин. М.: Наука, 1975. - 105с.

105. Мишустин Е.Н. Образование свободных аминокислот на разрушающейся/ • в почве целлюлозе / Е.Н. Мишустин, А.Н. Петрова // Микробиология. 1966. -Т.35. - №3. - С. 491-500.

106. Мишустин Е.Н. Ценозы почвенных микроорганизмов // Почвенныеорганизмы как компонент биогеоценоза. М.: Наука, 1984. - С.5-24.

107. Морозова Н.В. Влияние условий среды на развитие нефтеразлагающих микроорганизмов / Н.В. Морозова, В.Н. Николаев // Гидробиология. 1978. - Т. 14. 4. - С.55.

108. Мукатанов А.Х. Влияние нефти на свойства почв / А.Х. Мукатанов, П.Р. Ривкин //Нефтяное хозяйство. 1980. - № 4. - С.53-54.

109. Наблюдение за самоочищением почв от нефти в средней и южной тайге / Н.П. Ильин, И.Г. Калачникова, Т.И. Каркишко и др. // Добыча полезных ископаемых и геохимия природных экосистем. М.: Наука, 1982. - С.245-258.

110. Научно-прикладной справочник по климату СССР. Сер.З. Многолетние118 ' данные. -Вып. 1. Л.: 1989. - 484с.

111. Некоторые результаты комплексных исследований по рекультивации земель в объединении «Татнефть» У У.Г. Саттаров, G.M. Самосова, И.Т. Храмов и др. // Коррозия и защита в нефтегазовой промышленности. 1982. - № 3. -С.29-31.

112. Некрасова Л:С. Изучение почвенной мезофауны в районе нефтяного загрязнения Среднего Приобья / Л .С. Некрасова // Животные в условиях антропогенного ландшафта. Свердловск, 1990. - С.37-48.

113. Нефтеокисляющий потенциал ассоциативных ризобактерий рода Azospirillum / A.IO. Муратова, 0;В.Турковская, Л.П. Антонюк и др. // Микробиология.-2005. -№2. С. 248-254.

114. Новоселова Е.И. Использование ферментативной активности для мониторинга, биремедиации нефтеагрязненных почв / Е.И. Новоселова // Вестник Оренбургского университета. 2007. - №75. - С.246-247.

115. Новоселова Е.И. Экологические аспекты трансформации ферментного пула почвы при нефтяном загрязнении и рекультивации: Автореф. дис. . докт. биол. наук / Е.И. Новоселова. Воронеж: ВГУ, 2008. - 36с.

116. О влиянии южноузбекистанской нефти на бйогенность почв в ранние периоды вегетации хлопчатника / А.З. Закиров, Н.А. Теслинова, С.Т. Султанова, X. И. Умаров // Узб. биол. журн. 1982. - №1. - С.19-21.

117. Оборин.А.А. Нефтегазопоисковая геомикробиология / А.А. Оборин, Е.В. Стадник. Екатеринбург, 1997.- 408 с.

118. Особенности деградации тяжелой нефти в светлых светлокоричневых. почвах сухих субтропиках Азербайджана / А.Г. Ахмедов, Н.П. Ильин, Н.М. Исмаилов, Ю.И. Пиковский // Добыча полезных ископаемых и геохимияприродных экосистем. М.: Наука, 1982.- С. 217-225.

119. Оценка экологической- эффективности мероприятий по рекультивации нефтезагрязненных земель / P.P. Ибатуллин, И.А. Шайдуллина, В.З. Латыпова, И.И. Мутин // Защита окружающей среды в нефтегазовом комплексе. 2006. -№ 8t - С. 1-6.

120. Панасенко Е.В. Вплив агромелюративних заход1в вщновлення властивостей та родючост1 нафтозабрудненого чорнозему: Автореф. дис. . канд. с/х наук / Е.В: Панасенко. Харюв, 2007. - 24с.

121. Паринкина О.М*. КГ вопросу о продуктивности-микробных сообществ в . некоторых почвах западного Таймыра / О.М. Паринкина У/ Вопросы,*, численности; биомассы и продуктивности^ почвенных микроорганизмов. -Л:: Наука, 1972.-С. 89.

122. Паринкина О.М. Микрофлора тундровых почв / О.М. Паринкина. Л?: Наука,. - 1989. - 76 С.

123. Пиковский Ю.И. Геохимическая трансформация» дерново-подзолистых почв под влиянием потоков^ нефти / Ю:И. Пиковский, Н.П: Солнцева- // Техногенные потоки вещества в-ландшафтах и состояние экосистем. - М.: Наука, 1981. - С! 149-154.

124. Пиковский Ю.М. Трансформация техногенных потоков нефти впочвенных экосистемах / Ю.М. Пиковский // Восстановление нефтезагрязненных почвенных экосистем. М., 1988. - С. 7-22.

125. Плешакова Е.В. Получение нефтеокисляющего биопрепарата путем стимуляции аборигенной углеводородокисляющей микрофлоры / Е.В. Плешакова, Н.Н. Позднякова, О.В. Турковская // Прикладная биохимия и микробиология. 2005. - № 6. - С. 634-639.

126. Плешакова Е.В. Приемы стимуляции аборигенной нефтеокисляющей микрофлоры / Е.В. Плешакова, Е.В. Дубровская, О.В. Турковская // Биотехнология. 2005. - № 1. - С. 42-50.

127. Подзолистые почвы центральной и восточной частей европейской территории СССР. Л.: Наука, 1981. - 200с.

128. Почвы Башкортостана / Ф.Х. Хазиев, А.Х. Мукатанов, И.К. Хабиров и др.- Уфа: Гилем, 1995. Т. 1. - 283 с.

129. Почвы Башкортостана / Ф.Х. Хазиев, Г.А. Кольцова, Р.Я. Рамазанов и,др.- Уфа: Гилем, 1997. Т.2. - 327 с.

130. Почвы Печорского промышленного района. / С.В. Беляев, И.В. Забоева, и

131. B.А. Попов, Д.М. Рубцов // Москва - Ленинград, 1965.- С.3-32.

132. Практикум по микробиологии / Под ред. А.И. Нетрусова. М.: Издательский центр «Академия», 2005. - 608с.

133. Природоохранные работы на предприятиях нефтегазового комплекса. Часть 1. Рекультивация загрязненных нефтью земель в Усинском районе

134. Республики Коми / Р.У. Муганов, М.Ю. Маркарова, В.В. Муляк и др. »1. Сыктывкар, 2006. 208 с.

135. Распространение углеводородокисляющих микроорганизмов в почвах основных нефтеносных месторождений Узбекистана / Р.К. Андрусенко, Б.И. Бильмас, Т.Д. Джамалов , В.И. Рунов // Микробиология. 1969. - Т. 39.- № 5.1. C. 873-877.

136. Раськова Н.В. Активность и свойства пероксидазы и полифенолоксидазы в дерново-подзолистых почвах под лесными биоценозами / Н.В. Раськова //

137. Почвоведение. 1995. - № 11. - С. 1363-1368.

138. Раськова Н.В. Активность ферментов азотного обмена в почвах естественных фитоценозов / Н.В. Раськова, Ю.Г. Гельцер // Почвенные организмы как компоненты биогеоценоза. М.: Наука, 1984. - С.218-231.

139. Рахимова Э.Р. Биологическая Активность нефтезагрязненной почвы при засолении / Э.Р. Рахимова, А.В. Гарусов, С.К. Зарипова // Почвоведение. 2005. - № 4. - С. 481-485.

140. Регуляторное действие глюкозы на активность углеводородокисляющих микроорганизмов в почве / B.C. Гузев, Э.М. Халимов, М.И. Волде, И.С. Куличевская // Микробиология. 1997. - Т. 66. - № 2. - С. 154-160.

141. Рекультивация земель на Севере (Рекомендации по рекультивации земель на Крайнем Севере: Вып. I) / И.Б. Арчегова, Т.В. Евдокимова, М.Ю. Маркарова и др. - Сыктывкар, 1997. - 34 с.

142. Рекультивация земель на Севере (Вып. I). // И.Б. Арчегова, Т.В. Евдокимова, Н.С. Котелина и др. // Рекомендации по рекультивации земель на Крайнем Севере. -Сыктывкар, 1997. 34 с.

143. Рекультивация нефтезагрязненных земель лесостепной зоны Татарии / М.З. Гайнутдинов, С.М. Самосова, Т.И. Артемьева и др. // Восстановление нефтезагрязненных почвенных экосистем. М.: Наука, 1988. - С.177-197.

144. Роль почв и почвенного покрова в устойчивости экосистем тундры / В.Д. Василевская // Криопедеология-97: Тез. докл. междунар. конф. Сыктывкар, 1997. С. 165.

145. Романов Г.Г. Азотфиксирующая и денитрифицирующая активность в наземных биогеоценозах, как индикатор эффективности природовосстановительных работ / Г.Г. Романов // Криопедология-97: Тезисы докладов междунар. конф. Сыктывкар, 1997. - С. 179.

146. Рукосуева Н.П. Биологическая активность почв горных лесов Сибири / Н.П. Рукосуева, А.Б. Гукасян. Новосибирск: Наука, 1985. - 88с.

147. Рыбин А.В. Опыт рекультивации разлива нефти в условиях юга Западной

148. Сибири / А.В. Рыбин, И.Н. Шумилов, С.Н: Гашев // Биологическая рекультивация нарушенных земель. Тезисы докладов междунар. совещ. -Екатеринбург, 1996. С. 127-128.

149. Салангинас JI.A. Изменение свойств почв под воздействием* нефти и разработка системы мер по их реабилитации. / JI.A. Салангинас. Екатеринбург. - 2003: - 412с.

150. Салахова Г.М. Изменение эколого-физиологических параметров растений и ризосферной микробиоты в условиях нефтяного «загрязнения и рекультивации-почвы: Автореф. дис. . канд. биол. наук / Г.М. Салахова. Уфа, 2007. - 24с.

151. Самосова С.М. Изыскание путей стимуляции биодеградации нефти в почве/ С.М. Самосова, В.И. Фильченкова, Г.Х. Мусина // Микробиологическиеметоды борьбы с загрязнением окружающей среды. Пущино, 1979. - С. 8-10.

152. Сафонова' Г.И. Современные методы, исследования- нефтей / Под ред. "Богомолова А.И. Л.: Недра, 1984. - С. 79-80.

153. Сваровская Л.И. Биодеструкцияуглеводородов нефти почвенной микрофлорой, активированной фотолюминисцентными- пленками / Л.И. Сваровская, Л.К.Алтунина, Д.А. Филатов // Нефтехимия. 2007. - №*3.- С. 240-' 245.

154. Свирскене А. Микробиологические и биохимические показатели при-оценке антропогенного воздействия на почвы / А. Свирскене // Почвоведение. -2003. №2. - С.202-210.

155. Скрябин Г.К. Использование микроорганизмов в микробиологическом синтезе / Г.К. Скрябин, Л.А. Головлева. М: Наука, 1976. - С. 214-247.

156. Снижение фитотоксичности нефтезагрязненной серой лесной почвы при биорекультивации / Н.А(. Киреева; М.Д Бакаева, Е.М.Тарасенко и др. // Агрохимия. 2003. - №2. - С.50-55.

157. Солнцева Н.П Добыча нефти-итеохимия природных ландшафтов / Н.П. Солнцева. М: МГУ, 1998: - 376с.

158. Солнцева Н.П: Нефть в почвах тундровых ландшафтах России: Уровни накопления. Закономерность миграции / Н.П. Солнцева // Криопедология-97:

159. Тез. докл. межд. конф. Сыктывкар,1997. - С.181.

160. Солнцева Н.П. Особенности загрязнения почв при нефтедобычи / Н.П. Солнцева, Ю.И. Пиковский // Миграция загрязняющих веществ в почвах и сопредельных средах. Л.: Гидрометеоиздат, 1980. - С. 76-82.

161. Солнцева Н.П. Проблемы загрязнения почв нефтью и нефтепродуктами: геохимия, экология, рекультивация / Н.П. Солнцева, Ю.И. Пиковский // Доклады симпозиума VII делегатского съезда ВОП. Ташкент, 1985.- Ч. 6. -С. 246-254.

162. Соромотин А.В. Техногенная трансформация природных экосистем таежной зоны в процессе нефтегазодобычи (на примере Тюменской области): Автореф. дис. . докт. биол. наук / А.В. Соромотин. Тюмень: ТюмГУ, 2007. -47с.

163. Способ очистки воды и почвы от загрязнений нефтью и нефтепродуктами: патент РФ № 2057724 / Калюжин В.А. Приоритет изобретения 1996.

164. Способ очистки воды и почвы от нефтяных загрязнений: патент РФ № , 2036714 / Яненко А.С., Аракелян Э.И., Герасимова Т.В. 20.07.1995.

165. Способ очистки воды и почвы от нефтяных загрязнений: патент РФ №. 93041474 / Яненко А.С., Аракелян Э.И., Герасимова Т.В. 20.03.1997.

166. Стенина Т.А. Микробиологическая характеристика некоторых почв Коми АССР / Т.А. Стенина. Тр. КФАН СССР. - 1964. - Вып.6. - 120с.

167. Стенина Т.А. Некоторые данные о микрофлоре почв Коми АССР / Т.А. Стенина. Тр. КФАН СССР. - Сыктывкар, 1959. - №8.- С.45.

168. Сулейманов P.P. Изменение свойств серых лесных почв при биологической рекультивации: Автореф. дис. . канд. с.-х. наук / P.P. Сулейманов. -Уфа, 1999. 24с.

169. Суржко А.Ф. Биотехнологические способы очистки нефтезагрязненных почв / А.Ф. Суржко, В.В. Хадеева, М.И. Янкевич // Новые технологии для очистки нефтезагрязненных вод, почв, переработки, утилизации нефтешламов.

170. Тезисы докладов междунар. конф. Москва, 2001. - С. 98-99.

171. Сушкина Н.Н. Об особенностях микрофлоры арктических почв / Н.Н. Сушкина //Почвоведение. 1960. - № 4. - С.75-83.

172. Тен Хак Мун. Влияние фотосинтезирующих бактерий и компоста на деградацию нефтепродуктов в почве / Тен Хак Мун, О.А. Кириенко, E.JI. Имранова // Прикл. биохимия и микробиология. 2004. - Т. 40. - №2. - С. 214219.

173. Терещенко Н.Н. Биологическая азотфиксация как фактор ускорения микробиологической деструкции нефтяных углеводородов в почве и способы ее стимулирования / Н.Н, Терещенко, С.В. Лушников, Е.В. Пышьева ,//г

174. Биотехнология. 2004. - № 5. - С. 69-79.

175. Тишкина Е.И. Влияние нефтяного загрязнения на свойства серых лесных почв Предуралья и пути восстановления их плодородия: Автореф. дис. . канд. биол.наук / Е.И. Тишкина. Воронеж: ВГУ, 1989. - 23 с.

176. Тишкина Е.И. Окультуривание нефтезагрязненных серых лесных почв / Е.И. Тишкина, Н.А. Киреева // Повышение плодородия почв в условиях интенсивной системы земледелия: Сб. статей. Уфа: БФ АН СССР, 1986. -С.145-151.

177. Трофимов С.Я. Изменение свойств почв под влиянием нефтяного загрязнения / С.Я. Трофимов, М.С. Розанова // Деградация и охрана почв. М.: МГУ, 2002. - С. 359-373.

178. Ферментативная и микробиологическая активность загрязненных нефтью глееподзолистых почв на разных стадиях их восстановления / Н.А. Киреева,

179. М.Ю. Маркарова, Т.Н. Щемелинина, Г.Ф. Рафикова // Вестник Башкирского университета. 2006. - №4. - С. 57-60.

180. Хабибуллина Ф.М. Микромицеты почв Северо-таежной подзоны Европейского Северо-Востока / Ф.М. Хабибуллина // Криопедология-97: Тезисы докладов междунар. конф. Сыктывкар, 1997. - С. 198 -199.

181. Хабиров И.К. Устойчивость почвенных процессов / И.К. Хабиров, И.М. Габбасова, Ф.Х. Хазиев. Уфа: БГАУ, 2001. - 327 с.

182. Хазиев Ф.Х. Изменение биохимических процессов в почвах при нефтяном загрязнении и активация разложения нефти / Ф.Х. Хазиев, Ф.Ф. Фахтиев // Агрохимия. 1981. - № 10. - 1981. - С.102-111.

183. Хазиев Ф.Х. Методы почвенной энзимологии / Ф.Х. Хазиев. М.: Наука, 1990. - 189с.

184. Хазиев Ф.Х. Методы почвенной энзимологии / Ф.Х. Хазиев. М.: Наука, 2005. - 252с.

185. Хазиев Ф.Х. Почвенный азот и эффективность азотных удобрений / Ф.Х. Хазиев, Н.С. Наумов. Уфа: Башк. Кн. Изд-во, 1979. - 127с. S

186. Хазиев Ф.Х. Системно-экологический анализ ферментативной активности почв / Ф.Х. . Хазиев. М.: Наука, 1982. - 204с.

187. Халимов Э.М. Экологические и микробиологические аспекты повреждающего действия нефти на свойства почвы / Э.М. Халимов, С.В. Левин, B.C. Гузев // Вестник Моск. ун-та. Сер. 17. Почвоведение. 1996. - №2. - С.59-64.

188. Цуцаева В.В. Влияние нефтедобывающей промышленности на некоторые компоненты природы Томской области / В.В. Цуцаева // Влияниепромышленных предприятий на окружающую среду. Тезисы докладов всес. конф. Иущино, 1984.- С. 74-79.

189. Шакирова Р.Х. Влияние агротехники на содержание свободных аминокислот в оподзоленном черноземе: / Р.Х. Шакирова, Ф.Х. Хазиев // Почвоведение. 1978. - №7.- С.63-71.

190. Шамаева A.AL Исследование процессов биоремедиации почв и объектов, загрязненных нефтяными углеводородами: Автореф. дис. . канд. биол. наук / • А.А. Шамаева: Уфа, 2007:-23с. v .V

191. Шашурин М.М. Влияние хронического действия экотоксикантов на-физиолого-биохимические свойства и стрессоустойчивость растений; ферментный потенциал почв Центральной и Южной Якутии. Автореф. дис. канд. биол. наук / М.М. Шашурин. Якутск, 2006. - 18 с.

192. Bartha R. Biotechnology of petroleum pollutant biodegradation: / R. Bartha // Microb. Ecol. 1986. - №12. - P.155-172: .

193. Bossert J. Fale of hydrocarbons. utilizing microorganisms / Jt Bossert; W. Rachtl //ToprEnzime a:^Terment^^Biotechnol:^^.9. Chichester. N-Y., 1984.- P.ll-77.

194. Brohon- B: .Influence of soil microbial activity level- om the determination* of contaminated soil toxicity using Lumistox and MetPlate bioassays / B. Brohon, R . Gourdon// Soil Biol. Biochem. 2000.- V.32. - P. 853-857. , .

195. Brown K.N. Effects of mineral nutriens studge application rate and application frequency on biodegradation of two oil sludgres / K.N. Brown, K.S. Donelly // Micrrobial. Ecol; 1983: - V.9. - №4. - P.363-373.

196. Brown Lewis R. Oil-degrading microorganisms / R. Brown Lewis // Chem. Eng. Prog. 1987. - V. 83. - № 10. - P. 35-40.

197. Bunnell F.L. Strukture and function of tundra ecosystems / Ed. by Ross wall, O.W.Heal/F.L. Bunnell. Stockholm, 1975. - P 173-194.

198. Chianelli R.R. / R.R. Ghianelli, T. Aczel, R.E Bare, G.N. George, M;W. Genowitz, M.G. Grossman; // Proc. Intern: Oil. Spill Gonf. Washington: Amer. Petrol. Inst., 1991. - P. 549-558.

199. Colwel, R.R. Ecological Aspects of Microbial Degradation of Petroleum in the

200. Marine Environment / R:R: Colwel, J.D: Walker // Critical Reviews in Microbiology. ■№ 5. 1977. - P.-423-445.

201. Debry, A. Natural; recolonization of a chronically oil polluted mangrove soil afta a de. pollution.process / A. Debry, F. Martin; E. Dutriex //Ocean and Shoreline Manag. 1990. - V.14. - № 3. - P.173-190.

202. Ellis R. Contamination of soils; by petroleum hydrocarbons /-Ri Ellis, RiSi: Adams //Adv. Argon. -1961. V.13. - РЛ97.' . . . \

203. Eaw G.M. The bacterial of an active oil field in the Northwestern- Gulf of Mexico / G.M. Faw, , S.L. Holloway, R.S. Sizemore // Abstr. 79 th Annu.j Meet. Amer. Soc. Microbiol., Angeles, Cal., Wash. (D;C.), 1979;- P. 192.

204. Foght J^ M: Bioremediatiom of oil spills / G.M. Faw, S.L. Holloway, R.S; Sizemore//Spill Technoli.Newsiett. 1992. - V. 17. - RUrlO.

205. Frankenberger W.T. Influence of crude oil and refined petroleum products: on soil;dehydrogenase activity/ W.T. Frankenberger, Ir. Johanson, I.B'. Johanson //-Ji, Environ. Qual. 1982. - V.ll. - № 4. - P.602-607.

206. Golwer A. Microbiologische und chemische Untersuchungen bei Unfallen mit Mineralolprodukten; / A; Golwer, K.H. Wallhausser // Erdol. Und Kohle-Erdgas-Petrohem. 1985: - V. 38. - № 2: - P. 70-80.

207. Gonzales G.S. Actividad ureasica у poblaciones microbians: effecto. del toluene / G.S. Gonzales, M.M. Perez, M.A. Fuente Marcos // An edafol; Y agrobiol.1982.41. -№ 11-12.-P. 2345-2355.

208. Hetti de G. Biodeterioration of hydrocarbon fuels / Hetti de G. // Chem. N. Z. 1993.-V. 57.-№4.-P. 14-15.

209. Jensen V. Bacterial flora of soil afte application of oily waste /V. Jensen // Oikos. 1975. V.25. - № 2. - P. 152-158.

210. Jong E. The effect of subsurface hydrophobic layer on mater and salt movement/ E. Jong // Canad.J. Soil Sc. 1983. - V.63. - № 1. - P.57-63.

211. Kiss S. Adences in soil enzimology (Part I-II) / S. Kiss // Studia Universitates Bades-Bolyai Biologia. 2001. - №1. - C.3-48.

212. Kiss S. Enzymology of Disturbed / S. Kiss, D. Pascf, M. Dragan-Bularda. -Soils.Amsterdam: Elsevier, 1998. P. 3-62.

213. Lee E. Bioremediation of petrolium contaminated soil using vergetation: a microbial study / E. Lee, M. K. Banks // J. Environ. Sci and Health. 1993. - V. 28. -P. 2187-2198.

214. Lee M. Bioventing for in situ remediation / M. Lee, M. Swindoll // Hydrol. Sci

215. J. 1993. - V. 38.-P. 273-282.

216. Limitations of soil enzemes as indicators of soil pollution, in Dink, R.P. (Ed.) / C. Trasar-Cepeda, M.C. Leiros, S. Seoane, F. Gil-Sotres // Enzymes in the Environment: Activity, Ecology and Applications. Oregon State Univ. Corvallis, 1999.-P.120.

217. Llanos C. Changens in the flora of soil fungi following oil waste application / C. Llanos, A. Kjoller // Oikos. 1976. - № 27. - P. 377-382.

218. Margesin R. Monitoring of bioremediation by soil biological activities/ R. Margesin, A. Zimmerbauer, F. Schinner // Chemosphere 40. 2000. - P.339-346.

219. Margesin R. Soil lipase a useful indicator of oil bioremediation / R. Margesin, A. Zimmerbauer, F. Schinner // Biotechnology Tchniques. - 1999. - V. 13. -P. 859-863.

220. Mihelilc J.R. Microbial degradation, of acenaphthene and naphthalene under denitrification conditions in soil- water systems/ J.R. Mihelilc, R.G. Luthy // Appl and Environ. MicrobioL. 1988. - V.54. - № 5. - P. 1188-1198.

221. Nakayama K. // Biotechnology. 1981. - Vol. 1. - P. 355-410.

222. Niewolak S. Microbiologiczne aspecty rekutywacji gleb uprawnych skazonych гора naftowa»/ S. Niewolak // Wiad ecol. 1978. - V.24. - № 2. - P. 109118.

223. Obuekwe C.O. Crude oil effect on the reduction of ferric iron in soil and by bacterial isolates / C.O. Obuekwe, A.B. Amangala // Microbios. Lett. 1986. - V.32. -№ 127-128.- P.'129-135.

224. Odu C.T. Oil degradation and microbiological- change in soils deliberately contaminated with petroleum hydrocarbons / C.T. Odu // Inst. Petrol. (Techn. Pap.). -1977. №5. - P. 1-11.

225. Pancholy S.K. Quantitative fluorencence analysis of soil lipase activity / S.K. Pancholy, J.O. Lynd // Soil Biol. Biochem. 1972. - V.4.- № 2. - P. 257-259.

226. Panicker G. / G. Panicker, J. Aislabie, D. Saul, A.K. Bej // Polar Biology. -2002. -V. 25. №1.- P. 5-11.

227. Petroleum degrading^ potential of mixed bacterial populations from, roadside environment / J. W. Johnson, M:P. Waniclista, R. J. Wodzinski, R.N. Gennaro // Abstr. 79 th Annu. Meet Amer. Soc. Microbiol., Loa Angtles, Cal:,,Wash. (D.C.) 1979. - P. 192.

228. Pettitet N.M. Soil urease: activity, stability and kinetic properties / N.M. Pettitet, A.R Smith, R.B. Freedman // Soil. Boil. Biochem. 1976. - V. 8. - №6.1. Р.479-489.

229. Рора A. Activitatea dehidrogenazica in sol ca test ecotoxicologic pentru poluanti anorganici si organici / A. Popa // Stud. Univ. Babes-Doliai. Biol. -1999. -№ 44(1-2).-P.169-178.

230. Popa A. Inductia enzimatica in sol ca test ecotoxicologic pentru poluanti anorganici si organici / A. Popa // Stud. Univ. Babes-Doliai. Biol. 2000. №45 (1). P.129-138.

231. Przedwojski R. Zmiany wlasciwasci scodowiska glebowego wywola ne silgnn skazeniem гора, naftowa / R. Przedwojski, J. Macowicz, J. Rytelewski // Rocz.glebozn. 1980. - V.31. - № 3-4. - P. 185-192.

232. Raymond R.L. Oil degradation in soil / R.L. Raymond, J.O. Hudson, V.W. Jamison //Appl. Environ. Microbiol. 1976. - V 30. - P.535-552.

233. Riviere J. Evolution de la microflore d'un sol impregned'hydrocarbures / J. Riviere, C. Gatellier // Ann. AGRON. 1976. - У 27. - №1. - P.85-99.

234. Rosenberg E. Biotechnical oil cltaning / E. Rosenberg // -Rapp.-Ingenjorsvetenskapsacad. 1985.- №278. - P.83-95.

235. Sexston A.J. Response of microbial populations in Arctic tundra soils to crude oil / A.J. Sexston, R.M. Atlas // Canad.J. Microbiol. 1977. - У. 23. - №10. - P.1327-1333

236. Shukla O.P. Biodegradation for environmental management / O.P. Shukla // Everyman's Science. 1990. - V. 25. - №2. - P.46-50.

237. Skujins J. Mettal ion a vailabiti during • biodegradation of waste oil a in semiarid soils / J. Skujins, S.O. McDonald // Environ. Biogeochem. Proc. 5th Int. sump. ISEB Stockholm, 1-5 June, 1981. Stockholm, 1983. - P. 341-350.

238. Stirling L.A. Microbial metabolism of alicyclic hydrocarbons Isolation and properties of cyclohexanedegrading bacterium / L.A. Stirling, R.J. Watkinson, I.J. Higgins // J. Gen. Microbiol. 1977. - V. 99. - P. 119-125.

239. Takachashi D. Studies on the utilization of hydrocarbons by microorganisms. Pt V. Screening of yeasts cell production from hydrocarbons and their RNA contents

240. D. Takachashi, J. Kawabata, K. Yamada // Arctic. Biol. Chem. 1965. - V. 29. - №9. -P. 796-803.

241. Udo EJ. The effect of oil pollution of soil on generation, growth and nutrient uptake of corn / E.J. Udo, A.A. Fayemi // J. Environ. Quality. 1975. - V. 4. - № 4. -P.537-540.

242. Verstaeten L.MJ. Interaction between urease activity and soil characteristics / L.MJ. Verstaeten //Agrochimica. 1978. V.22. - №5/6. - P.455-464.

243. Westlake D.W.S. In situ degradation of oil in a soil of the Northwest Territories / D.W.S. Westlake, A.M Jobson, F. D. Cook // Canad. J. Microbiol. 1978. - V.24. -№3. - P.254-260.

244. Whyte L.G. / L.G. Whyte, C.W. Greer, W.E. Inniss // Canad. J. Microbiol. -1996.-V.42. №2. - P.99-106.

245. Whyte L.G. / L.G. Whyte, S.G. Slagman, F. Pietrantonio et. Al.// Applied and Environ. Microbiol. 1999. V.65. - №7. - P.2961-2968.

246. Wyszkowska J. Biochemical properties of soil contaminated by petrol / J. Wyszkowska, J. Kucharski // Polish Journal of Environmental Studies. 2000. - V.9.-№6.-P. 479-485.

247. Wyszkowska J., Kucharski J. Correlation between namber of microbes and degree of soil contamination by pertrol / J. Wyszkowska, J. // Polish Journal of Environmental Studies. 2001. - V.l0. - № 3. - P. 175-181.