Биохимические механизмы нарушения метаболизма костной ткани под действием низкомолекулярных хлорорганических соединений

Рамазанова, Лейсан Миннимухаматовна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Биохимические механизмы нарушения метаболизма костной ткани под действием низкомолекулярных хлорорганических соединений
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Биохимические механизмы нарушения метаболизма костной ткани под действием низкомолекулярных хлорорганических соединений"

На правах рукописи

Рамазанова Лейсан Миннимухаматовна

БИОХИМИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ НАРУШЕНИЯ МЕТАБОЛИЗМА КОСТНОЙ ТКАНИ ПОД ДЕЙСТВИЕМ НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНЫХ ХЛОРОРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ (клинико-экспериментальные исследования)

03.00.04 - биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

□ □348 14 ГЛ

Уфа - 2009

003481473

Работа выполнена на кафедре биологической и биоорганической химии ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Росздрава»

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор Камилов Феликс Хусаинович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Шараев Петр Низамиевич

Ижевская государственная медицинская академия Росздрава

доктор биологических наук профессор Мустафина Ольга Евгеньевна

Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра РАН Ведущая организация:

Челябинская государственная медицинская академия Росздрава

Защита состоится 2009г. в « часов на заседании

Диссертационного совета ДМ 002.133.01 при Учреждении Российской Академии наук Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра РАН по адресу: Уфа, пр. Октября, 71

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Уфимского научного центра РАН (Уфа, пр. Октября, 71) и на сайте ИБГ УНЦ РАН www.ibg.anrb.ru/dissov.html, E-mail: molgen@anrb.ru

Автореферат разослан «

Щълу- 200 Sr.

Ученый секретарь диссертационного совета

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Химические загрязнители занимают ведущее место в комплексе антропогенных воздействий на окружающую среду и здоровье населения. Синтез и внедрение в промышленное производство все новых соединений неуклонно увеличивает состав и объемы экотоксикантов.

Республика Башкортостан является крупнейшим регионом России с нефтехимической и химической промышленностью. По Республике Башкортостан профессиональная патология в химической отрасли в 2002-2006г.г. составила

3.1 случаев на 10000 работающих [Кондрова, 2008]. Вредные условия труда являются причиной формирования не только профессиональной патологии, но становятся патогенетическим фактором развития и прогрессирования общих заболеваний, не относящихся к категории профессиональных. Все чаще при обследовании рабочих регистрируется нарушения здоровья в виде функциональных и метаболических изменений отдельных органов и тканей, подчас скрытых, но имеющих тенденцию к росту по мере увеличения стажа работы в неблагоприятных условиях труда.

К важнейшим социально-медицинским проблемам современности, наряду с сердечно-сосудистыми, онкологическими заболеваниями и сахарным диабетом, относится остеопороз [Казимирко и др., 2006]. Эпидемиологические исследования состояния минеральной плотности костной ткани (МПКТ) свидетельствуют о широкой распространенности остеопороза и существенном негативном влиянии этого заболевания на состояние здоровья населения.

Остеопороз у мужчин остается малоизученной проблемой [Мсахалая, Ка-линченко, 2004]. Остеопоротические переломы у мужчин регистрируются в 2-3 раза реже, чем у женщин. Частота переломов бедра среди мужчин составляет 10,3-11,0%, у женщин 23,0-26,9%, но смертность мужчин в результате осложнений от данной патологии с возрастом повышается в 3,2 раза, тогда как у женщин - в

2.2 раза [ONell et al., 1996]. По переломам позвоночника смертность среди мужчин в 2,4 раза выше, чем среди женщин с аналогичными переломами [Melton, 1988]. Среди факторов риска развития остеопороза у мужчин отмечаются пожилой воз-

раст, курение, алкогольная зависимость, прием медикаментов, неадекватная физическая активность и иммобилизация, но основное внимание уделяется ги-поганадизму [Мсхалая, Калинченко, 2004]. Отмечается корреляция между снижением уровня свободного тестостерона и падением МПКТ, резкое уменьшение МПКТ после кастрации молодых мужчин [Jackson et al., 1992].

В литературе практически отсутствуют сведения о влиянии химических факторов, загрязняющих воздушную среду рабочих помещений, на МПКТ у мужчин-работников химических производств. Изучение влияния вредных производственных факторов на состояние здоровья, разработка стратегии патогенетически обоснованных профилактических и лечебных мероприятий, является актуальной медико-социальной задачей.

Цель исследования. Охарактеризовать метаболизм костной ткани у мужчин-работников химического предприятия, контактирующих с низкомолекулярными хлорорганическими соединениями, и при хронической интоксикации дихлорэтаном самцов-крыс в эксперименте.

Задачи исследования:

1. Оценить состояние минеральной плотности костной ткани у мужчин-работников химического производства (ЗАО «Каустик» г. Стерлитамак) в зависимости от возраста и стажа работы и изучить содержание в периферической крови показателей кальциево-фосфорного обмена (Са общий, фосфор, активность общей щелочной фосфатазы).

2. Определить содержание в крови фолликулостимулирующего, лютеинизи-рующего гормонов, пролактина, тестостерона и эстрадиола у работников химического производства в зависимости от возраста.

3. Изучить состояние оксидантно-антиоксидантной системы у работников производства, контактирующих с низкомолекулярными хлорорганическими соединениями.

4. Исследовать в трубчатых костях самцов белых крыс при хроническом действии дихлорэтана содержание свободного и белковосвязанного оксипролина, гликозаминогликанов, интенсивность биосинтеза коллагена и уровень общего

Са, Г^, Р, С-телопептидов, активность общей и костной щелочной фосфатаз в сыворотке крови.

5. Изучить интенсивность свободнорадикального окисления и состояния анти-оксидантной защиты (хемилюминесценция, продукты перекисного окисления липидов, общую антиокислительную активность, активность супероксиддисму-тазы, каталазы и глутатионпероксидазы) в крови и гомогенате костной ткани у самцов крыс, подвергшихся интоксикации дихлорэтаном в дозах 0,051Л35о и ОД1Х>50.

6. Определить содержание половых и гонадотропных гормонов в периферической крови (фолликулостимулирующего и лютеинезирующего гормонов, про-лактина, тестостерона и эстрадиола) у самцов - крыс при хроническом действии дихлорэтана.

7. Изучить патогистологические изменения в структуре костной ткани при хроническом действии ДЭ в суммарной дозе 0,11Д50 у крыс-самцов.

Научная новизна. Впервые получены данные, характеризующие метаболизм костной ткани при воздействии производственных факторов у работников химического предприятия. Показано, что у мужчин, имеющих производственный контакт с различными хлорорганическими веществами (дихлорэтан, хлор-пропан, хлорвинил, хлорпропен, дихлорпропан, эпихлоргидрин и др.), во всех возрастных группах чаще, чем у работников контрольной группы, обнаруживаются остеопения и остеопороз. Установлено, что в группе этих мужчин более, чем в два раза чаще выявляется интенсификация процессов свободно-радикального окисления (СРО), наблюдается дезинтеграция гормонального статуса со снижением уровня тестостерона, повышением содержания эстрадиола, фолликулостимулирующего (ФСГ) и лютеинизирующего (ЛГ) гормонов.

Выявлены особенности изменений метаболизма основных компонентов органического матрикса костной ткани (коллаген, гликозаминогликаны (ГАГ)) и патогистологической картины трубчатых костей самцов крыс при хроническом воздействии дихлорэтана в низких концентрациях.

Эксперименты с хронической интоксикацией самцов крыс дихлорэтаном

в суммарных дозах 0,05 1ЛЭ50 и 0,1 ЬО50 позволили выявить, что основными механизмами развития нарушений метаболизма костной ткани в мужском организме при длительном воздействии хлорорганических соединений являются интенсификация свободнорадикапьных процессов в костях и снижение продукции половых гормонов.

Теоретическая и практическая значимость. Впервые оценена распространенность остеопенического синдрома у мужчин-работников химического предприятия, имеющих производственный контакт с хлорорганическими соединениями в низких концентрациях. Выявлены ведущие механизмы остеоток-сического действия хлорорганических токсикантов в мужском организме.

Полученные результаты являются фундаментальной основой для разработки, апробации и внедрения оптимальных схем профилактики и лечения ос-теопенических состояний у работников химических предприятий, связанных с хлорорганическим производством.

Разработаны и предложены профилактические мероприятия для работников ЗАО «Каустик» с установленными изменениями минеральной плотности костной ткани.

Внедрение результатов исследования в практику. Результаты и основные положения диссертационной работы включены в педагогическую практику и учебный процесс кафедры биологической и биоорганической химии ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию», внедрены в диагностическую и лечебно-профилактическую деятельность муниципальных учреждений здравоохранения «Городская поликлиника №1» и «Городская поликлиника №6» г. Стерлитамака Республики Башкортостан, ООО «Проммедэко» г. Уфы Республики Башкортостан.

Апробация результатов работы. Основные результаты диссертации доложены на 72, 73, 74-й итоговых Республиканских научных конференциях студентов и молодых ученых с международным участием «Вопросы теоретической и практической медицины» (Уфа, 2007, 2008, 2009), на Всероссийской научно-

практической конференции, посвященной 75-летию башкирской нефти (Уфа, 2007), на Республиканской конференции молодых ученых Республики Башкортостан «Медицинская наука-2007», (Уфа, 2007), на Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные вопросы современной биохимии», (Киров, 2007), на IV съезде Российского общества биохимиков и молекулярных биологов (Новосибирск, 2008), на второй Международной научно-практической конференции «Проблемы биологии, экологии, географии, образования: история и современность» (Санкт - Петербург, 2008), на 6-й международной научно-практической конференции «Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины» (Астрахань, 2008), на Всероссийской научно-практической конференции «Нефть и здоровье» (Уфа, 2009).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 16 работ, из них 2 статьи в журналах, рекомендованных ВАК.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 172 страницах, содержит 20 таблиц, 33 рисунка и приложение (31 рисунок); включает введение, обзор литературы, результаты исследования и их обсуждение, заключение, выводы, практические рекомендации и список литературы, включающий 284 источника, из которых 121 иностранных. :

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования. В работе представлены результаты обследования 212 работников ЗАО «Каустик» (г. Стерлитамак, Республика Башкортостан). Исследования проводились во время плановых профилактических медицинских осмотров с участием терапевта, невропатолога, окулиста, отоларинголога, травматолога-ортопеда и других специалистов. Обследуемые работники были разделены на 2 группы: основную - мужчины - работники профессий, имеющие постоянный производственный контакт с различными углеводородами и их хлорированными производными и контрольную - работники административно-управленческого аппарата предприятия. Возраст обследуемых в обеих группах колебался от 20 лет до 61 года.

С целью выявления остеопении и остеопороза у работников была проведена ультразвуковая остеоденситометрия на определение МГЖТ [(Speed of Sound - SOS, м/с) на приборе «Omnisense 7000S» фирмы Sunlight Medical Ltd (Израиль) с применением общеевропейской программы]. Числовым выражением состояния МГЖТ является Т-критерий - количество стандартных отклонений (SD) от данного показателя молодых здоровых лиц (20-29 лет) в возрасте достижения максимальной МПКТ. Колебания Т-критерия в размахе 1,0 SD соответствует норме. При снижении МПКТ от -1 до -2,5 SD диагностируется ос-теопения. Если показатели МПКТ равны -2,5 SD и ниже, выявляется ОП; исследовано состояние СРО с использованием отечественного хемилюминометра XJI-003 [Владимиров, 1989] и ОАА плазмы крови [Клебанов и др., 1988]; изучены в плазме крови уровни гонадотропных и половых гормонов с помощью стандартных наборов [тестостерон - RIA Testosterone, direct (Франция), эстра-диол - RIA ESTRADIOL (Франция), пролактин (ЛТГ) - PROLACTIN IRMA ЮТ (Чехия), ЛГ - LH IRMA KIT (Чехия), ФСГ - FSH IRMA KIT (Чехия)], содержание общего кальция, фосфатов, магния и активности общей щелочной фосфата-зы (ОЩФ) с использованием наборов реактивов [общего кальция, фосфора, магния - «HUMAN» (Германия), ОЩФ - «Новофосфаль» фирмы ЗАО «Вектор-Бест»].

Экспериментальные исследования выполнены на 220 белых беспородных самцах крыс половозрелого возраста массой 180-230 г. Животные содержались в одинаковых условиях, на стандартной диете вивария. При проведении опытов соблюдали положения Хельсинской декларации о гуманном отношении к животным.

Учитывая, что работники ЗАО «Каустик» находятся под влиянием производственных факторов, в основном постоянного интермитирующего действия низкомолекулярных ациклических хлорорганических соединений, включая ДЭ, были проведены эксперименты с хронической интоксикацией животных ДЭ. ДЭ в оливковом масле вводили ежедневно внутрижелудочно с помощью специального металлического зонда в течение 60 дней в суммарных дозах 25 мг/кг

(0,05 LD5o) и 50 мг/кг (0,1 LD50). Контрольная группа животных получала только оливковое масло.

У животных в крови и гомогенатах эпифизов трубчатых костей (бедренная) исследовали состояние оксидантно-антиоксидантной системы (хемилюми-несцентный анализ по Владимирову (1989); содержание ТБК-реагирующих продуктов (ТБК-РП) с помощью набора реактивов «ТБК-АГАТ», ООО АГАТ-МЕД, Москва; уровень продуктов ПОЛ по Волчегорскому (1989). Активность каталазы [КФ 1.11.1.6] определяли по методу Королюк с соавт.(1988), СОД [КФ 1.15.1.1] и ГПО [КФ 1.11.1.9] с помощью наборов RANSOD и RANDOX фирмы Randox Labor. Ltd., ОАА по методике, описанной Клебановым (1988). В сыворотке крови изучали уровни маркеров костного метаболизма: ОЩФ и КЩФ наборами ИФА Metra BAR EIA Kit фирмы Quidel Corporaation, С-концевых.тело-пептидов - ИФА Serum Cross Laps ELISA фирмы Nordic Bioscience Diagnostic A/S (Дания), содержание кальция, магния и фосфора.

У животных определяли массу тела, печени и трубчатых костей: бедренной, болыпеберцовой, плечевой - на электронных весах Scout Pro (Китай). Окраской гематоксилином-эозином изучали гистологическую картину срезов бедренной кости. В гомогенатах костной ткани определяли содержание СО и БСО, общих ГАГ по Шараеву с соавт. (1990), интенсивность включения меченного 14С-пролина в коллаген костной ткани на установке «Бета-2» с использованием сцинтилляционной жидкости (раствор Брея).

В плазме крови определяли уровни половых и гонадотропных гормонов.

Статистические методы исследования. Статистическую обработку полученных данных проводили с помощью профессионального пакета Statistica 6,0 фирмы Stat Soft. В группах выборки оценивали следующие параметры: значения средних величин, среднеквадратичные отклонения, соответствие распределения признака закону нормального распределения. Сравнение групп проводили с использованием параметрических (t - критерий Стьюдента) методов. Различия считали достоверными при уровне значимости Р<0,05.

Благодарности. Выражаем благодарность директору ООО «Проммедэ-ко» Г.В. Ивановой и профессору кафедры гистологии ГОУ ВПО «БГМУ Росзд-рава» Ф.А. Каюмову за помощь в проведении данной работы.

Результаты исследования мужчин - работников химического производства У 113 работников проведено обследование МПКТ основных профессий химического предприятия (ЗАО «Каустик»), имеющих производственный контакт с различными хлорорганическими соединениями (ДЭ, хлорпропан, хлор-пропен, хлорвинил, дихлорпропан, эпихлоргидрин и др.) и алифатическими углеводородами жирного ряда, и у 31 работника административно-управленческого аппарата, бухгалтерии (группа контроля) в возрасте 20-61 года.

Состояние минеральной плотности костной ткани

У мужчин работников основной группы снижение МПКТ составило 94,7%, а контрольной группы - 61,3%. В основной группе остеопения была выявлена у 69,0% (Т-критерий от -1,0 до -2,5 80), остеопороз - у 25,7% (Т-критерий от -2,5 БИ) (рис.1).

•0 основная группа контрольная группа

80 п

20-29 30-39 40-49 50-61 20-29 30-39 40-49 50-61 годы

Востеопения ■ остеопороз □норма

Рисунок 1. Частота остеопении и остеопороза у работников в зависимости от возраста

Показатели кальций-фосфорного обмена и активность ОЩФ

Результаты исследования биохимических показателей, характеризующих состояние минерального обмена: общего Са, Р, Mg и активность ОЩФ (рис.2), не противоречат данным, полученным при остеоденситометрии. Са и Р входят в состав основного вещества костной ткани - гидроксиапатита кальция. Недостаток Са2+ приводит к снижению пика костной массы, дефицит Р и Mg - к подавлению функции остеобластов и ограничению костной минерализации [Marie et al,1993].

Са Р Mg ОЩФ

Рисунок 2. Изменения содержания Са, Р, Mg и ОЩФ у мужчин - работников химического производства У работников основной группы в сыворотке крови выявлено повышение

активности ОЩФ и снижение содержания Са, Mg и Р. Показатели фосфорно-

кальциевого обмена, активность ОЩФ подтверждают развитие у работников

основных профессий химического предприятия остеопенического синдрома.

Интенсивность СРО и состояние антиокислительной защиты

У 92 мужчин основной группы и у 30 - контрольной была исследована

интенсивность течения процессов СРО методом хемилюминесценции плазмы

крови и оценена антиокислительная активность плазмы (табл.1).

Таблица 1-Показатели процессов СРО в плазме крови у работников основной и

контрольной групп со снижением антиоксидантной защиты

Группа обследованных Показатели ХЛ, усл.ед. ОАА, %

Спонтанная светимость Быстрая вспышка Светосумма

Контрольная 0,44+0,012 4,27±0,9201 3,13+0,123 79,4+1,16

Основная 0,89±0,053* 5,29±0,25* 3,57±0Д91* 73,3±2,44*

Примечание: в данной и последующих таблицах *) Р<0,05 по сравнению с контрольной группой.

У рабочих повышены в плазме крови все показатели СРО, ОАА плазмы крови у рабочих по сравнению с контролем, наоборот, снижена.

Изменение содержания половых и гонадотропных гормонов Литературные данные свидетельствуют, что воздействие хлорорганиче-ских соединений приводит к развитию дефицита андрогенов [Галимов, Ками-лов, 2002; Козярин, 2003; Мухорямов и др., 2005], контролирующих метаболизм костной ткани. Результаты исследований мужчин, работающих в производственных цехах, во всех возрастных группах уровень тестостерона, контролирующего анаболические реакции в костной ткани, существенно снижен, что обнаруживается на фоне неизменного содержания эстрадиола в возрасте 20-39 лет и статистически значимого его повышения в возрастных группах с 40 лет до 61 года (табл. 2). Это приводит к выраженному падению коэффициента отношений мужских и женских половых гормонов.

Таблица 2 - Уровень половых и гонадотропных гормонов у _мужчин - работников химического предприятия_

Возраст Группы обследуемых Гормоны

Тестостерон, нМ/л Эстрадиол, пг/мл ФСГ, Ед/л ЛГ, Ед/л Прол актин, нг/мл

20-39 лет Контроль, п=20 24,2±2,32 34,3 ±3,06 13,1±1,50 7,0+0,40 14,7±0,96

Рабочие, п=8 13,6±2,75* 43,5±9,04* 20,5±8,52* 25,9±7,97* 3,5+0,35*

40-49 лет Контроль, п=19 20,2±3,41 31,2±2,70 12,7±1,91 6,8±0,76 12,3+1,11

Рабочие, п=8 8,8±2,52* 140,6+12,1* 41,4±10,39* 25,0±5,93* 20,1±4,02*

50-61 лет Контроль, п=16 15,6±1,83 38,6±3,10 12,0±1,38 4,8±0,36 12,0±0,86

Рабочие, п=8 10,3±1,42* 128,5±27,61* 48,4+10,33* 15,2±3,92* 8,9+3,07*

С целью выявления особенностей влияния хлорорганических производ-

ных низкомолекулярных алифатических углеводородов на метаболизм костной ткани и уточнения основных патохимических механизмов развития остеопени-ческого синдрома у работников химического производства, в дальнейшем были проведены серии экспериментов с интоксикацией самцов крыс одним из соеди-

нений, постоянно присутствующих в атмосфере производственных помещений -ДЭ.

Результаты экспериментальных исследований самцов - крыс при интоксикации дихлорэтаном Характеристика метаболизма костной ткани

У подопытных групп крыс при действии ДЭ наблюдалось дозозависимое снижение концентрации Са, Р и Mg в плазме крови, что является отражением нарушении кальций - фосфорного обмена и метаболизма костной ткани, поскольку в обмене этих макроэлементов важнейшую роль играет костная ткань [Скальный, Рудаков, 2004].

Состояние костного метаболизма, характеризующие активность остеокластов и остеобластов, уровень компонентов костного матрикса, которые высвобождаются и поступают в кровь в процессе формирования или резорбции костной ткани, отражают ряд биохимических маркеров [Ермакова, Пронченко, 2003]. Определение ОЩФ и КЩФ, показывающих интенсивность процессов остеогенеза, и С - концевых телопептидов ([3 - Cross Laps), отражающие, выраженность костной резорбции с катаболизмом органического матрикса костей, выявило, что у подопытных животных увеличиваются показатели как процессов остеогенеза, так и резорбции. При этом у крыс, получивших ДЭ в суммарной дозе 0,05 LDso повышение активности КЩФ составляет 213,8% к контролю, а С - телопептидов лишь 161,7%. При действии большей дозы токсиканта -0,1 LD50 катаболические процессы начинают превалировать над анаболическими (рис, 3).

В эпифизах трубчатых костей подопытных животных были исследованы содержание коллагена и ГАГ, интенсивность биосинтеза коллагена, выраженность ПОЛ и состояние антиоксидантной защиты.

Рисунок 3. Изменения показателей биохимических маркеров с увеличением дозы интоксикации самцов - крыс ДЭ, *) Р<0,05

В таблице 3 представлены данные содержания фракций оксипролина и ГАГ в эпифизах бедренной кости самцов крыс при хронической интоксикации ДЭ. Как видно, у подопытных животных наблюдается некоторое снижение содержания БСО, общих ГАГ и повышение уровня СО. Эти данные характеризуют превалирование катаболических процессов.

Таблица 3 - Изменение содержания фракций оксипролина и уровня ГАГ в

костной ткани у самцов крыс при интоксикации ДЭ, п=10

Группа живот- Показатели

ных СО, БСО, ГАГ,

мкмоль/г мкмоль/г мкмоль/г

Контрольная 0,48+0,01 3,59±0,47 1526±56,98

ДЭ, 0,05 Ш50 0,50+0,01 3,52±0,23 1508±9,56

ДЭ, 0,1 1Дю 0,51+0,01 3,51+0,12 1487±12,81

Об интенсивности синтеза коллагена в костной ткани самцов крыс в ус-

ловиях интоксикации ДЭ судили по включению в его состав 14С-пролина. При

этом мы исходили из данных, свидетельствующих о том, что пролин в костной

ткани преимущественно включается в состав основного белка костного матрик-

са - коллагена I типа [Яауп, 1997]. Интоксикация ДЭ приводит к падению тем-

пов инкорпорации 14С-пролина в коллагеновые белки. Эти изменения носили

отчетливый дозозависимый характер. У животных, получавших ДЭ в дозе

0,1 ГГ>5„ отмечалось статистически значимое снижение биосинтеза коллагена в

костной ткани по сравнению с контролем (рис. 4).

120

100 - *

80 - | я □ контроль

60 ■ в Н0.051Д50

40 ■ ш 11Ё □ 0,1 Щ50

20 • 9

0 ш

Рисунок 4.Уровень удельной радиоактивности коллагена костной ткани при введении 14С - пролина у самцов крыс, *) Р<0,05

Гистологические показатели изменения костной ткани при действии дихлорэтана

У подопытных групп крыс, получавших ДЭ в суммарной дозе 0,1ЬД50 в

течение 2-х месяцев, и у контрольной группы животных исследовали гистологическую картину состояния бедренных костей (рис. 5). Гистологическая картина, свидетельствует о развитии остеопороза со снижением содержания минерального вещества, истончением, рассасыванием и дезорганизацией расположения костных пластинок, явлениями деструкции и остеодистрофии, активацией остеогенеза в отдельных участках эпифиза и диафиза кости, заменой костной ткани волокнистой соединительной тканью и нарушением минерализации вновь образованных остеонов.

А Б

Рисунок 5. А. Остеоны с кровеносными сосудами бедренной кости контрольной группы животных Б. Остеодистрофия бедренной кости подопытных животных В. Разрастание соединительной ткани с ангиогенезом бедренной кости подопытных животных Г. Деформация костных пластинок и сужение просвета канала остеона бедренной кости подопытных животных. Окраска гематоксилином - эозином. Микрофотография. Ок. 10, об. 40

Показатели состояния окидантно-антиоксидантной системы

Об активности процессов свободнорадикального окисления и липоперок-сидации судили по изменению параметров железоиндуцированной хемилюми-несценции и накоплению продуктов ПОЛ в плазме крови и гомогенате эпифизов бедренной кости экспериментальных животных (табл. 5).

Таблица 5 - Влияние дихлорэтана на содержание продуктов ПОЛ в плазме крови и в гомогенате костной ткани у самцов крыс

Группа крыс Плазма крови ТБК - пр.

Гептановая фаза Изопропановая фаза

ДК КД и СТ ДК КД и СТ

Контроль, п=7 1,06±0,02 1,03±0,01 0,89±0,03 0,84+0,03 1,26±0,26

0,051Д,0, п=13 1,07+0,04 0,98±0,05 1,04+0,01* 1,05+0,08* 2,23+0,31*

0,1ЬД,(ь п=9 0,94+0,03*'" 2,0510,11*'" 1,16±0,07* 1,03 ±0,02* 2,63±0,13*'я

Гомогенат эпифиза бедренной кости

Контроль, п=7 1,05+0,09 0,97±0,09 1,08+0,10 0,96+0,11 1,48±0,30

0,05 иы п=13 1,05+0,02 0,92±0,03 1,30±0Д6 1,12+0,17 1,50±0,21

ОДЬДзо, п=9 1,11+0,02" 2,79±0,23*'# 1,05±0,06 1,04+0,12 1,85±0,11*'"

Примечание: в данной и последующих таблицах ) Р<0,05 между подопытными группами

Результаты исследования показали, что при интоксикации ДЭ в дозе 0,1Щ5о в плазме крови наблюдалось статистически значимое повышение первичных - диеновых конъюгатов ацилгидроперекисей (ДК) и вторичных продуктов липопероксидации (ПОЛ) - кетодиенов и сопряженных триенов (КД и СТ) изопропаноловой фазе, содержащей преимущественно полярные липиды (фосфолипиды и др.). У данной группы животных было выявлено повышение содержания продуктов, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой (ТБК - продукты). Усиление процессов ПОЛ выявлялось уже при интоксикации дозой 0,05ЬД5(|, что сопровождалось повышением содержания вторичных продуктов липопероксидации в плазме крови до 176,9% от аналогичных показателей у контрольных животных. У крыс, получавших ДЭ в дозе 0,1 Щ50, было выявле-

но особенно резкое повышение уровня ТБК - продуктов: в плазме крови до 208,7%, в гомогенатах эпифиза бедренной кости до 125,0%.

Данные по исследованию хемилюминесценции в гомогенатах эпифиза бедренной кости и плазме крови крыс, при интоксикации ДЭ, также свидетельствует об усилении всех показателей, характеризующих интенсификацию процессов СРО в гомогенатах эпифиза бедренной кости и в сыворотке крови животных, подвергнутых воздействию ДЭ, особенно в суммарной дозе 0,1ЬД5о (рис. 6).

0.05Щ50 0.1Щ50

|«ЗРе2» ОБр ПЬ ОНРе2» I 0.05Щ50 0.1 Щ50

Рисунок 6. Показатели хемилюминесценции сыворотки крови (А) и гомогената

бедренной кости (Б) крыс-самцов (в % к контролю); БРе2*- светосумма, 5р -спонтанная светимость, И - амплитуда быстрой вспышки, НРе2+ - максимальная амплитуда медленной вспышки

При поступлении ДЭ в дозе 0,1ЬД50 отмечалось наиболее выраженное уменьшение длительность латентного периода (К) между быстрой и медленной вспышками железоиндуцированной хемилюминесценции, что свидетельствует о снижении антиоксидантных резервов или угнетении их антиокислительной способности. При воздействии ДЭ суммарной дозой 0,051Д5О продолжительность интервала II в сыворотке крови и в гомогенатах бедренной кости не отличались от контрольных показателей.

О негативном влиянии ДЭ на состояние антиокислительной защиты у животных свидетельствуют и результаты определения активности основных антиоксидантных ферментов, и ОАА плазмы крови, и гомогенатов кости (табл.

6). ОАА, которая отражает, в основном, неферментативное звено антиокислительной защиты, и в плазме крови, и в гомогенате костной ткани падала статистически несущественно. При интоксикации дозой ДЭ 0,051Д5о в сыворотке крови и эритроцитах отмечалось достоверное ингибирование активности анти-оксидантных ферментов - каталазы и СОД, а в гомогенате бедренной кости эти изменения носили лишь характер тенденции. Увеличение дозы ДЭ приводило к более выраженному подавлению активности ферментов в сыворотке крови и гомогенате бедренной кости. Так, в гомогенатах кости активность каталазы снизилось до 74,34%; СОД - до 86,49%; ГПО - до 89,52% по сравнению с контрольными показателями.

Таблица 6 - Активность антиоксидантных ферментов и общая антиокислительная активность костной ткани и крови при хронической интоксикации _ дихлорэтаном самцов крыс_

Фермент Группа крыс

Контроль, п=7 0,05ЬД50, п=13 ОДЬДяь п=9

Катал аза Сыворотка, мкмоль/л 9,77±0,66 6,90±0,89* 5,37+0,88*

Эритроциты, мкмоль/л 2946,88+196,89 1979,96± 128,83* 1480,68±64,14*'"

Гомогенат бедренной кости, мкмоль/мг 7,56±0,37 6,17±0,42* 5,62±0,41*

сод Сыворотка, Е/мл 157,57+11,43 122,75113,04* 133,0±16,27

Гомогенат бедренной кости, Е/мг 131,1+12,11 122,8± 11,84 113,4±13,07*

ГПО Кровь, Е/л 1288,73±240,36 698,546± 131,420* 279,465±124,180*'"

Гомогенат бедренной кости, Е/мг 180,9+10,56 209,3+30,28* 129,9+53,37*

ОАА, % иигиби-рования Плазма 26,6±4,62 - 21,3±6,06 *

Гомогенат кости 67,8±2,46 - 49,4+11,31*

Изменение содержания половых и гонадотропных гормонов

Хроническое воздействие химических агентов воздуха производственных помещений является сильным стрессорным фактором, приводящим к сдвигам

гормонального фона в мужском организме [Козярин, 2003; Мухорямов и др., 2005]. Особое внимание при длительном воздействии органических соединений привлекают половые гормоны, оказывающие существенное влияние на метаболизм костной ткани.

При интоксикации ДЭ в дозе 0,05ЬД50 изменения уровня ФСГ и тестостерона носили характер тенденции и не претерпевали статистически значимых отклонений от контрольных значений. Более выраженные сдвиги были зарегистрированы при поступлении токсиканта в дозе ОДЬДяо. Обращает внимание снижение до 79% от контроля содержания основного мужского гормона - тестостерона. А уровень эстрадиола статистически значимо повышался до 173%.

Содержание гипофизарных гонадотропинов при интоксикации дозой ОДЬД50 снижалось: ЛГ - до 58,4%, ФСГ - до 75,4% от референтных значений, а содержание пролактина, наоборот, увеличивалось по сравнению с контролем в 1,3 раза. В целом, изменения уровней определяемых гормонов носили отчетливый дозозависимый характер (табл. 7).

Таблица 7 - Уровень гонадотропных и половых гормонов у самцов крыс

при хронической интоксикации ДЭ

Группа животных Гормон

ФСГ, Ед/л ЛГ, Ед/л Пролактин, нг/мл Эстрадиол, пг/мл Тестостерон, нмоль/л

Контрольная, п=7 5,01±0,06 1,42+0,06 1,25±0,04 18,75+2,34 26,47±1,48

ДЭ 0,05Ь05о, п=13 4,81±0,06 1,02±0,04* 1,44±0,04 * 25,54±0,86 * 19,26±2,81*

ДЭО,11Х>50, п=9 3,77±0,07*'# 0,83 ±0,04*'* 1,66±0,04*'" 32,48±1,3б*'* 20,95±1,46*

Таким образом, отравление ДЭ сопровождается изменениями профиля половых гормонов в сыворотке крови подопытных животных с преимущественным снижением содержания тестостерона и одновременным повышением концентрации эстрадиола.

Антагонистическое влияние эстрогенов по отношению к андрогенам, а их уровень при введении ДЭ резко увеличивается, прежде всего, сказывается на подавлении гипоталамо - гипофизарно - гонадного секреторного механизма.

При интоксикации ДЭ у подопытных животных снижалась относительная масса печени, нарушались метаболические функции: уменьшался уровень альбумина, повышалось содержание общего билирубина и активность аланиновой и аспарагиновой трансаминаз. Печень является органом, участвующим в активации витамина Д, контролирующего абсорбцию Са в кишечнике, принимающего активное участие в метаболизме костной ткани [Шварц, 2005].

Обобщая результаты исследования влияния хронической интоксикации ДЭ, можно констатировать, что патохимические механизмы токсического действия хлорпроизводных алифатических углеводородов на состояние костной ткани связаны с интенсификацией процессов СРО с одновременным снижением активности ферментов физиологической антиокислительной защиты; активацией костного ремоделирования с превалированием процессов резорбции; снижением уровня половых гормонов, изменениями фосфорно-кальциевого обмена, а также с поражением печени.

ВЫВОДЫ

1. Выявлено, что у работников химического предприятия, имеющих производственный контакт с хлорорганическими соединениями остеопенический синдром наблюдается в 1,5-2 раза чаще, чем у мужчин других профессий, во всех возрастных группах

2. Установлено, что производственный контакт с хлорорганическими поллю-тантами приводит у работников химического предприятия к интенсификации процессов свободно-радикального окисления, снижению антиокислительной защиты, изменению кальций-фосфорного обмена и содержания в крови половых и гонадотропных гормонов, независимо от возраста.

3. Показано, что интоксикация самцов крыс дихлорэтаном в течение двух месяцев в суммарных дозах 0,05ЬД50 и 0,1ЬД50 приводит к дезорганизации микроструктуры костной ткани, характерным изменениям гистологической картины с развитием в отдельных участках эпифизов и диафиза деструкции и остео-дистрофии, сочетающихся с активацией остеогенеза, заменой костной ткани

волокнистой соединительной, нарушением минерализации вновь образованных остеонов.

4. Установлено, что патогенетическую роль в развитии остеопенического синдрома при хроническом действии хлорорганических соединений играет усиление свободнорадикального окисления с развитием недостаточности антиокислительной защиты. При интоксикации дихлорэтаном самцов крыс наблюдается активация перекисного окисления липидов, снижение общей антиокислительной защиты и активности антиоксидантных ферментов - супероксиддис-мутазы, каталазы, глутатионпероксидазы - в гомогенате костной ткани на фоне повышения в крови уровня С-терминального полипептида коллагена I типа.

5. Нарушения метаболизма костной ткани в мужском организме при действии дихлорэтана связаны со снижением уровня основного полового гормона — тестостерона. Дефицит половых гормонов у самцов крыс неблагоприятно сказывается на метаболизме основных компонентов органического матрикса (коллаген, гликозаминогликаны) и структуре костной ткани с интенсификацией ре-зорбтивных и снижением анаболических процессов.

6. Выявлено, что нарушению минерального обмена при интоксикации дихлорэтаном способствует и токсическое поражение печени, о чем свидетельствуют снижение в сыворотке крови уровня альбумина, повышение билирубина и активности аланиновой и аспарагиновой трансаминаз.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ Высокая распространенность остеопении и остеопороза среди мужчин, имеющих производственный контакт с хлорорганическими соединениями, свидетельствует о необходимости периодического контроля минеральной плотности костной ткани у работников химического предприятия. Полученные данные позволяют выделить группу риска костных переломов у работников предприятия и обосновывают необходимость планирования и проведения профилактических мероприятий, направленных на повышение сопротивляемости организма к неблагоприятным производственным факторам, изменение реактивности и укрепление здоровья. Установленные патогенетические меха-

низмы развития остеопеиического синдрома у мужчин - работников химического производства являются теоретической базой для использования в профилактических мероприятиях антиоксидантов, мембрано- и гепатопротекто-ров, препаратов кальция, магния и витамина Д.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Л.М. Рамазанова. И.А. Меньшикова, Ф.Х. Камилов. Нарушения минеральной плотности костной ткани у мужчин работников химического производства // Вестник Оренбургского государственного университета. - 2008. - №9 (91).-С. 199-203.

2. Ф.Х. Камилов, И.А. Меньшикова, Л.М. Рамазанова. Корригирующее влияние триовита на остеопеническое действие дихлорэтана // Вестник Уральской медицинской академической науки. - Екатеринбург, 2009. - № 1 (23). - С. 74-77.

3. Ф.Х. Камилов, И.А. Меньшикова, Л.М. Рамазанова. Влияние хлорорганиче-ских поллютантов на метаболизм костной ткани // Медицинская наука и образование Урала. - 2008. - № 6. - С. 47-50.

4. Ф.Х. Камилов, И.А. Меньшикова, Р.З. Нурлыгаянов, Л.М. Рамазанова и др. Состояние минеральной плотности костной ткани у рабочих химического производства // Мед. вестник Башкортостана. - 2007. - Т. 2, № 1. - С. 78-82.

5. И.А. Меньшикова, Л.М. Рамазанова. Э.У. Нуретдинова, Э.Р. Бикметова. Изменения уровня половых гомонов и минеральной плотности костной ткани у работников химического производства // Материалы 72-й итоговой Республиканской научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Вопросы теоретической и практической медицины». -Уфа, 2007.-С. 174-175.

6. Л.М. Рамазанова. И.А. Меньшикова, Э.У. Нуретдинова, Э.Р. Бикметова. Показатели антиоксидантной активности у работников химического производства // Материалы 72-й итоговой Республиканской научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Вопросы теоретической и практической медицины». - Уфа, 2007. - С. 219-220.

7. Ф.Х. Камилов, В.О. Щепанский, И.А. Меньшикова, Л.М. Рамазанова, и др. Структурно-метаболические изменения костной ткани у работников химического производства // Материалы Всероссийской научно-практической конфе-

ренции, посвященной 75-летию башкирской нефти «Нефть и здоровье». - Уфа, 2007.-С. 386-390.

8. J1.M. Рамазанова, И.А. Меньшикова, Э.Р. Бикметова, Э.У. Нуретдинова, и др. Состояние антиокислительной защиты крови и костной ткани у самцов крыс при длительном воздействии малых доз дихлорэтана // Материалы 73-й итоговой Республиканской научной конференции студентов и молодых ученых «Вопросы теоретической и практической медицины». - Уфа, 2008. - С. 267-269.

9. Ф.Х. Камилов, Г.В. Иванова, И.А. Меньшикова, Л.М. Рамазанова. и др. Характеристика метаболизма костной ткани при воздействии хлорорганических соединений // Материалы IV съезда Российского общества биохимиков и молекулярных биологов. - Новосибирск, 2008. - С. 453.

10. И.А. Меньшикова, Л.М. Рамазанова. Г.В. Иванова, Ф.Х. Камилов. Влияние производственных факторов на структурно-метаболические изменения в костной ткани // Вестник Российской военно-медицинской академии. Приложение 2 (часть I). Второй Санкт-Петербургский международный экологический форум «Окружающая среда и здоровье человека». - 2008. - С. 54.

11. Ф.Х. Камилов, И.А. Меньшикова, Л.М. Рамазанова. Метаболические нарушения кости при хронической интоксикации хлорорганическими соединениями // Астраханский медицинский журнал (приложение). 6-я международная научно-практическая конференция «Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины». - Астрахань, 2008. - Т. 3, № 3. - С. 96-98.

12. Ф.Х. Камилов, З.С. Терегулова, И.А. Меньшикова, Л.М. Рамазанова. и др. Памятка для работников ЗАО «Каустик» по профилактике остеопороза и остео-пении. - Уфа-Стерлитамак, 2008. - 14 с.

13. Ф.Х. Камилов, Л.М. Рамазанова. И.А. Меньшикова, Г.В. Иванова, и др. Па-тохимические механизмы действия малых доз хлорированных производных алифатических углеводородов на метаболизм костной ткани // «Нефть и здоровье». Сборник научных трудов всероссийской научно - практической конференции. - Уфа, 2009. - С. 247-249.

14. Л.М. Рамазанова. И.А. Меньшикова, Г.В. Иванова, Ф.Х. Камилов. Влияние неблагоприятных факторов производства на минеральную плотность костной ткани у работников - мужчин // Проблемы биологии, экологии, географии, об-

разования: история и современность. Материалы второй международной научно - практической конференции. - Санкт - Петербург, 2008. - С. 216-218.

15. Л.М. Рамазанова, Э.Р. Бикметова, И.А. Меньшикова. Действие дихлорэтана на обмен коллагена костной ткани при хронической интоксикации самцов крыс //Вопросы теоретической и практической медицины. Материалы 74-й Республиканской научной конференции студентов и молодых ученых, посвященной Году молодежи в России и Году поддержки и развития молодежных инициатив в Республике Башкортостан. Т 2.-Уфа, 2009. - С. 84-85.

16. Л.М. Рамазанова, Ф.Х. Камилов, Г.В. Иванова, И.А. Меньшикова. Механизмы влияния неблагоприятных факторов производства на минеральную плотность костной ткани // «Актуальные проблемы теоретической и прикладной биохимии» Материалы Российской конференции, посвященной 80-летию со дня рождения Р.И. Лифшица, приуроченной к 65-летию Челябинской государственной медицинской академии. - Челябинск, 2009. - С. 243-246.

Список

БСО- белковосвязанный оксипролин

ГАГ-гликозаминогликаны

ГПО - глутатионпероксидаза

ДК - диеновые конъюгаты

ДЭ - дихлорэтан

КД - кетодиены

КЩФ - костная щелочная фосфатаза МПКТ - минеральная плотность костной ткани

ЛГ - лютеинизирующий гормон

ОАА - общая антиокислительная

активность

ОП - остеопороз

ОЩФ - общая щелочная фосфатаза ПОЛ - перекисное окисление липидов

СО - свободный оксипролин

СОД - супероксиддисмутаза СРО - свободнорадикальное окисление СТ - сопряженные триены ТБК - тиобарбитуровая кислота ТБК-РП - ТБК-реагирующие продукты ТФР- трансформирующий фактор роста ФСГ- фолликулостимулирующий гормон ХЛ - хемилюминесценция

ЬБ^о-доза, вызывающая гибель 50% животных

Ь - амплитуда быстрой вспышки

НРе2+ - максимальная амплитуда медленной вспышки Я - латентный период БРе2+ - светосумма

Бр - спонтанная светимость

РАМАЗАНОВА ЛЕЙСАН МИННИМУХАМАТОВНА

БИОХИМИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ НАРУШЕНИЯ МЕТАБОЛИЗМА КОСТНОЙ ТКАНИ ПОД ДЕЙСТВИЕМ НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНЫХ ХЛОРОРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ (клинико-эксперимектальные исследования)

03.00.04 - биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Лицензия № 0177 от 10.06.1996 г. Подписано в печать 16.10.2009 г. Бумага офсетная. Отпечатано на ризографе. Формат 60x84 1/16.Усл.-печ. л. 1,5. Уч.-изд. л. 1,7. Тираж 100 экз. Заказ № 485.

450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3, ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Рамазанова, Лейсан Миннимухаматовна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Современные представления об этиологии и факторах риска остеопороза.

1.2. Метаболизм костной ткани и его регуляция.

1.3. Неблагоприятное воздействие химических факторов на костную ткань.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Объекты исследования.

2.2. Общая характеристика условий труда работников

ЗАО «Каустик».

2.3. Экспериментальные исследования.

2.4. Методы исследования.

2.4.1. Методы исследования минеральной плотности костной ткани.

2.4.2. Методы исследования гормонов.

2.4.3. Биохимические методы исследования.

2.4.4. Исследования состояния свободнорадикального окисления и антиоксидантной активности.

2.4.5. Гистологические методы исследования.

2.5. Статистическая обработка результатов исследования.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И

ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Состояние минеральной плотности костной ткани и фосфорно-кальциевого обмена у мужчин — работников химического производства.

3.2. Интенсивность свободно-радикального окисления и состояние антиокислительной защиты у мужчин-работников химического предприятия.

3.3. Содержание половых и гонадотропных гормонов в крови у работников химического производства.

3.4. Характеристика метаболизма костной ткани у крыс-самцов при хронической интоксикации дихлорэтаном.

3.5. Влияние интоксикации дихлорэтана на содержание половых и гонадотропных гормонов в крови у самцов крыс.

3.6. Влияние интоксикации дихлорэтаном на метаболизм печени самцов крыс.

3.7. Гистологические исследования костной ткани самцов крыс в условиях экспериментальной интоксикации дихлорэтаном.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Биохимические механизмы нарушения метаболизма костной ткани под действием низкомолекулярных хлорорганических соединений"

Актуальность проблемы. Химические загрязнители занимают ведущее место в комплексе антропогенных воздействий на окружающую среду и здоровье населения. Общее число известных соединений превышает 14 млн., из которых более 300 тыс. находят широкое применение в промышленности, сельском хозяйстве и быту [Н.Ф. Измеров, 1999]. Синтез и внедрение в промышленное производство все новых соединений неуклонно увеличивает состав и объемы экотоксикантов.

Республика Башкортостан является крупнейшим регионом России с нефтехимической и химической промышленностью. Профессиональная заболеваемость в химической, нефтехимической и нефтеперерабатывающей промышленности в России в 2000г. составила соответственно 3,04; 2,81 и 1,69 случаев на 10000 работающих [Н.Ф. Измеров и др., 2002]. По Республике Башкортостан профессиональная патология в химической отрасли в 2002-2006г.г. составила 3,1 [Н.С. Кондрова, 2008]. Вредные условия труда являются причиной формирования не только профессиональной патологии, но становятся патогенетическим фактором развития и прогрессирования общих заболеваний, не относящихся к категории профессиональных. В современных условиях отмечается значительное утяжеление первично выявляемой патологии, преобладание тяжелых форм хронических заболеваний, требующих длительного лечения. Все чаще при обследовании рабочих регистрируется нарушения здоровья в виде функциональных и метаболических изменений отдельных органов и тканей, подчас скрытых, но имеющих тенденцию к росту по мере увеличения стажа работы в неблагоприятных условиях труда.

К важнейшим социально-медицинским проблемам современности, наряду с сердечно-сосудистыми, онкологическими заболеваниями и сахарным диабетом, относится остеопороз [В.К. Казимирко и др., 2006].

Эпидемиологические исследования состояния минеральной плотности костной ткани (МПКТ) свидетельствуют о широкой распространенности остеопороза и существенном негативном влиянии этого заболевания на состояние здоровья населения [Е.А. Насонов, 2001].

Имеющиеся литературные сведения о распространенности, социально-медицинском значении, клинических проявлениях, эффективности профилактики и лечения остеопороза в основном касаются женского населения, как более подверженного к развитию этой «безмолвной эпидемии», т.к. остеопороз чаще всего диагностируется только после переломов тел позвонков и трубчатых костей.

Остеопороз у мужчин остается малоизученной проблемой [Г.Ж. Мсахалая, С.Ю. Калинченко, 2004]. В то же время в популяционной выборке жителей г. Москвы в возрасте 50 лет и старше остеопороз был обнаружен у 26,9% мужчин, а остеопения - у 44,1% [Е.Е. Михайлов, Л.И. Беневолевская, 2003], близкие данные получены и другими авторами. Остеопоротические переломы у мужчин регистрируются в 2-3 раза реже, чем у женщин. Частота переломов бедра среди мужчин составляет 10,3-11,0%, у женщин 23,0-26,9%, но смертность мужчин в результате осложнений от данной патологии с возрастом повышается в 3,2 раза, тогда как у женщин — в 2,2 раза. По переломам позвоночника смертность среди мужчин в 2,4 раза выше, чем среди женщин с аналогичными переломами [E.J. Melton, 1988]. Лишь после 65 лет частота переломов позвоночника сопоставима у обеих полов [T.W. O'Nelletal., 1996].

Среди факторов риска развития остеопороза у мужчин отмечаются пожилой возраст, курение, алкогольная зависимость, прием медикаментов, неадекватная физическая активность и иммобилизация, но основное внимание уделяется гипоганадизму [Г.Ж. Мсхалая, С.Ю. Калинченко, 2004]. Отмечается корреляция между снижением уровня свободного тестостерона и падением минеральной плотности костной ткани, резкое уменьшение МПКТ после кастрации молодых мужчин [A Jackson et al., 1992]. 7

В литературе практически отсутствуют сведения о влиянии химических факторов, загрязняющих воздушную среду рабочих помещений, на МПКТ у мужчин - работников химических производств. Изучение влияния вредных производственных факторов на состояние здоровья, разработка стратегии патогенетически обоснованных профилактических и лечебных мероприятий, является актуальной медико-социальной задачей.

Цель исследования: Охарактеризовать метаболизм костной ткани у мужчин - работников химического предприятия, контактирующих с низкомолекулярными хлорорганическими соединениями, и при хронической интоксикации дихлорэтаном самцов-крыс в эксперименте.

Задачи исследования:

2. Определить содержание в крови фолликулостимулирующего, лютеинезирующего гормонов, пролактина, тестостерона и эстрадиола у работников химического производства в зависимости от возраста.

5. Изучить интенсивность свободнорадикального окисления и состояния антиоксидантной защиты (хемилюминесценция, продукты перекисного окисления липидов, общую антиокислительную активность, активность супероксиддисмутазы, каталазы и глутатионпероксидазы) в крови и гомогенате костной ткани у самцов крыс, подвергшихся интоксикации дихлорэтаном в дозах О,О51Л}50 и 0,1Ь050.

6. Определить содержание половых и гонадотропных гормонов в периферической крови (фолликулостимулирующего и лютеинезирующего гормонов, пролактина, тестостерона и эстрадиола) у самцов - крыс при хроническом действии дихлорэтана.

7. Изучить патогистологические изменения в структуре костной ткани при хроническом действии ДЭ в суммарной дозе 0,1ЬД50 у крыс-самцов.

Научная новизна. Впервые получены данные, характеризующие метаболизм костной ткани при воздействии производственных факторов у работников химического предприятия. Показано, что у мужчин, имеющих производственный контакт с различными хлорорганическими веществами (дихлорэтан, хлорпропан, хлорвинил, хлорпропен, дихлорпропан, эпихлоргидрин и др.), во всех возрастных группах чаще, чем у работников контрольной группы, обнаруживаются остеопения и остеопороз. Установлено, что в группе этих мужчин более, чем в два раза чаще выявляется интенсификация процессов свободно-радикального окисления (СРО), наблюдается дезинтеграция гормонального статуса со снижением уровня тестостерона, повышением содержания эстрадиола, фолликулостимулирующего (ФСГ) и лютеинизирующего (ЛГ) гормонов.

Эксперименты с хронической интоксикацией самцов крыс дихлорэтаном в суммарных дозах 0,05 1Л35о и 0,1 1Л35о позволили выявить, что основными механизмами развития нарушений метаболизма костной ткани в мужском организме при длительном воздействии хлорорганических соединений являются интенсификация свободнорадикальных процессов в костях и снижение продукции половых гормонов.

Теоретическая и практическая значимость. Впервые оценена распространенность остеопенического синдрома у мужчин — работников химического предприятия, имеющих производственный контакт с хлорорганическими соединениями в низких концентрациях.

Выявлены ведущие механизмы остеотоксического действия хлорорганических токсикантов в мужском организме.

Полученные результаты являются фундаментальной основой для разработки, апробации и внедрения оптимальных схем профилактики и лечения остеопенических состояний у работников химических предприятий, связанных с хлорорганическим производством.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. У работников химического предприятия, контактирующих с хлорорганическими соединениями, развитие остеопенического синдрома наблюдается в 1,5-2 раза чаще, чем в группе контроля, выявляется интенсификация процессов свободнорадикального окисления, снижение антиокислительной защиты, изменение фосфорно-кальциевого обмена, дезинтеграция содержания в крови половых и гонадотропных гормонов.

2. Хроническое поступление дихлорэтана в суммарных дозах 0,051Х>50 и 0,11Л35о приводит у самцов крыс к снижению массы и истончению кортикального слоя трубчатых костей, развитию в них патогистологической

10 картины остеопороза с явлениями деструкции и остеодистрофии, активацией остеогенеза в отдельных участках эпифизов и диафиза, заменой костной ткани волокнистой соединительной и нарушением минерализации вновь образованных остеонов.

3. При интоксикации дихлорэтаном самцов крыс в костной ткани активируется перекисное окисление липидов, с падением общей антиокислительной защиты и активности антиоксидантных ферментов — супероксиддисмутазы, каталазы, глутатионпероксидазы, на фоне снижения в сыворотке крови уровней кальция, фосфора и магния, повышения содержания С-терминального полипептида коллагена I типа и активации костного изофермента щелочной фосфатазы.

4. Хроническая интоксикация дихлорэтаном самцов крыс сопровождается снижением продукции половых гормонов, нарушениями метаболической функции печени, что способствует интенсификации в костной ткани резорбтивных процессов.

Внедрение результатов исследования в практику. Результаты и основные положения диссертационной работы включены в педагогическую практику и учебный процесс кафедры биологической и биоорганической химии ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию», внедрены в диагностическую и лечебно-профилактическую деятельность муниципальных учреждений здравоохранения «Городская поликлиника №1» и «Городская поликлиника №6» г.Стерлитамака Республики Башкортостан, ООО «Проммедэко» г.Уфы Республики Башкортостан.

Апробация работы. Основные результаты диссертации доложены на 72, 73, 7й-й итоговых Республиканских научных конференциях студентов и молодых ученых с международным участием «Вопросы теоретической и практической медицины» (Уфа, 2007, 2008, 2009), на Всероссийской научно

11 практической конференции, посвященной 75-летию башкирской нефти (Уфа, 2007), на Республиканской конференции молодых ученых Республики Башкортостан «Медицинская наука-2007», посвященной Году Единства Башкортостана с Россией, 75-летию БГМУ, Дню Медицинского работника (Уфа, 2007), на Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные вопросы современной биохимии», посвященной 20-летию Кировской государственной медицинской академии (Киров, 2007), на IV съезде Российского общества биохимиков и молекулярных биологов (Новосибирск, 2008), на второй Международной научно - практической конференции «Проблемы биологии, экологии, географии, образования: история и современность» (Санкт - Петербург, 2008), на 6-й международной научно-практической конференции «Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины» (Астрахань, 2008), на Всероссийской научно-практической конференции «Нефть и здоровье» (Уфа, 2009), на совместном заседании кафедр биологической и биоорганической химии и общей гигиены с экологией с курсом гигиенических дисциплин ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Росздрава» (Уфа, 2009).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 16 работ.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Рамазанова, Лейсан Миннимухаматовна

ВЫВОДЫ

3. Показано, что интоксикация самцов крыс дихлорэтаном в течение двух месяцев в суммарных дозах 0,05ЬД50 и 0,1ЬД50 приводит к дезорганизации микроструктуры костной ткани, характерным изменениям гистологической картины с развитием в отдельных участках эпифизов и диафиза деструкции и остеодистрофии, сочетающихся с активацией остеогенеза, заменой костной ткани волокнистой соединительной, нарушением минерализации вновь образованных остеонов.

4. Установлено, что патогенетическую роль в развитии остеопенического синдрома при хроническом действии хлорорганических соединений играет усиление свободнорадикального окисления с развитием недостаточности антиокислительной защиты. При интоксикации дихлорэтаном самцов крыс наблюдается активация перекисного окисления липидов, снижение общей антиокислительной защиты и активности антиоксидантных ферментов — супер-оксиддисмутазы, каталазы, глутатионпероксидазы - в гомогенате костной ткани на фоне повышения в крови уровня С-терминального полипептида коллагена I типа.

5. Нарушения метаболизма костной ткани в мужском организме при действии дихлорэтана связаны со снижением уровня основного полового гормона — тестостерона. Дефицит половых гормонов у самцов крыс неблагоприятно сказывается на метаболизме основных компонентов органического матрикса (коллаген, гликозаминогликаны) и структуре костной ткани с интенсификацией резорбтивных и снижением анаболических процессов.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Высокая распространенность остеопении и остеопороза среди мужчин, имеющих производственный контакт с хлорорганическими соединениями, свидетельствует о необходимости периодического контроля минеральной плотности костной ткани у работников химического предприятия. Полученные данные позволяют выделить группу риска костных переломов у работников предприятия и обосновывают необходимость планирования и проведения профилактических мероприятий, направленных на повышение сопротивляемости организма к неблагоприятным производственным факторам, изменение реактивности и укрепление здоровья. Установленные патогенетические механизмы развития остеопенического синдрома у мужчин - работников химического производства являются теоретической базой для использования в профилактических мероприятиях антиоксидантов, мембрано- и ге-патопротекторов, препаратов кальция, магния и витамина Д.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Рамазанова, Лейсан Миннимухаматовна, Уфа

1. Баженов, А.Н. Ревматоидный артрит и остеопороз / А.Н. Баженов // Клин, мед. 1998. - № 7. - С.15-19.

2. Балаховский, И.С. Флюресцентные исследования in vivo / И.С. Балаховский // Клиническая лабораторная диагностика — 2000. -№ 2. с. 3-8.

3. Барабой, В.А. Окислительно-антиоксидантный гомеостаз в норме и патологии / В.А. Барабой, Д.А, Сутковой // Под ред. Ю.А. Зозули. Киев: Чернобыльинтерформ, 1997. —413 с.

4. Барабой, В.А. Перекисное окисление и стресс / В.А. Барабой, Н.И. Брехман, В.Г. Голотин, Ю.Б. Кудряшов. СПб.: Наука, 1992. - 144с.

5. Бауман, B.K. Биохимия и физиология витамина Д / В.К. Бауман. Рига, 1989.-С. 23-27.

6. Безрукова, Г. А. Патофизиологические аспекты развития профессиональных заболеваний и их лабораторная диагностика (обзор литературы) / Г.А. Безрукова, В.Ф. Спирин // Медицина труда и промышленная экология. 2003. - № 11. - С. 7-13.

7. Белосельский, H.H. Рентгеноморфометрия в диагностике остеопоротических переломов тел позвонков / H.H. Белосельский / Второй Российский симпозиум по остеопорозу. Тез. лекц. и докл. — Екатеринбург, 1997.-С. 29-31.

8. Беневоленская, Л.И. Генетические аспекты остеопороза / Л.И. Беневоленская, В.А. Мякоткин // Руководство по остеопорозу—М.: Изд-во «Бином», 2003 .-С. 105-127.

9. Беневоленская, Л.И. Общие принципы профилактики и лечения остеопороза / Л.И. Беневоленская // Консилиум. 2002. - № 6. - С. 240-244.

10. Беневоленская, Л.И. Общие принципы профилактики остеопороза и переломов / Л.И. Беневоленская // Третий Росс, симпозиум по остеопорозу. СПб, 2000. С. 58-60.

11. Беневоленская, Л.И. Остеопороз. Диагностика, профилактика и лечение. Клинические рекомендации / Л.И. Беневоленская, О.М. Лесняк. -М.: Изд-во «ГЭОТАР Медиа», 2005. - С. 19-53.

12. Беневоленская, Л.И. Патогенез остеопороза. / Л.И. Беневоленская, Е.Л. Насонов // Руководство по остеопорозу / Под ред. Л.И. Беневоленской. М.: БИНОМ, Лаборатория знаний, 2003. - С. 77-104.

13. Биохимические методы анализа показателей обмена биополимеров соединительной ткани / П.Н. Шараев, В.Н. Пишков, О.Н. Зубарев, В.М. Иванов, И.В. Вольхина, Н.Г. Наумова // Методические рекомендации -Ижевск, 1990. С. 3-10.

14. Бодиенкова, Г.М. Особенности иммунологической реактивности работающих в условиях воздействия различных нейротоксикантов / Г.М. Бо128диенкова // Медицина труда и промышленная экология. — 2008, № 8. с. 1-6.

15. Бурлакова, Е.Б. Сверхслабые воздействия химических соединений и физических факторов на биологические системы / Е.Б. Бурлакова, A.A. Кондаров, E.JI. Мальцева // Биофизика. 2004. - т.49, в.З. - С. 551-564.

16. Васильева, Г.И. Цитокины общая система гомеостатической регуляции клеточных функций / Г.И. Васильева, И.А. Иванова, С.Ю. Тюкавкина // Цитология. - 2001. -№ 12, Т. 43. - С.1101-1111.

17. Вакс В.В. Нейроэндокринология / В.В. Вакс // Под ред. Е.И. Маровой. -Ярославль, 1999. С. 276-307.

18. Вартанян, К.Ф. Остеопороз у мужчин / К.Ф. Вартанян // Лекции, обзоры // Российские Медицинские вести. 2002.- № 1. - С. 36-40.

19. Вербова, А.Ф. Показатели фосфоро-кальциевого обмена и плотность костной ткани у работающих на производстве фосфора/ htth://osteoporosis-rus.webzone.ru/pagenew3 .htm.

20. Вербова, А.Ф. Состояние костной ткани у больных вибрационной болезнью / А.Ф. Вербова // Гигиена и санитария. 2004. - № 4. - С. 35-37.

21. Владимиров, Ю.А. Свободные радикалы и антиоксидантная активность / Ю.А. Владимиров // Вестник РАМН. 1998. - № 7. - С. 43-51.

22. Владимиров, Ю.А. Хемилюминесценция клеток животных / Ю.А. Владимиров, М.П. Шерстнев. М., 1989. - 176 с. (Итоги науки и техники. Сер. Биофизика; Т. 24).

23. Власов, В.Н. Показатели обмена липидов как критерии химической опасности /В.Н. Власов // Медицина труда и промышленная экология. — 2007, №2.-с. 29-34.

24. Возовая, М.А. Содержание хлористого метилена в биосредах в период беременности и кормления у работниц завода резинотехнических изделий /129

25. М.А. Возовая, JI.K. Малярова, P.M. Еникеева // Гигиена труда и профзаболевания. — 1974. № 4. - С. 42-43.

26. Вопросы эпидемиологи и профилактики остеопороза в среднем Поволжье / В.И. Струков, Л.Г. Радченко, Р.Т. Галеева, Г.Л. Дерябина // Мат. тез докладов III Российского конгресса по остеопорозу. — Екатеринбург, 2008. С. 58.

27. Вредные вещества в промышленности. / Под. ред. Н.В. Лазарева, Э.Н. Левиной. 1976.- Т.1. - с.205-209.

28. Галимов, Ш.Н. Гонадотропные эффекты феноксигербицидов в мужском организме / Ш.Н. Галимов, Ф.Х. Камилов. Уфа: Дизайн Полиграф Сервис, 2001.-184с.

29. Гельцер, Б.И. Хронические обструктивные болезни легких и остеопороз / Б.И. Гельцер, Е.А. Кочеткова, В.А. Невзорова и др. // Терапевтический архив. 2000, №11. - С. 74-77.

30. Глушков, С.И. Влияние острой интоксикации дихлорэтаном на показатели системы глутатиона / С.И. Глушков, А.И. Карпищенко // Клин, лаб. диагностика. 1997. - № 6. - С. 52.

31. Громова, O.A. Его величество магний / O.A. Громова // Методическое пособие для врачей и студентов. М., 2000. - 51с.

32. Гукасян, Д.А. Минеральная плотность костной ткани у больных ревматоидным артритом / Д.А. Гукасян, Е.Л. Насонов, P.M. Балабанова, A.B. Смирнов // Терапевтический архив. 2001, № 12. - С. 68-70.

33. Дворецкий, Л.И. Хроническая обструктивная болезнь легких и остеопороз. Реальный вклад ингаляторных глюкокортикоидов / Л.И. Дворецкий, Е.М. Чистякова // Русский медицинский журнал. 2006. — Т. 14, № 6. - С. 422-427.

34. Дедов, И.И. Эндокринология / И.И. Дедов, Г.А. Мельниченко, В.В. Фадеев М.: Медицина, 2000. -632с.

35. Егорова, H.H. Критериальные оценки окислительно-антиокислительных процессов биосред организма в гигиенической диагностике химических факторов / H.H. Егорова // Гигиена и санитария. -2006.-№5.-С. 81-83.

36. Ермакова, И.П. Биохимические маркеры обмена костной ткани и их клиническое использование / И.П. Ермакова // Лаборатория. 2001. - № 1. -С. 3-5.

37. Зайцева, О.В. Интерлейкин-1 альфа, фактор некроза опухолей — альфа и интерферон гамма в сыворотке крови детей, больных бронхиальной астмой / О.В. Зайцева, A.B. Лаврентьев, C.B. Зайцева, Г.А. Самсыгина // Цитокины и воспаление. - 2000, №3. - с. 54-56.

38. Зазерская, И.Е. Факторы риска снижения минеральной плотности костной ткани у женщин репродуктивного возраста, проживающих в Санкт Петербурге / И.Е. Зазерская, A.B. Дячук, Л.В. Кузнецова // Второй конгресс по остеопорозу. — 2000. — С. 52.

39. Зенков, Н.К. Окислительный стресс. Биохимические и патофизиологические аспекты / Н.К. Зенков, В.З. Ланкин, Е.Б. Меньшикова. -М., 2001.-323 с.

40. Зенков, Н.К. Окислительный стресс / Н.К. Зенков, Е.Б. Меньшикова, С.М. Шергин. Новосибирск, 1993. - 181 с.

41. Зозуля, Ю.А. Свободнорадикальное окисление и антиоксидантная защита при патологии головного мозга / Ю.А. Зозуля, В.А. Барабой, Д.А. Суткова. М.: Знание, 2000. - 344 с.

42. Зоткин, Е.Г. Глюкокортикоидный остеопороз при ревматических заболеваниях / Е.Г. Зоткин // Рук-во по остеопорозу. Под ред. Л.И. Беневоленской. М.: БИНОМ Лабор. знаний, 2003. - С. 430-441.

43. Зулкарнеев, P.A. Диагностика остеопороза различного генеза / P.A. Зулькарнеев, И.Ф. Ахтямов, P.P. Зулкарнеев // Казанский медицинский журнал. 2002. - № 1. - С. 75-76.

44. Изменения костной ткани человека в космическом полете II. Некоторые закономерности и особенности / B.C. Оганов, A.B. Бакулин, В.Е. Новиков, Л.М. Мурашко, O.E. Кабицкая // Остеопороз и остеопатии. 2005. - № 1.-С. 4-8.

45. Измеров, Н.Ф. Охрана здоровья рабочих и профилактика профессиональных заболеваний на современном этапе / Н.Ф. Измеров // Медицина труда и промышленная экология. 2002. - № 1. - С. 1-7.

46. Измеров Н.Ф., Халенко А.И., Родионова Г.К. и др. Профессиональный риск при воздействии химического фактора // Вестник РАМН. — 2002. № 2. -С. 11-15.

47. Казимирко, В.В. Остеопороз: патогенез, клиника, профилактика и лечение / В.В. Казимирко, В.Н. Коваленко, В.И. Мальцев. — Киев: Морион, 2006. 160 с.

48. Калашников, A.B. Факторы риска выявления репаративного остеогенеза / A.B. Калашников // Травматология. 2001. - № 4. - С. 375-380.

49. Камилов, Ф.Х. Состояние метаболических процессов в организме у рабочих химической, нефтехимической и нефтеперерабатывающей промышленности / Ф.Х. Камилов, Д.Ф. Шакиров // Молекулярные механизмы регуляции функции клетки. Тюмень, 2005. — С. 135-137.132

50. Камилов, Ф.Х. Курс лекций по биохимии ротовой полости. Уфа.: ГОУ ВПО «Башгосмедуниверситет Росздрава», - 2009.- 132с.

51. Кандрор, В.И. Регуляция биосинтеза и секреции гормонов гипоталамуса и гипофиза / В.И. Кандрор, В.П. Федотов // Болезни органов эндокринной системы (руководство для врачей). Под ред. акад. РАМН И.И. Дедова. М.: Медицина, 2000. - С. 50-68.

52. Карпищенко, А.И. Глутатион-зависимая антиоксидантная система в некоторых тканях крыс в условиях острого отравления дихлорэтаном / А.И. Карпищенко, С.И. Глушков, В.В. Смирнов // Токсикол. вестник. 1997. - № З.-С. 17-23.

53. Касаткина, Т.Б. Этика экспериментальных исследований животных в Космической биологии и медицине / Т.Б. Касаткина, A.C. Капланский // Авиакосмическая и экологическая медицина. 2000. - № 2. - С. 17-21.

54. Кондрова, Н.С. Динамика профессиональной заболеваемости в основных отраслях экономики Республики Башкортостан с 2002 по 2006 год / Н.С. Кондрова // Мед. труда и промыш. экология. — 2008. № 5. - С. 1-7.

55. Косарева, О.В. Минеральная плотность костной ткани и кальций-фосфорный обмен у больных сахарным диабетом I типа / О.В. Косарева // Пробл. эндокринологии. 2003. - Т. 49. - № 5. - С. 3-5.

56. Кораблева, Н. Остеопороз в амбулаторной практике / Н. Кораблева // Врач. 2005, № 3.- С. 37-39.

57. Клебанов, Г.И. Оценка антиокислительной активности плазмы крови с применением желточных липопротеидов / Г.И. Клебанов, И.В. Бабенкова, Ю.О. Теселкин и др. // Лабораторное дело. 1988, № 5. — С. 59-62.

58. Кудаева, И.В. Влияние химических веществ различной природы на показатели окислительного стресса /И.В. Кудаева, Л.Б. Маснавиева // Медицина труда и промышленная экология. 2008, № 1. - с. 17-24.

59. Кудаева, И.В. Закономерности нарушений биохимических процессов при воздействии нейротоксичных веществ различной природы /И.В. Кудаева, Л.А. Бударина, Л.Б. Маснавиева // Медицина труда и промышленная экология. — 2008, № 8. с. 7-11.

60. Курчатов, Г.В. Влияние 1,2 — дихлорэтана на некоторые функциональные группы тканевых белков / Г.В. Курчатов, С.И. Дрофа // Гигиена применения, токсикология пестицидов и клиника отравлений. М., 1973. - Вып. 10. - С. 247-250.

61. Лазебник, Л.Б. Первичный остеопороз: клиника, диагностика и лечение / Л.Б. Лазебник, С.Б. Маличенко // Лечащий врач. — 1999. № 7. - С. 9-14.

62. Лахман, О.Л. Прогнозирование развития токсической энцефалопатии от воздействия комплекса химических веществ у пожарных / О.Л. Лахман, Е.В. Катаманова, О.И. Шевченко // Медицина труда и промышленная экология. 2008, № 8. - с. 12-16.

63. Лебедева, С.Н. Использование пептидных биорегуляторов при отравлении гербецидом 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты / С.Н. Лебедева, С.Д. Жамсарова // Гигиена и санитария. 2004. - № 4. - С. 68-70.

64. Лейкок, Дж.Ф. Основы эндокринологии . (Перев. с англ. под ред.акад. РАМН И.И. Дедова) / Дж.Ф. Лейкок, П.Г. Вайс. -М.: Медицина, 2000.-504с.

65. Леоненко, О.Б. Состояние процессов перекисного окисления липидов и антирадикальной защиты при воздействии пестицидов / О.Б. Леоненко //134

66. Влияние факторов внешней среды на реактивность организма: материалы регион, науч.-практ. конф. Киев - Ворошиловград, 1990. - Т.1. — С. 96-97.

67. Лужников, Е.А. Клиническая токсикология / Е.А. Лужников. М., 1980.-301с.

68. Лужников, Е.А. Острые отравления: Руководство для врачей / Е.А. Лужников, Л.Г. Костомарова. -М.: Медицина, 1989. С. 34-37.

69. Лужников, Е.А. Поиски специфической терапии при острых отравлениях дихлорэтаном / Е.А. Лужников, Т.В. Новиковская, Ж.А. Лисовик // Гигиена труда и профзаболеваний. — 1989.- № 6.- С. 37-38.

70. Максимов, С. А. Особенности профессионального старения работников химических производств / С.А. Максимов // Профилактика заболеваний и укрепление здоровья. 2006. № 6. - С. 16-20.

71. Маличенко, С.Б. Роль кальция и витамина Д в развитии патологии сердечно-сосудистой и костной системы у пожилых (лекция) / С.Б. Маличенко // Лечащий врач. 2000, № 5-6. - С. 18-23.

72. Мануйлов, И.А. Клиника, патогенез и лечение посткастрационного синдрома / И.А. Мануйлов. М., 1980. - С. 27.

73. Марова, Е.И. Остеопороз в клинике эндокринных заболеваний / Е.И. Марова // Руководство по остеопорозу. — М.: БИНОМ, Лаборатория знаний. 2003. - С. 363-396.

74. Маршалл, В.Дж. Клиническая биохимия / В.Дж. Маршал. М. — СПб.: БИНОМ, Невский диалект, 2002. - 384 с.

75. Меркулов, В.И. Дихлорэтан. Токсические свойства и отравления / В.И. Меркулов. М., 1986. - 19 с.

76. Меркулов, В.Н. Повреждения грудного и поясничного отделов позвоночника на фоне ювенильного остеопороза / В.Н. Меркулов, С.С.135

77. Родионова, B.K. Ильина и др. // Вестник травматологии и ортопедии им. H.H. Приорова. -2002. -№1. С. 7-11.

78. Метод определения каталазы / М.А. Королюк, Л.И. Иванова, И.Г. Майорова, В.Е. Токарев // Лабораторное дело. 1988. - № 1. - С. 16-19.

79. Михайлов, Е.Е. Остеопороз / Е.Е. Михайлов, Л.И. Беневолевская // Руководство по внутренним болезням. Ревматические болезни, под ред. Насоновой В.А., Бунчука Н.В. М.: Изд-во «Медицина», 1997. - С. 439-446.

80. Михайлов, Е.Е. Распространенность переломов позвоночника в популяционной выборке лиц 50 лет и старше / Е.Е. Михайлов, Л.И. Беневоленская, Н.М. Мылов // Вестник травмат. и ортопед. 1997. - № 3. — С. 20-27.

81. Михайлов, Е.Е. Частота переломов проксимального отдела бедренной кости в различных регионах мира (Обзор литературы) / Е.Е. Михайлов // Науч.- практ. ревматология. 2000. - № 3. - С. 34-45.

82. Михайлов, Е.Е. Эпидемиология остеопороза и переломов / Е.Е. Михайлов, Л.И. Беневоленская // Руководство по остеопорозу — М.: ЗАО «Изд-во Бином», Лаборатория знаний, 2003. С. 10-53.

83. Мохорт, Т.В. Частота выявления остеопении и остеопороза у молодых мужчин с гипогонадизмом / Т.В. Мохорт, Е.И. Кузьменкова // Тезисы докладов III Российского конгресса по остеопорозу с международным участием. -Ектеринбург 2008.- С. 105.

84. Мсхалая, Г.Ж. Возрастной андрогенный дефицит мужчин и остеопороз. Обзор литературы и собственные данные / Г.Ж. Мсхалая, С.Ю. Калинченко // Остеопороз и остеопатии. — 2004.- № 1.- С. 26-32.

85. Мурадянц, A.A. Вторичный остеопороз при ревматоидном артрите: современное состояние проблемы, подходы к диагностике и лечению / A.A. Мурадянц, Н.Г. Правдюк // Клиницист. 2006. - № 3. - С. 6-11.

86. Мухаметова, Г.М. Вопросы клиники, патогенеза и лечения хронической интоксикации бензином / Г.М. Мухаметова, З.Г. Подрез. -Уфа: Башкнигоиздат, 1975. 164 с.

87. Мякоткин, В.А. Генетика остеопороза / В.А. Мякоткин, Л.И. Беневоленская // Вестник Российской АМН. 2008.- №6. - С. 37-41.

88. Мякоткина, Г.В. Особливос^ xiMiniioro складу kictok скелета статевозрших бших пацююв при вплив1 napiB формальдепду /Г.В. Мякоткина // Вюн. Морфологи. 2000. - № 1. - С. 66-67.

89. Насонов, Е.Л. Ревматические аспекты остеопороза / Е.Л. Насонов, В.А. Насонова, И.А. Скрипникова. М., 1997. - С. 45-58.

90. Насонов, Е.Л. Остеопороз при ревматических заболеваниях / Е.Л. Насонов, Е.Л. // Руководство по остеопорозу. М.: БИНОМ, Лаборатория знаний, 2003. - С. 346-362.

91. Насонов, Е.Л. Остеопороз: стандарты диагностики и лечения / Е.Л. Насонов // Консилиум. 2001. - № 3. - С. 416.

92. Насонов, Е.Л. Проблема остеопороза в ревматологии / Е.Л. Насонов,

93. B.А. Насонова, И.А. Скрипникова М.: Изд-во «Стин», 1997. - С. 37 - 349.

94. Насонов, Е.Л. Проблемы остеопороза у мужчин / Е.Л. Насонов // Русский медицинский журнал. 2008. - С. 43.

95. Нейрохимия (избранные разделы) / М.И. Прохорова, Н.Д. Ещенко,

96. C.Ю. Туманова и др.. Л.: Изд-во Ленинград, ун- та, 1979. - 267с.

97. Некрасова, М.Р. Особенности остеопенического синдрома при диффузном токсическом зобе / М.Р. Некрасова, Л.А. Суплотова, Л.И. Давыдова // Терапевтический архив. 2005. - № 10. - С. 29-33.

98. Оганов, B.C. Гипокинезия фактор риска остеопороза / B.C. Оганов // Остеопороз и остеопатии. - 1998. - № 1. - С. 13-17.

99. Основы биохимии / А. Уайт, Ф. Хендлер, Э. Смит, Р. Хилл, И. Леман // в 3 т. Пер. с англ. М.: Мир, 1981. - Т. 3. - 726 с.

100. Остеопороз: патогенез, патохимия. Принципы диагностики, лечения и профилактики / Ф.Х. Камилов, Б.Ш. Минасов, В.А. Кулавский, Ф.А. Зарудий, В.О. Щепанский. Уфа, 2005. - С. 17-41.

101. Остеопороз. Диагностика, профилактика и лечение. Под ред. О.М. Лесняк, Л.И. Беневоленской. Москва «ГЭОТАР-Медиа», 2009.

102. Оценка антиокислительной активности плазмы крови с применением желточных липопротеидов / Г.И. Клебанов, И.В. Бабенков, Ю.О. Теселкин и др. // Лабораторное дело. 1988. -№ 2. - С. 59-62.

103. Перекисное окисление и стресс / В.А. Барабой, Н.И. Брехман, В.Г. Голотин, Ю.Б. Кудряшов. СПб.: Наука, 1992. - 144 с.

104. Побел, А.Н. Структурно-метаболические нарушения в костной ткани под влиянием экологических факторов / А.Н. Побел // В кн.: Остеопороз: эпидемиология, клиника, диагностика, профилактика и лечение. — Харьков: Золотые страницы, 2002. — С. 66-71.

105. Показатели кальций-фосфорного обмена и костного метаболизма у больных диффузным токсическим зобом / Н.К. Ахкубекова, Е.И. Марова, Л.Я. Рожинская и др. // Пробл. эндокринологии. 1997. - Т. 43, № 5. - С.12-16.

106. Прохорова, М.И. Методы биохимических исследований / М.И. Прохорова. Л.: Изд-во Ленинград, ун-та, 1982. - 272 с.

107. Рахманин, Ю.А. Научные основы диагностики донозологических нарушений гомеостаза при хронических химических нагрузках / Ю.А. Рахманин, H.H. Литвинов // Гигиена и санитария. 2004. - № 6. - С. 48-51.

108. Рекомендации по использованию ультразвуковой техники для диагностики остеопороза // Остеопороз и остеопатии. — 2004. № 1. — С. 67.

109. Рекомендации Рабочей группы ВОЗ по обследованию и лечению больных с остеопорозом // Остеопороз и остеопатии. — 1999. № 4. — С. 2-7.

110. Риггз, Б.Л. Дефицит эстрогенов / Б.Л. Риггз, Л.Д. III Мелтон // В: Б.Л. Риггз, Л.Д. Мелтон III Остеопороз. Пер. с англ. М.-СПб.: ЗАО «Издательство БИНОМ», «Невский диалект», 2000. — С. 154-172.

111. Риггз, Б.Л. Остеопороз / Б.Л. Риггз, Л.Дж.Ш Мелтон. БИНОМ, Невский диалект, 2000. —С. 263-267.

112. Рожинская, Л.Я. Лечение и профилактика первичного остеопороза / Л.Я. Рожинская // Лечащий врач. 2001, № 9. - С. 16-20.

113. Рубин, М.П. Остеопороз: диагностика, современные подходы к лечению, профилактика / М.П. Рубин, P.E. Чечурин, О.М. Зубова // Терапевтический архив. -2002.- №1. С. 32-37.

114. Свешников, A.A. Возрастные изменения минеральной плотности костей скелета мужчин / A.A. Свешников, А.И. Капишева, E.H. Овчинников // Тезисы докладов III Российского конгресса по остеопорозу с международным участием. Ектеринбург, 2008.- С. 52.

115. Свободно-радикальное окисление у работников нефтехимической промышленности / Р.Н. Яппаров, Р.Ф. Камилов, О.В. Сидорчева, Д.Ф. Шакиров // Мед. труда и пром. Экология. 2007. - № 8. - С. 14-19.

116. Селезнева, Л.И. Генетические аспекты остеопороза / Л.И. Селезнева, Р.И. Хусаинова, Э.К. Хуснутдинова // Медицинская генетика. 2006, Т.5, № 12(54).-С. 3-12.

117. Серова, Л.Д. Диагностика, профилактика и лечение остеопороза / Л.Д. Серова, Е.В. Чеботарева.- 2004. С. 30-32.139

118. Скальный, A.B. Биоэлементы в медицине / A.B. Скальный, И.А. Рудаков. М.: Издательский дом «ОНИКС 21 век»: Мир, 2004. - 272с.

119. Сопиков, Н.Ф. Изучение поступления, распределения и выведения дихлорэтана у крыс / Н.Ф. Сопиков, А.И. Горшунова // Гигиена труда и профессиональные заболевания. — 1979. № 4. — С. 36-40.

120. Сопоставление различных подходов к определению продуктов перекисного окисления липидов в гептан-изопропанольных экстрактах крови / И.А. Волчегорский, А.Г. Налимов, Б.Г. Яровинский, Р.И. Лифшиц // Вопросы мед. химии. 1989. - № 1. - С. 127-131.

121. Соседова, Л.М. Морфо-функциональные нарушения у крыс при воздействии винилхлоридом в отдаленном периоде интоксикации / Л.М. Соседова, Е.А. Капустина, Е.А. Титов // Медицина труда и промышленная экология.-2008, №1.-с. 24-29.

122. Слуцкий, Л.И. Биохимия нормальной и патологически измененной соединительной ткани / Л.И. Слуцкий // Л.: «Медицина», 1969. С. 376.

123. Спиртус, Т.В. МПКТ поясничного отдела позвоночника и шейки бедра у пациентов из эпидемиологической выборки г. Москва / Т.В. Спиртус, Е.Е. Михайлов, Л.И. Беневоленская // Клин, ревмат. 1997. - № 3. - С. 31-36.

124. Сперматоксические свойства приоритетных загрязнителей окружающей среды класса полихлорбифенилов / Ш.Н. Галимов, Д.С. Громенко, А.З. Абдуллина, Э.Ф. Галимова // Медицина труда и промышленная экология. 2008, № 10. - с. 31-33.

125. Стародубов, В.И. Сохранение здоровья работающего населения — одна из важнейших задач здравоохранения / В.И. Стародубов // Медицина труда и промышленная экология. 2005. - №1. — С. 1-8.

126. Терегулова, З.С. Интоксикация органическими растворителями на предприятиях резинотехнических изделий (современные подходы к оценке условий труда, диагностики, лечению и профилактике) / З.С. Терегулова, Г.Г. Максимов. Уфа: Гилем, 1999. - 228 с.

127. Торопцова, Н.В. Подходы к профилактике и лечению остеопороза / Н.В. Торопцова, Л.И. Беневоленская // Лечащий врач. 2005. - № 4. - С. 3135.

128. Торопцова, Н.В. Остеопороз у мужчин: взгляд на проблему / Н.В. Торопцова // Рус. мед. журнал. 2009. - № 3 (342). - Т. 17. - С. 182-185.

129. Фархутдинов, P.P. Хемилюминесцентные методы исследования свободнорадикального окисления в биологии и медицине / P.P. Фархутдинов, В.А. Лиховских. Уфа: БГМУ, 1995. - 90с.

130. Физиологические и биогеохимические аспекты действия пестицидов на организм человека / Е.В. Евстафьева, В.Н. Башкин, Д.Б. Орлинский, Г.К. Васильева // Гигиена и санитария. 1994. - № 1. - С. 45-46.

131. Франке, Ю. Остеопороз / Ю. Франке, Г. Рунге. М.,1995. - С. 136-137.

132. Фролов, Б.А. Физиология и патология нейроэндокринной регуляции / Б.А. Фролов. -М.: Медицина, 2006. 320 с.

133. Фролысис, В.В. Экспериментальный остеопороз. Модели, механизмы развития возрастного остеопороза / В.В. Фролькис, В.В. Поворознюк, O.A. Евтушенко // Здоров'я Укранш. 2004. - № 1-2. - С. 86-87.

134. Хоначка, П. Биохимическая адаптация / П. Хоначка, Дж. Сомеро. М.: Мир, 1988. -349с.

135. Храмцова, С.Н. Роль цитокинов и гормонов в формировании костной ткани (сообщение 1) / С.Н. Храмцова, Л.А. Щеплягина // Российский педиатрический журнал. 2005, № 5. - С. 25-29.141

136. Цитокиновая регуляция биотрансформации ксенобиотиков и эндогенных соединений / C.B. Сибиряк, В.А. Черешнев, A.C. Симбирцев, Д.С. Сибиряк, Т.В. Гаврилова// Екатеринбург: Ур ОРАН, 2006. - 161с.

137. Частота переломов проксимального отдела бедренной кости и дистального отдела предплечья среди городского населения России. / Е.Е. Михайлов, Л.И. Беневоленская, С.Г. Аникин и др. // Остеопороз и остеопатии. 1999. - № 3. — С. 2-6.

138. Чеботарев, А.Г. Условия труда и профессиональная заболеваемость рабочих предприятий по производству алюминия / А.Г. Чеботарев, В.А. Прохоров // Медицина труда и промышленная экология. 2009, № 2. - с.5-9.

139. Ченский, А.Д. Остеопороз / А.Д. Ченский, A.B. Гаркави // Мед. помощь. 1998. - № 4. - С. 32-36.

140. Чечурин, P.E. Сахарный диабет 1типа и остеопороз / P.E. Чечурин, A.C. Ахметов // Остеопороз и остеопатии. 1999. - № 1. - С. 2-5.

141. Шаяхметов, С.Ф. Оценка профессионального риска нарушений здоровья работников предприятий химической промышленности // С.Ф. Шаяхметов, М.П. Дьякович, Н.М. Мещакова // Мед. труда и промышленная экология. 2008. - № 8. - С. 27-33.

142. Шварц, Г.Я. Витамин Д, Д-гормон и альфакальцидол: молекулярно-биологические и фармакологические аспекты действия / Г.Я. Шварц // Остеопороз и остеопатии. 1998. - № 3. - С. 2-6.

143. Шварц, Г.Я. Витамин Д и Д-гормон / Г.Я. Шварц. М.: Анахарсис, 2005. - 152с.

144. Шварц, Г.Я. Остеотропные цитокины семейства TNF и создание нового поколения лекарственных средств для лечения остеопороза / Г.Я. Шварц // Цитокины и воспаление,- 2004, № 3.- с. 24.142

145. Ширшев, C.B. Пролактин / C.B. Ширшев // Механизмы иммуноэндокринного контроля процессов репродукции. — Екатеринбург: УрОРАН, 2002.-Т. 2.-С. 137-147.

146. Шишкина, JI.H. Связь повреждения мембраны и ДНК с процессом перекисного окисления липидов при слабых воздействиях / JI.H. Шишкина, М.А. Смотряева//Биофизика. 2000. - Т. 44. - в. 5. - С. 844-852.

147. Шостак, H.A. Остеопороз настоящее и будущее / H.A. Шостак // Клиницист. 2006. - № 3. - С. 4-5.

148. Шостак, H.A. Остеопороз: современные аспекты диагностики и лечения / H.A. Шостак // Лечащий врач. 2004, № 7. - С. 26-29.

149. Экспериментальное моделирование и лабораторная оценка адаптивных реакций организма / И.А. Волчегорский, И.И. Долгушин, O.A. Колесников, В.Э. Цейликман. Челябинск: Изд-во Челябинского педагог, ун-та, 2000.-С. 21-28.

150. Экспериментальный остеопороз у крыс / P.P. Якупов, С.И. Рахматуллин, Р.Б. Ибатуллина, Ф.А. Каюмов // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. 2009, № 1(65). - с. 290-292.

151. Бур'янов, O.A. Патогенетична роль екологичних фктор1в pÎ3Hoi природи у виникненш остеопорозу / O.A. Бурянов // Тез. докл. I Укр. Науково-практично1 конф. «Остепороз: ешдемюлопя, юпшка, д1агностика, лисування та профшактика». Кшв, 1995. - С. 12-13.

152. Козярин I. П. BitaMÎHi I здоров'я // Здоров'я Украти. — 2003. № 2(63). -С. 25-31.

153. Поворознкж, B.B. Млжнародна декада захворювань юсток та изглоб.в: участь Укрансксй accou,iau,ii Остеопорозу / В.В. Поворознюк // Пробл. остеологи. 2003. - Т. 7, № 3-4. - С. 3-13.

154. Поворознюк В.В. Возрастные особенности костной ткани у мужчин /

155. B.В. Поворознюк, Е.А. Креслов // Пробл. остеологи. 2006. - т. 9 (прилож.) —1. C. 92-93.

156. Abnormal bone mineralization after fluoride treatment in osteoporosis: a small-angle X-ray scattring study / P. Fratzl, P. Roschger, J. Eschberger et al. // J. Bone Miner. Res. 1994. - Vol. 9. - P. 1541-1549.

157. Amin, S. Osteoporosis in men / S. Amin // Rheum Dis Clin North Am. -2001.-P. 19-47.

158. Amin, S. Association of hypogonadism and estradiol levels with bone mineral density in elderly men from the Framingham study / S. Amin, Y. Zhang, C.T. Sawin et al // Ann intern Med. 2000. - P. 951-963.

159. Anderson, H.C. Biology of disease: mechanism of mineral formation in bone / H.C. Anderson // Lab. Invest. 1989. - Vol. 60. - P. 320-330.

160. An uncoupling agent containing strontium prevents bone loss by depressing bone resorption and maintaining bone formation in estrogen-deficient rats / P.J. Marie, M. Hott, D. Modrowski, et al. // J. Bone Miner. Res. 1993. - Vol. 8. - P. 607-615.

161. A TNF receptor loop peptide mimic blocks RANK ligand-induced signaling, bone resoiption, and bone loss // K. Aoki, H. Saito, C. Itzstein, et al. // J. Clin. Invest. 2006. - Vol. 116, № 6. - P. 1525-1534.

162. Azria, M. The value of biomarkers in detecting alteration in bone metabolism /М. Azria // Calcif. Tiss. int. 1989. - Vol.9. - P. 427-449.

163. Baron, R. In vitro effect of SI2911-2 on osteoclast function and bone marrow mactophage differentiation / R. Baron, Y. Tsouderos // Eur. J. Pharmacol. -2002.-Vol. 450.-P. 11-17.

164. Bilezikian, J.P. Osteoporosis in men. / J.P. Bilezikian // Clin Endocnnol Metab. 1999. - Vol. 84.-P. 3431-3434.

165. Body size and hip fracture risk. Swedish Hip Fracture Study Group / B.Y. Farahmand, R. Michaelsen, J.A. Baron et al. // Epidemiology. 2000. - Vol. 11.-P. 214-219.

166. Bone markers: biochemical and clinical perspectives / R. Eastell, M. Bauman, N.R. Hoyle, L. Wieczorek, et al. // Roche. Martin Duntz. 2001. - P. 1-252.

167. Bone mineral density and vertebral fractures in men / E. Legrand, D. Chappard, C. Pascaretti, et al. // Osteoporosis Int. 1999. - Vol. 10. - P. 265270.

168. Bone protection by estrens occurs through non—tissue-selective activation of the androgen receptor / S.H. Windahl, R. Galien, R. Chiusaroli, et al. / J. Clin. Invest. 2006. - Vol. 116, № 9. - P. 2500-2509.

169. Brown, J.P. 2002 clinical practice guidelines for the diagnosis and management of osteoporosis in Canada /, R.G. Josse // CMAJ. 2002. - Vol. 167, № 10. - Suppl.l — P. 34.

170. Brown, J.P. Active bone turnover of the corticoendocteal envelope in postmenopausal osteoporosis / J.P. Brown, P.D. Delmas, M. Arlot et al. // J. Clin. Endocrin. 1987. - vol. 64. - P. 954-959.

171. Canalis, E. Skeletal growth factors / E. Canalis // Osteoporosis. San Diego: Academic Press, 1996. - P. 261-279.

172. Canalis E. Regulation of bone remodeling /Primer on Metabolic bone Disease and Disorders of Mineral Metabolism. Ed. F. Favus. -N.Y.: Raven Press, 1993.-P. 31-41.

173. Cann, C.E. Qualitative computed tomography for prediction of vertebral fracture risk / C.E. Cann, H.K. Genant // Bone. 1985. - Vol. 6. - P. 1-7.

174. Chen J.R. , Kousteni S., Bellido T. et. al. Gender independent induction of murine osteodast apoptosis in vitro by either estrogens or non — aromatizable androgens //J. Bone Muiner. Res. 2001.- vol. 16 (Suppl.l). - S 159.

175. Christenson, R.H. Biochemical markers of bone metabolism: an overvien / R.H. Christenson // Clin. Biochem. 1997. - Vol. 30, № 8 - P. 573-593.

176. Christiansen, G. Bone and Mineral Research / G. Christiansen, B. Riis -Amsterdam, 1989. P. 317-332.

177. Christiansen, G. Five years with continuous combined oestrogen/progestogen therapy. Effects on calcium metabolism, lipoproteins, and bleeding pattern / G. Christiansen, Br. J. Riis // Obstet. Gynecol. 1990. - Vol. 97.-P. 1087-1092.

178. Comparison of dual-energy x-ray absorptiometry and dual photon adsorptiometry for bone mineral measurements of the lumbar spine / H.W. Wahner, W.L. Dunn et al. // J. Clin. Invest. 1981. - Vol. 67. - P. 328-335.

179. Consensus development conference, diagnosis, prophylaxis and treatment of osteoporosis// Amer. J. Med. 1993. - Vol. 94. - P. 646-650.

180. Control of osteoclastogenesis and bone resorption by members of TNF family of receptors and ligands / M.C. Horowitz, Y. Xi, K. Wilson, M.A. Kacena // Cytokine and Growth Factor Review. 2001. - Vol. 12. - P. 9-18.

181. Cooper, C. Hip fractures in the elderly: a world-wide projection / C. Cooper // Clinical Rheumatologi Osteoporosis. - London, Bailliere Tindall, 1993. - Vol. 17.-P. 459-472.

182. Dawson-Hughes, B. Vitamin D for bone health / B. Dawson-Hughes // Osteoporosis Int. 1998. - Vol. 8 (Supp.2). - P. 30-34.

183. Defitos, L.J. Bone protein and peptide assays in the diagnosis and management of skeletal disease / L.J. Defitos // Clin. chem. 1991. - Vol. 37. - P. 1143-1148.

184. Delmas, P.D. Biochemical markers of bone turnover for the clinical assessment of metabolic disease / P.D. Delmas // Amer. Metab. Clin. N. Amer. -1990.-Vol. 19.-P. 1-18.

185. Dietary Reference Intakes. Washington, DC: Food and Nutrition Board, Institute of Medicine. National Academy Press, 1997. P. 132-134.

186. Ebeling, P.R. Teriparetide (rt PTH 1-34) for the treatment of osteoporosis / P.R. Ebeling, R.G. Russel // Int. J. Clin. Pract. 2003. - Vol. 57. - P. 710-718.

187. Effects of a combined estrogen-gestagen regimen on serum levels of the carboxy-terminal propeptide of human type I procollagen in osteoporosis / C. Hasling, E.F. Eriksen, J. Melkkoet et al. // J. Bone Miner.Res. 1991. - Vol. 6. -P. 1295-1300.

188. Effects of estrogen replacement on the progression of coronary-artery atherosclerosis / D.M. Herrington, D.M. Reboussin, K.D. Brosnihan, et al. // Ibid. 2000. - Vol. 343. - P. 522-529.

189. Effects of calcitonin, amylin and calcitonin gene-related peptide on osreoclast development / I. Cornish, K.E. Callon, U. Bava et al. // Bone. 2001. -Vol. 29, №2.-P. 162-168.

190. Endres, D.B. Biochemical markers of bone metabolism / D.B. Endres // Clin. Ligand Assay. 1998. - Vol. 21 (2). - P. 89-170.

191. Epidemiology of hip fracture: The MEDOS Study / G.P. Lyritis and MEDOS Study Group // Osteoporosis Int. 1996. - Vol. 6. (Suppl.3). - P. 11-15.

192. Epidemiology of osteoporosis and osteoporotic fractures / S.R. Cummins, J.L. Kelsey, M.C. Nevitt, K.J. O'Dowd // Epidemiol. Rev. 1985. - Vol. 7. - P. 178-208.

193. Epstein, S. The influence of age on bone mineral regulating hormones / S. Epstein, G. Bryce, J.W. Hinman, O.N. Miller. Bone. - 1986. - Vol. 7. - P.421-425.

194. Essential requirement of BMPs 2/4 for both osteoblast and osteoclast formation in bone marrow cultures from adult mice: antagonism by noggin / E. Abe, M. Yamamoto, Y. Taguchi et al. // J. Bone Miner. Res. 2000. - Vol. 15. -P. 663-673.

195. Estrogen protection against bone resorbing effect of parathyroid hormone infusion / F. Cosman, V. Shen, F. Xie et al. // Ann. Intern. Med. 1993. - Vol. 118.-P. 337-343.

196. Estrogen binding, receptor mRNA and biologic response in osteoblas-like osteosarcoma cells / R.S. Komm, C.M. Terpening, D.Y. Benz et al. // Science. -1988.-Vol. 241.-P. 81-84.

197. Falcichati -Nini A., Riggs R.L., Atkinson E.J. et.al. Relative contributions of testosterone and estrogen in regulating bone resporption and formation in normal enderby men // J. Clin. Invest. 2000. - vol. 106. - P. 1553-1560.

198. Favus, M.J. Primer on the metabolic bone diseases and disorders of mineral metabolism. N.Y.: Raven Press, 1993. - 441 p.

199. Finkelstein, J.S. Increases in bone density during treatment of men with idiopathic hypogonadotropic hypogonadism / J.S. Finkelstein, A. Klibanski, R.M. Neer et al. // J.Clin Endocrinol Metab. 1989. - P. 776-783.

200. Forsen, L. Survival after hip fracture: short-and long-term excess mortality according to age and gender. Osteoporos. 1999. — P. 73-78.

201. Garnero, P. Assessment of serum levels of bone alkaline phosphatase with a new immunoradiometric assay in patient with metabolic bone disease / P. Garnero, P.D. Delmas / J. Clin. Endocrinol. Metab. 1993. - Vol. 77. - P. 10461053.

202. Genant, H.K. Quantitative Computed Tomography of Vertebral Spongiosa: A Sensitive Method for Detecting Early Bone Loss After Oophorectomy / H.K Genant // Ann. intern. Mad. 1982. - Vol. 97. - P. 699-705.

203. Genetic factors of bone mass in adult: a twin study / N.A. Pocock, J.A. Eisman, J.L. Hopper et al. // J. Clin. Invest. 1987. - Vol. 80. - P. 706-710.

204. Gilsanz, V. Accumulation of bone mass during childhood and adolescence. In: Orwoll E.S., ed. Osteoporosis in men. San Diego, Calif.: Academic, 1999: 65-85.

205. Gustafson, J.A. Estrogen receptors-(3,-a: new dimension in estrogen mechanism of action / J.A. Gustafson // J. Endocrinol. — 1999. Vol. 163. - P. 379-383.

206. Heancy, R.P. Calcium balance and calcium requirements in middle-aged women / R.P. Heancy, R.R. Recker, P.D. Savitte // Am. J. Clin. Nutr. 1990. -Vol. 30.-P. 1603-1611.

207. Identifying bone-mass related risk factors for fracture to guide bone densitometry measrements: A systematic review of the literature / M. Espallargues, L. Sampietrocolom, M.D. Estrada et al. // Osteoporosis Int. -2001.-Vol.12.-P. 811-822.

208. Incidence of distal forearm fracture in British men and women / T.W. O'Neill, C. Cooper, J.D. Finn et al. // Osteoporosis Int. 2002. - Vol. 12. - P. 555-558.

209. Increased bone mass as a result of estrogen therapy in a man with aromatase deficiency / J.P. Bilezikian, D. Morishima., J. Bell et al. // N. J. Med. 1998.-Vol. 339.-P. 559-603.

210. Increased Osteoclast development after estrogen loss: mediation by interleukin-6 / R.L. Jilka, G. Hangoc, G. Girasole et al. // Science. 1992. - Vol. 257.-P. 88-91.

211. Jackson, J.A. Osteoporosis in men: diagnosis, pathophysiology, and prevention. / J.A. Jackson, M. Kleerkoper / Medicine (Baltimore). 1990. - Vol. 69.-P. 137-152.

212. Jackson, J.A. Testosterone deficiency as a risk factor for hip fractures in men: a case control study / J.A. Jackson, M.W. Riggs, A.M. Spiekerman // Am. J. Med. Sci. - 1992. - vol. 304 (1). - P. 4-8.

213. Jilka, R.L. Cytokines, bone remodeling and estrogen deficiency: a 1998 update / R.L. Jilka // Bone. 1998. - Vol. 23. - P. 75-81.

214. Johnson, C. Clinical use of bone densitometry / C. Johnson, C. Slemenda // N.Engl. J.Med. 1991.-Vol. 324. -P. 1105-1109.

215. Judd, J. Age dependence of estrogen responsiveness / J. Judd, M. Kremer, M. Qursler // Calcif. Tissue. Int. 1995. - Vol. 56, suppl. 1. - P. 25-26.

216. Kanis, J.A. Epidemiology of osteoporosis / J.A. Kanis // J. Bone. 1992. -Vol. 13, №2.-P. 7-13.

217. Kalra, J. Increased production of oxygen free radicals in cigarette smokers / J. Kalra, A.K. Chaudhray, R. Prasad // Int. J. Expt. Pathol. 1991. - № 1. - P. 1-7.

218. Kasperk C.H., Wergedal J.E., Furley J.R. et.al. Androgens directly stimulate proliferation of bone cell in vitro // Endocrinology. 1998. - vol. 124. - P. 15761578.

219. Kelepouris, N. Severe Osteoporosis in men / N. Kelepouris, K.D. Harper, F. Gannon et al. // Ann intern med. 1995. - P. 452-460.

220. Klinton, T.R. Biology, physiology and morphology on bone / T.R. Klinton, E.R. Janet. //J. Rheumat. 2004. - Vol. 110. - P. 1611-1634.

221. Lindsay, R. Дефицит эстрогенов. / R. Lindsay // Остеопороз. М.-СПб.: БИНОМ, Невский диалект, 2000. - Р. 153-180.

222. Long-term trends in the incidence of distal forearm fractures / L.J.III Melton, P.C. Amadio, C.S. Growson, W.M. O'Fallow. // Ibid. 1998. - Vol. 8. -P. 341-348.

223. Manolagas S.C. Birth and death of bone cells: basic regulatory mechanisms and impilications for the patogénesis and treatment of osteoporosis // Endocr. Rev.-2000.-vol. 21.-P. 115-137.

224. Martin, T.J. Bone structure and cellular activity / T.J. Martin, D.W. Dempster // In: Osteoporosis. — London: Chapman & Hall Medical, 1998. — P. 128.

225. Melton, L.J.III. Adverse outcomes of osteoporotic fractures in the general population / L.J.III. Melton // J. Bone Miner. Res. 2003. - Vol. 18. - P. 11391141.

226. Melton, L.J.III. Differing patterns of osteoporosis across the world / L.J.III Melton // New Dimensions Medica Asia / Ed. C.H. Chesnut. Honkong, 1991. -P. 13-18.

227. Melton, L.J.III. Serum trends in the incidence of hip fractures. / L.J.III Melton, W.M. O'Fallon, B.L. Riggs / Calcif. Tissue Int. 1987. - Vol. 41. - P. 5761.

228. Milk intake and bone mineral acquisition in adolescent girls: randomized, controlled intervention trial / J. Cadogan, R. Eastell, N. Jones., M.E. Barker // Brit. Med. J. 1997. - Vol. 15. - P. 1255-1260.

229. Miller, C.W. Survival and ambulation hip fracture / C.W. Miller // J. Bone Jt. Surg. 1978. - Vol. 60 A. - P. 930-934.

230. Modulation of growth factor incorporation into ECM of human osteoblast-like cells in vitro by 17(3-estradiol / M. Slater, J. Palara, K. Kingham et al.. // Am. J. Pisiol. 1994. - Vol. 267, № 6 (1). - P. E990-E1001.

231. Orwoll, E.S. Osteoporosis in men / E.S. Orwoll // Endocnnol Metab Clin North Am. 1998. - P. 349-367.

232. Orwoll, E.S. Assessing bone density in men /E.S. Orwoll // J. Bone Miner.Res. 2000. - P. 1867-1870.

233. O'Nell T.W., Felsenberg D., Verlaw J. et.al. The prevalence of vertebral deformity in European men and women. The Europen Vertebral Osteoporosis Study // Bone Miner. Res. — 1996. vol. 11.-P. 1010-1018.

234. Oz O.K., Zerwikh J.E., Fisher C. et.al. Bone has a sexually dimorphic response of aromatase dificiensy // Bone Miner. Res. — 2000. — vol. 15. P. 507514.

235. Pedersen, B.J. Type I Collagen C-telopeptide Degradation products as Bone Resorption Markers / B.J. Pedersen, P. Ravn, M. Bonde // J. Clin. LigandAssay. -1998.-Vol. 21 (2).-P. 118-127.

236. Poor, G. Determinants of reduced survival following hip fractures in men / G. Poor // Clin Orthop 1995. - p. 260-265.

237. Protein measurement with Folin phenol reagent / O. Lowry, N. Rosebrough, A. Farr, G. Randal. // J. Biol. Chem. 1951. - Vol. 193. - P. 265-275.

238. RANKL-RANK signaling in osteoclastogenesis and bone disease / T. Wada, T. Nakashima, N. Hiroshi, J.M. Penninger // Trends Mol. Med. 2006. -Vol. 12(1).-P. 17-25.

239. Ravn, P. High bone turnover is associated with low bone mass and spinal fracture in postmenopausal women / P. Ravn, M. Rix // Calcif. Tiss. Int. — 1997. -Vol. 60.-P. 255-260.

240. Riggs, B.L. Selective estrogen-receptor modulators mechanisms of action and application to clinical practice / B.L. Riggs // N. Engl. J. Med. - 2003. - Vol. 348, № 7.-P.618-629.

241. Risk factors for hip fracture in Japanese cohort / S. Fujiwara, F. Kasagi, M. Yamada, K. Komada // J. Bone Miner.Res. 1997. - Vol. 12. - P. 998-1004.

242. Robey, P.G. Биохимия кости / P.G. Robey // В кн. Б.Л. Риггз, Д. Мелтон III: Остеопороз. Этиология, диагностика, лечение. Пер. с англ. М. — СПб.: ЗАО «Изд-во БИНОМ», «Невский проспект», 2000. - с. 57-84.

243. Rodan, G.A. Костные клетки / G.A. Rodan, S.B. Rodan // В кн. Б.Л. Риггз, Д. Мелтон III: Остеопороз. Этиология, диагностика, лечение. Пер. с англ. М. - СПб.: ЗАО «Изд-во БИНОМ», «Невский проспект», 2000. - с. 15-55.

244. Roodman, D. Advances in bone biology: the osteoclast / D. Roodman // Endocrine Rev. 1996. - Vol. 17. - P. 308-332.

245. Role of physical activity in the development of skeletal mass in children / C.W. Slemenda., J.C. Christian., С J. Williams et al. // J. Bone Miner. Res. -1991.-Vol. 6.-P. 561-567.

246. Schett, G. The role of osteoprotegerin in arthritis / G. Schett, K. Redlich, J.S. Smolen // Artritis Res. Ther. 2003. - Vol. 5. - P. 239-345.

247. Schmidt A., Seedor J.G., Gentile M.A. et.al. Femoral bone density and length in male and female estrogen receptor 6 (ER6) knockout mice // Bone Miner. Res. - 1999. - vol. 14. (Suppl. 1). - S 456.

248. Screening for osteopenia and osteoporosis: Do accepted normal ranges lead too overdiagnosis? / A.I.H. Ahmed, G.M. Blake, J.M. Rymer, I. Fogelman. // Osteoporos. Int. 1997. - Vol. 7. - P. 432-438.

249. Seeman, E. Osteoporosis in men / E. Seeman // Osteoporos. 1999. — s.97 -s. 110.

250. Seeman, E. Risk factors for spinal Osteoporosis in men / E. Seeman, L.J. Melton, W.M. O'Fallon // Am J Med. 1983. - P. 977-983.

251. Seibel, M.J. Molecular markers of bone turnover: biochemical, technical and analytical aspects / M.J. Seibel // Osteoporosis Int. 2000. - Vol. 11 (№6). -P. 18-29 and 45-54.

252. Serum bone glaprotein (osteocalcin) in primary hyperparathyroidism and malignant hypercalcima/Comparison with bone histomorphometry / P.D. Delmas, B. Demiax, L. Malaval et al. // Ibid. 1986. - Vol. 77. - P. 985-991.

253. Serum bone glaprotein increases with aging in normal women: implications for the mechanism of age-related bone loss / P.D. Delmas, D. Stenner, H.W Wahner et al. //J. Clin. Invest. 1983. - Vol. 71. - P. 1316-1321.153

254. Smith E.P., Boyd J., Frank G.R. et.al. Estrogen resistance caused by a mutation in the estrogen — receptor gene in a man // N. Engl. J. Med. — 1994. — vol. 331.-P. 1056-1061.

255. Steven, L. Bone resorption on osteoclasts: revieves remodeling and repair / L. Steven, St.L. Teitelbaum.-2000. Vol. 289. - P. 1504-1508.

256. Strontium ranelate decreases vertebral fractures risk whatever the level of pretreatment bone turnover markers / J. Collette, J.V. Reginster, O. Bruy, et al. // Osteoporosis Int. 2007. - Vol. 18 (suppl 1). - P. 127-128.

257. Strontium ranelate effect on proliferation and OPG expression in osteoblast / T.C. Brennan, M.S. Rybchyn, A.D. Conigrave A.D., et al. // Calcif. Tissue Int. -2006.-Vol. 78.-P. 129.

258. Teitelbaum, St.L. Bone resorption by osteoclasts / St.L. Teitelbaum // Science. 2000. - Vol. 289. - P. 1504-1508.

259. The Apparent Incidence of Hip Fracture in Europe: A Study of National Register Sources / O. Johnell, B. Gulberg, E. Allander et al. // Ibid. 1992. -Vol. 2. - P. 298-302.

260. The effect of smoking at different life stages on bone mineral density in elderly men and women / D.P. Kiel, Y. Zhand, M.T. Hannan et al. // Osteoporosis Int. 1996. - Vol. 6. - P. 240-248.

261. The divalent strontium salt SI2911 enhances bone cell replication and bone formation in vitro / E. Canalis, M. Hott, P. Deloffre, Y.Tsouderos, P J. Marie // Bone. 1996. - Vol. 18. - P. 517-523.

262. Turner R.T., Colvard D.S., Spelsberg T.C. Estrogen inhibition of periosteal bone formation in rat long bones: down regulation of gene expression for bone matrix proteins // Endocrinology. - 1990. - vol. 127. - P. 1346-1351.

263. Vertebral fractures associated with osteoporosis: patient management / J. Tomayo-Orozco, P. Arzac-Palumbo, H. Peon-Vidales, et al. // Am. J. Med. -1997.-Vol. 103.-P. 44-48.

264. Vitamin D receptor gene start codon polymorphism (Fokl) and bone mineral density: Interaction with age, dietary calcium and 3'-end region154polymorphism / S. Ferrari, R. Rizzoli, D. Manen, et al. / J. Bone Miner. Res. -1998.-Vol. 13.-P. 925-930.

265. Wakley G.K., Schulte Jr. H.D., Hamion K.S. et.al. Androgen treatment prevents loss cancellons bone in the orchidectomized rat // J. Bone Lin. Res. — 1992.-vol. 6.-P. 325-330.

266. Weitzmann, M.N. Estrogen deficiency and bone loss: an inflammatory tale / M.N. Weitzmann, R. Pacifici // J. Clin. Invest. 2006. - Vol. 116, № 6. - P. 1186-1194.

267. Yllner, S. Metabolism of 1, 2-dichloroethane 14C in the mose / S. Yllner // Acta Pharmacol, et toxicol. 1971. - Vol. 30, № 4. - P. 257-265.

Информация о работе

Рамазанова, Лейсан Миннимухаматовна
кандидата биологических наук
Уфа, 2009
ВАК 03.00.04

Диссертация

Биохимические механизмы нарушения метаболизма костной ткани под действием низкомолекулярных хлорорганических соединений - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Биохимические механизмы нарушения метаболизма костной ткани под действием низкомолекулярных хлорорганических соединений - тема автореферата по биологии, скачайте бесплатно автореферат диссертации

Похожие работы